JP2006325444A - 細胞増殖培地 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 MAPキナーゼ阻害剤或いはp38MAPキナーゼ阻害剤を添加することでp16INK4aタンパク質発現を抑制し正常細胞を良好に増殖させる培地。
【選択図】なし
Description
特許文献1ではRb/INK4a経路を阻害する遺伝子を細胞に導入することで係る問題の解決を図っているが、目的とする個々の細胞について遺伝子導入をする必要があり煩雑である。また、特許文献2では培地中に増殖因子を添加することで細胞寿命の延長を図っているが、この場合でもなおRb/INK4a経路は保持されているため、やがて細胞老化に至る。
すなわち、本発明は:
[1]Rb/INK4a経路を不活性化する物質を含有すること特徴とする細胞増殖培地;
[2]Rb/INK4a経路を不活性化する物質がp16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質である[1]の細胞増殖培地;
[3]p16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質がMAPキナーゼ阻害剤である[2]の細胞増殖培地;
[4]p16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質がp38MAPキナーゼ阻害剤である[2]の細胞増殖培地;
[5]間葉系幹細胞の増殖培地である[1]〜[4]のいずれかの細胞増殖培地;
[6][1]〜[4]のいずれかの培地を用いて培養された細胞培養物;
[7]間葉系幹細胞の培養物である[6]の細胞培養物;
[8]Rb/INK4a経路を不活性化する物質の存在下で細胞を培養する工程を包含する細胞増殖方法;
[9]Rb/INK4a経路を不活性化する物質がp16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質である[8]の細胞増殖方法;
[10]p16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質がMAPキナーゼ阻害剤である[9]の細胞増殖方法;
[11]p16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質がp38MAPキナーゼ阻害剤である[9]の細胞増殖方法;
[12]細胞が間葉系幹細胞である[8]〜[11]のいずれかの細胞増殖方法
に関する。
実施例1 MAKキナーゼ阻害剤及びp38MAPキナーゼ阻害剤によるp16INK4aタンパク質の低下
Cambrex社から購入したヒト間葉系幹細胞をMF培地(東洋紡社製)で3〜5代継代培養し以下の実験に供した。細胞は37℃にて5%CO2存在下で培養した。
培養したヒト間葉系幹細胞をMF培地で6ウェルプレート(ファルコン社製)に200細胞/ウェルになるよう播種した。その後、SB203580(p38キナーゼ阻害剤阻害剤、メルク社製)を最終濃度2.6μMになるよう添加し、ヒト間葉系幹細胞を10日間培養した(図2中、「添加」)。培養後、細胞を回収し、細胞数を測定した。無添加対照での細胞数を100とした場合の相対的細胞量を計算した(図2中、「細胞量」)。その結果、図2に示すようにSB203580添加の場合では150以上の細胞増殖が認められた。
Claims (12)
- Rb/INK4a経路を不活性化する物質を含有すること特徴とする細胞増殖培地。
- Rb/INK4a経路を不活性化する物質がp16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質である請求項1記載の細胞増殖培地。
- p16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質がMAPキナーゼ阻害剤である請求項2記載の細胞増殖培地。
- p16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質がp38MAPキナーゼ阻害剤である請求項2記載の細胞増殖培地。
- 間葉系幹細胞の増殖培地である請求項1〜4のいずれか1項に記載の細胞増殖培地。
- 請求項1〜4のいずれか1項に記載の培地を用いて培養された細胞培養物。
- 間葉系幹細胞の培養物である請求項6記載の細胞培養物。
- Rb/INK4a経路を不活性化する物質の存在下で細胞を培養する工程を包含する細胞増殖方法。
- Rb/INK4a経路を不活性化する物質がp16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質である請求項8記載の細胞増殖方法。
- p16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質がMAPキナーゼ阻害剤である請求項9記載の細胞増殖方法。
- p16INK4aタンパク質の発現を抑制する物質がp38MAPキナーゼ阻害剤である請求項9記載の細胞増殖方法。
- 細胞が間葉系幹細胞である請求項8〜11のいずれか1項に記載の細胞増殖方法。
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