JP2010180145A - Method for producing tranexamic acid-containing nanoparticle and composite particle - Google Patents
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本発明は、生体適合性の高分子にトラネキサム酸を担持させたトラネキサム酸含有ナノ粒子及び複合粒子の製造方法、及び該製造方法により製造されたナノ粒子及び複合粒子、並びにそれらを配合して成る化粧料、外用医薬製剤に関するものである。 The present invention relates to a method for producing tranexamic acid-containing nanoparticles and composite particles in which tranexamic acid is supported on a biocompatible polymer, and nanoparticles and composite particles produced by the production method, and blending them. The present invention relates to cosmetics and external pharmaceutical preparations.
トラネキサム酸は、人工的に合成されたアミノ酸の一種である。このトラネキサム酸は血中でフィブリンに拮抗してプラスミノーゲンに結合し、フィブリンの分解による出血を抑制するため止血剤として用いられるほか、表皮中でプラスミンに結合して活性化を阻害することによりメラニンの産生を抑制することが知られている。そのため、美白効果を有する化粧料や肝斑等のシミを治療する医薬品の原料として用いられている。 Tranexamic acid is a kind of artificially synthesized amino acid. This tranexamic acid antagonizes fibrin in the blood and binds to plasminogen, and is used as a hemostatic agent to suppress bleeding due to fibrin degradation, and also binds to plasmin in the epidermis to inhibit activation. It is known to suppress the production of melanin. For this reason, it is used as a raw material for pharmaceuticals that treat white spots such as cosmetics and white spots that have a whitening effect.
トラネキサム酸を用いてメラニンの産生を効果的に抑制するためには、必要十分量のトラネキサム酸を目標部位（皮膚深部）に到達させる必要がある。しかしながら、経口投与により十分な量のトラネキサム酸を目標部位に到達させるには体内の消化酵素による分解を考慮して多量の投与が必要となるため、副作用が懸念される。また、トラネキサム酸の皮膚浸透性は低く、経皮投与では表皮の内側にまで十分浸透させることができない。そのため、トラネキサム酸を皮膚深部まで十分に送達可能な製剤はほとんど実用化されていないのが現状である。 In order to effectively suppress the production of melanin using tranexamic acid, a necessary and sufficient amount of tranexamic acid needs to reach the target site (deep skin). However, in order to reach a target site with a sufficient amount of tranexamic acid by oral administration, a large amount of administration is required in consideration of degradation by digestive enzymes in the body, and there is a concern about side effects. In addition, tranexamic acid has low skin permeability and cannot be sufficiently penetrated into the epidermis by transdermal administration. Therefore, the present condition is that the formulation which can fully deliver tranexamic acid to the skin deep part is hardly practically used.
そこで、薬物が患部に到達するまで吸収・分解されないようにして、効果的に薬物を投与する技術、いわゆるDrug Delivery System（以下、ＤＤＳという）を用いてトラネキサム酸を目標部位に供給する方法が考えられる。 Therefore, a method of supplying tranexamic acid to the target site using a so-called drug delivery system (hereinafter referred to as DDS), which effectively prevents the drug from being absorbed and decomposed until it reaches the affected area, is considered. It is done.
ＤＤＳにおいて中心となる技術の一つは、微量の薬物を生体適合性の高分子の内部または表面に担持させ、細胞への薬物導入効率の高い数十から数百ナノメートル程度のナノ粒子とする技術である。この薬物含有ナノ粒子は、目標とする患部まで薬物を安定して確実に運搬するとともに、高分子の種類や投与後の経過時間で薬物の放出速度（徐放性）をコントロールすることにより、患部に到達した時点で薬物を放出することができ、注射剤や経口剤としての用途の他、従来、皮膚深部まで十分浸透させることが困難であった外用薬にも高い効果を発揮する。 One of the main technologies in DDS is to carry a small amount of drug inside or on the surface of a biocompatible polymer to form nanoparticles with a high drug introduction efficiency into cells of several tens to several hundreds of nanometers. Technology. These drug-containing nanoparticles deliver the drug stably and reliably to the target affected area, and control the release rate (sustained release) of the drug according to the type of polymer and the elapsed time after administration. The drug can be released at the time of reaching the point, and exhibits high effects not only for use as an injection or oral preparation, but also for external preparations that have heretofore been difficult to sufficiently penetrate deep into the skin.
トラネキサム酸を用いたＤＤＳとして、例えば特許文献１には、末端がエステル化された生分解性α−ヒドロキシカルボン酸ポリマーのナノ粒子と薬物とを混合し、圧縮成型した長期徐放性製剤が開示されており、ナノ粒子と混合する薬物の一例としてトラネキサム酸が記載されている。
As a DDS using tranexamic acid, for example,
しかしながら、特許文献１の方法ではナノ粒子と薬物とを圧縮成型製剤とするため、皮膚浸透性を必要とする化粧料や外用薬への適用は困難であった。また、ナノ粒子とトラネキサム酸とを液中に分散させて皮膚に塗布することで、ナノ粒子と共にトラネキサム酸を皮膚深部まで浸透させる方法も試みられているが、ナノ粒子の皮膚浸透効果は粒子径と密接な関係を有しており、特許文献１の実施例に記載されているような平均粒子径が１００〜数百ｎｍのナノ粒子では皮膚浸透効果が十分ではなかった。
However, since the method of
また、特許文献２には、ナノ粒子内に生理活性成分を内包した経皮吸収剤が開示されており、生理活性成分の一例としてトラネキサム酸が記載されている。一方、平均粒子径が１００ｎｍ未満である小径のナノ粒子を調製する方法として、特許文献３、４には乳酸・グリコール酸共重合体（以下、ＰＬＧＡともいう）で形成されるナノ粒子の粒子径を制御する方法が開示されており、特許文献５にはＰＬＧＡを用いた平均粒子径が約５０ｎｍのアスタキサンチン、トコフェノール含有ナノ粒子の製造例が開示されている。
さらに、親水性物質であるトラネキサム酸をＰＬＧＡで形成されるナノ粒子内に封入することは困難であるところ、特許文献６には、ナノ粒子を形成するポリマーとして、親水性ポリマーブロックがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）で構成され、疎水性ポリマーブロックがＰＬＧＡで構成されたＰＥＧ−ＰＬＧＡブロック共重合体を用いることにより、親水性の生物活性成分を高封入率でナノ粒子内に封入する方法が開示されている。 Furthermore, it is difficult to encapsulate tranexamic acid, which is a hydrophilic substance, in nanoparticles formed of PLGA. However, Patent Document 6 discloses that a hydrophilic polymer block is polyethylene glycol (as a polymer for forming nanoparticles). A method of encapsulating hydrophilic bioactive components in nanoparticles at a high encapsulation rate by using a PEG-PLGA block copolymer composed of PEG) and a hydrophobic polymer block composed of PLGA is disclosed. Yes.
特許文献２の方法では、皮膚浸透性が高い平均粒子径５０〜８０ｎｍのナノ粒子の製造例が記載されているものの、ホモミキサによる一次乳化処理後、マイクロフルイダイザで複数回処理するか、或いはナノ粒子形成工程において有機溶媒の８０倍以上という多量の精製水を使用する必要があり、ナノ粒子を簡便に且つ効率良く製造できなかった。
In the method of
また、特許文献３〜５の方法においても、ナノ粒子を小径化するために反応液中のアセトン濃度やＰＬＧＡ濃度を調整したり、ナノ粒子懸濁液にアセトンや水を加える操作を繰り返し行ったりする必要があり、製造工程数や溶媒使用量が増加するという問題点があった。さらに、特許文献２〜５には生理活性成分としてトラネキサム酸を担持したナノ粒子の製造例は全く記載されておらず、平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子の製造にそのまま適用できるものではなかった。
Also in the methods of
一方、特許文献６の方法を用いた場合、親水性のトラネキサム酸をナノ粒子内に高封入率で封入できると予想されるものの、平均粒子径が１００ｎｍ未満である小径のナノ粒子を安定して製造することは困難であった。また、ＰＬＧＡに代えてＰＥＧ−ＰＬＧＡブロック共重合体を使用する必要があるため、コスト面においても不利となっていた。 On the other hand, when the method of Patent Document 6 is used, it is expected that hydrophilic tranexamic acid can be encapsulated in the nanoparticles at a high encapsulation rate, but small-sized nanoparticles having an average particle diameter of less than 100 nm are stably stabilized. It was difficult to manufacture. Moreover, since it is necessary to use a PEG-PLGA block copolymer instead of PLGA, it is disadvantageous in terms of cost.
本発明は、上記問題点に鑑み、皮膚浸透性の高い平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子、及びそれを複合化して成る複合粒子の簡便且つ低コストな製造方法を提供することを目的とする。 In view of the above-mentioned problems, the present invention provides a tranexamic acid-containing nanoparticle having a high skin permeability average particle diameter of less than 100 nm, and a simple and low-cost production method of a composite particle obtained by combining the nanoparticle. Objective.
上記目的を達成するために本発明の第１の構成は、トラネキサム酸を溶解させた水溶液に、生体適合性高分子を有機溶媒に溶解させた溶液を加えて、トラネキサム酸が内部及び表面に担持されたトラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液を生成するナノ粒子形成工程と、前記トラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液から有機溶媒を留去する溶媒留去工程と、を有するトラネキサム酸含有ナノ粒子の製造方法である。 In order to achieve the above object, the first configuration of the present invention is to add a solution in which a biocompatible polymer is dissolved in an organic solvent to an aqueous solution in which tranexamic acid is dissolved, so that tranexamic acid is supported on the inside and the surface. A nanoparticle forming step for producing a suspension of the tranexamic acid-containing nanoparticles, and a solvent distillation step for distilling off the organic solvent from the suspension of the tranexamic acid-containing nanoparticles. It is a manufacturing method.
また本発明の第２の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法において、前記生体適合性高分子が、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかであることを特徴としている。 According to a second configuration of the present invention, in the method for producing nanoparticles having the above configuration, the biocompatible polymer is any one of polylactic acid, polyglycolic acid, and lactic acid / glycolic acid copolymer. It is said.
また本発明の第３の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法において、前記生体適合性高分子が乳酸・グリコール酸共重合体であり、トラネキサム酸と乳酸・グリコール酸共重合体との重量比が１：２〜４：１であることを特徴としている。 According to a third configuration of the present invention, in the method for producing nanoparticles having the above configuration, the biocompatible polymer is a lactic acid / glycolic acid copolymer, and the weight of tranexamic acid and the lactic acid / glycolic acid copolymer is The ratio is 1: 2 to 4: 1.
また本発明の第４の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法において、トラネキサム酸を溶解させた水溶液にトラネキサム酸との重量比が１：１以下となるようにポリビニルアルコールを配合することを特徴としている。 According to a fourth configuration of the present invention, in the method for producing nanoparticles having the above configuration, polyvinyl alcohol is blended in an aqueous solution in which tranexamic acid is dissolved so that a weight ratio with tranexamic acid is 1: 1 or less. It is a feature.
また本発明の第５の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法において、前記生体適合性高分子を有機溶媒に溶解させた溶液に他の生理活性成分を添加することを特徴としている。 A fifth configuration of the present invention is characterized in that, in the method for producing nanoparticles of the above configuration, another physiologically active component is added to a solution in which the biocompatible polymer is dissolved in an organic solvent.
また本発明の第６の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法により製造されたトラネキサム酸含有ナノ粒子を複合化する複合化工程を有し、該複合化工程の前に、前記トラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液に保護剤を添加するトラネキサム酸含有複合粒子の製造方法である。 In addition, the sixth configuration of the present invention has a complexing step of complexing the tranexamic acid-containing nanoparticles produced by the method for producing nanoparticles having the above-described configuration, and the tranexamic acid-containing compound is included before the complexing step. It is a manufacturing method of the tranexamic acid containing composite particle which adds a protective agent to the suspension of nanoparticles.
また本発明の第７の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において、前記複合化工程が凍結乾燥工程であることを特徴としている。 The seventh configuration of the present invention is characterized in that, in the composite particle manufacturing method of the above configuration, the complexing step is a freeze-drying step.
また本発明の第８の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において、前記保護剤が、トレハロースであることを特徴としている。 The eighth configuration of the present invention is characterized in that, in the composite particle manufacturing method of the above configuration, the protective agent is trehalose.
また本発明の第９の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において、前記トレハロースの生体適合性高分子に対する重量比が２倍以上であることを特徴としている。 A ninth configuration of the present invention is characterized in that, in the method for producing composite particles having the above configuration, the weight ratio of the trehalose to the biocompatible polymer is twice or more.
また本発明の第１０の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において、前記保護剤と共に、さらにトラネキサム酸を添加することを特徴としている。 According to a tenth aspect of the present invention, in the method for producing composite particles having the above structure, tranexamic acid is further added together with the protective agent.
また本発明の第１１の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において、前記保護剤と共に、他の生理活性成分を添加することを特徴としている。 The eleventh configuration of the present invention is characterized in that, in the composite particle manufacturing method of the above configuration, another physiologically active ingredient is added together with the protective agent.
また本発明の第１２の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法において製造された、平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子である。 A twelfth configuration of the present invention is a tranexamic acid-containing nanoparticle having an average particle diameter of less than 100 nm manufactured by the method for manufacturing a nanoparticle having the above configuration.
また本発明の第１３の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において製造された、再分散後の平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有複合粒子である。 The thirteenth configuration of the present invention is a tranexamic acid-containing composite particle having an average particle diameter after redispersion of less than 100 nm, which is manufactured by the method for manufacturing composite particles having the above configuration.
また本発明の第１４の構成は、上記構成のトラネキサム酸含有ナノ粒子又は複合粒子を配合して成る化粧料である。 The fourteenth configuration of the present invention is a cosmetic comprising the tranexamic acid-containing nanoparticles or composite particles having the above-described configuration.
また本発明の第１５の構成は、上記構成のトラネキサム酸含有ナノ粒子又は複合粒子を配合して成る外用医薬製剤である。 According to a fifteenth aspect of the present invention, there is provided an external pharmaceutical preparation comprising the tranexamic acid-containing nanoparticles or composite particles having the above structure.
本発明の第１の構成によれば、トラネキサム酸を溶解させた水溶液に、生体適合性高分子を有機溶媒に溶解させた溶液を加えることで、従来の球形晶析法では製造が困難であった平均粒子径が１００ｎｍ未満である小径のトラネキサム酸含有ナノ粒子を簡便且つ効率的に製造することができる。 According to the first configuration of the present invention, the conventional spherical crystallization method is difficult to manufacture by adding a solution in which a biocompatible polymer is dissolved in an organic solvent to an aqueous solution in which tranexamic acid is dissolved. In addition, small-diameter tranexamic acid-containing nanoparticles having an average particle diameter of less than 100 nm can be easily and efficiently produced.
また、本発明の第２の構成によれば、上記第１の構成のナノ粒子の製造方法において、生体適合性高分子として、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかを用いることにより、生体への刺激・毒性が低くトラネキサム酸を内包及び表面担持可能であり、且つトラネキサム酸の効力を保持したまま長期間保存できるナノ粒子を製造することができる。 Further, according to the second configuration of the present invention, in the method for producing nanoparticles of the first configuration, any one of polylactic acid, polyglycolic acid, and lactic acid / glycolic acid copolymer is used as the biocompatible polymer. By using, it is possible to produce nanoparticles that have low irritation and toxicity to living bodies, can encapsulate and support tranexamic acid, and can be stored for a long period of time while retaining the efficacy of tranexamic acid.
また、本発明の第３の構成によれば、上記第２の構成のナノ粒子の製造方法において、生体適合性高分子として乳酸・グリコール酸共重合体を用い、トラネキサム酸と乳酸・グリコール酸共重合体との重量比を１：２〜４：１とすることにより、粒子の凝集や反応容器への付着を引き起こすことなく、微細な粒径のナノ粒子を効率的に製造可能となる。また、乳酸・グリコール酸共重合体の分子量や共重合体中の乳酸及びグリコール酸の含有量を選択することで、調製されたナノ粒子の皮膚浸透性やトラネキサム酸の放出速度を制御することができる。 According to the third configuration of the present invention, in the method for producing nanoparticles of the second configuration, a lactic acid / glycolic acid copolymer is used as a biocompatible polymer, and tranexamic acid and lactic acid / glycolic acid copolymer are used. By setting the weight ratio to the polymer to 1: 2 to 4: 1, it becomes possible to efficiently produce nanoparticles having a fine particle size without causing aggregation of particles and adhesion to the reaction vessel. In addition, by selecting the molecular weight of the lactic acid / glycolic acid copolymer and the content of lactic acid and glycolic acid in the copolymer, it is possible to control the skin permeability of the prepared nanoparticles and the release rate of tranexamic acid. it can.
また、本発明の第４の構成によれば、上記第１乃至第３のいずれかの構成のナノ粒子の製造方法において、トラネキサム酸を溶解させた水溶液にトラネキサム酸との重量比が１：１以下となるようにポリビニルアルコールを配合することにより、溶媒留去工程におけるナノ粒子の凝集を抑制するとともに、溶媒留去後のトラネキサム酸含有ナノ粒子の平均粒子径をより微小化することができる。 According to the fourth configuration of the present invention, in the method for producing nanoparticles of any one of the first to third configurations, the weight ratio of tranexamic acid to the aqueous solution in which tranexamic acid is dissolved is 1: 1. By blending polyvinyl alcohol as follows, aggregation of the nanoparticles in the solvent distillation step can be suppressed, and the average particle diameter of the tranexamic acid-containing nanoparticles after the solvent can be further reduced.
また、本発明の第５の構成によれば、上記第１乃至第４のいずれかの構成のナノ粒子の製造方法において、生体適合性高分子を有機溶媒に溶解させた溶液に他の生理活性成分を添加することにより、ナノ粒子中に他の生理活性成分を内包したトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造することができる。 Moreover, according to the fifth configuration of the present invention, in the method for producing nanoparticles of any one of the first to fourth configurations, another physiological activity is added to a solution in which a biocompatible polymer is dissolved in an organic solvent. By adding the component, tranexamic acid-containing nanoparticles in which other physiologically active components are encapsulated in the nanoparticles can be produced.
また、本発明の第６の構成によれば、上記第１乃至第５のいずれかの方法によって製造されたトラネキサム酸含有ナノ粒子を複合化する複合化工程を設け、複合化工程の前にトラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液に保護剤を添加することにより、使用前までは取り扱いが容易で、使用時には再分散可能な複合粒子を製造することができる。また、熱に弱いナノ粒子に耐熱性を付与することができ、ナノ粒子を安定して保存できる。さらに、複合粒子の再分散性が向上し、皮膚深部にまで十分に浸透できるようになる。 According to the sixth aspect of the present invention, there is provided a compounding step for compounding the tranexamic acid-containing nanoparticles produced by any one of the first to fifth methods, and tranexam before the compounding step. By adding a protective agent to the suspension of acid-containing nanoparticles, composite particles that are easy to handle before use and can be redispersed before use can be produced. In addition, heat resistance can be imparted to heat-sensitive nanoparticles, and the nanoparticles can be stored stably. Furthermore, the redispersibility of the composite particles is improved, and it can sufficiently penetrate deep into the skin.
また、本発明の第７の構成によれば、上記第６の構成の複合粒子の製造方法において、複合化工程を凍結乾燥によって行うことにより、ナノ粒子の複合化を良好に且つ効率よく行うことができる。 Further, according to the seventh configuration of the present invention, in the composite particle manufacturing method of the sixth configuration, the composite step is performed by freeze-drying, so that the composite of the nanoparticles can be performed efficiently and efficiently. Can do.
また、本発明の第８の構成によれば、上記第７の構成の複合粒子の製造方法において、保護剤としてトレハロースを用いることにより、凍結乾燥後における複合粒子の再分散性を高めることができる。 Further, according to the eighth configuration of the present invention, in the method for producing the composite particles of the seventh configuration, the redispersibility of the composite particles after lyophilization can be enhanced by using trehalose as a protective agent. .
また、本発明の第９の構成によれば、上記第８の構成の複合粒子の製造方法において、トレハロースの生体適合性高分子に対する重量比を２倍以上とすることにより、複合粒子を再分散させた後のナノ粒子の粒子径を溶媒留去後と同程度に維持することができる。 According to the ninth aspect of the present invention, in the method for producing composite particles according to the eighth aspect, the composite particles are redispersed by setting the weight ratio of trehalose to the biocompatible polymer to be twice or more. It is possible to maintain the particle diameter of the nanoparticles after being made the same as that after the solvent is distilled off.
また、本発明の第１０の構成によれば、上記第７乃至第９のいずれかの構成の複合粒子の製造方法において、保護剤と共に、さらにトラネキサム酸を添加することにより、トラネキサム酸のトータルでの含有率を高めることができる。従って、目的及び用途に応じた所望のトラネキサム酸含有量の複合粒子を簡単に得ることができる。 According to the tenth configuration of the present invention, in the method for producing composite particles according to any one of the seventh to ninth configurations, by adding tranexamic acid together with the protective agent, the total amount of tranexamic acid is increased. The content of can be increased. Therefore, composite particles having a desired tranexamic acid content according to the purpose and application can be easily obtained.
また、本発明の第１１の構成によれば、上記第７乃至第１０のいずれかの構成のナノ粒子の製造方法において、保護剤と共に、他の生理活性成分を添加することにより、表面に他の生理活性成分を付着させた複合粒子を得ることができる。 According to the eleventh configuration of the present invention, in the method for producing nanoparticles of any one of the seventh to tenth configurations, other physiologically active components are added together with a protective agent to the surface. It is possible to obtain composite particles to which the physiologically active components are attached.
また、本発明の第１２の構成によれば、上記第１乃至第５のいずれかの構成のナノ粒子の製造方法により製造された平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子であるため、化粧料や外用薬に配合した場合に皮膚浸透性が非常に高いトラネキサム酸含有ナノ粒子となる。 Further, according to the twelfth configuration of the present invention, since the nanoparticle-containing nanoparticle having an average particle diameter of less than 100 nm manufactured by the method for manufacturing a nanoparticle of any one of the first to fifth configurations, When blended in cosmetics or external preparations, it becomes tranexamic acid-containing nanoparticles with very high skin permeability.
また、本発明の第１３の構成によれば、上記第６乃至第１１のいずれかの構成の複合粒子の製造方法により製造された再分散後の平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有複合粒子であるため、使用前までは取り扱いが容易で、化粧料や外用薬に配合した場合に皮膚浸透性が非常に高いトラネキサム酸含有ナノ粒子に再分散可能なトラネキサム酸含有複合粒子となる。 According to the thirteenth configuration of the present invention, the tranexamic acid-containing composite particles having an average particle diameter after redispersion of less than 100 nm manufactured by the method for manufacturing composite particles having any of the sixth to eleventh configurations. Therefore, it is easy to handle before use, and becomes a tranexamic acid-containing composite particle that can be re-dispersed into tranexamic acid-containing nanoparticles having a very high skin permeability when blended in cosmetics and external preparations.
また、本発明の第１４の構成によれば、上記第１２又は第１３の構成のトラネキサム酸含有ナノ粒子又は複合粒子を配合することにより、トラネキサム酸含有ナノ粒子を皮膚深部まで浸透させ、粒子内部或いは表面に担持されたトラネキサム酸を放出させて美白効果を有効に発現できる化粧料が提供される。 Further, according to the fourteenth configuration of the present invention, by incorporating the tranexamic acid-containing nanoparticles or composite particles of the twelfth or thirteenth configuration, the tranexamic acid-containing nanoparticles are infiltrated to the deep part of the skin, Or the cosmetics which can express the whitening effect effectively by releasing the tranexamic acid carry | supported by the surface are provided.
また、本発明の第１５の構成によれば、上記第１２又は第１３の構成のトラネキサム酸含有ナノ粒子又は複合粒子を配合することにより、トラネキサム酸含有ナノ粒子を皮膚深部まで浸透させ、粒子内部或いは表面に担持されたトラネキサム酸を放出させてシミ治療効果を有効に発現できる外用医薬製剤が提供される。 Further, according to the fifteenth configuration of the present invention, by incorporating the tranexamic acid-containing nanoparticles or composite particles of the twelfth or thirteenth configuration, the tranexamic acid-containing nanoparticles are infiltrated to the deep part of the skin, Alternatively, a pharmaceutical preparation for external use that can effectively develop a stain treatment effect by releasing tranexamic acid supported on the surface is provided.
本発明のトラネキサム酸含有ナノ粒子の製造方法は、薬物および生体適合性高分子をｎｍ（ナノメートル）単位の大きさの粒子（ナノ粒子）に加工することができる球形晶析法を用いて、ナノ粒子表面にトラネキサム酸を物理的に吸着担持させるものである。球形晶析法は、化合物合成の最終プロセスにおける結晶の生成・成長プロセスを制御することで、球状の結晶粒子を設計し、その物性を直接制御して加工することができる方法である。本発明では、特に球形晶析法の一つであるエマルション溶媒拡散法（ＥＳＤ法）を用いている。 The method for producing tranexamic acid-containing nanoparticles of the present invention uses a spherical crystallization method capable of processing a drug and a biocompatible polymer into particles (nanoparticles) having a size of nm (nanometers). Tranexamic acid is physically adsorbed and supported on the nanoparticle surface. Spherical crystallization is a method in which spherical crystal particles can be designed and processed by directly controlling their physical properties by controlling the crystal generation and growth process in the final process of compound synthesis. In the present invention, an emulsion solvent diffusion method (ESD method) which is one of spherical crystallization methods is used.
ＥＳＤ法には、基剤ポリマーとなる生体適合性高分子を溶解する良溶媒と、これとは逆に生体適合性高分子を溶解しない貧溶媒の二種類の溶媒が用いられる。この良溶媒には、生体適合性高分子を溶解し、且つ貧溶媒へ混和するアセトン等の有機溶媒を用いる。そして、貧溶媒には、通常、水または界面活性剤を添加した水溶液等を用いる。 In the ESD method, two types of solvents are used: a good solvent that dissolves the biocompatible polymer serving as the base polymer, and a poor solvent that does not dissolve the biocompatible polymer. As the good solvent, an organic solvent such as acetone that dissolves the biocompatible polymer and is miscible with the poor solvent is used. As the poor solvent, water or an aqueous solution to which a surfactant is added is usually used.
本発明に用いられる生体適合性高分子は、生体への刺激・毒性が低く、投与後分解して代謝される生体内分解性のものが望ましい。このような素材としては、特に乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ）を好適に用いることができる。ＰＬＧＡの平均分子量は、５，０００〜２００，０００の範囲内であることが好ましく、ナノ粒子の調製の容易さや調製されたナノ粒子の皮膚浸透性、及び皮膚内部での分解性を考慮すれば１５，０００〜２５，０００の範囲内であることがより好ましい。乳酸とグリコール酸との組成比は１：９９〜９９：１であればよいが、乳酸１に対しグリコール酸１／３であることが好ましい。
The biocompatible polymer used in the present invention is desirably a biodegradable polymer that has low irritation and toxicity to the living body and is decomposed and metabolized after administration. As such a material, a lactic acid / glycolic acid copolymer (PLGA) can be particularly preferably used. The average molecular weight of PLGA is preferably in the range of 5,000 to 200,000, considering the ease of nanoparticle preparation, skin permeability of the prepared nanoparticles, and degradability inside the skin. More preferably, it is in the range of 15,000 to 25,000. The composition ratio of lactic acid and glycolic acid may be 1:99 to 99: 1, but glycolic acid is preferably 1/3 of
生体適合性高分子としては他に、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリアスパラギン酸等が挙げられる。また、これらのコポリマーであるアスパラギン酸・乳酸共重合体（ＰＡＬ）やアスパラギン酸・乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＡＬＧ）を用いても良く、アミノ酸のような荷電基あるいは官能基化し得る基を有していてもよい。 Other biocompatible polymers include polylactic acid (PLA), polyglycolic acid (PGA), polyaspartic acid, and the like. In addition, aspartic acid / lactic acid copolymer (PAL) and aspartic acid / lactic acid / glycolic acid copolymer (PALG), which are these copolymers, may be used, and charged groups such as amino acids or functionalizable groups may be used. You may have.
以下、生体適合性高分子としてＰＬＧＡを用いた場合のトラネキサム酸含有ナノ粒子の調製手順について詳述する。まず、ＰＬＧＡを良溶媒中に溶解後、トラネキサム酸を溶解した貧溶媒中に攪拌下、滴下すると、混合液中の良溶媒（有機溶媒）が貧溶媒中へ急速に拡散移行する。その結果、貧溶媒中で良溶媒の自己乳化が起き（マランゴニ効果）、サブミクロンサイズの良溶媒のエマルション滴が形成される。さらに、良溶媒と貧溶媒の相互拡散により、エマルション内から有機溶媒が貧溶媒へと継続的に拡散していくので、エマルション滴内のＰＬＧＡの溶解度が低下し、球状の結晶粒子となって析出する。このとき貧溶媒中のトラネキサム酸が粒子に内包および粒子表面を被覆することにより、最終的にトラネキサム酸を含有したＰＬＧＡナノ粒子が生成する（ナノ粒子形成工程）。 Hereinafter, a preparation procedure of tranexamic acid-containing nanoparticles when PLGA is used as the biocompatible polymer will be described in detail. First, when PLGA is dissolved in a good solvent and then dropped into a poor solvent in which tranexamic acid is dissolved with stirring, the good solvent (organic solvent) in the mixed solution rapidly diffuses into the poor solvent. As a result, self-emulsification of the good solvent occurs in the poor solvent (Marangoni effect), and emulsion droplets of the good solvent of submicron size are formed. Furthermore, due to the mutual diffusion of the good solvent and the poor solvent, the organic solvent continuously diffuses from the emulsion to the poor solvent, so that the solubility of PLGA in the emulsion droplets decreases and precipitates as spherical crystal particles. To do. At this time, tranexamic acid in the poor solvent coats the particles and the particle surface, so that PLGA nanoparticles containing tranexamic acid are finally produced (nanoparticle formation step).
上記球形晶析法では、物理化学的な手法でナノ粒子を形成でき、しかも得られるナノ粒子が略球形であるため、均質なナノ粒子を、触媒や原料化合物の残留といった問題を考慮することなく、容易に形成することができる。その後、良溶媒である有機溶媒を減圧留去し（溶媒留去工程）、乾燥することで、ナノ粒子粉末を得る。 In the above spherical crystallization method, nanoparticles can be formed by a physicochemical method, and the resulting nanoparticles are substantially spherical, so that homogeneous nanoparticles can be formed without considering the problem of catalyst and raw material residue. Can be easily formed. Then, the organic solvent which is a good solvent is depressurizingly distilled (solvent distillation process), and nanoparticle powder is obtained by drying.
従来のＥＳＤ法においては、通常、薬物と高分子とを溶解させた良溶媒を、界面活性剤を溶解させた貧溶媒中に滴下することにより薬物を内包した状態で球状の結晶粒子を析出させて薬物含有ナノ粒子を製造していた。しかし、有機溶媒に対するトラネキサム酸の溶解度は非常に小さいため、従来法ではナノ粒子中のトラネキサム酸の含有率を高めることが困難であった。また、従来法において製造されたナノ粒子の平均粒子径は１００〜数百ｎｍであり、平均粒子径が１００ｎｍ未満の微細なトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造できなかった。 In the conventional ESD method, normally, a good solvent in which a drug and a polymer are dissolved is dropped into a poor solvent in which a surfactant is dissolved, thereby precipitating spherical crystal particles in a state of encapsulating the drug. Drug-containing nanoparticles. However, since the solubility of tranexamic acid in organic solvents is very small, it has been difficult to increase the content of tranexamic acid in the nanoparticles by the conventional method. Moreover, the average particle diameter of the nanoparticles produced by the conventional method is 100 to several hundred nm, and fine tranexamic acid-containing nanoparticles having an average particle diameter of less than 100 nm could not be produced.
そこで、本発明の製造方法においては、予めトラネキサム酸を貧溶媒中へ溶解させておき、これに生体適合性高分子を溶解させた良溶媒を滴下することとした。図１は、本発明の製造方法により製造されたトラネキサム酸含有ナノ粒子の構造を示す模式図である。トラネキサム酸含有ナノ粒子１は、生体適合性高分子２が多数凝集して形成されており、粒子表面がトラネキサム酸３で被覆されている。また、ここでは図示しないが、生体適合性高分子２のマトリクス中にもトラネキサム酸が一部内包されている。
Therefore, in the production method of the present invention, tranexamic acid is previously dissolved in a poor solvent, and a good solvent in which a biocompatible polymer is dissolved is added dropwise thereto. FIG. 1 is a schematic diagram showing the structure of tranexamic acid-containing nanoparticles produced by the production method of the present invention. The tranexamic acid-containing
上述した製造方法によれば、有機溶媒に対する溶解度の小さいトラネキサム酸を高濃度で含有するトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造することができる。また、従来法のようにポリエチレングリコール（ＰＥＧ）によるＰＬＧＡ表面の修飾やマイクロフルイダイザによる複数回の処理を行うことなく１００ｎｍ未満の平均粒子径を有するトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造することができ、製造工程数及び溶媒使用量の削減も可能となる。 According to the production method described above, it is possible to produce tranexamic acid-containing nanoparticles containing tranexamic acid having a low solubility in an organic solvent at a high concentration. In addition, tranexamic acid-containing nanoparticles having an average particle size of less than 100 nm can be produced without modifying the PLGA surface with polyethylene glycol (PEG) or performing multiple treatments with a microfluidizer as in the conventional method. In addition, the number of manufacturing steps and the amount of solvent used can be reduced.
本発明の製造方法によってトラネキサム酸含有ナノ粒子の平均粒子径が小径化されるメカニズムについては明らかではないが、貧溶媒中で良溶媒が拡散しＰＬＧＡが凝集してミセルを形成する際、親水性部分（アミノ基及びカルボキシル基）及び親油性部分（六員環部分）を有するトラネキサム酸が界面活性剤のようにミセルと貧溶媒との界面に介在し、物理的作用によりミセル表面に吸着してＰＬＧＡの必要以上の凝集を抑制するためであると推定される。 The mechanism by which the average particle size of the tranexamic acid-containing nanoparticles is reduced by the production method of the present invention is not clear, but when the good solvent diffuses in the poor solvent and PLGA aggregates to form micelles, Tranexamic acid having a part (amino group and carboxyl group) and a lipophilic part (six-membered ring part) is present at the interface between the micelle and the poor solvent like a surfactant and adsorbs to the micelle surface by physical action. It is presumed that this is to suppress the aggregation of PLGA more than necessary.
上記ナノ粒子形成工程において使用する良溶媒および貧溶媒の種類は特に限定されるものではないが、人体に対して安全性が高く、且つ環境負荷の少ないものを用いる必要がある。このような貧溶媒としては、例えば精製水が好適に用いられる。良溶媒としては、低沸点の有機溶媒であるハロゲン化アルカン類、アセトン、メタノール、エタノール、エチルアセテート、ジエチルエーテル、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン等が挙げられるが、例えば、厚生労働省通知「医薬品の残留溶媒ガイドラインについて（平成１０年３月３０日 医薬審第３０７号）」でクラス３に分類されるアセトンのみ、若しくはアセトンとエタノールの混合液が好適に用いられる。
Although the kind of good solvent and poor solvent used in the nanoparticle formation step is not particularly limited, it is necessary to use a solvent that is highly safe for the human body and has a low environmental load. As such a poor solvent, for example, purified water is preferably used. Examples of good solvents include halogenated alkanes, which are low-boiling organic solvents, acetone, methanol, ethanol, ethyl acetate, diethyl ether, cyclohexane, benzene, toluene, etc. About the guideline (March 30, 1998, Pharmaceutical Trial No. 307), only acetone classified as
ナノ粒子形成時に貧溶媒に混合するトラネキサム酸量は、ナノ粒子を形成する生体適合性高分子の種類及び分子量、良溶媒中への配合量等により調整可能であるが、生体適合性高分子としてＰＬＧＡを用いる場合、ＰＬＧＡに対する重量比を１：２〜４：１とすることが好ましい。ＰＬＧＡに対する重量比が１／２未満の場合、トラネキサム酸の濃度が低すぎてナノ粒子の小径化効果が低くなる。一方、ＰＬＧＡに対する重量比が４倍を超えると、製造容器壁面への凝集が発生してナノ粒子の形成が阻害される。 The amount of tranexamic acid mixed in the poor solvent during nanoparticle formation can be adjusted by the type and molecular weight of the biocompatible polymer that forms the nanoparticle, the blending amount in a good solvent, etc. When using PLGA, the weight ratio to PLGA is preferably 1: 2 to 4: 1. When the weight ratio with respect to PLGA is less than 1/2, the concentration of tranexamic acid is too low and the effect of reducing the diameter of the nanoparticles becomes low. On the other hand, when the weight ratio with respect to PLGA exceeds four times, aggregation on the wall surface of the production container occurs and formation of nanoparticles is inhibited.
また、トラネキサム酸と共に精製水中に界面活性剤を添加して貧溶媒としても良い。界面活性剤としては、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）が好適に用いられる。ポリビニルアルコールの濃度についても、生体適合性高分子やトラネキサム酸の濃度等に応じて適宜決定すればよいが、ポリビニルアルコール水溶液の濃度が必要以上に高くなると、製造容器壁面への凝集が発生してナノ粒子の歩留まりが低下する。一方、ポリビニルアルコール水溶液の濃度が所定以下になると、貧溶媒中での分散性に悪影響を与える。そのため、ポリビニルアルコールの重合度やけん化度によっても異なるが、トラネキサム酸に対する重量比で１：１以下が好ましい。 Further, a surfactant may be added to purified water together with tranexamic acid to make a poor solvent. As the surfactant, polyvinyl alcohol (PVA) is preferably used. The concentration of polyvinyl alcohol may be appropriately determined according to the concentration of the biocompatible polymer or tranexamic acid, etc., but if the concentration of the polyvinyl alcohol aqueous solution becomes higher than necessary, aggregation on the wall surface of the production container occurs. The yield of nanoparticles decreases. On the other hand, when the concentration of the polyvinyl alcohol aqueous solution is below a predetermined level, the dispersibility in the poor solvent is adversely affected. Therefore, although it varies depending on the polymerization degree and saponification degree of polyvinyl alcohol, the weight ratio with respect to tranexamic acid is preferably 1: 1 or less.
ポリビニルアルコール以外の界面活性剤としては、ポリエチレングリコール、シクロデキストリン、レシチン、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられる。 Examples of surfactants other than polyvinyl alcohol include polyethylene glycol, cyclodextrin, lecithin, hydroxymethylcellulose, hydroxypropylcellulose, and the like.
また、良溶媒中に他の生理活性成分を溶解させておくことにより、ナノ粒子中に他の生理活性成分を内包したトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造することもできる。例えばトラネキサム酸と作用機序の異なるビタミンやプロビタミン等の美白成分を内包しておけば、トラネキサム酸とビタミンやプロビタミンとの相乗効果により美白効果の促進が期待できる。 In addition, by dissolving other physiologically active ingredients in a good solvent, it is possible to produce tranexamic acid-containing nanoparticles encapsulating other physiologically active ingredients in the nanoparticles. For example, if a whitening component such as vitamin or provitamin having a different mechanism of action from tranexamic acid is included, the whitening effect can be expected to be promoted by the synergistic effect of tranexamic acid and vitamin or provitamin.
このようにして得られたナノ粒子をそのまま用いるか、或いは必要に応じて複合化する（複合化工程）。この複合化により、使用前まではナノ粒子が集まった取り扱いの容易な複合粒子（ナノコンポジット）となっており、使用時に水分に触れることでナノ粒子に戻って高反応性等の特性を復元可能となる。 The nanoparticles thus obtained are used as they are, or are compounded as necessary (compositing step). This composite makes it easy to handle composite particles (nanocomposites) in which nanoparticles are collected before use, and can return to nanoparticles and restore properties such as high reactivity by touching moisture during use. It becomes.
ナノ粒子の複合化方法としては、凍結乾燥法（例えば、乾燥棚式の凍結乾燥機（宝製作所社製）やナウタミキサＮＸＶ（ホソカワミクロン社製）を用いて真空凍結乾燥を行うこと）が好適に用いられる。また、流動層乾燥造粒法（例えば、アグロマスタ（ホソカワミクロン社製）を使用して流動造粒を行うこと）または乾式機械的粒子複合化法（例えば、メカノフュージョンシステムＡＭＳ（ホソカワミクロン社製）を使用して圧縮力および剪断力を加えること）により複合化しても良い。特に、粒子化する材料を含む混合物を流動ガス中に噴霧する流動層乾燥造粒法を用いた場合、時間と手間のかかる凍結乾燥工程を省略可能となり、複合粒子を容易に且つ短時間で製造できるため工業化にも有利となる。 As a nanoparticle composite method, a freeze drying method (for example, vacuum freeze drying using a drying shelf type freeze dryer (Takara Seisakusho) or Nauta mixer NXV (Hosokawa Micron)) is preferably used. It is done. Also, fluidized bed dry granulation method (for example, fluid granulation is performed using Agromaster (manufactured by Hosokawa Micron)) or dry mechanical particle compositing method (for example, Mechanofusion System AMS (manufactured by Hosokawa Micron) is used. And applying a compressive force and a shearing force). In particular, when using a fluidized bed drying granulation method in which a mixture containing the material to be granulated is sprayed into a flowing gas, a time-consuming and laborious freeze-drying step can be omitted, and composite particles can be produced easily and in a short time. This is advantageous for industrialization.
なお、溶媒留去後のトラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液をそのまま凍結乾燥により複合化すると、粒子の凝集が発生して複合粒子の再分散性が低下する。また、トラネキサム酸は水溶性であるため、一旦ナノ粒子表面へ吸着されたトラネキサム酸が漏出すると、周囲に存在する水に再溶解する。 If the suspension of tranexamic acid-containing nanoparticles after evaporation of the solvent is combined as it is by freeze-drying, particle aggregation occurs and the redispersibility of the composite particles decreases. In addition, since tranexamic acid is water-soluble, once tranexamic acid adsorbed on the surface of the nanoparticles leaks, it is redissolved in the water existing around it.
そこで、有機または無機の物質を保護剤として再分散可能に複合化させ、トラネキサム酸の溶解した水を除去せずにそのままナノ粒子と共に凍結乾燥させることが好ましい。例えば、糖アルコールやショ糖を適用することにより、含有率のばらつきを効果的に防止するとともに、糖アルコール等が賦形剤となりナノ粒子の再分散性を維持することができる。また、容器への充填時におけるナノ粒子の取り扱い性を高めることができる。 Therefore, it is preferable that an organic or inorganic substance is combined as a protective agent so that it can be redispersed and lyophilized together with the nanoparticles without removing the water in which tranexamic acid is dissolved. For example, by applying sugar alcohol or sucrose, variation in content can be effectively prevented, and sugar alcohol or the like can serve as an excipient to maintain nanoparticle redispersibility. Moreover, the handling property of the nanoparticle at the time of filling to a container can be improved.
このような複合粒子の構造を図２に示す。複合粒子４は、トラネキサム酸含有ナノ粒子１を保護剤５により複合化して成り、トラネキサム酸３はナノ粒子１の表面に吸着されるのみでなく、ナノ粒子１の表面から再溶解したトラネキサム酸３が複合化の際に保護剤５で形成されたナノ粒子１の外層にも封入されている。
The structure of such a composite particle is shown in FIG. The
保護剤として使用可能なものには、マンニトール、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール等の糖アルコールやトレハロース、スクロース等の糖類、アクリル系ポリマーやエチルセルロース等の高分子化合物粉末が挙げられる。中でも、トレハロースやスクロース等の糖類は高い保水力を有し、凍結乾燥保護剤として頻用される。 Examples of the protective agent that can be used include sugar alcohols such as mannitol, erythritol, sorbitol, and xylitol, sugars such as trehalose and sucrose, and polymer compound powders such as acrylic polymers and ethyl cellulose. Among them, saccharides such as trehalose and sucrose have high water retention and are frequently used as freeze-drying protective agents.
トレハロースの添加量が少ない場合、凍結乾燥後の粒子の再分散性が低下して溶媒留去後の粒子径を維持できなくなり、再分散後の粒子径が１００ｎｍを超えてしまう。従って、トレハロースの添加量は生体適合性高分子に対する重量比で２倍以上とすることが好ましい。 When the amount of trehalose added is small, the redispersibility of the particles after lyophilization is reduced, the particle size after evaporation of the solvent cannot be maintained, and the particle size after redispersion exceeds 100 nm. Therefore, the amount of trehalose added is preferably at least twice as much as the weight ratio to the biocompatible polymer.
また、糖アルコールの中でマンニトールは、超急速冷却により固化した場合においても非晶質化することがなく、保存安定性の高い凍結乾燥保護剤として使用されている。特に、噴霧乾燥式流動層造粒法においては、保護剤として結晶性の弱い糖アルコールを用いると、複合化の際にアモルファス化してしまい良好に粒子化できなくなるため、結晶性の強いマンニトールを用いることが好ましい。 Further, among sugar alcohols, mannitol does not become amorphous even when solidified by ultra-rapid cooling, and is used as a freeze-drying protective agent with high storage stability. In particular, in the spray-drying fluidized bed granulation method, if sugar alcohol with low crystallinity is used as a protective agent, it becomes amorphous during compounding and cannot be formed into good particles, so mannitol with strong crystallinity is used. It is preferable.
また、複合化の際に、保護剤と共にさらにトラネキサム酸を添加することにより、トラネキサム酸のトータルでの含有率を高めることができる。従って、目的及び用途に応じた所望のトラネキサム酸含有量の複合粒子を簡単に得ることができる。また、保護剤に封入されたトラネキサム酸、ナノ粒子表面に吸着されたトラネキサム酸、ナノ粒子に内包されたトラネキサム酸の順に放出されるため、トラネキサム酸の放出速度を３段階に制御可能となる。 Moreover, the total content of tranexamic acid can be increased by adding tranexamic acid together with the protective agent at the time of compounding. Therefore, composite particles having a desired tranexamic acid content according to the purpose and application can be easily obtained. Moreover, since tranexamic acid encapsulated in the protective agent, tranexamic acid adsorbed on the surface of the nanoparticles, and tranexamic acid encapsulated in the nanoparticles are released in this order, the release rate of tranexamic acid can be controlled in three stages.
このようにして製造した、トラネキサム酸含有ナノ粒子若しくは複合粒子を化粧料或いは外用医薬製剤（以下、外用薬という）の原料として使用することで、有効な美白効果やシミ治療効果を得ることができる。一般に、皮膚細胞の大きさは１５，０００ｎｍ程度であり、皮膚細胞間隔は皮膚の浅い所と深い所でバラツキがあるが、７０ｎｍ程度である。また、細胞の脈動により皮膚細胞間隔は広がると考えられる。そのため、トラネキサム酸含有ナノ粒子の平均粒子径を１００ｎｍ未満とすることで、細胞間隙ルート（皮膚角質細胞間隙）を通してナノ粒子の表皮や真皮への浸透が促進され、トラネキサム酸を皮膚深部へ効果的に送達させることができる。 By using the tranexamic acid-containing nanoparticles or composite particles produced as described above as raw materials for cosmetics or external pharmaceutical preparations (hereinafter referred to as external medicines), an effective whitening effect and a stain treatment effect can be obtained. . In general, the size of skin cells is about 15,000 nm, and the skin cell spacing varies between shallow and deep skin, but is about 70 nm. Moreover, it is considered that the skin cell interval is widened by the pulsation of the cells. Therefore, by setting the average particle size of the tranexamic acid-containing nanoparticles to less than 100 nm, the penetration of the nanoparticles into the epidermis and dermis is promoted through the cell gap route (skin keratinocyte gap), and tranexamic acid is effectively introduced deep into the skin. Can be delivered to.
化粧料の剤型としては、パウダーファンデーション等の粉末でも良いし、乳液、化粧水、スキンクリーム等のスキンケア化粧料としても良い。外用薬の剤型としては、粉末剤の他、ワセリン、ラノリン、パラフィン、ろう、硬膏剤、樹脂、プラスチック、高級アルコール類、グリコール類、グリセリン等の基剤と共に、必要に応じて水や乳化剤、懸濁化剤等を配合して混合した、軟膏、クリーム剤、ローション、ゲル剤等が挙げられる。化粧料或いは外用薬中へのナノ粒子若しくは複合粒子の配合割合は、要求される効果や剤型等に応じて任意に設定することができる。 The dosage form of the cosmetic may be a powder such as a powder foundation, or may be a skin care cosmetic such as an emulsion, skin lotion, or skin cream. As a dosage form of the topical medicine, in addition to powders, bases such as petrolatum, lanolin, paraffin, wax, plaster, resin, plastic, higher alcohols, glycols, glycerin, water and emulsifiers as necessary, Ointments, creams, lotions, gels, etc. mixed and mixed with suspending agents and the like can be mentioned. The blending ratio of the nanoparticles or composite particles in the cosmetic or external medicine can be arbitrarily set according to the required effect, dosage form, and the like.
また、化粧料或いは外用薬中に機能性成分、表面改質剤、感触改良剤、吸着剤、防腐剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤等の他の固形成分を配合しても良い。機能性成分としては、リン酸Ｌ−アスコルビルマグネシウム（プロビタミンＣ）、トコフェロール、エラグ酸、アルブチン、ホエイ等が挙げられる。 Moreover, you may mix | blend other solid components, such as a functional component, a surface modifier, a touch improvement agent, an adsorbent, antiseptic | preservative, antioxidant, and an ultraviolet absorber, in cosmetics or an external medicine. Examples of the functional component include L-ascorbyl magnesium phosphate (provitamin C), tocopherol, ellagic acid, arbutin, whey and the like.
表面改質剤としては、タルク、メチコン等が挙げられる。感触改良剤としては、シリカ（無水ケイ酸）、シリコン、ラウロイルグルタミン酸ジヘキシルデシル、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、ヒドロキシエチルセルロース、プルラン等が挙げられる。吸着剤としては、シリカ、デキストリン、コーンスターチ、ベントナイト、結晶セルロース、ケイ酸カルシウム等が挙げられる。防腐剤としては、パラオキシ安息香酸エチル、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、フェルラ酸、フェノキシエタノールなどが挙げられる。酸化防止剤としては、アスコルビン酸、システイン、アセチルシステイン、トコフェロール、酢酸トコフェロール等が挙げられる。上記各成分は列挙したものに限られるものではなく他の成分を配合しても良い。 Examples of the surface modifier include talc and methicone. Examples of the feel improver include silica (anhydrous silicic acid), silicon, dihexyl decyl lauroyl glutamate, polyoxyethylene methyl glucoside, hydroxyethyl cellulose, pullulan and the like. Examples of the adsorbent include silica, dextrin, corn starch, bentonite, crystalline cellulose, calcium silicate and the like. Examples of the preservative include ethyl paraoxybenzoate, sodium benzoate, potassium sorbate, ferulic acid, phenoxyethanol and the like. Examples of the antioxidant include ascorbic acid, cysteine, acetylcysteine, tocopherol, tocopherol acetate and the like. The above components are not limited to those listed, and other components may be blended.
なお、ＰＬＧＡは水分と長時間触れると加水分解されてしまい、ナノ粒子の運搬性能が失われてしまう。そこで、乳液や化粧水等の化粧料、或いはローションタイプの外用薬として使用する場合は、ナノ粒子粉末とそれを分散させる液体（以下、分散液という）とを別々の容器に充填して保存しておき、使用直前にナノ粒子粉末と分散液とを所定量混合して使用することが好ましい。 In addition, PLGA will be hydrolyzed when it touches moisture for a long time, and the transport performance of nanoparticles will be lost. Therefore, when using as cosmetics such as milky lotion and lotion, or as a lotion-type external medicine, the nanoparticle powder and the liquid in which it is dispersed (hereinafter referred to as dispersion) are filled and stored in separate containers. It is preferable that a predetermined amount of the nanoparticle powder and the dispersion liquid are mixed and used immediately before use.
このようにして得られた化粧料或いは外用薬を皮膚に塗布すると、ナノ粒子は毛穴や皮膚表面から皮膚深部まで効率よく浸透する。即ち、皮膚表面に塗布されたナノ粒子を含有する液滴は、ナノ粒子により表面張力が低下しているため界面エネルギーが下がる方向（皮膚内部へ浸透する方向）に移動し易くなる。さらに、液滴内のナノ粒子又は水に対し皮膚内部からの吸着も起こるため、ナノ粒子は皮膚深部へと効率よく送達されることとなる。結果、ナノ粒子に吸着担持されたトラネキサム酸が皮膚内部において投与直後から所定期間に亘って徐放される。 When the cosmetic or topical medicine thus obtained is applied to the skin, the nanoparticles penetrate efficiently from the pores and the skin surface to the deep skin. That is, the droplets containing nanoparticles applied to the skin surface are likely to move in the direction in which the interfacial energy decreases (the direction of penetration into the skin) because the surface tension is reduced by the nanoparticles. Furthermore, adsorption from the inside of the skin also occurs with respect to the nanoparticles or water in the droplets, so that the nanoparticles are efficiently delivered deep into the skin. As a result, tranexamic acid adsorbed and supported on the nanoparticles is gradually released in the skin over a predetermined period immediately after administration.
なお、保護剤と共にトラネキサム酸を添加した複合粒子を分散液中に再分散させて使用する場合、保護剤から溶出したトラネキサム酸が再分散したナノ粒子表面に付着し、ナノ粒子と共に皮膚深部まで到達する。その結果、皮膚深部に送達可能なトラネキサム酸量を多くすることができる。また、皮膚深部へのトラネキサム酸の供給量を増やすために、分散液中にさらにトラネキサム酸を配合しても良いし、ナノ粒子粉末を分散させる際にトラネキサム酸の粉末を分散液中に溶解させても良い。 In addition, when composite particles added with tranexamic acid together with a protective agent are redispersed in a dispersion, tranexamic acid eluted from the protective agent adheres to the redispersed nanoparticle surface and reaches the skin deeply with the nanoparticles. To do. As a result, the amount of tranexamic acid that can be delivered to the deep part of the skin can be increased. In order to increase the amount of tranexamic acid supplied to the deep part of the skin, tranexamic acid may be further blended in the dispersion, and when dispersing the nanoparticle powder, the tranexamic acid powder is dissolved in the dispersion. May be.
さらに、複合化の際に保護剤と共にビタミンやプロビタミン等の他の美白成分を添加することにより、複合粒子の表面に生理活性成分を付着させることもできる。これにより、ナノ粒子から放出されるトラネキサム酸とは別に、複合粒子表面から溶け出す即効性の美白成分をナノ粒子表面に吸着させて皮膚深部へ浸透させることができる。また、分散液中に他の美白成分を配合しておくことで、保護剤と共に添加する場合と同様の効果を得ることができる。 Furthermore, by adding other whitening ingredients such as vitamins and provitamins together with a protective agent at the time of compounding, the physiologically active ingredients can be adhered to the surface of the composite particles. Thereby, apart from tranexamic acid released from the nanoparticles, an immediate whitening component that dissolves from the surface of the composite particles can be adsorbed on the surface of the nanoparticles and penetrated into the deep part of the skin. Moreover, the effect similar to the case where it adds with a protective agent can be acquired by mix | blending another whitening component in a dispersion liquid.
その他、本発明の化粧料には、マイカ、セリサイト、酸化チタン、カオリン、酸化亜鉛、雲母チタン、酸化鉄等の無機粉末、ポリエステル、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリウレタン、アクリル酸樹脂、フェノール樹脂、フッ素樹脂、ジビニルベンゼン、スチレン共重合体等の各種樹脂粉体或いはそれらの２種以上から成る共重合樹脂粉体、アセチルセルロース、多糖類、タンパク質等の有機粉末、赤色２０２号、赤色２２６号、黄色２０５号、黄色４０１号、青色１号、青色２０４号、青色４０４号等の顔料粉末、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸マグネシウム、パルミチン酸亜鉛等の金属石鹸、ジメチコン、シクロメチコン、ポリエーテル変性シリコン、フッ素変性シリコン等のシリコン化合物、アロエ、ベニバナ等の天然系原料、ビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＦ、ビタミンＫ、ビタミンＰ、ビタミンＵ、酢酸ｄｌ−α−トコフェロール、ニコチン酸−α−トコフェロール、コハク酸−α−トコフェロール等のビタミンまたはビタミン誘導体等の、任意の無機又は有機原料、或いは通常化粧料に配合される任意の成分、例えばエタノールや多価アルコール等のアルコール類、界面活性剤、保湿剤、着色料、香料等を、本発明の効果を妨げない範囲で配合することができる。 In addition, the cosmetics of the present invention include inorganic powders such as mica, sericite, titanium oxide, kaolin, zinc oxide, titanium mica, and iron oxide, polyester, polyethylene, polystyrene, polyurethane, acrylic acid resin, phenol resin, and fluorine resin. , Various resin powders such as divinylbenzene and styrene copolymer, or copolymer resin powders composed of two or more thereof, organic powders such as acetylcellulose, polysaccharides and proteins, red 202, red 226, yellow 205 No., Yellow No. 401, Blue No. 1, Blue No. 204, Blue No. 404, etc., metal soap such as zinc stearate, magnesium stearate, zinc palmitate, dimethicone, cyclomethicone, polyether-modified silicon, fluorine-modified Silicon compounds such as silicon, natural raw materials such as aloe and safflower, Vitamins such as Min A, Vitamin B, Vitamin C, Vitamin D, Vitamin E, Vitamin F, Vitamin K, Vitamin P, Vitamin U, dl-α-tocopherol acetate, nicotinic acid-α-tocopherol, succinic acid-α-tocopherol Or any inorganic or organic raw material such as vitamin derivatives, or any component that is usually blended in cosmetics, for example, alcohols such as ethanol and polyhydric alcohol, surfactants, moisturizers, coloring agents, fragrances, etc. It can mix | blend in the range which does not prevent the effect of this invention.
また、本発明は上述した実施形態に限定されるものではなく、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で種々の変更が可能である。以下、実施例により本発明のナノ粒子の製造方法について具体的に説明する。
［トラネキサム酸含有ＰＬＧＡナノ粒子の調製］
The present invention is not limited to the above-described embodiments, and various modifications can be made without departing from the spirit of the present invention. Hereinafter, the method for producing nanoparticles of the present invention will be specifically described with reference to examples.
[Preparation of tranexamic acid-containing PLGA nanoparticles]
１重量％のトラネキサム酸（Sigma-aldrich社製）水溶液１００ｍＬを貧溶媒とした。また、乳酸・グリコール酸共重合体（平均分子量２０，０００、重合比７５：２５、和光純薬工業社製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン４０ｍＬ、エタノール２０ｍＬの混合液に溶解させて良溶媒とした。 100 mL of a 1% by weight aqueous solution of tranexamic acid (manufactured by Sigma-aldrich) was used as a poor solvent. Also, 1 g of lactic acid / glycolic acid copolymer (average molecular weight 20,000, polymerization ratio 75:25, PLGA7520 manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was dissolved in a mixture of 40 mL of acetone and 20 mL of ethanol to obtain a good solvent.
貧溶媒を４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で良溶媒を滴下し、滴下終了後５分間攪拌したところ、良溶媒の貧溶媒中への拡散によりＰＬＧＡナノ粒子が晶析して半透明の懸濁液となった。その後、減圧下２００ｒｐｍで攪拌しながら２時間で有機溶媒を留去し、ナノ粒子懸濁液を調製した。次に、得られたナノ粒子懸濁液に保護剤としてトレハロース（林原社製）を１０ｇ添加し、約１日かけて凍結乾燥を行いトラネキサム酸含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．１ｇを得た。懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法（測定装置：ＭＩＣＲＯＴＲＡＣ ＵＰＡ（商品名）、HONEYWELL社製）により測定したところ２２ｎｍであった。 The good solvent was added dropwise at a constant speed (4 mL / min) while stirring the poor solvent at 40 ° C. and 400 rpm, and after stirring for 5 minutes, PLGA nanoparticles were crystallized by diffusion of the good solvent into the poor solvent. A translucent suspension was obtained. Thereafter, the organic solvent was distilled off in 2 hours while stirring at 200 rpm under reduced pressure to prepare a nanoparticle suspension. Next, 10 g of trehalose (manufactured by Hayashibara Co., Ltd.) as a protective agent is added to the obtained nanoparticle suspension and freeze-dried for about 1 day to obtain 1.1 g of freeze-dried powder of tranexamic acid-containing PLGA composite particles. It was. The average particle size of the nanoparticles in the suspension was 22 nm as measured by a dynamic light scattering method (measuring device: MICROTRAC UPA (trade name), manufactured by HONEYWELL).
また、凍結乾燥粉末をアセトニトリル−水系溶媒により溶解し、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて粒子内部及び表面のトラネキサム酸量（ＴＡ１）を定量した。同様に凍結乾燥粉末を水系溶媒のみで溶解し、粒子表面のみのトラネキサム酸量（ＴＡ２）を定量した。 Further, the lyophilized powder was dissolved in an acetonitrile-water solvent, and the amount of tranexamic acid (TA1) inside and on the surface of the particles was quantified using high performance liquid chromatography (HPLC). Similarly, the freeze-dried powder was dissolved only in an aqueous solvent, and the amount of tranexamic acid (TA2) on the particle surface alone was quantified.
ＨＰＬＣの操作条件としては、移動相（無水リン酸二水素ナトリウム１１．０ｇを水５００ｍＬに溶かし、トリエチルアミン１０ｍＬ及びラウリル硫酸ナトリウム１．４ｇを加える。リン酸でｐＨを２．５に調整した後、６００ｍＬまで精製水でメスアップし、メタノール４００ｍＬを添加し全量１Ｌとする。）を、２５℃に設定したカラム（ＧＬサイエンス社製、ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳ−３）内を流速２．０ｍＬ／分で流し、検出器（島津製作所製、ＳＰＤ−６ＡＶ）を用いて検出波長２２０ｎｍでトラネキサム酸のピークを検出した。そして、ＴＡ１−ＴＡ２により粒子内部のトラネキサム酸量を算出したところ、処方したトラネキサム酸の約２％が粒子内部に存在することが確認された。 As operating conditions of HPLC, the mobile phase (11.0 g of anhydrous sodium dihydrogen phosphate was dissolved in 500 mL of water, 10 mL of triethylamine and 1.4 g of sodium lauryl sulfate were added. After adjusting the pH to 2.5 with phosphoric acid, Measure up to 600 mL with purified water and add 400 mL of methanol to make a total volume of 1 L.) Flow through the column (GL Science, Inertsil ODS-3) set at 25 ° C. at a flow rate of 2.0 mL / min. A tranexamic acid peak was detected at a detection wavelength of 220 nm using an instrument (manufactured by Shimadzu Corporation, SPD-6AV). And when the amount of tranexamic acid inside the particle was calculated by TA1-TA2, it was confirmed that about 2% of the prescribed tranexamic acid was present inside the particle.
トラネキサム酸（Sigma-aldrich社製）０．５ｇ、及びポリビニルアルコール（ＥＧ−０５、日本合成工業社製）０．１ｇを精製水８０ｍＬに溶解させて貧溶媒とした。また、乳酸・グリコール酸共重合体（和光純薬工業社製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン４０ｍＬ、エタノール２０ｍＬの混合液に溶解させて良溶媒とした。 0.5 g of tranexamic acid (manufactured by Sigma-aldrich) and 0.1 g of polyvinyl alcohol (EG-05, manufactured by Nippon Gosei Kogyo Co., Ltd.) were dissolved in 80 mL of purified water to obtain a poor solvent. Moreover, 1 g of lactic acid / glycolic acid copolymer (PLGA7520 manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was dissolved in a mixed solution of 40 mL of acetone and 20 mL of ethanol to obtain a good solvent.
貧溶媒を４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で良溶媒を滴下した。滴下終了後５分間攪拌したところ、良溶媒の貧溶媒中への拡散によりＰＬＧＡナノ粒子が晶析して半透明の懸濁液となった。その後、減圧下２００ｒｐｍで攪拌しながら２時間で有機溶媒を留去した。次に、得られたナノ粒子懸濁液に保護剤としてトレハロース（林原社製）を１０ｇ添加し、約１日かけて凍結乾燥を行いトラネキサム酸含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．１ｇを得た。精製水に再分散させた懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定したところ６５ｎｍであった。また、実施例１と同様の方法により粒子内部のトラネキサム酸量を算出したところ、処方したトラネキサム酸の約２％が粒子内部に存在することが確認された。 The good solvent was added dropwise at a constant rate (4 mL / min) while stirring the poor solvent at 40 ° C. and 400 rpm. After stirring for 5 minutes after the completion of the dropping, PLGA nanoparticles were crystallized by diffusion of the good solvent into the poor solvent to form a translucent suspension. Thereafter, the organic solvent was distilled off in 2 hours while stirring at 200 rpm under reduced pressure. Next, 10 g of trehalose (manufactured by Hayashibara Co., Ltd.) as a protective agent is added to the obtained nanoparticle suspension and freeze-dried for about 1 day to obtain 1.1 g of freeze-dried powder of tranexamic acid-containing PLGA composite particles. It was. The average particle size of the nanoparticles in the suspension redispersed in purified water was measured by a dynamic light scattering method to be 65 nm. Further, when the amount of tranexamic acid inside the particles was calculated by the same method as in Example 1, it was confirmed that about 2% of the prescribed tranexamic acid was present inside the particles.
ポリビニルアルコールの添加量を０．５ｇとした以外は実施例２と同様の手順により、トラネキサム酸含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．１ｇを得た。精製水に再分散させた懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定したところ４９ｎｍであった。 1.1 g of freeze-dried powder of tranexamic acid-containing PLGA composite particles was obtained by the same procedure as in Example 2 except that the amount of polyvinyl alcohol added was 0.5 g. The average particle size of the nanoparticles in the suspension redispersed in purified water was 49 nm as measured by a dynamic light scattering method.
トラネキサム酸（Sigma-aldrich社製）０．５ｇ、及びポリビニルアルコール（ＥＧ−０５、日本合成工業社製）０．１ｇを精製水８０ｍＬに溶解させて貧溶媒とした。また、乳酸・グリコール酸共重合体（和光純薬工業社製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇ、及びプロビタミンＣである脂溶性テトラへキシルデカン酸アスコルビル（ＶＣ−ＩＰ：日光ケミカル社製）０．１５ｇをアセトン４０ｍＬ、エタノール２０ｍＬの混合液に溶解させて良溶媒とした。 0.5 g of tranexamic acid (manufactured by Sigma-aldrich) and 0.1 g of polyvinyl alcohol (EG-05, manufactured by Nippon Gosei Kogyo Co., Ltd.) were dissolved in 80 mL of purified water to obtain a poor solvent. In addition, 1 g of lactic acid / glycolic acid copolymer (PLGA7520 manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) and 0.15 g of fat-soluble tetrahexyldecanoic acid ascorbyl (VC-IP: manufactured by Nikko Chemical Co.) which is provitamin C, 40 mL of acetone, A good solvent was obtained by dissolving in a mixed solution of 20 mL of ethanol.
貧溶媒を４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で良溶媒を滴下した。滴下終了後５分間攪拌したところ、良溶媒の貧溶媒中への拡散によりＰＬＧＡナノ粒子が晶析して半透明の懸濁液となった。その後、減圧下２００ｒｐｍで攪拌しながら２時間で有機溶媒を留去した。次に、得られたナノ粒子懸濁液に保護剤としてトレハロース（林原社製）を１０ｇ添加し、約１日かけて凍結乾燥を行いトラネキサム酸・ＶＣ−ＩＰ含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．２ｇを得た。精製水に再分散させた懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定したところ７０ｎｍであった。
The good solvent was added dropwise at a constant rate (4 mL / min) while stirring the poor solvent at 40 ° C. and 400 rpm. After stirring for 5 minutes after the completion of the dropping, PLGA nanoparticles were crystallized by diffusion of the good solvent into the poor solvent to form a translucent suspension. Thereafter, the organic solvent was distilled off in 2 hours while stirring at 200 rpm under reduced pressure. Next, 10 g of trehalose (manufactured by Hayashibara Co., Ltd.) as a protective agent is added to the obtained nanoparticle suspension, freeze-dried for about 1 day, and freeze-dried
また、実施例１と同様の方法により粒子内部のトラネキサム酸量を算出したところ、処方したトラネキサム酸の約２％が粒子内部に存在することが確認された。さらに、ＨＰＬＣにより粒子内のＶＣ−ＩＰ封入率（ＰＬＧＡ重量に対するＶＣ−ＩＰの重量パーセント）を定量したところ８．６％であった。 Further, when the amount of tranexamic acid inside the particles was calculated by the same method as in Example 1, it was confirmed that about 2% of the prescribed tranexamic acid was present inside the particles. Further, the VC-IP encapsulation rate in the particles (weight percent of VC-IP with respect to PLGA weight) was quantified by HPLC to be 8.6%.
貧溶媒中にトラネキサム酸を溶解しなかった以外は実施例４と同様の手順により、ＶＣ−ＩＰ含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．２ｇを得た。精製水に再分散させた懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定したところ２２０ｎｍであった。
［トラネキサム酸の添加量とナノ粒子の平均粒子径との関係］
By the same procedure as in Example 4 except that tranexamic acid was not dissolved in the poor solvent, 1.2 g of a freeze-dried powder of VC-IP-containing PLGA composite particles was obtained. The average particle diameter of the nanoparticles in the suspension redispersed in purified water was 220 nm as measured by a dynamic light scattering method.
[Relationship between added amount of tranexamic acid and average particle size of nanoparticles]
貧溶媒中へのトラネキサム酸の添加量を０ｇ、０．１ｇとして、実施例２と同様の操作によりＰＬＧＡナノ粒子の懸濁液を得た。懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定した結果を実施例２の結果と併せて図３に示す。 A suspension of PLGA nanoparticles was obtained in the same manner as in Example 2 except that the amount of tranexamic acid added to the poor solvent was 0 g and 0.1 g. The result of measuring the average particle diameter of the nanoparticles in the suspension by the dynamic light scattering method is shown in FIG. 3 together with the result of Example 2.
貧溶媒中へのトラネキサム酸の添加量を０ｇ、１ｇ、２ｇとして、実施例３と同様の操作によりＰＬＧＡナノ粒子の懸濁液を得た。懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定した。測定結果を実施例３の結果と併せて図４に示す。 A suspension of PLGA nanoparticles was obtained in the same manner as in Example 3, except that the amount of tranexamic acid added to the poor solvent was 0 g, 1 g, and 2 g. The average particle size of the nanoparticles in the suspension was measured by a dynamic light scattering method. The measurement results are shown in FIG. 4 together with the results of Example 3.
図３及び図４から明らかなように、トラネキサム酸を添加しなかった場合は溶媒留去後のナノ粒子の平均粒子径が１００ｎｍ以上であったのに対し、貧溶媒中にトラネキサム酸を添加すると、ナノ粒子の平均粒子径が１００ｎｍ未満となった。また、トラネキサム酸の添加量が増加するにつれてナノ粒子の平均粒子径は小さくなるが、トラネキサム酸の添加によるナノ粒子の小径化効果には閾値が存在し、ＰＬＧＡに対する重量比で２倍程度であることがわかった。 As apparent from FIGS. 3 and 4, when no tranexamic acid was added, the average particle size of the nanoparticles after the solvent was distilled off was 100 nm or more, whereas when tranexamic acid was added to the poor solvent, The average particle diameter of the nanoparticles was less than 100 nm. In addition, the average particle size of the nanoparticles decreases as the amount of tranexamic acid added increases, but there is a threshold for the effect of reducing the size of the nanoparticles by the addition of tranexamic acid, which is about twice the weight ratio to PLGA. I understood it.
また、図３から、０．１ｇのポリビニルアルコールと０．５ｇのトラネキサム酸を添加した場合の平均粒子径が６５ｎｍであるのに対し、図４から、０．５ｇのポリビニルアルコールと０．５ｇのトラネキサム酸を添加した場合の平均粒子径は４９ｎｍであった。この結果より、ポリビニルアルコールの配合量をトラネキサム酸に対する重量比で１：１程度とすれば、ナノ粒子の小径化により効果的であることが確認された。
［保護剤の種類とナノ粒子の再分散性との関係］
Also, from FIG. 3, the average particle diameter when adding 0.1 g of polyvinyl alcohol and 0.5 g of tranexamic acid is 65 nm, whereas from FIG. 4, 0.5 g of polyvinyl alcohol and 0.5 g of The average particle diameter when tranexamic acid was added was 49 nm. From this result, it was confirmed that if the blending amount of polyvinyl alcohol is about 1: 1 by weight ratio with respect to tranexamic acid, it is effective for reducing the diameter of the nanoparticles.
[Relationship between type of protective agent and redispersibility of nanoparticles]
トラネキサム酸（Sigma-aldrich社製）０．５ｇ、及びポリビニルアルコール（ＥＧ−０５、日本合成工業社製）０．１ｇを精製水８０ｍＬに溶解させて貧溶媒とした。また、乳酸・グリコール酸共重合体（和光純薬工業社製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン４０ｍＬ、エタノール２０ｍＬの混合液に溶解させて良溶媒とした。 0.5 g of tranexamic acid (manufactured by Sigma-aldrich) and 0.1 g of polyvinyl alcohol (EG-05, manufactured by Nippon Gosei Kogyo Co., Ltd.) were dissolved in 80 mL of purified water to obtain a poor solvent. Moreover, 1 g of lactic acid / glycolic acid copolymer (PLGA7520 manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was dissolved in a mixed solution of 40 mL of acetone and 20 mL of ethanol to obtain a good solvent.
貧溶媒を４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で良溶媒を滴下した。滴下終了後５分間攪拌したのち、減圧下２００ｒｐｍで攪拌しながら２時間で有機溶媒を留去した。その後、得られたナノ粒子懸濁液に、保護剤としてトレハロース（林原社製）を１０ｇ添加し、約１日かけて凍結乾燥を行いトラネキサム酸含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．１ｇを得た。得られたナノ粒子粉末を水中へ再分散させた際の平均粒子径を動的光散乱法により測定した。また、トレハロースに代えて、スクロース（キシダ化学社製）、マンニトール（東和化成工業社製）を１０ｇ添加した場合、及び保護剤を添加しなかった場合の平均粒子径についても同様に測定した。測定結果を図５に示す。 The good solvent was added dropwise at a constant rate (4 mL / min) while stirring the poor solvent at 40 ° C. and 400 rpm. After stirring for 5 minutes after completion of dropping, the organic solvent was distilled off in 2 hours while stirring at 200 rpm under reduced pressure. Thereafter, 10 g of trehalose (manufactured by Hayashibara) as a protective agent was added to the obtained nanoparticle suspension, and freeze-dried for about 1 day to obtain 1.1 g of freeze-dried powder of tranexamic acid-containing PLGA composite particles. It was. The average particle diameter when the obtained nanoparticle powder was redispersed in water was measured by a dynamic light scattering method. Moreover, it replaced with trehalose and measured similarly about the average particle diameter at the time of adding 10g of sucrose (made by Kishida Chemical Co., Ltd.) and mannitol (made by Towa Kasei Kogyo Co., Ltd.), and when a protective agent was not added. The measurement results are shown in FIG.
図５から明らかなように、保護剤としてトレハロース又はスクロースを添加した場合は複合粒子を水中へ再分散させたときの平均粒子径は７０〜８０ｎｍであり、溶媒留去後（複合化前）の平均粒子径とほとんど変わらなかった。また、保護剤としてマンニトールを添加した場合は複合粒子を水中へ再分散させたときの平均粒子径が２７０ｎｍ程度となり、溶媒留去後の平均粒子径よりも大きくなった。一方、保護剤を添加しなかった場合は再分散性が著しく低下し、粒子がμｍオーダーに凝集した。 As is apparent from FIG. 5, when trehalose or sucrose is added as a protective agent, the average particle size when the composite particles are redispersed in water is 70 to 80 nm, and after the solvent is distilled off (before the composite) It was almost the same as the average particle size. When mannitol was added as a protective agent, the average particle size when the composite particles were redispersed in water was about 270 nm, which was larger than the average particle size after the solvent was distilled off. On the other hand, when the protective agent was not added, the redispersibility was remarkably lowered and the particles were aggregated on the order of μm.
この結果より、凍結乾燥後の複合粒子の再分散性を高めるためには保護剤としてトレハロース或いはスクロースを添加することが好適であることが確認された。
［保護剤の添加量とナノ粒子の再分散性との関係］
From this result, it was confirmed that it is preferable to add trehalose or sucrose as a protective agent in order to improve the redispersibility of the composite particles after lyophilization.
[Relationship between amount of added protective agent and redispersibility of nanoparticles]
ナノ粒子懸濁液へのトレハロースの添加量を０ｇ、１ｇ、２ｇ、４ｇ、６．６ｇ、及び１０ｇとして、試験例３と同様の方法によりトラネキサム酸含有ＰＬＧＡナノ粒子の凍結乾燥粉末を調製した。得られたナノ粒子粉末を水中へ再分散させた際の平均粒子径を動的光散乱法により測定した。また、トレハロースに代えて、スクロースを０ｇ、１ｇ、４ｇ、６．６ｇ、及び１０ｇ添加した場合の平均粒子径についても同様に測定した。測定結果を溶媒留去後（複合化前）の平均粒子径と合わせて図６及び図７に示す。 The amount of trehalose added to the nanoparticle suspension was 0 g, 1 g, 2 g, 4 g, 6.6 g, and 10 g, and lyophilized powder of tranexamic acid-containing PLGA nanoparticles was prepared in the same manner as in Test Example 3. The average particle diameter when the obtained nanoparticle powder was redispersed in water was measured by a dynamic light scattering method. Moreover, it replaced with trehalose and measured similarly about the average particle diameter at the time of adding 0g, 1g, 4g, 6.6g, and 10g of sucrose. The measurement results are shown in FIG. 6 and FIG. 7 together with the average particle diameter after the solvent is distilled off (before complexing).
図６及び図７から明らかなように、ＰＬＧＡに対する重量比で２倍以上のトレハロースを添加することにより、複合粒子を水中へ再分散させたときの平均粒子径を１００μｍ未満とすることができた。また、ＰＬＧＡに対する重量比で４倍以上のトレハロース或いはスクロースを添加することにより、複合粒子を水中へ再分散させたときの平均粒子径を溶媒留去後の平均粒子径と同程度に維持できた。なお、保護剤としてスクロースを用いた場合は、凍結乾燥後にナノ粒子の一部がμｍオーダーに凝集することが確認されており、トレハロースとスクロースとの比較ではトレハロースの方が保護剤としてより好ましいと考えられる。 As apparent from FIGS. 6 and 7, by adding trehalose more than twice the weight ratio to PLGA, the average particle diameter when the composite particles were redispersed in water could be made less than 100 μm. . Moreover, by adding trehalose or sucrose at a weight ratio of 4 times or more with respect to PLGA, the average particle size when the composite particles were re-dispersed in water could be maintained at the same level as the average particle size after evaporation of the solvent. . In addition, when sucrose is used as a protective agent, it has been confirmed that a part of the nanoparticles aggregate on the order of μm after lyophilization, and in comparison with trehalose and sucrose, trehalose is more preferable as a protective agent. Conceivable.
実施例４で作成したトラネキサム酸・ＶＣ−ＩＰ含有ＰＬＧＡ複合粒子５０重量部に、リン酸アスコルビルマグネシウム５重量部、フェノキシエタノール０．２重量部、トコフェロール０．０１重量部、及びタルク、シリコーンを適量混合して１００重量部とし、本発明の化粧料を製造した。また、比較対照として、トラネキサム酸・ＶＣ−ＩＰ含有ＰＬＧＡ複合粒子に代えてタルクを配合した以外は同様の処方で化粧料を製造した。 An appropriate amount of 5 parts by weight of ascorbyl magnesium phosphate, 0.2 parts by weight of phenoxyethanol, 0.01 parts by weight of tocopherol, and talc and silicone were mixed with 50 parts by weight of the PLGA composite particles containing tranexamic acid / VC-IP prepared in Example 4. Thus, the cosmetic of the present invention was produced at 100 parts by weight. Further, as a comparative control, a cosmetic was produced with the same formulation except that talc was added instead of tranexamic acid / VC-IP-containing PLGA composite particles.
上記２種類の化粧料を、それぞれ無作為で選出した２０〜４０歳の健常者１０名に使用してもらい、肌触り、及び使用感について満足度を１０点満点で評価した。その結果、比較対照の化粧料では平均７．６点であったのに対し、本発明の化粧料では平均９．２点であり、肌触り及び使用感が著しく改善されることが認められた。 The above-mentioned two types of cosmetics were used by 10 healthy individuals aged 20 to 40 each selected at random, and the satisfaction degree was evaluated on a 10-point scale with respect to the touch and the feeling of use. As a result, the average of the comparative control cosmetics was 7.6 points, while the average of the cosmetics of the present invention was 9.2 points. It was confirmed that the touch and the feeling of use were remarkably improved.
本発明のナノ粒子の製造方法によれば、従来の球形晶析法では製造が困難であった平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子を簡便且つ低コストで製造することができる。また、トラネキサム酸含有ナノ粒子を形成する材料として、生体への刺激・毒性が低く、投与後分解して代謝されるＰＧＡ、ＰＬＡ、及びＰＬＧＡのいずれかを用いるので、人体への高い安全性を確保することができる。 According to the method for producing nanoparticles of the present invention, tranexamic acid-containing nanoparticles having an average particle diameter of less than 100 nm, which was difficult to produce by conventional spherical crystallization methods, can be produced simply and at low cost. In addition, as a material for forming tranexamic acid-containing nanoparticles, any of PGA, PLA, and PLGA, which has low irritation and toxicity to the living body and is decomposed and metabolized after administration, has high safety to the human body. Can be secured.
特に、生体適合性高分子として乳酸・グリコール酸共重合体を用い、トラネキサム酸と乳酸・グリコール酸共重合体との重量比を１：２〜４：１としたので、粒子の凝集や反応容器への付着を引き起こすことなく微細な粒径のナノ粒子を効率的に製造可能となり、粒子径の制御も容易となる。また、貧溶媒中にトラネキサム酸との重量比が１：１以下となるようにポリビニルアルコールを配合したので、溶媒留去工程におけるナノ粒子の凝集を抑制するとともに、ナノ粒子の平均粒子径をより微小化することができる。 In particular, lactic acid / glycolic acid copolymer is used as the biocompatible polymer, and the weight ratio of tranexamic acid to lactic acid / glycolic acid copolymer is set to 1: 2 to 4: 1. Nanoparticles having a fine particle size can be efficiently produced without causing adhesion to the particles, and the particle size can be easily controlled. Moreover, since polyvinyl alcohol was blended in a poor solvent so that the weight ratio with tranexamic acid was 1: 1 or less, the aggregation of nanoparticles in the solvent distillation step was suppressed, and the average particle size of the nanoparticles was further increased. It can be miniaturized.
また、良溶媒中に他の生理活性成分を添加することで、他の生理活性成分を内包したトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造することができる。特に、トラネキサム酸と効能や作用機序の異なる生理活性成分を内包したナノ粒子を化粧料や医薬品の原料として用いた場合、トラネキサム酸と生理活性成分との相乗効果が期待できる。 Moreover, the tranexamic acid containing nanoparticle which included the other bioactive component can be manufactured by adding another bioactive component in a good solvent. In particular, when nanoparticles containing physiologically active ingredients having different efficacy and action mechanism from tranexamic acid are used as raw materials for cosmetics and pharmaceuticals, a synergistic effect of tranexamic acid and physiologically active ingredients can be expected.
また、トラネキサム酸含有ナノ粒子を複合する複合化工程を設けることで、使用前までは取り扱いが容易で、使用時には再分散可能な複合粒子を製造することができる。このとき、複合化工程の前に糖アルコール等の保護剤を添加しておけば、熱に弱いナノ粒子に耐熱性を付与することができ、ナノ粒子を安定して保存できる。さらに、複合粒子の再分散性も向上する。特に、凍結乾燥工程により複合化する場合は、生体適合性高分子に対する重量比で２倍以上のトレハロースを保護剤として添加することで複合粒子の凝集を効果的に抑制できる。 Further, by providing a compounding step for compounding the tranexamic acid-containing nanoparticles, it is possible to produce composite particles that are easy to handle before use and can be redispersed before use. At this time, if a protective agent such as sugar alcohol is added before the complexing step, heat resistance can be imparted to the heat-sensitive nanoparticles, and the nanoparticles can be stored stably. Furthermore, the redispersibility of the composite particles is also improved. In particular, when complexing by a freeze-drying step, aggregation of the composite particles can be effectively suppressed by adding as a protective agent trehalose twice or more in weight ratio to the biocompatible polymer.
また、保護剤と共に、さらにトラネキサム酸或いは他の生理活性成分を添加すれば、目的及び用途に応じてトラネキサム酸のトータルでの含有率を高めたり、他の生理活性成分を付着させたりすることができる。 Moreover, if tranexamic acid or other physiologically active ingredients are added together with the protective agent, the total content of tranexamic acid may be increased or other physiologically active ingredients may be attached depending on the purpose and application. it can.
そして、本発明により製造されたトラネキサム酸含有ナノ粒子或いは複合粒子は、皮膚浸透性が非常に高く、製造が容易で取り扱い性にも優れるため、化粧料や外用薬の原料として特に有用である。 The tranexamic acid-containing nanoparticles or composite particles produced according to the present invention are particularly useful as a raw material for cosmetics and external preparations because they have very high skin permeability, are easy to produce and are easy to handle.
１ トラネキサム酸含有ナノ粒子
２ 生体適合性高分子
３ トラネキサム酸
４ 複合粒子
５ 保護剤
1 tranexamic acid-containing
Claims (15)
前記トラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液から有機溶媒を留去する溶媒留去工程と、
を有するトラネキサム酸含有ナノ粒子の製造方法。 Nanoparticles that produce a suspension of tranexamic acid-containing nanoparticles in which tranexamic acid is encapsulated and supported on the surface by adding a solution in which a biocompatible polymer is dissolved in an organic solvent to an aqueous solution in which tranexamic acid is dissolved Forming process;
A solvent distillation step of distilling off the organic solvent from the suspension of tranexamic acid-containing nanoparticles;
A method for producing tranexamic acid-containing nanoparticles having
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