JP2007325542A - 分化制御剤及び自己再生制御剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 グルクロン酸及びN−アセチルグルコサミンを糖鎖に対して転移する活性を有する酵素(例えばEXT1、EXT2など)をコードする遺伝子の発現を制御する核酸を有効成分とする細胞の分化制御剤及び自己再生制御剤、及びグルクロン酸及びN−アセチルグルコサミンを糖鎖に対して転移する活性を有する酵素(例えばEXT1、EXT2など)をコードする遺伝子の発現を制御する核酸の細胞分化制御剤又は自己再生制御剤としての使用。
【選択図】 なし
Description
1.糖転移酵素をコードする遺伝子の発現を制御する核酸を、有効成分として含有する分化制御剤。
2.糖転移酵素が、グルクロン酸及びN−アセチルグルコサミンを糖鎖に対して転移する活性を有する酵素であることを特徴とする、1記載の分化制御剤。
3.糖転移酵素が、EXT1であることを特徴とする1記載の分化制御剤。
4.下記(a)〜(c)の核酸を有効成分として含有する分化制御剤。
(a)配列番号1記載の塩基配列中、塩基番号1775〜1795からなる塩基配列
(b)配列番号1記載の塩基配列中、塩基番号1954〜1974からなる塩基配列
(c)(a)又は(b)の配列に1又は数個の塩基の置換、欠失、挿入又は転位を有する塩基配列
5.核酸がデオキシリボ核酸であることを特徴とする1乃至4何れか記載の分化制御剤。
6.糖転移酵素をコードする核酸の発現を制御する核酸を、有効成分として含有する自己再生制御剤。
7.糖転移酵素が、グルクロン酸及びN−アセチルグルコサミンを糖鎖に対して転移する活性を有する酵素であることを特徴とする、6記載の自己再生制御剤。
8.糖転移酵素が、EXT1であることを特徴とする7記載の自己再生制御剤。
9.下記(a)〜(c)の核酸を有効成分として含有する自己再生制御剤。
(a)配列番号1記載の塩基配列中、塩基番号1775〜1795からなる塩基配列
(b)配列番号1記載の塩基配列中、塩基番号1954〜1974からなる塩基配列
(c)(a)又は(b)の配列に1又は数個の塩基の置換、欠失、挿入又は転位を有する塩基配列
10.核酸がデオキシリボ核酸であることを特徴とする6乃至9何れか記載の自己再生制御剤。
11.糖転移酵素をコードする遺伝子の発現を制御する核酸の、分化制御剤としての使用。
12.糖転移酵素をコードする遺伝子の発現を制御する核酸の、自己再生制御剤としての使用。
13.対象となる細胞に対して糖転移酵素の遺伝子の発現を制御する核酸を導入し、対象となる細胞の分化の進行度を制御する方法。
14.対象となる細胞に対して糖転移酵素の遺伝子の発現を制御する核酸を導入し、対象となる細胞の自己再生の進行度を制御する方法。
1.本発明分化制御剤
本発明分化制御剤は、糖転移酵素をコードする遺伝子の発現を制御する核酸を、有効成分として含有することを特徴とする。
また、上述の核酸に相補的な塩基配列からなる核酸に、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸も、本発明分化制御剤に使用することができる。なお、「ストリンジェントな条件下」とは、50%ホルムアミド、5×SSPE(塩化ナトリウム/リン酸ナトリウム/EDTA(エチレンジアミン四酢酸)緩衝液)、5×デンハルト溶液(Denhardt's solution)、0.5% SDS(ドデシル硫酸ナトリウム)、変性サケ精子DNA100μg/ml存在下、42℃の条件下及びこれと実質的に同一の条件下などが例示される。すなわちストリンジェントな条件とは、通常の遺伝子のハイブリダイゼーションに用いられる条件であり、ノザンブロット、サザンブロット、ハイブリダイゼーションを用いたスクリーニング等に使用される条件であれば、ここにいう「ストリンジェントな条件下」に包含される。
本発明分化制御方法は、対象となる細胞に対して糖転移酵素の遺伝子の発現を制御する核酸を導入し、対象となる細胞の分化の進行度を制御する方法である。
本発明自己再生制御剤は、糖転移酵素をコードする核酸の発現を制御する核酸を、有効成分として含有することを特徴とする。
本発明自己再生制御方法は、対象となる細胞に対して糖転移酵素の遺伝子の発現を制御する核酸を導入し、対象となる細胞の自己再生の進行度を制御する方法である。
マウスのES細胞(R1:生理学研究所 等 誠司 博士より恵与、E14TG2a:東京大学 程 久美子 博士より恵与)に対して、siRNA発現プラスミド(pSilencer(Ambion社製)のBamHI-HindIII領域に配列番号2に記載された配列(本発明分化抑制剤及び本発明自己再生制御剤の有効成分である核酸)を常法により連結して構築した)を導入した。陰性対象として配列番号2に記載された配列に代えて、EGFP配列(配列番号3に記載された塩基配列からなる)を連結したプラスミドを使用した。
実施例1の方法で核酸を導入した細胞(以下、配列番号2記載の塩基配列からなる核酸を導入した細胞を「実験群の細胞」という)を、トリプシンにより回収し、1000U/mlで白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor:以下「LIF」と略記する)を含むES細胞培養培地のゼラチンコートを施した60mmディッシュ上に1×104個ずつ播種した。未分化細胞の識別のためにはケミコン社製のALP detection kitで播種した5日経過後に固定して染色した。そして顕微鏡下で染色されたコロニー数をカウントした。その結果、ALP陽性率と全コロニー数が実験群の細胞では、対象と比して少なく、ヘパラン硫酸が細胞の自己再生と増殖を制御していることを示唆する結果が得られた(図3)。
実施例1の方法で配列番号2記載の塩基配列からなる核酸を導入した実験群の細胞を、LIF存在下で5日間培養し、顕微鏡観察した。
Claims (14)
- 糖転移酵素をコードする遺伝子の発現を制御する核酸を、有効成分として含有する分化制御剤。
- 糖転移酵素が、グルクロン酸及びN−アセチルグルコサミンを糖鎖に対して転移する活性を有する酵素であることを特徴とする、請求項1記載の分化制御剤。
- 糖転移酵素が、EXT1であることを特徴とする請求項1記載の分化制御剤。
- 下記(a)〜(c)の塩基配列からなる核酸を有効成分として含有する分化制御剤。
(a)配列番号1記載の塩基配列中、塩基番号1775〜1795からなる塩基配列
(b)配列番号1記載の塩基配列中、塩基番号1954〜1974からなる塩基配列
(c)(a)又は(b)の配列に1又は数個の塩基の置換、欠失、挿入又は転位を有する塩基配列 - 核酸がデオキシリボ核酸であることを特徴とする請求項1乃至4何れか一項記載の分化制御剤。
- 糖転移酵素をコードする遺伝子の発現を制御する核酸を、有効成分として含有する自己再生制御剤。
- 糖転移酵素が、グルクロン酸及びN−アセチルグルコサミンを糖鎖に対して転移する活性を有する酵素であることを特徴とする、請求項6記載の自己再生制御剤。
- 糖転移酵素が、EXT1であることを特徴とする請求項7記載の自己再生制御剤。
- 下記(a)〜(c)の塩基配列からなる核酸を有効成分として含有する自己再生制御剤。
(a)配列番号1記載の塩基配列中、塩基番号1775〜1795からなる塩基配列
(b)配列番号1記載の塩基配列中、塩基番号1954〜1974からなる塩基配列
(c)(a)又は(b)の配列に1又は数個の塩基の置換、欠失、挿入又は転位を有する塩基配列 - 核酸がデオキシリボ核酸であることを特徴とする請求項6乃至9何れか一項記載の自己再生制御剤。
- 糖転移酵素をコードする遺伝子の発現を制御する核酸の、分化制御剤としての使用。
- 糖転移酵素をコードする遺伝子の発現を制御する核酸の、自己再生制御剤としての使用。
- 対象となる細胞に対して糖転移酵素の遺伝子の発現を制御する核酸を導入し、対象となる細胞の分化の進行度を制御する方法。
- 対象となる細胞に対して糖転移酵素の遺伝子の発現を制御する核酸を導入し、対象となる細胞の自己再生の進行度を制御する方法。
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JPN6012000572; LIND,T. et al.: 'The putative tumor suppressors EXT1 and EXT2 are glycosyltransferases required for the biosynthesis' J. Biol. Chem. Vol.273, No.41, 19981009, pp.26265-8 * |
JPN6012000574; McCORMICK,C. et al.: 'The putative tumor suppressors EXT1 and EXT2 form a stable complex that accumulates in the Golgi app' Proc. Natl. Acad. Sci. USA. Vol.97, No.2, 20000118, pp.668-73 * |
JPN6012000576; AHN,J. et al.: 'Cloning of the putative tumour suppressor gene for hereditary multiple exostoses (EXT1).' Nat. Genet. Vol.11, No.2, 199510, pp.137-43 * |
JPN6012000577; STICKENS,D. et al.: 'The EXT2 multiple exostoses gene defines a family of putative tumour suppressor genes.' Nat. Genet. Vol.14, No.1, 199609, pp.25-32 * |
JPN6012000579; SEMIZAROV,D. et al.: 'Specificity of short interfering RNA determined through gene expression signatures.' Proc. Natl. Acad. Sci. USA. Vol.100, No.11, 20030527, pp.6347-52 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011130764A (ja) * | 2009-11-25 | 2011-07-07 | Soka Univ | 胚様体分化制御剤 |
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