JP2009294057A - 腎臓尿酸トランスポーター - Google Patents
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Abstract
【解決手段】以前、我々は、腎臓近位尿細管の主要尿酸塩再吸収可能なトランスポーターURAT1/SLC22A12を確認した。ここで、我々は、GLUT9/SLC2A9が電圧駆動尿酸トランスポーター(URATv1に名前を変更される)(細胞からの尿酸塩退出を伝達しそうな)として機能すると報告する。GLUT9の生体内役割はSLC22A12のいかなる突然変異のない腎臓低尿酸血症患者もSLC2A9のミスセンス突然変異を有するとわかったという事実で支えられた。そして、それは生体外で尿酸塩輸送活性を廃止した。これらのデータに基づいて、我々は、チューブ状セルの尿酸塩の経細胞輸送の新規なモデルを提案する。尿酸塩は頂点部分に位置するURAT1を介して始められる。そして、細胞内尿酸塩は基底部分に位置するURATv1を介して細胞を出る。
【選択図】 なし
Description
同じ線に沿って、Slc22a12-ヌルマウスを使用している最近の研究で腎臓尿酸塩再吸収の大半が保存される(9)ことが分かった。但し、人間の腎臓尿酸塩処理に対するこの発見の生理的関連は定められないままである。URAT1の識別で、尿酸塩輸送のためのいくつかの潜在的候補タンパク質は、提案された:UAT、OAT1、OAT3、OAT4、OATv1/NPT1、MRP4および最近確認されたOAT10は、生体外で(10-12)尿酸塩輸送を伝達することも示した。
ヒトGLUT9は、最初は機能未知の遺伝子として同定された(16)。GLUT9のグルコーストランスポーター活性が示されたにもかかわらず、それは古典的(クラスI)グルコーストランスポーターGLUT4(17、18)ほど効率的なようでない。ヒトGLUT9は、異なるアミノ末端を有する2つのスプライスバリアントを有する:アイソフォーム1(トランスクリプトバリアント1:Genbankアセッション NM_020041)そして、アイソフォーム2(トランスクリプトバリアント2:Genbankアセッション NM_001001290)。これらの2つのアイソフォームの違いは、アイソフォーム1だけの第一エキソンがあり、分極化したMDCK細胞において、ターゲティングの違いとなる。
尿酸塩のGLUT9により媒介される取り込みは、飽和可能な動力学を明らかにして、ミカエリス‐メンテンの式を求めた。
ロサルタン、アンギオテンシンII受容体ブロッカ(ARB)は、適度に尿酸塩取り込みをシス阻害した。
これらの結果は尿酸塩がGLUT9の実質的に唯一の輸送基質であり、そして、URAT1と比較したとき、それが異なる反応を潜在的に腎臓尿酸塩処理に影響を及ぼしているさまざまな薬に示したことを証明し、そして、GLUT9が新規な尿酸排泄薬品の潜在的標的でありえることを示した。
従って、我々は、SLC2A9によって、コード化されるタンパク質が、GLUT9と換わって、URATv1(電圧駆動尿酸塩トランスポーター1)と呼ばれることを提案する。
免疫細胞化学のために、cRNAsにより注入されるアフリカツメガエル卵母細胞はパラホルムアルデヒドを据えられて、抗GLUT9抗体(alfaDiagnostics)(1:500)によって培養し、続いてAlexa546のラベルのヤギ抗ウサギイムノグロブリン(IgG)で処理した(和光;1:200で希釈)。区画は、共焦点レーザースキャン顕微鏡(Fluoview FV500、オリンパス)の下で観察された。Alexa546の蛍光は、波長543 nmの緑色のHeNeレーザー光により励起されていた。
GLU9のアイソフォーム1と2のcDNAは、オリジェンテクノロジー(OriGen
Technologies)(アイソフォーム2)とオープンバイオシステムズ(Open Biosystems)(アイソフォーム1)から購入した。生体外における、転写およびキャップされたcRNA(1卵母細胞あたり30−50ng)の卵細胞への注入は、前述したように実行された(1,2)。卵母細胞は、使用の前に18℃で2−3dで、バッファー12浴漕の中で維持された。ND96バッファー12は、96 NaCl、2 KCl、1 MgCl2、1.8 CaCl2および5 HEPESバッファ(pH 7.4)(単位はmM)を含んでいた。0 Cl-浴槽において、Cl-は、グルコン酸塩の等モルの量と置き換えられた。輸送試験およびGLUT9を経た尿酸塩取り込みの動力学的パラメータの評価は、前述したように実行された(1,2)。実験は3つのバッチの卵母細胞を使用して実行された、そして、代表的な実験からの結果は平均±SEM.として表される。統計的有意性は、スチューデントt−テストにより測定された。
GLUT9シーケンスの決定のために、我々は、S.リにより記載されている、わずかな変更態様を有するプライマーを使用した(表2)。いくつかのプライマー配列は、ヒトGLUT9のゲノム構造に従って、新しく選択された(図6を参照)。高分子量ゲノムDNAは、周辺の全部の血球(3、4)から抽出されて(3、4)、PCRにより増幅された。PCR産物は、3130xl遺伝子アナライザ(アプライドバイオシステム)を使用して、両方の方向から配列決定された(3)。GLUT9(R380W)のエクソン10の突然変異は、50人のコントロールの日本人の個人の中からランダムに選ばれた分析のためのBtsCIを有するPCR産物(表2)の規制消化により検出された。R380W変異体の生成のための突然変異誘発性オリゴヌクレオチドプライマは、5'-GGTGTGCGGGACTG(A)ACACTGCTGCAGC-3'および5'-GGGGCCTGCAGGA(T)CTGTGGAGGGTGGCTG-3'であった。変異するcDNAの適当な構造は、完全な塩基配列決定により確認された。
1. A. Enomoto, H. Kimura, A. Chairoungdua, et al. Nature 第417巻, 第447-452頁 (2002年)
2. Jutabha P, Kanai Y, Hosoyamada M, et al. J. Biol. Chem. 第278巻, 第27930-27938頁 (2003年)
3. H. Matsuo, K. Kamakura, S. Matsushita, et al. Am. J. Med. Genet. 第88巻,
第733-737頁 (1999年)
4. H. Matsuo, K. Kamakura, M. Saito, et al. Arch. Neurol. 第56巻,
第721-726頁 (1999年)
Claims (5)
- GLUT9を使用する、腎臓からの尿酸排出を促進する作用を有する物質のスクリーニング方法。
- GLUT9を使用する、尿酸の血液濃度を低める作用を有する物質のスクリーニング方法。
- GLUT9を使用する、局所的炎症を軽減する作用を有する物質のスクリーニング方法。
- GLUT9を使用する、動脈硬化の進行において阻害作用を有する物質のスクリーニング方法。
- 腎臓からの尿酸排出を促進する作用を有する物質のスクリーニング方法であって、
a)GLUT9が発現した細胞を準備し、
b)上記細胞を物質と尿酸の存在下で培養し、
c)細胞による尿酸の取り込み量に基いて、上記物質が腎臓からの尿酸排出を促進する作用を有するか否かを決定する、スクリーニング方法。
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Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003093067A (ja) * | 2001-09-21 | 2003-04-02 | Hitoshi Endo | 腎臓及び胎盤型尿酸トランスポーターとその遺伝子 |
WO2005046724A1 (ja) * | 2003-11-14 | 2005-05-26 | Human Cell Systems, Inc. | 血管障害や高血圧症の治療・予防剤、及びそのスクリーニング方法 |
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---|---|---|---|---|
JP2003093067A (ja) * | 2001-09-21 | 2003-04-02 | Hitoshi Endo | 腎臓及び胎盤型尿酸トランスポーターとその遺伝子 |
WO2005046724A1 (ja) * | 2003-11-14 | 2005-05-26 | Human Cell Systems, Inc. | 血管障害や高血圧症の治療・予防剤、及びそのスクリーニング方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
JPN6013035070; Siguang Li, Serena Sanna, Andres Maschio, et al.: 'The GLUT9 Gene is Associated with Serum Uric Acid Levels in Sardinia and Chianti Cohorts' PLoS GENETICS Vol. 3, Issue 11; pp. 2156-2162, 2007 * |
JPN6014020893; 日本人類遺伝学会大会プログラム・抄録集 Vol.53rd, Page.161 P-005, 2008 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014195228A1 (en) * | 2013-06-03 | 2014-12-11 | Tpp Global Development Limited | Screening method for a glut9 inhibitor |
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