JP2006321763A - Biocompatibilie nanoparticle and method for production of the same - Google Patents

Biocompatibilie nanoparticle and method for production of the same Download PDF

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hydrophilic
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Inventor
Kaori Hara
Hiroyuki Tsujimoto
香織 原
広行 辻本
Original Assignee
Hosokawa Funtai Gijutsu Kenkyusho:Kk
株式会社ホソカワ粉体技術研究所
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide biocompatible nanoparticles encapsulating a medicinal substance with a high rate irrespective of the medicinal substance is hydrophilic or hydrophobic, and to provide a method for producing the same. <P>SOLUTION: The invention relates to the biocompatible nanoparticles 1 comprising a hydrophilic polymer block 3 thrusting to the surface of the particle and forming a shell part 5, and a hydrophobic polymer block 2 locating at a core section 6 to form a core shell structure. The leak out of the hydrophilic component 7 to a poor solvent is suppressed by a mutual action with the hydrophilic polymer block 3 and the hydrophilic component 7 is encapsulated in the shell part 5 of the nanoparticles 1. <P>COPYRIGHT: (C)2007,JPO&INPIT

Description

本発明は、生体適合性の高分子に生物活性成分を封入した生体適合性ナノ粒子に関するものである。 The present invention relates to biocompatible nanoparticles encapsulating biologically active ingredient in a biocompatible polymer.

薬剤療法を行う場合、通常、薬物は体内で吸収・分解されたり、全身、即ち患部(臓器や組織、細胞、病原体など)以外の部位にも広範囲に拡散したりするため、患部に到達する薬物は投与された内の極微量であると言われている。 When performing drug therapy usually the drug or is absorbed and degraded in the body, the whole body, i.e. the affected area (organs and tissues, cells, etc. pathogens) for or extensively diffused in sites other than the drug to reach the affected area it is said to be very small amount of which is administered. つまり、患部に薬物が到達できるか否かは、人為的にコントロールできるものではなかった。 That is, whether the drug can reach the affected area, was not able artificially controlled. 一方、患部に到達すべき薬物量から逆算して薬剤投与量を決定すると、その投与量は非常に多いものとなり、副作用発現の可能性が高くなってしまう。 On the other hand, if you backward from the amount of drug to be reached in the affected area to determine the drug dose, the dose becomes very large, the possibility of side effects is increased.

一般的に、薬物は、必要な量を必要な時間に必要な部位で作用させるのが理想とされている。 In general, the drug of the action necessary amount at the site required for the time required is ideal. そこで、薬物が患部に到達するまで吸収・分解されないようにして、過剰な薬物投与を抑える技術、いわゆるDrug Delivery System(以下、DDSという)が考案され、近年、盛んに研究されている。 Therefore, drug so as not absorbed and decomposed until it reaches the affected area, techniques of suppressing the excessive drug administration, so called Drug Delivery System (hereinafter, referred to as DDS) have been devised in recent years, have been actively studied. DDSは、薬物を膜(キャリアー)で包むことにより、途中で吸収・分解されることなく、目標とする患部に薬物を効果的かつ集中的に送り込み、患部で薬物を放出させる技術であり、薬物の治療効果を高めるだけでなく、副作用の軽減も期待できるというメリットがある。 DDS, by wrapping the drug film (carrier), without being absorbed and decomposed in the middle, targets and effectively and intensively fed a drug to the affected area to a technique for releasing a drug in the affected area, the drug not only enhance the therapeutic effect, side effects of mitigation also there is an advantage that can be expected.

DDSにおいて中心となる技術は、微量の薬物を生体適合性の高分子で包み込み、毛細血管の微小な穴を通り抜けることができる数十ナノメートル程度のナノ粒子とする技術である。 Technology at the heart in the DDS, a small amount of drug wrapped with a biocompatible polymer, a technique of several tens nanometers nanoparticles can pass through the tiny holes in the capillaries. この薬物含有ナノ粒子は、目標とする患部まで薬物を安定して確実に運搬するとともに、高分子の種類や投与後の経過時間で薬物の放出速度(徐放性)をコントロールすることにより、患部に到達した時点で薬物を放出することができ、注射剤や経口剤としての用途の他、従来、皮膚深部まで十分浸透させることが困難であった外用薬剤にも高い効果を発揮する。 The drug-containing nanoparticles with by the drug to the affected area stably reliably transported to the target, by controlling the rate of release (sustained release) of a drug in the elapsed time after the type and dose of the polymer, the affected area can release the drug at the time it reaches the other applications as injections and oral agents, conventionally, it is sufficiently penetrate deep skin exhibits high effect in which was topical preparations difficult.

ナノ粒子を構成する素材としての生体適合性高分子は、生体への刺激・毒性が低く、生体適合性で、投与後分解して代謝される生体内分解性のものが望ましい。 Biocompatible polymers as a material constituting the nanoparticles are less stimulus-toxicity to a living body, biocompatible, preferably those of the biodegradable metabolized decomposed after administration. また、内包する薬物を持続して徐々に放出する粒子であることが好ましい。 Further, it is preferable to maintain the drug enclosing a particle that release slowly. このような素材として、例えばポリ乳酸・グリコール酸共重合体(以下、PLGAという)が好適に用いられている。 Such material, such as polylactic acid-glycolic acid copolymer (hereinafter, referred to as PLGA) are preferably used. PLGAは薬物を内包可能であり、当該薬物の効力を保持したまま長期間保存できることが知られている。 PLGA is capable encapsulating drugs, known to be stored for a long period of time while maintaining the efficacy of the drug. さらに、PLGAの加水分解・長期半減期の特徴から、数日から1ヶ月単位の徐放ができると考えられる。 In addition, from the characteristics of the hydrolysis-term and long-term half-life of the PLGA, it is considered from a few days it is a sustained release of the 1-month unit.

特許文献1には、生分解性高分子から成る担体に薬物を封入して薬物の放出を調整しうる多重エマルジョン法による薬物含有ナノ粒子の製造方法が開示されており、生分解性高分子としてPLGAを用いた例が記載されている。 Patent Document 1, a manufacturing method is disclosed of the drug-containing nanoparticles by multiple emulsion method capable of drug carrier comprising a biodegradable polymer encapsulating adjust the release of a drug, as a biodegradable polymer example using the PLGA is described. また、特許文献2には、PLGA内にピリドンカルボン酸化合物を封入することにより、封入率の改善及び安定した徐放性を実現し、血中や患部での薬物濃度の長期間の保持を可能としたマイクロカプセル製剤が開示されている。 In Patent Document 2, by encapsulating the pyridonecarboxylic acid compound in the PLGA, and provide improved and stable controlled release of encapsulation rate, enables long-term retention of the drug concentration in the blood or affected area microcapsules formulation is disclosed in which a.

このようなナノ粒子は、一般に、良溶媒に溶解させた薬物溶液を、撹拌下、薬物を溶解し難い貧溶媒中に滴下することで、薬物の結晶を析出させる球形晶析法を用いて製造される。 Such nanoparticles are generally drug solution prepared by dissolving in a good solvent, stirring, by dropwise drug in a poor solvent which hardly dissolve, by using spherical crystallization method for precipitating crystals of the drug preparation It is. 球形晶析法では、物理化学的な手法でナノ粒子を形成でき、しかも得られるナノ粒子が略球形であるため、均質なナノ粒子を、触媒や原料化合物の残留といった問題を考慮する必要なく、容易に形成することができる。 The spherical crystallization method, can form nanoparticles with physicochemical technique, and since the resulting nanoparticles are substantially spherical, homogeneous nanoparticles, without the need to consider the residual problems such as the catalyst or the starting compound, it can be easily formed. しかしながら、貧溶媒として水相を用いた場合、一般に水に対する溶解度の高い親水性の薬物は、晶析時に良溶媒の拡散に伴い貧溶媒中へ拡散してしまうため、特許文献1、2の方法では、親水性の薬物を高封入率でナノ粒子内に封入することは困難であった。 However, when using an aqueous phase as a poor solvent, generally to hydrophilic drugs having high water solubility, diffuses into with the diffusion of the good solvent to the crystallization time poor solvent, the method of Patent Documents 1 and 2 So it has been difficult to encapsulate in nanoparticles of hydrophilic drugs with high encapsulation efficiency.

また、特許文献3には、マクロファージにより血流から浄化されにくく薬物の放出速度の調整が可能な粒子とするために、生分解性高分子として表面にポリアルキレングリコール部分を有するPLGAを用いた薬物含有ナノ粒子が開示されているが、特に親水性の薬物の封入率を高める旨の示唆はなく、封入率向上のための具体的方法についても何ら記載されていなかった。 In Patent Document 3, in order to have particles capable adjustment of the release rate of the drug difficult to clean from the bloodstream by macrophages were used PLGA having a polyalkylene glycol moiety on the surface as a biodegradable polymer drug Although containing nanoparticles are disclosed, no suggestion that the particular increase the encapsulation rate of hydrophilic drugs, has not been described any even specific methods for encapsulation rate increase.

一方、特許文献4には、生分解性ポリマーと酸化亜鉛との有機溶媒溶液に生理活性ポリペプチドを分散させた後、有機溶媒を除去することにより、生理活性ポリペプチドの封入率を高めた徐放性薬剤の製造方法が、特許文献5には、生分解性ポリマーの水溶液に水混和性有機溶媒或いは揮発性の塩類を添加して凍結乾燥することにより、生理活性ポリペプチドの封入率を高めた徐放性薬剤の製造方法がそれぞれ開示されており、生分解性ポリマーとしてPLGAを用いることも記載されている。 On the other hand, Patent Document 4, after dispersing the physiologically active polypeptide in the organic solvent solution of the zinc oxide and the biodegradable polymer, by removing the organic solvent, Xu with increased encapsulation rate of the physiologically active polypeptide method for producing a release agent, Patent Document 5, by freeze-drying an aqueous solution of the biodegradable polymer with the addition of water-miscible organic solvent or volatile salt, increase the encapsulation rate of the physiologically active polypeptide sustained-release and a manufacturing method of a medicament is disclosed respectively, it has also been described the use of PLGA as the biodegradable polymer.

しかしながら、特許文献4、5の方法では、PLGAに対する生理活性ポリペプチドの封入率は向上できるものの、ポリペプチド以外の親水性薬物に適用可能である旨の記載はなく、親水性の薬物一般の封入率を高める方法としては十分ではなかった。 However, in the method of Patent Document 4 and 5, although the encapsulation ratio of the physiologically active polypeptide to the PLGA can be improved, there is no description of the effect that can be applied to hydrophilic drugs other than polypeptides, encapsulation of hydrophilic drugs generally as a method of increasing the rate it was not sufficient.
特開2002−20269号公報 JP 2002-20269 JP 特開2003−300882号公報 JP 2003-300882 JP 特表平9−504042号公報 Hei 9-504042 JP 特開平10−231252号公報 JP 10-231252 discloses 特開平11−322631号公報 JP 11-322631 discloses

本発明は、上記問題点に鑑み、封入される薬物が親水性であるか疎水性であるかに係わらず、ナノ粒子内部への封入率を高めた生体適合性ナノ粒子を提供することを目的とする。 The present invention aims to view of the above problems, the drug to be encapsulated, regardless of whether hydrophobic is hydrophilic providing a biocompatible nanoparticles enhanced encapsulation rate into the interior nanoparticles to. また、本発明の他の目的は、簡便且つ低コストで環境負荷も少ない生体適合性ナノ粒子の製造方法を提供することを目的とする。 Another object of the present invention has an object to provide a method for producing easily and environmental impact is small biocompatible nanoparticles at low cost.

上記目的を達成するために本発明の第1の構成は、生体適合性の疎水性ポリマーブロック及び生体適合性の親水性ポリマーブロックが結合したブロック共重合体から成り、前記疎水性ポリマーブロックがコア側に位置し、前記親水性ポリマーブロックがシェル側に位置するコアシェル構造を形成している生体適合性ナノ粒子であって、親水性の生物活性成分を前記親水性ポリマーブロックに封入した生体適合性ナノ粒子である。 The first configuration is biocompatible made hydrophobic polymer block and a biocompatible hydrophilic polymer block is a block copolymer linked, the hydrophobic polymer block is a core of the present invention in order to achieve the above object located on a side, the hydrophilic polymer block is a biocompatible nanoparticles which form a core-shell structure located on the shell side, biocompatible hydrophilic bioactive components encapsulated in the hydrophilic polymer blocks it is a nanoparticle.

また本発明の第2の構成は、生体適合性の疎水性ポリマーブロック及び生体適合性の親水性ポリマーブロックが結合したブロック共重合体から成り、前記疎水性ポリマーブロックがシェル側に位置し、前記親水性ポリマーブロックがコア側に位置するコアシェル構造を形成している生体適合性ナノ粒子であって、親水性の生物活性成分を前記親水性ポリマーブロックに封入した生体適合性ナノ粒子である。 The second configuration of the present invention comprises a block copolymer biocompatible hydrophobic polymer block and a biocompatible hydrophilic polymer block are bonded, the hydrophobic polymer block is positioned on the shell side, the hydrophilic polymer block is a biocompatible nanoparticles which form a core-shell structure located on the core side, a biocompatible nanoparticles hydrophilic bioactive components encapsulated in the hydrophilic polymer blocks.

また本発明の第3の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子において、前記親水性の生物活性成分が両親媒性であり、該両親媒性の生物活性成分を前記疎水性ポリマーブロックと前記親水性ポリマーブロックの両方に封入したことを特徴としている。 A third configuration of the present invention is also in biocompatible nanoparticles having the above-described configuration, the hydrophilic bioactive components are amphipathic, the amphiphilic bioactive ingredient and the hydrophobic polymer block wherein It is characterized in that encapsulated in both of the hydrophilic polymer block.

また本発明の第4の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子において、前記生物活性成分として、さらに疎水性の生物活性成分を前記疎水性ポリマーブロックに封入したことを特徴としている。 The fourth embodiment of the present invention is a biocompatible nanoparticles having the above structure, as the bioactive ingredient is characterized in that it further hydrophobic bioactive ingredient encapsulated in the hydrophobic polymer block.

また本発明の第5の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子において、前記疎水性ポリマーブロックが乳酸・グリコール酸共重合体で構成され、前記親水性ポリマーブロックがポリエチレングリコールで構成されることを特徴としている。 The fifth embodiment of the present invention is a biocompatible nanoparticles having the above structure, that the hydrophobic polymer block is composed of lactic acid-glycolic acid copolymer, the hydrophilic polymer block is composed of polyethylene glycol It is characterized in.

また本発明の第6の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子において、前記ポリエチレングリコールの分子量が5,000以上10,000以下であることを特徴としている。 The sixth aspect of the invention, the biocompatible nanoparticles having the above structure is characterized in that the molecular weight of the polyethylene glycol is 5,000 to 10,000.

また本発明の第7の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子が非注射用途に使用されることを特徴としている。 The seventh configuration of the present invention is characterized in that the biocompatible nanoparticles having the above structure is used in a non-injectable use.

また本発明の第8の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子が複合化されることを特徴としている。 The eighth aspect of the present invention is characterized in that the biocompatible nanoparticles having the above structure is complexed.

また本発明の第9の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子と共にビタミンまたはビタミン誘導体が複合化される。 The ninth aspect of the invention, a vitamin or vitamin derivative together with a biocompatible nanoparticles having the above structure is complexed.

また本発明の第10の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子と共に糖アルコールが複合化される。 The tenth aspect of the invention, sugar alcohols together with a biocompatible nanoparticles having the above structure is complexed.

また本発明の第11の構成は、生体適合性の疎水性ポリマーブロック及び生体適合性の親水性ポリマーブロックが結合したブロック共重合体と、親水性の生物活性成分とを有機溶媒及び必要により加えた水に溶解する溶解工程と、前記溶解工程によって得られた溶液を水相に加えて、前記生物活性成分が少なくともシェル側に位置する親水性ポリマーブロックに封入された生体適合性ナノ粒子を形成してナノ粒子含有溶液とするナノ粒子形成工程と、前記ナノ粒子含有溶液から前記有機溶媒を留去する溶媒留去工程とを有することを特徴とする生体適合性ナノ粒子の製造方法である。 The eleventh aspect of the present invention, in addition the block copolymer biocompatible hydrophobic polymer block and a biocompatible hydrophilic polymer block are bonded by an organic solvent and optionally a hydrophilic bioactive components and a dissolution step of dissolving in water, the solution obtained by the dissolution step is added to the aqueous phase, forming said bioactive component is biocompatible nanoparticles encapsulated in a hydrophilic polymer block located at least the shell side and the nanoparticle formation step of the nano-particle-containing solution, a method for producing a biocompatible nanoparticles; and a solvent distillation step of distilling off the organic solvent from the nanoparticle-containing solution.

また本発明の第12の構成は、生体適合性の疎水性ポリマーブロック及び生体適合性の親水性ポリマーブロックが結合したブロック共重合体と、親水性の生物活性成分とを有機溶媒及び必要により加えた水に溶解する溶解工程と、前記溶解工程によって得られた溶液を油相に加えて、前記生物活性成分が少なくともコア側に位置する親水性ポリマーブロックに封入された生体適合性ナノ粒子を形成してナノ粒子含有溶液とするナノ粒子形成工程と、前記ナノ粒子含有溶液から前記有機溶媒を留去する溶媒留去工程とを有することを特徴とする生体適合性ナノ粒子の製造方法である。 The twelfth aspect of the invention, in addition the block copolymer biocompatible hydrophobic polymer block and a biocompatible hydrophilic polymer block are bonded by an organic solvent and optionally a hydrophilic bioactive components and a dissolution step of dissolving in water, the solution obtained by the dissolution step in addition to the oil phase, forming the bioactive component is biocompatible nanoparticles encapsulated in a hydrophilic polymer block located at least the core-side and the nanoparticle formation step of the nano-particle-containing solution, a method for producing a biocompatible nanoparticles; and a solvent distillation step of distilling off the organic solvent from the nanoparticle-containing solution.

また本発明の第13の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、前記水相がポリビニルアルコール水溶液であることを特徴としている。 The thirteenth configuration of the present invention is a method of manufacturing a biocompatible nanoparticles having the above structure is characterized in that the aqueous phase is polyvinyl alcohol aqueous solution.

また本発明の第14の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、前記油相がグリセリントリエステルであることを特徴としている。 The fourteenth aspect of the invention is a method of manufacturing a biocompatible nanoparticles having the above structure is characterized in that the oil phase is glycerin triester.

また本発明の第15の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、前記ポリビニルアルコール水溶液中のポリビニルアルコール濃度が0.5重量%未満であることを特徴としている。 The fifteenth aspect of the invention, the method for producing a biocompatible nanoparticles having the above structure, polyvinyl alcohol concentration in the aqueous solution of polyvinyl alcohol is characterized in that less than 0.5 wt%.

また本発明の第16の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、前記溶媒留去工程の後に、さらに前記ナノ粒子含有溶液からポリビニルアルコールを除去する除去工程を有することを特徴としている。 The sixteenth aspect of the present invention, characterized by having in the manufacturing method of biocompatible nanoparticles having the above configuration, after the solvent evaporation step, a removal step to further remove the polyvinyl alcohol from the nanoparticles-containing solution It is set to.

また本発明の第17の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、前記ポリビニルアルコール水溶液中のポリビニルアルコール濃度が0.1重量%以上10重量%以下であることを特徴としている。 The seventeenth aspect of the invention, the method for producing a biocompatible nanoparticles having the above structure, polyvinyl alcohol concentration in the aqueous solution of polyvinyl alcohol is characterized in that 10% by weight or less than 0.1 wt% .

また本発明の第18の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、前記溶解工程において、さらに疎水性の生物活性成分を有機溶媒に溶解することにより、前記親水性の生物活性成分が少なくとも親水性ポリマーブロックに封入され、前記疎水性の生物活性成分が少なくとも疎水性ポリマーブロックに封入された生体適合性ナノ粒子を形成することを特徴としている。 The eighteenth configuration of the present invention is a method of manufacturing a biocompatible nanoparticles having the above structure, in the dissolution step, by further dissolving a hydrophobic bioactive ingredient in an organic solvent, the hydrophilic bioactive components are encapsulated in at least the hydrophilic polymer block, wherein the hydrophobic bioactive ingredient is characterized by forming a biocompatible nanoparticles encapsulated in at least a hydrophobic polymer block.

また本発明の第19の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、前記有機溶媒がアセトンとエタノールの混合液であることを特徴としている。 The nineteenth configuration of the present invention is a method of manufacturing a biocompatible nanoparticles having the above structure is characterized in that the organic solvent is a mixture of acetone and ethanol.

また本発明の第20の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、前記溶媒留去工程又は前記除去工程の後に、さらに前記ナノ粒子を複合化する複合化工程を有することを特徴としている。 The twentieth aspect of the present invention is a method of manufacturing a biocompatible nanoparticles having the above configuration, after the solvent evaporation step or the removing step, to have a composite step of further compounding the nanoparticles It is characterized.

また本発明の第21の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、前記複合化工程において、前記ナノ粒子と共に、糖アルコール、ビタミンおよびビタミン誘導体のうちの1種以上を複合化させることを特徴としている。 The first 21 configuration of the present invention is a method of manufacturing a biocompatible nanoparticles having the above structure, in the composite step, together with the nanoparticles, conjugating one or more of sugar alcohols, vitamins and vitamin derivatives It is characterized in that to.

また本発明の第22の構成は、上記構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、前記複合化工程が凍結乾燥により行われることを特徴としている。 The 22nd aspect of the invention, the method for producing a biocompatible nanoparticles having the above-described configuration, the composite process is characterized by being performed by freeze-drying.

本発明の第1の構成によれば、疎水性ポリマーブロック及び親水性ポリマーブロックが結合したブロック共重合体から成るコアシェル構造の生体適合性ナノ粒子において、シェル側に位置する親水性ポリマーブロックに親水性の生物活性成分を封入することにより、疎水性ポリマーを用いた場合に球形晶析法では封入が困難であった親水性の生物活性成分が高封入率で封入された生体適合性ナノ粒子が提供される。 According to a first aspect of the present invention, the biocompatible nanoparticle core-shell structure comprising a block copolymer the hydrophobic polymer block and a hydrophilic polymer block are bonded, hydrophilic to hydrophilic polymer block located on the shell side by encapsulating the sex of the bioactive ingredient, the spherical crystallization hydrophilic bioactive components was difficult to encapsulate in the encapsulated with a high encapsulation rate biocompatible nanoparticles in the case of using a hydrophobic polymer It is provided.

また、本発明の第2の構成によれば、疎水性ポリマーブロック及び親水性ポリマーブロックが結合したブロック共重合体から成るコアシェル構造の生体適合性ナノ粒子において、コア側に位置する親水性ポリマーブロックに親水性の生物活性成分を封入することにより、親水性の生物活性成分が高封入率で封入されるとともに、シェル側に位置する疎水性ポリマーブロックの分解に伴い、生物活性成分を長期間に渉って徐放可能な生体適合性ナノ粒子が提供される。 Further, according to the second aspect of the present invention, the biocompatible nanoparticle core-shell structure comprising a block copolymer the hydrophobic polymer block and a hydrophilic polymer block are bonded, a hydrophilic polymer block located on the core side the by encapsulating hydrophilic bioactive components, together with a hydrophilic bioactive components are encapsulated with a high encapsulation efficiency, along with the degradation of the hydrophobic polymer block located on the shell side, the long-term bioactive components sustained release biocompatible nanoparticles are provided me Wataru.

また、本発明の第3の構成によれば、上記第1又は第2の構成の生体適合性ナノ粒子において、生物活性成分が両親媒性の場合、生物活性成分を疎水性ポリマーブロックと親水性ポリマーブロックの両方に封入することにより、生物活性成分の親水性の程度に関係なくナノ粒子内への封入率を向上させることができる。 Further, according to the third aspect of the present invention, the biocompatible nanoparticles of the first or second configuration, if the bioactive component is amphiphilic, hydrophobic polymer block and a hydrophilic bioactive components by sealing both polymer blocks, it is possible to improve the encapsulation efficiency into nano particles regardless of the degree of hydrophilicity of the bioactive ingredient.

また、本発明の第4の構成によれば、上記第1乃至第3のいずれかの構成の生体適合性ナノ粒子において、生物活性成分として、さらに疎水性の生物活性成分を疎水性ポリマーブロックに封入することにより、親水性であるか疎水性であるかを問わず様々な生物活性成分を同時に封入可能な生体適合性ナノ粒子となる。 Further, according to the fourth aspect of the present invention, in the first to third configuration of any one of biocompatible nanoparticles, as bioactive ingredient, further hydrophobic biologically active ingredient in a hydrophobic polymer block by encapsulating, a variety of biologically active ingredient can simultaneously sealed biocompatible nanoparticles regardless of whether hydrophobic hydrophilic.

また、本発明の第5の構成によれば、上記第1乃至第4のいずれかの構成の生体適合性ナノ粒子において、生体適合性高分子として工業的にも流通するブロック共重合体、即ち、疎水性ポリマーが乳酸・グリコール酸共重合体で構成され、親水性ポリマーがポリエチレングリコールで構成されるポリエチレングリコール−PLGA共重合体を用いることにより、親水性の生物活性成分の封入性能に優れた生体適合性ナノ粒子を低コストで提供できる。 Further, according to the fifth structure of the present invention, in the first to fourth configuration of any one of biocompatible nanoparticles, block copolymers flowing as an industrial biocompatible polymers, namely , hydrophobic polymer is composed of lactic acid-glycolic acid copolymer, the hydrophilic polymer by using a polyethylene glycol -PLGA copolymer composed of polyethylene glycol, excellent encapsulation performance bioactive components of the hydrophilic the biocompatible nanoparticles can be provided at low cost.

また、本発明の第6の構成によれば、上記第5の構成の生体適合性ナノ粒子において、ポリエチレングリコールの分子量を5,000以上10,000以下とすることにより、親水性の生物活性成分の封入率が一層向上するとともに、ポリエチレングリコール−PLGA共重合体の製造時の取り扱いも容易となる。 Further, according to the sixth aspect of the present invention, the biocompatible nanoparticles of the fifth configuration, by the molecular weight of polyethylene glycol 5,000 to 10,000, hydrophilic bioactive components with the encapsulation efficiency is further improved, it becomes easy to handle during manufacture of the polyethylene glycol -PLGA copolymer.

また、本発明の第7の構成によれば、上記第1乃至第6のいずれかの構成の生体適合性ナノ粒子を非注射用途に使用することにより、経口投与剤や、皮膚深部まで十分浸透させることが困難であった外用薬物に用いた場合にも、身体内部に十分浸透して高い薬効を発揮する。 According to the seventh aspect of the present invention, the use of biocompatible nanoparticles in the first to sixth configuration of any one of the non-injectable use, or oral dosage, sufficient to deep skin penetration in the case of using the external drug has been difficult to exert high efficacy sufficiently penetrate into the body.

また、本発明の第8の構成によれば、上記第1乃至第7のいずれかの構成の生体適合性ナノ粒子を複合化することにより、容器への充填時に取り扱いが容易で、使用時には再分散可能な凝集粒子となる。 In addition, according to the eighth aspect of the present invention, by compounding the biocompatible nanoparticle any one of the above first to seventh, it is easy to handle when filling the container, in use again a dispersible agglomerated particles.

また、本発明の第9の構成によれば、上記第8の構成の生体適合性ナノ粒子において、ナノ粒子と共に糖アルコールを複合化することにより、複合化されたナノ粒子の分散性、耐熱性が向上するとともに、一旦封入された生物活性成分のナノ粒子表面からの再漏出を防止できる。 According to the ninth aspect of the present invention, the biocompatible nanoparticle structure of the eighth, by complexing the sugar alcohol with nanoparticles, the dispersibility of the composite nanoparticles, heat resistance There is improved and can be prevented once again leakage from encapsulated nanoparticle surface bioactive components.

また、本発明の第10の構成によれば、上記第8又は第9の構成の生体適合性ナノ粒子において、ナノ粒子と共にビタミンまたはビタミン誘導体を複合化することにより、ナノ粒子内に封入された生物活性成分の効果と、ナノ粒子に複合化されたビタミン類やビタミン誘導体の効果とが相乗的に作用して、一層顕著な薬効が発現される。 Further, according to the tenth aspect of the invention, in the eighth or ninth biocompatible nanoparticles configuration of, by complexing the vitamins or vitamin derivatives with nanoparticles encapsulated within nanoparticles and effectiveness of the bioactive ingredient, and the effects of which are complexes of vitamins and vitamin derivatives act synergistically to the nanoparticles, are more prominent efficacy expression.

また、本発明の第11又は第12の構成によれば、疎水性ポリマーブロック及び親水性ポリマーブロックが結合した生体適合性高分子と、親水性の生物活性成分とを有機溶媒及び必要により加えた水に溶解した後、得られた溶液を水相又は油相に加えて、生物活性成分が少なくとも親水性ポリマーブロックに封入された生体適合性ナノ粒子を形成してナノ粒子含有溶液とした後、ナノ粒子含有溶液から有機溶媒を留去して生体適合性ナノ粒子を製造することにより、親水性の生物活性成分の封入率が高く、且つ封入率や平均粒子径のばらつきの少ない生体適合性ナノ粒子を簡便且つ低コストで製造することができる。 Further, according to the eleventh or twelfth structure of the present invention, the biocompatible polymer hydrophobic polymer block and a hydrophilic polymer block are bonded, and a hydrophilic bioactive components were added an organic solvent and optionally It was dissolved in water and the resulting solution was added to the aqueous phase or oil phase, after which the bioactive ingredient is a nanoparticle-containing solution to form a biocompatible nanoparticles encapsulated in at least the hydrophilic polymer block, by then distilling off the organic solvent from the nanoparticle-containing solution to produce a biocompatible nanoparticles, high encapsulation efficiency of the hydrophilic bioactive components, and less biocompatible nano variation in encapsulation efficiency and average particle size it can be produced in a simple and low cost particles.

また、本発明の第13の構成によれば、上記第11の構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、水相としてポリビニルアルコール水溶液を用いることにより、ナノ粒子表面へポリビニルアルコールが付着して、乾燥後の水への再分散性が向上するとともに、人体に対して安全性が高く、且つ環境負荷の少ない生体適合性ナノ粒子を製造することができる。 Further, according to the 13 structure of the present invention, in the manufacturing method of the eleventh aspect of biocompatible nanoparticles, by using a polyvinyl alcohol aqueous solution as an aqueous phase, adhering polyvinyl alcohol to the nanoparticle surface , thereby improving the redispersibility in water after drying, can be safe to the human body is high, and the production of small biocompatible nanoparticles environmental impact.

また、本発明の第14の構成によれば、上記第12の構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、油相としてグリセリントリエステルを用いることにより、親水性の生物活性成分はグリセリントリエステル中に拡散するより、非疎水的に親水性ポリマーブロックと相互作用して、ナノ粒子のコア部に高い封入率で封入される。 Further, according to the fourteenth aspect of the invention, in the manufacturing method of the twelfth configuration of biocompatible nanoparticles, by using a glycerol triester as an oil phase, a hydrophilic bioactive components are glycerol triesters from diffusing into the non-hydrophobically interacts with the hydrophilic polymer block is encapsulated with a high encapsulation ratio in the core portion of the nano-particles.

また、本発明の第15の構成によれば、上記第13の構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、ポリビニルアルコール水溶液中のポリビニルアルコール濃度を0.5重量%未満とすることにより、高濃度のポリビニルアルコール水溶液を用いた場合のように、ナノ粒子を遠心分離などで洗浄して余剰のポリビニルアルコールを除去する除去工程が不要となるため、製造時の工程と時間が削減できる。 Further, according to the 15 structure of the present invention, in the manufacturing method of the thirteenth structure of the biocompatible nanoparticles, polyvinyl alcohol concentration in the aqueous polyvinyl alcohol solution by less than 0.5 wt%, high as in the case of using the polyvinyl alcohol aqueous solution with a concentration, for removal step of removing the excess polyvinyl alcohol nanoparticles were washed with centrifugal separation is not required, thereby reducing the step and time in manufacturing.

また、本発明の第16の構成によれば、上記第13の構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、溶媒留去工程の後に、さらにナノ粒子含有溶液からポリビニルアルコールを除去する除去工程を設けることにより、高濃度のポリビニルアルコール水溶液を用いてナノ粒子を形成した後、余剰のポリビニルアルコールを除去することができ、ナノ粒子中に封入される生物活性成分の封入率を安定させることができる。 In addition, according to the sixteenth configuration of the present invention, in the manufacturing method of the thirteenth structure of the biocompatible nanoparticles, after solvent evaporation process, a further step of removing the polyvinyl alcohol from the nanoparticle containing solution by providing, after forming the nano-particles using a high concentration of polyvinyl alcohol aqueous solution, it is possible to remove excess polyvinyl alcohol, the encapsulation rate of the bioactive ingredient to be encapsulated in the nanoparticles can be stabilized .

また、本発明の第17の構成によれば、上記第16の構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、ポリビニルアルコール水溶液中のポリビニルアルコール濃度を0.1重量%以上10重量%以下とすることにより、水溶液の粘度を有機溶媒の拡散に対して適切な範囲に維持することができる。 Further, according to the seventeenth structure of the present invention, in the manufacturing method of the sixteenth configuration of biocompatible nanoparticles, polyvinyl alcohol concentration in the aqueous solution of polyvinyl alcohol and 0.1 wt% to 10 wt% it is thereby possible to maintain a suitable range of viscosity of the aqueous solution to diffusion of the organic solvent.

また、本発明の第18の構成によれば、上記第11乃至第17のいずれかの構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、親水性の生物活性成分に加えて疎水性の生物活性成分を有機溶媒に溶解し、親水性の生物活性成分が少なくとも親水性ポリマーブロックに封入され、疎水性の生物活性成分が少なくとも疎水性ポリマーブロックに封入された生体適合性ナノ粒子を製造することにより、親水性及び疎水性の生物活性成分の封入率が共に高く、且つ封入率や平均粒子径のばらつきの少ない生体適合性ナノ粒子を簡便且つ低コストで製造することができる。 Further, according to the 18 structure of the present invention, the eleventh to the manufacturing method of any one of the biocompatible nanoparticle seventeenth bioactive component hydrophobic in addition to the hydrophilic bioactive components by is dissolved in an organic solvent, a hydrophilic bioactive components are encapsulated in at least the hydrophilic polymer blocks, hydrophobic bioactive component to produce a biocompatible nanoparticles encapsulated in at least a hydrophobic polymer block, hydrophilic and hydrophobic bioactive ingredient encapsulation ratio are both high, and little variation biocompatible nanoparticles encapsulating rate and the average particle size can be produced in a simple and low cost.

また、本発明の第19の構成によれば、上記第11乃至第18のいずれかの構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、有機溶媒として揮発性の良いアセトンとエタノールの混合液を用い、後にそれらの留去工程を入れることにより、ナノ粒子中の残留有機溶媒をなくし、人体に対する悪影響のおそれの少ないナノ粒子を製造することができ、且つ環境への負荷も低減される。 Further, according to the 19 structure of the present invention, in the manufacturing method of the eleventh to eighteenth any one of the biocompatible nanoparticles, a mixture of good acetone and ethanol volatile organic solvent used , later by placing their distillation step, eliminating the residual organic solvent in the nanoparticles, it is possible to manufacture a fear less nanoparticles adverse to the human body, and the load on the environment is also reduced.

また、本発明の第20の構成によれば、上記第11乃至第19のいずれかの構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、ナノ粒子を複合化する複合化工程を設けることにより、容器への充填時に取り扱いが容易で、使用時には再分散可能な凝集粒子に複合化することができる。 Further, according to the 20 structure of the present invention, in the manufacturing method of the eleventh to nineteenth any one of the biocompatible nanoparticles, by providing a composite step of composite nanoparticles, container easily handled during filling of the can be conjugated to a redispersible aggregated particles at the time of use.

また、本発明の第21の構成によれば、上記第20の構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、複合化工程において、ナノ粒子と共に、糖アルコール、ビタミンおよびビタミン誘導体のうちの1種以上を複合化させることにより、複合化されたナノ粒子の分散性、耐熱性や薬効を一層向上させることができる。 Further, according to the 21 structure of the present invention, in the manufacturing method of the twentieth structure of biocompatible nanoparticles in the composite step, the nanoparticles, one of sugar alcohols, vitamins and vitamin derivatives more by compounding, it is possible to dispersibility of the composite nanoparticles, heat resistance and efficacy is further improved.

また、本発明の第22の構成によれば、上記第20又は第21の構成の生体適合性ナノ粒子の製造方法において、複合化工程を凍結乾燥によって行うことにより、ナノ粒子の複合化を良好に且つ効率よく行うことができる。 Further, according to the 22 structure of the present invention, in the manufacturing method of the twentieth or twenty-first configuration of biocompatible nanoparticles, by performing the conjugation step by freeze drying, the composite nanoparticles good it can be performed and efficiently.

以下、図面を参照しながら本発明の実施形態について説明する。 Hereinafter, with reference to the accompanying drawings, embodiments of the present invention will be described. 図1は、本発明に用いられるブロック共重合体の構造を示す模式図であり、図2は、本発明の第1実施形態に係る生体適合性ナノ粒子の構造を示す模式図である。 Figure 1 is a schematic diagram showing the structure of the block copolymer used in the present invention, FIG. 2 is a schematic diagram showing the structure of a biocompatible nanoparticle according to the first embodiment of the present invention. 生体適合性ナノ粒子1は、疎水性ポリマーブロック2と、親水性ポリマーブロック3が結合したブロック共重合体4が多数凝集して形成されたものであり、貧溶媒として水相を用いた水中エマルジョン法で調製すると、図1に示すように、親水性ポリマーブロック3が粒子表面に張り出して外殻部(シェル部)5を形成し、疎水性ポリマーブロック2は粒子内部(コア部)6に位置するコアシェル構造を形成する。 Biocompatible nanoparticle 1 is a hydrophobic polymer block 2, the hydrophilic polymer block 3 is a block copolymer 4 bound are those formed by many aggregate in water emulsion with an aqueous phase as a poor solvent When prepared by law, as shown in FIG. 1, the outer shell hydrophilic polymer block 3 projects on the particle surface (shell portion) 5 is formed, a hydrophobic polymer blocks 2 located inside the particles (core portion) 6 core-shell structure to be formed.

親水性ポリマーブロック3は、水分子を引き付けて保持する能力が高いため、親水性ポリマーブロック3が張り出したシェル部5は、貧溶媒中の水分子を引き付けて水和相を形成する。 The hydrophilic polymer block 3 has a high ability to attract and retain water molecules, the shell portion 5 which is a hydrophilic polymer block 3 projecting, attract water molecules poor solvent to form a hydrated phase. 親水性の生物活性成分(以下、親水性成分という)7は、ナノ粒子晶析時に有機溶媒(良溶媒)の拡散に伴い貧溶媒中へと拡散するが、親水性ポリマーブロック3と相互作用することにより、貧溶媒中への漏出が抑制され、ナノ粒子1のシェル部5での封入が可能になると考えられる。 Hydrophilic bioactive components (hereinafter, hydrophilic that component) 7 is diffused into the poor solvent along with the diffusion of the organic solvent to the nanoparticle crystallization time (good solvent), interact with the hydrophilic polymer block 3 it makes is suppressed leakage into the poor solvent, is believed to allow encapsulation of the shell portion 5 of the nano-particles 1.

従って、本発明の生体適合性ナノ粒子では、球形晶析法では封入が困難であった親水性の生物活性成分の封入率が向上するため、封入される生物活性成分のバリエーションを多様化したナノ粒子を簡便且つ低コストで製造することができる。 Nano Thus, the biocompatible nanoparticles of the present invention, in order to improve the encapsulation efficiency of the biologically active ingredient of a hydrophilic difficult to encapsulation spherical crystallization method, the diversified variations of bioactive components to be encapsulated it can be produced in a simple and low cost particles. なお、親水性成分7の親水性が弱くなると、親水性ポリマーブロック3との相互作用も弱くなってシェル部5への封入率が低下するが、反対に疎水性ポリマーブロック2との相互作用によりコア部6にも封入されるようになるため、親水性成分7が両親媒性であってもナノ粒子全体として高い封入率が確保されることとなる。 Incidentally, when the hydrophilicity of the hydrophilic component 7 is weakened, but encapsulation rate of the shell portion 5 becomes weaker interaction with the hydrophilic polymer block 3 is lowered, by the interaction between the hydrophobic polymer block 2 on the opposite since also to be enclosed in the core portion 6, so that the hydrophilic component 7 is high encapsulation efficiency as a whole nanoparticles even amphiphilic is ensured.

ここで、ブロック共重合体4全体の分子量が等しいとすると、ブロック共重合体4内の親水性ポリマーブロック3の分子量が小さい場合、図3(a)に示すようにナノ粒子1中に占めるコア部6の割合が大きくなり、シェル部5の割合が小さくなって親水性成分7の封入量は減少する。 Here, if the molecular weight of the block copolymer 4 are equal, occupies when the molecular weight of the hydrophilic polymer block 3 of the block copolymer 4 is small, in the nanoparticles 1 as shown in FIG. 3 (a) Core the proportion of unit (6) is increased, the charging amount of the hydrophilic component 7 the proportion of the shell portion 5 is smaller decreases. 一方、親水性ポリマーブロック3の分子量が大きい場合、図3(b)に示すようにナノ粒子1中に占めるコア部6の割合が小さくなり、シェル部5の割合が大きくなって親水性成分7の封入量は増加する。 On the other hand, when the molecular weight of the hydrophilic polymer block 3 is large, the ratio of the core portion 6 occupying in the nanoparticles 1 as shown in FIG. 3 (b) becomes small, the hydrophilic component 7 the proportion of the shell portion 5 becomes large the amount of the inclusion is increased.

また、疎水性ポリマーブロック2の分子量が等しい場合、図4(a)、(b)に示すように、コア部6の大きさは疎水性ポリマーブロック2の分子量に依存するため、親水性ポリマーブロック3の分子量に関係なく一定となるが、親水性ポリマーブロック3の分子量が大きい図4(b)では、親水性ポリマーブロック3の分子量が小さい図4(a)に比べてシェル部5が大きくなり、親水性成分7の封入量は増加する。 Also, when the molecular weight of the hydrophobic polymer blocks 2 are equal, as shown in FIG. 4 (a), (b), since the size of the core portion 6 is dependent on the molecular weight of the hydrophobic polymer block 2, the hydrophilic polymer block constant regardless of the 3 molecular weight, but in the molecular weight of the hydrophilic polymer block 3 is larger FIG. 4 (b), the shell portion 5 becomes larger than in FIG molecular weight of the hydrophilic polymer block 3 is less 4 (a) , the charging amount of the hydrophilic component 7 is increased. 従って、親水性成分7の封入量は親水性ポリマーブロック3の分子量に比例して増加する。 Therefore, the charging amount of the hydrophilic component 7 is increased in proportion to the molecular weight of the hydrophilic polymer block 3.

本発明に用いられる生体適合性のブロック共重合体4は、生体への刺激・毒性が低く、生体適合性で、投与後分解して代謝される生体内分解性のものが望ましい。 Biocompatible block copolymer 4 used in the present invention are less stimulating-toxicity to a living body, biocompatible, preferably those of the biodegradable metabolized decomposed after administration. また、内包する薬物を持続して徐々に放出する粒子であることが好ましい。 Further, it is preferable to maintain the drug enclosing a particle that release slowly. このような素材としては、特に疎水性ポリマーブロック2がポリ乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)で構成され、親水性ポリマーブロック3がポリエチレングリコール(PEG)で構成されたPEG−PLGA共重合体を好適に用いることができる。 As such materials, in particular hydrophobic polymer block 2 is composed of polylactic acid-glycolic acid copolymer (PLGA), PEG-PLGA copolymer composed of a hydrophilic polymer block 3 is polyethylene glycol (PEG) it can be used suitably.

PLGAの分子量は、5,000〜200,000の範囲内であることが好ましく、15,000〜25,000の範囲内であることがより好ましい。 The molecular weight of PLGA is preferably within the range of 5,000 to 200,000, and more preferably in the range of 15,000 to 25,000. 乳酸とグリコール酸との組成比は1:99〜99:1であればよいが、乳酸1に対しグリコール酸0.333であることが好ましい。 The composition ratio of lactic acid and glycolic acid is 1:99 to 99: may be a 1, it is preferable to lactic acid 1 0.333 glycolic acid. また、乳酸およびグリコール酸の含有量が25重量%〜65重量%の範囲内であるPLGAは、非晶質であり、かつアセトン等の有機溶媒に可溶であるから、好適に使用される。 Furthermore, PLGA content of lactic acid and glycolic acid is in the range of 25% to 65 wt% is amorphous, and because it is soluble in an organic solvent such as acetone, are preferably used.

PEGの分子量としては、1,000〜20,000の範囲内のものを使用可能であるが、前述したように、PEGの分子量に比例して親水性成分の封入率も高くなるため、PEGの分子量は3,000以上が好ましく、さらに5,000以上であることがより好ましい。 The molecular weight of the PEG, but can be used those in the range of 1,000 to 20,000, as described above, since the higher encapsulation efficiency of the hydrophilic components in proportion to the molecular weight of PEG, the PEG molecular weight is preferably 3,000 or more, more preferably more than 5,000. 一方、PEGの分子量が10,000を超えるとPEG−PLGA共重合体の製造時における取り扱いが困難となる。 On the other hand, the molecular weight of PEG is difficult to handle during manufacture of exceeding 10,000 PEG-PLGA copolymers.

従って、PEGの分子量は5,000以上10,000以下の範囲内であることがより好ましい。 Accordingly, the molecular weight of the PEG is more preferably in the range of 5,000 to 10,000. また、後述するように、PEGの分子量の増加と共に親水性成分の放出速度も速くなるため、PEGの分子量は、封入される生物活性成分の親水性や要求される徐放性の程度に応じて適宜選択すれば良い。 As will be described later, to become faster rate of release of the hydrophilic component with increasing molecular weight of PEG, the molecular weight of PEG, depending on the degree of sustained release, which is hydrophilic and the required biologically active ingredient to be encapsulated it may be appropriately selected.

PLGA以外の疎水性ポリマーブロック2としては、ポリグリコール酸(PGA)、ポリ乳酸(PLA)、ポリアスパラギン酸等が挙げられる。 The hydrophobic polymer block 2 other than PLGA, polyglycolic acid (PGA), polylactic acid (PLA), poly aspartic acid and the like. また、これらのコポリマーであるアスパラギン酸・乳酸共重合体(PAL)やアスパラギン酸・乳酸・グリコール酸共重合体(PALG)、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリエチレンのようなポリアルキレン、ポリプロピレン或いはそれらのコポリマーまたは混合物等が挙げられる。 Moreover, aspartic acid-lactic acid copolymer copolymers thereof (PAL) or aspartate-lactic acid-glycolic acid copolymer (PALG), polyamides, polycarbonates, polyalkylenes such as polyethylene, polypropylene or copolymers thereof or mixtures etc. the.

PEG以外の親水性ポリマーブロック3としては、ポリプロピレン1,2−グリコール、ポリプロピレン1,3−グリコール等のポリアルキレングリコール、ポリピロリドン、デキストラン、ポリビニルアルコール、セルロースおよび他の多糖類、ならびにペプチド又はタンパク質或いはそれらのコポリマーまたは混合物が挙げられる。 The hydrophilic polymer block 3 other than PEG, polypropylene 1,2-glycol, polyalkylene glycols such as polypropylene 1,3 glycol, polypyrrolidone, dextran, polyvinyl alcohol, cellulose and other polysaccharides, and peptides or proteins, or copolymers thereof, or mixtures thereof. これらの疎水性ポリマーブロック2及び親水性ポリマーブロック3を従来公知の方法によりブロック共重合させることにより、本発明に用いられる生体適合性のブロック共重合体4が得られる。 By block copolymer by these hydrophobic polymer block 2 and a hydrophilic polymer block 3 conventionally known method, biocompatible block copolymer 4 used in the present invention is obtained.

ブロック共重合体4としては、図1に示したような疎水性ポリマーブロック2と親水性ポリマーブロック3が直線状に結合したジブロック共重合体の他、疎水性ポリマーブロック2或いは親水性ポリマーブロック3の両端に他方のポリマーブロックが結合したトリブロック共重合体、ジブロック又はトリブロック共重合体が複数結合したマルチブロック共重合体等を用いることができる。 The block copolymer 4, other di-block copolymer has a hydrophobic polymer block 2 and a hydrophilic polymer block 3 as shown in FIG. 1 was attached to a linear, hydrophobic polymer block 2 or the hydrophilic polymer block triblock copolymers other polymer blocks are bonded to both ends of 3, can be used multi-block copolymers of diblock or triblock copolymer has multiple binding.

本発明の生体適合性ナノ粒子に内包される親水性成分7としては、プラスミドDNA等の遺伝子、ペプチド、インターフェロン(α、β、γ)等のタンパク質、カルシトニン、インスリン、ガストリン、プロラクチン、副腎皮質刺激ホルモン(ACTH)、甲状腺刺激ホルモン(TSH)、黄体形成ホルモン(LH)、卵胞刺激ホルモン(FSH)等のホルモン、インターロイキン、増血因子、増殖因子等の細胞間情報伝達物質(サイトカイン)、アルニカエキス、オトギリソウエキス、加水分解コンキオリン、キナエキス、クララエキス、セージエキス、チョウジエキス、冬虫夏草エキス、ペパーミントエキス、ホップエキス、グリチルレチン酸ジカリウム、β−グリチルレチン酸、オウゴンエキス、ローズマリーエキス、ボタンピエキス、 The hydrophilic component 7 to be encapsulated in biocompatible nanoparticles of the present invention, genes such as plasmid DNA, peptides, interferons (alpha, beta, gamma) proteins such as calcitonin, insulin, gastrin, prolactin, adrenocorticotropic hormone (ACTH), thyroid stimulating hormone (TSH), luteinizing hormone (LH), follicle stimulating hormone (FSH) hormones such as interleukins, Zouch factor, intercellular mediators such as growth factors (cytokines), arnica extract, Hypericum extract, hydrolyzed conchiolin, cinchona, Clara extract, sage extract, clove extract, cordyceps extract, peppermint extract, hops extract, glycyrrhetinic acid dipotassium, β- glycyrrhetinic acid, Scutellaria root extract, rosemary extract, moutan bark extract, ボウエキス、ニンジンエキス、ローヤルゼリーエキス、カミツレエキス、センキュウエキス、センブリエキス、トウガラシチンキ、ショウキョウチンキ、トウキエキス、ベニバナエキス、チンピエキス、セファランチン等の生薬成分、塩酸クロコナゾール、塩酸ネチコナゾール等の水溶性薬物、ビタミンC等の水溶性ビタミン類などが挙げられる。 Bouekisu, carrot extract, royal jelly extract, chamomile extract, Sen Qiu extract, assembly extract, capsicum tincture, ginger tincture, Japanese angelica root extract, safflower extract, Chinpiekisu, herbal components such as cepharanthine, hydrochloric cloconazole, water-soluble drugs such as hydrochloric acid neticonazole, vitamin soluble vitamins such as C and the like. また、上記生物活性成分のうち何れか1種のみを封入しても良いが、特に効能や作用機序の異なる成分を複数種封入しておけば、各成分の相乗効果により薬効の促進が期待できる。 It is also possible to encapsulate only either one kind of the bioactive ingredient, but if in particular sealed more efficacy and action mechanism different components of mechanisms, promoting efficacy by synergistic effect of the components is expected it can.

図5は、本発明の第2実施形態に係る生体適合性ナノ粒子の構造を示す模式図である。 Figure 5 is a schematic diagram showing the structure of a biocompatible nanoparticle according to a second embodiment of the present invention. 図2と共通する部分には同一の符号を付して説明を省略する。 The parts in common to those in FIG 2 will not be described are denoted by the same reference numerals. 本実施形態においては、親水性成分7は、親水性ポリマーブロック3との相互作用によりナノ粒子1のシェル部5に封入され、疎水性の生物活性成分(以下、疎水性成分という)8は、疎水性ポリマーブロック2との相互作用によりコア部6に封入されている。 In the present embodiment, the hydrophilic component 7 is enclosed in the shell portion 5 of the nano-particles 1 by interaction with the hydrophilic polymer block 3, a hydrophobic bioactive components (hereinafter, hydrophobic called component) 8, It is enclosed in the core portion 6 by the interaction between the hydrophobic polymer block 2.

即ち、基剤ポリマーとして疎水性ポリマーブロック2と親水性ポリマーブロック3が結合したブロック共重合体4を用いることにより、生物活性成分が親水性であるか疎水性であるかを問わず、効能や作用機序の異なる成分を粒子内に複数種封入可能となる。 That is, by using the block copolymer 4 hydrophobic polymer block 2 and a hydrophilic polymer block 3 is bonded as a base polymer, whether biologically active ingredient is either hydrophobic hydrophilic, efficacy Ya a plurality of kinds can encapsulate different components of the mechanism of action within the particles. 疎水性成分8としては、テトラヘキシルデカン酸アスコルビル、酢酸トコフェロール等の脂溶性ビタミン誘導体等、従来公知の脂溶性の生物活性成分を用いることができる。 The hydrophobic component 8 can be used Tetraisopalmitate ascorbyl, fat-soluble vitamin derivatives, such as tocopherol acetate and the like, the bioactive component of the known fat-soluble.

本発明の生体適合性ナノ粒子は、1,000nm未満の平均粒子径を有するものであれば特に制限はないが、外用薬剤に適用する場合、皮膚深部への浸透効果を高めるためには平均粒子径を300nm以下とすることが好ましい。 Biocompatible nanoparticles of the present invention is not particularly limited as long as it has an average particle size of less than 1,000 nm, when applied to external agents, in order to enhance the penetration effect of the skin deep average particle it is preferable that the diameter is 300nm or less. また、一般に、皮膚細胞の大きさは15,000nm、皮膚細胞間隔は皮膚の浅い所と深い所でバラツキがあるが、70nm程度であると考えられているため、ナノ粒子の粒径を100nm以下とすることで、皮膚への浸透性が非常に高いナノ粒子となるので好ましい。 In general, the size of the skin cells 15,000, although skin cells interval there is a variation in the shallow and deep skin, because it is considered to be about 70 nm, 100 nm or less the particle size of the nanoparticles with so permeability to the skin is very high nanoparticle preferred.

一方、ナノ粒子の粒子径が小さくなるほど封入率も低くなり、また、細胞のファゴサイトーシス(貪食:飲み込み)により、45nm程度までの異物は細胞に飲み込まれるといわれている。 On the other hand, encapsulation efficiency as particle size of the nanoparticles is less lowered, also the cells of phagocytosis: by (phagocytosis swallowing), foreign matter up to about 45nm are said to be swallowed into the cell. そのため、50nm以上で、且つできるだけ小さいナノ粒子を用いることにより、細胞のファゴサイトーシスを受けず、細胞間隔への浸透が期待できる。 Therefore, at 50nm or more and by using the smallest possible nanoparticles, without being phagocytosis of cells, penetration into the cell gap can be expected.

以上のようにして得られたナノ粒子は、凍結乾燥等により粉末化させる際に再分散可能な凝集粒子にできる(複合化できる)。 Or nanoparticles obtained as can be redispersible aggregated particles in which powdered by freeze-drying (possible complexation). また、流動層乾燥造粒法または乾式機械的粒子複合化法により(例えば、メカノフュージョンシステムAMS(ホソカワミクロン(株)製)により)、圧縮力および剪断力を加えることで複合化しても、再度分離可能な状態で一体化できる。 Further, the fluidized bed drying granulation or dry mechanical particle compounding method (by e.g., manufactured by mechanofusion system AMS (manufactured by Hosokawa Micron Corporation)), even if the composite by applying compressive and shear forces, separated again It can be integrated in a possible state. これにより、使用前まではナノ粒子が集まった取り扱い易い凝集粒子となっており、使用時に水分に触れることでナノ粒子に戻って高反応性等の特性を復元する複合粒子となる。 Thus, until prior to use has a manageable aggregated particles gathered nanoparticles, the composite particles to restore the properties of such highly reactive back to the nanoparticles by touching the water during use.

なお、封入される生物活性成分が水溶性の場合、一旦封入された生物活性成分がナノ粒子表面へ漏出すると、周囲に存在する水に再溶解する。 Incidentally, the bioactive ingredient being encapsulated where water soluble, once encapsulated bioactive ingredient may leak into the nanoparticle surface, redissolved in water present in the ambient. この水を凍結乾燥等により除去すると、その分だけ生物活性成分が減少して封入率にばらつきが発生してしまう。 The removal of the water by freeze-drying or the like, variation occurs in that much encapsulation rate bioactive ingredient is reduced. そこで、有機または無機の物質を再分散可能に複合化させ、生物活性成分の溶解した水を除去せずにそのままナノ粒子と共に乾燥させることが好ましい。 Accordingly, the organic or inorganic substances redispersible allowed to composite, it is preferable to directly dried with nanoparticles without removing the water of dissolved bioactive components. 例えば、糖アルコールやショ糖を適用することにより、封入率のばらつきを効果的に防止するとともに、糖アルコール等が賦形剤となりナノ粒子の取り扱い性を高めることができる。 For example, by applying a sugar alcohol or sucrose, as well as effectively prevent the variation in encapsulation efficiency, the sugar alcohol can increase the handling properties of the nanoparticles it becomes excipient. 糖アルコールとしては、マンニトール、トレハロース、ソルビトール、エリスリトール、マルチトース、キシリトースなどが挙げられ、この中でも特にトレハロースが好ましい。 The sugar alcohols, mannitol, trehalose, sorbitol, erythritol, maltitose, and the like xylitol, particularly trehalose Among these are preferred.

また、複合化の際に、複合化粒子(ナノコンポジット)の表面にさらにビタミンやプロビタミン等の薬物を付着させることにより、ナノ粒子から徐放的に放出される含有成分とは別に、複合化粒子表面から溶け出す速効性の薬物を作用させることができる。 At the time of compounding, by attaching the drug more such vitamins and provitamins on the surface of the composite particles (Nanocomposite), apart from containing ingredients sustained released from the nanoparticle, composite it can act fast acting drug leach from the particle surface. このような構成とすることで、ナノ粒子にさらにすばやい浸透性(速効性の浸透作用)を与えられる。 With such a structure, given further rapid penetration into nanoparticles (fast-acting osmosis). また、ナノ粒子に含有される薬物と、複合化される薬物とを有することで、速効性と遅効性の双方の効果を合わせ持ったナノ粒子となる。 Also, a drug contained in the nanoparticles, by having the drug to be complexed, the nanoparticles having combined both of the effect of fast-acting and slow-acting. なお、複合化される薬物が水溶性であれば、すばやく溶けて速効性の効果を示すのでより好ましい。 Incidentally, the drug to be complexed is as long as they are water-soluble, and more preferably exhibits the effect of immediate melts quickly.

複合化粒子の表面に付着させる薬物としては、ビタミンA、ビタミンB、ビタミンC、ビタミンD、ビタミンE、ビタミンF、ビタミンK、ビタミンP、ビタミンU、カルニチン、フェルラ酸、γ−オリザノール、α−リボ酸、オロット酸及びこれらの成分又は誘導体である酢酸レチノール、酢酸リボフラビン、ピリドキシンジオクタノエート、L−アスコルビン酸ジパルミチン酸エステル、L−アスコルビン酸−2−硫酸ナトリウム、L−アスコルビン酸リン酸エステル、DL−トコフェロール−L−アスコルビン酸リン酸ジエステルジカリウム、パントテニルエチルエーテル、D−パントテニルアルコール、アセチルパントテニルエチルエーテル、エルゴカルシフェロール、コレカルシフェロール、酢酸dl−α−トコフェロール、ニコチ Drugs to be attached to the surface of the composite particles, vitamin A, vitamin B, vitamin C, vitamin D, vitamin E, vitamin F, vitamin K, vitamin P, vitamin U, carnitine, ferulic acid, .gamma.-oryzanol, alpha- ribonucleic acid, orotic acid, and retinol acetate is these components or derivatives, acetic riboflavin, pyridoxine dioctanoate, L- ascorbic acid dipalmitate ester, L- ascorbic acid-2-sodium sulfate, L- ascorbyl phosphate ester, dL-tocopherol -L- ascorbyl phosphate dipotassium, pantothenyl ethyl ether, D- pantothenyl alcohol, acetyl pantothenyl ethyl ether, ergocalciferol, cholecalciferol, acetate dl-alpha-tocopherol, nicotinate 酸−α−トコフェロール、コハク酸−α−トコフェロール等のビタミンまたはビタミン誘導体、或いは水溶性のプロビタミン類、例えばリン酸アスコルビルMg、アスコルビン酸グルコシド、パンテノール(水溶性ビタミンB 5 )、L−システイン等が挙げられる。 Acid -α- tocopherol, vitamin or vitamin derivatives such as succinic acid -α- tocopherol, or water-soluble pro-vitamins, e.g. ascorbyl phosphate Mg, ascorbic acid glucoside, panthenol (water-soluble vitamin B 5), L-cysteine etc. the.

また、本発明の生体適合性ナノ粒子を経皮薬剤として用いる場合、ナノ粒子の表面に粘膜付着性を高めるキトサンを複合化したり、リン脂質(レシチン/フォスファチジルコリン)を複合化させたりして皮膚親和性を高めてもよい。 In the case of using a biocompatible nanoparticles of the present invention as a transdermal drug or composite chitosan to enhance the mucoadhesive property to the surface of the nanoparticles, the phospholipid (lecithin / phosphatidylcholine) or by complexing it may enhance the skin affinity Te. また、ポリエチレングリコール(PEG)を複合化することで、水に溶けやすくなり、皮膚への浸透性を高められる。 Furthermore, by conjugating polyethylene glycol (PEG), become more soluble in water, it is enhanced permeability of the skin. さらに、タルクを複合化することで、粒子のすべり性が向上し、肌への使用感を高めることができる。 Further, by compounding a talc, improved sliding property of the particles, increasing the feeling to the skin.

このようにして製造した複合化粒子は、このまま肌に付着させることでも肌に浸透し、含有または付着した薬物を皮膚深部に運ぶ効果があるが、乳液等と混合して使用することでさらに有効な浸透性を生じる。 Composite particles prepared in this way penetrates into even the skin by depositing on the left skin, the drug contained or attached is effective to carry the deep skin, more effective by used as a mixture with milk and the like resulting in Do permeability. しかしながら、PLGAは水分と混合させると加水分解されてしまい、短期間に複合粒子の運搬性能が失われてしまう。 However, PLGA is when mixing with water will be hydrolysed, transport performance of the composite particles is lost in a short time. そこで、このような乳液として使用をする場合は、乳液と粉末とを隣り合う別々の容器に充填して保存しておき、使用直前に容器同士の仕切りをはずして乳液と粉末とを混合できる容器を使用することが好ましい。 Therefore, the container such case of use as emulsions, which can be mixed to keep filled in separate containers adjacent the milk powder, the milk powder by removing the partition of the container between immediately before use it is preferable to use.

本発明の生体適合性ナノ粒子の製造方法としては、目的の物質を1,000nm未満の粒子径を有する粒子に加工することができる方法であれば特に限定されるものではないが、球形晶析法を用いることが非常に好ましい。 As a method for producing a biocompatible nanoparticles of the present invention, but are not particularly limited as long as it is a method capable of processing a substance of interest into particles having a particle size of less than 1,000 nm, spherical crystallization law it is highly preferable to use. 球形晶析法は、化合物合成の最終プロセスにおける結晶の生成・成長プロセスを制御することで、球状の結晶粒子を設計し、その物性を直接制御して加工することができる方法である。 Spherical crystallization method, by controlling the generation and growth process of crystals in the compound synthesis of the final process, the crystal grains of spherical design, is a method that can be processed by controlling the physical properties thereof directly. 球形晶析法には、晶析する結晶の生成・凝集機構の違いによって球形造粒法(SA法)と、エマルジョン溶媒拡散法(ESD法)とに分けることができる。 Spherical crystallization method, may be crystallized to spherical granulation by differences in generation and aggregation mechanism of crystals (SA method), divided in the emulsion solvent diffusion method (ESD method).

SA法は、二種類の溶媒を用いて薬物結晶を析出させて、球形造粒結晶を形成する方法である。 SA method, by precipitating drug crystals using two kinds of solvents, a method of forming a spherical granulated crystals. 具体的には、まず、目的の薬物を溶解し難い貧溶媒と、該薬物を良好に溶解でき、かつ貧溶媒にも混和拡散できる良溶媒とを準備する。 Specifically, first prepared drug and a sparingly soluble poor solvent of interest, the drug can be efficiently dissolved and a good solvent miscible diffused in the poor solvent. そして、良溶媒に溶解させた薬物溶液を、撹拌下、貧溶媒中に滴下する。 Then, the drug solution prepared by dissolving in a good solvent, under stirring, added dropwise to a poor solvent. このとき、良溶媒の貧溶媒への移行や温度効果等による溶解度の低下を利用することで、薬物の結晶が系内に析出する。 At this time, by utilizing the reduction in solubility due to migration and temperature effects, etc. to the poor solvent of the good solvent, crystals of the drug are deposited in the system.

さらに、系内に、薬物と親和性を有し貧溶媒には混和しない少量の液体(液体架橋剤)を添加すると、液体架橋剤が遊離する。 Further, in the system, when the poor solvent has a drug affinity adding a small amount of liquid that is immiscible (liquid crosslinking agent), a liquid crosslinking agent is released. そして、結晶の間に架橋が形成され、界面張力および毛細管力により、非ランダムに結晶が凝集し始める。 The bridge between the crystals form, the interfacial tension and capillary forces, non-random crystal begins to agglomerate. なお、この状態をファニキュラー状態という。 In addition, this state will be referred to as a funicular state.

ファニキュラー状態の系に対してさらに機械的剪断力を加えると、凝集した結晶は圧密化され、略球状の造粒物となる。 Further applying mechanical shearing force to the system in the funicular state, agglomerated crystals compacted becomes substantially granulated spherical. なお、この状態をキャピラリー状態という。 In addition, this state is referred to as capillary state. キャピラリー状態の造粒物がランダムに合一することで、最終的な球形造粒結晶が形成される(ナノ粒子形成工程)。 Granulation of the capillary state by coalescence randomly final spherical granulated crystals form (nanoparticle formation step).

ESD法も、二種類の溶媒を用いる方法であるが、SA法とは異なり、エマルジョンを形成してから、良溶媒と貧溶媒との相互拡散を利用して薬物を球状に結晶化させる方法である。 In the method ESD method is also a method of using two kinds of solvents, which unlike the SA method, after forming the emulsion is crystallized spherical drug by utilizing interdiffusion between good and poor solvents is there. 具体的には、まず、良溶媒(有機溶媒及び必要により水を加えたもの)中に溶解した薬物溶液を撹拌下、貧溶媒中に滴下する。 Specifically, first, stirring the good solvent (those of water was added an organic solvent and optionally) a drug solution dissolved in, it added dropwise to the poor solvent. このとき、薬物と良溶媒とが親和性を持つため、良溶媒の貧溶媒への移行が遅れ、エマルジョン滴が形成される。 At this time, since the drug and good solvent has an affinity, delay the transition to the poor solvent of the good solvent, the emulsion droplets are formed. そして、エマルジョン滴の冷却、並びに、良溶媒および貧溶媒の相互拡散により、エマルジョン滴内で薬物の溶解度が低下していき、薬物の球形結晶粒子が、エマルジョン滴の形状を保持したまま析出、成長する。 The cooling of the emulsion droplets, as well as good by mutual diffusion of solvent and anti-solvent, the solubility of the drug in the emulsion droplets continue to decrease, the spherical grains of the drug, deposited while maintaining the shape of the emulsion droplets, growth to.

球形晶析法によりナノ粒子含有溶液を調製した後、良溶媒である有機溶媒を減圧留去し(溶媒留去工程)、薬物含有ナノ粒子粉末を得る。 After preparation of nano-particle-containing solution by spherical crystallization method, then evaporated under reduced pressure organic solvent is a good solvent (solvent evaporation step) to obtain a drug-containing nanoparticle powder. そして、得られた粉末をそのまま、或いは必要に応じて凍結乾燥等により複合化し(複合化工程)、複合粒子とした後、容器内に充填して薬物含有ナノ粒子とする。 Then, the resulting powder was as such or composite by freeze-drying as necessary (composite step), after the composite particles were filled in a container and the drug-containing nanoparticle.

良溶媒および貧溶媒の種類、並びに液体架橋剤の種類は、封入される生物活性成分の種類等に応じて決定されるものであり特に限定されるものではないが、生体適合性ナノ粒子は、人体へ作用させる薬物の原料として用いられるため、人体に対して安全性が高く、且つ環境負荷の少ないものを用いる必要がある。 Good solvent and the type of the poor solvent, and the kind of the liquid crosslinking agent is not particularly limited is to be determined according to the type of biologically active ingredient to be encapsulated, biocompatible nanoparticles, for use as a raw material for drugs that act on the human body, highly safe to the human body, and it is necessary to use a low environmental impact.

このような貧溶媒としては、水、或いは界面活性剤を添加した水が挙げられるが、例えば界面活性剤としてポリビニルアルコールを添加したポリビニルアルコール水溶液が好適に用いられる。 Such a poor solvent, water, or is water with the addition of surface active agents, polyvinyl alcohol aqueous solution was added the polyvinyl alcohol is preferably used for example as a surfactant. なお、余剰のポリビニルアルコールが残存している場合は、溶媒留去工程の後に、遠心分離等によりポリビニルアルコールを除去する工程(除去工程)が設けられる。 Incidentally, if the excess polyvinyl alcohol remains, after the solvent evaporation process, removing the polyvinyl alcohol (removing step) is provided by centrifugation or the like. ポリビニルアルコール以外の界面活性剤としては、レシチン、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられる。 The surfactant other than polyvinyl alcohol include lecithin, hydroxymethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose, and the like. 良溶媒としては、低沸点且つ難水溶性の有機溶媒であるハロゲン化アルカン類、アセトン、メタノール、エタノール、エチルアセテート、ジエチルエーテル、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン等が挙げられるが、例えばアセトンとエタノールの混合液が好適に用いられる。 As the good solvent, a low boiling point and halogenated alkanes are poorly water-soluble organic solvent, acetone, methanol, ethanol, ethyl acetate, diethyl ether, cyclohexane, benzene, and toluene, and the like, for example, mixing acetone and ethanol liquid is preferably used.

ポリビニルアルコール水溶液の濃度、或いはアセトンとエタノールの混合比や、結晶析出時の条件や機械的剪断力の加え方も特に限定されるものではなく、目的となる薬物の種類や、球形造粒結晶の粒径(本発明の場合ナノオーダー)等に応じて適宜決定すればよいが、ポリビニルアルコール水溶液の濃度が高いほどナノ粒子表面へのポリビニルアルコールの付着が良好となり、乾燥後の水への再分散性が向上する反面、ポリビニルアルコール水溶液の濃度が所定以上になると、貧溶媒の粘度が上昇して良溶媒の拡散性に悪影響を与える。 The concentration of the aqueous polyvinyl alcohol solution, or and the mixing ratio of acetone and ethanol, in addition how conditions or mechanical shear during crystallization is also not limited in particular, drugs which are the object type and, spherical granulated crystals particle size may be suitably determined in accordance with the like (nano order in the present invention), but adhesion of the polyvinyl alcohol concentration of the polyvinyl alcohol aqueous solution to higher nanoparticle surface becomes excellent redispersion in water after drying whereas the sex is improved, when the concentration of the polyvinyl alcohol aqueous solution is equal to or greater than a predetermined viscosity of the poor solvent is an adverse effect on the diffusion of the good solvent to rise. そのため、ポリビニルアルコールの重合度やけん化度によっても異なるが、ナノ粒子形成工程後に除去工程を設ける場合は0.1重量%以上10重量%以下が好ましく、2%程度がより好ましい。 Therefore, it varies depending polymerization degree and saponification degree of the polyvinyl alcohol but is preferably 10 wt% or less than 0.1 wt% In the case of providing the removing step after nanoparticle formation step, about 2% being more preferred. なお、除去工程を設けない場合は0.5重量%以下とすることが好ましい。 In the case of not providing the removal step is preferably 0.5 wt% or less.

図6は、本発明の第3実施形態に係る生体適合性ナノ粒子の構造を示す模式図である。 Figure 6 is a schematic diagram showing the structure of a biocompatible nanoparticle according to a third embodiment of the present invention. 図2及び図5と共通する部分には同一の符号を付して説明を省略する。 The parts in common to those in FIG. 2 and FIG. 5 is omitted will be denoted by the same reference numerals. 本実施形態のナノ粒子1は、貧溶媒として油相を用いた油中エマルジョン法で調製されたものであり、図6に示すように、疎水性ポリマーブロック2が粒子表面に張り出してシェル部5を形成し、親水性ポリマーブロック3はコア部6に位置する。 Nanoparticles 1 of the present embodiment has been prepared in-oil emulsion method using an oil phase as a poor solvent, as shown in FIG. 6, the shell portion 5 hydrophobic polymer block 2 protrudes on the particle surface forming a hydrophilic polymer block 3 is located in the core portion 6. 即ち、第1及び第2実施形態とは逆のコアシェル構造を有している。 That is, the first and second embodiment has an inverted core-shell structure.

油中エマルジョン法によるナノ粒子の作製においては、貧溶媒として油相を使用するため、水中エマルジョン法と比較すると晶析時の良溶媒(アセトン、エタノール、水など)の拡散速度が遅延される。 In the production of nanoparticles by in-oil emulsion method, for using the oil phase as a poor solvent, when compared with the water emulsion method crystallization time of the good solvent (acetone, ethanol, water, etc.) the diffusion rate of the delay. そのため、親水性成分7は貧溶媒中に拡散する以前に親水性ポリマーブロック3と相互作用することにより、コア部6に留まり封入される。 Therefore, the hydrophilic component 7 by interacting with the hydrophilic polymer block 3 prior to diffuse into the poor solvent, is encapsulated remains in the core portion 6. これにより、親水性成分7がシェル部5に封入される第1、第2実施形態のナノ粒子とは薬物放出挙動が異なることが予想され、さらに長期間に渉る親水性成分7の徐放が可能になると考えられる。 Thus, first the hydrophilic component 7 is enclosed in a shell portion 5, and the nanoparticles of the second embodiment is expected drug release behavior differ, further sustained release of ranging between hydrophilic component 7 a long period of time It is considered to be made possible. なお、使用するブロック共重合体4の種類やナノ粒子1に内包される親水性成分7については第1実施形態と同様である。 As for the hydrophilic component 7 to be encapsulated in the type and nanoparticle 1 of the block copolymer 4 used are the same as in the first embodiment.

また、第2実施形態と同様に、本実施形態の生体適合性ナノ粒子に親水性成分7に加えて疎水性成分を封入することもできる。 It is also possible as in the second embodiment, the biocompatible nanoparticles of the present embodiment in addition to the hydrophilic ingredients 7 to encapsulate hydrophobic component. その場合、疎水性成分は疎水性ポリマーブロック2がマトリクス状に凝集したシェル部5に封入される。 In that case, the hydrophobic component is encapsulated in the shell portion 5 to a hydrophobic polymer block 2 are aggregated in a matrix. 油中エマルジョン法については、貧溶媒として油相(グリセリントリエステル等)を用いる以外は水中エマルジョン法と同様であるため説明は省略するが、必要に応じて油相に界面活性剤を添加しても良く、ナノ粒子表面に付着した油相を洗浄する洗浄工程や、ナノ粒子の再懸濁工程を設けても良い。 The oil emulsion method, except for using the oil phase as a poor solvent (glycerin triester, etc.) are omitted description is similar to the water emulsion method, by adding a surfactant to the oil phase if necessary It is good, and cleaning step of cleaning the oil phase attached to the nanoparticles surface, may be provided resuspension steps of nanoparticles. また、第1、第2実施形態と同様にナノ粒子を複合化して取り扱い性を向上させることもできる。 The first, the nanoparticles as in the second embodiment can improve the handling property by compounding.

なお、本発明は上述した各実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。 The present invention is not limited to the above embodiments, and various modifications are possible within the scope of the claims, are obtained by appropriately combining technical means disclosed in different embodiments also included in the technical scope of the present invention embodiment.

本発明の生体適合性ナノ粒子の製造方法について検討した。 It was investigated a method for manufacturing the biocompatible nanoparticles of the present invention. ポリエチレングリコール(PEG)と乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)のブロック共重合体(PEGの分子量5,000、PLGAの分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25、BPI社製)4gをアセトン80mLに溶解させ、ここにカフェイン1gを精製水5mLに溶解させた溶液を添加し、均一に混合し良溶媒とした。 Block copolymers of polyethylene glycol (PEG) and lactic acid-glycolic acid copolymer (PLGA) (PEG molecular weight 5,000, molecular weight 15,000 PLGA, lactic acid / glycolic acid = 75/25, BPI Corp.) 4g was dissolved in acetone 80 mL, here was added a solution of a caffeine 1g of purified water 5 mL, was uniformly mixed good solvent. 0.2重量%のポリビニルアルコール(PVA403、クラレ社製)水溶液100mLを貧溶媒とした。 0.2 wt% of polyvinyl alcohol (PVA403, manufactured by Kuraray Co., Ltd.) aqueous solution 100mL was a poor solvent.

この貧溶媒を40℃、400rpmで攪拌下、一定速度(4mL/分)で良溶媒を滴下した。 The poor solvent 40 ° C., under stirring at 400 rpm, was dropped the good solvent at a constant rate (4 mL / min). 滴下終了後5分間攪拌したのち、減圧下100rpmで攪拌しながら、4時間で有機溶媒を留去した。 After stirring After completion of the dropwise addition 5 minutes, with stirring under reduced pressure 100 rpm, followed by distilling off the organic solvent in 4 hours. その後、約1日かけて凍結乾燥を行った。 This was followed by a freeze-dried over a period of about one day. 動的光散乱法により測定した結果、平均粒子径280nmの凍結乾燥粉末が得られた。 Result of measurement by a dynamic light scattering method, freeze-dried powder having an average particle diameter of 280nm was obtained. HPLCにより、粒子内のカフェインの封入率(PLGA重量に対するカフェインの重量パーセント)を定量したところ9%であった。 By HPLC, and was 9% was quantified encapsulation ratio of caffeine within the particle (weight percent of caffeine for PLGA weight).

ポリエチレングリコール(PEG)と乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)のブロック共重合体(PEGの分子量5,000、PLGAの分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25、BPI社製)4gをアセトン80mLに溶解させ、ここにカフェイン1gを精製水5mLに溶解させた溶液を添加し、均一に混合し良溶媒とした。 Block copolymers of polyethylene glycol (PEG) and lactic acid-glycolic acid copolymer (PLGA) (PEG molecular weight 5,000, molecular weight 15,000 PLGA, lactic acid / glycolic acid = 75/25, BPI Corp.) 4g was dissolved in acetone 80 mL, here was added a solution of a caffeine 1g of purified water 5 mL, was uniformly mixed good solvent. 0.2重量%のポリビニルアルコール(PVA403、クラレ社製)水溶液100mLを貧溶媒とした。 0.2 wt% of polyvinyl alcohol (PVA403, manufactured by Kuraray Co., Ltd.) aqueous solution 100mL was a poor solvent.

この貧溶媒を40℃、400rpmで攪拌下、一定速度(4mL/分)で良溶媒を滴下した。 The poor solvent 40 ° C., under stirring at 400 rpm, was dropped the good solvent at a constant rate (4 mL / min). 滴下終了後5分間攪拌したのち、減圧下100rpmで攪拌しながら、4時間で有機溶媒を留去した。 After stirring After completion of the dropwise addition 5 minutes, with stirring under reduced pressure 100 rpm, followed by distilling off the organic solvent in 4 hours. その後、賦形剤としてトレハロース(林原製)8gを精製水50mLに溶解した溶液を添加し、プレ凍結後(−40℃で25分冷却)、約1日かけて凍結乾燥を行った。 Thereafter, a solution prepared by dissolving trehalose (manufactured by Hayashibara) 8 g of purified water 50mL as excipients, after the pre-freezing (25 min at -40 ℃ cooling), followed by freeze drying over a period of about 1 day. 動的光散乱法により測定した結果、平均粒子径220nmの水への再分散性が良好な複合粒子が得られた。 Result of measurement by a dynamic light scattering method, a good composite particles redispersibility to an average particle diameter 220nm of water was obtained.

比較例1 Comparative Example 1

実施例1の比較として、PEGとPLGAのブロック共重合体の代わりにPLGA(分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25)を用い、上記調製法と同一条件にて粒子の調製を行った。 As a comparative Example 1, using the PLGA in place of the block copolymer of PEG and PLGA (molecular weight 15,000, = 75/25 lactic / glycolic acid), subjected to the preparation of particles in the preparation the same conditions It was. 調製法を以下に示す。 Preparation method are shown below.

乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA;分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25、和光純薬製)4gとカフェイン1gをアセトン80mLに溶解させたのち、エタノール40mLを添加混合し良溶媒とした。 Lactic acid-glycolic acid copolymer (PLGA; molecular weight 15,000, lactic / glycolic acid = 75/25, manufactured by Wako Pure Chemical) After the 4g and caffeine 1g dissolved in acetone 80 mL, good admixed ethanol 40mL as a solvent. 0.4重量%のポリビニルアルコール(PVA403、クラレ社製)水溶液100mLを貧溶媒とした。 0.4 wt% of polyvinyl alcohol (PVA403, manufactured by Kuraray Co., Ltd.) aqueous solution 100mL was a poor solvent. 貧溶媒を40℃、400rpmで攪拌下、一定速度(4mL/分)で良溶媒を滴下した。 The poor solvent 40 ° C., stirring at 400 rpm, was dropped the good solvent at a constant rate (4 mL / min). 滴下終了後5分間攪拌したのち、減圧下100rpmで攪拌しながら、4時間で有機溶媒を留去した。 After stirring After completion of the dropwise addition 5 minutes, with stirring under reduced pressure 100 rpm, followed by distilling off the organic solvent in 4 hours. プレ凍結後(−40℃で25分冷却)、約1日かけて凍結乾燥を行った。 After pre-freezing (25 min at -40 ℃ cooling), followed by freeze drying over a period of about 1 day. 動的光散乱法により測定した結果、平均粒子径460nmの凍結乾燥粉末が得られた。 Result of measurement by a dynamic light scattering method, freeze-dried powder having an average particle diameter of 460nm was obtained. HPLCにより、粒子内のカフェインの封入率を定量したところ、約1%であった。 By HPLC, and was quantified encapsulation ratio of caffeine in the particle, was about 1%.

基剤ポリマーとして、乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)の分子量及び組成比は同一(PLGAの分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25)で、ポリエチレングリコール(PEG)の分子量が異なる(PEGの分子量6,000、8,000、10,000)3種類のPEGとPLGAのブロック共重合体(BPI社製)を用い、上記実施例1と同様の操作により粒子の調製を行った。 As base polymer, lactic acid-glycolic acid copolymer molecular weight and composition ratio of (PLGA) are identical (PLGA molecular weight of 15,000, lactic / glycolic acid = 75/25), the molecular weight of the polyethylene glycol (PEG) are different used (molecular weight 6,000,8,000,10,000 of PEG) 3 kinds of PEG and block copolymers of PLGA (BPI, Inc.), were prepared particles by the same operation as in example 1 . 動的光散乱法により測定した結果、平均粒子径が100〜3,000nmの凍結乾燥粉末が得られた。 Result of measurement by a dynamic light scattering method, average particle size was obtained lyophilized powder 100~3,000Nm.

HPLCにより、粒子中のカフェインの封入率及び導入率(仕込み時のカフェイン重量に対する粒子内のカフェインの重量パーセント)を定量し、その結果を実施例1、比較例1と合わせて表1及び図7に示した。 By HPLC, and to quantify the encapsulation ratio of the caffeine in the particles and introduction ratio (% by weight of caffeine in the particles to the caffeine by weight of the time of charging), Table 1 combined result Example 1, and Comparative Example 1 and it is shown in FIG.

表1に示すように、PEGの分子量が小さい順(PEGの分子量5,000、6,000、8,000、10,000)に、カフェインの封入率はそれぞれ9%、11%、17%、22%となり、導入率はそれぞれ36%、44%、68%、88%となった。 As shown in Table 1, in the order the molecular weight of PEG is small (molecular weight of PEG 5,000,6,000,8,000,10,000), each encapsulation ratio of caffeine 9%, 11%, 17% , it becomes 22%, 36% respectively introduction rate, 44%, 68%, was 88%. 一方、PEGとPLGAのブロック共重合体に代えてPLGAを用いた比較例1では、カフェインの封入率は1%、導入率は4%と低かった。 On the other hand, in Comparative Example 1 using PLGA in place of the block copolymer of PEG and PLGA, encapsulation ratio of caffeine was low 1% introduction ratio was 4%. また、図7から明らかなように、カフェインの封入率はPEGの分子量に比例して高くなり、約10%或いはそれ以上の封入率を得るためには、PEGの分子量を5,000以上とすることが好ましいと言える。 Further, as apparent from FIG. 7, encapsulation ratio of caffeine increased in proportion to the molecular weight of the PEG, to obtain about 10% or more of the encapsulation rate, 5,000 or more molecular weight PEG and it can be said that it is preferable to.

上記実施例1と同様の基剤ポリマーを用い、同様の操作により、水溶性ビタミンC誘導体であるリン酸アスコルビルMg(VCPMg)封入ナノ粒子を調製した。 Using the same base polymer as in Example 1, by the same operation, and the ascorbyl phosphate Mg (VCPMg) loaded nanoparticle is water soluble vitamin C derivatives were prepared. 調製法を以下に示す。 Preparation method are shown below.

ポリエチレングリコール(PEG)と乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)のブロック共重合体(PEGの分子量5,000、PLGAの分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25、BPI社製)4gをアセトン80mLに溶解させた後、リン酸アスコルビルMg(日光ケミカルズ社製)1gを精製水8mLに溶解させた溶液を添加し、均一に混合し良溶媒とした。 Block copolymers of polyethylene glycol (PEG) and lactic acid-glycolic acid copolymer (PLGA) (PEG molecular weight 5,000, molecular weight 15,000 PLGA, lactic acid / glycolic acid = 75/25, BPI Corp.) 4g the was dissolved in acetone 80 mL, was added a solution prepared by dissolving ascorbyl phosphate Mg (manufactured by Nikko Chemicals Co.) 1 g of purified water 8 mL, was uniformly mixed good solvent. 0.2重量%のポリビニルアルコール(PVA403、クラレ社製)水溶液100mLを貧溶媒とした。 0.2 wt% of polyvinyl alcohol (PVA403, manufactured by Kuraray Co., Ltd.) aqueous solution 100mL was a poor solvent.

この貧溶媒を40℃、400rpmで攪拌下、一定速度(4mL/分)で良溶媒を滴下した。 The poor solvent 40 ° C., under stirring at 400 rpm, was dropped the good solvent at a constant rate (4 mL / min). 滴下終了後5分間攪拌したのち、減圧下100rpmで攪拌しながら、4時間で有機溶媒を留去した。 After stirring After completion of the dropwise addition 5 minutes, with stirring under reduced pressure 100 rpm, followed by distilling off the organic solvent in 4 hours. プレ凍結後(−40℃で25分冷却)、約1日かけて凍結乾燥を行った。 After pre-freezing (25 min at -40 ℃ cooling), followed by freeze drying over a period of about 1 day. 動的光散乱法により測定した結果、平均粒子径170nmの凍結乾燥粉末が得られた。 Result of measurement by a dynamic light scattering method, freeze-dried powder having an average particle diameter of 170nm was obtained. HPLCにより、粒子内のリン酸アスコルビルMgの封入率(PLGA重量に対するリン酸アスコルビルMgの重量パーセント)を定量したところ8%であった。 By HPLC, it was 8% was quantified encapsulation ratio of ascorbyl phosphate Mg within the particle (weight percent ascorbyl phosphate Mg for PLGA weight).

基剤ポリマーとして、乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)の分子量及び組成比は同一(PLGAの分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25)で、ポリエチレングリコール(PEG)の分子量が異なる(PEGの分子量6,000、8,000、10,000)3種類のPEGとPLGAのブロック共重合体(BPI社製)を用い、上記実施例4と同様の操作により粒子の調製を行った。 As base polymer, lactic acid-glycolic acid copolymer molecular weight and composition ratio of (PLGA) are identical (PLGA molecular weight of 15,000, lactic / glycolic acid = 75/25), the molecular weight of the polyethylene glycol (PEG) are different (molecular weight 6,000,8,000,10,000 of PEG) 3 kinds of PEG and block copolymers of PLGA and (BPI Co.) was repeated using the preparation of the particles in the same manner as above example 4 . 動的光散乱法により測定した結果、平均粒子径が50〜4,000nmの凍結乾燥粉末が得られた。 Result of measurement by a dynamic light scattering method, average particle size was obtained lyophilized powder 50~4,000Nm.

HPLCにより、粒子中のリン酸アスコルビルMg(VCPMg)の封入率及び導入率(仕込み時のリン酸アスコルビルMg重量に対する粒子内のリン酸アスコルビルMgの重量パーセント)を定量し、その結果を実施例4と合わせて表2及び図8に示した。 By HPLC, and to quantify ascorbyl phosphate Mg in the particle encapsulation efficiency and the introduction ratio of (VCPMg) (weight percent ascorbyl phosphate Mg in particles to ascorbyl phosphate Mg weight at charge), the results in Example 4 It is shown in Table 2 and Figure 8 together with. なお、PEGとPLGAのブロック共重合体の代わりにPLGA(分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25)を用い、上記比較例1と同一条件にて調製した粒子(比較例2)についても合わせて結果を示した。 Incidentally, PLGA (molecular weight 15,000, lactic / glycolic acid = 75/25) instead of the block copolymer of PEG and PLGA for using, was prepared in Comparative Example 1 under the same conditions the particle (Comparative Example 2) It shows the results together.

表2に示すように、実施例4、5においては、PEGの分子量が小さい順(PEGの分子量5,000、6,000、8,000、10,000)に、VCPMgの封入率はそれぞれ8%、10%、16%、19%となり、VCPMgの導入率はそれぞれ32%、40%、64%、76%となった。 As shown in Table 2, in Examples 4 and 5, in the order the molecular weight of PEG is small (molecular weight of PEG 5,000,6,000,8,000,10,000), encapsulation ratio of VCPMg each 8 %, 10%, 16%, becomes 19%, 32% introduction rate of VCPMg respectively, 40%, 64%, was 76%. 一方、PEGとPLGAのブロック共重合体に代えてPLGAを用いた比較例2ではVCPMgの封入率は2%、導入率は8%と低かった。 On the other hand, encapsulation ratio of VCPMg Comparative Example 2 using the PLGA in place of the block copolymer of PEG and PLGA 2%, introduction rate was as low as 8%. また、図8から明らかなように、VCPMgの封入率はPEGの分子量に比例して高くなり、約10%或いはそれ以上の封入率を得るためには、PEGの分子量を5,000以上とすることが好ましいと言える。 Further, as apparent from FIG. 8, encapsulation ratio of VCPMg becomes higher in proportion to the molecular weight of the PEG, to obtain about 10% or more of the encapsulation rate, molecular weight of PEG of 5,000 or more it is said to be preferred.

ポリエチレングリコール(PEG)と乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)のブロック共重合体(PEGの分子量5,000、PLGAの分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25、BPI社製)4gをアセトン100mLに溶解させた。 Block copolymers of polyethylene glycol (PEG) and lactic acid-glycolic acid copolymer (PLGA) (PEG molecular weight 5,000, molecular weight 15,000 PLGA, lactic acid / glycolic acid = 75/25, BPI Corp.) 4g was dissolved in acetone 100 mL. そこにリン酸アスコルビルMg(日光ケミカルズ社製)1g、脂溶性ビタミンC誘導体(VC−IP)であるテトラヘキシルデカン酸アスコルビル(日光ケミカルズ社製)0.6gをそれぞれ精製水8mLならびにエタノール40mLで溶解した液を添加し、均一に混合し良溶媒とした。 There ascorbyl phosphate Mg (manufactured by Nikko Chemicals Co.) 1 g, was dissolved in a fat-soluble vitamin C derivatives (VC-IP) is a Tetraisopalmitate ascorbyl (manufactured by Nikko Chemicals Co.) 0.6 g of each purified water 8mL and ethanol 40mL solution was added and the uniformly mixed good solvent. 0.4重量%のポリビニルアルコール(PVA403、クラレ社製)水溶液100mLを貧溶媒とした。 0.4 wt% of polyvinyl alcohol (PVA403, manufactured by Kuraray Co., Ltd.) aqueous solution 100mL was a poor solvent.

この貧溶媒を40℃、400rpmで攪拌下、一定速度(4mL/分)で良溶媒を滴下した。 The poor solvent 40 ° C., under stirring at 400 rpm, was dropped the good solvent at a constant rate (4 mL / min). 滴下終了後5分間攪拌したのち、減圧下100rpmで攪拌しながら、4時間で有機溶媒を留去した。 After stirring After completion of the dropwise addition 5 minutes, with stirring under reduced pressure 100 rpm, followed by distilling off the organic solvent in 4 hours. プレ凍結後(−40℃で25分冷却)、約1日かけて凍結乾燥を行った。 After pre-freezing (25 min at -40 ℃ cooling), followed by freeze drying over a period of about 1 day. 動的光散乱法により測定した結果、平均粒子径180nmの凍結乾燥粉末が得られた。 Result of measurement by a dynamic light scattering method, freeze-dried powder having an average particle diameter of 180nm was obtained. HPLCにより、粒子内のリン酸アスコルビルMg、テトラヘキシルデカン酸アスコルビルの封入率(PLGA重量に対するリン酸アスコルビルMg、テトラヘキシルデカン酸アスコルビルの重量パーセント)を定量したところ、それぞれ6.3%、6.0%であった。 By HPLC, and was quantified ascorbyl phosphate Mg in the particle, encapsulation ratio of Tetraisopalmitate ascorbyl the (ascorbyl phosphate Mg for PLGA weight, the weight percent of Ascorbyl Tetraisopalmitate), respectively 6.3%, 6.0% Met.

基剤ポリマーとして、乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)の分子量及び組成比は同一(PLGAの分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25)で、ポリエチレングリコール(PEG)の分子量が異なる(PEGの分子量6,000、8,000、10,000)3種類のPEGとPLGAのブロック共重合体(BPI社製)を用い、上記実施例6と同様の操作により粒子の調製を行った。 As base polymer, lactic acid-glycolic acid copolymer molecular weight and composition ratio of (PLGA) are identical (PLGA molecular weight of 15,000, lactic / glycolic acid = 75/25), the molecular weight of the polyethylene glycol (PEG) are different used (molecular weight 6,000,8,000,10,000 of PEG) 3 kinds of PEG and block copolymers of PLGA (BPI, Inc.), were prepared particles by the same operation as in example 6 . 動的光散乱法により測定した結果、平均粒子径が50〜3,000nmの凍結乾燥粉末が得られた。 Result of measurement by a dynamic light scattering method, average particle size was obtained lyophilized powder 50~3,000Nm.

HPLCにより、粒子中のリン酸アスコルビルMg(VCPMg)、テトラヘキシルデカン酸アスコルビル(VC−IP)の封入率及び導入率(仕込み時のVCPMg、VC−IPの重量に対する粒子内のVCPMg、VC−IPの重量パーセント)を定量し、その結果を実施例6と合わせて表3及び図9に示した。 By HPLC, and encapsulation ratio and introduction rate of ascorbyl phosphate Mg in the particles (VCPMg), Ascorbyl Tetraisopalmitate (VC-IP) (at the time of charging VCPMg, in particles to the weight of the VC-IP VCPMg, the VC-IP to quantify the weight percent) shown in Table 3 and Figure 9 combined result as in example 6. なお、PEGとPLGAのブロック共重合体の代わりにPLGA(分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25)を用い、上記比較例1と同一条件にて調製した粒子(比較例3)についても合わせて結果を示した。 Incidentally, PLGA (molecular weight 15,000, lactic / glycolic acid = 75/25) instead of the block copolymer of PEG and PLGA for using, was prepared in Comparative Example 1 under the same conditions the particle (Comparative Example 3) It shows the results together.

表3に示すように、実施例6、7においては、PEGの分子量が小さい順(PEGの分子量5,000、6,000、8,000、10,000)に、水溶性薬物であるVCPMgの封入率はそれぞれ6.3%、8.1%、13.4%、18.3%となり、VCPMgの導入率はそれぞれ25.2%、32.4%、53.6%、73.2%となった。 As shown in Table 3, in Examples 6 and 7, the molecular weight of PEG ascending order (molecular weight of PEG 5,000,6,000,8,000,10,000), VCPMg of a water-soluble drug 6.3% encapsulation rate, respectively, 8.1%, 13.4%, becomes 18.3%, 25.2 percent rate of introduction of VCPMg respectively, 32.4% 53.6% 73.2% It became. 一方、脂溶性薬物であるVC−IPの封入率は約6%、導入率は40%で一定であった。 On the other hand, encapsulation ratio of VC-IP is a fat-soluble drug is about 6%, introduction rate was constant at 40%. なお、PEGとPLGAのブロック共重合体に代えてPLGAを用いた比較例3では、VC−IPの封入率は8.0%、導入率は53%であったが、VCPMgは封入率0.1%、導入率0.4%で、ほとんど封入されなかった。 In Comparative Example 3 using the PLGA in place of the block copolymer of PEG and PLGA, encapsulation ratio of VC-IP is 8.0%, the introduction rate was 53% VCPMg the encapsulation rate 0. 1%, the introduction rate of 0.4%, was hardly sealed.

この結果より、親水性成分であるVCPMgと疎水性成分であるVC−IPの両方を封入したナノ粒子を製造するためには、基剤ポリマーとしてPEG−PLGA共重合体を用いる必要があることが確認された。 This result is possible to produce nanoparticles encapsulating both VC-IP is VCPMg the hydrophobic component is a hydrophilic component, it is necessary to use a PEG-PLGA copolymer as base polymer confirmed. また、図9に示すように、VCPMgはPEGの分子量に比例して封入率が高くなることから、PEGの分子量に比例して大きくなるシェル部5(図4参照)に封入され、VC−IPはPEGの分子量に関係なく封入率がほぼ一定であることから、PEGの分子量に関係なく大きさが等しいコア部6(図4参照)に封入されることが推認される。 Further, as shown in FIG. 9, VCPMg is encapsulated from the encapsulation efficiency is proportional to the molecular weight of PEG increases, the shell portion 5 which increases in proportion to the molecular weight of PEG (see Fig. 4), VC-IP from that no encapsulation efficiency related to the molecular weight of PEG is substantially constant, that is enclosed in the core portion 6 are equal regardless magnitude of the molecular weight of the PEG (see FIG. 4) is presumed.

ポリエチレングリコール(PEG)と乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)のブロック共重合体(PEGの分子量5,000、PLGAの分子量15,000、乳酸/グリコール酸=75/25、BPI社製)1gをアセトン20mLに溶解させた後、リン酸アスコルビルMg(日光ケミカルズ社製)250mgを精製水2mLに溶解させた溶液を添加し、均一に個混合して良溶媒とした。 Block copolymers of polyethylene glycol (PEG) and lactic acid-glycolic acid copolymer (PLGA) (PEG molecular weight 5,000, molecular weight 15,000 PLGA, lactic acid / glycolic acid = 75/25, BPI, Inc.) 1 g the was dissolved in acetone 20 mL, was added a solution prepared by dissolving ascorbyl phosphate Mg (manufactured by Nikko Chemicals Co.) 250 mg purified water 2 mL, and the good solvent and uniformly pieces mixed. 2重量%のHGCR(ヘキサグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、日光ケミカルズ社)含有グリセリントリエステル(カプリル酸・カプリン酸トリグリセリド、日光ケミカルズ社)溶液250mLを貧溶媒とした。 2 wt% of HGCR (hexaglycerol condensed ricinoleate, Nikko Chemicals Co., Ltd.) containing glycerol triester (caprylic capric triglyceride, Nikko Chemicals Co., Ltd.) solution 250mL was a poor solvent.

この貧溶媒を40℃、400rpmで攪拌下、一定速度(2mL/分)で良溶媒を滴下した。 The poor solvent 40 ° C., under stirring at 400 rpm, was dropped the good solvent at a constant rate (2 mL / min). 滴下終了後5分間攪拌したのち、減圧下100rpmで攪拌しながら、2時間で有機溶媒を留去した。 After stirring After completion of the dropwise addition 5 minutes, with stirring under reduced pressure 100 rpm, followed by distilling off the organic solvent at 2 hours. 得られた油中懸濁ナノスフェアを遠心分離(20,000rpm、−20℃、15分)した。 The resulting oil suspended nanospheres centrifugation (20,000rpm, -20 ℃, 15 min) was. 上澄み液を除去後、粒子表面のトリエステルを洗浄するために、n−ヘキサンを加え超音波により再懸濁し、遠心操作を行った。 After removing the supernatant, to wash the triester of the particle surface, and resuspended by sonication added n- hexane, was centrifuged. 上澄みを除去した後、ペレットを完全に乾燥させ、2重量%ポリビニルアルコール(PVA403、クラレ社製)水溶液50mLに再懸濁し、再び遠心操作を行った。 After removing the supernatant, the pellet thoroughly dried, 2 wt% polyvinyl alcohol (PVA403, manufactured by Kuraray Co., Ltd.) and resuspended in an aqueous solution 50 mL, was centrifuged again. 上澄みを除去し、ペレットを精製水に再懸濁した。 The supernatant was removed, the pellet was resuspended in purified water. 得られた懸濁液をプレ凍結後(−40℃で25分冷却)、約1日かけて凍結乾燥を行った。 The resulting suspension after the pre-frozen (25 minutes of cooling at -40 ° C.), followed by freeze-drying over a period of about 1 day.

動的光散乱法により測定した結果、平均粒子径550nmの凍結乾燥粉末が得られた。 Result of measurement by a dynamic light scattering method, freeze-dried powder having an average particle diameter of 550nm was obtained. HPLCにより、粒子内のリン酸アスコルビルMgの封入率(PLGA重量に対するリン酸アスコルビルMgの重量パーセント)を定量したところ12.7%であった。 By HPLC, and was 12.7% was quantified encapsulation ratio of ascorbyl phosphate Mg within the particle (weight percent ascorbyl phosphate Mg for PLGA weight).

実施例1及び実施例3で調製したカフェイン内包ナノ粒子を用いて水溶性薬物の放出パターンを調査した。 It was investigated release pattern of water-soluble drug with caffeine containing nanoparticles prepared in Example 1 and Example 3. 試験方法としては、それぞれ100mgのナノ粒子を37℃リン酸緩衝液(pH=7.4)に浸漬し、所定時間経過後のカフェイン放出量(mg)をHPLCにより定量した。 Examples of the test method, respectively immersed nanoparticles 100mg to 37 ° C. Phosphate buffer (pH = 7.4), caffeine release amount after a predetermined time elapsed (mg) was determined by HPLC. 結果を図10に示した。 The results are shown in Figure 10.

図10から明らかなように、本発明のカフェイン内包ナノ粒子は、いずれも試験開始後5日目までカフェインの放出速度が速く、それ以降は放出速度が緩やかになっている。 As apparent from FIG. 10, caffeine containing nanoparticles of the present invention are all fast release rate of caffeine to 5 days after start of the test, is thereafter release rate has slowed. この結果より、初期段階においては粒子のシェル部に位置するPEGが周囲の水分を取り込んで水和層を形成し、シェル部の表面付近に封入されたカフェインが急速に放出され、その後、PLGA骨格の加水分解が起こり、PEG鎖が徐々に解離してシェル部の深部或いはコア部に封入されたカフェインが徐放されるという、PLGAの加水分解とブロック共重合体の解離とが連動した放出挙動を示すことが推認される。 From this result, PEG located in the shell portion of the particles in the initial stage captures ambient moisture to form a hydration layer, caffeine encapsulated in the vicinity of the surface of the shell portion is rapidly released, then, PLGA hydrolysis occurs skeleton, that caffeine PEG chain is enclosed deep or core portion of the shell portion gradually dissociated is sustained, and interlocked with dissociation of hydrolysis and block copolymers of PLGA it is presumed that shows the release behavior.

また、PEGの分子量が大きくなるほどカフェインの初期放出量も増加している。 In addition, the initial release amount of about caffeine molecular weight of PEG increases has also increased. これは、PEGの分子量に比例してシェル部の占める割合も増加するため、シェル部に封入されるカフェイン量が増加して初期段階に放出されるカフェイン量が増加するためであると考えられる。 Believed that this is, since the increase ratio of the shell portion in proportion to the molecular weight of the PEG, because the amount of caffeine caffeine volume to be sealed in the shell portion is released at an early stage increases to increase It is.

本発明の生体適合性ナノ粒子は、疎水性ポリマーブロック及び親水性ポリマーブロックが結合したブロック共重合体から成るコアシェル構造を有し、親水性ポリマーブロックに親水性の生物活性成分を封入することにより、PLGA等の疎水性ポリマーを基剤ポリマーとして用いた場合、球形晶析法では封入が困難であった親水性の生物活性成分を高封入率で封入可能となる。 Biocompatible nanoparticles of the present invention has a core-shell structure comprising a block copolymer the hydrophobic polymer block and a hydrophilic polymer block is bonded to the hydrophilic polymer block by encapsulating hydrophilic bioactive components when using a hydrophobic polymer such as PLGA as base polymer, thereby enabling encapsulated bioactive ingredient a hydrophilic difficult to encapsulate with a high encapsulation rate spherical crystallization method. また、コアシェル構造において親水性ポリマーブロックがシェル側に位置するか、コア側に位置するかを選択することにより、生物活性成分の徐放性を制御することもできる。 Also, either the hydrophilic polymer block is positioned on the shell side in the core-shell structure, by selecting whether located on the core side, it is also possible to control the sustained release of biologically active ingredients.

また、生物活性成分が両親媒性の場合、疎水性ポリマーブロックと親水性ポリマーブロックの両方に封入されるため、ナノ粒子全体として高い封入率が確保される。 Moreover, the bioactive ingredient may amphiphilic, because it is sealed in both the hydrophobic polymer block and a hydrophilic polymer block, high encapsulation rate is secured as a whole nanoparticles. さらに、疎水性の生物活性成分は疎水性ポリマーブロックに封入されるため、親水性、疎水性に係わらず様々な生物活性成分を同時に封入可能な生体適合性ナノ粒子となる。 Furthermore, the bioactive ingredient is hydrophilic since it is encapsulated in a hydrophobic polymer block, hydrophilicity, and various biologically active ingredient can simultaneously sealed biocompatible nanoparticles regardless hydrophobic.

また、ブロック共重合体として、工業的にも流通する安価なPEG−PLGA共重合体を用いることが好適である。 Further, as a block copolymer, it is preferable to use an inexpensive PEG-PLGA copolymer also distributed industrially. また、PEGの分子量に比例して親水性の生物活性成分の封入率が高くなり、放出速度も速くなるが、PEGの分子量を5,000以上10,000以下とすることにより、親水性の生物活性成分の封入率を高めるとともに、PEG−PLGA共重合体の製造時の取り扱いも容易となる。 Further, in proportion to the molecular weight of PEG increases the encapsulation efficiency of the hydrophilic bioactive components, although the release rate becomes faster, by the molecular weight of PEG of 5,000 to 10,000, hydrophilic organisms to increase the encapsulation rate of the active ingredient, it becomes easy to handle during manufacture of the PEG-PLGA copolymers.

また、生体適合性ナノ粒子を凍結乾燥等により複合化しておけば、容器への充填時において取り扱いやすい凝集粒子となる。 Further, if the biocompatible nanoparticles complexed by freeze-drying or the like, the easy handling agglomerated particles during filling of the container. さらに、ナノ粒子と共に糖アルコールやビタミン類を複合化しておけば、複合化されたナノ粒子の分散性、耐熱性が向上するとともに、封入される生物活性成分が水溶性の場合でも、一旦封入された成分の粒子表面への漏出を防止できる。 Further, if a composite of the sugar alcohol or vitamins with nanoparticles, the dispersibility of the composite nanoparticles, as well as improved heat resistance, bioactive ingredients to be encapsulated even where water soluble, is temporarily sealed It was possible to prevent leakage of the particle surface of the component. また、ナノ粒子に含有される薬物と、複合化される薬物とを有することで、速効性と遅効性の双方の効果を合わせ持ったナノ粒子となる。 Also, a drug contained in the nanoparticles, by having the drug to be complexed, the nanoparticles having combined both of the effect of fast-acting and slow-acting.

また、球形晶析法を用いてナノ粒子を形成する本発明の生体適合性ナノ粒子の製造方法は、貧溶媒として水相又は油相のいずれを用いることもできる。 A method of manufacturing a biocompatible nanoparticles of the present invention to form the nanoparticles using a spherical crystallization method, can be formed using either water or oil phase as a poor solvent. 貧溶媒として水相を用いた場合は、親水性の生物活性成分はシェル側に位置する親水性ポリマーブロックに封入され、油相を用いた場合はコア側に位置する親水性ポリマーブロックに封入される。 If as a poor solvent with water phase, the bioactive component of the hydrophilic are encapsulated in a hydrophilic polymer block located on the shell side, in the case of using the oil phase is encapsulated in the hydrophilic polymer blocks located on the core side that. 水相としてはポリビニルアルコール水溶液が好適に用いられ、油相としてはグリセリントリエステルが好適に用いられる。 As aqueous phase of polyvinyl alcohol aqueous solution is suitably used, glycerin triester is suitably used as the oil phase.

また、ポリビニルアルコール水溶液の濃度を0.5重量%以下の低濃度とすることで、遠心分離などによるナノ粒子の洗浄が不要となるため手間と時間が削減でき、製造面で有利となる。 Further, the concentration of the aqueous polyvinyl alcohol solution by a low concentration of 0.5 wt% or less, washing the nanoparticles by centrifugal separation can reduce time and effort to become unnecessary, which is advantageous in terms of production. 一方、高濃度のポリビニルアルコール水溶液を用いてナノ粒子を形成した後、当該水溶液を遠心分離などによって固液分離してナノ粒子表面に付着した余剰のポリビニルアルコールを除去する工程を設けた場合、ナノ粒子中に封入される生物活性成分の封入率を安定化することができる。 On the other hand, if after the formation of the nano-particles using a high concentration of polyvinyl alcohol aqueous solution, provided with a step of removing the excess polyvinyl alcohol to the aqueous solution and solid-liquid separation such as by centrifugation attached to the nanoparticles surface, nano it is possible to stabilize the encapsulation rate of the bioactive ingredient to be encapsulated in the particles. このとき、ポリビニルアルコール水溶液の濃度を0.1重量%以上10重量%以下とすることで、貧溶媒の粘度を良溶媒の拡散に影響を与えない程度に抑えることができる。 At this time, the concentration of the aqueous polyvinyl alcohol solution by 0.1 wt% to 10 wt% or less, can be suppressed to a degree that does not affect the diffusion of the good solvent to the viscosity of the poor solvent.

また、人体や環境への影響の少ないアセトン、エタノールの混合液を良溶媒として用いたので、人体へ直接作用させる薬剤の原料として安全性の高いものとなる。 Moreover, little acetone influence on the human body and the environment, since using a mixture of ethanol as a good solvent, becomes highly safe as a raw material for drugs which act directly on the human body. また、複合化工程を凍結乾燥により行うこととすれば、ナノ粒子の複合化を良好に且つ効率よく行うことができる。 Further, if performing the conjugation step by freeze drying, it can be performed with good and efficient complexation of nanoparticles.

は、本発明に用いられるブロック共重合体の構造を示す模式図である。 Is a schematic diagram showing the structure of the block copolymer used in the present invention. は、本発明の第1実施形態に係る生体適合性ナノ粒子の構造を示す模式図である。 Is a schematic diagram showing the structure of a biocompatible nanoparticle according to the first embodiment of the present invention. は、ブロック共重合体の分子量が等しい場合の親水性ポリマーブロックの分子量とコアシェル構造との関係を示す模式図である。 Is a schematic diagram showing the relationship between the molecular weight and the shell structure of the hydrophilic polymer block when the molecular weight of the block copolymer are equal. は、疎水性ポリマーブロックの分子量が等しい場合の親水性ポリマーブロックの分子量とコアシェル構造との関係を示す模式図である。 Is a schematic diagram showing the relationship between the molecular weight and the shell structure of the hydrophilic polymer block when the molecular weight of the hydrophobic polymer blocks are equal. は、本発明の第2実施形態に係る生体適合性ナノ粒子の構造を示す模式図である。 Is a schematic diagram showing the structure of a biocompatible nanoparticle according to a second embodiment of the present invention. は、本発明の第3実施形態に係る生体適合性ナノ粒子の構造を示す模式図である。 Is a schematic diagram showing the structure of a biocompatible nanoparticle according to a third embodiment of the present invention. は、ポリエチレングリコールの分子量とカフェインの封入率との関係を示すグラフである。 Is a graph showing a relationship between the molecular weight and caffeine encapsulation ratio of polyethylene glycol. は、ポリエチレングリコールの分子量とVCPMgの封入率との関係を示すグラフである。 Is a graph showing a relationship between the molecular weight and VCPMg of encapsulation ratio of polyethylene glycol. は、ポリエチレングリコールの分子量とVCPMg及びVC−IPの封入率との関係を示すグラフである。 Is a graph showing the relationship between the molecular weight of polyethylene glycol and VCPMg and VC-IP encapsulation rate. は、ポリエチレングリコールの分子量とナノ粒子からのカフェインの放出速度との関係を示すグラフである。 Is a graph showing the relationship between the release rate of caffeine from the molecular weight and nanoparticles of polyethylene glycol.

符号の説明 DESCRIPTION OF SYMBOLS

1 生体適合性ナノ粒子 2 疎水性ポリマーブロック 3 親水性ポリマーブロック 4 ブロック共重合体 5 シェル部 6 コア部 7 親水性成分 8 疎水性成分 1 biocompatible nanoparticle 2 hydrophobic polymer block 3 hydrophilic polymer block 4 Block copolymer 5 shell part 6 the core portion 7 hydrophilic component 8 hydrophobic component

Claims (22)

  1. 生体適合性の疎水性ポリマーブロック及び生体適合性の親水性ポリマーブロックが結合したブロック共重合体から成り、前記疎水性ポリマーブロックがコア側に位置し、前記親水性ポリマーブロックがシェル側に位置するコアシェル構造を形成している生体適合性ナノ粒子であって、 Consists block copolymer biocompatible hydrophobic polymer block and a biocompatible hydrophilic polymer block are bonded, the hydrophobic polymer block is located in the core side, the hydrophilic polymer block is positioned on the shell side a biocompatible nanoparticles which form a core-shell structure,
    親水性の生物活性成分を前記親水性ポリマーブロックに封入したことを特徴とする生体適合性ナノ粒子。 Biocompatible nanoparticles, characterized in that the hydrophilic bioactive components encapsulated in the hydrophilic polymer blocks.
  2. 生体適合性の疎水性ポリマーブロック及び生体適合性の親水性ポリマーブロックが結合したブロック共重合体から成り、前記疎水性ポリマーブロックがシェル側に位置し、前記親水性ポリマーブロックがコア側に位置するコアシェル構造を形成している生体適合性ナノ粒子であって、 Consists block copolymer biocompatible hydrophobic polymer block and a biocompatible hydrophilic polymer block are bonded, the hydrophobic polymer block is positioned on the shell side, the hydrophilic polymer block is located on the core side a biocompatible nanoparticles which form a core-shell structure,
    親水性の生物活性成分を前記親水性ポリマーブロックに封入したことを特徴とする生体適合性ナノ粒子。 Biocompatible nanoparticles, characterized in that the hydrophilic bioactive components encapsulated in the hydrophilic polymer blocks.
  3. 前記親水性の生物活性成分が両親媒性であり、該両親媒性の生物活性成分を前記疎水性ポリマーブロックと前記親水性ポリマーブロックの両方に封入したことを特徴とする請求項1又は請求項2に記載の生体適合性ナノ粒子。 Said hydrophilic bioactive components are amphiphilic, claim 1 or claim, characterized in that the said amphiphilic bioactive ingredient encapsulated in both of the hydrophilic polymer block and the hydrophobic polymer block biocompatible nanoparticles according to 2.
  4. 前記生物活性成分として、さらに疎水性の生物活性成分を前記疎水性ポリマーブロックに封入したことを特徴とする請求項1乃至請求項3のいずれか1項に記載の生体適合性ナノ粒子。 It said biologically as active ingredient, biocompatibility nanoparticles according to any one of claims 1 to 3 further characterized in that the hydrophobic bioactive ingredient encapsulated in the hydrophobic polymer block.
  5. 前記疎水性ポリマーブロックが乳酸・グリコール酸共重合体で構成され、前記親水性ポリマーブロックがポリエチレングリコールで構成されることを特徴とする請求項1乃至請求項4のいずれか1項に記載の生体適合性ナノ粒子。 The hydrophobic polymer block is composed of lactic acid-glycolic acid copolymer, biological according to any one of claims 1 to 4 wherein the hydrophilic polymer block is characterized in that it is composed of polyethylene glycol compatible nanoparticles.
  6. 前記ポリエチレングリコールの分子量が5,000以上10,000以下であることを特徴とする請求項5に記載の生体適合性ナノ粒子。 Biocompatible nanoparticle of claim 5, wherein the molecular weight of the polyethylene glycol is 5,000 to 10,000.
  7. 非注射用途に使用されることを特徴とする請求項1乃至請求項6のいずれか1項に記載の生体適合性ナノ粒子。 Biocompatible nanoparticles according to any one of claims 1 to 6, characterized in that it is used for non-injectable use.
  8. 請求項1乃至請求項7のいずれか1項に記載の生体適合性ナノ粒子が複合化されることを特徴とする生体適合性ナノ粒子。 Biocompatible nanoparticles biocompatible nanoparticles according to characterized in that it is conjugated to any one of claims 1 to 7.
  9. 前記生体適合性ナノ粒子と共に糖アルコールが複合化されることを特徴とする請求項8に記載の生体適合性ナノ粒子。 Biocompatible nanoparticle of claim 8, sugar alcohol together with the biocompatible nanoparticles, characterized in that it is complexed.
  10. 前記生体適合性ナノ粒子と共にビタミンまたはビタミン誘導体が複合化されることを特徴とする請求項8又は請求項9に記載の生体適合性ナノ粒子 Biocompatible nanoparticle of claim 8 or claim 9 vitamins or vitamin derivatives with the biocompatible nanoparticles, characterized in that it is complexed
  11. 生体適合性の疎水性ポリマーブロック及び生体適合性の親水性ポリマーブロックが結合したブロック共重合体と、親水性の生物活性成分とを有機溶媒及び必要により加えた水に溶解する溶解工程と、 A block copolymer biocompatible hydrophobic polymer block and a biocompatible hydrophilic polymer block are bonded, a dissolution step of dissolving in water plus an organic solvent and optionally a hydrophilic bioactive components,
    前記溶解工程によって得られた溶液を水相に加えて、前記生物活性成分が少なくともシェル側に位置する親水性ポリマーブロックに封入された生体適合性ナノ粒子を形成してナノ粒子含有溶液とするナノ粒子形成工程と、 The solution obtained by the dissolution step is added to the aqueous phase, the nano to the biologically active ingredient nanoparticle-containing solution to form a biocompatible nanoparticles encapsulated in a hydrophilic polymer block located at least the shell side and particle formation step,
    前記ナノ粒子含有溶液から前記有機溶媒を留去する溶媒留去工程と、 And the solvent was distilled off step of distilling off the organic solvent from the nanoparticles-containing solution,
    を有することを特徴とする生体適合性ナノ粒子の製造方法。 Method for producing a biocompatible nanoparticles and having a.
  12. 生体適合性の疎水性ポリマーブロック及び生体適合性の親水性ポリマーブロックが結合したブロック共重合体と、親水性の生物活性成分とを有機溶媒及び必要により加えた水に溶解する溶解工程と、 A block copolymer biocompatible hydrophobic polymer block and a biocompatible hydrophilic polymer block are bonded, a dissolution step of dissolving in water plus an organic solvent and optionally a hydrophilic bioactive components,
    前記溶解工程によって得られた溶液を油相に加えて、前記生物活性成分が少なくともコア側に位置する親水性ポリマーブロックに封入された生体適合性ナノ粒子を形成してナノ粒子含有溶液とするナノ粒子形成工程と、 The solution obtained by the dissolution step in addition to the oil phase, the nano to the biologically active ingredient nanoparticle-containing solution to form a biocompatible nanoparticles encapsulated in a hydrophilic polymer block located at least the core-side and particle formation step,
    前記ナノ粒子含有溶液から前記有機溶媒を留去する溶媒留去工程と、 And the solvent was distilled off step of distilling off the organic solvent from the nanoparticles-containing solution,
    を有することを特徴とする生体適合性ナノ粒子の製造方法。 Method for producing a biocompatible nanoparticles and having a.
  13. 前記水相がポリビニルアルコール水溶液であることを特徴とする請求項11に記載の生体適合性ナノ粒子の製造方法。 Method for producing a biocompatible nanoparticle of claim 11, wherein the aqueous phase is polyvinyl alcohol aqueous solution.
  14. 前記油相がグリセリントリエステルであることを特徴とする請求項12に記載の生体適合性ナノ粒子の製造方法。 Method for producing a biocompatible nanoparticle according to claim 12, wherein the oil phase is glycerin triester.
  15. 前記ポリビニルアルコール水溶液中のポリビニルアルコール濃度が0.5重量%未満であることを特徴とする請求項13に記載の生体適合性ナノ粒子の製造方法。 Method for producing a biocompatible nanoparticle of claim 13, wherein the polyvinyl alcohol concentration in the aqueous polyvinyl alcohol solution is less than 0.5 wt%.
  16. 前記溶媒留去工程の後に、さらに前記ナノ粒子含有溶液からポリビニルアルコールを除去する除去工程を有することを特徴とする請求項13に記載の生体適合性ナノ粒子の製造方法。 Production method of the after solvent distillation step, further biocompatible nanoparticle of claim 13, characterized in that it comprises a removing step of removing the polyvinyl alcohol from the nanoparticle-containing solution.
  17. 前記ポリビニルアルコール水溶液中のポリビニルアルコール濃度が0.1重量%以上10重量%以下であることを特徴とする請求項16に記載の生体適合性ナノ粒子の製造方法。 Method for producing a biocompatible nanoparticle of claim 16, wherein the polyvinyl alcohol concentration in the aqueous polyvinyl alcohol solution is not more than 10 wt% 0.1 wt%.
  18. 前記溶解工程において、さらに疎水性の生物活性成分を有機溶媒に溶解することにより、前記親水性の生物活性成分が少なくとも親水性ポリマーブロックに封入され、前記疎水性の生物活性成分が少なくとも疎水性ポリマーブロックに封入された生体適合性ナノ粒子を形成することを特徴とする請求項11乃至請求項17のいずれか1項に記載の生体適合性ナノ粒子の製造方法。 In the melting step, by further dissolving a hydrophobic bioactive ingredient in an organic solvent, the hydrophilic bioactive components are encapsulated in at least the hydrophilic polymer block, wherein the hydrophobic bioactive ingredient at least a hydrophobic polymer method for producing a biocompatible nanoparticles according to any one of claims 11 to 17, characterized in that to form the biocompatible nanoparticles encapsulated in a block.
  19. 前記有機溶媒がアセトンとエタノールの混合液であることを特徴とする請求項11乃至請求項18のいずれか1項に記載の生体適合性ナノ粒子の製造方法。 Method for producing a biocompatible nanoparticles according to any one of claims 11 to 18, wherein the organic solvent is a mixture of acetone and ethanol.
  20. 前記溶媒留去工程又は前記除去工程の後に、さらに前記ナノ粒子を複合化する複合化工程を有することを特徴とする請求項11乃至請求項19のいずれか1項に記載の生体適合性ナノ粒子の製造方法。 After the solvent was distilled off step or the removing step, further biocompatible nanoparticles according to any one of claims 11 to 19, wherein the nanoparticles and having a composite step of composite the method of production.
  21. 前記複合化工程において、前記ナノ粒子と共に、糖アルコール、ビタミンおよびビタミン誘導体のうちの1種以上を複合化させることを特徴とする請求項20に記載の生体適合性ナノ粒子の製造方法。 In the above composite process, together with the nanoparticles, the production method of a sugar alcohol, a biocompatible nanoparticle of claim 20, characterized in that to decrypt the one or more of the vitamins and vitamin derivatives.
  22. 前記複合化工程が凍結乾燥により行われることを特徴とする請求項20又は請求項21に記載の生体適合性ナノ粒子の製造方法。 Method for producing a biocompatible nanoparticle of claim 20 or claim 21, wherein the composite process is carried out by freeze-drying.
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