JP2007501012A - 化合物をスクリーニングしそして同定する方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、酵素および1種もしくは複数種の基質を組み合わせる段階;反応ミックスをインキュベーションする段階;相分配液(例えば相分配シンチレーション液)を加える段階;および酵素活性を検出する段階を含んでなる酵素活性を測定する方法に関する。適切な場合、反応は、反応ミックスの酸性化により終了させることができる。本発明の一つの態様として、反応は、単一反応溶液(例えば有機耐性(organic resistant)マルチウェルプレート)において行うことができる。別の態様として、本発明の方法は、ハイスループットスクリーニング(high throughput screen)に用いることができる。
[本発明の記述]
本発明は、放射性標識基質および反応の生成物が水相および非混和性シンチレーション液含有有機相に別個に分配される酵素活性の定量的測定の方法を提供する。これらの方法は、放射性核種が有機シンチラント含有相にある場合にのみシンチレーションが検出されることを利用する。酵素活性は、生成物分子への放射性標識含有有機溶解性部分の取り込み(シグナルアッセイの増加)もしくは基質分子からの放射性標識含有有機溶解性部分の喪失(シグナルアッセイの喪失)のいずれかにより評価される。
脂肪酸シンターゼ
FASは、アセチル−CoA、マロニル−CoAおよびNADPHからの長鎖脂肪酸の形成を触媒する。この多機能タンパク質は、7つの触媒活性およびアシルキャリアータンパク質を有する。それは、デノボ脂肪酸合成およびエネルギーバランスに必要とされる。
正味の反応:
アセチル−CoA+nマロニル−CoA+2nNADPH=
長鎖脂肪酸+(n+1)CoA+nCO2+2nNADP+
触媒活性(1):
アセチル−CoA+[アシルキャリアータンパク質]=CoA+アセチル−[アシルキャリアータンパク質]
触媒活性(2):
マロニル−CoA+[アシルキャリアータンパク質]=CoA+マロニル−[アシルキャリアータンパク質]
触媒活性(3):
アシル−[アシルキャリアータンパク質]+マロニル−[アシルキャリアータンパク質]=3−オキソアシル−[アシルキャリアータンパク質]+CO2+[アシルキャリアータンパク質]
触媒活性(4):
(3R)−3−ヒドロキシアシル−[アシルキャリアータンパク質]+NADP+=3−オキソアシル−[アシルキャリアータンパク質]+NADPH
触媒活性(5):
(3R)−3−ヒドロキシパルミトイル−[アシルキャリアータンパク質]=
2−ヘキサデセノイル−[アシルキャリアータンパク質]+H2O
触媒活性(6):
アシル−[アシルキャリアータンパク質]+NADP+=
トランス−2,3−デヒドロアシル−[アシルキャリアータンパク質]+NADPH
触媒活性(7):
オレオイル−[アシルキャリアータンパク質]+H2O=[アシルキャリアータンパク質]+オレイン酸塩
本発明のこの方法は、放射性標識として[2−14C]マロニルCoA、ならびに酸性化および反応混合物へのPPSFの添加後のPPSF(MicroscintTM−E)への放射性生成物(14Cで標識されたオレイン酸およびパルミチン酸)の分配を用いるシグナルアッセイの増加によってFAS活性の放射分析検出(radiometric detection)を可能にする。
アセチル−CoAカルボキシラーゼ1
ACCは、長鎖脂肪酸の生合成における律速反応を触媒する。このタンパク質は補因子としてビオチンを用い、そして2つの別個の活性:
触媒活性(1):
ATP+アセチル−CoA+HCO3 −=ADP+リン酸塩+マロニル−CoA
触媒活性(2):
ATP+ビオチン−カルボキシルキャリアータンパク質+CO2=
ADP+リン酸塩+カルボキシビオチン−カルボキシルキャリアータンパク質
とともに、3つの機能:ビオチンカルボキシルキャリアータンパク質、ビオチンカルボキシラーゼおよびカルボキシトランスフェラーゼを有する。
ファルネシル−二リン酸シンターゼ
触媒活性
ゲラニル二リン酸+イソペンテニル二リン酸=
二リン酸塩+トランス,トランス−ファルネシル二リン酸
本発明のこの方法は、反応混合物の酸性化の後に[1−14C]イソペンテニルピロリン酸とゲラニル二リン酸との間の反応の放射性生成物、[1−14C]トランス,トランス−ファルネシル二リン酸(FPP)をPPSFに分配することによってFPPシンターゼ活性の放射分析検出を可能にする。FPPの酸処理は、[1−14C]ファルネソール(脱ピロリン酸化アルコール生成物)および[1−14C]ネロリドール(3,7,11−トリメチル−1,6,10−ドデカトリエン−3−オール;脱ピロリン酸化、続いてカルボカチオン転位からのアルコール生成物;Holloway,et al.,Biochem.J.104:57−70,1967)の混合物をもたらす。ネロリドールおよびファルネソールは両方とも有機溶解性である。放射性基質[1−14C]イソペンチルピロリン酸は酸安定性であり、そして有機相に分配しない。生成物(基質からDPMを取り込む)からの消費されていない基質(および関連するDPM)の分離は、有機非混和性(水混和性)生成物を有機混和性アリル型アルコール生成物に転化するように働くFPP合成酵素反応混合物の酸性化の組み合わせ、続いてPPSFの添加によって成し遂げられる。
ジアシルグリセロールO−アシルトランスフェラーゼ1
DGATは、基質としてジアシルグリセロールおよび脂肪酸アシルCoAを用いることによりトリアシルグリセロール合成における最終的なそして関与段階のみを触媒する。
触媒活性:
アシル−CoA+1,2−ジアシルグリセロール=CoA+トリアシルグリセロール
本発明のこの方法は、[1−14C]デカノイル−CoAとジ−デカノイルグリセロールとのDGAT触媒縮合から形成される放射性生成物トリ−デカノイルグリセロールをPPSF(MicroscintTM−E)に分配することによるシグナルアッセイの増加によってDGAT活性の放射分析検出を可能にする。
1−ホスファチジルイノシトール−4,5−ビスリン酸ホスホジエステラーゼガンマ−1
PLCδ−1は、ヘパリン結合性増殖因子1(酸性線維芽細胞増殖因子)活性化チロシンキナーゼの主要な基質である。
触媒活性:
1−ホスファチジル−1D−ミオ−イノシトール4,5−ビスリン酸+H2O=
D−ミオ−イノシトール1,4,5−トリスリン酸+ジアシルグリセロール
本発明のこの方法は、放射性生成物[イノシトール−2−3H]1−リン酸を水相にそして加水分解されていない基質L−3−ホスファチジル[2−3H]イノシトール([3H]PI)をPPSF(ALDRICH LSM)に分配することによるシグナルアッセイの喪失によってPLCδ−1活性の放射分析検出を可能にする。天然基質イノシトール4,5−ビスリン酸およびPLCδ触媒反応の生成物イノシトール1,4,5−3リン酸は両方とも水相に可溶性であり、そしてシグナルアッセイの喪失は不可能である。PLCδの基質としてホスファチジルイノシトール4,5−リン酸のホスファチジルイノシトールでのこの代用は、報告されている(Rhee,et al.,Methods Enzymol.197:502−511,1991)。
グリセロール−3−リン酸O−アシルトランスフェラーゼ
グリセロール−3−リン酸O−アシルトランスフェラーゼ(GPAT)は、グリセロール脂質生合成の第一関与段階:脂肪酸アシル−CoAとのsn−1位におけるグリセロール−3−リン酸のエステル化を触媒して1−アシルグリセロール−3−リン酸(リゾホスファチジン酸)を形成する。このタンパク質のミクロソームおよびミトコンドリア(mt)アイソザイムが存在する。大部分の組織において、mtGPATは総GPAT活性の10%に寄与し、しかしながら、肝臓では、mtGPATは総活性の30〜50%に寄与する。ミクロソームGPATは、飽和および不飽和脂肪酸アシル−CoAの両方を同等によくエステル化し、しかしながら、mtGPATはパルミトイル−CoAに対する基質選択性を有する。
触媒活性
アシル−CoA+sn−グリセロール−3−リン酸=CoA+1−アシル−sn−グリセロール−3−リン酸
本発明のこの方法は、[3H−9,10]パルミトイル−CoAとsn−グリセロール−3−リン酸との間の反応の1−パルミトイル[3H−9,10]グリセロール3リン酸生成物をPPSF(MicroscintTM−E)に分配するシグナルアッセイの増加によってGPAT活性の放射分析検出を可能にする。
カルニチンO−パルミトイルトランスフェラーゼ1(CPT1)
CPT1は、パルミトイル−CoAおよびL−カルニチンからのL−パルミトイルカルニチンおよび補酵素Aの形成を触媒する。それはミトコンドリア内膜の外部表面上に位置し、そして肝臓ミトコンドリアベータ酸化の速度の制御の多くは、CPT1のレベルに存在するように思われ、ミトコンドリアへのフラックスは、CPT1のエフェクターにより制御される。
触媒活性
パルミトイル−CoA+L−カルニチン=CoA+L−パルミトイルカルニチン
本発明のこの方法は、L−[N−メチル−14C]カルニチンとパルミトイル−CoAとの間の反応のL−[N−メチル−14C]パルミトイルカルニチン生成物をPPSF(MicroscintTM−E)に分配するシグナルアッセイの増加によってCPT1活性の放射分析検出を可能にする。
セリンC−パルミトイルトランスフェラーゼ(SPT)
SPTは、パルミトイル−CoAとセリンとの縮合を触媒して3−ケトジヒドロスフィンゴシン(3−ケトスフィンガニン)を生成せしめる。補酵素Aおよび二酸化炭素は、副産物である。SPTは、真核細胞におけるデノボスフィンゴ脂質合成の最初の段階に関与し、そしてスフィンゴ脂質は細胞増殖に必須である。
触媒活性
パルミトイル−CoA+L−セリン=3−ケトジヒドロスフィンゴシン+CoA+CO2
本発明のこの方法は、L−[3−3H]セリンとパルミトイル−CoAとの間の反応のD−エリトロ−[3−3H]ケトジヒドロスフィンゴシン生成物をPPSF(MicroscintTM−E)に分配するシグナルアッセイの増加によってSPT活性の放射分析検出を可能にする。
処置の方法
本明細書において用いる場合に、様々な用語が以下に定義される。
化合物の評価
本発明の方法により同定される化合物の有用性の実証は、当該技術分野において周知であるインビトロもしくはインビボアッセイによって成し遂げることができる。例えば、癌の処置について製薬学的因子の効能を示すために、インビトロ腫瘍細胞増殖アッセイを用いることができる。インビトロでの腫瘍細胞増殖アッセイにおける活性と臨床設定における抗腫瘍活性との間の関連は、当該技術分野において確立している。例えば、タキソール(Silvestrini,et al.,Stem Cells 11(6):528−535,1993)、タキソテール(Bissery,et al.,Anti Cancer Drugs 6(3):339,1995)およびトポイソメラーゼインヒビター(Edelman,et al.,Cancer Chemother.Pharmacol.37(5):385−393,1996)の治療有用性は、インビトロ腫瘍増殖アッセイを用いて示された。
化合物で処理した3T3−L1細胞におけるインシュリン受容体結合
3T3−L1細胞をCostar平底TCにおいてウェル当たり9300細胞で接種し、そしてそれらが融合した(例えば、細胞が最大密度に到達した)後2日になるまで1週間インキュベーションする。次に、細胞を0.5μMのヒトインシュリン様増殖因子(IGF−1)および試験化合物を含有する分化培地(ダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)、100μg/mlのペニシリン/ストレプトマイシン、2mMのL−グルタミン、10%の胎仔ウシ血清)で2日間処理する。処理後に、培地を分化培地で置換し、そして細胞を4日間インキュベーションする。次に、細胞をインシュリン受容体活性についてアッセイする。細胞をバッファーで洗浄した後に、それらを0.1nMの125I−インシュリンおよび(+/−)100nMの標識されていないインシュリンとインキュベーションし、そしてrtで1時間インキュベーションする。次に、細胞をバッファーで3x洗浄し、1N NaOHで溶解し、そしてガンマカウンター上で計数する。プラトに達する場合にEC50値を決定し、そして%最大刺激を評価する。
血糖レベルを測定する方法
db/dbマウス(Jackson Laboratories,Bar Harbor,MEから入手する)から血液を抜き取り(眼もしくは尾静脈のいずれかにより)、そして同等の平均血糖レベルに従って分類する。それらに試験化合物を経口で(製薬学的に許容しうる賦形剤において強制飼養により)毎日1回14日間与える。この時点で、動物から眼もしくは尾静脈により再び血液を抜き取り、そして血糖レベルを決定する。いずれの場合にも、グルコースレベルはGlucometer Elite XL(Bayer Corporation,Elkhart,IN)で測定される。
トリグリセリドレベルを測定する方法。
HDL−コレステロールレベルを測定する方法
血漿HDL−コレステロールレベルを決定するために、hApoA1マウスから血液を抜き取り、そして同等の平均血漿HDL−コレステロールレベルで分類した。マウスに賦形剤もしくは試験化合物を経口で毎日1回7日間与え、そして次に8日目に再び血液を抜き取る。血漿は、Synchron Clinical System(CX4)(Beckman Coulter,Fullerton,CA)を用いてHDL−コレステロールについて分析される。
総コレステロール、HDL−コレステロール、トリグリセリドおよびグルコースレベルを測定する方法
別のインビボアッセイにおいて、肥満したサルから血液を抜き取り、次に賦形剤もしくは試験化合物を経口で毎日1回4週間与え、そして次に再び血液を抜き取る。血清は、Synchron Clinical System(CX4)(Beckman Coulter,Fullerton,CA)を用いて総コレステロール、HDL−コレステロール、トリグリセリドおよびグルコースについて分析される。リポタンパク質サブクラス分析は、Oliver et al.,(Proc.Natl.Acad.Sci.USA 98:5306−5311,2001)により記述されているようにNMR分光法により行われる。
心臓血管パラメーターへの効果を測定する方法
心臓血管パラメーター(例えば、心拍数および血圧)もまた評価される。SHRラットに賦形剤もしくは試験化合物を経口で毎日1回2週間与える。血圧および心拍数は、Grinsell et al.,(Am.J.Hypertens.13:370−375,2000)により記述されているようにテイルカフ法を用いて決定される。サルにおいて、血圧および心拍数は、Shen et al.,(J.Pharmacol.Exp.Therap.278:1435−1443,1996)により記述されているようにモニターされる。
インビトロ腫瘍細胞増殖アッセイ
化合物の活性を試験するために使用する腫瘍細胞増殖アッセイは、細胞増殖の阻害を測定する、Promega(Madison,WI)により開発されたCell Titer−GlowR発光細胞生存アッセイ(Luminescent Cell Viability Assay)と呼ばれる読み取りを伴う(Cunningham,The Scientist 15(13):26,2001;Crouch,et al.,J.Immunol.Methods 160:81−88,1993)。発光シグナルの生成は存在するATPの量に対応し、それは代謝的に活性の(増殖する)細胞の数に直接比例する。
製薬学的組成物
本明細書において用いる場合に、様々な用語が以下に定義される。
Claims (34)
- 酵素および1種もしくは複数種の基質を組み合わせる段階;
反応ミックスをインキュベーションする段階;
相分配液を加える段階;および
酵素活性を検出する段階
を含んでなる酵素活性の測定方法。 - 酸性化により反応を終了させる段階をさらに含んでなる請求項1の方法。
- 相分配液が相分配シンチレーション液である請求項1の方法。
- 反応を単一反応容器中で行う請求項1の方法。
- 反応を有機耐性(organic resistant)マルチウェルプレート中で行う請求項1の方法。
- マルチウェルプレートが96個までのウェルを含んでなる請求項5の方法。
- マルチウェルプレートが96個より多いウェルを含んでなる請求項5の方法。
- マルチウェルプレートが384個までのウェルを含んでなる請求項5の方法。
- マルチウェルプレートが384個より多いウェルを含んでなる請求項5の方法。
- 該方法がハイスループットスクリーニングに用いられる請求項1の方法。
- 該酵素が脂肪酸シンターゼ;アセチルCoAカルボキシラーゼ;ジアシルグリセロールアセチルトランスフェラーゼ;ファルネシル二リン酸シンターゼ;グリセロール−3−リン酸O−アシルトランスフェラーゼ;カルニチンO−パルミトイルトランスフェラーゼ1;セリンC−パルミトイルトランスフェラーゼ;およびホスホリパーゼCガンマから選択される請求項1の方法。
- 1種もしくは複数種の基質を放射性標識する請求項3の方法。
- 酵素活性を放射分析検出(radiometric detection)により測定する請求項12の方法。
- 酵素活性をシグナルアッセイの増加もしくは喪失により測定する請求項1の方法。
- 酸が酢酸、リン酸および塩酸から選択される請求項2の方法。
- 酵素、1種もしくは複数種の基質および1種もしくは複数種の試験化合物を組み合わせる段階;
反応ミックスをインキュベーションする段階;
相分配液を加える段階;および
酵素活性を検出する段階
を含んでなる酵素活性を調節する化合物の同定方法。 - 酸性化により反応を終了させる段階をさらに含んでなる請求項16の方法。
- 相分配液が相分配シンチレーション液である請求項16の方法。
- 反応を単一反応容器中で行う請求項16の方法。
- 反応を有機耐性マルチウェルプレート中で行う請求項16の方法。
- マルチウェルプレートが96個までのウェルを含んでなる請求項20の方法。
- マルチウェルプレートが96個より多いウェルを含んでなる請求項20の方法。
- マルチウェルプレートが384個までのウェルを含んでなる請求項20の方法。
- マルチウェルプレートが384個より多いウェルを含んでなる請求項20の方法。
- 該方法がハイスループットスクリーニングに用いられる請求項16の方法。
- 該酵素が脂肪酸シンターゼ;アセチルCoAカルボキシラーゼ;ジアシルグリセロールアセチルトランスフェラーゼ;ファルネシル二リン酸シンターゼ;グリセロール−3−リン酸O−アシルトランスフェラーゼ;カルニチンO−パルミトイルトランスフェラーゼ1;セリンC−パルミトイルトランスフェラーゼ;およびホスホリパーゼCガンマから選択される請求項16の方法。
- 1種もしくは複数種の基質を放射性標識する請求項18の方法。
- 酵素活性を放射分析検出により測定する請求項27の方法。
- 酵素活性をシグナルアッセイの増加もしくは喪失により測定する請求項16の方法。
- 酸が酢酸、リン酸および塩酸から選択される請求項17の方法。
- 請求項16の方法により同定される化合物の治療的に有効な量を哺乳類に投与する段階を含んでなる糖尿病、糖尿病関連障害、肥満症、心臓血管疾患および癌の処置方法。
- 1種もしくはそれ以上の製薬学的因子と組み合わせて請求項16の方法により同定される化合物の治療的に有効な量を哺乳類に投与する段階を含んでなる糖尿病、糖尿病関連障害、肥満症、心臓血管疾患および癌の処置方法。
- 製薬学的に許容しうる担体と組み合わせて請求項16の方法により同定される化合物を含んでなる製薬学的組成物。
- 製薬学的に許容しうる担体および1種もしくはそれ以上の製薬学的因子と組み合わせて請求項16の方法により同定される化合物を含んでなる製薬学的組成物。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2012530507A (ja) * | 2009-06-26 | 2012-12-06 | サノフイ | Mest活性を測定するための試験系並びにそれを含む方法及び使用 |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1660671A4 (en) * | 2003-08-04 | 2007-09-12 | Bayer Pharmaceuticals Corp | METHOD FOR SCREENING AND IDENTIFICATION OF CONNECTIONS |
US7384757B2 (en) * | 2004-03-31 | 2008-06-10 | Bristol-Myers Squibb Company | Scintillation proximity assay method of measuring acetyl CoA carboxylase enzyme activity |
US20080064717A1 (en) * | 2006-05-19 | 2008-03-13 | Rajesh Iyengar | Inhibitors of diacylglycerol O-acyltransferase type 1 enzyme |
US20080015227A1 (en) * | 2006-05-19 | 2008-01-17 | Kym Philip R | Inhibitors of diacylglycerol O-acyltransferase type 1 enzyme |
US20070292906A1 (en) * | 2006-06-14 | 2007-12-20 | Bristol-Myers Squibb Company | Assay for measuring acyltransferase activity |
EP2581081A3 (en) | 2007-06-01 | 2013-07-31 | The Trustees Of Princeton University | Treatment of viral infections by modulation of host cell metabolic pathways |
AU2009245975A1 (en) * | 2008-05-16 | 2009-11-19 | The Governors Of The University Of Alberta | High throughput methods of identifying neutral lipid synthases |
WO2010086820A1 (en) | 2009-02-02 | 2010-08-05 | Pfizer Inc. | 4-amino-5-oxo-7, 8-dihydropyrimido [5,4-f] [1,4] oxazepin-6 (5h) -yl) phenyl derivatives, pharmaceutical compositions and uses thereof |
WO2010089685A1 (en) | 2009-02-03 | 2010-08-12 | Pfizer Inc. | 4-amino-7,8-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-5(6h)-one derivatives |
CA2749893A1 (en) | 2009-02-04 | 2010-08-12 | Pfizer Inc. | 4-amino-7,8-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-5(6h)-one derivatives |
US20160067267A1 (en) * | 2013-03-15 | 2016-03-10 | Normoxys, Inc. | Myo-inositol trispyrophosphate as an anti-obesity agent |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4372941A (en) * | 1980-09-05 | 1983-02-08 | Ryan James W | Novel radioassay procedure |
US5875992A (en) * | 1994-09-21 | 1999-03-02 | Koenig & Bauer-Albert Aktiengesellschaft | Supporting journal for winding tube |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US18487A (en) * | 1857-10-20 | badger | ||
US203411A (en) * | 1878-05-07 | Improvement in electric lamps | ||
US26235A (en) * | 1859-11-22 | Henry m | ||
US4563305A (en) * | 1981-01-07 | 1986-01-07 | University Of Miami | Radiolabelled substrates for assaying mammalian enzymes |
CA2200952C (en) * | 1994-09-30 | 2006-04-11 | Inex Pharmaceuticals Corp. | Novel compositions comprising quaternary ammonium compounds and neutral lipids for the introduction of polyanionic materials into cells |
US7312041B2 (en) * | 2001-02-16 | 2007-12-25 | Arbor Vita Corporation | Methods of diagnosing cervical cancer |
US20030203411A1 (en) * | 2001-06-05 | 2003-10-30 | Sabbadini Roger A. | Methods of minicell-based delivery |
WO2005005977A2 (en) * | 2003-06-30 | 2005-01-20 | Applera Corporation | Fluorescent phospholipase assays and compositions |
EP1660671A4 (en) * | 2003-08-04 | 2007-09-12 | Bayer Pharmaceuticals Corp | METHOD FOR SCREENING AND IDENTIFICATION OF CONNECTIONS |
-
2004
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-
2005
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4372941A (en) * | 1980-09-05 | 1983-02-08 | Ryan James W | Novel radioassay procedure |
US5875992A (en) * | 1994-09-21 | 1999-03-02 | Koenig & Bauer-Albert Aktiengesellschaft | Supporting journal for winding tube |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2012530507A (ja) * | 2009-06-26 | 2012-12-06 | サノフイ | Mest活性を測定するための試験系並びにそれを含む方法及び使用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
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