JP2006345870A - ストレスの判定方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】唾液中のα−アミラーゼに注目し、ストレスがかかった被験者ではα−アミラーゼ活性が高いことから、被験者の唾液中に存在するα-アミラーゼ活性を指標とし、被験者の唾液中のα-アミラーゼ活性の経時変化における時間勾配に関し、正の時間勾配の大きさから不快なストレス(distress)の大きさの程度を、負の時間勾配の大きさから快適なストレス(eustress)の大きさの程度を判定するストレス判定方法による。
【選択図】図3
Description
1.被験者の唾液中に存在するα-アミラーゼ活性を指標にすることを特徴とする被験者のストレス判定方法であって、被験者の唾液中のα-アミラーゼ活性の経時変化における時間勾配に関し、正の時間勾配の大きさから不快なストレス(distress)の大きさの程度を、負の時間勾配の大きさから快適なストレス(eustress)の大きさの程度を判定するストレス判定方法。
本発明において唾液の採取は、被験者の身体または精神にストレスをかけることなく行う。特に、唾液の採取量は微量で十分であるので、被験者にストレスを与えることなく短時間で採取できるものが望ましい。さらに、唾液の採取には、毛細管現象を利用して採取することが好ましい。
本発明によるストレス判定装置では、毛細管現象を利用して微量の唾液を瞬時に採取できるような採取部を備えることが好ましい。
ストレス判定の指標となるα-アミラーゼの酵素活性測定には、すでに公知となっている測定法が利用できるが、特に酵素センサ等の技術により短時間で簡便に測定することが好ましい。具体的には、唾液中のα-アミラーゼを基質に作用させ、必要により追随酵素(共役酵素)を作用させて生成した該酵素反応生成物を検出して、α-アミラーゼ活性を測定する。前記基質としては、デンプンまたはオリゴ糖、およびこれらの誘導体などがある(臨床検査提要改定版第31版622〜626頁)。
α-アミラーゼ グルコシダーゼ
デンプン → マルトース → ブドウ糖(C6H12O6)
グルコースオキシダーゼ(GOD)
C6H12O6 + O2 → C6H10O6 + H2O2
H2O2 → 2H+ + 2e- + O2
(電流検出)
具体的には、下記の一般式よりなる修飾マルトオリゴ糖がα-アミラーゼの基質となり得る。
本発明のα-アミラーゼ活性の測定は、採取された唾液濃度は薄めることなくそのまま測定に付される。基質濃度は、自体公知の最適量が使用される。通常は0.05mM〜1M程度の濃度になるように調製される。反応温度は、特に限定されないが、好ましくは約25〜40℃である。反応時間は、1〜10数分で十分であるが、基質および共役酵素の種類に依存する。反応至適pHは特に限定されないが、所望により適当な緩衝液でpH6〜8に調節しても良い。さらに、所望により、反応の促進のために、公知のα-アミラーゼの活性化剤を用いてもよい。
本発明のストレス判定装置は、α-アミラーゼ酵素活性測定可能なセンサ部を有する。本発明において使用する唾液中のα−アミラーゼ活性を簡便に測定することができるセンサとは、(1)少なくとも2つの電極とα-アミラーゼの基質、必要により追随酵素(共役酵素)(α−グルコシダーゼ、β−グルコシダーゼ、グルコースオキシダーゼなど)を含む電気化学センサ、(2)少なくともα-アミラーゼ基質(例えば、p−ニトロフェニルマルトトリオシド)からα-アミラーゼ反応により生成する色素(例えばp−ニトロフェノール)、またはα-アミラーゼ基質(例えばデンプン)からα-アミラーゼ、α-グルコシダーゼおよびグルコースオキシダーゼの反応により生成した過酸化水素に、ぺルオキシダーゼ、4−アミノアンチピリンおよびアニリン類またはフェノール類を反応させて生成する色素を認識する化学センサ、(3)少なくともα-アミラーゼ基質、発光素子、受光素子および光反射面を担持する、表面プラズモン共鳴を利用するセンサ等が含まれる。なお、追随酵素(共役酵素)は、固定化されていることがより好ましい。
本発明におけるストレスとは、肉体的ストレス、精神的ストレスのいずれも包含する。本発明のストレス判定法は、唾液中のα−アミラーゼ量、特に酵素活性により判定する。
任意に選出した4名の被験者を用いて、コールドプレッサーテストを実施し、ストレスの判定を試みた。コールドプレッサーテストとは、片手を手首のところまで氷水の入った容器に30秒間浸し、その後容器から手を出し30秒間休む。これを7回繰り返すことでストレスをかけるテストである。
任意に選出した2名の被験者を用いて、クレペリンテストを実施し、ストレスの判定を試みた。クレペリンテストとは、心理検査の一手法として考案されている筆記試験で、一桁の数値が並んでいる用紙を用いて被験者に足し算を連続して行わせる、精神的苦痛を与えるストレス負荷試験である。
ここでも、実施例1と同様にクレペリンテストすなわちストレスによりα-アミラーゼの活性値が上昇し、クレペリンテストが終了するとα-アミラーゼの活性値は低下した。
任意に選出した1名の被験者を用いて、ミラードローイングテストを実施し、ストレスの判定を試みた。ミラードローイングテストとは、自分の手を直接見られない様に仕切りを立て、鏡に映った像を見ながら所定の経路をペンで描かせるストレス負荷試験である。本試験では、二重の星型の線が印刷された用紙を用い、線の間をはみ出さない様にペンで描かせた。はみ出したらもう一度スタート地点からやり直すというペナルティを与え、5分間継続させた。
実施例1、2と同様にミラードローイングテストすなわちストレスによりα-アミラーゼの活性値が上昇し、ミラードローイングテストが終了するとα-アミラーゼの活性値は低下した。
任意に選出した2名の被験者を用いて、穿刺テストを実施し、ストレスの判定を試みた。これは、血糖測定用の針を用いて指尖を自ら穿刺させることによりストレスを与えるテストである。
任意に選出した1名の被験者を用いて、クレペリンテスト実施後のリラクゼーション効果の判定を試みた。
これは、精神的ストレス負荷であるクレペリンテストを実施後に、座位または仰臥位の姿勢をとってもらう、またはマッサージを受けてもらうことによるリラクゼーション効果との関係をみることで、快適なストレス(eustress)の大きさを判定するものである。
B:溝
C:試験紙
1:測定孔(直径1.6mm)
2:上板(ポリエステル)
3:毛細管形成板(ポリエステル)
4:下板(ポリエステル)
5:界面活性剤
Claims (1)
- 被験者の唾液中に存在するα-アミラーゼ活性を指標にすることを特徴とする被験者のストレス判定方法であって、被験者の唾液中のα-アミラーゼ活性の経時変化における時間勾配に関し、正の時間勾配の大きさから不快なストレス(distress)の大きさの程度を、負の時間勾配の大きさから快適なストレス(eustress)の大きさの程度を判定するストレス判定方法。
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EP2394518A1 (en) * | 2009-02-04 | 2011-12-14 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing noodle, and enzyme preparation for modifying noodle |
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2006
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Cited By (3)
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EP2394518A4 (en) * | 2009-02-04 | 2012-08-01 | Ajinomoto Kk | PROCESS FOR THE PREPARATION OF NOODLES AND ENZYPROPARATES FOR THE MODIFICATION OF NOODLES |
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