JP2007522177A

JP2007522177A - 血管新生を伴う疾病の治療のためのｏ−ＡＴＰの使用

Info

Publication number: JP2007522177A
Application number: JP2006552566A
Authority: JP
Inventors: エレーナフェレロ，マリア
Original assignee: Universita degli Studi di Milano
Current assignee: Universita degli Studi di Milano
Priority date: 2004-02-17
Filing date: 2005-02-14
Publication date: 2007-08-09
Also published as: ITMI20040255A1; ATE456371T1; PL1732574T3; CA2556601A1; EP1732574A1; NO20063686L; CN1917887A; DE602005019142D1; US20070099864A1; EP1732574B1; WO2005077383A1; RU2006129748A; RU2359679C2; AU2005211924A1; BRPI0507738A; KR20070007786A; ES2336011T3

Abstract

抗血管新生活性を有する医薬の製造のためのｏ−ＡＴＰの使用及び腫瘍治療において同時、別個又は連続使用するための、細胞毒性又は細胞増殖抑制化合物、代謝拮抗物質、アルカロイド、抗生物質、アルキル化剤、ペプチド、生物学的応答モジュレータ及びサイトカインから選択される抗腫瘍物質との組み合わせ、あるいは薬剤とスタチンを低下させる脂質から選択される抗アテローム性動脈硬化性物質との組み合わせでｏ−ＡＴＰを含有する治療剤。
【選択図】なし

Description

本発明は、一般に血管新生に作用する物質に関し、より詳細には、本発明は、血管新生の阻害を必要とする病状の治療のためのｏ−ＡＴＰの使用に関する。

血管新生
内皮細胞の増殖は、血管新生として知られる新しい血管の形成のプロセスを担っている。新しく作られた血管は、血管新生が起こる組織の細胞に、栄養分及び酸素を供給する。再生組織は適当な血液供給を必要とするため、血管新生のプロセスは、例えば、傷の修復に有用である。一方、血液供給が腫瘍細胞の増殖を促進するため、血管新生は、腫瘍疾患の場合には有害となる。さらに、アテローム動脈硬化性のプラークに進展する場合、血管新生は有害となる。実際、これらの組織では、内皮及び他の細胞によるＶＥＧＦ（脈管内皮成長因子）生成のための新しい血管の発生は、単球／大食細胞として、同じプラークの保存を支持する。従って、内皮細胞増殖の抑制または血管新生を阻害する作用は、抗腫瘍及び抗アテローム硬化症の治療に対する注目に値する関心事である。

ｏ−ＡＴＰの生物学的活性
ｏ−ＡＴＰとして知られるＡＴＰの酸化形態は、リボフラノシル（ribofuranosyl）環の２’及び３’位での２つのアルデヒド基の存在によって特徴付けられる。P.N. Loweらによって"Preparation and chemical properties of periodate-oxidized adenosine triphosphate and some related compounds", Biochemical Society Transactions, vol. 7: 1131-1133,1979で開示されたように、それは、ＡＴＰを過ヨウ素酸塩で処理することにより形成することができる。

ｏ−ＡＴＰは、ヌクレオチド部位に存在する非プロトン化されたリジン残基と反応するその能力のために、ヌクレオチドの酵素部位の親和性標識として一般的に用いられており（Easterbrook-Smith, B., Wallace, J.C. & Keech, D.B. (1976) Eur. J. Biochem. 62, 125-130）、シッフの塩基又はジヒドロモルホリン誘導体を形成する(Colman, R. F. (1990) in The Enzymes - Sigman, D. S.及びBoyer, P. D., eds-Vol 19, pp. 283-323, Academic Press, San Diego)。また、それは、血小板の活性化を研究し、鶏の筋肉のＡＴＰ−誘発刺激を阻害するために用いられている(Pearce, P. H., Wright, J. M. Egan. C. M. & Scrutton, M. C. (1978) Eur. J. Biochem. 88,543-554 ; Thomas, S. A., Zawisa, M. J., Lin, X. & Hume, R. I. (1991) Br. J. Pharmacol. 103, 1963-1969)。さらに、マクロファージ細胞系において、ｏ−ＡＴＰは、原形質膜のＡＴＰ誘発浸透性を阻止することができることが判明し、膜外ＡＴＰアーゼ（ecto-ATPases）によって外因性のＡＴＰの加水分解レベルを減少させ、ＡＴＰ誘発の細胞膨張、空胞変性及び溶解を阻害する(Murgiaら、The Journal of Biological Chemistry, (1993) by The American Society for Biochemistry and Molecular Biology, inc., Vol. 268, No. 11, pp 8199)。Ｐ２２／Ｐ２Ｘ７を発現する小膠細胞からのＩＬ-１β（インターロイキン１β）放出（それは、ＬＰＳ＝リポポリサッカライドに依存する）が、ｏ−ＡＴＰによって選択的に妨げられる（Ferrari D.ら、J. Exp. Med., (1997) Vol. 185, N. 3, Pag. 579-582)という事実によって、ｏ−ＡＴＰは、作動性神経性レセプターＰ２ｚ／Ｐ２Ｘ７に拮抗的な活性を有していることが示唆されている。

従来技術
ＷＯ０２／１１７３７号において、同出願人は、実験的なモデルとして、完全なフロイントアジュバント（ＣＦＡ）の足底注射に起因するネズミ足の片側の炎症を使用して、ｏ−ＡＴＰ抗炎症性及び鎮痛性の影響を開示している。

ヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）のインビトロ分析では、有糸分裂促進物質の存在でさえ、ｏ−ＡＴＰがそれらの増殖能力の顕著な減少を誘発することを示している。ｏ−ＡＴＰの影響は、バソスタチン(vasostatin)、既知の抗血管新生化合物によって誘導されるより高い結果を示した。

従って、本発明は、血管新生の阻害のためのｏ−ＡＴＰの使用を目的とする。特に、本発明は、血管新生を含む病状、発現又進行の治療に有用である、有効成分としてｏ−ＡＴＰを含む薬剤を提供する。本発明によるｏ−ＡＴＰでの治療から利益を得ることができる血管新生によって媒介される疾患は、新血管新生によって誘発される眼性疾患（糖尿病性網膜症、黄斑変性、増殖的な硝子体網膜症、緑内障等）、アテローム動脈硬化性の進行及び腫瘍（癌腫、リンパ腫、白血病、肉腫、黒色腫、神経膠腫、神経芽細胞腫及び他の固形腫瘍等）を含む。

治療用途のために、ｏ−ＡＴＰは医薬的に許容される担体及び賦形剤で製剤化することができ、経口、局所、非経口ルートによって投与することができる。異なる投与ルートに適する薬剤形態は、錠剤、ピル、カプセル、顆粒、粉末、坐薬、シロップ、溶液、懸濁液、クリーム、軟膏、ゲル、ペースト、ローション、エマルジョン、スプレーを含む。レミントンのPharmaceutical Sciences Handbook（Mack Pub. Co., NY, USA, XVII Ed）で解説されるように、医薬組成物を製造することができる。用量単位毎の活性成分の量は、体重１Ｋｇにつき０．０１から１００ｍｇの範囲であり、病状のタイプ及び重篤さによって日に一回以上投与される。一般に、１日量は１から３００ｍｇで、好ましくは１０から１００ｍｇの範囲であろう。

別の実施形態では、本発明は、血管新生によって媒介される病状の治療のために、ｏ−ＡＴＰ及び他の生物学的活性物質の組み合わせ製剤に言及する。好ましい実施形態では、ｏ−ＡＴＰが、抗腫瘍物質（例えば、アルカロイド、抗生物質、細胞障害性又は細胞増殖抑制化合物、代謝拮抗物質、抗ホルモン剤、アルキル化薬、ペプチド、生物学的応答モジュレータ、サイトカイン）と組み合わせて用いられる。あるいは、ｏ−ＡＴＰは、抗アテローム硬化性物質、好ましくは、薬またはスタチンを低減させる脂質と組み合わせて用いられる。

種々の活性成分を、同時に又は別個に投与することができる。活性成分の特定の組合せの選択、それらの用量及び投与方法は、特異的疾患、薬理学的治療に対するその抵抗、患者の寛容性及び個別的なベースにおいて測定される他の変数に依存する。

実施例１−増殖分析
ヒト内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を、臍静脈から分離し、計数し、９６ウェルプレート中に、一定の数で接種した。ＶＥＧＦ（５０ｎｇ／ｍｌ）の有無（対照）、つまり、ｏ−ＡＴＰ（１００μＭ）及びｏ−ＡＴＰ＋ＶＥＧＦの存在下、開示されているようにして(Jaffe, E. A. (1984) Biology of Endothelial Cells, Martinus Nighoff Publisher, Boston, USA, pp. 1-260)、細胞を培養した。刺激の有無による２４時間の培養の後、細胞を洗浄し、バーカーチャンバを用いて光学顕微鏡で計数した。その結果を図１に示す。１０の実験の平均＋ＳＤを表している。

実施例２−透過性分析
細胞培養用のトランスウェル・チャンバ（ポリカーボネートフィルター０．４μｍ、Costar)を用いた。要するに、融合性内皮細胞は、単分子層で、１時間、ＶＥＧＦ、ｏ−ＡＴＰ、ＡＴＰ（３００μＭ）、ＡＴＰ＋ｏ−ＡＴＰ、ｏ−ＡＴＰ＋ＶＥＧＦにさらされ（予め、上述した濃度で）、完全に洗浄した。¹²⁵Ｉ（ＮＥＮ、ボストン、ＭＡ）で標識されたアルブミンを、上部コンパートメントに加え、冷却したアルブミン（１．５ｍｇ／ｍｌ）を、トランスサイトーシスを最小にするために、培養液に加えた。^l25Ｉ−標識アルブミンの各ウェルへの添加の１時間後に、サンプルをコンパートメント下方から採取した。サンプルの放射能は、ガンマカウンター（パッカード、スターリング、ＶＡ）で測定した。その結果は、図２に示しており、１０の独立した実験の平均＋ＳＤを表わし、移動した内皮細胞のパーセンテージとして表した。

ヒト内皮細胞の細胞増殖を示すグラフである。ヒト内皮細胞の移動を示すグラフである。

Claims

抗血管新生活性を有する医薬の製造のためのｏ−ＡＴＰの使用。
血管新生が発症又は悪化する疾病の治療用である請求項１の使用。
眼性疾患、アテローム性動脈硬化症プロセス又は腫瘍の治療用である請求項１又は２の使用。
癌腫、リンパ腫、白血病、肉腫、黒色腫、神経膠腫、神経芽細胞腫の治療用である請求項３の使用。
腫瘍治療において同時、別個又は連続使用するための、細胞毒性又は細胞増殖抑制化合物、代謝拮抗物質、アルカロイド、抗生物質、アルキル化剤、ペプチド、生物学的応答モジュレータ及びサイトカインから選択される抗腫瘍物質との組み合わせでｏ−ＡＴＰを含有する治療剤。
腫瘍治療において同時、別個又は連続使用するための、薬剤とスタチンを低下させる脂質から選択される抗アテローム性動脈硬化性物質との組み合わせでｏ−ＡＴＰを含有する治療剤。