JP2005518209A - 組換えマイナス鎖ウイルスrna発現系およびワクチン - Google Patents
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Abstract
Description
(発明の分野)
本発明は、天然で非分節型のマイナス鎖ウイルスに由来してこのウイルスに適用可能な組換えRNAウイルステンプレート(ボルナウイルス科、フィロウイルス科、およびパラミクソウイルス科が挙げられる)およびこのような組換えRNAウイルステンプレートを産生する方法に関し、ここで、このテンプレートは、2個以上の組換えRNA分子から産生される。この組換えRNAウイルステンプレートは、適切な宿主細胞系において異種遺伝子産物を発現するためおよび/またはこの科から得て発現し、パッケージングし、そして/または異種遺伝子産物を提示する組換えウイルスを構築するために使用され得る。このように調製された発現産物およびキメラウイルスは、ワクチン処方において、有利に使用され得る。本発明はまた、弱毒化原型または増強された免疫原性のような、組換えウイルスをワクチンおよび治療処方物における使用のために適切にする改変および/または変異を含む、対応する遺伝操作された組換えウイルスにも関する。
多くのDNAウイルス(例えば、ワクシニアウイルス、バキュロウイルスなど)が、宿主細胞系における異種タンパク質の発現を導くために、遺伝子操作されている。同様の進歩が、プラス鎖RNAウイルス(例えば、ポリオウイルス)を用いてなされている。これらの構築物の発現産物(すなわち、異種遺伝子産物または異種遺伝子産物を発現するキメラウイルス)が、ワクチン処方物(サブユニットウイルスワクチンまたはウイルス全体のワクチンのどちらか)において、潜在的に有用であると考えられる。ワクチンにおいて使用するための組換えウイルスまたはキメラウイルスを構築する際のワクシニアウイルスのようなウイルスの使用の1つの欠点は、主要なエピトープの変化を欠くことである。ウイルス株におけるこの可変性の欠如は、複数のワクチン接種がその株に対する宿主耐性を引き起こし、従って、接種したウイルスは、宿主に感染し得ないという点で、それゆえキメラワクシニアの繰り返し使用に対して厳しい限定を設ける。キメラウイルスでの耐性個体の接種は、効率的な免疫刺激を誘導しない。
ネガティブ−センスゲノムのエンベロープに包まれた一本鎖RNAを含むウイルス科は、非分節型ゲノムを有する群(パラミクソウイルス科、ラブドウイルス科、ボルナウイルス科およびフィロウイルス科)または分節型ゲノムを有する群(オルトミクソウイルス科、ブニヤウイルス科およびアレナウイルス科)に分類される。本明細書中で以下に詳細に記載され、実施例において使用されるパラミクソウイルス科としては、ニューカッスル病ウイルス(NDV)、パラインフルエンザウイルス、センダイウイルス、シミアンウイルス5、麻疹ウイルスおよびムンプスウイルスのウイルスが挙げられる。ラブドウイルス科としては、狂犬病ウイルスおよび水疱性口内炎ウイルス(VSV)のウイルスが挙げられる。以下の議論は、限定ではなく例示として、パラミクソウイルス科の特定のメンバーに焦点を当てる。
組換えDNAまたはクローン化DNAからのNDVゲノムの遺伝的操作を可能にする逆遺伝学系は、記載されている(Peeters BPら(1999)J Virol 73:5001−5009;Romer−Oberdorfer Aら(1999)J Gen Virol 80:2987−2995;Krishnamurthy Sら(2000)Virology 278:168−182;Nakaya Tら(2001)J Virol 75:11868−11873)。以下を含む、他の非分節型マイナス鎖RNAウイルスのための組換え系もまた、記載されている:狂犬病ウイルス(Schnell MJ ら(1994)EMBO J 13:4195−4203)、VSV(Lawson NDら(1995)Proc Natl Acad Sci USA 92:4477−4481;Whelan SPら(1995)Proc Natl Acad Sci(USA)92:8388−8392)、麻疹ウイルス(Radecke Fら(1995)EMBO J 14:5773−5784)、感染性ヒトRSウイルス(Collins PLら(1995)Proc Natl Acad Sci(USA)92:11563−11567)、センダイウイルス(Garcin Dら(1995)EMBO J 14:6087−6094;Kato Aら(1996)Genes Cells 1:569−579)、牛疫ウイルス(Baron MDおよびBarrett T.(1997)J Virol 71:1265−1271)、パラインフルエンザウイルス(Hoffman MA,およびBanerjee AK.(1997)J Virol 71:4272−4277;Durbin APら(1997)Virology 235:323−332)およびパラミクソウイルスSV5(He Bら(1997)Virology 1997;237:249−260)。これらの全ての系において、非分節型ゲノムの必要なウイルスタンパク質(NP、P/V、M、F、HNおよびL)が、単一のプラスミドまたは単一のRNA分子上の組換え核酸からコードされ、このようにしてウイルスゲノムの構成を模倣する。さらに、ウイルス性のNPタンパク質、Pタンパク質およびLタンパク質は、同時トランスフェクトされたプラスミドから発現されたか、または同時発現された異種RNAポリメラーゼもしくはヘルパーウイルスによってそれらの機能が提供された。
本発明は、天然で非分節型のマイナス鎖ウイルス由来であってこのウイルスに適用可能な組換えRNAウイルステンプレートおよびこのような組換えRNAウイルステンプレートを産生する方法に関し、ここで、このテンプレートは、2個以上の組換えRNA分子から産生される。従って、本発明の方法は、マイナス鎖天然非分節型RNAウイルスゲノムの非分節型の基本的な性質を変化または改変させ、分節型ゲノムを含む組換えRNAウイルスのレスキューを可能にする、複数のゲノムセグメントを作製することに基づく。次いで、本発明の方法は、単一のウイルス非分節型リボ核タンパク質に代わって複数のウイルスリボ核タンパク質から、必要なウイルスタンパク質を発現することを容易にし、このことによって達成される。
(a)2個以上の組換えRNA分子をコードするヌクレオチド配列であって、この組換えRNA分子は、マイナス鎖RNAウイルスのRNAポリメラーゼの結合部位、ならびにウイルス媒介性の複製および転写に必要であって、かつこの宿主細胞内でこのウイルスのゲノムvRNAまたは対応するcRNAにおける発現を可能にするシグナルを含む、ヌクレオチド配列;ならびに
(b)このウイルスの核タンパク質およびRNA依存性ポリメラーゼが発現可能である、発現ベクターまたは発現ベクターのセット、
によって宿主細胞をトランスフェクトする工程、および培養物からウイルスを回収する工程を、包含する。
(a)2個以上の組換えRNA分子をコードするヌクレオチド配列であって、この組換えRNA分子は、マイナス鎖RNAウイルスのRNAポリメラーゼの結合部位、ならびにウイルス媒介性の複製および転写に必要であって、かつこの宿主細胞内でこのウイルスのゲノムvRNAまたは対応するcRNAの発現を可能にするシグナル、ならびに1つ以上の異種RNA配列を含む、ヌクレオチド配列;ならびに
(b)このウイルスの核タンパク質およびRNA依存性ポリメラーゼが発現可能である、発現ベクターまたは発現ベクターのセット、
によって宿主細胞をトランスフェクトする工程、および培養物からキメラウイルスを回収する工程を、包含する。
本明細書中で使用される場合、以下の用語は、示した意味を有する:
cRNA = アンチゲノムRNA
HIV = ヒト免疫不全ウイルス
L = 高分子タンパク質
M = マトリックスタンパク質(エンベロープの内側の系統)
moi = 感染の多重度
NA = ノイラミニダーゼ(エンベロープ糖タンパク質)
NDV = ニューカッスル病ウイルス
NP = 核タンパク質(RNAと結合し、ポリメラーゼ活性に必須である)
NS = 非構造タンパク質(機能未知)
nt = ヌクレオチド
PA、PB1、PB2 = RNA指親和性RNAポリメラーゼ成分
RNP = リボ核タンパク質
rRNP = 組換えRNP
vRNA = ゲノムウイルスRNA
(発明の詳細な説明)
本発明は、遺伝子操作されたマイナス鎖非分節型RNAウイルスおよび1つ以上の生物学的に活性名ウイルスリボ核タンパク質(RNP)から産生されるウイルスベクターに関する。本発明は、マイナス鎖RNAウイルスおよび2つ以上の組換えRNA分子または組換えセグメントから、本発明の方法を使用して産生される天然非分節型RNAウイルスのためのウイルステンプレートに関する。
本発明のウイルスポリメラーゼ結合部位/プロモーターの補体(例えば、3’−NDVウイルス末端の補体)、または3’− NDV末端および5’−NDV末端によって隣接される配列をコードする異種遺伝子は、当該分野で公知の技術を用いて構築され得る。生じたRNAテンプレートは、ネガィブ極性であり得、そしてウイルスRNA合成装置がこのテンプレートを認識し得るような、適切な末端配列を含む。あるいは、ウイルスRNA合成装置がこのテンプレートを認識し得るような適切な末端配列を含むプラス極性RNAテンプレートもまた、使用され得る。これらのハイブリッド配列を含む組換えDNA分子は、クローン化され得、そしてDNA指親和性RNAポリメラーゼ(例えば、バクテリオファージのT7ポリメラーゼ、T3ポリメラーゼおよびSP6ポリメラーゼ、またはポリメラーゼIのような真核生物ポリメラーゼなど)によって転写され、ウイルスポリメラーゼの認識および活性を許容する適切なウイルス配列を保有する組換えRNA分子をインビトロまたはインビボで産生し得る。
本発明の実施形態において、HNタンパク質、Pタンパク質、NPタンパク質、Mタンパク質、Fタンパク質、またはLタンパク質をコードする遺伝子セグメントが、異種遺伝子産物の挿入のために使用され得る。外来遺伝子配列を、これらのセグメントのいずれかへ挿入することは、外来遺伝子にはウイルスコード領域のとの完全な置換または一部置換のどちらかによって達成され得る。完全な置換は、PCR指向的変異誘発の使用を介して、おそらく最もよく達成される。簡潔には、PCRプライマーAは、5’から3’末端へと、以下を含む:クラスIIS制限酵素部位(すなわち、「シフター(shifter)」酵素;特定の配列を認識するが、その配列の上流または下流のどちらかのDNAを切断する)のような独特な制限酵素部位;特定のウイルス遺伝子の領域に相補的な一続きのヌクレオチド;および、外来遺伝子産物のカルボキシ末端コード部分に相補的な一続きのヌクレオチド。PCRプライマーBは、5’末端からから3’末端へとに、以下を含む:独特な制限酵素部位;特定のウイルス遺伝子に相補的な一続きのヌクレオチド;外来遺伝子の5’コード部分に対応する一続きのオヌクレオチド。外来遺伝子のクローン化コピーと共に、これらのプライマーを使用するPCR反応の後、生成物は、その独特の制限酵素部位を用いて、切断され、そしてクローン化され得る。クラスIIS酵素を用いる消化および精製ファージポリメラーゼを用いた転写は、外来遺伝子挿入を有する特定のウイルス遺伝子の正確な非転写末端を含むRNA分子を生成する。代替の実施形態において、PCRプライム反応は、バクテリオファージプロモーター配列およびハイブリッド遺伝子配列を含む2本鎖DNAを調製するために使用され得、その結果、RNAテンプレートは、クローニングすることなく直接転写され得る。
NDVの赤血球凝集素活性およびノイラミニダーゼ活性は、単一の遺伝子HNによってコードされる。HNタンパク質は、ウイルスの主要な表面糖タンパク質である。インフルエンザウイルスのような種々のウイルスについて、赤血球凝集素タンパク質およびノイラミニダーゼタンパク質は、多くの抗原性部位を含むことが実証されている。従って、このタンパク質は、感染後の体液性免疫応答の強力な標的である。従って、HN内の抗原部位を外来性タンパク質の一部で置換すると、この外来性ペプチドに対し、強い体液性応答を提供し得る。配列が、HN分子内に挿入され、そしてこの配列がHNの外側表面上で発現する場合、この配列は、免役原性である。例えば、HIVのgp160に由来するペプチドは、HNタンパク質の抗原性部位を置換し得、細胞性免役応答および体液性免役応答の両方の誘発を生じる。異なったアプローチにおいて、外来ペプチド配列は、ウイルス配列を少しも欠失することなく、抗原性部位内に挿入され得る。このような構築物の発現生成物は、外来性抗原に対するワクチンにおいて有用であり得、そして上で議論された問題(ワクチン接種された宿主における組換えウイルスの伝播の問題)を上手に避け得る。抗原性部位のみにおける置換を有するインタクトなHN分子は、HN機能を可能にし得、従って、生存可能なウイルスの構築を可能にする。従って、このウイルスは、さらなるヘルパー機能の必要なしに増殖し得る。このウイルスはまた、いかなる偶発的漏出の危険も避ける他の方法において、弱毒化され得る。他のハイブリッド構築物は、細胞表面上にタンパク質を発現するように作製され得るか、またはこれらのタンパク質が細胞から放出されることを可能にするように作製され得る。表面の糖タンパク質としては、HNは、細胞表面への輸送に必要なアミノ末端切断可能なシグナル配列および膜の固定に必要なカルボキシ末端配列を有する。細胞表面上のインタクトな外来性タンパク質を発現するために、これらのHNシグナルを使用してハイブリッドタンパク質を作製することが、必要であり得る。この場合、その融合タンパク質は、さらなる内部プロモーター由来の別個の融合タンパク質として発現され得る。あるいは、輸送シグナルだけが存在し、かつ膜固定ドメインが存在しない場合、そのタンパク質は、細胞外に分泌され得る。
2シストロン性mRNAが、ウイルス配列の翻訳の内部開始を許容し、そして正規の末端開始部位からの外来タンパク質コード配列の発現を可能にするように、構築され得る。あるいは、ウイルス配列が正規の末端オープンリーディングフレームから翻訳され、一方で外来配列が内部部位から開始される2シストロン性mRNA配列が、構築され得る。特定の内部リボソーム侵入部位(IRES)配列が、利用され得る。選択されるIRES配列は、ウイルスパッケージング制限を妨害しないように十分短くあるべきである。従って、このような2シストロン性アプローチのために選択されるIRESは、500ヌクレオチド長以下であることが好ましく、250ヌクレオチド未満である。さらに、利用されるIRESは、ピコルナウイルスエレメントと配列または構造の相同性を共有しないことが好ましい。好ましいIRESエレメントとしては、哺乳動物BiP IRESおよびC型肝炎IRESが挙げられるが、これらに限定されない。
上述のように調製された組換えテンプレートは、適切な宿主細胞において異種遺伝子産物を発現するためかまたは異種遺伝子産物を発現するキメラウイルスを作製するために、種々の方法にて使用され得る。1つの実施形態において、組換えテンプレートは、高レベルでの異種遺伝子産物の発現を指示し得る適切な宿主細胞を、トランスフェクトするために使用され得る。高レベルでの発現を提供する宿主細胞系としては、NDVで重感染された(superinfected)細胞株、NDV機能を補完するように操作された細胞株などのような、ウイルス機能を提供する継続的細胞株が、挙げられる。
キメラウイルスを調製するため、マイナス鎖ウイルスゲノムおよび/または2つ以上の分節または2つ以上のRNAにおけるプラスセンスまたはマイナスセンスにおいて外来タンパク質をコードする組換えマイナス鎖ウイルスRNAが、細胞をトランスフェクトするために使用され得、この細胞は、複製およびレスキューのために必要な、ウイルスタンパク質ならびに機能を提供するか、または「親」ウイルスによってもまた感染される。代替のアプローチにおいて、2つ以上の分節においてゲノムウイルスRNAまたはアンチゲノムウイルスRNAをコードするプラスミド(野生型または改変型のどちらか)が、ウイルスポリメラーゼタンパク質(例えば、NP、PまたはL)をコードするプラスミドと共に宿主中に同時トランスフェクトされ得る。別の実施形態において、2つ以上の分節においてアンチゲノムウイルスRNAをコードするプラスミドが、ウイルスポリメラーゼタンパク質Pおよびウイルスポリメラーゼタンパク質Lをコードするプラスミドと共に同時トランスフェクトされ得る。なぜなら、NPポリメラーゼタンパク質は、例えばNDVのアンチゲノムコピーによって転写される最初のタンパク質であり、トランスでNPポリメラーゼをさらに提供する必要はないからである。
本発明は、本発明の操作されたマイナス鎖RNAウイルスを含むワクチン処方物および治療処方物を包含する。本発明は、ウイルス感染に対する保護を授けるため、または癌抗原に対する免疫応答を促進もしくは開始させるためにワクチン処方物において改変された、天然で非分類型マイナス鎖の組換えウイルスの使用を、包含する。なお別の実施形態において、本発明の天然で非分類型マイナス鎖の組換えウイルスは、種々の病原体のいずれかに対する保護性応答を誘導する外来エピトープを発現するためのビヒクルとして使用され得る。さらなる実施形態において、本発明の組換えウイルスは、異種性のポリペプチドまたは治療的タンパク質(オンコジーンまたは改変されたオンコジーン、リガンドまたはレセプター結合性タンパク質、および増殖因子または免疫刺激性分子が挙げられるが、これらに限定されない)を発現するためのビヒクルとして使用され得る。
ワクチン接種は、種々の疾患を予防または処置するための、強力な手段である。有効なワクチンは、ヒトおよび動物において、種々の感染性因子に対して開発されているが、ワクチンが利用可能でない多くの微生物病原体(HIVを含む)が存在する。本実施例は、種々の病原体ならびに癌に対して有効なワクチンの開発のために重要であり得る、新規のマイナス鎖RNAウイルスベクターに関する。この実施例において、天然で非分類型のマイナス鎖ウイルスが、2つ以上のセグメントからか、または2つ以上のRNA分子もしくはウイルスRNPSから、組換え的に調製される。
Claims (18)
- マイナス鎖非分節型ウイルスのためのマイナス鎖RNAウイルスを産生するための方法であって、該方法は、宿主細胞を、以下:
(a)2個以上の組換えRNA分子をコードするヌクレオチド配列であって、該組換えRNA分子は、マイナス鎖RNAウイルスのRNAポリメラーゼの結合部位、ならびにウイルス媒介性の複製および転写に必要なシグナルを含み、かつ該宿主細胞において該ウイルスのゲノムvRNAまたは対応するcRNAを発現可能である、ヌクレオチド配列;ならびに
(b)該ウイルスの核タンパク質およびRNA依存性ポリメラーゼを発現可能である、発現ベクターまたは発現ベクターのセット、
によってトランスフェクトする工程、ならびに
培養物から該ウイルスを回収する工程、
を包含する、方法。 - マイナス鎖非分節型ウイルスのためのキメラマイナス鎖RNAウイルスを産生するための方法であって、該方法は、宿主細胞を、以下:
(a)2個以上の組換えRNA分子をコードするヌクレオチド配列であって、該組換えRNA分子は、マイナス鎖RNAウイルスのRNAポリメラーゼの結合部位、ならびにウイルス媒介性の複製に必要なシグナルおよびウイルス媒介性の転写に必要なシグナルを含み、かつ該宿主細胞において該ウイルスのゲノムvRNAまたは対応するcRNAおよび1つ以上の異種RNA配列を発現可能である、ヌクレオチド配列;ならびに
(b)該ウイルスの核タンパク質およびRNA依存性ポリメラーゼを発現可能である、発現ベクターまたは発現ベクターのセット、
によってトランスフェクトする工程、ならびに
培養物から該キメラウイルスを回収する工程、
を包含する、方法。 - 2個以上の分節型組換えRNA分子のセットであって、天然で非分節型RNAウイルスのRNAポリメラーゼに特異的な結合部位、ならびに該ウイルス媒介性の複製および転写に必要なシグナルを含み、該分節型組換えRNA分子は、RNA配列に作動可能に連結しており、かつ該RNAウイルスの必要な機能的転写単位を集合的にコードし、ここで、各分節型組換えRNA分子が、該RNAウイルスの必要な機能的転写単位のサブセットをコードする、RNA分子のセット。
- 2個以上の分節型組換えRNA分子のセットであって、天然で非分節型RNAウイルスのRNAポリメラーゼに特異的な結合部位、ならびに該ウイルス媒介性の複製および転写に必要なシグナルを含み、該分節型組換えRNA分子は、RNA配列に作動可能に連結しており、かつ該RNAウイルスの必要な機能的転写単位を集合的にコードし、ここで、各分節型組換えRNA分子が、該RNAウイルスの必要な機能的転写単位のサブセットをコードし、そしてここで、該組換えRNA分子のうちの1つ以上は、異種RNA配列に作動可能に連結した該RNAウイルスの機能的転写単位をコードする、RNA分子のセット。
- 2個以上の分節型組換えRNA分子のセットであって、天然で非分節型RNAウイルスのRNAポリメラーゼに特異的な結合部位、ならびに該ウイルス媒介性の複製および転写に必要なシグナルを含み、該分節型組換えRNA分子は、RNA配列に作動可能に連結しており、かつ該RNAウイルスの必要な機能的転写単位を集合的にコードし、ここで、各分節型組換えRNA分子が、該RNAウイルスの必要な機能的転写単位のサブセットをコードし、そしてここで、該組換えRNA分子のうちの1つ以上は、変異、挿入または欠失を含む、RNA分子のセット。
- 前記異種RNAが、ウイルス抗原、細菌抗原、寄生生物抗原、腫瘍抗原、オンコジーンもしくは改変オンコジーン、リガンドもしくはレセプター結合タンパク質、治療タンパク質、増殖因子、または免疫調節分子からなる群から選択される異種ポリペプチドをコードする、請求項4に記載の組換えRNA分子のセット。
- 前記ウイルス抗原が、ヒト免疫不全ウイルス、ニューカッスル病ウイルス、インフルエンザウイルス、RSウイルス、マレック病ウイルス、伝染性ファブリキウス嚢病ウイルス、伝染性気管支炎ウイルス、伝染性滑液包炎ウイルス、ニワトリ貧血ウイルス、伝染性喉頭気管炎ウイルス、トリ白血病ウイルス、細網内皮症ウイルス、トリインフルエンザウイルス、狂犬病ウイルス、ネコジステンパーウイルス、水疱性口内炎ウイルス、牛疫ウイルス、および豚痘ウイルスからなる群から選択されるウイルスに由来する、請求項6に記載の組換えRNA分子のセット。
- 請求項3、請求項4または請求項5に記載の組換えRNA分子のセットを含むマイナス鎖RNAウイルスを含む、組換えウイルスまたはキメラウイルス。
- 請求項8に記載のキメラウイルスであって、前記異種RNAは、ウイルス抗原、腫瘍抗原、細菌抗原、寄生生物抗原、オンコジーンもしくは改変オンコジーン、リガンドもしくはレセプター結合タンパク質、治療タンパク質、増殖因子または免疫調節分子に由来する、キメラウイルス。
- 請求項9に記載のキメラウイルスであって、前記ウイルス抗原は、ヒト免疫不全ウイルス、ニューカッスル病ウイルス、インフルエンザウイルス、RSウイルス、マレック病ウイルス、伝染性ファブリキウス嚢病ウイルス、伝染性気管支炎ウイルス、伝染性滑液包炎ウイルス、ニワトリ貧血ウイルス、伝染性喉頭気管炎ウイルス、トリ白血病ウイルス、細網内皮症ウイルス、トリインフルエンザウイルス、狂犬病ウイルス、ネコジステンパーウイルス、水疱性口内炎ウイルス、牛疫ウイルス、および豚痘ウイルスからなる群から選択されるウイルスに由来する、キメラウイルス。
- 分節型ゲノムを有する、天然で非分節型のマイナス鎖RNAウイルスの組換えウイルスを産生するための方法であって、該方法は、宿主細胞を、請求項3または請求項5の組換えRNA分子のセットをコードするヌクレオチド配列および複製または転写に必要なウイルス機能をコードするヌクレオチド配列でトランスフェクトする工程、および培養物から該組換えウイルスを回収する工程を、包含する方法。
- 天然で非分節型のマイナス鎖RNAのキメラウイルス組換えウイルスを産生するための方法であって、該方法は、宿主細胞を、請求項4または請求項5の組換えRNA分子のセットをコードするヌクレオチド配列および複製または転写に必要なウイルス機能をコードするヌクレオチド配列でトランスフェクトする工程、ならびに培養物から該キメラウイルスを回収する工程を、包含する方法。
- 1つ以上の異種エピトープをコードする、請求項12に記載の方法によって産生される組換えキメラマイナス鎖ウイルス、および薬学的に受容可能な賦形剤またはビヒクルを含有する、ワクチン処方物。
- 前記異種エピトープが、ウイルス抗原、細菌抗原、寄生生物抗原、または腫瘍抗原である、請求項13に記載のワクチン処方物。
- 前記ウイルス抗原が、ヒト免疫不全ウイルス、ニューカッスル病ウイルス、インフルエンザウイルス、RSウイルス、マレック病ウイルス、伝染性ファブリキウス嚢病ウイルス、伝染性気管支炎ウイルス、伝染性滑液包炎ウイルス、ニワトリ貧血ウイルス、伝染性喉頭気管炎ウイルス、トリ白血病ウイルス、細網内皮症ウイルス、トリインフルエンザウイルス、狂犬病ウイルス、ネコジステンパーウイルス、水疱性口内炎ウイルス、牛疫ウイルス、および豚痘ウイルスからなる群から選択されるウイルスに由来する、請求項14に記載のワクチン処方物。
- 前記異種エピトープが、免疫増強タンパク質である、請求項13に記載のワクチン処方物。
- 前記異種エピトープが、腫瘍抗原である、請求項13に記載のワクチン処方物。
- 異種ポリペプチドをコードする、請求項12に記載の方法によって産生される組換えキメラマイナス鎖ウイルス、および薬学的に受容可能な賦形剤またはビヒクルを含有する、治療処方物。
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