JP2007314574A - Slightly digestible agent - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は難消化剤に関し、特に脂肪蓄積抑制/便秘解消剤に関する。 The present invention relates to an indigestible agent, and more particularly to a fat accumulation inhibitor / constipation relieving agent.
人の消化酵素で消化されない成分である食物繊維は、食生活の欧米化に伴い摂取量が年々減少している。しかしその一方で、その低カロリー性、血糖値の改善、便秘解消などの効果が見直されてきている。さらに近年の美容、健康への関心の高まりにより、実に様々な食物繊維を含んだ食品・飲料が提案、市販されている。 Dietary fiber, an ingredient that is not digested by human digestive enzymes, is decreasing year by year with the westernization of diet. However, on the other hand, its effects such as low calorieity, improvement of blood sugar level and elimination of constipation have been reviewed. Furthermore, with the recent increase in interest in beauty and health, foods and beverages containing various dietary fibers have been proposed and marketed.
例えば特許文献1には、低分子化したコンニャクマンナンからなる食物繊維を含む飲料が提案されている。
その他にも特許文献2にはキノコ類から得られたもの、特許文献3には低分子ペクチン、特許文献4にはアルギン酸類など、実に多数の食物繊維が提案されている。
For example,
In addition,
現在飲食品用として使用されている多くは水溶性の食物繊維である。この種の食物繊維はゲル化しやすい性質を持ち、粘性が高いため、飲食物に添加するには低粘度化してやらねばならず、製造法が複雑になってしまう。また、摂取した場合には腹部に多量のガスが発生するなどの問題がある。
本発明は脂肪蓄積抑制(ダイエット)及び便秘解消作用を有する新規な難消化剤を提供することを目的とするものである。 An object of the present invention is to provide a novel indigestible agent having an action of suppressing fat accumulation (diet) and relieving constipation.
本発明はセリシン及び/又はその加水分解物を有効成分とする難消化剤である。 The present invention is an indigestible agent containing sericin and / or a hydrolyzate thereof as an active ingredient.
本発明で用いるセリシンとしては通常、繭又は生糸由来のセリシンが好ましく用いられる。非加水分解物としてのセリシンは、繭又は生糸から一般的に行われる抽出方法で得ることができる。例えば以下のようにして純度90%以上の高精製度単一タンパク質の状態で抽出できる。 As sericin used in the present invention, usually sericin derived from silkworms or raw silk is preferably used. Sericin as a non-hydrolyzate can be obtained by an extraction method generally performed from straw or raw silk. For example, it can be extracted in the state of a highly purified single protein having a purity of 90% or more as follows.
即ち、繭又は生糸に含有されるセリシンを水によって抽出し、例えば次の(1)、(2)のいずれかの方法で回収する。
(1)メタノール、エタノール、ジオキサン等の水溶性有機溶媒を混合してセリシンを析出させた後、これを濾別乾燥して、セリシン粉体として得る。
(2)特開平4−202435号公報に提案されているように、限外濾過膜もしくは逆浸透膜に付した後、乾燥することによりセリシン粉体を得る。
That is, sericin contained in cocoons or raw silk is extracted with water and recovered by, for example, any one of the following methods (1) and (2).
(1) A water-soluble organic solvent such as methanol, ethanol, dioxane or the like is mixed to precipitate sericin, which is then filtered and dried to obtain sericin powder.
(2) As proposed in JP-A-4-202435, a sericin powder is obtained by applying an ultrafiltration membrane or a reverse osmosis membrane, followed by drying.
またセリシンの加水分解物は、繭又は生糸から一般的に行われる抽出方法で得ることができる。
即ち、繭又は生糸に含有されるセリシンを、電気分解した水や、酸、アルカリもしくは酵素などによって部分加水分解して抽出してから、例えば同様に上記(1)、(2)のいずれかの方法で回収する。
Moreover, the hydrolyzate of sericin can be obtained by an extraction method generally performed from straw or raw silk.
That is, sericin contained in silkworms or raw silk is extracted by partial hydrolysis with electrolyzed water, acid, alkali or enzyme, and then, for example, either of the above (1) and (2) Collect by method.
繭はその良質なタンパク質が注目され、粉砕するなどして栄養源として食品に添加することが提案されているが、その繭タンパク質の一つであるセリシンが体内の消化酵素に対して消化性が低く、ダイエットや便秘解消に効果的であるということは全く知られていない。 The high quality protein of salmon has attracted attention, and it has been proposed to add it to food as a nutrient source by crushing it. However, sericin, one of the salmon proteins, is digestible to digestive enzymes in the body. It is not known at all to be low and effective in reducing diet and constipation.
難消化性であるセリシンは、腸内の活動を活発化させ、便の大腸通過時間を短縮させる働きがあり、有害・有毒物質を速やかに体外に排出させる。また余分な糖や脂質などを吸収しにくくするなど、食物繊維のような作用を示す。
このような直接的な効果だけでなく、吸収した水分により排便がスムーズになるなどの効果も有している。
Sericin, which is indigestible, activates activities in the intestines and shortens the transit time of the stool to the large intestine, and quickly releases harmful and toxic substances out of the body. It also acts like dietary fiber, making it difficult to absorb excess sugar and lipids.
In addition to such a direct effect, there are also effects such as smooth defecation due to absorbed moisture.
このセリシンは天然物由来であるため人体への安全性が高く、一般食品、一般飲料、さらには健康食品、特定保険用食品などの特別用途食品、その他経口摂取する適宜のもの(これらを本発明では飲食品と総称する)に添加して用いることができ、日常の食生活において無理なく摂取可能である。さらに水に可溶であるため、飲食品に添加しやすく様々な形状とすることができる。 Since this sericin is derived from a natural product, it is highly safe for the human body, and is suitable for general foods, general drinks, foods for special uses such as health foods, foods for specified insurance, etc. Can be added and used without difficulty in daily eating habits. Furthermore, since it is soluble in water, it can be easily added to foods and drinks and can have various shapes.
難消化剤としての好ましい形状の例としては、粉末状、溶液状、ゲル状、スティック状、顆粒状、カプセル状、錠剤がある。
摂取量も無毒性故特に制限はなく、通常1日の摂取量は1〜30g程度である。
Examples of preferable shapes as the indigestible agent include powder, solution, gel, stick, granule, capsule, and tablet.
The intake is not particularly limited because it is non-toxic, and the daily intake is usually about 1 to 30 g.
次に実施例により本発明を例証する。
〔製造例1〕 セリシン粉体の製造
繭1kgを水50L(リットル)中で95℃にて2時間処理し、セリシンを抽出した。得られた抽出液を平均孔径0.2μmのフィルターで濾過し、凝集物を除去した後、濾液を逆浸透膜により脱塩し、濃度0.2%の無色透明のセリシン水溶液を得た。この水溶液をエバポレーターを用いてセリシン濃度約2%にまで濃縮した後、凍結乾燥を行って、純度95%以上、平均分子量100,000のセリシン粉体(以下セリシンH)100gを得た。
The following examples illustrate the invention.
[Production Example 1] Production of
〔製造例2〕 セリシン加水分解物粉体の製造
繭1kgを0.2%炭酸ナトリウム水(pH11〜12)50L中で95℃にて2時間処理し、セリシン加水分解物を抽出した。得られた抽出液を平均孔径0.2μmのフィルターで濾過し、凝集物を除去した後、濾液を逆浸透膜により脱塩し、濃度0.2%の無色透明のセリシン加水分解物抽出液を得た。この抽出液をエバポレーターを用いてセリシン濃度約2%にまで濃縮した後、凍結乾燥を行って、純度90%以上、平均分子量20,000のセリシン加水分解物粉体(以下セリシンL)100gを得た。
[Production Example 2] Production of
〔試験例1〕 消化性試験
消化試験の試料としてセリシンLまたはカゼインを用い、各試料濃度が0.5%(pH2.0)溶液になるように塩酸を用いて調製し、蒸留水で100mlに合わせた。胃の消化酵素であるペプシン(シグマ社)5mg試料溶液に加え、37℃で24時間インキュベートし、適時にサンプリングを行った。インキュベート終了後、試料溶液100mlを0.1%(pH8.5)になるよう炭酸水素ナトリウムを用いて調製した。その後、十二指腸の消化酵素であるパンクレアチン(シグマ社)を2mg加え37℃で24時間インキュベートを行った。
[Test Example 1] Digestibility test Using sericin L or casein as a sample for the digestion test, each sample concentration was adjusted to 0.5% (pH 2.0) solution using hydrochloric acid and made up to 100 ml with distilled water. Combined. The sample was added to a 5 mg sample solution of pepsin (Sigma), which is a digestive enzyme of the stomach, incubated at 37 ° C. for 24 hours, and sampled at an appropriate time. After completion of the incubation, 100 ml of the sample solution was prepared using sodium hydrogen carbonate so as to be 0.1% (pH 8.5). Thereafter, 2 mg of pancreatin (Sigma), a digestive enzyme of the duodenum, was added and incubated at 37 ° C. for 24 hours.
ペプチドの濃度測定はTNBS(2,4,6−トリニトロベンゼンスルホン酸)法を用いて行った。サンプリングは全て0.5mlを採取し、30%TCA(トリクロロ酢酸)を0.1ml加え、遠心分離後、上清100μlに7%炭酸水素ナトリウムを3ml、0.1%TNBSを2ml加えて、37℃で2時間加温し、420nmの吸光度を測定した。
結果を図1、図2に示した。本試験では体内での消化酵素であるペプシンやパンクレアチンに対する影響を試験管内で確認した。TNBS法はタンパク質のアミノ末端と反応し、消化酵素で分解され易いほど、ペプチドが多く存在するためTNBS試薬との反応性が高まる。つまり値が高いほど消化酵素に対して分解されやすいことになる。カゼインに比べてセリシンはペプシン、パンクレアチンのいずれの消化酵素でも難消化性であることが確認された。
The peptide concentration was measured using the TNBS (2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid) method. For sampling, 0.5 ml was collected, 0.1 ml of 30% TCA (trichloroacetic acid) was added, and after centrifugation, 3 ml of 7% sodium bicarbonate and 2 ml of 0.1% TNBS were added to 100 μl of the supernatant. The mixture was heated at 0 ° C. for 2 hours, and the absorbance at 420 nm was measured.
The results are shown in FIGS. In this test, the effects on pepsin and pancreatin, which are digestive enzymes in the body, were confirmed in vitro. The TNBS method reacts with the amino terminus of a protein, and the more easily it is degraded by a digestive enzyme, the more the peptide is present, the more reactive with the TNBS reagent. In other words, the higher the value, the easier it is to decompose with digestive enzymes. Compared with casein, sericin was confirmed to be indigestible with both pepsin and pancreatin digestive enzymes.
〔試験例2〕 消化管輸送能試験
実験動物として、5週令の雄ICR系マウスを用いた。1群当たり10匹とし室温を24±1℃に保ち、12時間ごとの明暗交替(8:00〜20:00は明、20:00〜翌8:00は暗)の環境下で飼育を行った。予備飼育として1週間、市販の固形試料(MF、オリエンタル酵母(株))を与えた。試験日前日、終夜絶食させた後、1時間摂食させ摂食量がほぼ一定の動物を選別し、1群8匹として実験に用いた。消化管輸送能のマーカーとしてBTB(投与量:0.3%溶液を1匹当たり0.35ml)を経口投与し、同時にセリシンL(投与量:2g/体重kg)またはコントロール(カゼイン、投与量:2g/体重kg)を経口投与した。投与後25時間まで経時的に糞を採取した。この間、6時間及び23時間後に各1時間ずつ摂食させた。糞のBTB排泄量を測定した後、糞を24時間減圧乾燥し糞乾燥重量を測定した。なお有意差の判定にはStudentのt−検定を用いた。
[Test Example 2] Gastrointestinal transport ability test As a test animal, a 5-week-old male ICR mouse was used. 10 animals per group, keeping the room temperature at 24 ± 1 ° C., and rearing in an environment of light / dark alternation every 12 hours (8: 00 to 20: 00 is light, 20: 00 to the next 8:00 is dark) It was. A commercially available solid sample (MF, Oriental Yeast Co., Ltd.) was given for 1 week as a preliminary breeding. The animals were fasted overnight on the day before the test day and then fed for 1 hour to select animals with a substantially constant food intake, and 8 animals per group were used in the experiment. BTB (dose: 0.35 ml of 0.3% solution per mouse) was orally administered as a marker of gastrointestinal transport ability, and sericin L (dose: 2 g / kg body weight) or control (casein, dose: 2 g / kg body weight) was administered orally. Feces were collected over time until 25 hours after administration. During this time, the animals were fed for 1 hour each after 6 hours and 23 hours. After measuring the fecal BTB excretion, the feces were dried under reduced pressure for 24 hours, and the fecal dry weight was measured. Student's t-test was used to determine the significant difference.
その結果、セリシン群は糞重量がコントロール群に比べて有意に増加していた(図3)。糞の性状はコントルール群に比べてやや大きく、柔らかめであったが、水様便、粘液便などの下痢症状は見られなかった。
またコントロール群で摂食後、2〜4時間で糞中にBTBが見出され始め、6時間までにBTB総投与量の33.5%、8時間までに53.5%、25時間までに88.3%が排泄された。一方セリシン群では摂食後4〜8時間のBTB排泄率がコントルール群に比べて有意に高く、セリシンは消化管輸送速度を高める効果を確認した(図4)。
As a result, the sericin group significantly increased the fecal weight compared to the control group (FIG. 3). Feces were slightly larger and softer than the control rule group, but no diarrhea such as watery or mucous stool was observed.
In addition, BTB began to be found in
〔試験例3〕 便秘改善効果試験
実験動物として3週令の雄Sprague−Dawley系ラット(日本LSC(株))を用い、1群13匹とした。1匹ずつ金属ケージに入れ、室温を24±1℃に保ち、12時間ごとの明暗交替の環境下で飼育を行った。予備飼育として2週間、市販の固形試料(MF、オリエンタル酵母(株))を与えた後、セリシン群、コントロール群の2群に分け、実験食(表1)で7日間飼育を行った。なお1群は14匹とし、食事時間は全て14:00〜17:00に限定した。実験食開始から7日目の17:00に、各群を平均体重が等しくなるように2つのグループに分け、それぞれアトロピン塩酸塩(0.5mg/体重kg)または生理食塩水を腹腔内注射により投与した。注射後6時間(17:00〜23:00)の糞を採取し、減圧乾燥後、乾燥重量とした。なお有意差の判定にはDuncanの多重比較検定を用いた。
ヒトの便秘の多くは機能性便秘である。これは腸管平滑筋が副交換神経からアセチルコリンの遊離が減少することで、消化管運動や肛門機能を抑制した結果生じる便秘である。実験に用いたアトロピンはナス科のベラドンナから得られるアルカロイドに由来し、副交感神経遮断薬として用いられる為、アセチルコリン及びアセチルコリン様薬物の可逆的拮抗物質として機能性便秘を誘導する。
表2の結果より、セリシンはアトロピン投与によって低下した消化管機能の改善が認められたことから、セリシンの便秘改善効果を確認した。
[Test Example 3] Constipation-improving effect test Three-week-old male Sprague-Dawley rats (Japan LSC Co., Ltd.) were used as experimental animals, and each group consisted of 13 animals. Each animal was placed in a metal cage, kept at a room temperature of 24 ± 1 ° C., and bred in an environment of light / dark alternation every 12 hours. As a preliminary breeding, a commercially available solid sample (MF, Oriental Yeast Co., Ltd.) was given for 2 weeks, and then divided into two groups, a sericin group and a control group, and fed on an experimental diet (Table 1) for 7 days. One group consisted of 14 animals, and all meal times were limited to 14: 00-17: 00. At 17:00 on the seventh day from the start of the experimental diet, each group was divided into two groups so that the average body weights were equal, and atropine hydrochloride (0.5 mg / kg body weight) or physiological saline was injected intraperitoneally, respectively. Administered. Feces 6 hours after the injection (17: 00 to 23:00) were collected, dried under reduced pressure, and taken as the dry weight. Duncan's multiple comparison test was used to determine the significant difference.
Most human constipation is functional constipation. This is constipation resulting from the suppression of gastrointestinal motility and anal function by reducing the release of acetylcholine from the intestinal smooth muscle of the intestinal smooth muscle. The atropine used in the experiment is derived from an alkaloid obtained from the belladonna of the solanaceae family and is used as a parasympathetic nerve blocker, and therefore induces functional constipation as a reversible antagonist of acetylcholine and acetylcholine-like drugs.
From the results in Table 2, since sericin was found to improve the gastrointestinal function decreased by atropine administration, the effect of sericin on improving constipation was confirmed.
〔試験例4〕 脂肪蓄積抑制効果試験
実験動物として5週令の雄ICR系マウス(日本LSC(株))を用いた。1群12匹とし、表3に示す飼料及び水を自由摂取させ、室温を24±1℃に保ち、12時間ごとの明暗交替の環境下で8週間飼育を行った。試験終了後マウスを屠殺、解剖し、体重および腎付着脂肪重量を測定した。脂肪は体重当たりの腎付着脂肪重量割合を算出し、これを腎付着脂肪率とした。さらに血液から常法により血清を得て、トリグリセライド測定キット(トリグリセライド G−テストワコー 和光純薬工業(株))を用いて血清中のトリグリセライド濃度を測定した。なお有意差の判定にはDuncanの多重比較検定を用いた。
結果を表4に示した。各群の食事摂取量には有意差が見られなかったが、コントロール群に比べてセリシン群はセリシンの添加量に伴って、体重の抑制が確認された。さらにセリシン群では腎付着脂肪率も抑制し、血清中のトリグリセライド濃度も低下したことから、セリシンは脂肪の蓄積を抑制していることが確認された。
[Test Example 4] Fat accumulation inhibitory effect test As a laboratory animal, a 5-week-old male ICR mouse (Japan LSC Co., Ltd.) was used. Each group consisted of 12 animals, and was allowed to freely ingest the feed and water shown in Table 3, kept at room temperature of 24 ± 1 ° C., and reared for 8 weeks in an environment of alternating light and darkness every 12 hours. After the test was completed, the mice were sacrificed and dissected, and the body weight and kidney attached fat weight were measured. For fat, the weight ratio of kidney-attached fat per body weight was calculated, and this was defined as the kidney-attached fat ratio. Further, serum was obtained from blood by a conventional method, and the triglyceride concentration in the serum was measured using a triglyceride measurement kit (Triglyceride G-Test Wako, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). Duncan's multiple comparison test was used to determine the significant difference.
The results are shown in Table 4. Although no significant difference was observed in the dietary intake of each group, suppression of body weight was confirmed in the sericin group with the amount of sericin added compared to the control group. Furthermore, in the sericin group, the rate of fat adhering to the kidneys was also reduced, and the triglyceride concentration in the serum was also reduced, confirming that sericin inhibited fat accumulation.
セリシンは難消化性であり、胃や腸の働きを活性化させ、胃や腸内で余分な水分やコレステロール、有害物質、中性脂肪などを吸収しにくくし、脂肪蓄積抑制(ダイエット)や便秘解消効果に大いに効果がある。又セリシンは天然物由来のタンパク質としての特性を持ち、生体内では高い安全性を有するので、たとえ大量に摂取したとしても無害である。従って、日常の食生活において無理なく摂取可能であり、その効果はいっそう顕著なものとなりうる。 Sericin is indigestible, activates the function of the stomach and intestines, makes it difficult to absorb excess water, cholesterol, toxic substances, neutral fat, etc. in the stomach and intestines, suppresses fat accumulation (diet) and constipation There is a great effect on the cancellation effect. In addition, sericin has properties as a protein derived from natural products and has high safety in vivo, so it is harmless even if ingested in large quantities. Therefore, it can be taken without difficulty in daily eating habits, and the effect can be even more remarkable.
更に、本発明の有効成分であるセリシンは繭又は生糸の溶媒抽出物から、容易にしかも単一のタンパク質としては高い純度で抽出できるため、安価に得られ、しかも水溶液の色が無色透明であるので、消色する必要が無く、複雑な処理工程を必要としないという大きな利点がある。 Furthermore, since sericin, which is an active ingredient of the present invention, can be easily extracted from a cocoon or raw silk solvent extract with high purity as a single protein, it can be obtained at low cost, and the color of the aqueous solution is colorless and transparent. Therefore, there is a great advantage that there is no need to decolorize and no complicated processing steps are required.
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