JP2004317359A

JP2004317359A - バイオセンサおよび酵素保存方法

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Publication number: JP2004317359A
Application number: JP2003112985A
Authority: JP
Inventors: Mitsuhiro Hoshijima; 光博星島
Original assignee: Arkray Inc
Current assignee: Arkray Inc
Priority date: 2003-04-17
Filing date: 2003-04-17
Publication date: 2004-11-11

Abstract

【課題】バックグラウンド電流の影響や酵素の失活が抑制できるバイオセンサを提供し、また酵素を安定した状態で保存する方法を提供する。
【解決手段】酵素および安定化剤を含んだ試薬部を備え、かつ試料に含まれる分析対象成分を分析する際に利用されるバイオセンサにおいて、安定化剤として、３個以上の単糖が結合したオリゴ糖を用いた。オリゴ糖としては、グルコースに複数の単糖が結合したものが挙げられる。安定化剤としては、最も好ましくは、ラフィノースを用いる。
【選択図】図２

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、試料（たとえば血液や尿などの生化学的試料）における分析対象成分（たとえばグルコース、コレステロールあるいは乳酸）を分析する際に使用されるバイオセンサ、および酵素の保存方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
血液中のグルコース濃度を測定する場合、簡易な手法として、使い捨てとして構成されたバイオセンサを利用する方法が採用されている（たとえば特許文献１参照）。バイオセンサとしては、たとえば本願の図１ないし図３に示したバイオセンサ１のように、血糖値の演算に必要な応答電流値を、作用極２１および対極２２を利用して電圧を印加したときに測定できるように構成されたものがある。バイオセンサ１では、基板２上に、スリット３０が形成されたスペーサ３を介して、カバー４を積層した構成を有している。基板２上には、これらの要素２〜４により、キャピラリ５が規定されている。キャピラリ５は、毛細管力により血液を移動させるためのものであり、その内部において、作用極２１および対極２２をつなぐようにして試薬部２３が設けられている。
【０００３】
試薬部２３には、通常、グルコースと特異的に反応してグルコースを酸化するための酸化還元酵素と、この酸化還元酵素と作用極２１との間の電子伝達を助けるための電子伝達物質とが含まれている。電子伝達物質は、応答電流値を酸化電流として測定する場合には、試薬部２３において酸化型として含有させられる。この試薬部２３は、固体状に形成され、キャピラリ５に血液が導入されたときに溶解し、キャピラリ５内に酸化還元酵素や電子伝達物質が分散するように構成されている。
【０００４】
しかしながら、バイオセンサ１では、保存時や使用時において一部の電子伝達物質が共存物質から電子を受け取って還元される。電子伝達物質が還元された場合には、作用極２１および対極２２の電圧の印加によって作用極２１に対して電子が供給されてしまう。すなわち、電子伝達物質が試料中のグルコース以外の成分により還元された場合には、応答電流値の測定において、バックグラウンド電流が生じることとなる。このような電子伝達物質の還元は、酸化還元酵素を媒体として起こる。また、酸化還元酵素は、経時的に活性が小さくなるものであるから、バックグラウンド電流の問題とは別に、酸化還元酵素の活性が小さくなることを抑制する必要があり、バイオセンサ１の保存安定性を高めるために、酸化還元酵素の保存安定性を高めることが検討されている。
【０００５】
上述した問題を解決するために、試薬部に安定化剤を含有させる方法がある。安定化剤の一例としては、スクロースが挙げられ、その他に、糖アルコールが挙げられる（たとえば特許文献２参照）。確かに、これらの安定化剤は、電子伝達物質の還元を抑制し、酸化還元酵素が失活するのを抑制することができる。しかしながら、スクロースはバックグラウンド電流を抑制する点において改善の余地があり、また糖アルコールについてはバックグラウンド電流および酵素活性維持の双方の点において改善の余地がある。
【０００６】
【特許文献１】
特公平８−１０２０８号公報
【特許文献１】
特開２００２−２０７０２２号公報
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、このような事情のもとに考え出されたものであって、バックグラウンド電流の影響や酵素の失活を抑制することができるバイオセンサを提供し、また酵素を安定した状態で保存する方法を提供することを課題としている。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
上述した課題を解決すべく、本発明者が鋭意検討した結果、バイオセンサの試薬部に特定のオリゴ糖を含有させることにより、バックグラウンド電流の影響や酵素の失活が抑制されることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明の第１の側面により提供されるバイオセンサは、酵素および安定化剤を含んだ試薬部を備え、かつ試料に含まれる分析対象成分を分析する際に利用されるバイオセンサであって、上記安定化剤として、３個以上の単糖が結合したオリゴ糖を含んでいることを特徴としている。
【００１０】
このバイオセンサでは、試薬部に安定化剤として３個以上の単糖が結合したオリゴ糖が使用されている。その結果、後述の実施例からも明らかとなるが、本発明のバイオセンサでは、試薬部における酸化還元酵素の活性を長く維持でき、またバックグラウンド電流の影響を適切に抑制することができる。
【００１１】
本発明のバイオセンサでは、安定化剤としてのオリゴ糖として、たとえば１つのグルコースに複数の単糖が結合したものを使用することができる。グルコースに結合させる単糖としては、たとえばフルクトース、ガラクトース、グルコース、マントース、リボース、アラビノース、キシロース、リブロース、およびキシルロースを例示することができる。これらのうち、グルコースに対してフルクトースおよびガラクトースのうちの少なくとも一方を結合させて、安定化剤としてのオリゴ糖を構成するのが好ましい。安定化剤としては、最も好ましくは下記化学式１で示されるラフィノースが使用される。
【００１２】
【化１】

【００１３】
本発明で用いる酵素は、分析対象成分の種類に応じて選択され、典型的には、酸化還元酵素が用いられる。ここで、分析対象成分としては、たとえばグルコース、コレステロール、乳酸、およびビリルビンを挙げることができる。ただし、本発明を適用することができる分析対象成分は、例示したものには限定されない。分析対象成分がグルコースの場合には、酸化還元酵素としてグルコースデヒドロゲナーゼやグルコースオキシダーゼが使用され、分析対象成分がコレステロールの場合には、酸化還元酵素としてコレステロールデヒドロゲナーゼやコレステロールオキシダーゼが使用される。
【００１４】
試薬部におけるオリゴ糖の含有量は、使用される酵素の種類や活性に応じて適宜選択されるが、その含有量は、たとえば酵素１００重量部（あるいは酵素活性１ｋＵ）に対して、１０〜１０００重量部（あるいは０．１〜１０ｍｇ）とされる。
【００１５】
試薬部は、固相あるいは液相として形成される。試薬部を固相として形成する場合には、試料が液体の場合に、試薬部に対して不溶なものとして構成してもよいし、試薬により溶解するように構成してもよい。試薬部を試料に溶解するように構成する場合には、試薬部におけるオリゴ糖の含有量は、試薬部に含まれる成分と試料において構築される液相反応系において、その割合が０．１〜５．０ｖｏｌ％となるように設定するのが好ましい。安定化剤の割合が不当に小さいと、酵素を十分に安定化させることができないばかりか、バックグラウンドの影響を十分に抑制することができず、また安定化剤の割合が不当に大きいと、試薬部の溶解性が悪化し、また試薬部が溶解したときの液相反応系の粘度が大きくなって測定精度および反応速度が低下することが懸念されるからである。
【００１６】
本発明のバイオセンサは、液相反応系に電気的刺激を与え、かつ電気的応答を出力するための第１および第２電極をさらに備えたものとして構成してもよいし、試薬部が分析対象成分と反応して吸収波長の変化する試薬を含んだものとして、光学的手法により試料の分析を行えるように構成してもよい。
【００１７】
本発明の第２の側面においては、酵素を安定化剤と共存させて保存する方法であって、安定化剤として、３個以上の単糖が結合したオリゴ糖を用いることを特徴とする、酵素保存方法が提供される。
【００１８】
保存対象となる酵素としては、典型的には酸化還元酵素が挙げられ、その場合には、安定化剤としてのオリゴ糖として、ラフィノースが使用される。
【００１９】
酵素に対する安定化剤の共存量は、酵素１００重量部（あるいは酵素活性１ｋＵ）に対して、１０〜１０００重量部（あるいは０．１〜１０ｍｇ）とされる。
【００２０】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の好ましい実施の形態について、図１ないし図３を参照しつつ具体的に説明する。
【００２１】
図１ないし図３に示したバイオセンサ１は、使い捨てとして構成されたものであり、濃度測定装置（図示略）に装着して血液中のグルコース濃度を測定するように構成されたものである。このバイオセンサ１は、長矩形状の基板２に対して、スペーサ３を介してカバー４を積層した形態を有している。バイオセンサ１においては、各要素２〜４により、基板２の長手方向に延びるキャピラリ５が規定されている。キャピラリ５は、開口部（導入口）５０から導入された血液を、毛細管現象を利用して基板２の長手方向に移動させ、かつ導入された血液を保持するためのものである。
【００２２】
スペーサ３は、基板２の上面２０からカバー４の下面４０までの距離、すなわちキャピラリ５の高さ寸法を規定するためのものである。このスペーサ３には、先端部が開放したスリット３０が形成されている。スリット３０は、キャピラリ５の幅寸法を規定するためのものであり、スリット３０における先端の開放部分は、キャピラリ５の内部に血液を導入するための導入口５０を構成している。このスペーサ３は、たとえばアクリルエマルジョン系材料を用いて形成されている。
【００２３】
カバー４には、貫通孔４１が形成されている。貫通孔４１は、キャピラリ５の内部の気体を外部に排気するためのものである。
【００２４】
基板２の上面２０には、作用極２１、対極２２および試薬部２３が形成されている。作用極２１および対極２２は、全体として基板２の長手方向に延びている。作用極２１および対極２２の端部２１ａ，２２ａは、基板２の短手方向に延び、かつ長手方向に並んでいる。一方、作用極２１および対極２２の端部２１ｂ，２２ｂは、濃度測定装置（図示略）に設けられた端子に接触させるための端子部を構成している。
【００２５】
試薬部２３は、作用極２１および対極２２の端部２１ａ，２２ａどうしを橋渡すようにして設けられており、たとえば電子伝達物質、酸化還元酵素および安定化剤を含む固体状に形成されている。この試薬部２３は、血液に対して容易に溶解するものとして形成されている。したがって、キャピラリ５に血液を導入した場合には、基板２の表面に沿って血液が移動しやすく、またキャピラリ５の内部には、電子伝達物質、酸化還元酵素およびグルコースを含む液相反応系が構築される。
【００２６】
酸化還元酵素としては、たとえばＧＯＤやＧＤＨを用いることができ、典型的にはＰＱＱＧＤＨが使用される。電子伝達物質としては、たとえばルテニウム錯体や鉄錯体を使用することができ、典型的には［Ｒｕ（ＮＨ_３）_６］Ｃｌ_３やＫ_３［Ｆｅ（ＣＮ）_６］を使用することができる。
【００２７】
安定化剤としては、３個以上の単糖が結合したオリゴ糖が使用される。オリゴ糖としては、たとえばグルコースに複数の単糖が結合したものを使用するのが好ましい。グルコースに結合させる単糖としては、たとえばフルクトース、ガラクトース、グルコース、マントース、リボース、アラビノース、キシロース、リブロース、およびキシルロースを例示することができる。これらのうち、グルコースに対してフルクトースおよびガラクトースのうちの少なくとも一方を結合させて、安定化剤としてのオリゴ糖を構成するのが好ましい。安定化剤としては、最も好ましくは下記化学式２で示されるラフィノースが使用される。
【００２８】
【化２】

【００２９】
試薬部２３におけるオリゴ糖の含有量は酵素１００重量部（あるいは酵素活性１ｋＵ）に対して、１０〜１０００重量部（あるいは０．１〜１０ｍｇ）とされ、試薬部２３が溶解したときの液相反応系において、その割合が０．１〜５．０ｖｏｌ％となるように設定するのが好ましい。
【００３０】
バイオセンサ１を用いた血糖値の測定は、バイオセンサ１を濃度測定装置（図示略）に装着した上で、バイオセンサ１の導入口５０を介してキャピラリ５に血液を供給することにより、濃度測定装置（図示略）において自動的に行われる。
【００３１】
濃度測定装置（図示略）に対してバイオセンサ１を装着した場合、バイオセンサ１の作用極２１および対極２２が濃度測定装置の端子（図示略）に接触する。一方、キャピラリ５に血液を供給した場合、キャピラリ５において生じる毛細管現象により、血液が導入口５０から貫通孔４１に向けて進行する。血液の進行過程においては、血液により試薬部２３が溶解させられ、酸化還元酵素および電気伝達物質が分散してキャピラリ５の内部に液相反応系が構築される。
【００３２】
液相反応系においては、たとえば酸化還元酵素が血液中のグルコースと特異的に反応してグルコースから電子が取り出され、その電子が電子伝達物質に供給されて電子伝達物質が還元型とされる。液相反応系に対して作用極２１および対極２２を利用して電圧を印加した場合、還元型とされた電子伝達物質から作用極２１に電子が供給される。一方、濃度測定装置においては、たとえば作用極２１に対する電子供給量が、応答電流値として測定される。濃度測定装置（図示略）ではさらに、キャピラリ５に対する血液の供給から一定時間が経過したときに測定される応答電流値に基づいて、血糖値が演算される。
【００３３】
上述したバイオセンサ１には、試薬部２３に安定化剤として、ラフィノースのような３個以上の単糖が結合したオリゴ糖が使用されている。その結果、後述の実施例からも明らかとなるが、バイオセンサ１では、試薬部２３における酸化還元酵素の活性を長く維持でき、またバックグラウンド電流の影響を適切に抑制することができる。
【００３４】
本発明は、上述した実施の形態に係るバイオセンサには限定されない。本発明は、たとえば血液以外の試料を用いてグルコースを測定するためのバイオセンサ、血液中のグルコース以外の成分、あるいは血液以外の試料液を用いてグルコース以外の成分を分析するためのバイオセンサに対しても適用することができる。
【００３５】
本発明はさらに、電圧印加による応答電流値に基づいてグルコース濃度を測定する場合に限らず、光学的手法を用いてグルコースなどの分析対象成分を分析するように構成されたバイオセンサに対しても適用することができる。
【００３６】
【実施例】
以下においては、本発明に係るバイオセンサについて測定レンジおよびバックグラウンドの影響を検討し、あわせて本発明に係る保存方法について検討する。
【００３７】
実施例１（測定レンジ）
本実施例では、本案センサおよび比較センサを用いて、グルコース濃度に対する応答電流値の直線性に基づいて測定レンジを検討した。
【００３８】
グルコースセンサは、次の要領で作成した。まず、ＰＥＴ製の基板上に、カーボンインクを用いたスクリーン印刷により作用極および対極を形成した。次いで、電子伝達層および酵素含有層からなる２層構造の試薬部を形成した。電子伝達層は、作用極および対極の端部を覆うように、基板上に第１材料液を０．４μＬ塗布した後に第１材料液を送風乾燥（３０℃、１０％Ｒｈ）することにより形成した。酵素含有層は、電子伝達層上に、酸化還元酵素を含む第２材料液を０．３μＬ塗布した後に第２材料液を送風乾燥（３０℃、１０％Ｒｈ）することにより形成した。
【００３９】
第１材料液は、下記表１に▲１▼〜▲４▼で示した材料をその番号通りの順序で混合した混合液を、１〜３日放置した後、この混合液に電子伝達物質を添加することにより調製した。電子伝達物質としては、［Ｒｕ（ＮＨ_３）_６］Ｃｌ_３（同仁化学研究所製「ＬＭ７２２」）を使用し、試薬部における電子伝達物質の含有量は、キャピラリが標準液で満たされたときの濃度が４ｖｏｌ％となるように設定した。
【００４０】
【表１】

【００４１】
表１などにおいて、ＳＷＮはルーセンタイトＳＷＮの略称であり、ＣＨＡＰＳは３−［（３−ｃｈｏｌａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ）ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｏ］ｐｒｏｐａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃａｃｉｄの略称であり、ＡＣＥＳはＮ−（２−ａｃｅｔａｍｉｄｏ）−２−ａｍｉｎｏｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃａｃｉｄの略称である。ＳＷＮとしてはコープケミカル（株）製「３１５０」を使用し、ＣＨＡＰＳとしては同仁化学研究所製「ＫＣ０６２」を使用し、ＡＣＥＳとしては同仁化学研究所製「ＥＤ０６７」を使用した。なお、ＡＣＥＳ溶液はｐＨが７．５となるように調製した。
【００４２】
一方、第２材料液は、酸化還元酵素および安定化剤を０．１％ＣＨＡＰＳに溶解させることにより調製した。酸化還元酵素としては、酵素活性が５００Ｕ／ｍｇであるＰＱＱＧＤＨを使用した。安定化剤としては、ラフィノース（本案センサ）およびスクロース（比較センサ）を使用した。試薬部における安定化剤の含有量は、キャピラリが標準液で満たされたときの濃度が２ｖｏｌ％となるように設定した。
【００４３】
応答電流値は、本案センサおよび比較センサのそれぞれに対して、グルコース濃度が０ｍｇ／ｄＬ、９３ｍｇ／ｄＬ、４１５ｍｇ／ｄＬ、６６３ｍｇ／ｄＬおよび８３６ｍｇ／ｄＬの５種類の標準液１μＬを用いて、印加電圧を２００ｍＶとして測定した。応答電流値のサンプリングは、作用極および対極の間に電圧を印加した状態を継続し、試薬部に対する標準液の供給が検知されてから５秒経過後に行った。標準液が供給されたことの検知は、応答電流値に基づいて、作用極と対極とが液絡したことを検出することにより行った。その結果を図４に示した。
【００４４】
図４から分かるように、本案センサおよび比較センサともに、測定した範囲におけるプロット点の群が高い直線性を示し、グルコース濃度が高い場合（４００ｍｇ／ｄＬ以上）でも適切にグルコース濃度を測定できることを示している。とくに、本案センサでは、グルコース濃度が０〜４００ｍｇ／ｄＬの範囲において、比較センサより高い直線性を示している。したがって、安定化剤としてラフィノースを用いた場合には、安定化剤としてスクロースを用いた場合と同等の測定レンジを有するとともに、低濃度から中濃度領域において、スクロースよりも正確な測定が行える。
【００４５】
ところで、安定化剤は、その含有量が大きいほど酵素を安定化させる効果が大きくなると考えられるが、安定化剤の含有量が大きくなれば、試薬部の溶解性が低下し、また試薬部の溶解時において液相反応系の粘度が大きくなって測定精度および反応速度を低下させる要因ともなりかねない。しかしながら、本案センサでは、試薬部の溶解時において２ｖｏｌ％となるように安定化剤が含まれている。この濃度は、安定化剤の濃度として比較的に大きなものであり、このような濃度において高い直線性が得られていることの意義は大きい。すなわち、安定化剤としてラフィノースを用いた場合には、測定精度をさほど低下させることなく、より確実に酵素を安定化できることを意味している。
【００４６】
実施例２（バックグラウンド電流の影響）
本実施例では、バイオセンサに対して標準液を供給したときの応答電流値に基づいて、バックグラウンド電流の影響について検討した。
【００４７】
バイオセンサについては、実施例の場合と同様にして作成した。ただし、下記表２に示したように、本実施例では、安定化剤の種類の異なる９種類のバイオセンサを作成し、試薬部における安定化剤の含有量は、キャピラリが標準液で満たされたときの濃度が１ｖｏｌ％となるように設定した。
【００４８】
応答電流値は、バイオセンサのキャピラリにグルコースを含まない標準液（蒸留水）を１μＬ供給し、印加電圧を２００ｍＶとして測定した。応答電流値のサンプリングは、作用極および対極の間に電圧を印加した状態を継続し、試薬部に対する標準液の供給が検知されてから５秒経過後に行った。標準液が供給されたことの検知は、応答電流値に基づいて、作用極と対極とが液絡したことを検出することにより行った。その結果を表２に示した。
【００４９】
【表２】

【００５０】
表２から分かるように、安定化剤としてラフィノースを用いた場合（センサＮＯ．１）には、安定化剤として２糖のオリゴ糖であるスクロースを用いた場合（センサＮＯ．２）や糖アルコールを用いた場合（センサＮＯ．３〜９）に比べて、バックグラウンド電流値が小さくなっている。したがって、安定化剤としてラフィノースを用いた場合には、保存時や使用時における電子伝達物質の還元を抑制し、バックグラント電流の影響を適切に抑制することができる。
【００５１】
実施例３（残存活性）
本実施例では、酵素の保存方法について、凍結乾燥直後の酵素の活性と凍結乾燥後に５日間保存した酵素活性とを比較することにより評価した。
【００５２】
酵素の凍結乾燥は、常法にしたがって行なった。安定化剤を共存させる場合には、凍結乾燥酵素を９０００Ｕ／ｍｌの溶液としたときに、安定化剤の濃度が０．５ｖｏｌ％となるように凍結乾燥させた。
【００５３】
一方、酵素活性の測定は、ＤＣＩＰ法にしたがって行った。まず、リン酸緩衝液（ｐＨ６．０）を４７ｍＭ、グルコースを０．２０ｍＭ、フェナジメントサルフェートを２ｍＭ、および２，６−ジクロロフェノールインドフェノール（ＤＣＩＰ）を０．１ｍＭ含む混合溶液を調整した。この混合溶液を３７℃に加温した後、溶液の温度を３７℃に維持しつつ、凍結乾燥した酵素を、溶液中における活性が９０００Ｕ／ｍｌとなるように加えて反応を開始させた。酵素の添加後、波長が６００ｎｍの光に対する吸光度変化を測定した。残存活性は、ＤＣＩＰの分子吸光係数を４．７６ｍＭ／ｃｍとし、１分間に１μｍｏｌのＤＣＩＰが酸化される量を１Ｕとして定義して算出した。
【００５４】
５日後の活性の測定を行う場合には、酵素の保存は、３０℃、８０％Ｒｈの環境下で行った。凍結乾燥直後および５日後の活性の測定結果については、表３に示した。表３においては、凍結乾燥直後の吸光度を１００％とし、５日後の値については、その相対値として示してある。
【００５５】
【表３】

【００５６】
表３から分かるように、安定化剤としてラフィノースを用いた本案保存方法では、安定化剤としてスクロースを用いた参考保存方法に比べて残存活性が若干劣るものの、安定化剤としてラクチトール（糖アルコール）を用いた比較保存方法１に比べて、残存活性が大きくなっている。すなわち、安定化剤としてラフィノースを用いた場合には、スクロースには劣るものの、相当に高いレベルで酵素の安定性を維持できるようなる。また、残存活性の評価は、安定化剤の含有量を比較的に小さくして行っている。すなわち、安定化剤としてラフィノースを用いた場合には、試薬部に少量の安定化剤を含ませるだけで酵素の失活を抑制することができる。
【００５７】
【発明の効果】
以上に説明したように、本発明では、安定化剤として、ラフィノースのような３個以上の単糖が結合したオリゴ糖を使用することにより、酸化還元酵素の活性を長く維持でき、また上記オリゴ糖を酸化還元酵素と共存させた試薬部を備えたバイオセンサでは、バックグラウンド電流の影響を適切に抑制することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】バイオセンサの一例を示す全体斜視図である。
【図２】図１に示したバイオセンサの分解斜視図である。
【図３】図１のＩＩＩ‐ＩＩＩ線に沿う断面図である。
【図４】複数のグルコース濃度に対する応答電流値の測定結果をプロットしたグラフである。
【符号の説明】
１バイオセンサ
２１作用極（第１電極）
２２対極（第２電極）
２３試薬部
５キャピラリ（反応空間）

Claims

酵素および安定化剤を含んだ試薬部を備え、かつ試料に含まれる分析対象成分を分析する際に利用されるバイオセンサであって、
上記安定化剤として、３個以上の単糖が結合したオリゴ糖を含んでいることを特徴とする、バイオセンサ。
上記オリゴ糖は、グルコースに複数の単糖が結合したものである、請求項１に記載のバイオセンサ。
上記オリゴ糖は、ラフィノースである、請求項２に記載のバイオセンサ。
上記酵素は、グルコース酸化還元酵素である、請求項１ないし３のいずれかに記載のバイオセンサ。
上記試薬部を保持し、かつ上記試薬部に試料を供給したときに、試料と上記試薬部に含まれる成分とにより液相反応系を構築するための反応空間をさらに備えている、請求項１ないし４のいずれかに記載のバイオセンサ。
上記試薬部における上記オリゴ糖の含有量は、上記液相反応系における割合が０．１〜５．０ｖｏｌ％となるように設定されている、請求項５に記載のバイオセンサ。
上記液相反応系に電気的刺激を与え、かつ電気的応答を出力するための第１および第２電極をさらに備えている、請求項５または６に記載のバイオセンサ。
上記試薬部は、試料に含まれる分析対象成分と反応して吸収波長が変化する試薬を含んでおり、光学的手法により試料の分析を行えるように構成されている、請求項５または６に記載のバイオセンサ。
酵素を安定化剤と共存させて保存する方法であって、
上記安定化剤として、３個以上の単糖が結合したオリゴ糖を用いることを特徴とする、酵素保存方法。
上記酵素は酸化還元酵素であり、上記オリゴ糖はラフィノースである、請求項９に記載の酵素保存方法。
上記酵素に対するオリゴ糖の共存量は、酵素１００重量部に対して、１０〜１０００重量部とされる、請求項９または１０に記載の酵素保存方法。