JP2009529000A - ヒト化抗グレリン抗体 - Google Patents
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Abstract
Description
a)アシル化ヒトグレリンに対して約1730pMから約11pMの範囲の平衡解離定数KDを示し、
b)アシル化ヒトグレリンに対して約4.44×106(1/Ms)から約4.89×107(1/Ms)の範囲のkon値を示し、
c)アシル化ヒトグレリンに対して約4.98×10−5(1/s)から約2.58×10−2(1/s)の範囲のkoff値を示し、
前記KD、kon及びkoff値は表面プラズモン共鳴により計測され;
d)ヒト成長ホルモン分泌促進物質受容体1aを発現するよう安定的に形質転換されたハムスターAV12細胞において、細胞内カルシウムのアシル化ヒトグレリン媒介増加を、インビトロFLIPRカルシウムアッセイによる測定としてIC50が約10nM以下で阻害する。
別の態様において、ヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分は、ヒトIgG1、IgG2、IgG3、及びIgG4から選ばれる重鎖定常領域、又はヒトカッパ又はラムダから選ばれる軽鎖定常領域を含みうる。ヒトIgG1及びIgG4が好適である。
別の態様において、ヒト化抗原結合部分は、Fab断片、F(ab’)2断片、及び単鎖Fv断片からなる群から選ばれる。
別の態様において、本発明は、医薬品として用いるための、前述のいずれか1つのヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分を提供する。
別の態様において、本発明は、哺乳類、好適にはヒトにおける肥満、非インシュリン依存性糖尿病、プラダー・ウィリー症候群、過食症、障害性の満腹、又はガンからなる群から選ばれる疾病又は障害の治療のための、前述のいずれか1つのヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分の使用を提供する。
別の態様において、本発明は、前述のいずれか1つのヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分の有効量を、これを必要とするヒトに投与することを含んでなる、
ヒトにおける肥満、非インシュリン依存性糖尿病、プラダー・ウィリー症候群、過食症、障害性の満腹、又はガンを治療する方法を提供する。肥満の治療法は、治療的でも、又は例えば美容、美観等の非治療的でもありうる。
本発明の適用性のさらなる態様は、以下の詳細な記載及び実施例により明らかであり、これらは非限定的な例示のためのみである。
本発明は、タンパク工学を用いてげっ歯類の抗体定常領域及び可変ドメインフレームワーク領域をヒト抗体に見出された配列で入れ替えることにより、異質タンパク配列を低減し、ヒトグレリンに対して治療的に用いるためのヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分を提供する。
本発明のヒト化抗グレリンモノクローナル抗体(その抗原結合部分を含む)は、ヒトグレリンへの特異的結合が可能である。好適な抗グレリンモノクローナル抗体は、グレリンに付随する生物学的活性を調節することが可能であり、これにより肥満及び肥満関連疾病を含んでなる種々の疾病及び病理学的症状の治療又は予防に有用である。
本発明は、アシル化ヒトグレリン及び脱アシル化ヒトグレリンの両者に特異的に結合する、ヒト化モノクローナル抗体及びその抗原結合部分の提供に関する。このような抗体は、アシル化ヒトグレリンでも脱アシルヒトグレリンでも、あるいは両者であっても、ヒトグレリン又はヒトグレリンの生物学的活性を中和する。阻害される活性は:(i)受容体GHS−R1aに対するアシル化ヒトグレリンの結合;(ii)GHS−R1aに結合するアシル化ヒトグレリンにより促進される情報伝達;(iii)特異的結合箇所を有する結合パートナーに対する脱アシル化ヒトグレリンの結合、又は(iv)特異的結合箇所を有する結合パートナーに結合する脱アシル化ヒトグレリンにより促進される情報伝達、でありうる。本発明のヒト化モノクローナル抗体及びその抗原結合部分の、アシル化及び脱アシル化の両形態のヒトグレリンに対する特異的結合により、当該分子は、グレリン付随疾病及び症状、すなわち被験者内に存在するグレリンの生物活性又は活性グレリン濃度の低下又は阻害が役立つ疾病又は症状の治療薬又は予防薬として用いうる。
本発明は、さらに、アフィニティ又は特異性に悪影響を及ぼさない、CDR内の1又は2の保守的なアミノ酸置換変異体を含んでなる、本願明細書に開示のヒト化抗体及び抗体断片に対して実質的に相同な変異体及び等価物を提供することに関する。
このような変異体又は等価物はCDRの末端アミノ酸の欠失も含んでなる。
本発明のヒト化抗体は、アシル化又は脱アシルのいずれかの形態においてヒトグレリンの発現に付随する疾病又は症状の診断に用いることが可能であり、あるいはグレリン関連症状に対して治療が行われる又は治療が考慮される被験者内のグレリン濃度をモニターすることが可能である。診断アッセイは、本発明の抗体及びヒト体液、細胞又は組織抽出物等の試料中のアシル化グレリン及び/又は脱アシルグレリンを検出するための標識を利用する方法を含んでなり、例えばELISA、RIA及びFACS等のプロトコルを含んでなる。
本発明のモノクローナル抗体を含む医薬品組成物は、肥満症及び/又は肥満関連障害、例えば非インスリン依存型糖尿病(NIDDM;II型糖尿病)、プラダー・ウィリー症候群、障害性の満腹、過食症、不安、胃の自動運動性障害(例えば、過敏性腸症候群及び機能性消化不良が挙げられる)、インスリン抵抗性症候群、メタボリック初稿群、異脂肪血症、アテローム性動脈硬化症、高血圧、アンドロゲン過多症、多嚢胞の子房のシンドローム、心血管性の障害及び種々のガン、例えば肝ガン、前立腺ガン、心臓ガン、膵臓ガン、副腎ガン、下垂体ガン、骨ガン及び乳ガン等の障害の治療又は予防に用いてもよい。当該抗体は、食欲亢進、神経性食欲不振及び過食症を含む摂食障害の治療又は予防に用いてもよいが、これらに限定しない。
グレリン(アシル化又は脱アシル、若しくは両者)活性が有害である前述の障害の少なくとも1以上を治療又は予防するための医薬品としての本発明の抗ヒトグレリンモノクローナル抗体も、本願明細書の想定範囲にある。加えて、グレリン活性が有害である前述の障害の少なくとも1以上の治療用医薬品の製造において、本発明の抗グレリンモノクローナル抗体を使用することも、想定範囲にある。
本願明細書に用いるように、「治療」「治療する」等の用語は、所望の薬理学的及び/又は生理学的作用を得ることを指す。用語「治療」は、疾病の阻害、すなわち疾病又は障害を退行させ、若しくは症候又はその合併症を軽減する目的のために、哺乳類、特にヒトに本発明の化合物の投与することを含んでなる。この効果は、疾病に対する部分的又は完全な治療法、及び/又は疾病に起因する影響の逆行の場合がある。治療は、摂食制限及びエクササイズ等、行動の改良と組み合わせてもよい。そのため、肥満治療には、摂食抑制、体重増加の抑制を含んでなり、及び/又は必要であれば被験者の体重減少を含んでなる。治療効果は予防的であってもよく、すなわち、疾病を被るかもしれないが、疾病を有するという診断をまだ受けていない被験者に、疾病又は症候が発生する前に完全に又は部分的に発生を防ぐことでもよい。
薬剤投与計画は、最適な所望の反応(例えば治療又は予防の反応)を提供するように調節してもよい。例えば、単一のボーラス投与を行ってもよく、いくつかの分割服用量を経時的に投与してもよく、又は服用量は治療状況の緊急性の度合いに応じて減少又は増加してもよい。
本発明のヒト化抗体及び抗原結合部分は、被験者への投与に適切な医薬品組成物に組み込まれうる。当該抗体化合物の投与は単独でもよく、単一又は複数の服用において薬理学的に許容できるキャリア、希釈液又は賦形剤と組み合わせてもよい。医薬品組成物は、本願明細書に開示の抗体の組み合わせを含みうる。このような医薬品組成物は、選択された投与モード又は経路に適切であるようn設計され、薬理学的に許容できる希釈剤、キャリア、及び/又は分散剤、バッファ、界面活性剤、保存剤、可溶化剤、等張力剤、安定化剤等の賦形剤が適宜用いられる。このような組成物は、例えば、Remington、The Science and Practice of Pharmacy”、第19版、Gennaro編、Mack Publishing Co.、Easton、PA、1995年、に開示のように、通常の技法に従って設計しうる。医薬品組成物のための適切なキャリアは、本発明のモノクローナル抗体に組み合わされるときには、分子の活性を保持し、被験者の免疫系に反応性でない任意の材料を含んでなる。
本発明の抗ヒトグレリンモノクローナル抗体を含む医薬品組成物は、肥満又は関連障害、若しくは種々のガンに付随する病理の危険にある又は表している被験者に、本願明細書に記載のように、経口、非経口、吸引、又は局所(静脈内、腹腔内、皮下、肺、経皮、筋肉内、鼻腔内、口内、舌下、座薬(経直腸又は経膣)を含む)投与を含んでなる通常の投与技法を用いて投与されうる。静脈内、腹腔内、又は皮下注射による周辺性の全身輸送が好適である。
このような医薬品組成物は、好適には本発明の1以上の抗体の「有効量」又は「治療上有効量」又は「予防的有効量」を含有する。「有効量」又は「治療上有効量」は、服用に対して及び必要期間の間に、所望の治療上の結果を成し遂げるのに効果的な量を指す。抗体の有効量又は治療上有効量は、疾病状態、年齢、性別及び個人の体重等の要因、及び所望の反応を個人に誘発する抗体又は抗体部分の能力に従って変化しうる。
有効量又は治療上有効量は、いかなる抗体の毒性又は有害な作用よりも治療上の有益な効果が上回るものである。「予防的有効量」は、服用に対して及び必要期間の間に、所望の予防上の結果を成し遂げるのに効果的な量を指す。典型的には、予防的投与量は、被験者が病気になる前に、又は病気の初期段階において用いるので、予防的有効量は、治療上有効量よりも少ないであろう。
有効量又は治療上有効量は、被験者に治療上の利点をもたらすのに必要な活性薬剤の、少なくとも最小量であるが有毒量未満である。換言すると、肥満症治療のためのこうした量は、例えばボディー・マス・インデックス(BMI)の減少等により、哺乳類の肥満状態に改良を誘導、回復、さもなければ発生する量である。
医療技術において周知のように、任意の被験者に対する服用量は、患者のサイズ、体表面積、年齢、投与する特定の化合物、性別、投与時間及び投与経路、一般的健康状態、及び同時に投与される他の薬剤を含んでなる多くの要因に依存する。本発明の抗体又は抗原結合部分のための典型定期な服用量は、例えば、約0.001から約1000μgの範囲でありうるが、しかしながら、特に前述の要因を考慮し、この例示を下回る又は上回る服用量も考えられる。1日あたりの非経口投与基準は全体重の約0.1μg/kgから約100mg/kgの範囲、好適には約0.3μg/kgから約10mg/kg、より好適には約1μg/kgから約1mg/kg、さらにより好適には1日あたり体重の約0.5から約10mg/kgである。患者の経過記録を周期的な評価によりモニタし、これによって投与量を調節しうる。
以下の実施例は、例示のためのみに提示し、いかなる点においても本発明の範囲を制限する意図はない。
(マウスD4 Fab3281のヒト化)
PCT国際特許出願第WO 2006/019577 (PCT/US2005/023968)号は、Fab3281、4731、及び4281と名付けられた、ヒト化グレリンC末端への種々のマウスモノクローナル抗体を開示している。これらのFabは、当該ペプチドのアミノ酸14−27内に位置する抗原エピトープでヒトグレリンのアシル化及び脱アシル化形態の両者に結合する。これらのFabのC8アシル化ヒトグレリン全長(1−28)に対するアフィニティ(KD)は、4.36×10−9から8.62×10−11M(4360pMから86.2pM)の範囲にある。
マウスD4 Fab3281軽鎖及び重鎖可変領域アミノ酸配列を、CDR領域を太字及び下線付きとして、以下に示す。
マウスD4 Fab3281の軽鎖及び重鎖可変領域の両者のCDRにアミノ酸の変化を導入することは、通常の分子生物学の技法を介してコード化DNA内の適切なコドンを変更することにより実施される。表1に、本発明のヒト化Fab内CDRのアミノ酸配列を示す。
* D4 7.1 LCVR及びHCVR CDRは、それぞれ適切なマウスLCVR及びHCVRフレームワーク内のマウスに最適化した配列である。
表1の全体を通じて用いるように:
X1はQ又はDであり;
X2はS又はHであり;
X3はN、S、T、又はDであり;
X4はN、F、Y、又はHであり;
X5はH又はSであり;
X6はS又はDであり;
X7はY、T、又はGであり;
X8はN又はDであり;
X9はE、Y、又はFである。
軽鎖又は重鎖可変領域の全体は、適切なCDRをヒト軽鎖及び重鎖フレームワークアミノ酸配列中に取り入れることにより生成される。
本発明の抗体の軽鎖可変領域のための好適なヒトフレームワークアミノ酸配列は、次の配列を含んでなり、本願明細書に開示のFab 3a(太字及び下線)と共に図示を目的として当該配列を表す。
本発明の抗体の重鎖可変領域のための好適なヒトフレームワークアミノ酸配列は、次の配列を含んでなり、本願明細書に開示のFab 3a(太字及び下線)と共に図示を目的として当該配列を表す。
表2に、本発明のFabの軽鎖可変領域アライメントを示す。
マウスに最適化したFab D4 7.1のLVCR及びHCVRの配列は、CDRに太字及び下線を付し、以下に示す。
Fab D4 7.1 LCVR
Fab D4 7.1 HCVR
(アシル化ヒトグレリンに対するヒト化D4 Fabのアフィニティ)
実施例1に開示の、C−8アシル化ヒトグレリン(1−28)に対するヒト化/最適化抗グレリンFabのアフィニティ(KD)は、CM5センサチップを装備するBIAcore(登録商標)2000装置を用いて測定した。記載の場合を除き、全ての試薬及び材料はBIAcore(登録商標)AB社(Upsala、スウェーデン)から購入した。測定は約25℃で実施した。ヒトグレリンを含む試料は、HBS−EPバッファ(150mM塩化ナトリウム、3mM EDTA、0.005%(w/v)界面活性剤P−20、及び10mM HEPES pH7.4)に溶解した。捕獲抗体は、D4及びD4 7.1Fabに対してはヤギ抗マウスカッパ(Southern Biotechnology, Inc.)であり、他の全てのFabに対してはヤギ抗ヒトカッパ(Jackson ImmunoResearch)であり、以後「捕獲抗体」と称するこれらのものを、アミン結合を用いるフローセル上に固定化した。フローセル(1−4)は、0.1M N−ヒドロキシスクシンイミド及び0.1M 3−(N,N−ジメチルアミノ)プロピル−N−エチルカルボジイミドの1:1混合物で7分間、流速10μL/分にて活性化した。ヤギ抗マウスカッパ又はヤギ抗ヒトカッパ(10mM酢酸ナトリウム中30μg/mL、pH4.5)は、流速10μL/分にて4つのフローセルに手操作で注入した。表面密度をモニタし、必要ならば全てのフローセルの表面密度が4500−5000反応単位(RU)となるまで追加の捕獲抗体を個々の細胞に注入した。表面は、1Mエタノールアミン−塩酸、pH8.5(10μL/分)を7分間注入してブロックした。共有結合的に結合しなかった全ての捕獲抗体が完全に除去されたことを確認するために、10mMグリシン15μL、pH1.5を2回注入した。
動態試験用に用いたランニングバッファは、10mM HEPES、pH7.4、150mM塩化ナトリウム、0.005% P20を含んでなる。
(ヒト化D4モノクローナル抗体の種々のグレリンに対するアフィニティ)
アシル化ヒトグレリンに対するヒト化D4モノクローナル抗体のアフィニティ(KD)は、CM5センサチップを装備するBIAcore(登録商標)2000装置を用いて測定した。
このモノクローナル抗体は、ラット軽鎖カッパ定常ドメイン及びラットIgG1重鎖定常ドメインのそれぞれに融合した、Fabの軽鎖可変領域及び重鎖可変領域の配列を含んでなる。
使用したラット軽鎖カッパ定常ドメインのアミノ酸配列は次の通りである。
記載の場合を除き、全ての試薬及び材料はBIAcore(登録商標)AB社(Upsala、スウェーデン)から購入した。全ての測定は約25℃で実施した。ヒトグレリン(全長、C−8アシル化又は脱アシル)を含む全ての試料及び抗グレリンMabは、HBS−EPバッファ(150mM塩化ナトリウム、3mM EDTA、0.005%(w/v)界面活性剤P−20、及び10mM HEPES pH7.4)で希釈した。全てのMabに対し、後述のアミン結合を用いて抗体をCM5チップに直接結合して、表面密度が800−1000反応単位(RU)となるようにした。フローセル(1−4)は、0.1M N−ヒドロキシスクシンイミド及び0.1M 3−(N,N−ジメチルアミノ)プロピル−N−エチルカルボジイミドの1:1混合物で7分間、流速10μL/分にて活性化した。Mabは10mM酢酸ナトリウム中、pH4.5で10μg/mLに希釈し、流速10μL/分にて4つのフローセルに手操作で注入した。表面密度をモニタし、必要ならば全てのフローセルの表面密度が800−1000RUとなるまで追加の捕獲抗体を個々の細胞に注入した。表面は、1Mエタノールアミン−塩酸、pH8.5(10μL/分)を7分間注入してブロックした。共有結合的に結合しなかった全ての捕獲抗体が完全に除去されたことを確認するために、10mMグリシン15μL、pH1.5を2回注入した。動態試験用に用いたランニングバッファは、HBS−EPバッファ(150mM塩化ナトリウム、3mM EDTA、0.005%(w/v)界面活性剤P−20、10mM HEPES、pH7.4)である。
(インビトロFLIPRアッセイにおけるヒト化D4 Mabの活性)
インビトロFLIPRカルシウムアッセイシステム(Molecular Devices)は、GHS−R1a(ヒトグレるん受容体)を発現するために安定的に形質転換したハムスターAV12細胞と共に用いた。このアッセイは、グレリン/GHS−R1a結合及び本発明のヒト化Mabの存在又は不在におけるシグナリングを検出する手段として、細胞内カルシウムの変化を評価する。
本願明細書に開示のMabのIC50値は0.55nMから6.49nMの範囲を示した。例えば、Mab D27QのIC50値は1.12nMを示し、一方Mab S34NのIC50値は2.55nMを示した。
(食餌負荷肥満オスラットの体重におけるキメラのマウスD4グレリン抗体の効果)
本研究は、食餌負荷肥満(DIO)ラットの体重減少におけるD4型抗体の投与効果を計測するために設計した。
離乳以来、高カロリー食餌負荷(TD95217、Teklad、Madison米ウィスコンシン州)に維持した食餌負荷肥満(DIO)オスLong−Evansラット(Harlan、米バージニア州)を用いた。DIOは、少なくとも7週間、40%脂質、39%炭水化物、及び21%タンパクカロリー内容(TD95217)を含んでなる餌を随意に給餌して確立した。動物は、12時間の明暗サイクル(光照射2200時間)を有する温度制御(24℃)した施設内に固体別に収容し、自由に食餌(TD95217)及び水にアクセスさせた。この施設に2週間順化した後、動物をランダム化し、体重ごとにグループ試験した。
Claims (13)
- アシル化及び脱アシル化ヒトグレリンのいずれにも特異的に結合し:
a)アシル化ヒトグレリンに対して約1730pMから約11pMの範囲の平衡解離定数KDを示し、
b)アシル化ヒトグレリンに対して約4.44×106(1/Ms)から約4.89×107(1/Ms)の範囲のkon値を示し、
c)アシル化ヒトグレリンに対して約4.98×10−5(1/s)から約2.58×10−2(1/s)の範囲のkoff値を示し、
前記KD、kon及びkoff値は表面プラズモン共鳴により計測され;
d)ヒト成長ホルモン分泌促進物質受容体1aを発現するよう安定的に形質転換されたハムスターAV12細胞において、細胞内カルシウムのアシル化ヒトグレリン媒介増加を、インビトロFLIPRカルシウムアッセイによる測定としてIC50が約10nM以下で阻害する、ヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分。 - 細胞内カルシウムのアシル化ヒトグレリン媒介増加をIC50が約5nM以下で阻害する請求項1に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分。
- 細胞内カルシウムのアシル化ヒトグレリン媒介増加をIC50が約2.5nM以下で阻害する請求項1又は2に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分。
- 細胞内カルシウムのアシル化ヒトグレリン媒介増加を阻害する、IC50が約1nM以下の、請求項1から3のいずれか1項に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分。
- IgG1及びIgG4からなる群から選ばれる重鎖定常領域を含んでなる、請求項1から4のいずれか1項に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分。
- カッパ及びラムダからなる群から選ばれる軽鎖定常領域を含んでなる、請求項1から5のいずれか1項に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分。
- 前記抗原結合部分はFab断片、F(ab’)2断片、及び単鎖Fv断片からなる群から選ばれる、請求項1から6のいずれか1項に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分。
- 軽鎖可変領域は配列番号4で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号5で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号32で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号45で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号33で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号46で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号34で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号47で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号35で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号48で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号36で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号49で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号37で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号50で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号38で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号51で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号39で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号52で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号40で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号53で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号41で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号54で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号42で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号55で示される配列を有するペプチドを含み;
軽鎖可変領域は配列番号43で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号56で示される配列を有するペプチドを含み;又は、
軽鎖可変領域は配列番号44で示される配列を有するペプチドを含み、かつ重鎖可変領域は配列番号57で示される配列を有するペプチドを含む;
請求項1から7のいずれか1項に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分。 - 請求項1から8のいずれか1項に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分、及び薬理学的に許容できるキャリア、希釈剤又は賦形剤を含んでなる医薬品組成物。
- 医薬品として用いるための、請求項1から8のいずれか1項に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトにおける肥満、非インシュリン依存性糖尿病、プラダー・ウィリー症候群、過食症、障害性の満腹、及びガンからなる群から選ばれる疾病又は障害の治療のための、請求項1から8のいずれか1項に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分の使用。
- 請求項1から8のいずれか1項に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分の有効量を、これを必要とするヒトに投与することを含んでなる、ヒトの肥満を治療する非治療的方法。
- 請求項1から8のいずれか1項に記載のヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合部分の有効量を、これを必要とするヒトに投与することを含んでなる、ヒトにおける、グレリン活性を中和又は阻害する、あるいは活性グレリン濃度を低下させる、非治療的方法。
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