JP2007507516A - Treatment and use of amino sugars of disorders of a mammal by amino sugars administration - Google Patents

Treatment and use of amino sugars of disorders of a mammal by amino sugars administration Download PDF

Info

Publication number
JP2007507516A
JP2007507516A JP2006534068A JP2006534068A JP2007507516A JP 2007507516 A JP2007507516 A JP 2007507516A JP 2006534068 A JP2006534068 A JP 2006534068A JP 2006534068 A JP2006534068 A JP 2006534068A JP 2007507516 A JP2007507516 A JP 2007507516A
Authority
JP
Grant status
Application
Patent type
Prior art keywords
method
joint
glcnac
disorders
acetylglucosamine
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2006534068A
Other languages
Japanese (ja)
Inventor
オクム,フランクリン,ダブリュー
シックーマン,アレクサンダー,アール
シュー,ユェ−コン
ロッツ,マーティン
Original Assignee
オプティマー・ファーマスーティカルズ・インコーポレイテッド
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof

Abstract

【課題】本発明は、アミノ糖を投与することによって哺乳動物の関節関連障害を治療することに関する。 The invention relates to treating joint related disorders in a mammal by administering an aminosugar.
【解決手段】前記治療は、関節障害に関連する疾病を特異的に予防、軽減或いは改善し、前記疾病は、滑膜炎、軟骨下骨浮腫及び軟骨退化から成る群から選択される。 A said treatment, specifically preventing diseases associated with joint disorders, alleviate or improve the disease, synovitis, is selected from the group consisting of subchondral bone edema and cartilage degradation.

Description

政府の認可 Government approval
本発明は、米国国立衛生研究所からの助成金番号NIH AG 07996及びAT 00052の補助を受けることで、一部米国政府の支援によって成された。 The present invention, by receiving the assistance of Grant No. NIH AG 07996 and AT 00052 from the National Institutes of Health, was made with the assistance of some US government. 米国政府は本発明において一定の権利を有し得る。 The United States government may have certain rights in this invention.

関連出願 RELATED APPLICATIONS
本願は、2003年10月1日出願の米国仮特許出願第60/507,716号(発明の名称:アミノ糖投与による哺乳動物の障害の治療及びアミノ糖の使用)の優先権を主張するものである。 This application is October 1, 2003 U.S. Provisional Patent Application No. 60 / 507,716, filed: claims priority to (entitled use of therapeutic and amino sugars of disorders of a mammal by amino sugars administration) it is.

本発明は、アミノ糖の投与によって哺乳動物の重篤な関節関連障害を治療する方法に関する。 The present invention relates to a method of treating severe rheumatoid-related disorders in mammals by the administration of amino sugars. 前記治療は、前記関節障害に関連する病理学的マーカーの多くを特異的に予防、軽減或いは改善し、前記病理学的マーカーは、滑膜炎、軟骨下骨浮腫(subchondral bone edema)及び軟骨退化(cartilage degradation)から成る群から選択される。 Said treatment, said specifically prevent many pathological markers associated with joint disorders, reduce or improve, the pathological markers, synovitis, subchondral bone edema (subchondral bone edema) and cartilage degradation It is selected from the group consisting of (cartilage degradation).

様々な病理学的マーカーが関節関連障害や疾患に関連している。 Various pathological marker is associated with the joint-related disorders and diseases. 関節関連障害や疾患としては、関節への身体的傷害(physical injury)や骨関節炎(OA)、関節リウマチを挙げることができるが、これらに限定されない。 The joint-related disorders and diseases, physical injury to the joints (physical injury) and osteoarthritis (OA), may be mentioned rheumatoid arthritis, and the like. 特に、関連する病理学的マーカーとしては、滑膜炎や軟骨下骨浮腫、進行性軟骨退化を挙げることができるが、他にも多数存在する(Ayral et al., Rheumatology, Vol.35, 14-17; McAlindon, Best Pract Res Clin Rheumatol 1999, 13(2):329-44; Ayral et al., Annals of the Rheumatic Diseases 2002, Vol.61, suppl. 1, #OP0014; Kerin et al., Cell Mol Life Sci 2002, 59:27-35; Hedborn et al., Cell Mol Life Sci 2002, 59:45-53; Silver et al., Crit Rev Biomed Eng 2001, 29:373-91; Elsaid et al., Osteoarthritis Cartilage. 2003, 11, 673-80; Altman et al., Am J Med. 1983 Oct 31, 75(4B):50-5)。 In particular, as related pathological markers, synovitis and subchondral bone edema, there may be mentioned a progressive cartilage degeneration, there are many other (Ayral et al., Rheumatology, Vol.35, 14 -17; McAlindon, Best Pract Res Clin Rheumatol 1999, 13 (2):... 329-44; Ayral et al, Annals of the Rheumatic Diseases 2002, Vol.61, suppl 1, # OP0014; Kerin et al, Cell Mol Life Sci 2002, 59:. 27-35; Hedborn et al, Cell Mol Life Sci 2002, 59:. 45-53; Silver et al, Crit Rev Biomed Eng 2001, 29: 373-91; Elsaid et al,. ... Osteoarthritis Cartilage 2003, 11, 673-80; Altman et al, Am J Med 1983 Oct 31, 75 (4B): 50-5).

残念ながら、関節障害に対する現在の治療は通常、アセトアミノフェンや非ステロイド性抗炎症薬、関節内注射用コルチコステロイド、ヒアルロン酸に限られているが、これらは一般的な炎症を治療し、痛みを多少軽減するにすぎない(Geletka et al., Best Pract Res Clin Rheumatol. 2003 Oct, 17:791-809; Altman et al., Am J Med. 1983 Oct 31, 75(4B):50-5)。 Unfortunately, current treatments for rheumatoid disorders are usually acetaminophen and nonsteroidal anti-inflammatory drugs, intra-articular injection corticosteroids, but are limited to hyaluronic acid, they treat general inflammation, only slightly reduce pain (Geletka et al, Best Pract Res Clin Rheumatol 2003 Oct, 17:.... 791-809; Altman et al, Am J Med 1983 Oct 31, 75 (4B): 50-5 ).

最近では、グルコサミン(GlcN)が関節障害である骨関節炎の治療に用いており、その作用機序が一般に抗炎症性として認められている。 Recently, glucosamine (GlcN) are used in the treatment of osteoarthritis is rheumatoid disorder, its mechanism of action is recognized as a general anti-inflammatory. ごく最近、GlcNが関節腔狭窄の進行を停止させて、骨関節炎の膝関節のバイオメカニクスを改善できることが示唆された(Reginster et al., Lancet 2001, 357:251-6; Hughes et al., Rheumatology (Oxford) 2002, 41:279-84)。 More recently, GlcN is to stop the progression of joint space narrowing, it is suggested that can improve biomechanics of knee joint osteoarthritis (Reginster et al, Lancet 2001, 357:. 251-6; Hughes et al,. Rheumatology (Oxford) 2002, 41: 279-84). 残念ながら、GlcNの最適in vitro活性は、糖の経口投与では達成するのが困難或いは不可能でさえある濃度範囲で見られ、更に、GlcNは低ミリモル濃度でも軟骨細胞に対して細胞毒性を示すため、高濃度のGlcNによる治療は好ましくない(Sandy et al., Arch Biochem Biophys 1999, 367:258-64; Shikhman et al., J Immunol 2001, 166:5155-60; Setnikar et al., Arzneimittelforschung 2001, 51:699-725; Adebowale et al., Biopharm Drug Dispos 2002, 23:217-25; Aghazadeh-Habashi et al,. J Pharm Pharm Sci 2002, 5(2):181-4; de Mattei et al., Osteoarthritis Cartilage 2002, 10:816-25)。 Unfortunately, optimal in vitro activity of GlcN is found in even a range of concentrations is difficult or impossible to achieve with the oral administration of sugar, further, GlcN represents cytotoxic to chondrocytes also at low millimolar concentrations Therefore, higher concentrations of treatment with GlcN is undesirable (Sandy et al, Arch Biochem Biophys 1999, 367:.. 258-64; Shikhman et al, J Immunol 2001, 166:. 5155-60; Setnikar et al, Arzneimittelforschung 2001 , 51: 699-725; Adebowale et al, Biopharm Drug Dispos 2002, 23:. 217-25; Aghazadeh-Habashi et al ,. J Pharm Pharm Sci 2002, 5 (2): 181-4; de Mattei et al. , Osteoarthritis Cartilage 2002, 10: 816-25).

また、N−アセチルグルコサミン(GlcNAc)もOAやRAの治療に用いられている。 Further, N- acetylglucosamine (GlcNAc) is also used to treat OA and RA. 研究結果から、GlcNAcはGlcNとは対照的に、ヒト関節軟骨細胞に対して毒性を示さず、50mMより高い濃度でも軟骨細胞死を誘導しないことが分かった(de Mattei et al., Osteoarthritis Cartilage 2002, 10:816-25)。 From findings, GlcNAc as opposed to GlcN, not toxic to human articular chondrocytes, even higher than 50mM concentration was found not to induce chondrocyte death (de Mattei et al., Osteoarthritis Cartilage 2002 , 10: 816-25).

OA及び/又はRAの治療のためのGlcNやGlcNAcの使用に関する特許は数多くある。 Patent to the use of GlcN and GlcNAc for the treatment of OA and / or RA are numerous. 米国特許第3,683,076号(Rovati)にはOAやRAの治療のためのGlcN塩の使用が開示されており、米国特許第4,870,061号(Speck)には口腔投与により変性関節疾患を治療するためのGlcNAcの使用が開示されており、米国特許第5,840,715号及び6,136,795号(いずれもFlorio)には関節炎を軽減するための食事療法における栄養補助剤としてのGlcNAcの使用が開示されている。 U.S. Patent No. 3,683,076 (Rovati) are disclosed the use of a GlcN salts for the treatment of OA and RA, modified by oral administration in U.S. Pat. No. 4,870,061 (Speck) use of GlcNAc to treat joint disease is disclosed, in U.S. Patent No. 5,840,715 No. and 6,136,795 (both Florio) supplement in diet to reduce arthritis use of GlcNAc is disclosed as agents.

しかし、現在まで、重篤な滑膜炎や軟骨下骨浮腫、軟骨退化を治療、予防或いは軽減する有効な手段はない。 However, up to now, severe synovitis and subchondral bone edema, the cartilage degeneration treatment, there is no effective means to prevent or mitigate. 従って、関節障害に関連するこのような重篤な疾病の治療や予防、軽減への必要性が高まっている。 Therefore, treatment and prevention of such serious diseases associated with rheumatoid disorders, there is a growing need for relief.

アミノ糖が関節障害に関連する疾病を軽減し、予防し、改善することが見出された。 Reduces disease aminosugar related joint disorders, prevent, was found to improve. 従って、この知見により、このような疾病の一以上が存在する関節障害の特定の治療が提供される。 Therefore, this finding, the specific treatment of joint disorders there are one or more such diseases are provided. 前記病理学的マーカーの一以上を有する関節障害を治療するこの新たに見出された方法は、標的アプローチ(a targeted approach)であり、新たに見出されたアミノ糖の効果によって、アミノ糖療法を受けることのなかった関節障害の治療が可能となる。 This newly discovered method is a target approaches (a targeted approach), the newly discovered amino sugars effects, aminosugars therapy to treat joint disorders having one or more of the pathological markers it is possible to treat never been joint disorders of undergoing.

本発明は、アミノ糖を投与することによって哺乳動物の関節関連障害を治療することに関する。 The present invention relates to treating joint related disorders in a mammal by administering an aminosugar. 前記治療は、関節障害に関連する疾病を特異的に予防、軽減或いは改善し、前記疾病は、滑膜炎、軟骨下骨浮腫及び軟骨退化から成る群から選択される。 It said treatment, specifically preventing diseases associated with joint disorders, alleviate or improve the disease, synovitis, is selected from the group consisting of subchondral bone edema and cartilage degradation.

本発明の好ましい実施形態は、アミノ糖(N−アセチルグルコサミンやグルコサミン、ガラクトサミン、N−アセチルガラクトサミン、イミノシクリトール、その薬学的に許容し得る塩等が挙げられるが、これらに限定されない)の治療有効量を哺乳動物に投与することによって関節障害に関連する重篤な疾病を予防、軽減或いは改善する方法に関する。 A preferred embodiment of the present invention, treatment of an amino sugar (N- acetylglucosamine or glucosamine, galactosamine, N- acetyl galactosamine, iminocyclitol, its although pharmaceutically acceptable salts include, but are not limited to) preventing serious diseases associated with joint disorders by administering an effective amount to a mammal relates to a method for reducing or improving. この好ましい実施形態の一様相においては、関節障害を特定の病理学的マーカーによって判断し、前記マーカーが存在する場合には、アミノ糖の治療有効量を投与する。 In this one aspect of the preferred embodiment, the joint damage is determined by the specific pathological markers, and if the marker is present, administering a therapeutically effective amount of amino sugars. この好ましい実施形態の他の様相においては、関節障害に関連するこのような病理学的マーカーを有することが当該技術分野で知られた関節障害をアミノ糖の治療有効量を用いて治療する。 In this another aspect of preferred embodiments, it is treated with a therapeutically effective amount of amino sugar known joint disorders in the art having such a pathological marker associated with rheumatoid disorders. 好ましくは、アミノ糖の治療有効量を哺乳動物に関節内投与する。 Preferably, a therapeutically effective amount of the amino sugar is administered intra-articularly to a mammal. また、好ましくは、このアミノ糖はGlcNAcであり、より好ましくは、このアミノ糖は、放出制御製剤としてのマトリックスに含まれたGlcNAcである。 Also, preferably, the aminosugar is GlcNAc, more preferably the amino sugars are included in the matrix as a controlled release formulation GlcNAc.

本発明の他の好ましい実施形態においては、関節障害を有する哺乳動物にGlcNAcを関節内投与して、軟骨退化や軟骨下骨浮腫、滑膜炎を治療する。 In another preferred embodiment of the present invention, the GlcNAc in a mammal with rheumatoid disorders and intraarticular administration, to treat cartilage degeneration and subchondral bone edema, and synovitis. 好ましくは、治療効果が巨視的レベル及び微視的レベルで見られる。 Preferably, the therapeutic effect is seen at the macroscopic level and the microscopic level. また、好ましくは、治療効果が特に軟骨退化の遅延や、軟骨下骨骨髄浮腫の過形成の抑制、滑膜炎における膜炎症の抑制である。 Also, preferably, therapeutic effect and in particular cartilage degeneration delay, inhibition of hyperplasia subchondral bone marrow edema, inhibition of membrane inflammation in synovitis.

本発明の他の好ましい実施形態は、治療有効量のアミノ糖(好ましくはGlcNAc)を含む組成物を単独で、或いは既存の抗炎症薬又はヘキソサミニダーゼ阻害剤と併用して哺乳動物に投与するための方法である。 Another preferred embodiment of the present invention is administered, a therapeutically effective amount of amino sugar (preferably GlcNAc) alone a composition comprising, or to an existing anti-inflammatory or hexosaminidase inhibitor in combination with mammalian it is a method for. 好ましくは、本発明の製剤を投与するための方法としては、関節内投与方法や局所投与方法、筋肉内投与方法が挙げられるが、これらに限定されない。 Preferably, the method for administering the formulation of the present invention, intraarticular administration or topical administration, although intramuscular administration methods include, but are not limited to. より好ましくは、アミノ糖の放出制御製剤をこのような治療を必要とする哺乳動物に関節内投与する。 More preferably, administered intra-articularly to a mammal in need of such treatment a controlled release formulation of the amino sugar.

このように、本発明は、アミノ糖療法に有利に反応する病理学的マーカーの一以上を有する関節障害を特異的に治療するための方法を提供する。 Thus, the present invention provides methods for specifically treating joint disorders having one or more pathological markers that responds favorably to aminosugar therapy. また、本発明は、病理学的マーカーの一以上を有する関節障害の標的治療におけるアミノ糖の新たな使用も提供する。 The present invention also provides a new use of amino sugars in the targeted treatment of joint disorders having one or more pathological markers. 本発明は更に、病理学的マーカーの一以上を有する関節障害の標的治療に有用な化合物及びその医薬製剤を提供する。 The present invention further provides useful compounds and their pharmaceutical formulations targeted treatment of joint disorders having one or more pathological markers.

略語及び用語 Abbreviations and terms
本発明及び本明細書においては、特に明記しない限り、次の用語及び略語は下に記載する意味で定義されるが、これらの説明は典型的なものを意図しているにすぎないものであって、用語の意味を、明細書全体に亘って記載或いは言及されている意味のみに限定するものではない。 In the present invention and herein, unless otherwise indicated, the following terms and abbreviations are defined in the sense that described below, it is those only these descriptions are intended to typical Te, the meaning of terms, not limited only meaningful listed or mentioned throughout the specification. むしろ、これらの説明は、本明細書や請求項に記載する用語の付加的様相及び/又は例示のいずれをも含むことを意図している。 Rather, these explanations are intended to include both additional aspects and / or exemplary terms provided herein and claims.
本明細書に記載の略語は次の通りである。 Abbreviations described herein are as follows.
ACL=前十字靭帯ACLT=前十字靭帯切断GlcN=グルコサミンGaG=グリコサミノグリカンGlcNAc=N−アセチルグルコサミンHA=ヒアルロン酸IL−1β=インターロイキン−1β ACL = anterior cruciate ligament ACLT = anterior cruciate ligament cutting GlcN = glucosamine gag = glycosaminoglycan GlcNAc = N-acetylglucosamine HA = hyaluronic acid IL-l [beta] = interleukin -1β
IL−6=インターロイキン−6 IL-6 = interleukin-6
NSAID=非ステロイド性抗炎症薬OA=骨関節炎PBS=リン酸緩衝生理食塩水PEG=ポリエチレングリコールPMSF=フッ化フェニルメチルスルホニルRA=関節リウマチ NSAID = non-steroidal anti-inflammatory drugs OA = osteoarthritis PBS = phosphate-buffered saline PEG = Polyethylene glycol PMSF = phenylmethylsulfonyl fluoride RA = rheumatoid arthritis

「有効成分」とは、治療有効量の薬物或いはその製剤を意味する。 By "active ingredient" means a drug or formulation thereof a therapeutically effective amount. 好ましくは、本発明の有効成分はアミノ糖であり、より好ましくはアミノ糖GlcNAc及びGlcNであり、最も好ましくはアミノ糖GlcNAcである。 Preferably, the active ingredient of the present invention is an amino sugar, more preferably an amino sugar GlcNAc and GlcN, most preferably amino sugars GlcNAc.

「治療有効量」とは、本発明の所望の薬理学的効果の一以上を誘導するのに必要な有効成分の量を意味する。 A "therapeutically effective amount" means an amount of active ingredient required to induce one or more desired pharmacological effects of the present invention. この量は、特定の有効成分の有効性、個体の年齢や重量、応答、及び個体の症状の性質や重症度によって大きく変わり得る。 This amount is determined by the efficacy of the particular active ingredient, the age and weight of the individual, the response, and may vary greatly depending on the symptoms of the nature and severity of the individual. 従って、有効成分の量に対する上限や下限はない。 Therefore, there is no upper limit and a lower limit for the amount of the active ingredient. 本発明で用いる治療有効量は、当業者によって容易に決定することができる。 Therapeutically effective amount for use in the present invention can be readily determined by one skilled in the art.

「アルギン酸ゲル」とは、1,4−結合β−D−マンヌロン酸残基及びα−L−グルロン酸残基を異なる比率で含む天然多糖ポリマーを意味する。 The "alginic acid gel" refers to natural polysaccharide polymers comprising 1,4-linked beta-D-mannuronic and alpha-L-guluronic acid residues in different ratios. アルギン酸塩は、特に特定の2価カチオン(カルシウムやバリウム、ストロンチウム等)の存在下で安定なゲルを形成することができる。 Alginate can form stable gels in particular in the presence of certain divalent cations (calcium, barium, strontium, etc.).

「アミノ糖」とは、一以上の炭素原子がアミノ基(−NH 2 )で置換された合成糖や天然糖のいずれをも意味する。 "Amino sugar", one or more carbon atoms refers to any synthetic sugars and natural sugars substituted with amino group (-NH 2). このような置換は、糖に存在する不斉炭素の配向や配置とは関係なく起こり得る。 Such substitutions may occur regardless of the orientation or configuration of the asymmetric carbons present in the sugar. 特に断りのない限り、「アミノ糖」とは、環状アミノ糖のいずれかのアノマー(α或いはβ)を意味する。 Unless otherwise indicated, the term "aminosugar" refers to either anomer cyclic amino sugars (alpha or beta). アミノ糖は、アルキル基或いはアシル基でN置換されていてもよい(即ち、ペンダントアミノ基の一水素原子がアルキル基或いはアシル基(−COR、Rは低級アルキル)で置換されていてもよい)。 Amino sugars, optionally N-substituted with an alkyl group or an acyl group (i.e., one hydrogen atom of the pendant amino group is an alkyl group or an acyl group (-COR, R may be substituted with lower alkyl)) . 本発明の好ましい一実施形態において、−CORのRはメチル(−CH 3 )である。 In one preferred embodiment of the present invention, R in -COR is methyl (-CH 3).

「関節炎」とは、関節の炎症によって特徴付けられる特定の疾患のいずれをも意味するが、関節炎症の原因は各種条件で異なり得る。 The term "arthritis", but refers to any particular disease characterized by joint inflammation, cause of joint inflammation may differ in various conditions. 比較的一般的な関節疾患としては、関節リウマチや若年性関節炎、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、骨関節炎が挙げられる。 Relatively Common joint disease, rheumatoid arthritis and juvenile arthritis, ankylosing spondylitis, psoriatic arthritis, osteoarthritis.

「関節軟骨」又は「軟骨」とは、骨の末端を覆い、関節面を形成する物質を意味する。 The "articular cartilage" or "cartilage", covering the ends of the bone, means a material which forms an articulating surface. 軟骨は圧縮力に耐えることができ、関節が滑り得る低摩擦面を形成する。 Cartilage can withstand compressive forces, to form a joint obtained sliding low friction surface. 関節軟骨は、軟骨細胞と、タンパク質及びグリコサミノグリカン多糖を更に含む基質とから成る。 Articular cartilage is composed of chondrocytes, and further comprising a substrate protein and glycosaminoglycan polysaccharide.

「軟骨退化」とは、軟骨を含む組織の退化を意味する。 The term "cartilage degradation" refers to the degeneration of tissues, including cartilage.

「キチン」とは、β−1,4結合した(ポリ)GlcNAcを意味する。 The term "chitin", refers to the β-1,4 bound (poly) GlcNAc. キチンは自然界全体、例えば、昆虫や甲殻類の外骨格に存在する。 Chitin is the entire natural world, for example, present in the exoskeleton of insects and crustaceans.

「キトサン」とは、脱アシル化したキチン或いはβ−1,4結合した(ポリ)N−グルコサミンを意味する。 The term "chitosan" refers to deacylated chitin, or beta-l, 4 linked (poly) N- glucosamine.

「軟骨細胞」とは、関節軟骨内に存在する細胞を意味する。 The term "cartilage cells", refers to a cell present in the articular cartilage. 軟骨細胞は、コラーゲン(ゼラチン状タンパク質)及びプロテオグリカン(タンパク質に結合したグルコサミングリカン(ムコ多糖ともいう))を産生する。 Chondrocytes produce collagen (gelatin-like protein) and proteoglycans (glucosamine glycans linked to proteins (also called mucopolysaccharides)).

「関節の障害」又は「関節障害」は、哺乳動物の関節に影響を及ぼす疾患のいずれをも意味し、次の障害、即ち、滑膜炎、軟骨下骨浮腫及び軟骨退化の一以上を示す。 "Joint disorder" or "joint disorder" also refers to any disease affecting mammalian joints, shown next failure, i.e., synovitis, one or more subchondral bone edema and cartilage degradation .

「カプセル化効率」とは、注射用ポリマーゲルやリポソーム、マイクロスフェア、ナノ粒子等内に包込、配合、ロード、結合、固定或いは取込まれた化合物や有効成分の量を意味する。 By "encapsulation efficiency", injectable polymeric gels or liposomes, microspheres, wrapped in the nanoparticles or the like, blending, loading, binding, refers to the amount of fixed or preparative incorporated compound and the active ingredient. 一般に、「収率」は有効成分のカプセル化率で表わされる。 In general, "yield" is expressed by the encapsulation rate of the active ingredient.

「取込」又は「カプセル化」とは、有効成分を処方するいずれの方法をも意味し、これによってマトリックス(溶液や固相等)内の有効成分の自由な溶出(free dissolution)が制限、抑制或いは阻害される。 The "capture" or "encapsulated" also refers to any method of formulating an active ingredient, whereby the matrix free dissolution of the active ingredient (solution or solid phase etc.) in (free Dissolution) is limited, It is suppressed or inhibited. 有効成分の取込或いはカプセル化の好ましい例としては、粒子、インプラント或いはゲルから選択されるマトリックス内に取込んだ製剤が挙げられるが、これに限定されない。 Preferred examples of the take or encapsulation of the active ingredient, particles, although ipecac but preparations are exemplified in the matrix is ​​selected from the implant or gel, but is not limited thereto.

「マトリックス」とは、アミノ糖及び必要に応じて他の物質(抗炎症薬等)を取込むことができる固状、ゲル状或いは液状組成物を意味する。 The term "matrix" refers to depending on the amino sugar and optionally other substances (anti-inflammatory agents, etc.) solid capable of uptake of, gel or liquid composition.

「グリコサミノグリカン」とは、繰り返し二糖単位を含む長いヘテロ多糖分子を意味する。 The term "glycosaminoglycan" refers to a long hetero polysaccharide molecules containing repeating disaccharide units. 二糖単位は、変性アミノ糖(D−、N−アセチルガラクトサミン或いはD−GlcNAc)及びウロン酸(D−グルクロネートやL−イズロネート等)から成ることができる。 Disaccharide units are modified amino sugar can be made of (D-, N-acetylgalactosamine or D-GlcNAc) and uronic acid (D-glucuronate or L- iduronate etc.). GAGは関節内では特に潤滑液として機能する。 GAG is particularly functions as a lubricating fluid in the joints. 生理学的に重要な特定のGAGとしては、ヒアルロン酸やデルマタン硫酸、コンドロイチン硫酸、ヘプリン(heprin)、ヘパラン硫酸、ケラタン硫酸が挙げられる。 Physiologically important particular GAG, hyaluronic acid and dermatan sulfate, chondroitin sulfate, Hepurin (heprin), heparan sulfate, keratan sulfate.

「ヒアルロン酸」とは、D−グルクロン酸及びD−N−アセチルグルコサミンのサブユニットを交互に含む天然ムコ多糖を意味する。 The term "hyaluronic acid" refers to naturally occurring mucopolysaccharide comprising alternating subunits of D- glucuronic acid and D-N-acetylglucosamine. ヒアルロン酸は、β(1−4)グリコシド結合によって結合したD−グルクロン酸β(1−3)N−アセチル−D−グルコサミンから成る二糖単位を繰り返すことによって形成された直鎖多糖(長鎖生体高分子)である。 Hyaluronic acid, beta (1-4) glycosidic bonds D- glucuronic acid linked by beta (1-3) straight-chain polysaccharide which is formed by repeating disaccharide units consisting of N- acetyl -D- glucosamine (long chain it is a biological polymer). ヒアルロン酸は、約50,000ドルトン〜約8×10 6ドルトンの様々な分子量範囲で市販されている。 Hyaluronic acid is commercially available in various molecular weights ranging from about 50,000 Daltons to about 8 × 10 6 daltons. ヒアルロン酸はナトリウム塩としても入手可能であり、これは乾燥高純度物質である。 Hyaluronic acid is also available as the sodium salt, which is a dry high purity material. ヒアルロン酸ナトリウムは、当該技術分野で知られた各種保存料(アルキル置換安息香酸エステルやアルコール、そのコンジュゲート、ブレンド及び混合物が挙げられるが、これらに限定されない)と共に保存することができる。 Sodium hyaluronate, known various preservative in the art (alkyl-substituted benzoic acid esters and alcohols, conjugates thereof, although blends and mixtures thereof, but not limited to) can be saved with.

「ヒアルロナン」とは、N−アセチルグルコサミン及びグルクロン酸の繰り返し分子から成るポリマーを意味する。 The term "hyaluronan" refers to a polymer composed of repeating molecules of N- acetylglucosamine and glucuronic acid.

「IL−1β」とは、インターロイキン−1β、即ち、広範囲の免疫反応及び炎症反応(B細胞やT細胞の活性化等)を仲介する免疫調節剤を意味する。 The "IL-l [beta]", interleukin-1 beta, that is, means an immunomodulator that mediates a wide range of immune and inflammatory responses (activation of B cells and T cells).

「注射用製剤」とは、溶液或いは懸濁液として調製した滅菌注射用組成物を意味する。 By "injectable formulation" refers to a sterile injectable composition prepared as a solution or suspension. 注射前に液状ビヒクルに溶解或いは懸濁させるのに適した固形製剤を調製することもできる。 It can also be prepared before injection of solid formulations suitable for solution or suspension in a liquid vehicle. 調製物は乳化させてもよく、有効成分を取込んでもよい。 Preparation may also be emulsified may captures and active ingredient. また、注射用製剤は、当該技術分野で知られた各種保存料(アルキル置換安息香酸エステルやアルコール、そのコンジュゲート、ブレンド及び混合物が挙げられるが、これらに限定されない)を含んでいてもよい。 Moreover, injectable formulations, known various preservative in the art (alkyl-substituted benzoic acid esters and alcohols, conjugates thereof, although blends and mixtures thereof, but not limited to) may include.

「注射用ポリマーゲル」とは、本発明の有効成分を取込或いはカプセル化するのに用いるポリマーマトリックス担体を意味する。 By "injectable polymer gel" means a polymer matrix carrier used to capture or encapsulate active ingredients of the present invention. ポリマーベースの注射用製剤の場合、有効成分とポリマーとの各種組合せを選択、処方することによって薬物用量やタイミングを調整することができる。 For injectable formulations of polymer-based, the various combinations of the active ingredient and the polymer selected, it is possible to adjust the drug dose and timing by formulating. 薬剤総用量や放出速度は調整可能な変数である。 Total drug dose and release rate is an adjustable variable. 例えば、溶媒量、コポリマー比や分子量、及び高分子溶媒極性を変化させることによって、薬物送達パラメータを最適化することができる。 For example, the amount of solvent, the copolymer ratio and molecular weight, and by varying the polymer solvent polarity, it is possible to optimize drug delivery parameters. ポリマーベースの系では有効成分の寿命を増加させることもできる。 The polymer-based systems may also increase the life of the active ingredient. 製剤にポリラクチド及びラクチド−グリコリドコポリマーを含むポリマー系を用いることによって、生体適合性や生分解性等の利益が得られる。 Polylactide and lactide in the formulation - by using polymer containing glycolide copolymer, profit biocompatible and biodegradable, and the obtained. 注射用ポリマーゲルは、当該技術分野で知られたプロセスに従って調製、例えば、処理、混合、濾過、加熱或いは滅菌することができる。 Injectable polymer gels, prepared according to the process known in the art, for example, processing, mixing, filtration, can be heated or sterilized.

「マイクロスフェア」とは、本発明の有効成分を取込或いはカプセル化するのに用いるポリマーマトリックス担体を意味する。 By "microspheres" means polymer matrix carrier used to capture or encapsulate active ingredients of the present invention. マイクロスフェアベースの製剤の場合、有効成分とポリマーとの各種組合せを選択、処方することによって薬物用量やタイミングを調整することができる。 For microsphere based formulation, the various combinations of the active ingredient and the polymer selected, it is possible to adjust the drug dose and timing by formulating. 薬剤総用量や放出速度は調整可能な変数である。 Total drug dose and release rate is an adjustable variable. 例えば、コポリマー比やコポリマー分子量を変化させることによって、薬物送達パラメータを最適化することができる。 For example, by changing the copolymer ratio and copolymer molecular weight, it is possible to optimize drug delivery parameters. マイクロスフェアベースの系では有効成分の寿命を増加させることもできる。 It may also increase the lifetime of the active ingredient in microspheres based systems. 製剤にラクチド−グリコリドコポリマーを含むマイクロスフェアを用いることによって、生体適合性や生分解性等の利益が得られる。 Lactide in the formulation - by using microspheres comprising glycolide copolymer, profit biocompatible and biodegradable, and the obtained. マイクロスフェアは、当該技術分野で知られたプロセスに従って調製、例えば、処理、加工、粉砕、破砕或いは押出することができる。 Microspheres, prepared according to the process known in the art, for example, processing, machining, milling, can be crushed or extrusion.

「関節内」とは、薬物を関節へ直接送達する方法をいう。 The term "intra-articular" refers to a method of delivering the drug directly into the joint. 従来の薬物送達経路、例えば、経口投与や静脈内投与、筋肉内投与は、薬物を関節へ運搬する上で滑膜の血流に依存しているが、これは効率が悪い。 Conventional drug delivery routes, for example, oral or intravenous administration, intramuscular administration, although the drug is dependent on blood flow synovium in order to transport into the joint, which is inefficient. 即ち、滑膜毛管から関節腔への小分子の経滑膜運搬(transynovial transfer)は一般に受動拡散によって起こるため、標的分子のサイズが増大すると効率が悪くなる。 That is, after synovial transport of small molecules from the synovial capillaries to the joint space (transynovial transfer) because that occurs typically by passive diffusion, the efficiency is deteriorated when the size of the target molecule is increased. よって、分子(例えば、GlcN)を関節腔へ近づけることは実質的に制限される。 Therefore, molecules (e.g., GlcN) bringing the to the joint space is substantially restricted. 薬物の関節内注射或いは灌流によってこのような制限を回避する。 By intra-articular injection or perfusion of drugs to avoid this limitation.

「ポリマー」とは、ヒアルロン酸、ポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールとポリ(乳酸/グリコール酸)とのコポリマー、乳酸のポリマー、ポリ(エチレングリコール−y−(DL−乳酸−co-グリコール酸)のコポリマー、アルギン酸ゲル、キトサン、或いはその薬学的に許容し得る塩を意味する。 "Polymer", hyaluronic acid, polyethylene glycol, copolymers of polyethylene glycol and poly (lactic / glycolic acid), polymers of lactic acid, a copolymer of poly (ethylene glycol-y-(DL-lactic -co- glycolic acid), alginate gel, chitosan, or means a pharmaceutically acceptable salts.

「持続放出」とは、薬物が放出されて有効である期間、或いは薬物の生理学的摂取が有効になっている期間を意味する。 "Sustained release" means a period during which period the drug is active is released, or physiological uptake of the drug is enabled. 薬物が殆ど放出されないか或いは全く放出されない誘導期間が持続放出期間に先行してもよく、持続放出期間は、二相性(biphasic)、即ち、薬物が多少放出される初期期間と薬物が更に放出される第二期間とを含んでいてもよい。 Drug may precede the most released no or no released induction period sustained release period not, sustained release period, biphasic (biphasic), i.e., the initial period and the drug the drug is somewhat released are further released second period and it may include that. 一方、「連続放出」は、単相性(monophasic)と思われ、滑らかな曲線の放出時間プロファイルを有する放出プロファイルを説明する際にのみ用いる。 On the other hand, "continuous release" is believed to monophasic (monophasic), used only in describing the release profile having a release time profile of a smooth curve. 当業者であれば、放出プロファイルが実際に指数関数的或いは対数的時間−放出プロファイルに対応し得ることは理解できるであろう。 Those skilled in the art, the release profile is indeed exponential or logarithmic time - it will be understood that may correspond to the release profile.

「滑膜炎」とは、関節内膜(滑膜)の炎症を意味する。 The "synovitis", means inflammation of the joint lining (synovium). 滑膜炎は、様々な関節関連障害(骨関節炎や肉体的或いは外傷性傷害、関節リウマチ、他の自己免疫障害が挙げられるが、これらに限定されない)に存在する。 Synovitis, various joint-related disorders (osteoarthritis or physical or traumatic injury, rheumatoid arthritis, including but other autoimmune disorders, but not limited to) present in the.

アミノ糖が関節障害に関連する疾病を軽減し、予防し、改善することが見出された。 Reduces disease aminosugar related joint disorders, prevent, was found to improve. 従って、この知見により、このような疾病の一以上が存在する関節障害に対する具体的治療法が提供される。 Therefore, this finding, specific treatment for joint disorders there are one or more such diseases are provided. 前記病理学的マーカーの一以上を有する関節障害を治療するこの新たに見出された方法は、標的アプローチであり、新たに見出されたアミノ糖の効果によって、アミノ糖療法を受けることのなかった関節障害の治療が可能となる。 This newly discovered method of treating joint disorders having one or more of the pathological markers is a targeted approach, the newly discovered amino sugars effect, not be subjected to amino sugars therapy the treatment of joint disorders it is possible to have. 「疾病」及び「病理学的マーカー」は本明細書においては交換可能に用いられているが、これらの用語が滑膜炎、軟骨下骨浮腫及び軟骨退化を言及している点に注意。 "Disease" and "pathological marker" have been used interchangeably herein, note that these terms are referring synovitis, subchondral bone edema, and cartilage degradation.

本発明は、アミノ糖を投与することによって哺乳動物の関節関連障害を治療することに関する。 The present invention relates to treating joint related disorders in a mammal by administering an aminosugar. 前記治療は、関節障害に関連する疾病を特異的に予防、軽減或いは改善し、前記疾病は、滑膜炎、軟骨下骨浮腫及び軟骨退化から成る群から選択される。 It said treatment, specifically preventing diseases associated with joint disorders, alleviate or improve the disease, synovitis, is selected from the group consisting of subchondral bone edema and cartilage degradation.

本発明の好ましい実施形態は、アミノ糖(N−アセチルグルコサミンやグルコサミン、ガラクトサミン、N−アセチルガラクトサミン、イミノシクリトール、その薬学的に許容し得る塩等が挙げられるが、これらに限定されない)の治療有効量を哺乳動物に投与することによって関節障害に関連する重篤な疾病を予防、軽減或いは改善する方法に関する。 A preferred embodiment of the present invention, treatment of an amino sugar (N- acetylglucosamine or glucosamine, galactosamine, N- acetyl galactosamine, iminocyclitol, its although pharmaceutically acceptable salts include, but are not limited to) preventing serious diseases associated with joint disorders by administering an effective amount to a mammal relates to a method for reducing or improving. この好ましい実施形態の一様相においては、関節障害を特定の病理学的マーカーによって判断し、前記マーカーが存在する場合には、アミノ糖の治療有効量を投与する。 In this one aspect of the preferred embodiment, the joint damage is determined by the specific pathological markers, and if the marker is present, administering a therapeutically effective amount of amino sugars. この好ましい実施形態の他の様相においては、関節障害に関連するこのような病理学的マーカーを有することが当該技術分野で知られた関節障害をアミノ糖の治療有効量を用いて治療する。 In this another aspect of preferred embodiments, it is treated with a therapeutically effective amount of amino sugar known joint disorders in the art having such a pathological marker associated with rheumatoid disorders. 好ましくは、アミノ糖の治療有効量を哺乳動物に関節内投与する。 Preferably, a therapeutically effective amount of the amino sugar is administered intra-articularly to a mammal. また、好ましくは、このアミノ糖はGlcNAcであり、より好ましくは、このアミノ糖は、放出制御製剤としてのマトリックスに含まれたGlcNAcである。 Also, preferably, the aminosugar is GlcNAc, more preferably the amino sugars are included in the matrix as a controlled release formulation GlcNAc.

本発明の他の好ましい実施形態においては、関節障害を有する哺乳動物にGlcNAcを関節内投与して、軟骨退化や軟骨下骨浮腫、滑膜炎を治療する。 In another preferred embodiment of the present invention, the GlcNAc in a mammal with rheumatoid disorders and intraarticular administration, to treat cartilage degeneration and subchondral bone edema, and synovitis. 好ましくは、治療効果が巨視的レベル及び微視的レベルで見られる。 Preferably, the therapeutic effect is seen at the macroscopic level and the microscopic level. また、好ましくは、治療効果が特に軟骨退化の遅延や、軟骨下骨骨髄浮腫の過形成の抑制、滑膜炎における膜炎症の抑制である。 Also, preferably, therapeutic effect and in particular cartilage degeneration delay, inhibition of hyperplasia subchondral bone marrow edema, inhibition of membrane inflammation in synovitis.

本発明の他の好ましい実施形態は、治療有効量のアミノ糖(好ましくはGlcNAc)を含む組成物を単独で、或いは既存の抗炎症薬又はヘキソサミニダーゼ阻害剤と併用して哺乳動物に投与するための方法である。 Another preferred embodiment of the present invention is administered, a therapeutically effective amount of amino sugar (preferably GlcNAc) alone a composition comprising, or to an existing anti-inflammatory or hexosaminidase inhibitor in combination with mammalian it is a method for. 好ましくは、本発明の製剤を投与するための方法としては、関節内投与方法や局所投与方法、筋肉内投与方法が挙げられるが、これらに限定されない。 Preferably, the method for administering the formulation of the present invention, intraarticular administration or topical administration, although intramuscular administration methods include, but are not limited to. より好ましくは、アミノ糖の放出制御製剤をこのような治療を必要とする哺乳動物に関節内投与する。 More preferably, administered intra-articularly to a mammal in need of such treatment a controlled release formulation of the amino sugar.

このように、本発明は、アミノ糖療法に有利に反応する病理学的マーカーの一以上を有する関節障害を特異的に治療するための方法を提供する。 Thus, the present invention provides methods for specifically treating joint disorders having one or more pathological markers that responds favorably to aminosugar therapy. また、本発明は、病理学的マーカーの一以上を有する関節障害の標的治療におけるアミノ糖の新たな使用も提供する。 The present invention also provides a new use of amino sugars in the targeted treatment of joint disorders having one or more pathological markers. 本発明は更に、病理学的マーカーの一以上を有する関節障害の標的治療に有用な化合物及びその医薬製剤を提供する。 The present invention further provides useful compounds and their pharmaceutical formulations targeted treatment of joint disorders having one or more pathological markers.

本明細書に引用した全ての特許、刊行物及び特許出願は、それらの内容全てを本明細書の一部を構成するものとしてここに援用する。 All patents cited herein, publications and patent applications are incorporated herein for all their contents as constituting a part of this specification. 特に明記しない限り、本明細書で用いた全ての技術用語及び科学用語は、本発明の属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。 Unless otherwise stated, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. 典型的な方法や材料については後述する。 For a typical process and materials described below. しかし、本明細書に記載の方法や材料と同様或いは同等のものを用いて本発明の変形例を得ることもできる。 However, it is also possible to obtain a modification of the present invention using those same or equivalent to the methods and materials described herein. 後述の材料や方法、実施例は説明のためにすぎず、これらに限定されるものではない。 Materials and methods described below, examples are merely for illustration and are not intended to be limited thereto.

次の実施例は本発明の具体的な実施形態を説明するためのものであり、本発明の範囲を何ら限定するものではない。 The following examples are intended to illustrate specific embodiments of the present invention and are not intended in any way to limit the scope of the present invention.

外傷後関節変形のACLT(前十字靭帯切断)モデルは、関節軟骨の退行性変化の研究に最も広く用いられているモデルの一種である。 ACLT (anterior cruciate ligament cutting) model of post-traumatic joint deformity is a type of model that is most widely used to study degenerative changes in articular cartilage. ACLTについては、Settonet al., Osteoarthritis Cartilage 1999, 7:2-14に記載されている。 For ACLT, Settonet al, Osteoarthritis Cartilage 1999, 7:. Described in 2-14. ACLTは、異常な膝のバイオメカニクス、例えば、伸展時及び90°屈曲時の前方引き出し(anterior drawer)の増加や、関節障害(外傷性傷害や関節炎等)を患っているヒト膝で見られるものと同様の内転の増加を引き起こす。 ACLT is abnormal knee biomechanics, for example, those found in extended time and 90 ° increased and the front drawer flexion (anterior drawer), human knee suffering from joint disorders (traumatic injury or arthritis, etc.) It causes an increase in the same adduction with.

骨関節炎は、次の疾病、即ち、滑膜炎、軟骨下骨浮腫及び軟骨退化の一以上を示す多くの関節障害の一種にすぎない。 Osteoarthritis, the following diseases, i.e., only one of a number of joint disorders showing synovitis, one or more subchondral bone edema, and cartilage degradation. 他の関節障害としては、肉体的或いは外傷性傷害や関節リウマチが挙げられるが、これらに限定されない。 Other joint disorders, including but physical or traumatic injury and rheumatoid arthritis, and the like. 以下、ACLTモデルの考察と関連して用いる「実験的(experimental)OA」は本発明を骨関節炎に限定するものではない。 Hereinafter, "experimental (experimental) OA" as used in connection with discussion of ACLT model are not intended to limit the invention to osteoarthritis. どちらかといえば、「実験的OA」は当該技術分野においては一般的な用語にすぎない。 If anything, "experimental OA" is only in general terms in the art. 本発明は、上述の疾病に関連する関節障害の全種類に対して有用である。 The present invention is useful for all types of joint disorder associated with diseases described above.

関節障害に関連する病理学的マーカーに対するアミノ糖の作用について検討するため、ACLTによってウサギの膝に実験的OAを誘導した。 To examine the effect of amino sugars for pathological markers associated with joint damage was induced experimental OA knee of rabbits by ACLT. これらのウサギにおいて軟骨変性が最も重篤な部分は大腿骨内側顆に生じ、大腿骨外側顆がそれに続く(Chang et al., Osteoarthritis Cartilage 1997, Sep; 5:357-72)。 The most severe portion cartilage degeneration in these rabbits occurred medial femoral condyle, femoral condyle is followed (Chang et al, Osteoarthritis Cartilage 1997, Sep; 5:. 357-72). 脛骨プラトーにおいては、ACL切断によって、半月板で覆われた部分に軽度から中程度の病変が生じるのみである。 In the tibial plateau, the ACL cutting, only moderate lesions resulting from mild-covered part meniscus.

試薬 GlcNAcはシグマ社(ミズーリ州セントルイス)から購入した。 Reagent GlcNAc were purchased from Sigma (St. Louis, MO). GlcNAcを通常の生理食塩水に溶解し、0.22μmフィルター(コーニング社、マサチューセッツ州アクトン)による濾過によって滅菌した。 Was dissolved GlcNAc into normal saline, 0.22 [mu] m filter (Corning, Acton, Mass) was sterilized by filtration through. GlcNAc滅菌溶液を4℃で保存した。 GlcNAc sterile solution was stored at 4 ℃ to. ヒアルロン酸ナトリウム(Hyalgan TM)はサノフィ・シンセラボ社(ニューヨーク州ニューヨーク)から購入した。 Sodium hyaluronate (Hyalgan TM) was purchased from Sanofi-Shinserabo, Inc. (New York, NY).

GlcNAc持続放出製剤の調製ポリ乳酸デポー(PLAD) Preparation polylactic depot GlcNAc sustained release formulation (PLAD)
凍結乾燥cGMPグレードGlcNAc(グリーンフィールド社、米国イリノイ州グミー(Gumee))粉末を、医薬グレード低分子量ポリ乳酸(L−102、ベーリンガーインゲルハイム(BI)ケミカルズ社、米国コネチカット州ウォーリングフォード)をUSP/NFグレード溶媒(ベンジルアルコール(BA)、安息香酸ベンジル(BB)、エタノール(EtOH))に溶解して得たポリマー溶液に溶解或いは懸濁させた。 Lyophilized cGMP grade GlcNAc to (Greenfield, Inc., Illinois, USA Shores (Gumee)) powder, a pharmaceutical grade low-molecular weight polylactic acid (L-102, Boehringer Ingelheim (BI) Chemicals, Inc., USA Wallingford, Conn) and USP / NF grade solvents (benzyl alcohol (BA), benzyl benzoate (BB), ethanol (EtOH)) was dissolved or suspended in a polymer solution obtained by dissolving the. 得られた混合物はin vitro及びin vivoで評価した。 The resulting mixture was evaluated in vitro and in vivo.

ポリ乳酸−co-グリコール酸(PLGA)注射用ゲル 凍結乾燥GlcNAc粉末を、医薬グレード低分子量PLGA(RG 502−H、ベーリンガーインゲルハイム(BI)ケミカルズ社、米国コネチカット州ウォーリングフォード)をUSP/NFグレード溶媒(NMP、DMSO、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、エタノール)に溶解して得たポリマー溶液に溶解或いは懸濁させた。 Polylactic -co- glycolic acid (PLGA) injectable gel lyophilized GlcNAc powder, pharmaceutical grade low molecular weight PLGA (RG 502-H, Boehringer Ingelheim (BI) Chemicals, Inc., USA Wallingford, Conn) to USP / NF grade solvent (NMP, DMSO, benzyl alcohol, benzyl benzoate, ethanol) was dissolved or suspended in a polymer solution obtained by dissolving the. 得られた混合物はin vitro及びin vivoで評価した。 The resulting mixture was evaluated in vitro and in vivo.

製造及び品質管理 Production and quality control
注射用ゲル製剤は、0.22ミクロンフィルターによる最終濾過によって水溶液として滅菌した後、無菌で乾燥した。 Injectable gel formulation and sterile as an aqueous solution by final filtration through a 0.22 micron filter, and then dried with sterile. 滅菌ポリマー溶液と滅菌GlcNAc粉末とを使用時に無菌技法によって混合した。 And mixed by aseptic technique the sterile polymer solution and sterile GlcNAc powder during use. 各製剤の同一性、純度、効力、無菌性(sterility)及び負荷(loading)については製造バッチレコードに記録した。 The identity of each formulation, purity, and potency, sterility (sterility) and load (loading) was recorded in the production batch records. HPLC或いはFT−IRを用いて同一性、純度、効力及び負荷を測定した。 Identity using HPLC or FT-IR, purity, potency and load were measured. 無菌性は変法USP無菌試験によって求めた。 Sterility was determined by modified USP sterility test. 即ち、試料を適切な溶媒(通常はDMSO)に溶解した後、存在する溶媒が静菌性でなくなるレベルまで滅菌水で逐次希釈する。 That is, a sample of a suitable solvent (usually DMSO) were dissolved in the solvent present is sequentially diluted with sterile water until the level not bacteriostatic. このように希釈した試料を標準USP無菌試験(USPモノグラフ番号<71>)に付す。 Subjecting thus the diluted samples to the standard USP sterility test (USP monograph number <71>).

リン酸緩衝生理食塩水にてインキュベートした製剤からのGlcNAcの放出 Release of GlcNAc from incubated formulated in phosphate buffered saline
In vitro放出実験をリン酸緩衝生理食塩水にて行い、生理条件下での放出速度を評価した。 The In vitro release experiment performed in phosphate buffered saline was evaluated the release rate under physiological conditions. 各持続放出製剤(100μL)を1.0mLのリン酸緩衝生理食塩水に添加した後、37℃でインキュベートした。 After each sustained-release formulation (100 [mu] L) was added in phosphate buffered saline 1.0 mL, and incubated at 37 ° C.. 異なる時点で、リン酸緩衝生理食塩水浴溶液をピペットで除去することによって製剤マトリックスを分離した。 At different time points were separated formulation matrix by removing the phosphate-buffered saline bath solution with a pipette. GlcNAc誘導体を先に記載の方法(Reissig et al., J. Biol. Chem. 1955 217:959-966)によって生成した後、得られた溶液をUV検出によって解析した。 The method according to GlcNAc derivative previously (Reissig et al, J. Biol Chem 1955 217:... 959-966) was produced by the resulting solution was analyzed by UV detect. 次いで、製剤マトリックスを1.0mLのリン酸緩衝生理食塩水に再懸濁させ、上述同様の条件下でインキュベートした。 Then resuspended formulation matrix in phosphate buffered saline 1.0 mL, was incubated in the above same conditions. 結果を下の図7に示す。 The results are shown in Figure 7 below.

動物 animal
New Zealand Whiteウサギ(8〜12月齢、重量:3.7〜4.2kg、骨端閉鎖)を、後述のアルゼットポンプ実験で3.0〜3.5kgのウサギを用いた以外は、全ての実験で用いた。 New Zealand White rabbits (8-12 months old, weight: 3.7~4.2Kg, epiphyseal closure) and, except for using rabbit 3.0~3.5kg at Alzet pump experiments described below, all It was used in the experiment. 実験は全て、AACLガイドラインに従い、カリフォルニア大学サンディエゴ校及びスクリップス研究所双方の動物審査委員会の承認に基づいて行った。 All experiments, in accordance with AACL guidelines, was based on the approval of the University of California at San Diego and the Scripps Research Institute both of animal review committee.

前十字靭帯切断(ACLT) Anterior cruciate ligament cutting (ACLT)
片側或いは両側ACLTを各実験セットにおける記載のように行った。 The one or both sides ACLT was performed as described in each set of experiments. ACLTは、内側関節切開技法(Yoshioka et al., Osteoarthritis Cartilage 1996, 4:87-98)によって行った。 ACLT, the inner joint incision technique (Yoshioka et al, Osteoarthritis Cartilage 1996, 4:. 87-98) by were carried out. 膝蓋骨を横方向に外した後、ACLを鋭利な刃物で切断した。 After removing the patella laterally, it was cut ACL with a sharp knife. 切断の完了は手動による前方引き出し試験によって確認した。 Complete cleavage was confirmed by the front drawer test manual. 膝関節を滅菌生理食塩水で洗浄し、縫合によって層を閉鎖した。 The knee joint was washed with sterile saline, and closed layer by stitching. 全てのウサギは自由に活動させながら個別に維持した。 It was maintained individually with all of the rabbits to operate freely. 外科処置から8週間後に全てのウサギを殺した。 It killed all of the rabbits from the surgical treatment after 8 weeks. 先に公表されたデータから、ACLT処置を行ったウサギの大部分においては、この時点で軟骨変性が生じることが示されている(Sah et al., J Orthop Res 1997 Mar; 15:197-203)。 From previously published data, in most of the rabbits were ACLT treatment has been shown to cartilage degeneration occurs at this point (Sah et al, J Orthop Res 1997 Mar; 15:. 197-203 ).

GlcNAcの筋肉内注射 Intramuscular injection of GlcNAc
GlcNAcの筋肉内注射は週に3回、施術1週間後に開始し7週間行った。 Intramuscular injection of GlcNAc is 3 times a week, went started seven weeks treatment after one week. 注射1回当りのGlcNAcの用量は200mg/kgであった。 Dose of one injection per GlcNAc was 200 mg / kg. 対照群には通常の生理食塩水を同じ回数、筋肉内投与した。 The same number of normal saline control group, was administered intramuscularly.

GlcNAcの関節内注射 GlcNAc of intra-articular injection
GlcNAcの関節内注射は施術1週間後に開始し7週間行った。 Intra-articular injection of GlcNAc went 7 weeks to start one week after treatment. ウサギには膝関節当り0.3mLのGlcNAcを週に2回注射した。 The rabbits were injected twice GlcNAc of the knee joint per 0.3mL a week. 注射1回当りのGlcNAcの単回投与量は80mgであった。 Single dose of one injection per GlcNAc was 80 mg. 対照ウサギには通常の生理食塩水を週に2回関節内注射した(関節当り0.3mL)。 The control rabbits were twice intraarticular injection of normal saline a week (joint per 0.3 mL). 第3のウサギ群にはヒアルロナンの関節内注射(関節当り0.3mL)を週に2回、ACL切断1週間後から開始し7週間行った。 The third rabbit group hyaluronan intraarticular injection twice (joint per 0.3 mL) weekly, was carried out starting from ACL cut one week after 7 weeks. 肉眼で見える滑液滲出(gross synovial effusions)が生じた3羽のウサギ(対照群の2羽及びヒアルロナン群の1羽)において滑液解析を行った。 Synovial fluid analysis was performed in macroscopic synovial fluid effusion (gross synovial effusions) is 3 rabbits (one bird 2 birds and hyaluronan group control group) produced. これら3羽のウサギ全てにおいて滑液は培養陰性であった。 Synovial fluid in all 3 rabbits were negative culture.

膝関節の総合的形態学的評価 Overall morphological evaluation of the knee joint
膝関節の総合的形態学的評価としては、関節腫脹の評価、滑液滲出、脛骨プラトー及び大腿顆の巨視的関節軟骨形態、及び半月板の評価を行った。 The overall morphological evaluation of the knee joint, the evaluation of joint swelling, synovial effusion, macroscopic articular cartilage forms of the tibial plateau and femoral condyle, and the evaluation of the meniscus was performed.

次の評点方式を用いて関節腫脹を評価した。 It was to evaluate the joint swelling using the following grading system. グレード0−正常;グレード1(軽度の腫脹)−関節包の軽度の炎症及び/又は増殖;グレード2(中程度の腫脹)−関節包の肥厚及び/又は滑膜の炎症;グレード3(重篤な腫脹)−滑膜の十分な炎症、半月板や靭帯(前十字靭帯或いは後十字靭帯)の腫脹。 Grade 0-normal; Grade 1 (mild swelling) - mild inflammation and / or growth of the joint capsule; Grade 2 (moderate swelling) - inflammation of thickening and / or synovial joint capsule; Grade 3 (severe such swelling) - sufficient inflammation, swelling of the meniscus and ligaments (anterior cruciate ligament or posterior cruciate ligament) of the synovium.

次の評点方式を用いて滑液滲出を評価した。 It was evaluated synovial fluid exudation using the following grading system. グレード0−正常;グレード1(軽度の滲出)−正常の場合と比べて滲出は多いが、膝関節は滲出液で満たされない;グレード2(中程度の滲出)−膝関節が滲出液で満たされるが、関節包が開く際にそこから滲出液が吐出しない;グレード3(重篤な滲出)−滲出液によって膝関節が膨張し、関節包が開く際に滲出液が吐出する。 Grade 0-normal; Grade 1 (mild effusion) - but exudation often than in the case of a normal knee joint is not filled with exudate; Grade 2 (moderate effusion) - knee joint is filled with exudate but exudate therefrom when opening the joint capsule is not ejected; grade 3 (severe exudative) - knee expanded by exudate, exudate is discharged when opening the joint capsule.

関節軟骨の総合的形態学的評価 Overall morphological assessment of articular cartilage
3.5cm〜4cmの骨軸を残して大腿遠位と脛骨近位端を回収した。 To recover the distal femur and proximal tibia, leaving the bone axis of the 3.5cm~4cm. 各試料の関節軟骨表面を、インディアインク(エバーハードファーバー社(Eberhard Faber)、テネシー州ルイスバーグ)を1:5の比率でPBSに溶解した溶液で覆った。 The articular cartilage surface of each sample, India ink (Eberhard Faber Ltd. (Eberhard Faber), Lewisburg, TN) 1: covered with a ratio of 5 in solution in PBS. 過剰なインク溶液は、PBSで予め湿らせたティッシュで優しく吸い取ることによって除去した。 Excess ink solution was removed by blotting gently with a tissue prewetted with PBS. 次いで、全ての関節を撮影し、デジタル画像を解析した。 Then, taking all the joints were analyzed digital images.

次の評点方式を用いて関節軟骨を評価した。 It was to evaluate the articular cartilage using the following grading system. グレード1(無傷表面)−表面は外見は正常であり、インディアインクを保持していない;グレード2(微小な繊維化)−表面にインディアインクが保持され細長い染みや薄灰色の斑点のようになっている;グレード3(明白な繊維化)−外見がビロードのような部分が生じ、インディアインクを保持し濃い黒い斑点のようになっている;グレード4(浸食)−軟骨が損失し下層の骨が露出している。 Grade 1 (intact surface) - surface appearance is normal, do not hold the India ink; Grade 2 (fine fibrosis) - India ink is retained on the surface so that the elongated stains and light gray spots and has; grade 3 (pronounced fibrosis) - appearance occur portion velvety, so that the dark black spots holds India ink; grade 4 (erosion) - bone cartilage loss lower There has been exposed.

デジタル画像 Digital Imaging
大腿顆及び脛骨プラトーの関節面をティッシュで優しく吸い取って乾かし、解れたティッシュを取り除いた。 Blotted gently the femoral condyles and the tibial plateau of the articular surface with a tissue to remove tissue that was loosened. 各大腿骨軸を光学ベンチに固定した。 Each femur shaft were fixed to the optical bench. 約12cmの距離で100mmマクロレンズを搭載したCanon EOS D30デジタルカメラを用いて大腿顆の画像(解像度:60画素/mm、画面上倍率:20×)を得た。 About 12cm distance 100mm macro lens equipped with Canon EOS femoral condyle of the image using a D30 digital camera (resolution: 60 pixels / mm, screen magnification: 20 ×) was obtained. ミリメートルスケールを写真内に置き、画像を正確に評尺できるようにした。 Place the millimeter scale in the photograph, and so the image can Hyoshaku accurately. 次いで、拡大画像を大腿顆の3Dモデル上に投影した。 Then, the enlarged image was projected onto the 3D model of the femoral condyle. 病変の3D表面積は、該病変の縁をインタラクティブにプロットすることによって測定した。 3D surface area of ​​the lesion was measured by plotting the disease-varying edge interactively. 脛骨関節面のデジタル画像は上述のようにして得た。 Digital images of the tibial articular surface obtained as described above. 脛骨表面は比較的平坦で、2D測定値が3D測定値とは大幅に異ならないため、3D投影は用いなかった。 The tibial surface is relatively flat, since the 2D measurements do not differ significantly from 3D measurements, 3D projection was used.

膝関節の組織学的グレード分け Histological grading of the knee joint
ウサギ膝関節から得た大腿遠位と脛骨近位端を10%緩衝ホルマリンに固定し、TBD−2脱灰装置(decalcifier)(サーモシャンドン社、カリフォルニア州ピッツバーグ)にて脱灰し、パラフィンブロックに包埋した。 The distal femur and proximal tibia obtained from rabbits knee joints were fixed in 10% buffered formalin, TBD-2 demineralization device (decalcifier) ​​(Thermo Shandon, Inc., CA Pittsburgh) were decalcified by, in paraffin blocks and embedded. 大腿骨外側顆及び大腿骨内側顆の矢状断面と脛骨プラトーの冠状断面とを更なる組織学的解析に用いた。 The femoral lateral condyle and the medial femoral condyle and the sagittal section and the tibial plateau coronal sections were used for further histological analysis.

硫酸化グリコサミノグリカン(SGAG)含量の評価は、組織切片をサフラニンO/ファーストグリーンで染色した後に行った。 Evaluation of sulfated glycosaminoglycan (SGAG) content was carried out tissue sections after staining with Safranin O / Fast Green.

次の評点方式を用いてSGAG含量を評価した。 It was evaluated SGAG content using the following grading system. グレード1−サフラニンO染色損失が25%未満;グレード2−サフラニンO染色損失が25〜50%;グレード3−サフラニンO染色損失が50%超。 Grade 1 Safranin O staining loss less than 25%; grade 2 Safranin O staining losses 25-50%; grade 3 Safranin O staining loss than 50%.

次の評点方式を用いて軟骨の完全性(integrity)を評価した。 Using the following grading system was evaluated integrity of the cartilage (integrity). グレード1−無傷軟骨面;グレード2−繊維化の存在;グレード3−全層軟骨欠陥。 The presence of grade 2 fibrosis; Grade 1 intact cartilage surface grade 3 full thickness cartilage defect. 更に、全ての組織試料に対し、軟骨細胞増殖やクローニングの存在について解析を行った。 Furthermore, for all the tissue samples were analyzed for the presence of chondrocyte proliferation or cloning.

滑膜の組織学的評価は、滑膜増殖や滑膜血管新生の存在に基づいて行い、脛骨プラトー、大腿骨外側顆及び大腿骨内側顆に付着した滑膜については別に行った。 Histological evaluation of the synovial membrane, carried out based on the presence of synovial proliferation and synovial angiogenesis, were carried out separately for the tibial plateau, synovial membrane attached to the femoral condyle and medial femoral condyle.

骨髄の微視的評価は、表3に示すように、軟骨下骨髄過形成や血管形成増加の存在に基づいて行った。 Microscopic evaluation of bone marrow, as shown in Table 3 was based on the presence of subchondral bone marrow hyperplasia and angiogenesis increase.

滑膜組織中のDNA含量測定 DNA content measurement in synovial tissue
滑膜組織細胞性(cellularity)の評価は、組織DNA濃度の定量(Amiel et al., J Orthop Res 1986;4:162-172)によって行った。 Evaluation of synovial tissue cellularity (cellularity) is tissue DNA concentration of quantitation (Amiel et al, J Orthop Res 1986; 4:. 162-172) by Been. 即ち、洗浄し凍結乾燥した滑膜組織を1N NaOH中、65℃で2時間インキュベーションすることによって可溶化した。 Namely, synovial tissues 1N NaOH in a freeze-dried and washed, and solubilized by incubation for 2 hours at 65 ° C.. 同様に作成したアリコート(duplicate aliquots)を0.04%インドール−HCl試薬と反応させ、クロロホルムと混合して妨害物質を除去した。 Similarly created Aliquots (duplicate aliquots) was reacted with 0.04% indole -HCl reagent to remove interfering substances is mixed with chloroform. DNAを含む水相を回収し、吸光度を490nmで測定した。 The aqueous phase containing the DNA was collected, and the absorbance was measured at 490 nm. 仔ウシ胸腺DNAを標準品として用いた。 Calf thymus DNA was used as the standard. 結果は乾燥組織mg当りのmgDNAで表わした。 The results were expressed as mgDNA per dry tissue mg.

実験データの統計的解析はMicrosoft Excel Analysis ToolPakを用いて行った。 Statistical analysis of the experimental data was performed using Microsoft Excel Analysis ToolPak.

GlcNAcのアルゼットポンプ投与 GlcNAc of alzet pump administration
本実験においては、New Zealand Whiteウサギ(3.0〜3.5kg)を用いた。 In this experiment, using New Zealand White rabbits (3.0~3.5kg). このウサギを無作為に5群に割り当てた(各群8羽)。 The rabbits were randomly assigned into five groups (8 rabbits per group). 群Aは生理食塩水で処理し(陰性対照群)、群Bは1.5MのGlcNAcで処理し、群Cは0.5MのGlcNAcで処理し、群Dは0.15MのGlcNAcで処理し、群Eは0.05MのGlcNAcで処理した。 Group A was treated with saline (negative control group), the group B were treated with GlcNAc of 1.5M, Group C was treated with GlcNAc of 0.5M, the group D is treated with 0.15M of GlcNAc , group E were treated with GlcNAc of 0.05M. 化合物は全てアルゼットミニポンプによって関節へ連続的に送達した。 Compounds were delivered continuously into the joint by all Alzet mini pumps. このポンプの送達速度は2.5μL/時間であった。 Delivery rate of the pump was 2.5μL / time. 全てのウサギに対し右膝にACLT処置を施し、GlcNAcを右膝に送達した。 Subjected to ACLT treatment in the right knee for all of the rabbit, was delivered GlcNAc to the right knee.

右膝へのGlcNAc投与はACLT処置直後に開始して8週間、アルゼットポンプによって行った。 GlcNAc administration to a right knee eight weeks to start immediately after ACLT treatment, was carried out by Alzet pump. ポンプは4週目の最後に交換した。 Pump was replaced at the end of the fourth week. ポンプと送達チューブは週に2回チェックし、関節の所定の位置にあることを確認した。 Pump and delivery tube is checked twice a week, it was confirmed that in place of the joint. 実験の最後にデジタルカメラで写真を撮り、ポリエチレンチューブ(内径:0.58mm)がまだ関節内にあることを示した。 Finally taking pictures with a digital camera of the experiment, polyethylene tubing (inner diameter: 0.58 mm) showed that still lies within the joint.

両膝の総合的形態学的変化(関節腫脹や滑液等)について評価した。 They were evaluated for overall morphological changes of both knees (joint swelling and synovial fluid, etc.). 施術膝及び反対側対照膝の各々の大腿遠位と脛骨近位端を回収した。 It was collected practitioner knee and opposite each of the distal femur and proximal tibia of the control knee. 試料表面の病変の発生、部位及び重症度は、光学顕微鏡下で設定基準によって判断した。 Generation of lesions of the sample surface, site and severity were determined by setting the reference under the light microscope. また、インディアインクで染色した大腿顆及び脛骨プラトーもデジタルカメラで撮影した。 In addition, the femoral condyle and tibial plateau stained with India ink was also taken with a digital camera. デジタル画像上の染色病変の表面積については、画像解析ソフトウェアによって定量化し、各群間で比較した。 The surface area of ​​staining lesions on the digital image, and quantified by image analysis software, were compared between the groups.

GlcNAc筋肉内注射の有効性は両側ACLTを行った6羽のウサギにおいて評価し、同様に両側ACLTを行ったが生理食塩水のみを筋肉内注射した6羽のウサギと比較した。 Efficacy of GlcNAc intramuscular injection was evaluated in 6 rabbits were subjected to bilateral ACLT, was bilateral ACLT similarly has been compared with 6 rabbits were injected intramuscularly with saline only. 脛骨プラトー及び大腿顆の総合的形態学的解析からは、GlcNAc処理集団と対照集団との間で軟骨損傷の程度に統計的有意差は見られなかった。 From a comprehensive morphological analysis of the tibial plateau and femoral condyle, statistically significant difference to the degree of cartilage damage between the GlcNAc processing and control populations were observed. 図1a及び1bはこれらの群の総合的形態学的評価のプロットである。 Figure 1a and 1b are comprehensively morphological evaluation plots of these groups. 図1aは大腿顆の評価を示し、図1bは脛骨プラトーの評価を示す。 Figure 1a shows the evaluation of the femoral condyle, Figure 1b shows the evaluation of the tibial plateau.

一方、GlcNAcの関節内注射によって、脛骨プラトー及び大腿顆の障害が改善することが分かる。 On the other hand, the intra-articular injection of GlcNAc, it can be seen that to improve the fault of the tibial plateau and femoral condyle. 両側ACLTを行ったウサギに対し、GlcNAcの関節内注射(処理群、n=7)或いは生理食塩水の関節内注射(対照群、n=7)を週に2回、計7週間行った。 To rabbits subjected to bilateral ACLT, intraarticular injection (treatment group, n = 7) of GlcNAc or intraarticular injection (control group, n = 7) of saline twice a week, it was carried out a total of 7 weeks. 図2に示すように、大腿顆の総合的形態学的解析から、対照群に比べて処理群では軟骨障害の改善(病変の改善)への傾向が見られた。 As shown in FIG. 2, from a comprehensive morphological analysis of the femoral condyles, the treated group compared to the control group tended to improve the cartilage disorder (improvement of the lesion). 更に、図3に示すように、脛骨プラトーの形態学的解析から、GlcNAcの顕著な軟骨保護活性(chondroprotective activity)が分かった。 Furthermore, as shown in FIG. 3, the tibial plateau morphological analysis, it was found significant cartilage protective activity of GlcNAc (chondroprotective activity). 即ち、対照群のウサギ7羽の内の6羽に軟骨病変が発症したのに対し、処理群のウサギ7羽の内、軟骨病変を発症したウサギは1羽のみであった(p<0.003)。 That is, whereas cartilage lesions developed in 6 birds of the control group of rabbits 7 birds, of rabbits 7 birds treatment groups, rabbits developed cartilage lesions was only one bird (p <0. 003). 図4及び5は、GlcNAcの関節内投与が、関節腫脹、滑液滲出及び滑膜組織中のDNA含量に対して有意に影響を及ぼさないことを示す。 4 and 5 show that intra-articular administration of GlcNAc does not significantly affect relative DNA content of joint swelling, synovial effusions and synovial tissues.

このように、GlcNAc筋肉内注射の場合、軟骨保護作用は示されないものの、滑膜炎抑制の傾向が見られる。 Thus, in the case of GlcNAc intramuscular injection, although the cartilage protective effect is not shown, the tendency of synovitis suppression is observed. 一方、GlcNAc関節内投与の場合、巨視的レベル及び微視的レベルで有意な軟骨退化の抑制が見られる。 On the other hand, in the case of GlcNAc intraarticular administration, macroscopic level and the microscopic level in the suppression of significant cartilage degeneration is observed.

次いで、GlcNAc関節内投与とヒアルロナン関節内投与との比較実験を行った。 It was then carried out comparative experiments of administration and hyaluronan intraarticular the GlcNAc joint. 上述のように、ヒアルロナン製剤は、膝骨関節炎の治療用粘性補充剤(viscosupplementation)として一般に用いられている。 As described above, hyaluronan preparations are therapeutic viscosupplement knee osteoarthritis as (viscosupplementation) is generally used. 本実験において、大腿顆の総合的形態学的解析からは、GlcNAc群とヒアルロナン群(n=7)との間に有意差は見られない(図2)。 In this experiment, the comprehensive morphological analysis of the femoral condyles, not observed significant differences between the GlcNAc groups and hyaluronan group (n = 7) (Figure 2). しかし、図3から分かるように、GlcNAcは、ヒアルロナンに比べて有意に高い(p<0.01)軟骨保護活性を示す。 However, as can be seen from FIG. 3, GlcNAc shows a significantly higher compared to hyaluronan (p <0.01) chondroprotective activity. また、軟骨病変の表面積については、ヒアルロナン群に比べてGlcNAc群では大幅に減少する(図6a及び6b)。 Also, the surface area of ​​cartilage lesions, greatly reduced the GlcNAc group compared to the hyaluronan group (FIG. 6a and 6b). GlcNAc群とヒアルロナン群との間で滑液滲出については有意差がない(図4)。 No significant difference for the synovial fluid exudation between GlcNAc group and hyaluronan group (Figure 4). しかし、DNA含量評価から、ヒアルロナン群に比べてGlcNAc群では滑膜過形成及び細胞性が有意に抑制(p<0.05)されていることが分かる(図5)。 However, the DNA content evaluation, it can be seen that synovial hyperplasia and cellular is significantly suppressed (p <0.05) in the GlcNAc group compared to the hyaluronan group (Fig. 5).

GlcNAc処理或いは生理食塩水投与した実験用ウサギの組織学的解析を行い、各集団から得た結果を比較した。 Performed Histological analysis of experimental rabbits administered GlcNAc processing or saline to compare the results obtained from each group. 下の表1から分かるように、GlcNAc処理集団及び対照集団のいずれにおいても大腿骨内側顆で同様のSGAG損失が見られる。 As can be seen from Table 1 below, similar SGAG loss medial femoral condyle in any of the GlcNAc processing population and the control population are seen. しかし、脛骨プラトーにおけるSGAGの解析及び比較から、GlcNAc群では改善への傾向が見られ、更にGlcNAc群においては、大腿骨外側顆でSGAG損失が有意に抑制されているのが分かる。 However, from the analysis and comparison of SGAG in the tibial plateau, it tended to improve the GlcNAc group, in yet GlcNAc group, it can be seen that SGAG loss femoral condyle is significantly suppressed. また、これらの群について軟骨完全性(cartilage integrity)を検討した結果、対照群に比べてGlcNAc群では脛骨プラトー及び大腿骨外側顆に対して有意な軟骨保護活性が見られる。 Moreover, results of investigation cartilage integrity of (cartilage integrity) for these groups are found significant cartilage protective activity against the tibial plateau and femoral condyle in GlcNAc group compared to the control group.

滑膜炎の組織学的評価から、GlcNAcが滑膜増殖を抑制することが分かる(表2)。 Histological evaluation of synovial inflammation, it can be seen that GlcNAc to inhibit synovial proliferation (Table 2). 滑膜血管新生に対するGlcNAcの作用は部位によって異なるが、大腿骨内側顆近傍でGlcNAcによる有意な改善が示される(表2)。 Effect of GlcNAc on synovial angiogenesis varies by site but significant improvement with GlcNAc in the medial femoral 顆近 near are shown (Table 2). 軟骨下骨髄の検査から、GlcNAc処理によって、軟骨下骨浮腫を引き起こす毛細血管拡張(capillary dilution)や過形成が抑制されることが分かる(表3)。 From examination of the subchondral bone marrow, by GlcNAc process, it can be seen that telangiectasia causing subchondral bone edema (capillary dilution) or hyperplasia is inhibited (Table 3).

以上まとめると、軟骨、滑膜及び軟骨下骨髄/浮腫の組織学的解析から、関節内投与したGlcNAcの軟骨保護作用及び抗炎症作用が示される。 In summary, cartilage, histological analysis of the synovial membrane and the subchondral bone marrow / edema, chondroprotective and anti-inflammatory action of GlcNAc administered intraarticular is shown.

これらの結果から、GlcNAcの関節内投与によって、巨視的及び微視的基準によって測定される軟骨退化が有意に且つ予想外に抑制されたことが分かる。 These results by intra-articular administration of GlcNAc, it can be seen that cartilage degradation, as measured by macroscopic and microscopic criteria are significantly and unexpectedly suppressed. また、最大の軟骨保護活性が脛骨プラトーで見られ、そして大腿骨外側顆、大腿骨内側顆と続いたが、この結果から、軟骨破壊の重症度が低い関節部位ほどGlcNAcの治療作用に対する感受性が高いことが強く示された。 The maximum of the chondroprotective activity was observed in tibial plateau and femoral condyle, lasted the medial femoral condyle, this results sensitive to treatment effects GlcNAc lower the severity articular site of cartilage destruction high it was strongly indicated. 最後に、関節内GlcNAc投与によって、滑膜炎の重症度が予想外に低下し、軟骨下骨髄の過形成も改善された。 Finally, by intraarticular GlcNAc administration, the severity of synovitis is decreased unexpectedly, hyperplasia of subchondral bone marrow was also improved. 更に、GlcNAcの関節への送達は、上述の持続放出法及びアルゼットポンプ法によって求められるように、単回投与(関節内)後3週間を超えて連続的に行うことができる。 Additionally, delivery to the GlcNAc joints, as determined by sustained release methods and Alzet pump method described above, it is carried out continuously beyond 3 weeks after a single dose (in the joints).

GlcNAcの関節内投与の際、最大の軟骨保護活性が脛骨プラトーで見られ、そして大腿骨外側顆、大腿骨内側顆と続いたが、この結果から、変性が最小限に近い関節部位の方が、軟骨損傷の重症度が高い部位よりもGlcNAc投与に反応することが分かった。 During intra-articular administration of GlcNAc, maximum chondroprotective activity was observed in tibial plateau and femoral condyle, lasted the medial femoral condyle, this results found the degeneration of the joint portion close to the minimum , than sites severity is high cartilage damage was found to react to the GlcNAc administration. 一方、実験的OAのウサギにGlcNAcを筋肉内投与した場合、軟骨保護効果は示されなかったが、滑膜炎の有意な抑制(即ち、抗炎症活性)が示された。 On the other hand, when administered intramuscularly GlcNAc rabbit experimental OA, but chondroprotective effect was shown, significant inhibition of synovitis (i.e., anti-inflammatory activity) was demonstrated. GlcNAcの関節内投与は、筋肉内投与に比べて遥かに効力が高かった。 Intra-articular administration of GlcNAc are potent higher much compared to intramuscular administration. 関節内GlcNAc投与によって処理したウサギの場合、巨視的レベル及び微視的レベルのいずれにおいても軟骨変性の有意な遅延が示された。 When rabbits were treated by intra-articular GlcNAc administration, a significant delay in cartilage degeneration in any of the macroscopic level and the microscopic level is illustrated. 最後に、関節内GlcNAc投与はその軟骨保護効果に関して、ヒアルロナンを用いた粘性補充療法(visco-supplementation therapy)よりも優れている。 Finally, intra-articular GlcNAc administration for its chondroprotective effect, is superior viscosupplementation therapy with hyaluronan (visco-supplementation therapy).

要約すると、実験的OAウサギのGlcNAcによる関節内療法によって、軟骨退化が予想外に抑制されると共に、ウサギの病変サイズが巨視的に減少し、滑膜炎が有意に抑制され、軟骨下骨浮腫の骨髄過形成が抑制された。 In summary, by intraarticular therapy with GlcNAc of experimental OA rabbits, the cartilage degradation is unexpectedly suppressed, lesion size rabbit decreases macroscopically synovitis was significantly suppressed, subchondral bone edema Bone marrow hyperplasia was inhibited in.

医薬製剤及び投与 Pharmaceutical formulation and administration
有効成分としてのアミノ糖(最も好ましくはGlcNAc)は、一旦単離すれば、薬学的に許容し得る製剤、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences、第18版、Mack Publishing社、ペンシルバニア州イーストン(1990)(本明細書の一部を構成するものとしてここに援用する)に記載の製剤に配合することができ、健常組織に殆ど或いは全く影響を及ぼさなければ、疾患や障害の特定の治療に用いることができる。 Amino sugars as active ingredient (most preferably GlcNAc) is be isolated once, pharmaceutically acceptable formulation, e.g., Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990) (the specification of which is incorporated herein as constituting a part) to be formulated in the formulations described, as long as it does not affect little or no healthy tissue, it can be used for specific treatment of diseases and disorders . 溶解或いは分散された有効成分を含む薬理組成物の調製は、処方に基づいて限定する必要はない。 Preparation of pharmaceutical compositions comprising a dissolved or dispersed active ingredient need not be limited based on formulation. このような組成物は注射用溶液或いは懸濁液として調製することができる。 Such compositions may be prepared as injectable solutions or suspensions. しかし、使用前に液体へ溶解或いは再懸濁させるのに適した固状体を調製することもできる。 However, it is also possible to prepare a solid body suitable for dissolution or resuspension before use to liquid. 調製物を乳化させることもできる。 It can also be emulsified preparation.

好ましい実施形態においては、該組成物が本明細書に記載の疾患や障害を治療する上で米国食品医薬品局(FDA)によって承認されていることを示すラベル(或いは他国における同等なラベル)を付した容器内に該組成物を収容する。 In a preferred embodiment, with a label (or equivalent labels in other countries), which indicates that the composition is approved by the US Food and Drug Administration in treating diseases and disorders described herein (FDA) housing the composition into the container. このような容器によって、ホストへ投与される治療有効量の有効成分が提供される。 Such containers, the active ingredient a therapeutically effective amount administered to the host is provided.

対象障害に影響を及ぼす特定のアミノ糖は、哺乳動物に対して単独で、或いは該アミノ糖を適切な担体や賦形剤と混合した医薬組成物として投与することができる。 Specific amino sugar affecting target disorder can be administered as alone to the mammal, or a pharmaceutical composition prepared by mixing the amino sugar with a suitable carrier or excipient. 対象障害を示す哺乳動物の治療に当っては、治療有効量の剤(例えば、GlcNAc)を投与する。 It is hitting the treatment of mammals representing the target disorder, administering a therapeutically effective amount of an agent (e.g., GlcNAc) a. 有効成分は、薬学的に許容し得るものであって該有効成分に適合し得る賦形剤に、本明細書に記載の治療方法に用いるのに適した量を混合することができる。 The active ingredient can be mixed with an amount suitable for use in excipients which may be adapted for the active ingredient be one pharmaceutically acceptable, the therapeutic methods described herein.

薬学的に許容し得る塩は標準的な技法によって調製することができる。 Pharmaceutically acceptable salts can be prepared by standard techniques. 例えば、先ず、遊離塩基型の化合物を、適切な酸を含む適切な溶媒(例えば、水溶液或いは水−アルコール溶液)に溶解する。 For example, first, the free base form of the compound, suitable solvents containing the appropriate acid (e.g., aqueous or water - alcohol solution) is dissolved in. 次いで、該溶液を蒸発させることによって塩を単離する。 Then isolated salt by evaporating the solution. 他の例においては、有機溶媒中で遊離塩基と酸とを反応させることによって塩を調製する。 In other examples, preparing the salts by reacting the free base and acid in an organic solvent.

担体や賦形剤を用いて化合物の投与を容易にする(例えば、該化合物の溶解性を上げる)ことができる。 To facilitate administration of a compound with the carriers and excipients (e.g., increase the solubility of the compound) can be. 担体や賦形剤の例としては、炭酸カルシウムやリン酸カルシウム、各種糖やデンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油、ポリエチレングリコール、水、生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノール、生理適合性溶媒が挙げられる。 Examples of carriers and excipients include calcium and phosphate carbonate, various sugars and starch, cellulose derivatives, gelatin, vegetable oils, polyethylene glycol, water, saline, dextrose, glycerol, ethanol, physiologically compatible solvents.

本発明の組成物には有効成分の薬学的に許容し得る塩を含めることができる。 The composition of the present invention can include pharmaceutically acceptable salts of the active ingredient. 薬学的に許容し得る塩としては、アミノ糖の遊離アミノ基と、無機酸(例えば、塩酸やリン酸、硫酸等)或いは有機酸(酢酸や酒石酸、マンデル酸等)とから形成された酸付加塩が挙げられる。 The pharmaceutically acceptable salts, the free amino group of the amino sugar, an inorganic acid (e.g., hydrochloric acid or phosphoric acid, sulfuric acid, etc.) or organic acid (acetic acid or tartaric acid, mandelic acid, etc.) acid formed from the additional salt and the like. また、アミノ糖の遊離カルボキシル基と、無機塩基(例えば、水酸化ナトリウムや水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、水酸化第二鉄等)或いは有機塩基(例えば、イソプロピルアミンやトリメチルアミン、2−アミノエタノール、ヒスチジン、プロカイン等)とから塩を形成することもできる。 Further, the free carboxyl group of the amino sugar, an inorganic base (e.g., sodium hydroxide, potassium hydroxide, ammonium hydroxide, calcium hydroxide, ferric hydroxide) or organic bases (e.g., isopropylamine or trimethylamine, 2 - it aminoethanol, histidine, to form a salt from the procaine and the like).

このような化合物の毒性及び治療有効性は、細胞培養や実験動物における標準的な薬学的手順によって求めることができ、例えば、LD50(集団の50%が死に至る量)及びED50(集団の50%に治療有効な量)を求めることができる。 Toxicity and therapeutic efficacy of such compounds can be determined by standard pharmaceutical procedures in cell cultures or experimental animals, e.g., LD50 (the amount lethal to 50% of the population) and ED50 (50% of the population it can be obtained a therapeutically effective amount) to. 毒性作用と治療作用との用量比が治療係数であり、LD50/ED50で表わされる。 The dose ratio between toxic and therapeutic effects is the therapeutic index, expressed in LD50 / ED50. 治療係数の大きい化合物が好ましい。 Big compounds of therapeutic indices are preferred. このような細胞培養アッセイや動物実験から得たデータを用いて、ヒトに用いる用量範囲を設定することができる。 The data obtained from such cell culture assays and animal studies can be set a dosage range for use in humans. このような化合物の用量は、毒性が殆ど或いは全くなければ、ED50を含む血中濃度範囲内にあるのが好ましい。 The dosage of such compounds, if little or no no toxicity, preferably within a range of circulating concentrations that include the ED50. 化合物の用量は、用いる剤形や投与経路に応じてこの範囲内で変わり得る。 Dose of the compound may vary within this range depending upon the dosage form and administration route used.

本発明の方法に用いるいずれのアミノ糖化合物の場合でも、治療有効量は先ず細胞培養アッセイによって推定することができる。 In either case the amino sugar compound used in the methods of the invention, the therapeutically effective dose can be estimated initially from cell culture assays. 例えば、細胞培養で求められるIC50(即ち、タンパク質複合体の最大半量崩壊(half-maximal disruption)或いは複合体成分の細胞レベル及び/又は活性の最大半量阻害(half-maximal inhibition)を達成する試験化合物の濃度)を含む循環血漿濃度範囲を達成するように、動物モデルにて用量を設定することができる。 For example, IC50 determined in cell culture (i.e., half-maximal disruption of the protein complex (half-maximal disruption) or half-maximal inhibition (half-maximal inhibition) test compound which achieves a cellular level and / or activity of the complex components to achieve a circulating plasma concentration range that includes the concentration), it is possible to set a dose in the animal model. このような情報を用いて、ヒトにおける有用な用量をより正確に決定することができる。 Using such information, it is possible to more accurately determine useful doses in humans. 血漿中濃度は、例えばHPLCによって測定することができる。 Levels in plasma can be measured, for example, by HPLC.

本発明の他の好ましい実施形態は、有効成分であるGlcNAcの改良製剤に関する。 Another preferred embodiment of the present invention relates to an improved formulation of an active ingredient GlcNAc. GlcNAcをリポソームや他の取込剤にカプセル化或いは取込むことによって、その関節内注射時の薬力学的プロファイルが変わる。 By GlcNAc to capture encapsulated or in liposomes or other capture agent, it changes the pharmacodynamic profile at the time of intra-articular injection. 好ましくは、GlcNAcをマトリックス内に取込む。 Preferably, Tokomu the GlcNAc in the matrix. より好ましくは、粒子、インプラント及びゲルから成る群から選択されるマトリックス内にGlcNAcを取込む。 More preferably, capture the GlcNAc in a matrix selected from the group consisting of particles, implants, and gels.

的確な製剤や投与経路、用量は、哺乳動物の障害を考慮して個々の医師によって選択することができる(例えば、Fingl et al., The Pharmacological Basis of Therapeutics, 1975, Ch.1, p.1参照)。 The exact formulation and route of administration, dosage, taking into account the disorder in a mammal can be chosen by the individual physician (e.g., Fingl et al., The Pharmacological Basis of Therapeutics, 1975, Ch.1, p.1 reference). 当然のことながら、主治医であれば、毒性や臓器機能不全のために投与を終了、中断或いは調整する方法やその時期を知っているであろう。 Of course, if the attending physician, ends the administration due to toxicity or organ dysfunction, you would know how and its timing to interrupt or adjust. 逆に、主治医であれば、臨床反応が十分でない場合(毒性は除外する)、処置のレベルをより高く調整することも知っているであろう。 Conversely, if the attending physician, if the clinical response is not adequate (toxicity excluded), would also know to higher adjust the level of treatment. 対象障害の処置における投与量の大小は、治療対象障害の重症度や投与経路によって変わる。 Dose of magnitude in the treatment of a subject failure, the severity and the route of administration of the treated disorder. 障害の重症度は、例えば、標準的な予後評価方法によって一部評価することができる。 The severity of the disorder, for example, can be evaluated in part, by standard prognostic evaluation methods. また、用量、そして恐らく投与頻度は、個々の哺乳動物の齢や体重、反応に応じても変わる。 Further, the dose and perhaps dose frequency, may age and weight of the individual mammal, also changes depending on the reaction. 上述のプログラムに匹敵するものを獣医学に用いることができる。 The comparable to the program described above can be used in veterinary medicine.

治療する特定の障害に応じて、上述の剤を処方し、全身的に或いは局所的に投与することができる。 Depending on the particular disorder being treated, and the formulation of the above agents may be administered systemically or topically. 処方や投与の技法については、Remington's Pharmaceutical Sciences、第18版、Mack Publishing社、ペンシルバニア州イーストン(1990)に見出すことができるが、この文献を本明細書の一部を構成するものとしてここに援用する。 The techniques of the formulation and administration, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing Company, can be found in Easton, PA (1990), incorporated the document here as constituting a part hereof to.

注射の場合、本発明の剤を水溶液、好ましくは、生理適合性バッファー(例えば、ハンクス液やリンガー液、生理食塩水バッファー)に処方することができる。 For injection, an aqueous solution of the agent of the present invention, preferably, can be formulated in physiologically compatible buffers (e.g., Hanks' solution and Ringer's solution, physiological saline buffer).

薬学的に許容し得る担体を用いて、本発明の実施のために本明細書に開示された化合物を全身投与に適した剤形に調製することは、本発明の範囲内である。 With a pharmaceutically acceptable carrier, it is prepared in a form suitable the compounds disclosed herein for systemic administration for the practice of the invention are within the scope of the present invention. 担体を適切に選択し、適切に製造を行うことによって、本発明の組成物、特に溶液として処方される組成物を非経口投与、例えば、静脈内注射することができる。 Carrier appropriately select, by performing proper preparation, the compositions of the present invention, a composition that is specifically formulated as solutions for parenteral administration, for example, can be injected intravenously.

本発明に用いるのに適した医薬組成物としては、有効成分をその所期の目的を達成する有効量含んでいる組成物が挙げられる。 Pharmaceutical compositions suitable for use in the present invention, compositions comprising an effective amount to achieve its intended purpose the active ingredients. 有効量については、特に本明細書における詳細な開示を考慮すれば、当業者の能力の範囲内で十分、決定することができる。 The effective amount, particularly if light of the detailed disclosure herein, may be sufficient, determining within the capability of those skilled in the art. このような医薬組成物には、有効成分に加えて、活性化合物の薬学的に用い得る製剤への加工を容易にする補助剤や賦形剤を含む、適切な薬学的に許容し得る担体を含有させることができる。 Such pharmaceutical compositions contain, in addition to the active ingredient, including adjuvants and excipients that facilitate processing of the pharmaceutically used formulation of the active compound, suitable pharmaceutically acceptable carrier it can be contained. 本発明の医薬組成物は、自体公知の方法、例えば、従来の混合プロセスや溶解プロセス、造粒プロセス、糖衣錠製造プロセス、浮揚(levitating)プロセス、乳化プロセス、カプセル化プロセス、取込プロセス、凍結乾燥プロセスによって製造することができる。 The pharmaceutical compositions of the present invention, a method known per se, for example, conventional mixing process or dissolution process, granulation process, dragee-making process, flotation (levitating) process, an emulsion process, the encapsulation process, taking process, freeze-dried it can be prepared by the process.

非経口投与用医薬製剤としては、水溶性活性化合物の水溶液が挙げられる。 The Pharmaceutical formulations for parenteral administration include aqueous solutions of water-soluble active compounds. また、活性化合物の懸濁液は、適切な油性注射懸濁液として調製することができる。 Additionally, suspensions of the active compounds may be prepared as appropriate oily injection suspensions. 適切な親油性溶媒或いはビヒクルとしては、ゴマ油等の脂肪油や、オレイン酸エチルやトリグリセリド等の合成脂肪酸エステル、リポソームが挙げられる。 Suitable lipophilic solvents or vehicles include fatty oils or sesame oil, or synthetic fatty acid esters such as ethyl oleate or triglycerides, liposomes. 水性注射懸濁液には、懸濁液の粘度を上げる物質、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウムやソルビトール、デキストランを含有させることができる。 Aqueous injection suspensions, substances which increase the viscosity of the suspension, for example, may contain sodium carboxymethyl cellulose and sorbitol, dextran. 必要に応じて、該懸濁液に適切な安定剤や化合物の溶解度を上げる剤を含有させて、高濃度溶液を調製することもできる。 If necessary, contain a material increase the solubility of suitable stabilizers or compounds to the suspension, it is also possible to prepare highly concentrated solutions.

糖衣錠のコアには、適切なコーティングを設ける。 Dragee cores are provided with suitable coatings. この目的のために、濃縮糖溶液を用いることができ、必要に応じて、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールジェル、ポリエチレングリコール、及び/又は二酸化チタン、ラッカー溶液、及び適切な有機溶媒或いは溶媒混合物を含有させることができる。 For this purpose, concentrated sugar solutions may be used, if necessary, gum arabic, talc, polyvinylpyrrolidone, carbopol gel, polyethylene glycol and / or titanium dioxide, lacquer solutions, and suitable organic solvents or It may contain a solvent mixture. 染料や顔料を錠剤や糖衣錠コーティングに添加して、識別できるようにしたり、活性化合物投与の様々な組合せに対する性格付けを行うことができる。 A dye or pigment added to the tablets or dragee coatings, or to be identified, it is possible to perform the characterization for different combinations of active compound administered.

本明細書で説明的に記載した本発明は、本明細書で具体的に開示されていない要素や限定の非存在下で適切に実施することができる。 The present invention has been described illustratively herein, it can be suitably carried out in the absence of the specifically disclosed have not elements or limited herein. 例えば、「comprising」や「including」、「containing」等の用語は、限定せずに広く解釈されるものとする。 For example, "comprising" and "including", terms such as "containing" are to be broadly construed without limitation. また、本明細書に記載の用語や表現は、限定するための用語ではなく説明のための用語として用いたものであり、このような用語や表現を用いるに当り、記載された特徴のいずれの等価物やそのいずれの部分をも除外するつもりはなく、また、請求する本発明の範囲内で様々な変更が可能であることは理解されるであろう。 Further, the terms and expressions as described herein are those used as terms of description and not terms of limitation, it strikes the use of such terms and expressions, the described features either not intended to exclude even equivalents or any part thereof, Further, it can be modified in various ways within the scope of the invention claimed will be appreciated. よって、当然のことながら、本発明を好ましい実施形態及び任意的特徴によって具体的に開示してきたが、本明細書に開示した本発明の変更や変形は当業者によって再分類(resorted)することができ、このような変更や変形は本明細書に開示した本発明の範囲内にあるものと考えられる。 Therefore, of course, be has been specifically disclosed by preferred embodiments and optional features of the present invention, modifications and variations of the present invention disclosed herein to be reclassified (resorted) by those skilled in the art can, such modifications and variations are considered to be within the scope of the invention disclosed herein. 本明細書においては、本発明を広く包括的に説明してきた。 In the present specification, the invention has been described broadly generically. この包括的な開示の範囲内にある下位概念種の各々も本発明の一部を形成する。 Each subordinate concept species within the scope of this generic disclosure also form part of the present invention. これには、この属から何らかの内容を取り除くという条件や否定的限定の下、各発明の包括的な説明が含まれるが、割愛された内容が具体的にそこに存在したかどうかについては関係ない。 This includes under conditions and negative limitation that removing some content from this genus, including but comprehensive description of the invention, what is omitted is not related to whether there therein specifically . 更に、発明の特徴や様相がマーカッシュ群の形式によって記載されている場合、当業者であれば、この発明がマーカッシュ群の個々の要素或いはその複数の要素から成るサブグループによっても記載されていることが理解できるであろう。 In addition, where features or aspects of the invention are described by the format of the Markush groups, those skilled in the art, it is also described by a sub-group the invention consisting of individual elements or a plurality of elements that the Markush group There will be appreciated.

上述の説明が説明的なものであり限定的なものではないことは理解されるであろう。 It foregoing description is not a description ones in and restrictive will be appreciated. 上述の説明を再検討すれば、多くの実施形態が当業者にとって明らかになるであろう。 If upon reviewing the above description, it would be more embodiments will become apparent to those skilled in the art. 従って、本発明の範囲は上述の説明によって決定されるべきではなく、その代わり、添付クレームとそのクレームに基づく等価物の全範囲とによって決定されるべきである。 Accordingly, the scope of the present invention should not be determined by the above description, but instead should be determined by the full scope of equivalents based on the appended claims and the claim. 全ての論文や参考文献(特許公報を含む)の開示内容を本明細書の一部を構成するものとしてここに援用する。 The disclosures of all articles and references (including patent publications) are incorporated herein as constituting a part of this specification.

図1Aは、両側前十字靭帯切断(ACLT)を施し、GlcNAc或いは通常の生理食塩水の筋肉内注射によって処理したウサギにおける大腿顆の総合的形態学的グレード分けを示す。 Figure 1A is on both sides before subjected to cruciate ligament cutting (ACLT), showing the overall morphological grading of femoral condyles in rabbits treated by intramuscular injection of GlcNAc or normal saline. 図1Bは、両側前十字靭帯(ACL)切断を施し、GlcNAc或いは通常の生理食塩水の筋肉内注射によって処理したウサギにおける脛骨プラトーの総合的形態学的グレード分けを示す。 Figure 1B sides before subjected to cruciate ligament (ACL) cut, showing an overall morphological grading of tibial plateau in rabbits treated by intramuscular injection of GlcNAc or normal saline. 図2は、片側ACL切断を施し、GlcNAc、ヒアルロン酸ナトリウム或いは生理食塩水の関節内注射によって処理したウサギにおける大腿顆の総合的形態学的グレード分けを示す。 Figure 2 illustrates subjected to unilateral ACL cutting, GlcNAc, a comprehensive morphological grading of femoral condyles in rabbits treated by intraarticular injection of sodium hyaluronate or saline. 図3は、片側ACL切断を施し、GlcNAc、ヒアルロン酸ナトリウム或いは生理食塩水の関節内注射によって処理したウサギにおける脛骨プラトーの総合的形態学的グレード分けを示す。 Figure 3 illustrates subjected to unilateral ACL cutting, GlcNAc, a comprehensive morphological grading of tibial plateau in rabbits treated by intraarticular injection of sodium hyaluronate or saline. 図4は、片側ACL切断を施し、GlcNAc、ヒアルロン酸ナトリウム或いは生理食塩水の関節内注射によって処理したウサギにおける関節腫脹の総合的形態学的評価を示す。 Figure 4 illustrates subjected to unilateral ACL cutting, GlcNAc, a comprehensive morphological assessment of joint swelling in rabbits treated by intraarticular injection of sodium hyaluronate or saline. 図5は、片側ACL切断を施し、GlcNAc、ヒアルロン酸ナトリウム或いは生理食塩水の関節内注射によって処理したウサギから得た滑膜組織中のDNA含量を示す。 Figure 5 illustrates subjected to unilateral ACL cutting, GlcNAc, the DNA content in synovial tissue obtained from rabbits treated by intraarticular injection of sodium hyaluronate or saline. 図6Aは、片側ACL切断を施し、GlcNAc或いはヒアルロン酸ナトリウムの関節内注射によって処理したウサギから得た大腿顆における病変サイズのデジタル画像解析を示す。 6A is subjected to unilateral ACL cutting, shows a digital image analysis of lesion size in the femoral condyle was obtained from rabbits treated by intraarticular injection of GlcNAc or sodium hyaluronate. 図6Bは、片側ACL切断を施し、GlcNAc或いはヒアルロン酸ナトリウムの関節内注射によって処理したウサギから得た脛骨プラトーにおける病変サイズのデジタル画像解析を示す。 6B is subjected to unilateral ACL cutting, it shows a digital image analysis of lesion size in tibial plateau obtained from rabbits treated by intraarticular injection of GlcNAc or sodium hyaluronate. 図7は、本発明の一実施形態に係る注射用ポリマー製剤に取込まれたGlcNAcの時間依存in vitro放出を示す。 Figure 7 shows a time-dependent in vitro release of the incorporated injectable polymeric formulation according to an embodiment of the present invention GlcNAc.

Claims (33)

  1. 哺乳動物の疾病を治療する方法であって、前記疾病は、滑膜炎、軟骨下骨浮腫及び軟骨退化から成る群から選択され、前記治療は前記哺乳動物にアミノ糖の治療有効量を投与することを含む方法。 A method of treating a disease in a mammal, said disease, synovitis, selected from the group consisting of subchondral bone edema and cartilage degeneration, the treatment is administered a therapeutically effective amount of amino sugars to said mammal the method comprising.
  2. 前記アミノ糖は、N−アセチルグルコサミン、グルコサミン、ガラクトサミン、N−アセチルガラクトサミン、イミノシクリトール、及びその薬学的に許容し得る塩から成る群から選択される、請求項1に記載の方法。 The amino sugar is, N- acetylglucosamine, glucosamine, galactosamine, N- acetyl galactosamine, is selected from the iminocyclitol, and the group consisting of pharmaceutically acceptable salts A method according to claim 1.
  3. 前記アミノ糖はマトリックス内に取込まれている、請求項1に記載の方法。 The amino sugar is incorporated in the matrix, The method according to claim 1.
  4. 前記マトリックスは、粒子、インプラント及びゲルから成る群から選択される、請求項3に記載の方法。 It said matrix is ​​selected from the group consisting of particles, implants and gels, the method of claim 3.
  5. 前記粒子はリポソーム、ナノスフェア、マイクロスフェア又は懸濁物(suspension)である、請求項4に記載の方法。 The particles are liposomes, nanospheres, microspheres or suspension (suspension), The method of claim 4.
  6. 前記インプラントはポリマー、ポンプ又はデバイスである、請求項4に記載の方法。 The implant polymers, a pump or device, The method of claim 4.
  7. 前記ゲルはin situインプラント形成ゲル、半固体ゲル、ハイドロゲル又は感熱性ゲルである、請求項4に記載の方法。 The gel is in situ implant formation gel, semi-solid gels, hydrogels or thermosensitive gel process according to claim 4.
  8. マトリックスに取込まれたアミノ糖を含む、関節障害に関連する疾病の関節内治療のための注射用製剤であって、前記マトリックスは粒子、インプラント又はゲルである注射用製剤。 Including Tokoma amino sugar matrix, a injectable formulation for intra-articular treatment of diseases associated with rheumatoid disorders, injectable formulations the matrix is ​​particles, implants or gels.
  9. 放出制御製剤としてのN−アセチルグルコサミンの治療有効量を投与することを含む、関節障害に関連する疾病を治療する方法。 Comprising administering a therapeutically effective amount of N- acetylglucosamine as a controlled release formulation, methods of treating diseases associated with joint disorders.
  10. N−アセチルグルコサミンを筋肉内注射又は関節内注射によって投与する、請求項9に記載の方法。 The N- acetylglucosamine is administered by intramuscular injection or intraarticular injection method according to claim 9.
  11. N−アセチルグルコサミンを皮下注射又は注入によって投与する、請求項9に記載の方法。 The N- acetylglucosamine is administered by subcutaneous injection or infusion, The method of claim 9.
  12. 関節障害に関連する疾病は、滑膜炎、軟骨下骨浮腫及び軟骨退化から成る群から選択される、請求項9に記載の方法。 Diseases associated with rheumatoid disorders, synovitis, is selected from the group consisting of subchondral bone edema and cartilage degradation The method of claim 9.
  13. 前記疾病は滑膜炎である、請求項12に記載の方法。 The disease is a synovitis The method of claim 12.
  14. 前記疾病は軟骨下骨浮腫である、請求項12に記載の方法。 The disease is subchondral bone edema, The method of claim 12.
  15. 前記疾病は軟骨退化である、請求項12に記載の方法。 The disease is a cartilage degradation, the method of claim 12.
  16. 前記関節障害は骨関節炎ではない、請求項9に記載の方法。 The joint disorder not osteoarthritis method of claim 9.
  17. 前記関節障害は関節リウマチではない、請求項9に記載の方法。 The joint disorders is not a rheumatoid arthritis The method of claim 9.
  18. a. a. 関節障害に関連する病理学的マーカーを診断する工程と、 And a step to diagnose the pathological markers associated with joint disorders,
    b. b. アミノ糖を治療有効製剤として投与する工程とを含む、関節障害を治療する方法。 And a step of administering an aminosugar as a therapeutically active formulations, methods of treating joint disorders.
  19. 前記病理学的マーカーは、滑膜炎、軟骨下骨浮腫及び軟骨退化から成る群から選択される、請求項18に記載の方法。 The pathological markers, synovitis, is selected from the group consisting of subchondral bone edema and cartilage degradation The method of claim 18.
  20. 前記病理学的マーカーは滑膜炎である、請求項19に記載の方法。 The pathological markers is a synovitis The method of claim 19.
  21. 前記病理学的マーカーは軟骨下骨浮腫である、請求項19に記載の方法。 The pathological markers is subchondral bone edema, The method of claim 19.
  22. 前記病理学的マーカーは軟骨退化である、請求項19に記載の方法。 The pathological markers is a cartilage degradation, the method of claim 19.
  23. 前記関節障害は骨関節炎ではない、請求項18に記載の方法。 The joint disorder not osteoarthritis method of claim 18.
  24. 前記関節障害は関節リウマチではない、請求項18に記載の方法。 The joint disorders is not a rheumatoid arthritis The method of claim 18.
  25. アミノ糖を投与するステップは、関節内、筋肉内、注入ポンプ及び皮下から成る群から選択される投与経路によって行われる、請求項18に記載の方法。 Step of administering the amino sugars, intraarticular, intramuscular, performed according to the route of administration selected from the group consisting of an infusion pump and subcutaneous method of claim 18.
  26. 前記投与経路は関節内である、請求項25に記載の方法。 The route of administration is intra-articular, The method of claim 25.
  27. 前記アミノ糖は、N−アセチルグルコサミン、グルコサミン、ガラクトサミン、N−アセチルガラクトサミン、イミノシクリトール、その組合せ治療(combination therapies thereof)、その薬学的に許容し得る塩、及びその注射用製剤からなる群から選択される、請求項18に記載の方法。 The amino sugar is, N- acetylglucosamine, glucosamine, galactosamine, N- acetyl galactosamine, iminocyclitol, the combination therapy (combination therapies thereof), from the group consisting of a pharmaceutically acceptable salt thereof, and injectable preparations thereof It is selected, the method of claim 18.
  28. 前記アミノ糖はN−アセチルグルコサミンである、請求項27に記載の方法。 The amino sugar is N- acetylglucosamine The method of claim 27.
  29. その注射用製剤は、マトリックス粒子、マトリックスゲル及び放出制御製剤から成る群から選択される、請求項27に記載の方法。 Its injectable preparation, matrix particles are selected from the group consisting of matrix gel and controlled release formulations, method of claim 27.
  30. その組合せ治療(combination therapy thereof)は、前記アミノ糖と、抗炎症薬及びヘキソサミニダーゼ阻害剤から成る群から選択される化合物とを組合せたものである、請求項27に記載の方法。 The combination therapy (combination therapy thereof) is said amino sugar is a combination of a compound selected from the group consisting of anti-inflammatory agents and hexosaminidase inhibitor The method of claim 27.
  31. 軟骨退化を予防する方法であって、前記軟骨退化の重症度が低い哺乳動物に放出制御製剤としてのN−アセチルグルコサミンの治療有効量を投与することを含む方法。 A method for preventing cartilage degradation, comprising administering a therapeutically effective amount of N- acetylglucosamine as a controlled release formulation in the low severity of cartilage degradation mammal.
  32. 前記N−アセチルグルコサミンを筋肉内又は関節内注射によって投与する、請求項31に記載の方法。 It said N- acetylglucosamine administered by intramuscular or intraarticular injection method according to claim 31.
  33. 前記N−アセチルグルコサミンを皮下注射又は注入ポンプによって投与する、請求項21に記載の方法。 It said N- acetylglucosamine is administered by subcutaneous injection or infusion pump, The method of claim 21.
JP2006534068A 2003-10-01 2004-09-30 Treatment and use of amino sugars of disorders of a mammal by amino sugars administration Pending JP2007507516A (en)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US50771603 true 2003-10-01 2003-10-01
PCT/US2004/032048 WO2005034961A1 (en) 2003-10-01 2004-09-30 Treatment of a condition in a mammal with adminisration of aminosugar and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2007507516A true true JP2007507516A (en) 2007-03-29

Family

ID=34434891

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2006534068A Pending JP2007507516A (en) 2003-10-01 2004-09-30 Treatment and use of amino sugars of disorders of a mammal by amino sugars administration

Country Status (5)

Country Link
EP (1) EP1670486A4 (en)
JP (1) JP2007507516A (en)
CN (1) CN1909911A (en)
CA (1) CA2540586A1 (en)
WO (1) WO2005034961A1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011528348A (en) * 2008-07-18 2011-11-17 ジェニス イーエイチエフ.Genis ehf. Novel compositions for the treatment of autoimmune diseases
JP2012514634A (en) * 2009-01-09 2012-06-28 ソウル大学校産学協力団 Inflammatory diseases for improving compositions utilizing Abh antigen

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007518814A (en) * 2004-01-20 2007-07-12 オプティマー・ファーマスーティカルズ・インコーポレイテッド Treatment of degenerative cartilage diseases in mammals by glycosidase inhibitor
CN102614111B (en) * 2012-04-05 2013-11-06 苏州豫源生物医药有限公司 Glucosamine gel and preparation method thereof

Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH04502758A (en) * 1989-01-26 1992-05-21
JPH10502807A (en) * 1994-07-07 1998-03-17 ザ ユニバーシテイ オブ メルバン Diagnostic methods and compositions relating to the proteoglycan proteins of cartilage destruction
US5840715A (en) * 1995-12-11 1998-11-24 Inholtra Investment Holdings & Trading, N.V. Dietary regimen of nutritional supplements for relief of symptoms of arthritis
US20010051834A1 (en) * 1999-03-24 2001-12-13 Chondros, Inc. Method for composite cell-based implants
US20020012705A1 (en) * 1998-04-08 2002-01-31 Chondros, Inc. Polymer constructs
JP2002510332A (en) * 1997-09-03 2002-04-02 ギルフォード・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド Poly (ADP-ribose) polymerase ( "parp") inhibitors, nerve or methods and pharmaceutical compositions for the treatment of cardiovascular tissue damage
JP2002515488A (en) * 1998-05-15 2002-05-28 ギルフォード ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Carboxamide compound, method of inhibiting compositions, and parp activity
US20020119952A1 (en) * 1998-09-09 2002-08-29 Petrus Edward J. Composition and method of treating arthritis
WO2002078445A1 (en) * 2001-03-29 2002-10-10 The Scripps Research Institute Formulations comprising entrapped active ingredients and uses thereof
WO2003041724A1 (en) * 2001-11-13 2003-05-22 Alcon, Inc. Use of a mixture of sodium hyaluronate and chondroitin sulfate for the treatment of osteoarthritis
WO2003045351A1 (en) * 2001-11-30 2003-06-05 Pfizer Inc. Controlled release polymeric compositions of bone growth promoting compounds
JP2003225093A (en) * 2001-11-30 2003-08-12 Sumitomo Pharmaceut Co Ltd Marker for cartilage disorder and use thereof

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2240165A1 (en) * 1995-12-11 1997-06-19 Inholtra, Inc. Dietary regimen of nutritional supplements for relief of symptoms of arthritis
WO1998025631A1 (en) * 1996-12-13 1998-06-18 Lescarden, Inc. Treatment of osteoarthritis by administering poly-n-acetyl-d-glucosamine
US6378527B1 (en) * 1998-04-08 2002-04-30 Chondros, Inc. Cell-culture and polymer constructs
US6506785B2 (en) * 1998-05-22 2003-01-14 Pfizer, Inc. Treating or preventing the early stages of degeneration of articular cartilage or subchondral bone in mammals using carprofen and derivatives
US6346519B1 (en) * 1998-09-09 2002-02-12 Advanced Medical Instruments Method and composition for treating arthritis
DE60219653D1 (en) * 2001-09-26 2007-05-31 Genis Ehf A pharmaceutical composition comprising chito-oligomers

Patent Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH04502758A (en) * 1989-01-26 1992-05-21
JPH10502807A (en) * 1994-07-07 1998-03-17 ザ ユニバーシテイ オブ メルバン Diagnostic methods and compositions relating to the proteoglycan proteins of cartilage destruction
US5840715A (en) * 1995-12-11 1998-11-24 Inholtra Investment Holdings & Trading, N.V. Dietary regimen of nutritional supplements for relief of symptoms of arthritis
JP2002510332A (en) * 1997-09-03 2002-04-02 ギルフォード・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド Poly (ADP-ribose) polymerase ( "parp") inhibitors, nerve or methods and pharmaceutical compositions for the treatment of cardiovascular tissue damage
US20020012705A1 (en) * 1998-04-08 2002-01-31 Chondros, Inc. Polymer constructs
JP2002515488A (en) * 1998-05-15 2002-05-28 ギルフォード ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Carboxamide compound, method of inhibiting compositions, and parp activity
US20020119952A1 (en) * 1998-09-09 2002-08-29 Petrus Edward J. Composition and method of treating arthritis
US20010051834A1 (en) * 1999-03-24 2001-12-13 Chondros, Inc. Method for composite cell-based implants
WO2002078445A1 (en) * 2001-03-29 2002-10-10 The Scripps Research Institute Formulations comprising entrapped active ingredients and uses thereof
WO2003041724A1 (en) * 2001-11-13 2003-05-22 Alcon, Inc. Use of a mixture of sodium hyaluronate and chondroitin sulfate for the treatment of osteoarthritis
WO2003045351A1 (en) * 2001-11-30 2003-06-05 Pfizer Inc. Controlled release polymeric compositions of bone growth promoting compounds
JP2003225093A (en) * 2001-11-30 2003-08-12 Sumitomo Pharmaceut Co Ltd Marker for cartilage disorder and use thereof

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011528348A (en) * 2008-07-18 2011-11-17 ジェニス イーエイチエフ.Genis ehf. Novel compositions for the treatment of autoimmune diseases
JP2012514634A (en) * 2009-01-09 2012-06-28 ソウル大学校産学協力団 Inflammatory diseases for improving compositions utilizing Abh antigen
US8545851B2 (en) 2009-01-09 2013-10-01 Snu R&Db Foundation Composition for improving inflammatory disease using ABH antigens

Also Published As

Publication number Publication date Type
EP1670486A1 (en) 2006-06-21 application
CA2540586A1 (en) 2005-04-21 application
WO2005034961A1 (en) 2005-04-21 application
EP1670486A4 (en) 2009-04-01 application
CN1909911A (en) 2007-02-07 application

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Rogachefsky et al. Treatment of canine osteoarthritis with insulin-like growth factor-1 (IGF-1) and sodium pentosan polysulfate
Saito et al. Intra-articular administration of platelet-rich plasma with biodegradable gelatin hydrogel microspheres prevents osteoarthritis progression in the rabbit knee
US20070203095A1 (en) Treatment of arthritis and other musculoskeletal disorders with crosslinked hyaluronic acid
Yoshioka et al. The effects of hyaluronan during the development of osteoarthritis
US20060228391A1 (en) Methods of tissue repair and compositions therefor
Gerwin et al. Intraarticular drug delivery in osteoarthritis
US20060013905A1 (en) Anti-inflammatory compositions for treating multiple sclerosis
Madan et al. In situ forming polymeric drug delivery systems
US5902800A (en) Dextran formulations and method for treatment of inflammatory joint disorders
US20060040894A1 (en) Compositions and methods using hyaluronic acid
Brandt Effects of nonsteroidal anti-inflammatory drugs on chondrocyte metabolism in vitro and in vivo
WO2004034980A2 (en) Treatment for traumatic synovitis and damaged articular cartilage
US20060122150A1 (en) Pharmaceutical composition and method for treating a joint-capsule arthropathy
US6645945B1 (en) Method of treating diseased, injured or abnormal cartilage with hyaluronic acid and growth factors
WO2009089036A2 (en) Therapeutic compositions for treatment of ocular inflammatory disorders
US7485629B2 (en) Composition and method for treatment of joint damage
US20050164980A1 (en) Hyaluronic acid modification product
US6608043B1 (en) Remedies for joint diseases
JPH08259604A (en) Pharmacologically active fraction of hyaluronic acid, its preparation and pharmaceutical composition
US20030086899A1 (en) Chondroitin sulfate containing viscoelastics for use in treating joints
JP2005521629A (en) Composition comprising a glycosaminoglycan and hyaluronidase inhibitor for the treatment of arthritic joints
WO2003041724A1 (en) Use of a mixture of sodium hyaluronate and chondroitin sulfate for the treatment of osteoarthritis
Elmorsy et al. Chondroprotective effects of high-molecular-weight cross-linked hyaluronic acid in a rabbit knee osteoarthritis model
WO1998048816A1 (en) Aminosugar, glycosaminoglycan or glycosaminoglycan-like compounds, and s-adenosylmethionine
JP2007525541A (en) Crosslinked hyaluronic acid composition for tissue augmentation

Legal Events

Date Code Title Description
A711 Notification of change in applicant

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711

Effective date: 20070208

A521 Written amendment

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821

Effective date: 20070208

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20070628

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20101116

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20110216

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20110223

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20110315

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20110323

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20110415

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20110422

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20110705