JP2005522220A - Cetp活性及び心臓病治療(剤)の効力(有効性)の生体外測定方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 被検体の体液中のコレステリルエステル転送タンパク質(CETP)活性測定方法であって、被検体から体液のサンプルを採取すること、前記サンプルと、標識CETP基質を含むドナー及び該基質がCETP活性によって転送されて来られ得るアクセプターとを接触して反応混合溶液を生成するとともに、該サンプルが該反応混合溶液の少なくとも凡そ89%v/vを構成するようにすること、及び前記ドナーから前記アクセプターへの前記基質の転送を検出して前記体液中のCETPの活性を測定することを含む測定方法。
Description
Claims (20)
- 被検体の体液中のコレステリルエステル転送タンパク質(CETP)活性測定方法であって、
前記被検体から体液のサンプルを採取すること、
前記サンプルと、標識CETP基質を含むドナーと、該基質がCETP活性によって転送されて来られ得るアクセプターと、を接触して反応混合溶液を生成するとともに、該サンプルが該反応混合溶液の少なくとも凡そ89%v/vを構成するようにすること、及び
前記ドナーから前記アクセプターへの前記基質の転送を検出して前記体液中のCETPの活性を測定すること
を含む方法。 - 前記基質は、自己消光蛍光分子で標識されている請求項1の方法。
- 前記自己消光蛍光分子は、N-(7-ニトロベンズ-2-オキサ-1,3-ジアゾール-4-イル)アミノ(NBD)、5-ブチル-4,4-ジフルオロ-4-ボラ-3a,4a-ジアザ-s-インダセン、フルオレセイン、ダンシル、又はローダミンである請求項2の方法。
- 前記分子は、NBDである請求項3の方法。
- 前記基質は、コレステリルエステル、トリアシルグリセロール、又はトリグリセリドである請求項3の方法。
- 前記基質は、リノール酸コレステリルである請求項5の方法。
- 前記アクセプターは、アポB含有リポタンパク質である請求項1〜6の何れか一の方法。
- 前記ドナーは、アポA-Iを含有しない請求項1〜7の何れか一の方法。
- 前記サンプルは、凍結されている請求項1〜8の何れか一の方法。
- 標準から、転送された基質の量を(コンピュータで)計算することを更に含む請求項1〜9の何れか一の方法。
- 前記アクセプターに組み込まれた標識の量の前記測定は、前記反応混合溶液から該アクセプターを分離することなく該反応混合溶液において実行される請求項1〜10の何れか一の方法。
- 前記サンプルは、内因性CETP阻害剤又は賦活剤を含む請求項1〜11の何れか一の方法。
- CETP活性のレベルと、心臓病、アテローム性動脈硬化症、低αリポタンパク血症、プラズマアポA−I対アポBの異常割合、アポB含有タンパク質のレベル上昇、冠動脈硬化症、糖尿病及び/又は肥満症に関する危険因子の存在を指示する予め決定された基準値と比較することを更に含む請求項12の方法。
- CETP活性のレベルと、前記サンプル中のCETPタンパク質の量又は活性に影響を及ぼすCETPをコードする遺伝子における遺伝的欠陥の存在を指示する予め決定された基準値と比較することを更に含む請求項1〜12の何れか一の方法。
- 前記被検体は、CETP活性阻害剤の投与により処置され、かつ前記体液は、前記CETP阻害剤を含有する、及び/又は
前記被検体は、生理的CETP活性に影響を及ぼす非アテローム生成食餌改良療法により処置されている
請求項1〜12の何れか一の方法。 - 前記阻害剤は、コレステロール合成及び/又は転送を阻害し、CETP発現を阻害し、又はアテローム性動脈硬化症の治療に使用される請求項15の方法。
- 前記CETP発現の阻害は、CETPの転写又は翻訳の阻害により行われる請求項16の方法。
- 被検体の体液中に存在するCETPの活性を調節する化合物の効力の測定方法であって、
前記化合物を前記被検体へ投与する前に該被検体から体液の第1のサンプルを採取し、及び前記化合物を前記被検体へ投与した後に該被検体から体液の第2のサンプルを採取すること、
前記第1及び第2のサンプルの各々と、標識CETP基質を含むドナー及び該基質がCETP活性によって転送されて来られ得るアクセプターとを接触して第1及び第2の反応混合溶液をそれぞれ生成するとともに、各サンプルが対応する各反応混合溶液の少なくとも凡そ89%v/vを構成するようにすること、及び
前記ドナーから前記アクセプターへの前記基質の転送を検出して各サンプル中のCETPの活性を測定するとともに、
前記化合物の効力は、前記第2のサンプルのCETP活性と前記第1のサンプルのCETP活性とを比較することにより測定すること
を含む方法。 - 被検体の体液中のコレステリルエステル転送タンパク質(CETP)活性の測定方法であって、
被検体から、アポB含有リポタンパク質を含む体液のサンプルを採取すること、
前記サンプルと、CETP活性によって前記リポタンパク質へ転送され得る標識CETP基質を含むドナーとを接触させて反応混合溶液を生成するとともに、該サンプルが該反応混合溶液の少なくとも凡そ89%v/vを構成するようにすること、及び
前記ドナーから前記リポタンパク質への前記基質の転送を検出して前記体液中のCETPの活性を測定すること
を含む方法。 - 体液サンプル中のCETP活性測定用キットであって、
標識基質を含むドナー粒子の懸濁液を含有する第1の容器と、請求項1のアッセイを実行するための説明書とを有し、
更に、任意的に、第2の容器内の前記基質の転送のためのアクセプターを有する
キット。
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