JP2009039040A - ヒトにおけるSLCトランスポーターのmRNAの測定方法、そのためのプローブ及びキット - Google Patents

ヒトにおけるSLCトランスポーターのmRNAの測定方法、そのためのプローブ及びキット Download PDF

Info

Publication number
JP2009039040A
JP2009039040A JP2007207636A JP2007207636A JP2009039040A JP 2009039040 A JP2009039040 A JP 2009039040A JP 2007207636 A JP2007207636 A JP 2007207636A JP 2007207636 A JP2007207636 A JP 2007207636A JP 2009039040 A JP2009039040 A JP 2009039040A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
region
gene
probe
seq
primer pair
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2007207636A
Other languages
English (en)
Inventor
Masuhiro Nishimura
益浩 西村
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Otsuka Pharmaceutical Factory Inc
Original Assignee
Otsuka Pharmaceutical Factory Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Otsuka Pharmaceutical Factory Inc filed Critical Otsuka Pharmaceutical Factory Inc
Priority to JP2007207636A priority Critical patent/JP2009039040A/ja
Publication of JP2009039040A publication Critical patent/JP2009039040A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

【課題】 ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAを分別して定量する新しい測定技術及びそのためのプライマー対及びプローブを提供する。
【解決手段】 ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの測定に用いられるプローブであって、遺伝子の特定領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドからなるプローブ;前記プローブ、及び遺伝子の特定領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドからなるフォワードプライマーとリバースプライマーとのプライマー対の組合せから選ばれる、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの測定キット;並びに前記測定キットを用いる、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの測定方法である。
【選択図】なし

Description

本発明は、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの測定方法及びそのためのプローブ及びキットに関する。
新薬を開発する上で、ヒトを用いた試験は一般的に行なわれている。
ところで、新薬を開発する上で、該新薬を投与した際のヒトにおけるSLCトランスポーターの働き(発現量の増減)を把握することは重要である。何故なら、ヒトにおけるSLCトランスポーターの変動が判らないと、該新薬と併用される併用薬剤の効力や副作用の増減、或いは併用薬剤や他の摂取物による新薬の効力や副作用の起こる機構が予測できず、該新薬の安全性を確認することができないからである。
そこで、上記新薬開発等の分野においては、かかるヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAに関する情報、特にこれら各ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAを区別して測定できる測定技術の開発が、要望されている。かかる技術が開発できれば、例えば、新薬の他剤との相互作用や特殊病態時における影響の機構解明が容易にでき、該新薬の副作用に関する有用な情報を得ることができ、かくして新薬の安全性を確保することができる。
他方、ポリメラーゼチェインリアクション(PCR)は、核酸の増幅法として広く知られており、例えばRT−PCR(Reverse Transcription-PCR)、コンペティティブRT−PCR等が微量のmRNAの検出、定量に威力を発揮している。
近年、PCRを利用したリアルタイム定量検出法が確立された(Taq Man PCR (Genome Res., 6(10), 986 (1996)), ABI PRISMTMSequence Detection System (Applied Biosystems社))。これは、特定の蛍光標識プローブ(TaqMan probe)を用いて核酸を測定する方法である。より詳しくは、例えば5’末端にリポーター色素及び3’末端にクエンチャー色素を付加して蛍光標識したプローブをターゲットDNAにアニールさせた状態で、通常のPCR反応を行なわせると、伸長反応の進行に伴って、DNAポリメラーゼの有する5′−3′エキソヌクレアーゼ活性により、上記プローブが5’末端から加水分解される。その結果、5’末端のリポーター色素が3’末端のクエンチャー色素から離れ、これにより、当初一定の空間的距離を保っていたことによるFRET(Fluoresence Resonance Energy Transfer, 両蛍光色素の共鳴によるリポーター色素のエネルギー順位の低下に基づく蛍光強度の低下現象)効果がなくなり、クエンチャー色素により制御されていたリポーター色素の蛍光強度が増加し、かくして、該蛍光強度の増加を測定することによって、ターゲット核酸をリアルタイムに選択的に定量検出できるのである。この方法によれば、PCR反応後に増幅物を例えばアガロースゲル電気泳動して、泳動パターンを解析する等の複雑な工程が不要となり、短時間で且つ同時に多種のサンプルを定量できる利点がある。これまでに、上記PCRによるリアルタイム検出法に着目し、これをヒトにおけるグルクロン酸抱合に関与する酵素の検出に利用することが提案されている(特許文献1)。
本発明者らは、上記PCRによるリアルタイム検出法に着目し、これが、ヒトにおけるSLCトランスポーターの蛋白質をコードするmRNAの検出に利用できれば、同じ装置を用いて同時に同一のPCR条件で上記各mRNAを区別して測定、検出できるとの着想から、鋭意研究を重ねた。
しかしながら、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAは、それぞれのmRNAの配列は知られているものの、これらをターゲット遺伝子として、同一PCR条件で充分に増幅し得、更に、該ターゲット遺伝子の特定位置にハイブリダイズし得る各プライマー対としてのオリゴヌクレオチドの検索自体困難であると考えられた。また、かかるプライマー対に挟まれた特定領域に、同一PCR条件下にこれらのプライマーよりも早くハイブリダイズし得、しかもヒトにおける特異的なプローブの構築もまた、同様に困難であると考えられた。特に、ヌクレオチド配列が既知の2つの核酸のハイブリダイズのし易さは、融点(Tm)の計算によりある程度推定することはできるものの、この推定によって選択したプライマーとプローブとの組合せが、必ずしもDNA測定において好結果をもたらすわけではないことが知られていることより、現在知られているヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAについて、これらを同時に区別して測定可能な、上記PCRによるリアルタイム検出用の各プライマー対とプローブとの組合せの選択には、熟練者の試行錯誤による多大な実験等が必要になると予想された。
特開2002−85066号公報
本発明の目的は、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAのPCRによる測定法、特にリアルタイム検出法の確立と、そのためのプローブ及びプライマー対を提供することにある。
本発明者らは、上記目的よりヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAについて、更に、多大な実験、研究を繰返し行った結果、178種類の各ヒトにおけるSLCトランスポーターの蛋白質をコードするmRNAに対する目的のプライマー対及びプローブの組合せを提供することに成功し、ここに下記要旨の本発明を完成するに至った。
本発明によれば、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの測定に用いられるプローブであって、下記(1)〜(178)の各領域のそれぞれにハイブリダイズするオリゴヌクレオチドから選ばれることを特徴とするプローブ;特にリポーター色素とクエンチャー色素とが結合している前記プローブ;塩基配列の長さが20〜45である前記プローブ;配列番号1〜配列番号178に示される配列のいずれかを含む前記プローブ;並びに配列番号1〜配列番号178に示される配列のいずれかである前記プローブが提供される。
(1)SLC8A1遺伝子の2344-2373の領域
(2)SLC8A2遺伝子の233-261の領域
(3)SLC8A3遺伝子の392-420の領域
(4)SLC9A1遺伝子の1455-1483の領域
(5)SLC9A2遺伝子の1266-1297の領域
(6)SLC9A3遺伝子の1975-1999の領域
(7)SLC9A4遺伝子の2074-2097の領域
(8)SLC9A5遺伝子の222-247の領域
(9)SLC9A6遺伝子の322-346の領域
(10)SLC9A7遺伝子の1694-1717の領域
(11)SLC9A8遺伝子の1443-1469の領域
(12)SLC9A9遺伝子の1542-1572の領域
(13)SLC9A10遺伝子の1076-1105の領域
(14)SLC9A11遺伝子の3245-3277の領域
(15)SLC11A1遺伝子の451-474の領域
(16)SLC11A2遺伝子の407-436の領域
(17)SLC12A1遺伝子の104-133の領域
(18)SLC12A2遺伝子の602-632の領域
(19)SLC12A3遺伝子の2618-2643の領域
(20)SLC12A4遺伝子の737-767の領域
(21)SLC12A5遺伝子の2823-2847の領域
(22)SLC12A6遺伝子の2339-2369の領域
(23)SLC12A7遺伝子の2689-2716の領域
(24)SLC12A8遺伝子の1090-1115の領域
(25)SLC12A9遺伝子の1883-1910の領域
(26)SLC13A1遺伝子の1130-1162の領域
(27)SLC13A2遺伝子の964-987の領域
(28)SLC13A3遺伝子の247-274の領域
(29)SLC13A4遺伝子の1639-1665の領域
(30)SLC13A5遺伝子の98-124の領域
(31)SLC14A1遺伝子の77-102の領域
(32)SLC14A2遺伝子の562-590の領域
(33)SLC16A1遺伝子の482-505の領域
(34)SLC16A2遺伝子の834-860の領域
(35)SLC16A3遺伝子の150-175の領域
(36)SLC16A4遺伝子の339-369の領域
(37)SLC16A5遺伝子の155-179の領域
(38)SLC16A6遺伝子の614-637の領域
(39)SLC16A7遺伝子の1167-1195の領域
(40)SLC16A8遺伝子の799-819の領域
(41)SLC16A9遺伝子の710-736の領域
(42)SLC16A10遺伝子の299-325の領域
(43)SLC16A11遺伝子の701-723の領域
(44)SLC16A12遺伝子の336-365の領域
(45)SLC16A13遺伝子の830-854の領域
(46)SLC16A14遺伝子の93-117の領域
(47)SLC17A1遺伝子の139-169の領域
(48)SLC17A2遺伝子の78-106の領域
(49)SLC17A3遺伝子の32-62の領域
(50)SLC17A4遺伝子の1232-1262の領域
(51)SLC17A5遺伝子の314-342の領域
(52)SLC17A6遺伝子の656-682の領域
(53)SLC17A7遺伝子の335-362の領域
(54)SLC17A8遺伝子の1073-1103の領域
(55)SLC18A1遺伝子の820-849の領域
(56)SLC18A2遺伝子の238-270の領域
(57)SLC18A3遺伝子の377-403の領域
(58)SLC19A1遺伝子の102-125の領域
(59)SLC19A2遺伝子の713-742の領域
(60)SLC19A3遺伝子の510-538の領域
(61)SLC20A1遺伝子の1948-1977の領域
(62)SLC20A2遺伝子の343-372の領域
(63)SLC23A1遺伝子の391-418の領域
(64)SLC23A2遺伝子の1183-1210の領域
(65)SLC23A3遺伝子の999-1026の領域
(66)SLC24A1遺伝子の1415-1440の領域
(67)SLC24A2遺伝子の1844-1871の領域
(68)SLC24A3遺伝子の848-875の領域
(69)SLC24A4遺伝子の1658-1683の領域
(70)SLC24A5遺伝子の723-749の領域
(71)SLC24A6遺伝子の188-211の領域
(72)SLC25A1遺伝子の452-475の領域
(73)SLC25A2遺伝子の485-511の領域
(74)SLC25A3遺伝子の354-377の領域
(75)SLC25A4遺伝子の250-275の領域
(76)SLC25A5遺伝子の209-231の領域
(77)SLC25A6遺伝子の732-759の領域
(78)SLC25A7遺伝子の163-193の領域
(79)SLC25A8遺伝子の608-633の領域
(80)SLC25A9遺伝子の454-481の領域
(81)SLC25A10遺伝子の607-632の領域
(82)SLC25A11遺伝子の761-786の領域
(83)SLC25A12遺伝子の1764-1790の領域
(84)SLC25A13遺伝子の899-924の領域
(85)SLC25A14遺伝子の142-169の領域
(86)SLC25A15遺伝子の469-502の領域
(87)SLC25A16遺伝子の449-478の領域
(88)SLC25A17遺伝子の165-197の領域
(89)SLC25A18遺伝子の634-656の領域
(90)SLC25A19遺伝子の761-788の領域
(91)SLC25A20遺伝子の347-375の領域
(92)SLC25A21遺伝子の430-455の領域
(93)SLC25A22遺伝子の757-782の領域
(94)SLC25A23遺伝子の349-376の領域
(95)SLC25A24遺伝子の725-754の領域
(96)SLC25A25遺伝子の758-780の領域
(97)SLC25A26遺伝子の296-322の領域
(98)SLC25A27遺伝子の125-152の領域
(99)SLC25A28遺伝子の366-398の領域
(100)SLC25A29遺伝子の69-93の領域
(101)SLC25A30遺伝子の249-279の領域
(102)SLC25A31遺伝子の381-406の領域
(103)SLC25A32遺伝子の417-447の領域
(104)SLC25A33遺伝子の756-781の領域
(105)SLC25A34遺伝子の238-262の領域
(106)SLC25A35遺伝子の712-735の領域
(107)SLC25A36遺伝子の388-415の領域
(108)SLC25A37遺伝子の237-267の領域
(109)SLC25A38遺伝子の85-111の領域
(110)SLC25A39遺伝子の278-302の領域
(111)SLC25A40遺伝子の522-552の領域
(112)SLC25A41遺伝子の66-97の領域
(113)SLC25A42遺伝子の159-185の領域
(114)SLC25A43遺伝子の459-490の領域
(115)SLC25A44遺伝子の29-55の領域
(116)SLC25A45遺伝子の653-677の領域
(117)SLC25A46遺伝子の757-787の領域
(118)SLC26A1遺伝子の299-327の領域
(119)SLC26A2遺伝子の480-512の領域
(120)SLC26A3遺伝子の302-330の領域
(121)SLC26A4遺伝子の265-294の領域
(122)SLC26A5遺伝子の871-899の領域
(123)SLC26A6遺伝子の620-647の領域
(124)SLC26A7遺伝子の319-347の領域
(125)SLC26A8遺伝子の654-681の領域
(126)SLC26A9遺伝子の38-64の領域
(127)SLC26A10遺伝子の191-223の領域
(128)SLC26A11遺伝子の226-250の領域
(129)SLC27A1遺伝子の1412-1435の領域
(130)SLC27A2遺伝子の961-988の領域
(131)SLC27A3遺伝子の1501-1532の領域
(132)SLC27A4遺伝子の950-977の領域
(133)SLC27A5遺伝子の1153-1181の領域
(134)SLC27A6遺伝子の831-860の領域
(135)SLC30A1遺伝子の1333-1359の領域
(136)SLC30A2遺伝子の979-1004の領域
(137)SLC30A3遺伝子の874-897の領域
(138)SLC30A4遺伝子の300-336の領域
(139)SLC30A5遺伝子の1820-1853の領域
(140)SLC30A6遺伝子の909-934の領域
(141)SLC30A7遺伝子の86-113の領域
(142)SLC30A8遺伝子の532-555の領域
(143)SLC30A9遺伝子の1215-1242の領域
(144)SLC30A10遺伝子の649-676の領域
(145)SLC31A1遺伝子の280-306の領域
(146)SLC31A2遺伝子の294-319の領域
(147)SLC32A1遺伝子の1132-1155の領域
(148)SLC33A1遺伝子の552-577の領域
(149)SLC34A1遺伝子の1274-1297の領域
(150)SLC34A2遺伝子の1030-1055の領域
(151)SLC34A3遺伝子の489-514の領域
(152)SLC35A1遺伝子の439-469の領域
(153)SLC35A2遺伝子の355-387の領域
(154)SLC35A3遺伝子の493-528の領域
(155)SLC35A4遺伝子の325-349の領域
(156)SLC35A5遺伝子の1145-1175の領域
(157)SLC37A1遺伝子の390-412の領域
(158)SLC37A2遺伝子の121-150の領域
(159)SLC37A3遺伝子の214-240の領域
(160)SLC37A4遺伝子の169-196の領域
(161)SLC39A1遺伝子の396-420の領域
(162)SLC39A2遺伝子の194-221の領域
(163)SLC39A3遺伝子の257-278の領域
(164)SLC39A4遺伝子の515-539の領域
(165)SLC39A5遺伝子の454-481の領域
(166)SLC39A6遺伝子の629-655の領域
(167)SLC39A7遺伝子の389-417の領域
(168)SLC39A8遺伝子の296-325の領域
(169)SLC39A9遺伝子の401-429の領域
(170)SLC39A10遺伝子の1678-1702の領域
(171)SLC39A11遺伝子の295-320の領域
(172)SLC39A12遺伝子の537-564の領域
(173)SLC39A13遺伝子の754-778の領域
(174)SLC39A14遺伝子の595-622の領域
(175)SLC40A1遺伝子の1343-1372の領域
(176)SLC41A1遺伝子の737-760の領域
(177)SLC41A2遺伝子の884-909の領域
(178)SLC41A3遺伝子の965-990の領域
また、本発明によれば、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードする遺伝子の各領域にそれぞれハイブリダイズするオリゴヌクレオチドからなるフォワードプライマーとリバースプライマーとのプライマー対およびプローブのセットの少なくとも1つを含むヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの検出および定量キットであって、上記両プライマー対およびプローブが下記(1)〜(178)に示される遺伝子の各領域にそれぞれハイブリダイズし得るオリゴヌクレオチドであるキットが提供される。
(1)プライマー対;SLC8A1遺伝子の2311-2331領域及び2407-2389領域、プローブ;2344-2373領域
(2)プライマー対;SLC8A2遺伝子の211-230領域及び280-264領域、プローブ;233-261領域
(3)プライマー対;SLC8A3遺伝子の368-388領域及び478-458領域、プローブ;392-420領域
(4)プライマー対;SLC9A1遺伝子の1433-1453領域及び1547-1527領域、プローブ;1455-1483領域
(5)プライマー対;SLC9A2遺伝子の1240-1261領域及び1328-1308領域、プローブ;1266-1297領域
(6)プライマー対;SLC9A3遺伝子の1955-1973領域及び2029-2009領域、プローブ;1975-1999領域
(7)プライマー対;SLC9A4遺伝子の2043-2063領域及び2124-2104領域、プローブ;2074-2097領域
(8)プライマー対;SLC9A5遺伝子の191-213領域及び273-254領域、プローブ;222-247領域
(9)プライマー対;SLC9A6遺伝子の302-320領域及び368-348領域、プローブ;322-346領域
(10)プライマー対;SLC9A7遺伝子の1672-1692領域及び1742-1722領域、プローブ;1694-1717領域
(11)プライマー対;SLC9A8遺伝子の1412-1430領域及び1506-1486領域、プローブ;1443-1469領域
(12)プライマー対;SLC9A9遺伝子の1519-1540領域及び1600-1576領域、プローブ;1542-1572領域
(13)プライマー対;SLC9A10遺伝子の1047-1067領域及び1127-1108領域、プローブ;1076-1105領域
(14)プライマー対;SLC9A11遺伝子の3219-3239領域及び3330-3310領域、プローブ;3245-3277領域
(15)プライマー対;SLC11A1遺伝子の431-449領域及び544-524領域、プローブ;451-474領域
(16)プライマー対;SLC11A2遺伝子の383-403領域及び489-469領域、プローブ;407-436領域
(17)プライマー対;SLC12A1遺伝子の81-101領域及び163-143領域、プローブ;104-133領域
(18)プライマー対;SLC12A2遺伝子の580-600領域及び661-643領域、プローブ;602-632領域
(19)プライマー対;SLC12A3遺伝子の2597-2616領域及び2665-2645領域、プローブ;2618-2643領域
(20)プライマー対;SLC12A4遺伝子の715-735領域及び823-803領域、プローブ;737-767領域
(21)プライマー対;SLC12A5遺伝子の2798-2819領域及び2889-2868領域、プローブ;2823-2847領域
(22)プライマー対;SLC12A6遺伝子の2319-2337領域及び2391-2371領域、プローブ;2339-2369領域
(23)プライマー対;SLC12A7遺伝子の2666-2686領域及び2749-2729領域、プローブ;2689-2716領域
(24)プライマー対;SLC12A8遺伝子の1067-1085領域及び1144-1123領域、プローブ;1090-1115領域
(25)プライマー対;SLC12A9遺伝子の1862-1880領域及び1931-1913領域、プローブ;1883-1910領域
(26)プライマー対;SLC13A1遺伝子の1105-1125領域及び1201-1178領域、プローブ;1130-1162領域
(27)プライマー対;SLC13A2遺伝子の935-953領域及び1011-991領域、プローブ;964-987領域
(28)プライマー対;SLC13A3遺伝子の227-245領域及び350-331領域、プローブ;247-274領域
(29)プライマー対;SLC13A4遺伝子の1614-1634領域及び1685-1667領域、プローブ;1639-1665領域
(30)プライマー対;SLC13A5遺伝子の72-92領域及び152-133領域、プローブ;98-124領域
(31)プライマー対;SLC14A1遺伝子の56-75領域及び145-125領域、プローブ;77-102領域
(32)プライマー対;SLC14A2遺伝子の542-560領域及び637-615領域、プローブ;562-590領域
(33)プライマー対;SLC16A1遺伝子の459-480領域及び593-575領域、プローブ;482-505領域
(34)プライマー対;SLC16A2遺伝子の810-829領域及び931-913領域、プローブ;834-860領域
(35)プライマー対;SLC16A3遺伝子の126-148領域及び199-180領域、プローブ;150-175領域
(36)プライマー対;SLC16A4遺伝子の314-334領域及び404-384領域、プローブ;339-369領域
(37)プライマー対;SLC16A5遺伝子の137-153領域及び198-181領域、プローブ;155-179領域
(38)プライマー対;SLC16A6遺伝子の592-612領域及び670-651領域、プローブ;614-637領域
(39)プライマー対;SLC16A7遺伝子の1145-1165領域及び1236-1216領域、プローブ;1167-1195領域
(40)プライマー対;SLC16A8遺伝子の778-796領域及び840-821領域、プローブ;799-819領域
(41)プライマー対;SLC16A9遺伝子の681-706領域及び761-738領域、プローブ;710-736領域
(42)プライマー対;SLC16A10遺伝子の278-296領域及び404-384領域、プローブ;299-325領域
(43)プライマー対;SLC16A11遺伝子の681-699領域及び799-779領域、プローブ;701-723領域
(44)プライマー対;SLC16A12遺伝子の302-322領域及び449-429領域、プローブ;336-365領域
(45)プライマー対;SLC16A13遺伝子の810-828領域及び898-878領域、プローブ;830-854領域
(46)プライマー対;SLC16A14遺伝子の72-90領域及び146-127領域、プローブ;93-117領域
(47)プライマー対;SLC17A1遺伝子の115-135領域及び194-174領域、プローブ;139-169領域
(48)プライマー対;SLC17A2遺伝子の56-76領域及び203-184領域、プローブ;78-106領域
(49)プライマー対;SLC17A3遺伝子の10-30領域及び88-68領域、プローブ;32-62領域
(50)プライマー対;SLC17A4遺伝子の1207-1227領域及び1322-1302領域、プローブ;1232-1262領域
(51)プライマー対;SLC17A5遺伝子の290-310領域及び380-360領域、プローブ;314-342領域
(52)プライマー対;SLC17A6遺伝子の626-650領域及び706-686領域、プローブ;656-682領域
(53)プライマー対;SLC17A7遺伝子の312-330領域及び388-368領域、プローブ;335-362領域
(54)プライマー対;SLC17A8遺伝子の1051-1071領域及び1126-1107領域、プローブ;1073-1103領域
(55)プライマー対;SLC18A1遺伝子の797-816領域及び874-855領域、プローブ;820-849領域
(56)プライマー対;SLC18A2遺伝子の215-236領域及び294-271領域、プローブ;238-270領域
(57)プライマー対;SLC18A3遺伝子の348-368領域及び453-433領域、プローブ;377-403領域
(58)プライマー対;SLC19A1遺伝子の80-100領域及び183-165領域、プローブ;102-125領域
(59)プライマー対;SLC19A2遺伝子の684-705領域及び764-745領域、プローブ;713-742領域
(60)プライマー対;SLC19A3遺伝子の489-508領域及び594-575領域、プローブ;510-538領域
(61)プライマー対;SLC20A1遺伝子の1925-1945領域及び2003-1983領域、プローブ;1948-1977領域
(62)プライマー対;SLC20A2遺伝子の320-340領域及び394-376領域、プローブ;343-372領域
(63)プライマー対;SLC23A1遺伝子の371-389領域及び448-426領域、プローブ;391-418領域
(64)プライマー対;SLC23A2遺伝子の1162-1181領域及び1256-1236領域、プローブ;1183-1210領域
(65)プライマー対;SLC23A3遺伝子の973-997領域及び1060-1042領域、プローブ;999-1026領域
(66)プライマー対;SLC24A1遺伝子の1392-1409領域及び1477-1458領域、プローブ;1415-1440領域
(67)プライマー対;SLC24A2遺伝子の1815-1835領域及び1899-1879領域、プローブ;1844-1871領域
(68)プライマー対;SLC24A3遺伝子の819-838領域及び919-900領域、プローブ;848-875領域
(69)プライマー対;SLC24A4遺伝子の1623-1643領域及び1719-1700領域、プローブ;1658-1683領域
(70)プライマー対;SLC24A5遺伝子の697-717領域及び779-760領域、プローブ;723-749領域
(71)プライマー対;SLC24A6遺伝子の165-185領域及び234-216領域、プローブ;188-211領域
(72)プライマー対;SLC25A1遺伝子の427-450領域及び513-493領域、プローブ;452-475領域
(73)プライマー対;SLC25A2遺伝子の459-480領域及び601-583領域、プローブ;485-511領域
(74)プライマー対;SLC25A3遺伝子の329-352領域及び399-379領域、プローブ;354-377領域
(75)プライマー対;SLC25A4遺伝子の228-248領域及び313-293領域、プローブ;250-275領域
(76)プライマー対;SLC25A5遺伝子の187-207領域及269-249び領域、プローブ;209-231領域
(77)プライマー対;SLC25A6遺伝子の712-730領域及び782-762領域、プローブ;732-759領域
(78)プライマー対;SLC25A7遺伝子の140-160領域及び224-204領域、プローブ;163-193領域
(79)プライマー対;SLC25A8遺伝子の571-591領域及び669-649領域、プローブ;608-633領域
(80)プライマー対;SLC25A9遺伝子の430-450領域及び552-533領域、プローブ;454-481領域
(81)プライマー対;SLC25A10遺伝子の582-605領域及び718-697領域、プローブ;607-632領域
(82)プライマー対;SLC25A11遺伝子の740-759領域及び817-797領域、プローブ;761-786領域
(83)プライマー対;SLC25A12遺伝子の1742-1762領域及び1863-1843領域、プローブ;1764-1790領域
(84)プライマー対;SLC25A13遺伝子の878-897領域及び987-969領域、プローブ;899-924領域
(85)プライマー対;SLC25A14遺伝子の122-140領域及び202-181領域、プローブ;142-169領域
(86)プライマー対;SLC25A15遺伝子の438-459領域及び536-513領域、プローブ;469-502領域
(87)プライマー対;SLC25A16遺伝子の418-443領域及び508-485領域、プローブ;449-478領域
(88)プライマー対;SLC25A17遺伝子の133-154領域及び226-203領域、プローブ;165-197領域
(89)プライマー対;SLC25A18遺伝子の603-622領域及び704-685領域、プローブ;634-656領域
(90)プライマー対;SLC25A19遺伝子の741-759領域及び812-794領域、プローブ;761-788領域
(91)プライマー対;SLC25A20遺伝子の326-345領域及び409-390領域、プローブ;347-375領域
(92)プライマー対;SLC25A21遺伝子の409-428領域及び490-470領域、プローブ;430-455領域
(93)プライマー対;SLC25A22遺伝子の730-750領域及び838-822領域、プローブ;757-782領域
(94)プライマー対;SLC25A23遺伝子の324-342領域及び397-379領域、プローブ;349-376領域
(95)プライマー対;SLC25A24遺伝子の702-723領域及び789-767領域、プローブ;725-754領域
(96)プライマー対;SLC25A25遺伝子の738-756領域及び814-796領域、プローブ;758-780領域
(97)プライマー対;SLC25A26遺伝子の271-291領域及び356-334領域、プローブ;296-322領域
(98)プライマー対;SLC25A27遺伝子の105-123領域及び172-153領域、プローブ;125-152領域
(99)プライマー対;SLC25A28遺伝子の344-364領域及び439-419領域、プローブ;366-398領域
(100)プライマー対;SLC25A29遺伝子の49-67領域及び163-143領域、プローブ;69-93領域
(101)プライマー対;SLC25A30遺伝子の227-247領域及び302-282領域、プローブ;249-279領域
(102)プライマー対;SLC25A31遺伝子の352-375領域及び452-431領域、プローブ;381-406領域
(103)プライマー対;SLC25A32遺伝子の394-414領域及び498-475領域、プローブ;417-447領域
(104)プライマー対;SLC25A33遺伝子の736-754領域及び806-786領域、プローブ;756-781領域
(105)プライマー対;SLC25A34遺伝子の218-232領域及び320-304領域、プローブ;238-262領域
(106)プライマー対;SLC25A35遺伝子の688-708領域及び773-753領域、プローブ;712-735領域
(107)プライマー対;SLC25A36遺伝子の365-384領域及び452-432領域、プローブ;388-415領域
(108)プライマー対;SLC25A37遺伝子の214-234領域及び288-269領域、プローブ;237-267領域
(109)プライマー対;SLC25A38遺伝子の62-82領域及び138-118領域、プローブ;85-111領域
(110)プライマー対;SLC25A39遺伝子の255-274領域及び327-308領域、プローブ;278-302領域
(111)プライマー対;SLC25A40遺伝子の497-519領域及び588-570領域、プローブ;522-552領域
(112)プライマー対;SLC25A41遺伝子の44-64領域及び136-116領域、プローブ;66-97領域
(113)プライマー対;SLC25A42遺伝子の138-156領域及び239-218領域、プローブ;159-185領域
(114)プライマー対;SLC25A43遺伝子の437-457領域及び583-563領域、プローブ;459-490領域
(115)プライマー対;SLC25A44遺伝子の6-26領域及び80-60領域、プローブ;29-55領域
(116)プライマー対;SLC25A45遺伝子の625-643領域及び716-694領域、プローブ;653-677領域
(117)プライマー対;SLC25A46遺伝子の733-753領域及び810-790領域、プローブ;757-787領域
(118)プライマー対;SLC26A1遺伝子の261-280領域及び378-360領域、プローブ;299-327領域
(119)プライマー対;SLC26A2遺伝子の460-478領域及び575-555領域、プローブ;480-512領域
(120)プライマー対;SLC26A3遺伝子の281-300領域及び389-369領域、プローブ;302-330領域
(121)プライマー対;SLC26A4遺伝子の242-262領域及び348-328領域、プローブ;265-294領域
(122)プライマー対;SLC26A5遺伝子の853-869領域及び973-952領域、プローブ;871-899領域
(123)プライマー対;SLC26A6遺伝子の600-618領域及び685-665領域、プローブ;620-647領域
(124)プライマー対;SLC26A7遺伝子の294-312領域及び412-394領域、プローブ;319-347領域
(125)プライマー対;SLC26A8遺伝子の634-652領域及び702-682領域、プローブ;654-681領域
(126)プライマー対;SLC26A9遺伝子の17-36領域及び96-76領域、プローブ;38-64領域
(127)プライマー対;SLC26A10遺伝子の166-189領域及び252-231領域、プローブ;191-223領域
(128)プライマー対;SLC26A11遺伝子の198-217領域及び274-255領域、プローブ;226-250領域
(129)プライマー対;SLC27A1遺伝子の1384-1402領域及び1472-1454領域、プローブ;1412-1435領域
(130)プライマー対;SLC27A2遺伝子の936-956領域及び1029-1010領域、プローブ;961-988領域
(131)プライマー対;SLC27A3遺伝子の1479-1499領域及び1553-1534領域、プローブ;1501-1532領域
(132)プライマー対;SLC27A4遺伝子の921-941領域及び1016-997領域、プローブ;950-977領域
(133)プライマー対;SLC27A5遺伝子の1123-1144領域及び1204-1184領域、プローブ;1153-1181領域
(134)プライマー対;SLC27A6遺伝子の805-825領域及び891-871領域、プローブ;831-860領域
(135)プライマー対;SLC30A1遺伝子の1311-1331領域及び1377-1359領域、プローブ;1333-1359領域
(136)プライマー対;SLC30A2遺伝子の948-968領域及び1046-1026領域、プローブ;979-1004領域
(137)プライマー対;SLC30A3遺伝子の852-872領域及び938-920領域、プローブ;874-897領域
(138)プライマー対;SLC30A4遺伝子の275-295領域及び362-342領域、プローブ;300-336領域
(139)プライマー対;SLC30A5遺伝子の1798-1818領域及び1876-1856領域、プローブ;1820-1853領域
(140)プライマー対;SLC30A6遺伝子の880-899領域及び959-939領域、プローブ;909-934領域
(141)プライマー対;SLC30A7遺伝子の64-84領域及び137-117領域、プローブ;86-113領域
(142)プライマー対;SLC30A8遺伝子の510-530領域及び614-596領域、プローブ;532-555領域
(143)プライマー対;SLC30A9遺伝子の1192-1212領域及び1307-1287領域、プローブ;1215-1242領域
(144)プライマー対;SLC30A10遺伝子の623-641領域及び721-696領域、プローブ;649-676領域
(145)プライマー対;SLC31A1遺伝子の253-273領域及び386-368領域、プローブ;280-306領域
(146)プライマー対;SLC31A2遺伝子の272-292領域及び377-357領域、プローブ;294-319領域
(147)プライマー対;SLC32A1遺伝子の1103-1123領域及び1236-1216領域、プローブ;1132-1155領域
(148)プライマー対;SLC33A1遺伝子の529-549領域及び634-615領域、プローブ;552-577領域
(149)プライマー対;SLC34A1遺伝子の1252-1272領域及び1319-1300領域、プローブ;1274-1297領域
(150)プライマー対;SLC34A2遺伝子の1005-1028領域及び1085-1066領域、プローブ;1030-1055領域
(151)プライマー対;SLC34A3遺伝子の463-483領域及び557-539領域、プローブ;489-514領域
(152)プライマー対;SLC35A1遺伝子の411-431領域及び496-476領域、プローブ;439-469領域
(153)プライマー対;SLC35A2遺伝子の325-345領域及び461-442領域、プローブ;355-387領域
(154)プライマー対;SLC35A3遺伝子の468-490領域及び550-530領域、プローブ;493-528領域
(155)プライマー対;SLC35A4遺伝子の301-323領域及び382-362領域、プローブ;325-349領域
(156)プライマー対;SLC35A5遺伝子の1118-1137領域及び1206-1188領域、プローブ;1145-1175領域
(157)プライマー対;SLC37A1遺伝子の366-383領域及び431-414領域、プローブ;390-412領域
(158)プライマー対;SLC37A2遺伝子の98-118領域及び176-156領域、プローブ;121-150領域
(159)プライマー対;SLC37A3遺伝子の193-212領域及び261-242領域、プローブ;214-240領域
(160)プライマー対;SLC37A4遺伝子の149-167領域及び274-256領域、プローブ;169-196領域
(161)プライマー対;SLC39A1遺伝子の374-394領域及び487-471領域、プローブ;396-420領域
(162)プライマー対;SLC39A2遺伝子の172-192領域及び258-238領域、プローブ;194-221領域
(163)プライマー対;SLC39A3遺伝子の235-254領域及び322-303領域、プローブ;257-278領域
(164)プライマー対;SLC39A4遺伝子の490-508領域及び583-565領域、プローブ;515-539領域
(165)プライマー対;SLC39A5遺伝子の434-452領域及び504-485領域、プローブ;454-481領域
(166)プライマー対;SLC39A6遺伝子の607-627領域及び679-661領域、プローブ;629-655領域
(167)プライマー対;SLC39A7遺伝子の369-387領域及び438-420領域、プローブ;389-417領域
(168)プライマー対;SLC39A8遺伝子の262-284領域及び360-343領域、プローブ;296-325領域
(169)プライマー対;SLC39A9遺伝子の375-395領域及び449-431領域、プローブ;401-429領域
(170)プライマー対;SLC39A10遺伝子の1653-1676領域及び1732-1708領域、プローブ;1678-1702領域
(171)プライマー対;SLC39A11遺伝子の260-280領域及び355-335領域、プローブ;295-320領域
(172)プライマー対;SLC39A12遺伝子の512-535領域及び605-584領域、プローブ;537-564領域
(173)プライマー対;SLC39A13遺伝子の725-744領域及び798-780領域、プローブ;754-778領域
(174)プライマー対;SLC39A14遺伝子の571-589領域及び696-677領域、プローブ;595-622領域
(175)プライマー対;SLC40A1遺伝子の1320-1340領域及び1392-1374領域、プローブ;1343-1372領域
(176)プライマー対;SLC41A1遺伝子の716-735領域及び844-823領域、プローブ;737-760領域
(177)プライマー対;SLC41A2遺伝子の855-875領域及び944-926領域、プローブ;884-909領域
(178)プライマー対;SLC41A3遺伝子の944-963領域及び1018-998領域、プローブ;965-990領域
上記キットにおけるプローブは、更にリポーター色素とクエンチャー色素とを結合させたものであることが好ましい。
上記キットを構成するプライマー対とプローブとの組合せ(セット)の好ましいものとしては、下記(1)〜(178)から選ばれる各配列番号で示される配列を含むもの、より好ましくは各配列番号で示される配列を有するものを挙げることができる。
(1)プライマー対;配列番号179及び180、プローブ;配列番号1
(2)プライマー対;配列番号181及び182、プローブ;配列番号2
(3)プライマー対;配列番号183及び184、プローブ;配列番号3
(4)プライマー対;配列番号185及び186、プローブ;配列番号4
(5)プライマー対;配列番号187及び188、プローブ;配列番号5
(6)プライマー対;配列番号189及び190、プローブ;配列番号6
(7)プライマー対;配列番号191及び192、プローブ;配列番号7
(8)プライマー対;配列番号193及び194、プローブ;配列番号8
(9)プライマー対;配列番号195及び196、プローブ;配列番号9
(10)プライマー対;配列番号197及び198、プローブ;配列番号10
(11)プライマー対;配列番号199及び200、プローブ;配列番号11
(12)プライマー対;配列番号201及び202、プローブ;配列番号12
(13)プライマー対;配列番号203及び204、プローブ;配列番号13
(14)プライマー対;配列番号205及び206、プローブ;配列番号14
(15)プライマー対;配列番号207及び208、プローブ;配列番号15
(16)プライマー対;配列番号209及び210、プローブ;配列番号16
(17)プライマー対;配列番号211及び212、プローブ;配列番号17
(18)プライマー対;配列番号213及び214、プローブ;配列番号18
(19)プライマー対;配列番号215及び216、プローブ;配列番号19
(20)プライマー対;配列番号217及び218、プローブ;配列番号20
(21)プライマー対;配列番号219及び220、プローブ;配列番号21
(22)プライマー対;配列番号221及び222、プローブ;配列番号22
(23)プライマー対;配列番号223及び224、プローブ;配列番号23
(24)プライマー対;配列番号225及び226、プローブ;配列番号24
(25)プライマー対;配列番号227及び228、プローブ;配列番号25
(26)プライマー対;配列番号229及び230、プローブ;配列番号26
(27)プライマー対;配列番号231及び232、プローブ;配列番号27
(28)プライマー対;配列番号233及び234、プローブ;配列番号28
(29)プライマー対;配列番号235及び236、プローブ;配列番号29
(30)プライマー対;配列番号237及び238、プローブ;配列番号30
(31)プライマー対;配列番号239及び240、プローブ;配列番号31
(32)プライマー対;配列番号241及び242、プローブ;配列番号32
(33)プライマー対;配列番号243及び244、プローブ;配列番号33
(34)プライマー対;配列番号245及び246、プローブ;配列番号34
(35)プライマー対;配列番号247及び248、プローブ;配列番号35
(36)プライマー対;配列番号249及び250、プローブ;配列番号36
(37)プライマー対;配列番号251及び252、プローブ;配列番号37
(38)プライマー対;配列番号253及び254、プローブ;配列番号38
(39)プライマー対;配列番号255及び256、プローブ;配列番号39
(40)プライマー対;配列番号257及び258、プローブ;配列番号40
(41)プライマー対;配列番号259及び260、プローブ;配列番号41
(42)プライマー対;配列番号261及び262、プローブ;配列番号42
(43)プライマー対;配列番号263及び264、プローブ;配列番号43
(44)プライマー対;配列番号265及び266、プローブ;配列番号44
(45)プライマー対;配列番号267及び268、プローブ;配列番号45
(46)プライマー対;配列番号269及び270、プローブ;配列番号46
(47)プライマー対;配列番号271及び272、プローブ;配列番号47
(48)プライマー対;配列番号273及び274、プローブ;配列番号48
(49)プライマー対;配列番号275及び276、プローブ;配列番号49
(50)プライマー対;配列番号277及び278、プローブ;配列番号50
(51)プライマー対;配列番号279及び280、プローブ;配列番号51
(52)プライマー対;配列番号281及び282、プローブ;配列番号52
(53)プライマー対;配列番号283及び284、プローブ;配列番号53
(54)プライマー対;配列番号285及び286、プローブ;配列番号54
(55)プライマー対;配列番号287及び288、プローブ;配列番号55
(56)プライマー対;配列番号289及び290、プローブ;配列番号56
(57)プライマー対;配列番号291及び292、プローブ;配列番号57
(58)プライマー対;配列番号293及び294、プローブ;配列番号58
(59)プライマー対;配列番号295及び296、プローブ;配列番号59
(60)プライマー対;配列番号297及び298、プローブ;配列番号60
(61)プライマー対;配列番号299及び300、プローブ;配列番号61
(62)プライマー対;配列番号301及び302、プローブ;配列番号62
(63)プライマー対;配列番号303及び304、プローブ;配列番号63
(64)プライマー対;配列番号305及び306、プローブ;配列番号64
(65)プライマー対;配列番号307及び308、プローブ;配列番号65
(66)プライマー対;配列番号309及び310、プローブ;配列番号66
(67)プライマー対;配列番号311及び312、プローブ;配列番号67
(68)プライマー対;配列番号313及び314、プローブ;配列番号68
(69)プライマー対;配列番号315及び316、プローブ;配列番号69
(70)プライマー対;配列番号317及び318、プローブ;配列番号70
(71)プライマー対;配列番号319及び320、プローブ;配列番号71
(72)プライマー対;配列番号321及び322、プローブ;配列番号72
(73)プライマー対;配列番号323及び324、プローブ;配列番号73
(74)プライマー対;配列番号325及び326、プローブ;配列番号74
(75)プライマー対;配列番号327及び328、プローブ;配列番号75
(76)プライマー対;配列番号329及び330、プローブ;配列番号76
(77)プライマー対;配列番号331及び332、プローブ;配列番号77
(78)プライマー対;配列番号333及び334、プローブ;配列番号78
(79)プライマー対;配列番号335及び336、プローブ;配列番号79
(80)プライマー対;配列番号337及び338、プローブ;配列番号80
(81)プライマー対;配列番号339及び340、プローブ;配列番号81
(82)プライマー対;配列番号341及び342、プローブ;配列番号82
(83)プライマー対;配列番号343及び344、プローブ;配列番号83
(84)プライマー対;配列番号345及び346、プローブ;配列番号84
(85)プライマー対;配列番号347及び348、プローブ;配列番号85
(86)プライマー対;配列番号349及び350、プローブ;配列番号86
(87)プライマー対;配列番号351及び352、プローブ;配列番号87
(88)プライマー対;配列番号353及び354、プローブ;配列番号88
(89)プライマー対;配列番号355及び356、プローブ;配列番号89
(90)プライマー対;配列番号357及び358、プローブ;配列番号90
(91)プライマー対;配列番号359及び360、プローブ;配列番号91
(92)プライマー対;配列番号361及び362、プローブ;配列番号92
(93)プライマー対;配列番号363及び364、プローブ;配列番号93
(94)プライマー対;配列番号365及び366、プローブ;配列番号94
(95)プライマー対;配列番号367及び368、プローブ;配列番号95
(96)プライマー対;配列番号369及び370、プローブ;配列番号96
(97)プライマー対;配列番号371及び372、プローブ;配列番号97
(98)プライマー対;配列番号373及び374、プローブ;配列番号98
(99)プライマー対;配列番号375及び376、プローブ;配列番号99
(100)プライマー対;配列番号377及び378、プローブ;配列番号100
(101)プライマー対;配列番号379及び380、プローブ;配列番号101
(102)プライマー対;配列番号381及び382、プローブ;配列番号102
(103)プライマー対;配列番号383及び384、プローブ;配列番号103
(104)プライマー対;配列番号385及び386、プローブ;配列番号104
(105)プライマー対;配列番号387及び388、プローブ;配列番号105
(106)プライマー対;配列番号389及び390、プローブ;配列番号106
(107)プライマー対;配列番号391及び392、プローブ;配列番号107
(108)プライマー対;配列番号393及び394、プローブ;配列番号108
(109)プライマー対;配列番号395及び396、プローブ;配列番号109
(110)プライマー対;配列番号397及び398、プローブ;配列番号110
(111)プライマー対;配列番号399及び400、プローブ;配列番号111
(112)プライマー対;配列番号401及び402、プローブ;配列番号112
(113)プライマー対;配列番号403及び404、プローブ;配列番号113
(114)プライマー対;配列番号405及び406、プローブ;配列番号114
(115)プライマー対;配列番号407及び408、プローブ;配列番号115
(116)プライマー対;配列番号409及び410、プローブ;配列番号116
(117)プライマー対;配列番号411及び412、プローブ;配列番号117
(118)プライマー対;配列番号413及び414、プローブ;配列番号118
(119)プライマー対;配列番号415及び416、プローブ;配列番号119
(120)プライマー対;配列番号417及び418、プローブ;配列番号120
(121)プライマー対;配列番号419及び420、プローブ;配列番号121
(122)プライマー対;配列番号421及び422、プローブ;配列番号122
(123)プライマー対;配列番号423及び424、プローブ;配列番号123
(124)プライマー対;配列番号425及び426、プローブ;配列番号124
(125)プライマー対;配列番号427及び428、プローブ;配列番号125
(126)プライマー対;配列番号429及び430、プローブ;配列番号126
(127)プライマー対;配列番号431及び432、プローブ;配列番号127
(128)プライマー対;配列番号433及び434、プローブ;配列番号128
(129)プライマー対;配列番号435及び436、プローブ;配列番号129
(130)プライマー対;配列番号437及び438、プローブ;配列番号130
(131)プライマー対;配列番号439及び440、プローブ;配列番号131
(132)プライマー対;配列番号441及び442、プローブ;配列番号132
(133)プライマー対;配列番号443及び444、プローブ;配列番号133
(134)プライマー対;配列番号445及び446、プローブ;配列番号134
(135)プライマー対;配列番号447及び448、プローブ;配列番号135
(136)プライマー対;配列番号449及び450、プローブ;配列番号136
(137)プライマー対;配列番号451及び452、プローブ;配列番号137
(138)プライマー対;配列番号453及び454、プローブ;配列番号138
(139)プライマー対;配列番号455及び456、プローブ;配列番号139
(140)プライマー対;配列番号457及び458、プローブ;配列番号140
(141)プライマー対;配列番号459及び460、プローブ;配列番号141
(142)プライマー対;配列番号461及び462、プローブ;配列番号142
(143)プライマー対;配列番号463及び464、プローブ;配列番号143
(144)プライマー対;配列番号465及び466、プローブ;配列番号144
(145)プライマー対;配列番号467及び468、プローブ;配列番号145
(146)プライマー対;配列番号469及び470、プローブ;配列番号146
(147)プライマー対;配列番号471及び472、プローブ;配列番号147
(148)プライマー対;配列番号473及び474、プローブ;配列番号148
(149)プライマー対;配列番号475及び476、プローブ;配列番号149
(150)プライマー対;配列番号477及び478、プローブ;配列番号150
(151)プライマー対;配列番号479及び480、プローブ;配列番号151
(152)プライマー対;配列番号481及び482、プローブ;配列番号152
(153)プライマー対;配列番号483及び484、プローブ;配列番号153
(154)プライマー対;配列番号485及び486、プローブ;配列番号154
(155)プライマー対;配列番号487及び488、プローブ;配列番号155
(156)プライマー対;配列番号489及び490、プローブ;配列番号156
(157)プライマー対;配列番号491及び492、プローブ;配列番号157
(158)プライマー対;配列番号493及び494、プローブ;配列番号158
(159)プライマー対;配列番号495及び496、プローブ;配列番号159
(160)プライマー対;配列番号497及び498、プローブ;配列番号160
(161)プライマー対;配列番号499及び500、プローブ;配列番号161
(162)プライマー対;配列番号501及び502、プローブ;配列番号162
(163)プライマー対;配列番号503及び504、プローブ;配列番号163
(164)プライマー対;配列番号505及び506、プローブ;配列番号164
(165)プライマー対;配列番号507及び508、プローブ;配列番号165
(166)プライマー対;配列番号509及び510、プローブ;配列番号166
(167)プライマー対;配列番号511及び512、プローブ;配列番号167
(168)プライマー対;配列番号513及び514、プローブ;配列番号168
(169)プライマー対;配列番号515及び516、プローブ;配列番号169
(170)プライマー対;配列番号517及び518、プローブ;配列番号170
(171)プライマー対;配列番号519及び520、プローブ;配列番号171
(172)プライマー対;配列番号521及び522、プローブ;配列番号172
(173)プライマー対;配列番号523及び524、プローブ;配列番号173
(174)プライマー対;配列番号525及び526、プローブ;配列番号174
(175)プライマー対;配列番号527及び528、プローブ;配列番号175
(176)プライマー対;配列番号529及び530、プローブ;配列番号176
(177)プライマー対;配列番号531及び532、プローブ;配列番号177
(178)プライマー対;配列番号533及び534、プローブ;配列番号178
また、上記各セットはそれぞれ以下のヒトにおけるSLCトランスポーターの蛋白質をコードするmRNAの測定用であることが好ましい。
(1)のセット;SLC8A1測定用
(2)のセット;SLC8A2測定用
(3)のセット;SLC8A3測定用
(4)のセット;SLC9A1測定用
(5)のセット;SLC9A2測定用
(6)のセット;SLC9A3測定用
(7)のセット;SLC9A4測定用
(8)のセット;SLC9A5測定用
(9)のセット;SLC9A6測定用
(10)のセット;SLC9A7測定用
(11)のセット;SLC9A8測定用
(12)のセット;SLC9A9測定用
(13)のセット;SLC9A10測定用
(14)のセット;SLC9A11測定用
(15)のセット;SLC11A1測定用
(16)のセット;SLC11A2測定用
(17)のセット;SLC12A1測定用
(18)のセット;SLC12A2測定用
(19)のセット;SLC12A3測定用
(20)のセット;SLC12A4測定用
(21)のセット;SLC12A5測定用
(22)のセット;SLC12A6測定用
(23)のセット;SLC12A7測定用
(24)のセット;SLC12A8測定用
(25)のセット;SLC12A9測定用
(26)のセット;SLC13A1測定用
(27)のセット;SLC13A2測定用
(28)のセット;SLC13A3測定用
(29)のセット;SLC13A4測定用
(30)のセット;SLC13A5測定用
(31)のセット;SLC14A1測定用
(32)のセット;SLC14A2測定用
(33)のセット;SLC16A1測定用
(34)のセット;SLC16A2測定用
(35)のセット;SLC16A3測定用
(36)のセット;SLC16A4測定用
(37)のセット;SLC16A5測定用
(38)のセット;SLC16A6測定用
(39)のセット;SLC16A7測定用
(40)のセット;SLC16A8測定用
(41)のセット;SLC16A9測定用
(42)のセット;SLC16A10測定用
(43)のセット;SLC16A11測定用
(44)のセット;SLC16A12測定用
(45)のセット;SLC16A13測定用
(46)のセット;SLC16A14測定用
(47)のセット;SLC17A1測定用
(48)のセット;SLC17A2測定用
(49)のセット;SLC17A3測定用
(50)のセット;SLC17A4測定用
(51)のセット;SLC17A5測定用
(52)のセット;SLC17A6測定用
(53)のセット;SLC17A7測定用
(54)のセット;SLC17A8測定用
(55)のセット;SLC18A1測定用
(56)のセット;SLC18A2測定用
(57)のセット;SLC18A3測定用
(58)のセット;SLC19A1測定用
(59)のセット;SLC19A2測定用
(60)のセット;SLC19A3測定用
(61)のセット;SLC20A1測定用
(62)のセット;SLC20A2測定用
(63)のセット;SLC23A1測定用
(64)のセット;SLC23A2測定用
(65)のセット;SLC23A3測定用
(66)のセット;SLC24A1測定用
(67)のセット;SLC24A2測定用
(68)のセット;SLC24A3測定用
(69)のセット;SLC24A4測定用
(70)のセット;SLC24A5測定用
(71)のセット;SLC24A6測定用
(72)のセット;SLC25A1測定用
(73)のセット;SLC25A2測定用
(74)のセット;SLC25A3測定用
(75)のセット;SLC25A4測定用
(76)のセット;SLC25A5測定用
(77)のセット;SLC25A6測定用
(78)のセット;SLC25A7測定用
(79)のセット;SLC25A8測定用
(80)のセット;SLC25A9測定用
(81)のセット;SLC25A10測定用
(82)のセット;SLC25A11測定用
(83)のセット;SLC25A12測定用
(84)のセット;SLC25A13測定用
(85)のセット;SLC25A14測定用
(86)のセット;SLC25A15測定用
(87)のセット;SLC25A16測定用
(88)のセット;SLC25A17測定用
(89)のセット;SLC25A18測定用
(90)のセット;SLC25A19測定用
(91)のセット;SLC25A20測定用
(92)のセット;SLC25A21測定用
(93)のセット;SLC25A22測定用
(94)のセット;SLC25A23測定用
(95)のセット;SLC25A24測定用
(96)のセット;SLC25A25測定用
(97)のセット;SLC25A26測定用
(98)のセット;SLC25A27測定用
(99)のセット;SLC25A28測定用
(100)のセット;SLC25A29測定用
(101)のセット;SLC25A30測定用
(102)のセット;SLC25A31測定用
(103)のセット;SLC25A32測定用
(104)のセット;SLC25A33測定用
(105)のセット;SLC25A34測定用
(106)のセット;SLC25A35測定用
(107)のセット;SLC25A36測定用
(108)のセット;SLC25A37測定用
(109)のセット;SLC25A38測定用
(110)のセット;SLC25A39測定用
(111)のセット;SLC25A40測定用
(112)のセット;SLC25A41測定用
(113)のセット;SLC25A42測定用
(114)のセット;SLC25A43測定用
(115)のセット;SLC25A44測定用
(116)のセット;SLC25A45測定用
(117)のセット;SLC25A46測定用
(118)のセット;SLC26A1測定用
(119)のセット;SLC26A2測定用
(120)のセット;SLC26A3測定用
(121)のセット;SLC26A4測定用
(122)のセット;SLC26A5測定用
(123)のセット;SLC26A6測定用
(124)のセット;SLC26A7測定用
(125)のセット;SLC26A8測定用
(126)のセット;SLC26A9測定用
(127)のセット;SLC26A10測定用
(128)のセット;SLC26A11測定用
(129)のセット;SLC27A1測定用
(130)のセット;SLC27A2測定用
(131)のセット;SLC27A3測定用
(132)のセット;SLC27A4測定用
(133)のセット;SLC27A5測定用
(134)のセット;SLC27A6測定用
(135)のセット;SLC30A1測定用
(136)のセット;SLC30A2測定用
(137)のセット;SLC30A3測定用
(138)のセット;SLC30A4測定用
(139)のセット;SLC30A5測定用
(140)のセット;SLC30A6測定用
(141)のセット;SLC30A7測定用
(142)のセット;SLC30A8測定用
(143)のセット;SLC30A9測定用
(144)のセット;SLC30A10測定用
(145)のセット;SLC31A1測定用
(146)のセット;SLC31A2測定用
(147)のセット;SLC32A1測定用
(148)のセット;SLC33A1測定用
(149)のセット;SLC34A1測定用
(150)のセット;SLC34A2測定用
(151)のセット;SLC34A3測定用
(152)のセット;SLC35A1測定用
(153)のセット;SLC35A2測定用
(154)のセット;SLC35A3測定用
(155)のセット;SLC35A4測定用
(156)のセット;SLC35A5測定用
(157)のセット;SLC37A1測定用
(158)のセット;SLC37A2測定用
(159)のセット;SLC37A3測定用
(160)のセット;SLC37A4測定用
(161)のセット;SLC39A1測定用
(162)のセット;SLC39A2測定用
(163)のセット;SLC39A3測定用
(164)のセット;SLC39A4測定用
(165)のセット;SLC39A5測定用
(166)のセット;SLC39A6測定用
(167)のセット;SLC39A7測定用
(168)のセット;SLC39A8測定用
(169)のセット;SLC39A9測定用
(170)のセット;SLC39A10測定用
(171)のセット;SLC39A11測定用
(172)のセット;SLC39A12測定用
(173)のセット;SLC39A13測定用
(174)のセット;SLC39A14測定用
(175)のセット;SLC40A1測定用
(176)のセット;SLC41A1測定用
(177)のセット;SLC41A2測定用
(178)のセット;SLC41A3測定用
さらに、本発明によれば、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAを含む検体について、上記いずれかに記載の測定キットを用いてポリメラーゼ連鎖反応(PCR、RT−PCRを含む)を行い、用いたプローブの加水分解の有無を測定することを特徴とするヒトにおけるSLCトランスポーターの蛋白質をコードするmRNAの測定方法、特に上記加水分解の有無が、励起光照射による蛍光の発色の有無により測定される上記測定方法が提供される。
より詳しくは、フォーワードプライマー及びリバースプライマーのプライマー対並びにレポーター色素とクエンチャー色素を有し上記両プライマーに挟まれた領域内で鋳型核酸とハイブリダイズするプローブを用いて、5′−3′エキソヌクレアーゼ活性を有するDNAポリメラーゼによりポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を行うことによって、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードする遺伝子を測定するリアルタイム検出方法が提供される。
本発明によれば、同一PCR又はRT−PCR反応条件下にリアルタイムで簡便且つ迅速に、各種ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAを定量することができる。このようなヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAのリアルタイム検出方法の確立は、臨床分野において非常に有益である。
また、上記方法によれば、ヒトより手術で摘出した組織やバイオプシーにより摘出した組織中に発現するヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAを見るにあたり、迅速且つ多種の試料を処理でき、また、僅かな組織片から抽出した全RNAで検出可能である、という効果も得られる。
以下、本発明におけるプローブ及びプライマー対について詳述する。本発明における各プローブ及びプライマーは、上述した通り、ヒトにおけるSLCトランスポーターの蛋白質をコードする遺伝子の特定領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドから選択される。
本発明において「ハイブリダイズする」とは、後述するPCR(又はRT−PCR)の条件でハイブリダイズすることをいう。
本発明におけるプローブ及びプライマーに共通する要件としては、増幅生成物が50〜400塩基対の長さであること、プライマーとプローブができる限り近接していること、配列に含まれるG(グアニン)及びC(シトシン)の割合が好ましくは50%前後であること、G(グアニン)が4つ以上連続していないこと、を挙げることができる。加えて、本発明におけるプローブにみられる要件としては、Tm値が70℃前後であることを挙げることができ、本発明におけるプライマーにみられる要件としてはTm値が60℃前後であることを挙げることができる。
それぞれのmRNA配列は公知であり、それぞれジーンバンク(BenBank)に以下の登録番号で登録されている。
(1)SLC8A1遺伝子;NM_021097
(2)SLC8A2遺伝子;NM_015063
(3)SLC8A3遺伝子;NM_033262
(4)SLC9A1遺伝子;NM_003047
(5)SLC9A2遺伝子;NM_003048
(6)SLC9A3遺伝子;NM_004174
(7)SLC9A4遺伝子;NM_001011552
(8)SLC9A5遺伝子;NM_004594
(9)SLC9A6遺伝子;NM_001042537
(0)SLC9A7遺伝子;NM_032591
(11)SLC9A8遺伝子;NM_015266
(12)SLC9A9遺伝子;NM_173653
(13)SLC9A10遺伝子;NM_183061
(14)SLC9A11遺伝子;NM_178527
(15)SLC11A1遺伝子;NM_000578
(16)SLC11A2遺伝子;NM_000617
(17)SLC12A1遺伝子;NM_000338
(18)SLC12A2遺伝子;NM_001046
(19)SLC12A3遺伝子;NM_000339
(20)SLC12A4遺伝子;NM_005072
(21)SLC12A5遺伝子;NM_020708
(22)SLC12A6遺伝子;NM_133647
(23)SLC12A7遺伝子;NM_006598
(24)SLC12A8遺伝子;NM_024628
(25)SLC12A9遺伝子;NM_020246
(26)SLC13A1遺伝子;NM_022444
(27)SLC13A2遺伝子;NM_003984
(28)SLC13A3遺伝子;NM_022829
(29)SLC13A4遺伝子;NM_012450
(30)SLC13A5遺伝子;NM_177550
(31)SLC14A1遺伝子;NM_015865
(32)SLC14A2遺伝子;NM_007163
(33)SLC16A1遺伝子;NM_003051
(34)SLC16A2遺伝子;NM_006517
(35)SLC16A3遺伝子;NM_001042422
(36)SLC16A4遺伝子;NM_004696
(37)SLC16A5遺伝子;NM_004695
(38)SLC16A6遺伝子;NM_004694
(39)SLC16A7遺伝子;NM_004731
(40)SLC16A8遺伝子;NM_013356
(41)SLC16A9遺伝子;NM_194298
(42)SLC16A10遺伝子;NM_018593
(43)SLC16A11遺伝子;NM_153357
(44)SLC16A12遺伝子;NM_213606
(45)SLC16A13遺伝子;NM_201566
(46)SLC16A14遺伝子;NM_152527
(47)SLC17A1遺伝子;NM_005074
(48)SLC17A2遺伝子;NM_005835
(49)SLC17A3遺伝子;NM_006632
(50)SLC17A4遺伝子;NM_005495
(51)SLC17A5遺伝子;NM_012434
(52)SLC17A6遺伝子;NM_020346
(53)SLC17A7遺伝子;NM_020309
(54)SLC17A8遺伝子;NM_139319
(55)SLC18A1遺伝子;NM_003053
(56)SLC18A2遺伝子;NM_003054
(57)SLC18A3遺伝子;NM_003055
(58)SLC19A1遺伝子;NM_194255
(59)SLC19A2遺伝子;NM_006996
(60)SLC19A3遺伝子;NM_025243
(61)SLC20A1遺伝子;NM_005415
(62)SLC20A2遺伝子;NM_006749
(63)SLC23A1遺伝子;NM_005847
(64)SLC23A2遺伝子;NM_005116
(65)SLC23A3遺伝子;NM_144712
(66)SLC24A1遺伝子;NM_004727
(67)SLC24A2遺伝子;NM_020344
(68)SLC24A3遺伝子;NM_020689
(69)SLC24A4遺伝子;NM_153646
(70)SLC24A5遺伝子;NM_205850
(71)SLC24A6遺伝子;NM_024959
(72)SLC25A1遺伝子;NM_005984
(73)SLC25A2遺伝子;NM_031947
(74)SLC25A3遺伝子;NM_005888
(75)SLC25A4遺伝子;NM_001151
(76)SLC25A5遺伝子;NM_001152
(77)SLC25A6遺伝子;NM_001636
(78)SLC25A7遺伝子;NM_021833
(79)SLC25A8遺伝子;NM_003355
(80)SLC25A9遺伝子;NM_022803
(81)SLC25A10遺伝子;NM_012140
(82)SLC25A11遺伝子;NM_003562
(83)SLC25A12遺伝子;NM_003705
(84)SLC25A13遺伝子;NM_014251
(85)SLC25A14遺伝子;NM_022810
(86)SLC25A15遺伝子;NM_014252
(87)SLC25A16遺伝子;NM_152707
(88)SLC25A17遺伝子;NM_006358
(89)SLC25A18遺伝子;NM_031481
(90)SLC25A19遺伝子;NM_021734
(91)SLC25A20遺伝子;NM_000387
(92)SLC25A21遺伝子;NM_030631
(93)SLC25A22遺伝子;NM_024698
(94)SLC25A23遺伝子;NM_024103
(95)SLC25A24遺伝子;NM_013386
(96)SLC25A25遺伝子;NM_052901
(97)SLC25A26遺伝子;NM_173471
(98)SLC25A27遺伝子;NM_004277
(99)SLC25A28遺伝子;NM_031212
(100)SLC25A29遺伝子;NM_001039355
(101)SLC25A30遺伝子;NM_001010875
(102)SLC25A31遺伝子;NM_031291
(103)SLC25A32遺伝子;NM_030780
(104)SLC25A33遺伝子;NM_032315
(105)SLC25A34遺伝子;NM_207348
(106)SLC25A35遺伝子;NM_201520
(107)SLC25A36遺伝子;NM_018155
(108)SLC25A37遺伝子;NM_016612
(109)SLC25A38遺伝子;NM_017875
(110)SLC25A39遺伝子;NM_016016
(111)SLC25A40遺伝子;NM_018843
(112)SLC25A41遺伝子;NM_173637
(113)SLC25A42遺伝子;NM_178526
(114)SLC25A43遺伝子;NM_145305
(115)SLC25A44遺伝子;NM_014655
(116)SLC25A45遺伝子;NM_182556
(117)SLC25A46遺伝子;NM_138773
(118)SLC26A1遺伝子;NM_022042
(119)SLC26A2遺伝子;NM_000112
(120)SLC26A3遺伝子;NM_000111
(121)SLC26A4遺伝子;NM_000441
(122)SLC26A5遺伝子;NM_198999
(123)SLC26A6遺伝子;NM_022911
(124)SLC26A7遺伝子;NM_052832
(125)SLC26A8遺伝子;NM_052961
(126)SLC26A9遺伝子;NM_052934
(127)SLC26A10遺伝子;NM_133489
(128)SLC26A11遺伝子;NM_173626
(129)SLC27A1遺伝子;NM_198580
(130)SLC27A2遺伝子;NM_003645
(131)SLC27A3遺伝子;NM_024330
(132)SLC27A4遺伝子;NM_005094
(133)SLC27A5遺伝子;NM_012254
(134)SLC27A6遺伝子;NM_014031
(135)SLC30A1遺伝子;NM_021194
(136)SLC30A2遺伝子;NM_001004434
(137)SLC30A3遺伝子;NM_003459
(138)SLC30A4遺伝子;NM_013309
(139)SLC30A5遺伝子;NM_022902
(140)SLC30A6遺伝子;NM_017964
(141)SLC30A7遺伝子;NM_133496
(142)SLC30A8遺伝子;NM_173851
(143)SLC30A9遺伝子;NM_006345
(144)SLC30A10遺伝子;NM_018713
(145)SLC31A1遺伝子;NM_001859
(146)SLC31A2遺伝子;NM_001860
(147)SLC32A1遺伝子;NM_080552
(148)SLC33A1遺伝子;NM_004733
(149)SLC34A1遺伝子;NM_003052
(150)SLC34A2遺伝子;NM_006424
(151)SLC34A3遺伝子;NM_080877
(152)SLC35A1遺伝子;NM_006416
(153)SLC35A2遺伝子;NM_005660
(154)SLC35A3遺伝子;NM_012243
(155)SLC35A4遺伝子;NM_080670
(156)SLC35A5遺伝子;NM_017945
(157)SLC37A1遺伝子;NM_018964
(158)SLC37A2遺伝子;NM_198277
(159)SLC37A3遺伝子;NM_207113
(160)SLC37A4遺伝子;NM_001467
(161)SLC39A1遺伝子;NM_014437
(162)SLC39A2遺伝子;NM_014579
(163)SLC39A3遺伝子;NM_144564
(164)SLC39A4遺伝子;NM_017767
(165)SLC39A5遺伝子;NM_173596
(166)SLC39A6遺伝子;NM_012319
(167)SLC39A7遺伝子;NM_006979
(168)SLC39A8遺伝子;NM_022154
(169)SLC39A9遺伝子;NM_018375
(170)SLC39A10遺伝子;NM_020342
(171)SLC39A11遺伝子;NM_139177
(172)SLC39A12遺伝子;NM_152725
(173)SLC39A13遺伝子;NM_152264
(174)SLC39A14遺伝子;NM_015359
(175)SLC40A1遺伝子;NM_014585
(176)SLC41A1遺伝子;NM_173854
(177)SLC41A2遺伝子;NM_032148
(178)SLC41A3遺伝子;NM_001008485
本明細書において、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの特定領域の表示は、いずれも上記各登録番号で登録された遺伝子の開始コドンからの配列に従うものである。
これら各プライマー及びプローブ用のオリゴヌクレオチドのヌクレオチド数は、15個以上、好ましくは15〜50個、より好ましくは20〜45個の範囲にあるのがよい。これらプライマー及びプローブのヌクレオチド数が上記範囲よりも多くなりすぎると、1本鎖DNAにハイブリダイズしにくくなり、逆に、少なすぎると、ハイブリダイゼーションの特異性が低下する傾向がある。
プライマー及びプローブの特定のヌクレオチド配列の好ましい具体的配列の例は、前述したとおり、各分子種に応じてそれぞれ、配列番号1〜178(プローブの場合)並びに配列番号179〜534(プライマーの場合)に示されるとおりである。
なお、例えば20ヌクレオチドからなるプライマー又はプローブは、鋳型鎖との間に少数のミスマッチが存在してもハイブリダイズし、PCRのプライマーとして又は検出用プローブとして機能し得ることが知られている。従って、本発明におけるプライマー及びプローブもまた、上記の特定のヌクレオチド配列を有するものに限定されず、上記配列をその一部として含むものや、上記配列中の例えば2個以下のヌクレオチドに置換、欠失及び/又は付加による修飾がなされた配列等をも包含することができる。
上述した本発明におけるプローブ及びプライマーとしての各オリゴヌクレオチドは、常法に従い、自動合成機(例えばDNAシンセサイザー(パーキンエルマー社製))等を用いて容易に合成することができ、さらに必要に応じて、得られたオリゴヌクレオチドを市販の精製用カートリッジ等を用いて精製することもできる。
本発明のリアルタイム検出用のプローブは、その一端、例えば5′−末端にレポーター色素を結合しており、そして他端、例えば3′−末端にクエンチャー色素を結合していることが好ましい。レポーター色素は、例えば励起光の照射によって蛍光を発する物質であり、クエンチャー色素は、該レポーター色素に距離的に接近して存在する場合に該レポーター色素に作用してその蛍光の発生を消去する作用を有する物質であるのがよい。このようなレポーター色素の例としては、例えば、6−カルボキシ−フルオレッセイン(FAM)、テトラクロロ−6−カルボキシフルオレッセイン(TET)、2,7−ジメトキシ−4,5−ジクロロ−6−カルボキシフルオレッセイン(JOE)、ヘキソクロロ−6−カルボキシフルオレッセイン(HEX)等が挙げられる。クエンチャー色素の例としては、例えば、6−カルボキシ−テトラメチル−ローダミン(TAMRA)等が挙げられる。
本発明におけるプローブは、前記特定配列のプローブ用オリゴヌクレオチドにレポーター色素及びクエンチャー色素を結合させることにより調製できる。例えば、プローブの5′側は、通常数個のメチレン鎖をリンカーとし、末端のリン酸基にFAM分子をリン酸エステルの形で結合させることができる。また、プローブの3′側には、下記に示す構造単位を介してアミド結合によりTAMRA分子を結合させ得る。
以下、本発明におけるプライマー対及びプローブを利用したPCRによるリアルタイム検出法について詳述する。
本発明にかかる測定方法は、前述した本発明におけるプライマー対及びプローブを利用することを必須として、他は公知のPCR法(例えば、Science, 230, 1350 (1985)参照)、RT−PCR(Genome Res., 6(10), 986 (1996)参照)等、特にリアルタイム検出法(例えばTaqMan PCR, ABI PRISM TM 7700 SEQUENCE DETECTION SYSTEM, Applied Biosystems, Ver1, June (1996)参照)に従い実施することができる。
これらの方法は、特に、本発明が対象とするヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの発現量の測定方法として、mRNAを測定する場合に有用である。この場合、例えば、特定のヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAを発現している生体組織を採取し、常法に従って全RNAを抽出し、次いで、それに対して相補性のcDNAを常法に従って合成した後、本発明におけるプライマー対とプローブとを用いてPCRを行えばよい。また、常法に従って全RNAを抽出後、本発明におけるプライマーとプローブとを用いて、直接RT−PCRを行なうこともできる。
PCR反応およびRT−PCR反応は、基本的には公知の方法に従うことができる。それらの反応条件も、公知の方法に準じて適宜決定することができ、特に制限されるものではない。具体的には、後述する実施例に示す条件を好ましく採用できる。
検出も、基本的には常法に従い、例えば、アルゴンレーザ光をPCR反応液に照射し、放射される蛍光をCCDカメラを用いて検出することにより行なうことができる。
以上のようにして、本発明にかかる測定方法によって、薬物の輸送に関与する各ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAを容易且つ迅速に、しかも各ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNA毎に測定、検出することができる。
本発明は、さらに、上記方法の実施のためのキットをも提供する。本発明のキットは、上記本発明におけるプライマー対及びプローブを含んでなる。本発明のキットは、さらに、対照として使用することのできる既知の核酸や、該核酸を測定するためのプライマー対及びプローブを含んでいてもよい。
本発明のキットによれば、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAをそのヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNA毎に測定、検出でき、ひいては、ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの定量を迅速に、精度よく行なうことができる。
以下、本発明をさらに詳しく説明するため、実施例を挙げる。
(実施例)
ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAについて以下の試験を行い、リアルタイム検出方法による検量線を作成した。
本試験で採用したリアルタイムワンステップRT−PCR法は、96ウエルを用いて、最大96の異なった反応を同時に実施して、一度に最大96の検体を測定できるものである。また、1チューブ内でRT反応とPCR反応とを行なうことができるものであり、さらに、384ウエルでの測定も可能なものである。
本定量の原理は、隣接した2種類の蛍光色素を用いて、一方の色素(リポーター色素)の蛍光波長と他方の色素(クエンチャー色素)の励起光波長との間で、波長領域が重なる場合に生じるFRETを利用したものである。すなわち、FRETを生じる2種の蛍光色素を両末端に結合させたプローブ(TaqMan probe)が、PCRで増幅した特定のヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNA種由来のcDNAにハイブリダイゼーションし、この状態でPCRの伸長反応が始まると、Taq DNAポリメラーゼが有する5’−3’エンドヌクレアーゼ活性によってTaqManプローブが加水分解される。それにより、リポーター色素が脱離し、クエンチャー色素との間の物理的距離が生じ、FRETによって抑制されていたリポーター色素の蛍光強度が増加する。この蛍光強度の増加はPCRの増幅産物の増加量に比例するため、これをPCR反応毎に測定することによって、所望の定量が可能となる。
本試験では、プローブの5’末端側にはリポーター色素としてFAMを、3’末端側にはクエンチャー色素としてTAMRAを使用した。これら各色素の結合及びこれによるTaqManプローブの作成は、文献(Genome Res., 6(10), 986 (1996))記載の方法に従って行なった。
また、各プライマー及びプローブとしてのオリゴヌクレオチドは、自動シンセサイザー(DNA/RNA合成機(ABI社製))を利用して、基質(dNTP)及び規定の試薬を用いて合成した。
検体RNAとしては、ヒトの組織プールより精製された全RNAを用いた。なお、これらの全RNAは、ヒトの各組織よりMini kit(「Rneasy(登録商標)」QIAGEN社製)を用いて調製した。
ヒトの組織プールより精製された全RNAは、RNaseフリーの水で希釈して20μg/mLとし、検量線作成用とした。以後は、50μg/mLのイーストtRNA(「Yeast tRNA」GIBCO社製)を用いて、5倍公比で希釈した。測定には5μLを使用した。
RT−PCR反応は、300nMフォーワードプライマー、900nMリバースプライマー、及び200nM TaqManプローブを含むTaqMan One-Step RT-PCR Master Mix Reagents Kit (Applied Biosystems)を用いて、20μL/チューブの系で、Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Applied Biosystems)にて行なった。
温度等の測定条件は、48℃で30分間保温した後、95℃で10分間保温し、その後、95℃で15秒間および60℃で1分間を1サイクルとして該サイクルを50回行い、各サイクルごとに蛍光強度を測定した。
下記表1〜表6に示す各ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAに対して各配列番号に示される配列のプライマー対及びプローブを用いて上記試験を行った。結果(検量線)を表7〜表12に示す。なお、表7〜表12中、定量下限の後に、検量線に使用したtotal RNAの組織名を記載した。
上記表7〜表12より、60000pg全RNA/20μL反応液量から5倍公比で希釈された検量線を作成したところ、定量下限は0.768pg全RNA/20μL反応液量から2400pg全RNA/20μL反応液量であり、検量線の相関係数(r)は全てにおいて0.99以上であった。

Claims (12)

  1. ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの測定に用いられるプローブであって、下記(1)〜(178)の各領域のそれぞれにハイブリダイズするオリゴヌクレオチドから選ばれることを特徴とするプローブ。
    (1)SLC8A1遺伝子の2344-2373の領域
    (2)SLC8A2遺伝子の233-261の領域
    (3)SLC8A3遺伝子の392-420の領域
    (4)SLC9A1遺伝子の1455-1483の領域
    (5)SLC9A2遺伝子の1266-1297の領域
    (6)SLC9A3遺伝子の1975-1999の領域
    (7)SLC9A4遺伝子の2074-2097の領域
    (8)SLC9A5遺伝子の222-247の領域
    (9)SLC9A6遺伝子の322-346の領域
    (10)SLC9A7遺伝子の1694-1717の領域
    (11)SLC9A8遺伝子の1443-1469の領域
    (12)SLC9A9遺伝子の1542-1572の領域
    (13)SLC9A10遺伝子の1076-1105の領域
    (14)SLC9A11遺伝子の3245-3277の領域
    (15)SLC11A1遺伝子の451-474の領域
    (16)SLC11A2遺伝子の407-436の領域
    (17)SLC12A1遺伝子の104-133の領域
    (18)SLC12A2遺伝子の602-632の領域
    (19)SLC12A3遺伝子の2618-2643の領域
    (20)SLC12A4遺伝子の737-767の領域
    (21)SLC12A5遺伝子の2823-2847の領域
    (22)SLC12A6遺伝子の2339-2369の領域
    (23)SLC12A7遺伝子の2689-2716の領域
    (24)SLC12A8遺伝子の1090-1115の領域
    (25)SLC12A9遺伝子の1883-1910の領域
    (26)SLC13A1遺伝子の1130-1162の領域
    (27)SLC13A2遺伝子の964-987の領域
    (28)SLC13A3遺伝子の247-274の領域
    (29)SLC13A4遺伝子の1639-1665の領域
    (30)SLC13A5遺伝子の98-124の領域
    (31)SLC14A1遺伝子の77-102の領域
    (32)SLC14A2遺伝子の562-590の領域
    (33)SLC16A1遺伝子の482-505の領域
    (34)SLC16A2遺伝子の834-860の領域
    (35)SLC16A3遺伝子の150-175の領域
    (36)SLC16A4遺伝子の339-369の領域
    (37)SLC16A5遺伝子の155-179の領域
    (38)SLC16A6遺伝子の614-637の領域
    (39)SLC16A7遺伝子の1167-1195の領域
    (40)SLC16A8遺伝子の799-819の領域
    (41)SLC16A9遺伝子の710-736の領域
    (42)SLC16A10遺伝子の299-325の領域
    (43)SLC16A11遺伝子の701-723の領域
    (44)SLC16A12遺伝子の336-365の領域
    (45)SLC16A13遺伝子の830-854の領域
    (46)SLC16A14遺伝子の93-117の領域
    (47)SLC17A1遺伝子の139-169の領域
    (48)SLC17A2遺伝子の78-106の領域
    (49)SLC17A3遺伝子の32-62の領域
    (50)SLC17A4遺伝子の1232-1262の領域
    (51)SLC17A5遺伝子の314-342の領域
    (52)SLC17A6遺伝子の656-682の領域
    (53)SLC17A7遺伝子の335-362の領域
    (54)SLC17A8遺伝子の1073-1103の領域
    (55)SLC18A1遺伝子の820-849の領域
    (56)SLC18A2遺伝子の238-270の領域
    (57)SLC18A3遺伝子の377-403の領域
    (58)SLC19A1遺伝子の102-125の領域
    (59)SLC19A2遺伝子の713-742の領域
    (60)SLC19A3遺伝子の510-538の領域
    (61)SLC20A1遺伝子の1948-1977の領域
    (62)SLC20A2遺伝子の343-372の領域
    (63)SLC23A1遺伝子の391-418の領域
    (64)SLC23A2遺伝子の1183-1210の領域
    (65)SLC23A3遺伝子の999-1026の領域
    (66)SLC24A1遺伝子の1415-1440の領域
    (67)SLC24A2遺伝子の1844-1871の領域
    (68)SLC24A3遺伝子の848-875の領域
    (69)SLC24A4遺伝子の1658-1683の領域
    (70)SLC24A5遺伝子の723-749の領域
    (71)SLC24A6遺伝子の188-211の領域
    (72)SLC25A1遺伝子の452-475の領域
    (73)SLC25A2遺伝子の485-511の領域
    (74)SLC25A3遺伝子の354-377の領域
    (75)SLC25A4遺伝子の250-275の領域
    (76)SLC25A5遺伝子の209-231の領域
    (77)SLC25A6遺伝子の732-759の領域
    (78)SLC25A7遺伝子の163-193の領域
    (79)SLC25A8遺伝子の608-633の領域
    (80)SLC25A9遺伝子の454-481の領域
    (81)SLC25A10遺伝子の607-632の領域
    (82)SLC25A11遺伝子の761-786の領域
    (83)SLC25A12遺伝子の1764-1790の領域
    (84)SLC25A13遺伝子の899-924の領域
    (85)SLC25A14遺伝子の142-169の領域
    (86)SLC25A15遺伝子の469-502の領域
    (87)SLC25A16遺伝子の449-478の領域
    (88)SLC25A17遺伝子の165-197の領域
    (89)SLC25A18遺伝子の634-656の領域
    (90)SLC25A19遺伝子の761-788の領域
    (91)SLC25A20遺伝子の347-375の領域
    (92)SLC25A21遺伝子の430-455の領域
    (93)SLC25A22遺伝子の757-782の領域
    (94)SLC25A23遺伝子の349-376の領域
    (95)SLC25A24遺伝子の725-754の領域
    (96)SLC25A25遺伝子の758-780の領域
    (97)SLC25A26遺伝子の296-322の領域
    (98)SLC25A27遺伝子の125-152の領域
    (99)SLC25A28遺伝子の366-398の領域
    (100)SLC25A29遺伝子の69-93の領域
    (101)SLC25A30遺伝子の249-279の領域
    (102)SLC25A31遺伝子の381-406の領域
    (103)SLC25A32遺伝子の417-447の領域
    (104)SLC25A33遺伝子の756-781の領域
    (105)SLC25A34遺伝子の238-262の領域
    (106)SLC25A35遺伝子の712-735の領域
    (107)SLC25A36遺伝子の388-415の領域
    (108)SLC25A37遺伝子の237-267の領域
    (109)SLC25A38遺伝子の85-111の領域
    (110)SLC25A39遺伝子の278-302の領域
    (111)SLC25A40遺伝子の522-552の領域
    (112)SLC25A41遺伝子の66-97の領域
    (113)SLC25A42遺伝子の159-185の領域
    (114)SLC25A43遺伝子の459-490の領域
    (115)SLC25A44遺伝子の29-55の領域
    (116)SLC25A45遺伝子の653-677の領域
    (117)SLC25A46遺伝子の757-787の領域
    (118)SLC26A1遺伝子の299-327の領域
    (119)SLC26A2遺伝子の480-512の領域
    (120)SLC26A3遺伝子の302-330の領域
    (121)SLC26A4遺伝子の265-294の領域
    (122)SLC26A5遺伝子の871-899の領域
    (123)SLC26A6遺伝子の620-647の領域
    (124)SLC26A7遺伝子の319-347の領域
    (125)SLC26A8遺伝子の654-681の領域
    (126)SLC26A9遺伝子の38-64の領域
    (127)SLC26A10遺伝子の191-223の領域
    (128)SLC26A11遺伝子の226-250の領域
    (129)SLC27A1遺伝子の1412-1435の領域
    (130)SLC27A2遺伝子の961-988の領域
    (131)SLC27A3遺伝子の1501-1532の領域
    (132)SLC27A4遺伝子の950-977の領域
    (133)SLC27A5遺伝子の1153-1181の領域
    (134)SLC27A6遺伝子の831-860の領域
    (135)SLC30A1遺伝子の1333-1359の領域
    (136)SLC30A2遺伝子の979-1004の領域
    (137)SLC30A3遺伝子の874-897の領域
    (138)SLC30A4遺伝子の300-336の領域
    (139)SLC30A5遺伝子の1820-1853の領域
    (140)SLC30A6遺伝子の909-934の領域
    (141)SLC30A7遺伝子の86-113の領域
    (142)SLC30A8遺伝子の532-555の領域
    (143)SLC30A9遺伝子の1215-1242の領域
    (144)SLC30A10遺伝子の649-676の領域
    (145)SLC31A1遺伝子の280-306の領域
    (146)SLC31A2遺伝子の294-319の領域
    (147)SLC32A1遺伝子の1132-1155の領域
    (148)SLC33A1遺伝子の552-577の領域
    (149)SLC34A1遺伝子の1274-1297の領域
    (150)SLC34A2遺伝子の1030-1055の領域
    (151)SLC34A3遺伝子の489-514の領域
    (152)SLC35A1遺伝子の439-469の領域
    (153)SLC35A2遺伝子の355-387の領域
    (154)SLC35A3遺伝子の493-528の領域
    (155)SLC35A4遺伝子の325-349の領域
    (156)SLC35A5遺伝子の1145-1175の領域
    (157)SLC37A1遺伝子の390-412の領域
    (158)SLC37A2遺伝子の121-150の領域
    (159)SLC37A3遺伝子の214-240の領域
    (160)SLC37A4遺伝子の169-196の領域
    (161)SLC39A1遺伝子の396-420の領域
    (162)SLC39A2遺伝子の194-221の領域
    (163)SLC39A3遺伝子の257-278の領域
    (164)SLC39A4遺伝子の515-539の領域
    (165)SLC39A5遺伝子の454-481の領域
    (166)SLC39A6遺伝子の629-655の領域
    (167)SLC39A7遺伝子の389-417の領域
    (168)SLC39A8遺伝子の296-325の領域
    (169)SLC39A9遺伝子の401-429の領域
    (170)SLC39A10遺伝子の1678-1702の領域
    (171)SLC39A11遺伝子の295-320の領域
    (172)SLC39A12遺伝子の537-564の領域
    (173)SLC39A13遺伝子の754-778の領域
    (174)SLC39A14遺伝子の595-622の領域
    (175)SLC40A1遺伝子の1343-1372の領域
    (176)SLC41A1遺伝子の737-760の領域
    (177)SLC41A2遺伝子の884-909の領域
    (178)SLC41A3遺伝子の965-990の領域
  2. リポーター色素とクエンチャー色素とが結合している請求項1に記載のプローブ。
  3. 塩基配列の長さが20〜45である請求項1または2に記載のプローブ。
  4. 配列番号1〜配列番号178に示される配列のいずれかを含むものである請求項1〜3のいずれかに記載のプローブ。
  5. 配列番号1〜配列番号178に示される配列のいずれかである請求項1〜3のいずれかに記載のプローブ。
  6. ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードする遺伝子の各領域にそれぞれハイブリダイズするオリゴヌクレオチドからなるフォワードプライマーとリバースプライマーとのプライマー対およびプローブのセットの少なくとも1つを含むヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの検出および定量キットであって、上記両プライマー対およびプローブが下記(1)〜(178)に示される遺伝子の各領域にそれぞれハイブリダイズし得るオリゴヌクレオチドであることを特徴とするキット。
    (1)プライマー対;SLC8A1遺伝子の2311-2331領域及び2407-2389領域、プローブ;2344-2373領域
    (2)プライマー対;SLC8A2遺伝子の211-230領域及び280-264領域、プローブ;233-261領域
    (3)プライマー対;SLC8A3遺伝子の368-388領域及び478-458領域、プローブ;392-420領域
    (4)プライマー対;SLC9A1遺伝子の1433-1453領域及び1547-1527領域、プローブ;1455-1483領域
    (5)プライマー対;SLC9A2遺伝子の1240-1261領域及び1328-1308領域、プローブ;1266-1297領域
    (6)プライマー対;SLC9A3遺伝子の1955-1973領域及び2029-2009領域、プローブ;1975-1999領域
    (7)プライマー対;SLC9A4遺伝子の2043-2063領域及び2124-2104領域、プローブ;2074-2097領域
    (8)プライマー対;SLC9A5遺伝子の191-213領域及び273-254領域、プローブ;222-247領域
    (9)プライマー対;SLC9A6遺伝子の302-320領域及び368-348領域、プローブ;322-346領域
    (10)プライマー対;SLC9A7遺伝子の1672-1692領域及び1742-1722領域、プローブ;1694-1717領域
    (11)プライマー対;SLC9A8遺伝子の1412-1430領域及び1506-1486領域、プローブ;1443-1469領域
    (12)プライマー対;SLC9A9遺伝子の1519-1540領域及び1600-1576領域、プローブ;1542-1572領域
    (13)プライマー対;SLC9A10遺伝子の1047-1067領域及び1127-1108領域、プローブ;1076-1105領域
    (14)プライマー対;SLC9A11遺伝子の3219-3239領域及び3330-3310領域、プローブ;3245-3277領域
    (15)プライマー対;SLC11A1遺伝子の431-449領域及び544-524領域、プローブ;451-474領域
    (16)プライマー対;SLC11A2遺伝子の383-403領域及び489-469領域、プローブ;407-436領域
    (17)プライマー対;SLC12A1遺伝子の81-101領域及び163-143領域、プローブ;104-133領域
    (18)プライマー対;SLC12A2遺伝子の580-600領域及び661-643領域、プローブ;602-632領域
    (19)プライマー対;SLC12A3遺伝子の2597-2616領域及び2665-2645領域、プローブ;2618-2643領域
    (20)プライマー対;SLC12A4遺伝子の715-735領域及び823-803領域、プローブ;737-767領域
    (21)プライマー対;SLC12A5遺伝子の2798-2819領域及び2889-2868領域、プローブ;2823-2847領域
    (22)プライマー対;SLC12A6遺伝子の2319-2337領域及び2391-2371領域、プローブ;2339-2369領域
    (23)プライマー対;SLC12A7遺伝子の2666-2686領域及び2749-2729領域、プローブ;2689-2716領域
    (24)プライマー対;SLC12A8遺伝子の1067-1085領域及び1144-1123領域、プローブ;1090-1115領域
    (25)プライマー対;SLC12A9遺伝子の1862-1880領域及び1931-1913領域、プローブ;1883-1910領域
    (26)プライマー対;SLC13A1遺伝子の1105-1125領域及び1201-1178領域、プローブ;1130-1162領域
    (27)プライマー対;SLC13A2遺伝子の935-953領域及び1011-991領域、プローブ;964-987領域
    (28)プライマー対;SLC13A3遺伝子の227-245領域及び350-331領域、プローブ;247-274領域
    (29)プライマー対;SLC13A4遺伝子の1614-1634領域及び1685-1667領域、プローブ;1639-1665領域
    (30)プライマー対;SLC13A5遺伝子の72-92領域及び152-133領域、プローブ;98-124領域
    (31)プライマー対;SLC14A1遺伝子の56-75領域及び145-125領域、プローブ;77-102領域
    (32)プライマー対;SLC14A2遺伝子の542-560領域及び637-615領域、プローブ;562-590領域
    (33)プライマー対;SLC16A1遺伝子の459-480領域及び593-575領域、プローブ;482-505領域
    (34)プライマー対;SLC16A2遺伝子の810-829領域及び931-913領域、プローブ;834-860領域
    (35)プライマー対;SLC16A3遺伝子の126-148領域及び199-180領域、プローブ;150-175領域
    (36)プライマー対;SLC16A4遺伝子の314-334領域及び404-384領域、プローブ;339-369領域
    (37)プライマー対;SLC16A5遺伝子の137-153領域及び198-181領域、プローブ;155-179領域
    (38)プライマー対;SLC16A6遺伝子の592-612領域及び670-651領域、プローブ;614-637領域
    (39)プライマー対;SLC16A7遺伝子の1145-1165領域及び1236-1216領域、プローブ;1167-1195領域
    (40)プライマー対;SLC16A8遺伝子の778-796領域及び840-821領域、プローブ;799-819領域
    (41)プライマー対;SLC16A9遺伝子の681-706領域及び761-738領域、プローブ;710-736領域
    (42)プライマー対;SLC16A10遺伝子の278-296領域及び404-384領域、プローブ;299-325領域
    (43)プライマー対;SLC16A11遺伝子の681-699領域及び799-779領域、プローブ;701-723領域
    (44)プライマー対;SLC16A12遺伝子の302-322領域及び449-429領域、プローブ;336-365領域
    (45)プライマー対;SLC16A13遺伝子の810-828領域及び898-878領域、プローブ;830-854領域
    (46)プライマー対;SLC16A14遺伝子の72-90領域及び146-127領域、プローブ;93-117領域
    (47)プライマー対;SLC17A1遺伝子の115-135領域及び194-174領域、プローブ;139-169領域
    (48)プライマー対;SLC17A2遺伝子の56-76領域及び203-184領域、プローブ;78-106領域
    (49)プライマー対;SLC17A3遺伝子の10-30領域及び88-68領域、プローブ;32-62領域
    (50)プライマー対;SLC17A4遺伝子の1207-1227領域及び1322-1302領域、プローブ;1232-1262領域
    (51)プライマー対;SLC17A5遺伝子の290-310領域及び380-360領域、プローブ;314-342領域
    (52)プライマー対;SLC17A6遺伝子の626-650領域及び706-686領域、プローブ;656-682領域
    (53)プライマー対;SLC17A7遺伝子の312-330領域及び388-368領域、プローブ;335-362領域
    (54)プライマー対;SLC17A8遺伝子の1051-1071領域及び1126-1107領域、プローブ;1073-1103領域
    (55)プライマー対;SLC18A1遺伝子の797-816領域及び874-855領域、プローブ;820-849領域
    (56)プライマー対;SLC18A2遺伝子の215-236領域及び294-271領域、プローブ;238-270領域
    (57)プライマー対;SLC18A3遺伝子の348-368領域及び453-433領域、プローブ;377-403領域
    (58)プライマー対;SLC19A1遺伝子の80-100領域及び183-165領域、プローブ;102-125領域
    (59)プライマー対;SLC19A2遺伝子の684-705領域及び764-745領域、プローブ;713-742領域
    (60)プライマー対;SLC19A3遺伝子の489-508領域及び594-575領域、プローブ;510-538領域
    (61)プライマー対;SLC20A1遺伝子の1925-1945領域及び2003-1983領域、プローブ;1948-1977領域
    (62)プライマー対;SLC20A2遺伝子の320-340領域及び394-376領域、プローブ;343-372領域
    (63)プライマー対;SLC23A1遺伝子の371-389領域及び448-426領域、プローブ;391-418領域
    (64)プライマー対;SLC23A2遺伝子の1162-1181領域及び1256-1236領域、プローブ;1183-1210領域
    (65)プライマー対;SLC23A3遺伝子の973-997領域及び1060-1042領域、プローブ;999-1026領域
    (66)プライマー対;SLC24A1遺伝子の1392-1409領域及び1477-1458領域、プローブ;1415-1440領域
    (67)プライマー対;SLC24A2遺伝子の1815-1835領域及び1899-1879領域、プローブ;1844-1871領域
    (68)プライマー対;SLC24A3遺伝子の819-838領域及び919-900領域、プローブ;848-875領域
    (69)プライマー対;SLC24A4遺伝子の1623-1643領域及び1719-1700領域、プローブ;1658-1683領域
    (70)プライマー対;SLC24A5遺伝子の697-717領域及び779-760領域、プローブ;723-749領域
    (71)プライマー対;SLC24A6遺伝子の165-185領域及び234-216領域、プローブ;188-211領域
    (72)プライマー対;SLC25A1遺伝子の427-450領域及び513-493領域、プローブ;452-475領域
    (73)プライマー対;SLC25A2遺伝子の459-480領域及び601-583領域、プローブ;485-511領域
    (74)プライマー対;SLC25A3遺伝子の329-352領域及び399-379領域、プローブ;354-377領域
    (75)プライマー対;SLC25A4遺伝子の228-248領域及び313-293領域、プローブ;250-275領域
    (76)プライマー対;SLC25A5遺伝子の187-207領域及269-249び領域、プローブ;209-231領域
    (77)プライマー対;SLC25A6遺伝子の712-730領域及び782-762領域、プローブ;732-759領域
    (78)プライマー対;SLC25A7遺伝子の140-160領域及び224-204領域、プローブ;163-193領域
    (79)プライマー対;SLC25A8遺伝子の571-591領域及び669-649領域、プローブ;608-633領域
    (80)プライマー対;SLC25A9遺伝子の430-450領域及び552-533領域、プローブ;454-481領域
    (81)プライマー対;SLC25A10遺伝子の582-605領域及び718-697領域、プローブ;607-632領域
    (82)プライマー対;SLC25A11遺伝子の740-759領域及び817-797領域、プローブ;761-786領域
    (83)プライマー対;SLC25A12遺伝子の1742-1762領域及び1863-1843領域、プローブ;1764-1790領域
    (84)プライマー対;SLC25A13遺伝子の878-897領域及び987-969領域、プローブ;899-924領域
    (85)プライマー対;SLC25A14遺伝子の122-140領域及び202-181領域、プローブ;142-169領域
    (86)プライマー対;SLC25A15遺伝子の438-459領域及び536-513領域、プローブ;469-502領域
    (87)プライマー対;SLC25A16遺伝子の418-443領域及び508-485領域、プローブ;449-478領域
    (88)プライマー対;SLC25A17遺伝子の133-154領域及び226-203領域、プローブ;165-197領域
    (89)プライマー対;SLC25A18遺伝子の603-622領域及び704-685領域、プローブ;634-656領域
    (90)プライマー対;SLC25A19遺伝子の741-759領域及び812-794領域、プローブ;761-788領域
    (91)プライマー対;SLC25A20遺伝子の326-345領域及び409-390領域、プローブ;347-375領域
    (92)プライマー対;SLC25A21遺伝子の409-428領域及び490-470領域、プローブ;430-455領域
    (93)プライマー対;SLC25A22遺伝子の730-750領域及び838-822領域、プローブ;757-782領域
    (94)プライマー対;SLC25A23遺伝子の324-342領域及び397-379領域、プローブ;349-376領域
    (95)プライマー対;SLC25A24遺伝子の702-723領域及び789-767領域、プローブ;725-754領域
    (96)プライマー対;SLC25A25遺伝子の738-756領域及び814-796領域、プローブ;758-780領域
    (97)プライマー対;SLC25A26遺伝子の271-291領域及び356-334領域、プローブ;296-322領域
    (98)プライマー対;SLC25A27遺伝子の105-123領域及び172-153領域、プローブ;125-152領域
    (99)プライマー対;SLC25A28遺伝子の344-364領域及び439-419領域、プローブ;366-398領域
    (100)プライマー対;SLC25A29遺伝子の49-67領域及び163-143領域、プローブ;69-93領域
    (101)プライマー対;SLC25A30遺伝子の227-247領域及び302-282領域、プローブ;249-279領域
    (102)プライマー対;SLC25A31遺伝子の352-375領域及び452-431領域、プローブ;381-406領域
    (103)プライマー対;SLC25A32遺伝子の394-414領域及び498-475領域、プローブ;417-447領域
    (104)プライマー対;SLC25A33遺伝子の736-754領域及び806-786領域、プローブ;756-781領域
    (105)プライマー対;SLC25A34遺伝子の218-232領域及び320-304領域、プローブ;238-262領域
    (106)プライマー対;SLC25A35遺伝子の688-708領域及び773-753領域、プローブ;712-735領域
    (107)プライマー対;SLC25A36遺伝子の365-384領域及び452-432領域、プローブ;388-415領域
    (108)プライマー対;SLC25A37遺伝子の214-234領域及び288-269領域、プローブ;237-267領域
    (109)プライマー対;SLC25A38遺伝子の62-82領域及び138-118領域、プローブ;85-111領域
    (110)プライマー対;SLC25A39遺伝子の255-274領域及び327-308領域、プローブ;278-302領域
    (111)プライマー対;SLC25A40遺伝子の497-519領域及び588-570領域、プローブ;522-552領域
    (112)プライマー対;SLC25A41遺伝子の44-64領域及び136-116領域、プローブ;66-97領域
    (113)プライマー対;SLC25A42遺伝子の138-156領域及び239-218領域、プローブ;159-185領域
    (114)プライマー対;SLC25A43遺伝子の437-457領域及び583-563領域、プローブ;459-490領域
    (115)プライマー対;SLC25A44遺伝子の6-26領域及び80-60領域、プローブ;29-55領域
    (116)プライマー対;SLC25A45遺伝子の625-643領域及び716-694領域、プローブ;653-677領域
    (117)プライマー対;SLC25A46遺伝子の733-753領域及び810-790領域、プローブ;757-787領域
    (118)プライマー対;SLC26A1遺伝子の261-280領域及び378-360領域、プローブ;299-327領域
    (119)プライマー対;SLC26A2遺伝子の460-478領域及び575-555領域、プローブ;480-512領域
    (120)プライマー対;SLC26A3遺伝子の281-300領域及び389-369領域、プローブ;302-330領域
    (121)プライマー対;SLC26A4遺伝子の242-262領域及び348-328領域、プローブ;265-294領域
    (122)プライマー対;SLC26A5遺伝子の853-869領域及び973-952領域、プローブ;871-899領域
    (123)プライマー対;SLC26A6遺伝子の600-618領域及び685-665領域、プローブ;620-647領域
    (124)プライマー対;SLC26A7遺伝子の294-312領域及び412-394領域、プローブ;319-347領域
    (125)プライマー対;SLC26A8遺伝子の634-652領域及び702-682領域、プローブ;654-681領域
    (126)プライマー対;SLC26A9遺伝子の17-36領域及び96-76領域、プローブ;38-64領域
    (127)プライマー対;SLC26A10遺伝子の166-189領域及び252-231領域、プローブ;191-223領域
    (128)プライマー対;SLC26A11遺伝子の198-217領域及び274-255領域、プローブ;226-250領域
    (129)プライマー対;SLC27A1遺伝子の1384-1402領域及び1472-1454領域、プローブ;1412-1435領域
    (130)プライマー対;SLC27A2遺伝子の936-956領域及び1029-1010領域、プローブ;961-988領域
    (131)プライマー対;SLC27A3遺伝子の1479-1499領域及び1553-1534領域、プローブ;1501-1532領域
    (132)プライマー対;SLC27A4遺伝子の921-941領域及び1016-997領域、プローブ;950-977領域
    (133)プライマー対;SLC27A5遺伝子の1123-1144領域及び1204-1184領域、プローブ;1153-1181領域
    (134)プライマー対;SLC27A6遺伝子の805-825領域及び891-871領域、プローブ;831-860領域
    (135)プライマー対;SLC30A1遺伝子の1311-1331領域及び1377-1359領域、プローブ;1333-1359領域
    (136)プライマー対;SLC30A2遺伝子の948-968領域及び1046-1026領域、プローブ;979-1004領域
    (137)プライマー対;SLC30A3遺伝子の852-872領域及び938-920領域、プローブ;874-897領域
    (138)プライマー対;SLC30A4遺伝子の275-295領域及び362-342領域、プローブ;300-336領域
    (139)プライマー対;SLC30A5遺伝子の1798-1818領域及び1876-1856領域、プローブ;1820-1853領域
    (140)プライマー対;SLC30A6遺伝子の880-899領域及び959-939領域、プローブ;909-934領域
    (141)プライマー対;SLC30A7遺伝子の64-84領域及び137-117領域、プローブ;86-113領域
    (142)プライマー対;SLC30A8遺伝子の510-530領域及び614-596領域、プローブ;532-555領域
    (143)プライマー対;SLC30A9遺伝子の1192-1212領域及び1307-1287領域、プローブ;1215-1242領域
    (144)プライマー対;SLC30A10遺伝子の623-641領域及び721-696領域、プローブ;649-676領域
    (145)プライマー対;SLC31A1遺伝子の253-273領域及び386-368領域、プローブ;280-306領域
    (146)プライマー対;SLC31A2遺伝子の272-292領域及び377-357領域、プローブ;294-319領域
    (147)プライマー対;SLC32A1遺伝子の1103-1123領域及び1236-1216領域、プローブ;1132-1155領域
    (148)プライマー対;SLC33A1遺伝子の529-549領域及び634-615領域、プローブ;552-577領域
    (149)プライマー対;SLC34A1遺伝子の1252-1272領域及び1319-1300領域、プローブ;1274-1297領域
    (150)プライマー対;SLC34A2遺伝子の1005-1028領域及び1085-1066領域、プローブ;1030-1055領域
    (151)プライマー対;SLC34A3遺伝子の463-483領域及び557-539領域、プローブ;489-514領域
    (152)プライマー対;SLC35A1遺伝子の411-431領域及び496-476領域、プローブ;439-469領域
    (153)プライマー対;SLC35A2遺伝子の325-345領域及び461-442領域、プローブ;355-387領域
    (154)プライマー対;SLC35A3遺伝子の468-490領域及び550-530領域、プローブ;493-528領域
    (155)プライマー対;SLC35A4遺伝子の301-323領域及び382-362領域、プローブ;325-349領域
    (156)プライマー対;SLC35A5遺伝子の1118-1137領域及び1206-1188領域、プローブ;1145-1175領域
    (157)プライマー対;SLC37A1遺伝子の366-383領域及び431-414領域、プローブ;390-412領域
    (158)プライマー対;SLC37A2遺伝子の98-118領域及び176-156領域、プローブ;121-150領域
    (159)プライマー対;SLC37A3遺伝子の193-212領域及び261-242領域、プローブ;214-240領域
    (160)プライマー対;SLC37A4遺伝子の149-167領域及び274-256領域、プローブ;169-196領域
    (161)プライマー対;SLC39A1遺伝子の374-394領域及び487-471領域、プローブ;396-420領域
    (162)プライマー対;SLC39A2遺伝子の172-192領域及び258-238領域、プローブ;194-221領域
    (163)プライマー対;SLC39A3遺伝子の235-254領域及び322-303領域、プローブ;257-278領域
    (164)プライマー対;SLC39A4遺伝子の490-508領域及び583-565領域、プローブ;515-539領域
    (165)プライマー対;SLC39A5遺伝子の434-452領域及び504-485領域、プローブ;454-481領域
    (166)プライマー対;SLC39A6遺伝子の607-627領域及び679-661領域、プローブ;629-655領域
    (167)プライマー対;SLC39A7遺伝子の369-387領域及び438-420領域、プローブ;389-417領域
    (168)プライマー対;SLC39A8遺伝子の262-284領域及び360-343領域、プローブ;296-325領域
    (169)プライマー対;SLC39A9遺伝子の375-395領域及び449-431領域、プローブ;401-429領域
    (170)プライマー対;SLC39A10遺伝子の1653-1676領域及び1732-1708領域、プローブ;1678-1702領域
    (171)プライマー対;SLC39A11遺伝子の260-280領域及び355-335領域、プローブ;295-320領域
    (172)プライマー対;SLC39A12遺伝子の512-535領域及び605-584領域、プローブ;537-564領域
    (173)プライマー対;SLC39A13遺伝子の725-744領域及び798-780領域、プローブ;754-778領域
    (174)プライマー対;SLC39A14遺伝子の571-589領域及び696-677領域、プローブ;595-622領域
    (175)プライマー対;SLC40A1遺伝子の1320-1340領域及び1392-1374領域、プローブ;1343-1372領域
    (176)プライマー対;SLC41A1遺伝子の716-735領域及び844-823領域、プローブ;737-760領域
    (177)プライマー対;SLC41A2遺伝子の855-875領域及び944-926領域、プローブ;884-909領域
    (178)プライマー対;SLC41A3遺伝子の944-963領域及び1018-998領域、プローブ;965-990領域
  7. プローブが、更にリポーター色素とクエンチャー色素とを結合させたものである請求項6に記載のキット。
  8. 下記(1)〜(178)に示されるセットの、各配列番号で示される配列を含むオリゴヌクレオチドからなるプライマー対とプローブとの組合せから選ばれる、請求項6または7に記載のキット。
    (1)プライマー対;配列番号179及び180、プローブ;配列番号1
    (2)プライマー対;配列番号181及び182、プローブ;配列番号2
    (3)プライマー対;配列番号183及び184、プローブ;配列番号3
    (4)プライマー対;配列番号185及び186、プローブ;配列番号4
    (5)プライマー対;配列番号187及び188、プローブ;配列番号5
    (6)プライマー対;配列番号189及び190、プローブ;配列番号6
    (7)プライマー対;配列番号191及び192、プローブ;配列番号7
    (8)プライマー対;配列番号193及び194、プローブ;配列番号8
    (9)プライマー対;配列番号195及び196、プローブ;配列番号9
    (10)プライマー対;配列番号197及び198、プローブ;配列番号10
    (11)プライマー対;配列番号199及び200、プローブ;配列番号11
    (12)プライマー対;配列番号201及び202、プローブ;配列番号12
    (13)プライマー対;配列番号203及び204、プローブ;配列番号13
    (14)プライマー対;配列番号205及び206、プローブ;配列番号14
    (15)プライマー対;配列番号207及び208、プローブ;配列番号15
    (16)プライマー対;配列番号209及び210、プローブ;配列番号16
    (17)プライマー対;配列番号211及び212、プローブ;配列番号17
    (18)プライマー対;配列番号213及び214、プローブ;配列番号18
    (19)プライマー対;配列番号215及び216、プローブ;配列番号19
    (20)プライマー対;配列番号217及び218、プローブ;配列番号20
    (21)プライマー対;配列番号219及び220、プローブ;配列番号21
    (22)プライマー対;配列番号221及び222、プローブ;配列番号22
    (23)プライマー対;配列番号223及び224、プローブ;配列番号23
    (24)プライマー対;配列番号225及び226、プローブ;配列番号24
    (25)プライマー対;配列番号227及び228、プローブ;配列番号25
    (26)プライマー対;配列番号229及び230、プローブ;配列番号26
    (27)プライマー対;配列番号231及び232、プローブ;配列番号27
    (28)プライマー対;配列番号233及び234、プローブ;配列番号28
    (29)プライマー対;配列番号235及び236、プローブ;配列番号29
    (30)プライマー対;配列番号237及び238、プローブ;配列番号30
    (31)プライマー対;配列番号239及び240、プローブ;配列番号31
    (32)プライマー対;配列番号241及び242、プローブ;配列番号32
    (33)プライマー対;配列番号243及び244、プローブ;配列番号33
    (34)プライマー対;配列番号245及び246、プローブ;配列番号34
    (35)プライマー対;配列番号247及び248、プローブ;配列番号35
    (36)プライマー対;配列番号249及び250、プローブ;配列番号36
    (37)プライマー対;配列番号251及び252、プローブ;配列番号37
    (38)プライマー対;配列番号253及び254、プローブ;配列番号38
    (39)プライマー対;配列番号255及び256、プローブ;配列番号39
    (40)プライマー対;配列番号257及び258、プローブ;配列番号40
    (41)プライマー対;配列番号259及び260、プローブ;配列番号41
    (42)プライマー対;配列番号261及び262、プローブ;配列番号42
    (43)プライマー対;配列番号263及び264、プローブ;配列番号43
    (44)プライマー対;配列番号265及び266、プローブ;配列番号44
    (45)プライマー対;配列番号267及び268、プローブ;配列番号45
    (46)プライマー対;配列番号269及び270、プローブ;配列番号46
    (47)プライマー対;配列番号271及び272、プローブ;配列番号47
    (48)プライマー対;配列番号273及び274、プローブ;配列番号48
    (49)プライマー対;配列番号275及び276、プローブ;配列番号49
    (50)プライマー対;配列番号277及び278、プローブ;配列番号50
    (51)プライマー対;配列番号279及び280、プローブ;配列番号51
    (52)プライマー対;配列番号281及び282、プローブ;配列番号52
    (53)プライマー対;配列番号283及び284、プローブ;配列番号53
    (54)プライマー対;配列番号285及び286、プローブ;配列番号54
    (55)プライマー対;配列番号287及び288、プローブ;配列番号55
    (56)プライマー対;配列番号289及び290、プローブ;配列番号56
    (57)プライマー対;配列番号291及び292、プローブ;配列番号57
    (58)プライマー対;配列番号293及び294、プローブ;配列番号58
    (59)プライマー対;配列番号295及び296、プローブ;配列番号59
    (60)プライマー対;配列番号297及び298、プローブ;配列番号60
    (61)プライマー対;配列番号299及び300、プローブ;配列番号61
    (62)プライマー対;配列番号301及び302、プローブ;配列番号62
    (63)プライマー対;配列番号303及び304、プローブ;配列番号63
    (64)プライマー対;配列番号305及び306、プローブ;配列番号64
    (65)プライマー対;配列番号307及び308、プローブ;配列番号65
    (66)プライマー対;配列番号309及び310、プローブ;配列番号66
    (67)プライマー対;配列番号311及び312、プローブ;配列番号67
    (68)プライマー対;配列番号313及び314、プローブ;配列番号68
    (69)プライマー対;配列番号315及び316、プローブ;配列番号69
    (70)プライマー対;配列番号317及び318、プローブ;配列番号70
    (71)プライマー対;配列番号319及び320、プローブ;配列番号71
    (72)プライマー対;配列番号321及び322、プローブ;配列番号72
    (73)プライマー対;配列番号323及び324、プローブ;配列番号73
    (74)プライマー対;配列番号325及び326、プローブ;配列番号74
    (75)プライマー対;配列番号327及び328、プローブ;配列番号75
    (76)プライマー対;配列番号329及び330、プローブ;配列番号76
    (77)プライマー対;配列番号331及び332、プローブ;配列番号77
    (78)プライマー対;配列番号333及び334、プローブ;配列番号78
    (79)プライマー対;配列番号335及び336、プローブ;配列番号79
    (80)プライマー対;配列番号337及び338、プローブ;配列番号80
    (81)プライマー対;配列番号339及び340、プローブ;配列番号81
    (82)プライマー対;配列番号341及び342、プローブ;配列番号82
    (83)プライマー対;配列番号343及び344、プローブ;配列番号83
    (84)プライマー対;配列番号345及び346、プローブ;配列番号84
    (85)プライマー対;配列番号347及び348、プローブ;配列番号85
    (86)プライマー対;配列番号349及び350、プローブ;配列番号86
    (87)プライマー対;配列番号351及び352、プローブ;配列番号87
    (88)プライマー対;配列番号353及び354、プローブ;配列番号88
    (89)プライマー対;配列番号355及び356、プローブ;配列番号89
    (90)プライマー対;配列番号357及び358、プローブ;配列番号90
    (91)プライマー対;配列番号359及び360、プローブ;配列番号91
    (92)プライマー対;配列番号361及び362、プローブ;配列番号92
    (93)プライマー対;配列番号363及び364、プローブ;配列番号93
    (94)プライマー対;配列番号365及び366、プローブ;配列番号94
    (95)プライマー対;配列番号367及び368、プローブ;配列番号95
    (96)プライマー対;配列番号369及び370、プローブ;配列番号96
    (97)プライマー対;配列番号371及び372、プローブ;配列番号97
    (98)プライマー対;配列番号373及び374、プローブ;配列番号98
    (99)プライマー対;配列番号375及び376、プローブ;配列番号99
    (100)プライマー対;配列番号377及び378、プローブ;配列番号100
    (101)プライマー対;配列番号379及び380、プローブ;配列番号101
    (102)プライマー対;配列番号381及び382、プローブ;配列番号102
    (103)プライマー対;配列番号383及び384、プローブ;配列番号103
    (104)プライマー対;配列番号385及び386、プローブ;配列番号104
    (105)プライマー対;配列番号387及び388、プローブ;配列番号105
    (106)プライマー対;配列番号389及び390、プローブ;配列番号106
    (107)プライマー対;配列番号391及び392、プローブ;配列番号107
    (108)プライマー対;配列番号393及び394、プローブ;配列番号108
    (109)プライマー対;配列番号395及び396、プローブ;配列番号109
    (110)プライマー対;配列番号397及び398、プローブ;配列番号110
    (111)プライマー対;配列番号399及び400、プローブ;配列番号111
    (112)プライマー対;配列番号401及び402、プローブ;配列番号112
    (113)プライマー対;配列番号403及び404、プローブ;配列番号113
    (114)プライマー対;配列番号405及び406、プローブ;配列番号114
    (115)プライマー対;配列番号407及び408、プローブ;配列番号115
    (116)プライマー対;配列番号409及び410、プローブ;配列番号116
    (117)プライマー対;配列番号411及び412、プローブ;配列番号117
    (118)プライマー対;配列番号413及び414、プローブ;配列番号118
    (119)プライマー対;配列番号415及び416、プローブ;配列番号119
    (120)プライマー対;配列番号417及び418、プローブ;配列番号120
    (121)プライマー対;配列番号419及び420、プローブ;配列番号121
    (122)プライマー対;配列番号421及び422、プローブ;配列番号122
    (123)プライマー対;配列番号423及び424、プローブ;配列番号123
    (124)プライマー対;配列番号425及び426、プローブ;配列番号124
    (125)プライマー対;配列番号427及び428、プローブ;配列番号125
    (126)プライマー対;配列番号429及び430、プローブ;配列番号126
    (127)プライマー対;配列番号431及び432、プローブ;配列番号127
    (128)プライマー対;配列番号433及び434、プローブ;配列番号128
    (129)プライマー対;配列番号435及び436、プローブ;配列番号129
    (130)プライマー対;配列番号437及び438、プローブ;配列番号130
    (131)プライマー対;配列番号439及び440、プローブ;配列番号131
    (132)プライマー対;配列番号441及び442、プローブ;配列番号132
    (133)プライマー対;配列番号443及び444、プローブ;配列番号133
    (134)プライマー対;配列番号445及び446、プローブ;配列番号134
    (135)プライマー対;配列番号447及び448、プローブ;配列番号135
    (136)プライマー対;配列番号449及び450、プローブ;配列番号136
    (137)プライマー対;配列番号451及び452、プローブ;配列番号137
    (138)プライマー対;配列番号453及び454、プローブ;配列番号138
    (139)プライマー対;配列番号455及び456、プローブ;配列番号139
    (140)プライマー対;配列番号457及び458、プローブ;配列番号140
    (141)プライマー対;配列番号459及び460、プローブ;配列番号141
    (142)プライマー対;配列番号461及び462、プローブ;配列番号142
    (143)プライマー対;配列番号463及び464、プローブ;配列番号143
    (144)プライマー対;配列番号465及び466、プローブ;配列番号144
    (145)プライマー対;配列番号467及び468、プローブ;配列番号145
    (146)プライマー対;配列番号469及び470、プローブ;配列番号146
    (147)プライマー対;配列番号471及び472、プローブ;配列番号147
    (148)プライマー対;配列番号473及び474、プローブ;配列番号148
    (149)プライマー対;配列番号475及び476、プローブ;配列番号149
    (150)プライマー対;配列番号477及び478、プローブ;配列番号150
    (151)プライマー対;配列番号479及び480、プローブ;配列番号151
    (152)プライマー対;配列番号481及び482、プローブ;配列番号152
    (153)プライマー対;配列番号483及び484、プローブ;配列番号153
    (154)プライマー対;配列番号485及び486、プローブ;配列番号154
    (155)プライマー対;配列番号487及び488、プローブ;配列番号155
    (156)プライマー対;配列番号489及び490、プローブ;配列番号156
    (157)プライマー対;配列番号491及び492、プローブ;配列番号157
    (158)プライマー対;配列番号493及び494、プローブ;配列番号158
    (159)プライマー対;配列番号495及び496、プローブ;配列番号159
    (160)プライマー対;配列番号497及び498、プローブ;配列番号160
    (161)プライマー対;配列番号499及び500、プローブ;配列番号161
    (162)プライマー対;配列番号501及び502、プローブ;配列番号162
    (163)プライマー対;配列番号503及び504、プローブ;配列番号163
    (164)プライマー対;配列番号505及び506、プローブ;配列番号164
    (165)プライマー対;配列番号507及び508、プローブ;配列番号165
    (166)プライマー対;配列番号509及び510、プローブ;配列番号166
    (167)プライマー対;配列番号511及び512、プローブ;配列番号167
    (168)プライマー対;配列番号513及び514、プローブ;配列番号168
    (169)プライマー対;配列番号515及び516、プローブ;配列番号169
    (170)プライマー対;配列番号517及び518、プローブ;配列番号170
    (171)プライマー対;配列番号519及び520、プローブ;配列番号171
    (172)プライマー対;配列番号521及び522、プローブ;配列番号172
    (173)プライマー対;配列番号523及び524、プローブ;配列番号173
    (174)プライマー対;配列番号525及び526、プローブ;配列番号174
    (175)プライマー対;配列番号527及び528、プローブ;配列番号175
    (176)プライマー対;配列番号529及び530、プローブ;配列番号176
    (177)プライマー対;配列番号531及び532、プローブ;配列番号177
    (178)プライマー対;配列番号533及び534、プローブ;配列番号178
  9. 請求項8に記載のキットであって、(1)のセットがSLC8A1の測定用で、(2)のセットがSLC8A2の測定用で、(3)のセットがSLC8A3の測定用で、(4)のセットがSLC9A1の測定用で、(5)のセットがSLC9A2の測定用で、(6)のセットがSLC9A3の測定用で、(7)のセットがSLC9A4の測定用で、(8)のセットがSLC9A5の測定用で、(9)のセットがSLC9A6の測定用で、(10)のセットがSLC9A7の測定用で、(11)のセットがSLC9A8の測定用で、(12)のセットがSLC9A9の測定用で、(13)のセットがSLC9A10の測定用で、(14)のセットがSLC9A11の測定用で、(15)のセットがSLC11A1の測定用で、(16)のセットがSLC11A2の測定用で、(17)のセットがSLC12A1の測定用で、(18)のセットがSLC12A2の測定用で、(19)のセットがSLC12A3の測定用で、(20)のセットがSLC12A4の測定用で、(21)のセットがSLC12A5の測定用で、(22)のセットがSLC12A6の測定用で、(23)のセットがSLC12A7の測定用で、(24)のセットがSLC12A8の測定用で、(25)のセットがSLC12A9の測定用で、(26)のセットがSLC13A1の測定用で、(27)のセットがSLC13A2の測定用で、(28)のセットがSLC13A3の測定用で、(29)のセットがSLC13A4の測定用で、(30)のセットがSLC13A5の測定用で、(31)のセットがSLC14A1の測定用で、(32)のセットがSLC14A2の測定用で、(33)のセットがSLC16A1の測定用で、(34)のセットがSLC16A2の測定用で、(35)のセットがSLC16A3の測定用で、(36)のセットがSLC16A4の測定用で、(37)のセットがSLC16A5の測定用で、(38)のセットがSLC16A6の測定用で、(39)のセットがSLC16A7の測定用で、(40)のセットがSLC16A8の測定用で、(41)のセットがSLC16A9の測定用で、(42)のセットがSLC16A10の測定用で、(43)のセットがSLC16A11の測定用で、(44)のセットがSLC16A12の測定用で、(45)のセットがSLC16A13の測定用で、(46)のセットがSLC16A14の測定用で、(47)のセットがSLC17A1の測定用で、(48)のセットがSLC17A2の測定用で、(49)のセットがSLC17A3の測定用で、(50)のセットがSLC17A4の測定用で、(51)のセットがSLC17A5の測定用で、(52)のセットがSLC17A6の測定用で、(53)のセットがSLC17A7の測定用で、(54)のセットがSLC17A8の測定用で、(55)のセットがSLC18A1の測定用で、(56)のセットがSLC18A2の測定用で、(57)のセットがSLC18A3の測定用で、(58)のセットがSLC19A1の測定用で、(59)のセットがSLC19A2の測定用で、(60)のセットがSLC19A3の測定用で、(61)のセットがSLC20A1の測定用で、(62)のセットがSLC20A2の測定用で、(63)のセットがSLC23A1の測定用で、(64)のセットがSLC23A2の測定用で、(65)のセットがSLC23A3の測定用で、(66)のセットがSLC24A1の測定用で、(67)のセットがSLC24A2の測定用で、(68)のセットがSLC24A3の測定用で、(69)のセットがSLC24A4の測定用で、(70)のセットがSLC24A5の測定用で、(71)のセットがSLC24A6の測定用で、(72)のセットがSLC25A1の測定用で、(73)のセットがSLC25A2の測定用で、(74)のセットがSLC25A3の測定用で、(75)のセットがSLC25A4の測定用で、(76)のセットがSLC25A5の測定用で、(77)のセットがSLC25A6の測定用で、(78)のセットがSLC25A7の測定用で、(79)のセットがSLC25A8の測定用で、(80)のセットがSLC25A9の測定用で、(81)のセットがSLC25A10の測定用で、(82)のセットがSLC25A11の測定用で、(83)のセットがSLC25A12の測定用で、(84)のセットがSLC25A13の測定用で、(85)のセットがSLC25A14の測定用で、(86)のセットがSLC25A15の測定用で、(87)のセットがSLC25A16の測定用で、(88)のセットがSLC25A17の測定用で、(89)のセットがSLC25A18の測定用で、(90)のセットがSLC25A19の測定用で、(91)のセットがSLC25A20の測定用で、(92)のセットがSLC25A21の測定用で、(93)のセットがSLC25A22の測定用で、(94)のセットがSLC25A23の測定用で、(95)のセットがSLC25A24の測定用で、(96)のセットがSLC25A25の測定用で、(97)のセットがSLC25A26の測定用で、(98)のセットがSLC25A27の測定用で、(99)のセットがSLC25A28の測定用で、(100)のセットがSLC25A29の測定用で、(101)のセットがSLC25A30の測定用で、(102)のセットがSLC25A31の測定用で、(103)のセットがSLC25A32の測定用で、(104)のセットがSLC25A33の測定用で、(105)のセットがSLC25A34の測定用で、(106)のセットがSLC25A35の測定用で、(107)のセットがSLC25A36の測定用で、(108)のセットがSLC25A37の測定用で、(109)のセットがSLC25A38の測定用で、(110)のセットがSLC25A39の測定用で、(111)のセットがSLC25A40の測定用で、(112)のセットがSLC25A41の測定用で、(113)のセットがSLC25A42の測定用で、(114)のセットがSLC25A43の測定用で、(115)のセットがSLC25A44の測定用で、(116)のセットがSLC25A45の測定用で、(117)のセットがSLC25A46の測定用で、(118)のセットがSLC26A1の測定用で、(119)のセットがSLC26A2の測定用で、(120)のセットがSLC26A3の測定用で、(121)のセットがSLC26A4の測定用で、(122)のセットがSLC26A5の測定用で、(123)のセットがSLC26A6の測定用で、(124)のセットがSLC26A7の測定用で、(125)のセットがSLC26A8の測定用で、(126)のセットがSLC26A9の測定用で、(127)のセットがSLC26A10の測定用で、(128)のセットがSLC26A11の測定用で、(129)のセットがSLC27A1の測定用で、(130)のセットがSLC27A2の測定用で、(131)のセットがSLC27A3の測定用で、(132)のセットがSLC27A4の測定用で、(133)のセットがSLC27A5の測定用で、(134)のセットがSLC27A6の測定用で、(135)のセットがSLC30A1の測定用で、(136)のセットがSLC30A2の測定用で、(137)のセットがSLC30A3の測定用で、(138)のセットがSLC30A4の測定用で、(139)のセットがSLC30A5の測定用で、(140)のセットがSLC30A6の測定用で、(141)のセットがSLC30A7の測定用で、(142)のセットがSLC30A8の測定用で、(143)のセットがSLC30A9の測定用で、(144)のセットがSLC30A10の測定用で、(145)のセットがSLC31A1の測定用で、(146)のセットがSLC31A2の測定用で、(147)のセットがSLC32A1の測定用で、(148)のセットがSLC33A1の測定用で、(149)のセットがSLC34A1の測定用で、(150)のセットがSLC34A2の測定用で、(151)のセットがSLC34A3の測定用で、(152)のセットがSLC35A1の測定用で、(153)のセットがSLC35A2の測定用で、(154)のセットがSLC35A3の測定用で、(155)のセットがSLC35A4の測定用で、(156)のセットがSLC35A5の測定用で、(157)のセットがSLC37A1の測定用で、(158)のセットがSLC37A2の測定用で、(159)のセットがSLC37A3の測定用で、(160)のセットがSLC37A4の測定用で、(161)のセットがSLC39A1の測定用で、(162)のセットがSLC39A2の測定用で、(163)のセットがSLC39A3の測定用で、(164)のセットがSLC39A4の測定用で、(165)のセットがSLC39A5の測定用で、(166)のセットがSLC39A6の測定用で、(167)のセットがSLC39A7の測定用で、(168)のセットがSLC39A8の測定用で、(169)のセットがSLC39A9の測定用で、(170)のセットがSLC39A10の測定用で、(171)のセットがSLC39A11の測定用で、(172)のセットがSLC39A12の測定用で、(173)のセットがSLC39A13の測定用で、(174)のセットがSLC39A14の測定用で、(175)のセットがSLC40A1の測定用で、(176)のセットがSLC41A1の測定用で、(177)のセットがSLC41A2の測定用で、(178)のセットがSLC41A3の測定用であるキット。
  10. 請求項8に記載の(1)〜(178)に示されるセットの、各配列番号で示される配列を有するオリゴヌクレオチドからなるプライマー対とプローブとの組合せから選ばれる、請求項9に記載のキット。
  11. ヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAを含む検体について、請求項6〜10のいずれかに記載のキットを用いてポリメラーゼ連鎖反応(PCR又はRT−PCR)を行い、用いたプローブの加水分解の有無を測定することを特徴とするヒトにおけるSLCトランスポーターをコードするmRNAの測定方法。
  12. 加水分解の有無が、励起光照射による蛍光の発色の有無により測定される請求項11に記載の測定方法。
JP2007207636A 2007-08-09 2007-08-09 ヒトにおけるSLCトランスポーターのmRNAの測定方法、そのためのプローブ及びキット Pending JP2009039040A (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2007207636A JP2009039040A (ja) 2007-08-09 2007-08-09 ヒトにおけるSLCトランスポーターのmRNAの測定方法、そのためのプローブ及びキット

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2007207636A JP2009039040A (ja) 2007-08-09 2007-08-09 ヒトにおけるSLCトランスポーターのmRNAの測定方法、そのためのプローブ及びキット

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2009039040A true JP2009039040A (ja) 2009-02-26

Family

ID=40440498

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2007207636A Pending JP2009039040A (ja) 2007-08-09 2007-08-09 ヒトにおけるSLCトランスポーターのmRNAの測定方法、そのためのプローブ及びキット

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JP2009039040A (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2020536500A (ja) * 2017-09-07 2020-12-17 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドRegeneron Pharmaceuticals, Inc. 溶質キャリアファミリー14メンバー1(slc14a1)の変異型及びその使用

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2020536500A (ja) * 2017-09-07 2020-12-17 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドRegeneron Pharmaceuticals, Inc. 溶質キャリアファミリー14メンバー1(slc14a1)の変異型及びその使用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Fraga et al. Real‐time PCR
Li et al. Rolling circle amplification-driven encoding of different fluorescent molecules for simultaneous detection of multiple DNA repair enzymes at the single-molecule level
Lin et al. Development and evaluation of a reverse dot blot assay for the simultaneous detection of common alpha and beta thalassemia in Chinese
JP2012235778A (ja) アセトアルデヒド脱水素酵素2及びアルコール脱水素酵素2の遺伝子変異を同時に検出する方法
JP4190562B2 (ja) 遺伝子配列検査法
JP2012040029A (ja) 変異の検出方法およびそれに用いるキット
JP2013090622A (ja) 多型検出用プローブ、多型検出方法、薬効判定方法及び多型検出用キット
JP2013081450A (ja) 多型検出用プローブ、多型検出方法、薬効判定方法及び多型検出用試薬キット
JP2018528780A (ja) 短いホモポリマー反復の改良された検出
JPWO2009011297A1 (ja) Jak2遺伝子の変異検出用プローブおよびその用途
JP2008199965A (ja) abl遺伝子変異の検出用プローブおよびその用途
US20210079456A1 (en) Method for detecting mutant gene
JP6153758B2 (ja) 多型検出用プローブ、多型検出方法、薬効判定方法及び多型検出用キット
JP2007028978A (ja) ヒトにおける薬物トランスポーターのmRNAの測定方法、そのためのプローブ及びキット
JP2009039040A (ja) ヒトにおけるSLCトランスポーターのmRNAの測定方法、そのためのプローブ及びキット
JP6205216B2 (ja) 変異検出用プローブ、変異検出方法、薬効判定方法及び変異検出用キット
WO2016158898A1 (ja) 遺伝子変異の検出方法及びそれに用いる蛍光標識オリゴヌクレオチド
CN110612355B (zh) 用于定量pcr扩增的组合物及其应用
JP6853523B2 (ja) ヘリカーゼを用いたpcr
JP2004313120A (ja) β3アドレナリン受容体変異遺伝子の検出法ならびにそのための核酸プローブおよびキット
Zhang et al. Multiple thermocycles followed by LAMP with only two primers for ultrasensitive colorimetric viral RNA testing and tracking at single-base resolution
US20060188886A1 (en) Method of detecting or quantitatively determining mitochondrial dna 3243 variation, and kit therefor
JP5860667B2 (ja) Egfrエクソン21l858r遺伝子多型検出用プライマーセット及びその用途
US20120021413A1 (en) Method for Detecting Mutation in Exon 12 of JAK2 Gene, and Nucleic Acid Probe and Kit Therefor
JP2008206443A (ja) ラットにおけるトランスポーターのmRNAの測定方法、そのためのプローブ及びキット