JP2004149532A - 活性な治療法または物質による組織内における一定の標的領域に対する自己由来細胞のホーミング - Google Patents

Abstract

【課題】 一定の哺乳類動物の組織内において脈管増殖を誘発するための方法。
【解決手段】 上記方法は一定の哺乳類動物から内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を単離する工程、前記組織における一定の標的領域に対して一定のサイトカインまたは化学誘引物質を配給する工程、および前記単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を前記哺乳類動物に対して再導入して当該内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を前記組織の標的領域に対してホーミング処理することにより当該標的領域において脈管増殖を行なう工程を含む。
【選択図】 図１

Description

本特許出願は現在において米国特許第６，３０９，３７０号として発行されている１９９８年２月５日に出願されている米国特許出願第０９／０１９，４５３号の一部継続出願である１９９９年８月２４日に出願されている米国特許出願第０９／３７９，５４０号の一部継続出願である。
本発明は一般に侵襲性の心臓治療のための種々の方法および装置を含む細胞に基づく治療法に関連しており、特に、心臓虚血の最少侵襲性の治療のための方法および装置に関連している。

心臓病または心不全は依然として西洋世界における死亡の主原因となっている。心臓病の最も一般的な形態の一例は、慢性の冠動脈病またはこれに続く急性の心筋梗塞のいずれかによる、血液灌流の欠乏により生じる心筋層内における虚血領域の形成である。このような虚血領域内の細胞は最終的に死に至る段階的かつ概ね不可逆的な退化過程を示す（非特許文献１を参照されたい）。この過程は虚血領域の生存能力の相当な進行的退化として発現される。

冠動脈の病状を治療するための現在において有効と考えられる手法は噴門上部の冠動脈樹状部における大きな局在化部分への血流の回復（血管形成）および一定のバイパス移植片による冠動脈内における閉塞部の全体的なバイパス形成処理を含む。

また、例えば、嫌気性細胞の生存能力を延長する細胞保護性の化合物の投与等の薬物投与、および心筋患部への血液供給を改善するレーザーによる心筋血管再生等が（一部はまだ試験中ではあるが）虚血症を治療するための別の治療手法である。

虚血組織への酸素供給量を増大するために心臓内において新しい副行血管が成長する可能性があることが心筋虚血症の一部の場合において観察されている。このような現象は新脈管形成として知られている。脈管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）および線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）等の増殖因子として知られる天然物質に基づいてこのような新脈管形成を制御する機構を理解することにおける最近の進歩に伴って、心臓への外因性の脈管形成増殖因子の投与に基づく新しい有望な治療形態が開発されている。

このような慢性および／または急性の虚血症の軽減において見られる増殖因子の有効な作用を説明するために幾つかの機構が提案されている。これらの機構には、新脈管形成、筋細胞の生存能力および障害に対する抵抗力の増大、虚血障害を受けた内皮依存性の血管運動の回復、先在する副行血管の漸増が含まれる（本明細書に参考文献として含まれる、非特許文献２を参照されたい）。

非特許文献３（本文献は本明細書に参考文献として含まれる）は段階的（人為的に誘導した）冠動脈閉塞部を有する豚への塩基性の線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）の外膜周囲投与により冠動脈血流の改善および梗塞領域の減少が改善され、ペーシング誘導性の血流力学的衰退が防止できることを報告している。この増殖因子は、ｂＦＧＦを含有するビーズを保有する多数個のカプセルを供給してこれらを動脈に固定することにより閉塞した動脈およびその周辺の動脈の両方に管腔の外部から投与されている。これらのビーズはｂＦＧＦが心筋の患部領域に効果的に吸収されて運ばれるように一定の延長された期間にわたり所定速度でそれらのｂＦＧＦ内容物を徐々に放出するように設計されている。

一方、継続的な全身的注入を含むｂＦＧＦの静脈内投与は、外膜周囲投与に比べて、主に血流により薬物が流れ出して希釈され、その維持時間が短くなるという理由により、消極的な血管形成作用しか示さないことが報告されている（非特許文献４、非特許文献５、および非特許文献６を参照されたい。なお、これらは本明細書に参考文献として含まれる）。

さらに最近の文献（非特許文献７、本文献は本明細書に参考文献として含まれる） において、著者は豚における脈管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）と同様の有効な脈管形成作用を報告している。このＶＥＧＦはアメロイド・コンストリクタ（ameroid constrictor）（すなわち、動脈の段階的閉塞部を誘発するために動脈の周辺に配置した適当な内径の外部リング）の近くに配置されて当該コンストリクタの先端側における心筋糸に直接固定されたマイクロカテーテルにより投与される。このマイクロカテーテルは胸壁の内側で心臓周囲の空腔部の外側に配置された一定の浸透圧ポンプ（カリフォルニア州パロ・アルトのアルザ社（Alza）によるアルゼット（ALZET））に接続している。

新脈管形成を刺激するための別の手法として遺伝子療法がある。非特許文献８（本文献は本明細書に参考文献として含まれる）は導入物質としてアデノウイルスベクターを用いる遺伝子導入配給法により投与した場合のイン・ビボ（生体内）での心筋の新脈管形成を誘発する能力を有するさらに別の増殖因子であるＦＧＦ−５を報告している。同様に、非特許文献９（本文献は本明細書に参考文献として含まれる）は遺伝子コード化脈管内皮増殖因子（ｐｈＶＥＧＦ）を含む「裸のＤＮＡ（naked DNA）」の動脈内投与による重度の四肢虚血症の治療を報告している。すなわち、プラスミドＤＮＡの溶液を血管形成バルーンのヒドロゲル被膜に加えると、当該被膜が遺伝子導入部位において上記バルーンが膨張するまで上記ＤＮＡを保持するので、このＤＮＡが動脈壁に導入される。

これらの結果を合わせて考慮すると、種々の増殖因子に対応して選択される薬物配給手法は全身系的（静脈内）な配給手法よりも局所的な配給手法にすべきであることが示されている。このような局所的配給の優先性は注入されるｂＦＧＦの半減期が短いこととその短い保持時間によると考えられる。一方、ｂＦＧＦの延長された全身系的な静脈内配給は治療後４週間経過しても完全に消失しない相当な血液学的毒性および血圧低下作用を生じることが報告されている。加えて、血流による薬物の流出に伴う希釈作用により、このような手法における薬物の必要量が許容度を超えて高くなる（本明細書に参考文献として含まれる、非特許文献１０、および非特許文献１１を参照されたい）。

一方、局所的な持続型の配給は上記の不都合点の少なくとも一部分を含まず、さらに効果的であることが明らかである。なお、上述のような現在において有効と考えられる技法を用いる局所的配給法における主な欠点は侵襲性が高いことである。すなわち、上記の種々の文献に記載されている方法は開胸手術を含む。従って、生理学的かつ治療的に明らかな利点があるにも関わらず、特に制御された放出投与法に基づく、心臓内薬物配給のための効果的で局所的目的の最少侵襲性の技法に適応し得る有効な技法が現在においては存在していない。

全て本明細書に参考文献として含まれる特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５および特許文献６は一般に内視鏡を伴う使用目的の患者の内部器官への流体および固体カプセルの薬物配給用のカテーテルを記載している。これらのカテーテルは一般的にその先端部に配置されて導管を介して流体または固体ディスペンサに連絡している一定の針または管を備えている。しかしながら、これらの開示されているカテーテルは治療用薬物の正確な位置制御された配給のための手段を備えていない。
米国特許第４，５７８，０６１号明細書 米国特許第４，５８８，３９５号明細書 米国特許第４，６６８，２２６号明細書 米国特許第４，８７１，３５６号明細書 米国特許第５，３８５，１４８号明細書 米国特許第５，５８８，４３２号明細書 Ｍ．Ｃ．フィッシュバイン（M. C. Fishbein）およびＭ．Ｂ．マクレーン（M. B. McLean）他，「エクスペリメンタル・マイオカージアル・インファークション・イン・ザ・ラット（Experimental myocardial infarction in the rat）」，アメリカン・ジャーナル・オブ・パソロジー（Am. J. Pathol.），９０巻，５７頁乃至７０頁，１９７８年 Ｊ．Ａ．ウエア（J. A. Ware）およびＭ．シモンズ（M. Simons），「アンジオゲネシス・イン・イスケミック・ハート・デイズイーズ（Angiogenesis in ischemic heart disease）」ネイチャー・メデイシン（Nature Medicine），３（２）巻，１５８頁乃至１６４頁，１９９７年 ハラダ（Harada）他，「ベイシック・フィブロブラスト・グロウス・ファクター・インプルーブズ・マイオカージアル・ファンクション・イン・クロニカリー・イスケミック・ポルシン・ハーツ（Basic fibroblast growth factor improves myocardial function in chronically ischemic porcine hearts）」，ジャーナル・オブ・クリニカル・インベスト（J. Clin. Invest.），９４巻，６２３頁乃至６３０頁，１９９４年 Ｅ．Ｒ．エデルマン（E. R. Edelman）他，「ペリバスキュラー・アンド・イントラベナス・アドミニストレーション・オブ・ベイシック・フィブロブラスト・グロウス・ファクター（Perivascular and intravenous administration of basic fibroblast growth factor：Vascular and solid organ deposition）」，プロック・ナチュラル・アカデミック・ソサイエテイ・ＵＳＡ（Proc. Natl. Acad. Sci. USA），９０巻，１５１３頁乃至１５１７頁，１９９３年 Ｇ．Ｆ．ウエーレン（G.F. Whalen）他，「ザ・フェイト・オブ・イントラベナスリー・アドミニスタード・ｂＦＧＦ・アンド・ジ・エフェクト・オブ・ヘパリン（The fate of intravenously administered bFGF and the effect of heparin）」，グロウス・ファクターズ（Growth Factors），１巻，１５７頁乃至１６４頁，１９８９年 Ｅ．Ｆ．アンガー（E. F. Unger） 他，「ア・モデル・トウー・アセス・インターベンションズ・トウー・インプルーブ・コラテラル・ブラッド・フロー：コンテイニュアス・アドミニストレーション・オブ・エージェント・イントウー・ザ・レフト・コロナリー・アーテリー・イン・ドッグズ（A model to assess interventions to improve collateral blood flow：continuous administration of agents into the left coronary artery in dogs）」，カージオバスキュラー・リサーチ（Cardiovasc. Res.），２７巻，７８５頁乃至７９１頁，１９９３年 Ｋ．ハラダ（K. Harada）他，「バスキュラー・エンドセリアル・グロウス・ファクター・アドミニストレーション・イン・クローニック・マイオカージアル・イスケミア（Vascular endothelial growth factor administration in chronic myocardial ischemia）」，アメリカン・ジャーナル・オブ・フィジオロジー（Am. J. Physiol.），２７０巻［ハート・サーキュレートリー・フィジオロジー（Heart Circ. Physiol.），３９巻］，Ｈ１７９１頁乃至Ｈ１８０２頁，１９９６年 シモンズ（Simons）およびウエア（Ware），「フード・フォー・スタービング・ハート（Food for starving heart）」，ナチュラル・メデイシン（Nature Medicine），２（５）巻，５１９頁乃至５２０頁，１９９６年 Ｊ．Ｍ．イスナー（J. M. Isner），「アンジオゲネシス・フォー・レバスキュラリゼーション・オブ・イスケミック・テイシュー（Angiogenesis for revascularization of ischaemic tissues）」，ヨーロピアン・ハート・ジャーナル（European Heart Journal），１８巻，１頁乃至２頁，１９９７年 Ｊ．Ｊ．ロペス（J. J. Lopez）他，「ローカル・ペリバスキュラー・アドミニストレーション・オブ・ベイシック・フィブロブラスト・グロウス・ファクター：ドラッグ・デリバリー・アンド・トキシコロジカル・エバリュエーション（Local perivascular administration of basic fibroblast growth factor: drug delivery and toxicological evaluation）」，ドラッグ・メタボリズム・アンド・デイスポジション（Drug Metabolism and Disposition），２４（８）巻，９２２頁乃至９２４頁，１９９６年 Ｊ．Ｊ．ロペス（J. J. Lopez）およびＭ．シモンズ（M. Simons），「ローカル・エクストラバスキュラー・グロウス・ファクター・デリバリー・イン・マイオカージアル・イスケミア（Local extravascular growth factor delivery in myocardial ischemia）」，ドラッグ・デリバリー（Drug Delivery），３巻，１４３頁乃至１４７頁，１９９６年

本発明の目的は一般に侵襲性の心臓治療のための種々の方法および装置を含む従来に比して優れた細胞に基づく治療法を提供することであり、特に、心臓虚血の最少侵襲性の治療のための優れた方法および装置を提供することである。

本発明の一部の態様における目的は心筋層への薬物の心臓内投与のための正確な最少侵襲性の方法および装置を提供することである。

本発明の一部の態様において、上記の方法および装置は制御された放出の薬物配給装置の正確な配置のために使用される。

なお、本特許出願の明細書および特許請求の範囲の記載内容において、用語の「制御された放出（contolled-release）」とは、ポリマーを基材とする遅速放出（slow-release）および局所的な継続的注入の全ての形態を含む、液体または溶解可能な化合物の持続された、制御された配給（delivery）の任意または全ての技法を意味する。

本発明の一部の態様は、脈管形成増殖因子が境界生存能力を示す心臓虚血領域内に適当に投与された場合に新脈管形成を誘発および／または促進して血液灌流を増大するという上記の発見に基づいている。好ましくは、上記の増殖因子は心臓組織内において既知の所定の深さに投与される。

従って、本発明の好ましい実施形態において、最少侵襲性の心臓内薬物配給（ＭＩ２Ｄ２）装置（すなわち心臓内薬物投与用装置）は、心臓の一室内に挿入するための先端部を有するカテーテルから成る。このカテーテルは心筋層内の１個以上の所定の場所に薬物を投与するために使用される。このカテーテルは上記１個以上の所定の場所のそれぞれの近くにカテーテルを案内して位置決めする位置センサーと、ディスペンサに連結されて所定の場所において薬物を投与するための薬物配給装置を備えている。この薬物配給装置はカテーテルの先端部またはこの近くに配置されて、薬物を心筋層内の適当な深さに注入または配給する。

本発明の一部の好ましい実施形態において、上記のカテーテルは薬物投与を必要とする心筋層内の部位の診断および特定用の１個以上の生理学的センサーをさらに備えている。好ましくは、これらのセンサーは増殖因子を投与する必要のある虚血領域を特定するために使用される。最も好ましくは、これらの生理学的センサーを上記の位置センサーと共に使用して心臓の活性度マップを作成し、このマップに従って後に詳述するように薬物が投与される。

本発明の一部の好ましい実施形態において、上記カテーテルは所定量の薬物を計量して分配する薬物ディスペンサ（すなわち薬物配給装置）と、装置を制御しかつ始動するための制御回路を伴って動作する。このカテーテルにおける薬物配給装置は当該カテーテルの長さに沿って延在する内孔部または管のような適当な導管を介してディスペンサに連通しているのが好ましい。本発明の好ましい実施形態において、上記カテーテルおよびこれに付属する薬物配給装置は心筋層に増殖因子を投与するために使用されるが、当該装置が別の種類の治療薬剤も正確に投与するために同様に使用できることが理解されると考える。

好ましくは、上記位置センサーは本明細書に参考文献として含まれるＰＣＴ特許出願公開第ＷＯ ９６／０５７６８号において記載されるような磁気位置センサーにより構成されている。さらに好ましくは、上記カテーテルは、例えば、本特許出願の譲受人に譲渡されて本明細書に参考文献として含まれる米国仮特許出願第６０／０４２，８７２号において記載されるような操縦機構を備えている。あるいは、この操縦機構は全て本明細書に参考文献として含まれるＰＣＴ特許出願のＰＣＴ／ＵＳ９５／０１１０３号または米国特許第５，４０４，２９７号、同第５，３６８，５９２号、同第５，４３１，１６８号、同第５，３８３，９２３号、同第５，３６８，５６４号、同第４，９２１，４８２号および同第５，１９５，９６８号のいずれかにおいて記載されるような当該技術分野において既知の任意の適当な種類のものであってよい。

上述したように、虚血領域の境界および心臓壁部内の深さに対する薬物投与部位の正確な位置は治療を有効に完了する上で重要であり、健康な組織における増殖因子の過剰量の存在は当該領域に悪影響を及ぼす可能性がある。また、薬物が血液により洗い流される可能性のある、虚血領域の境界を越えた領域または心臓内壁の表面近くの領域への増殖因子を投与することは治療の効果を低下させ、毒性の危険性を伴い、所望の治療効果を達成するために必要とされる薬物の量を不必要に増加する。それゆえ、薬物投与に指定された虚血領域に対してカテーテルを正確に案内して位置や方向を定めること、および、カテーテルの係合面と心臓壁部との間の適正な接触を確認することが重要である。

カテーテルの正確な位置および方向決めは上述した位置センサーおよび操縦機構により達成できる。さらに、本発明の一部の好ましい実施形態において、カテーテルは当該カテーテルおよび心臓壁部の間の接触を感知して確認するための１個以上の近接または接触センサーを備えている。また、これらの好ましい実施形態の一部において、カテーテルは当該カテーテルの先端部の表面上に配置された少なくとも３個の接触センサーを備えていて、カテーテルおよび心臓壁部の間の適正な接触を確認し、最終的に、注入した薬物の所望の深さへの浸透を確認することができる。

本発明の一部の好ましい実施形態においては、一方に適正に灌流されている領域があって他方に梗塞した不活性な領域がある、虚血状態ではあるが依然として生存能力のある心筋部分の領域を特定する生存マップに基づいてカテーテルが案内されて位置決めされる。このようなマップは、例えば、本明細書に参考文献として含まれる米国特許第５，５６８，８０９号またはＰＣＴ特許出願のＰＣＴ／ＩＬ９７／０００１０号に記載される方法により製造することができ、当該方法においては、局所的な生存度（活性度）を示す心臓の幾何学的マップが形成される。好ましくは、このようなマップ上にカテーテルにより薬物を注入する位置の点格子により治療すべき虚血領域が標識される。好ましくは、このマップおよび格子は位置座標を伴って局所的組織生存度を示す心臓の生理学的活性度に基づいて決定される。

本発明の一部の好ましい実施形態において、生存度のマッピングが同一のカテーテルを用いる薬物投与により行なわれる。これらの実施形態においては、カテーテルは心筋組織の生存または非生存を決定するためのセンサーを備えている。このようなセンサーは１個以上の電気−生理学的検出装置または機械−生理学的検出装置を備えており、これらの検出装置は、上記の米国特許第５，５６８，８０９号およびＰＣＴ／ＩＬ９７／０００１０号に記載されるように、それぞれ局所的な心筋の電気的または機械的な活性度を感知する。あるいは、または、さらに、上記のセンサーは光学センサーを備えており、当該光学センサーは、好ましくは、カテーテル内の適当な光源および光ファイバーによる光ガイド手段に連結されていて、当該技術分野において知られるように、生存度の指示手段としての心筋組織におけるＮＡＤＨの自己蛍光を検出する。

あるいは、上記の生存度マップは上述の方法の一つを用いて薬物投与の前に予め作成してＭＩ２Ｄ２装置の制御回路に供給できる。

本発明の一部の好ましい実施形態において、薬物配給装置は、例えば、上記の米国特許第４，５７８，０６１号、同第４，６６８，２２６号および同第５，５８８，４３２号において記載されるような好ましくは後退可能な中空の針を備えている。この針はカテーテルの心臓内への挿入および心臓からの除去時に後退しているが、カテーテルの先端部から延出して心臓の内側に薬物を配給する。好ましくは、この針は当該技術分野において既知のシリコン隔壁のような任意の適当なシール材によりシールされた開口部を通して延出して、カテーテル内への血液の逆流を防ぎながら、多数回の針の突出および後退を可能にしている。必要に応じて、例えば、上記の米国特許第４，８７１，３５６号に記載されるような弁を用いて、針自体をシールして血液成分が中に流入しないように防ぐことができる。

好ましくは、上記の薬物配給装置は針に連結した後退機構を備えていて、当該後退機構が薬物配給の前後においてそれぞれ針をカテーテルから突出および後退させて、多数回の突出／後退動作を可能にする。従って、この後退機構は当該技術分野において既知の制限されたストローク長を有するピストンまたは他の適当な装置により構成できる。好ましくは、センサーが上記の後退機構または針自体に連結していて、薬物投与に先立って、針がカテーテルから心臓壁部内に完全に突出した時点を感知できる。最も好ましくは、このセンサーは針がカテーテル内に完全に後退した時点も感知して、カテーテルが別の場所に安全に移動できることが確認できる。好ましくは、カテーテルが心臓壁部に適正に接触して針が所望の長さまで突出している場合を除いて、薬物投与が自動的に停止できる。あるいは、または、さらに、装置の使用者は、自動停止機能の有無によらず、針の位置を通知される。

さらに好ましくは、上記薬物配給装置またはディスペンサは、例えば、当該技術分野において既知の、圧力センサー、超音波トランスデューサまたは流量計のような閉塞検出装置を備えており、当該検出装置が針のあらゆる閉塞の発生または導管内の流動障害を感知する。このような閉塞検出により薬物の流動経路に沿って破裂を生じる可能性のある圧力蓄積を防ぐことができ、薬物の所望の場所への信頼性の高い投与が確実に行なえるようになる。

一般的に、心筋層内の虚血領域は１０ｃｍ² までの面積にわたって延在するが、局所的な増殖因子の注入が及ぶ一般的な面積は僅かに数平方ミリメートルである。従って、患部領域全体に対して増殖因子の投与のための単一の針を使用することは手間と時間がかかる。それゆえ、本発明の別の好ましい実施形態においては、薬物配給装置が、導管により供給される薬物配給マニホールドに接続していて集合的な突出−後退動作または独立的な突出−後退動作が可能な、互いに適当に離間する複数の針を備えている。

本発明の一部の好ましい実施形態においては、カテーテルによる薬物投与の制御が心臓の周期（心拍）に応じて調節される。好ましくは、薬物配給装置は心臓の周期に応じて周期的に変化する心臓壁部の厚さに応じて制御される。それゆえ、例えば、薬物が心臓拡張期の終点時において配給される場合は、心臓壁部がほぼ最小の厚さになっており、薬物が一般に心筋層内に最も深く分散される。

このような好ましい実施形態の一例において、カテーテルは、例えば、上記ＰＣＴ出願のＰＣＴ／ＵＳ９５／０１１０３号において記載されるような、心臓壁部の局所的な厚さを測定するために使用される超音波センサーをその先端部に備えている。このような厚さ測定を薬物放出の制御に使用することにより、上記のように、薬物を好ましくは２ｍｍ乃至３ｍｍの心筋層内の最適な深さに投与することができる。好ましくは、薬物投与部位における心臓壁部の厚さを心臓の周期における幾つかの時点において測定して、この厚さの測定値を用いて薬物投与の当該周期における時点を決定し、これに従って、薬物を放出するように薬物配給装置を制御する。

本発明の好ましい実施形態を主に薬物投与について説明しているが、上記のような心臓壁部の厚さに対して薬物放出を制御する方法は別の種類の心臓療法にも適用できることが理解されると考える。例えば、この厚さによる制御法は不整脈の治療のための心臓組織の切除またはレーザー心筋脈管再生（ＬＭＲ）において有効に利用できる。例えば、ＬＭＲのための方法および装置は本明細書に参考文献として含まれるＰＣＴ特許出願のＰＣＴ／ＩＬ９７／０００１１号において記載されている。経皮的心筋脈管再生（ＰＭＲ）として一般に知られるこれらの方法においては、カテーテルが心臓の中に挿入されて、レーザー・ビームがカテーテル内の導波管により伝送されて心臓の中を通して心筋層内に通路が形成される。また、心筋内外脈管再生（ＴＭＲ）として知られる別の方法においては、プローブが胸壁を通して挿入されて、心外膜および心筋層を通して心臓の一室内に進入する通路を形成するために使用される。

それゆえ、本発明の一部の好ましい実施形態においては、ＬＭＲに使用されるレーザーが心臓壁部の厚さに対応して制御される。好ましくは、ＬＭＲがＰＭＲ法により行なわれている場合に、レーザーは心臓壁部がほぼ最大の厚さになる心臓収縮期中に発射するように制御されて、レーザーの通路が心臓壁部全体を貫通したり、心外膜を貫通する危険性を最小にする。一方、ＴＭＲ方を使用する場合は、レーザーが心臓拡張期中に発射されるように制御されて、最小のレーザー・エネルギーにより心臓壁部内に通路が形成できるようにする。

本発明の一部の好ましい実施形態において、ＬＭＲが脈管形成作用を高める増殖因子の投与と共に使用される。このような実施形態においては、一体化されたカテーテルが上述した心臓内薬物配給用の構成要素と共にＬＭＲレーザー供給源およびカテーテル先端部における適当な光学装置に連結した導波管を備えている。このレーザーは心筋層内にＬＭＲ通路を形成するために作動し、その後に増殖因子の投与量が当該通路の一部または全ての中に挿入される。ＬＭＲを伴う増殖因子の使用は心臓の虚血領域内の新脈管形成をさらに容易にすると考えられる（例えば、上記のＪ．Ａ．ウエア（J. A. Ware）およびＭ．シモンズ（M. Simons）を参照されたい）。

上記の好ましい実施形態において、増殖因子の薬物が、例えば、上記の米国特許第４，５８８，３９５号または同第４，５７８，０６１号において記載されるような適当な固体薬物配給媒体により形成された遅速放出（slow-release）型カプセル内に収容されているのが好ましい。このカプセルはＬＭＲ通路内に挿入されるか、ＬＭＲを使用せずに心筋層内に押し込むことができる。このカプセルはその大きさが治療期間を通してほぼ一定に保たれるように構成されていて、カプセルが所定の場所に固定されてその偶発的な移動を防止することにより、当該治療期間中に適当な局所的薬物投与が確実に行なえることが好ましい。

本発明の別の好ましい実施形態においては、例えば、ＲＦ（高周波）または超音波放射のような別の種類の放射線による心臓組織の放射を伴って増殖因子またはその他の薬物が投与される。

増殖因子またはその他の薬物が液体の形態または液体キャリヤ内に分散した遅速放出型マイクロカプセルとして心筋層内に注入される本発明の一部の好ましい実施形態においては、薬物ディスペンサがカテーテルの基端部に連結した計量ポンプを備えている。このようなポンプは当該技術分野において既知であり、例えば、回転ピストン計量ポンプおよび往復運動ピストン計量ポンプ、蠕動ポンプまたはその他の任意の高精度で微容量液体を分配し得る容量形ポンプを含む。あるいは、このディスペンサは装置の使用者により手動で作動する医療用注射器により構成できる。

本発明の別の好ましい実施形態、とりわけ、制御放出（controlled-release）型カプセルを採用する実施形態において、上記ディスペンサは別個のフィーダー（供給器）を備えている。好ましくは、このフィーダーはカプセル溜め、カプセルの通路を制御するための弁、チューブに沿うカプセルの通過を検出する検出器、およびカプセル溜めからチューブに沿ってカテーテルの先端部までカプセルを搬送するための制御された生理流体の供給手段により構成されている。

さらに、別の好ましい実施形態において、増殖因子の投与が移植あるいはカテーテルまたはその一部分を一定の延長期間にわたって心筋層内に固定することにより行なわれる。このディスペンサは、例えば、浸透圧ポンプであって、患者の胸部内に移植されるのが好ましく、心臓内に残るカテーテルの部分に連結されて一定の延長期間にわたって治療を行なう。必要に応じて、このディスペンサは患者の体外に配置されて、カテーテルの基端部が当該ディスペンサに体外で接続される。

本発明の好ましい実施形態によれば、心臓の一室内に挿入されて心臓壁部内の一定の部位に係合するカテーテルを含む心臓内薬物投与用の装置が提供され、当該カテーテルは、心臓内におけるカテーテルの位置に応じて信号を発生する少なくとも１個の位置センサーと、上記位置センサーからの信号に応じて決定される部位に所望量の治療用薬物を投与する薬物配給装置を備えている。

好ましくは、上記の治療用薬物は増殖因子である。この薬物は好ましくは固体カプセルを含む遅速放出型基材中に収容されているのが最も好ましい。

好ましい実施形態において、上記カテーテルは当該カテーテルの先端側の表面上に配置された接触センサーを備えており、当該センサーはカテーテル表面の心臓壁部に対する接触を感知する。好ましくは、この接触センサーは圧力センサーである。

好ましくは、上記位置センサーは外部から供給される磁場に応じて信号を発生する磁気位置センサーを含む。

好ましくは、上記位置センサーの信号は位置および方向の座標情報を発生するために用いられて、当該情報に応じて薬剤の投薬物が配給される。

好ましい実施形態において、上記カテーテルは少なくとも１個の生理学的センサーを備えており、当該センサーが上記部位における心臓の生存度（viability）を示す信号を発生する。好ましくは、この少なくとも１個の生理学的センサーは電極を含む。さらに好ましくは、上記装置は上記信号に基づいて心臓の生存度マップを作成し、これに応じて薬物を投与する。

さらに、別の好ましい実施形態において、上記装置は心筋組織を照射するための放射線供給源を備えており、この場合に、上記カテーテルは放射線供給源に連携する導波管を備えている。好ましくは、上記薬物配給装置は照射により組織内に形成される通路の中に薬物を投与し、固体カプセルの形態で薬物を投与するのが最も好ましい。

好ましくは、上記の薬物配給装置は、カテーテルから延出し心臓組織内に進入して薬物投与量を配給する中空の針を含む。

好ましい実施形態において、上記の針は螺旋形状を有していて、当該針の回転移動により心臓壁部内の所定部位に固定される。

好ましくは、上記の針は薬物投与量の配給の前後においてカテーテル内に後退する。さらに好ましくは、この針はカテーテル内の開口部を通してカテーテルから延出し、この開口部は穿刺シール材により被覆されている。好ましくは、上記薬物配給装置は針を後退する移動機構を備えており、この場合に、当該移動機構はカテーテルから針が延出する距離を制御するのが好ましく、これにより、心臓壁部内に所定の深さで薬物が投与できる。

好ましい実施形態において、上記の薬物投与が所定部位における心臓壁部の厚さの変化に応じて制御される。好ましくは、上記カテーテルは心臓壁部の厚さを示す信号を発生する超音波トランスデューサを備えており、薬物配給装置が心臓壁部の所定の厚さにおいて薬物を投与するように制御される。

本発明の別の好ましい実施形態によれば、心臓内治療用の装置が提供され、当該装置は、
心臓の一室内に挿入されて心臓壁部に治療用薬物を投与するためのカテーテルと、
心臓壁部の厚さに応じて信号を発生するセンサーと、
上記センサーから信号を受信して心臓壁部の厚さに応じて治療を制御するコントローラにより構成されている。

好ましくは、上記センサーは超音波トランスデューサを備えており、当該トランスデューサは上記カテーテルの先端部近傍において当該カテーテルに固定されているのが好ましい。

あるいは、さらに、上記センサーは位置センサーを備えており、当該位置センサーは上記カテーテルの先端部近傍において当該カテーテルに固定されている。

好ましい実施形態において、上記カテーテルは薬物配給装置を備えており、上記の治療が心臓壁部内の一定部位への治療用物質の投与を含む。

さらに、別の好ましい実施形態において、上記装置は放射線供給源を備えており、この場合に、上記の治療は当該供給源による心筋組織の照射を含み、上記カテーテルは放射線供給源に連携する導波管を備えている。

好ましくは、上記コントローラは心臓の周期の一部分において上記治療用物質が投与されるように治療を制御する。好ましくは、上記コントローラは心臓壁部の厚さが最大の時、あるいは、心臓壁部の厚さが最小の時に治療用物質を投与するように治療を制御する。

さらに、本発明の好ましい実施形態によれば、心臓内薬物投与のための方法が提供され、当該方法は、
カテーテルを心臓の一室内に導入する工程と、
上記カテーテルの位置座標を感知する工程と、
上記座標を用いて所望部位における心臓壁部に係合した状態で上記カテーテルを位置決めする工程と、
上記カテーテルを用いて上記部位に治療用薬物を投与する工程により構成されている。

好ましくは、上記治療薬物を投与する工程は増殖因子の投与を含む。好ましくは、この増殖因子は線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）あるいは脈管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）を含む。好ましい実施形態において、この増殖因子は増殖因子をコード化する遺伝子を含む。

好ましくは、上記治療薬物を投与する工程は心筋層内への薬物の遅速放出調製剤の注入を含む。好ましくは、この遅速放出調製剤は液体を含む。あるいは、この遅速放出調製剤は心筋層内に挿入される薬物を収容するカプセルを含む。

好ましい実施形態において、上記方法は心筋層の脈管再生を生じるための、好ましくはレーザー放射線による、心臓壁部の照射処理を含む。好ましくは、上記心臓壁部の照射処理は心筋層内の通路の形成を含み、上記治療用薬物の投与は当該通路内への薬物の挿入を含む。

別の好ましい実施形態において、上記カテーテルの位置決め工程はカテーテル上に配置された接触センサーにより発生される信号を受信することによりカテーテルと心臓壁部との間の接触を確認する処理を含む。

好ましくは、上記方法は心臓から生理的信号を受信する処理を含み、この場合に、上記治療用薬物の投与が当該生理的信号に応じて薬物を投与する処理を含む。好ましくは、この生理的信号は機械−生理的信号および／または電気−生理的信号を含む。

好ましくは、上記治療用薬物を投与する工程が上記の生理的信号により決定される組織の生存度の測定値に応じて薬物を投与する処理を含み、当該治療用薬物の投与が概ね心臓における虚血状態であるが生存能力を有する領域にのみ薬物を投与する処理により構成されているのが好ましい。さらに好ましくは、上記治療法薬物を投与する工程が組織の生存度のマップに応じて薬物を投与する処理を含む。

好ましくは、上記位置座標を感知する工程がカテーテルの方向の座標を感知する処理を含み、上記カテーテルを位置決めする工程が当該方向の座標に応じて心臓壁部に対して所望の方向にカテーテルを配向する処理を含む。

さらに好ましくは、上記カテーテルを位置決めする工程が心臓の形状マップにおける薬物投与に対応する領域を画定する点の格子に対してカテーテルを位置決めする処理を含む。

さらに、本発明の好ましい実施形態によれば、心臓内治療の方法が提供され、当該方法は、
心臓の壁部の厚さにおける変化を示す信号を受信する工程と、
上記厚さの変化に応じて心臓壁部における一定部位に治療用薬物を投与する工程により構成されている。

好ましくは、上記治療薬物を投与する工程はカテーテルを心臓の中に挿入して当該カテーテルを上記一定部位の近くに運搬する処理を含む。

さらに好ましくは、上記治療薬物を投与する工程はカテーテルを介して伝送されるレーザー放射線により心臓壁部を照射する処理を含む。

あるいは、または、さらに、上記治療薬物を投与する工程はカテーテルを用いて心臓壁部内に治療薬物を導入する処理を含む。

好ましくは、上記信号を受信する工程はカテーテルに固定されるセンサー、最も好ましくはカテーテルに固定される位置センサーからの信号を受信する処理を含む。

好ましい実施形態において、上記信号を受信する工程は超音波信号を受信する処理を含む。

さらに、別の好ましい実施形態において、上記信号を受信する工程は電気生理的信号を受信する処理を含む。

好ましくは、上記治療薬物を投与する工程は上記心臓壁部の厚さの変化に応じて治療薬物を制御する処理を含む。好ましくは、この治療薬物を制御する処理は一定の心臓周期中に心臓壁部の厚さがほぼ最大になる時、あるいは、一定の心臓周期中に当該厚さがほぼ最小になる時に治療薬物を投与する処理を含む。

あるいは、または、さらに、上記治療薬物を制御する処理は治療薬物が心臓壁部内の所望の深さにおいて配給されるように当該治療薬物を制御する処理を含む。

本発明はまた一定の哺乳類動物の組織内における脈管の増殖を誘発するための一定の方法も含み、この場合に、この方法は（ａ）上記哺乳類動物から種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を単離する工程、（ｂ）上記組織における一定の標的領域に一定のサイトカインまたは化学誘引物質を配給する工程、および（ｃ）上記の単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を上記哺乳類動物に再導入して、その内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を上記組織の標的領域に対してホーミング処理することにより当該標的領域において脈管増殖を行なう工程を含む。

本発明による方法は脈管形成による脈管増殖、血管形成による脈管増殖、または動脈形成による脈管装飾を行なうために用いられる。

哺乳類動物の血液から単離した内皮先祖細胞または哺乳類動物の骨髄から単離した骨髄由来幹細胞が上記の本発明による方法において用いられる。加えて、（必要とされる場合に）体外における上記の単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞の培養または増殖が行なわれる。

上記方法はさらに一定の標識物質または治療用タンパク質を生成するために種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を遺伝子工学的に処理する随意的な工程を含む。

ＶＥＧＦ、ＧＭＣＳＦ、ｂＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＩＧＦ−１、ＰＬＧＦ、ＳＤＦ−１、ＡＮＧ１、ＡＮＧ２、ＴＩＥ２、ＨＧＦ、ＴＮＦα、ＴＧＦβ、ＳＣＧＦ、セレクチン、インテグリン、ＭＭＰ、ＰＥＣＡＭ、カドヘリン、ＮＯ、ＣＸＣ、ＭＣＰ−１、ＨＩＦα、ＣＯＸ−２およびこれらの全ての異性体または類似体から成る群から選択される少なくとも１種類の転座刺激因子が本発明の方法と共に用いられる。これらのサイトカイン、ケモキネシス、化学誘引物質等のような転座刺激因子は注入、好ましくは一定のカテーテルの使用により上記組織の標的領域に配給される。上記方法はさらに上記カテーテルにおける一定の位置センサーにより当該カテーテルを上記標的領域に操縦する処理を含む。また、上記の転座刺激因子は心筋、噴門上部、心内膜、心臓の一定の血管内、または心臓の血管の壁部に注入される。

上記の方法はさらに上記の単離した内皮先祖細胞を静脈内投与または上記組織の標的領域の近くにおける投与により再導入する処理を含む。

上記方法はさらに上記の単離した骨髄由来幹細胞を静脈内投与または上記組織の標的領域の近くにおける投与により再導入する処理を含む。

本発明はまた一定の哺乳類動物の組織内における筋発生を誘発するための方法を含み、この場合に、この方法は（ａ）上記哺乳類動物から種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を単離する工程、（ｂ）上記組織における一定の標的領域に一定の転座刺激因子を配給する工程、および（ｃ）上記単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を上記哺乳類動物に再導入して、その内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を上記組織の標的領域に対してホーミング処理することにより当該標的領域において筋発生を行なう工程を含む。

本発明はまた一定の哺乳類動物の組織を再造形する方法も含み、この方法は（ａ）上記哺乳類動物から内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を単離する工程、（ｂ）上記組織の一定の標的領域に一定の転座刺激因子を配給する工程、および（ｃ）上記の単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を上記哺乳類動物に再導入して、当該内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を上記組織の標的領域に対してホーミング処理することにより、当該標的組織領域における組織の再造形を行なう工程を含む。

本発明はまた一定の哺乳類動物の組織内における一定の瘢痕を置換するための方法も含み、この方法は（ａ）上記哺乳類動物から内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を単離する工程、（ｂ）上記瘢痕を一定の標的領域として設定する工程、（ｃ）上記組織の標的領域に一定の転座刺激因子を配給する工程、および（ｄ）上記の単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を上記哺乳類動物に再導入して、当該内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を上記組織の標的領域に対してホーミング処理することにより、当該標的組織領域における瘢痕の置換を行なう工程を含む。

本発明はまた組織内の一定の標的領域にドナー細胞をホーミング処理または転座処理するための一定の方法も含む。本発明の一例の実施形態によれば、一定の哺乳類動物の組織内において脈管の増殖を誘発するための方法は（ａ）上記哺乳類動物の組織における一定の標的領域に対して一定の転座刺激因子を配給する工程、および（ｂ）当該哺乳類動物にドナー前駆体細胞を導入して当該ドナー前駆体細胞を上記組織の標的領域に対してホーミング処理することにより、その標的領域における脈管の増殖を行なう工程を含む。上記ドナー前駆体細胞は一定の同種異系供給源または異種供給源からの種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞である。上記方法はさらに一定の免疫抑制物質を上記哺乳類動物に投与する工程も含む。

本発明による上記の方法において使用する転座刺激因子は以下のＶＥＧＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ｂＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＩＧＦ−１、ＰＬＧＦ、ＳＤＦ−１、ＡＮＧ１、ＡＮＧ２、ＴＩＥ２、ＨＧＦ、ＴＮＦα、ＴＮＦβ、ＳＣＧＦ、セレクチン、インテグリン、ＭＭＰ、ＰＥＣＡＭ、カドヘリン、ＮＯ、ＣＸＣ、ＭＣＰ−１、ＨＩＦα、ＣＯＸ−２およびこれらの全ての異性体および類似体から成る群からの種々のサイトカイン、ケモキネシスまたは化学誘引因子の内の少なくとも１種類を含む。

上記の転座刺激因子は、好ましくは一定のカテーテルにおける一定の位置センサーを使用して上記標的領域に対して当該カテーテルを操縦することによる注入用の一定のカテーテルを用いる、注入により上記組織の標的領域に対して配給される。

本発明の別の実施形態は一定の哺乳類動物の組織内における筋発生を誘発するための方法を含み、この方法は（ａ）上記哺乳類動物の組織における一定の標的領域に対して一定の転座刺激因子を配給する工程、および上記哺乳類動物にドナー前駆体細胞を導入して上記組織標的領域に対して上記ドナー前駆体細胞をホーミング処理することにより、当該標的領域における筋発生を行なう工程を含む。

本発明の別の実施形態は一定の哺乳類動物の組織内における再造形を誘発するための方法を含み、この方法は（ａ）上記哺乳類動物の組織における一定の標的領域に対して一定の転座刺激因子を配給する工程、および（ｂ）上記哺乳類動物にドナー前駆体細胞を導入して上記組織の標的領域に対して上記ドナー前駆体細胞をホーミング処理することにより、当該標的領域における再造形を行なう工程を含む。

本発明の別の実施形態は一定の哺乳類動物の組織における一定の瘢痕の置換を誘発するための方法を含み、この方法は（ａ）上記瘢痕を一定の標的領域として設定する工程、（ｂ）上記哺乳類動物の組織における標的領域に対して一定の転座刺激因子を配給する工程、および（ｃ）上記哺乳類動物に対してドナー前駆体細胞を導入して上記組織の標的領域に対して上記ドナー前駆体細胞をホーミング処理することにより、当該標的領域における瘢痕の置換を行なう工程を含む。

本発明はまた組織における一定の標的領域に対して胚芽幹細胞をホーミング処理または転座処理するための方法も含む。本発明の一例の実施形態によれば、一定の哺乳類動物の組織内における脈管の増殖を誘発するための方法は（ａ）上記組織における一定の標的領域に対して一定の転座刺激因子を配給する工程、および（ｂ）上記哺乳類動物に対してヒト胚芽幹細胞を導入して上記組織の標的領域に対して上記ヒト胚芽幹細胞をホーミング処理することにより、当該標的領域における脈管の増殖を行なう工程を含む。この方法はさらに脈管形成、血管形成、または動脈形成により脈管増殖を行なう工程も含む。

上記の転座刺激因子は、例えば、ＶＥＧＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ｂＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＩＧＦ−１、ＰＬＧＦ、ＳＤＦ−１、ＡＮＧ１、ＡＮＧ２、ＴＩＥ２、ＰＤＧＦ、ＨＧＦ、ＴＮＦα、ＴＮＦβ、ＳＣＧＦ、セレクチン、インテグリン、ＭＭＰ、ＰＥＣＡＭ、カドヘリン、ＮＯ、ＣＸＣ、ＭＣＰ−１、ＨＩＦα、ＣＯＸ−２およびこれらの全ての異性体および類似体から成る群からの種々のサイトカイン、ケモキネシスまたは化学誘引因子の内の少なくとも１種類である。

本発明の別の実施形態は一定の哺乳類動物の組織における筋発生を誘発するための方法を含み、この方法は（ａ）組織における一定の標的領域に対して一定の転座刺激因子を配給する工程、および（ｂ）上記哺乳類動物に対してヒト胚芽幹細胞を導入して上記組織の標的領域に対して上記ヒト胚芽幹細胞をホーミング処理することにより、当該標的領域における筋発生を行なう工程を含む。

本発明の別の実施形態は一定の哺乳類動物の組織内における一定の瘢痕を置換するための方法を含み、この方法は（ａ）上記瘢痕を一定の標的領域として設定する工程、（ｂ）上記組織の標的領域に対して一定の転座刺激因子を配給する工程、および（ｃ）上記哺乳類動物に対してヒト胚芽幹細胞を導入して上記組織の標的領域に対して上記ヒト胚芽幹細胞をホーミング処理することにより、当該標的領域における瘢痕の置換を行なう工程を含む。

以下の各図面に基づく本発明の好ましい種々の実施形態についての詳細な説明により、本発明がさらに完全に理解される。

従って、本発明によれば、一般に侵襲性の心臓治療のための従来に比して優れた方法および装置が提供でき、特に、心臓虚血症の最少侵襲性の治療のための優れた方法および装置が提供できる。

図１および図２は本発明の好ましい実施形態による最少侵襲性の心臓内薬物配給用のカテーテル２０の概略的部分断面図である。これらの図に示すように、カテーテル２０は心筋層内に薬物を注入するための中空の針２４を当該カテーテルの先端部２２の中に備えている。図１において、この針２４は第１の形態で示されていて、当該形態において、針２４はカテーテル２０の内側のシース２６の中に後退している。一方、図２において、針２４は薬物の注入のためにカテーテルの先端部２２よりも先端側に延出している。

好ましくは、上記の薬物は、例えば、上述のＶＥＧＦまたはｂＦＧＦのような増殖因子により構成されている。好ましい実施形態において、この薬物はＦＧＦ−４またはＦＧＦ−５により構成されている。さらに、別の好ましい実施形態において、この薬物はｐｈＶＥＧＦのような遺伝子療法剤により構成されている。針２４は導管４６を介してディスペンサ５４（図４）に接続しており、このディスペンサ５４は薬物を収容してこれを針を介して所定の投与量で分配する。

好ましくは、針２４は１ｍｍ以下程度の外径を有している。図２の延出した形態において、針２４はカテーテル２０の先端部２２の先端から２ｍｍ乃至３ｍｍ延出しているのが好ましい。シース２６は針２４の外径よりも僅かに幅が広く、例えば、シリコン隔壁のような適当なシール材２８によりその先端部が閉塞されている。このシール材２８はシースおよびカテーテルの中への血液の逆流を防ぐと共に、針のカテーテルに対する延出および後退の反復動作を可能にする。針２４が後退している場合は、図１に示すように、針２４はシース２６の中に完全に収容されていて、当該針と体内組織との間の接触はほとんど完全に阻止される。カテーテル２０の心臓内への挿入時および心臓からの取り外し時、およびカテーテルが後述するように心臓内の一定位置から他の位置に案内されている時は、針２４は上記の後退位置に維持される。

移動機構３０が薬物を投与するために図２に示す形態で針２４を先端部２２から先端側に延出させ、投与処理の間は図１に示す位置に針２４を後退させる。好ましくは、この移動機構３０は一定の適当に制限されたストローク長を有する液圧式ピストン、またはソレノイドのような電気機械的装置、または、例えば本明細書に参考文献として含まれる上記の米国特許第４，５７８，０６１号において記載されるような、当該技術分野において既知の他の任意の適当な遠隔駆動機構により構成されている。あるいは、この移動機構３０はスプリング負荷型（spring-loaded）機構により構成することができ、当該機構はその起動時に針２４を心内膜の中に駆動し、次に薬物投与後に針２４をシース２６の中に引き戻す。

好ましくは、針センサー４０は機構３０および／または針２４または導管４６に連結している。センサー４０は圧力トランスデューサまたは当該技術分野において既知の他の流量計量装置により構成されているのが好ましく、針のあらゆる閉塞または導管内の流れの障害を感知して針の中の適正な薬物配給を確認する。あるいは、または、さらに、センサー４０は、薬物の注入前に針２４が完全に延出していること、および／または、カテーテルを移動する前に針２４が完全に後退していることを確認するためのマイクロスイッチまたはその他の機械的センサーにより構成されている。

好ましくは、カテーテル２０は先端部２２を操縦して案内するための先端部偏向機構４４を備えている。好ましくは、この機構４４は上記の米国仮特許出願第６０／０４２，８７２号に記載されるような１本以上の引張りワイヤ（図示せず）により作動する。あるいは、この機構４４は上記のＰＣＴ特許出願のＰＣＴ／ＵＳ９５／０１１０３号または米国特許第５，４０４，２９７号、同第５，３６８，５９２号、同第５，４３１，１６８号、同第５，３８３，９２３号、同第５，３６８，５６４号、同第４，９２１，４８２号および同第５，１９５，９６８号に記載されるような当該技術分野において既知の任意の適当な種類のものとすることができる。

カテーテル２０はさらにカテーテル先端部２２の位置および方向の座標を決定するための位置センサー３２を備えている。好ましくは、センサー３２は上記のＰＣＴ出願公開第ＷＯ ９６／０５７６８号に記載されるような外部から加えられる磁場に応じて信号を発生するコイル３４を備えている磁気位置センサーにより構成されている。このカテーテル２０は上記のような位置センサーにより案内および位置決めされて、薬物、好ましくは上記の選択された増殖因子を心臓内において指定されて正確に選択された部位に配給する。従って、カテーテル２０は当該技術分野において既知の装置および方法により実現し得なかった最少侵襲性の様式での増殖因子の効果的な投与に必要とされる薬物の高精度な局所的配給を可能にする。

好ましくは、カテーテル２０はさらに、例えば、圧力センサーのような１個以上の接触センサー３６を備えており、これらのセンサー３６はカテーテル先端部２２と心臓壁部との間の接触に応じて信号を発生して、針２４が延出する前にカテーテルと心臓壁部との間の適正な接触を確認する。加えて、このカテーテル２０は心臓組織の局所的生存度を検量してマッピングするために心臓壁部内の電気的活性度を測定するために使用される１個以上の電極３８を備えることができる。この生存度のマッピングについては、例えば、上記のＰＣＴ特許出願のＰＣＴ／ＩＬ９７／０００１０号および米国特許第５，５６８，８０９号に詳細に記載されている。なお、生存度マップは後述するように薬物投与の前またはこれと同時に作成できる。

図３は本発明の別の好ましい実施形態による心臓内薬物配給用のカテーテル４５の概略的部分断面図である。このカテーテル４５は螺旋状の針４７を有していることを除いて上記のカテーテル２０とほぼ同一である。このカテーテルが薬物を配給すべき心臓壁部内の部位に係合された後に、針４７がコルクネジ状の回転移動により壁部の中にねじ込まれる。この回転移動はカテーテル内の針の回転またはカテーテル全体の回転のいずれかにより行なうことができる。この針の心臓壁部内へのねじ込みにより、薬物投与中にカテーテル４５を確実に所定部位に固定保持できる。

図示しない別の好ましい実施形態において、カテーテル４５はその先端部２２内に螺旋状または円筒形の空孔部を有していて、この空孔部により、カテーテルの心臓内への挿入時における、好ましくは、カテーテルの心臓内における１個の投薬部位から他の投薬部位への移動中における針４７のカテーテル内への後退が可能になる。

図４は本発明の好ましい実施形態による心臓内薬物配給システム４８を示す概略的な斜視図である。このシステム４８はカテーテル２０の基端部が接続されるコンソール５０を備えている。このコンソール５０は制御回路５２を備えており、好ましくは、当該制御回路５２はコンピュータにより構成されている。さらに、このコンピュータにはユーザー入力装置５６およびディスプレイ５８が連結されていて、一般に医者である使用者により当該システムを操作および作動することが可能になっている。上記の回路５２はセンサー３２，３６，３８および４０並びに図１および図２に示すような機構３０および機構４０を含むカテーテル２０にワイヤ４２を介して連結している。

さらに、コンソール５０は導管４６を介して連結して針２４により所定投与量で薬物を分配するためのディスペンサ５４を備えている。好ましくは、ディスペンサ５４は薬物を液体の形態で充填する液溜めと、当該液溜めに連通する流体計量ポンプを備えている。このポンプは回転または往復動ピストン式計量ポンプ、蠕動ポンプまたは、例えば、ニューヨーク州オイスター・ベイのフルイド・メターリング社（Fluid Metering Inc.）により製造されるピップ（Pip）・バルブレス・ピストン・ポンプのような、当該技術分野において既知の他の任意の容量形ポンプにより構成されている。あるいは、ディスペンサ５４は当該技術分野において同様に既知の上記液溜めからカテーテルを通るマイクロカプセルの通過を制御するための別個のフィーダーにより構成することができる。なお、マイクロカプセルは、例えば、以下の図８に示しかつこれに基づいて説明するように心筋層内に移植される。

好ましくは、回路５２は心臓のマップ、好ましくは生存度マップを作成し、このマップはディスプレイ５８上に表示される。この生存度マップは薬物投与の適当な候補領域、すなわち、心臓組織における虚血領域ではあるがまだ生存可能な領域を特定するのに有用であり、このような候補領域は、増殖因子療法が無効であるか毒性を及ぼす梗塞状態および生存不能な領域または良好に灌流される健康な領域に対して、増殖因子療法が最も有効に適用できる。さらに、回路５２は薬物を投与する必要のある候補領域を所望の密度（各点の間隔）で覆いながらマップ上に点格子を決定して標識する。この生存度マップは薬物投与のためにカテーテル２０を挿入する前に別に作成することができるが、位置センサー３２および電極３８を用いて心臓の電気的活性をマッピングすることにより、当該薬物投与と同時かその直前に作成するのが好ましい。

図５は本発明の好ましい実施形態による心臓内薬物配給システム４８およびカテーテル２０を用いる生存度マッピングと薬物投与を同時に行なうための方法を示すフローチャートである。すなわち、カテーテルがまず心臓内に、好ましくは経皮的に挿入された後に、自動または使用者の制御により薬物投与の候補領域に案内される。次に、この薬物投与の候補場所において、位置センサー３２を用いてカテーテル先端部２２を心内膜に対して当該膜の表面に対してほぼ垂直の方向で位置決めする。好ましくは、回路５２は接触センサー３６からの信号を受け取って分析することによりカテーテル先端部と心内膜との間の適正な接触を確認する。あるいは、または、さらに、回路５２は数回の心臓周期にわたり（当該心臓周期における任意の段階において）位置座標がほぼ一定に保たれていることが決定できる程度まで、位置センサーから読取値を受け取ってからカテーテル先端部２２が心内膜に対して適正に接触していることを推定できる。

カテーテル先端部２２の位置決めが確定した後に、回路５２は、好ましくは電極３８により受信されたエレクトログラム（電位図）信号の波形および振幅に基づいて、当該先端部の位置における心臓組織の生存度を評価する。また、心臓周期の多数の段階におけるセンサー３２からの位置読取値を用いて上記の位置における心臓壁部の移動プロファイルを作成して生存度検量に使用することも可能である。この方法において、回路５２はカテーテル先端部２２の位置の近傍における心臓組織が虚血状態ではあるがまだ生存可能であることを当該位置における薬物投与の前に確認することが好ましい。すなわち、既に説明したように、心臓の非虚血領域への増殖因子のような薬物の投与は逆効果を生じるおそれがあり、一般的に、必要以下に抑えた正確な投与量を適用して全身系的な毒性が発生するおそれを回避することが望ましい。このような理由から、上記の生存度における条件に合致しない場所における薬物の投与を回路５２が防止するか、少なくとも当該場所の生存度状態を使用者に通知することが好ましい。

カテーテル２０の先端部２２が虚血部位に確実に位置決めされたことが確認されると、針２４が図２に示すようにシース２６から延出して一定量の薬物が投与される。次に、回路５２はこの場所、生存度状態および投薬情報を心臓のマップ上に標識し、カテーテルが格子上の次の点に移動する。好ましくは、この方法は候補領域全体が標識で覆われるまで継続され、この時点で、カテーテルは心臓から取り出される。この生存度マッピング処理は後日に繰り返されて薬物治療の効果が評価され、必要であれば、付加的な投薬が行なわれる。

あるいは、または、さらに、カテーテル２０は薬物投与の制御および／またはモニターおよび心臓の生存度マッピングにおいて使用するための別の種類のセンサーを備えることができる。このような種々のセンサーを有するマッピング・カテーテルは、例えば、上記のＰＣＴ特許出願のＰＣＴ／ＩＬ９７／０００１０号および米国特許第５，５６８，８０９号に記載されている。さらに、例えば、局所的な微小循環血流速度を測定する灌流検出器、または局所的な血液灌流に関連する蛍光発光を感知する光検出器のような別の生理学的検出装置も使用できる。

図６は本発明の好ましい実施形態による心臓内薬物注入用の別のカテーテル６４の概略的部分断面図である。カテーテル６４は上記のカテーテル２０とほぼ同一であるが、超音波放射線６２のビームを発生して心臓壁部により反射した超音波を受け取る超音波トランスデューサ６０をさらに備えている。このトランスデューサ６０は上記のＰＣＴ特許出願のＰＣＴ／ＵＳ９５／０１１０３号に記載されるように心臓壁部の厚さを測定してマッピングするために使用されるのが好ましい。あるいは、または、さらに、このトランスデューサは心臓内部および／または心臓内部の表面の超音波画像を作成するために使用できる。この場合に、トランスデューサ６０はトランスデューサ素子のアレイにより構成されていて、詳細な画像が高解像度で作成できるのが好ましい。

図７は心臓７０の概略的断面図であり、当該心臓の中にカテーテル６４が薬物を投与するために挿入されている。既に説明したように、カテーテル６４の先端部２２は心内膜７２に係合されている。トランスデューサ６０により受け取られた超音波信号は心内膜から心外膜７４の外表面までの距離を測定するために用いられて、心臓壁部の厚さＷが決定される。カテーテル先端部２２が薬物投与に適する生存能力を有する場所に適正に位置決めされると、針２４がカテーテルから心筋層７６の中に延出する。

好ましくは、針２４による薬物の分配は心臓壁部の厚さにおける変化に応じて制御される。心筋層７６内における最適な分散および薬物の維持は針が薬物を心筋層のほぼ中央に分配することにより概ね達成できると考えられる。しかしながら、心臓の収縮および拡張により心臓の壁部の厚さが変化するために、この厚さをトランスデューサ６０により測定する。針の長さは既知であるので、図７に示すように、心臓壁部の厚さＷがカテーテルから延出する針の長さの少なくとも２倍にほぼ等しい時に薬物を分配するのが好ましい。あるいは、薬物の分散を任意の所望の心臓壁部の厚さの時に行なって、当該薬物を心臓壁部内の概ね任意の所望の深さにおいて分配できる。あるいは、または、さらに、針２４の挿入の深さを上記の厚さＷに応じて調節して、厚さが増すと針を深く挿入するようにできる。

図８は本発明の別の好ましい実施形態によるレーザー心筋層脈管再生（ＬＭＲ）および心臓内薬物投与を組み合わせて行なうためのカテーテル７８の先端部２２を概略的に示している図である。また、図９はカテーテル７８を使用する組合せ型ＬＭＲおよび薬物療法のためのシステム９６の概略的な斜視図である。このシステム９６は制御コンソール５０を備えており、当該コンソール５０は図４に基づいて既に説明したものとほぼ同一であるが、システム９６におけるものはＬＭＲ処理に使用するためのレーザー供給源９４をさらに備えている。

図８および図９の実施形態において、投与される薬物は、好ましくは増殖因子により構成されていて、固体高分子基材カプセル８８の中に収容されている。このカプセルはディスペンサ５４からカテーテルに沿って延在する通路９２の中に適当に加圧されたキャリヤ流体と共に供給されて、当該カテーテルから心臓壁部の中に挿入される。好ましくは、一方向弁９０が通路９２の先端部を閉じていて、カプセル８８の排出を可能にするが、通路内への血液や破片の侵入および凝結等を防ぐ。

さらに、カテーテル７８はレーザー供給源９４よりも先端側で光学装置８２よりも基端側に接続される導波管８０を備えており、光学装置８２はレーザー供給源からの放射線を集光して心臓壁部に供給する。好ましくは、カテーテル７８はさらに位置センサー３２および１個以上の接触センサー３６および／または電極３８、並びに、既に説明したような操縦機構（図８に示さない）を備えている。さらに、カテーテル７８は大動脈のような血管を介して心臓の一室内に経皮的に供給されて上記の操縦機構および位置センサーにより心臓の虚血領域に案内されるのが好ましい。

上記の制御回路５２により心臓のマップ上に決定および指定された虚血領域における格子の各点において、例えば、上記ＰＣＴ／ＩＬ９７／０００１１号において記載されるように、レーザー供給源９４が作動して心筋層内に脈管再生用の通路が形成される。通路が形成されると、当該ＬＭＲ通路内に適合するように構成された遅速放出型カプセル８８が適当に湾曲した先端部分を有する導管９２から弁９０を介して排出される。あるいは、この薬物は、例えば、上記の米国特許第４，５８８，３９５号および同第４，５７８，０６１号に記載されるような、当該技術分野において既知の任意の他の適当な種類の固体カプセル配給システムにより分配できる。

好ましくは、カプセル８８は治療期間中にその寸法がほぼ一定に保たれるように構成されていて、カプセルが指定された場所に固定されて移動しないようになっており、これにより、治療継続期間中の適当な局所的薬物投与が確実に行なえる。さらに好ましくは、上記の増殖因子が埋め込まれる媒体は、例えば、上記のハラダ（Harada）他およびイスナー（Isner）の各文献に記載されるような、ヘパリン等の生体許容性のポリマー基材やその他の補助剤により構成されている。この増殖因子はカプセルと周囲の組織との間の浸透圧の勾配により心筋層の血液循環に伴ってカプセルから溶出して組織内に分散する。好ましくは、このカプセルは適当な機構により治療完了時に崩壊するように構成されている。例えば、基材の溶解度を薬物の拡散速度に対応させたり、高速の基材溶解を所定成分の一定濃度値に応じて開始させることができる。この結果、治療終了点の到達時において、カプセルを迅速に溶解させてその成分を洗い流すことができる。

カテーテル７８はＬＭＲ放射と共に固体薬物カプセルの配給を行なうものとして説明したが、薬物投与プロトコルに従ってこれらの処理要素を独立して使用できることが理解されると考える。例えば、カプセル８８を針（適当に構成された針２４のようなもの）または他の微小外科手術装置、あるいは導管９２を介する圧力による噴出手段等を用いて心臓壁部内に移植できる。

あるいは、上記のＬＭＲ療法を液体基材内における増殖因子のような薬物の投与により行なうことができる。この場合に、針２４のような針が心臓壁部に穴をあけて、このＬＭＲ通路の近くの部位に薬物を投与することにより、当該薬物の治療有効時間の少なくとも大部分において、通路の境界領域が増殖因子の作用の及ぶ一定範囲内に入るようにする。なお、このような増殖因子およびＬＭＲの同時使用は既に説明したように脈管形成をさらに容易にすると考えられる。

図１０は本発明の好ましい実施形態によるレーザー供給源９４を制御する場合に使用する各信号を概略的に示すタイミング図である。このレーザー供給源は治療を受けている患者の皮膚上の身体表面電極またはカテーテル７８における電極３８のいずれかから受信したＥＣＧ信号に応じて始動する。この方法におけるレーザー始動により、心臓壁部がその収縮期中に一定の所望の厚さ、好ましくはその最大の厚さである時にレーザー・パルスを心筋層内に確実に照射することができる。

図１０に示すように、カテーテル７８が心内膜に対して適当に位置決めされた後に、ＥＣＧのＲ−波のピークが検出され、その後、好ましくは２０ミリ秒程度乃至５０ミリ秒程度の短時間の内に位置センサー３２から位置読取値が得られる。このＲ−波の検出および位置読取値の採取は数回の心臓周期にわたって連続的に行なわれる。さらに、回路５２が連続周期におけるＲ−Ｒ間の間隔を調べて、連続的した位置読取値を比較する。この比較はレーザーを照射する前に患者の心臓の周期的変動およびカテーテル先端部２２の位置の両方が安定していることを確認するために行なわれる。それゆえ、回路５２は、上記のＲ−Ｒ間隔が２個以上の先行する周期の間隔における所定制限範囲以内、好ましくは±１２％または１２０ミリ秒以内であり、センサー３２からの位置読取値が所定の距離、好ましくは０ｍｍ乃至１２ｍｍの範囲、最も好ましくは３ｍｍ乃至６ｍｍの範囲以内よりも大きくずれない場合にのみ、レーザー供給源９４を使用可能にする。

回路５２が心臓の周期的変動およびカテーテル位置が安定していることを確認すると、各周期におけるＲ−波の検出時点後の所定の遅延時間において、各心臓周期毎に１回レーザー・イネーブル・パルスを供給する。この遅延時間は回路５２により自動的に調節されるか、あるいは、システム９６の使用者により調節されて、心臓壁部が所望の厚さになる心臓周期における時点においてのみレーザーが照射するようになる。この結果、使用者がコンソール５０上のレーザー・スイッチを作動すると、回路５２により供給される各レーザー・イネーブル・パルスに応じて１個以上の放射パルスを一列に照射する。レーザー供給源９４を駆動するために使用される高電圧電子機器における固有の遅延により、このレーザー・パルス列は一般に約５ミリ秒乃至２５ミリ秒の微小で不規則な遅延時間だけレーザー・イネーブル・パルスの立ち上がり端部に対して一般に遅延する。

随意的に、図６に示すトランスデューサ６０のような超音波トランスデューサを用いて心臓壁部の厚さを測定し、この測定値に従ってレーザー供給源９４を始動できる。あるいは、さらに、心臓周期の過程においてセンサー３２から受信した位置読取値における変化を用いて心臓壁部の厚さを推定してレーザーを始動できる。いずれの場合においても、レーザーは心臓壁部の厚さが最大の時に照射するように制御されて、心筋層に比較的幅の広い通路を形成すると共に通路が心外膜を貫通するおそれを減少することが好ましい。

細胞配給による新脈管形成
本発明の目的において、用語の「治療用薬物（therapeutic drug）」は新脈管形成に利用される細胞を含む。当該技術分野において既に確立されているように、筋芽細胞または筋細胞のような細胞、特に心筋細胞が種々の形態の病気を治療するために遺伝子またはそのプロモータのような組換え分子を伝達するために利用される。治療用物質を配給するための発現ベクターのような配給ビヒクルとしての細胞の使用が本明細書に参考文献として含まれる米国特許第５，６０２，３０１号（フィールド，ローレン（Field, Loren））およびＰＣＴ出願公開第ＷＯ ９６／１８３０３号（ロー，ピーター（Law, Peter））に記載されている。すなわち、上記の点について、筋芽細胞または筋細胞は全般的な遺伝子導入ビヒクルとして利用されて、心臓組織のような組織に直接的に配給される。従って、筋芽細胞または筋細胞は組織に治療作用を与える組換えタンパク質およびその他の分子のような治療用物質を最終的に発現するための発現ベクターとして使用される。例えば、このような治療作用の一例は増殖因子またはその他のタンパク質のような脈管形成因子を発現する要因となる配給ビヒクルとして筋芽細胞または筋細胞を利用することである。これらの増殖因子はさらに副行血管を形成して組織における新脈管形成を生じる要因となる。さらに、これらの副行血管は塩基性および酸性の線維芽増殖因子（ＦＧＦ）、形質転換増殖因子（ＴＧＦ）、脈管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）等のような脈管形成因子により形成される。この種の治療手法は改善された血流を必要とする組織または器官に対して明らかに有利である。例えば、この手法の応用は心臓組織における脈管再生において特に有用である。

細胞配給手法を利用する利点の一つはウイルス・ベクターの使用が省けることであり、この理由は、配給ビヒクルとしてウイルスを使用することに対して偏りが生じることが時々あるためである。そこで、本発明は配給ビヒクルとしてウイルスを使用する代わりに上述のような所望の増殖因子またはその他の因子またはタンパク質を発現するように特異的に遺伝子操作した細胞を利用する。

さらに、細胞配給手法の別の利点はウイルス・ベクターを利用した場合の生体内（イン−ビボ）で到達するトランスフェクションの速度がかなり遅いのに比べて、トランスフェクションの速度を生体外（エクス−ビボ）で大幅に速くできることである。従って、この細胞配給手法は治療効果を顕著に高めることができ、ウイルス・ベクター手法よりもはるかに改善されている。

さらに、配給ビヒクルとして移植細胞を利用する別の利点はこれらの細胞がウイルス・ベクターまたは増殖因子の場合に時々見られるような注入部位からの導入の傾向が比較的少ないことである。それゆえ、この細胞配給療法は実際に局所的手法であり、心臓組織に対して集中した治療を行なうことができる。

細胞配給手法のさらに別の利点は、配給した細胞による増殖因子の発現が、例えば細胞が生存する期間のような細胞寿命期間にわたって、あるいは、例えば発現が活性化または不活性化されるように細胞が巧妙にプログラムされる期間のような遺伝子操作細胞のプログラム期間にわたって、継続可能であることである。この後者の手法は配給された細胞の発現された増殖因子に対応する実際に「制御された放出（controlled release）」処理である。従って、この手法は、ベクターまたは増殖因子配給手法が本質的に時間に制限されるために、これらの手法よりも優れた特別な利点を提供する。

細胞移植による筋発生
本発明の目的において、用語の「治療用薬物」は筋発生のために移植できる任意の種類の細胞も含む。筋芽細胞または筋細胞のような細胞が細胞の移植により筋発生を促進するために使用できることが知られている。このような特別の技法が本明細書に参考文献として含まれるＰＣＴ出願公開第ＷＯ ９６／１８３０３号（ロー，ピーター（Law, Peter））および米国特許第５，６０２，３０１号（フィールド，ローレン（Field, Loren））において記載されている。細胞移植による筋発生を有効にするために、別の細胞と融合できる細胞を特定して利用することが重要である。

このような技法の一例として公的寄託機関から入手できる提供者の筋芽細胞の利用がある。一般に、筋芽細胞は互いに融合して遺伝的に正常な筋線維の形成を可能にする特性を有している。この方法は退化した筋線維の補充を可能にして、これらの筋芽細胞の正常な遺伝子の完全な補体をこの種の療法において標的とされる器官における異常な細胞内に統合することができる。さらに、心臓のような器官または筋肉内に移植するのに適する所望の細胞を得るために幹細胞のような細胞が培養および処理可能であることも考えられる。

提供者の筋芽細胞を利用する場合は、これら細胞が処理されている場合がある。このような処理の一例が免疫抑制剤の使用である。また、このような筋芽細胞の別の処理は遺伝的に優れた細胞系統の作成を目的としている。

筋発生に利用できる筋芽細胞のような細胞の別の供給源は患者から由来する筋芽細胞の供給源である。この方法はＰＣＴ出願公開第ＷＯ ９６／１８３０３号（ロー，ピーター（Law, Peter））の第９頁に記載されているような生検および接種技法である。この技法の最初の工程は注入処理の前に採取した細胞または注入処理に伴って即時に、例えば、注入処理と共に採取した細胞のいずれかにより患者から筋肉生検材料を得ることである。次の工程は正常な遺伝子により「接種（seed）」量の衛星細胞をトランスフェクションすることである。その後、このトランスフェクション処理された細胞の筋原性を確認する。次に、トランスフェクション処理した筋芽細胞を移植時に有効に作用する程度に十分に増殖する。さらに、最後の工程はこの筋芽細胞を配給システムにより患者の体内の目的の部位に投与することである。

別の生検技法は患者から直接に心筋細胞を採取して、正常な細胞を必要とする患者の体内部位に投与して戻すために十分な数の心筋細胞を増殖することを可能にする様式で処理することである。この目的は生存可能な心臓組織内の正常な細胞を必要とする領域を標的にして当該部位のみにおける生検を行なって、採取した心筋細胞が、処理の後に、心筋梗塞領域、瘢痕組織領域、虚血領域または適当な移植治療を必要とする心臓における他の任意の領域のような治療を必要とする領域において移植できるようにすることである。

細胞を移植するための別の技法は、例えば、哺乳類動物モデルのような人間以外の供給源から得られる細胞等の、異種移植片を利用することである。このような細胞または異種移植片は、例えば、免疫抑制剤の使用により上記のような方法で処理して異常な細胞が同時に存在している特に心臓のような器官の領域に移植できる。

配給の方法
上記の細胞治療技法を有効に配備するために、薬物配給システム４８（図４）、およびＬＭＲおよび配給システム９６（図９）が特にこの目的に対して有用である。例えば、細胞はカテーテル２０（図１および図２）、カテーテル４５（図３）、およびカテーテル６４（図６）により配給される。既に説明したように、生存度マップはそれぞれ当該生存度マップを作成するためのシステム４８またはシステム９６を用いて作成される。さらに、心臓の生存度マップは制御回路５２により作成されてディスプレイ５８上に表示される。表示された生存度マップの有用な目的の一つは、例えば、まだ生存可能であって治療を必要としている心臓組織の領域のような心臓組織における虚血領域を特定することである。加えて、生存度マップは心筋梗塞に罹った領域および瘢痕領域並びに心臓内における解剖構造学的な目標を特定するためにも有用である。システム４８およびシステム９６は目標の治療計画の一部分として生存度マップ上に点の格子を決定して標識するための回路５２を用いることにより当該目標の治療計画の効果的な組み立てを着実に可能にする。従って、医者は点から点の間隔の間に所望密度の細胞配給を計画することができる。

医者が上記のシステム４８またはシステム９６により作成される生存度マップを利用することに制限されないことに注目することが重要である。むしろ、医者は細胞治療処理の前に別のマッピング技法により作成した別の種類の生存度マップを利用できる。

さらに、システム４８またはシステム９６を利用することにより、医者は治療薬物配給計画を所望に展開できる。この治療薬物配給計画は心筋梗塞または瘢痕の影響を受ける心臓の領域のみを目標とするように構成でき、さらに、この計画は虚血領域のような心臓の別の領域を目標にすることができる。梗塞領域を目標にする場合は、医者は生存度マップ上の梗塞領域を標識して正常な組織に対する梗塞の割合を決定する。細胞配給計画の一部として、梗塞領域内または当該領域における好ましい注入部位が生存度マップ上に特定および標識される。この結果、好ましい注入部位が梗塞領域の瘢痕の境界領域上に実際に存在するようにできる。

注入部位が特定されると、カテーテル２０，２２または４５が各目標部位に配置されて、治療用細胞が治療薬物配給計画に従って各部位に配給される。配給した細胞の最大の効果および効率を得るための技法の一つは目標部位に一定の斜角で細胞を配給または注入することである。この場合に、カテーテルは当該カテーテルの先端部に配置した位置センサー３２から得た位置情報により適当な斜角に位置決めできる。

既に説明したように、各部位に配給した細胞は心筋細胞のような筋芽細胞または筋細胞のいずれかとすることができる。これら両方の細胞配給手法が本発明の場合に使用可能である。従って、細胞は脈管形成因子が発現できる発現ベクターまたは筋発生を生じ得る細胞融合機構のいずれかとして配給できる。

これらの細胞は特定の例である中空の針２４または螺旋状の針４７のような配給装置を通して注入できる。さらに、本発明に適する別の配給技法により細胞配給に先立って通路を形成できる。さらに、これらの通路は目標部位において一定の斜角で形成され、適当な通路形成技法により作成できる。このような通路を形成するための好ましい実施形態の一例はＬＭＲおよび薬物配給カテーテル７８（図８）を用いてまず光学装置８２によりレーザー通路を形成し、次に当該形成した通路内に直接に細胞を配給する方法である。

上記の特定の配給装置は本発明により考えられる配給機構の一部に過ぎないと考えることが重要である。すなわち、圧力噴出手段のような別の配給装置もまた本発明により考えられる。さらに、既に説明したように、針２４および針４７がカテーテル２０およびカテーテル４５の先端部２２の外部からそれぞれ後退可能である。この後退手段は手動制御、または細胞配給後に針２４を自動的に後退させるスプリング負荷機構のような移動機構３０（図１および図２）の使用による自動後退手段のいずれでもよい。

目的の配給計画が実行されると、心臓組織の経時的な生存度マップを評価して心臓組織の特性変化を追跡すると共に治療後の組織の生存度を確認することができる。

本発明による別の方法は心筋層の生検材料から心筋細胞を採取することである。この処理は心臓の室内に生検カテーテルを挿入して通常は中隔壁部から生検材料を採取することにより行なわれる。この心筋層生検において最も共通に複雑な処理は心臓壁部の穴あけである。提案される治療の候補である心臓病を有する患者においては、１個以上の梗塞状態または虚血状態の領域が中隔壁部内に存在している可能性がある。それゆえ、心筋層の最も健康な部分により生検を行なうことが有利である。このことは、虚血領域および健康組織領域の特定を経て生検に最適な部位を決定するための生存度マップを用いた後に、当該部位に案内して可能な限り安全な方法で健康な組織領域における生検を行なうための位置センサーを有する生検カテーテルを用いることにより行なうことができる。その後、これらの生検材料または収穫された細胞は上記の技法に従って処理および移植される。

サイトカイン、ケモキネシス、および化学誘引物質を媒介とする細胞の転座
本発明による上記の方法およびシステムはまた組織内の一定の標的領域に対する種々のサイトカイン媒介型および／または化学誘引物質媒介型の細胞の転座にも関連している。このように転座処理された細胞はその患者（哺乳類動物）に対して生体内で配給される種々の前駆体細胞である。なお、以下において定められているように、用語の「前駆体細胞（precursor cell）」は一定の自己由来細胞または一定のドナーから由来している細胞（ドナー前駆体細胞）のいずれかを含む任意の種類の細胞を意味する。ドナー前駆体細胞はまた一定の同種異系の供給源から由来している種々の細胞も含み、これらの細胞はヒト胚芽幹細胞（ｈＥＳ）並びに一定の異種供給源から由来している種々の細胞を含む。このような異種のドナー前駆体細胞は、マロウフ（Malouf）他（「アダルト−デライブド・ステム・セルズ・フロム・ザ・リバー・ビカム・マイオサイツ・イン・ザ・ハート・イン・ビボ（Adult-Derived Stem Cells from the Liver become Myocytes in the Heart in Vivo）」，アメリカン・ジャーナル・オブ・パソロジー（American Journal of Pathology），１５８巻，６号，２００１年６月，１９２９頁乃至１９３４頁）により利用されているＷＢ−Ｆ３４４成人幹細胞系等のような、成人の肝組織から由来している成人幹細胞を含む間葉組織および種々の器官から由来している細胞等のような異種の成人幹細胞を含む。加えて、上記用語の「前駆体細胞（precursor cell）」はさらに一定の胚芽幹細胞（ｈＥＳまたは異種胚芽幹細胞）から由来している一定の血管芽細胞または一定の血管芽細胞様細胞として分類されている任意の細胞として定義される。このような血管芽細胞様細胞は種々の内皮先祖細胞（ＥＰＣｓ）、すなわち、種々の血管芽細胞、造血幹細胞（ＨＳＣｓ）、および骨髄由来幹細胞（ＢＭＳＣｓ）およびその他の成人幹細胞を含む。従って、本発明によれば、上記において定められている全ての細胞型が上記「前駆体細胞（precursor cell）」の定義に含まれると考えられる。

本発明による上記の方法およびシステムは一定の患者に対して生体内で配給される種々の前駆体細胞のホーミング処理、転座処理または反応速度に関連している。本発明によれば、上記方法は組織内における脈管増殖、筋発生、組織再造形、または一定の瘢痕の置換を誘発することに関連している。特に、本発明による方法は任意の種類の組織内における、特に、組織内の特定の部位または場所、すなわち、一定の標的領域に対する脈管増殖、筋発生、組織再造形または一定の瘢痕の置換を誘発するために利用できる。特に、本発明は心筋層、心内膜または心外膜等のような心臓組織内の一定の虚血領域（標的領域）における脈管増殖、筋発生、組織再造形、または置換を誘発するために利用できる。

生体内で配給される種々の前駆体細胞を介する本発明による脈管増殖の誘発は（１）一定の原始脈管網状構造の形成におけるＥＰＣまたは血管芽細胞の移動および造血幹細胞の移動を含む脈管形成、（２）組織の再造形における毛細管増殖および脈管新芽形成を示す過程である血管形成（平滑筋細胞の漸増も含む）、および（３）種々の内皮細胞（脈管の内側）および平滑筋細胞（脈管の外側）の移動および増殖に関連する種々の脈管の副行的な増殖を含む動脈形成を生じる。

上記のカテーテル２０（図１、図２および図３）を含むシステム４８は上記の本発明の方法に従って用いられる。特に、組織内の一定の標的領域がカテーテル２０における先端部２２の位置および配向の各座標を決定するために１個以上の電極３８および位置センサー３２を用いる一定のマッピング処置により確認される。すなわち、既に述べられているこれらのマッピングおよびカテーテル操縦の態様が用いられて、新しい脈管の増殖、組織再生、新しい筋細胞の発育、一定の瘢痕の置換等のような組織の再造形または既存組織の置換に適している組織内の一定のまたは種々の領域を確認するために、カテーテル２０がその組織内の標的領域に案内される。特に、本発明による方法は心筋層、心内膜または心外膜等のような心臓組織内の標的領域として種々の虚血領域を確認するために有用である。さらに、回路５２は既に説明されているように上記標的領域（虚血領域）における生活能力のマッピングを行なうために特に有用である。従って、本発明によれば、上記方法は生体内において配給されるサイトカインまたは化学誘引物質を媒介としている種々の前駆体細胞に関連する細胞に基づく治療法を受けるために、心臓内の虚血組織等のような、組織内の一定の適当な領域または区域の確認に基づく一定の標的領域確認工程を含む。さらに、このことは配給される種々の前駆体細胞およびサイトカイン、ケモキネシスおよび化学誘引物質による置換または組織再造形のための一定の標的領域として一定の瘢痕を設定する処理を含む。

さらに、心臓７０における組織（心内膜７２、心筋層７６および／または心外膜７４）のマッピング処理は脈管増殖、筋発生、組織再造形または組織置換を誘発するための本発明による方法を行なうことにおいて有用である。既に説明されているように、生活能力マッピング処理は上記回路５２による一定の目的の療法プランの組み立ておよび表示装置５８における表示のための一定の生活能力マップの発生のために用いられる。

さらに、本明細書に参考文献として含まれる米国特許第６，４００，９８１号において記載されている、上記の生活能力マップを発生するための方法および装置のような一定の高速マッピング技法を用いることができる。これにより、心室の内の１個（例えば、左心室）等のような心臓の室部の内の１個以上のマッピングを促進するために、例えば、３個程度の、さらに、一例の特定の実施例においては、６個乃至１０個程度の一定の選択数の点を用いて形成することができる。これにより、一定の基準線の生活能力マップが種々の電気的パラメーター（低ピーク対ピークの単極または双極電圧、インピーダンス、回転速度、フラグメント化等）および／または種々の電磁的パラメーター（局部的な壁部移動測定値等）に基づく治療法の計画のために形成される。

加えて、例えば、二心室マッピング処理としても知られている、両方の心室の生活能力マッピング処理等のような心臓７０における２個以上の室部についての生活能力マッピング処理を行なうことが必要であるか望ましいと考えられる。これにより、一定の二心室マッピング処理が上記のカテーテル２０および制御回路５２、あるいは、一定の二心室高速マッピング処理のための米国特許第６，４００，９８１号において記載されているカテーテルおよびシステムを用いて行なわれる。すなわち、上記心臓７０の両方の心室の生活能力マッピング処理がそれぞれの心室について６個乃至１０個のマッピング点等のような一定の選択された少数のマッピング点における関連の電気的パラメーター情報および／または電磁的パラメーター情報を収集する等のような一定の高速マッピング技法を用いて行なわれる。従って、上記のような二心室マッピング処理は所望の種々のサイトカイン、ケモキネシスおよび／または化学誘引物質等のような１種類以上の所望の転座刺激因子を注入するためのカテーテル２０を用いる一定の二心室注入療法を可能にする。さらに、上記カテーテル２０による注入療法（ＧＴｘ）の後に、第２の生活能力マップまたは一定のフォロー・マップ（別の生活能力マップ）、すなわち、追加ＧＴｘ療法情報が同時の医療処置中または配給された治療の作用効果を決定するために一定時間の経過後に行なわれる後続の医療処置中において得られる。このような経時的に反復される生活能力マッピング処理は医者において一定の長期医療計画または患者に対する追跡調査として考えられる。このような反復された生活能力マッピング処理の結果（後続の生活能力マップ情報）は、上記基準線の生活能力マップおよび初期の生活能力マップの各情報に対して比較される場合に、測定された種々の電気的パラメーターおよび／または電磁的パラメーターにおける変化の検出およびその心臓組織の再造形の決定のために使用できる。さらに、このことが望まれる場合に、一定の心臓内生検が、例えば、注入部位から２ｍｍ乃至７ｍｍの範囲内における心臓の一定の所望の場所において行なわれる。この心臓内生検は組織化学的分析のために心臓内組織を除去することを可能にする。このような組織化学的分析の幾つかの適当な例は毛細管密度、瘢痕組織指標、例えば、心筋細胞または内皮細胞のような脈管の細胞等の特定の細胞型の新細胞の数の調査を含む。加えて、上記のような反復型の生活能力マッピング処理の結果は望まれる場合に反復型のＧＴｘ配給療法を生じることができる。

本発明による方法を行なう場合に、自己由来の前駆体細胞を利用する場合に、これらの自己由来前駆体細胞は一定の患者から収穫される。このような自己由来前駆体細胞は生体内における配給または投与に適している種々の前駆体細胞の一定の供給源を入手するための一定の収穫工程の一部として患者から入手される。この収穫工程において、血管芽細胞様細胞（ＥＰＣｓ、ＨＳＣｓ、ＢＭＳＣｓまたは成人幹細胞）が血液収集および細胞濾過または骨髄吸引および細胞濾過等のような種々の技法または当業界において知られているその他の細胞収穫技法により一定の患者から収集される。

所望の前駆体細胞がこれらの前駆体細胞の特定のマーカーに基づいて不所望な種々の細胞型から単離される。例えば、ＥＰＣｓに対する一部の関連のまたは選択可能なマーカーはＶＥＧＦＲ−２、ＶＥ−カドヘリン、ＣＤ３４、ＢＤＮＦ、Ｅ−セレクチンまたはＣＸＣＲ４を含む。加えて、ＢＭＣＳｓに対する関連のまたは選択可能なマーカーはＣ−キット、Ｐ−グリコプロテイン、ＭＲＤ１またはＳｃａ−１ような例示的なマーカーを含む。さらに、種々の前駆体細胞に対応する関連のまたは選択可能なマーカーがコッヘル（Kocher）他，「ネオバスキュラ−リゼーション・オブ・イスケミック・マイオカージウム・バイ・ヒューマン・ボーン−マロウ−デライブド・アンジオブラスツ・プリベンツ・カージオマイオサイト・アポプトシス，レデユーセス・リモデリング・アンド・インプルーブズ・カージアック・ファンクション（Neovcascular-ization Cardiomyocyte Apoptosis, Reduces Remodeling and Improves Cardiac Function）」，ネイチャー・メディシン（Nature Medicine），７巻，４号，２００１年４月，４３０頁乃至４３６頁において概説されている。これらの関連のマーカーはまたＣＤ１１７、ＦＬＫ１レセプタ、および種々のタンパク質の発現、ＴＩＥ−２、ＡＣ１３３、ＧＡＴＡ−２およびＧＡＴＡ−３を含む種々の因子および転写因子も含む。さらに、成人幹細胞（人間または異種）あるいは胚芽幹細胞（人間または異種）のいずれかのような、種々のドナー前駆体細胞を本発明の上記方法において用いることを含むために、種々の幹細胞を本発明による前駆体細胞として用いる場合に、これらの幹細胞はそれぞれの関連の選択可能なマーカーにより単離され、これらのマーカーはネスチン、段階特定的胚芽抗原（ＳＳＥＡ）、ＴＲＡ−１−６０、ＴＲＡ−１−８１、アルカリ・ホスファターゼ、およびＧＬ−７およびＧＢ−５等のようなグロボ−シリーズ糖タンパク質を含む関連の選択可能な種々のマーカーを含むことができる。

本発明による方法における付加的な工程は一定の患者に対する生体内配給のための一定の適当な治療量の細胞を発生するために上記の収穫した前駆体細胞を精製、培養および増殖する一定の随意的な工程である。当業界において知られている種々のプロトコル等のような精製、培養および増殖の種々のプロトコルが一定の患者に対する生体内配給のための一定の適当量の前駆体細胞を発生するために用いられる。例えば、治療に有効な細胞の数は１×１０⁴ 個乃至１×１０⁷ 個の細胞の範囲である。

上記の収穫した前駆体細胞（一定の自己由来型の手法における細胞）またはドナー前駆体細胞（一定の非自己由来型の手法における、例えば、一定の同種異系または異種の細胞供給源による細胞）に対応する別の随意的な工程は一定の所望の作用効果を得るためにこれらの前駆体細胞を遺伝工学的に処理することである。例えば、これらの前駆体細胞は種々の因子、サイトカインまたは増殖因子、リガンド、信号発生分子またはアポプトーシス因子等のような細胞表面レセプタまたはマーカーまたは治療タンパク質を分泌または生成するために転換された前駆体細胞に対する発現ベクターとして裸のＤＮＡまたはウイルス・ベクターを利用している適当な細胞変換技法により遺伝子工学的に処理される。なお、このような自己由来前駆体細胞またはドナー前駆体細胞の遺伝工学的処理は当該技術分野において知られているプロトコルを含む種々のプロトコルにより行なわれる。

一定の非自己由来のドナー細胞手法を採用する場合に、免疫抑制性の種々の薬物、化合物または物質が以下において概説されている配給または投与の工程に対する一定の免疫応答を回避するために利用できる。適当な免疫抑制性の薬物の例はシクロスポリン、シロリマス（ラパマイシン）、タクロリマス（ＦＫ−５０６）、ＯＫＴ３、アザチオプリン、マイコフェノレート・モフェチル等を含むがこれらに限らない。従って、これらの免疫抑制性の薬物は上記前駆体細胞の配給工程の前、その途中、またはその後に、あるいは、これらの時間の任意の組み合わせにおいて、すなわち、上記前駆体細胞の配給工程の前および後または当該工程の途中および後等において一定の患者に投与される。

本発明の方法による別の工程は種々の前駆体細胞のホーミング処理、転座または媒介型の運動を容易にするための種々の刺激因子として用いるために１種類以上のサイトカイン、ケモキネシスまたは化学誘引物質等のような一定の信号発生分子または信号発生化合物を全身系的に投与するか、一定の部位特定的な様式において、すなわち、一定の患者の組織における標的領域に対して局所的に配給することである。このような種々のサイトカイン、ケモキネシスまたは化学誘引物質の投与または局所的配給は、上記システム４８と共に上記位置センサー３２により上記カテーテル２０の操縦および案内を採用する場合に、「ＧＴｘ」と呼ばれている。以下において本明細書に定められているように、用語の「転座刺激因子（translocation stimulator）」は上記前駆体細胞のホーミング処理を誘引するか容易にするために一定の標的領域において局所的に（または全身系的に）配給される一定のサイトカイン、ケモキネシスまたは化学誘引物質（またはこれらの組み合わせ）等のような任意の信号発生分子または信号発生化合物を定義するために用いられている。開示の目的のために、用語の「サイトカイン（cytokine）」、「ケモキネシス（chemokine）」および「化学誘引物質（chemoattractant）」は交換可能に用いられており、一定の前駆体細胞（上記において定義されているような細胞）のホーミング処理、転座または媒介型の運動を容易にするために用いられる任意の信号発生分子または信号発生化合物を意味する。また、これらの用語の「サイトカイン」、「ケモキネシス」および「化学誘引物質」は上記のような種々の信号発生分子または信号発生化合物を分泌するか分泌するように誘引される任意の細胞型を意味してこれらを含むことも目的としている。上記の本発明による前駆体細胞の転座刺激工程を行なう場合に、上記の転座刺激因子は全身系的に投与されるか、あるいは、例えば、一定の標的領域に連絡している一定の脈管内腔の中または当該標的領域の近くにおける一定の脈管壁部の中または当該標的領域の近くにおける組織の中において、その標的領域の組織にまたはその中に直接的に、あるいは、当該標的領域の近隣または近傍に、上記針２４を配置することにより、上記カテーテル２０の針２４を用いる注入による一定の部位特定的な様式において局所的に配給される。このカテーテル２０の上記位置センサー３２の使用による案内は上記のＧＴｘ工程を行なう場合に有用である。特に、心臓血管の用途において、上記の転座刺激因子は冠動脈等のような一定の虚血領域に連絡している脈管を含むように心臓組織内における一定の虚血領域等のような一定の標的領域に対して直接的にまたは当該領域の近くに配給される。種々の転座刺激因子の心臓血管組織に対する局所的な配給において、虚血領域等のような適当な標的領域が心筋層、心内膜または心外膜の中、あるいは、冠動脈等の種々の脈管の中またはこれらの脈管の壁部の中に存在する。従って、上記の転座刺激因子は一定の心臓における心筋層、心内膜または心外膜の中、あるいは、種々の脈管の内腔の中、あるいは、冠動脈等のような心臓血管系における種々の脈管を含む一定の脈管の壁部の中に注入される。

上記組織の標的領域に局所的に投与または配給する適当な種類のサイトカインはＶＥＧＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ｂＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＩＧＦ−１、ＰＬＧＦ、ＳＤＦ−１、ＡＮＧ１、ＡＮＧ２、ＴＩＥ２、ＰＤＧＦ、ＨＧＦ、ＴＮＦα、ＴＧＦβ、ＳＣＧＦ、セレクチン、インテグリン、ＭＭＰ、ＰＥＣＡＭ、カドヘリン、ＮＯ、ＣＸＣ、ＭＣＰ−１、ＨＩＦα、ＣＯＸ−２および本明細書において記載されているそれぞれのサイトカインの全ての異性体および類似体およびこれらサイトカイン全体のあらゆる組み合わせを含む。さらに、適当な種類のケモキネシスまたは化学誘引物質もまた使用可能である。

あるいは、上記のサイトカインまたは化学誘引物質は既に述べられている固体高分子基材カプセル８８と共に使用する場合のような一定の「遅速放出型（slow-release）」または「持続放出型（sustained release）」の方式で含有されている。例えば、既に述べられているように、上記生体相容性のポリマー基材カプセル８８の基材溶解度は上記の遅速放出型または持続放出型の方式および高速基材溶解度の方式の両方における所望の薬物拡散速度と共に共同作用する。従って、上記カテーテル２０の針２４は一定の標的領域の組織にまたはその中に直接的に、あるいは、当該標的領域の近隣または近傍に上記のポリマー基材−サイトカイン組み合わせ型のカプセル８８を配給または注入するために用いられる。

本発明によるサイトカインの配給のための一例の特定の実施例は脈管内皮増殖因子−２（ｐｈＶＥＧＦ−２）をコード化する裸の血漿ＤＮＡの注入による。この本発明の配給工程はベール（Vale）他，「ランダマイズド・シングル−ブラインド・プラシーボ・コントロールド・パイロット・スタデイ・オブ・カテーテル−ベイスド・マイオカージアル・ジーン・トランスファー・フォー・テラポイチック・アンギオゲネシス・ユージング・レフト・ベントリキュラー・エレクトロメカニカル・マッピング・イン・ペイシェント・ウイズ・クローニック・マイオカージアル・イスケミア（Randomized, Single-Blind, Placebo Controlled Pilot Study of Catheter-Based Myocardial Gene Transfer for Therapeutic Angiogenesis Using Left Ventricular Electromechanical Mapping in Patients with Chronic Myocardial Ischemia）」，サーキュレーション（Circulation），（２００１年），１０２巻，２１３８頁において記載されているような慢性の心筋虚血症に罹っている人間の患者に関連する最近の臨床調査において概説されている。本発明の上記システム４８を利用している上記の人間の臨床調査において、一定の２７ゲージの針２４を含む８フレンチ（Ｆ）の操縦可能で偏向可能なカテーテル２０（装置および処置はＧＴｘとして呼ばれることもある）の形態のカテーテル２０が慢性の心筋虚血症を伴う６人の患者の左心室の心筋層に経皮的に進行している。これらの患者は各虚血症の心筋層内における６回の注入として投与されるｐｈＶＥＧＨ−２（合計の投与量、２００μｇ）またはプラシーボ（無効処置）を受けるために無作為化（１：１）されている。さらに、これらの注入はＮＯＧＡ（登録商標）（カリフォルニア州、ダイアモンド・バーのバイオセンス・ウェブスター社（Biosense Webster, Inc.））の上記システム４８による左心室の電気機械的マッピング処理により案内されている。プラシーボに対して初期的に無作為化された各患者はそれぞれの初期的な処置後の９０日目に全く臨床的な改善が見られない場合に上記ｐｈＶＥＧＦ−２のＧＴｘ（上記システム４８およびカテーテル２０により案内された療法）に対して適格であるとした。カテーテルの注入（ｎ＝３６）は心拍数または血圧において変化を全く生じなかった。また、持続した心室の不整脈、梗塞形成のＥＣＧの形跡、または心室の穿孔は全く観察されなかった。ｐｈＶＥＧＦ−２によりトランスフェクションを生じた患者はＧＴｘ後の３６０日目までにわたる減少したアンギナ（ＧＴｘの前対後、３６．２±２．３対３．５±１．２のエピソード／週）および減少したニトログリセリン消費（３３．８±２．３対４．１±１．５錠剤／週）、電気機械的マッピング処理による減少した虚血症（虚血の平均面積、１０．２±３．５対２．８±１．６ｃｍ² 、Ｐ＝０．０４）、および対照の処置後に得られた画像に対して比べた場合にＧＴｘ後の９０日目までにわたるＳＰＥＣＴセスタミビ操作処理（SPECT-sestamibi scanning）による改善された心筋層灌流を経験した。

上記の５２ｋＤａのヒトＶＥＧＦ−２（バスキュラー・ゲネテイクス社（Vascular Genetics, Inc.）をコード化する相補的ＤＮＡシーケンスを含有しているｐｈＶＥＧＦ−２プラスミドを上記の注入用カテーテルにより投与した。この発現プラスミドは５２８３塩基対の長さであり、ヒューマン・ゲノム・サイエンスイズ社（Human Genome Sciences）により構成されている。ｐｈＶＥＧＦ−２により形質転換処理した大腸菌の培養体からの調製および精製をピュアシン・ポリフロ（Puresyn PolyFlo）法により行ない、リン酸塩緩衝液化した塩水（２０ｍｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ７．２、０．０１％［重量／容量］のエデト酸二ナトリウム含有）中において１．２２ｍｇ／ｍＬのプラスミドＤＮＡを含有していた。

上記ＬＶＥＭＭ処理（左心室の電磁的マッピング処理）の完了後に、そのマッピング用カテーテルを一定の改良した８フレンチ（Ｆ）のマッピングカテーテルであり、その先端部分に４ｍｍ乃至６ｍｍだけ前進または後退する２７ゲージ（Ｇ）の針２４が組み込まれている注入カテーテル２０（バイオセンス・ウェブスター社（Biosense Webster）に取り替えた。このカテーテル２０は注入前に３０分間乃至４５分間にわたり無菌の塩水により洗浄されているので、上記の循環系の中にこのカテーテル２０を導入する前にその内孔内に充填されている。その後、この注入カテーテル２０は大動脈弁を横切り左心室内に到る大腿動脈切開部を介して進行して、既に得られている３次元（３Ｄ）マップ上に重ねられた標的領域（標的区域）内における上記のパラメーターに基づいて安定な複数の点を得るために操縦される。

１個の安定な点が得られると、上記針２４が、一時的な心筋層の外傷部および／またはその心筋層の中への針の侵入の証拠としての永久的な心室の収縮により検出される心臓内電位図により、その心筋層の中に４ｍｍ乃至６ｍｍだけ進行する。一方、ＧＴｘに対して無作為化された患者において（１：１でプラシーボに対して無作為化されている）、６回の注入が、例えば、標的領域である虚血領域（維持される電圧および異常な壁部の移動の組み合わせにより示される）に対して行なわれる。各注入は、２００μｇのｐｈＶＥＧＦ−１２の全体の投与量に対して、一定の１ｍＬの注射器から配給される１ｍＬの溶液（全容量、６ｍＬ／患者）により構成されている。各注入の完了後に、上記針が後退して、上記カテーテル２０が虚血の標的領域内における別の心筋層の部位に移動する。その後、最後の注入後の針の後退前に、その内孔部が０．１ｍＬの無菌塩水により再び洗浄される。

プラシーボに対して無作為化されている患者において一定の処置の変化が採用されており、これらの患者においては、有益性の可能性のある物質が全く投与されないので、上記の針２４は全く延出していない（患者に対する考察のため）。しかしながら、これ以外の全ての点において、上記の処置は、６種類の異なる領域へのカテーテルの進行、および適当な虚血部位を位置決した時に、個別のワーク・ステーションの操作および一定の注入の「開始（beginning）」または「終了（ending）」の患者に対する可聴の指示に関する説明を含み、そのオペレーターが上記の注入処理をまねることを含んで繰り返されている。

上記対照グループに対して初期的に無作為化された各患者は、これらの人が臨床的な改善の証拠を示さずに、ＳＰＥＣＴセスタミビ操作処理またはＬＶ−ＮＯＧＡ−ＥＭＭ（上記のシステム４８およびマッピング・カテーテルによる左心室の電磁的マッピング処理）による心筋層の灌流における改善を全く示さない場合に、９０日後にＧＴｘによる治療に移ることにおいて適格であるとして将来的に指定されている。全ての患者は意識的な鎮静処置の分別ある使用、ヘッドホーンを介して演奏されるテープによる音楽、および上記の対照患者におけるオペレーターによるＧＴｘの偽装による試みによる処置を通して盲検的に処理されている。

６人の患者は合計で３６回のカテーテルによる心筋層の注入を受け、これらの患者はｐｈＶＥＧＦ−２のＧＴｘに対して初期的に無作為化されている３人の患者および対照グループに対する初期的な無作為化の９０日以上経過後にＧＴｘに移った３人の患者を含む。なお、上記の注入は心拍数（注入前、７４±５ｂｐｍ、注入後、７４±５ｂｐｍ）、収縮期血圧（１４７±１４ｍｍＨｇ対１４８±１１ｍｍＨｇ）、または拡張時血圧（６９±６ｍｍＨｇ対７０±５ｍｍＨｇ）においていずれも有意義な変化を全く生じなかった。なお、上記針が心筋層の中に延在している時に一次的で単一焦点状の脈管の異所性の活動が観察された。また、全ての患者において、散在性で早発性の心室収縮が注入中に生じたが、持続された心室（または動脈）の不整脈のエピソードは全く見られなかった。さらに、心臓内電位図により記録されるような注入時における持続された傷害パターンも全く観察されなかった。

上記ＧＴｘ処理（本発明のシステム４８およびカテーテル２０による）の後の２４時間にわたる継続的なＥＣＧモニターにより、持続された心室または動脈の不整脈が全く見られなかった。さらに、ＧＴｘ処理後に記録された種々のＥＣＧの結果はあらゆる患者において急性の心筋の梗塞または虚血の証拠を全く示さなかった。また、クレアチン・キナーゼ−ＭＢの量はＧＴｘ処理後のあらゆる患者において正常な制限値を超えて増加しなかった。また、主要な合併症も全く存在せず、心内膜液浸出および／または心タンポナーデの心エコー図による証拠も全く存在しなかった。

臨床的に、ｐｈＶＥＧＦのトランスフェクションの作用を受けた患者は、ＧＴｘ後の３６０日目までにわたり、１週間当たりにおけるアンギナのエピソードにおける一定の減少（３６．２±２．３対３．５±１．２のエピソード／週、Ｐ＝０．００２）およびニトログリセリン錠剤の消費量における一定の減少（３３．８±２．３対４．１±１．５、Ｐ＝０．００２）を報告している。これに対して、上記対照グループに対して無作為化された盲検処理を受けた患者は１週間にわたるアンギナのエピソードおよびニトログリセリンの消費量において一定の初期的な減少を報告しているが、このような変化した臨床的なプロファイルは３０日の経過後まで持続しなかった。実際に、処理の割当後から９０日までに、上記対照グループ内の各患者は各基準線値に対して統計学的に異なっていないそれぞれの値に戻っている。

改良型ブルース・プロトコル（Modified Bruce protocol）の運動許容試験を上記ＧＴｘ処理後の９０日目、１８０日目、および３６０日目における全ての患者について行なった。この結果、上記ｐｈＶＥＧＦ−２のトランスフェクションの作用を受けた患者の６人の内の４人がＧＴｘ処理後の３６０日目までにわたり改善された運動の耐久性、すなわち、７秒から１２７秒（平均、７２±２５秒）の範囲に及ぶ運動の耐久性における増加を示した。一方、運動の耐久性が改善されなかった残りの２人の患者においては、一人はアンギナの理由により、また、他の一人は跛行の理由により試験を停止した。さらに、３人の元々において対照の患者の内の２人は対照の割当後の９０日目まで改善されなかったが、ｐｈＶＥＧＦ−２のＧＴｘ処理への移行後において、両人共にそのＧＴｘ処理後の１８０日までにわたり改善された。さらに、運動試験が対照の割当後の９０日において改善されていた残りの一人の元々において対照の患者も継続していたアンギナおよびＳＰＥＣＴ−セスタミビ操作処理およびＬＶ−ＮＯＧＡ−ＥＭＭにおける一貫した虚血によりＧＴｘ処理に移行することが認められた。

ＬＶＥＦ値（左心室駆出率）はＧＴｘ処理後の３６０日目までにわたり有意差を伴って変化しなかった。ｐｈＶＥＧＦ−２のトランスフェクションの作用を受けた患者の場合において、ＧＴｘ処理前の平均のＬＶＥＦ値は４４±９％であり、ＧＴｘ処理後の平均値は４９±７％であった（Ｐ＝０．０７）。一方、対照の患者の場合には、処理前および処理後の平均のＬＶＥＦ値はそれぞれ４３±４％および４７±７％であった（Ｐ＝０．４２３）。

さらに、虚血部分における心筋層の生活能力を定めているそれぞれ＞５ｍＶおよび＞２ｍＶの平均のＵｐＶ値および双極電圧の読取値はＧＴｘ後において有意差を伴って変化しなかった。しかしながら、心筋層の虚血部分における平均のＬＬＳ値はｐｈＶＥＧＦ−２によるトランスフェクションの作用を受けた患者において５．３±１．４％から１２．５±１．４％まで有意差を伴って改善された（Ｐ＝０．０２）。この結果、虚血性の心筋層の面積はＧＴｘ処理前の１０．２±３．５ｃｍ² からＧＴｘ処理後の２．８±１．６ｃｍ² まで減少した（Ｐ＝０．０４、上記の患者において）。

加えて、本発明のサイトカイン配給工程による前駆体細胞としての骨髄由来幹細胞のホーミング処理を誘引および容易にするための種々のサイトカインＳＣＦ（幹細胞因子）およびＧ−ＳＣＦ（顆粒球コロニー刺激因子）の局所的配給を利用している別のプロトコルがオルリック（Orlic）他，「モビライズド・ボーン・マロウ・セルズ・リペア・ザ・インファークテド・ハート，インプルービング・ファンクション・アンド・サバイバル（Mobilized Bone Marrow Cells Repair the Infarcted Heart, Improving Function and Survival）」，ＰＮＡＳ初版，（６月２９日，２００１年）において詳述されている。このオルリック他の調査において、２００μｇ／ＫＧ／日での組換えラットＳＣＦおよび５０μｇ／ＫＧ／日での組換えヒトＳＣＦ（アムゲン・バイオロジカルズ社（Amgen Biologicals））の配給が生後２ヶ月のＣ５７ＢＬ／６のオスのマウスに対して５日間にわたり１日に１回行なわれている。さらに、これらのＣ５７ＢＬ／６マウスの左心室の露出および冠動脈の結紮の後に、付加的なＳＣＦおよびＧ−ＣＳＦをさらに３日間にわたり投与した。この調査において、上記のＳＣＦおよびＧ−ＣＳＦは上記マウスの心筋層組織内における一定の標的領域として誘発された心筋梗塞の部分に直接的に注入され、これにより、循環している種々の前駆体幹細胞が上記心筋梗塞の領域または標的領域に移動して、２７日間の一定期間内に当該標的領域において有意義な程度の組織再生を生じている。これらのＳＣＦおよびＧ−ＣＳＦのサイトカインの局所的注入により、循環している前駆体幹細胞の数が２９種の幹細胞（未処理の対照のマウスの場合）から上記のサイトカインにより処理されたマウスにおける７，２００種の幹細胞に増加している。加えて、このサイトカイン誘発型の心臓治療は死亡率を６８％、梗塞領域の大きさを４０％、空洞性の拡張を２６％および拡張期の応力を７０％だけ減少している。また、上記のサイトカインにより治療したマウスにおける駆出率は漸進的に増加しており、その血行力学は小動脈および毛細管を伴う約１５×１０⁶ 個の新しい筋細胞の形成の結果として有意義に改善されている。従って、この調査による結果により、種々のサイトカインの局所的な注入がこの局所的なサイトカインの配給の部位に対して誘引される種々の循環幹細胞の数に一定の有意義な影響を与えることが示されている。従って、上記のサイトカインＳＣＦおよびＧ−ＣＳＦは本発明のカテーテル２０による一定の組織の標的領域内への注入に適している。

さらに、上記の転座刺激因子の内で、例えば、種々のサイトカイン、ケモキネシスまたは化学誘引物質が上記前駆体細胞の一定の標的領域に対する転座を容易にするために一定の組織の標的領域に、またはその内部または近くにおいて注入される。これらのケモキネシスまたは化学誘引物質の適当な治療量の範囲は１μｌ乃至５．０μｌの範囲である。

さらに、本発明によれば、上記本発明の方法は一定の患者の体内に再導入するための上記において概説されているような一定の様式で収穫および単離されている自己由来前駆体細胞、または同種異系または異種の供給源の両方からの成人または胚芽の幹細胞を含む同種異系または異種の供給源からのドナー前駆体細胞のいずれかの前駆体細胞の配給または投与のための工程を含む。さらに、一定の患者に対して上記において定められているような一定の免疫抑制性の薬物または物質を投与する随意的な工程が同種異系または異種の前駆体細胞による一定の免疫応答を防止するためにこれらの細胞を上記患者に対して配給する状況において用いられる。この免疫抑制性の物質は上記前駆体細胞の配給工程の前、途中、またはその後のいずれかにおいてこれらの工程の１種類以上の段階を含むように投与される。

本発明によれば、上記の前駆体細胞は一定の患者の適当な脈管の中への静脈内投与のような方法により全身系的に、または本発明のカテーテル２０による局所的配給により上記患者に対して配給される（自己由来前駆体細胞の場合には再導入される）。上記の本発明の方法による投与または配給の工程において任意の量の前駆体細胞が利用できるが、適当な治療量の前駆体細胞が幾つかの既知のプロトコルにおいて概説されている。例えば、コッヘル（Kocher）他（上記において引用されている）において、ＣＤ−３４マーカーを有する種々の前駆体細胞が単離されて、一定の治療量の２×１０⁶ 個の前駆体細胞が誘発した急性の心筋梗塞を有する種々のラットにおける梗塞領域（標的領域）の中に静脈を介して注入されており、これらの細胞の静脈内注入により上記の心臓における左前下行動脈の結紮から４８時間以内に上記の標的領域または梗塞領域に対する上記細胞の浸潤が生じている。加えて、ＥＰＣｓの形態の同様の治療量の前駆体細胞がカワモト（Kawamoto）他，「テラポイチック・ポテンシャル・オブ・エクス−ビボ・エクスパンデッド・エンドセリアル・プロゲネレイター・セルズ・フォー・マイオカージアル・イスケミア（Therapeutic Potential of Ex-Vivo Expanded Endothelial Progenerator Cells for Myocardial Ischemia）」，サーキュレーション（Circulation），２００１年，６３４頁乃至６３７頁により行なわれている一定の調査において有効であることが証明されており、この場合に、一定の治療的に有効量のヒトＥＰＣｓ（１×１０⁶ 個の細胞）を用いて左前下行冠動脈の結紮後の無胸腺症ヌード・ラットにおける虚血の誘発後の約３時間において静脈内注射によりこれらのラットに投与している。上記のカワモト（Kawamoto）他の調査において指摘されているように、１×１０⁶ 個の前駆体細胞（ＥＰＣｓ）は対照のラットの毛細管密度よりも約１００ｍｍ² 多い毛細管密度を誘発することにおいて有効であると共に、線維症領域を上記対照のラットに対してこのＥＰＣ投与したラットの場合に約５％だけ減少している。従って、一定の組織における上記のような治療効果を生じるために静脈内に投与される同等量の前駆体細胞の治療効果もまた本発明の上記の前駆体細胞投与工程において適している。

加えて、本発明によれば、上記の前駆体細胞は上記カテーテル２０（ＧＴｘ）により行なわれる案内および操縦による一定の局所的な部位特異的な様式で一定の標的領域において、またはその中またはその近くに局所的に配給される。例えば、種々のブタを含む症状発現前の調査において、本発明のカテーテル２０がフックス（Fuchs）他，「トランスエンドカージアル・デリバリー・オブ・オートロガス・ボーン・マロウ・エンハンスイズ・コラテラル・プロフュージョン・アンド・リージョナル・ファンクション・イン・ピッグズ・ウィズ・クローニック・エクスペリメンタル・マイオカージアル・イスケミア（Transendocardial Delivery of Autologous Bone Marrow Enhances Collateral Profusion and Regional Function in Pigs with Chronic Experimental Myocardial Ischemia）」，ジャーナル・オブ・ザ・アメリカン・カレッジ・オブ・カージオロジー（Journal of the American College of Cardiology），３７巻，６号，２００１年，１７２６頁乃至１７３２頁のプロトコルにおいて利用されている。この調査において、１０頭の虚血症のブタにおける上記の先端部偏向式注入カテーテル２０（バイオセンス・ウェブスター社（Biosense Webster）、ダイアモンド・バー、カリフォルニア州）による自己由来骨髄（ＡＢＭ）の経心内膜注入における実行可能性および安全性が評価されている。各注入部位は１対９の比率においてフルオレスブライト（Fluoresbrite）ＹＧ２．０ｕｍの微小球体（ポリサイエンシーズ社（Polysciences, Inc.）、ウオーリングトン、ペンシルベニア州）をＡＢＭに対して添加することにより標識されている。０．２ｍｌの１０回の注入が虚血領域（標的領域）およびその境界領域（側壁部、ｎ＝５）の中および非虚血領域（前−中隔壁部、ｎ＝５）の中において約１ｃｍだけ離間して均一に分布されている。その後、これらの動物体は１日目、３日目、７日目および２１日目（各時点においてｎ＝２）においてそれぞれ犠牲にされている。さらに、２頭の動物体が０．５ｍｌのＡＢＭ注入後の３週間目において犠牲にされている。

次に、第２の段階において、複数の動物体を上記の予備調査と同様の様式で虚血領域およびその境界領域に対してそれぞれ０．２ｍｌの新鮮に収穫されたＡＢＭ吸引物（ｎ＝７）または同等量のヘパリン添加した塩水（ｎ＝７）の１２回の注入を受容するように無作為化した。心拍数および全身系の血圧を継続的に測定して、左心房の圧力をこの心筋層の血流の調査において記録した。

さらに、心筋層の虚血を伴わない別の７頭の動物体を正常な心筋層内へのＡＢＭの経心内膜的な注入が局所的な血流を増加するか否かを決定するために調査されている。さらに、これらの動物体は上述したように側壁部内へのＡＢＭ（ｎ＝４）またはヘパリン添加塩水（ｎ＝３）の注入に対して無作為化されている。

副行流（虚血／正常領域×１００）はＡＢＭ処理を受けたブタにおいて改善されていた（ＡＢＭ：９８±１４対８３±１２（静止状態）、ｐ＝０．００１、８９±１８対７８±１２（アデノシン処理中）、ｐ＝０．０２５、対照：９２±１０対８９±９（静止状態）、ｐ＝０．４９、７８±１１対７７±５（アデノシン処理中）、ｐ＝０．７５）。同様に、収縮性もＡＢＭ処理を受けたブタにおいて増加していた（ＡＢＭ：８３±２１対６０±３２（静止状態）、ｐ＝０．０４、９１±４４対３６±４４対３６±４３（ペーシング中）、ｐ＝０．０５６、対照：６９±４８対６４±４６（静止状態）、ｐ＝０．７４、６５±５６対３７±５６（ペーシング中）、ｐ＝０．２３）。

種々の骨髄細胞は内皮細胞増殖を誘発する種々の脈管形成因子を分泌し、経心内膜的に注入される場合に、副行灌流を増加して虚血の心筋層内の心筋機能を高める。

さらに、カルカ（Kalka）他，「トランスプランテーション・オブ・エクス・ビボ・エクスパンデッド・エンドセリアル・プロゲニター・セルズ・フォー・テラポイチック・ネオバスキュラリゼーション（Transplantation of Ex Vivo Expanded Endothelial Progenitor Cells for Therapeutic Neovascularization）」，ＰＮＡＳ，（３月２８日，２０００年），９７巻，７号，３４２２頁乃至３４２７頁により行なわれている調査において、一定の適当な治療量のＥＰＣｓの形態の前駆体細胞が治療的に有効であることが示されており、この場合に、５×１０⁵ 個の培養および増殖したＥＰＣｓが無胸腺ヌード・マウスの後方肢の虚血組織内におけるヒト内皮先祖細胞の局所的注入によりその心臓内に直接的に注入されている。従って、上記の量のＥＰＣｓはさらに本発明のカテーテル２０による組織の一定の標的領域における一定の治療効果を誘発するために適している。

従って、脈管の増殖、筋発生、組織再造形または瘢痕組織等のような組織の置換を誘発するための本発明による方法は、静脈内投与等のような一定の技法により全身系的に、または一定組織の標的領域においてまたはその近くにおいて一定の比較的に局在化された配給技法と組み合わされている種々のサイトカイン、ケモキネシスまたは化学誘引物質等のような転座刺激因子の上記組織の標的領域に対する局所的な配給の工程を含むように、上記において概説されている工程の１個以上を利用している。

上記の好ましい実施形態は例示的な目的で記載したものであり、本発明の完全な範囲は特許請求の範囲およびその実施態様によってのみ制限される。

本発明による方法およびシステムは一定の患者に対して生体内で配給される種々の前駆体細胞のホーミング処理、転座処理または反応速度に関連している。本発明によれば、上記方法は組織内における脈管増殖、筋発生、組織再造形、または一定の瘢痕の置換を誘発することに関連しており、特に、本発明による方法は任意の種類の組織内における、特に、組織内の特定の部位または場所、すなわち、一定の標的領域に対する脈管増殖、筋発生、組織再造形または一定の瘢痕の置換を誘発するために利用できる。さらに、本発明は心筋層、心内膜または心外膜等のような心臓組織内の一定の虚血領域（標的領域）における脈管増殖、筋発生、組織再造形、または置換を誘発するために利用できる。

本発明の具体的な実施態様は以下のとおりである。
（１）さらに、脈管形成による脈管増殖を行なう処理を含む請求項１に記載の方法。
（２）さらに、血管形成による脈管増殖を行なう処理を含む請求項１に記載の方法。
（３）さらに、動脈形成による脈管増殖を行なう処理を含む請求項１に記載の方法。
（４）さらに、前記哺乳類動物の血液から種々の内皮先祖細胞を単離する処理を含む請求項１に記載の方法。
（５）さらに、前記哺乳類動物の骨髄から種々の骨髄由来幹細胞を単離する処理を含む請求項１に記載の方法。

（６）さらに、前記単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を生体外において培養および増殖する処理を含む請求項１に記載の方法。
（７）さらに、種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を遺伝子工学的に処理して一定のマーカーを生成する処理を含む実施態様（６）に記載の方法。
（８）さらに、種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を遺伝子工学的に処理して一定の治療タンパク質を生成する処理を含む実施態様（６）に記載の方法。
（９）さらに、ＶＥＧＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ｂＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＩＧＦ−１、ＰＬＧＦ、ＳＤＦ−１、ＡＮＧ１、ＡＮＧ２、ＴＩＥ２、ＨＧＦ、ＴＮＦα、ＴＧＦβ、ＳＣＧＦ、セレクチン、インテグリン、ＭＭＰ、ＰＥＣＡＭ、カドヘリン、ＮＯ、ＣＸＣ、ＭＣＰ−１、ＨＩＦα、ＣＯＸ−２およびこれらの全ての異性体または類似体から成る群からの少なくとも１種類の転座刺激因子を配給する処理を含む請求項１に記載の方法。
（１０）さらに、注入により前記組織の標的領域に対して一定のサイトカイン転座刺激因子を配給する処理を含む請求項１に記載の方法。

（１１）さらに、前記転座刺激因子の注入のために一定のカテーテルを使用する処理を含む実施態様（１０）に記載の方法。
（１２）さらに、前記カテーテルにおける一定の位置センサーを用いて当該カテーテルを前記標的領域に操縦する処理を含む実施態様（１１）に記載の方法。
（１３）さらに、心臓における一定の心筋層の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（１１）に記載の方法。
（１４）さらに、心臓における一定の心外膜の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（１１）に記載の方法。
（１５）さらに、心臓における一定の脈管の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（１１）に記載の方法。

（１６）さらに、心臓における一定の脈管の壁部の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（１１）に記載の方法。
（１７）さらに、生活能力について前記組織をマッピング処理することにより前記標的領域を確認する処理を含む請求項１に記載の方法。
（１８）さらに、一定の電極を有する一定のカテーテルにより生活能力について前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（１７）に記載の方法。
（１９）さらに、前記カテーテルにおける一定の位置センサーを用いて当該カテーテルを操縦する処理を含む実施態様（１８）に記載の方法。
（２０）さらに、一定の選択可能なマーカーにより種々の内皮先祖細胞を単離する処理を含む請求項１に記載の方法。

（２１）ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥ−カドヘリン、ＣＤ３４、ＢＤＮＦ、Ｅ−セレクチンまたはＣＸＣＲ４から成る群からの少なくとも１種類の選択可能なマーカーを用いる実施態様（２０）に記載の方法。
（２２）さらに、静脈内投与により前記単離した内皮先祖細胞を再導入する処理を含む実施態様（２０）に記載の方法。
（２３）さらに、前記組織の標的領域の近くに前記単離した内皮先祖細胞を再導入する処理を含む実施態様（２０）に記載の方法。
（２４）さらに、一定の選択可能なマーカーにより種々の骨髄由来幹細胞を単離する処理を含む請求項１に記載の方法。
（２５）さらに、Ｃ−キット、Ｐ−グリコプロテイン、ＭＲＤ１またはＳｃａ−１から成る群からの少なくとも１種類の選択可能なマーカーを用いる処理を含む実施態様（２４）に記載の方法。

（２６）さらに、静脈内投与により前記単離した骨髄由来幹細胞を再導入する処理を含む実施態様（２４）に記載の方法。
（２７）さらに、前記組織の標的領域の近くに前記単離した骨髄由来幹細胞を再導入する処理を含む実施態様（２４）に記載の方法。
（２８）さらに、前記哺乳類動物の血液から種々の内皮先祖細胞を単離する処理を含む請求項２に記載の方法。
（２９）さらに、前記哺乳類動物の骨髄から種々の骨髄由来幹細胞を単離する処理を含む請求項２に記載の方法。
（３０）さらに、前記単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を生体外において培養または増殖する処理を含む請求項２に記載の方法。

（３１）さらに、種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を遺伝子工学的に処理して一定のマーカーを生成する処理を含む実施態様（３０）に記載の方法。
（３２）さらに、種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を遺伝子工学的に処理して一定の治療タンパク質を生成する処理を含む実施態様（３０）に記載の方法。
（３３）さらに、ＶＥＧＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ｂＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＩＧＦ−１、ＰＬＧＦ、ＳＤＦ−１、ＡＮＧ１、ＡＮＧ２、ＴＩＥ２、ＨＧＦ、ＴＮＦα、ＴＧＦβ、ＳＣＧＦ、セレクチン、インテグリン、ＭＭＰ、ＰＥＣＡＭ、カドヘリン、ＮＯ、ＣＸＣ、ＭＣＰ−１、ＨＩＦα、ＣＯＸ−２およびこれらの全ての異性体または類似体から成る群からの少なくとも１種類の転座刺激因子を配給する処理を含む請求項２に記載の方法。
（３４）さらに、注入により前記組織の標的領域に対して一定の前記転座刺激因子を配給する処理を含む請求項２に記載の方法。
（３５）さらに、前記転座刺激因子の注入のために一定のカテーテルを使用する処理を含む実施態様（３４）に記載の方法。

（３６）さらに、前記カテーテルにおける一定の位置センサーを用いて当該カテーテルを前記標的領域に操縦する処理を含む実施態様（３５）に記載の方法。
（３７）さらに、心臓における一定の心筋層の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（３５）に記載の方法。
（３８）さらに、心臓における一定の心外膜の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（３５）に記載の方法。
（３９）さらに、心臓における一定の脈管の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（３５）に記載の方法。
（４０）さらに、心臓における一定の脈管の壁部の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（３５）に記載の方法。

（４１）さらに、生活能力について前記組織をマッピング処理することにより前記標的領域を確認する処理を含む請求項２に記載の方法。
（４２）さらに、一定の電極を有する一定のカテーテルにより生活能力について前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（４１）に記載の方法。
（４３）さらに、前記カテーテルにおける一定の位置センサーを用いて当該カテーテルを操縦する処理を含む実施態様（４２）に記載の方法。
（４４）さらに、一定の選択可能なマーカーにより種々の内皮先祖細胞を単離する処理を含む請求項２に記載の方法。
（４５）ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥ−カドヘリン、ＣＤ３４、ＢＤＮＦ、Ｅ−セレクチンまたはＣＸＣＲ４から成る群からの少なくとも１種類の選択可能なマーカーを用いる実施態様（４４）に記載の方法。

（４６）さらに、静脈内投与により前記単離した内皮先祖細胞を再導入する処理を含む実施態様（４４）に記載の方法。
（４７）さらに、前記組織の標的領域の近くに前記単離した内皮先祖細胞を再導入する処理を含む実施態様（４４）に記載の方法。
（４８）さらに、一定の選択可能なマーカーにより種々の骨髄由来幹細胞を単離する処理を含む請求項２に記載の方法。
（４９）さらに、Ｃ−キット、Ｐ−グリコプロテイン、ＭＲＤ１またはＳｃａ−１から成る群からの少なくとも１種類の選択可能なマーカーを用いる処理を含む実施態様（４８）に記載の方法。
（５０）さらに、静脈内投与により前記単離した骨髄由来幹細胞を再導入する処理を含む実施態様（４８）に記載の方法。

（５１）さらに、前記組織の標的領域の近くに前記単離した骨髄由来幹細胞を再導入する処理を含む実施態様（４８）に記載の方法。
（５２）さらに、前記哺乳類動物の血液から種々の内皮先祖細胞を単離する処理を含む請求項３に記載の方法。
（５３）さらに、前記哺乳類動物の骨髄から種々の骨髄由来幹細胞を単離する処理を含む請求項３に記載の方法。
（５４）さらに、前記単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を生体外において培養または増殖する処理を含む請求項３に記載の方法。
（５５）さらに、種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を遺伝子工学的に処理して一定のマーカーを生成する処理を含む実施態様（５４）に記載の方法。

（５６）さらに、種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を遺伝子工学的に処理して一定の治療タンパク質を生成する処理を含む実施態様（５４）に記載の方法。
（５７）さらに、ＶＥＧＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ｂＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＩＧＦ−１、ＰＬＧＦ、ＳＤＦ−１、ＡＮＧ１、ＡＮＧ２、ＴＩＥ２、ＨＧＦ、ＴＮＦα、ＴＧＦβ、ＳＣＧＦ、セレクチン、インテグリン、ＭＭＰ、ＰＥＣＡＭ、カドヘリン、ＮＯ、ＣＸＣ、ＭＣＰ−１、ＨＩＦα、ＣＯＸ−２およびこれらの全ての異性体または類似体から成る群からの少なくとも１種類の転座刺激因子を配給する処理を含む請求項３に記載の方法。
（５８）さらに、注入により前記組織の標的領域に対して一定の前記転座刺激因子を配給する処理を含む請求項３に記載の方法。
（５９）さらに、前記転座刺激因子の注入のために一定のカテーテルを使用する処理を含む実施態様（５８）に記載の方法。
（６０）さらに、前記カテーテルにおける一定の位置センサーを用いて当該カテーテルを前記標的領域に操縦する処理を含む実施態様（５９）に記載の方法。

（６１）さらに、心臓における一定の心筋層の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（５９）に記載の方法。
（６２）さらに、心臓における一定の心外膜の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（５９）に記載の方法。
（６３）さらに、心臓における一定の脈管の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（５９）に記載の方法。
（６４）さらに、心臓における一定の脈管の壁部の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（５９）に記載の方法。
（６５）さらに、生活能力について前記組織をマッピング処理することにより前記標的領域を確認する処理を含む請求項３に記載の方法。

（６６）さらに、一定の電極を有する一定のカテーテルにより生活能力について前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（６５）に記載の方法。
（６７）さらに、前記カテーテルにおける一定の位置センサーを用いて当該カテーテルを操縦する処理を含む実施態様（６６）に記載の方法。
（６８）さらに、一定の選択可能なマーカーにより種々の内皮先祖細胞を単離する処理を含む請求項３に記載の方法。
（６９）ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥ−カドヘリン、ＣＤ３４、ＢＤＮＦ、Ｅ−セレクチンまたはＣＸＣＲ４から成る群からの少なくとも１種類の選択可能なマーカーを用いる実施態様（６８）に記載の方法。
（７０）さらに、静脈内投与により前記単離した内皮先祖細胞を再導入する処理を含む実施態様（６８）に記載の方法。

（７１）さらに、前記組織の標的領域の近くに前記単離した内皮先祖細胞を再導入する処理を含む実施態様（６８）に記載の方法。
（７２）さらに、一定の選択可能なマーカーにより種々の骨髄由来幹細胞を単離する処理を含む請求項３に記載の方法。
（７３）さらに、Ｃ−キット、Ｐ−グリコプロテイン、ＭＲＤ１またはＳｃａ−１から成る群からの少なくとも１種類の選択可能なマーカーを用いる処理を含む実施態様（７２）に記載の方法。
（７４）さらに、静脈内投与により前記単離した骨髄由来幹細胞を再導入する処理を含む実施態様（７２）に記載の方法。
（７５）さらに、前記組織の標的領域の近くに前記単離した骨髄由来幹細胞を再導入する処理を含む実施態様（７２）に記載の方法。

（７６）さらに、前記哺乳類動物の血液から種々の内皮先祖細胞を単離する処理を含む請求項４に記載の方法。
（７７）さらに、前記哺乳類動物の骨髄から種々の骨髄由来幹細胞を単離する処理を含む請求項４に記載の方法。
（７８）さらに、前記単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を生体外において培養または増殖する処理を含む請求項４に記載の方法。
（７９）さらに、種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を遺伝子工学的に処理して一定のマーカーを生成する処理を含む実施態様（７８）に記載の方法。
（８０）さらに、種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を遺伝子工学的に処理して一定の治療タンパク質を生成する処理を含む実施態様（７８）に記載の方法。

（８１）さらに、ＶＥＧＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ｂＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＩＧＦ−１、ＰＬＧＦ、ＳＤＦ−１、ＡＮＧ１、ＡＮＧ２、ＴＩＥ２、ＨＧＦ、ＴＮＦα、ＴＧＦβ、ＳＣＧＦ、セレクチン、インテグリン、ＭＭＰ、ＰＥＣＡＭ、カドヘリン、ＮＯ、ＣＸＣ、ＭＣＰ−１、ＨＩＦα、ＣＯＸ−２およびこれらの全ての異性体または類似体から成る群からの少なくとも１種類の転座刺激因子を配給する処理を含む請求項４に記載の方法。
（８２）さらに、注入により前記組織の標的領域に対して一定の前記転座刺激因子を配給する処理を含む請求項４に記載の方法。
（８３）さらに、前記転座刺激因子の注入のために一定のカテーテルを使用する処理を含む実施態様（８２）に記載の方法。
（８４）さらに、前記カテーテルにおける一定の位置センサーを用いて当該カテーテルを前記標的領域に操縦する処理を含む実施態様（８３）に記載の方法。
（８５）さらに、心臓における一定の心筋層の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（８３）に記載の方法。

（８６）さらに、心臓における一定の心外膜の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（８３）に記載の方法。
（８７）さらに、心臓における一定の脈管の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（８３）に記載の方法。
（８８）さらに、心臓における一定の脈管の壁部の中に前記サイトカイン転座刺激因子を注入する処理を含む実施態様（８３）に記載の方法。
（８９）さらに、生活能力について前記組織をマッピング処理することにより前記標的領域を確認する処理を含む請求項４に記載の方法。
（９０）さらに、一定の電極を有する一定のカテーテルにより生活能力について前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（８９）に記載の方法。

（９１）さらに、前記カテーテルにおける一定の位置センサーを用いて当該カテーテルを操縦する処理を含む実施態様（９０）に記載の方法。
（９２）さらに、一定の選択可能なマーカーにより種々の内皮先祖細胞を単離する処理を含む請求項４に記載の方法。
（９３）ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥ−カドヘリン、ＣＤ３４、ＢＤＮＦ、Ｅ−セレクチンまたはＣＸＣＲ４から成る群からの少なくとも１種類の選択可能なマーカーを用いる実施態様（９２）に記載の方法。
（９４）さらに、静脈内投与により前記単離した内皮先祖細胞を再導入する処理を含む実施態様（９２）に記載の方法。
（９５）さらに、前記組織の標的領域の近くに前記単離した内皮先祖細胞を再導入する処理を含む実施態様（９２）に記載の方法。

（９６）さらに、一定の選択可能なマーカーにより種々の骨髄由来幹細胞を単離する処理を含む請求項４に記載の方法。
（９７）さらに、Ｃ−キット、Ｐ−グリコプロテイン、ＭＲＤ１またはＳｃａ−１から成る群からの少なくとも１種類の選択可能なマーカーを用いる処理を含む実施態様（９６）に記載の方法。
（９８）さらに、静脈内投与により前記単離した骨髄由来幹細胞を再導入する処理を含む実施態様（９６）に記載の方法。
（９９）さらに、前記組織の標的領域の近くに前記単離した骨髄由来幹細胞を再導入する処理を含む実施態様（９６）に記載の方法。
（１００）さらに、心臓の２個以上の室部における生活能力について前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（１８）に記載の方法。

（１０１）さらに、一定の二心室マッピングを行なう処理を含む実施態様（１００）に記載の方法。
（１０２）さらに、一定の高速マッピング技法を用いて前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（１００）に記載の方法。
（１０３）さらに、６個乃至１０個の点を用いて一定の生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１０１）に記載の方法。
（１０４）さらに、３個程度の点により前記生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１０２）に記載の方法。
（１０５）一定の高速マッピング技法を用いて前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（１８）に記載の方法。

（１０６）さらに、６個乃至１０個の点を用いて一定の生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１０４）に記載の方法。
（１０７）さらに、３個程度の点により前記生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１０５）に記載の方法。
（１０８）さらに、前記心臓の２個以上の室部の中における生活能力について前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（４１）に記載の方法。
（１０９）さらに、二心室マッピング処置を行なう処理を含む実施態様（１０７）に記載の方法。
（１１０）さらに、一定の高速マッピング技法により前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（１０７）に記載の方法。

（１１１）さらに、６個乃至１０個の点を用いて一定の生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１０９）に記載の方法。
（１１２）さらに、３個程度の点を用いて前記生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１１０）に記載の方法。
（１１３）さらに、一定の高速マッピング技法を用いて前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（４１）に記載の方法。
（１１４）さらに、６個乃至１０個の点を用いて一定の生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１１２）に記載の方法。
（１１５）さらに、３個程度の点により前記生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１１３）に記載の方法。

（１１６）さらに、前記心臓の２個以上の室部の中における生活能力について前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（６５）に記載の方法。
（１１７）さらに、二心室マッピング処置を行なう処理を含む実施態様（１１５）に記載の方法。
（１１８）さらに、一定の高速マッピング技法により前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（１１５）に記載の方法。
（１１９）さらに、６個乃至１０個の点を用いて一定の生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１１７）に記載の方法。
（１２０）さらに、３個程度の点を用いて前記生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１１８）に記載の方法。

（１２１）さらに、一定の高速マッピング技法を用いて前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（６５）に記載の方法。
（１２２）さらに、６個乃至１０個の点を用いて一定の生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１２０）に記載の方法。
（１２３）さらに、３個程度の点により前記生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１２１）に記載の方法。
（１２４）さらに、前記心臓の２個以上の室部における生活能力についてマッピングする処理を含む実施態様（８９）に記載の方法。
（１２５）さらに、二心室マッピング処置を行なう処理を含む実施態様（１２３）に記載の方法。

（１２６）さらに、一定の高速マッピング技法により前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（１２４）に記載の方法。
（１２７）さらに、６個乃至１０個の点を用いて一定の生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１２５）に記載の方法。
（１２８）さらに、３個程度の点を用いて前記生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１２６）に記載の方法。
（１２９）さらに、一定の高速マッピング技法を用いて前記組織をマッピングする処理を含む実施態様（８９）に記載の方法。
（１３０）さらに、６個乃至１０個の点を用いて一定の生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１２８）に記載の方法。
（１３１）さらに、３個程度の点により前記生活能力マップを形成する処理を含む実施態様（１２９）に記載の方法。

本発明の好ましい実施形態による第１の後退した形態における心臓内薬物配給用の針を備えているカテーテルの概略的部分断面図である。 針が第２の延伸した形態である図１のカテーテルを示す概略的部分断面図である。 本発明の別の好ましい実施形態による心臓内薬物配給用の針を備えているカテーテルの概略的部分断面図である。 本発明の好ましい実施形態による図１および図２のカテーテルを備えている心臓内薬物配給用のシステムを示す概略的斜視図である。 本発明の好ましい実施形態による図４のシステムの動作方法を示すフローチャートである。 本発明の別の好ましい実施形態による心臓内薬物配給において使用するためのカテーテルの概略的部分断面図である。 本発明の好ましい実施形態による心臓に薬物を配給するために図６のカテーテルを挿入した人間の心臓を示す概略的断面図である。 本発明の好ましい実施形態によるレーザー心筋脈管再生（ＬＭＲ）および心臓内薬物配給を同時に行なうのに使用するためのカテーテルの概略的部分断面図である。 本発明の好ましい実施形態による図８のカテーテルを備えているＬＭＲおよび心臓内薬物配給用のシステムを示す概略的斜視図である。 本発明の好ましい実施形態による図９のシステムを用いるＬＭＲ治療に伴う信号を示すタイミング図である。

符号の説明

２０ カテーテル
２４ 針
３０ 移動機構
３２ 位置センサー
３６ 接触センサー
３８ 電極
４０ 針センサー
４５ カテーテル
４７ 螺旋状の針
４８ 配給システム
５０ 制御コンソール
５２ 制御回路
５４ ディスペンサ
５８ ディスプレイ
６０ トランスデューサ
６４ カテーテル
７８ カテーテル
８０ 導波管
８２ 光学装置
８８ カプセル
９４ レーザー供給源
９６ ＬＭＲおよび配給システム

Claims (4)

1. 一定の哺乳類動物の組織内における脈管増殖を誘発するための方法において、
   （ａ）前記哺乳類動物から種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を単離する工程、
   （ｂ）前記組織の一定の標的領域に対して一定の転座刺激因子を配給する工程、および
   （ｃ）前記単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を前記哺乳類動物に対して再導入して当該内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を前記組織の標的領域に対してホーミング処理することにより当該標的領域において脈管増殖を行なう工程を含む方法。
2. 一定の哺乳類動物の組織内における筋発生を誘発するための方法において、
   （ａ）前記哺乳類動物から種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を単離する工程、
   （ｂ）前記組織の一定の標的領域に対して一定の転座刺激因子を配給する工程、および
   （ｃ）前記単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を前記哺乳類動物に対して再導入して当該内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を前記組織の標的領域に対してホーミング処理することにより当該標的領域において筋発生を行なう工程を含む方法。
3. 一定の哺乳類動物の組織を再造形するための方法において、
   （ａ）前記哺乳類動物から種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を単離する工程、
   （ｂ）前記組織の一定の標的領域に対して一定の転座刺激因子を配給する工程、および
   （ｃ）前記単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を前記哺乳類動物に対して再導入して当該内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を前記組織の標的領域に対してホーミング処理することにより当該標的領域における組織の再造形を行なう工程を含む方法。
4. 一定の哺乳類動物の組織内における瘢痕を置換するための方法において、
   （ａ）前記哺乳類動物から種々の内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を単離する工程、
   （ｂ）一定の標的領域として前記瘢痕を設定する工程、
   （ｃ）前記組織の標的領域に対して一定の転座刺激因子を配給する工程、および
   （ｄ）前記単離した内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を前記哺乳類動物に対して再導入して当該内皮先祖細胞または骨髄由来幹細胞を前記組織の標的領域に対してホーミング処理することにより当該標的領域における瘢痕の置換を行なう工程を含む方法。

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