JP2006259548A - Microscope objective lens - Google Patents

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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an immersion system microscope objective lens which can correct aberration caused by the difference in the refractive indexes of a cover glass and a sample. <P>SOLUTION: The objective lens is provided with a first lens group G1, a second lens group G2 and a third lens group G3 which are successively arranged in that order from an object side. The second lens group G2 is placed in a diverging luminous flux and the group G2 can relatively be moved with respect to the first and the third lens groups G1 and G3 along the optical axis. <P>COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

本発明は、細胞内の対象物を観察または計測する液浸系顕微鏡のための対物レンズに関するものである。   The present invention relates to an objective lens for an immersion microscope that observes or measures an object in a cell.

近年、生物学の分野で、光学顕微鏡を用いて生体細胞内の分子の運動や活性を観察し、細胞の構造や機能を解明する研究が行なわれている。その中で、全反射型蛍光顕微鏡法(Total Internal Reflection Fluorescence Microscopy:以下、TIRFMと称する)が重要な研究手段として注目されている。TIRFMを行なうためには、照明光がカバーガラスと試料との境界面で全反射しなければならない。境界面で全反射を起こすためには、使用する対物レンズは高NAである必要がある。例えば、カバーガラスの屈折率を1.52〜1.79、細胞内の媒質の屈折率を1.37とすると、対物レンズのNAは1.37より大きい必要がある。   In recent years, in the field of biology, studies have been conducted to elucidate the structure and function of cells by observing the movement and activity of molecules in living cells using an optical microscope. Among them, total internal reflection fluorescence microscopy (hereinafter referred to as TIRFM) has attracted attention as an important research tool. In order to perform TIRFM, the illumination light must be totally reflected at the interface between the cover glass and the sample. In order to cause total reflection at the boundary surface, the objective lens used needs to have a high NA. For example, if the refractive index of the cover glass is 1.52 to 1.79 and the refractive index of the intracellular medium is 1.37, the NA of the objective lens needs to be larger than 1.37.

NAが1.37より大きい対物レンズは、例えば下記の文献に提案されている。
特開平6−160721号公報 特開平7−035983号公報 特開平7−230039号公報 特開平7−281097号公報 特開2000−035541号公報 特開2002−148519号公報 特開2002−350347号公報 特開2003−015046号公報 特開2003−021786号公報 特開2003−337285号公報 特開2004−061589号公報 特表2004−522185号公報(優先権主張番号DE10108796) 特開2002−098903号公報 特開2002−341249号公報 特許文献2、特許文献5、特許文献6、特許文献9、特許文献10に記載されている対物レンズは、倍率が60倍でNAが1.4の対物レンズである。
An objective lens having an NA larger than 1.37 is proposed in the following document, for example.
JP-A-6-160721 Japanese Patent Laid-Open No. 7-035983 JP-A-7-230039 Japanese Patent Application Laid-Open No. 7-281097 JP 2000-035541 A JP 2002-148519 A JP 2002-350347 A JP 2003-015046 A JP 2003-021786 A JP 2003-337285 A JP 2004-061589 A JP-T-2004-522185 (priority claim number DE10108796) JP 2002-098903 A JP, 2002-341249, A The objective lens indicated in patent documents 2, patent documents 5, patent documents 6, patent documents 9, and patent documents 10 is an objective lens whose magnification is 60 times and NA is 1.4. .

また、特許文献1、特許文献3、特許文献6、特許文献9、特許文献11に記載されている対物レンズは、倍率が100倍でNAが1.4の対物レンズである。   In addition, the objective lenses described in Patent Literature 1, Patent Literature 3, Patent Literature 6, Patent Literature 9, and Patent Literature 11 are objective lenses having a magnification of 100 times and an NA of 1.4.

また、特許文献8に記載されている対物レンズは、倍率が59.6倍でNAが1.4の対物レンズや、倍率が55.9倍でNAが1.4の対物レンズであり、カバーガラスの厚さに依存して発生する収差や温度の変化に起因して発生する収差を補正する補正レンズ群を備えている。   The objective lens described in Patent Document 8 is an objective lens having a magnification of 59.6 and NA of 1.4, and an objective lens having a magnification of 55.9 and NA of 1.4. A correction lens group that corrects aberrations that occur depending on the glass thickness and aberrations that occur due to temperature changes is provided.

また、特許文献14に記載されている対物レンズは、倍率が60倍でNAが1.4の対物レンズであり、カバーガラス厚さの変化や温度の変化による収差を補正する補正レンズ群を備えている。   The objective lens described in Patent Document 14 is an objective lens having a magnification of 60 times and an NA of 1.4, and includes a correction lens group that corrects aberrations due to changes in cover glass thickness and temperature. ing.

また、特許文献7に記載されている対物レンズは、倍率が60倍でNAが1.45の対物レンズである。   Moreover, the objective lens described in Patent Document 7 is an objective lens having a magnification of 60 times and an NA of 1.45.

また、特許文献7、特許文献9、特許文献12に記載されている対物レンズは、倍率が100倍でNAが1.45の対物レンズである。   The objective lenses described in Patent Document 7, Patent Document 9, and Patent Document 12 are objective lenses having a magnification of 100 times and an NA of 1.45.

また、特許文献7に記載されている対物レンズは、倍率が100倍でNAが1.46の対物レンズである。   The objective lens described in Patent Document 7 is an objective lens having a magnification of 100 times and an NA of 1.46.

また、特許文献4に記載されている対物レンズは、nd=1.78035のオイルとnd=1.7865のカバーガラスに最適設計された、倍率が100倍でNAが1.65の対物レンズである。   The objective lens described in Patent Document 4 is an objective lens optimally designed for oil with nd = 1.78035 and a cover glass with nd = 1.865, with a magnification of 100 times and an NA of 1.65. is there.

また、特許文献13に記載されている対物レンズは、nd=1.80911のオイルとnd=1.804のカバーガラスに最適設計された、倍率が100倍でNAが1.65〜1.67の対物レンズである。   In addition, the objective lens described in Patent Document 13 is optimally designed for an oil of nd = 1.80911 and a cover glass of nd = 1.804, and has a magnification of 100 and an NA of 1.65 to 1.67. Objective lens.

これらの対物レンズは、設計に適合したオイルやカバーガラスを用いることにより、カバーガラス表面近傍の試料を良好に観察することができる。また、NAだけから判断すれば、TIRFMに使用できる可能性がある。   These objective lenses can satisfactorily observe a sample in the vicinity of the cover glass surface by using oil or cover glass suitable for the design. Moreover, if it judges only from NA, there is a possibility that it can be used for TIRFM.

しかし、特許文献1〜特許文献14の対物レンズは、細胞を観察する場合、カバーガラス表面よりもさらに深部(1μm以上離れた部分)を観察するには不適である。カバーガラスの屈折率が1.52〜1.8であるのに対して、細胞内の屈折率は1.33〜1.5程度である。カバーガラス表面よりもさらに細胞内深部を観察する場合、両者の屈折率差に起因して球面収差が発生し、結像性能が劣化する。結像性能の劣化は両者の屈折率差が大きいほど著しく、また観察または計測するピント面がカバーガラス表面から遠いほど著しい。   However, the objective lenses of Patent Documents 1 to 14 are unsuitable for observing deeper portions (portions separated by 1 μm or more) than the cover glass surface when observing cells. The refractive index of the cover glass is 1.52 to 1.8, whereas the intracellular refractive index is about 1.33 to 1.5. When observing a deeper part of the cell than the cover glass surface, spherical aberration occurs due to the difference in refractive index between the two, and the imaging performance deteriorates. Degradation in imaging performance is more remarkable as the difference in refractive index between the two is greater, and the more the focusing surface to be observed or measured is farther from the cover glass surface.

例えば、特許文献9の実施例2に記載されている対物レンズを用いて細胞内深部を観察する場合の球面収差を図16に示す。図16において、(a)はカバーガラス表面から0mm離れたピント位置での球面収差、(b)は0.002mm離れたピント位置での球面収差、(c)は0.005mm離れたピント位置での球面収差、(d)は0.01mm離れたピント位置での球面収差を表している。ここでは、細胞内の媒質の屈折率を1.38と仮定している。図16から分かるように、ピント面がカバーガラス表面から離れるほど、球面収差の発生量が増えている。また、球面収差の発生の様子を見ると、NAの70%辺りから大きく湾曲している。このようなNAの70%辺りから大きく湾曲する球面収差の発生は結像性能を著しく劣化させ、満足な結像を得ることができない。   For example, FIG. 16 shows spherical aberration when observing a deep part in a cell using the objective lens described in Example 2 of Patent Document 9. In FIG. 16, (a) is a spherical aberration at a focus position 0 mm away from the cover glass surface, (b) is a spherical aberration at a focus position 0.002 mm away, and (c) is a focus position 0.005 mm away. (D) represents spherical aberration at a focus position separated by 0.01 mm. Here, it is assumed that the refractive index of the intracellular medium is 1.38. As can be seen from FIG. 16, the amount of spherical aberration generated increases as the focus surface moves away from the cover glass surface. Further, when the appearance of spherical aberration is observed, it is greatly curved from around 70% of NA. The generation of spherical aberration that is greatly curved from around 70% of NA significantly deteriorates the imaging performance, and satisfactory imaging cannot be obtained.

特許文献8や特許文献14の対物レンズは収差を補正する補正機能を有するが、その機能はカバーガラス厚さの変化や使用温度の変化による収差を補正するものであり、カバーガラスと試料の屈折率差に起因して発生する著しい収差は補正しきれない。補正レンズ群を過剰に動かして補正しようとすると、球面収差の70%付近がプラス側に大きく膨らみ、結像性能を劣化させてしまう。   The objective lenses of Patent Document 8 and Patent Document 14 have a correction function for correcting aberrations, and this function corrects aberrations due to changes in cover glass thickness and operating temperature. Remarkable aberrations caused by the rate difference cannot be corrected. If an attempt is made to move the correction lens group excessively to correct it, the vicinity of 70% of the spherical aberration swells to the plus side, degrading the imaging performance.

もちろん、カバーガラス表面よりもさらに深部(数百nm以上)を観察する場合は、TIRFMを用いることはできない。しかし、TIRFMによりカバーガラス表面の生体分子を観察し、なおかつ、同一の装置でカバーガラスから離れた細胞内の生体分子を観察することができれば、生物学研究に新たな研究手段を提供することが可能となる。   Of course, when observing a deeper part (several hundred nm or more) than the cover glass surface, TIRFM cannot be used. However, if the biomolecules on the surface of the cover glass can be observed by TIRFM and the intracellular biomolecules separated from the cover glass can be observed with the same apparatus, it can provide a new research means for biological research. It becomes possible.

本発明の目的は、カバーガラスと試料の屈折率差に起因して発生する収差を補正し得る液浸系顕微鏡対物レンズを提供することである。   An object of the present invention is to provide an immersion microscope objective lens capable of correcting an aberration caused by a difference in refractive index between a cover glass and a sample.

本発明は、生体細胞に代表される試料(屈折率ndが1.33〜1.5)をカバーガラス(屈折率ndが1.4〜1.6)と液浸液(屈折率ndが1.33〜1.6)を通して観察または計測するための液浸系顕微鏡対物レンズであり、前記試料と前記カバーガラスの屈折率差に起因して発生する収差または前記試料の厚さに依存して発生する収差を補正するために、発散光束中に置かれた光軸に沿って移動可能な移動レンズ群を備えている。   In the present invention, a sample represented by a living cell (refractive index nd is 1.33 to 1.5) is covered with a cover glass (refractive index nd is 1.4 to 1.6) and an immersion liquid (refractive index nd is 1). .33 to 1.6) is an immersion microscope objective lens for observation or measurement, depending on the aberration caused by the refractive index difference between the sample and the cover glass or the thickness of the sample In order to correct the generated aberration, a moving lens group is provided that is movable along the optical axis placed in the divergent light beam.

本発明によれば、カバーガラスと試料の屈折率差に起因して発生する収差を補正し得る液浸系顕微鏡対物レンズが提供される。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the immersion type | system | group microscope objective lens which can correct | amend the aberration which arises due to the refractive index difference of a cover glass and a sample is provided.

以下、本発明の実施形態を説明するにあたり、まず、すべての実施形態に共通する本発明の対物レンズの基本構成について述べ、そのあとで、図面を参照しながら本発明の実施形態の対物レンズについて説明する。   Hereinafter, in describing the embodiments of the present invention, first, the basic configuration of the objective lens of the present invention common to all the embodiments will be described, and then the objective lens of the embodiments of the present invention with reference to the drawings. explain.

本発明の対物レンズは、物体側から順に配置された、正の屈折力を持つ第一レンズ群と、正の屈折力を持つ第二レンズ群と、正の屈折力を持つ第三レンズ群とを備えている。   The objective lens of the present invention includes a first lens group having a positive refractive power, a second lens group having a positive refractive power, and a third lens group having a positive refractive power, which are arranged in order from the object side. It has.

本発明の対物レンズは無限遠補正型の対物レンズであり、対物レンズは試料からの発散光束を平行光束に変換する。第一レンズ群は、対物レンズに入射した発散光束の発散角を小さくして第二レンズ群に伝える。第二レンズ群は、第一レンズ群を通過した発散光束の発散角をさらに小さくして第三レンズ群に伝える。第三レンズ群は、第一レンズ群と第二レンズ群とを通過した緩い発散光束を収束して平行光束にする。   The objective lens of the present invention is an infinitely corrected objective lens, and the objective lens converts a divergent light beam from a sample into a parallel light beam. The first lens group reduces the divergence angle of the divergent light beam incident on the objective lens and transmits it to the second lens group. The second lens group transmits the divergent angle of the divergent light beam that has passed through the first lens group to the third lens group by further reducing the divergence angle. The third lens group converges the loose divergent light beam that has passed through the first lens group and the second lens group into a parallel light beam.

第二レンズ群は球面収差を補正するための移動レンズ群であり、第一レンズ群と第三レンズ群に対して相対的に対物レンズの光軸に沿って移動可能である。さらに第二レンズ群は発散光束中に置かれている。ここで、第二レンズ群が発散光束中に置かれているとは、光束が第二レンズ群を通過する前後のいずれにおいても光軸に対して発散角を持っている状態をいう。   The second lens group is a moving lens group for correcting spherical aberration, and is movable along the optical axis of the objective lens relative to the first lens group and the third lens group. Further, the second lens group is placed in the divergent light beam. Here, the phrase “the second lens group is placed in the divergent light beam” means that the light beam has a divergence angle with respect to the optical axis both before and after passing through the second lens group.

従来の対物レンズでは、移動レンズ群は、著しい発散光束中や著しい収束光束中に置かないことが当たり前とされていた。その理由は、カバーガラスの厚さに依存して発生する球面収差は発生量が小さく、補正量も小さくて済んだためである。   In a conventional objective lens, it has been assumed that the moving lens group is not placed in a significantly divergent beam or a significantly convergent beam. The reason is that the amount of spherical aberration generated depending on the thickness of the cover glass is small and the correction amount is small.

前述したように、試料とカバーガラスの間に屈折率差があると著しい球面収差が発生する。生体細胞内の媒質の屈折率は1.33〜1.5であり、ほとんどの場合は1.4程度以下である。また、カバーガラスの屈折率は1.52〜1.79である。このため、試料とカバーガラスの間には屈折率差が生じ、著しい球面収差が発生する。また高次の球面収差が発生する。そのため、従来の対物レンズにおける移動レンズ群では補正量が不足するか、高次の球面収差を補正しきれない。   As described above, when there is a difference in refractive index between the sample and the cover glass, significant spherical aberration occurs. The refractive index of the medium in the living cell is 1.33 to 1.5, and in most cases is about 1.4 or less. The cover glass has a refractive index of 1.52 to 1.79. For this reason, a refractive index difference arises between a sample and a cover glass, and remarkable spherical aberration occurs. In addition, higher-order spherical aberration occurs. For this reason, the moving lens group in the conventional objective lens has insufficient correction amount or cannot completely correct higher-order spherical aberration.

これに対して本発明の対物レンズでは、移動レンズ群である第二レンズ群が著しい発散光束中、すなわち、光線と光軸の角度が大きい場所に配置されている。このため、従来よりも大きな補正作用を得ることができる。   On the other hand, in the objective lens of the present invention, the second lens group which is a moving lens group is arranged in a significantly divergent light beam, that is, a place where the angle between the light beam and the optical axis is large. For this reason, it is possible to obtain a larger correction action than in the prior art.

例えば、第二レンズ群を第一レンズ群側に移動すると、第一レンズ群と第二レンズ群の間の空気間隔d3が減少し、第二レンズ群と第三レンズ群の間の空気間隔d4が増大する。空気間隔d3の現象は大きな正の球面収差を発生させ、空気間隔d4の増大もまた大きな正の球面収差を発生させる。それぞれの正の球面収差を合わせてさらに大きな正の球面収差を得ることができる。これにより、試料とカバーガラスの屈折率差によって発生した著しい負の球面収差をキャンセルすることができる。反対に、著しい正の球面収差をキャンセルするには、第二レンズ群を第三レンズ群側に移動するとよい。   For example, when the second lens group is moved to the first lens group side, the air gap d3 between the first lens group and the second lens group is decreased, and the air gap d4 between the second lens group and the third lens group. Will increase. The phenomenon of air spacing d3 generates large positive spherical aberration, and the increase of air spacing d4 also generates large positive spherical aberration. By combining each positive spherical aberration, a larger positive spherical aberration can be obtained. Thereby, the remarkable negative spherical aberration which generate | occur | produced by the refractive index difference of a sample and a cover glass can be canceled. On the other hand, in order to cancel a significant positive spherical aberration, the second lens group may be moved to the third lens group side.

移動レンズ群である第二レンズ群の移動による収差補正作用は、試料とカバーガラスの屈折率差に起因して発生する球面収差または試料の厚さに依存して発生する収差の補正だけでなく、従来のカバーガラスの厚さに依存して発生する球面収差の補正や試料と液浸液の温度変化に起因して発生する球面収差の補正に適用されてもよい。   Aberration correction by moving the second lens group, which is a moving lens group, not only corrects spherical aberration caused by the refractive index difference between the sample and the cover glass, but also aberrations that depend on the thickness of the sample. The present invention may be applied to correction of spherical aberration that occurs depending on the thickness of a conventional cover glass, and correction of spherical aberration that occurs due to temperature changes between the sample and the immersion liquid.

第一レンズ群は、物体側から順に物体側に平面を向けた平凸レンズと物体側に凹面を向けたメニスカスレンズとからなる接合レンズを有している。この接合レンズの接合面は負の屈折力を持ち、ペッツバール和を補正する。第一レンズ群の接合レンズのメニスカスレンズの像側の凸面は不遊条件(アプラナティックな条件)を満たし、球面収差やコマ収差の発生を抑える。このように、第一レンズ群が接合レンズを有していることにより、1.37より大きい高NAであっても収差を良好に補正することが可能となる。   The first lens group includes a cemented lens including a plano-convex lens having a plane facing the object side and a meniscus lens having a concave surface facing the object side in order from the object side. The cemented surface of this cemented lens has negative refractive power and corrects the Petzval sum. The convex surface on the image side of the meniscus lens of the cemented lens of the first lens group satisfies the non-play condition (aplanatic condition) and suppresses the occurrence of spherical aberration and coma. As described above, since the first lens group includes the cemented lens, it is possible to satisfactorily correct the aberration even when the NA is higher than 1.37.

第二レンズ群は少なくとも一つの正レンズを有している。この正レンズは、好ましくは、像側に強い凸面を持っているとよく、物体側に凹面を向けたメニスカスレンズまたは物体側に平面を向けた平凸レンズであるとよい。   The second lens group has at least one positive lens. This positive lens preferably has a strong convex surface on the image side, and may be a meniscus lens having a concave surface facing the object side or a plano-convex lens having a flat surface facing the object side.

第三レンズ群は少なくとも三つの接合レンズを有しており、これらの接合レンズにより球面収差と色収差を補正する。色収差をさらに良好に補正するため、第三レンズ群は、望ましくは、少なくとも一つの三枚接合レンズを有しているとよい。また、ペッツバール和やコマ収差をさらに良好に補正するため、望ましくは、強い負の屈折力を持つレンズが像側に近い場所に置かれるとよい。この強い負の屈折力を持つレンズは、像側に強い凹面を向けた両凹レンズや平凹レンズやメニスカスレンズや接合メニスカスレンズであるとよい。   The third lens group has at least three cemented lenses, and spherical aberration and chromatic aberration are corrected by these cemented lenses. In order to correct chromatic aberration more satisfactorily, the third lens group desirably includes at least one three-piece cemented lens. Further, in order to correct Petzval sum and coma aberration more satisfactorily, it is desirable that a lens having a strong negative refractive power is placed near the image side. The lens having a strong negative refractive power is preferably a biconcave lens, a plano-concave lens, a meniscus lens, or a cemented meniscus lens having a strong concave surface facing the image side.

本発明の対物レンズは、好ましくは、次の条件式
4<f(G2)/f<10 …(1)
を満足しており、より好ましくは、次の条件式
4<f(G2)/f<8 …(2)
を満足している。ここで、f(G2)は第二レンズ群の焦点距離、fは対物レンズ全系の焦点距離である。
The objective lens according to the present invention preferably has the following conditional expression: 4 <f (G2) / f <10 (1)
More preferably, the following conditional expression 4 <f (G2) / f <8 (2)
Is satisfied. Here, f (G2) is the focal length of the second lens group, and f is the focal length of the entire objective lens system.

条件式(1)は第二レンズ群のパワーを規定しており、第二レンズ群に比較的強いパワーを持たせることを意図している。条件式(1)を満足していれば、大きな補正作用が得られる。条件式(1)の下限値4を下回ると、第二レンズ群のパワーが強くなりすぎ、第二レンズ群で発生する諸収差を他のレンズ群で補正できなくなるだけでなく、レンズ系全体の倍率を維持することが困難になる。また条件式(1)の上限値10を上回ると、十分な補正作用を得ることができなくなる。さらに条件式(2)を満足していれば、さらにバランスの良い設計となる。   Conditional expression (1) defines the power of the second lens group, and is intended to give the second lens group a relatively strong power. If the conditional expression (1) is satisfied, a large correcting action can be obtained. If the lower limit 4 of conditional expression (1) is not reached, the power of the second lens group becomes too strong, and various aberrations occurring in the second lens group cannot be corrected by other lens groups, and the entire lens system can be corrected. It becomes difficult to maintain the magnification. If the upper limit value 10 of conditional expression (1) is exceeded, sufficient correction action cannot be obtained. If the conditional expression (2) is further satisfied, the design is further balanced.

また、本発明の対物レンズは、好ましくは、次の条件式
0.1<θ1/θ2<0.4 …(3)
を満足しており、より好ましくは、次の条件式
0.15<θ1/θ2<0.3 …(4)
を満足している。ここで、θ1は移動レンズ群へ入射する最大NAのマージナル光線と光軸との成す角、θ2は移動レンズ群から射出される最大NAのマージナル光線と光軸との成す角である。
In the objective lens according to the present invention, preferably, the following conditional expression 0.1 <θ1 / θ2 <0.4 (3)
More preferably, the following conditional expression 0.15 <θ1 / θ2 <0.3 (4)
Is satisfied. Here, θ1 is an angle formed between the optical beam and the maximum NA marginal ray incident on the moving lens group, and θ2 is an angle formed between the optical axis and the maximum NA marginal ray emitted from the moving lens unit.

条件式(3)は、第二レンズ群に入射する光線および射出する光線を規定することによって、第一レンズ群と第二レンズ群と第三レンズ群のそれぞれのレンズパワーのバランスを規定している。下限値0.1を下回ると、第一レンズ群と第二レンズ群を合わせたレンズパワーが強くなりすぎ、第三レンズ群での収差補正が困難になる。また上限値0.4を上回ると、第一レンズ群または第二レンズ群のレンズパワーが弱くなりすぎ、第三レンズ群のレンズ外径が大きくなりレンズの加工が困難になるだけでなく、対物レンズ全体の全長が長くなりがちとなりシステム上望ましくない。従って、条件式(3)を満足していれば、諸収差と加工性と全長のバランスが良い設計となる。さらに条件式(4)を満足していれば、諸収差と加工性と全長のバランスがさらに良い設計となる。   Conditional expression (3) defines the balance of the lens powers of the first lens group, the second lens group, and the third lens group by defining the light rays that enter and exit the second lens group. Yes. Below the lower limit of 0.1, the combined lens power of the first lens group and the second lens group becomes too strong, making it difficult to correct aberrations in the third lens group. If the upper limit of 0.4 is exceeded, the lens power of the first lens group or the second lens group becomes too weak, the lens outer diameter of the third lens group becomes large, and the lens processing becomes difficult. The overall length of the entire lens tends to be long, which is undesirable in the system. Therefore, if the conditional expression (3) is satisfied, the design has a good balance of various aberrations, workability, and overall length. Further, if the conditional expression (4) is satisfied, the balance between various aberrations, workability, and the overall length becomes a better design.

また本発明の対物レンズは、好ましくは、1.37より大きい開口数を有しており、より好ましくは、1.4以上の開口数を有している。   The objective lens of the present invention preferably has a numerical aperture greater than 1.37, more preferably 1.4 or higher.

生体細胞内の媒質の中で、細胞液の屈折率ndは1.37〜1.38程度である。対物レンズの開口数が1.37より大きければ、ほとんどの場合、TIRFMで使用できる。また、NAが大きいことにより、試料から発せられる微弱蛍光の像を得やすく、高解像を得ることができる。NAが1.37を下回ると、TIRFMで観測できる対象がかなり限定され、また微弱蛍光の像を得ることが困難になる。NAが1.37であるとした場合、液浸液の屈折率ndは1.37以上である必要がある。また、NAが1.4であるとした場合、液浸液の屈折率ndは1.4以上である必要がある。対物レンズの開口数が1.4以上であれば、細胞内のほとんどの媒質(屈折率が1.33〜1.4)に対して、TIRFMで使用可能となる。   In the medium in a living cell, the refractive index nd of the cell fluid is about 1.37 to 1.38. If the numerical aperture of the objective lens is larger than 1.37, it can be used in TIRFM in most cases. In addition, since the NA is large, it is easy to obtain an image of weak fluorescence emitted from the sample, and high resolution can be obtained. When NA is below 1.37, the objects that can be observed by TIRFM are considerably limited, and it becomes difficult to obtain an image of weak fluorescence. When NA is 1.37, the refractive index nd of the immersion liquid needs to be 1.37 or more. When NA is 1.4, the refractive index nd of the immersion liquid needs to be 1.4 or more. If the numerical aperture of the objective lens is 1.4 or more, it can be used in TIRFM for almost all intracellular media (refractive index: 1.33 to 1.4).

[第一実施形態]
本発明の第一実施形態の対物レンズは、図1に示されるように、物体側から順に配置された第一レンズ群G1と第二レンズ群(補正レンズ群)G2と第三レンズ群G3とを備えている。第一レンズ群G1は、物体側から順に、物体側に平面を向けた平凸レンズL1と物体側に凹面を向けたメニスカスレンズL2からなる接合レンズで構成されている。また、第二レンズ群G2は、物体側に凹面を向けたメニスカスレンズL3で構成されており、光軸に沿って移動可能である。また、第三レンズ群G3は、正レンズL4と負レンズL5と正レンズL6からなる三枚接合レンズと、正レンズL7と、負レンズL8と正レンズL9と負レンズL10からなる三枚接合レンズと、正レンズL11と負レンズL12とからなる二枚接合レンズと、正レンズL13と負レンズL14とからなる二枚接合レンズと、像側にきつい凹面を向けた負レンズL15と、物体側に凹面を向けた負レンズL16と正レンズL17とからなる二枚接合レンズとから構成されている。
[First embodiment]
As shown in FIG. 1, the objective lens according to the first embodiment of the present invention includes a first lens group G1, a second lens group (correction lens group) G2, and a third lens group G3 arranged in order from the object side. It has. The first lens group G1 includes, in order from the object side, a cemented lens including a plano-convex lens L1 having a plane facing the object side and a meniscus lens L2 having a concave surface facing the object side. The second lens group G2 includes a meniscus lens L3 having a concave surface directed toward the object side, and is movable along the optical axis. The third lens group G3 includes a three-piece cemented lens including a positive lens L4, a negative lens L5, and a positive lens L6, a positive lens L7, a negative lens L8, a positive lens L9, and a negative lens L10. A cemented lens composed of a positive lens L11 and a negative lens L12, a cemented lens composed of a positive lens L13 and a negative lens L14, a negative lens L15 having a concave surface facing the image side, and an object side It is composed of a double-junction lens composed of a negative lens L16 and a positive lens L17 having a concave surface.

第一実施形態の対物レンズのデータは下記の通りである。

Figure 2006259548
The data of the objective lens of the first embodiment is as follows.
Figure 2006259548

Figure 2006259548
Figure 2006259548

収差を補正するためのレンズ面間隔の可変量(単位mm)は下記の通りである。d1はピント位置からカバーガラス表面までの距離である。細胞は様々な媒質(nd=1.33〜1.5)で構成されているが、ここでは細胞液(nd=1.38程度)を仮定した。もちろん、nd=1.38以外の媒質であっても、補正レンズ群の移動によって実用的な結像性能を得ることができる。d2はWDであって、オイルで充填されている。d3とd4は、第二レンズ群G2の前後の間隔の可変量である。

Figure 2006259548
The variable amount (unit: mm) of the lens surface interval for correcting the aberration is as follows. d1 is the distance from the focus position to the cover glass surface. Cells are composed of various media (nd = 1.33 to 1.5), but here, cell fluid (about nd = 1.38) was assumed. Of course, even with a medium other than nd = 1.38, practical imaging performance can be obtained by moving the correction lens group. d2 is WD and is filled with oil. d3 and d4 are variable amounts of the distance before and after the second lens group G2.
Figure 2006259548

第一実施形態において用いられるカバーガラスは、厚さが0.17mm、nd=1.51637、νd=64.2である。また、オイルは、nd=1.511、νd=43.1である。なお、本実施形態では、37℃の試料を観察する場合を想定し、試料に近いカバーガラスとオイルには37℃のnd、νdを用いた。   The cover glass used in the first embodiment has a thickness of 0.17 mm, nd = 1.51637, and νd = 64.2. The oil has nd = 1.511 and νd = 43.1. In this embodiment, it is assumed that a sample at 37 ° C. is observed, and nd and νd at 37 ° C. are used for the cover glass and oil close to the sample.

ここで、レンズデータ中、rは各レンズ面の曲率半径(単位mm)、dは各レンズ面間の間隔(単位mm)、ndは各レンズのd線の屈折率、νdは各レンズのd線におけるアッベ数である。また、fは焦点距離(単位mm)、f(G1)は第一レンズ群G1の焦点距離(単位mm)、f(G2)は第二レンズ群G2の焦点距離(単位mm)、f(G3)は第三レンズ群G3の焦点距離(単位mm)、θ1は第二レンズ群G2に入射する最大NAのマージナル光線と光軸との成す角度(単位°)、θ2は第二レンズ群G2から射出される最大NAのマージナル光線と光軸との成す角度(単位°)、βは倍率、NAは開口数、WDは作動距離(単位mm)である。なお、θ1、θ2は、プラスの値の場合に発散光束、マイナスの値の場合に収束光束と定義している。   Here, in the lens data, r is a radius of curvature (unit: mm) of each lens surface, d is an interval (unit: mm) between the lens surfaces, nd is a refractive index of d-line of each lens, and νd is d of each lens. Abbe number on the line. In addition, f is a focal length (unit: mm), f (G1) is a focal length (unit: mm) of the first lens group G1, f (G2) is a focal length (unit: mm) of the second lens group G2, and f (G3). ) Is the focal length (unit: mm) of the third lens group G3, θ1 is the angle (unit: °) between the marginal ray of the maximum NA incident on the second lens group G2 and the optical axis, and θ2 is from the second lens group G2. An angle (unit degree) formed by the marginal ray having the maximum NA emitted and the optical axis, β is a magnification, NA is a numerical aperture, and WD is a working distance (unit mm). Θ1 and θ2 are defined as a divergent light beam when the value is positive and as a convergent light beam when the value is negative.

[第二実施形態]
本発明の第二実施形態の対物レンズは、図2に示されるように、物体側から順に配置された第一レンズ群G1と第二レンズ群(補正レンズ群)G2と第三レンズ群G3とを備えている。第一レンズ群G1は、物体側から順に、物体側に平面を向けた平凸レンズL1と物体側に凹面を向けたメニスカスレンズL2からなる接合レンズで構成されている。また、第二レンズ群G2は、物体側に凹面を向けたメニスカスレンズL3で構成されており、光軸に沿って移動可能である。また、第三レンズ群G3は、正レンズL4と負レンズL5と正レンズL6からなる三枚接合レンズと、正レンズL7と、負レンズL8と正レンズL9と負レンズL10からなる三枚接合レンズと、正レンズL11と負レンズL12とからなる二枚接合レンズと、正レンズL13と負レンズL14とからなる二枚接合レンズと、像側にきつい凹面を向けた負レンズL15と、物体側に凹面を向けた負レンズL16と正レンズL17とからなる二枚接合レンズとから構成されている。
[Second Embodiment]
As shown in FIG. 2, the objective lens according to the second embodiment of the present invention includes a first lens group G1, a second lens group (correction lens group) G2, and a third lens group G3 arranged in order from the object side. It has. The first lens group G1 includes, in order from the object side, a cemented lens including a plano-convex lens L1 having a plane facing the object side and a meniscus lens L2 having a concave surface facing the object side. The second lens group G2 includes a meniscus lens L3 having a concave surface directed toward the object side, and is movable along the optical axis. The third lens group G3 includes a three-piece cemented lens including a positive lens L4, a negative lens L5, and a positive lens L6, a positive lens L7, a negative lens L8, a positive lens L9, and a negative lens L10. A cemented lens composed of a positive lens L11 and a negative lens L12, a cemented lens composed of a positive lens L13 and a negative lens L14, a negative lens L15 having a concave surface facing the image side, and an object side It is composed of a double-junction lens composed of a negative lens L16 and a positive lens L17 having a concave surface.

第二実施形態の対物レンズのデータは下記の通りである。

Figure 2006259548
The data of the objective lens of the second embodiment is as follows.
Figure 2006259548

Figure 2006259548
Figure 2006259548

収差を補正するためのレンズ面間隔の可変量(単位mm)は下記の通りである。d1はピント位置からカバーガラス表面までの距離である。細胞は様々な媒質(nd=1.33〜1.5)で構成されているが、ここでは細胞液(nd=1.38程度)を仮定した。もちろん、nd=1.38以外の媒質であっても、補正レンズ群の移動によって実用的な結像性能を得ることができる。d2はWDであって、オイルで充填されている。d3とd4は、第二レンズ群G2の前後の間隔の可変量である。

Figure 2006259548
The variable amount (unit: mm) of the lens surface interval for correcting the aberration is as follows. d1 is the distance from the focus position to the cover glass surface. Cells are composed of various media (nd = 1.33 to 1.5), but here, cell fluid (about nd = 1.38) was assumed. Of course, even with a medium other than nd = 1.38, practical imaging performance can be obtained by moving the correction lens group. d2 is WD and is filled with oil. d3 and d4 are variable amounts of the distance before and after the second lens group G2.
Figure 2006259548

第二実施形態において用いられるカバーガラスは、厚さが0.17mm、nd=1.48748、νd=70.2である。また、オイルは、nd=1.47392、νd=56.4である。なお、本実施形態では、37℃の試料を観察する場合を想定し、試料に近いカバーガラスとオイルには37℃のnd、νdを用いた。   The cover glass used in the second embodiment has a thickness of 0.17 mm, nd = 1.48748, and νd = 70.2. The oil has nd = 1.43792 and νd = 56.4. In this embodiment, it is assumed that a sample at 37 ° C. is observed, and nd and νd at 37 ° C. are used for the cover glass and oil close to the sample.

ここで、レンズデータ中、rは各レンズ面の曲率半径(単位mm)、dは各レンズ面間の間隔(単位mm)、ndは各レンズのd線の屈折率、νdは各レンズのd線におけるアッベ数である。また、fは焦点距離(単位mm)、f(G1)は第一レンズ群G1の焦点距離(単位mm)、f(G2)は第二レンズ群G2の焦点距離(単位mm)、f(G3)は第三レンズ群G3の焦点距離(単位mm)、θ1は第二レンズ群G2に入射する最大NAのマージナル光線と光軸との成す角度(単位°)、θ2は第二レンズ群G2から射出される最大NAのマージナル光線と光軸との成す角度(単位°)、βは倍率、NAは開口数、WDは作動距離(単位mm)である。なお、θ1、θ2は、プラスの値の場合に発散光束、マイナスの値の場合に収束光束と定義している。   Here, in the lens data, r is a radius of curvature (unit: mm) of each lens surface, d is an interval (unit: mm) between the lens surfaces, nd is a refractive index of d-line of each lens, and νd is d of each lens. Abbe number on the line. In addition, f is a focal length (unit: mm), f (G1) is a focal length (unit: mm) of the first lens group G1, f (G2) is a focal length (unit: mm) of the second lens group G2, and f (G3). ) Is the focal length (in mm) of the third lens group G3, θ1 is the angle (unit °) between the marginal ray of the maximum NA incident on the second lens group G2 and the optical axis, and θ2 is from the second lens group G2. An angle (unit degree) formed by the marginal ray having the maximum NA emitted and the optical axis, β is a magnification, NA is a numerical aperture, and WD is a working distance (unit mm). Θ1 and θ2 are defined as a divergent light beam when the value is positive and as a convergent light beam when the value is negative.

[第三実施形態]
本発明の第三実施形態の対物レンズは、図3に示されるように、物体側から順に配置された第一レンズ群G1と第二レンズ群(補正レンズ群)G2と第三レンズ群G3とを備えている。第一レンズ群G1は、物体側から順に、物体側に平面を向けた平凸レンズL1と物体側に凹面を向けたメニスカスレンズL2からなる接合レンズで構成されている。また、第二レンズ群G2は、物体側に凹面を向けたメニスカスレンズL3で構成されており、光軸に沿って移動可能である。また、第三レンズ群G3は、正レンズL4と負レンズL5と正レンズL6からなる三枚接合レンズと、正レンズL7と、負レンズL8と正レンズL9と負レンズL10からなる三枚接合レンズと、正レンズL11と負レンズL12とからなる二枚接合レンズと、正レンズL13と負レンズL14とからなる二枚接合レンズと、像側にきつい凹面を向けた負レンズL15と、物体側に凹面を向けた負レンズL16と正レンズL17とからなる二枚接合レンズとから構成されている。
[Third embodiment]
As shown in FIG. 3, the objective lens according to the third embodiment of the present invention includes a first lens group G1, a second lens group (correction lens group) G2, and a third lens group G3 arranged in order from the object side. It has. The first lens group G1 includes, in order from the object side, a cemented lens including a plano-convex lens L1 having a plane facing the object side and a meniscus lens L2 having a concave surface facing the object side. The second lens group G2 includes a meniscus lens L3 having a concave surface directed toward the object side, and is movable along the optical axis. The third lens group G3 includes a three-piece cemented lens including a positive lens L4, a negative lens L5, and a positive lens L6, a positive lens L7, a negative lens L8, a positive lens L9, and a negative lens L10. A cemented lens composed of a positive lens L11 and a negative lens L12, a cemented lens composed of a positive lens L13 and a negative lens L14, a negative lens L15 having a concave surface facing the image side, and an object side It is composed of a double-junction lens composed of a negative lens L16 and a positive lens L17 having a concave surface.

第三実施形態の対物レンズのデータは下記の通りである。

Figure 2006259548
The data of the objective lens of the third embodiment is as follows.
Figure 2006259548

Figure 2006259548
Figure 2006259548

収差を補正するためのレンズ面間隔の可変量(単位mm)は下記の通りである。d1はピント位置からカバーガラス表面までの距離である。細胞は様々な媒質(nd=1.33〜1.5)で構成されているが、ここでは細胞液(nd=1.38程度)を仮定した。もちろん、nd=1.38以外の媒質であっても、補正レンズ群の移動によって実用的な結像性能を得ることができる。d2はWDであって、オイルで充填されている。d3とd4は、第二レンズ群G2の前後の間隔の可変量である。

Figure 2006259548
The variable amount (unit: mm) of the lens surface interval for correcting the aberration is as follows. d1 is the distance from the focus position to the cover glass surface. Cells are composed of various media (nd = 1.33 to 1.5), but here, cell fluid (about nd = 1.38) was assumed. Of course, even with a medium other than nd = 1.38, practical imaging performance can be obtained by moving the correction lens group. d2 is WD and is filled with oil. d3 and d4 are variable amounts of the distance before and after the second lens group G2.
Figure 2006259548

第三実施形態において用いられるカバーガラスは、厚さが0.17mm、nd=1.45861、νd=67.7である。また、オイルは、nd=1.47392、νd=56.4である。なお、本実施形態では、37℃の試料を観察する場合を想定し、試料に近いカバーガラスとオイルには37℃のnd、νdを用いた。   The cover glass used in the third embodiment has a thickness of 0.17 mm, nd = 1.45861, and νd = 67.7. The oil has nd = 1.43792 and νd = 56.4. In this embodiment, it is assumed that a sample at 37 ° C. is observed, and nd and νd at 37 ° C. are used for the cover glass and oil close to the sample.

ここで、レンズデータ中、rは各レンズ面の曲率半径(単位mm)、dは各レンズ面間の間隔(単位mm)、ndは各レンズのd線の屈折率、νdは各レンズのd線におけるアッベ数である。また、fは焦点距離(単位mm)、f(G1)は第一レンズ群G1の焦点距離(単位mm)、f(G2)は第二レンズ群G2の焦点距離(単位mm)、f(G3)は第三レンズ群G3の焦点距離(単位mm)、θ1は第二レンズ群G2に入射する最大NAのマージナル光線と光軸との成す角度(単位°)、θ2は第二レンズ群G2から射出される最大NAのマージナル光線と光軸との成す角度(単位°)、βは倍率、NAは開口数、WDは作動距離(単位mm)である。なお、θ1、θ2は、プラスの値の場合に発散光束、マイナスの値の場合に収束光束と定義している。   Here, in the lens data, r is a radius of curvature (unit: mm) of each lens surface, d is an interval (unit: mm) between the lens surfaces, nd is a refractive index of d-line of each lens, and νd is d of each lens. Abbe number on the line. In addition, f is a focal length (unit: mm), f (G1) is a focal length (unit: mm) of the first lens group G1, f (G2) is a focal length (unit: mm) of the second lens group G2, and f (G3). ) Is the focal length (unit: mm) of the third lens group G3, θ1 is the angle (unit °) between the marginal ray of the maximum NA incident on the second lens group G2 and the optical axis, and θ2 is from the second lens group G2. An angle (unit degree) formed by the marginal ray having the maximum NA emitted and the optical axis, β is a magnification, NA is a numerical aperture, and WD is a working distance (unit mm). Θ1 and θ2 are defined as a divergent light beam when the value is positive and as a convergent light beam when the value is negative.

[第四実施形態]
本発明の第四実施形態の対物レンズは、図4に示されるように、物体側から順に配置された第一レンズ群G1と第二レンズ群(補正レンズ群)G2と第三レンズ群G3とを備えている。第一レンズ群G1は、物体側から順に、物体側に平面を向けた平凸レンズL1と物体側に凹面を向けたメニスカスレンズL2からなる接合レンズで構成されている。また、第二レンズ群G2は、物体側に凹面を向けたメニスカスレンズL3で構成されており、光軸に沿って移動可能である。また、第三レンズ群G3は、正レンズL4と負レンズL5と正レンズL6からなる三枚接合レンズと、負レンズL7と正レンズL8と負レンズL9からなる三枚接合レンズと、正レンズL10と像側に凹面を向けた負レンズL11からなる二枚接合レンズとから構成されている。
[Fourth embodiment]
As shown in FIG. 4, the objective lens according to the fourth embodiment of the present invention includes a first lens group G1, a second lens group (correction lens group) G2, and a third lens group G3 arranged in order from the object side. It has. The first lens group G1 includes, in order from the object side, a cemented lens including a plano-convex lens L1 having a plane facing the object side and a meniscus lens L2 having a concave surface facing the object side. The second lens group G2 includes a meniscus lens L3 having a concave surface directed toward the object side, and is movable along the optical axis. The third lens group G3 includes a triplet cemented lens including a positive lens L4, a negative lens L5, and a positive lens L6, a triplet cemented lens including a negative lens L7, a positive lens L8, and a negative lens L9, and a positive lens L10. And a double-junction lens composed of a negative lens L11 having a concave surface facing the image side.

第四実施形態の対物レンズのデータは下記の通りである。

Figure 2006259548
The data of the objective lens of the fourth embodiment is as follows.
Figure 2006259548

Figure 2006259548
Figure 2006259548

収差を補正するためのレンズ面間隔の可変量(単位mm)は下記の通りである。d1はピント位置からカバーガラス表面までの距離である。細胞は様々な媒質(nd=1.33〜1.5)で構成されているが、ここでは細胞液(nd=1.38程度)を仮定した。もちろん、nd=1.38以外の媒質であっても、補正レンズ群の移動によって実用的な結像性能を得ることができる。d2はWDであって、オイルで充填されている。d3とd4は、第二レンズ群G2の前後の間隔の可変量である。

Figure 2006259548
The variable amount (unit: mm) of the lens surface interval for correcting the aberration is as follows. d1 is the distance from the focus position to the cover glass surface. Cells are composed of various media (nd = 1.33 to 1.5), but here, cell fluid (about nd = 1.38) was assumed. Of course, even with a medium other than nd = 1.38, practical imaging performance can be obtained by moving the correction lens group. d2 is WD and is filled with oil. d3 and d4 are variable amounts of the distance before and after the second lens group G2.
Figure 2006259548

第四実施形態において用いられるカバーガラスは、厚さが0.17mm、nd=1.48748、νd=70.2である。また、オイルは、nd=1.47392、νd=56.4である。なお、本実施形態では、37℃の試料を観察する場合を想定し、試料に近いカバーガラスとオイルには37℃のnd、νdを用いた。   The cover glass used in the fourth embodiment has a thickness of 0.17 mm, nd = 1.48748, and νd = 70.2. The oil has nd = 1.43792 and νd = 56.4. In this embodiment, it is assumed that a sample at 37 ° C. is observed, and nd and νd at 37 ° C. are used for the cover glass and oil close to the sample.

ここで、レンズデータ中、rは各レンズ面の曲率半径(単位mm)、dは各レンズ面間の間隔(単位mm)、ndは各レンズのd線の屈折率、νdは各レンズのd線におけるアッベ数である。また、fは焦点距離(単位mm)、f(G1)は第一レンズ群G1の焦点距離(単位mm)、f(G2)は第二レンズ群G2の焦点距離(単位mm)、f(G3)は第三レンズ群G3の焦点距離(単位mm)、θ1は第二レンズ群G2に入射する最大NAのマージナル光線と光軸との成す角度(単位°)、θ2は第二レンズ群G2から射出される最大NAのマージナル光線と光軸との成す角度(単位°)、βは倍率、NAは開口数、WDは作動距離(単位mm)である。なお、θ1、θ2は、プラスの値の場合に発散光束、マイナスの値の場合に収束光束と定義している。   Here, in the lens data, r is a radius of curvature (unit: mm) of each lens surface, d is an interval (unit: mm) between the lens surfaces, nd is a refractive index of d-line of each lens, and νd is d of each lens. Abbe number on the line. In addition, f is a focal length (unit: mm), f (G1) is a focal length (unit: mm) of the first lens group G1, f (G2) is a focal length (unit: mm) of the second lens group G2, and f (G3). ) Is the focal length (in mm) of the third lens group G3, θ1 is the angle (unit °) between the marginal ray of the maximum NA incident on the second lens group G2 and the optical axis, and θ2 is from the second lens group G2. An angle (unit degree) formed by the marginal ray having the maximum NA emitted and the optical axis, β is a magnification, NA is a numerical aperture, and WD is a working distance (unit mm). Θ1 and θ2 are defined as a divergent light beam when the value is positive and as a convergent light beam when the value is negative.

[第五実施形態]
本発明の第五実施形態の対物レンズは、図5に示されるように、物体側から順に配置された第一レンズ群G1と第二レンズ群(補正レンズ群)G2と第三レンズ群G3とを備えている。第一レンズ群G1は、物体側から順に、物体側に平面を向けた平凸レンズL1と物体側に凹面を向けたメニスカスレンズL2からなる接合レンズで構成されている。また、第二レンズ群G2は、物体側に凹面を向けたメニスカスレンズL3と物体側に平面を向けた平凸レンズL4で構成されており、光軸に沿って移動可能である。また、第三レンズ群G3は、正レンズL5と負レンズL6と正レンズL7からなる三枚接合レンズと、正レンズL8と、負レンズL9と正レンズL10と負レンズL11からなる三枚接合レンズと、正レンズL12と負レンズL13からなる二枚接合レンズと、像側にきつい凹面を向けた負レンズL14と、物体側に凹面を向けた負レンズL15と正レンズL16とからなる二枚接合レンズとから構成されている。
[Fifth embodiment]
As shown in FIG. 5, the objective lens according to the fifth embodiment of the present invention includes a first lens group G1, a second lens group (correction lens group) G2, and a third lens group G3 arranged in order from the object side. It has. The first lens group G1 includes, in order from the object side, a cemented lens including a plano-convex lens L1 having a plane facing the object side and a meniscus lens L2 having a concave surface facing the object side. The second lens group G2 includes a meniscus lens L3 having a concave surface facing the object side and a plano-convex lens L4 having a flat surface facing the object side, and is movable along the optical axis. The third lens group G3 includes a three-piece cemented lens including a positive lens L5, a negative lens L6, and a positive lens L7, a positive lens L8, a negative lens L9, a positive lens L10, and a negative lens L11. A double-junction lens comprising a positive lens L12 and a negative lens L13, a negative lens L14 having a tight concave surface on the image side, and a negative lens L15 and a positive lens L16 having a concave surface on the object side It consists of a lens.

第五実施形態の対物レンズのデータは下記の通りである。

Figure 2006259548
The data of the objective lens of the fifth embodiment is as follows.
Figure 2006259548

Figure 2006259548
Figure 2006259548

収差を補正するためのレンズ面間隔の可変量(単位mm)は下記の通りである。d1はピント位置からカバーガラス表面までの距離である。細胞は様々な媒質(nd=1.33〜1.5)で構成されているが、ここでは細胞液(nd=1.38程度)を仮定した。もちろん、nd=1.38以外の媒質であっても、補正レンズ群の移動によって実用的な結像性能を得ることができる。d2はWDであって、オイルで充填されている。d3とd4は、第二レンズ群G2の前後の間隔の可変量である。

Figure 2006259548
The variable amount (unit: mm) of the lens surface interval for correcting the aberration is as follows. d1 is the distance from the focus position to the cover glass surface. Cells are composed of various media (nd = 1.33 to 1.5), but here, cell fluid (about nd = 1.38) was assumed. Of course, even with a medium other than nd = 1.38, practical imaging performance can be obtained by moving the correction lens group. d2 is WD and is filled with oil. d3 and d4 are variable amounts of the distance before and after the second lens group G2.
Figure 2006259548

第五実施形態において用いられるカバーガラスは、厚さが0.17mm、nd=1.45861、νd=67.7である。また、オイルは、nd=1.47392、νd=56.4である。なお、本実施形態では、37℃の試料を観察する場合を想定し、試料に近いカバーガラスとオイルには37℃のnd、νdを用いた。   The cover glass used in the fifth embodiment has a thickness of 0.17 mm, nd = 1.45861, and νd = 67.7. The oil has nd = 1.43792 and νd = 56.4. In this embodiment, it is assumed that a sample at 37 ° C. is observed, and nd and νd at 37 ° C. are used for the cover glass and oil close to the sample.

ここで、レンズデータ中、rは各レンズ面の曲率半径(単位mm)、dは各レンズ面間の間隔(単位mm)、ndは各レンズのd線の屈折率、νdは各レンズのd線におけるアッベ数である。また、fは焦点距離(単位mm)、f(G1)は第一レンズ群G1の焦点距離(単位mm)、f(G2)は第二レンズ群G2の焦点距離(単位mm)、f(G3)は第三レンズ群G3の焦点距離(単位mm)、θ1は第二レンズ群G2に入射する最大NAのマージナル光線と光軸との成す角度(単位°)、θ2は第二レンズ群G2から射出される最大NAのマージナル光線と光軸との成す角度(単位°)、βは倍率、NAは開口数、WDは作動距離(単位mm)である。なお、θ1、θ2は、プラスの値の場合に発散光束、マイナスの値の場合に収束光束と定義している。   Here, in the lens data, r is a radius of curvature (unit: mm) of each lens surface, d is an interval (unit: mm) between the lens surfaces, nd is a refractive index of d-line of each lens, and νd is d of each lens. Abbe number on the line. Further, f is a focal length (unit: mm), f (G1) is a focal length (unit: mm) of the first lens group G1, f (G2) is a focal length (unit: mm) of the second lens group G2, and f (G3). ) Is the focal length (in mm) of the third lens group G3, θ1 is the angle (unit °) between the marginal ray of the maximum NA incident on the second lens group G2 and the optical axis, and θ2 is from the second lens group G2. An angle (unit degree) formed by the marginal ray having the maximum NA emitted and the optical axis, β is a magnification, NA is a numerical aperture, and WD is a working distance (unit mm). Θ1 and θ2 are defined as a divergent light beam when the value is positive and as a convergent light beam when the value is negative.

上記第一実施形態〜第五実施形態において用いられる各光学ガラスは、紫外域での透過率が優れ、自家蛍光の少ない光学ガラスを選択しており、各実施形態は蛍光観察に最適な対物レンズとなっている。また、各光学ガラスは、環境対応ガラス(鉛フリーガラス)を選択しており、各実施形態は環境に配慮した対物レンズとなっている。   Each optical glass used in the first embodiment to the fifth embodiment is selected from optical glasses having excellent transmittance in the ultraviolet region and low autofluorescence, and each embodiment is an objective lens that is optimal for fluorescence observation. It has become. Each optical glass is selected from environmentally friendly glass (lead-free glass), and each embodiment is an objective lens in consideration of the environment.

また、第一実施形態〜第五実施形態はいずれも、対物レンズからの射出光が平行光束となる無限遠補正型の対物レンズであり、それ自身では結像しない。そこで、例えば、表16に示されるレンズデータを有し、図17に示されるレンズ断面を有する結像レンズ(焦点距離180)と組み合わせて使用される。

Figure 2006259548
Each of the first to fifth embodiments is an infinity correction type objective lens in which light emitted from the objective lens becomes a parallel light beam, and does not form an image by itself. Therefore, for example, the lens data shown in Table 16 is used in combination with the imaging lens (focal length 180) having the lens cross section shown in FIG.
Figure 2006259548

このレンズデータにおいて、rは各レンズ面の曲率半径、dは各レンズ面間の間隔、ndは各レンズのd線の屈折率、νdは各レンズのd線におけるアッベ数である。   In this lens data, r is the radius of curvature of each lens surface, d is the distance between the lens surfaces, nd is the refractive index of the d-line of each lens, and νd is the Abbe number of the d-line of each lens.

この場合、第一実施形態〜第五実施形態の対物レンズと結像レンズの間の間隔は50mm〜170mmの間のいずれの位置でもよい。この間隔を120mmとした場合の第一実施形態の対物レンズの収差図を図6と図7に、第二実施形態の対物レンズの収差図を図8と図9に、第三実施形態の対物レンズの収差図を図10と図11に、第四実施形態の対物レンズの収差図を図12と図13に、第五実施形態の対物レンズの収差図を図14と図15に示す。これらの図において、(a)はd1=0時の球面収差、(b)はd1=0.002時の球面収差、(c)はd1=0.005時の球面収差、(d)はd1=0.01時の球面収差、(e)は正弦条件違反量、(f)は非点収差、(g)は歪曲収差、(h)はコマ収差を示している。なお、細胞内を観察するにあたり1.38を超えるような光線は結像に寄与しない。よって、(b)(c)(d)ではNAを若干少なくして表示している。   In this case, the interval between the objective lens and the imaging lens of the first to fifth embodiments may be any position between 50 mm and 170 mm. FIGS. 6 and 7 show aberration diagrams of the objective lens of the first embodiment when the distance is 120 mm, FIGS. 8 and 9 show aberration diagrams of the objective lens of the second embodiment, and FIG. 10 and 11 are aberration diagrams of the lenses, FIGS. 12 and 13 are aberration diagrams of the objective lens of the fourth embodiment, and FIGS. 14 and 15 are aberration diagrams of the objective lens of the fifth embodiment. In these drawings, (a) is a spherical aberration at d1 = 0, (b) is a spherical aberration at d1 = 0.002, (c) is a spherical aberration at d1 = 0.005, (d) is d1. = Spherical aberration at 0.01, (e) shows sine condition violation amount, (f) shows astigmatism, (g) shows distortion, and (h) shows coma. When observing the inside of a cell, light rays exceeding 1.38 do not contribute to image formation. Therefore, in (b), (c), and (d), the NA is slightly reduced for display.

第一実施形態〜第五実施形態の収差図と、図16の従来例の収差図と比較して分かるように、本発明の実施形態の対物レンズは、細胞内のように屈折率が低い試料を観察または計測する場合に発生する球面収差を良好に補正することができる。従って、細胞内を観察または計測する場合であっても、実用的な結像性能を得ることが可能である。   As can be seen by comparing the aberration diagrams of the first to fifth embodiments and the aberration diagram of the conventional example of FIG. 16, the objective lens of the embodiment of the present invention is a sample having a low refractive index as in a cell. It is possible to satisfactorily correct spherical aberration that occurs when observing or measuring the above. Therefore, practical imaging performance can be obtained even when the inside of a cell is observed or measured.

本発明の第一実施形態の対物レンズのレンズ断面図である。It is lens sectional drawing of the objective lens of 1st embodiment of this invention. 本発明の第二実施形態の対物レンズのレンズ断面図である。It is a lens sectional view of the objective lens of a second embodiment of the present invention. 本発明の第三実施形態の対物レンズのレンズ断面図である。It is lens sectional drawing of the objective lens of 3rd embodiment of this invention. 本発明の第四実施形態の対物レンズのレンズ断面図である。It is lens sectional drawing of the objective lens of 4th embodiment of this invention. 本発明の第五実施形態の対物レンズのレンズ断面図である。It is lens sectional drawing of the objective lens of 5th embodiment of this invention. 本発明の第一実施形態の対物レンズの収差図である。It is an aberration diagram of the objective lens of the first embodiment of the present invention. 本発明の第一実施形態の対物レンズの収差図である。It is an aberration diagram of the objective lens of the first embodiment of the present invention. 本発明の第二実施形態の対物レンズの収差図である。It is an aberration diagram of the objective lens of the second embodiment of the present invention. 本発明の第二実施形態の対物レンズの収差図である。It is an aberration diagram of the objective lens of the second embodiment of the present invention. 本発明の第三実施形態の対物レンズの収差図である。It is an aberration diagram of the objective lens of the third embodiment of the present invention. 本発明の第三実施形態の対物レンズの収差図である。It is an aberration diagram of the objective lens of the third embodiment of the present invention. 本発明の第四実施形態の対物レンズの収差図である。It is an aberration diagram of the objective lens of the fourth embodiment of the present invention. 本発明の第四実施形態の対物レンズの収差図である。It is an aberration diagram of the objective lens of the fourth embodiment of the present invention. 本発明の第五実施形態の対物レンズの収差図である。It is an aberration diagram of the objective lens of the fifth embodiment of the present invention. 本発明の第五実施形態の対物レンズの収差図である。It is an aberration diagram of the objective lens of the fifth embodiment of the present invention. 特開2003−021786号公報に開示されている対物レンズの収差図である。It is an aberration diagram of the objective lens disclosed in Japanese Patent Application Laid-Open No. 2003-021786. 図1〜図5の対物レンズと組み合わされる結像レンズのレンズ断面図である6 is a lens cross-sectional view of an imaging lens combined with the objective lens of FIGS.

符号の説明Explanation of symbols

G1…第一レンズ群、G2…第二レンズ群、G3…第三レンズ群。 G1 ... first lens group, G2 ... second lens group, G3 ... third lens group.

Claims (11)

生体細胞に代表される試料(屈折率ndが1.33〜1.5)をカバーガラス(屈折率ndが1.4〜1.6)と液浸液(屈折率ndが1.33〜1.6)を通して観察または計測するための液浸系顕微鏡対物レンズであり、前記試料と前記カバーガラスの屈折率差に起因して発生する収差または前記試料の厚さに依存して発生する収差を補正するために、発散光束中に置かれた光軸に沿って移動可能な移動レンズ群を備えていることを特徴とする液浸系顕微鏡対物レンズ。   A sample represented by a living cell (refractive index nd is 1.33 to 1.5) is covered with a cover glass (refractive index nd is 1.4 to 1.6) and an immersion liquid (refractive index nd is 1.33 to 1). .6) an immersion microscope objective lens for observation or measurement through, wherein aberrations caused by a difference in refractive index between the sample and the cover glass or aberrations depending on the thickness of the sample An immersion microscope objective lens comprising a moving lens group movable along an optical axis placed in a divergent light beam for correction. 物体側から順に、物体側に平面を向けた平凸レンズと物体側に凹面を向けたメニスカスレンズからなる接合レンズを有し正の屈折力を持つ第一レンズ群と、発散光束中に置かれ、少なくとも一つの正レンズを有し正の屈折力を持つ第二レンズ群と、少なくとも三つの接合レンズを有し、発散光束を平行光束に変換する正の屈折力を持つ第三レンズ群とから構成され、前記第二レンズ群は収差の補正のために、前記第一レンズ群と前記第三レンズ群に対して相対的に光軸に沿って移動可能であることを特徴とする液浸系顕微鏡対物レンズ。   In order from the object side, a first lens group having a positive refractive power having a cemented lens composed of a plano-convex lens having a plane facing the object side and a meniscus lens having a concave surface facing the object side, is placed in a divergent light beam, Consists of a second lens group having at least one positive lens and positive refractive power, and a third lens group having at least three cemented lenses and having positive refractive power for converting a divergent light beam into a parallel light beam An immersion microscope characterized in that the second lens group is movable along the optical axis relative to the first lens group and the third lens group in order to correct aberrations. Objective lens. 請求項2に記載の液浸系顕微鏡対物レンズであって、次の条件式
4<f(G2)/f<10 …(1)
(ここで、f(G2)は第二レンズ群の焦点距離、fは対物レンズ全系の焦点距離である)
を満足していることを特徴とする液浸系顕微鏡対物レンズ。
The immersion microscope objective lens according to claim 2, wherein the following conditional expression 4 <f (G2) / f <10 (1)
(Where f (G2) is the focal length of the second lens group, and f is the focal length of the entire objective lens system)
An immersion microscope objective lens characterized by satisfying
請求項3に記載の液浸系顕微鏡対物レンズであって、次の条件式
4<f(G2)/f<8 …(2)
を満足していることを特徴とする液浸系顕微鏡対物レンズ。
The immersion microscope objective lens according to claim 3, wherein the following conditional expression 4 <f (G2) / f <8 (2)
An immersion microscope objective lens characterized by satisfying
生体細胞に代表される試料(屈折率ndが1.33〜1.5)をカバーガラス(屈折率ndが1.4〜1.6)と液浸液(屈折率ndが1.33〜1.6)を通して観察または計測するための液浸顕微鏡対物レンズであり、物体側から順に、物体側に平面を向けた平凸レンズと物体側に凹面を向けたメニスカスレンズからなる接合レンズを有し正の屈折力を持つ第一レンズ群と、発散光束中に置かれ、少なくとも一つの正レンズを有し正の屈折力を持つ第二レンズ群と、少なくとも三つの接合レンズを有し、発散光束を平行光束に変換する正の屈折力を持つ第三レンズ群とから構成され、前記第二レンズ群は前記試料と前記カバーガラスの屈折率差に起因して発生する収差または前記試料の厚さに依存して発生する収差の補正のために、前記第一レンズ群と前記第三レンズ群に対して相対的に光軸に沿って移動可能であることを特徴とする液浸系顕微鏡対物レンズ。   A sample represented by a living cell (refractive index nd is 1.33 to 1.5) is covered with a cover glass (refractive index nd is 1.4 to 1.6) and an immersion liquid (refractive index nd is 1.33 to 1). .6) An immersion microscope objective lens for observation or measurement through a positive lens having, in order from the object side, a cemented lens consisting of a plano-convex lens having a plane facing the object side and a meniscus lens having a concave surface facing the object side. A first lens group having a refractive power of 2; a second lens group having at least one positive lens and having a positive refractive power; and at least three cemented lenses. A third lens group having a positive refractive power for conversion into a parallel light beam, and the second lens group has an aberration caused by a difference in refractive index between the sample and the cover glass or a thickness of the sample. For the correction of aberrations generated depending on Immersion microscope objective characterized in that it is movable along the relative optical axis with respect to the third lens group and first lens group. 請求項5に記載の液浸系顕微鏡対物レンズであって、次の条件式
4<f(G2)/f<10 …(1)
(ここで、f(G2)は第二レンズ群の焦点距離、fは対物レンズ全系の焦点距離である)
を満足していることを特徴とする液浸系顕微鏡対物レンズ。
6. The immersion microscope objective lens according to claim 5, wherein the following conditional expression 4 <f (G2) / f <10 (1)
(Where f (G2) is the focal length of the second lens group, and f is the focal length of the entire objective lens system)
An immersion microscope objective lens characterized by satisfying
請求項6に記載の液浸系顕微鏡対物レンズであって、次の条件式
4<f(G2)/f<8 …(2)
を満足していることを特徴とする液浸系顕微鏡対物レンズ。
The immersion microscope objective lens according to claim 6, wherein the following conditional expression 4 <f (G2) / f <8 (2)
An immersion microscope objective lens characterized by satisfying
請求項1ないし請求項7のいずれかに記載の液浸系顕微鏡対物レンズであって、次の条件式
0.1<θ1/θ2<0.4 …(3)
(ここで、θ1は前記移動レンズ群へ入射する最大NAのマージナル光線と光軸との成す角、θ2は前記移動レンズ群から射出される最大NAのマージナル光線と光軸との成す角である)
を満足していることを特徴とする液浸系顕微鏡対物レンズ。
The immersion microscope objective lens according to any one of claims 1 to 7, wherein the following conditional expression: 0.1 <θ1 / θ2 <0.4 (3)
(Where θ1 is the angle formed by the marginal ray of maximum NA incident on the moving lens group and the optical axis, and θ2 is the angle formed by the marginal ray of maximum NA emitted from the moving lens group and the optical axis. )
An immersion microscope objective lens characterized by satisfying
請求項8に記載の液浸系顕微鏡対物レンズであって、次の条件式
0.15<θ1/θ2<0.3 …(4)
を満足していることを特徴とする液浸系顕微鏡対物レンズ。
The immersion microscope objective lens according to claim 8, wherein the following conditional expression: 0.15 <θ1 / θ2 <0.3 (4)
An immersion microscope objective lens characterized by satisfying
請求項1ないし請求項9のいずれかに記載の液浸系顕微鏡対物レンズであって、液浸液の屈折率ndが1.37以上であり、開口数が1.37より大きいことを特徴とする液浸系顕微鏡対物レンズ。   10. The immersion microscope objective lens according to claim 1, wherein a refractive index nd of the immersion liquid is 1.37 or more and a numerical aperture is larger than 1.37. Immersion microscope objective lens. 請求項10に記載の液浸系顕微鏡対物レンズであって、液浸液の屈折率ndが1.4以上であり、開口数が1.4より大きいことを特徴とする液浸系顕微鏡対物レンズ。   The immersion microscope objective lens according to claim 10, wherein the refractive index nd of the immersion liquid is 1.4 or more and the numerical aperture is larger than 1.4. .
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