JP2007198990A

JP2007198990A - 化学分析前処理装置

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Publication number: JP2007198990A
Application number: JP2006019960A
Authority: JP
Inventors: Hirotoshi Ishimaru; 博敏石丸; So Kato; 宗加藤; Yasuhiko Sasaki; 康彦佐々木; Shinichi Fukuzono; 真一福薗
Original assignee: Hitachi High Technologies Corp; Hitachi High Tech Corp
Current assignee: Hitachi High Tech Corp
Priority date: 2006-01-30
Filing date: 2006-01-30
Publication date: 2007-08-09
Anticipated expiration: 2026-01-30
Also published as: US8496890B2; US20070178017A1; JP4906362B2

Abstract

【課題】多目的，多品種，微量液に対応が可能で、正確で再現性に富み信頼性に優れた化学分析前処理装置を得る。
【解決手段】試料液及び試薬を保持する容器（２０１，２０２，２０３）を試薬リザーバ１０２に複数個有し、試料液及び試薬を送液及び混合する化学分析前処理装置において、複数の容器を直列に接続する流路（２０７，２０８，２０９，２１０）と、流路の間に透析膜６０１を挟んだ透析流路２０４２と、を備え、容器から流路への送液及び送液の停止による戻りを行うことで混合し、その後透析流路へ流入させる。
【選択図】図３

Description

本発明は、試料液と試薬類を送液，混合，阻害物質を除去したりする化学分析前処理装置に関し、特にタンパク質の機能解析のために、タンパク質試料からタンパク質断片化までを行うものに好適である。

タンパク質試料からの１次構造情報を取得するため、疎水表面を有する有機ポリマー，シリカ、またはガラス製の疎水性微細粒子担体をピペットチップに充填し、溶液ハンドリングロボットを使って、タンパク質試料溶液の吸入および排出を繰り返すことによって、タンパク質を疎水性微細粒子担体固定化し、予め各試薬を充填したウェルプレートの溶液を吸入および排出することでタンパク質を断片化し、断片化されたペプチドの一次構造を取得することが知られ、例えば、特許文献１に記載されている。

また、各種液体の品質を評価する分析装置において、ブロックの間隙で液体流路を形成し、分析流路に攪拌部，混合部、を設け、試薬流路から流量調節弁を介して混合部に試薬を供給することが特許文献２に記載されている。

特開２００４−３０１７１５号公報特開平１０−１７０４９５号公報（図６）

上記従来技術の特許文献１に記載のものでは、作業者がタンパク質試料をエッペンチューブなどに採取し、そこへ各試薬を分注して各過程の反応を行い、透析膜を貼り付けた専用透析容器へ各反応後の試料を移し替え、試料の透析を実施後、再度、エッペンチューブなどに透析後の試料を移し替え、分解酵素によりタンパク質の断片化を実施するなど、タンパク質試料から、タンパク質断片化までの過程は長時間にわたり、その間、拘束される。また、試料の移送のためにハンドリングロボットを搭載しているが、装置全体が大型化し、機構も複雑であるため、定期的なメンテナンスが必要になる。

さらに、特許文献２に記載のものでは、ブロック内に流量調整弁，逆流調整弁等を必須とするため、数〜数十マイクロリットルと言う微量液を扱う場合に適用することが困難であり、正確な液量採取や希釈の調整，補正を行うことができず、試料のコンタミネーション（特に雑菌混入，純粋培養に何らかの原因で、異種の微生物が混入して発育してしまう事。）、漏洩の恐れがある。

本発明の目的は、上記従来技術の課題を解決し、多目的，多品種，微量液に対応が可能で、正確で再現性に富み信頼性に優れた前処理を行い、特に、多様なタンパク質の１次構造解析ニーズに対応するためタンパク質試料からタンパク質断片化までの過程を自動一貫処理するに適したものとすることにある。

上記課題を解決するため、本発明は、試料液及び試薬を保持する容器を試薬リザーバに複数個有し、前記試料液及び試薬を送液及び混合する化学分析前処理装置において、複数の前記容器を直列に接続する流路と、前記流路の間に透析膜を挟んだ透析流路と、を備え、前記容器から前記流路への送液及び送液の停止による戻りを行うことで混合し、その後前記透析流路へ流入させるものである。

本発明によれば、試薬リザーバ内部で複数の容器及び透析膜を挟んだ透析流路を直列に接続し、送液及び送液の停止により混合するので、化学分析向けの前処理プロトコルを集積化することができ、多目的，多品種，微量液に対応して前処理プロトコルの全工程を信頼性を高めて一貫処理できる。

タンパク質機能解析分野においては、細胞内外のタンパク質の機能解析および、細胞系や無細胞系で人為的に発現したタンパク質の系統的な機能解析へのニーズが増進している。タンパク質の機能解析のためには、まずタンパク質の一次構造を解析する必要があり、その解析を行うためにはタンパク質を断片化してペプチド化する必要があるが、タンパク質は多様であり、必ずしも画一的にペプチド化はできないのが現状である。

そこで、物質の検出や化学的組成の決定のため、化学分析前処理が行われ、一般的なタンパク質の質量分析前処理プロトコルとしては、変性・還元化工程，アルキル化工程，脱塩工程，酵素消化工程の４つの工程が必要とされる。つまり、タンパク質を含む試料に変性試薬，還元化試薬を分注後、良く攪拌して中間生成物Ａを生成し、中間生成物Ａにアルキル化試薬を分注後、良く攪拌して透析試料を生成し、試料中の塩を脱塩し、中間生成物Ｂを生成する。最後にその中間生成物Ｂに酵素を分注後、タンパク質の酵素消化を行い、最終生成物を生成する。この最終生成物が質量分析計によって解析される試料になる。

図１は一実施の形態による化学分析前処理装置の概要を示す。

化学分析前処理装置１０１は、試料や試薬などを保持できる複数の容器と透析流路を備えた試薬リザーバ１０２，透析バッファを保持できる透析バッファ容器１０３，各試料や試薬などの送液を可能にするエアーラインマニホールド１０４と圧力源となるシリンジポンプ１０５などで構成されている。また、試薬リザーバ１０２と透析バッファ容器１０３とエアーラインマニホールド１０４は固定治具１０６によって、それぞれが着脱可能で且つ各部品の流路の繋ぎ目が十分シールできる程度に固定されている。

液体送液システムは、電磁弁１０７を搭載したエアーラインマニホールド１０４とシリンジ１０８，シリンダ固定部品１０９，ピストンを駆動させる支持板１１０，支持板110をスライドさせるドライブシャフト１１１と駆動源となるモーター１１２などから構成されている。

図２の上図は試薬リザーバ１０２の上面図、下図にＡ−Ａ断面図をそれぞれ示す。試薬リザーバ１０２には試料を保持する試料保持容器２０１，還元化試薬を保持し、且つ試料の還元化を実施する還元化容器２０２，アルキル化試薬を保持し、且つ試料のアルキル化を実施するアルキル化容器２０３，試料側透析流路２０４１，酵素を保持し、且つ酵素消化を実施する酵素消化容器２０５，酵素消化が完了した試料を回収し、且つ保持する試料回収容器２０６を設けている。そして、それらの各容器は送液流路２０７，２０８，209，２１０で直列に接続されている。

図３は図２に示した試薬リザーバ１０２のＡ−Ａ断面図と試薬リザーバ１０２に着脱可能で、且つ圧力のシールが可能な程度に固定された液体送液システム３０１の模式図を示す。液体送液システム３０１はシリンジポンプ１０５および、試薬リザーバ１０２の各容器内の圧力を大気開放するための電磁弁３０２，３０３，３０４，３０５，３０６と、シリンジポンプ１０５からの圧力を伝達するための電磁弁３０７，３０８，３０９，３１０，３１１などから構成されている。

試料保持容器２０１から還元化容器２０２へ液体を送液するときは、試料保持容器201へ接続されている圧力伝達用の電磁弁３０７と還元化容器２０２に接続されている大気開放用の電磁弁３０３を開き、シリンジポンプ１０５を駆動する。そして、液体は試料保持容器２０１の底部から流出し、送液流路２０７を通過して、還元化容器２０２へと流入する。送液が完了した時点でシリンジポンプ１０５を停止し、両電磁弁３０３、３０７を閉じる。次に、液体をアルキル化容器２０３へ送液するため、電磁弁３０８と電磁弁３０４を開き、シリンジポンプ１０５を駆動する。送液終了後はシリンジポンプ１０５と両電磁弁３０４，３０８を停止する。

液体を酵素消化容器２０５へ送液するときは、電磁弁３０９と電磁弁３０５を開き、シリンジポンプ１０５を駆動する。送液終了後はシリンジポンプ１０５と電磁弁３０５，
３０９は停止する。最後に液体を試料回収容器２０６へ送液するため、電磁弁３１０と電磁弁３０６を開き、シリンジポンプ１０５を駆動する。

試料回収容器２０６への送液が終了後、シリンジポンプ１０５と両電磁弁３０６，310を停止する。即ち、液体を保持している容器から次段容器へと送液する時は、液体を保持している容器へ接続されている圧力伝達用の電磁弁と次段容器に接続されている大気開放用の電磁弁を開き、シリンジポンプ１０５を駆動する。そして、容器から容器への送液を可能にしている。送液後はシリンジポンプ１０５と両電磁弁を停止する。エアーラインマニホールド１０４と試薬リザーバ１０２内に残圧が発生すると、液の保持力に悪影響を及ぼすため、シリンジポンプ１０５，圧力伝達用の電磁弁，大気開放用の電磁弁は、全て同時に停止しても良いが、この順番で停止することが動作を確実にするうえでは望ましい。

前処理プロトコルを実現するための基本要素は、液量が、数マイクロリットルから数十マイクロリットルオーダーの送液，２液の攪拌，透析膜を用いた試料の透析であり、試薬リザーバ１０２の容器形状について説明する。

図４上図は、図２に示した試薬リザーバ１０２Ａ−Ａ要部断面図を示し、試薬リザーバ１０２に設けている各容器は下流（容器底部）に行くに従い徐々に容器断面が縮小する形状であり、その容器の最下底部に送液流路２０７，２０８を接続されている。送液流路
２０７，２０８は容器壁面２０１１に対して略垂直方向に接続されている。送液中に発生する残液を極力少なくするために送液流路２０７，２０８の断面形状は円形が望ましい。但し、液回収率が低くて良いのであれば、或いは、流路断面積が微小で断面形状のアスペクト比が１に近く、且つ送液時の流路抵抗を無視できるほどの圧力源を備えているならば、送液流路２０７，２０８の断面は矩形形状でも残液は生じない。

送液流路２０７，２０８の容積は、試料の全液または液の一部を送液して保持できる程度の容積を有している。前段容器と次段容器を接続する流路は、省スペース化のために２次元の蛇行流路になっているが、渦巻き流路や３次元の蛇行流路でも同等の送液が実施できる。

次に２液攪拌について説明する。図４下図は、図４上図に示した領域Ｂの拡大図を示す。即ち図４上図は試薬リザーバ１０２に設けられた試料保持容器２０１の底部と送液流路２０７の接続部の拡大図である。図に示すように容器に溶液Ａ４０２と溶液Ｂ４０３を保持し、これからその２液を攪拌するところであり、２液の全液、或いは液の一部が一旦、送液流路２０７に送液され、送液を止めて、矢印４０４の方向即ち、試料保持容器２０１へ戻す方向へ送液する。そうすることによって、送液流路２０７から試料保持容器２０１へ戻ってきた流れが、容器壁面２０１１に衝突して、容器底部において矢印４０５に示すように流れが転向し、微少流量であっても２液の攪拌が効率良く、確実に行われる。さらに、一旦送液流路２０７に保持された２液の全部或いは一部を容器に戻した後も往復送液４０６を繰り返せば２液の攪拌効果は向上する。
なお、送液流路２０７が試薬保持容器壁面２０１１に対して略垂直方向に接続されているが、送液流路２０７から試料保持容器２０１への流入角度が大きければその分、攪拌の効果も大きくなる。

次に送液流路２０７から還元化容器２０２への接続について説明する。図５上図は図２上図に示した試薬リザーバ１０２のＡ−Ａ要部断面図を示す。図５下図は領域Ｃの拡大図を示す。送液流路２０７と還元化容器２０２への接続は還元化容器２０２へ送液された液面５０１よりも上方に接続部５０２を設ける。そして、その接続方向は容器に対して下方を向いており、試料保持容器２０１から送液する液体が還元化容器２０２の底部に保持されるように送液流路２０７を接続する。なお、接続する容器への接続角度は容器壁面2021に沿った角度が好ましいが、その角度を実現するためには、送液流路接続部５０２より下流の流路曲がり部５０３の曲がり角度が鋭角となり圧力損失が増大するので、流路曲がり部５０３の曲がり角度が鋭角にならないようにすることが良い。

次に透析膜を用いた試料の透析について説明する。図６上図と図７上図は、図２上図に示した試薬リザーバ１０２のＡ−Ａ断面図を示す。図６下図は、Ｂ−Ｂ要部断面図を示す。図７下図は、Ｃ−Ｃ要部断面図を示す。

試料の前処理プロトコルは酵素消化を行うために試料中の塩７０１を除去する脱塩工程が含まれている。即ち、試薬リザーバ１０２のアルキル化容器２０３と酵素消化容器205の間に透析流路２０４をマイクロ流路で設け、化学分析の前処理プロトコルの一貫処理を実現し、脱塩工程を高速化している。

透析流路２０４は、試料側透析流路２０４１と透析バッファ側透析流路２０４２を対向する位置に配置しており、それらの間に透析膜６０１を挟んでいる。試料および透析バッファが、試料側透析流路２０４１および透析バッファ側透析流路２０４２に対して略垂直方向へ流入する位置となるように送液流路２０９を接続する。アルキル化容器２０３から流出した試料は、送液流路２０９を通過して試料側透析流路２０４１へ流入し、保持される。一方透析バッファ容器１０３から流出した透析バッファは送液流路６０２を通過し、透析バッファ側透析流路２０４２へ流入し、保持される。そして、図７下図に示すように透析膜６０１を介して両液が接触している状態を保持し、且つ透析膜６０１近傍での塩濃度勾配により試料に含まれる塩７０１が透析バッファ側へ透析される。

化学分析前処理装置１０１が実施する一般的なタンパク質の質量分析前処理プロトコルについて説明する。

図８は、タンパク質の一般的な質量分析前処理プロトコルを示し、前処理プロトコルは、変性・還元化工程，アルキル化工程，脱塩工程，酵素消化工程の４つの工程から構成されている。つまり、タンパク質を含む試料に変性試薬，還元化試薬を分注後、良く攪拌して中間生成物Ａを生成する。次に中間生成物Ａにアルキル化試薬を分注後、良く攪拌して透析試料を生成する。次に透析試料と透析バッファを透析膜６０１を介して接触させ試料中の塩７０１を脱塩し、中間生成物Ｂを生成する。最後にその中間生成物Ｂに酵素を分注後、タンパク質の酵素消化を行い、最終生成物を生成する。この最終生成物が質量分析計によって解析される試料になる。

化学分析前処理装置を使用した場合のプロトコルの実行例について説明する。

図９上図は試薬リザーバ１０２と透析バッファ容器１０３を組み合わせた状態の上面図である。図９、中図はＤ−Ｄ断面図で、下図は、Ｅ−Ｅ断面図である。図１０，図１１，図１２，図１３，図１４，図１５はＤ−Ｄ断面図およびＥ−Ｅ断面図であり、プロトコルの各ステップである。

図９、中図に示すように最初に試薬リザーバ１０２の試料保持容器２０１にタンパク質試料９０１と変性試薬９０２を分注する。そして、還元化容器２０２には還元化試薬903，アルキル化容器２０３にはアルキル化試薬９０４，酵素消化容器２０５には酵素９０５，透析バッファ保持容器１０３１には透析バッファ９０６をそれぞれ分注し、その状態を保持する。その後、試薬リザーバ１０２と透析バッファ容器１０３にエアーラインマニホールド１０４を組み合わせる（図示せず）。

エアーラインマニホールド１０４は固定治具１０６によって、試薬リザーバ１０２と透析バッファ容器１０３に脱着可能で、且つ各容器から圧力を十分シールできる程度に固定されている。なお、試料，試薬類の分注，装置の組立より以降の作業は全て自動で行うため、電磁弁の開閉とシリンジポンプの駆動はすべて、事前にプログラムされたＰＣで自動制御される。

プロトコルの変性・還元化工程では、まず電磁弁３０３と電磁弁３０７を開きシリンジポンプ１０５を駆動することによって試料保持容器２０１に保持されたタンパク質試料
９０１と変性試薬９０２を一旦送液流路２０７に送液し保持する。その後、シリンジポンプ１０５と電磁弁３０３と電磁弁３０７は停止する。次に、電磁弁３０３と電磁弁３０７を開き、シリンジポンプ１０５を駆動することによって送液流路２０７中に保持されたタンパク質試料９０１と変性試薬９０２を試料保持容器２０１へと戻す。その後シリンジポンプ１０５と電磁弁３０３と電磁弁３０７は停止する。再度、電磁弁３０３と電磁弁307を開き、シリンジポンプ１０５を駆動することによって、試料保持容器２０１にある変性後のタンパク質試料１００１を還元化容器２０２へと移送する（図１０）。

一連の液体の移送は前段の容器と次段の容器の圧力差によるものであるため、それ以降のアルキル化試薬９０４，透析バッファ９０６，酵素９０５が保持されている容器には影響しないため、それらの試薬類はそれぞれの容器に保持された状態を維持できる。

次に電磁弁３０４と電磁弁３０８を開き、シリンジポンプ１０５を駆動することにより変性後のタンパク質試料１００１と還元化試薬９０３を送液流路２０８へ送液し保持する。次に、電磁弁３０４と電磁弁３０８とシリンジポンプ１０５は停止する。そして電磁弁３０４と電磁弁３０８を開きシリンジポンプ１０５を駆動することによって、送液流路
２０８中に保持されている変性後のタンパク質試料１００１と還元化試薬９０３を還元化容器２０２へと戻す。この時、中間生成物Ａ１１０１が生成される。電磁弁３０４と電磁弁３０８とシリンジポンプ１０５は停止する。

再度電磁弁３０４と電磁弁３０８を開き、シリンジポンプ１０５を駆動することにより、中間生成物Ａ１１０１をアルキル化容器２０３へと移送する（図１１）。その後、電磁弁３０４と電磁弁３０８とシリンジポンプ１０５は停止する。

次に電磁弁３０９と電磁弁３０５を開きシリンジポンプ１０５を駆動することによって、アルキル化容器２０３に保持された中間生成物Ａ１１０１とアルキル化試薬９０４を一旦送液流路２０９へ送液して保持する。電磁弁３０９と電磁弁３０５とシリンジポンプ
１０５を停止する。電磁弁３０５と電磁弁３０９を開きシリンジポンプ１０５を駆動することによって送液流路２０９に保持された中間生成物Ａ１１０１とアルキル化試薬９０４をアルキル化容器２０３へ戻す。この時、透析試料１２０１が生成される。電磁弁３０５と電磁弁３０９を開きシリンジポンプ１０５を駆動することによって、透析試料１２０１を試料側透析流路２０４１へ移送し、保持する（図１２）。その後電磁弁３０５と電磁弁３０９とシリンジポンプ１０５は停止する。

次に図１３に示すように電磁弁１３０１と電磁弁１３０２を開き、シリンジポンプ105を駆動することによって、透析バッファ９０６を移送し、バッファ側透析流路２０４２に送液し、そこに保持する（図１３）。電磁弁１３０１と電磁弁１３０２とシリンジポンプ１０５を停止する。この状態を維持することによって、透析試料１２０１に含まれる塩
７０１を脱塩する。時間経過とともに透析膜近傍の塩濃度勾配が均一になり、透析効率が低下する。よって、一定時間が経過したら再度電磁弁１３０１と電磁弁１３０２を開き、シリンジポンプ１０５を駆動することによって、塩濃度が高くなった透析バッファ９０６を透析バッファ回収容器１３０３へ廃液し、バッファ側透析流路２０４２には新鮮な透析バッファ９０６が送液される。

透析試料１２０１は試料側透析流路２０４１に保持された状態を維持し、バッファ側透析流路２０４２に透析バッファ９０６を保持する。電磁弁１３０１と電磁弁１３０２とシリンジポンプ１０５を停止する。タンパク試料の脱塩が終了するまでこの操作を繰り返す。透析バッファ９０６を一定時間で交換することによって透析膜近傍の塩濃度勾配を高い状態に保ち、効率の良い脱塩を行う。また、塩７０１の拡散速度に見合った流速で透析バッファ９０６を常時、送液し続けることでも効率の良い透析が行える。脱塩が終了し中間生成物Ｂ１４０１が生成される。

次に電磁弁３０５と電磁弁３０９を開き、シリンジポンプ１０５を駆動することにより、中間生成物Ｂ１４０１を酵素消化容器２０５へ移送する（図１４）。電磁弁３０５と電磁弁３０９とシリンジポンプ１０５は停止する。電磁弁３０６と電磁弁３１０を開きシリンジポンプ１０５を駆動することにより、酵素消化容器２０５に保持された中間生成物
Ｂ１４０１と酵素９０５を一旦送液流路２１０に送液し、保持する。電磁弁３０６と電磁弁３１０とシリンジポンプ１０５を停止する。電磁弁３０６と電磁弁３１０を開き、シリンジポンプ１０５を駆動することにより、送液流路２１０に保持された中間生成物Ｂ1401と酵素９０５を酵素消化容器２０５に戻す。その時、最終生成物１５０１が生成される。電磁弁３０６と電磁弁３１０とシリンジポンプ１０５を停止する。最後に電磁弁３０６と電磁弁３１０を開き、シリンジポンプ１０５を駆動することによって、最終生成物1501を試料回収容器２０６へと移送する（図１５）。その最終生成物１５０１が、前処理プロトコルが完了した試料である。

なお、前処理プロトコルの各工程において、温度制御などが必要な場合は、試薬リザーバ１０２内の各容器近辺にヒートブロック（図示せず）等の温度調節可能な熱源を設けると良い。また、制御するべき目標温度が低温ならば、装置全体を常時、炉の中に導入して前処理プロトコルを実行しても良い。試薬リザーバ１０２，透析バッファ容器１０３，エアーラインマニホールド１０４の材質は、タンパク質などの非特異吸着を回避できる材料なら何でも良い。例えばポリカーボネートやエッペンチップなどに用いられるポリプロピレンである。

図１６上図は試薬リザーバ１０２の第２実施形態の上面図であり、下図はＦ−Ｆ断面図である。送液流路２０７，２０８，２０９，２１０は必ずしも各容器の下方に位置する必要は無く、各容器と送液流路１６０１，１６０２，１６０３を同じ高さに設けても良く、同様の前処理性能を得ることができる。

図１７上図は試薬リザーバ１０２の第３実施形態の上面図であり、中図はＧ−Ｇ断面図、下図Ｈ−Ｈ断面図を示す。試薬リザーバ１０２の送液流路１７０１，１７０２，1703，２０４１は、必ずしも鉛直方向に蛇行する必要は無く、水平方向に蛇行して設けても良い。

本発明の一実施の形態である化学分析前処理装置の斜視図。一実施の形態である試薬リザーバの上面図，断面図。一実施の形態における液体送液システムの模式図。一実施の形態における試薬リザーバの要部断面図。一実施の形態における試薬リザーバ要部断面図。一実施の形態における透析流路の断面図。他の実施の形態における透析流路の断面図。タンパク質質量分析前処理プロトコルを示すフローチャート。一実施の形態における試薬リザーバの部品組立上面図，要部断面図。一実施の形態における前処理過程を説明するブロック図。一実施の形態における前処理過程を説明するブロック図。一実施の形態における前処理過程を説明するブロック図。一実施の形態における前処理過程を説明するブロック図。一実施の形態における前処理過程を説明するブロック図。一実施の形態における前処理過程を説明するブロック図。他の実施の形態による試薬リザーバの上面図，断面図。さらに、他の実施の形態による試薬リザーバの上面図，断面図。

符号の説明

１０１…化学分析前処理装置、１０２…試薬リザーバ、２０１…試料保持容器、２０２…還元化容器、２０３…アルキル化容器、２０５…酵素消化容器、２０６…試料回収容器、２０７，２０８，２０９，２１０…送液流路、６０１…透析膜、２０４２…透析流路。

Claims

試料液及び試薬を保持する容器を試薬リザーバに複数個有し、前記試料液及び試薬を送液及び混合する化学分析前処理装置において、
複数の前記容器を直列に接続する流路と、前記流路の間に透析膜を挟んだ透析流路と、を備え、前記容器から前記流路への送液及び送液の停止による戻りを行うことで混合し、その後前記透析流路へ流入させることを特徴とする化学分析前処理装置。
請求項１に記載のものにおいて、前記試薬リザーバには前記試料を保持する試料保持容器，還元化試薬を保持する還元化容器，アルキル化試薬を保持するアルキル化容器，前記透析流路，酵素を保持する酵素消化容器，酵素消化が完了した前記試料を回収する試料回収容器の順に設けられていることを特徴とする化学分析前処理装置。
請求項１に記載のものにおいて、前記容器はその断面積が下方へ縮小する形状であり、前記流路は前記容器の底部に接続されていることを特徴とする化学分析前処理装置。
請求項１に記載のものにおいて、前記流路は第１の前記容器の底部に接続され、さらに次段となる第２の前記容器の側壁となる容器壁面に接続されていることを特徴とする化学分析前処理装置。
請求項１に記載のものにおいて、前記流路は第１の前記容器に接続され、さらに次段となる第２の前記容器の側壁となる容器壁面で第２の前記容器の液面高さよりも高い位置に接続されることを特徴とする化学分析前処理装置。
請求項１に記載のものにおいて、前記流路は第１の前記容器に接続され、さらに次段となる第２の前記容器の側壁となる容器壁面に、その接続方向が容器下方となるように接続されていることを特徴とする化学分析前処理装置。
請求項１に記載のものにおいて、前記流路は、透析膜に対して垂直方向に接続されたことを特徴とする化学分析前処理装置。
請求項１に記載のものにおいて、前記透析流路において脱塩を行うことを特徴とする化学分析前処理装置。