JP2009237277A - Container for microscopic observation - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、顕微鏡を用いて被検査物を観察するために用いられる顕微鏡観察用容器に関する。 The present invention relates to a microscope observation container used for observing an inspection object using a microscope.
大学や企業の研究室等においては、生体細胞、生物組織片、微生物、細菌等、もしくはこれらの培養物、またはこれらに薬物や遺伝子等を注入したものの経時的な変化(形態変化、移動等)を顕微鏡で観察し、生物化学的、薬学的な研究等がなされている。顕微鏡としては、実体顕微鏡、蛍光顕微鏡、位相差顕微鏡、微分干渉顕微鏡等の種々の方式のものが存在しており、研究の目的や対象の性質等に応じて適宜選定されて用いられる。なお、近時においては、顕微鏡は接眼レンズを介した目視観察の他に、CCD等の撮像素子で撮像してモニタ上に表示し、あるいはパーソナルコンピュータ等に画像データとして記憶して、必要に応じて画像処理等も行い得るようになっている。 In university or corporate laboratories, biological cells, biological tissue fragments, microorganisms, bacteria, etc., or cultures thereof, or changes in these drugs or genes injected over time (morphological changes, migration, etc.) Are observed with a microscope, and biochemical and pharmaceutical researches have been conducted. There are various types of microscopes such as a stereo microscope, a fluorescence microscope, a phase contrast microscope, a differential interference microscope, and the like, which are appropriately selected and used according to the purpose of the research and the properties of the object. Recently, in addition to visual observation through an eyepiece, the microscope picks up an image with an image pickup device such as a CCD and displays it on a monitor, or stores it as image data in a personal computer or the like. Image processing and the like can be performed.
このような細胞等の経時変化を顕微鏡で観察する際には、一般に培養容器をも兼ねた顕微鏡観察用容器が用いられる。顕微鏡観察用容器としては、細胞等の被検査物を収容する収容部を備え、この収容部は底面を構成する板状部、および側壁を構成する筒状部を有している。この収容部を単一で備える容器として細胞培養ディッシュ等とも呼ばれるものや複数の収容部を配列的(マトリクス状)に配置したマイクロプレート等とも呼ばれるものがある。 When observing such time-dependent changes of cells or the like with a microscope, a microscope observation container that also serves as a culture container is generally used. As a microscope observation container, it is provided with an accommodating portion for accommodating an inspected object such as a cell, and this accommodating portion has a plate-like portion constituting the bottom surface and a cylindrical portion constituting the side wall. As a container having a single housing portion, there are a so-called cell culture dish and a microplate in which a plurality of housing portions are arranged in an array (matrix).
収容部の少なくとも板状部は、照明光を透過させる必要があるため、光透過性の高い材料から形成され、顕微鏡の対物レンズの焦点距離等との関係で定められる値よりも薄い板厚とされる必要がある。顕微鏡観察用容器としては、この板状部として、光学的性質が良好で、比較的に薄い板厚でも所望の強度を維持できるガラス板を用い、筒状部等のその余の部分を樹脂で形成したものが知られている(例えば、下記特許文献1または特許文献2参照)。但し、近時においては、光学的性質がガラスに近いあるいはガラスを越え、また機械的強度も十分な樹脂材料が開発されており、樹脂は軽量で成形が容易であること等から、板状部を含む容器の全体を樹脂で製造することも、現在では可能となっている。
Since at least the plate-like portion of the housing portion needs to transmit illumination light, it is formed of a material having high light transmittance, and has a plate thickness thinner than a value determined in relation to the focal length of the objective lens of the microscope, and the like. Need to be done. As a plate for microscopic observation, a glass plate having good optical properties and capable of maintaining a desired strength even with a relatively thin plate thickness is used as the plate-like portion, and the remaining portion such as the cylindrical portion is made of resin. What was formed is known (for example, refer to
ところで、このような顕微鏡観察用容器を用いて被検査物の経時変化を観察する場合には、顕微鏡のステージ上に被検査物を収容した容器を設置し、板状部上の被検査物の一部を拡大して複数箇所において観察(撮像)した後、該ステージ上から一旦取り外して時間をおいて再度ステージ上に設置して、同じ位置、同じ倍率で観察するという動作を何回か繰り返し実施することになる。この場合に、細胞等の形態変化量や移動量を計測し、あるいは前後の観察画像を画像処理により重ね合わせて比較する場合等には、板状部上の位置に関する基準が必要となる。 By the way, when observing a time-dependent change of an inspection object using such a microscope observation container, a container containing the inspection object is installed on the stage of the microscope, and the inspection object on the plate-like portion is placed. After magnifying a part and observing (imaging) at multiple locations, remove it from the stage, place it on the stage again after a while, and repeat the operation several times to observe at the same position and magnification Will be implemented. In this case, when the amount of morphological change or movement of cells or the like is measured, or when comparing the observation images before and after being overlapped by image processing, a reference regarding the position on the plate-like portion is required.
このような位置基準として、特許文献1または特許文献2には、板状部上に複数の緯線および経線からなる格子状のグリッド座標を設けたものが開示されている。グリッド座標の外側には、各緯線および経線を他の緯線および経線から識別するための記号として、アルファベットや数字が表示されている(例えば、特許文献1の図6、特許文献2の図3参照)。
As such a position reference,
しかしながら、上述した通り、顕微鏡観察する際には、板状部上の被検査物の任意の一部を拡大した状態で観察するため、グリッド座標の外側に表示された記号は、拡大観察時には顕微鏡の視野内にない場合が多く、顕微鏡視野内に記号が入っていない場合には、記号を含むグリッド座標の全体が顕微鏡視野内に入る程度に倍率を一旦低倍率に設定した上で、観察すべき位置を確認調整した後に、再度所望の拡大倍率に設定して観察する必要があり、そのような作業は煩雑であり、観察に長時間を要するという問題がある。 However, as described above, when observing with a microscope, since an arbitrary part of the inspection object on the plate-like portion is observed in an enlarged state, the symbols displayed outside the grid coordinates are displayed with a microscope during the magnifying observation. If there is no symbol in the microscope field of view, set the magnification to a low magnification so that the entire grid coordinates including the symbol are within the microscope field of view, and then observe After confirming and adjusting the power position, it is necessary to set the magnification again at the desired magnification for observation, and such an operation is complicated and requires a long time for observation.
また、拡大倍率で観察している状態では、顕微鏡視野中に緯線および経線が含まれていても、その緯線および経線が他の緯線および他の経線と識別できないことが多いため、観察している位置を確認できず、誤った位置で観測してしまう場合があるとともに、観察画像を画像データとして画像処理する場合にも、同様にその位置を特定することができないという問題がある。 In addition, in the state of observing at a magnification, even if the microscopic field includes latitude lines and meridians, the latitude lines and meridians are often indistinguishable from other latitude lines and other meridians. In some cases, the position cannot be confirmed and the observation is performed at an incorrect position, and when the observation image is processed as image data, the position cannot be specified similarly.
上記問題について、グリッド座標の中央部分に位置する被検査物を観察する場合を例として、以下に、より具体的に説明する。すわなち、まず、顕微鏡の倍率を低倍率に設定した状態で被検査物の座標位置を確認する。次いで、顕微鏡の倍率を拡大倍率とした状態で、グリッド座標の外側に表示された識別用の記号を見ながら、例えばグリッド座標の縦方向の位置を特定し、ステージの縦方向の位置を固定する。次いで、拡大倍率の設定状態では、グリッド座標の横方向の位置を示す識別用の記号が顕微鏡視野内に入らないため、グリッド座標端部からのグリッドの数をカウントしつつ、グリッド座標の横方向に沿ってステージを移動させて、ステージの横方向の位置を特定してステージの横方向の位置を固定し、この状態で被検査物の観察を行う。しかしながら、ステージの横方向の位置を特定する場合にグリッド数をカウントする必要があり、カウント数の勘違いやカウント間違い等が頻繁に生じ得る。また、被検査物が細胞である場合には、細胞の外形が経時的に変化し得るため、被検査物を視認しただけでは、同一の被検査物を観察しているのか否かの判断ができない。このため、上記手順によれば、被検査物の観察が非常に困難であるという問題がある。 The above problem will be described more specifically below, taking as an example the case of observing an object to be inspected that is located at the center of the grid coordinates. That is, first, the coordinate position of the object to be inspected is confirmed with the magnification of the microscope set to a low magnification. Next, in the state where the magnification of the microscope is set to an enlargement magnification, for example, the vertical position of the grid coordinate is specified by fixing the vertical position of the stage while looking at the identification symbol displayed outside the grid coordinate. . Next, in the magnification setting state, since the identification symbol indicating the horizontal position of the grid coordinate does not enter the microscope field of view, the number of grids from the end of the grid coordinate is counted, and the horizontal direction of the grid coordinate The stage is moved along the position of the stage, the position in the lateral direction of the stage is specified and the position in the lateral direction of the stage is fixed, and the inspection object is observed in this state. However, when specifying the horizontal position of the stage, it is necessary to count the number of grids, and misunderstanding of the count number, incorrect count, and the like can frequently occur. In addition, when the object to be inspected is a cell, the outer shape of the cell can change over time, so just observing the object to be inspected can determine whether or not the same object is being observed. Can not. For this reason, according to the said procedure, there exists a problem that observation of a to-be-inspected object is very difficult.
本発明は、このような点に鑑みてなされたものであり、拡大倍率で観察している際に、観察中の位置を容易に認識・特定することができる顕微鏡観察用容器を提供することを目的とする。
本発明によると、顕微鏡を用いて被検査物を観察するための顕微鏡観察用容器であって、前記被検査物を支持する板状部を備え、前記板状部には、所定間隔で配置された複数の緯線および経線により構成されるグリッドが設けられ、前記グリッドには、当該グリッドの任意の一部を、前記緯線と前記経線との交点が一以上存在する程度まで拡大観察した際に、当該拡大観察視野内における前記交点の絶対位置を識別可能な目印が設けられている顕微鏡観察用容器が提供される。 According to the present invention, there is provided a microscope observation container for observing an object to be inspected using a microscope, comprising a plate-like portion that supports the object to be inspected, and arranged on the plate-like portion at a predetermined interval. A grid composed of a plurality of latitude lines and meridians is provided, and when the grid is observed by magnifying an arbitrary part of the grid to the extent that one or more intersections between the latitude lines and the meridians exist, There is provided a microscope observation container provided with a mark capable of identifying the absolute position of the intersection in the enlarged observation visual field.
本発明において、前記板状部を含む容器全体を樹脂で形成することができ、その樹脂としては、脂環式構造を有する樹脂を用いることができる。 In this invention, the whole container containing the said plate-shaped part can be formed with resin, and resin which has an alicyclic structure can be used as the resin.
また、前記目印としては、前記緯線および前記経線をそれぞれ互いに識別するための特徴により表現されたものを用いることができる。この場合の前記特徴としては、線の本数、線の太さ、線の種類、線に付された記号、およびこれらの少なくとも2つの組み合わせにより表現されているものを用いることができる。さらに、前記特徴としては、前記緯線および/または前記経線を、当該線自体を識別可能な記号によって線状に構成したことにより表現されたものを用いてもよい。 In addition, as the mark, those expressed by features for distinguishing the latitude line and the meridian from each other can be used. In this case, as the characteristics, those expressed by the number of lines, the thickness of the lines, the types of lines, the symbols attached to the lines, and combinations of at least two of these can be used. Further, as the feature, the latitude line and / or the meridian may be expressed by forming the line itself with a symbol that can identify the line itself.
また、本発明において、前記板状部を底面とし、上部に開口を有する筒状部を備えることができ、加えて、前記筒状部の前記開口から挿入される柱状部を有する蓋を備えることができる。 Moreover, in this invention, the said plate-shaped part can be provided with the cylindrical part which has an opening in the upper part on the bottom, and in addition, the lid | cover which has a columnar part inserted from the said opening of the said cylindrical part is provided. Can do.
本発明の顕微鏡観察用容器によれば、被検査物を支持する板状部に設けられたグリッドの任意の一部を、緯線と経線との交点が一以上存在する程度まで拡大観察した際に、当該拡大観察視野内における前記交点の絶対位置を識別可能な目印を設けたので、従来技術のように一旦低倍率に設定して確認する等の作業を行う必要がなく、拡大倍率で観察している際に、観察中の位置を容易に認識・特定することができるという効果がある。 According to the microscope observation container of the present invention, when an arbitrary part of the grid provided on the plate-like portion that supports the object to be inspected is magnified to such an extent that one or more intersections between the parallels and meridians exist. Since the mark that can identify the absolute position of the intersection point in the enlarged observation field is provided, there is no need to set the low magnification once and confirm it as in the prior art. In this case, the position being observed can be easily recognized and specified.
また、拡大観察した画像を画像処理する際に、該画像中にはその位置を識別するための目印が必ず含まれているため、前後の画像データでその観察位置が厳密に一致していなくても、当該目印によって画像処理時に前後の画像を正確に重ね合わせることができる。従って、前後の観察位置を厳密に一致させる必要がなく、作業の容易化を図ることができるという効果がある。 In addition, when image processing is performed on the magnified image, the image always includes a mark for identifying the position. Therefore, the observation position does not exactly match the preceding and subsequent image data. In addition, it is possible to accurately superimpose the preceding and succeeding images at the time of image processing by the mark. Therefore, there is no need to strictly match the front and rear observation positions, and the work can be facilitated.
以下、本発明の実施形態に係る顕微鏡観察用容器について、図面を参照して説明する。 Hereinafter, a microscope observation container according to an embodiment of the present invention will be described with reference to the drawings.
〔容器の全体構成〕
図1は本発明の実施形態に係る顕微鏡観察用容器の一例の全体構成を示す側断面図であり、図2は図1の顕微鏡観察用容器の容器本体の構成を示す平面図である。
[Overall configuration of container]
FIG. 1 is a side sectional view showing an overall configuration of an example of a microscope observation container according to an embodiment of the present invention, and FIG. 2 is a plan view showing a configuration of a container main body of the microscope observation container of FIG.
この顕微鏡観察用容器11は、細胞培養ディッシュ等とも呼ばれる容器であり、容器本体12と、蓋体13とを備えて構成されている。容器本体12は上面が開口し、下面が閉塞された略円筒状の部材(シャーレ)であり、容器本体12の底部12aの略中央部には被検査物としての細胞等を含む培地を収容する収容部14が配置されている。この収容部14は、容器本体12の底部12aの略中央部に凹部が形成されることによって構成され、凹部の底部が被検査物を支持する(または付着させる)ための板状部14aとなり、凹部の側面が収容部14の側壁を構成する筒状部14bとなっている。
The
板状部14aの板厚(肉厚)は、この容器11を用いて観察する際に用いられる顕微鏡の対物レンズの焦点距離等との関係において、所定の厚さとなっている。また、図2に示されているように、板状部14aには、拡大観察時に板状部14a内の位置を認識・特定するための目印Mが配置されている。この目印Mについては、後に詳述する。容器本体12の側壁12bの開口近傍の部分には、段差12cが形成されている。
The plate thickness (wall thickness) of the plate-
蓋体13は、容器本体12の上面開口を着脱自在に閉塞する略円板状の部材から構成されており、容器本体12の段差12cの部分に嵌め合うように円環状の側壁部13aが形成されている。なお、図示は省略するが、蓋体13の下面に、容器本体12の開口を蓋体13で閉塞した状態で、内部に画成される空間の酸素を吸収してその濃度を調整するための酸素吸収剤を収容するためのポケット等が設けられていてもよい。生体細胞等は体内と同様に低酸素濃度(例えば、5%程度)下で培養・観察することが望ましい場合があるからである。
The
図3は本発明の実施形態に係る顕微鏡観察用容器の他の例の全体構成を示す側断面図であり、図4は図3の顕微鏡観察用容器の容器本体の構成を示す平面図である。 FIG. 3 is a side sectional view showing the overall configuration of another example of the microscope observation container according to the embodiment of the present invention, and FIG. 4 is a plan view showing the configuration of the container main body of the microscope observation container of FIG. .
この顕微鏡観察用容器21は、マイクロプレート等とも呼ばれる容器であり、容器本体22と、蓋体23とを備えて構成されている。容器本体22は、底板22a上に、被検査物としての細胞等を含む培地を収容する複数の収容部24を配列的に設けて構成されている。ここでは、一例として、2×4の合計8個の収容部24を備えている。但し、収容部24の個数は、8個未満(例えば2×2の4個)でも、9個以上でもよい。各収容部24は、上面が開口し、下面が閉塞された略円筒状の筒状部24bを有し、収容部24の底部(底板22aの該収容部に対応する部分)が被検査物を支持する(または付着させる)ための板状部24aとなっている。
The
板状部24a(即ち、底板22a)の板厚(肉厚)は、この容器21を用いて観察する際に用いられる顕微鏡の対物レンズの焦点距離等との関係において、所定の厚さとなっている。また、図4に示されているように、各収容部24のそれぞれの板状部24aには、図1および図2を参照して上述した顕微鏡観察用容器11と同様に、拡大観察時に板状部24a内の位置を認識・特定するための目印Mが配置されている。この目印Mについては、後に詳述する。
The plate thickness (thickness) of the plate-
蓋体23は、容器本体22の各収容部24の上面開口を着脱自在に閉塞する略矩形状の部材から構成されており、各収容部24の筒状部24bの内側の開口側近傍の部分に遊嵌する柱状部23aが各収容部24に対応して配置されているとともに、筒状部24bの外側に嵌り込むように形成された凸部23bを有している。各収容部24の開口を閉塞するように蓋体23を取り付けた状態で、柱状部23aは筒状部24bと僅かな隙間をもって挿入されており、収容部24内に収容され、板状部24a上に支持された培地が液体である場合に該液体の界面(上面)に生じることがあるメニスカスを、この筒状部23aの先端面が該液体内に僅かに挿入されることによって解消するものである。メニスカスが生じると該液体の界面近傍がレンズとして作用し、顕微鏡観察する際の誤差となり得るので、このような柱状部23aによって、これを防止することができる。
The
なお、図1および図2、または図3および図4に示した容器の構成は、例示であって、他の構成であってもよい。 In addition, the structure of the container shown in FIG. 1 and FIG. 2, or FIG. 3 and FIG. 4 is an illustration, Comprising: Another structure may be sufficient.
〔容器形成材料〕
これらの容器本体12,22および蓋体13,23は、ガラスを用いて製造してもよいが、軽量であること、成形が容易であること等から樹脂を用いることが好ましい。用いる透明樹脂としては、アクリル樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリスチレン、および脂環式構造を有する樹脂等を例示することができる。これらの中でも、脂環式構造を有する樹脂は、流動性が良好であり、顕微鏡の対物レンズの焦点距離等との関係から板状部に要請される板厚(肉厚)程度の薄さでも十分な機械的強度を実現できるとともに、高光透過性、平坦性、均一性、低複屈折性等の容器の板状部を含む光透過部に要請される光学特性を良好に実現できることから好ましい。また、脂環式構造を有する樹脂は、材料に起因する自家蛍光が小さいので、蛍光観察する用途の場合にも問題がなく、耐薬品性にも優れていることから好適である。
[Container forming material]
Although these container
脂環式構造を有する樹脂は、主鎖および/または側鎖に脂環式構造を有する樹脂である。機械的強度などの観点から、主鎖に脂環式構造を含有する樹脂が特に好ましい。脂環式構造としては、飽和環状炭化水素(シクロアルカン)構造、不飽和環状炭化水素(シクロアルケン)構造などを挙げることができる。機械的強度などの観点から、シクロアルカン構造やシクロアルケン構造が好ましく、中でもシクロアルカン構造が最も好ましい。脂環式構造を構成する炭素原子数は、格別な制限はないが、通常4〜30個、好ましくは5〜20個、より好ましくは5〜15個の範囲であるときに、機械的強度および成形性等の特性が高度にバランスされ、好適である。脂環式構造を有する樹脂中の脂環式構造を有する繰り返し単位の割合は、通常50重量%以上、好ましくは70重量%以上、より好ましくは90重量%以上である。 The resin having an alicyclic structure is a resin having an alicyclic structure in the main chain and / or side chain. From the viewpoint of mechanical strength and the like, a resin containing an alicyclic structure in the main chain is particularly preferable. Examples of the alicyclic structure include a saturated cyclic hydrocarbon (cycloalkane) structure and an unsaturated cyclic hydrocarbon (cycloalkene) structure. From the viewpoint of mechanical strength and the like, a cycloalkane structure or a cycloalkene structure is preferable, and among them, a cycloalkane structure is most preferable. The number of carbon atoms constituting the alicyclic structure is not particularly limited, but is usually 4 to 30, preferably 5 to 20, more preferably 5 to 15 in the range of mechanical strength and Properties such as moldability are highly balanced and suitable. The ratio of the repeating unit having an alicyclic structure in the resin having an alicyclic structure is usually 50% by weight or more, preferably 70% by weight or more, more preferably 90% by weight or more.
脂環式構造を有する樹脂の具体例としては、
(1)ノルボルネン系単量体の開環重合体およびノルボルネン系単量体とこれと開環共重合可能なその他の単量体との開環共重合体、並びにこれらの水素添加物、ノルボルネン系単量体の付加重合体およびノルボルネン系単量体とこれと共重合可能なその他の単量体との付加共重合体などのノルボルネン系重合体;
(2)単環の環状オレフィン系重合体およびその水素添加物;
(3)環状共役ジエン系重合体およびその水素添加物;
(4)ビニル脂環式炭化水素系単量体の重合体およびビニル脂環式炭化水素系単量体とこれと共重合可能なその他の単量体との共重合体、並びにこれらの水素添加物、ビニル芳香族系単量体の重合体の二重結合部分(芳香環も含む)の水素添加物およびビニル芳香族単量体とこれと共重合可能なその他の単量体との共重合体の二重結合部分(芳香環も含む)の水素添加物などのビニル脂環式炭化水素系重合体;などが挙げられる。
As a specific example of a resin having an alicyclic structure,
(1) Ring-opening polymer of norbornene-based monomer, ring-opening copolymer of norbornene-based monomer and other monomers capable of ring-opening copolymerization, and hydrogenated products thereof, norbornene-based Norbornene polymers such as addition polymers of monomers and addition copolymers of norbornene monomers with other monomers copolymerizable therewith;
(2) a monocyclic olefin polymer and a hydrogenated product thereof;
(3) a cyclic conjugated diene polymer and a hydrogenated product thereof;
(4) Polymers of vinyl alicyclic hydrocarbon monomers, copolymers of vinyl alicyclic hydrocarbon monomers and other monomers copolymerizable therewith, and hydrogenation thereof , Hydrogenated double bond portion (including aromatic rings) of vinyl aromatic monomer polymers, and copolymerization of vinyl aromatic monomers with other monomers copolymerizable therewith And vinyl alicyclic hydrocarbon polymers such as a hydrogenated product of a double bond portion (including an aromatic ring) of the polymer.
これらの中でも、光学特性や機械的強度等の観点から、ノルボルネン系重合体およびビニル脂環式炭化水素系重合体が好ましく、ノルボルネン系単量体の開環重合体水素添加物、ノルボルネン系単量体とこれと開環共重合可能なその他の単量体との開環共重合体水素添加物、ビニル芳香族系単量体の重合体の二重結合部分(芳香環も含む)の水素添加物およびビニル芳香族単量体とこれと共重合可能なその他の単量体との共重合体の二重結合部分(芳香環も含む)の水素添加物がさらに好ましい。 Among these, from the viewpoints of optical properties and mechanical strength, norbornene-based polymers and vinyl alicyclic hydrocarbon-based polymers are preferable, ring-opening polymer hydrogenated norbornene-based monomers, norbornene-based single monomers Hydrogenation product of ring-opening copolymer of polymer and other monomer capable of ring-opening copolymerization, hydrogenation of double bond part (including aromatic ring) of vinyl aromatic monomer polymer And a hydrogenated product of a double bond portion (including an aromatic ring) of a copolymer of a vinyl aromatic monomer and another monomer copolymerizable therewith.
〔目印の構成〕
容器本体12、22の被検査物が支持される板状部14a,24aの表面(被検査物を支持する面)または裏面(被検査物を支持する面と反対側の面)には、板状部14a,24a内の任意の一部を拡大観察した状態で、該拡大観察している該板状部14a,24a内の位置を板状部14a,24a内の他の位置から識別するための目印Mが配置されている。この目印Mとしては、例えば、図5に示すような構成(第1の構成)のものを用いることができる。
[Composition of landmarks]
On the front surface (surface supporting the inspection object) or the back surface (surface opposite to the surface supporting the inspection object) of the plate-
図5に示す目印Mは、複数の緯線(横線)Y0〜Y4…および複数の経線(縦線)X0〜X4…を所定間隔でグリッド(格子)状に配置するとともに、各緯線または各経線を他の緯線または経線から識別するための特徴として、緯線および経線の交点の位置を示す記号IMとして番地を該交点近傍に配置して構成されている。緯線および経線としては、ここでは実線を用い、その線幅は1μm程度である。 The mark M shown in FIG. 5 arranges a plurality of latitude lines (horizontal lines) Y0 to Y4... And a plurality of meridian lines (vertical lines) X0 to X4. As a feature for discriminating from other latitudes or meridians, an address is arranged in the vicinity of the intersection as a symbol IM indicating the position of the intersection of the latitude and longitude. Here, solid lines are used as latitudes and meridians, and the line width is about 1 μm.
図5中、符号Fiを付した矩形状の枠線は、顕微鏡のステージ上にこの容器11,21を設置し、所定の倍率で拡大観察した場合の該顕微鏡の観察視野(または撮像視野)を示している。なお、この観察視野Fiの同図内における位置は、一例であり、顕微鏡のステージを自動または手動で移動させることによって、板状部14a,24a上の任意の位置に移動可能である。観察視野Fiの大きさは、顕微鏡の仕様によるが、被検査物としての細胞の大きさは一般に100μm程度以下であるため、観察倍率を60倍として、被検面上において、縦150μm×横200μm程度のものや縦75μm×横100μm程度のものが用いられる。
In FIG. 5, a rectangular frame with a reference symbol Fi indicates the observation field (or imaging field) of the microscope when the
緯線Y0〜Y4…および経線X0〜X4…(以下、両者を含めてグリッド線ともいう)の配設間隔は、被検査物の観察に用いるものとして想定される最も大きい拡大倍率において、グリッド線の各交点のうち、少なくとも1つの交点が観察視野Fi内に入るように、即ち少なくとも1本の緯線、少なくとも1本の経線が観察視野Fi内に入るような間隔に設定されている。例えば、最大倍率として60倍を想定した場合には、緯線の間隔は150μm未満に、経線の間隔は200μm未満に設定される。ここでは、一例として、緯線および経線の間隔は同じとして、150μmよりも僅かに小さい140μmに設定している。 The arrangement intervals of the latitude lines Y0 to Y4... And the meridians X0 to X4 (hereinafter also referred to as grid lines) are set at the largest magnification assumed to be used for observation of the inspection object. The intervals are set such that at least one of the intersections falls within the observation visual field Fi, that is, at least one latitude line and at least one meridian fall within the observation visual field Fi. For example, assuming that the maximum magnification is 60 times, the interval between latitude lines is set to less than 150 μm, and the interval between meridians is set to less than 200 μm. Here, as an example, the interval between the latitude and longitude lines is the same and is set to 140 μm, which is slightly smaller than 150 μm.
記号IMとしての番地は、同図では、4桁の数字で表現しており、4桁のうち、上2桁が緯線を識別し、下2桁が経線を識別することを意味している。この表記法により、緯線、経線ともに、00〜99までの100本の線の識別が可能である。記号IMの大きさとしては、観察の支障とならない程度になるべく小さく、且つ、観察倍率との関係で識別可能な程度の大きさに設定される。具体的には、一例として、観察倍率を60倍程度として、1文字の大きさは10μm角程度、文字間スペースは3μm程度とすることができる。 The address as the symbol IM is expressed by a four-digit number in the figure, and among the four digits, the upper two digits identify a latitude line and the lower two digits identify a meridian. With this notation, 100 lines from 00 to 99 can be identified for both latitude and meridian. The size of the symbol IM is set to a size that is as small as possible so as not to hinder observation and is identifiable in relation to the observation magnification. Specifically, as an example, the observation magnification is about 60 times, the size of one character can be about 10 μm square, and the space between characters can be about 3 μm.
グリッド線および記号IMの板状部14a,24aに対する形成方法としては、ナノインプリンティングやフォトリソグラフィにより形成することができる。ナノインプリンティングは、金型にグリッド線および記号IMに対応する凸部を形成して、板状部14a,24aに押しつけて凹部を形成することにより転写する方法であり、フォトリソグラフィは、薄膜形成、マスク露光、エッチング等により、グリッド線および記号IMをパターニングするものである。但し、グリッド線および記号IMの形成方法としては、これらに限定されず、他の方法を用いてもよい。
As a method of forming the grid lines and the symbols IM on the plate-
次に、目印Mの変形例をいくつか説明する。図6は目印の第2の構成を示しており、この第2の構成は、図5に示した第1の構成に係る記号IMの表記法を変更したものであり、2桁のアルファベットで表記したものである。グリッド線の表記は図5と同じである。この表記法により、緯線、経線ともに、アルファベットA〜Zまでの26本の識別が可能である。なお、記号IMの表記法は、図5または図6のような数字やアルファベットによるもの以外に、アルファベット以外の文字や図形等によるものであってもよい。また、数字、文字、図形等のうちの2つ以上を組み合わせたものを用いてもよい。 Next, some modified examples of the mark M will be described. FIG. 6 shows a second configuration of the mark. This second configuration is obtained by changing the notation of the symbol IM according to the first configuration shown in FIG. It is a thing. The notation of the grid lines is the same as in FIG. With this notation, it is possible to identify 26 letters from alphabets A to Z for both latitude and meridians. In addition, the notation method of the symbol IM may be based on characters or figures other than the alphabet in addition to those based on the numbers and alphabets as shown in FIG. Moreover, you may use what combined 2 or more of a number, a character, a figure, etc.
図5または図6では、単一の線種(実線)によりグリッド線を表示し、これに記号IMを組み合わせることにより、グリッド線の識別を行えるようにしている。これに対し、図7に示す第3の構成では、そのような記号IMを用いてグリッド線を識別するのではなく、グリッド線自体の種類(線種)を互いに異なるものとして、その識別を行えるようにしている。この第3の構成では、グリッド線は実線および点線を用い、点線はその点部分と間欠部分のピッチ(周期)を異なるものとして他の点線と識別できるようにしている。線種としては、実線および点線の他、一点鎖線、二点鎖線等の鎖線を用いることもできる。鎖線の場合も点線の場合と同様に、その長線部分、短線部分、および間欠部分の周期を異ならせることにより、互いの識別が可能である。 In FIG. 5 or FIG. 6, the grid line is displayed by a single line type (solid line), and the grid line can be identified by combining it with the symbol IM. On the other hand, in the third configuration shown in FIG. 7, the grid line is not identified using such a symbol IM, but the type (line type) of the grid line itself can be different from each other. I am doing so. In the third configuration, a solid line and a dotted line are used as the grid line, and the dotted line can be distinguished from other dotted lines with different pitches (periods) between the point portion and the intermittent portion. As a line type, in addition to a solid line and a dotted line, a chain line such as a one-dot chain line or a two-dot chain line can also be used. In the case of the chain line, as in the case of the dotted line, the long line part, the short line part, and the intermittent part can be distinguished from each other by different periods.
図8は目印の第4の構成を示しており、この第4の構成では、グリッド線として実線を用い、その線幅を異なるものとして、互いを識別できるようにしている。線幅を変更することによる表現単独では、多数の識別は難しいが、グリッド線の数がそれほど多くない場合には、線幅の変更のみによって識別することが可能である。図7に示した線種による表記と図8に示した線幅による表記とを組み合わせてもよく、これにより、さらに多くの識別が可能となる。 FIG. 8 shows a fourth configuration of the mark. In the fourth configuration, solid lines are used as grid lines, and the line widths are different from each other so that they can be distinguished from each other. It is difficult to identify a large number of expressions by changing the line width alone, but when the number of grid lines is not so large, it is possible to identify only by changing the line width. The notation based on the line type shown in FIG. 7 and the notation based on the line width shown in FIG. 8 may be combined, thereby enabling further identification.
図9は目印の第5の構成を示しており、この第5の構成では、グリッド線を実線で表記するとともに、グリッド線と同じ線を付加して複数の線の束からなる線束により互いを識別できるようにしている。1つの線束を構成する複数の線の数が多くなると、やや見えづらくなる懸念があるため、グリッド線の数が多い場合には、例えば、線種や線幅の異なる線と組み合わせて、ローマ数字の如き表記にするとよい。線束を構成する線の線幅は1μm程度であり、隣接する線の間隔は2μm程度とすることができる。 FIG. 9 shows a fifth configuration of the mark. In this fifth configuration, the grid lines are represented by solid lines, and the same lines as the grid lines are added to each other by a bundle of a plurality of lines. It can be identified. If the number of multiple lines that make up one line bundle increases, it may be difficult to see, so if there are many grid lines, for example, combining Roman lines with lines of different line types and line widths It is good to use the notation. The line width of the lines constituting the line bundle can be about 1 μm, and the interval between adjacent lines can be about 2 μm.
図10は目印の第6の構成を示しており、この第6の構成は、図9の線束による表記法を改良したものであり、板状体14a,24aの中央部に実線で基準となる緯線Y2および経線X2を表記し、これらの基準となる緯線および経線から上下または左右に離れる毎に、線束を構成する線の数を増加させている。従って、緯線Y1とY3、Y0とY4は同じ線束で表現され、経線X1とX3、X0とX4は同じ線束で表現されている。この場合、同じ形態の交点が現れる。例えば、緯線Y1と経線X1の交点、緯線Y1と経線X3の交点、緯線Y3と経線X1の交点、緯線Y3と経線X3の交点は同じ形態となり、互いを識別することができない。そこで、図10では、緯線と経線の交点の近傍に記号IMを付すことによって識別できるようにしている。
FIG. 10 shows a sixth configuration of the mark. This sixth configuration is an improvement of the notation method using the line bundle of FIG. 9 and is a reference with a solid line at the center of the plate-
ここでの記号IMは、単一の黒点(ドット)である。この黒点は、当該交点を原点として、緯線を横軸、経線を縦軸と例えて、第1象限〜第4象限の何れに付されているかで、互いを識別できるようにしている。例えば、緯線Y1と経線X3の交点に付される黒点は第1象限に、緯線Y1と経線X1の交点に付される黒点は第2象限に、緯線Y3と経線X1の交点に付される黒点は第3象限に、緯線Y3と経線X3の交点に付される黒点は第4象限に付されることにより、互いが識別される。このような表記を用いた場合には、容器11,12が顕微鏡のステージに誤って90°、180°または270°回転した状態で設置されると、その誤りを識別することができず、不都合である。この場合に対応するため、図10では、方向を示す方向表示(矢印)DMを表示することによって、容器が顕微鏡のステージに回転して設置されることを防止するようにしている。
The symbol IM here is a single black dot (dot). The black dots are distinguished from each other depending on which of the first to fourth quadrants, with the intersection point as the origin, the latitude line as the horizontal axis, and the meridian as the vertical axis. For example, the black point attached to the intersection of the latitude line Y1 and the meridian X3 is in the first quadrant, the black point attached to the intersection of the latitude line Y1 and the longitude line X1 is in the second quadrant, and the black point attached to the intersection of the latitude line Y3 and the longitude line X1. Are identified in the third quadrant, and the black point added to the intersection of the latitude line Y3 and the meridian X3 is assigned to the fourth quadrant, thereby identifying each other. When such a notation is used, if the
なお、細胞中には、膜成分でできた顆粒や細胞核が存在するため、記号IMとしての黒点の径によっては、これらとの区別が困難となるおそれがあるため、用いる黒点の径は、そのような顆粒よりも十分大径とし、細胞核よりも十分小径として、これらから区別できるようにすることが好ましい。黒点の径は、例えば、数μm程度に設定することができる。また、記号IMとして、このような黒点ではなく、細胞中には存在することがない、または少ない図形(例えば、三角形や四角形)、幾何学的な模様、あるいは文字(例えば、L字)等を用いれば、細胞中に存在する模様と明確に区別することができ、都合がよい。 In addition, since granules and cell nuclei made of membrane components exist in the cell, depending on the diameter of the black spot as the symbol IM, it may be difficult to distinguish from these, so the diameter of the black spot used is It is preferable that the diameter is sufficiently larger than such a granule and the diameter is sufficiently smaller than the cell nucleus so that they can be distinguished from these. The diameter of the black spot can be set to about several μm, for example. In addition, the symbol IM is not such a black dot, and is a figure that does not exist in the cell or is small in number (for example, a triangle or a quadrangle), a geometric pattern, or a character (for example, an L-shape). If used, it can be clearly distinguished from the pattern present in the cells, which is convenient.
図11は目印の第7の構成を示しており、この第7の構成では、緯線および経線に、各グリッドに対応するように複数の間欠部を形成し、緯線または経線を他の緯線または経線から識別するための記号として、数字を該間欠部にそれぞれ配置している。なお、記号は、数字に限られず、アルファベットやその他の図形またはこれらの組み合わせを用いてもよい。また、間欠部の形成および記号の標記は、全ての緯線または経線について行わなくてもよく、1つおき、あるいは2つおき等であってもよい。 FIG. 11 shows a seventh configuration of the mark. In this seventh configuration, a plurality of intermittent portions are formed on the latitude lines and meridians so as to correspond to each grid, and the latitude lines or meridians are replaced with other latitude lines or meridians. Numbers are arranged in the intermittent portions as symbols for distinguishing from each other. In addition, a symbol is not restricted to a number, You may use an alphabet, another figure, or these combination. Further, the formation of the intermittent portion and the marking of the symbols may not be performed for all latitude lines or meridians, and may be performed every other line, every other line, or the like.
図12は目印の第8の構成を示しており、この第8の構成では、緯線および経線の偶数列を比較的に細い実線とし、奇数列を該偶数列と識別するために比較的に太い実線とし、奇数列の緯線および経線にのみ、各グリッドに対応するように複数の間欠部を形成し、緯線または経線を他の緯線または経線から識別するための記号として、数字を該間欠部にそれぞれ配置している。特に、限定はされないが、偶数列の太い緯線または経線の線幅と記号としての数字の大きさとを揃えることが好ましい。なお、記号は、数字に限られず、アルファベットやその他の図形またはこれらの組み合わせを用いてもよい。また、奇数列を太い線とし、偶数列を細い線としてもよいし、細い線にのみ間欠部を形成して記号を配置するようにしてもよい。 FIG. 12 shows an eighth configuration of the mark. In the eighth configuration, even lines of latitude and meridians are relatively thin solid lines, and odd columns are relatively thick to distinguish them from the even columns. A plurality of intermittent portions are formed so as to correspond to each grid only on odd-numbered parallels and meridians, and numbers are used as symbols for distinguishing the parallels or meridians from other parallels or meridians. Each is arranged. Although not particularly limited, it is preferable to align the line widths of thick latitude lines or meridians in even columns with the numbers as symbols. In addition, a symbol is not restricted to a number, You may use an alphabet, another figure, or these combination. Further, the odd-numbered columns may be thick lines, the even-numbered columns may be thin lines, or the intermittent portions may be formed only on the thin lines to arrange the symbols.
図13は目印の第9の構成を示しており、この第9の構成では、緯線および経線を線分で表現するのではなく、数字およびアルファベットの組み合わせからなる記号を直線状に羅列することにより表現している。図13では、各緯線または各経線を構成する文字列は互いに同一の表現形式として、グリッドを他のグリッドから識別するためにグリッド毎に構成する記号を異ならせている。また、図13では、緯線を構成する文字と経線を構成する文字の向きは、90度の関係となるようにしている。なお、記号は、数字またはアルファベットの組み合わせに限られず、数字、アルファベット、その他の文字や図形を単独で、またはこれらの組み合わせで用いてもよい。また、緯線を構成する文字と経線を構成する文字の向きは、90度の関係に限られず、同じ向きでも、180度の関係でもよい。 FIG. 13 shows a ninth configuration of the mark. In this ninth configuration, the parallel lines and meridians are not represented by line segments, but symbols formed by combinations of numbers and alphabets are arranged in a straight line. expressing. In FIG. 13, the character strings constituting each latitude line or each meridian are in the same expression format, and the symbols constituting each grid are different in order to distinguish the grid from other grids. In FIG. 13, the direction of the characters composing the latitude line and the characters composing the meridian has a 90-degree relationship. The symbols are not limited to numbers or combinations of alphabets, and numbers, alphabets, other characters and figures may be used alone, or a combination thereof. In addition, the orientation of the characters constituting the latitude and the meridians is not limited to 90 degrees, and may be the same or 180 degrees.
図14は図13に示した第9の構成の変形例を示しており、図14では、各緯線または各経線を構成する記号(文字列)を緯線または経線毎に異ならせるとともに、グリッド毎にも異ならせている。また、図14では、緯線を構成する文字と経線を構成する文字の向きは、同じ方向となるようにしている。なお、記号は、数字またはアルファベットの組み合わせに限られず、数字、アルファベット、その他の文字や図形を単独で、またはこれらの組み合わせで用いてもよい。また、緯線を構成する文字と経線を構成する文字の向きは、同じ向きに限られず、90度の関係でも、180度の関係でもよい。 FIG. 14 shows a modification of the ninth configuration shown in FIG. 13. In FIG. 14, symbols (character strings) constituting each latitude line or each meridian are made different for each latitude line or meridian, and for each grid. It is also different. Further, in FIG. 14, the direction of the characters composing the latitude line and the characters composing the meridian are the same. The symbols are not limited to numbers or combinations of alphabets, and numbers, alphabets, other characters and figures may be used alone, or a combination thereof. In addition, the direction of the characters composing the latitude line and the characters composing the meridian is not limited to the same direction, and may be 90 degrees or 180 degrees.
図15は図13に示した第9の構成の他の変形例を示しており、図15では、緯線および経線を構成する記号(文字列)は同一の文字の羅列とし、各緯線または各経線毎に文字を異ならせている。図15では、緯線には数字を、経線にはアルファベットを用いており、緯線と経線の識別をも行い得るようになっている。また、図15では、緯線を構成する文字と経線を構成する文字の向きは、同じ方向となるようにしている。なお、記号は、数字またはアルファベットに限られず、数字、アルファベット、その他の文字や図形を単独で、またはこれらの組み合わせで用いてもよい。また、緯線を構成する文字と経線を構成する文字の向きは、同じ向きに限られず、90度の関係でも、180度の関係でもよい。 FIG. 15 shows another modification of the ninth configuration shown in FIG. 13. In FIG. 15, the symbols (character strings) constituting the latitude lines and meridians are the same character enumeration, and each latitude line or each meridian Each letter is different. In FIG. 15, numerals are used for the latitude lines and alphabets are used for the meridians so that the latitude and meridians can be identified. In FIG. 15, the direction of the characters composing the latitude line and the characters composing the meridian are the same. Note that the symbols are not limited to numbers or alphabets, and numbers, alphabets, other characters and figures may be used alone, or a combination thereof. In addition, the direction of the characters composing the latitude line and the characters composing the meridian is not limited to the same direction, and may be 90 degrees or 180 degrees.
上述した目印の第1〜第9の構成において、図16に示されるように、各グリッドに長さを示すスケール(目盛)および該スケールの寸法(長さ)を数字で併記するようにしてもよい。同図では、スケールの寸法は25μmとしている。但し、スケール(目盛)の表示のみで、スケールの寸法の併記はなくてもよい。図10に示した第6の構成において、上述した黒点(ドット)に代えて、このスケールを緯線と経線の交点付近に表示するようにしてもよい。また、スケール(およびその寸法)の標記は、全てのグリッドについて行わなくてもよく、1つおき、あるいは2つおき等であってもよい。 In the first to ninth configurations of the above-described marks, as shown in FIG. 16, the scale (scale) indicating the length and the dimension (length) of the scale may be written together with numerals in each grid. Good. In the figure, the dimension of the scale is 25 μm. However, only the scale (scale) is displayed, and the scale dimensions may not be indicated. In the sixth configuration shown in FIG. 10, this scale may be displayed in the vicinity of the intersection of the latitude line and the meridian instead of the black point (dot) described above. Further, the scale (and its dimensions) may not be marked for every grid, and every other grid, every other grid, or the like may be used.
なお、以上説明した実施形態は、本発明の理解を容易にするために記載されたものであって、本発明を限定するために記載されたものではない。従って、上述した実施形態に開示された各要素は、本発明の技術的範囲に属する全ての設計変更や均等物をも含む趣旨である。 The embodiment described above is described for facilitating the understanding of the present invention, and is not described for limiting the present invention. Therefore, each element disclosed in the above-described embodiment is intended to include all design changes and equivalents belonging to the technical scope of the present invention.
11,21…顕微鏡観察用容器
12,22…容器本体
13,23…蓋体
14,24…収容部
14a,24a…板状部
14b,24b…筒状部
M…目印
X0〜X4…経線
Y0〜Y4…緯線
IM…記号(番地、黒点)
Fi…観察視野(撮像視野)
DM…方向表示
11, 21 ...
Fi: Observation field (imaging field)
DM: Direction display
Claims (8)
前記被検査物を支持する板状部を備え、
前記板状部には、所定間隔で配置された複数の緯線および経線により構成されるグリッドが設けられ、
前記グリッドには、当該グリッドの任意の一部を、前記緯線と前記経線との交点が一以上存在する程度まで拡大観察した際に、当該拡大観察視野内における前記交点の絶対位置を識別可能な目印が設けられている顕微鏡観察用容器。 A microscope observation container for observing an object to be inspected using a microscope,
A plate-like portion for supporting the object to be inspected;
The plate-like portion is provided with a grid composed of a plurality of latitudes and meridians arranged at a predetermined interval,
The grid can identify the absolute position of the intersection in the enlarged observation field when an arbitrary part of the grid is enlarged and observed to the extent that there is at least one intersection of the latitude line and the meridian. A container for microscopic observation provided with a mark.
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