JP2008507557A - 眼疾患の治療法 - Google Patents

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ミハエル， エイチ． ポリメロポウロス，
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シモナ ヴォルピ，
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ヴァンダ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド
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Abstract

アダマンタン、及び遺伝子の発現にアダマンタン同様の影響を及ぼすその他の薬剤は、眼疾患の治療又は予防に有用である。
【選択図】 なし

Description

関連出願の相互参照
本願は、２００４年７月２２日に出願した同時係属中の米国特許仮出願第６０／５９０，２６０号の利益を主張するものであり、その内容を参照によって本明細書中に組み込む。
本発明は、眼疾患の治療、より具体的には網膜神経線維機能の防護及び網膜脈管構造の維持に関する。
シンメトレル（登録商標）としても知られている塩酸アマンタジン、すなわち、塩酸１−アミノアダマンタンは、現在、抗ウィルス薬及び抗パーキンソン薬として市場に出回っている。パーキンソン病の治療におけるアマンタジンンの作用機序は分かっていない。また、８名のハンチントン病患者を対象とした小規模オープンラベル試験によって、アマンタジンによる治療を受けた患者ではジスキネジーが顕著に減少することが報告されている。このデータは、アマンタジンがハンチントン病の治療法になり得ることを示唆するものである。
ある種の眼障害及び眼疾患の治療にその他のアダマンタン誘導体を使用することについての記載もある。
発明の概要
本発明は、種々の眼疾患を治療するために、アダマンタン及びその誘導体を使用することに関する。詳細には、本発明は、眼の神経線維機能の低下を治療又は予防するために、並びに網膜脈管構造を維持／回復するためにアダマンタン及びその誘導体を使用することを含む。
その他の態様において、本発明は、眼で発現するある種の遺伝子をアップレギュレートすること、すなわち、眼におけるある種の遺伝子の転写及び／又はそれら遺伝子に相当するＲＮＡ転写産物の翻訳を増大させることが知られている又は判明している薬剤を使用することに関する。具体的な遺伝子については以下に記載する。本発明は、アダマンタン及びその誘導体だけでなく、以下に記載する遺伝子の一部又は全部に関して遺伝子発現に同様の影響を及ぼすその他の薬剤の使用も意図している。
アダマンタン及びその誘導体の使用、又は遺伝子の発現に同様の影響を及ぼすその他の薬剤の使用が有益であると考えられる具体的な疾患の例としては、網膜ジストロフィー、網膜浮腫、網膜新血管新生、糖尿病性網膜症、虚血性網膜症、硝子体網膜症、黄斑浮腫、加齢黄斑変性症、糖尿病性黄斑浮腫、ＩＯＰ、眼圧亢進症、網膜色素変性症、脈絡膜硬化症、桿体／錐体変性、及び緑内障が挙げられる。
本発明の１つの特定の態様は、視神経線維の減少、網膜脈管構造の崩壊、網膜障害、網膜新血管新生、網膜色素変性症、脈絡膜硬化症、加齢黄斑変性症、及び桿体／錐体変性から成る群から選択される少なくとも１つの眼疾患を治療又は予防する方法を提供し、この方法は、有効量のアマンタジンを、それを必要としている患者に体内投与することを含む。
本発明の別の態様は、視神経線維機能の低下を防ぐ方法であって、ＣＲＸ、カベオリン、クリスタリン、ＡＫＴ１、ＨＳＰ１Ａ、ＳＬＣ６Ａ６及びアクアポリンの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法である。
本発明のまた別の態様は、これだけに限らないが、眼内圧（ＩＯＰ）の上昇による網膜障害などの、網膜障害から患者を防護する方法であって、ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＩＧＦＢＰ２、ＡＳＳ、クリスタリン、ＳＬＣ６Ａ６、アクアポリン及びＧＡＤ１の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法である。
本発明のまた別の態様は、網膜新血管新生から患者を防護する方法であって、ＴＩＭＰ３及びＴＩＭＰ２の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法である。
本発明の別の態様は、網膜神経保護薬として開発される医薬品開発候補物質を同定する方法であって、未治療の実験動物の遺伝子発現プロファイルと被験物質で治療した動物の遺伝子発現プロファイルとを比較することを含み、前記被験物質が、ＣＲＸ、クリスタリン、カベオリン、ＡＫＴ１、ＳＬＣ６Ａ６、ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＡＳＳ、ＩＧＦＢＰ２、ＴＩＭＰ３及びアクアポリンの各遺伝子から成る群から選択される少なくとも１つの遺伝子のアップレギュレーションに関連している場合に、その被験物質を、網膜神経保護薬として開発される開発候補物質であると見なす方法である。
本発明のさらに別の態様は、網膜神経保護薬として開発される医薬品開発候補物質を同定する方法であって、未治療の実験動物の遺伝子発現プロファイルと被験物質で治療した動物の遺伝子発現プロファイルとを比較することを含み、前記被験物質が、ＰＤＣＤ８、ＴＲＡＤＤ及びＡＳＮＳの各遺伝子から成る群から選択される少なくとも１つの遺伝子のダウンレギュレーションに関連している場合に、その被験物質を、網膜神経保護薬として開発される開発候補物質であると見なす方法である。
本発明のさらに別の態様は、網膜脈管構造を維持する方法であって、ＣＲＸ、カベオリン、クリスタリン、ＡＫＴ１、ＨＳＰ１Ａ、ＳＬＣ６Ａ６及びアクアポリンの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子によるタンパク質発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法である。
本発明のさらに別の態様は、網膜障害から患者を防護する方法であって、ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＩＧＦＢＰ２、ＡＳＳ、クリスタリン、ＳＬＣ６Ａ６及びアクアポリンの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子によるタンパク質発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法である。
本発明のさらに別の態様は、網膜血管新生から患者を防護する方法であって、ＴＩＭＰ２及びＴＩＭＰ３の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子によるタンパク質発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法である。
本発明のさらに別の態様は、網膜神経保護薬として開発される医薬品開発候補物質を同定する方法であって、未治療の実験動物のタンパク質発現プロファイルと被験物質で治療した動物のタンパク質発現プロファイルとを比較することを含み、前記被験物質が、ＣＲＸ、クリスタリン、カベオリン、ＡＫＴ１、ＳＬＣ６Ａ６、ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＡＳＳ、ＩＧＦＢＰ２、ＴＩＭＰ３及びアクアポリンの各タンパク質から成る群から選択される少なくとも１つのタンパク質の発現のアップレギュレーションに関連している場合に、その被験物質を、網膜神経保護薬として開発される開発候補物質であると見なす方法である。
本発明のさらに別の態様は、網膜神経保護薬として開発される医薬品開発候補物質を同定する方法であって、未治療の実験動物のタンパク質発現プロファイルと被験物質で治療した動物のタンパク質発現プロファイルとを比較することを含み、前記被験物質が、ＰＤＣＤ８、ＴＲＡＤＤ及びＡＳＮＳの各タンパク質から成る群から選択される少なくとも１つのタンパク質の発現のダウンレギュレーションに関連している場合に、その被験物質を、網膜神経保護薬として開発される開発候補物質であると見なす方法である。
本発明のさらに別の態様は、眼疾患の治療又は予防用治療薬に対し規制当局の承認を得る方法であって、前記治療薬が、ＣＲＸ、カベオリン、クリスタリン、ＡＫＴ１、ＨＳＰ１Ａ、ＳＬＣ６Ａ６及びアクアポリンの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のアップレギュレーション、ＰＤＣＤ８及びＴＲＡＤＤの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のダウンレギュレーション、ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＩＧＦＢＰ２、ＡＳＳ、クリスタリン、ＳＬＣ６Ａ６、アクアポリン及びＧＡＤ１の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のアップレギュレーション、ＡＳＮＳ遺伝子の発現のダウンレギュレーション、並びにＴＩＭＰ３及びＴＩＭＰ２の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のアップレギュレーションのうちの少なくとも１つを起こすことを立証するデータを、規制所管機関に提供することを含む方法である。
本発明のさらに別の態様は、レーザー治療及び網膜虚血障害のうちの少なくとも１つから患者を防護する方法であって、ＴＩＭＰ３、ＴＩＭＰ２、ＳＵＬＦ１、ＩＲＦ１、ＲＢＰ１、ＲＢＰ４、Ｆ３、ＣＤ４４、ＩＲＦ１、ＰＬＡ２Ｇ４Ａ及びＶＥＧＦＢの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法である。
本発明のさらに別の態様は、光及び遺伝的素因による障害のうちの少なくとも１つから患者を防護する方法であって、ＬＲＡＴ、ＲＢＰ１／ＣＲＡＢＰ−１、ＲＢＰ４、ＲＰＥ６５及びＴＴＲの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法である。
本発明の前記及びその他の特徴は、以下に記載する本発明の実施形態の詳細な説明を読めば明らかとなろう。
発明の詳細な説明
本発明の実施に有用なアダマンタン誘導体の例としては、アダマンタン（トリシクロデカン）の核構造を有する化合物、例えば、メマンチン、アマンタジン及びリマンタジンなどが挙げられる。いずれの場合も、有用な化合物にはアダマンタン及びアダマンタン誘導体の塩、立体異性体、多形体、エステル、プロドラッグ及び水和物、並びに他の溶媒和物が含まれる。好ましい化合物はアマンタジン、例えば塩酸アマンタジンである。このような薬剤を使って以下に記載するような眼障害の治療、すなわち予防又は治療が可能であることが判明した。
有効量の本発明の作用剤、すなわちアダマンタンもしくはアダマンタン誘導体、又は遺伝子発現に同様の影響を及ぼす以下に記載するようなまた別の薬剤を、多くの経路によって、対象動物（通常ヒトであるが、その他の動物、例えば家畜、ペット及び競争用動物なども治療の対象とすることができる）に投与することが可能である。これら経路の例としては、経口、吸入、局所、経粘膜、非経口、静脈内などの全身への投与経路、並びに眼内、硝子体内、脈絡膜内及び眼の局所投与などのより局部への投与を意図した経路が挙げられる。
本発明の作用剤の製剤は、例えば投与経路によって決まる、型通りの製剤技術によって成し得る。作用剤は、速放性製剤、放出制御製剤又は徐放性製剤の形態で送達することができる。
送達される作用剤の最も望ましい量は、標準的手法で決めることができる。投与経路、アダマンタン及びアダマンタン誘導体の製剤並びにその用量についての手引きとして、開業医は、シンメトレル（登録商標）に関する添付文書及びその他の公表文献、並びに本明細書において引用されるものも含めて、その他の目的でのアダマンタン及びアダマンタン誘導体の投与に関する公表文献を参照することができる。
本発明の実施に有用な、アダマンタン以外の薬剤を同定するために、標準的手法に従って遺伝子発現の定量を行うこともできる。このような定量を使えば、それがある化合物か又は他の薬剤かどうか、どちらがその他の用途に承認される医薬品並びに新規化学物質又はバイオ医薬品を含むことができるか、どの薬剤が眼での遺伝子発現に所望の効果を有するかなどを容易に決定することができる。
ある治療薬（この語は予防薬も含む）が所定の効能をもって商品化される前には、米国食品医薬品局及び欧州医薬品審査庁などの規制当局により承認されなければならない。承認されるにあったては、一般に、その薬剤の安全性及び有効性を立証するデータの提出が必要となる。そのようなデータには遺伝子発現プロファイルデータが含まれる。
シンメトレル（登録商標）としても知られている塩酸アマンタジンは、現在、抗ウィルス薬及び抗パーキンソン薬として市場に出回っている。アマンタジンが、特にニューロン及び脳において、多くの生物学的作用を有することは明らかになっているが、それら生物学的活性の背後にある分子の作用機序についてはいまだ分かっていない。そのため、アマンタジンによってレギュレートされる分子経路を同定するために、複数のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットをそれぞれ異なる用量のアマンタジンで治療し、選択した組織についてＲＮＡ発現プロファイル解析を行った。この報告では、定常状態でと殺した動物から得た網膜を解析した結果を記載する。遺伝子発現に現れる変化は、アマンタジンが遺伝子発現に影響を及ぼしていること、その結果神経保護作用が生じている可能性があることを示唆するものである。このデータは、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、加齢黄斑変性症、緑内障及び網膜色素変性症における桿体／錐体減少、桿体／錐体ジストロフィー、並びに脈絡膜硬化症における網膜神経節細胞の減少から防護するために、アマンタジンを使用できる可能性を示すものである。
アマンタジンは水溶性であり良好に吸収される（Ｅｎｄｏ）。アマンタジンは、糸球体濾過及び尿細管分泌によって不変の状態で主として尿中に排泄される（Ｅｎｄｏ；Ｇｏｒａｌｓｋｉ、Ｓｍｙｔｈ及びＳｉｔａｒ、４９６−５０４）。ヒトの場合、ピーク濃度に達する時間（Ｃｍａｘ）は３．３±１．５時間（範囲：１．５〜８時間）で半減期は１７±４時間（範囲１０〜２５時間）である（Ｅｎｄｏ）。アマンタジンは、ラットの場合、５０ｍｇ／ｋｇ／日で催奇性であり、１００ｍｇ／ｋｇ／日で胎児毒性である（ヒトの場合の予測等価用量（ＨＥＤ）は身体表面積換算でそれぞれ７．１ｍｇ／ｋｇ／日、１４．２ｍｇ／ｋｇ／日）という報告がある（Ｅｎｄｏ）。ラットの場合、３７ｍｇ／ｋｇ／日（予測ＨＥＤ５．３ｍｇ／ｋｇ／日）の用量では催奇性及び胎児毒性はいずれも生じない（Ｅｎｄｏ）。アマンタジンの発癌性の可能性を評価する長期にわたるｉｎ ｖｉｖｏ動物実験はまだ行われていないが、Ａｍｅｓ試験又はチャイニーズハムスター卵巣由来の細胞において、アマンタジンは非変異原性であることが明らかになっている（Ｅｎｄｏ）。また、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのヒト抹消血リンパ球又はｉｎ ｖｉｖｏでのマウス骨髄小核試験においては、染色体異常の証拠は認められなかった（Ｅｎｄｏ）。
アマンタジンが、特にニューロン及び脳において、多くの生物学的作用を有することは明らかになっているが、それら生物学的活性の背後にある分子の作用機序についてはいまだ分かっていない。そのため、アマンタジンによってレギュレートされる分子経路を同定するために、複数のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットをそれぞれ異なる用量のアマンタジンで、異なる期間治療した。具体的には、３時間（Ｃｍａｘ）、１４日間（定常状態）及び１４日間プラス無治療の３日間（回復）である。前記ラットを適当な時期にと殺し、その組織をＲＮＡ発現プロファイル解析用に採取した。アマンタジンによる治療の影響を受けた遺伝子発現プロファイルを解析することによって、アマンタジンの作用機序が解明されるだけでなく、同薬剤の新たな治療指標が同定される。遺伝子発現プロファイルには、タンパク質及び／又は転写産物の測定値が含まれる。この報告では、定常状態でと殺した動物からの網膜を解析した結果を記載する。遺伝子発現の変化は、アマンタジンが遺伝子発現に影響を及ぼしていること、その結果神経保護作用を生じている可能性があることを示唆するものである。それゆえ、このデータは、アマンタジンが糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、加齢黄斑変性症、緑内障及び網膜色素変性症における桿体／錐体減少、桿体／錐体ジストロフィー、並びに脈絡膜硬化症における網膜神経節細胞の減少の防護に有用であることを示すものである。
１． 材料及び方法
１．１ 動物治療プロトコル
全動物サービスを、試験番号２３１−００１で、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社に外部委託した。本試験では、異系交配のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙアルビノ雄ラット（Ｃｒｌ：ＣＤ（登録商標）（ＳＤ）ＩＧＳ ＢＲ）３０匹を使用し、それらをＣｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．社（Ｒａｌｅｉｇｈ、Ｎｏｒｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎｅ）から受け取った。前記動物を、試験日１日目以前に８日間順応させておき、試験用に解放する前にＳｔａｆｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｉａｎがチェックした。群の平均体重が全体の平均体重の±１０％超えないような、コンピュータ生成体重順分布によってラットを無作為にグループに割り当てた。試験第１日目には、前記ラットはおよそ１１週齢で３００〜３６９グラムであった。試験デザインを表１に示す。
Figure 2008507557
群２、３及び４のラットに、１日１回それぞれの服用量を腹腔内注射した。群１のラットは治療しなかった。群２のラットは、連続１４日間にわたり毎日溶媒対照（ｄＨ２Ｏ）で治療した。群３及び群４のラットは、連続１４日間にわたり毎日試験品で治療した。試験第１日目の投与３時間後に、２、３及び４群のラットのうち各群の３匹を群１の３匹のラットと一緒に安楽死させた。試験第１４日目（定常状態）の投与３時間後に、２、３及び４群のラットのうち各群の３匹を安楽死させた。３日間の無治療期間の後、試験第１７日目（回復）に、２、３及び４群の残りのラットを安楽死させた。安楽死は、容認されている米国動物協会ガイドラインに従って、麻酔なしの断頭術によって行った。
安楽死させた後、網膜を採取し、液体窒素中で瞬間凍結した。全サンプルをドライアイスを使ってＶａｎｄａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓに移し、使用時まで−８０℃で貯蔵した。
１．２ ＲＮＡ抽出
標準的ＲＮＡ抽出プロトコルに従ってＲＮＡを抽出し、分光光度計を用いてＲＮＡ定量を行った。
１．３ ＲＮＡ発現プロファイリング
Ｒａｔ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ａｒｒａｙ ２３０Ａ及び２３０ｖ２．０を用い、メーカーの標準プロトコル（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ、サンタクララ、カリフォルニア）に従って、ＲＮＡ発現プロファイリングを行った。
１．４ 遺伝子発現解析
本発明者等は、溶媒で治療した網膜由来のアレー、「ベースラインチップ」、及び塩酸アマンタジン（低容量［ＬＤ］又は高容量［ＨＤ］）で治療した網膜由来のアレー、「試験チップ」、で異なる発現をする遺伝子を同定した。ｐ＜０．０５のフィルタ及び倍率変化１．５倍又は１．６倍を使用して２種類の解析、すなわち（１）溶媒対低用量と（２）溶媒対低＋高用量、を行った。ただし、発現の検出されないプローブセットは全て解析から除外した。
２． 結果
２．１ ＲＮＡ発現解析
２．１．１ 網膜：溶媒対定常状態で低用量
アマンタジンの生物学的作用を理解するための第一のステップとして、溶媒で治療したラット（群２）から採取した網膜のＲＮＡ発現プロファイルを、定常状態における低用量のアマンタジンで治療したラット（群３、２０ｍｇ／ｋｇ／日）から採取した網膜のＲＮＡ発現プロファイルと比較した。この方法を行う理論的根拠は３つある。第一に、２０ｍｇ／ｋｇ／日という用量が、１日に処方されるＨＥＤ（ヒトの場合の等価用量）を表していること。第二に、あるうる新規効能を同定するためには、長期間連続して薬剤に暴露した後の遺伝子発現変化を知ることが重要であること。多くの遺伝子発現変化は暴露直後（すなわちＴｍａｘ／３時間の時点）に生じているが、これらの変化はむしろ薬剤治療に対する「一過性の」適応反応であると考えられよう。第三に、アマンタジンが脳において生物学的作用を有することは十分証拠づけられているが、一方、網膜における潜在的な作用については何も分かっていないことである。さらに、網膜は、ラットから摘出した時点で他の組織／構造物によって汚染されていないことが確信できるという意味において、比較的「清浄な」組織である。
２つの治療群間で比較解析を行い、その発現が１．６又は１．５倍以上変化しており（アップレギュレーション又はダウンレギュレーションのいずれか）また統計学的に有意である（ｐ＜０．０５、ｔ検定）遺伝子を同定した。プローブセットの解析により、類似の生物学的機能を有するタンパク質をコードする多数の遺伝子群を同定した。例えば、アマンタジンによって、多くの溶質／イオンチャンネルタンパク質（ＫＣＮＥ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ３Ａ１、ＳＬＣ４Ａ３、ＳＬＣ６Ａ６、ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ１７Ａ７、ＳＬＣ２１Ａ５、ＳＬＣ２４Ａ１及びＳＬＣ２６Ａ１）、直接又は間接的にグルタミン酸塩合成に関与するタンパク質（ＡＳＮＳ、ＡＳＳ、ＧＡＤ１）、細胞間相互作用の維持に関与するタンパク質（ＴＩＭＰ２、ＴＩＭＰ３、ＳＥＲＰＩＮＩ１）、水晶体構造形成タンパク質（ＣＲＹＡＢ及びＣＲＹＢＡ３）並びにアポトーシス執行タンパク質（ＰＤＣＤ８）の発現に変化が生じた。
遺伝子リストの全体的テーマは、アマンタジンが、神経保護（細胞周期及びアポトーシス）、レチノイド回路、凝固経路及び血管形成に関与する遺伝子の調節において役割を果たしていることを示している。これらの結果の重要性については、考察の項でさらに詳しく述べる。
Figure 2008507557
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Figure 2008507557
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２．１．２ 網膜：溶媒対定常状態で（低用量及び高用量）
アマンタジンの生物学的作用を理解するための第二のステップとして、低用量のアマンタジンで治療したラット（群３、２０ｍｇ／ｋｇ／日）から採取した網膜のＲＮＡ発現プロファイルと高用量のアマンタジンで治療したラット（群４、１００ｍｇ／ｋｇ／日）から採取した網膜のＲＮＡ発現プロファイルを１つの治療群にまとめた、それらを、溶媒のみで治療したラットから採取した網膜のＲＮＡ発現プロファイルと比較した。２つのアマンタジン群を一体にすることによって、用量に関係なく、重要な遺伝子発現変化を同定するための検出力が増す。
２つの治療群間で比較解析を行い、その発現が１．６倍以上変化しており（アップレギュレーション又はダウンレギュレーションのいずれか）また統計学的に有意である（ｐ＜０．０５、ｔ検定）遺伝子を同定した。プローブセットの解析により、類似の生物学的機能を有するタンパク質をコードする幾つかの遺伝子群を同定した。例えば、アマンタジンによって、多数の水晶体構造形成タンパク質（ＣＲＹＡＡ、ＣＲＹＡＢ、ＣＲＹＢＡ２、ＣＲＹＢＡ４、ＣＲＹＢＢ３及びＣＲＹＢＳ）、アクアポリン（ＡＱＰ１、ＡＱＰ４）、溶質／イオンチャンネルタンパク質（ＣＡＣＮＢ２、ＫＣＮＥ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ３Ａ１、ＳＬＣ４Ａ３、ＳＬＣ６Ａ６、ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ１７Ａ７、ＳＬＣ２１Ａ５、ＳＬＣ２４Ａ１、ＳＬＣ２４Ａ２及びＳＬＣ２６Ａ１）、直接又は間接的にグルタミン酸塩合成に関与するタンパク質（ＡＳＮＳ、ＡＳＳ、ＧＡＤ１及びＧＬＹＴ１）、細胞間相互作用の維持に関与するタンパク質（ＴＩＭＰ２、ＴＩＭＰ３、ＳＥＲＰＩＮＩ１）、並びにアポトーシス執行タンパク質（ＣＡＶ１、ＰＤＣＤ８及びＴＲＡＤＤ）の発現に変化が生じた。
先の場合のように、遺伝子リストにおける重要なテーマを確認した。最も重要な群は、ＣＡＶ１、すなわち、分裂促進シグナル伝達及び腫瘍形成に関与しているとされ（Ｆｉｕｃｃｉ他、２３６５〜７５）また抗アポトーシス作用を有していると報告されている（Ｌｉ他、９３８９〜４０４）ゴルジ小胞細胞膜に見られる足場タンパク質に集中しているように思われる。これらの結果の重要性については考察の項でさらに詳しく述べる。
Figure 2008507557
３． 考察
塩酸アマンタジンは、現在、抗ウィルス薬及び抗パーキンソン薬として市場に出回っている（Ｅｎｄｏ）。アマンタジンの作用機序についてはいまだ分かっていない。その作用機序を調べ、できれば新規の効能を同定するために、複数のラットをそれぞれ異なる用量のアマンタジンで治療し、遺伝子発現プロファイリングを実施した。網膜の解析結果は、アマンタジンが、網膜神経節細胞の減少を防護する網膜神経保護薬としてまた眼内圧を下げる薬剤として有用であることを示している。したがって、そのデータは、アマンタジンが網膜変性症、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫及び緑内障に有用であることを示していることになる。これら主張の裏付けについて以下に論じる。
３．１ 神経保護
アマンタジンが神経保護の役割を果たしていることを示す第一の遺伝子はＣｏｎｅ−ｒｏｄホメオボックス（ＣＲＸ）である。ＣＲＸは、主として網膜の桿体及び錐体光受容体で発現するｏｔｄ／Ｏｔｘ様ホメオドメイン転写因子である（Ｆｕｒｕｋａｗａ、Ｍｏｒｒｏｗ及びＣｅｐｋｏ、５３１〜４１）。ＣＲＸは、ロドプシン、β―ホスホジエステラーゼ、アレスチン及び光受容体間レチノイド結合タンパク質などを含めた多数の光受容体遺伝子のプロモーターに結合し、それを活性化する（Ｃｈｅｎ他１０１７〜３０）。ＣＲＸの重要性は、ｎｕｌｌＣＲＸ対立遺伝子がホモ接合である突然変異マウスの研究において最初に確認されている。機能性ＣＲＸ対立遺伝子が欠如しているマウスでは、機能性光受容体外節が発現せず網膜変性を生じる（Ｆｕｒｕｋａｗａ他、４６６−７０）。これらのマウスの遺伝子発現解析によって、変性が発症する前に多くの光受容体特異的遺伝子の発現が減少又は喪失することが明らかになっているが、このことは、ＣＲＸが光受容体遺伝子発現の重要な調節遺伝子であることを示唆している（Ｌｉｖｅｓｅｙ他、３０１〜１０）。網膜の機能におけるＣＲＸの重要性は、この遺伝子での多くの突然変異が網膜変性に関連しているという事実によっても裏付けられる（Ｆｒｅｕｎｄ他、５４３〜５３；Ｊａｃｏｂｓｏｎ他、２４１７〜２６；Ｓｗａｉｎ他１３２９〜３６）。ＣＲＸが、アマンタジンで治療した動物の網膜で２．７倍アップレギュレートしていることが判明したという事実は、アマンタジンが神経保護効果を有しており、光受容体の機能を促進しかつ網膜変性を低く抑えていることを示すものである。
アマンタジンが神経保護の役割を果たしていることを示す第二の遺伝子ファミリーはクリスタリンのファミリーである。クリスタリンは、水晶体線維細胞及び網膜内外顆粒層において高レベルで発現する種々のタンパク質群である（Ｘｉ他、４１０〜１９）。これらタンパク質は、シャペロン機能を有することが明らかになっている。すなわち、損傷したタンパク質の部分的に折り畳みがなされていない種を認識することによって、又はそれらの種に結合することによってその他のタンパク質をストレスにより誘発される凝集から保護する、小さな熱ショックタンパク質ファミリーのメンバーである（Ｓｃｈｅｙ他、２００〜０３）。興味深いことに、アマンタジンによる治療によって、７０ｋＤａ熱ショックタンパク質１Ａも１．６倍誘発されていた。クリスタリンは、カスパーゼの活性を阻害することによって抗アポトーシス作用を有することも明らかになっている（Ｍａｏ他、５１２〜２６；Ｘｉ他、４１０〜１９）。したがって、最終的には早期の細胞死を阻害すると考えられる。眼の機能におけるクリスタリンの重要性は、発達性白内障、退行性白内障及び優性白内障などの原因となる、幾つかの種類のクリスタリンに起こる突然変異を同定することによっても立証されている。幾つかのクリスタリンは、アマンタジンによる治療を受けたラットの網膜において顕著にアップレギュレートされる（４〜２１倍）。したがって、クリスタリン及び熱ショックタンパク質１Ａの発現を誘発することによって、これらの抗アポトーシスタンパク質を誘発することによって、アマンタジンは網膜を細胞死から保護することができる。
アポトーシス／早期の細胞死に関与している他の多くの遺伝子が、アマンタジンの治療によって差次的に発現することも判明した。例えば、カベオリン１及びカベオリン２は、それぞれ２．４２倍、１．９９倍アップレギュレートされることが判明している。先に示したように、カベオリンは抗アポトーシス作用を有するという報告がある（Ｌｉ他９３８９〜４０４）。
ＡＫＴ１もアマンタジンの治療によってアップレギュレートされた。ＡＫＴ１は、細胞内増殖シグナル及び生存シグナルの形質導入において主要な役割を果たしているセリン／スレオニンキナーゼである（Ｍａｒｔｅ及びＤｏｗｎｗａｒｄ、３５５〜５８）。ＡＫＴ１は、アポトーシスシグナル伝達カスケードに関与する多数のタンパク質をリン酸化することが立証されており、これらタンパク質のリン酸化によってアポトーシスが防護され、幾つかの異なる機序によって細胞の生存が促進される（Ｔｒｅｎｃｉａ他、４５１１〜２１）。
カベオリンとＡＫＴの他に、ＥＤＮＲＢがアップレギュレートされている。エンドセリンＢ受容体は、脳における神経細胞の生存に関連している。エンドセリン、すなわち血管収縮タンパク質は、抗アポト−シス因子として作用する（Ｙａｇａｍｉ他、２９１〜３００）。したがって、アマンタジンによるこれら遺伝子のアップレギュレーションは、早期細胞死から網膜を防護すると考えられる。
一方、アポト−シスを誘発することが知られている２つの遺伝子、ＰＤＣＤ８及びＴＲＡＤＤは、アマンタジンによる治療後ダウンレギュレートされることが判明した。アポト−シス誘発因子としても知られているＰＤＣＤ８は、ミトコンドリアに限局されており、細胞死の刺激に反応して放出される（Ｊｏｚａ他、５４９〜５４）。ＰＤＣＤ８を遺伝子不活化すると、細胞は細胞死に対して抵抗性となる（Ｊｏｚａ他、５４９〜５４）。ＴＲＡＤＤ、すなわち腫瘍壊死因子１受容体の細胞内ドメインと特異的に相互作用するタンパク質は、プログラム細胞死の媒介に必須であることが明らかになっている（Ｈｓｕ、Ｘｉｏｎｇ及びＧｏｅｄｄｅｌ、４９５〜５０４）。したがって、アマンタジンによるこれらの遺伝子のダウンレギュレーションも、早期細胞死から網膜を防護すると考えられる。本研究で示す結果は、アマンタジンが神経保護薬として有用であり、網膜細胞を細胞死から防護することを示唆するものである。
３．２ 眼内圧及び緑内障
緑内障は、視神経乳頭陥凹及び変性を伴う網膜神経節細胞死によって特徴づけられる、一群の視神経障害であると定義することができる（Ａｈｍｅｄ他、１２４７〜５８）。緑内障の発生進展に関わる１つの重要な危険因子は高眼内圧（ＩＯＰ）である。慢性的ＩＯＰ上昇後の網膜における遺伝子発現変化を同定する研究で、Ｔｏｍａｒｅｖと同僚達は、５週間高ＩＯＰを経験したラット由来の網膜をマイクロアレイ解析した。その解析によって、網膜でアップレギュレートされた７４の遺伝子とダウンレギュレートされた７つの遺伝子を同定し、網膜における「高ＩＯＰ遺伝子サイン」を作製した。興味深いことに、Ｔｏｍａｒｅｖ等がその研究でダウンレギュレートされているとした遺伝子の一部が、アマンタジン実験でアップレギュレートされていることが判明し、またその逆も同様であった。ＩＯＰ試験では、例えば、ＣＲＹＡＢ、ＣＲＹＡＡ、ＣＲＹＢＢ２及びＳＬＣ６Ａ６がそれぞれ−５．０倍、−１４．５倍、−１８．０倍及び−２．１倍ダウンレギュレートされていることが判明し、一方、アマンタンジン試験では、上記遺伝子はそれぞれ３．８３倍、１９．０７倍、１８．５５倍及び２．８９倍アップレギュレートされていることが判明した。
クリスタリンの生物学的重要性は先に説明した。タウリントランスポーターとしても知られているＳＬＣ６Ａ６は、神経興奮性及び浸透圧調節に関与している。タウリンは、タンパク質に組み込まれていない半必須アミノ酸であり、網膜に高ミリモル濃度で見られる（Ｍｉｌｉｔａｎｔｅ及びＬｏｍｂａｒｄｉｎｉ、７５〜９０；Ｓｃｈｕｌｌｅｒ−Ｌｅｖｉｓ及びＰａｒｋ、１９５〜２０２）。視機能障害及び網膜損傷がタウリン欠乏に起因することは証明されている（Ｍｉｌｉｔａｎｔｅ及びＬｏｍｂａｒｄｉｎｉ、７５〜９０）。また、タウリントランスポーターノックアウトマウスでは、アポトーシスによるひどい網膜変性が原因の視力低下を生じる（Ｓｃｈｕｌｌｅｒ−Ｌｅｖｉｓ及びＰａｒｋ、１９５〜２０２）。重要なことであるが、アマンタジンによる治療によって、網膜においてタウリントランスポーターがアップレギュレートされた。これらのデータは、アマンタジンが、ＩＯＰの上昇によって引き起こされる網膜障害の保護薬として有用であることを示唆するものである。
通常デキサメタゾンの形態をとるグルココルチコイド点眼液は、眼の炎症の治療薬として一般に使われている。デキサメタゾンは、小柱網（ＴＭ）を通過する房水流出抵抗の増加に関系する一種の開放隅角緑内障を引き起こすことが知られている（Ｉｓｈｉｂａｓｈｉ他、３６９１〜９７）。ＴＭ細胞に対して長期間デキサメタゾン治療の影響を与えることによって、第一の緑内障遺伝子、すなわちミオシリン（ＭＹＯＣ）を同定した（Ｌｅｕｎｇ他、４２５〜３９）。ＭＹＯＣ突然変異が緑内障を引き起こすことが最近明らかにされている（Ａｌｗａｒｄ他、１０２２〜２７；Ｆｉｎｇｅｒｔ他、８９９〜９０５；Ｓｔｏｎｅ他、６６８〜７０）。興味深いことに、ＭＹＯＣは、アマンタジンで治療したラット由来の網膜では２．５８倍アップレギュレートされていることが判明した。ステロイド誘発性緑内障の発症に関係する遺伝子を同定するために、２つのグループが、デキサメタゾンで処理した培養ＴＭ細胞について遺伝子発現解析研究を行った。両研究とも、デキサメタゾン処理によってＭＹＯＣとインシュリン様成長因子結合タンパク質２型（ＩＧＦＢＰ２）がアップグレードされていること、またアスパラギン合成酵素がダウンレギュレートされていることを確認した（Ｉｓｈｉｂａｓｈｉ他、３６９１〜９７；Ｌｅｕｎｇ他、４２５〜３９）。これらの遺伝子の同様な調節が、アマンタジンで治療したラット由来の網膜において確認された。遺伝子発現変化が、デキサメタゾンによって引き起こされた障害に対する保護効果なのかあるいはその障害の結果なのかは、この時点では明らかでない。この点を明らかにするために、いっそうの研究が必要である。しかし、これらの変化が保護的なものであるとすれば、この結果は、アマンタジンがＩＯＰの上昇によって引き起こされる網膜障害の保護薬として有用であるとする仮説を強化するものとなろう。
アクアポリンは、水輸送タンパク質であり、ＩＯＰの調節及び網膜シグナル伝達などの、膜関門を通過する体液輸送に関わる眼の機能の多くの面において役割を果たしている（Ｖｅｒｋｍａｎ、１３７〜４３）。アクアポリン１及び４（ＡＱＰ１及びＡＱＰ４）の両者とも、アマンタジン治療後にアップレギュレートされることが判明した。ＡＱＰ４は網膜シグナル伝達において重要であることが明らかになっており、ＡＱＰ１はＴＭ細胞の維持に関与していることが判明している（Ｖｅｒｋｍａｎ、１３７〜４３）。アマンタジンによるこれら遺伝子のアップレギュレーションは、アマンタジンがＩＯＰ上昇の治療において果たす役割を示唆するものである。
グルタミン酸塩は、哺乳類の中枢神経系における主要な興奮性神経伝達物質であり、過剰レベルのグルタミン酸塩は緑内障の病因に関連づけられている（Ｎａｓｋａｒ、Ｖｏｒｗｅｒｋ及びＤｒｅｙｅｒ、１９４０〜４４）。正常な状態では、グルタミン酸輸送体は、グルタミン酸塩を迅速に細胞内空間に輸送して眼における生理学的濃度を維持する（Ｎｉｃｈｏｌｌｓ及びＡｔｔｗｅｌｌ、４６２〜６８）。これまで、５つの興奮性アミノ酸輸送体が、神経系におけるグルタミン酸クリアランスに関与していることが確認されている。具体的には、ＥＡＡＴ１が網膜で見つかっている（Ｒａｕｅｎ、Ｒｏｔｈｓｔｅｉｎ及びＷａｓｓｌｅ、３２５〜３６）。このグルタミン酸輸送体の発現は、緑内障において減少することが判明している（Ｎａｓｋａｒ、Ｖｏｒｗｅｒｋ及びＤｒｅｙｅｒ、１９４０〜４４）。重要なことは、この輸送体（ＳＬＣ１Ａ３としても知られる）が、アマンタジンで治療した動物由来の網膜においてアップレギュレートされていることが分かったことである。これら遺伝子のアップレギュレーションによって輸送体の発現が増加し、硝子体液内に見られるグルタミン酸塩が減少するであろうと考えられる。
輸送体だけでなく、グルタミン酸産生に関与しているその他の遺伝子も、アマンタジンによる治療後に弁別的に発現することが判明した。具体的には、アスパラギン合成酵素（ＡＳＮＳ）が、アマンタジンによる治療後にダウンレギュレートされていることが判明した。ＡＳＮＳは２つの生化学的反応、すなわち、（１）アスパラギン酸塩のアスパラギンへの変換並びに（２）アスパラギン酸塩及びグルタミン酸のアスパラギン及びグルタミン酸塩への変換、の触媒作用に関与している。ＡＳＮＳの発現が減少するとグルタミン酸塩保護が低下することになり、それによって網膜は過剰なグルタミン酸塩の毒性から解放される。ＡＳＮＳの他に、アルギノコハク酸合成酵素（ＡＳＳ）がアマンタジンによる治療後にアップレギュレートされていることが判明した。ＡＳＳはアスパラギン酸塩のアルギニンへの変換に関与しているが、これが産生されるグルタミン酸塩の量に間接的に影響しているのではないかと考えられる。ＡＳＳの発現を増やすことで利用できるアスパラギン酸塩がアルギニンに変換され、それによってグルタミン酸塩への変換に利用できるアスパラギン酸塩の量が減るのではないかと考えられる。
また、アマンタジンは、炭酸脱水酵素（ＣＡ）ファミリーのメンバーであるＣＡ４をダウンレギュレートする。ＣＡ４は、ＣＯ２及び重炭酸塩の輸送において機能上重要な物質であり、角膜内皮の細胞外部分に存在する膜結合型酵素である。緑内障で重大なできごとは、ＣＯ２とＯＨから触媒によりＨＣＯ３が産生することである。したがって、アマンタジンはＣＡ４の発現を減少させることによって、ＨＣＯ３の産生を阻害する可能性があり、ひいては水の生成を減らし緑内障患者の眼内圧を低下させる可能性がある（Ｍａｒｅｎ、１９７６；同上）。したがって、先に示した結果は、網膜変性症を予防するための高眼内圧の治療にアマンタジンを使用し得ることを明白に証明するものである。
３．３ 糖尿病性網膜症及び糖尿病性黄斑浮腫
糖尿病性網膜症及び糖尿病性黄斑浮腫は、糖尿病患者によく起こる微小血管合併症であり、視力を急激に弱体化させ、ついには失明に至ることがある（Ｃｉｕｌｌａ、Ａｍａｄｏｒ及びＺｉｎｍａｎ、２６５３〜６４）。先進国においては、糖尿病性網膜症は生産年齢人口（２０〜７４歳）の失明の第一の原因とされており、毎年新たに生じる失明の１２％は糖尿病性網膜症が原因である（Ｃｉｕｌｌａ、Ａｍａｄｏｒ及びＺｉｎｍａｎ、２６５３〜６４）。１０年間で、糖尿病性黄斑浮腫は糖尿病を患う米国人の１０〜１４％に発生すると考えられる（Ｋｌｅｉｎ、Ｋｌｅｉｎ及びＭｏｓｓ、７９６〜８０１）。糖尿病性網膜症及び糖尿病性黄斑浮腫の特徴は、網膜血管が異常成長し、その結果、黄斑部での網膜が厚くなり、また拡張した血管透過亢進性毛細血管及び微細血管瘤からの血液の漏出により血液網膜柵が破綻することである（Ｃｉｕｌｌａ、Ａｍａｄｏｒ及びＺｉｎｍａｎ、２６５３〜６４）。内血液網膜柵が破綻すると、黄斑部に細胞外液が蓄積し、ついには高ＩＯＰに至る（Ａｎｔｃｌｉｆｆ及びＭａｒｓｈａｌｌ、２２３〜３２）。さらに、糖尿病の高グリシン血症により、網膜に細胞内のソルビトール及びフルクトースが蓄積する（Ｇａｂｂａｙ、５２１〜３６）。それに続く網膜の浸透圧バランスの崩壊は細胞損傷に至るとされており、他の合併症の中でも、血液網膜柵の完全な状態が失われるという点で重要である（Ｇａｂｂａｙ、５２１〜３６）。
先に記載のように、アマンタジンは、早期細胞死からの細胞の保護に関与する遺伝子を誘発し、またアクアポリン、タウリン、及び浸透圧の恒常性維持に関与しているその他多くの溶質キャリア輸送チャンネルの発現を誘発する。したがって、これら遺伝子のアップレギュレーションは、糖尿病性網膜症及び糖尿病性黄斑浮腫によって引き起こされる障害から網膜を保護するのに役立つと考えられ、糖尿病性網膜症及び糖尿病性黄斑浮腫の治療にアマンタジンを使うことを支持するものと考えられる。
３．４ 加齢黄斑変性症
黄斑変性症は、黄斑の変性による中心視の発達性損失を引き起こす網膜変性疾患である。黄斑変性症の発生進展のリスクは、年齢と共に高まる。黄斑は、眼に見える細部を識別する働きを担っている網膜の中心部である。光受容体とも呼ばれる網膜の受光細胞は、光を電気インパルスに変換し、次いでそのインパルスを視神経を介して脳に伝達する。
黄斑変性症には、ドライ型とウェット型の２種類ある。ドライ黄斑変性症は、全症例の９０％を占める。また、ドライ黄斑変性症は、萎縮型、非滲出型又はドルーゼ型黄斑変性症と呼ばれることもある。ドライ黄斑変性症の場合、ドルーゼと呼ばれる黄白色の沈着物が、黄斑の下の網膜色素上皮（ＲＰＥ）組織に蓄積する。ドルーゼ沈着物は光受容体細胞の老廃物から成る。理由は分かっていないが、ＲＰＥが老廃物を処理する能力を失うことがある。その結果、ドルーゼが蓄積する。このような沈着物が網膜の光受容体の機能を損ない、それら細胞の発達性変性を引き起こしていると考えられる。
ウェット黄斑変性症は全黄斑変性症症例の１０％を占める。ウェット黄斑変性症は、脈絡膜新血管新生型、網膜下新血管新生型、滲出型又は円板型変性症とも呼ばれる。ウェット黄斑変性症では、黄斑の下に異常な血管成長が生じる。このような血管から血液及び液が網膜に漏れ出し、光受容体細胞を損傷する。ウェット黄斑変性症は急速に進行する傾向があり、中心視に重い障害を引き起こすことがある（Ｆｉｇｈｔｉｎｇ Ｂｌｉｎｄｎｅｓｓ ｈｔｔｐ://ｗｗｗ．ｂｌｉｎｄｎｅｓｓ．ｏｒｇ／により提供された情報）。
近年、黄斑変性症の治療法の開発は少なからぬ進歩をとげてきた。レーザー光凝固法は、ウェット黄斑変性症の一部の症例では（周辺ＣＮＶ−脈絡膜新血管新生黄斑変性症）好ましい治療法である。
先に記載のように、アマンタジンは、凝固経路に関与する遺伝子（ＣＤ４４、Ｆ３、ＩＲＦ１、ＰＬＡ２Ｇ４Ａ及びＶＥＧＦ）の発現をアップレギュレートする。
ＶＥＧＦとＣＤ４４抗原は、レーザー光凝固法による治療後３〜５日に最大量誘発されることが明らかになっており、ＲＰＥ、脈絡膜血管内皮及び炎症細胞に限局していた（Ｓｈｅｎ他、１０６３〜７１）。
Ｆ３（組織因子）は凝固カスケードに関与していることが分かっている。Ｆ３は、通常血管の外傷によって外因系の活性化が開始されるときに放出され、また因子Ｘの因子ＶＩＩａ触媒による活性化における補因子である（Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ他、３９７〜４１７）。ＰＬＡ２Ｇ４Ａ（細胞質ホスホリパーゼＡ２）は、膜リン脂質からのアルキドン酸の放出を触媒する。アラキドン酸は、血行動態の調節、炎症反応及びその他の細胞プロセスに関与している、集合的にエイコサノイドとして知られる多種類の生物学的エフェクターの前駆体としての役割を果たす。アラキドン酸の放出によってトロンボキサンＢ２（トロンボキサンＡ２の水和最終産物）、すなわち重要な内因性血小板アクチベーター及び血管組織の収縮作用物質が増加する（Ｒａｏ、２６３〜７５）。
また、正常な角膜に比べ、血管新生した角膜ではＩＲＦ１（インターフェロン調節因子１）がダウンレギュレートされていることが明らかになっている。ＩＲＦ１は、インターフェロンアルファ及びベータ（血管新生インヒビター）転写のアクチベーターとしての役割をする。さらに、ＩＲＦ１がアポトーシス及び腫瘍抑制においても役割を果たしていることが明らかになっている（Ｋｒｏｇｅｒ他、１０４５〜５６）。
要するに、これら遺伝子のアップレギュレーションは、毛細血管からの血液の漏出や微小動脈瘤の形成を伴う血液網膜柵の破綻の影響を最小化するのにアマンタジンが有用であることを示唆するものである。
また、アマンタジンは、血管新生／血管新生抑制活性を有する幾つかの遺伝子、具体的にはＳｕｌｆ、ＩＲＦ１、ＲＢＰ１、ＲＢＰ４、ＴＩＭＰ−３及びＶＥＧＦをアップレギュレートする。ＨＳｕｌｆ−１は、細胞表面の硫酸化を減少させるヘパリン分解エンドスルファターゼである。卵巣癌細胞系におけるＨＳｕｌｆ−１発現が、細胞増殖を減弱させまたアポトーシス誘発の感受性を減弱させることが明らかになっている（Ｌａｉ他、２３１０７〜１７）。ヘパリナーゼが血管新生インヒビターであることは知られており、したがってアマンタジンが、ＨＳｕｌｆ−１遺伝子発現を増強することによって新血管新生と毛細血管内皮細胞の増殖の両方を阻害する可能性がある（Ｓａｓｉｓｅｋｈａｒａｎ他、１５２４〜２８）。
メタロプロテアーゼ３組織インヒビターは非常に良く知られている血管新生阻害物質である。最近の研究によって、ＴＩＭＰ３の血管内皮因子（ＶＥＧＦ）媒介血管新生阻害活性が証明されており、それが生じる機序、すなわちＴＩＭＰ３がＶＥＧＦのＶＥＧＦ受容体２への結合を妨げ、下流のシグナル伝達及び血管新生を阻害することが確認されている（Ｑｉ他、４０７−１５）。一方で、ＶＥＧＦはアップレギュレートされており、血管新生分子としての役割を果たしていることが知られているが、ＶＥＧＦは、血管新生抑制性と考えられているＩＰ−１０ケモカイン発現を誘発することが明らかになっている（Ｌｉｎ他、７９〜８２）。アマンタジンがＴＩＭＰ３及びＶＥＧＦ遺伝子発現に及ぼす総合的な影響が、最終的なアマンタジンの血管新生阻害効果に寄与している可能性がある。また、２つのレチノール結合タンパク質がアップレギュレートされているが、これらのタンパク質は血液中のレチノール（ビタミンＡアルコール）特異的キャリアである。したがって、それらタンパク質をアップレギュレートすることにより、より多くのレチノールが最終標的組織に送達されることになり、その組織においてアマンタジンの血管新生阻害活性が解明できることになる（Ｐａｌ他、１１２〜２０）。
結論として、血管新生／血管新生抑制活性を伴う、アマナタジンによる上記遺伝子発現のアップレギュレーションは、加齢黄斑変性症によって生じる障害から網膜を保護するのに役立っており、このことは、前記眼疾患の治療にアマンタジンが使えることを示唆するものである。
３．５ 網膜色素変性症、桿体／錐体変性、早発性網膜変性症及び脈絡膜硬化症
網膜色素変性症（ＲＰ）は、網膜をおかす一群の遺伝性眼疾患につけられる病名である。網膜色素変性症は、発達性の視力低下をもたらす、光受容体（桿状体及び錐状体）細胞又は網膜色素上皮（ＲＰＥ）の変性を引き起こす。その他の遺伝性疾患でもＲＰの一部の症状が現れる。これらの状態の一部に、視力低下だけでなく他の症状が合併している。これら遺伝性疾患で最も一般的なものはアッシャー症候群であり、この疾患は聴力低下及び視力低下をもたらす。その他まれに起こる症候群の例としては、バルデ−ビードル（ローレンス−ムーン）症候群、ベスト病、脈絡膜欠損症、脳回転状萎縮、レーベルの先天性黒内障及びスターガールト病が挙げられる。光視症（閃光の感覚）の初期症状、中心視異常、色覚異常又は眼の使い方に著しい非対称性を有する人はＲＰではなく、桿体／錐体変性及び脈絡膜硬化症などの他のレチノイド回路に関連する網膜変性症又は網膜疾患である可能性がある（Ｆｉｇｈｔｉｎｇ Ｂｌｉｎｄｎｅｓｓ ｈｔｔｐ://ｗｗｗ．ｂｌｉｎｄｎｅｓｓ．ｏｒｇ／により提供された情報）。
表６に示すように、アマンタジンは、ＬＲＡＴ、ＲＰＥ６５、ＲＢＰ１／ＣＲＡＢＰ−１、ＲＢＰ４、ＲＧＲ及びＴＴＲなどの、レチノイド回路に関与している幾つかの遺伝子をアップレギュレートする。網膜色素上皮（ＲＰＥ）は、網膜光受容体細胞の外表面に位置する一層の単純な上皮細胞である。そして、レチノイド視覚回路、光受容体外節円板食作用及びリサイクリングなどの多くのＲＰＥ特異的機能を含め、光受容体細胞を持続的に維持するために必須である網膜外層代謝の多くに面に関与している。Ｈａｍｅｌ他（１９９３）は、ＲＰＥで発現するユニークなＲＰＥ特異的ミクロソームタンパク質、ＲＰＥ６５の特徴付けを行い、クローンした。ＲＰＥ６５遺伝子の破壊が、網膜色素上皮における全トランス型レチニルエステルの重度の蓄積、１１シス型レチナールの欠乏及びそれに伴うロドプシンの欠乏、そして最終的に失明をもたらすことが明らかになっている。したがって、網膜におけるＲＰＥ６５遺伝子の発現を増強するアマンタジンの効果は、ＲＰ又はＬＣＡ患者のＲＰＥ変性予防に役立つことになろう。
また、アマンタジンはＬＲＡＴ、ＲＢＰ１/ＣＲＡＢＰ−１、ＲＢＰ４、ＲＧＲ及びＴＴＲをアップレギュレートする。これらの遺伝子は、網膜色素上皮において、主として脈絡膜抹消循環への全トランス型レチノールの供給、トランス型レチナールのシス型レチナールへの異性化、及びレチノールのレチニルエステルへのエステル化に関与している。
アマンタジンは、タンパク質ｓｐ：Ｐ４７８０４（ヒト）ＲＧＲ＿ヒトＰＲＥ網膜Ｇタンパク質結合受容体に類似のラット転写配列である、プローブセット１３８９４７３＿のシグナルを増強する。視覚回路において重要なステップは、ＲＰＥにおける全トランス型レチナールの１１シス型レチナールへの異性化であり、ＲＧＲタンパク質は大部分が内因性の全トランス型レチナールに結合する。すなわち、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＲＧＲの暴露によって、結合全トランス型異性体は１１シス型レチナールに立体異性変換される。ＲＧＲをコードするヒト遺伝子における突然変異は、網膜色素変性症及び脈絡膜硬化症と関連している（Ｃｈｅｎ他、２５６〜６０）。
もう１つの重要な遺伝子は、ホスファチジルコリン（ＰＣ）のアシル部分を転移することによってレチニルエステルを合成する、レシチンレチノールアシル転移酵素（ＬＲＡＴ）である。ＬＲＡＴにおける突然変異もまた、レーベルの先天性黒内障（ＬＣＡ）及び早発性網膜変性症と関連がある（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ他、１２３〜２４）。さらに、アマンタジンによってアップレギュレートされるレチノイド結合タンパク質及びトランスサイレチンは、血中レチノールの標的組織への輸送、及び腎臓中レチノールの濾過の予防に関与しているという報告がある（Ｋｕｋｓａ他、２９５９〜８１；Ｗｅｉ他、８６６〜７０）。
結論として、アマンタジンは、ＲＰＥにおける化学反応にとって非常に重要な基質の送達及び利用を向上させることによって、また、網膜変性症、桿体／錐体変性、早発性網膜変性症及び脈絡膜硬化症などの特異的変性疾患に欠けている遺伝子をアップレギュレートすることによって、レチノイド回路に関連する眼疾患において重要であると報告されている遺伝子の発現を調整するのである。
アマンタジンによる治療を受けた網膜又はラットにおける遺伝子発現変化の本発明者等の発見は、多数の眼疾患の治療におけるアマンタジンの利点を強固に裏付けるものである。
４．参照
Ahmed, F. et al. "Microarray analysis of changes in mRNA levels in the rat retina after experimental elevation of intraocular pressure." Invest Ophthalmol.Vis.Sci 45.4 (2004): 1247-58.
Alward, W. L. et al. "Clinical features associated with mutations in the chromosome 1 open-angle glaucoma gene (GLC1A)." N.Engl.J Med 338.15 (1998): 1022-27.
Antcliff, R. J. and J. Marshall. "The pathogenesis of edema in diabetic maculopathy." Semin.Ophthalmol. 14.4 (1999): 223-32.
Chen, P. et al. "A photic visual cycle of rhodopsin regeneration is dependent on Rgr." Nat.Genet. 28.3 (2001): 256-60.
Chen, S. et al. "Crx, a novel Otx-like paired-homeodomain protein, binds to and transactivates photoreceptor cell-specific genes." Neuron 19.5 (1997): 1017-30.
Ciulla, T. A., A. G. Amador, and B. Zinman. "Diabetic retinopathy and diabetic macular edema: pathophysiology, screening, and novel therapies." Diabetes Care 26.9 (2003): 2653-64.
Endo. Symmetrel PDR Label (Endo Labs). 2000. Ref Type: Report
Fingert, J. H. et al. "Analysis of myocilin mutations in 1703 glaucoma patients from five different populations." Hum.Mol.Genet. 8.5 (1999): 899-905.
Fiucci, G. et al. "Caveolin-1 inhibits anchorage-independent growth, anoikis and invasiveness in MCF-7 human breast cancer cells." Oncogene 21.15 (2002): 2365-75.
Frederick, R. et al. "Modulators of the coagulation cascade: focus and recent advances in inhibitors of tissue factor, factor VIIa and their complex." Curr.Med Chem. 12.4 (2005): 397-417.
Freund, C. L. et al. "Cone-rod dystrophy due to mutations in a novel photoreceptor-specific homeobox gene (CRX) essential for maintenance of the photoreceptor." Cell 91.4 (1997): 543-53.
Furukawa, T., E. M. Morrow, and C. L. Cepko. "Crx, a novel otx-like homeobox gene, shows photoreceptor-specific expression and regulates photoreceptor differentiation." Cell 91.4 (1997): 531-41.
Furukawa, T. et al. "Retinopathy and attenuated circadian entrainment in Crx-deficient mice." Nat.Genet. 23.4 (1999): 466-70.
Gabbay, K. H. "Hyperglycemia, polyol metabolism, and complications of diabetes mellitus." Annu.Rev.Med 26 (1975): 521-36.
Goralski, K. B., D. D. Smyth, and D. S. Sitar. "In vivo analysis of amantadine renal clearance in the uninephrectomized rat: functional significance of in vitro bicarbonate-dependent amantadine renal tubule transport." J Pharmacol Exp.Ther. 290.2 (1999): 496-504.
Graw, J. and J. Loster. "Developmental genetics in ophthalmology." Ophthalmic Genet. 24.1 (2003): 1-33.
Hamel, C. P. et al. "Molecular cloning and expression of RPE65, a novel retinal pigment epithelium-specific microsomal protein that is post-transcriptionally regulated in vitro." J Biol.Chem. 268.21 (1993): 15751-57.
Hsu, H., J. Xiong, and D. V. Goeddel. "The TNF receptor 1-associated protein TRADD signals cell death and NF-kappa B activation." Cell 81.4 (1995): 495-504.
Ishibashi, T. et al. "cDNA microarray analysis of gene expression changes induced by dexamethasone in cultured human trabecular meshwork cells." Invest Ophthalmol.Vis.Sci 43.12 (2002): 3691-97.
Jacobson, S. G. et al. "Retinal degenerations with truncation mutations in the cone-rod homeobox (CRX) gene." Invest Ophthalmol.Vis.Sci 39.12 (1998): 2417-26.
Joza, N. et al. "Essential role of the mitochondrial apoptosis-inducing factor in programmed cell death." Nature 410.6828 (2001): 549-54.
Klein, R., B. E. Klein, and S. E. Moss. "The Wisconsin Epidemiologic Study of Diabetic Retinopathy. XVI. The relationship of C-peptide to the incidence and progression of diabetic retinopathy." Diabetes 44.7 (1995): 796-801.
Kroger, A. et al. "IRF-1 reverts the transformed phenotype of oncogenically transformed cells in vitro and in vivo." Oncogene 22.7 (2003): 1045-56.
Kuksa, V. et al. "Retinoid cycle in the vertebrate retina: experimental approaches and mechanisms of isomerization." Vision Res 43.28 (2003): 2959-81.
Lai, J. et al. "Loss of HSulf-1 up-regulates heparin-binding growth factor signaling in cancer." J Biol.Chem. 278.25 (2003): 23107-17.
Leung, Y. F. et al. "The dual role of dexamethasone on anti-inflammation and outflow resistance demonstrated in cultured human trabecular meshwork cells." Mol.Vis. 9 (2003): 425-39.
Li, L. et al. "Caveolin-1 maintains activated Akt in prostate cancer cells through scaffolding domain binding site interactions with and inhibition of serine/threonine protein phosphatases PP1 and PP2A." Mol.Cell Biol. 23.24 (2003): 9389-404.
Li, X. M. et al. "Amantadine increases aromatic L-amino acid decarboxylase mRNA in PC12 cells." J Neurosci.Res. 53.4 (1998): 490-93.
Lin, C. S. et al. "Vascular endothelial growth factor induces IP-10 chemokine expression." Biochem.Biophys.Res Commun. 292.1 (2002): 79-82.
Livesey, F. J. et al. "Microarray analysis of the transcriptional network controlled by the photoreceptor homeobox gene Crx." Curr.Biol. 10.6 (2000): 301-10.
Lucetti, C. et al. "Amantadine in Huntington's disease: open-label video-blinded study." Neurol.Sci 23 Suppl 2 (2002): S83-S84.
Mao, Y. W. et al. "Human alphaA- and alphaB-crystallins bind to Bax and Bcl-X(S) to sequester their translocation during staurosporine-induced apoptosis." Cell Death.Differ. 11.5 (2004): 512-26.
Maren,T.H. et al. ” The rates of movement of Na+, Cl-, and HCO-3 from plasma to posterior chamber: effect of acetazolamide and relation to the treatment of glaucoma” Invest Ophthalmol. 1976 May;15(5):356-64.
Marte, B. M. and J. Downward. "PKB/Akt: connecting phosphoinositide 3-kinase to cell survival and beyond." Trends Biochem.Sci 22.9 (1997): 355-58.
Militante, J. D. and J. B. Lombardini. "Taurine: evidence of physiological function in the retina." Nutr.Neurosci. 5.2 (2002): 75-90.
Naskar, R., C. K. Vorwerk, and E. B. Dreyer. "Concurrent downregulation of a glutamate transporter and receptor in glaucoma." Invest Ophthalmol.Vis.Sci 41.7 (2000): 1940-44.
Nicholls, D. and D. Attwell. "The release and uptake of excitatory amino acids." Trends Pharmacol Sci 11.11 (1990): 462-68.
Pal, S. et al. "Retinoic acid selectively inhibits the vascular permeabilizing effect of VPF/VEGF, an early step in the angiogenic cascade." Microvasc.Res 60.2 (2000): 112-20.
Qi, J. H. et al. "A novel function for tissue inhibitor of metalloproteinases-3 (TIMP3): inhibition of angiogenesis by blockage of VEGF binding to VEGF receptor-2." Nat.Med 9.4 (2003): 407-15.
Rao, G. H. "Physiology of blood platelet activation." Indian J Physiol Pharmacol 37.4 (1993): 263-75.
Rauen, T., J. D. Rothstein, and H. Wassle. "Differential expression of three glutamate transporter subtypes in the rat retina." Cell Tissue Res. 286.3 (1996): 325-36.
Sasisekharan, R. et al. "Heparinase inhibits neovascularization." Proc.Natl.Acad.Sci U.S.A 91.4 (1994): 1524-28.
Schey, K. L. et al. "Photooxidation of lens alpha-crystallin by hypericin (active ingredient in St. John's Wort)." Photochem.Photobiol. 72.2 (2000): 200-03.
Schuller-Levis, G. B. and E. Park. "Taurine: new implications for an old amino acid." FEMS Microbiol.Lett. 226.2 (2003): 195-202.
Shen, W. Y. et al. "Expression of cell adhesion molecules and vascular endothelial growth factor in experimental choroidal neovascularisation in the rat." Br.J Ophthalmol. 82.9 (1998): 1063-71.
Snijdelaar, D. G., G. Koren, and J. Katz. "Effects of perioperative oral amantadine on postoperative pain and morphine consumption in patients after radical prostatectomy: results of a preliminary study." Anesthesiology 100.1 (2004): 134-41.
Stone, E. M. et al. "Identification of a gene that causes primary open angle glaucoma." Science 275.5300 (1997): 668-70.
Swain, P. K. et al. "Mutations in the cone-rod homeobox gene are associated with the cone-rod dystrophy photoreceptor degeneration." Neuron 19.6 (1997): 1329-36.
Thompson, D. A. et al. "Mutations in the gene encoding lecithin retinol acyltransferase are associated with early-onset severe retinal dystrophy." Nat.Genet. 28.2 (2001): 123-24.
Trencia, A. et al. "Protein kinase B/Akt binds and phosphorylates PED/PEA-15, stabilizing its antiapoptotic action." Mol.Cell Biol. 23.13 (2003): 4511-21.
Van Hooser, J. P. et al. "Recovery of visual functions in a mouse model of Leber congenital amaurosis." J Biol.Chem. 277.21 (2002): 19173-82.
Verkman, A. S. "Role of aquaporin water channels in eye function." Exp.Eye Res. 76.2 (2003): 137-43.
Wei, S. et al. "Studies on the metabolism of retinol and retinol-binding protein in transthyretin-deficient mice produced by homologous recombination." J Biol.Chem. 270.2 (1995): 866-70.
Xi, J. et al. "A comprehensive analysis of the expression of crystallins in mouse retina." Mol.Vis. 9 (2003): 410-19.
Yagami, T. et al. "Effects of an endothelin B receptor agonist on secretory phospholipase A2-IIA-induced apoptosis in cortical neurons." Neuropharmacology 48.2 (2005): 291-300.

Claims (56)

  1. 視神経線維の減少、網膜脈管構造の崩壊、網膜障害、網膜新血管新生、網膜色素変性症、脈絡膜硬化症、加齢黄斑変性症、及び桿体／錐体変性から成る群から選択される少なくとも１つの眼疾患を治療又は予防する方法であって、
    有効量のアマンタジンを、それを必要としている患者に体内投与することを含む方法。
  2. 前記眼疾患が、
    網膜色素変性症、脈絡膜硬化症、加齢黄斑変性症及び緑内障のうちの少なくとも１つが原因である視神経線維の減少、
    糖尿病性網膜症、脈絡膜硬化症、加齢黄斑変性症及び緑内障が原因である網膜脈管構造の崩壊、
    眼内圧の上昇、身体的外傷、レーザー治療、網膜虚血、光、糖尿病及び遺伝的素因のうちの少なくとも１つが原因である網膜障害、並びに
    光、レーザー治療及び遺伝的素因のうちの少なくとも１つが原因である桿体／錐体変性
    のうちの少なくとも１つである請求項１に記載の方法。
  3. 前記アマンタジンの投与が、経口投与、非経口投与、眼内投与、硝子体内投与、脈絡膜内投与及び眼の局所投与のうちの少なくとも１つである請求項１に記載の方法。
  4. 視神経線維機能の低下を防ぐ方法であって、ＣＲＸ、カベオリン、クリスタリン、ＡＫＴ１、ＨＳＰ１Ａ、ＳＬＣ６Ａ６及びアクアポリンの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法。
  5. 前記薬剤が、同時にＰＤＣＤ８及びＴＲＡＤＤの遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現をダウンレギュレートする請求項４に記載の方法。
  6. 前記薬剤が、アダマンタン及びアダマンタン誘導体のうちの少なくとも１つである請求項５に記載の方法。
  7. 前記薬剤がアマンタジンである請求項６に記載の方法。
  8. これだけに限らないが、眼内圧（ＩＯＰ）の上昇による網膜障害などの網膜障害から患者を防護する方法であって、
    ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＩＧＦＢＰ２、ＡＳＳ、クリスタリン、ＳＬＣ６Ａ６、アクアポリン及びＧＡＤ１の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法。
  9. 前記薬剤が、同時にＡＳＮＳ遺伝子の発現をダウンレギュレートする請求項８に記載の方法。
  10. 前記薬剤が、アダマンタン及びアダマンタン誘導体のうちの少なくとも１つである請求項８に記載の方法。
  11. 前記薬剤がアマンタジンである請求項１０に記載の方法。
  12. 網膜新血管新生及び網膜虚血のうちの少なくとも１つから患者を防護する方法であって、
    ＴＩＭＰ３、ＴＩＭＰ２、ＳＵＬＦ１，ＩＦ１，ＲＢＰ１及びＲＢＰ４の各遺伝子のうち少なくとも１つの遺伝子の発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法。
  13. 前記薬剤が、アダマンタン及びアダマンタン誘導体のうちの少なくとも１つである請求項１２に記載の方法。
  14. 前記患者が、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫及び腫瘍形成のうちの少なくとも１つを患っている請求項１２に記載の方法。
  15. 網膜神経保護薬として開発される医薬品開発候補物質を同定する方法であって、未治療の実験動物の遺伝子発現プロファイルと被験物質で治療した動物の遺伝子発現プロファイルとを比較することを含み、前記被験物質が、ＣＲＸ、クリスタリン、カベオリン、ＡＫＴ１、ＳＬＣ６Ａ６、ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＡＳＳ、ＩＧＦＢＰ２、ＴＩＭＰ３及びアクアポリンの各遺伝子から成る群から選択される少なくとも１つの遺伝子のアップレギュレーションに関連している場合に、その被験物質を、網膜神経保護薬として開発される開発候補物質であると見なす方法。
  16. 前記有効量が、ＣＲＸ遺伝子の発現を少なくとも約２．６５倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  17. 前記有効量が、少なくとも１つの型のカベオリン遺伝子の発現を少なくとも約１．９９倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  18. 前記有効量が、少なくとも１つの型のクリスタリン遺伝子の発現を少なくとも約３．８３倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  19. 前記有効量が、ＡＫＴ１遺伝子の発現を少なくとも約１．６９倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  20. 前記有効量が、ＨＳＰＡ１Ａ遺伝子の発現を少なくとも約１．８２倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  21. 前記有効量が、ＳＬＣ６Ａ６遺伝子の発現を少なくとも約２．８９倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  22. 前記有効量が、アクアポリン遺伝子の発現を少なくとも約１．６８倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  23. 前記有効量が、ＭＹＯＣ遺伝子の発現を少なくとも約２．５８倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  24. 前記有効量が、ＳＬＣ１Ａ３遺伝子の発現を少なくとも約２．９４倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  25. 前記有効量が、ＩＧＦＢＰ２遺伝子の発現を少なくとも約２．１３倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  26. 前記有効量が、ＡＳＳ遺伝子の発現を少なくとも約２．５６倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  27. 前記有効量が、ＴＩＭＰ３遺伝子の発現を少なくとも約２．３４倍アップレギュレートするのに有効な量である請求項１５に記載の方法。
  28. 網膜神経保護薬として開発される医薬品開発候補物質を同定する方法であって、未治療の実験動物の遺伝子発現プロファイルと被験物質で治療した動物の遺伝子発現プロファイルとを比較することを含み、前記被験物質が、ＰＤＣＤ８、ＴＲＡＤＤ及びＡＳＮＳの各遺伝子から成る群から選択される少なくとも１つの遺伝子のダウンレギュレーションに関連している場合に、その被験物質を、網膜神経保護薬として開発される開発候補物質であると見なす方法。
  29. 前記有効量が、ＡＳＮＳ遺伝子の発現を少なくとも約２．１２倍ダウンレギュレートするのに有効な量である請求項２８に記載の方法。
  30. 前記有効量が、ＰＤＣＤ８遺伝子の発現を少なくとも約１．７３倍ダウンレギュレートするのに有効な量である請求項２８に記載の方法。
  31. 前記有効量が、ＴＲＡＤＤ遺伝子の発現を少なくとも約１．７５倍ダウンレギュレートするのに有効な量である請求項２８に記載の方法。
  32. 網膜脈管構造を維持する方法であって、
    ＣＲＸ、カベオリン、クリスタリン、ＡＫＴ１、ＨＳＰ１Ａ、ＳＬＣ６Ａ６及びアクアポリンの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子によるタンパク質発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法。
  33. 前記薬剤が、同時に、ＰＤＣＤ８遺伝子及びＴＲＡＤＤ遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子によるタンパク質発現をダウンレギュレートする請求項３２に記載の方法。
  34. 前記薬剤が、アダマンタン及びアダマンタン誘導体のうちの少なくとも１つである請求項３２に記載の方法。
  35. 網膜障害から患者を防護する方法であって、
    ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＩＧＦＢＰ２、ＡＳＳ、クリスタリン、ＳＬＣ６Ａ６及びアクアポリンの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子によるタンパク質発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法。
  36. 前記薬剤が、同時に、ＡＳＮＳタンパク質の発現をダウンレギュレートする請求項３５に記載の方法。
  37. 前記薬剤が、アダマンタン及びアダマンタン誘導体のうちの少なくとも１つである請求項３５に記載の方法。
  38. 網膜血管新生から患者を防護する方法であって、
    ＴＩＭＰ２及びＴＩＭＰ３の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子によるタンパク質発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法。
  39. 前記薬剤が、アダマンタン及びアダマンタン誘導体のうちの少なくとも１つである請求項３８に記載の方法。
  40. 網膜神経保護薬として開発される医薬品開発候補物質を同定する方法であって、
    未治療の実験動物のタンパク質発現プロファイルと被験物質で治療した動物のタンパク質発現プロファイルとを比較することを含み、前記被験物質が、ＣＲＸ、クリスタリン、カベオリン、ＡＫＴ１、ＳＬＣ６Ａ６、ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＡＳＳ、ＩＧＦＢＰ２、ＴＩＭＰ３及びアクアポリンの各タンパク質から成る群から選択される少なくとも１つのタンパク質のアップレギュレーションに関連している場合に、その被験物質を、網膜神経保護薬として開発される開発候補物質であると見なす方法。
  41. 網膜神経保護薬として開発される医薬品開発候補物質を同定する方法であって、
    未治療の実験動物のタンパク質発現プロファイルと被験物質で治療した動物のタンパク質発現プロファイルとを比較することを含み、前記被験物質が、ＰＤＣＤ８、ＴＲＡＤＤ及びＡＳＮＳの各タンパク質から成る群から選択される少なくとも１つのタンパク質のダウンレギュレーションに関連している場合に、その被験物質を、網膜神経保護薬として開発される開発候補物質であると見なす方法。
  42. 眼疾患の治療又は予防用治療薬に対し規制当局の承認を得る方法であって、
    前記治療薬が、
    ＣＲＸ、カベオリン、クリスタリン、ＡＫＴ１、ＨＳＰ１Ａ、ＳＬＣ６Ａ６及びアクアポリンの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のアップレギュレーション、
    ＰＤＣＤ８及びＴＲＡＤＤの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のダウンレギュレーション、
    ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＩＧＦＢＰ２、ＡＳＳ、クリスタリン、ＳＬＣ６Ａ６、アクアポリン及びＧＡＤ１の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のアップレギュレーション、
    ＡＳＮＳ遺伝子の発現のダウンレギュレーション、
    ＴＩＭＰ３、ＴＩＭＰ２、ＳＵＬＦ１及びＩＲＦ１の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のアップレギュレーション、
    ＬＲＡＴ、ＲＢＰ１；ＣＲＡＢＰ−１、ＲＢＰ４、ＲＰＢＥ６５及びＴＴＲの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のアップレギュレーション、並びに
    ＣＡ４遺伝子の発現のダウンレギュレーション
    のうちの少なくとも１つを起こすことを立証するデータを、規制所管機関に提供することを含む方法。
  43. 前記薬剤が、視神経の減少の抑制及び網膜脈管構造の維持のうちの少なくとも一方のためのものであって、前記データは、前記薬剤が、
    ＣＲＸ、カベオリン、クリスタリン、ＡＫＴ１、ＨＳＰ１Ａ、ＳＬＣ６Ａ６及びアクアポリンの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のアップレギュレーション、並びに
    ＰＤＣＤ８及びＴＲＡＤＤの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のダウンレギュレーション
    のうちの少なくとも１つを起こすことを立証するものである請求項４２に記載の方法。
  44. 前記薬剤が、ＩＯＰの上昇による網膜障害防護のためのものであって、前記データは、前記薬剤が、
    ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＩＧＦＢＰ２、ＡＳＳ、クリスタリン、ＳＬＣ６Ａ６、アクアポリン及びＧＡＤ１の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のアップレギュレーション、並びに
    ＡＳＮＳ遺伝子の発現のダウンレギュレーション
    のうちの少なくとも１つを起こすことを立証するものである請求項４２に記載の方法。
  45. 前記薬剤が、網膜血管新生から患者を防護するためのものであって、前記データは、前記薬剤が、ＴＩＭＰ３及びＴＩＭＰ２の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現をアップレギュレートすることを立証するものである請求項４２に記載の方法。
  46. 前記薬剤が、レーザー治療及び網膜虚血のうちの少なくとも１つによる網膜障害防護のためのものであって、前記データは、前記薬剤が、
    ＭＹＯＣ、ＳＬＣ１Ａ３、ＩＧＦＢＰ２、ＡＳＳ、クリスタリン、ＳＬＣ６Ａ６、アクアポリン及びＧＡＤ１の各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のアップレギュレーション、
    ＡＳＮＳ遺伝子の発現のダウンレギュレーション、又は
    両方を起こすことを立証するものである請求項４２に記載の方法。
  47. 前記薬剤が、光及び遺伝性素因のうちの少なくとも１つによる網膜障害防護のためのものであって、前記データは、前記薬剤が、
    ＬＲＡＴ、ＲＢＰ１／ＣＲＡＢＰ−１、ＲＢＰ４、ＲＰＥ６５及びＴＴＲの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現のアップレギュレーション、
    ＣＡ４遺伝子の発現のダウンレギュレーション、又は
    両方を起こすことを立証するものである請求項４２に記載の方法。
  48. レーザー治療及び網膜虚血障害のうちの少なくとも１つから患者を防護する方法であって、
    ＴＩＭＰ３、ＴＩＭＰ２、ＳＵＬＦ１、ＩＲＦ１、ＲＢＰ１、ＲＢＰ４、Ｆ３、ＣＤ４４、ＩＲＦ１、ＰＬＡ２Ｇ４Ａ及びＶＥＧＦＢの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法。
  49. 前記薬剤が、アダマンタン及びアダマンタン誘導体のうちの少なくとも１つである請求項４８に記載の方法。
  50. 前記薬剤が、アマンタジンである請求項４９に記載の方法。
  51. 前記患者が、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、糖尿病性黄斑変性症及び虚血性網膜症のうちの少なくとも１つを患っている請求項４８に記載の方法。
  52. 光及び遺伝的素因による障害のうちの少なくとも１つから患者を防護する方法であって、
    ＬＲＡＴ、ＲＢＰ１／ＣＲＡＢＰ−１、ＲＢＰ４、ＲＰＥ６５及びＴＴＲの各遺伝子のうちの少なくとも１つの遺伝子の発現をアップレギュレートする薬剤を有効量投与することを含む方法。
  53. 前記薬剤が、アダマンタン及びアダマンタン誘導体のうちの少なくとも１つである請求項５２に記載の方法。
  54. 前記薬剤が、アマンタジンである請求項５３に記載の方法。
  55. 前記患者が、網膜色素変性症における桿体／錐体の減少、桿体／錐体ジストロフィー及び脈絡膜硬化症のうちの少なくとも１つを患っている請求項５２に記載の方法。
  56. 前記薬剤が、同時に、ＣＡ４遺伝子の発現をダウンレギュレートする請求項５２に記載の方法。
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CA (1) CA2574466A1 (ja)
WO (1) WO2006012521A2 (ja)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020189821A1 (ko) * 2019-03-20 2020-09-24 (주)레티마크 실명 유발 주요 안질환 진단용 혈액 마커 및 이를 이용한 진단 방법
JP2022524775A (ja) * 2019-03-07 2022-05-10 レチ マーク カンパニー リミテッド 糖尿病網膜症の診断用複合マーカーおよびその用途

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7803931B2 (en) 2004-02-12 2010-09-28 Archemix Corp. Aptamer therapeutics useful in the treatment of complement-related disorders
CN101072555B (zh) * 2004-12-08 2011-06-29 矫正诊疗公司 治疗与视黄醇有关的疾病的方法、分析和组合物
WO2010089355A1 (en) * 2009-02-04 2010-08-12 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Taurine or taurine-like substances for the prevention and treatment of a disease associated with retinal ganglion cell degeneration
ES2758554T3 (es) 2009-12-08 2020-05-05 Univ Case Western Reserve Aminoácidos gama para tratamiento de trastornos oculares
KR102490156B1 (ko) 2014-10-24 2023-01-18 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 헤테로시클릭 화합물

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5922773A (en) * 1992-12-04 1999-07-13 The Children's Medical Center Corp. Glaucoma treatment
US5811446A (en) * 1997-04-18 1998-09-22 Cytos Pharmaceuticals Llc Prophylactic and therapeutic methods for ocular degenerative diseases and inflammations and histidine compositions therefor
CA2368242A1 (en) * 1999-03-12 2000-09-21 Alcon Laboratories, Inc. Combination therapy for treating glaucoma
US6482854B1 (en) * 1999-03-25 2002-11-19 Massachusetts Eye And Ear Infirmary Glaucoma treatment
AU2002248284A1 (en) * 2000-11-01 2002-08-06 Allergan, Inc. Compositions for treatment of ocular neovascularization
US8557855B2 (en) * 2002-07-03 2013-10-15 Allergan, Inc. Methods of using ryanodine antagonists in treating neural injury
US20050031652A1 (en) * 2003-02-25 2005-02-10 Allergan, Inc. Compositions and methods comprising memantine and polyanionic polymers
US20050244478A1 (en) * 2004-04-30 2005-11-03 Allergan, Inc. Anti-excititoxic sustained release intraocular implants and related methods

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2022524775A (ja) * 2019-03-07 2022-05-10 レチ マーク カンパニー リミテッド 糖尿病網膜症の診断用複合マーカーおよびその用途
JP7224690B2 (ja) 2019-03-07 2023-02-20 レチ マーク カンパニー リミテッド 糖尿病網膜症の診断用複合マーカーおよびその用途
WO2020189821A1 (ko) * 2019-03-20 2020-09-24 (주)레티마크 실명 유발 주요 안질환 진단용 혈액 마커 및 이를 이용한 진단 방법

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