JP2008017703A - METHOD FOR PRODUCING FOOD COMPRISING gamma-AMINOBUTYRIC ACID AND ORNITHINE - Google Patents
METHOD FOR PRODUCING FOOD COMPRISING gamma-AMINOBUTYRIC ACID AND ORNITHINE Download PDFInfo
- Publication number
- JP2008017703A JP2008017703A JP2006189435A JP2006189435A JP2008017703A JP 2008017703 A JP2008017703 A JP 2008017703A JP 2006189435 A JP2006189435 A JP 2006189435A JP 2006189435 A JP2006189435 A JP 2006189435A JP 2008017703 A JP2008017703 A JP 2008017703A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- ornithine
- gaba
- acid
- food
- producing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
本発明は、乳酸菌培養によって得られるγ−アミノ酪酸とオルニチンを含有する組成物又は食品の製造方法に関するものである。 The present invention relates to a method for producing a composition or food containing γ-aminobutyric acid and ornithine obtained by lactic acid bacteria culture.
γ−アミノ酪酸(γ−amino butyric acid、以下、GABAと略す。)は生物界に微量ながら広く存在する非タンパク質構成の遊離アミノ酸であり、ヒトにおいては脳内で神経伝達物質として働くことが知られている。食品素材としてのGABAは血圧降下作用、精神安定作用、脳機能改善作用、更年期障害症状緩和作用、成長ホルモン分泌促進作用、中性脂肪増加抑制作用等の生理作用を有している。 γ-aminobutyric acid (hereinafter abbreviated as GABA) is a non-protein free amino acid that exists widely in the living world but is known to act as a neurotransmitter in the brain. It has been. GABA as a food material has physiological actions such as a blood pressure lowering action, a tranquilizing action, a brain function improving action, a climacteric disorder symptom reducing action, a growth hormone secretion promoting action, and a neutral fat increase inhibiting action.
一方、オルニチンも生物界に微量ながら広く存在する非タンパク質構成の遊離アミノ酸であり、肝臓のオルニチン回路の重要な成分でアンモニアの代謝に関与していることが知られている。食品素材としてのオルニチンは、成長ホルモン分泌促進作用、肝機能改善作用、免疫機能改善作用、疲労改善作用、美肌作用等の生理作用を有している。 On the other hand, ornithine is a non-protein free amino acid widely present in a small amount in the living world, and is known to be involved in the metabolism of ammonia as an important component of the ornithine cycle in the liver. Ornithine as a food material has physiological actions such as growth hormone secretion promoting action, liver function improving action, immune function improving action, fatigue improving action, and skin beautifying action.
このことから、GABAとオルニチンを含有する組成物は、健康維持意識の高い現代人にとって有効な生理作用を多数有することが期待される。 From this, it is expected that a composition containing GABA and ornithine has many physiological effects that are effective for modern people with high health maintenance awareness.
従来、GABAとオルニチンを含有する組成物を製造しようとする場合、各々の純品及び/又はその塩及び/又はそれらの含有物を混合する、または、一方のアミノ酸の製造工程でもう一方のアミノ酸の純品及び/又はその塩及び/又はそれらの含有物を添加するしかなく、コストが高くなった。 Conventionally, when a composition containing GABA and ornithine is to be produced, each pure product and / or salt thereof and / or their contents are mixed, or the other amino acid is produced in the production process of one amino acid. The pure product and / or the salt thereof and / or the content thereof must be added to increase the cost.
また、GABAは玄米、茶、一部の野菜、果物等の食品に含まれることが分かっているが、その含量は低く、上記の効能を得るだけの有効量を摂取することは困難であった。そのため、食品中のGABA含量を高める方法が種々検討されてきた。 In addition, GABA is known to be contained in foods such as brown rice, tea, some vegetables, fruits, etc., but its content is low and it is difficult to take an effective amount sufficient to obtain the above-mentioned effects. . Therefore, various methods for increasing the GABA content in foods have been studied.
食品中のGABA含量を高める方法としては、食品中にGABA産生能を持つ微生物を接種するかあるいは食品のもつ酵素を利用してGABA含量を高める方法と、微生物により生産されたエキス化されたGABAを食品に添加する方法の2種類があった。 Methods for increasing the GABA content in foods include inoculating microorganisms having GABA producing ability in foods or increasing the GABA content using enzymes of foods, and extracted GABA produced by microorganisms. There were two types of methods of adding to the food.
前者の方法について、食品中にGABA産生能を持つ微生物を接種する方法には、脱脂乳とトマト果汁を含む培地にラクトバチルス・ヘルベチカス(Lactobacillus helveticus)およびラクトバチルス・カゼイ(L.casei)の2種の乳酸菌を添加して乳酸醗酵を行う方法(特許文献1参照)、乳類にグルタミン酸遊離活性を有する乳酸菌およびグルタミン酸デカルボキシラーゼ活性を有する乳酸菌とを接種し乳酸醗酵を行う方法(特許文献2参照)、魚醤油にラクトバチルス・プランタラム(L.plantaram)を添加して乳酸醗酵を行う方法(特許文献3参照)、飲食品または調味食品原料にグルタミン酸またはグルタミン酸含有物と、GABA生産能を有する乳酸菌とを添加し乳酸醗酵を行う方法(特許文献4参照)等が開示されている。 As for the former method, a method of inoculating a microorganism having a GABA producing ability into foods is carried out by adding Lactobacillus helveticus and Lactobacillus casei to a medium containing skim milk and tomato juice. A method of performing lactic acid fermentation by adding two kinds of lactic acid bacteria (see Patent Document 1), a method of inoculating milk with lactic acid bacteria having glutamate-releasing activity and lactic acid bacteria having glutamate decarboxylase activity (Patent Document 2) Reference), Lactobacillus plantarum (L. plantaram) is added to fish soy sauce and lactic acid fermentation is performed (see Patent Document 3), glutamic acid or glutamic acid-containing material and GABA production ability are added to food and beverage or seasoning food ingredients Method for performing lactic acid fermentation by adding lactic acid bacteria having See Patent Document 4) have been disclosed.
また、食品のもつ酵素を利用してGABA含量を高める方法には、米胚芽、米糠、小麦胚芽などの中に元来含まれる酵素の作用を利用してGABA富化穀物を製造する技術(例えば、特許文献5及び6参照)、トマト、カボチャ等の野菜などの中に含まれる酵素の作用を利用してGABA富化組成物を製造する技術(例えば、特許文献7〜9参照)、茶葉を嫌気処理することによってGABA含量の高い茶葉を製造する技術(例えば、特許文献10参照)などが報告されている。 In addition, as a method for increasing the GABA content using enzymes of foods, a technique for producing GABA-enriched cereals using the action of enzymes originally contained in rice germ, rice bran, wheat germ, etc. (for example, , Patent Documents 5 and 6), a technique for producing a GABA-enriched composition using the action of enzymes contained in vegetables such as tomatoes and pumpkins (see, for example, Patent Documents 7 to 9), tea leaves Techniques for producing tea leaves with a high GABA content by anaerobic treatment (for example, see Patent Document 10) have been reported.
しかしながら、これらの方法によってGABA含量を高めた食品は、処理前と比較すると含量が高くなっているものの、いまだ満足いくものでなかった。特に、他の飲食品に添加・混合する場合には、さらにGABA含量を高める必要があった。また、これらの方法は、長期間の醗酵が必要であり生産性が低い、食品によっては該食品中では必ずしも乳酸菌がGABAを産生しない、といった問題があった。また、上記記載の方法の多くではグルタミン酸または/およびその塩または/およびそれらの含有物を添加するが、生産効率の悪さからグルタミン酸が残存し、食品本来の風味を失う、といった問題があった。 However, although the foodstuff which raised GABA content by these methods was high compared with the thing before a process, it was still unsatisfactory. In particular, when adding and mixing to other foods and drinks, it was necessary to further increase the GABA content. In addition, these methods have problems that long-term fermentation is required and productivity is low, and depending on the food, lactic acid bacteria do not necessarily produce GABA in the food. In many of the methods described above, glutamic acid or / and a salt thereof or / and their contents are added, but there is a problem that glutamic acid remains due to poor production efficiency and loses the original flavor of food.
一方、後者の方法について、微生物によりGABAを生産する方法として、グルタミン酸および/またはその塩を含む醗酵培地中で乳酸菌による乳酸醗酵を行う方法が挙げられる。乳酸菌としては、ラクトバチルス・ヒルガルディーK−3(Lactobacillus hilgardiiK−3)(特許文献11)、ラクトバチルス・ブレビスTY414(L.brevis TY414)(特許文献12)、ラクトバチルスsp.Y−3(Lactobacillus sp.Y−3)(特許文献13)が開示されている。この後者の方法では、食品に後からGABAを添加するために、化学物質の添加物を加えるという悪いイメージを与える。また、醗酵培地由来の香味物質が食品に移行し、食品本来の香味を損なったりする恐れがあった。 On the other hand, with respect to the latter method, as a method for producing GABA by a microorganism, a method of performing lactic acid fermentation with lactic acid bacteria in a fermentation medium containing glutamic acid and / or a salt thereof can be mentioned. Examples of lactic acid bacteria include Lactobacillus hilgardi K-3 (Patent Document 11), Lactobacillus brevis TY414 (L. brevis TY414) (Patent Document 12), and Lactobacillus sp. Y-3 (Lactobacillus sp. Y-3) (patent document 13) is disclosed. This latter method gives the bad image of adding chemical additives in order to add GABA to the food later. Moreover, the flavor substance derived from a fermentation medium may transfer to a foodstuff and may impair the original flavor of a foodstuff.
一方、オルニチンもキノコ類、シジミ、ヒラメ、キハダマグロ、チーズ等に比較的多く含まれることが知られているが、その含量は低く、前記の効能を得るだけの有効量を摂取することは困難であった。 On the other hand, ornithine is also known to be relatively contained in mushrooms, rainbow trout, flounder, yellowfin tuna, cheese, etc., but its content is low and it is difficult to ingest an effective amount sufficient to obtain the above-mentioned effects. there were.
例えば、非特許文献1には、シロタモギタケ(現ブナシメジ)の成熟柄には100g中284.4mg、特許文献14には、−20℃緩慢冷却したシジミの抽出液凍結乾燥物100g中758mg、非特許文献2には、白菜漬を7℃で30日間保存したもの100g中に44.62mg、非特許文献3には、Mini St Paulin type cheese100g中に52.8mg含まれるとされている。しかし、これら以外の食品にはほとんど含まれず、固形分100g中のオルニチン量が50mgを超える食品は少なかった。 For example, Non-Patent Document 1 includes 284.4 mg in 100 g for the mature pattern of Shirotamogitake (currently Bunashimeji), and Patent Document 14 includes 758 mg in 100 g of lyophilized extract of shijimi that has been slowly cooled at −20 ° C. Patent Document 2 describes that 44.62 mg is contained in 100 g of Chinese cabbage preserved at 7 ° C. for 30 days, and Non-Patent Document 3 includes 52.8 mg in 100 g of Mini St Paulin type cheese. However, it was hardly contained in foods other than these, and there were few foods in which the amount of ornithine in solid content 100g exceeded 50 mg.
食品中のオルニチン含量を高める方法としては、オルニチンを含有する生物の生体反応を利用してオルニチン含量を高める方法と、工業的に生産されたオルニチンを食品に添加する方法の2種類があった。 There are two methods for increasing the ornithine content in foods, a method for increasing the ornithine content using the biological reaction of organisms containing ornithine and a method for adding ornithine produced industrially to foods.
オルニチンを含有する生物の生体反応を利用してオルニチン含量を高める方法としては、シジミ貝に冷却負荷をかけ、そのオルニチン生合成反応を促進する方法(特許文献14)が知られている。しかし、この方法はシジミにしか応用することができない。 As a method for increasing the ornithine content by utilizing the biological reaction of an organism containing ornithine, a method is known (Patent Document 14) in which a cooling load is applied to swordfish shells to promote the ornithine biosynthesis reaction. However, this method can only be applied to Shijimi.
オルニチンを工業的に生産する方法としては、化学合成法と発酵法がある。ただし、この方法では、食品に後からオルニチンを添加するために、化学物質の添加物を加えるという悪いイメージを与える。 As a method for industrially producing ornithine, there are a chemical synthesis method and a fermentation method. However, this method gives a bad image of adding a chemical additive in order to add ornithine to the food later.
上記したオルニチンを比較的多く含む食品中のGABA含量は、シジミ、Mini St Paulin type cheeseには含有されず、シロタモギタケの成熟柄には100g中12.8mg、白菜漬を7℃で30日間保存したもの100g中に12.42mgしか含有されない。よって、GABAとオルニチンを食品から摂取するには別々の食品から摂取するしかなく、また、その含有量も少量であるためその効能が期待できるほど摂取するのは非現実的であった。
このような背景から、GABAとオルニチンの両方を同時に効率よく製造できる方法が求められていた。また、食品中のGABAとオルニチン含量を、各々の純品又は/及びそれらの塩又は/及びそれらの含有物を添加することなく、かつ、効率よく増加させる方法が求められていた。本発明は、このような状況を鑑みて発明されたものである。 From such a background, a method capable of efficiently producing both GABA and ornithine simultaneously has been demanded. Moreover, the method of increasing GABA and ornithine content in a foodstuff efficiently without adding each pure product or / and their salts or / and those content was calculated | required. The present invention has been invented in view of such a situation.
本発明者らは上記した課題について鋭意検討した結果、γ−アミノ酪酸生産能とオルニチン生産能の両方を有する乳酸菌を利用することで上記課題が解決できることを見出し、本発明を完成するに至った。 As a result of intensive studies on the above problems, the present inventors have found that the above problems can be solved by using a lactic acid bacterium having both γ-aminobutyric acid-producing ability and ornithine-producing ability, and have completed the present invention. .
すなわち、本発明の第一は、グルタミン酸又は/及びその塩類と、アルギニン又は/及びその塩類を含有する培地に、γ−アミノ酪酸生産能とオルニチン生産能の両方を有する乳酸菌を接種し乳酸発酵することを特徴とするγ−アミノ酪酸とオルニチンを含有する組成物の製造方法を要旨とするものである。 That is, in the first aspect of the present invention, lactic acid fermentation is performed by inoculating a medium containing glutamic acid or / and salts thereof and arginine or / and salts thereof with lactic acid bacteria having both γ-aminobutyric acid producing ability and ornithine producing ability. The gist of the present invention is a method for producing a composition containing γ-aminobutyric acid and ornithine.
また、本発明の第二は、食品原料に、γ−アミノ酪酸生産能とオルニチン生産能の両方を有する乳酸菌を接種し乳酸発酵することを特徴とするγ−アミノ酪酸とオルニチンを含有する食品の製造方法を要旨とするものであり、好ましくは、食品原料に、さらにグルタミン酸又は/及びその塩類を含ませる前記したγ−アミノ酪酸とオルニチンを含有する食品の製造方法であり、また好ましくは、食品原料に、さらにアルギニン又は/及びその塩類を含ませる前記したいずれかに記載のγ−アミノ酪酸とオルニチンを含有する食品の製造方法であり、また好ましくは、食品原料が、あらかじめ蛋白分解酵素により処理されたものである前記したいずれかに記載のγ−アミノ酪酸とオルニチンを含有する食品の製造方法であり、さらに好ましくは、γ−アミノ酪酸生産能とオルニチン生産能の両方を有する乳酸菌が、ラクトバチルス ブレビス(Lactobacillus brevis)に属する乳酸菌である前記したいずれかに記載のγ−アミノ酪酸とオルニチンを含有する組成物又は食品の製造方法であり、さらに好ましくは、食品原料が、アスパラガスから得られるものである前記したいずれかに記載のγ−アミノ酪酸とオルニチンを含有する食品の製造方法である。 In addition, the second of the present invention is a food containing γ-aminobutyric acid and ornithine characterized by inoculating a lactic acid bacterium having both γ-aminobutyric acid producing ability and ornithine producing ability into a food raw material and fermenting lactic acid. The manufacturing method is the gist of the present invention, preferably the above-described method for producing a food containing γ-aminobutyric acid and ornithine, which further contains glutamic acid or / and a salt thereof in the food material, and preferably food. The method for producing a food containing γ-aminobutyric acid and ornithine according to any one of the above, wherein the raw material further contains arginine or / and a salt thereof, and preferably the food raw material is previously treated with a proteolytic enzyme. A method for producing a food containing γ-aminobutyric acid and ornithine as described above, and more preferably γ The method for producing a composition or food containing γ-aminobutyric acid and ornithine according to any one of the above, wherein the lactic acid bacterium having both aminobutyric acid producing ability and ornithine producing ability is a lactic acid bacterium belonging to Lactobacillus brevis (Lactobacillus brevis) More preferably, it is a method for producing a food containing γ-aminobutyric acid and ornithine as described above, wherein the food material is obtained from asparagus.
さらに、本発明の第三は、前記したいずれかに記載の製造方法によって製造されるγ−アミノ酸とオルニチンを含有する組成物又は食品を要旨とするものである。 Furthermore, a third aspect of the present invention is a composition or food containing γ-amino acid and ornithine produced by any one of the production methods described above.
本発明によれば、GABAとオルニチンの両方を同時に、効率よく製造することができる。また、食品中のGABAとオルニチン含量を、各々の純品又は/及びそれらの塩又は/及びそれらの含有物を添加することなく、かつ、効率よく増加させることができる。 According to the present invention, both GABA and ornithine can be efficiently produced simultaneously. In addition, the GABA and ornithine contents in the food can be efficiently increased without adding each pure product or / and their salts or / and their contents.
以下、本発明を詳細に説明する。先ず本発明の第一について説明する。 Hereinafter, the present invention will be described in detail. First, the first of the present invention will be described.
本発明において用いられる乳酸菌は、食品に用いても安全であり、GABA生産能とオルニチン生産能を併せ持つことが必要である。そのような乳酸菌としては、Lactbacillus brevis、L.lactis等に属する乳酸菌が挙げられる。これらに属する乳酸菌株のうち、本発明者らが以前に自然界より見出したL.brevis UAS−4(FERM P−20710)、L.brevis UAS−6(FERM P−20711)はGABA生産能およびオルニチン生産能が高く、より好ましい。本発明においては、これらに属する乳酸菌株を単独で用いても構わないし、2以上の菌株を組み合わせて用いてもよい。 The lactic acid bacteria used in the present invention are safe even when used in foods, and must have both GABA producing ability and ornithine producing ability. Examples of such lactic acid bacteria include Lactobacillus brevis, L. et al. and lactic acid bacteria belonging to lactis and the like. Among the lactic acid strains belonging to these, L. has previously been found from nature by the present inventors. brevis UAS-4 (FERM P-20710), L.M. brevis UAS-6 (FERM P-20711) is more preferred because of its high ability to produce GABA and ornithine. In the present invention, lactic acid strains belonging to these may be used alone, or two or more strains may be used in combination.
本発明において、乳酸菌を増殖させ、GABA産生とオルニチン産生を行わせるための培地としては、従来公知のあらゆる培地を使用することができる。かかる培地としては、乳酸菌培養に一般的なGYP培地(D−グルコース1%、ペプトン0.5%、酵母エキス1%、酢酸ナトリウム3水和物0.2%、ツイン80 0.05%、硫酸マグネシウム7水和物0.02%、硫酸マンガン4水和物10ppm、硫酸鉄7水和物10ppm、塩化ナトリウム10ppm)、FYP培地(GYP培地の糖がD−フルクトースになったもの)の他、市販のGAM培地(日水製薬)、MRS培地(Difco)等を使用することもできるし、酵母エキス、肉エキス、麦芽エキス、魚肉エキス、大豆分解物、ペプトン、ポリペプトン、ポテト浸出液等を単独で又は2種以上を水に溶解させた培地を使用することもできる。 In the present invention, any conventionally known medium can be used as a medium for growing lactic acid bacteria and causing GABA production and ornithine production. As such a medium, a GYP medium (D-glucose 1%, peptone 0.5%, yeast extract 1%, sodium acetate trihydrate 0.2%, twin 80 0.05%, sulfuric acid, which is commonly used for lactic acid bacteria culture, is used. Magnesium heptahydrate 0.02%, manganese sulfate tetrahydrate 10 ppm, iron sulfate heptahydrate 10 ppm, sodium chloride 10 ppm), FYP medium (GYP medium sugar converted to D-fructose), Commercially available GAM medium (Nissui Pharmaceutical), MRS medium (Difco), etc. can be used, and yeast extract, meat extract, malt extract, fish meat extract, soybean degradation product, peptone, polypeptone, potato exudate, etc. alone Alternatively, a medium in which two or more kinds are dissolved in water can also be used.
本発明においては、上記した培地にグルタミン酸又は/及びその塩類と、アルギニン又は/及びその塩類を含有させることが必要である。グルタミン酸の塩類としては、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩が挙げられる。グルタミン酸又は/及びその塩類を含有させる方法として、グルタミン酸又は/及びその塩類を含有する含有物を培地に含ませてもよい。そのような含有物としては、タンパク質の酸加水分解物、酵素分解物、酵母エキス等が挙げられ、そのうち酵母エキスが乳酸菌のGABA産生能を促進する効果が高いという点から好ましい。 In the present invention, it is necessary that glutamic acid or / and salts thereof and arginine or / and salts thereof are contained in the medium described above. Examples of salts of glutamic acid include sodium salt, potassium salt, magnesium salt, and calcium salt. As a method for containing glutamic acid or / and salts thereof, a medium containing glutamic acid or / and salts thereof may be included in the medium. Examples of such inclusions include acid hydrolysates of proteins, enzyme degradation products, yeast extracts, and the like. Among them, yeast extracts are preferable because they have a high effect of promoting the ability to produce GABA of lactic acid bacteria.
グルタミン酸又は/及びその塩類の添加量は、グルタミン酸換算で培地に対して0.1質量%〜40質量%であり、0.2質量%〜25質量%が好ましく、1質量%〜20質量%がさらに好ましい。この範囲より少なければ培養液中に蓄積されるGABAの量が少なくなり、この範囲より多ければグルタミン酸及び/又はグルタミン酸塩が残存してしまうか、全量GABAに変換されたとしても培養に長時間要する場合がある。グルタミン酸又は/及びその塩類は、培養に先立って全量を添加してもよいし、培養期間中に複数回に分けて添加してもよい。作業性の面では1回で全量添加することが好ましいが、急激なpHの変化を避けるためには、少量ずつ添加することもでき、その場合好ましくは2回〜10回であり、さらに好ましくは2回〜5回である。 The addition amount of glutamic acid or / and salts thereof is 0.1% by mass to 40% by mass, preferably 0.2% by mass to 25% by mass, and preferably 1% by mass to 20% by mass with respect to the medium in terms of glutamic acid. Further preferred. If the amount is less than this range, the amount of GABA accumulated in the culture solution is reduced. If the amount is more than this range, glutamic acid and / or glutamate remains, or even if the whole amount is converted to GABA, it takes a long time to culture. There is a case. Glutamic acid or / and salts thereof may be added in total before culturing, or may be added in a plurality of times during the culturing period. In terms of workability, it is preferable to add the whole amount at one time, but in order to avoid a sudden change in pH, it can also be added in small amounts, in which case it is preferably 2 to 10 times, more preferably 2 to 5 times.
アルギニンの塩類としては、塩酸塩、グルタミン酸塩が挙げられる。アルギニン又は/及びその塩類を含有させる方法として、アルギニン又は/及びその塩類を含有する含有物を培地に含ませてもよい。そのような含有物としては、タンパク質の酸加水分解物、酵素分解物、酵母エキス等が挙げられ、そのうち酵母エキスが乳酸菌のオルニチン産生能を促進する効果が高いという点から好ましい。 Examples of arginine salts include hydrochloride and glutamate. As a method for containing arginine or / and a salt thereof, a content containing arginine or / and a salt thereof may be included in the medium. Examples of such inclusions include acid hydrolysates, enzyme degradation products, yeast extracts and the like of proteins. Among them, yeast extracts are preferable because they have a high effect of promoting ornithine production ability of lactic acid bacteria.
アルギニン又は/及びその塩類の添加量は、アルギニン換算で培地に対して0.1質量%〜40質量%であり、0.2質量%〜25質量%が好ましく、1質量%〜20質量%がさらに好ましい。この範囲より少なければ培養液中に蓄積されるオルニチンの量が少なくなり、この範囲より多ければアルギニン及び/又はアルギニン塩が残存してしまうか、全量オルニチンに変換されたとしても培養に長時間要する場合がある。アルギニン又は/及びその塩類は、培養に先立って全量を添加してもよいし、培養期間中に複数回に分けて添加してもよい。作業性の面では1回で全量添加することが好ましいが、急激なpHの変化を避けるためには、少量ずつ添加することもでき、その場合好ましくは2回〜10回であり、さらに好ましくは2回〜5回である。 The addition amount of arginine or / and salts thereof is 0.1% by mass to 40% by mass, preferably 0.2% by mass to 25% by mass, and preferably 1% by mass to 20% by mass with respect to the medium in terms of arginine. Further preferred. If it is less than this range, the amount of ornithine accumulated in the culture solution will be small, and if it is more than this range, arginine and / or arginine salt will remain, or even if the whole amount is converted to ornithine, it will take a long time for cultivation. There is a case. Arginine or / and salts thereof may be added in total before culturing or may be added in a plurality of times during the culturing period. In terms of workability, it is preferable to add the whole amount at one time, but in order to avoid a sudden change in pH, it can also be added in small amounts, in which case it is preferably 2 to 10 times, more preferably 2 to 5 times.
次に、本発明における培養の条件について述べる。 Next, the culture conditions in the present invention will be described.
乳酸菌の添加方法は、上記した培地に直接少量の菌体を接種する方法でもよいし、短期間で菌体濃度を上昇させる為に、前培養した菌液を接種する方法でもよい。前培養液としては、本培養と同じく上記した培地を使用することもできる。前培養した菌液を接種する量としては、本培養の培地量の100000分の1〜2分の1であり、1000分の1〜10分の1が好ましく、200分の1〜30分の1がさらに好ましい。この範囲より接種量が少なければ、菌体濃度の増加に時間がかかる問題があり、この範囲より多ければもはや前培養の時点で大きなスケールになっており、本培養を行う必要性がないということである。 The method of adding lactic acid bacteria may be a method of directly inoculating a small amount of bacterial cells in the above-mentioned medium, or a method of inoculating a pre-cultured bacterial solution in order to increase the bacterial cell concentration in a short period of time. As the preculture solution, the above-mentioned medium can be used as in the case of the main culture. The amount inoculated with the pre-cultured bacterial solution is 1 / 100,000 of the amount of the main culture medium, preferably 1/1000 to 1/10, and preferably 1/200 to 30 minutes. 1 is more preferable. If the inoculation amount is less than this range, there is a problem that it takes time to increase the bacterial cell concentration, and if it is more than this range, it is already a large scale at the time of pre-culture and there is no need to perform main culture. It is.
培養時の温度は、用いる菌株にもよるが、5℃〜45℃であり、好ましくは15℃〜40℃であり、さらに好ましくは20℃〜35℃である。培養温度がこの温度範囲より高くても低くても著しく増殖速度が劣る問題がある。 Although the temperature at the time of culture | cultivation is based also on the strain to be used, it is 5 to 45 degreeC, Preferably it is 15 to 40 degreeC, More preferably, it is 20 to 35 degreeC. There is a problem that the growth rate is remarkably inferior even if the culture temperature is higher or lower than this temperature range.
培養液のpHは、用いる菌株にもよるが、3.5〜8.0に調整することが好ましく、4.0〜7.0に調整することがより好ましく、4.5〜6.5に調整するのが最も好ましい。pHがこの範囲を外れると、グルタミン酸脱炭酸酵素の活性が低下し、GABAの産生速度が低下する問題がある。pH調整に用いる薬品はいかなる物も使用でき、例えば塩酸、硫酸、リン酸、硝酸、酢酸、酪酸、乳酸、蟻酸、コハク酸、マレイン酸、リンゴ酸、シュウ酸、クエン酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、アンモニア水等が挙げられる。本発明ではGABAの産生に応じてpHは上昇する傾向になり調整は主に酸を添加して行うため、これらの中で好ましくは、塩酸、リン酸、酢酸、乳酸、コハク酸、リンゴ酸、クエン酸であり、さらに好ましくは塩酸、乳酸、酢酸である。 The pH of the culture solution depends on the strain to be used, but is preferably adjusted to 3.5 to 8.0, more preferably 4.0 to 7.0, and 4.5 to 6.5. It is most preferable to adjust. When the pH is out of this range, there is a problem that the activity of glutamate decarboxylase is lowered and the production rate of GABA is lowered. Any chemical can be used for pH adjustment, such as hydrochloric acid, sulfuric acid, phosphoric acid, nitric acid, acetic acid, butyric acid, lactic acid, formic acid, succinic acid, maleic acid, malic acid, oxalic acid, citric acid, sodium hydroxide, water Examples thereof include potassium oxide, calcium hydroxide, and aqueous ammonia. In the present invention, the pH tends to increase according to the production of GABA, and adjustment is mainly performed by adding an acid. Among these, hydrochloric acid, phosphoric acid, acetic acid, lactic acid, succinic acid, malic acid, Citric acid, more preferably hydrochloric acid, lactic acid, and acetic acid.
培養時の酸素条件は、用いる菌株にもよるが、嫌気条件下でも好気条件下でも増殖させることができる。ただし、好気条件下では増殖は可能でもGABA生産能が低下する菌株が存在するので、嫌気条件か緩やかに攪拌する程度の好気条件にする方が好ましく、例えばバブリングや速い攪拌等を行う必要は無い。 Oxygen conditions during culture depend on the strain used, but can be grown under anaerobic or aerobic conditions. However, since there are strains that can grow under aerobic conditions but the GABA production ability decreases, it is preferable to use anaerobic conditions such as anaerobic conditions or moderate stirring, for example, bubbling or rapid stirring is required. There is no.
上述のようにして培養を行うことによって、培養液中にGABAとオルニチンが蓄積されことになり、その培養液そのままで、本発明におけるGABAとオルニチンを含有する組成物とすることができる。また、この培養液から菌体を除去して得られた培養上清を本発明におけるGABAとオルニチンを含有する組成物とすることもできる。さらにこの培養上清を濃縮、乾燥してもよいし、また、培養上清に晶析、イオン交換等の処理を施してGABA及び/又はオルニチンの純度を向上させることを行ってもよい。 By culturing as described above, GABA and ornithine are accumulated in the culture broth, and the culture broth can be used as the composition containing GABA and ornithine in the present invention. Moreover, the culture supernatant obtained by removing the cells from this culture solution can be used as a composition containing GABA and ornithine in the present invention. Further, the culture supernatant may be concentrated and dried, or the culture supernatant may be subjected to treatment such as crystallization and ion exchange to improve the purity of GABA and / or ornithine.
菌体の除去は、従来公知の方法で行えばよく、例えばフィルタープレス、ブフナー漏斗、遠心ろ過器、遠心分離機、デカンタ等を使用することができる。 The cells can be removed by a conventionally known method. For example, a filter press, a Buchner funnel, a centrifugal filter, a centrifuge, a decanter, or the like can be used.
培養上清を濃縮するには、従来公知の濃縮装置を使用することができ、例えばエバポレーター、濃縮缶の他、エバポール(大河原製作所)、ウォールウェッター(関西化学機械製作)等が挙げられる。 In order to concentrate the culture supernatant, conventionally known concentrators can be used, and examples include evaporators, concentration cans, evaporator (Okawara Seisakusho), wall wetter (manufactured by Kansai Chemical Machinery), and the like.
培養上清を乾燥するには、従来公知の乾燥装置を使用することができ、例えば真空凍結乾燥機、真空棚式乾燥機、温風乾燥機、真空ニーダー、リボコーン乾燥機、ドラムドライヤー、振動流動乾燥機、スプレードライヤー等が挙げられる。乾燥させる液は培養上清そのままでもよいし、濃縮した物でもよいが、固形分濃度5〜70質量%、好ましくは5〜50質量%、さらに好ましくは10〜40質量%まで濃縮したものを使用することが好ましい。 In order to dry the culture supernatant, a conventionally known drying apparatus can be used. For example, a vacuum freeze dryer, a vacuum shelf dryer, a hot air dryer, a vacuum kneader, a ribocorn dryer, a drum dryer, an oscillatory flow Examples include dryers and spray dryers. The liquid to be dried may be the culture supernatant as it is, or may be a concentrated product, but a solid concentration of 5 to 70% by mass, preferably 5 to 50% by mass, more preferably 10 to 40% by mass is used. It is preferable to do.
上記のようにして乾燥させたものは粉砕して粉末状にすることもできる。粉砕には従来公知の粉砕機が使用でき、例えば乳鉢、ブレンダーミキサー、カッターミル、ハンマーミル、ジェットミル、フェザーミル等が挙げられる。 What was dried as mentioned above can also be pulverized into powder. A conventionally known pulverizer can be used for the pulverization, and examples thereof include a mortar, a blender mixer, a cutter mill, a hammer mill, a jet mill, and a feather mill.
以上のようにして得られたGABAとオルニチンを含有する組成物には、乾燥物の場合、GABAが5質量%以上含まれ、好ましくは10質量%以上含まれ、オルニチンが0.1質量%以上含まれ、好ましくは0.5質量%以上含まれることとなる。 The composition containing GABA and ornithine obtained as described above contains GABA in an amount of 5% by mass or more, preferably 10% by mass or more, and ornithine in an amount of 0.1% by mass or more when dry. Contained, preferably 0.5% by mass or more.
産生したGABA及び/またはオルニチンの濃度をさらに向上させるために、さらなる精製を行っても良く、かかる精製方法としては、晶析、限外ろ過、イオン交換、活性炭処理、クロマト分離等が挙げられる。これらの中で、限外ろ過、イオン交換、活性炭処理が好ましい。 In order to further improve the concentration of the produced GABA and / or ornithine, further purification may be performed, and examples of such purification methods include crystallization, ultrafiltration, ion exchange, activated carbon treatment, and chromatographic separation. Among these, ultrafiltration, ion exchange, and activated carbon treatment are preferable.
晶析による精製は、従来公知の方法を用いることができ、例えば濃縮晶析、冷却晶析、加熱溶解・冷却晶析、等電点晶析、有機溶媒を加える晶析法などが挙げられる。GABAとオルニチンは溶解度及び等電点が異なるため、その差を利用して一方のアミノ酸の純度を任意に上げることができる。析出した結晶は従来公知の方法で分離すれば良く、例えば遠心ろ過機、ブフナー漏斗、フィルタープレス等を使用することができる。 For purification by crystallization, conventionally known methods can be used, and examples thereof include concentration crystallization, cooling crystallization, heating dissolution / cooling crystallization, isoelectric crystallization, and crystallization method in which an organic solvent is added. Since GABA and ornithine have different solubility and isoelectric point, the purity of one amino acid can be arbitrarily increased by utilizing the difference. The precipitated crystals may be separated by a conventionally known method. For example, a centrifugal filter, a Buchner funnel, a filter press or the like can be used.
限外ろ過による精製は、高分子量の成分を除去することができるものであり、目的とするGABA及びオルニチン純度になるように分画分子量を選定することができる。限外ろ過膜の分画分子量は好ましくは1000〜200000であり、さらに好ましくは3000〜10000である。この範囲より低ければ精製に時間がかかる問題があり、この範囲より高ければGABA及びオルニチン純度が向上しない問題がある。 Purification by ultrafiltration can remove high molecular weight components, and the molecular weight cutoff can be selected so as to achieve the desired GABA and ornithine purity. The molecular weight cutoff of the ultrafiltration membrane is preferably 1000-200000, more preferably 3000-10000. If it is lower than this range, there is a problem that purification takes time, and if it is higher than this range, there is a problem that the purity of GABA and ornithine is not improved.
イオン交換は従来公知の方法を用いることができるが、好ましくはイオン交換樹脂塔を用いた精製である。イオン交換樹脂としては陽イオン交換樹脂、陰イオン交換樹脂いずれも使用することができる。例えば、陽イオン交換樹脂を用いる時には酸でH型に変換したところに培養液を通液してGABA及びオルニチンを樹脂に吸着させ、アルカリを通液してGABA及びオルニチンを溶離させる方法が好適に使われる。また例えば、陰イオン交換樹脂を用いる時にはアルカリでOH型に変換したところに培養液を通液してGABA及びオルニチンを樹脂に吸着させ、酸を通液してGABA及びオルニチンを溶離させる方法が好適に使われる。イオン交換樹脂としては陽イオン交換樹脂が好ましく、特に強酸性陽イオン交換樹脂が好ましい。また、GABAとオルニチンはイオン交換樹脂への親和性が異なるので、溶離液を経時的に分画して採取することで一方のアミノ酸の純度を任意に上げることができる。 Although ion exchange can use a conventionally well-known method, Preferably it is the refinement | purification using an ion exchange resin tower. As the ion exchange resin, either a cation exchange resin or an anion exchange resin can be used. For example, when a cation exchange resin is used, a method in which a culture solution is passed through an acid-converted H-form to adsorb GABA and ornithine to the resin, and an alkali is passed through to elute GABA and ornithine is preferred. used. In addition, for example, when an anion exchange resin is used, a method in which a culture solution is passed through an alkali-converted OH type to adsorb GABA and ornithine to the resin, and an acid is passed through to elute GABA and ornithine is preferred. Used for. As the ion exchange resin, a cation exchange resin is preferable, and a strong acid cation exchange resin is particularly preferable. In addition, since GABA and ornithine have different affinity for ion exchange resins, the purity of one amino acid can be arbitrarily increased by fractionating and collecting the eluent over time.
活性炭処理は従来公知の方法を使用でき、活性炭をGABA及びオルニチンを含む培養液の中に投入して攪拌するバッチ法、活性炭をカラムに充填してその中に培養液を通液するカラム法のいずれの方法でも良い。 Conventionally known methods can be used for the activated carbon treatment, such as a batch method in which activated carbon is put into a culture solution containing GABA and ornithine and stirred, and a column method in which activated carbon is packed into a column and the culture solution is passed therethrough. Either method is acceptable.
また、本発明によって製造されたGABAとオルニチンを含有する組成物は、素材として既存の飲食品或いは調味食品に添加することも可能である。ベースとなる飲食品或いは調味食品としては特に限定されないが、例えば、うどんやパスタ等の加工麺、ハム・ソーセージ等の食肉加工食品、かまぼこ・ちくわ等の水産加工食品、バター・粉乳・醗酵乳等の乳加工品、ゼリー・アイスクリーム等のデザート類、パン類、菓子類、調味料類等の加工食品、および、清涼飲料水、アルコール類、果汁飲料、野菜汁飲料、乳飲料、炭酸飲料、コーヒー飲料、アルコール類等の飲料が好ましい。 Moreover, the composition containing GABA and ornithine produced by the present invention can be added as a raw material to an existing food or beverage or seasoning food. Although it is not particularly limited as a base food or drink or seasoned food, for example, processed noodles such as udon and pasta, processed meat foods such as ham and sausage, marine processed foods such as kamaboko and chikuwa, butter, powdered milk, fermented milk, etc. Processed milk products, desserts such as jelly and ice cream, processed foods such as breads, confectionery, seasonings, and soft drinks, alcohol, fruit juice beverages, vegetable juice beverages, milk beverages, carbonated beverages, Beverages such as coffee drinks and alcohols are preferred.
このような飲食品或いは調味食品における、GABAとオルニチンを含有する組成物の含有量は、特に限定されないが、GABAに換算して1日当たりに摂取する量が10〜3000mgになるように配合する、あるいは、オルニチンに換算して1日当たりに摂取する量が10〜5000mgになるよう配合することが好ましい。この範囲より少ない場合は効果が望めない可能性、または効果を得るために該飲食品或いは調味食品を過剰に摂取する可能性があり、この範囲より多い場合はもはや効果の増大は見込めない可能性がある。 The content of the composition containing GABA and ornithine in such a food or drink or seasoning is not particularly limited, but is formulated so that the amount taken per day in terms of GABA is 10 to 3000 mg. Or it is preferable to mix | blend so that the quantity taken per day in conversion to ornithine may be 10-5000 mg. If the amount is less than this range, the effect may not be expected, or the food or seasoning may be excessively consumed to obtain the effect. If the amount is more than this range, the effect may not be expected any longer. There is.
次に、本発明の第二の発明について説明する。ここで用いられる、GABA生産能とオルニチン生産能を併せ持つ乳酸菌としては、本発明の第一で説明したものが同様に用いられる。 Next, the second invention of the present invention will be described. As the lactic acid bacteria having both GABA producing ability and ornithine producing ability, those described in the first aspect of the present invention are used in the same manner.
本発明で用いられる、食品原料としては、乳酸菌が増殖可能であればいかなるものでもよく、例としては、野菜類、果実類、種実類、穀類、いも類、豆類、藻類、キノコ類、魚介類、肉類、乳類、卵類等が挙げられる。これらの中で、アスパラガスが乳酸菌のGABA産性能を高める効果が高い点で好ましい。 The raw material for food used in the present invention may be any material as long as lactic acid bacteria can grow. Examples include vegetables, fruits, seeds, cereals, potatoes, beans, algae, mushrooms, and seafood. , Meat, milk, eggs and the like. Among these, asparagus is preferable in that it has a high effect of enhancing the GABA production performance of lactic acid bacteria.
これらの各種食品原料は、そのまま用いてもよいし、本発明の効果を損なわない限り洗浄、粉砕、細断、抽出、圧搾、濃縮、固液分離、加熱滅菌、濾過滅菌等公知の技術を単独或いは2つ以上組み合せて処理してから用いてもよい。また、必要に応じて水分含量調整、pH調整、加糖、上記した培地に用いられる成分の添加等の操作を行ってもよい。 These various food materials may be used as they are, or as long as the effects of the present invention are not impaired, known techniques such as washing, grinding, shredding, extraction, pressing, concentration, solid-liquid separation, heat sterilization, and filter sterilization are used alone. Alternatively, it may be used after processing by combining two or more. Moreover, you may perform operations, such as adjustment of a water content, pH adjustment, sugar addition, and addition of the component used for an above-described culture medium as needed.
これらの操作により得られた食品原料は、不溶成分を除いた糖濃度(ブリックス(Brix)換算)が0.1〜40%であるのが好ましく、0.1〜20%であるのがより好ましく、0.5〜5%であるのがもっとも好ましい。糖濃度(Brix換算)がこの範囲を下回ると、乳酸菌の増殖が極めて悪くなり、糖濃度(Brix換算)がこの範囲を上回ると、乳酸菌のGABA産生能およびオルニチン産生能が低下する。 The food material obtained by these operations preferably has a sugar concentration (in terms of Brix) of 0.1 to 40%, more preferably 0.1 to 20%, excluding insoluble components. 0.5 to 5% is most preferable. When the sugar concentration (Brix equivalent) is below this range, the growth of lactic acid bacteria becomes extremely poor, and when the sugar concentration (Brix equivalent) is above this range, the GABA producing ability and ornithine producing ability of the lactic acid bacteria are reduced.
また、本発明において、GABA及び/又はオルニチン含量を増加させるために、本発明の第一において説明したグルタミン酸又は/及びその塩類、又はアルギニン又は/及びその塩類を、調整された食品原料に添加することができる。グルタミン酸又は/及びその塩類と、アルギニン又は/及びその塩類は、どちらか一方のみを添加してもよいし、両方を添加してもよい。また、添加量は本発明の第一で説明したとおりである。 Further, in the present invention, in order to increase the GABA and / or ornithine content, the glutamic acid or / and salt thereof, or arginine or / and salt thereof described in the first of the present invention is added to the prepared food material. be able to. Only one or both of glutamic acid or / and salts thereof and arginine or / and salts thereof may be added. Further, the addition amount is as described in the first of the present invention.
また、本発明において、GABA及び/又はオルニチン含量を増加させるために、調整された食品原料を酵素処理することもできる。この酵素処理は、食品原料に含まれる蛋白質やペプチドを各々の分解酵素で処理することにより遊離グルタミン酸及び遊離アルギニンの含量を増加させたり、グルタミナーゼによりグルタミンをグルタミン酸に変換させ遊離グルタミン酸の含量を増加させるという意味がある。本発明においては、上記した酵素を一種類だけ用いてもよいし、二種以上を同時に又は工程を分けて用いてもよい。使用する酵素の量は、調整された食品又は食品原料中の蛋白質に対して0.01質量%〜10質量%であることが好ましく、0.1質量%〜5質量%であることがより好ましい。この範囲より少なければ酵素を添加する効果がほとんど期待できず、この範囲より多くとももはやこれ以上の効果は期待できない。 Moreover, in this invention, in order to increase GABA and / or ornithine content, the adjusted foodstuff raw material can also be enzyme-processed. This enzyme treatment increases the content of free glutamic acid and free arginine by treating proteins and peptides contained in food ingredients with each degrading enzyme, or converts glutamine to glutamic acid by glutaminase and increases the content of free glutamic acid There is a meaning. In the present invention, only one type of the above-described enzyme may be used, or two or more types may be used simultaneously or in separate steps. The amount of the enzyme to be used is preferably 0.01% by mass to 10% by mass and more preferably 0.1% by mass to 5% by mass with respect to the protein in the adjusted food or food material. . If it is less than this range, the effect of adding an enzyme can hardly be expected, and if it exceeds this range, no further effect can be expected.
本発明における培養の条件は、上述した本発明の第一で説明した条件と同様の条件を採用することができる。 As the culture conditions in the present invention, the same conditions as those described above in the first aspect of the present invention can be employed.
以上のようにして培養を行うことにより、食品原料中にGABA及び/又はオルニチンが蓄積することとなり、そのままで本発明におけるGABAとオルニチンを含有する食品とすることができるが、必要に応じて殺菌、除菌、固液分離、乾燥等の操作を行い、清澄液や粉末の形態にすることも可能である。 By culturing as described above, GABA and / or ornithine accumulates in the raw material of the food and can be used as it is as a food containing GABA and ornithine in the present invention. It is also possible to carry out operations such as sterilization, solid-liquid separation, and drying to form a clarified liquid or powder.
以上のようにして得られたGABAとオルニチンを含有する食品中のGABAとオルニチンの含有量は、特に限定されないが、GABAに換算して1日当たりに摂取する量が10〜3000mgになるように配合する、あるいは、オルニチンに換算して1日当たりに摂取する量が10〜5000mgになるよう配合することが好ましい。この範囲より少ない場合は効果が望めない可能性、又は効果を得るために該食品を過剰に摂取する必要があり、この範囲より多い場合はもはや効果の増大は見込めない可能性がある。 The content of GABA and ornithine in the food containing GABA and ornithine obtained as described above is not particularly limited, but is formulated so that the amount taken per day in terms of GABA is 10 to 3000 mg. Or it is preferable to mix | blend so that the quantity taken | dosed per day in conversion to ornithine may be 10-5000 mg. If the amount is less than this range, the effect may not be expected, or the food needs to be excessively consumed to obtain the effect, and if it is more than this range, the increase in the effect may no longer be expected.
本発明の第一により得られたGABAとオルニチンを含有する組成物及び本発明の第二により得られたGABAとオルニチンを含有する食品の形態としては、適当な担体を添加した後常法により顆粒状、粒状、錠剤、カプセル、ゲル状、ペースト状、乳状、懸濁状、液状、飲料等の食用に適した形態に成形してもよい。 The composition containing GABA and ornithine obtained according to the first aspect of the present invention and the form of food containing GABA and ornithine obtained according to the second aspect of the present invention are prepared by adding a suitable carrier and then granulating by a conventional method. It may be formed into an edible form such as a shape, granule, tablet, capsule, gel, paste, milk, suspension, liquid, or beverage.
固形状に調整する際には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、着色剤等常法で用いられているものを用いればよく、そのような担体の例としては、賦形剤としては乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニット、ソルビット、デキストリン、デンプン、結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、デキストラン、プルラン、無水ケイ酸、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム等を、結合剤としては結晶セルロース、白糖、マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、アラビアゴム、デキストラン、プルラン、水、エタノール等を、崩壊剤としてはデンプン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、デキストリン、結晶セルロース等を、滑沢剤としてはステアリン酸およびその金属塩、タルク、ホウ酸、脂肪酸ナトリウム塩、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、無水ケイ酸等を、矯味矯臭剤としては白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等を例示できる。 When adjusting to a solid, what is used in conventional methods such as excipients, binders, disintegrants, lubricants, flavoring agents, and coloring agents may be used, and examples of such carriers As an excipient, lactose, sucrose, glucose, mannitol, sorbit, dextrin, starch, crystalline cellulose, carboxymethylcellulose, hydroxypropylcellulose, dextran, pullulan, anhydrous silicic acid, calcium phosphate, calcium carbonate, calcium sulfate, etc. Binders include crystalline cellulose, sucrose, mannitol, dextrin, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, polyvinylpyrrolidone, gum arabic, dextran, pullulan, water, ethanol, etc., and disintegrants include starch, carboxymethylcellulose, hydroxypropyl Pyrcellulose, dextrin, crystalline cellulose, etc., as a lubricant, stearic acid and its metal salts, talc, boric acid, fatty acid sodium salt, sodium lauryl sulfate, magnesium lauryl sulfate, silicic acid anhydride, etc. Examples include sucrose, orange peel, citric acid, tartaric acid and the like.
液体状に調整する際には、乳化剤、可溶化剤、分散剤、懸濁化剤、粘調剤、緩衝剤、安定化剤、矯味矯臭剤等常法で用いられているものを用いればよく、乳化剤および可溶化剤としてはレシチン、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム等を、分散剤および懸濁化剤としては、レシチン、ショ糖脂肪酸エステル、メチルセルロース、アラビアゴム、ゼラチン等を、粘調剤としてはメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アラビアゴム、ゼラチン等を、緩衝剤としてはクエン酸塩、コハク酸塩等を、安定化剤としてはレシチン、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロースを、矯味矯臭剤としては上記したものを例示できる。 When adjusting to a liquid state, an emulsifier, a solubilizer, a dispersant, a suspending agent, a thickening agent, a buffering agent, a stabilizer, a flavoring agent, etc. may be used, As the emulsifier and solubilizer, lecithin, sucrose fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, sodium lauryl sulfate and the like, and as the dispersant and suspending agent, lecithin, sucrose fatty acid ester, methylcellulose, gum arabic, gelatin and the like, As a thickener, methylcellulose, carboxymethylcellulose, gum arabic, gelatin, etc., as a buffer, citrate, succinate, etc., as a stabilizer, lecithin, gum arabic, gelatin, methylcellulose, as a flavoring agent What was mentioned above can be illustrated.
また、味質の改善のために、糖類、糖アルコール類、塩類、油脂類、アミノ酸類、有機酸類、果汁、野菜汁、香料、香辛料、アルコール類、グリセリン等を添加することができる。 In addition, sugars, sugar alcohols, salts, oils and fats, amino acids, organic acids, fruit juices, vegetable juices, fragrances, spices, alcohols, glycerin, and the like can be added to improve the taste.
また、pH調整のために、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、酪酸、乳酸、コハク酸、リンゴ酸、シュウ酸、クエン酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、アンモニア水等を添加することができる。 In addition, hydrochloric acid, sulfuric acid, phosphoric acid, acetic acid, butyric acid, lactic acid, succinic acid, malic acid, oxalic acid, citric acid, sodium hydroxide, potassium hydroxide, calcium hydroxide, aqueous ammonia, etc. are added for pH adjustment. can do.
本発明において、GABAを始めとするアミノ酸の含有量は、以下の方法により求められた値である。すなわち、高速液体クロマトグラフィー法(HPLC法)により以下の条件で測定し、蛍光検出器を用いて検出した。
HPLC:島津製作所(株)製LC−10A
カラム:Shim−pack Amino−Li(100mmL.×6.0mmI.D.)
移動相:アミノ酸移動相キットLi形 グラディエント溶出
流速:0.6ml/分
カラム温度:39℃
反応液:オルト−フタルアルデヒド(ポストカラム)
反応液速度:0.3ml/分
反応温度:39℃
検出波長:励起波長350nm、蛍光波長450nm
In the present invention, the content of amino acids including GABA is a value determined by the following method. That is, it measured on the following conditions by the high performance liquid chromatography method (HPLC method), and detected using the fluorescence detector.
HPLC: Shimadzu Corporation LC-10A
Column: Shim-pack Amino-Li (100 mm L. × 6.0 mm ID)
Mobile phase: Amino acid mobile phase kit Li form Gradient elution flow rate: 0.6 ml / min Column temperature: 39 ° C
Reaction solution: ortho-phthalaldehyde (post column)
Reaction liquid rate: 0.3 ml / min Reaction temperature: 39 ° C.
Detection wavelength: excitation wavelength 350 nm, fluorescence wavelength 450 nm
以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。なお、本実施例中のGABAを始めとするアミノ酸の含有量は前記した方法で測定した。 Hereinafter, the present invention will be specifically described with reference to examples, but the present invention is not limited thereto. The content of amino acids including GABA in this example was measured by the method described above.
実施例1
5.0重量%のグルタミン酸ソーダ及び1.0重量%のアルギニンを含有するGYP培地1Lに、前培養して定常状態となっているラクトバチルス ブレビス UAS−4の菌体懸濁液を10mL添加して30℃、静置の条件で培養を開始した。24時間後に培養液を遠心し、上清をHPLC分析してグルタミン酸ナトリウム、GABA、アルギニン、オルニチンの量を測定した結果、98%の変換率でGABAが、98%の変換率でオルニチンが生成していた。この培養液上清を凍結乾燥、粉砕したところGABAを41重量%、オルニチンを11重量%含有する褐色の粉末が64.3g得られた。
Example 1
To 1 L of GYP medium containing 5.0% by weight sodium glutamate and 1.0% by weight arginine, 10 mL of a cell suspension of Lactobacillus brevis UAS-4 pre-cultured and in a steady state was added. The culture was started at 30 ° C. under static conditions. After 24 hours, the culture broth was centrifuged, and the supernatant was analyzed by HPLC to measure the amounts of sodium glutamate, GABA, arginine, and ornithine. As a result, GABA was produced at a conversion rate of 98%, and ornithine was produced at a conversion rate of 98%. It was. When this culture supernatant was freeze-dried and pulverized, 64.3 g of a brown powder containing 41% by weight of GABA and 11% by weight of ornithine was obtained.
実施例2
1.0重量%のグルタミン酸ソーダ及び3.0重量%のアルギニンを含有するGYP培地1Lに、前培養して定常状態となっているラクトバチルス ブレビス UAS−6の菌体懸濁液を10mL添加して30℃、静置の条件で培養を開始した。24時間後に培養液を遠心し、上清をHPLC分析してグルタミン酸ナトリウム、GABA、アルギニン、オルニチンの量を測定した結果、99%の変換率でGABAが、97%の変換率でオルニチンが生成していた。この培養液上清を凍結乾燥、粉砕したところGABAを9.8重量%、オルニチンを52重量%含有する褐色の粉末が54.9g得られた。
Example 2
To 1 L of GYP medium containing 1.0% by weight sodium glutamate and 3.0% by weight arginine, 10 mL of a cell suspension of Lactobacillus brevis UAS-6 that has been pre-cultured and is in a steady state is added. The culture was started at 30 ° C. under static conditions. After 24 hours, the culture broth was centrifuged, and the supernatant was analyzed by HPLC to measure the amounts of sodium glutamate, GABA, arginine, and ornithine. As a result, GABA was produced at a conversion rate of 99%, and ornithine was produced at a conversion rate of 97%. It was. When this culture supernatant was freeze-dried and pulverized, 54.9 g of a brown powder containing 9.8% by weight of GABA and 52% by weight of ornithine was obtained.
実施例3
20%脱脂粉乳溶液に、蛋白質に対し1%のプロテアーゼ(天野製薬社製、プロテアーゼA「アマノG」)を添加し24時間50℃で反応させた。この反応液を15%、脱脂粉乳20%、果糖0.5%、グルタミン酸ソーダ0.05%を含有する培地1Lに、前培養して定常状態となっているラクトバチルス ブレビス UAS−4の菌体懸濁液を10mL添加して30℃、静置の条件で培養を開始した。36時間後発酵乳中の遊離アミノ酸含量を測定した。発酵前後でのグルタミン酸、GABA、アルギニン、オルニチンの含量を表1に示す。
Example 3
To a 20% non-fat dry milk solution, 1% protease (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd., protease A “Amano G”) was added to the protein and allowed to react at 50 ° C. for 24 hours. Bacterial cells of Lactobacillus brevis UAS-4 pre-cultured in 1 L of a medium containing 15%, skim milk 20%, fructose 0.5%, and sodium glutamate 0.05%. 10 mL of the suspension was added and culture was started at 30 ° C. and standing. After 36 hours, the free amino acid content in the fermented milk was measured. Table 1 shows the contents of glutamic acid, GABA, arginine and ornithine before and after fermentation.
実施例4
アスパラガス、トマト、リンゴ、温州ミカン各1kgにそれぞれ水1Lを添加して家庭用のミキサーで粉砕した。破砕液に珪藻土を添加し、ろ紙(ADVANTEC東洋製No.5C)を用いて吸引濾過を行い、清澄な濾液を得た。この各濾液を濃縮或いは水で希釈しBrixを2.5%に調整した後、各原料の濾液1Lに酵母エキスを1w/w%添加し、高圧蒸気滅菌を行った。その後グルタミン酸ソーダを0.5w/w%、アルギニンを0.3w/w%添加し、ラクトバチルス ブレビス UAS−4の前培養液10mlを接種した。30℃で24時間発酵させた後、100℃で5分間加熱殺菌し、ろ紙を用いて吸引濾過を行い、清澄な濾液を得た。この濾液を凍結乾燥して粉末化し、GABAとオルニチンの含量を測定した。各原料ごとに得られた凍結乾燥物中のGABAとオルニチンの含量を表2に示す。
Example 4
1 L of water was added to each 1 kg of asparagus, tomato, apple, and mandarin orange and pulverized with a household mixer. Diatomaceous earth was added to the crushed liquid, and suction filtration was performed using a filter paper (ADVANTEC Toyo No. 5C) to obtain a clear filtrate. Each filtrate was concentrated or diluted with water to adjust Brix to 2.5%, and then 1 w / w% of yeast extract was added to 1 L of each raw material filtrate, followed by high-pressure steam sterilization. Thereafter, 0.5 w / w% sodium glutamate and 0.3 w / w% arginine were added, and 10 ml of a preculture of Lactobacillus brevis UAS-4 was inoculated. After fermentation at 30 ° C. for 24 hours, the mixture was sterilized by heating at 100 ° C. for 5 minutes, and suction filtration was performed using a filter paper to obtain a clear filtrate. The filtrate was lyophilized to powder and the GABA and ornithine contents were measured. Table 2 shows the contents of GABA and ornithine in the freeze-dried product obtained for each raw material.
実施例5
ウーロン茶200mlに実施例1及び2で得られた粉末100mgを溶解させ、GABAとオルニチンを含有するウーロン茶を得た。粉末は速やかに溶解し、味質、臭いにほとんど変化は無かった。
Example 5
100 mg of the powder obtained in Examples 1 and 2 was dissolved in 200 ml of oolong tea to obtain oolong tea containing GABA and ornithine. The powder dissolved rapidly and there was almost no change in taste and odor.
実施例6
実施例4にて得られた各植物エキス醗酵液の凍結乾燥品を1w/w%になるよう中力粉と混合し、うどんの麺を作製した。この麺を調理したうどんを食したところ、微かに甘味と爽やかな香りを感じる良好な麺であった。
Example 6
The freeze-dried product of each plant extract fermented liquid obtained in Example 4 was mixed with medium strength flour so as to be 1 w / w% to prepare noodles of udon. When the udon noodles were cooked, they were good noodles with a slight sweetness and a refreshing scent.
Claims (8)
A composition or food containing γ-amino acid and ornithine produced by the production method according to claim 1.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006189435A JP2008017703A (en) | 2006-07-10 | 2006-07-10 | METHOD FOR PRODUCING FOOD COMPRISING gamma-AMINOBUTYRIC ACID AND ORNITHINE |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006189435A JP2008017703A (en) | 2006-07-10 | 2006-07-10 | METHOD FOR PRODUCING FOOD COMPRISING gamma-AMINOBUTYRIC ACID AND ORNITHINE |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008017703A true JP2008017703A (en) | 2008-01-31 |
Family
ID=39074177
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006189435A Pending JP2008017703A (en) | 2006-07-10 | 2006-07-10 | METHOD FOR PRODUCING FOOD COMPRISING gamma-AMINOBUTYRIC ACID AND ORNITHINE |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2008017703A (en) |
Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009112205A (en) * | 2007-11-02 | 2009-05-28 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | Method for producing l-ornithine-containing material |
JP2009225722A (en) * | 2008-03-24 | 2009-10-08 | Oriental Yeast Co Ltd | Lactic acid bacterium culture medium for food, and method for culturing lactic acid bacterium for food by using the same |
JP2010098962A (en) * | 2008-10-21 | 2010-05-06 | Nagatanien:Kk | Method for producing ornithine-containing miso (fermented soybean paste) |
JP2011217739A (en) * | 2010-03-24 | 2011-11-04 | Taimatsu Shokuhin Kk | Rice germ fermented liquid, rice germ fermented powder, and method for producing the rice germ fermented liquid and rice germ fermented powder |
JP2013169158A (en) * | 2012-02-20 | 2013-09-02 | Nagoya Univ | Non-protein amino acid-producing lactobacillus and use of the same |
JP2014100112A (en) * | 2012-11-21 | 2014-06-05 | Institute Of National Colleges Of Technology Japan | Ornithine-containing food raw material made by using dried barley shochu lees for cultivation of basidiomycete |
WO2015111598A1 (en) * | 2014-01-22 | 2015-07-30 | 株式会社明治 | Method for culturing lactic acid bacteria at high concentration |
JP2016220650A (en) * | 2015-06-02 | 2016-12-28 | イチビキ株式会社 | Low salt miso and manufacturing method therefor |
KR101733967B1 (en) * | 2014-07-21 | 2017-05-11 | 우석대학교 산학협력단 | The method for manufacturing barley bran fermented material containing ornithine and barley bran fermented material containing ornithine thereof |
CN112167630A (en) * | 2020-06-29 | 2021-01-05 | 武汉林宝莱生物科技有限公司 | Gamma-aminobutyric acid oral-aid functional food formula and preparation method |
JP7403096B2 (en) | 2020-02-06 | 2023-12-22 | 宮崎県 | Method for producing feed containing high GABA and ornithine content |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000210075A (en) * | 1999-01-21 | 2000-08-02 | Taiyo Corp | Lactic acid bacterium having high productivity of gamma- aminobutyric acid, fermented food with high content of gamma-aminobutyric acid using the same lactic acid bacterium and its production |
JP2001120179A (en) * | 1999-10-26 | 2001-05-08 | Yakult Honsha Co Ltd | Method for production of gaba-containing fermented milk |
DE10006064A1 (en) * | 2000-02-10 | 2001-08-16 | Rudi F Vogel | Improvements in the aroma of baked goods such as bread are achieved by using Lactobacillus pontis strains to increase production of ornithine and so of acetylpyroline |
JP2001352940A (en) * | 2000-06-13 | 2001-12-25 | Fujicco Co Ltd | METHOD OF PRODUCING FOOD MATERIAL HIGHLY INCLUDING gamma- AMINO BUTYRIC ACID AND FOOD MATERIAL OBTAINED THEREFROM |
JP2002300862A (en) * | 2001-02-05 | 2002-10-15 | Kikkoman Corp | METHOD FOR PRODUCING gamma-AMINOBUTYRIC ACID-CONTAINING NATURAL FOOD MATERIAL |
JP2002360289A (en) * | 2001-06-13 | 2002-12-17 | Takara Holdings Inc | METHOD FOR PRODUCING gamma-AMINOBUTYRIC ACID |
JP2004313032A (en) * | 2003-04-14 | 2004-11-11 | Sadaji Yokoyama | Method for producing functional raw material |
-
2006
- 2006-07-10 JP JP2006189435A patent/JP2008017703A/en active Pending
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000210075A (en) * | 1999-01-21 | 2000-08-02 | Taiyo Corp | Lactic acid bacterium having high productivity of gamma- aminobutyric acid, fermented food with high content of gamma-aminobutyric acid using the same lactic acid bacterium and its production |
JP2001120179A (en) * | 1999-10-26 | 2001-05-08 | Yakult Honsha Co Ltd | Method for production of gaba-containing fermented milk |
DE10006064A1 (en) * | 2000-02-10 | 2001-08-16 | Rudi F Vogel | Improvements in the aroma of baked goods such as bread are achieved by using Lactobacillus pontis strains to increase production of ornithine and so of acetylpyroline |
JP2001352940A (en) * | 2000-06-13 | 2001-12-25 | Fujicco Co Ltd | METHOD OF PRODUCING FOOD MATERIAL HIGHLY INCLUDING gamma- AMINO BUTYRIC ACID AND FOOD MATERIAL OBTAINED THEREFROM |
JP2002300862A (en) * | 2001-02-05 | 2002-10-15 | Kikkoman Corp | METHOD FOR PRODUCING gamma-AMINOBUTYRIC ACID-CONTAINING NATURAL FOOD MATERIAL |
JP2002360289A (en) * | 2001-06-13 | 2002-12-17 | Takara Holdings Inc | METHOD FOR PRODUCING gamma-AMINOBUTYRIC ACID |
JP2004313032A (en) * | 2003-04-14 | 2004-11-11 | Sadaji Yokoyama | Method for producing functional raw material |
Cited By (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009112205A (en) * | 2007-11-02 | 2009-05-28 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | Method for producing l-ornithine-containing material |
JP2009225722A (en) * | 2008-03-24 | 2009-10-08 | Oriental Yeast Co Ltd | Lactic acid bacterium culture medium for food, and method for culturing lactic acid bacterium for food by using the same |
JP2010098962A (en) * | 2008-10-21 | 2010-05-06 | Nagatanien:Kk | Method for producing ornithine-containing miso (fermented soybean paste) |
JP2011217739A (en) * | 2010-03-24 | 2011-11-04 | Taimatsu Shokuhin Kk | Rice germ fermented liquid, rice germ fermented powder, and method for producing the rice germ fermented liquid and rice germ fermented powder |
JP2013169158A (en) * | 2012-02-20 | 2013-09-02 | Nagoya Univ | Non-protein amino acid-producing lactobacillus and use of the same |
JP2014100112A (en) * | 2012-11-21 | 2014-06-05 | Institute Of National Colleges Of Technology Japan | Ornithine-containing food raw material made by using dried barley shochu lees for cultivation of basidiomycete |
WO2015111598A1 (en) * | 2014-01-22 | 2015-07-30 | 株式会社明治 | Method for culturing lactic acid bacteria at high concentration |
JPWO2015111598A1 (en) * | 2014-01-22 | 2017-03-23 | 株式会社明治 | High concentration culture method of lactic acid bacteria |
KR101733967B1 (en) * | 2014-07-21 | 2017-05-11 | 우석대학교 산학협력단 | The method for manufacturing barley bran fermented material containing ornithine and barley bran fermented material containing ornithine thereof |
JP2016220650A (en) * | 2015-06-02 | 2016-12-28 | イチビキ株式会社 | Low salt miso and manufacturing method therefor |
JP7403096B2 (en) | 2020-02-06 | 2023-12-22 | 宮崎県 | Method for producing feed containing high GABA and ornithine content |
CN112167630A (en) * | 2020-06-29 | 2021-01-05 | 武汉林宝莱生物科技有限公司 | Gamma-aminobutyric acid oral-aid functional food formula and preparation method |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2008017703A (en) | METHOD FOR PRODUCING FOOD COMPRISING gamma-AMINOBUTYRIC ACID AND ORNITHINE | |
JP4628978B2 (en) | Method for producing composition with high content of γ-aminobutyric acid | |
JP5467433B2 (en) | Seaweed fermentation composition and method for producing the same | |
KR101106668B1 (en) | The preparing method for natural GABA using serial fermentation of plant originated lactic acid bacteria with GABA-producing ability and protease-producing ability | |
JP2004215529A (en) | Method for producing lactic acid bacterium fermentation food product, beverage product, and seasoned food product all having good flavor and high gaba content | |
JP2004313032A (en) | Method for producing functional raw material | |
AU2006309588B2 (en) | Method of producing gaba-containing fermented product | |
JP2000210075A (en) | Lactic acid bacterium having high productivity of gamma- aminobutyric acid, fermented food with high content of gamma-aminobutyric acid using the same lactic acid bacterium and its production | |
JP2001204405A (en) | Method for producing cabbage syrup and use thereof | |
JP4968869B2 (en) | Method for producing γ-aminobutyric acid | |
JP2008150350A (en) | gamma-AMINOBUTYRIC ACID-CONTAINING COMPOSITION | |
JP7464940B2 (en) | Onions enriched with γ-aminobutyric acid and cycloalliin and method for producing the same | |
JP2007135416A (en) | NEW LACTOBACILLUS AND METHOD FOR PRODUCING gamma-AMINOBUTYRIC ACID | |
JP5626915B2 (en) | Method for producing γ-aminobutyric acid | |
JP2008086292A (en) | Method for producing gamma-aminobutyric acid-containing food material | |
JP4838628B2 (en) | Method for producing composition with high content of γ-aminobutyric acid | |
JP2007104977A (en) | Method for producing substance containing gamma aminobutyric acid | |
JP6006946B2 (en) | Flavor improver | |
JP2012205539A (en) | Method of manufacturing ferulic acid containing fraction | |
JP3791681B2 (en) | Beverage containing acetic acid | |
JP3564119B2 (en) | Treated product with increased vitamin U content in plants | |
JP2005323596A (en) | Method for producing vitamin k by culture of unnan sl-001 strain | |
JP2020103045A (en) | Lactic acid bacteria fermented seasoning | |
JP7084664B1 (en) | Manufacturing method of γ-aminobutyric acid (GABA) powder and products using it | |
KR100729981B1 (en) | ?-aminobutyric acid rich material, production process thereof and, food and drink containing ?-aminobutyric acid rich material |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20090702 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20111108 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20120508 |