JP2003523760A - ヒトポリヌクレオチド、ポリペプチド、および抗体 - Google Patents

ヒトポリヌクレオチド、ポリペプチド、および抗体

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Abstract

(57)【要約】 本発明は、新規なヒトポリペプチドに関する。本発明はまた、新規なヒトポリペプチドをコードする遺伝子のコード領域を含む単離された核酸に関する。また、本発明のヒトポリペプチドを産生するための、ベクター、宿主細胞、抗体および組換え方法が提供される。本発明はさらに、これらの新規なヒトポリペプチドに関する障害を診断するために有用な診断方法に関する。そして発明はさらに、これらの新規なヒトポリペプチドに関する障害を処置するために有用な治療方法に関する。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 （発明の分野） 本発明は、新規ヒトタンパク質に関する。より詳細には、新規ヒトポリペプチ
ドをコードする、単離された核酸分子が提供される。新規ヒトポリペプチドおよ
びこれらのポリペプチドに結合する抗体が、提供される。本発明のヒトポリヌク
レオチドおよび／またはポリペプチドを産生するためのベクター、宿主細胞なら
びに組み換え方法および合成方法もまた、提供される。本発明はさらに、これら
の新規ヒトポリペプチドに関する障害の診断、処理、予防および／または予後判
定するために有用な診断方法および治療方法に関する。本発明はさらに、本発明
のポリヌクレオチドおよびポリペプチドの、アゴニストおよびアンタゴニストを
同定するためのスクリーニング方法に関する。本発明はさらに、本発明のポリペ
プチドの産生および機能を阻害するための方法および／または組成物に関する。
【０００２】 （発明の背景） タンパク質輸送は、原核生物の細胞および真核生物の細胞の両方のために本質
的なプロセスである。個々のタンパク質の輸送は通常、アミノ末端シグナル配列
を介して生じる。このシグナル配列は、リボソーム集合部位から特定の細胞の位
置または細胞外位置に、タンパク質を指向または標的化する。輸送は、以下の工
程：シャペロンとの接触、アンフォールディング、レセプターおよび／または孔
複合体との相互作用、エネルギーの添加、ならびにリフォールディング、のいく
つかの任意の組み合わせを含み得る。さらに、細胞外タンパク質は、不活性な前
駆体として産生され得る。一旦前駆体が外に輸送されると、シグナルペプチダー
ゼによるシグナルペプチドの除去が、このタンパク質を活性化する。
【０００３】 アミノ末端シグナル配列は、実質的に変化するが、多くのパターンおよび全体
的な特性が共有される。最近、隠れＭａｒｋｏｖモデル（ＨＭＭ）（ＦＡＳＴＡ
およびＳｍｉｔｈ Ｗａｔｅｒｍａｎアルゴリズムの統計的な代替物）が、共有
されたパターン、詳細にはコンセンサス配列を見出すために使用されている（Ｐ
ｅａｒｓｏｎ、Ｗ．Ｒ．およびＤ．Ｊ．Ｌｉｐｍａｎ、ＰＮＡＳ、８５：２４４
４−４８（１９８８）；Ｓｍｉｔｈ、Ｔ．Ｆ．およびＭ．Ｓ．Ｗａｔｅｒｍａｎ
、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１４７：１９５−９７（１９８１））。これらは最
初、発話認識パターンを検定するために開発されたが、ＨＭＭは、タンパク質配
列およびＤＮＡ配列を分析するために、そしてタンパク質構造をモデル化するた
めに生物学において使用されてきた（Ｋｒｏｇｈ、Ａ．ら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ
ｌ．、２３５：１５０１−３１（１９９４）；Ｃｏｌｌｉｎ、Ｍ．ら、Ｐｒｏｔ
ｅｉｎ Ｓｃｉ．、２：３０５−１４（１９９３））。ＨＭＭは、正式な確率的
基礎を有し、アミノ酸またはヌクレオチドのための、ならびに挿入または欠失を
開きそして伸長するための位置特異的なスコアを使用する。このアルゴリズムは
、さらにより成功したパターンを構築するために新たに同定された配列からの情
報を取り込む点において、非常に柔軟である。他の方法が、膜結合タンパク質を
同定するために存在する。Ｋｌｅｉｎらは、ポリペプチド中の潜在的な膜貫通セ
グメントを検出するための方法（「ＡＬＯＭ」またＫＫＤと称される）を開発し
た（Ｋｌｅｉｎ、Ｐ．ら、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｐｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．、８１
５：４６８（１９８５））。これは、一定範囲のアミノ酸残基にわたる平均疎水
性価から、最も有望な膜貫通セグメントを同定しようと試みる。これは、このセ
グメントが膜貫通セグメントであるか（ＩＮＴＥＧＲＡＬ）否か（ＰＥＲＩＰＨ
ＥＲＡＬ）を予言し、従って、ポリペプチドの膜結合を示唆し得る。
【０００４】 形質膜結合型であることが公知のタンパク質ファミリーのいくつかの例は、レ
セプター（核、４回膜貫通、Ｇタンパク質共役、およびチロシンキナーゼ）、サ
イトカイン（ケモカイン）、ホルモン（増殖因子および分化因子）、神経ペプチ
ドおよび血管媒介因子、タンパク質キナーゼ、ホスファターゼ、ホスホリパーゼ
、ホスホジエステラーゼ、ヌクレオチドシクラーゼ、マトリックス分子（接着、
カドヘリン、細胞外マトリックス分子、インテグリン、およびセレクチン）、Ｇ
タンパク質、イオンチャネル（カルシウム、塩化物、カリウムおよびナトリウム
）、プロテアーゼ、輸送体／ポンプ（アミノ酸、糖、タンパク質、金属およびビ
タミン；カルシウム、リン酸塩、カリウムおよびナトリウム）ならびに調節タン
パク質である。これらのタンパク質のいくつか（レセプター、ホルモン、および
マトリックス分子）の記載ならびにこれらの機能不全に関連する疾患が、続く。
【０００５】 （フィブロネクチン） フィブロネクチンタンパク質は、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の構造および
機能において必須の役割を果たす。ＥＣＭの機能における欠損は、骨粗鬆症、ア
テローム硬化症、関節炎、および線維症の疾患のような疾患に関与すると考えら
れる。フィブロネクチンは、細胞がＥＣＭに接着することを可能にし、そして細
胞の増殖および移動、ならびに細胞骨格の組織化に影響する。ＥＣＭの主要な構
成成分として、フィブロネクチンは、特に発生の間の細胞の接着および移動よう
なプロセス、ならびに外傷修復のようなプロセスに影響すると考えられる（Ｒ．
Ｏ．Ｈｙｎｅｓ、ＰＮＡＳ、９６：２５８８−９０（１９９９））。
【０００６】 フィブロネクチンは、Ｉ型、ＩＩ型およびＩＩＩ型フィブロネクチンリピート
から構成される、ジスルフィド結合した二量体の糖タンパク質である。Ｉ型リピ
ートは、約４５アミノ酸の長さであり、タンパク質のアミノ末端およびカルボキ
シ末端に位置する。ＩＩ型ドメインは、約４０〜６０アミノ酸の長さであり、ジ
スルフィド結合に関与する保存されたシステインを４つ含む。ＩＩ型ドメインは
、コラーゲン結合において機能し得ると考えられる。タンパク質の中ほどに縦列
して配置された約１５〜１７個のＩＩＩ型ドメインが存在し、これは、フィブロ
ネクチンに弾力性を提供すると考えられる。
【０００７】 明らかに、フィブロネクチンドメインを含む新規のタンパク質の同定および／
または特徴付けは、広範な種類の疾患および／または障害（例えば、骨粗鬆症、
アテローム硬化症、関節炎、線維症の疾患、および外傷の治癒の障害）における
適用を潜在的に有する。
【０００８】 従って、新規のフィブロネクチンドメイン含有ファミリーメンバーを同定およ
び開発する明らかな必要性が存在する。構造的に関連しているが、このようなタ
ンパク質は、種々の細胞および組織型において多様かつ多面的な機能を有し得る
。本発明の精製されたフィブロネクチンドメイン含有タンパク質は、細胞の移動
、細胞外マトリックスの形成、および外傷の治癒、ならびにその調節に関与する
さらなる分子の同定、特徴付けおよび精製のために有用な研究ツールとして有用
である。さらに、フィブロネクチンドメインをコードする新規遺伝子の同定は、
次に、異常な外傷治癒、骨粗鬆症、アテローム硬化症、関節炎、線維症の疾患の
ような広い範囲の状態の処置および診断における適用を有する範囲の核酸レベル
およびタンパク質レベルでの誘導体、アゴニストおよびアンタゴニストの開発を
可能にする。
【０００９】 （デフェンシン） 哺乳動物のデフェンシンは、抗菌能において機能すると考えられる生得的なエ
フェクター分子として、表皮および粘膜上皮によって産生される。デフェンシン
は、グラム陽性細菌およびグラム陰性細菌、真菌類、寄生生物、ウイルス、なら
びにマイコバクテリアに対する広範な活性を有する、細胞傷害性ペプチドえある
。２つの特徴付けられたデフェンシンは、αデフェンシンおよびβデフェンシン
である。このα−デフェンシンは、好中球およびマクロファージによって産生さ
れ、一方、β−デフェンシンは、上皮によって産生される（Ｓｉｎｇｈ，Ｐ．Ｋ
．ら、ＰＮＡＳ、９５：１４９６１−６６（１９９８）；Ｌｉｌｌａｒｄ，Ｊ．
Ｗ．ら、ＰＮＡＳ、９６：６５１−５６（１９９９））。
【００１０】 デフェンシンペプチドの長さは、約２９〜３５アミノ酸の範囲であり、そして
ジスルフィド結合の形成およびタンパク質のフォールディングに関与する６つの
保存されたシステイン残基を含む。このシステイン残基の分布および結合は、α
デフェンシンとβデフェンシンとの間で異なる。
【００１１】 明らかに、新規デフェンシンタンパク質の同定および／または特徴付けは、広
範な種類の疾患および／または障害（例えば、免疫系の欠損および微生物による
感染）における適用を潜在的に有する。
【００１２】 従って、新規のデフェンシンタンパク質ファミリーメンバーを同定および開発
する明らかな必要性が存在する。構造的に関連しているが、このようなタンパク
質は、種々の細胞および組織型において多様かつ多面的な機能を有し得る。本発
明の精製されたデフェンシンタンパク質は、生得免疫および抗菌活性、ならびに
その調節に関与するさらなる分子の同定、特徴付けおよび精製のために有用な研
究ツールとして有用である。さらに、新規デフェンシン遺伝子の同定は、次に、
免疫系の欠損、微生物による感染のような広い範囲の状態の処置および診断にお
ける適用を有する範囲の核酸レベルおよびタンパク質レベルでの誘導体、アゴニ
ストおよびアンタゴニストの開発を可能にする。
【００１３】 （ＥＦ−ハンド（ｈａｎｄ）ドメイン含有タンパク質） カルシウムは、細胞のシグナル伝達に必須であることが周知である。しかし、
カルシウムはまた、タンパク質のプロセシング、ならびにゴルジ体への膜輸送お
よびゴルジ体を通じる膜輸送のような細胞のプロセスにおいて、役割を果たす。
カルシウムの結合に関与すると考えられる多くのタンパク質は、ＥＦ−ハンドド
メインとして公知のタンパク質カルシウム結合ドメインを部分的に介して、これ
を達成する。
【００１４】 このドメインは、両側に１２残基のαへリックスドメインが隣接する、１２残
基のループからなる。ＥＦハンドループにおいて、カルシウムイオンは、統合さ
れた五角形の二錐体型の配置に、位置する。不変のグルタミン酸またはアスパラ
ギン酸残基は、カルシウムイオンを配位するための２つの酸素を提供する。
【００１５】 このドメインを含むタンパク質としては、例えば、エクオリンおよびＲｅｎｉ
ｌｌａルシフェリン結合タンパク質（ＬＢＰ）、リカバリン、カルモジュリン、
カルパイン小鎖および大鎖、カルレチニン、カルサイクリン、フィンブリン、セ
リン／スレオニンプロテインホスファターゼ、ならびにジアシルグリセロールキ
ナーゼが挙げられる。
【００１６】 明らかに、新規のＥＦ−ハンドドメインを含有タンパク質の同定および／また
は特徴付けは、広範な種類の疾患および／または障害（例えば、細胞のシグナル
伝達およびタンパク質のプロセシングに関与する疾患および／または障害）にお
ける適用を潜在的に有する。
【００１７】 従って、ＥＦ−ハンドドメインを含む新規のファミリーメンバーを同定および
開発する明らかな必要性が存在する。構造的に関連しているが、このようなタン
パク質は、種々の細胞および組織型において多様なおよび多面的な機能を有し得
る。本発明の精製されたＥＦ−ハンドドメイン含有タンパク質は、細胞のシグナ
ル伝達およびタンパク質のプロセシングならびにその調節に関与するさらなる分
子の同定、特徴付けおよび精製のために有用な研究ツールとして有用である。さ
らに、ＥＦハンドドメインをコードする新規遺伝子の同定は、次に、異常な細胞
シグナル伝達およびタンパク質のプロセシングのような、広い範囲の状態の処置
および診断における適用を有する範囲の、核酸レベルおよびタンパク質レベルで
の誘導体、アゴニストおよびアンタゴニストの開発を可能にする。
【００１８】 （性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）） 黄体形成ホルモン（ＬＨ）および卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）は、まとめて、
性腺刺激ホルモンとして公知である。雌性において、ＦＳＨは、未成熟の卵を含
む卵胞の発達を誘導し、一方、ＬＨは、排卵を誘発する。同様に、雄性において
、ＬＨは、精巣がアンドロゲン（例えば、テストステロン）を分泌するのを誘導
し、そしてＦＳＨは、精子形成を促進する。
【００１９】 下垂体からの性腺刺激ホルモンの放出は、海馬からの性腺刺激ホルモン放出ホ
ルモン（ＧｎＲＨ）の放出によって制御される。ＧｎＲＨは、デカペプチドであ
り、その残基のうちの４つは現在までに同定され、そして配列が決定された全て
の種において完全に保存されている。
【００２０】 明らかに、新規ＧｎＲＨタンパク質の同定および／または特徴付けは、広範な
種類の疾患および／または障害（例えば、生殖腺の成長および発達に関与する疾
患および／または障害）における適用を潜在的に有する。
【００２１】 従って、新規のＧｎＲＨファミリーメンバーを同定および開発する明らかな必
要性が存在する。構造的に関連しているが、このようなタンパク質は、種々の細
胞および組織型において多様なおよび多面的な機能を有し得る。本発明の精製さ
れたＧｎＲＨタンパク質は、生殖腺の成長および発達、ならびにその調節に関与
するさらなる分子の同定、特徴付けおよび精製のために有用な研究ツールとして
有用である。さらに、新規ＧｎＲＨ遺伝子の同定は、次に、異常な生殖腺の成長
および発達のような広い範囲の状態の処置および診断における適用を有する範囲
の、核酸レベルおよびタンパク質レベルでの誘導体、アゴニストおよびアンタゴ
ニストの開発を可能にする。
【００２２】 （ＭＡＣ／パーフォリンファミリーメンバー） 細胞膜傷害複合体（ＭＡＣ）は、疾患にかかった細胞または順応しない細胞を
除去するために利用される、経時的に活性化される補体系の膜結合複合体の１つ
である。この系の下において、活性化されたＣ５ｂは、経時的にＣ６およびＣ７
に結合し、これらが細胞膜に挿入される。次いで、この複合体は、Ｃ８の１分子
に結合し、その後Ｃ９の１〜１８分子に結合し、これらが重合化して膜貫通チャ
ネルを形成する。これらの膜貫通チャネルは、膜を貫通し、細胞の透過性を増加
させる。これらの膜貫通チャネルは、細胞内の小分子が、培地と交換するのを可
能にする。したがって、水は、浸透圧的に細胞内に引き込まれ、最終的には細胞
のバーストを生じる。
【００２３】 同様に、パーフォリンは、細胞傷害性Ｔ細胞によって生成される分子である。
カルシウムの存在下で、パーフォリンは、膜貫通チャネルに重合化して、非特異
的な様式において種々の標的細胞を可溶化し得る。
【００２４】 明らかに、新規のＭＡＣ／パーフォリンファミリーメンバータンパク質の同定
および／または特徴づけは、広範な種々の疾患および／または障害（例えば、補
体媒介性の細胞死を含む疾患および／または障害）における適用を潜在的に有す
る。
【００２５】 したがって、新規なＭＡＣ／パーフォリンファミリーメンバーを同定し、かつ
特徴づける、明確な必要性が存在する。構造的に関連するが、このようなタンパ
ク質は、種々の細胞および組織型において、多様かつ多面性の機能を保有し得る
。本発明の精製されたＭＡＣ／パーフォリンファミリーメンバータンパク質は、
補体媒介性の細胞死に関与するさらなる分子の同定、特徴づけ、および精製に有
用である検索ツールとして有用である。さらに、新しいＭＡＣ／パーフォリン遺
伝子の同定により、核酸およびタンパク質のレベルで、ある範囲の誘導体、アゴ
ニストおよびアンタゴニストを開発することが可能になる。次にこれらは、補体
媒介性の細胞死のような広い範囲の状態の処置および診断において適用を有する
。
【００２６】 （膵臓ホルモン） 膵臓ホルモン（ＰＰ）は、長さ約８０アミノ酸のペプチドであり、膵臓のラン
ゲルハンス島およびにおいて生成され、その結果として分泌される。膵臓ホルモ
ンは、膵臓および胃腸機能の調節因子として機能することが考えられている。
【００２７】 膵臓ホルモンファミリータンパク質の代表的なメンバーは、神経ペプチドＹ、
ペプチドＹＹ、および皮膚ペプチドＹＹを含む。これらのタンパク質は、性腺刺
激ホルモン放出ホルモンの分泌制御、接食に関する障害、血管収縮作用、および
結腸の易動性、ならびに抗細菌活性および抗真菌活性のための治療剤として有用
であり得る。
【００２８】 明らかに、新規の膵臓ホルモンファミリーメンバータンパク質の同定および／
または特徴づけは、広範な種々の疾患および／または障害（例えば、膵臓および
胃腸機能に関する障害）における適用を潜在的に有する。
【００２９】 したがって、新規な膵臓ホルモンファミリーメンバーを同定し、かつ特徴づけ
る、明確な必要性が存在する。構造的に関連するが、このようなタンパク質は、
種々の細胞および組織型において、多様かつ多面性の機能を保有し得る。本発明
の精製された膵臓ホルモンファミリーメンバータンパク質は、膵臓機能および胃
腸機能の調節に関与するさらなる分子の同定、特徴づけ、および精製に有用であ
る検索ツールとして有用である。さらに、新しい膵臓ホルモン遺伝子の同定によ
り、核酸およびタンパク質のレベルで、ある範囲の誘導体、アゴニストおよびア
ンタゴニストを開発することが可能になる。次にこれらは、膵臓機能および胃腸
機能の調節のような広い範囲の状態の処置および診断において適用を有する。
【００３０】 （セリンカルボキシペプチダーゼ） カルボキシペプチダーゼは、ポリペプチドのＣ末端残基の加水分解を触媒する
。カルボキシペプチダーゼは、メタロカルボキシペプチダーゼまたはセリンカル
ボキシペプチダーゼのいずれかとして同定される。
【００３１】 セリンカルボキシペプチダーゼは、Ｃ末端からペプチドおよびペプチドアミド
を加水分解する能力を有し、そしてＣ末端のアルギニンまたはリジン残基の優先
的な放出をする。これらの細胞における位置は、通常細胞外または細胞内である
。セリンカルボキシペプチダーゼの触媒的活性は、ヒスチジン（自身は、セリン
に水素結合した）に水素結合したアスパラギン酸残基を含む電荷リレー系によっ
て提供される。
【００３２】 これらのカルボキシペプチダーゼ遺伝子のポリペプチドは、ホルモン／サイト
カインのプロセシングおよび活性化、消化、新脈管形成、腫瘍形成、血液凝固、
ならびに外来分子、ウイルスおよび細菌に対する防御に関する、ペプチダーゼ活
性の阻害に有用であり得る。
【００３３】 明らかに、新規のセリンカルボキシペプチダーゼファミリーメンバータンパク
質の同定および／または特徴づけは、広範な種々の疾患および／または障害（例
えば、広範な種々の生物学的系におけるペプチダーゼ活性に関する障害）におけ
る適用を潜在的に有する。
【００３４】 したがって、新規なセリンカルボキシペプチダーゼファミリーメンバーを同定
し、かつ特徴づける、明確な必要性が存在する。構造的に関連するが、このよう
なタンパク質は、種々の細胞および組織型において、多様かつ多面性の機能を保
有し得る。本発明の精製されたセリンカルボキシペプチダーゼファミリーメンバ
ータンパク質は、広範囲の種々の生物系におけるペプチダーゼ活性に関与するさ
らなる分子の同定、特徴づけ、および精製に有用である検索ツールとして有用で
ある。さらに、新しいセリンカルボキシペプチダーゼ遺伝子の同定により、核酸
およびタンパク質のレベルで、ある範囲の誘導体、アゴニストおよびアンタゴニ
ストを開発することが可能になる。次にこれらは、ペプチダーゼ活性の疾患およ
び／または障害のような広い範囲の状態の処置および診断において適用を有する
。
【００３５】 （発明の要旨） 本発明は、配列表に開示され、そして／または表１に記載されかつＡｍｅｒｉ
ｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に寄託
されたヒトｃＤＮＡプラスミドに含まれる、ポリヌクレオチド配列を含むか、ま
たは代替的に、その配列からなる単離された核酸分子を含む。これらの核酸分子
のフラグメント、改変体、および誘導体もまた、本発明に含まれる。本発明はま
た、ヒトポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むか、または代替的に
それらのポリヌクレオチドからなる単離された核酸分子を含む。本発明は、これ
らのポリヌクレオチドによってコードされるヒトポリペプチドをさらに含む。配
列表に開示され、そして／または表１に記載されかつＡＴＣＣに寄託されたヒト
ｃＤＮＡプラスミドによってコードされるようなヒトポリペプチドを含むか、ま
たは代替的にそれらのポリペプチドからなるアミノ酸配列が、さらに提供される
。これらのポリペプチドに結合する抗体もまた、本発明に含まれる。これらのア
ミノ酸配列のポリペプチドのフラグメント、改変体、および誘導体もまた、これ
らのポリペプチドおよびこれらのポリペプチドを結合する抗体をコードするポリ
ヌクレオチドと同様に、本発明に含まれる。
【００３６】 （詳細な説明） （表） 表１は、本願に関連してＡＴＣＣで成された寄託物のＡＴＣＣ寄託物、寄託日
、およびＡＴＣＣ受託番号を要約する。表１はさらに、ｃＤＮＡクローンＩＤ、
ｃＤＮＡクローンＩＤに含まれるベクターの種類、ヌクレオチド配列ＩＤ番号、
開示される配列に含まれるヌクレオチド、開示された配列の開始コドンの５’ヌ
クレオチドの位置、アミノ酸配列ＩＤ番号、および開示された配列によってコー
ドされるＯＲＦの最後のアミノ酸を含む、以下の各「遺伝子番号」に関する情報
を要約する。
【００３７】 表２は、公開されたＥＳＴを示し、それらの少なくとも１、２、３、４、５、
１０、またはそれ以上の任意の１以上のこれらの公開されたＥＳＴ配列は、必要
に応じて本発明の特定の実施形態から除外される。
【００３８】 表３は、表１に開示されるクローンに対応するポリヌクレオチドの発現プロフ
ィールを要約する。第１列は、表１に開示される各コンティグ配列に関連するｃ
ＤＮＡクローンについて、特有のクローン識別子「クローンＩＤ番号Ｖ」を提供
する。列２、「ライブラリーコード」は、本発明のポリヌクレオチドを発現する
組織および／または細胞株ライブラリーの発現プロフィールを示す。列２の各ラ
イブラリーコードは、表４において提供されるライブラリーコードおよびライブ
ラリーの説明に対応する組織／細胞供給源の識別子を表す。これらのポリヌクレ
オチドの発現は、試験される他の組織および／または細胞ライブラリーにおいて
観察されなかった。当業者は、本発明の対応するポリヌクレオチドの顕著な発現
パターンを示す組織を同定するためか、または顕著なおよび／もしくは特異的な
組織の発現を示すポリヌクレオチドを同定するためのこの情報を慣用的に使用し
得る。
【００３９】 表４、列１は、表３、列２に開示されるＬｉｂｒａｒｙ Ｃｏｄｅを提供する
。列２は、対応するライブラリーが由来する組織または細胞供給源の説明を提供
する。疾患組織に対応するライブラリーコードは、単語「疾患」として３列目に
示される。列３の単語「疾患」の使用は、限定されない。ライブラリーの組織源
は、特定（例えば、新生物）であり得るか、または疾患に関連し得る（例えば、
疾患器官の正常部位に由来する組織サンプル）。さらに、「疾患」の名称を欠い
ているライブラリーは、疾患状態または障害に直接的または非直接的に関与する
供給源になお由来し得、したがってこの疾患状態または障害におけるさらなる有
用性を有し得る。
【００４０】 （定義） 以下の定義は、本明細書全体を通して使用される特定の用語の理解を容易にす
るために提供される。
【００４１】 本発明において、「単離された（単離した）」とは、その本来の環境（例えば
、それが天然に存在する場合は天然の環境）から取り出された物質をいい、した
がって、その天然の状態から「人間の手によって」変更されている。例えば、単
離されたポリヌクレオチドは、ベクターまたは組成物の一部であり得るか、ある
いは細胞中に含まれ得、そしてなお「単離されている」状態であり得る。なぜな
ら、そのベクター、組成物、または特定の細胞は、そのポリヌクレオチドの本来
の環境ではないからである。用語「単離された」は、ゲノムライブラリーまたは
ｃＤＮＡライブラリー、細胞全体の総ＲＮＡ調製物またはｍＲＮＡ調製物、ゲノ
ムＤＮＡ調製物（電気泳動により分離され、そしてブロットへトランスファーさ
れたものを含む）、剪断された細胞全体のゲノムＤＮＡ調製物をも、本発明のポ
リヌクレオチド／配列の識別する特徴がないことが当該分野で示されている他の
組成物をもいわない。
【００４２】 本明細書中で使用される場合、「ポリヌクレオチド」とは、（表１の第５列に
記載にされる）配列番号Ｘに含まれる核酸配列を有する分子、または（表１の第
２列に記載され、そしてＡＴＣＣ受託番号ＺでＡＴＣＣに寄託されたプラスミド
のプール内に含まれる）ｃＤＮＡプラスミドＶをいう。例えば、このポリヌクレ
オチドは、５’および３’非翻訳配列、天然または人工のシグナル配列を伴うか
または伴わないコード領域、タンパク質コード領域、ならびにこの核酸配列のフ
ラグメント、エピトープ、ドメイン、および改変体を含む、全長ｃＤＮＡ配列の
ヌクレオチド配列を含み得る。さらに、本明細書で使用される場合、「ポリペプ
チド」とは、広く定義される本発明のポリヌクレオチド（ｃＤＮＡに対応する配
列のポリＡテールの翻訳から生じるポリフェニルアラニンペプチド配列もポリリ
ジンペプチド配列も明らかに除く）によってコードされるアミノ酸配列を有する
分子をいう。
【００４３】 本発明では、配列番号Ｘの配列を含む代表的プラスミドが、Ａｍｅｒｉｃａｎ
Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（「ＡＴＣＣ」）に寄託さ
れ、そして／また表１に記載されている。表１に示すように、各プラスミドは、
ｃＤＮＡクローンＩＤ（識別番号）およびＡＴＣＣ受託番号（ＡＴＣＣ受託番号
Ｚ）によって同定される。単一の寄託物としてプールし、そして寄託したプラス
ミドは、同じＡＴＣＣ受託番号を有する。ＡＴＣＣは、１０８０１ Ｕｎｉｖｅ
ｒｓｉｔｙ Ｂｏｕｌｅｖａｒｄ，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖｉｒｇｉｎｉａ ２０
１１０−２２０９，ＵＳＡに位置する。ＡＴＣＣ寄託は、特許手続上の微生物の
寄託の国際的承認に関するブダペスト条約の条項に拠って行われた。
【００４４】 本発明の「ポリヌクレオチド」はまた、ストリンジェントなハイブリダイゼー
ション条件下で、配列番号Ｘに含まれる配列、またはその相補体（例えば、本明
細書中に記載されるポリヌクレオチドフラグメントのうちのいずれか１つ、２つ
、３つ、４つ以上の相補体）、および／またはｃＤＮＡプラスミドＶに含まれる
配列（例えば、本明細書中に記載されるポリヌクレオチドフラグメントのうちの
いずれか１つ、２つ、３つ、４つ以上の相補体）にハイブリダイズし得るポリヌ
クレオチドを含む。「ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件」とは、
５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ（７５０ｍＭ ＮａＣｌ、７５ｍＭクエン酸三
ナトリウム）、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ７．６）、５×デンハルト溶液
、１０％デキストラン硫酸、および２０μｇ／ｍｌ変性剪断サケ精子ＤＮＡを含
む溶液中での４２℃での一晩のインキュベーション、続いて０．１×ＳＳＣ中で
約６５℃にてフィルターを洗浄することをいう。
【００４５】 本発明の「ポリヌクレオチド」には、より低いストリンジェンシーのハイブリ
ダイゼーション条件で本発明のポリヌクレオチドにハイブリダイズする核酸分子
もまた含まれる。ハイブリダイゼーションのストリンジェンシーおよびシグナル
検出の変更は、主として、ホルムアミド濃度（より低い百分率のホルムアミドが
、低下したストリンジェンシーを生じる）；塩条件、または温度の操作を通じて
達成される。例えば、より低いストリンジェンシー条件は、６×ＳＳＰＥ（２０
×ＳＳＰＥ＝３Ｍ ＮａＣｌ；０．２Ｍ ＮａＨ２ＰＯ４；０．０２Ｍ ＥＤＴ
Ａ、ｐＨ７．４）、０．５％ ＳＤＳ、３０％ホルムアミド、１００μｇ／ｍｌ
サケ精子ブロッキングＤＮＡを含む溶液中、３７℃で一晩のインキュベーション
；次いで１×ＳＳＰＥ、０．１％ ＳＤＳを用いた５０℃での洗浄を含む。さら
に、さらにより低いストリンジェンシーを達成するために、ストリンジェントな
ハイブリダイゼーション後に行われる洗浄は、より高い塩濃度（例えば、５×Ｓ
ＳＣ）で行われ得る。
【００４６】 上記の条件におけるバリエーションが、ハイブリダイゼーション実験において
バックグラウンドを抑制するために使用される代替的なブロッキング試薬の含有
および／または置換によって達成され得ることに留意のこと。代表的なブロッキ
ング試薬としては、デンハルト試薬、ＢＬＯＴＴＯ、ヘパリン、変性サケ精子Ｄ
ＮＡ、および市販の特許処方物が挙げられる。特異的ブロッキング試薬の含有は
、適合性の問題に起因して、上記のハイブリダイゼーション条件の改変を必要と
し得る。
【００４７】 もちろん、ポリＡ＋配列（例えば、配列表に示されるｃＤＮＡの任意の３’末
端ポリＡ＋領域（ｔｒａｃｔ））に、またはＴ（もしくはＵ）残基の相補的スト
レッチにのみハイブリダイズするポリヌクレオチドは、「ポリヌクレオチド」の
定義に包含されない。なぜなら、このようなポリヌクレオチドは、ポリ（Ａ）ス
トレッチまたはその相補体を含む任意の核酸分子（例えば、プライマーとしてオ
リゴｄＴを用いて生成される、事実上任意の二本鎖ｃＤＮＡクローン）にハイブ
リダイズするからである。
【００４８】 本発明のポリヌクレオチドは、任意のポリリボヌクレオチドまたはポリデオキ
シリボヌクレオチドから構成され得、これは、非改変ＲＮＡもしくは非改変ＤＮ
Ａまたは改変ＲＮＡもしくは改変ＤＮＡであり得る。例えば、ポリヌクレオチド
は、一本鎖および二本鎖のＤＮＡ、一本鎖領域と二本鎖領域との混合物であるＤ
ＮＡ、一本鎖および二本鎖のＲＮＡ、ならびに一本鎖領域と二本鎖領域との混合
物であるＲＮＡ、一本鎖、またはより代表的には二本鎖もしくは一本鎖領域と二
本鎖領域との混合物であり得るＤＮＡおよびＲＮＡを含むハイブリッド分子から
構成され得る。さらに、このポリヌクレオチドは、ＲＮＡもしくはＤＮＡまたは
ＲＮＡおよびＤＮＡの両方を含む、三本鎖領域から構成され得る。ポリヌクレオ
チドはまた、安定性のために、または他の理由のために改変された、１つ以上の
改変された塩基またはＤＮＡ骨格もしくはＲＮＡ骨格を含み得る。「改変された
」塩基としては、例えば、トリチル化された塩基およびイノシンのような普通で
ない塩基が挙げられる。種々の改変が、ＤＮＡおよびＲＮＡに対して行われ得；
したがって、「ポリヌクレオチド」は、化学的、酵素的、または代謝的に改変さ
れた形態を含む。
【００４９】 特定の実施形態においては、本発明のポリヌクレオチドは、少なくとも１５の
、少なくとも３０の、少なくとも５０の、少なくとも１００の、少なくとも１２
５の、少なくとも５００の、または少なくとも１０００の連続するヌクレオチド
であるが、３００ｋｂ以下、２００ｋｂ以下、１００ｋｂ以下、５０ｋｂ以下、
１５ｋｂ以下、１０ｋｂ以下、７．５ｋｂ以下、５ｋｂ以下、２．５ｋｂ以下、
２．０ｋｂ以下、または１ｋｂ以下の長さである。さらなる実施形態においては
、本発明のポリヌクレオチドは、本明細書中に開示されたコード配列の一部を含
むが、任意のイントロンの全てまたは一部を含むわけではない。別の実施形態に
おいては、コード配列を含むポリヌクレオチドは、ゲノムの隣接遺伝子のコード
配列（すなわち、ゲノムにおける目的の遺伝子に対する５’または３’）を含ま
ない。他の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、１０００、５００
、２５０、１００、５０、２５、２０、１５、１０、５、４、３、２または１以
上のゲノム隣接遺伝子のコード配列を含まない。
【００５０】 「配列番号Ｘ」とは、表１の５列目に記載されるポリヌクレオチド配列をいう
が、「配列番号Ｙ」とは、表１の１０列目に記載されるポリペプチド配列をいう
。配列番号Ｘは、表１の６列目において特定される整数によって同定される。配
列番号Ｙのポリペプチド配列は、配列番号Ｘのポリヌクレオチドによってコード
される翻訳されたオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）である。ポリヌクレ
オチド配列は、配列リストに示され、直ちに全てのポリペプチド配列が続く。従
って、配列番号２のポリヌクレオチド配列に対応するポリペプチド配列は、配列
リストに示される第１のポリペプチド配列である。第２のポリペプチド配列は、
配列番号３などとして示されるポリヌクレオチド配列に対応する。
【００５１】 本発明のポリペプチドは、ペプチド結合または改変されたペプチド結合、すな
わち、ペプチドアイソスター（ｉｓｏｓｔｅｒｅ）によって互いに連結したアミ
ノ酸から構成され得、そして遺伝子がコードする２０個のアミノ酸以外のアミノ
酸を含み得る。ポリペプチドは、翻訳後プロセシングのような天然のプロセスに
よって、または当該技術分野で周知の化学的改変技術のいずれかによって、改変
され得る。このような改変は、基本テキスト、およびより詳細な研究論文、なら
びに多くの研究文献に十分に記載される。改変は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖
、およびアミノ末端またはカルボキシル末端、を含むポリペプチドのどこにでも
生じ得る。同じ型の改変が、所定のポリペプチド中のいくつかの部位で、同じま
たは種々の程度で存在し得ることが理解される。また、所定のポリペプチドは多
くの型の改変を含み得る。ポリペプチドは、例えば、ユビキチン化の結果として
分枝状であり得、そしてそれらのポリペプチドは、分枝を含むかまたは含まない
、環状であり得る。環状、分枝状および分枝した環状のポリペプチドは、天然の
翻訳後プロセスから生じ得るか、または合成方法によって作製され得る。改変と
しては、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−リボシル化、アミド化、フラビンの共
有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の共有結
合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホスファチジルイノシトール（ｐｈｏｓ
ｐｈｏｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ）の共有結合、架橋、環化、ジスルフィド結
合形成、脱メチル化、共有結合架橋の形成、システインの形成、ピログルタミン
酸の形成、ホルミル化、γ−カルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形
成、水酸化、ヨウ素化、メチル化、ミリストイル化、酸化、ペグ化（ｐｅｇｙｌ
ａｔｉｏｎ）、タンパク質分解プロセシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化
、セレノイル化、硫酸化、アルギニル化のようなタンパク質へのアミノ酸のトラ
ンスファーＲＮＡ媒介付加、およびユビキチン化が挙げられる。（例えば、ＰＲ
ＯＴＥＩＮＳ−ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ ＡＮＤ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＰＲＯＰＥ
ＲＴＩＥＳ、第２版、Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ、Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ
ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９９３）；ＰＯＳＴＴＲＡＮＳ
ＬＡＴＩＯＮＡＬ ＣＯＶＡＬＥＮＴ ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮ ＯＦ ＰＲ
ＯＴＥＩＮＳ、Ｂ．Ｃ．Ｊｏｈｎｓｏｎ編、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎ
ｅｗ Ｙｏｒｋ、１−１２頁（１９８３）；Ｓｅｉｆｔｅｒら、Ｍｅｔｈ Ｅｎ
ｚｙｍｏｌ．１８２：６２６−６４６（１９９０）；Ｒａｔｔａｎら、Ａｎｎ
ＮＹ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ６６３：４８−６２（１９９２）を参照のこと）。
【００５２】 本発明のポリペプチドは、任意の適切な様式で調製され得る。そのようなポリ
ペプチドとしては、単離された天然に存在するポリペプチド、組換え的に生成さ
れたポリペプチド、合成的に生成されたポリペプチド、またはこれらの方法の組
み合わせによって生成されたポリペプチドが挙げられる。このようなポリペプチ
ドを調製するための手段は、当該分野において十分に理解されている。
【００５３】 ポリペプチドは、分泌タンパク質の形態（成熟形態を含む）であり得るか、ま
たはより大きなタンパク質（例えば、融合タンパク質）の一部であり得る（下記
を参照のこと）。分泌配列またはリーダー配列、プロ配列、精製において補助す
る配列（例えば、多重のヒスチジン残基）、または組換え生成の間の安定性のた
めのさらなる配列を含むさらなるアミノ酸配列を含むことは、しばしば有利であ
る。
【００５４】 本発明のポリペプチドは、好ましくは単離された形態で提供され、そして好ま
しくは実質的に精製される。ポリペプチドの組換え的に生成されたバージョン（
分泌ポリペプチドを含む）は、本明細書中で記載される技術か、または当該分野
で別の公知の技術を使用して（例えば、ＳｍｉｔｈおよびＪｏｈｎｓｏｎ（Ｇｅ
ｎｅ ６７：３１−４０（１９８８））により記載される１工程方法によって）
、実質的に精製され得る。本発明のポリペプチドはまた、本明細書中で記載され
る技術、または当該分野における他の公知の方法を使用して（例えば、当該分野
で周知の方法で本発明のポリペプチドに対して惹起された本発明の抗体を使用す
ることによって）、天然の供給源、合成的な供給源または組換え供給源から精製
され得る。
【００５５】 「機能的活性」を示すポリペプチドとは、本発明の全長（完全）タンパク質と
関連した１つ以上の公知の機能的活性を示し得るポリペプチドを意味する。この
ような機能的活性としては、生物学的活性、抗原性［抗ポリペプチド抗体に結合
する（または結合することについて、ポリペプチドと競合する）能力］、免疫原
性（本発明の特異的ポリペプチドに結合する抗体を生成する能力）、本発明のポ
リペプチドと多量体を形成する能力、およびポリペプチドについてのレセプター
またはリガンドに結合する能力が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５６】 「機能的活性を有するポリペプチド」とは、特定のアッセイ（例えば、生物学
的アッセイのような）で測定した場合、用量依存性を伴っても伴わなくても、本
発明のポリペプチド（成熟形態を含む）の活性と類似であるが、必ずしも同一で
はない活性を示すポリペプチドをいう。用量依存性が存在する場合、ポリペプチ
ドの用量依存性と同一である必要はないが、むしろ本発明のポリペプチドと比較
した場合に、所定の活性における用量依存性に実質的に類似する（すなわち、候
補ポリペプチドは、本発明のポリペプチドと比較して、より大きな活性を示すか
、または約１／２５以上、そして好ましくは約１／１０以上の活性、そして最も
好ましくは約１／３以上の活性を示す）。
【００５７】 ポリペプチド、ならびにそれらのフラグメント、改変体、誘導体、およびアナ
ログの機能的活性は、種々の方法によってアッセイされ得る。
【００５８】 例えば、全長ポリペプチドの抗体への結合について本発明の全長ポリペプチド
に結合するか、またはそれと競合する能力についてアッセイする、１つの実施形
態では、当該分野で公知の種々の免疫アッセイが、用いられ得る。このようなア
ッセイとしては、放射免疫アッセイ、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）
、「サンドイッチ」免疫アッセイ、免疫放射分析アッセイ、ゲル拡散沈降反応、
免疫拡散アッセイ、インサイチュ免疫アッセイ（例えば、コロイド金、酵素また
は放射性同位体標識を用いる）、ウェスタンブロット、沈降反応、凝集アッセイ
（例えば、ゲル凝集アッセイ、血球凝集アッセイ）、補体結合アッセイ、免疫蛍
光アッセイ、プロテインＡアッセイ、および免疫電気泳動アッセイなどのような
技術を用いる競合および非競合アッセイ系が挙げられるが、これらに限定されな
い。１つの実施形態では、抗体結合が、一次抗体上の標識を検出することによっ
て検出される。別の実施形態では、この一次抗体は、この一次抗体に対する二次
抗体または試薬の結合を検出することによって検出される。さらなる実施形態で
は、この二次抗体が標識される。多くの手段が、免疫アッセイにおける結合の検
出について当該分野で公知であり、そして本発明の範囲内である。
【００５９】 別の実施形態では、同定されたリガンド、または本発明のポリペプチドフラグ
メント、改変体、または誘導体が多量体化する能力が評価される場合、結合が、
例えば、還元および非還元ゲルクロマトグラフィー、タンパク質アフィニティー
クロマトグラフィー、ならびにアフィニティーブロッティングのような当該分野
で周知の手段によって、アッセイされ得る。一般には、Ｐｈｉｚｉｃｋｙ、Ｅ．
ら、１９９５、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．５９：９４−１２３を参照のこと
。別の実施形態では、その基質への本発明のポリペプチドの結合の生理学的相関
（シグナル伝達）がアッセイされ得る。
【００６０】 さらに、本明細書中に記載のアッセイ（実施例を参照のこと）および当該分野
で公知の他のアッセイは、本発明のポリペプチドならびにそれらのフラグメント
、改変体、誘導体、およびアナログが、ポリペプチドに関連した生物学的活性を
（インビトロまたはインビボのいずれかで）惹起する能力を測定するために、慣
用的に適用され得る。他の方法は、当業者に公知であり、そして本発明の範囲内
である。
【００６１】 （本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド） （遺伝子番号１によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、ＳＥＺ−６を含む、マウスおよびヒトてんかん発作
関連（ｓｅｉｚｕｒｅ−ｒｅｌａｔｅｄ）タンパク質（Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号
ＡＪ２４５８２１およびＢＡＡ０６１６７を参照のこと）と配列相同性を共有す
る。この遺伝子はまた、細胞膜攻撃（ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｔｔａｃｋ）複合体
（ＭＡＣ）／タンパク質のパーフォリンファミリーのメンバーと相同性を共有す
る。この遺伝子は、細胞溶解および細胞死を導く、標的細胞のリン脂質二重層を
崩壊させる膜内外チャネルの作製に関与すると考えられる。このファミリーの代
表的メンバーとしては、ＭＡＣおよびパーフォリンタンパク質が挙げられる。開
示されるｃＤＮＡをコードする遺伝子は、染色体１６の位置に存在すると考えら
れる。従って、本発明に関連するポリヌクレオチドは、染色体１６の連鎖分析に
おけるマーカーとして有用である。
【００６２】 本発明の好ましいポリペプチドは、以下の残基として配列番号１７に示される
１、２、３、４、５またはそれ以上の免疫原性エピトープを含有するか、あるい
はそれらからなる：Ｇｌｎ−２０〜Ｇｌｙ−２８、Ｐｒｏ−４４〜Ｇｌｙ−５０
、Ｇｌｙ−８４〜Ｇｌｕ−９２、Ｓｅｒ−１７１〜Ｇｌｕ−１７８、Ｔｈｒ−２
２６〜Ｇｌｙ−２３５、Ｐｒｏ−２６２〜Ｔｈｒ−２７０、Ｐｒｏ−２９２〜Ａ
ｓｐ−３０３、Ａｓｐ−３３５〜Ｓｅｒ−３４０、Ａｒｇ−３４８〜Ｌｅｕ−３
５６、Ｐｒｏ−３７０〜Ｇｌｙ−３７７、Ｇｌｕ−３８８〜Ｔｒｐ−４０５、Ｇ
ｌｙ−４６５〜Ｓｅｒ−４７０、Ｔｙｒ−４９９〜Ａｒｇ−５１１、Ｇｌｙ−５
２６〜Ｔｈｒ−５３４、Ｐｒｏ−５６６〜Ｇｌｎ−５７５、Ｇｌｎ−５８３〜Ｇ
ｌｙ−５９３、Ｇｌｙ−６３１〜Ｓｅｒ−６３６、Ａｓｐ−６４３〜Ｌｅｕ−６
４８、およびＡｌａ−６５１〜Ｇｌｕ−６５６。これらのポリペプチドをコード
するポリヌクレオチドもまた、本発明によって包含され、これらのポリペプチド
の１つ以上を結合する抗体もまた包含される。さらに、これらのポリペプチドの
フラグメントおよび改変体（例えば、本明細書中で記載されるようなフラグメン
ト、これらのポリペプチド、およびストリンジェントな条件下でこれらのポリペ
プチドをコードするポリヌクレオチド、またはその相補体にハイブリダイズする
ポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチドに少なくとも８０％、８５
％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なポリペプチ
ド）は、本発明によって包含される。本発明のこれらのフラグメントおよび改変
体を結合する抗体はまた、本発明によって含まれる。これらのフラグメントおよ
び改変体をコードするポリヌクレオチドはまた、本発明によって含まれる。
【００６３】 この遺伝子は、乳児組織および成体脳組織において発現される。
【００６４】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、生
物学的サンプル中に存在する神経組織型または神経細胞型の示差的同定のため、
ならびに以下：神経系の疾患および／または障害、特に、てんかん発作に関連す
る疾患および／または障害を含むが、これらに限定されない疾患および状態の診
断のための試薬として有用である。同様に、ポリペプチドおよびこれらのポリペ
プチドに対する抗体は、組織型または細胞型の示差的同定のための免疫学的プロ
ーブを提供することに有用である。上記組織または細胞、特に中枢神経系の多く
の障害について、標準的な遺伝子発現レベル、すなわち、障害を有さない個体か
らの健常組織または体液中の発現レベルに対して、有意により高いかまたはより
低いレベルのこの遺伝子の発現が、このような障害を有する個体から採取された
、特定の組織型または細胞型（例えば、神経組織、癌性組織および創傷組織）ま
たは体液（例えば、リンパ、血清、血漿、尿、滑液および髄液）あるいは別の組
織またはサンプル中で慣用的に検出され得る。
【００６５】 乳児および成体脳組織における組織分布、ならびにＳＥＺ−６てんかん発作関
連タンパク質に対する相同性は、この遺伝子に対応するポリヌクレオチド、翻訳
産物および抗体が、神経系、特にてんかん発作に関連する疾患および／または障
害、ならびに／あるいは題目「神経活性および神経学的疾患」の節において本明
細書中に記載されるような疾患および／または障害の診断、予後診断、予防およ
び／または処置のために有用であることを示す。この組織分布は、このクローン
のタンパク質産物が、神経変性疾患状態および行動障害、例えば、アルツハイマ
ー病、パーキンソン病、ハンチントン病、ツレット症候群、精神分裂病、躁病、
痴呆、妄想症、強迫性障害、恐慌性障害、学習障害、ＡＬＳ、精神病、自閉症、
および行動変化（栄養補給、睡眠パターン、平衡、および知覚の障害を含む）の
検出および／または処置に有用であることをさらに示唆する。さらに、この遺伝
子または遺伝子産物はまた、胚の発生と関連する発生障害、または性関連障害の
処置および／または検出において役割を果たし得る。
【００６６】 この遺伝子の翻訳産物、およびこの遺伝子の翻訳産物に対して指向される抗体
は、上記に列挙された腫瘍マーカーおよび／または免疫療法の標的としての有用
性を示し得る。
【００６７】 （遺伝子番号２によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、インターフェロン結合に関与するレセプターと考え
られている、ヒトカルシニューリン−βタンパク質（国際公開番号ＷＯ／９８３
１７９６を参照のこと）と配列相同性を共有する。この遺伝子はまた、タンパク
質のＥｆ−ハンド（ｈａｎｄ）ファミリーのメンバーと相同性を共有する。タン
パク質のこのファミリーは、カルシウム結合に関与すると考えられている。タン
パク質のこのファミリーの代表的なメンバーとしては、例えば、エクオリン、α
アクチニン、植物由来のカルシウム依存的プロテインキナーゼ、オステオネクチ
ン、およびリカバリン（ｒｅｃｏｖｅｒｉｎ）が挙げられる。
【００６８】 開示されたｃＤＮＡをコードする遺伝子は、第５染色体上に存在すると考えら
れる。従って、本発明に関するポリヌクレオチドは、第５染色体の連鎖分析にお
けるマーカーとして有用である。
【００６９】 本発明の好ましいポリペプチドは、配列番号１８において残基：Ｌｙｓ−４７
〜Ａｒｇ−６３，Ａｓｐ−１６７〜Ｇｌｙ−１７２，およびＳｅｒ−２２１〜Ａ
ｓｐ−２３７として示される免疫原性エピトープの１、２、または３全てを含む
か、またはこれらからなる。これらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチ
ドもまた、これらの１つ以上のポリペプチドに結合する抗体と同様に、本発明に
よって含まれる。さらに、これらのポリペプチドのフラグメントおよび改変体（
例えば、本明細書中に記載のフラグメント、これらのポリペプチドおよびストリ
ンジェントな条件下でこれらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドにハ
イブリダイズするポリヌクレオチド、またはそれらの相補体によってコードされ
るポリペプチドに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、
９７％、９８％、または９９％同一であるポリペプチド）は、本発明によって含
まれる。本発明のこれらのフラグメントおよび改変体に結合する抗体もまた、本
発明によって包含される。これらのフラグメントおよび改変体をコードするポリ
ヌクレオチドはまた、本発明によって包含される。
【００７０】 この遺伝子は、乳児および成人の脳組織、胎児の心臓組織および肺組織、なら
びに活性化されたＴ細胞および好中球において発現する。
【００７１】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、生
物学的サンプル中に存在する組織または細胞型の差示的同定のため、ならびに以
下を含むがこれらに限定されない疾患および状態の診断のための試薬として有用
である：神経系、心血管系、肺系、および免疫系の疾患および／または障害。同
様に、ポリペプチドおよびこれらのポリペプチドに対する抗体は、組織または細
胞型の差示的同定のための免疫学的プローブの提供に有用である。上記組織また
は細胞、特に免疫系および神経系の多くの障害に関して、標準の遺伝子発現レベ
ル（すなわち、障害を有さない個体由来の健常組織または体液中の発現レベル）
に対して有意に高いまたは低いレベルのこの遺伝子の発現が、このような障害を
有する個体から採取された特定の組織または細胞型（例えば、神経組織、心臓血
管組織、肺組織、免疫組織、癌性組織および創傷組織）または体液（例えば、リ
ンパ、血清、血漿、尿、滑液もしくは髄液）あるいは別の組織またはサンプル中
で慣用的に検出され得る。
【００７２】 免疫系組織、胎児の心臓組織および肺組織、および神経系組織における組織分
布、ならびにヒトカルシニューリン−βタンパク質に対する相同性は、この遺伝
子に対応するポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）が、免疫系、
心血管系、肺系および神経系の疾患および／または障害の診断、予後診断、予防
および／または処置に有用であることを示す。
【００７３】 この遺伝子の翻訳産物は、サイトカイン生産、抗原提示、または癌の処置にお
ける有用性をまた示し得る他のプロセスの調節に（例えば、免疫応答をブースト
することにより）関与し得る。さらに、本発明の発明の組成物はまた、免疫学的
障害（関節炎、喘息、ＡＩＤＳのような免疫不全疾患、白血病、慢性関節リウマ
チ、炎症性腸疾患、敗血症、挫瘡、乾癬、および／または節の表題「免疫活性」
で本明細書中に記載される免疫学的障害を含む）のための薬剤として使用され得
る。
【００７４】 さらに、この遺伝子の翻訳産物は、種々の血液系列の幹細胞および方向付けら
れた前駆体の拡大において、ならびに種々の細胞型の分化および／または増殖に
おいて商業的有用性を有し得る。
【００７５】 あるいは、この遺伝子に対応する、ヌクレオチド、翻訳産物および抗体は、以
下のような神経変性疾患状態および行動障害の検出／処置に有用である：アルツ
ハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、ツレット症候群、精神分裂病、
躁病、痴呆、偏執症、強迫性障害、恐慌性障害、学習障害、ＡＬＳ、精神病、自
閉、および行動変化（栄養補給、睡眠パターン、平衡、および知覚の障害を含む
）。さらに、この遺伝子または遺伝子産物はまた、胚発生に関連する発達障害ま
たは伴性障害の処置および／または検出において役割を果たし得る。
【００７６】 この遺伝子の翻訳産物ならびにこの遺伝子の翻訳産物に対する抗体は、上記に
挙げられた組織に対する腫瘍マーカーおよび／または免疫治療の標的として有用
性を示し得る。
【００７７】 （遺伝子番号３によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、ヒトトラベキュリン（ｔｒａｂｅｃｕｌｉｎ）α（
マウス微小管−アクチン架橋因子のオルトログ）（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＣＡ
Ｃ１５９２０およびＡＦ１５０７５５を参照のこと）と配列相同性を共有する。
【００７８】 好ましい実施形態として、ＥＦ−ハンド（ｈａｎｄ）カルシウム結合ドメイン
（これは、ＰｒｏＳｉｔｅ分析ツール（Ｓｗｉｓｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ
Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ）を使用して同定された）が本発明に含まれる
。これらのＥＦ−ハンド（ｈａｎｄ）カルシウム結合ドメインを検出するために
、以下のコンセンサス配列が開発された：Ｄ−ｘ−［ＤＮＳ］−｛ＩＬＶＦＹＷ
｝−［ＤＥＮＳＴＧ］−［ＤＮＱＧＨＲＫ］−｛ＧＰ｝−［ＬＩＶＭＣ］−［Ｄ
ＥＮＱＳＴＡＧＣ］−ｘ（２）−［ＤＥ］−［ＬＩＶＭＦＹＷ］。
【００７９】 本発明の発明のさらに好ましいポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を含む：
ＤＫＤＱＤＧＫＩＴＲＱＥＦ（配列番号３２）および／またはＤＲＤＧＤＧＹＩ
ＤＹＹＥＦ（配列番号３３）。これらのポリペプチドをコードするポリヌクレオ
チドもまた、これらのポリペプチドの１つ以上を結合する抗体と同様に、本発明
の発明によって含まれる。さらに、これらのポリペプチドのフラグメントおよび
改変体（例えば、本明細書に記載のフラグメント、これらのポリペプチドおよび
ストリンジェントな条件下でこれらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチ
ドにハイブリダイズするポリヌクレオチド、またはそれらの相補体によってコー
ドされるポリペプチドに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９
６％、９７％、９８％、または９９％同一であるポリペプチド）は、本発明によ
って含まれる。本発明のこれらのフラグメントおよび改変体に結合する抗体もま
た、本発明によって包含される。これらのフラグメントおよび改変体をコードす
るポリヌクレオチドはまた、本発明によって包含される。
【００８０】 さらに好ましいのは、配列番号３２および配列番号３３、ならびに配列番号１
９の少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、５０、または７５のさらに
隣接するアミノ酸残基のＥＦ−ハンド（ｈａｎｄ）カルシウム結合ドメインを含
む。さらなる隣接するアミノ酸残基は、ＥＦ−ハンド（ｈａｎｄ）カルシウム結
合ドメインに対するＮ末端またはＣ末端であり得る。あるいは、さらなる隣接す
るアミノ酸残基は、ＥＦ−ハンド（ｈａｎｄ）カルシウム結合ドメインに対する
Ｎ末端およびＣ末端の両方であり得、ここでＮ末端およびＣ末端隣接アミノ酸残
基の総数は、特定の数に等しい。上記の同定されたアミノ酸ドメインは、タンパ
ク質のＥＦ−ハンド（ｈａｎｄ）ファミリーのメンバーに見出されるＥＦ−ハン
ド（ｈａｎｄ）カルシウム結合ドメインの特徴であり、さらに、本発明の配列は
、新規のＥＦ−ハンド（ｈａｎｄ）カルシウム結合ドメインを表す。この遺伝子
はまた、タンパク質のＥＦ−ハンド（ｈａｎｄ）ファミリーのメンバーと相同性
を共有する。カルシウム結合タンパク質のこのファミリは、カルシウム結合に関
与していると考えられている。タンパク質のこのファミリーの代表的なメンバー
としては、例えば、エクオリン、αアクチニン、植物由来のカルシウム依存的プ
ロテインキナーゼ、オステオネクチン、およびリカバリンが挙げられる。
【００８１】 上記のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドはまた、これらの１つ以上
のポリペプチドに結合する抗体と同様に、本発明によって含まれる。さらに、こ
れらのポリペプチドのフラグメントおよび改変体（例えば、本明細書中に記載の
フラグメント、これらのポリペプチドおよびストリンジェントな条件下でこれら
のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドにハイブリダイズするポリヌクレ
オチド、またはそれらの相補体によってコードされるポリペプチドに対して少な
くとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９
％同一であるポリペプチド）は、本発明によって含まれる。本発明のこれらのフ
ラグメントおよび改変体に結合する抗体もまた、本発明によって包含される。こ
れらのフラグメントおよび改変体をコードするポリヌクレオチドはまた、本発明
によって包含される。
【００８２】 本発明のさらなる好ましいポリヌクレオチドは、配列番号１９に残基：Ａｒｇ
−３３〜Ａｒｇ−４４、Ａｓｐ−７１〜Ｔｙｒ−７７、Ｐｒｏ−８９〜Ａｓｐ−
９９、Ｇｌｎ−１２４〜Ｌｙｓ−１２９、Ｇｌｎ−１３７〜Ｇｌｎ−１４３、Ａ
ｓｐ−１７３〜Ａｓｎ−１８２、Ｐｒｏ−２０４〜Ｔｈｒ−２２２、Ｐｈｅ−３
２０〜Ｇｌｙ−３３５、Ａｌａ−３３８〜Ｓｅｒ−３５１、およびＰｒｏ−３６
９〜Ａｒｇ−４０８として示されるような、１、２、３、４、５、またはそれ以
上の免疫原性エピトープを含むか、あるいはそれらからなる。これらのポリペプ
チドをコードするポリヌクレオチドはまた、これらの１つ以上のポリペプチドに
結合する抗体と同様に、本発明によって含まれる。さらに、これらのポリペプチ
ドのフラグメントおよび改変体（例えば、本明細書中に記載のフラグメント、こ
れらのポリペプチドおよびストリンジェントな条件下でこれらのポリペプチドを
コードするポリヌクレオチド、またはそれらの相補体にハイブリダイズするポリ
ヌクレオチドによってコードされるポリペプチドに対して少なくとも８０％、８
５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一であるポリ
ペプチド）は、本発明によって含まれる。本発明のこれらのフラグメントおよび
改変体に結合する抗体もまた、本発明によって包含される。これらのフラグメン
トおよび改変体をコードするポリヌクレオチドはまた、本発明によって包含され
る。
【００８３】 この遺伝子は、胎児組織（例えば、胎児の肝臓組織／脾臓組織、乳児の脳組織
、胎児の肺組織、および胎児の心臓組織）において広範囲に発現される。
【００８４】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、生
物学的サンプル中に存在する胎児の組織または細胞型の差示的同定のため、なら
びに以下を含むがこれらに限定されない疾患および状態の診断のための試薬とし
て有用である：発生系の疾患および／または障害。同様に、ポリペプチドおよび
これらのポリペプチドに対する抗体は、組織または細胞型の差示的同定のための
免疫学的プローブの提供に有用である。上記組織または細胞、特に胎児の発生系
の多くの障害に関して、標準の遺伝子発現レベル（すなわち、障害を有さない個
体由来の健常組織または体液中の発現レベル）に対して有意に高いまたは低いレ
ベルのこの遺伝子の発現が、このような障害を有する個体から採取された特定の
組織または細胞型（例えば、発生組織、癌性組織、および創傷組織）または体液
（例えば、リンパ、血清、血漿、尿、滑液もしくは髄液）あるいは別の組織また
はサンプル中で慣用的に検出され得る。
【００８５】 胎児および発生系における組織分布は、この遺伝子に対応するポリヌクレオチ
ド、翻訳産物および抗体が、胎児および発生系を含む疾患および／または障害の
診断、予後診断、予防および／または処置に有用であることを示す。この遺伝子
の胎児組織における広範囲な発現は、発生中の胚または胎児の発生および／また
は生存において役割を果たし得ることを示す。
【００８６】 さらに、増殖細胞によって特徴付けられる胎児組織および他の細胞供給源内で
の発現は、この遺伝子が細胞分裂の調節に役割を果たすことを示し得、そしてこ
の遺伝子に対応するポリヌクレオチド、翻訳産物および抗体は、癌および他の増
殖障害（例えば、本明細書中の「過剰増殖障害」のもとで記載される増殖障害）
の診断および処置における有用性を示し得る。同様に、組織の発生は、パターン
形成における細胞の分化および／またはアポトーシスの決定を関与する。従って
、この遺伝子はまた、アポトーシスまたは組織分化に関与し得、そしてまた癌治
療に有用であり得る。
【００８７】 この遺伝子の翻訳産物ならびにこの遺伝子の翻訳産物に対する抗体とは、上記
に列挙された組織に対する腫瘍マーカーおよび／または免疫治療の標的としての
有用性を示し得る。
【００８８】 （遺伝子番号４によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、ヒト細胞分裂調節タンパク質（米国特許ＵＳ５８７
１９７３を参照のこと）と配列相同性を共有し、このタンパク質は、細胞の分裂
の調節において機能すると考えられる。この遺伝子はまた、性腺刺激ホルモン放
出ホルモンファミリーのメンバーのタンパク質とも相同性を共有する。このファ
ミリーのタンパク質は、黄体化ホルモンおよび卵胞刺激ホルモンの合成および分
泌を刺激するように下垂体において作用すると考えられる。このファミリーの代
表的なメンバーとしては、性腺刺激ホルモン放出ホルモンが挙げられる。開示さ
れたｃＤＮＡをコードする遺伝子は、Ｘ染色体上に存在すると考えられる。従っ
て、本発明に関するポリヌクレオチドは、Ｘ染色体についての連鎖分析における
マーカーとして有用である。
【００８９】 本発明の好ましいポリペプチドは、以下のアミノ酸配列：ＱＬＶＮＫＳＶＳＱ
Ｇ（配列番号３４）を含むか、あるいはこれからなる。これらのポリペプチドを
コードするポリヌクレオチドもまた、これらのポリペプチドの１つ以上に結合す
る抗体と同様に、本発明により包含される。さらに、これらのポリペプチドのフ
ラグメントおよび改変体（例えば、本明細書に記載のフラグメント、これらのポ
リペプチドに少なくとも、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、
９８％または９９％同一であるポリペプチド、およびこれらのポリペプチドをコ
ードするポリヌクレオチドにストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポ
リヌクレオチドによりコードされるポリペプチド、またはその相補体）が、本発
明により包含される。本発明のこれらのフラグメントおよび改変体に結合する抗
体がまた、本発明により包含される。これらのフラグメントおよび改変体をコー
ドするポリヌクレオチドはまた、本発明により包含される。
【００９０】 本発明のさらなる好ましいポリペプチドは、配列番号２０に残基：Ｇｌｕ−９
６〜Ｔｈｒ−１０１、Ｇｌｎ−１３４〜Ｔｙｒ−１４１、Ｐｒｏ−２４２〜Ｓｅ
ｒ−２４７、Ｇｌｕ−３１０〜Ａｒｇ−３２５、Ｌｙｓ−３３５〜Ｐｈｅ−３４
４、Ｇｌｕ−３４８〜Ａｓｎ−３５５、およびＬｅｕ−３６１〜Ｌｙｓ−３６７
として示される免疫原性エピトープの１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたはそれ
以上を含むか、あるいはこれらからなる。これらのポリペプチドをコードするポ
リヌクレオチドもまた、これらのポリペプチドの１つ以上に結合する抗体と同様
に、本発明により包含される。さらに、これらのポリペプチドのフラグメントお
よび改変体（例えば、本明細書に記載のフラグメント、これらのポリペプチドに
少なくとも、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または
９９％同一であるポリペプチド、およびこれらのポリペプチドをコードするポリ
ヌクレオチドにストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチ
ドによりコードされるポリペプチド、またはその相補体）が、本発明により包含
される。本発明のこれらのフラグメントおよび改変体に結合する抗体もまた、本
発明により包含される。これらのフラグメントおよび改変体をコードするポリヌ
クレオチドもまた、本発明により包含される。
【００９１】 この遺伝子は、排泄組織および筋骨格系組織ならびに多数の免疫系細胞および
免疫系組織（例えば、活性化されたＴ細胞、Ｂ細胞、一次樹状細胞、骨髄、およ
び扁桃）において発現される。
【００９２】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、生
物学的サンプル中に存在する免疫、排泄および筋骨格の組織または細胞型の示差
的同定のため、ならびに以下：免疫系、排泄系および筋骨格系の疾患および／ま
たは障害を含むが、これらに限定されない疾患および状態の診断のための試薬と
して有用である。同様に、ポリペプチドおよびこれらのポリペプチドに対する抗
体は、組織または細胞型の示差的同定のための免疫学的プローブを提供する際に
有用である。上記組織または細胞、特に免疫系、排泄系および筋骨格系の多くの
障害について、標準的な遺伝子発現レベル、すなわち、障害を有さない個体から
の健常組織または体液中の発現レベルに対して、有意により高いかまたはより低
いレベルのこの遺伝子の発現が、このような障害を有する個体から採取された、
特定の組織または細胞型（例えば、免疫組織、筋骨格組織、排泄組織、癌性組織
および創傷組織）または体液（例えば、リンパ、血清、血漿、尿、滑液および髄
液）あるいは別の組織またはサンプル中で慣用的に検出され得る。
【００９３】 免疫組織、筋骨格組織、および排泄組織における組織分布は、この遺伝子に対
応するポリヌクレオチド、翻訳産物および抗体が、免疫系、筋骨格系および排泄
系に関連する疾患および／または障害の診断、予後、予防、および／または処置
に有用であることを示す。
【００９４】 免疫系細胞および免疫系組織における組織分布は、この遺伝子に対応するポリ
ヌクレオチド、翻訳産物および抗体が、免疫学的障害（例えば、免疫不全（例え
ば、ＡＩＤＳ）、炎症障害、自己免疫障害、および／または本明細書において「
免疫活性」の下で記載されるような）の診断、予後、予防、および／または処置
に有用であり得ることを示唆する。さらに、ヒト細胞分裂調節タンパク質に対す
る配列同一性は、この遺伝子の翻訳産物またはその抗体が免疫細胞の増殖の調節
に有用であり得ることをさらに示唆する。
【００９５】 筋骨格組織における組織分布は、この遺伝子のタンパク質産物が、心臓血管系
の状態および病理（例えば、心臓疾患、再狭窄、アテローム性動脈硬化症、発作
、アンギナ、血栓症、創傷治癒、および／または本発明において「心臓血管障害
」の下で記載されるような）；ならびに、骨格系（例えば、慢性関節リウマチ、
狼瘡、強皮症、皮膚筋炎、小人症、脊髄変形、ならびに特定の関節異常および軟
骨形成不全症（すなわち、先天性脊椎骨端形成異常、家族性関節炎、ＩＩ型発育
不全骨発生症（ａｔｅｌｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ ｔｙｐｅ ＩＩ）、Ｓｃｈ
ｍｉｄ型骨幹端軟骨形成不全症（ｍｅｔａｐｈｙｓｅａｌ ｃｈｏｎｄｒｏｄｙ
ｓｐｌａｓｉａ ｔｙｐｅ Ｓｃｈｍｉｄ）の診断および／または処置に有用で
あることを示す。
【００９６】 同様に、排泄組織における組織分布は、この遺伝子のタンパク質産物が腎臓、
小腸および大腸、ならびに肝臓に関連する排泄系の障害の診断、予後、予防、お
よび／または処置に有用であることを示す。
【００９７】 この遺伝子の翻訳産物、およびこの遺伝子の翻訳産物に対する抗体は、上に列
挙された組織に対する腫瘍マーカーおよび／または免疫治療の標的としての有用
性を示し得る。
【００９８】 （遺伝子番号５によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、マウスＳＨ３ドメイン含有アダプタータンパク質お
よびヒトアダプタータンパク質ＣＭＳ（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＡＣ３６０９
９およびＴ１３１５１を各々参照のこと）と配列相同性を共有し、このタンパク
質は、細胞骨格のパターン形成および再構築に関与すると考えられる。この遺伝
子はまた、Ｅｆハンドファミリーのメンバーのタンパク質とも相同性を共有する
。このファミリーのタンパク質は、カルシウム結合に関与すると考えられる。こ
のファミリーの代表的なメンバーのタンパク質としては、例えば、エクオリン、
αアクチニン、植物由来のカルシウム依存性タンパク質キナーゼ、オステオネク
チン、およびリカバリンが挙げられる。
【００９９】 本発明の好ましいポリペプチドは、配列番号２１に残基：Ｇｌｕ−９〜Ｓｅｒ
−２０、Ｉｌｅ−２３〜Ｇｌｙ−２９、Ｐｒｏ−５０〜Ｃｙｓ−６６、Ｐｒｏ−
７４〜Ｇｌｕ−７９、Ｇｌｕ−９３〜Ｔｒｐ−９８、Ｔｈｒ−１２１〜Ｓｅｒ−
１３３、Ｌｅｕ−１８０〜Ｌｙｓ−１９６、Ｔｈｒ−２１３〜Ｇｌｕ−２２５、
Ｇｌｕ−２３４〜Ｇｌｕ−２４０、Ａｒｇ−２６３〜Ｇｌｕ−２７０、Ｇｌｕ−
２８３〜Ａｌａ−２９８、Ｌｙｓ−３１８〜Ａｌａ−３３６、Ｖａｌ−３４０〜
Ａｌａ−３５１、Ｖａｌ−３６１〜Ｐｒｏ−３７２、Ａｓｎ−４４５〜Ｐｒｏ−
４６８およびＰｒｏ−４７５〜Ｌｙｓ−４９１として示される免疫原性エピトー
プの１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたはそれ以上を含むか、あるいはこれらか
らなる。これらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドもまた、これらの
ポリペプチドの１つ以上に結合する抗体と同様に、本発明により包含される。さ
らに、これらのポリペプチドのフラグメントおよび改変体（例えば、本明細書に
記載のフラグメント、これらのポリペプチドに少なくとも、８０％、８５％、９
０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一であるポリペプチド、
およびこれらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドにストリンジェント
な条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチ
ド、またはその相補体）が、本発明により包含される。本発明のこれらのフラグ
メントおよび改変体に結合する抗体もまた、本発明により包含される。これらの
フラグメントおよび改変体をコードするポリヌクレオチドもまた、本発明により
包含される。
【０１００】 この遺伝子は、小腸組織および胃組織において発現される。
【０１０１】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、生
物学的サンプル中に存在する組織または細胞型の示差的同定のため、ならびに以
下：胃腸系に関する疾患および／または障害を含むが、これらに限定されない疾
患および状態の診断のための試薬として有用である。同様に、ポリペプチドおよ
びこれらのポリペプチドに対する抗体は、組織または細胞型の示差的同定のため
の免疫学的プローブを提供する際に有用である。上記組織または細胞、特に胃腸
系の多くの障害について、標準的な遺伝子発現レベル、すなわち、障害を有さな
い個体からの健常組織または体液中の発現レベルに対して、有意により高いかま
たはより低いレベルのこの遺伝子の発現が、このような障害を有する個体から採
取された、特定の組織または細胞型（例えば、胃腸組織、癌性組織および創傷組
織）または体液（例えば、リンパ、血清、血漿、尿、滑液および髄液）あるいは
別の組織またはサンプル中で慣用的に検出され得る。
【０１０２】 胃腸組織における組織分布、およびＳＨ３ドメイン含有アダプタータンパク質
に対する相同性は、この遺伝子に対応するポリヌクレオチド、翻訳産物および抗
体が、胃腸系の疾患および／または障害の診断、予後、予防、および／または処
置に有用であることを示す。これは、消化および食物吸収に関連する疾患、なら
びに造血障害（小腸のパイアー斑、または身体内の他の造血細胞および造血組織
に関する）を含み得る。同様に、この遺伝子産物のＳＨ３ドメイン含有アダプタ
ータンパク質に対する相同性は、胃腸組織の構造または組織モデリングへの関与
が示唆される。
【０１０３】 この遺伝子の翻訳産物、およびこの遺伝子の翻訳産物に対する抗体は、上に列
挙された組織に対する腫瘍マーカーおよび／または免疫治療の標的としての有用
性を示し得る。
【０１０４】 （遺伝子番号６によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、フィブロネクチンファミリーのメンバーのタンパク
質と相同性を共有する。血漿タンパク質のこのファミリーは、細胞の接着、移動
、および増殖に関連し、そして炎症、創傷修復、悪性転移、微生物付着および血
栓症のような疾患および／または障害における潜在的有用性を見出すと考えられ
る。このファミリーの代表的なメンバーのタンパク質としては、血液凝固因子Ｘ
ＩＩ、肝細胞増殖因子活性化因子、ＩＧＦレセプター、および精漿タンパク質Ｐ
ＤＣ−１０９が挙げられる。
【０１０５】 本発明の好ましいポリペプチドは、配列番号２２に残基：Ａｌａ−１〜Ａｒｇ
−９、Ｈｉｓ−１５〜Ｐｒｏ−２１、Ｐｒｏ−２９〜Ｇｌｎ−４０、Ｐｒｏ−４
２〜Ｔｈｒ−５５、Ｌｅｕ−５７〜Ｇｌｕ−６４、Ｌｅｕ−６７〜Ａｌａ−１０
３、Ｔｈｒ−１０５〜Ｖａｌ−１２７、およびＧｌｕ−１３５〜Ｓｅｒ−１４０
として示される免疫原性エピトープの１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたはそれ
以上を含むか、あるいはこれらからなる。これらのポリペプチドをコードするポ
リヌクレオチドもまた、提供される。これらのポリペプチドをコードするポリヌ
クレオチドもまた、これらのポリペプチドの１つ以上に結合する抗体と同様に、
本発明により包含される。さらに、これらのポリペプチドのフラグメントおよび
改変体（例えば、本明細書に記載のフラグメント、これらのポリペプチドに少な
くとも、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９
％同一であるポリペプチド、およびこれらのポリペプチドをコードするポリヌク
レオチドにストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドに
よりコードされるポリペプチド、またはその相補体）もまた、本発明により包含
される。本発明のこれらのフラグメントおよび改変体に結合する抗体もまた、本
発明により包含される。これらのフラグメントおよび改変体をコードするポリヌ
クレオチドもまた、本発明により包含される。
【０１０６】 この遺伝子は、中枢神経系組織（例えば、成体脳組織、小脳組織、および乳児
脳組織）で発現される。
【０１０７】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、生
物学的サンプル中に存在する神経組織型または神経細胞型の示差的同定のため、
ならびに以下：中枢神経系の疾患および／または障害を含むが、これらに限定さ
れない疾患および状態の診断のための試薬として有用である。同様に、ポリペプ
チドおよびこれらのポリペプチドに対する抗体は、組織または細胞型の示差的同
定のための免疫学的プローブを提供する際に有用である。上記組織または細胞、
特に中枢神経系（ＣＮＳ）の多くの障害について、標準的な遺伝子発現レベル、
すなわち、障害を有さない個体からの健常組織または体液中の発現レベルに対し
て、有意により高いかまたはより低いレベルのこの遺伝子の発現が、このような
障害を有する個体から採取された、特定の組織または細胞型（例えば、ＣＮＳ組
織、癌性組織および創傷組織）または体液（例えば、リンパ、血清、血漿、尿、
滑液および髄液）あるいは別の組織またはサンプル中で慣用的に検出され得る。
【０１０８】 中枢神経系組織における組織分布は、この遺伝子に対応するポリヌクレオチド
、翻訳産物およびこの遺伝子に対応する抗体が、例えば、神経変性疾患状態およ
び行動障害、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、ツ
レット症候群、精神分裂病、ＡＬＳ、精神病、および／または本明細書中の以下
「神経活性および神経学的疾患」に記載されるような中枢神経系を含む疾患およ
び／または障害の、診断、予後、予防および／または処置に有用であることを示
す。脳におけるこの遺伝子産物の上昇した発現は、この遺伝子産物が、ニューロ
ンの生存；シナプス形成；コンダクタンス；および／またはニューロンの分化に
関与し得ることを示す。このような関与は、多くのプロセス（例えば、学習およ
び認識）において影響を与え得る。さらに、この遺伝子または遺伝子産物はまた
、胚の発生と関連する発生障害、または性関連障害の処置および／または検出に
おいて役割を果たし得る。
【０１０９】 この遺伝子の翻訳産物、ならびにこの遺伝子の翻訳産物に対する抗体は、上記
に列挙される組織の腫瘍マーカーおよび／または免疫治療の標的として有用性を
示し得る。
【０１１０】 （遺伝子番号７によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、マウスおよびヒト由来の筋肉関連タンパク質（ジー
ンバンク登録番号ＡＪ００１０３８および同Ｘ６９０９０を参照のこと）、なら
びにヒトフィブロネクチンタンパク質（欧州特許ＥＰ２０７７５１を参照のこと
）と配列相同性を共有し、これは細胞表面の結合に関すると考えられる血漿タン
パク質である。この遺伝子はまた、フィブロネクチンファミリーのタンパク質の
メンバーと相同性を共有する。血漿タンパク質のこのファミリーは、細胞接着、
細胞移動、および細胞増殖に関すると考えられ、そしてこのような疾患および／
または障害（炎症、損傷修復、悪性転移、微生物付着および血栓症）における潜
在的な有用性を見出す。このファミリーのタンパク質の代表的なメンバーとして
は、血液凝固因子ＸＩＩ、肝細胞増殖因子活性化因子、ＩＧＦレセプター、およ
び精漿タンパク質ＰＤＣ−１０９が挙げられる。
【０１１１】 本発明の好ましいポリペプチドは、配列番号２３において残基：Ｍｅｔ−４９
〜Ｔｙｒ−５６、Ｇｌｎ−９１〜Ｖａｌ−１０１、Ｐｒｏ−１７２〜Ｇｌｎ−１
８１およびＳｅｒ−１８３〜Ｉｌｅ−１９７として示される、１個、２個、３個
または全ての４個の免疫原性エピトープを含むか、あるいはこれらの免疫原性エ
ピトープからなる。これらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドはまた
、本発明によって包含され、１つ以上のこれらのポリペプチドに結合する抗体も
同様に包含される。さらに、これらのポリペプチドのフラグメントおよび改変体
（例えば、本明細書中で記載されるようなフラグメント、これらのポリペプチド
、およびストリンジェントな条件下でこれらのポリペプチドをコードするポリヌ
クレオチド、またはその相補体にハイブリダイズするポリヌクレオチドによって
コードされるポリペプチドに少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６
％、９７％、９８％、または９９％同一なポリペプチド）は、本発明によって包
含される。本発明のこれらのフラグメントおよび改変体を結合する抗体はまた、
本発明によって包含される。これらのフラグメントおよび改変体をコードするポ
リヌクレオチドはまた、本発明によって包含される。
【０１１２】 この遺伝子は、大腿四頭筋、心臓および脊髄組織において発現される。
【０１１３】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、生
物学的サンプル中に存在する組織または細胞型の示差的同定のため、ならびに筋
骨格系および中枢神経系（ＣＮＳ）に関与する疾患および／または障害を含むが
、これらに限定されない疾患および状態の診断のための試薬として有用である。
同様に、ポリペプチドおよびこれらのポリペプチドに対する抗体は、組織または
細胞型の示差的同定のための免疫学的プローブの提供に有用である。上記組織ま
たは細胞、特に筋骨格系およびＣＮＳに関する特定の細胞および特定の細胞およ
び組織の多数の障害について、標準の遺伝子発現レベル（すなわち、この障害を
有さない個体由来の健常組織または体液中の発現レベル）に対して有意により高
いまたはより低いレベルのこの遺伝子の発現が、このような障害を有する個体か
ら採取された特定の組織もしくは細胞型（例えば、ＣＮＳ、筋骨格、癌性組織お
よび創傷組織）または体液（例えば、リンパ、血清、血漿、尿、滑液および髄液
）または別の組織もしくはサンプルの中で、慣用的に検出され得る。
【０１１４】 筋組織（例えば、心臓および大腿四頭筋）における組織分布、ならびにヒト骨
格筋関連タンパク質に対する相同性は、この遺伝子に対応するポリヌクレオチド
、翻訳産物および抗体が、神経筋障害（例えば、筋炎、筋萎縮、筋萎縮性側索硬
化症、横紋筋肉腫および平滑筋肉腫）の診断、予後、予防および／または処置に
有用であることを示す。
【０１１５】 さらに、大腿四頭筋組織および心臓組織における組織分布は、この遺伝子のタ
ンパク質産物が、例えば、心臓疾患、再狭窄、アテローム性動脈硬化症、発作、
アンギナ、血栓症、損傷治癒および／または本明細書中の以下「心血管障害」に
記載されるような心血管系の状態および病理学の診断、予後、予防および／また
は処置に有用であることを示す。
【０１１６】 同様に、脊髄組織における組織分布は、この遺伝子に対応するポリヌクレオチ
ド、翻訳産物および抗体が、例えば、神経変性疾患状態および行動障害、例えば
、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、ツレット症候群、精神
分裂病、ＡＬＳ、精神病、および／または本明細書中の以下「神経活性および神
経学的疾患」に記載されるような中枢神経系を含む疾患および／または障害の診
断、予後、予防および／または処置に有用であることを示す。さらに、この遺伝
子または遺伝子産物はまた、胚の発生と関連する発生障害、または性関連障害の
処置および／または検出において役割を果たし得る。
【０１１７】 この遺伝子の産物のヒトフィブロネクチンに対する相同性に基づいて、これら
のタンパク質は少なくともいくつかの生物学的活性を共有するようである。従っ
て、本発明のこの翻訳産物は、結合細胞表面において、またはそこで発現される
結合タンパク質において、機能し得る。
【０１１８】 この遺伝子の翻訳産物、ならびにこの遺伝子の翻訳産物に対する抗体は、上記
に列挙される組織の腫瘍マーカーおよび／または免疫治療の標的として有用性を
示し得る。
【０１１９】 （遺伝子番号８によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、ＳＣＰファミリーのタンパク質のメンバーと相同性
を共有し、これは共通の特徴づけられた機能のない進化的に保存されたタンパク
質である。
【０１２０】 本発明の好ましいポリペプチドは、配列番号２４において残基：Ａｓｎ−１８
〜Ｇｌｙ−２５、Ｌｙｓ−３３〜Ｓｅｒ−４３、Ｈｉｓ−５４〜Ｃｙｓ−６３、
Ｓｅｒ−７１〜Ｇｌｙ−７６、およびＳｅｒ−８５〜Ｇｌｎ−９３として示され
る、１個、２個、３個、４個、または全ての５個の免疫原性エピトープを含むか
、あるいはこれらの免疫原性エピトープからなる。これらのポリペプチドをコー
ドするポリヌクレオチドはまた、本発明によって包含され、１つ以上のこれらの
ポリペプチドに結合する抗体も同様に包含される。さらに、これらのポリペプチ
ドのフラグメントおよび改変体（例えば、本明細書中で記載されるようなフラグ
メント、これらのポリペプチド、およびストリンジェントな条件下でこれらのポ
リペプチドをコードするポリヌクレオチド、またはその相補体にハイブリダイズ
するポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチドに少なくとも８０％、
８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なポリペ
プチド）は、本発明によって包含される。本発明のこれらのフラグメントおよび
改変体を結合する抗体はまた、本発明によって包含される。これらのフラグメン
トおよび改変体をコードするポリヌクレオチドはまた、本発明によって包含され
る。
【０１２１】 この遺伝子は、活性化された単球、Ｔ細胞、好酸球、樹状細胞、およびマクロ
ファージにおいて発現される。
【０１２２】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、生
物学的サンプル中に存在する免疫組織または細胞型の示差的同定のため、ならび
に免疫系の疾患および／または障害を含むが、これらに限定されない疾患および
状態の診断のための試薬として有用である。同様に、ポリペプチドおよびこれら
のポリペプチドに対する抗体は、組織または細胞型の示差的同定のための免疫学
的プローブの提供に有用である。上記組織または細胞、特に免疫系の特定の細胞
および特定の細胞および組織の多数の障害について、標準の遺伝子発現レベル（
すなわち、この障害を有さない個体由来の健常組織または体液中の発現レベル）
に対して有意により高いまたはより低いレベルのこの遺伝子の発現が、このよう
な障害を有する個体から採取された特定の組織もしくは細胞型（例えば、免疫組
織、癌性組織および創傷組織）または体液（例えば、リンパ、血清、血漿、尿、
滑液および髄液）または別の組織もしくはサンプルの中で、慣用的に検出され得
る。
【０１２３】 多くの免疫系細胞（活性化単球、Ｔ細胞、好酸球、樹状細胞およびマクロファ
ージを含む）における組織分布は、潜在的に全ての造血細胞系統（血液幹細胞を
含む）の増殖；生存；分化；および／または活性化の調節における役割を示す。
従って、この遺伝子に対応するポリヌクレオチド、翻訳産物および抗体は、例え
ば、関節炎、喘息、免疫不全疾患（例えば、ＡＩＤＳ）、白血病、慢性関節リウ
マチ、炎症性腸疾患、敗血症、挫瘡、乾癬、および／または本明細書中の以下「
免疫活性」に記載される免疫疾患の処置に有用であり得る。
【０１２４】 さらに、この遺伝子産物は、種々の血液系列の幹細胞および方向付けられた前
駆細胞の増大において、ならびに種々の細胞型の分化および／または増殖におい
て商業的有用性を有し得る。
【０１２５】 さらに、この遺伝子の翻訳産物は、サイトカイン産生、抗原提示、または他の
プロセスの調節における関与し得、このことはまた、癌の処置（例えば、免疫応
答をブーストすることによる）における有用性を示唆する。この遺伝子の翻訳産
物ならびにこの遺伝子の翻訳産物に対する抗体は、上記に列挙された組織の腫瘍
マーカーおよび／または免疫療法標的としての有用性を示し得る。
【０１２６】 （遺伝子番号９によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、ディフェンシンファミリーのタンパク質のメンバー
と相同性を共有する。このタンパク質のファミリーは、主なグラム陽性細菌に作
用する抗細菌性ペプチドとして機能すると考えられ、従ってこれは抗細菌薬とし
て有用である。開示されたｃＤＮＡをコードする遺伝子は、第１２染色体に存在
すると考えられる。従って、本発明に関するポリヌクレオチドは、第１２染色体
の連鎖分析におけるマーカーとして有用である。
【０１２７】 本発明の好ましいポリペプチドは、配列番号２５において残基：Ｉｌｅ−５７
〜Ｔｒｐ−６５およびＴｙｒ−９５〜Ａｒｇ−１００として示される、１個また
は両方の免疫原性エピトープを含むか、あるいはこれらの免疫原性エピトープか
らなる。これらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドはまた、本発明に
よって包含され、１つ以上のこれらのポリペプチドに結合する抗体も同様に包含
される。さらに、これらのポリペプチドのフラグメントおよび改変体（例えば、
本明細書中で記載されるようなフラグメント、これらのポリペプチド、およびス
トリンジェントな条件下でこれらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチド
、またはその相補体にハイブリダイズするポリヌクレオチドによってコードされ
るポリペプチドに少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％
、９８％、または９９％同一なポリペプチド）は、本発明によって包含される。
本発明のこれらのフラグメントおよび改変体を結合する抗体はまた、本発明によ
って包含される。これらのフラグメントおよび改変体をコードするポリヌクレオ
チドはまた、本発明によって包含される。
【０１２８】 この遺伝子は、乳児および胎児の脳組織において発現される。
【０１２９】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、生
物学的サンプル中に存在する神経組織または細胞型の示差的同定のため、ならび
に発達神経系に関与する疾患および／または障害を含むが、これらに限定されな
い疾患および状態の診断のための試薬として有用である。同様に、ポリペプチド
およびこれらのポリペプチドに対する抗体は、組織または細胞型の示差的同定の
ための免疫学的プローブの提供に有用である。上記組織または細胞、特に発達神
経系の特定の細胞および特定の細胞および組織の多数の障害について、標準の遺
伝子発現レベル（すなわち、この障害を有さない個体由来の健常組織または体液
中の発現レベル）に対して有意により高いまたはより低いレベルのこの遺伝子の
発現が、このような障害を有する個体から採取された特定の組織もしくは細胞型
（例えば、神経組織、癌性組織および創傷組織）または体液（例えば、リンパ、
血清、血漿、尿、滑液および髄液）または別の組織もしくはサンプルの中で、慣
用的に検出され得る。
【０１３０】 乳児および胎児の脳における組織分布は、この遺伝子に対応するポリヌクレオ
チド、翻訳産物および抗体が、中枢神経系および発達脳の疾患および／または障
害の診断、予後、予防および／または処置に有用であることを示す。詳細には、
この遺伝子に対応するポリヌクレオチド、翻訳産物および抗体は、神経変性疾患
状態および行動障害、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチント
ン病、ツレット症候群、精神分裂病、ＡＬＳ、精神病、および／または本明細書
中の以下「神経活性および神経学的障害」に記載されるような神経変性疾患状態
および行動障害の検出／処置に有用であることを示す。脳におけるこの遺伝子産
物の上昇した発現は、この遺伝子産物が、ニューロンの生存；シナプス形成；コ
ンダクタンス；および／またはニューロンの分化に関与し得ることをを示す。こ
のような関与は、多くのプロセス（例えば、学習および認識）において影響を与
え得る。
【０１３１】 この遺伝子の翻訳産物、ならびにこの遺伝子の翻訳産物に対する抗体は、上記
に列挙される組織の腫瘍マーカーおよび／または免疫治療の標的として有用性を
示し得る。
【０１３２】 （遺伝子番号１０によってコードされるタンパク質の特徴） 本遺伝子の翻訳産物は、ラットニューレキシン（ｎｅｕｒｅｘｉｎ）ＩＩ−β
−ａ（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｍ９６３７７を参照のこと）と配列相同性を共有
する。ラットニューレキシンＩＩ−β−ａ（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｍ９６３７
７）は、神経末端における細胞認識分子として機能すると考えられている。この
遺伝子はまた、タンパク質のディフェンシンファミリーのメンバーを相同性を共
有する。タンパク質のこのファミリーは、抗菌性ペプチド（グラム陽性細菌に主
に作用する）として機能すると考えられており、従って抗菌薬剤として有用であ
る。この開示されたｃＤＮＡをコードする遺伝子は、第１１染色体上に存在する
と考えられている。従って、本発明に関連するポリヌクレオチドは、第１１染色
体に対する連鎖分析におけるマーカーとして有用である。
【０１３３】 本発明の好ましいポリペプチドは、配列番号２６の以下の残基として示された
免疫原性エピトープの１つまたは両方を含むか、またはあるいは、これらからな
る：Ｓｅｒ−５８〜Ａｒｇ−６５およびＣｙｓ−９４〜Ｌｅｕ−１００。これら
のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドはまた、これらのポリペプチドの
１つ以上と結合する抗体と同様に、本発明によって含まれる。さらに、これらの
ポリペプチドのフラグメントおよび改変体（例えば，本明細書中で記載されるフ
ラグメント、これらのポリペプチドおよび、これらのポリペプチドをコードする
ポリヌクレオチド、またはこれらの相補体に、ストリンジェントな条件下でハイ
ブリダイズするポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチドに、少なく
とも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同
一であるポリペプチド）は、本発明に含まれる。本発明のこれらのフラグメント
および改変体に結合する抗体はまた、本発明に含まれる。これらのフラグメント
および改変体をコードするポリヌクレオチドはまた、本発明により含まれる。
【０１３４】 この遺伝子は、初期段階のヒトの脳、多発性硬化症の病巣、および分裂病性視
床下部（ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃ ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ）を含む、中
枢神経系の、正常組織および罹患組織の多くにおいて発現される。
【０１３５】 したがって、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は
、生物学的試料中に存在する神経の組織または細胞型の示差的同定のため、なら
びに、中枢神経系の疾患および／または障害を含むが、これらに限定されない疾
患および状態の診断のための試薬として有用である。同様に、ポリペプチドおよ
びこれらのポリペプチドに対する抗体は、組織または細胞型の示差的同定のため
の免疫学的プローブを提供することに有用である。上記組織または細胞の多くの
障害、特に中枢神経系（ＣＮＳ）の多くの障害について、標準的な遺伝子発現レ
ベル、すなわち、障害を有さない個体からの健常組織または体液中の発現レベル
に対して有意により高いまたはより低いレベルのこの遺伝子の発現が、特定の組
織または細胞型（例えば、ＣＮＳ組織、癌性組織および創傷組織）または体液（
例えば、リンパ、血清、血漿、尿、滑液および髄液）またはこのような障害を有
する個体から採取された別の組織もしくは試料中で慣用的に検出され得る。
【０１３６】 タンパク質のディフェンシンファミリのメンバーに対する相同性は、これらの
遺伝子に対応する、ポリヌクレオチド、転写産物および抗体が、（特にグラム陽
性細菌に対する）抗菌能において、ならびに多くの免疫障害（例えば、本明細書
中の「免疫活性」に記載の免疫障害）の処置において、有用であり得る。
【０１３７】 あるいは、中枢神経系組織における組織分布、およびニューレキシンＩＩ−β
−ｂに対する相同性は、この遺伝子に対応する、ポリヌクレオチド、転写産物、
および抗体が、中枢神経系の疾患および／もしくは障害の、診断、予後、予防な
らびに／または処置について有用である。詳細には，この遺伝子に対応する、ポ
リヌクレオチド、転写産物および抗体が、以下のような神経変性疾患状態および
行動的障害の検出／処置について有用である：アルツハイマー病、パーキンソン
病、ハンティングトン病、ツレット症候群、精神分裂病、ＡＬＳ、精神病,およ
び／または本明細書中の「神経活性および神経学的疾患」に記載のような神経変
性疾患状態および行動的障害。脳内でのこの遺伝子産物の上昇した発現は、これ
が以下に関連し得ることを示唆する：神経の生存；シナプス形成；コンダクタン
ス；および／または神経分化。このような関与は、多くのプロセス（例えば、学
習および認知）に影響を与え得る。さらに、この遺伝子または遺伝子産物はまた
、発生胚などに関連した発生障害、または性関連障害の処理および／または検出
に役割を果たし得る。
【０１３８】 この遺伝子の翻訳産物、ならびにこの遺伝子の翻訳産物対する抗体が、上に列
挙した組織についての腫瘍マーカーおよび／または免疫療法の標的として有用性
を示し得る。
【０１３９】 （遺伝子番号１１によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、タンパク質の膵臓ホルモンファミリーのメンバーと
配列相同性を共有する。タンパク質のこのファミリーは,膵臓機能および胃腸機
能のレギュレータとして作用すると考えられている。従って、この遺伝子の転写
産物は、膵臓機能および胃腸機能のレギュレータとして有用であり得る。このフ
ァミリーの代表的なメンバーとしては、ペプチドＹＹ、神経ペプチドＹ、および
皮膚ペプチド（ＳＰＹＹ）が挙げられる。この開示されたｃＤＮＡをコードする
遺伝子は、第１７染色体上に存在すると考えられている。従って、本発明に関連
したポリヌクレオチドは、第１７染色体に対する連鎖分析においてマーカーとし
て有用であり得る。
【０１４０】 本発明の好ましいポリペプチドは、配列番号２７の以下の残基として示された
免疫原性エピトープを含むか、あるいは、これからなる：Ｉｌｅ−２７〜Ｇｌｙ
−２７。このポリペプチドをコードしたポリヌクレオチドがまた、このポリペプ
チドに結合する抗体と同様に、本発明によって含まれる。さらに、これらのポリ
ペプチドのフラグメントおよび改変体（例えば，本明細書中で記載される、フラ
グメント、このポリペプチドおよび、このポリペプチドをコードするポリヌクレ
オチド、またはこれらの相補体に、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズ
するポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチドに、少なくとも８０％
、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一であるポ
リペプチド）は、本発明に含まれる。本発明のこれらのフラグメントおよび改変
体に結合する抗体はまた、本発明に含まれる。これらのフラグメントおよび改変
体をコードするポリヌクレオチドはまた、本発明により含まれる。
【０１４１】 この遺伝子は、喉頭癌組織および肺癌組織において発現される。
【０１４２】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、生
物学的試料中に存在する肺組織または細胞型の示差的同定のため、ならびに、肺
系の疾患および／または障害を含むが、これらに限定されない疾患および状態の
診断のための試薬として有用である。同様に、ポリペプチドおよびこれらのポリ
ペプチドに対する抗体は、組織または細胞型の示差的同定のための免疫学的プロ
ーブを提供することに有用である。上記組織または細胞の多くの障害、特に肺系
の多くの障害について、標準的な遺伝子発現レベル、すなわち、障害を有さない
個体からの健常組織または体液中の発現レベルに対して有意により高いまたはよ
り低いレベルのこの遺伝子の発現が、特定の組織または細胞型（例えば、肺組織
、癌性組織および創傷組織）または体液（例えば、リンパ、血清、血漿、尿、滑
液および髄液）またはこのような障害を有する個体から採取された別の組織もし
くは細胞試料中で慣用的に検出され得る。
【０１４３】 タンパク質の膵臓ホルモンファミリーのメンバーに対するこの遺伝子の相同性
は、この遺伝子に対応する、ポリヌクレオチド、転写産物および抗体が、膵臓お
よび胃腸系の疾患および／または障害（これらの調節を含む）の診断、予後、予
防、および／または処置に対して有用であり得ることを示している。
【０１４４】 あるいは、肺系組織での組織分布は、この遺伝子に対応する、ポリヌクレオチ
ド、転写産物および抗体が、肺系の疾患および／または障害（喉頭癌のような、
肺系の癌を含む）の診断、予後、予防、および／または処置に対して有用である
ことを示している。喉頭癌組織における組織分布は、この遺伝子が、アゴニスト
、特に低分子または抗体に対する良好な標的であることを示し、このアゴニスト
は、同族リガンドによってレセプターの結合を遮断する。従って、この遺伝子の
転写産物の部分に特異的に結合する抗体および／または低分子が好ましい。喉頭
癌を検出するキットがまた、提供される。このようなキットは、１つの実施形態
において、固体支持体に結合した、この遺伝子の転写産物に特異的な抗体を含む
。個体において喉頭癌を検出する方法がまた提供され、この方法は、この遺伝子
の転写産物に特異的な抗体を、個体からの体液（好ましくは血清）に、接触させ
る工程、ならびに抗体が体液中で見出される抗原に結合したか否かを確認する工
程を包含する。好ましくは、この抗体が固体支持体に結合されており、そしてこ
の体液が血清である。上の実施形態は、他の処置および診断試験（キットおよび
方法）と同様に、より詳しく本明細書中の他の場所に記載される。
【０１４５】 この遺伝子の翻訳産物、およびこの遺伝子の転写産物に対する抗体は、上に列
挙したような組織に対する、腫瘍マーカおよび／または免疫療法の標的として有
用性を示し得る。
【０１４６】 （遺伝子番号１２によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、ダウン症候群細胞の接着分子（Ｇｅｎｂａｎｋ登録
番号ＡＡＣ１７９６６を参照のこと）との配列相同性を共有しており、この遺伝
子が、ある程度まで細胞接着で機能していると考えられている。この遺伝子はま
た、タンパク質のフィブロネクチンファミリーのメンバーと相同性を共有してい
る。血漿タンパク質のこのファミリーは、細胞接着、細胞移動、および細胞増殖
に関与すると考えられており、そして炎症、創傷治癒、悪性転移、微生物付着お
よび血栓症のような疾患ならびに／または障害において潜在的に有用性を見出す
。タンパク質のこのファミリーの代表的なメンバーとしては、血液凝固因子ＸＩ
Ｉ、肝細胞増職因子アクチベーター、ＩＧＦレセプター、および精漿（ｓｅｍｉ
ｎａｌ ｐｌａｓｍａ）タンパク質ＰＤＣ−１０９が挙げられる。
【０１４７】 開示されたｃＤＮＡをコードする遺伝子は、第１３染色体に存在すると考えら
れている。したがって、本発明に関連するポリヌクレオチドは、第１３染色体に
対する連鎖分析におけるマーカーとして有用である。
【０１４８】 本発明の好ましいポリペプチドは、以下のような残基として配列番号２８に示
される、１、２、３、４または５つ全ての免疫原性エピトープを含むか、あるい
はこれらからなる：Ｈｉｓ−１〜Ｔｈｒ−８、Ｖａｌ−１１〜Ｔｙｒ−２０、Ｌ
ｙｓ−８９〜Ａｒｇ−１０５、Ｇｌｎ−１２４〜Ｈｉｓ１３１、およびＧｌｎ−
１４７〜Ｓｅｒ−１７０。これらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチド
はまた、これらのポリペプチドの１つ以上に結合する抗体と同様に、本発明に含
まれる。さらに、これらのポリペプチドのフラグメントおよび改変体（例えば，
本明細書中で記載されるフラグメント、これらのポリペプチドおよび、これらの
ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、またはこれらの相補体に対して、
ストリンジェントな条件下で、ハイブリダイズするポリヌクレオチドによってコ
ードされるポリペプチド、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％
、９７％、９８％または９９％同一であるポリペプチド）は、本発明に含まれる
。本発明のこれらのフラグメントにおよび改変体に結合する抗体はまた、本発明
に含まれる。これらのフラグメントおよび改変体をコードするポリヌクレオチド
はまた、本発明に含まれる。
【０１４９】 この遺伝子は、生殖系組織、筋骨格系組織、免疫系組織、および消化器系組織
で幅広く発現される。
【０１５０】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、生
物学的試料中に存在する組織または細胞型の示差的同定のため、ならびに、生殖
系、免疫系、筋骨格系または消化器系の細胞に関与する、接着、移動、および／
または増殖の障害を含むが、これらに限定されない疾患および状態の診断のため
の試薬として有用である。同様に、ポリペプチドおよびこれらのポリペプチドに
対する抗体は、組織または細胞型の示差的同定のための免疫学的プローブを提供
することに有用である。上記組織または細胞の多くの障害、特に免疫系、生殖系
、筋骨格系および消化器系の多くの障害について、標準的な遺伝子発現レベル、
すなわち、障害を有さない個体からの健常組織または体液中の発現レベルに対し
て有意により高いまたはより低いレベルのこの遺伝子の発現が、特定の組織また
は細胞型（例えば、免疫組織、生殖組織、消化器組織、筋骨格組織、癌性組織お
よび創傷組織）または体液（例えば、リンパ、血清、血漿、尿、滑液および髄液
）またはこのような障害を有する個体から採取された別の組織もしくは細胞試料
中で慣用的に検出され得る。
【０１５１】 この組織分布およびダウン症候群細胞接着分子に対する相同性が、これらの遺
伝子に対応する、ポリヌクレオチド、転写産物および抗体が、細胞接着、細胞増
殖、もしくは細胞移動に関連する疾患および／または障害（例えば、炎症、創傷
治癒、悪性転移、微生物付着、および血栓症）の診断、予後、予防、および／ま
たは処置について有用である。この遺伝子に対応する、ポリヌクレオチド、転写
産物および抗体は、これらが免疫系、消化器系、生殖系、および／または筋骨格
系に関与する場合、上に列挙した疾患の処置について特に有用であり得る。
【０１５２】 この遺伝子の翻訳産物、ならびにこの遺伝子の転写産物に対する抗体は、上に
列挙した組織に対する腫瘍マーカーおよび／または免疫療法標的としての有用性
を示し得る。
【０１５３】 （遺伝子番号１３によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、神経堤および硬節性細胞の移動ならびに骨格の形成
に関連すると考えられる、テネイシン−Ｗタンパク質と配列相同性を有する（ジ
ーンバンク登録番号ＣＡＡ０４７５５を参照のこと）。このタンパク質は、フィ
ブロネクチンファミリーのタンパク質の新規のメンバーであると考えられ、そし
て相同性に基づいて、この遺伝子の翻訳産物は、このファミリーのタンパク質の
他のメンバーと類似の生物学性質を共有することが予期される。
【０１５４】 開示されたｃＤＮＡをコードする遺伝子は、第１染色体に存在すると考えられ
る。従って、本発明に関するポリヌクレオチドは、第１染色体の連鎖分析におけ
るマーカーとして有用である。
【０１５５】 本発明の好ましいポリペプチドは、配列番号２９において残基：Ｈｉｓ−１７
〜Ｌｅｕ−２７、Ｐｒｏ−３０〜Ｓｅｒ−４０、Ｉｌｅ−６２〜Ａｒｇ−６９お
よびＧｌｙ−７４〜Ｌｅｕ−８０として示される１、２、３または４つ全ての免
疫原性エピトープを含むまたは、あるいはこれらからなる。これらのポリペプチ
ドをコードするポリヌクレオチドもまた、１つ以上のこれらのポリペプチドに結
合する抗体が本発明により含まれるように、本発明に含まれる。さらに、これら
のポリペプチドのフラグメントおよび改変体（例えば、本明細書に記載されるよ
うなフラグメント、これらのポリペプチドに少なくとも８０％、８５％、９０％
、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一なポリペプチド、およびこ
れらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに、ストリンジェントな条件
下で、ハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド）
が本発明により包含される。本発明のフラグメントおよび改変体に結合する抗体
はまた、本発明に含まれる。これらフラグメントおよび改変体をコードするポリ
ヌクレオチドもまた本発明に包含される。
【０１５６】 この遺伝子は、軟骨肉腫および胎児組織において発現される。
【０１５７】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチドは、生物学的サンプル
中に存在する組織または細胞型の示差的同定のため、ならびに骨格系および軟骨
および軟骨組織の癌を含む、骨格系の発達に関する疾患および／または障害を含
むがそれらに限定されない疾患および状態の診断のための試薬として有用である
。同様に、ポリペプチドおよびこれらのポリペプチドに対する抗体は、組織また
は細胞型の示差的同定のための免疫学的プローブの提供に有用である。上記組織
または細胞、特に骨格系の多数の障害に関して、標準の遺伝子発現レベル（すな
わち、その障害を有さない個体由来の健常組織または体液中の発現レベル）に対
して有意により高いか、またはより低いレベルのこの遺伝子の発現が、このよう
な障害を有する個体から採取された特定の組織もしくは細胞型（例えば、骨格組
織、癌性組織および創傷組織）または体液（例えば、リンパ、血清、血漿、尿、
滑液および髄液）、または別の組織もしくは細胞サンプルの中で、慣用的に検出
され得る。
【０１５８】 軟骨肉腫および胎児組織における組織分布、およびテネイシン−Ｗとの相同性
は、骨格系（それらの発達障害および癌（例えば、軟骨肉腫）を含む）の疾患お
よび／または障害の診断、予測、予防および／または処置に有用であるこの遺伝
子に対応するポリヌクレオチド、翻訳産物および抗体を示す。
【０１５９】 この遺伝子に対応するポリヌクレオチド、翻訳産物および抗体は、骨格系（特
に、骨粗鬆症および結合組織を冒す障害（例えば、関節炎、外傷、腱炎、軟骨軟
化症（ｃｈｒｏｎｄｏｍａｌａｃｉａ）および炎症）を冒す疾患および／または
障害、例えば、慢性関節リウマチ、狼瘡、強皮症、および皮膚筋炎ならびに小人
症、骨髄変形、および特異的な関節異常ならびに軟骨形成不全症（すなわち、先
天性脊椎骨端形成異常、家族性関節炎、ＩＩ型骨形成不全症（Ａｔｅｌｏｓｔｅ
ｏｇｅｎｅｓｉｓ ｔｙｐｅ ＩＩ）、Ｓｃｈｍｉｄ型骨幹端軟骨形成不全症）
の診断、予測、予防および／または処置に有用であり得る。
【０１６０】 この遺伝子の翻訳産物、およびこの遺伝子の翻訳産物に対して指向される抗体
は、上で列挙される組織に対する腫瘍マーカーおよび免疫療法の標的と示し得る
。
【０１６１】 （遺伝子番号１４によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、セリンカルボキシペプチダーゼファミリーのタンパ
ク質のメンバーと配列相同性を共有する。タンパク質のこのファミリーは、ホル
モン／サイトカインプロセシングおよび活性化、消化、新脈管形成、腫瘍形成、
血液凝固、ならびに外来分子、微生物、およびウイルスに対する防御に関与する
と考えられている。
【０１６２】 開示されたｃＤＮＡをコードする遺伝子は、第２０染色体に存在すると考えら
れる。従って、本発明に関するポリヌクレオチドは、第２０染色体の連鎖分析に
おけるマーカーとして有用である。
【０１６３】 本発明の好ましいポリペプチドは、配列番号３０において残基：Ｐｒｏ−１０
〜Ｌｙｓ−２５、Ｇｌｎ−３３〜Ｓｅｒ−３９、Ａｒｇ−４４〜Ａｒｇ−５５、
Ｌｙｓ−６７〜Ｔｈｒ−７５、Ａｌａ−７７〜Ｔｈｒ−９１、Ｇｌｙ−９３〜Ｃ
ｙｓ−１０１、Ｇｌｕ−から１１４〜Ｐｒｏ−１２６、Ｌｙｓ−１３７〜Ｓｅｒ
−１７１、Ａｓｎ−１７６〜Ｐｒｏ−１８８、およびＡｓｎ−２００〜Ｇｌｎ−
２１７として示される１、２、３、４または５つ以上の免疫原性エピトープを含
むまたは、あるいはこれらからなる。これらのポリペプチドをコードするポリヌ
クレオチドもまた、１つ以上のこれらのポリペプチドに結合する抗体が本発明に
より含まれるように、本発明に含まれる。さらに、これらのポリペプチドのフラ
グメントおよび改変体（例えば、本明細書に記載されるようなフラグメント、こ
れらのポリペプチドに少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９
７％、９８％または９９％同一なポリペプチド、およびこれらのポリペプチドを
コードするポリヌクレオチドに、ストリンジェントな条件下で、ハイブリダイズ
するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド）が本発明により包含さ
れる。本発明のフラグメントおよび改変体に結合する抗体はまた、本発明に含ま
れる。これらフラグメントおよび改変体をコードするポリヌクレオチドもまた本
発明に包含される。
【０１６４】 この遺伝子は、脊髄組織、前頭皮質、髄質、視床下部、側頭皮質および黒質の
ような中枢神経系組織に、ならびに分裂病疾患の、アルツハイマー病および癲癇
性の脳において発現される。
【０１６５】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチドは、生物学的サンプル
中に存在する中枢神経系組織または細胞型の示差的同定のため、ならびに中枢神
経系の疾患および／または障害を含むがそれらに限定されない疾患および状態の
診断のための試薬として有用である。同様に、ポリペプチドおよびこれらのポリ
ペプチドに対する抗体は、組織または細胞型の示差的同定のための免疫学的プロ
ーブの提供に有用である。上記組織または細胞、特に中枢神経系の障害に関して
、標準の遺伝子発現レベル（すなわち、その障害を有さない個体由来の健常組織
または体液中の発現レベル）に対して有意により高いか、またはより低いレベル
のこの遺伝子の発現が、このような障害を有する個体から採取された特定の組織
もしくは細胞型（例えば、中枢神経系組織、癌性組織および創傷組織）または体
液（例えば、リンパ、血清、血漿、尿、滑液および髄液）、または別の組織もし
くは細胞サンプルの中で、慣用的に検出され得る。
【０１６６】 中枢神経系の組織における組織分布は、この遺伝子に対応するポリヌクレオチ
ド、翻訳産物および抗体が、中枢神経系の疾患および／または障害の診断、予測
、予防および／または処置に有用であることを示す。特に、この遺伝子に対応す
るポリヌクレオチド、翻訳産物および抗体は、アルツハイマー病、パーキンソン
病、ハンティングトン病、ツレット症候群、精神分裂病、ＡＬＳ、精神病のよう
なおよび／または本明細書中に記載される「Ｎｅｕｒａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ
ａｎｄ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ Ｄｉｓｅａｓｅｓ」のような神経変性疾患
状態および行動障害の検出／処置のために有用である。脳内でのこの遺伝子産物
の発現の上昇は、ニューロンの生存；シナプス形成；伝達；および／またはニュ
ーロンの分化に関連に関連し得ることを示唆する。このような関与は、多くのプ
ロセス（例えば、学習および認知）に影響を与え得る。さらに、この遺伝子また
は遺伝子産物はまた、発生中の胚に関連する発生障害または性に関連する障害の
処置および／または検出の役割を担い得る。
【０１６７】 この遺伝子の翻訳産物ならびにこの遺伝子の翻訳産物に対する抗体は、上記に
列挙された組織の腫瘍マーカーおよび／または免疫療法標的としての有用性を示
し得る。
【０１６８】 （遺伝子番号１５によってコードされるタンパク質の特徴） この遺伝子の翻訳産物は、性腺刺激ホルモン放出ホルモンファミリーのタンパ
ク質のメンバーと配列相同性を共有する。このファミリーのタンパク質は、下垂
体に作用して、黄体化ホルモンおよび卵胞刺激ホルモンの合成および分泌を刺激
すると考えられる。このファミリーの代表的なメンバーは、性腺刺激ホルモン放
出ホルモンを含む。
【０１６９】 本発明の好ましいポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を含むか、またはある
いはこれからなる：ＱＬＶＳＨＡＱＰＲＧ（配列番号３５）。これらのポリペプ
チドをコードするポリヌクレオチドもまた、１つ以上のこれらのポリペプチドに
結合する抗体が本発明により含まれるように、本発明に含まれる。さらに、これ
らのポリペプチドのフラグメントおよび改変体（例えば、本明細書に記載される
ようなフラグメント、これらのポリペプチドに少なくとも８０％、８５％、９０
％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一なポリペプチド、および
これらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに、ストリンジェントな条
件下で、ハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド
）が本発明により包含される。本発明のフラグメントおよび改変体に結合する抗
体はまた、本発明に含まれる。これらフラグメントおよび改変体をコードするポ
リヌクレオチドもまた本発明に包含される。
【０１７０】 開示されたｃＤＮＡをコードする遺伝子は、第２染色体に存在すると考えられ
る。従って、本発明に関するポリヌクレオチドは、第２染色体の連鎖分析におけ
るマーカーとして有用である。
【０１７１】 本発明の好ましいポリペプチドは、配列番号３１において残基：Ｐｒｏ−１６
〜Ｐｒｏ−２１として示される免疫原性エピトープを含むまたは、あるいはこれ
らからなる。これらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドもまた、１つ
以上のこれらのポリペプチドに結合する抗体が本発明により含まれるように、本
発明に含まれる。さらに、これらのポリペプチドのフラグメントおよび改変体（
例えば、本明細書に記載されるようなフラグメント、これらのポリペプチドに少
なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９
％同一なポリペプチド、およびこれらのポリペプチドをコードするポリヌクレオ
チドに、ストリンジェントな条件下で、ハイブリダイズするポリヌクレオチドに
よりコードされるポリペプチド）が本発明により包含される。本発明のフラグメ
ントおよび改変体に結合する抗体はまた、本発明に含まれる。これらフラグメン
トおよび改変体をコードするポリヌクレオチドもまた本発明に包含される。
【０１７２】 この遺伝子は、胎児脳組織および成体脳組織（視床下部、扁桃、黒質および脊
髄、ならびに多発性硬化症を含む）において発現される。
【０１７３】 従って、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチドは、生物学的サンプル
中に存在する神経組織または細胞型の示差的同定のため、ならびに神経系の疾患
および／または障害を含むがそれらに限定されない疾患および状態の診断のため
の試薬として有用である。同様に、ポリペプチドおよびこれらのポリペプチドに
対する抗体は、組織または細胞型の示差的同定のための免疫学的プローブの提供
に有用である。上記組織または細胞、特に神経系の障害に関して、標準の遺伝子
発現レベル（すなわち、その障害を有さない個体由来の健常組織または体液中の
発現レベル）に対して有意により高いか、またはより低いレベルのこの遺伝子の
発現が、このような障害を有する個体から採取された特定の組織もしくは細胞型
（例えば、神経組織、癌性組織および創傷組織）または体液（例えば、リンパ、
血清、血漿、尿、滑液および髄液）、または別の組織もしくは細胞サンプルの中
で、慣用的に検出され得る。
【０１７４】 中枢神経系の組織における組織分布は、この遺伝子に対応するポリヌクレオチ
ド、翻訳産物および抗体が、中枢神経系の疾患および／または障害の診断、予測
、予防および／または処置に有用であることを示す。特に、この遺伝子に対応す
るポリヌクレオチド、翻訳産物および抗体は、アルツハイマー病、パーキンソン
病、ハンティングトン病、ツレット症候群、精神分裂病、ＡＬＳ、精神病のよう
なおよび／または本明細書中に記載される「Ｎｅｕｒａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ
ａｎｄ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ Ｄｉｓｅａｓｅｓ」のような神経変性疾患
状態および行動障害の検出／処置のために有用である。脳内でのこの遺伝子産物
の発現の上昇は、ニューロンの生存；シナプス形成；伝達；および／またはニュ
ーロンの分化に関連に関連し得ることを示唆する。このような関与は、多くのプ
ロセス（例えば、学習および認知）に影響を与え得る。さらに、この遺伝子また
は遺伝子産物はまた、発生中の胚に関連する発生障害または性に関連する障害の
処置および／または検出の役割を担い得る。
【０１７５】 この遺伝子の翻訳産物ならびにこの遺伝子の翻訳産物に対する抗体は、上記に
列挙された組織の腫瘍マーカーおよび／または免疫療法標的としての有用性を示
し得る。
【０１７６】
【表１】 表１は、上記の各「遺伝子番号（Ｇｅｎｅ Ｎｏ．：）」に対応する情報を要
約する。「ヌクレオチド配列番号Ｘ（ＮＴ ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：Ｘ）」として
同定されるヌクレオチド配列は、表１において同定される「ｃＤＮＡクローン番
号Ｖ（ｃＤＮＡ ｃｌｏｎｅ ＩＤ ＮＯ：Ｖ）」から、およびいくつかの場合
において、さらなる関連のＤＮＡクローンから得られる、部分的に相同な（「重
複する」）配列から構築された。重複する配列は、高い冗長性の単一の連続した
配列に構築され（通常、各ヌクレオチド位置で３〜５個の重複する配列）、配列
番号Ｘとして同定される最終的な配列を得た。
【０１７７】 ｃＤＮＡクローンＩＤは、その日付に寄託され、そして「ＡＴＣＣ受託番号Ｚ
および日付」において列挙される対応する受託番号が与えられた。寄託物のいく
つかは、同じ遺伝子に対応する複数の異なるクローンを含む。「ベクター」は、
ｃＤＮＡクローンＩＤにおいて含まれるベクターの型をいう。
【０１７８】 「総ヌクレオチド配列」は、「遺伝子番号」によって同定されるコンティグに
おけるヌクレオチドの総数をいう。寄託されたプラスミドは、これらの配列の全
てを含み得、この配列は、配列番号Ｘの「クローン配列の５’ヌクレオチド」お
よび「クローン配列の３’ヌクレオチド」として示されるヌクレオチドの位置に
よって反映される。推定メチオニン開始コドンの配列番号Ｘのヌクレオチドの位
置は（存在する場合）、「開始コドンの５’ヌクレオチド」として同定される。
同様に、推定シグナル配列の配列番号Ｘのヌクレオチドの位置は（存在する場合
）、「シグナルペプチドの第一のアミノ酸の５’ヌクレオチド」として同定され
る。
【０１７９】 翻訳されたアミノ酸配列は、ポリヌクレオチド配列の第１翻訳コドンで始まり
、「アミノ酸配列番号Ｙ」として同定されるが、他のリーディングフレームもま
た、公知の分子生物学技術を使用して容易に翻訳され得る。これらの代替的オー
プンリーディングフレームによって産生されるポリペプチドは、本発明によって
具体的に意図される。
【０１８０】 配列番号Ｘ（ここで、Ｘは、配列表に開示されたポリヌクレオチド配列のいず
れかであり得る）および翻訳される配列番号Ｙ（ここで、Ｙは、配列表に開示さ
れたポリペプチド配列のいずれかであり得る）は、十分に正確であり、そしてそ
うでなければ、当該分野において周知でありかつ以下でさらに記載される種々の
使用に適切である。例えば、配列番号Ｘは、配列番号Ｘにおいて含まれる核酸配
列または寄託されたプラスミドに含まれるｃＤＮＡを検出する核酸ハイブリダイ
ゼーションプローブを設計することを含む使用を有するが、これらに限定されな
い。これらのプローブはまた、生物学的サンプル中の核酸分子にハイブリダイズ
し、それによって本発明の種々の法医学の方法、および診断の方法を可能にする
。同様に、配列番号Ｙから同定されるポリぺプチドは、表１において同定された
ｃＤＮＡクローンによりコードされる分泌タンパク質に特異的に結合する抗体を
産生することを含むが、これらに限定されない使用を有する。
【０１８１】 それにもかかわらず、配列決定反応によって生じるＤＮＡ配列は、配列決定の
エラーを含み得る。エラーは、誤って同定されたヌクレオチドとして、または生
じたＤＮＡ配列におけるヌクレオチドの挿入または欠失として存在する。誤って
挿入されたか、または欠失されたヌクレオチドは、推定アミノ酸配列のリーディ
ングフレームにおいてフレームシフトを引き起こす。これらの場合において、生
じたＤＮＡ配列は、実際のＤＮＡ配列と９９．９％（例えば、１０００塩基を超
えるオープンリーディングフレームにおける１塩基の挿入または欠失）を超えて
同一であり得るにもかかわらず、推定アミノ酸配列は、実際のアミノ酸配列とは
異なる。
【０１８２】 従って、ヌクレオチド配列またはアミノ酸配列における正確さを必要とするこ
れらの適用のために、本発明は、配列番号Ｘとして同定された作製されたヌクレ
オチド配列、および配列番号Ｙとして同定された推定の翻訳されたアミノ酸配列
のみではなく、表１において記載されるような、ＡＴＣＣに寄託された本発明の
ヒトｃＤＮＡを含むプラスミドＤＮＡのサンプルもまた提供する。各々の寄託さ
れたプラスミドのヌクレオチド配列は、公知の方法に従って、寄託されたプラス
ミドの配列決定により容易に決定され得る。
【０１８３】 次いで、推定アミノ酸配列は、このような寄託物から証明され得る。さらに、
特定のプラスミドによりコードされるタンパク質のアミノ酸配列はまた、ペプチ
ド配列決定により、または寄託されたヒトｃＤＮＡを含む適切な宿主細胞中でタ
ンパク質を発現し、このタンパク質を収集し、そしてその配列を決定することに
より、直接的に決定され得る。
【０１８４】 また、ｃＤＮＡプラスミドを含むベクターの名前を表１に提供する。各ベクタ
ーは、当該分野において、慣用的に使用される。以下のさらなる情報は、利便性
のために提供される。
【０１８５】 ベクターＬａｍｂｄａ Ｚａｐ（米国特許第５，１２８，２５６号および同第
５，２８６，６３６号）、Ｕｎｉ−Ｚａｐ ＸＲ（米国特許第５，１２８，２５
６号および同第５，２８６，６３６号）、Ｚａｐ Ｅｘｐｒｅｓｓ（米国特許第
５，１２８，２５６号および同第５，２８６，６３６号）、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉ
ｐｔ（ｐＢＳ）（Ｓｈｏｒｔ，Ｊ．Ｍ．ら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅ
ｓ． １６：７５８３−７６００（１９８８）；Ａｌｔｉｎｇ−Ｍｅｅｓ，Ｍ．
Ａ．およびＳｈｏｒｔ，Ｊ．Ｍ．、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． １
７：９４９４（１９８９））ならびにｐＢＫ（Ａｌｔｉｎｇ−Ｍｅｅｓ，Ｍ．Ａ
．ら、Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ５：５８−６１（１９９２））は、Ｓｔｒａｔａ
ｇｅｎｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．、１１０１１ Ｎ．Ｔｏ
ｒｒｅｙ Ｐｉｎｅｓ Ｒｏａｄ、Ｌａ Ｊｏｌｌａ，ＣＡ，９２０３７から市
販されている。ｐＢＳは、アンピシリン耐性遺伝子を含み、そしてｐＢＫはネオ
マイシン耐性遺伝子を含む。ファージミドｐＢＳは、λＺａｐベクターおよびＵ
ｎｉ−Ｚａｐ ＸＲベクターから切り出され得、そしてファージミドｐＢＫは、
Ｚａｐ発現ベクターから切り出され得る。両方のファージミドは、Ｅ．ｃｏｌｉ
株ＸＬ−１ Ｂｌｕｅ（これもまた、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅから入手可能である
）に形質転換され得る。
【０１８６】 ベクターｐＳｐｏｒｔ１、ｐＣＭＶＳｐｏｒｔ １．０、ｐＣＭＶＳｐｏｒｔ
２．０およびｐＣＭＶＳｐｏｒｔ３．０は、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉ
ｅｓ、Ｉｎｃ．、Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ ６００９、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ ２０８９７から得られた。全てのＳｐｏｒｔベクターはアンピシリン耐性遺伝
子を含み、そしてＥ．ｃｏｌｉ株ＤＨ１０Ｂ（これもまた、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈ
ｎｏｌｏｇｉｅｓから入手可能である）に形質転換され得る。例えば、Ｇｒｕｂ
ｅｒ，Ｃ．Ｅ．ら、Ｆｏｃｕｓ １５：５９（１９９３）を参照のこと。ベクタ
ーｌａｆｍｉｄ ＢＡ（Ｂｅｎｔｏ Ｓｏａｒｅｓ、Ｃｏｌｕｍｂｉａ Ｕｎｉ
ｖｅｒｓｉｔｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ）は、アンピシリン耐性遺伝子を含み
、そしてＥ．ｃｏｌｉ株ＸＬ−１ Ｂｌｕｅに形質転換され得る。ベクターｐＣ
Ｒ（登録商標）２．１（これはＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１６００ Ｆａｒａｄａ
ｙ Ａｖｅｎｕｅ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ ９２００８から入手可能である）
は、アンピシリン耐性遺伝子を含み、そしてＥ．ｃｏｌｉ株ＤＨ１０Ｂ（Ｌｉｆ
ｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから入手可能である）に形質転換され得る。例え
ば、Ｃｌａｒｋ，Ｊ．Ｍ．、Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１６：９６７７−９
６８６（１９８８）およびＭｅａｄ，Ｄ．ら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
９：（１９９１）を参照のこと。
【０１８７】 本発明はまた、配列番号Ｘ、配列番号Ｙ、および／または寄託されたプラスミ
ド（ｃＤＮＡプラスミドＶ）に対応する遺伝子に関する。対応する遺伝子は、本
明細書中に開示される配列情報を使用して、公知の方法に従って単離され得る。
このような方法は、開示された配列からプローブまたはプライマーを調製する工
程、およびゲノム物質の適切な供給源から対応する遺伝子を同定または増幅する
工程を包含するが、これらに限定されない。
【０１８８】 本発明においてまた提供されるものは、対立遺伝子改変体、オルソログ（ｏｒ
ｔｈｏｌｏｇ）、および／または種相同体である。当該分野において公知である
手順は、本明細書中で開示された配列またはＡＴＣＣに寄託されたクローンから
の情報を用いて、配列番号Ｘ、配列番号Ｙ、および／またはｃＤＮＡプラスミド
Ｖに対応する遺伝子の全長遺伝子、対立遺伝子改変体、スプライス改変体、全長
コード部分、オルソログ、および／または種相同体を得るために使用され得る。
例えば、対立遺伝子改変体および／または種相同体は、本明細書中に提供される
配列から適切なプローブまたはプライマーを作製し、そして対立遺伝子改変体お
よび／または所望の相同体について適切な核酸供給源をスクリーニングすること
により単離および同定され得る。
【０１８９】 本発明は、配列番号Ｘの核酸配列および／またはｃＤＮＡプラスミドＶを含む
か、あるいはこれらからなるポリヌクレオチドを提供する。本発明はまた、配列
番号Ｙのポリペプチド配列、配列番号Ｘによりコードされるポリペプチド、およ
び／またはｃＤＮＡプラスミドＶ中のｃＤＮＡによりコードされるポリペプチド
を含むか、あるいはこれらからなるポリペプチドを提供する。配列番号Ｙのポリ
ペプチド配列、配列番号Ｘによりコードされるポリペプチド、および／またはｃ
ＤＮＡプラスミドＶ中のｃＤＮＡによりコードされるポリペプチドを含むか、あ
るいはこれらからなるポリペプチドをコードするポリヌクレオチドはまた、本発
明により包含される。本発明はさらに、配列番号Ｘの核酸配列の相補体、および
／またはｃＤＮＡプラスミドＶ中のｃＤＮＡのコード鎖の相補体を含むか、ある
いはこれらからなるポリヌクレオチドを包含する。
【０１９０】 多くのポリヌクレオチド配列（例えば、ＥＳＴ配列）は、公に利用可能であり
、そして配列データベースを通してアクセス可能であり、そして本発明の着想の
前に公に利用可能であったかもしれない。好ましくは、このような関連するポリ
ヌクレオチドは、本発明の範囲から特に除外される。全ての関連配列を列挙する
ことは、本出願の開示では非常に煩わしい。従って、好ましくは、配列番号Ｘか
ら、一般式ａ−ｂにより記載されるヌクレオチド配列（ここで、ａは配列番号Ｘ
の１と配列番号Ｘの最終ヌクレオチド−１５との間の任意の整数であり、ｂは１
５〜配列番号Ｘの最終ヌクレオチドの整数であり、ここでａおよびｂの両方は配
列番号Ｘに示されるヌクレオチド残基の位置に対応し、そしてここでｂはａ＋１
４以上である）を含む１つ以上のポリヌクレオチドが除外される。
【０１９１】 （全長遺伝子の回収のためのＲＡＣＥプロトコル） 部分的ｃＤＮＡクローンは、Ｆｒｏｈｍａｎ，Ｍ．Ａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’
ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８５：８９９８−９００２（１９８８）に記載
されたｃＤＮＡ末端の高速増幅（ＲＡＣＥ）手順を利用することにより全長を作
製し得る。５’末端または３’末端のいずれかが欠失しているｃＤＮＡクローン
は、翻訳の開始コドンまたは終止コドンのそれぞれに伸長する欠失塩基対を含む
ように再構築され得る。いくつかの場合において、ｃＤＮＡは、そのために翻訳
の開始を欠失している。以下に、この本来の５’ＲＡＣＥ手順の改変を簡単に記
載する。ポリＡ＋または全ＲＮＡを、Ｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔ ＩＩ（Ｇｉｂｃ
ｏ／ＢＲＬ）およびｃＤＮＡ配列に特異的なアンチセンスプライマーまたは相補
的プライマーを用いて逆転写する。そのプライマーを、Ｍｉｃｒｏｃｏｎ Ｃｏ
ｎｃｅｎｔｒａｔｏｒ（Ａｍｉｃｏｎ）を用いて反応から除去する。次いで、第
１鎖ｃＤＮＡを、ｄＡＴＰおよび末端デオキシヌクレオチドトランスフェラーゼ
（Ｇｉｂｃｏ／ＢＲＬ）を用いて、添付する。このように、アンカー配列を産生
し、これは、ＰＣＲ増幅のために必要である。第２鎖をｄＡ−テイル含有ＰＣＲ
緩衝液、ＴａｑＤＮＡポリメラーゼ（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ Ｃｅｔｕｓ）
、５’末端で３つの隣接制限部位（ＸｈｏＩ、ＳａｌＩおよびＣｌａＩ）を含む
オリゴｄＴプライマーならびにこれらの制限部位を正しく含むプライマーから合
成する。この２本鎖ｃＤＮＡを同じプライマーならびにネスティッドｃＤＮＡ特
異的アンチセンスプライマーを用いて４０サイクルでＰＣＲ増幅する。このＰＣ
Ｒ産物を、エチジウムブロマイドアガロースゲル上でサイズ分離し、そして欠失
しているタンパク質コードＤＮＡの推定サイズのｃＤＮＡ産物を含むゲルの領域
を取り出す。ｃＤＮＡをＭａｇｉｃ ＰＣＲ Ｐｒｅｐ ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇ
ａ）を用いてアガロースゲルから精製し、ＸｈｏＩまたはＳａｌＩを用いて制限
消化し、そしてプラスミド（例えば、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫＩＩ（Ｓｔ
ｒａｔａｇｅｎｅ））にＸｈｏＩ部位およびＥｃｏＲＶ部位で連結する。このＤ
ＮＡを細菌に形質転換し、そしてこのプラスミドクローンを配列決定して、正確
なタンパク質コード挿入物を同定する。正確な５’末端を、この配列を推定的に
同定された相同体と、そして重複を部分的ｃＤＮＡクローンと比較することによ
り確認する。当該分野において公知の同様の方法および／または市販のキットを
使用して、増幅し、そして３’末端を回収する。
【０１９２】 いくつかの、品質制御キットが購入のために市販されている。上記のそれらと
同様の試薬および方法は、全長遺伝子を回収をするための５’ ＲＡＣＥおよび
３’ＲＡＣＥの両方について、Ｇｉｂｃｏ／ＢＲＬからキットの形態で供給され
る。第２のキットは、Ｃｌｏｎｔｅｃｈから入手可能である。このキットは、Ｄ
ｕｍａｓら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，１９：５２２７−３２（
１９９１）により開発された、関連技術の改変（ＳＬＩＣ（一本鎖ｃＤＮＡへの
、一本鎖の連結））である。手順における主な違いは、ＲＮＡを、逆転写後にア
ルカリ加水分解し、そしてＲＮＡリガーゼを使用して、第１鎖ｃＤＮＡに、制限
部位を含むアンカープライマーを連結することである。これは、過去に配列決定
をするのが困難なポリＴの伸長を生じるｄＡテーリング反応における必要性を除
去する。
【０１９３】 ＲＮＡからの５’ｃＤＮＡまたは３’ｃＤＮＡを産生する代替法は、ｃＤＮＡ
ライブラリー二本鎖ＤＮＡを使用することである。非対称性ＰＣＲ増幅アンチセ
ンスｃＤＮＡ鎖を、アンチセンスｃＤＮＡ特異的プライマーおよびプラスミドア
ンカープライマーを用いて合成する。これらのプライマーを除去し、そして対称
ＰＣＲ反応を、ネストしたｃＤＮＡ特異的アンチセンスプライマーおよびプラス
ミドアンカープライマーを用いて実施する。
【０１９４】 （５’末端配列または３’末端配列を産生し、全長遺伝子を得るための、ＲＮ
Ａリガーゼのプロトコル） 一旦、目的の遺伝子が同定されると、本来のｃＤＮＡプラスミド中には存在し
ないかもしれない遺伝子の５’部分または３’部分の同定のためのいくつかの方
法が利用可能である。これらの方法は、以下を含むがこれらに限定されない：フ
ィルタープローブ探索、特異的プローブを使用するクローン富化、５’ ＲＡＣ
Ｅおよび３’ＲＡＣＥと類似および同一のプロトコル。全長遺伝子は、ライブラ
リー中に存在し得、そして探索によって同定され得るが、一方、５’末端または
３’末端を生成するために有用な方法は、欠けている情報を生成するために、本
来のｃＤＮＡからの既存の配列情報を、使用することである。５’ＲＡＣＥに類
似する方法は、所望の全長遺伝子の欠けている５’末端を生成するために利用可
能である（この方法は、Ｆｒｏｍｏｎｔ−Ｒａｃｉｎｅら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａ
ｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，２１（７）：１６８３−１６８４（１９９３）によって発
表された）。簡潔には、特定のＲＮＡオリゴヌクレオチドを、全長遺伝子ＲＮＡ
転写物をおそらく含むＲＮＡの集団の５’末端に連結し、そして連結されたＲＮ
Ａオリゴヌクレオチドに特異的なプライマーおよび目的の遺伝子の公知の配列に
特異的なプライマーを含むプライマーセットを使用して、所望の全長遺伝子の５
’部分をＰＣＲ増幅する。次いで、この増幅した産物を配列決定し、そしてこれ
を使用して全長遺伝子を生成し得る。この方法は、所望の供給源から単離された
総ＲＮＡを用いて開始し、この手順における必要条件ではないが、ポリＡ ＲＮ
Ａを使用し得る。次いで、ＲＮＡ調製物を、必要ならばホスファターゼで処理し
て、後のＲＮＡリガーゼ工程を妨害し得る分解または損傷ＲＮＡの５’リン酸基
を排除し得る。次いで、使用された場合、ホスファターゼを不活化し、そしてＲ
ＮＡを、メッセンジャーＲＮＡの５’末端に存在するキャップ構造を除去するた
めに、タバコ酸性ピロホスファターゼを用いて処理する。この反応は、キャップ
切断ＲＮＡの５’末端に、次いでＴ４ ＲＮＡリガーゼを用いてＲＮＡオリゴヌ
クレオチドに連結され得る５’リン酸基を残す。次いで、この改変型ＲＮＡ調製
物を、遺伝子特異的なオリゴヌクレオチドを用いる、第一鎖ｃＤＮＡ合成のため
のテンプレートとして使用し得る。次いで、第一鎖合成反応物を、連結されたＲ
ＮＡオリゴヌクレオチドに特異的なプライマーおよび目的のヒト遺伝子の公知の
配列に特異的なプライマーを用いる、所望の５’末端のＰＣＲ増幅のためのテン
プレートとして使用し得る。次いで、得られた生成物を配列決定し、そして分析
して５’末端配列が関連する遺伝子に属することを確認する。
【０１９５】 （ポリヌクレオチドフラグメントおよびポリペプチドフラグメント） 本発明はまた、本発明のポリヌクレオチド（核酸）の、ポリヌクレオチドフラ
グメントに関する。本発明において、「ポリヌクレオチドフラグメント」とは、
以下である核酸配列を有するポリヌクレオチドをいう：ｃＤＮＡプラスミドＶに
含まれるｃＤＮＡの一部か、もしくはｃＤＮＡプラスミドＶに含まれるｃＤＮＡ
によりコードされるポリペプチドをコードするｃＤＮＡの一部；配列番号Ｘもし
くはその相補鎖におけるポリヌクレオチド配列の一部；配列番号Ｙのポリペプチ
ドの一部をコードするポリヌクレオチド配列；あるいは配列番号Ｘによりコード
されるポリペプチドの一部をコードするポリヌクレオチド配列。本発明のヌクレ
オチドフラグメントは、好ましくは、少なくとも約１５ｎｔ、そしてより好まし
くは少なくとも約２０ｎｔ、なおより好ましくは少なくとも約３０ｎｔ、そして
さらにより好ましくは少なくとも約４０ｎｔ、少なくとも約５０ｎｔ、少なくと
も約７５ｎｔ、少なくとも約１００ｎｔ、少なくとも約１２５ｎｔ、または少な
くとも約１５０ｎｔの長さである。例えば、「少なくとも約２０ｎｔの長さ」の
フラグメントは、ｃＤＮＡプラスミドＶのｃＤＮＡ配列に含まれる配列または配
列番号Ｘもしくはその相補鎖に示されるヌクレオチド配列由来の２０以上の連続
する塩基を含むことが意図される。この文脈において「約（おおよそ）」は、特
に記載された値、あるいはそれより数個（５、４、３、２、または１）のヌクレ
オチドだけ大きいかまたは小さな値を含む。これらのヌクレオチドフラグメント
は、本明細書中で議論されるように、診断プローブおよびプライマーとしての使
用を含むが、それらに限定されない使用を有する。もちろん、より大きなフラグ
メント（例えば、少なくとも１５０、１７５、２００、２５０、５００、６００
、１０００または２０００のヌクレオチドの長さ）もまた、本発明に包含される
。
【０１９６】 さらに、本発明のポリヌクレオチドフラグメントの代表例としては、例えば、
配列番号Ｘ、またはその相補鎖の以下のおおよそのヌクレオチド数の配列を含む
か、あるいはそれらからなるフラグメントが挙げられる：１〜５０、５１〜１０
０、１０１〜１５０、１５１〜２００、２０１〜２５０、２５１〜３００、３０
１〜３５０、３５１〜４００、４０１〜４５０、４５１〜５００、５０１〜５５
０、５５１〜６００、６０１〜６５０、６５１〜７００、７０１〜７５０、７５
１〜８００、８０１〜８５０、８５１〜９００、９０１〜９５０、９５１〜１０
００、１００１〜１０５０、１０５１〜１１００、１１０１〜１１５０、１１５
１〜１２００、１２０１〜１２３１、１２０１〜１２５０、１２５１〜１３００
、１３０１〜１３５０、１３５１〜１４００、１４０１〜１４５０、１４５１〜
１５００、１５０１〜１５５０、１５５１〜１６００、１６０１〜１６５０、１
６５１〜１７００、１７０１〜１７５０、１７５１〜１８００、１８０１〜１８
５０、１８５１〜１９００、１９０１〜１９５０、１９５１〜２０００、２００
１〜２０５０、２０５１〜２１００、２１０１〜２１５０、２１５１〜２２００
、２２０１〜２２５０、２２５１〜２３００、２３０１〜２３５０、２３５１〜
２４００、２４０１〜２４５０、２４５１〜２５００、２５０１〜２５５０、２
５５１〜２６００、２６０１〜２６５０、２６５１〜２７００、２７０１〜２７
５０、２７５１〜２８００、２８０１〜２８５０、２８５１〜２９００、２９０
１〜２９５０、２９５１〜３０００および／または３００１〜３０２９。この文
脈において、「おおよそ（約）」は、特に記載された範囲、またはいずれかの末
端もしくは両方の末端において、これより数個（５、４、３、２、または１）の
ヌクレオチドだけ大きいか、または小さな範囲を含む。好ましくは、これらのフ
ラグメントは、その配列が一部であるポリヌクレオチドによりコードされるポリ
ペプチドの、機能的活性（例えば、生物学的活性）を有するポリペプチドをコー
ドする。より好ましくは、これらのフラグメントは、本明細書中で議論されるよ
うにプローブまたはプライマーとして使用され得る。ストリンジェントなハイブ
リダイゼーション条件下またはより低いストリンジェンシー条件下でこれらのフ
ラグメントの１つ以上にハイブリダイズするポリヌクレオチドもまた本発明に含
まれ、これらのポリヌクレオチドまたはフラグメントによりコードされるポリペ
プチドも同様に含まれる。
【０１９７】 さらに、本発明のポリヌクレオチドフラグメントの代表例としては、例えば、
ｃＤＮＡプラスミドＶに含まれるｃＤＮＡヌクレオチド配列、またはその相補鎖
の以下のおおよそのヌクレオチド数の配列を含むか、あるいはそれらからなるフ
ラグメントが挙げられる：１〜５０、５１〜１００、１０１〜１５０、１５１〜
２００、２０１〜２５０、２５１〜３００、３０１〜３５０、３５１〜４００、
４０１〜４５０、４５１〜５００、５０１〜５５０、５５１〜６００、６０１〜
６５０、６５１〜７００、７０１〜７５０、７５１〜８００、８０１〜８５０、
８５１〜９００、９０１〜９５０、９５１〜１０００、１００１〜１０５０、１
０５１〜１１００、１１０１〜１１５０、１１５１〜１２００、１２０１〜１２
５０、１２５１〜１３００、１３０１〜１３５０、１３５１〜１４００、１４０
１〜１４５０、１４５１〜１５００、１５０１〜１５５０、１５５１〜１６００
、１６０１〜１６５０、１６５１〜１７００、１７０１〜１７５０、１７５１〜
１８００、１８０１〜１８５０、１８５１〜１９００、１９０１〜１９５０、１
９５１〜２０００、２００１〜２０５０、２０５１〜２１００、２１０１〜２１
５０、２１５１〜２２００、２２０１〜２２５０、２２５１〜２３００、２３０
１〜２３５０、２３５１〜２４００、２４０１〜２４５０、２４５１〜２５００
、２５０１〜２５５０、２５５１〜２６００、２６０１〜２６５０、２６５１〜
２７００、２７０１〜２７５０、２７５１〜２８００、２８０１〜２８５０、２
８５１〜２９００、２９０１〜２９５０、２９５１〜３０００および／または３
００１〜３０２９。この文脈において、「おおよそ（約）」は、特に記載された
範囲、あるいはいずれかの末端もしくは両方の末端において、これより数個（５
、４、３、２、または１）のヌクレオチドだけ大きいか、または小さな範囲を含
む。好ましくは、これらのフラグメントは、ｃＤＮＡプラスミドＶに含まれるｃ
ＤＮＡヌクレオチド配列によってコードされるポリペプチドの機能的活性（例え
ば、生物学的活性）を有するポリペプチドをコードする。より好ましくは、これ
らのフラグメントは、本明細書中で議論されるように、プローブまたはプライマ
ーとして使用され得る。ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下また
はより低いストリンジェンシー条件下で１つ以上のこれらのフラグメントにハイ
ブリダイズするポリヌクレオチドもまた本発明に含まれ、これらのポリヌクレオ
チドまたはフラグメントによりコードされるポリペプチドもまた、含まれる。
【０１９８】 本発明において、「ポリペプチドフラグメント」とは、配列番号Ｙに含まれる
アミノ酸配列の一部、配列番号Ｘのポリヌクレオチド配列によってコードされる
アミノ酸配列の一部、および／またはｃＤＮＡプラスミドＶ中のｃＤＮＡによっ
てコードされるアミノ酸配列の一部であるアミノ酸配列をいう。タンパク質（ポ
リペプチド）フラグメントは、「自立構造（ｆｒｅｅ−ｓｔａｎｄｉｎｇ）」で
あり得るか、あるいはより大きなポリぺプチド（このフラグメントが、部分また
は領域（最も好ましくは単一の連続した領域として）を形成する）内に含まれ得
る。本発明のポリペプチドフラグメントの代表例としては、例えば、配列番号Ｙ
のコード領域の、以下のおおよそのアミノ酸数のアミノ酸配列を含むか、あるい
はそれらからなるフラグメントが挙げられる：１〜２０、２１〜４０、４１〜６
０、６１〜８０、８１〜１００、１０１〜１２０、１２１〜１４０、１４１〜１
６０、１６１〜１８０、１８１〜２００、２０１〜２２０、２２１〜２４０、２
４１〜２６０、２６１〜２８０、２８１〜３００、３０１〜３２０、３２１〜３
４０、３４１〜３６０、３６１〜３８０、３８１〜４００、４０１〜４２０、４
２１〜４４０、４４１〜４６０、４６１〜４８０、４８１〜５００、５０１〜５
２０、５２１〜５４０、５４１〜５６０、５６１〜５８０、５８１〜６００、６
０１〜６２０、６２１〜６４０および／または６４１〜６６１。さらに、本発明
のポリペプチドフラグメントは、少なくとも約１０、１５、２０、２５、３０、
３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、
１００、１１０、１２０、１３０、１４０、または１５０のアミノ酸の長さであ
り得る。この文脈において、「約（おおよそ）」とは、特に記載された範囲また
は値、あるいはいずれかの末端もしくは両方の末端において、これより数個（５
、４、３、２、または１）のアミノ酸だけ大きいかまたは小さな、範囲または値
を含む。これらのポリペプチドフラグメントをコードするポリヌクレオチドもま
た、本発明に含まれる。
【０１９９】 タンパク質のＮ末端からの１つ以上のアミノ酸の欠失が、タンパク質の１つ以
上の生物学的機能の損失の改変を生じるとしても、他の機能的活性（例えば、生
物学的活性、多量体化する能力、リガンドに結合する能力）は、なお保持され得
る。例えば、ポリペプチドの完全な形態または成熟形態を認識する抗体を誘導す
るおよび／または抗体に結合する、短縮型ムテインの能力は、完全なポリペプチ
ド、または成熟ポリペプチドの大部分より少ない残基が、Ｎ末端から除去される
場合には、一般的に保持される。完全なポリペプチドのＮ末端残基を欠く特定の
ポリペプチドが、このような免疫学的活性を保持するかどうかは、本明細書中に
記載される慣用的な方法、および当該分野において公知の別の方法によって容易
に決定され得る。多数の欠失したＮ末端アミノ酸残基を有するムテインは、いく
つかの生物学的活性または免疫原性活性を保持し得るようである。実際に、６つ
と同じくらい少ないアミノ酸残基からなるペプチドは、しばしば免疫応答を惹起
し得る。
【０２００】 従って、本発明のポリペプチドフラグメントとしては、分泌タンパク質および
成熟形態が挙げられる。さらに好ましいポリペプチドフラグメントとしては、ア
ミノ末端もしくはカルボキシ末端またはその両方から、連続した一連の欠失した
残基を有する分泌タンパク質、もしくは成熟形態が挙げられる。例えば、任意の
数のアミノ酸（１〜６０の範囲）は、分泌ポリペプチドもしくは成熟形態のいず
れかのアミノ末端から欠失され得る。同様に、任意の数のアミノ酸（１〜３０の
範囲）が、分泌タンパク質もしくは成熟形態のカルボキシ末端から欠失され得る
。さらに、上記のアミノ末端およびカルボキシ末端の欠失の任意の組み合わせは
好ましい。同様に、これらのポリペプチドフラグメントをコードするポリヌクレ
オチドもまた好ましい。
【０２０１】 本発明は、本明細書中で開示されるポリペプチド（例えば、配列番号Ｙのポリ
ペプチド、配列番号Ｘに含まれるポリヌクレオチド配列によりコードされるポリ
ペプチド、および／またはｃＤＮＡプラスミドＶに含まれるｃＤＮＡによりコー
ドされるポリペプチド）のアミノ酸配列のアミノ末端から、１つ以上の欠失した
残基を有するポリペプチドを、さらに提供する。特に、Ｎ末端の欠失は、一般式
ｍ−ｑによって記載され得、ここでｑは、本発明のポリペプチド（例えば、配列
番号Ｙに開示されるポリペプチド）におけるアミノ酸残基の総数を表す全整数で
あり、そしてｍは、２〜ｑ−６の範囲の任意の整数として定義される。これらの
ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド（フラグメントおよび／または改変
体を含む）もまた、本発明に含まれる。
【０２０２】 また、上記のように、タンパク質のＣ末端からの１つ以上のアミノ酸の欠失が
、このタンパク質の１つ以上の生物学的機能の損失の改変を生じるとしても、他
の機能的活性（例えば、生物学的活性、多量体化する能力、リガンドに結合する
能力）は、なお保持され得る。例えば、ポリペプチドの完全な形態または成熟形
態を認識する抗体を誘導するおよび／またはこの抗体に結合する、短縮型ムテイ
ンの能力は、完全なポリペプチド、または成熟ポリペプチドの大部分より少ない
残基が、Ｃ末端から除去される場合には、一般的に保持される。完全なポリペプ
チドのＣ末端残基を欠く特定のポリペプチドが、このような免疫学的活性を保持
するか否かは、本明細書中に記載される慣用的な方法、および当該分野において
公知の他の方法によって容易に決定され得る。多数の欠失したＣ末端アミノ酸残
基を有するムテインは、いくつかの生物学的活性または免疫原性活性を保持し得
るようである。実際に、６つと同じくらい少ないアミノ酸残基からなるペプチド
は、しばしば免疫応答を惹起し得る。
【０２０３】 従って、本発明は、本明細書中で開示されるポリペプチド（例えば、配列番号
Ｙのポリペプチド、配列番号Ｘに含まれるポリヌクレオチド配列によりコードさ
れるポリペプチド、および／またはｃＤＮＡプラスミドＶに含まれるｃＤＮＡに
よりコードされるポリペプチド）のアミノ酸配列のカルボキシ末端からの１つ以
上の残基を有するポリペプチドを、さらに提供する。特に、Ｃ末端の欠失は、一
般式１−ｎによって記載され得、ここでｎは、６〜ｑ−１の範囲の任意の全整数
であり、そしてここでｎは、本発明のポリペプチドにおけるアミノ酸残基の位置
に対応する。これらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチド（フラグメン
トおよび／または改変体を含む）もまた、本発明により含まれる。
【０２０４】 さらに、上記のＮ末端またはＣ末端の欠失のいずれかを組み合わせて、Ｎ末端
およびＣ末端欠失型ポリペプチドを産生し得る。本発明はまた、アミノ末端およ
びカルボキシ末端の両方から１つ以上の欠失したアミノ酸を有するポリペプチド
を提供する。このポリペプチドは、一般的に、配列番号Ｘ（例えば、好ましくは
配列番号Ｙとして開示されるポリペプチドを含むが、これに限定されない）およ
び／またはｃＤＮＡプラスミドＶ中のｃＤＮＡ、ならびに／あるいはそれらの相
補鎖によってコードされるポリペプチドの、残基ｍ−ｎを有する場合に記載され
得、ここでｎおよびｍは、上記のような整数である。これらのポリペプチドをコ
ードするポリヌクレオチド（フラグメントおよび／または改変体を含む）もまた
、本発明に含まれる。
【０２０５】 配列番号Ｙのポリペプチドに含まれる任意のポリペプチド配列、配列番号Ｘと
して記載されるポリヌクレオチド配列によってコードされる、任意のポリペプチ
ド配列、またはｃＤＮＡプラスミドＶ中のｃＤＮＡによってコードされる任意の
ポリペプチド配列は、そのポリペプチドの特定の好ましい領域を決定するために
、分析され得る。例えば、配列番号ＸまたはｃＤＮＡプラスミドＶ中のｃＤＮＡ
のポリヌクレオチド配列によってコードされるポリペプチドのアミノ酸配列は、
ＤＮＡＳＴＡＲコンピュータアルゴリズム（ＤＮＡＳＴＡＲ，Ｉｎｃ．，１２２
８ Ｓ．Ｐａｒｋ Ｓｔ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ ５３７１５ ＵＳＡ；ｈｔ
ｔｐ：／／ｗｗｗ．ｄｎａｓｔａｒ．ｃｏｍ／）のデフォルトパラメーターを使
用して、分析され得る。
【０２０６】 ＤＮＡＳＴＡＲコンピューターアルゴリズムを使用して慣用的に得られ得るポ
リペプチドの領域としては、以下が挙げられるが、それらに限定されない：Ｇａ
ｒｎｉｅｒ−Ｒｏｂｓｏｎのα−領域、β−領域、ターン領域、およびコイル領
域、Ｃｈｏｕ−Ｆａｓｍａｎのα−領域、β−領域、およびターン領域、Ｋｙｔ
ｅ−Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの親水性領域および疎水性領域、Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇの
α−両親媒性領域およびβ−両親媒性領域、Ｋａｒｐｌｕｓ−Ｓｃｈｕｌｚの可
撓性領域、Ｅｍｉｎｉの表面形成領域ならびに高い抗原性指標のＪａｍｅｓｏｎ
−Ｗｏｌｆの領域。この点で、本発明の非常に好ましいポリヌクレオチドの中に
、いくつかの構造的特徴（例えば、上記の特徴のいくつか（例えば、１、２、３
または４））と組み合わされる領域を含むポリペプチドをコードするポリヌクレ
オチドがある。
【０２０７】 さらに、Ｋｙｔｅ−Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ親水性領域および疎水性領域、Ｅｍｉ
ｎｉ表面形成領域、ならびに高い抗原性指標のＪａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆ領域（
すなわち、Ｊａｍｅｓｏｎ−Ｗｏｌｆプログラムのデフォルトパラメターを使用
して同定されるような、１．５以上の抗原性指標を有する、４つ以上の連続する
アミノ酸を含む）を慣用的に使用して、抗原性に対する高い程度の潜在性を表す
ポリペプチドの領域を決定し得る。高い抗原性の領域は、免疫応答の開始プロセ
スにおいて、抗原認識が生じ得る環境中のポリペプチドの表面上に曝されるよう
であるポリペプチドの領域を表す値を選択することによって、ＤＮＡＳＴＡＲ分
析によるデータから決定される。
【０２０８】 本発明の好ましいポリペプチドフラグメントは、そのアミノ酸配列がフラグメ
ントであるポリペプチド配列の、機能的活性（例えば、生物学的活性）を示すア
ミノ酸配列を含むか、またはあるいは、これらからなるフラグメントである。「
機能的活性」を示すポリペプチドとは、全長タンパク質と関連した１つ以上の公
知の機能的活性（例えば、前述のような、生物学的活性、抗原性、免疫原性、お
よび／または多量体化など）を示し得るポリペプチドを意味する。
【０２０９】 他の好ましいポリペプチドフラグメントは、生物学的に活性なフラグメントで
ある。生物学的に活性なフラグメントとは、本発明のポリペプチドの活性に対し
て、同一である必要はないが、類似する活性を示すフラグメントである。このフ
ラグメントの生物学的活性は、改善された所望の活性、または低下した望ましく
ない活性を含み得る。
【０２１０】 好ましい実施形態において、本発明のポリペプチドは、配列番号Ｙのポリペプ
チドの１、２、３、４、５以上の抗原性フラグメントか、またはその部分を含む
か、またはあるいはそれらからなる。これらのポリペプチドをコードするポリヌ
クレオチド（フラグメントおよび／または改変体を含む）もまた、本発明に含ま
れる。
【０２１１】 本発明は、以下のポリペプチドを含むか、またはあるいは以下からなるポリペ
プチドを含む：配列番号Ｙに示されるポリペプチド配列のエピトープ、またはｃ
ＤＮＡプラスミドＶ中のｃＤＮＡによりコードされるポリペプチド配列のエピト
ープ、あるいは前述で定義されるように、ストリンジェントなハイブリダイゼー
ション条件下またはより低いストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件
下で、配列番号Ｘのエピトープコード配列またはｃＤＮＡプラスミドＶに含まれ
るエピトープコード配列の相補鎖にハイブリダイズするポリヌクレオチドによっ
てコードされるポリペプチド配列のエピトープ。本発明はさらに、本発明のポリ
ペプチド配列のエピトープをコードするポリヌクレオチド配列（例えば、配列番
号Ｘに開示される配列など）、本発明のエピトープをコードするポリヌクレオチ
ド配列の相補鎖のポリヌクレオチド配列、および前記で定義されるように、スト
リンジェントなハイブリダイゼーション条件下またはより低いストリンジェンシ
ーのハイブリダイゼーション条件下で、この相補鎖にハイブリダイズするポリヌ
クレオチド配列を含む。
【０２１２】 用語「エピトープ」とは、本明細書中で使用される場合、動物において、好ま
しくは哺乳動物において、そして最も好ましくはヒトにおいて抗原性活性または
免疫原性活性を有するポリペプチドの部分をいう。好ましい実施形態において、
本発明は、エピトープを含むポリペプチド、およびこのポリペプチドをコードす
るポリヌクレオチドを含む。「免疫原性エピトープ」とは、本明細書中で使用さ
れる場合、当該分野で公知の任意の方法によって決定されるような（例えば、下
記に記載される抗体を産生するための方法による）、動物における抗体応答を誘
発するタンパク質の一部として定義される（例えば、Ｇｅｙｓｅｎら、Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：３９９８−４００２（１９８３
）を参照のこと）。用語「抗原性エピトープ」とは、本明細書中で使用される場
合、当該分野で周知の任意の方法（例えば、本明細書中に記載される免疫アッセ
イによる）によって決定されるような、抗体がその抗原に免疫特異的に結合し得
るタンパク質の一部として定義される。免疫特異的結合は、非特異的結合は除外
するが、他の抗原との交差反応を必ずしも除外しない。抗原性エピトープは、必
ずしも免疫原性である必要はない。
【０２１３】 エピトープとして機能するフラグメントは、任意の従来の方法によって産生さ
れ得る。（例えば、Ｈｏｕｇｈｔｅｎ，Ｒ．Ａ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：５１３１−５１３５（１９８５）を参照のこと。こ
れはさらに、米国特許第４，６３１，２１１号に記載される）。
【０２１４】 本発明においては、抗原性エピトープは、好ましくは、少なくとも４、少なく
とも５、少なくとも６、少なくとも７アミノ酸の配列を含み、より好ましくは、
少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１
２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも２０、少な
くとも２５、少なくとも３０、少なくとも４０、少なくとも５０アミノ酸の配列
を含み、そして最も好ましくは約１５アミノ酸と約３０アミノ酸との間の配列を
含む。免疫原性エピトープまたは抗原性エピトープを含有する好ましいポリペプ
チドは、少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、
５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５または１００アミノ酸
残基の長さである。さらなる非排他的に好ましい抗原性エピトープは、本明細書
中で開示される抗原性エピトープおよびその一部を含む。抗原性エピトープは、
有用である（例えば、エピトープに特異的に結合する抗体（モノクローナル抗体
を含む）を惹起するため）。好ましい抗原性エピトープは、本明細書中で開示さ
れる抗原性エピトープ、および２、３、４、５以上のこれらの抗原性エピトープ
の任意の組合わせを含む。抗原性エピトープは、イムノアッセイにおいて、標的
分子として使用され得る。（例えば、Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅｌｌ ３７：７６７
−７７８（１９８４）；Ｓｕｔｃｌｉｆｆｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２１９：６６
０−６６６（１９８３）を参照のこと）。
【０２１５】 同様に、免疫原性エピトープを使用して、例えば、当該分野で周知の方法に従
う抗体を誘導し得る。（例えば、Ｓｕｔｃｌｉｆｆｅら、前出；Ｗｉｌｓｏｎら
，前出；Ｃｈｏｗら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：
９１０−９１４；およびＢｉｔｔｌｅら、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．６６：２３
４７−２３５４（１９８５）を参照のこと）。好ましい免疫原性エピトープは、
本明細書で開示される免疫原性エピトープおよび２、３、４、５以上のこれらの
免疫原性エピトープの任意の組合せを含む。１つ以上の免疫原性エピトープを含
むポリペプチドは、キャリアタンパク質（例えば、アルブミン）とともに動物系
（例えば、ウサギまたはマウス）に対する抗体応答を誘発するために提示され得
るか、またはこのポリペプチドが十分に長い場合（少なくとも約２５アミノ酸）
、そのポリペプチドはキャリアなしで提示され得る。しかし、８〜１０個程度の
少なさのアミノ酸を含む免疫原性エピトープは、少なくとも変性ポリペプチド中
の（例えば、ウェスタンブロッティングにおける）直鎖状エピトープに結合し得
る抗体を惹起するには十分であることが示されている。
【０２１６】 本発明のエピトープ保有ポリペプチドは、当該分野で周知の方法に従って抗体
を誘導するために使用され得る。これらの周知の方法としては、インビボ免疫、
インビトロ免疫、およびファージディスプレイ法が挙げられるが、それらに限定
されない。例えば、Ｓｕｔｃｌｉｆｆｅら、前出；Ｗｉｌｓｏｎら、前出、およ
びＢｉｔｔｌｅら、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．、６６：２３４７−２３５４（１
９８５）を参照のこと。インビボ免疫を使用する場合、動物を遊離ペプチドを用
いて免疫し得る；しかし、抗ペプチド抗体力価は、高分子キャリア（例えば、キ
ーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）または破傷風トキソイド）にペプチ
ドを結合させることによりブーストされ得る。例えば、システイン残基を含むペ
プチドは、マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（Ｍ
ＢＳ）のようなリンカーを用いてキャリアに結合され得る。その一方、他のペプ
チドは、より一般的な結合剤（例えば、グルタルアルデヒド）を用いてキャリア
に結合され得る。ウサギ、ラット、およびマウスのような動物は、遊離のペプチ
ドまたはキャリア結合ペプチドのいずれかを用いて、例えば、約１００μｇのペ
プチドまたはキャリアタンパク質およびフロイントアジュバントまたは免疫応答
を刺激することが公知である他の任意のアジュバントを含むエマルジョンを腹腔
内注射および／または皮内注射することにより免疫される。いくつかのブースタ
ー注射が、抗ペプチド抗体の有用な力価を提供するために、例えば、約２週間の
間隔で、必要とされ得る。この力価は、例えば、固体表面に吸着した遊離のペプ
チドを用いるＥＬＩＳＡアッセイにより検出され得る。免疫した動物由来の血清
中の抗ペプチド抗体の力価は、抗ペプチド抗体の選択（例えば、当該分野で周知
の方法に従う固体支持体上のペプチドへの吸着および選択された抗体の溶出によ
る）により上昇し得る。
【０２１７】 当業者に理解されるように、そして上記で考察されるように、本発明のポリペ
プチドおよびその免疫原性エピトープフラグメントおよび／または抗原性エピト
ープフラグメントは、他のポリペプチド配列に融合され得る。例えば、本発明の
ポリペプチドは、免疫グロブリン（ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ）の定常ド
メインまたはそれらの部分（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、またはそれらの任意の組
み合わせ、およびこれらの部分）と融合し得、これがキメラポリペプチドを生じ
る。このような融合タンパク質は、精製を容易にし得、そしてインビボにおける
半減期を増加し得る。このことは、ヒトＣＤ４ポリペプチドの最初の２つのドメ
インおよび哺乳動物の免疫グロブリンの重鎖または軽鎖の定常領域の種々のドメ
インからなるキメラタンパク質について示された。例えば、ＥＰ ３９４，８２
７；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ，３３１：８４−８６（１９８８）
を参照のこと。上皮の関門を横切っての免疫系への抗原の増強された送達は、Ｆ
ｃＲｎ結合パートナー（例えば、ＩｇＧフラグメントまたはＦｃフラグメント（
例えば、ＰＣＴ公開 ＷＯ９６／２２０２４およびＷＯ ９９／０４８１３を参
照のこと）に結合体化した抗原（例えば、インスリン）について実証されている
。ジスルフィド架橋二量体構造を有するＩｇＧ融合タンパク質はまた、そのＩｇ
Ｇ部分ジスルフィド結合に起因して、単量体ポリペプチドまたはそれらのフラグ
メント単独よりも、他の分子の結合および中和において効果的であることが見出
された。例えば、Ｆｏｕｎｔｏｕｌａｋｉｓら、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２７０
：３９５８−３９６４（１９９５）を参照のこと。
【０２１８】 同様に、ＥＰ−Ａ−Ｏ ４６４ ５３３（カナダ国対応出願２０４５８６９）
は、別のヒトタンパク質またはその一部とともに免疫グロブリン分子の定常領域
の種々の部分を含む、融合タンパク質を開示する。多くの場合、融合タンパク質
中のＦｃ部分は、治療および診断において有利であり、従って、例えば改善され
た薬物動態学的特性を生じ得る（ＥＰ−Ａ ０２３２ ２６２）。あるいは、融
合タンパク質が発現、検出、および精製された後に、Ｆｃ部分が欠失され得るこ
とが望ましい。例えば、融合タンパク質が、免疫の抗原として使用される場合、
そのＦｃ部分は、治療および診断を妨げ得る。薬物探索において、例えばｈＩＬ
−５のようなヒトタンパク質が、ｈＩＬ−５のアンタゴニストを同定するための
高処理能力スクリーニングアッセイの目的のためにＦｃ部分と融合されている。
（Ｄ．Ｂｅｎｎｅｔｔら、Ｊ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ
８：５２−５８（１９９５）；Ｋ．Ｊｏｈａｎｓｏｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅ
ｍ．２７０：９４５９−９４７１（１９９５）を参照のこと）。
【０２１９】 さらに、本発明のポリペプチドは、融合されたポリペプチドの精製を容易にす
るペプチドのような、マーカー配列と融合され得る。好ましい実施形態において
、このマーカーアミノ酸配列は、とりわけ、ｐＱＥベクター（ＱＩＡＧＥＮ，Ｉ
ｎｃ．，９２５９ Ｅｔｏｎ Ａｖｅｎｕｅ，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ，９
１３１１）において提供されるタグのようなヘキサ−ヒスチジンペプチドであり
、それらの多くは市販されている。例えば、Ｇｅｎｔｚら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ
．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８２１−８２４（１９８９）に記載される
ように、ヘキサ−ヒスチジンは、融合タンパク質の簡便な精製を提供する。精製
に有用な他のペプチドタグである「ＨＡ」タグは、インフルエンザ赤血球凝集素
タンパク質由来のエピトープに対応する（Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅｌｌ ３７：７
６７（１９８４））。
【０２２０】 従って、これら上記の任意の融合物は、本発明のポリヌクレオチドまたはポリ
ペプチドを用いて操作され得る。
【０２２１】 上記のエピトープをコードする核酸はまた、エピトープタグ（例えば、血球凝
集素（「ＨＡ」）タグまたはフラッグタグ（ｆｌａｇ ｔａｇ））として目的の
遺伝子と組換えられ、発現されたポリペプチドの検出および精製を補助し得る。
例えば、Ｊａｎｋｎｅｃｈｔらによって記載された系は、ヒト細胞株において発
現される非変性融合タンパク質の迅速な精製を可能にする（Ｊａｎｋｎｅｃｈｔ
ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：８９７２−８９７
（１９９１））。この系において、目的の遺伝子は、遺伝子の読み取り枠（リー
ディングフレーム）が、６つのヒスチジン残基からなるアミノ末端タグと翻訳で
融合されるように、ワクシニア組換えプラスミド中にサブクローンされる。この
タグは、融合タンパク質についての基質結合ドメインとしてはたらく。組換えワ
クシニアウイルスに感染した細胞由来の抽出物は、Ｎｉ２＋ニトリロ酢酸アガロ
ースカラムに充填され、そしてヒスチジンタグ化したタンパク質が、イミダゾー
ル含有緩衝液を用いて選択的に溶出され得る。
【０２２２】 本発明のさらなる融合タンパク質は、遺伝子シャッフリング、モチーフシャッ
フリング、エキソンシャッフリング、および／またはコドンシャッフリング（総
称して「ＤＮＡシャッフリング」といわれる）の技術を通じて生成され得る。Ｄ
ＮＡシャッフリングを使用して、本発明のポリペプチドの活性を調節し得、この
ような方法を用いて、変化した活性を有するポリペプチド、ならびにそのポリペ
プチドのアゴニストおよびアンタゴニストを生成し得る。一般には、米国特許第
５，６０５，７９３号；同第５，８１１，２３８号；同第５，８３０，７２１号
；同第５，８３４，２５２号；および同第５，８３７，４５８号、ならびにＰａ
ｔｔｅｎら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８：７２４−
３３（１９９７）；Ｈａｒａｙａｍａ、Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．
１６（２）：７６−８２（１９９８）；Ｈａｎｓｓｏｎら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ
ｌ．２８７：２６５−７６（１９９９）；ならびにＬｏｒｅｎｚｏおよびＢｌａ
ｓｃｏ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２４（２）：３０８−１３（１９９８）
（これらの特許および刊行物の各々は、本明細書によってその全体が参考として
援用される）を参照のこと。１つの実施形態において、配列番号Ｘに対応するポ
リヌクレオチドおよびこれらのポリヌクレオチドによってコードされるポリペプ
チドの改変は、ＤＮＡシャッフリングにより達成され得る。ＤＮＡシャッフリン
グは、相同組換えまたは部位特異的組換えにより、２つ以上のＤＮＡセグメント
をアセンブリして、ポリヌクレオチド配列における変化を産生することを含む。
別の実施形態において、本発明のポリヌクオチドまたはコードされるポリペプチ
ドは、組換え前に、エラープローンＰＣＲ、ランダムヌクレオチド挿入または他
の方法による、ランダムな変異誘発に供されることによって改変され得る。別の
実施形態において、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの１つ
以上の成分、モチーフ、セクション（ｓｅｃｔｉｏｎ）、部分、ドメイン、フラ
グメントなどは、１つ以上の異種分子の１つ以上の成分、モチーフ、セクション
、部分、ドメイン、フラグメントなどと組み換えられ得る。
【０２２３】 （ポリヌクレオチド改変体およびポリペプチド改変体） 本発明はまた、改変体を含む。本発明は、配列番号Ｘに開示されるポリヌクレ
オチド配列の改変体またはそれらに対する相補鎖の改変体、および／またはｃＤ
ＮＡプラスミドＶ中に含まれるｃＤＮＡ配列の改変体に関する。
【０２２４】 本発明はまた、配列番号Ｙに開示されるポリペプチド配列の改変体、配列番号
Ｘのポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチド配列の改変体および／
またはｃＤＮＡプラスミドＶ中のｃＤＮＡによってコードされるポリペプチド配
列の改変体を含む。
【０２２５】 「改変体」とは、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチドとは異なるが
それらの特性は保持している、ポリヌクレオチドまたはポリペプチドをいう。一
般的に、改変体は全体的に非常に類似しており、そして、多くの領域において、
本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチドと同一である。
【０２２６】 従って、本発明の１つの局面は、以下からなる群より選択されるヌクレオチド
配列を有するポリヌクレオチドを含む単離された核酸分子か、あるいはその代わ
りに以下からなる群より選択されるヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチド
からなる単離された核酸分子を提供する：（ａ）配列番号Ｘに記載されるヌクレ
オチド配列、またはクローン番号ＶのｃＤＮＡ配列に含まれるヌクレオチド配列
；（ｂ）配列番号Ｘのヌクレオチド配列、または配列番号Ｙの完全アミノ酸配列
をコードするクローン番号ＶのｃＤＮＡ、またはクローンＩＤ番号ＶのｃＤＮＡ
によりコードされる完全アミノ酸配列；（ｃ）配列番号Ｘのヌクレオチド配列ま
たは成熟ヒトポリペプチドをコードするクローンＩＤ番号Ｖ中のｃＤＮＡ；（ｄ
）配列番号Ｘのヌクレオチド配列またはクローンＩＤ番号ＶのｃＤＮＡ配列（こ
れは、ヒトポリペプチドの生物学的に活性なフラグメントをコードする）；（ｅ
）配列番号Ｘのヌクレオチド配列またはクローンＩＤ番号ＶのｃＤＮＡ配列（ヒ
トポリペプチドの抗原性フラグメントをコードする）；（ｆ）配列番号Ｙの完全
アミノ酸配列またはクローンＩＤ番号ＶのｃＤＮＡによってコードされた完全ア
ミノ酸配列を含むヒトポリペプチドをコードするヌクレオチド配列；（ｇ）配列
番号Ｙのアミノ酸配列またはクローンＩＤ番号ＶのｃＤＮＡによってコードされ
たアミノ酸配列の成熟ヒトポリペプチドをコードするヌクレオチド配列；（ｈ）
配列番号Ｙの完全アミノ酸配列またはクローンＩＤ番号ＶのｃＤＮＡによってコ
ードされた完全アミノ酸配列を有するヒトポリペプチドの生物学的に活性なフラ
グメントをコードするヌクレオチド配列；（ｉ）配列番号Ｙの完全アミノ酸配列
またはクローンＩＤ番号ＶのｃＤＮＡによってコードされた完全アミノ酸配列を
有するヒトポリペプチドの抗原性フラグメントをコードするヌクレオチド配列；
ならびに（ｊ）上記の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ
）、（ｈ）、または（ｉ）における任意のヌクレオチド配列に相補的なヌクレオ
チド配列。
【０２２７】 本発明はまた、例えば上記の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ
）、（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）または（ｊ）中の任意のヌクレオチド配列に少なく
とも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または
１００％同一であるヌクレオチド配列、配列番号Ｘ中の配列をコードするヌクレ
オチドまたはその相補鎖、クローンＩＤ番号Ｖ中に含まれるｃＤＮＡの配列をコ
ードするヌクレオチドまたはその相補鎖、配列番号Ｙのポリペプチドをコードす
るヌクレオチド配列、配列番号Ｘのヌクレオチド配列によりコードされるポリペ
プチド配列をコードするヌクレオチド配列、配列番号Ｘのポリヌクレオチド配列
の相補体によりコードされるポリペプチド配列、クローンＩＤ番号Ｖに含まれる
ｃＤＮＡによってコードされるポリペプチドをコードするヌクレオチド配列、表
１の１０列に規定されるポリペプチド配列をコードする配列番号Ｘのヌクレオチ
ド配列またはその相補鎖、表１の１０列に規定されるポリペプチドをコードする
ヌクレオチド配列またはその相補鎖、および／またはこれらの任意の核酸分子の
ポリヌクレオチドフラグメント（例えば、本明細書に記載のフラグメント）を含
むか、あるいはこれらからなる、核酸分子に関する。これらの核酸分子の相補体
に、ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下または低いストリンジェ
ンシー条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドもまた、これらのポリヌク
レオチドおよび核酸分子によってコードされるポリペプチドがそうであるように
、本発明によって包含される。
【０２２８】 好ましい実施形態において、本発明は、これらのポリヌクレオチドによりコー
ドされるポリペプチドがそうであるように、上記の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（
ｄ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）または（ｉ）中のポリヌクレオチドに、
ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするか、あるいは低ストリンジェン
シー条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドを含むか、あるいはこのよう
なポリヌクレオチドからなる核酸分子を包含する。別の好ましい実施形態におい
て、これらの核酸分子の相補体に、ストリンジェントなハイブリダイゼーション
条件下または低いストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするポリヌクレオ
チドもまた、これらのポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチドがそ
うであるように、本発明によって包含される。
【０２２９】 別の実施形態において、本発明は、以下からなる群より選択されるアミノ酸配
列を有するポリペプチドを含むかまたはそれからなる、精製されたタンパク質を
提供する：（ａ）配列番号Ｙの完全アミノ酸配列またはクローンＩＤ番号Ｖのｃ
ＤＮＡによってコードされる完全アミノ酸配列；（ｂ）配列番号Ｙのアミノ酸配
列を有するヒトポリペプチドの成熟形態のアミノ酸配列またはクローンＩＤ番号
ＶのｃＤＮＡによってコードされるアミノ酸配列；（ｃ）配列番号Ｙの完全アミ
ノ酸配列またはクローンＩＤ番号ＶのｃＤＮＡによってコードされる完全アミノ
酸配列を有するヒトポリペプチドの生物学的に活性なフラグメントのアミノ酸配
列；ならびに（ｄ）配列番号Ｙの完全アミノ酸配列またはクローンＩＤ番号Ｖの
ｃＤＮＡによりコードされる完全アミノ酸配列を有するヒトポリペプチドの抗原
性フラグメントのアミノ酸配列。
【０２３０】 本発明はまた、例えば、上記（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、または（ｄ）における
アミノ酸配列、配列番号Ｙに示されるアミノ酸配列、クローンＩＤ番号Ｖに含ま
れるｃＤＮＡによってコードされるアミノ酸配列、表１の１０列目に規定される
アミノ酸配列、配列番号Ｘのヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列
、および配列番号Ｘのポリヌクレオチド配列の相補体によってコードされるアミ
ノ酸配列のいずれかに少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９
７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含むかまたは
それからなる、タンパク質に関する。これらのポリペプチドのフラグメント（例
えば、本明細書に記載のフラグメント）もまた提供される。これらのアミノ酸配
列をコードする核酸分子の相補体に、ストリンジェントなハイブリダイゼーショ
ン条件下またはより低いストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするポリヌ
クレオチドによってコードされるさらなるタンパク質もまた、本発明により包含
され、同様に、これらのタンパク質をコードするポリヌクレオチドも、本発明に
より包含される。
【０２３１】 本発明の参照ヌクレオチド配列に、例えば、少なくとも９５％「同一」である
ヌクレオチド配列を有する核酸とは、その核酸のヌクレオチド配列が、そのヌク
レオチド配列がポリぺプチドをコードする参照ヌクレオチド配列の各１００ヌク
レオチドあたり５つまでの点変異を含み得ることを除いて、参照配列に対して同
一であることを意図する。換言すれば、参照ヌクレオチド配列に対して少なくと
も９５％同一のヌクレオチド配列を有する核酸を得るために、参照配列のヌクレ
オチドの５％までが、欠失され得るか、または別のヌクレオチドで置換され得る
か、あるいは参照配列中の総ヌクレオチドの５％までの数のヌクレオチドが参照
配列中に挿入され得る。問い合わせ（ｑｕｅｒｙ）配列は、表１に示される配列
全体、ＯＲＦ（オープンリーディングフレーム）、または本明細書中で記載され
るように特定される任意のフラグメントであり得る。
【０２３２】 実際問題として、任意の特定の核酸分子またはポリぺプチドが、本発明のヌク
レオチド配列に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９
７％、９８％、または９９％同一であるか否かは、公知のコンピュータープログ
ラムを使用して従来的に決定され得る。問い合わせ配列（本発明の配列）と対象
配列との間の最も良好な全体的な適合性（全体的な配列整列とも呼ばれる）を決
定するための好ましい方法は、Ｂｒｕｔｌａｇら（Ｃｏｍｐ．Ａｐｐ． Ｂｉｏ
ｓｃｉ．６：２３７−２４５（１９９０））のアルゴリズムに基づくＦＡＳＴＤ
Ｂコンピュータープログラムを使用して決定され得る。配列整列において、問い
合わせ配列および対象配列は、両方ともにＤＮＡ配列である。ＲＮＡ配列は、Ｕ
からＴに変換することによって比較され得る。この全体的な配列整列の結果は、
同一性パーセント（％）で示される。同一性パーセントを算定するためにＤＮＡ
配列のＦＡＳＴＤＢ整列において使用される好ましいパラメーターは：Ｍａｔｒ
ｉｘ＝Ｕｎｉｔａｒｙ、ｋ−ｔｕｐｌｅ＝４、Ｍｉｓｍａｔｃｈ Ｐｅｎａｌｔ
ｙ＝１、Ｊｏｉｎｉｎｇ Ｐｅｎａｌｔｙ＝３０、Ｒａｎｄｏｍｉｚａｔｉｏｎ
Ｇｒｏｕｐ Ｌｅｎｇｔｈ＝０、Ｃｕｔｏｆｆ Ｓｃｏｒｅ＝１、Ｇａｐ Ｐ
ｅｎａｌｔｙ＝５、Ｇａｐ Ｓｉｚｅ Ｐｅｎａｌｔｙ ０．０５、Ｗｉｎｄｏ
ｗ Ｓｉｚｅ＝５００または対象ヌクレオチド配列の長さ（どちらかより短い方
）である。
【０２３３】 対象配列が、５’または３’欠失のために（内部欠失のためではなく）問い合
わせ配列より短い場合、手動の補正が結果に対してなされなけらばならない。こ
れは、同一性パーセントを計算する場合に、ＦＡＳＴＤＢプログラムが対象配列
の５’および３’の短縮を考慮しないからである。５’末端または３’末端で短
縮されている対象配列について、問い合わせ配列に対して、同一性パーセントは
、問い合わせ配列の総塩基のパーセントとして一致／整列されない対象配列の５
’および３’である問い合わせ配列の塩基の数を計算することによって補正され
る。ヌクレオチドが一致／整列されるか否かは、ＦＡＳＴＤＢ配列整列の結果に
よって決定される。次いで、このパーセントは、特定のパラメーターを用いて上
記のＦＡＳＴＤＢプログラムによって算定された同一性パーセントから差し引か
れ、最終的な同一性パーセントのスコアに到達する。この補正されたスコアが、
本発明の目的に使用されるものである。ＦＡＳＴＤＢ整列によって示されるよう
に、問い合わせ配列と一致／整列されない、対象配列の５’および３’の塩基の
外側の塩基のみが、同一性パーセントのスコアを手動で調整する目的で算定され
る。
【０２３４】 例えば、９０塩基の対象配列が、同一性パーセントを決定するために１００塩
基の問い合わせ配列に整列される。欠失が、対象配列の５’末端で生じ、従って
、ＦＡＳＴＤＢ整列は、５’末端の最初の１０塩基で一致／整列を示さない。１
０個の不対合塩基は、配列の１０％（一致していない５’および３’の末端の塩
基の数／問い合わせ配列の塩基の総数）を表し、そのため１０％が、ＦＡＳＴＤ
Ｂプログラムによって算定される同一性パーセントのスコアから差し引かれる。
残りの９０塩基が完全に一致する場合は、最終的な同一性パーセントは９０％で
ある。別の例では、９０塩基の対象配列が、１００塩基の問い合わせ配列と比較
される。この場合、欠失は、内部欠失であり、その結果、対象配列の５’または
３’に問い合わせと一致／整列しない塩基が存在しない。この場合、ＦＡＳＴＤ
Ｂによって算定される同一性パーセントは手動で補正されない。再び、問い合わ
せ配列と一致／整列しない対象配列の５’または３’の塩基のみが手動で補正さ
れる。他の手動の補正は、本発明の目的のためにはなされない。
【０２３５】 本発明の問い合わせアミノ酸配列に、例えば、少なくとも９５％「同一」であ
るアミノ酸配列を有するポリぺプチドにより、対象ポリペプチドのアミノ酸配列
は、その対象ポリぺプチド配列が問い合わせアミノ酸配列の各１００個のアミノ
酸あたり５つまでのアミノ酸の変更を含み得ることを除いて、問い合わせ配列に
同一であることが意図される。換言すれば、問い合わせアミノ酸配列に少なくと
も９５％同一であるアミノ酸配列を有するポリぺプチドを得るために、対象配列
におけるアミノ酸残基の５％までが、挿入、欠失、（インデル（挿入−欠失）（
ｉｎｄｅｌｓ））または別のアミノ酸で置換され得る。参照配列のこれらの改変
は、参照アミノ酸配列のアミノ末端もしくはカルボキシ末端位置で生じ得るか、
またはそれらの末端位置の間のどこにでも生じ得、参照配列中の残基間で個々に
かまたは参照配列内の１個以上の連続する群でかのいずれかで、散在する。
【０２３６】 実際問題として、任意の特定のポリぺプチドが、例えば、表１に示されるアミ
ノ酸配列またはそのフラグメント、配列番号Ｘにおけるヌクレオチド配列により
コードされるアミノ酸配列またはそのフラグメント、あるいはｃＤＮＡプラスミ
ドＶにおけるｃＤＮＡによりコードされるアミノ酸配列またはそのフラグメント
に対して、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８
％、または９９％同一であるか否かは、公知のコンピュータープログラムを使用
して従来のように決定され得る。問い合わせ配列（本発明の配列）と対象配列と
の間での最良の全体的な一致（全体的配列整列とも呼ばれる）を決定するための
好ましい方法は、Ｂｒｕｔｌａｇら（Ｃｏｍｐ．Ａｐｐ．Ｂｉｏｓｃｉ．６：２
３７−２４５（１９９０））のアルゴリズムに基づくＦＡＳＴＤＢコンピュータ
ープログラムを使用して決定され得る。配列整列において、問い合わせ配列およ
び対象配列は、両方ともヌクレオチド配列であるかまたは両方ともアミノ酸配列
であるかのいずれかである。上記の全体的配列整列の結果は、同一性パーセント
で示される。ＦＡＳＴＤＢアミノ酸整列に用いられる好ましいパラメーターは：
Ｍａｔｒｉｘ＝ＰＡＭ ０、ｋ−ｔｕｐｌｅ＝２、Ｍｉｓｍａｔｃｈ Ｐｅｎａ
ｌｔｙ＝１、Ｊｏｉｎｉｎｇ Ｐｅｎａｌｔｙ＝２０、Ｒａｎｄｏｍｉｚａｔｉ
ｏｎ Ｇｒｏｕｐ Ｌｅｎｇｔｈ＝０、Ｃｕｔｏｆｆ Ｓｃｏｒｅ＝１、Ｗｉｎ
ｄｏｗ Ｓｉｚｅ＝配列の長さ、Ｇａｐ Ｐｅｎａｌｔｙ＝５、Ｇａｐ Ｓｉｚ
ｅ Ｐｅｎａｌｔｙ＝０．０５、Ｗｉｎｄｏｗ Ｓｉｚｅ＝５００または対象ア
ミノ酸配列の長さ（どちらかより短い方）である。
【０２３７】 対象配列が、Ｎ末端またはＣ末端欠失により（内部の欠失のためではなく）問
い合わせ配列よりも短い場合、手動の補正が結果に対してなされなけらばならな
い。これは、ＦＡＳＴＤＢプログラムが、全体的な同一性パーセントを算定する
場合に、対象配列のＮ末端短縮およびＣ末端短縮を考慮しないからである。Ｎ末
端およびＣ末端で短縮されている対象配列について、問い合わせ配列に対して、
同一性パーセントは、問い合わせ配列の総塩基のパーセントとして、対応する対
象残基と一致／整列しない、対象配列のＮ末端およびＣ末端である問い合わせ配
列の残基の数を計算することによって補正される。残基が一致／整列されている
か否かは、ＦＡＳＴＤＢ配列整列の結果によって決定される。次いで、このパー
セントは、上記のＦＡＳＴＤＢプログラムによって特定のパラメーターを使用し
て計算された同一性パーセントから差し引かれ、最終的な同一性パーセントのス
コアに到達する。この最終的な同一性パーセントのスコアが、本発明の目的で使
用されるものである。問い合わせ配列と一致／整列していない対象配列のＮ末端
側およびＣ末端側の残基のみが、同一性パーセントのスコアを手動で調整する目
的のために考慮される。すなわち、対象配列の最も遠いＮ末端およびＣ末端残基
の外側の問い合わせ残基位置のみである。
【０２３８】 例えば、９０アミノ酸残基の対象配列が、同一性パーセントを決定するために
１００残基の問い合わせ配列と整列される。欠失が対象配列のＮ末端で生じ、そ
してそれゆえＦＡＳＴＤＢ整列は、Ｎ末端での最初の１０残基の一致／整列を示
さない。この１０個の不対合残基は、配列の１０％（一致していないＮ末端およ
びＣ末端の残基の数／問い合わせ配列中の残基の総数）を表し、その結果ＦＡＳ
ＴＤＢプログラムによって計算される同一性パーセントのスコアから１０％が差
し引かれる。残りの９０残基が完全に一致した場合、最終的な同一性パーセント
は９０％である。別の例において、９０残基の対象配列が、１００残基の問い合
わせ配列と比較される。この場合、欠失は、内部欠失であり、そのため問い合わ
せ配列と一致／整列しない対象配列のＮ末端またはＣ末端の残基は存在しない。
この場合、ＦＡＳＴＤＢによって算定される同一性パーセントは、手動で補正さ
れない。再び、ＦＡＳＴＤＢ整列において示されるように、問い合わせ配列と一
致／整列しない対象配列のＮ末端およびＣ末端の外側の残基位置のみが手動で補
正される。他の手動の補正は、本発明の目的のためにはなされない。
【０２３９】 改変体は、コード領域、非コード領域、またはその両方における変化を含み得
る。特に好ましいものは、サイレントな置換、付加、または欠失を生成するがコ
ードされるポリぺプチドの特性または活性を変化させない変化を含む、ポリヌク
レオチド改変体である。遺伝コードの縮重に起因するサイレントな置換によって
生成されるヌクレオチド改変体が、好ましい。さらに、５０アミノ酸未満、４０
アミノ酸未満、３０アミノ酸未満、２０アミノ酸未満、１０アミノ酸未満、ある
いは５〜５０アミノ酸、５〜２５アミノ酸、５〜１０アミノ酸、１〜５アミノ酸
、または１〜２アミノ酸が、任意の組合せで置換、欠失、または付加されている
改変体もまた、好ましい。ポリヌクレオチド改変体は、種々の理由（例えば、特
定の宿主についてのコドン発現を至適化する（ヒトｍＲＮＡにおけるコドンを、
Ｅ．ｃｏｌｉのような細菌宿主によって好ましいコドンに変化させる））のため
に、生成され得る。
【０２４０】 天然に存在する改変体は、「対立遺伝子改変体」と呼ばれ、そして生物の染色
体上の所定の遺伝子座を占有する遺伝子のいくつかの代替の形態のうちの１つを
いう。（Ｇｅｎｅｓ ＩＩ、Ｌｅｗｉｎ，Ｂ．，編 Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆
Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９８５））。これらの対立遺伝子改変体は、
ポリヌクレオチドレベルおよび／またはポリぺプチドレベルのいずれかで変化し
得、そして本発明に含まれる。あるいは、天然に存在しない改変体は、変異誘発
技術によってまたは直接的な合成によって生成され得る。
【０２４１】 タンパク質工学および組換えＤＮＡ技術の公知の方法を使用して、改変体は、
本発明のポリぺプチドの特性を改善または変化させるために作製され得る。例え
ば、本明細書中に考察されるように、１つ以上のアミノ酸が、生物学的機能の実
質的な欠損を伴わずに、本発明のポリペプチドのＮ末端またはＣ末端から欠失さ
れ得る。Ｒｏｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８：２９８４−２９８８（１
９９３）の著者らは、３個、８個、または２７個のアミノ末端アミノ酸残基を欠
失させた後でさえもヘパリン結合活性を有する改変体ＫＧＦタンパク質を報告し
た。同様に、インターフェロンγは、このタンパク質のカルボキシ末端から８〜
１０個のアミノ酸残基を欠失させた後、１０倍までのより高い活性を示した（Ｄ
ｏｂｅｌｉら、Ｊ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ７：１９９−２１６（１９８
８））。
【０２４２】 さらに、豊富な証拠は、改変体が、天然に存在するタンパク質の生物学的活性
に類似する活性をしばしば保持することを実証する。例えば、Ｇａｙｌｅおよび
共同研究者ら（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ ２６８：２２１０５−２２１１１（１
９９３））は、ヒトサイトカインＩＬ−１ａの広範な変異分析を行った。彼らは
、ランダムな変異誘発を使用して、分子の全長にわたって改変体当たり平均２．
５アミノ酸の変化になる、３，５００個を超える個々のＩＬ−１ａ変異体を作製
した。複数の変異が、全ての潜在的なアミノ酸の位置で試験された。この研究者
らは、「分子の大部分は、［結合活性または生物学的活性］のいずれに対しても
ほとんど影響を伴わないで変化され得る」ことを見出した。（要約を参照のこと
）。実際、試験された３，５００個を超えるヌクレオチド配列のうち、わずか２
３個の独特なアミノ酸配列が、野生型と活性が有意に異なるタンパク質を生成し
た。
【０２４３】 さらに、本明細書において記載されるように、ポリぺプチドのＮ末端またはＣ
末端からの１つ以上のアミノ酸の欠失が、１つ以上の生物学的機能の改変または
欠失を生じたとしても、他の生物学的活性はなお保持され得る。例えば、分泌さ
れる形態を認識する抗体を誘導および／または結合する、欠失改変体の能力は、
分泌される形態の大多数より少ない残基が、Ｎ末端またはＣ末端から除去される
場合に保持されるようである。タンパク質のＮ末端またはＣ末端残基を欠損する
特定のポリぺプチドが、このような免疫原性活性を保持するか否かは、本明細書
中に記載される慣用的な方法、およびそうでなければ当該分野において公知の慣
用的な方法によって容易に決定され得る。
【０２４４】 従って、本発明はさらに、本発明のポリペプチド（それらが改変体である）の
機能的な活性（例えば、生物学的活性）を示すポリぺプチド改変体を含む。この
ような改変体としては、活性に対する影響をほとんど有さないように、当該分野
において公知の一般的な法則に従って選択される、欠失、挿入、逆位、反復、お
よび置換が挙げられる。
【０２４５】 本出願は、本明細書中に開示される核酸配列に対して少なくとも８０％、８５
％、９０％、９５％、９６％、９７、９８％、９９％または１００％同一の核酸
分子に関し（例えば、Ｎおよび／またはＣ末端欠失のアミノ酸配列を有するポリ
ペプチドをコードする）、それらが機能的活性を有するポリペプチドをコードす
るかどうかに関わらない。これは、特定の核酸分子が機能的活性を有するポリペ
プチドをコードしない場合さえ、当業者はなお、例えば、ハイブリダイゼーショ
ンプローブまたはポリメラーゼ鎖反応（ＰＣＲ）プライマーとして核酸分子を使
用する方法を知るからである。機能的活性を有するポリペプチドをコードしない
本発明の核酸分子の使用は、特に、（１）ｃＤＮＡライブラリー内で遺伝子また
は対立遺伝子またはそれらのスプライス改変体を単離する工程；（２）Ｖｅｒｍ
ａら、Ｈｕｍａｎ Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ：Ａ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｂａｓ
ｉｃ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒ
ｋ（１９８８）に記載されるような、遺伝子の正確な染色体位置を提供するため
の、中期染色体拡散へのインサイチュハイブリダイゼーション（例えば、「ＦＩ
ＳＨ」）；および（３）特定の組織内でｍＲＮＡ発現を検出するためノーザンブ
ロット分析を含む。
【０２４６】 しかし、本明細書中に開示される核酸配列に対して少なくとも８０％、８５％
、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％同一の配列
を有する核酸分子が好ましく、これは、実際に本発明のポリペプチドの機能的活
性を有するポリペプチドをコードする。
【０２４７】 当然のことながら、遺伝子コードの縮重に起因して、例えば、ｃＤＮＡプラス
ミドＶ中のｃＤＮＡの核酸配列、表１（配列番号Ｘ）に示される核酸配列または
そのフラグメントに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％
、９７％、９８％、９９％、または１００％同一の配列を有する多数の核酸分子
が、「機能活性を有する」ポリペプチドをコードするということを、当業者は、
直ちに理解する。実際に、これらのヌクレオチド配列の任意の縮重改変体すべて
が、同じポリぺプチドをコードするので、多くの場合、このことは、上記の比較
アッセイを実行しなくても、当業者に明らかである。縮重改変体でないこのよう
な核酸分子について、合理的な数がまた、機能活性を有するポリペプチドをコー
ドすることが、当該分野でさらに理解される。なぜならば、当業者が、さらに以
下に記載されるように、タンパク質をあまり有意に機能させそうにないかまたは
有意に機能させそうにないかのいずれかであるアミノ酸置換（例えば、１つの脂
肪族アミノ酸を第２の脂肪族アミノ酸と置換すること）を完全に知っているから
である。
【０２４８】 例えば、表現型的にサイレントなアミノ酸置換の作製方法に関する手引きは、
Ｂｏｗｉｅら、「Ｄｅｃｉｐｈｅｒｉｎｇ ｔｈｅ Ｍｅｓｓａｇｅ ｉｎ Ｐ
ｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ：Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｔｏ Ａｍｉｎｏ
Ａｃｉｄ Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎｓ」，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４７：１３０６
−１３１０（１９９０）に提供され、ここにおいてこの著者らは、アミノ酸配列
の変化に対する寛容性を研究するための２つの主な戦略が存在することを示す。
【０２４９】 第１のストラテジーは、進化の過程の間の自然の選択によるアミノ酸置換の寛
容を利用する。異なる種におけるアミノ酸配列を比較することによって、保存さ
れたアミノ酸が同定され得る。これらの保存されたアミノ酸は、タンパク質の機
能について重要であるようである。対照的に、置換が自然の選択によって寛容さ
れたアミノ酸の位置は、これらの位置がタンパク質の機能に重要ではないことを
示す。従って、アミノ酸置換を寛容する位置は改変され得るが、タンパク質の生
物学的活性をなおも維持する。
【０２５０】 第２のストラテジーは、タンパク質機能に重要な領域を同定するために、クロ
ーン化された遺伝子の特定の位置でアミノ酸変化を導入するための遺伝子工学を
使用する。例えば、部位指向性変異誘発またはアラニンスキャニング変異誘発（
分子中の各残基で１つのアラニン変異の導入）が、使用され得る。（Ｃｕｎｎｉ
ｎｇｈａｍおよびＷｅｌｌｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４４：１０８１−１０８５（
１９８９））。次いで、得られた変異分子は生物学的活性について試験され得る
。
【０２５１】 著者らが言及するように、これらの２つのストラテジーは、タンパク質がアミ
ノ酸置換に驚くほど寛容であることを明らかにした。著者らはさらに、どのアミ
ノ酸変化が、タンパク質中の特定のアミノ酸位置で許容されるようであるかを示
す。例えば、（タンパク質の三次構造内に）ほとんど埋もれているアミノ酸残基
は、非極性側鎖を必要とするが、表面側鎖の特徴は、一般にほとんど保存されな
い。さらに、寛容される保存的なアミノ酸置換は、脂肪族または疎水性アミノ酸
のＡｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、およびＩｌｅの置換；ヒドロキシル残基のＳｅｒお
よびＴｈｒの置換；酸性残基のＡｓｐおよびＧｌｕの置換；アミド残基のＡｓｎ
およびＧｌｎの置換、塩基性残基のＬｙｓ、Ａｒｇ、およびＨｉｓの置換；芳香
族残基のＰｈｅ、Ｔｙｒ、およびＴｒｐの置換、ならびに小さなサイズのアミノ
酸のＡｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｍｅｔ、およびＧｌｙの置換を含む。保存的なア
ミノ酸置換に加えて、本発明の改変体は、（ｉ）１つ以上の非保存的なアミノ酸
残基との置換、ここでは置換されるアミノ酸残基は、遺伝コードによってコード
されるアミノ酸残基であってもよく、もしくはそうでなくてもよい、または（ｉ
ｉ）置換基を有する１つ以上のアミノ酸残基での置換、または（ｉｉｉ）別の化
合物（例えば、ポリぺプチドの安定性および／もしくは可溶性を増加するための
化合物（例えば、ポリエチレングリコール））との成熟ポリぺプチドの融合、ま
たは（ｉｖ）さらなるアミノ酸（例えば、ＩｇＧ Ｆｃ融合領域ペプチド、また
はリーダーもしくは分泌配列、または精製を容易にする配列のような）とのポリ
ぺプチドの融合、または（ｖ）アルブミン（組み換えアルブミンを含むがこれに
限定されない（例えば、その全体が参考として本明細書に援用される、１９９９
年３月２日発行、米国特許番号第５，８７６，９６９号、欧州特許番号第０４１
３ ６２２号、および１９９８年６月１６日発行、米国特許番号第５，７６６，
８８３号）を参照のこと）のような別の化合物とのこのポリペプチドの融合を含
む。このような改変体ポリぺプチドは、本明細書中の教示から、当業者の範囲内
であると考えられる。
【０２５２】 例えば、他の荷電されたアミノ酸または中性のアミノ酸での荷電されたアミノ
酸のアミノ酸置換を含むポリぺプチド改変体は、改善された特性（例えば、より
少ない凝集性）を有するタンパク質を生成し得る。薬学的処方物の凝集は、凝集
体の免疫原性活性に起因して、活性の減少およびクリアランスの増加の両方をも
たらす。（Ｐｉｎｃｋａｒｄら、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２：３３
１−３４０（１９６７）；Ｒｏｂｂｉｎｓら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ ３６：８３８
−８４５（１９８７）；Ｃｌｅｌａｎｄら、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａｐｅ
ｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ １０：３０７−３７７
（１９９３））。
【０２５３】 本発明のさらなる実施形態は、少なくとも１つのアミノ酸置換を含むが、５０
アミノ酸置換を超えず、さらにより好ましくは、４０アミノ酸置換を超えず、な
おより好ましくは、３０アミノ酸置換を超えず、そしてなおさらにより好ましく
は、２０アミノ酸置換を超えないアミノ酸配列を有するポリペプチドのアミノ酸
配列を含むポリペプチドに関する。もちろん、ポリペプチドが、配列番号Ｙのポ
リペプチドのアミノ酸配列、配列番号Ｘによってコードされるアミノ酸配列、お
よび／またはｃＤＮＡプラスミドＶ中のｃＤＮＡによってコードされるアミノ酸
配列を含むアミノ酸配列を有することが非常に好ましく、好ましさの増大する順
番に、これは、少なくとも１つのアミノ酸置換を含むが、１０、９、８、７、６
、５、４、３、２、または１アミノ酸置換を超えない。特定の実施形態において
、配列番号Ｙのアミノ酸配列またはそのフラグメント（例えば、本明細書に記載
の成熟形態および／または他のフラグメント）、配列番号Ｘによってコードされ
るアミノ酸配列またはそのフラグメント、ならびに／あるいはｃＤＮＡプラスミ
ドＶまたはそのフラグメントによってコードされるアミノ酸配列における付加、
置換、および／または欠失の数は、１〜５、５〜１０、５〜２５、５〜５０、１
０〜５０、または５０〜１５０であり、保存的アミノ酸置換が好ましい。本明細
書中で議論されるように、本発明の任意のポリペプチドは、融合タンパク質を産
生するために使用され得る。例えば、本発明のポリペプチドは、第２のタンパク
質と融合される場合、抗原性タグとして使用され得る。本発明のポリペプチドに
対して惹起される抗体は、ポリペプチドに結合することによって、第２のタンパ
ク質を間接的に検出するために使用され得る。さらに、分泌されるタンパク質は
、細胞位置を輸送シグナルに基づいて標的化するので、分泌されることが示され
る本発明のポリペプチドは、他のタンパク質に一旦融合された標的化分子として
使用され得る。
【０２５４】 本発明のポリペプチドと融合され得るドメインの例は、異種シグナル配列のみ
ならず、また他の異種機能性領域をも含む。融合は、必ずしも直接的である必要
はないが、リンカー配列を介して起こり得る。
【０２５５】 特定の好ましい実施形態において、本発明のタンパク質は、ポリペプチドがＮ
および／またはＣ末端欠失変異体である融合タンパク質を含む。好ましい実施形
態において、本出願は、特定のＮおよびＣ末端欠失変異体のアミノ酸配列を有す
るポリペプチドをコードする核酸配列に対して少なくとも８０％、８５％、９０
％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一の核酸分子に関する。こ
れらのポリペプチド（フラグメントおよび／または改変体を含む）をコードする
ポリヌクレオチドはまた、本発明によって包含される。
【０２５６】 さらに、融合タンパク質はまた、本発明のポリペプチドの特徴を改良するため
に操作され得る。例えば、さらなるアミノ酸、特に荷電アミノ酸の領域が、宿主
細胞からの精製または続く取り扱いおよび貯蔵の間の安定性および持続性を改良
するためにポリペプチドのＮ末端へ付加され得る。また、ペプチド部分は精製を
容易にするためにポリペプチドへ付加され得る。このような領域は、ポリペプチ
ドの最終調製の前に除去され得る。ポリペプチドの取り扱いを容易にするための
ペプチド部分の付加は、当該分野でよく知られる慣用の技術である。
【０２５７】 当業者に理解されるように、上記の本発明のポリペプチドおよびそのエピトー
プ保有フラグメントは、異種ポリペプチド配列と連結させられ得る。例えば、本
発明のポリペプチドは、異種ポリペプチド配列と融合され得、例えば、本発明の
ポリペプチドは、免疫グロブリン（ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ）の定常ド
メインまたはそれらの部分（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、またはそれらの任意の組
み合わせ（それらの全体ドメインおよび部分の両方を含む））と融合され得、キ
メラポリペプチドを生じる。これらの融合タンパク質は、精製を容易にし得、そ
してインビボでの半減期を増大させ得る。ヒトＣＤ４−ポリペプチドの最初の２
つのドメインおよび哺乳動物の免疫グロブリンの重鎖または軽鎖の定常領域の種
々のドメインからなるキメラタンパク質を説明する例が報告された。（ＥＰ Ａ ３９４，８２７；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ，３３１：８４〜８
６（１９８８））。（ＩｇＧ部分に起因する）ジスルフィド結合二量体構造を有
する融合タンパク質はまた、単量体タンパク質またはタンパク質のフラグメント
単独よりも、他の分子の結合および中和においてより効果的である（Ｆｏｕｎｔ
ｏｕｌａｋｉｓら，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２７０：３９５８−３９６４（１９
９５））。
【０２５８】 （ベクター、宿主細胞、およびタンパク質産生） 本発明はまた、本発明のポリヌクレオチドを含むベクター、宿主細胞、および
組換え技術によるポリペプチドの産生に関連する。例えば、ベクターは、ファー
ジベクター、プラスミドベクター、ウイルスベクター、またはレトロウイルスベ
クターであり得る。レトロウイルスベクターは、複製コンピテント、または複製
欠損であり得る。後者の場合、一般的にウイルス増殖は、補完性（ｃｏｍｐｌｅ
ｍｅｎｔｉｎｇ）宿主細胞にのみ生じる。
【０２５９】 本発明のポリヌクレオチドは、宿主における増殖のために選択マーカーを含む
ベクターに連結され得る。一般に、プラスミドベクターは、リン酸カルシウム沈
澱物のような沈澱物、または荷電脂質との複合体において導入される。ベクター
がウイルスである場合、このベクターは、適切なパッケージング細胞株を使用し
てインビトロでパッケージングされ、次いで宿主細胞に形質導入され得る。
【０２６０】 ポリヌクレオチド挿入物は、適切なプロモーター（いくつか挙げれば、例えば
、ファージλＰＬプロモーター、Ｅ．ｃｏｌｉ ｌａｃプロモーター、ｔｒｐプ
ロモーター、ｐｈｏＡプロモーターおよびｔａｃプロモーター、ＳＶ４０初期プ
ロモーターおよびＳＶ４０後期プロモーター、ならびにレトロウイルスＬＴＲの
プロモーター）に作動可能に連結されるべきである。他の適切なプロモーターは
当業者に公知である。発現構築物はさらに、転写開始、転写終結のための部位、
および転写領域において、翻訳のためのリボソーム結合部位を含む。この構築物
によって発現される転写物のコード部分は、好ましくは、始めに翻訳開始コドン
、および翻訳されるべきポリペプチドの末端に適切に位置される終結コドン（Ｕ
ＡＡ、ＵＧＡまたはＵＡＧ）を含む。
【０２６１】 示されるように、発現ベクターは、好ましくは少なくとも１つの選択マーカー
を含む。このようなマーカーは、真核細胞培養のためのジヒドロ葉酸レダクター
ゼ、Ｇ４１８、またはネオマイシン耐性遺伝子、ならびにＥ．ｃｏｌｉおよび他
の細菌において培養するためのテトラサイクリン、カナマイシンまたはアンピシ
リン耐性遺伝子を含む。適切な宿主の代表的な例は、細菌細胞（例えば、Ｅ．ｃ
ｏｌｉ、ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓおよびＳａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍ
ｕｒｉｕｍ細胞）；真菌細胞（例えば、酵母細胞（例えば、Ｓａｃｃｈａｒｏｍ
ｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅまたはＰｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ（ＡＴ
ＣＣ受託番号２０１１７８）））；昆虫細胞（例えばＤｒｏｓｏｐｈｉｌｉａ
Ｓ２およびＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ Ｓｆ９細胞）；動物細胞（例えば、ＣＨＯ細
胞、ＣＯＳ細胞、２９３細胞、およびＢｏｗｅｓメラノーマ細胞）；ならびに植
物細胞を含むが、これらに限定されない。上記の宿主細胞のための適切な培養培
地および条件は、当該分野で公知である。
【０２６２】 細菌における使用のために好ましいベクターの中には、ｐＱＥ７０、ｐＱＥ６
０およびｐＱＥ−９（ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．から入手可能）；ｐＢｌｕｅｓｃ
ｒｉｐｔベクター、Ｐｈａｇｅｓｃｒｉｐｔベクター、ｐＮＨ８Ａ、ｐＮＨ１６
ａ、ｐＮＨ１８Ａ、ｐＮＨ４６Ａ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓ
ｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．から入手可能）；およびｐｔｒｃ９９ａ、ｐＫＫ２２３
−３、ｐＫＫ２３３−３、ｐＤＲ５４０、ｐＲＩＴ５（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂ
ｉｏｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．から入手可能）を含む。好ましい真核生物ベクターの中
には、ｐＷＬＮＥＯ、ｐＳＶ２ＣＡＴ、ｐＯＧ４４、ｐＸＴ１およびｐＳＧ（Ｓ
ｔｒａｔａｇｅｎｅから入手可能）；ならびにｐＳＶＫ３、ｐＢＰＶ、ｐＭＳＧ
およびｐＳＶＬ（Ｐｈａｒｍａｃｉａから入手可能）がある。酵母系における使
用のために好ましい発現ベクターとしては、ｐＹＥＳ２、ｐＹＤ１、ｐＴＥＦ１
／Ｚｅｏ、ｐＹＥＳ２／ＧＳ、ｐＰＩＣＺ、ｐＧＡＰＺ、ｐＧＡＰＺａｌｐｈ、
ｐＰＩＣ９、ｐＰＩＣ３．５、ｐＨＩＬ−Ｄ２、ｐＨＩＬ−Ｓ１、ｐＰＩＣ３．
５Ｋ、ｐＰＩＣ９Ｋ、およびＰＡＯ８１５（全てが、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃ
ａｒｌｂａｄ，ＣＡから入手可能）が挙げられるがこれらに限定されない。他の
適切なベクターは、当業者に容易に明らかである。
【０２６３】 宿主細胞への構築物の導入は、リン酸カルシウムトランスフェクション、ＤＥ
ＡＥ−デキストラン媒介トランスフェクション、カチオン性脂質媒介トランスフ
ェクション、エレクトロポレーション、形質導入、感染、または他の方法によっ
てもたらされ得る。このような方法は、Ｄａｖｉｓら、Ｂａｓｉｃ Ｍｅｔｈｏ
ｄｓ Ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ （１９８６）のような多く
の標準的実験マニュアルに記載される。本発明のポリペプチドが、実際、組換え
ベクターを欠損する宿主細胞によって発現され得ることが特に意図される。
【０２６４】 本発明のポリペプチドは、硫酸アンモニウム沈澱またはエタノール沈澱、酸抽
出、陰イオンまたは陽イオン交換クロマトグラフィー、ホスホセルロースクロマ
トグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグ
ラフィー、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィーおよびレクチンクロマト
グラフィーを含む周知の方法によって組換え細胞培養物から回収され得、そして
精製され得る。最も好ましくは、高速液体クロマトグラフィー（「ＨＰＬＣ」）
が精製のために使用される。
【０２６５】 本発明のポリペプチドはまた、以下から回収され得る：直接単離されるかまた
は培養されるかにかかわらず、体液、組織および細胞を含む天然の供給源から精
製された産物；化学的合成手順の産物；ならびに、例えば、細菌細胞、酵母細胞
、高等植物細胞、昆虫細胞、および哺乳動物細胞を含む、原核生物宿主または真
核生物宿主から組換え技術によって産生された産物。組換え産生手順に使用され
る宿主に依存して、本発明のポリペプチドは、グリコシル化されてもまたはグリ
コシル化されていなくてもよい。さらに、本発明のポリペプチドはまた、宿主媒
介プロセスの結果として、いくつかの場合において、最初の改変されたメチオニ
ン残基を含み得る。従って、一般に、翻訳開始コドンによってコードされるＮ末
端メチオニンが、すべての真核生物細胞における翻訳後の任意のタンパク質から
高い効率で除去されることは当該分野において周知である。ほとんどのタンパク
質においてＮ末端メチオニンもまた、ほとんどの原核生物において効果的に除去
されるが、いくつかのタンパク質について、この原核生物除去プロセスは、Ｎ末
端メチオニンが共有結合するアミノ酸の性質に依存しており、非効率的である。
【０２６６】 １つの実施形態において、酵母Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓは、真核細胞
系において、本発明のポリペプチドを発現させるために使用される。Ｐｉｃｈｉ
ａ ｐａｓｔｏｒｉｓは、メタノールをその唯一の炭素供給源として代謝し得る
メチル栄養性（ｍｅｔｈｙｌｏｔｒｏｐｈｉｃ）酵母である。メタノール代謝経
路における主要な工程は、Ｏ２を使用してのホルムアルデヒドへのメタノールの
酸化である。この反応は、酵素アルコールオキシダーゼによって触媒される。そ
の唯一の炭素供給源としてメタノールを代謝するために、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓ
ｔｏｒｉｓは、Ｏ２に対するアルコールオキシダーゼの比較的低い親和性に部分
的に起因して、高レベルのアルコールオキシダーゼを生成する。結果的に、主要
な炭素供給源としてメタノールに依存する増殖培地において、２つのアルコール
オキシダーゼ遺伝子（ＡＯＸ１）のうちの１つのプロモーター領域は、非常に活
性である。メタノールの存在下で、ＡＯＸ１遺伝子から産生されるアルコールオ
キシダーゼは、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓにおける総可溶性タンパク質の
うちのおよそ３０％までを含む。Ｅｌｌｉｓ，Ｓ．Ｂ．ら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．
Ｂｉｏｌ．５：１１１１〜２１（１９８５）；Ｋｏｕｔｚ，Ｐ．Ｊ．ら、Ｙｅａ
ｓｔ ５：１６７〜７７（１９８９）；Ｔｓｃｈｏｐｐ，Ｊ．Ｆ．ら、Ｎｕｃｌ
．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１５：３８５９〜７６（１９８７）を参照のこと。従っ
て、ＡＯＸ１調節配列の全てまたは一部の転写調節下の異種コード配列（例えば
、本発明のポリヌクレオチドなど）は、メタノールの存在下で増殖したＰｉｃｈ
ｉａ酵母において、並外れて高レベルで発現される。
【０２６７】 １つの実施例において、プラスミドベクターｐＰＩＣ９Ｋは、「Ｐｉｃｈｉａ
Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌ
ｏｇｙ」，Ｄ．Ｒ．ＨｉｇｇｉｎｓおよびＪ．Ｃｒｅｇｇ編（Ｔｈｅ Ｈｕｍａ
ｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，１９９８）において本質的に記載され
るように、Ｐｉｃｈｅａ酵母系において、本明細書中に示されるように本発明の
ポリペプチドをコードするＤＮＡを発現させるために使用される。この発現ベク
ターは、マルチクローニング部位の上流に位置するＰｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒ
ｉｓアルカリホスファターゼ（ＰＨＯ）分泌シグナルペプチド（すなわち、リー
ダー）に連結された強力なＡＯＸ１プロモーターの効力によって、本発明のポリ
ペプチドの発現および分泌を可能にする。
【０２６８】 多くの他の酵母ベクター（例えば、ｐＹＥＳ２、ｐＹＤ１、ｐＴＥＦ１／Ｚｅ
ｏ、ｐＹＥＳ２／ＧＳ、ｐＰＩＣＺ、ｐＧＡＰＺ、ｐＧＡＰＺα、ｐＰＩＣ９、
ｐＰＩＣ３．５、ｐＨＩＬ−Ｄ２、ｐＨＩＬ−Ｓ１、ｐＰＩＣ３．５Ｋ、および
ＰＡＯ８１５）は、当業者が容易に理解するように、提案された発現構築物が必
要とされる場合インフレームのＡＵＧを含む転写、翻訳、分泌（所望される場合
）などのため適切に配置されたシグナルを提供する限り、ｐＰＩＣ９Ｋの代わり
に使用され得る。
【０２６９】 別の実施形態において、異種コード配列（例えば、本発明のポリヌクレオチド
など）の高レベルの発現は、本発明の異種ポリヌクレオチドを発現ベクター（例
えば、ｐＧＡＰＺまたはｐＧＡＰＺαなど）中にクローニングし、そしてメタノ
ールの非存在下で酵母培養物を増殖させることによって達成され得る。
【０２７０】 本明細書において議論されるベクター構築物を含む宿主細胞を含むことに加え
て、本発明はまた、脊椎動物起源（特に、哺乳動物起源）の一次（ｐｒｉｍａｒ
ｙ）宿主細胞、二次（ｓｅｃｏｎｄａｒｙ）宿主細胞、および不死化宿主細胞を
含む。これらの宿主細胞は、内因性の遺伝物質（例えば、コード配列）を欠失ま
たは置換するように操作されており、そして／または本発明のポリヌクレオチド
と作動可能に連結された遺伝物質（例えば、異種ポリヌクレオチド配列）を含む
ように操作され、そして内因性のポリヌクレオチドを活性化、変更、および／ま
たは増幅する。例えば、当該分野で公知の技術は、相同組換えを介して、異種制
御領域（例えば、プロモーターおよび／またはエンハンサー）ならびに内因性ポ
リヌクレオチド配列を作動可能に連結するために使用され得る（例えば、１９９
７年６月２４日に発行された米国特許番号第５，６４１，６７０号；１９９６年
９月２６日に公開された国際公開第ＷＯ ９６／２９４１１号；１９９４年８月
４日に公開された国際公開第ＷＯ ９４／１２６５０号；Ｋｏｌｌｅｒら，Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８９３２−８９３５（１９
８９）；およびＺｉｊｌｓｔｒａら，Ｎａｔｕｒｅ ３４２：４３５−４３８（
１９８９）を参照のこと。これらの開示の各々は、その全体が参考として援用さ
れる）。
【０２７１】 さらに、本発明のポリペプチドは、当該分野で公知の技術を用いて化学合成さ
れ得る（例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，１９８３，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕ
ｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ，Ｗ．Ｈ．
Ｆｒｅｅｍａｎ ＆ Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ．およびＨｕｎｋａｐｉｌｌｅｒら，Ｎａ
ｔｕｒｅ，３１０：１０５−１１１（１９８４）を参照のこと）。例えば、ポリ
ペプチドのフラグメントに対応するポリペプチドは、ペプチド合成機の使用によ
り合成され得る。さらに、所望の場合、非古典的アミノ酸または化学的アミノ酸
アナログが、置換または付加としてこのポリペプチド配列に導入され得る。非古
典的アミノ酸としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：通常のアミ
ノ酸のＤ異性体、２，４−ジアミノ酪酸、ａ−アミノイソ酪酸、４−アミノ酪酸
、Ａｂｕ、２−アミノ酪酸、ｇ−Ａｂｕ、ｅ−Ａｈｘ、６−アミノヘキサン酸、
Ａｉｂ、２−アミノイソ酪酸、３−アミノプロピオン酸、オルニチン、ノルロイ
シン、ノルバリン、ヒドロキシプロリン、サルコシン、シトルリン、ホモシトル
リン、システイン酸、ｔ−ブチルグリシン、ｔ−ブチルアラニン、フェニルグリ
シン、シクロヘキシルアラニン、ｂ−アラニン、フルオロアミノ酸、デザイナー
アミノ酸（例えば、ｂ−メチルアミノ酸）、Ｃａ−メチルアミノ酸、Ｎａ−メチ
ルアミノ酸、および一般のアミノ酸アナログ。さらに、アミノ酸はＤ（右旋性）
またはＬ（左旋性）であり得る。
【０２７２】 本発明は、翻訳の間または翻訳後に、例えば、グリコシル化、アセチル化、リ
ン酸化、アミド化、公知の保護基／ブロッキング基による誘導体化、タンパク質
分解切断、抗体分子または他の細胞性リガンドへの結合などによって示差的に改
変される本発明のポリペプチドを含む。任意の多数の化学的改変は、以下を含む
がこれらに限定されない公知の技術によって実施され得る：臭化シアン、トリプ
シン、キモトリプシン、パパイン、Ｖ８プロテアーゼ、ＮａＢＨ４による特異的
化学的切断；アセチル化、ホルミル化、酸化、還元；ツニカマイシンの存在下で
の代謝合成；など。
【０２７３】 本発明によって含まれるさらなる翻訳後修飾としては、例えば、以下などが挙
げられる：Ｎ結合型もしくはＯ結合型の炭水化物鎖（Ｎ末端またはＣ末端のプロ
セシング）、アミノ酸骨格への化学部分の結合、Ｎ結合型もしくはＯ結合型の炭
水化物鎖の化学修飾、および原核生物宿主細胞発現の結果としてのＮ末端メチオ
ニン残基の付加もしくは欠失。このポリペプチドはまた、検出可能な標識（例え
ば、酵素標識、蛍光標識、同位体標識または親和性標識）を用いて改変して、こ
のタンパク質の検出および単離が可能にされ得る。
【０２７４】 本発明によってまた、さらなる利点（例えば、このポリペプチドの溶解度、安
定性および循環時間の増加、または免疫原性の減少）を提供し得る、本発明のポ
リペプチドの化学修飾誘導体が提供される（米国特許番号第４，１７９，３３７
号を参照のこと）。誘導体化のための化学部分は、水溶性ポリマー（例えば、ポ
リエチレングリコール、エチレングリコール／プロピレングリコールコポリマー
、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコールなど）か
ら選択され得る。このポリペプチドは、この分子内のランダムな位置で、または
この分子内の所定の位置で改変され得、そして１、２、３以上の結合した化学部
分を含み得る。
【０２７５】 このポリマーは、任意の分子量のポリマーであり得、そして分枝状であっても
非分枝状であってもよい。ポリエチレングリコールに関しては、好ましい分子量
は、取り扱いおよび製造の容易さのために、約１ｋＤａと約１００ｋＤａとの間
（用語「約」は、ポリエチレングリコールの調製において、いくつかの分子は示
した分子量よりも重く、いくつかは示した分子量よりも軽いことを示す）である
。所望の治療的プロフィール（例えば、所望される徐放性の持続時間、ある場合
には生物学的活性に対する効果、取り扱いの容易さ、抗原性の程度または抗原性
がないこと、および治療タンパク質またはアナログに対するポリエチレングリコ
ールの他の公知の効果）に依存して、他のサイズが用いられ得る。
【０２７６】 ポリエチレングリコール分子（または他の化学的部分）は、このタンパク質の
機能的ドメインまたは抗原性ドメインに対する効果を考慮してタンパク質に結合
されるべきである。当業者に利用可能な多数の結合方法が存在する（例えば、本
明細書中に参考として援用される、ＥＰ ０ ４０１ ３８４（Ｇ−ＣＳＦにＰ
ＥＧを結合する）、Ｍａｌｉｋら，Ｅｘｐ．Ｈｅｍａｔｏｌ．２０：１０２８−
１０３５（１９９２）（塩化トレシルを用いたＧＭ−ＣＳＦのペグ化（ｐｅｇｙ
ｌａｔｉｏｎ）を報告する）もまた参照のこと）。例えば、ポリエチレングリコ
ールは、反応性基（例えば、遊離のアミノ基またはカルボキシル基）によってア
ミノ酸残基を介して共有結合され得る。反応性基は、活性化ポリエチレングリコ
ール分子が結合し得る基である。遊離のアミノ基を有するアミノ酸残基としては
、リジン残基およびＮ末端アミノ酸残基が挙げられ得る；遊離のカルボキシル基
を有するアミノ酸残基としては、アスパラギン酸残基、グルタミン酸残基および
Ｃ末端アミノ酸残基が挙げられ得る。スルフヒドリル残基もまた、ポリエチレン
グリコール分子を結合するための反応性基として用いられ得る。治療目的のため
に好ましいのは、アミノ基での結合、例えば、Ｎ末端またはリジン基での結合で
ある。
【０２７７】 Ｎ末端で化学修飾されたタンパク質を具体的に所望し得る。ポリエチレングリ
コールを本発明の組成の例示として用いて、種々のポリエチレングリコール分子
から（分子量、分枝などによって）、反応混合物中でのポリエチレングリコール
分子のタンパク質（ポリペプチド）分子に対する比、行われるべきペグ化反応の
型、および選択されたＮ末端ペグ化タンパク質の獲得方法を選択し得る。Ｎ末端
ペグ化調製物の獲得方法（すなわち、必要な場合、この部分を他のモノペグ化部
分から分離すること）は、ペグ化タンパク質分子の集団からの、Ｎ末端ペグ化物
質の精製により行われ得る。Ｎ末端修飾で化学修飾された選択的タンパク質は、
特定のタンパク質における誘導体化に利用可能な異なる型の第１級アミノ基（リ
ジン対Ｎ末端）の示差的反応性を利用する還元的アルキル化によって達成され得
る。適切な反応条件下では、カルボニル基含有ポリマーを用いた、Ｎ末端でのタ
ンパク質の実質的に選択的な誘導体化が達成される。
【０２７８】 本発明のポリペプチドは、単量体または多量体（すなわち、二量体、三量体、
四量体およびより高度の多量体）であり得る。従って、本発明は、単量体および
多量体の本発明のポリペプチド、それらの調製ならびにそれらを含む組成物（好
ましくは治療薬）に関する。特定の実施形態では、本発明のポリペプチドは、単
量体、二量体、三量体または四量体である。さらなる実施形態では、本発明の多
量体は、少なくとも二量体、少なくとも三量体、または少なくとも四量体である
。
【０２７９】 本発明によって含まれる多量体は、ホモマーまたはヘテロマーであり得る。本
明細書中で用いられる場合、用語ホモマーは、配列番号Ｙのアミノ酸配列に対応
するかまたは配列番号Ｘによってコードされるアミノ酸配列または配列番号Ｘの
相補体、および／またはｃＤＮＡプラスミドＶによってコードされるアミノ酸配
列（本明細書中に記載されるこれらに対応する、フラグメント、改変体、スプラ
イス改変体および融合タンパク質を含む）のみを含む多量体をいう。これらのホ
モマーは、同一または異なるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含み得る。特
定の実施形態では、本発明のホモマーは、同一のアミノ酸配列を有するポリペプ
チドのみを含む多量体である。別の特定の実施形態では、本発明のホモマーは、
異なるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む多量体である。特定の実施形態
では、本発明の多量体は、ホモ二量体（例えば、同一または異なるアミノ酸配列
を有するポリペプチドを含む）あるいはホモ三量体（例えば、同一および／また
は異なるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む）である。さらなる実施形態
では、本発明のホモマー性多量体は、少なくともホモ二量体、少なくともホモ三
量体または少なくともホモ四量体である。
【０２８０】 本明細書中で用いられる場合、用語ヘテロマーとは、本発明のポリペプチドに
加えて、１つ以上の異種ポリペプチド（すなわち、異なるタンパク質のポリペプ
チド）を含む多量体をいう。特定の実施形態では、本発明の多量体は、ヘテロ二
量体、ヘテロ三量体またはヘテロ四量体である。さらなる実施形態では、本発明
のヘテロマー性多量体は、少なくともヘテロ二量体、少なくともヘテロ三量体ま
たは少なくともヘテロ四量体である。
【０２８１】 本発明の多量体は、疎水性、親水性、イオン性および／もしくは共有結合性の
結合の結果であり得、ならびに／または例えば、リポソーム形成によって間接的
に連結され得る。従って、１つの実施形態では、本発明の多量体（例えば、ホモ
二量体またはホモ三量体など）は、本発明のポリペプチドが溶液中で互いに接触
する場合に形成される。別の実施形態では、本発明のへテロ多量体（例えば、ヘ
テロ三量体またはヘテロ四量体など）は、本発明のポリペプチドが、溶液中で本
発明のポリペプチドに対する抗体（本発明の融合タンパク質中の異種ポリペプチ
ド配列に対する抗体を含む）と接触する場合に、形成される。他の実施形態では
、本発明の多量体は、本発明のポリペプチドとの、および／または本発明のポリ
ペプチド間での共有結合によって形成される。このような共有結合は、ポリペプ
チド配列（例えば、配列番号Ｙに列挙されるか、または配列番号Ｘおよび／もし
くはｃＤＮＡプラスミドＶによってコードされるポリペプチド中に含まれる、ポ
リペプチド配列）中に含まれる１以上のアミノ酸残基を含み得る。１例では、こ
の共有結合は、ネイティブ（すなわち、天然に存在する）ポリペプチドにおいて
相互作用するポリペプチド配列内に存在するシステイン残基間での架橋である。
別の例では、この共有結合は、化学的操作または組換え操作の結果である。ある
いは、このような共有結合は、融合タンパク質中の異種ポリペプチド配列におい
て含まれる、１以上のアミノ酸残基を含み得る。１例では、共有結合は、本発明
の融合タンパク質に含まれる異種配列間にある（例えば、米国特許番号第５，４
７８，９２５号を参照のこと）。特定の例では、この共有結合は、（本明細書中
に記載されるような）本発明のＦｃ融合タンパク質に含まれる異種配列間にある
。別の特定の例では、本発明の融合タンパク質の共有結合は、共有結合した多量
体を形成し得る別のタンパク質（例えば、オステオプロテゲリン（ｏｓｔｅｏｐ
ｒｏｔｅｇｅｒｉｎ）（例えば、国際公開第ＷＯ ９８／４９３０５号（この内
容はその全体が本明細書中で参考として援用される）を参照のこと）など）由来
の異種ポリペプチド配列間にある。別の実施形態では、２以上の本発明のポリペ
プチドは、ペプチドリンカーを介して連結される。例としては、米国特許番号第
５，０７３，６２７号（本明細書中に参考として援用される）に記載されるペプ
チドリンカーが挙げられる。ペプチドリンカーによって隔てられた本発明の複数
のポリペプチドを含むタンパク質は、従来の組換えＤＮＡ技術を用いて生成され
得る。
【０２８２】 本発明の多量体ポリペプチドを調製する別の方法は、ロイシンジッパーまたは
イソロイシンジッパーのポリペプチド配列に融合した本発明のポリペプチドの使
用を含む。ロイシンジッパードメインおよびイソロイシンジッパードメインは、
それらが発見されたタンパク質の多量体化を促進するポリペプチドである。ロイ
シンジッパーは、本来、いくつかのＤＮＡ結合タンパク質（Ｌａｎｄｓｃｈｕｌ
ｚら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１７５９（１９８８））において同定され、そ
してそれ以来、種々の異なるタンパク質から見出されている。公知のロイシンジ
ッパーは、共通して、二量体化または三量体化する天然に存在するペプチド、お
よびそれらの誘導体である。本発明の可溶性多量体タンパク質を産生するために
適切なロイシンジッパードメインの例は、ＰＣＴ出願ＷＯ９４／１０３０８（本
明細書中で参考として援用される）に記載されるロイシンジッパードメインであ
る。溶液中で二量体化または三量体化するポリペプチド配列と融合した、本発明
のポリペプチドを含む組換え融合タンパク質は、適切な宿主細胞において発現さ
れ、そして得られる可溶性多量体融合タンパク質は、当該分野で公知の技術を使
用して、培養上清から回収される。
【０２８３】 本発明の三量体ポリペプチドは、増大した生物学的活性の利点を提供し得る。
好ましいロイシンジッパー部分およびイソロイシン部分は、優先的に三量体を形
成するものである。１つの例は、Ｈｏｐｐｅら（ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ３
４４：１９１，（１９９４））および米国特許出願第０８／４４６，９２２号（
本明細書中で参考として援用される）に記載されるような、肺サーファクタント
タンパク質Ｄ（ＳＰＤ）から誘導されるロイシンジッパーである。天然に存在す
る三量体タンパク質から誘導される他のペプチドは、本発明の三量体ポリペプチ
ドの調製において使用され得る。
【０２８４】 別の例において、本発明のタンパク質は、Ｆｌａｇ（登録商標）ポリペプチド
配列を含む本発明の融合タンパク質に含まれるＦｌａｇ（登録商標）ポリペプチ
ド配列間の相互作用によって結合される。さらなる実施形態において、本発明の
結合タンパク質は、本発明のＦｌａｇ（登録商標）融合タンパク質に含まれる異
種ポリペプチド配列と抗Ｆｌａｇ（登録商標）抗体との間の相互作用によって結
合される。
【０２８５】 本発明の多量体は、当該分野で公知の化学技術を用いて生成され得る。例えば
、本発明の多量体中に含まれることが所望されるポリペプチドは、当該分野で公
知のリンカー分子およびリンカー分子長最適化技術を用いて化学的に架橋され得
る（例えば、米国特許番号第５，４７８，９２５号を参照のこと、これは、本明
細書中でその全体が参考として援用される）。さらに、本発明の多量体は、多量
体中に含まれることが所望されるポリペプチドの配列中に位置するシステイン残
基間に１つ以上の分子間架橋を形成するために、当該分野で公知の技術を用いて
生成され得る（例えば、米国特許番号第５，４７８，９２５号を参照のこと、こ
れは、本明細書中でその全体が参考として援用される）。さらに、本発明のポリ
ペプチドは、そのポリペプチドのＣ末端またはＮ末端へのシステインまたはビオ
チンの付加によって慣用的に改変され得、そして当該分野で公知の技術が、１つ
以上のこれらの改変したポリペプチドを含む多量体を生成するために適用され得
る（例えば、米国特許番号第５，４７８，９２５号を参照のこと、これは、本明
細書中でその全体が参考として援用される）。さらに、当該分野で公知の技術は
、本発明の多量体に含まれることが所望されるポリペプチド成分を含むリポソー
ムを生成するために適用され得る（例えば、米国特許番号第５，４７８，９２５
号を参照のこと、これは、本明細書中でその全体が参考として援用される）。
【０２８６】 あるいは、本発明の多量体は、当該分野で公知の遺伝子工学技術を用いて生成
され得る。１つの実施形態において、本発明の多量体中に含まれるポリペプチド
は、本明細書中に記載されるかまたはさもなくば当該分野で公知の融合タンパク
質技術を用いて組換え産生される（例えば、米国特許番号第５，４７８，９２５
号を参照のこと、これは、本明細書中でその全体が参考として援用される）。特
定の実施形態において、本発明のホモ二量体をコードするポリヌクレオチドは、
本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を、リンカーポリペプ
チドをコードする配列に連結し、次いで、もともとのＣ末端からＮ末端へ逆方向
にポリペプチドの翻訳産物をコードする合成ポリヌクレオチド（リーダー配列を
欠く）に、さらに連結することによって生成される（例えば、米国特許番号第５
，４７８，９２５号を参照のこと、これは、本明細書中でその全体が参考として
援用される）。別の実施形態において、本明細書中に記載されるかまたはさもな
くば当該分野で公知の組換え技術が適用されて、膜貫通ドメイン（あるいは疎水
性ペプチドまたはシグナルペプチド）を含む本発明の組換えポリペプチドを生成
し、そしてこれは、膜再構成技術によってリポソームに取り込まれ得る（例えば
、米国特許番号第５，４７８，９２５号を参照のこと、これは、本明細書中でそ
の全体が参考として援用される）。
【０２８７】 （抗体） 本発明のさらなるポリペプチドは、本発明の配列番号Ｙのポリペプチド、ポリ
ペプチドフラグメント、もしくは改変体、および／または本発明のエピトープに
免疫特異的に結合する（特異的抗体−抗原結合をアッセイするための当該分野で
周知のイムノアッセイにより決定されるような）抗体およびＴ−細胞抗原レセプ
ター（ＴＣＲ）に関する。本発明の抗体としては、ポリクローナル抗体、モノク
ローナル抗体、多重特異的抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体、単
鎖抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）フラグメント、Ｆａｂ発現ライブラ
リーによって産生されたフラグメント、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例え
ば、本発明の抗体に対する抗Ｉｄ抗体が挙げられる）、および任意の上記抗体の
エピトープ結合フラグメントが挙げられるが、これらに限定されない。本明細書
中で使用される場合、用語「抗体」とは、免疫グロブリン分子および免疫グロブ
リン分子の免疫学的に活性な部分（すなわち、抗原に免疫特異的に結合する抗原
結合部位を含む分子）をいう。本発明の免疫グロブリン分子は、免疫グロブリン
分子の任意の型（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩ
ｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１
およびＩｇＡ２）またはサブクラスの分子であり得る。
【０２８８】 最も好ましくは、抗体は、本発明のヒト抗原結合抗体フラグメントであり、そ
してＦａｂ、Ｆａｂ’およびＦ（ａｂ’）２、Ｆｄ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、単
鎖抗体、ジスルフィド連結Ｆｖ（ｓｄＦｖ）およびＶＬドメインまたはＶＨドメ
インのいずれかを含むフラグメントが挙げられるが、これらに限定されない。単
鎖抗体を含む抗原結合抗体フラグメントは、可変領域を、単独であるいは以下：
ヒンジ領域、ＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインの全体また
は部分との組み合わせで含み得る。ヒンジ領域、ＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイ
ンおよびＣＨ３ドメインと可変領域の任意の組み合わせをもまた含む抗原結合フ
ラグメントもまた、本発明に含まれる。本発明の抗体は、鳥類および哺乳動物を
含む任意の動物起源由来であり得る。好ましくは、この抗体は、ヒト、ネズミ（
例えば、マウスおよびラット）、ロバ、ウサギ（ｓｈｉｐ ｒａｂｂｉｔ）、ヤ
ギ、モルモット、ラクダ、ウマ、またはニワトリである。本明細書中で使用され
る場合、「ヒト」抗体は、ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を有する抗体を含
み、そしてヒト免疫グロブリンライブラリーから、または１つ以上のヒト免疫グ
ロブリンについてトランスジェニックでかつ内因性免疫グロブリンを発現しない
動物（以下および、例えば、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉらによる米国特許番号第
５，９３９，５９８号に記載されるような）から単離された抗体を含む。
【０２８９】 本発明の抗体は、一重特異的、二重特異的、三重特異的またはより多価の多重
特異的であり得る。多重特異的な抗体は、本発明のポリペプチドの異なるエピト
ープに対して特異的であり得るか、または本発明のポリペプチドおよび異種エピ
トープ（例えば、異種ポリペプチドまたは固体支持体物質）の両方に特異的であ
り得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ ９３／１７７１５；ＷＯ９２／０８８０２；
ＷＯ ９１／００３６０；ＷＯ ９２／０５７９３；Ｔｕｔｔら、Ｊ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．１４７：６０−６９（１９９１）；米国特許第４，４７４，８９３号；
同第４，７１４，６８１号；同第４，９２５，６４８号；同第５，５７３，９２
０号；同第５，６０１，８１９号；Ｋｏｓｔｅｌｎｙら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．
１４８：１５４７−１５５３（１９９２）を参照のこと。
【０２９０】 本発明の抗体は、この抗体により認識されるかまたは特異的に結合される本発
明のポリペプチドのエピトープまたは部分によって、記載され得るかまたは特定
化され得る。このエピトープまたはポリペプチド部分は、本明細書中に記載され
るように、例えば、Ｎ末端およびＣ末端位置により、または連続するアミノ酸残
基のサイズにより、特定化され得る。本発明の任意のエピトープまたはポリペプ
チドを特異的に結合する抗体はまた排除され得る。従って、本発明は、本発明の
ポリペプチドを特異的に結合し、そしてこのポリペプチドの排除を可能にする抗
体を含む。
【０２９１】 本発明の抗体はまた、その交差反応性によって記載され得るか、または特定化
され得る。本発明のポリペプチドの任意の他のアナログ、オルソログ（ｏｒｔｈ
ｏｌｏｇ）またはホモログを結合しない抗体が、含まれる。本発明のポリペプチ
ドに対して少なくとも９５％、少なくとも９０％、少なくとも８５％、少なくと
も８０％、少なくとも７５％、少なくとも７０％、少なくとも６５％、少なくと
も６０％、少なくとも５５％および少なくとも５０％の同一性（当該分野で公知
の方法および本明細書において記載された方法を用いて計算される場合）を有す
るポリペプチドを結合する抗体もまた、本発明に含まれる。特定の実施形態にお
いて、本発明の抗体は、ヒトタンパク質のマウスホモログ、ラットホモログおよ
び／またはウサギホモログならびにそれらの対応するエピトープと交差反応する
。本発明のポリペプチドに対して９５％未満、９０％未満、８５％未満、８０％
未満、７５％未満、７０％未満、６５％未満、６０％未満、５５％未満および５
０％未満の同一性（当該分野で公知の方法および本明細書において記載された方
法を用いて計算される場合）を有するポリペプチドに結合しない抗体もまた、本
発明に含まれる。特定の実施形態において、上記の交差反応性は、任意の単一特
異的な抗原性ポリペプチドもしくは免疫原性ポリペプチド、または２、３、４、
５もしくはそれより多くの本明細書中に開示される特異的な抗原性ポリペプチド
および／または免疫原性ポリペプチドの組み合わせに関する。さらに本発明には
、（本明細書中に記載されるような）ストリンジェントなハイブリダイゼーショ
ン条件下で本発明のポリヌクレオチドにハイブリダイズするポリヌクレオチドに
よりコードされるポリペプチドを結合する抗体が含まれる。本発明の抗体はまた
、本発明のポリペプチドに対するその結合親和性によって記載または特定され得
る。好ましい結合親和性としては、５×１０−２Ｍ、１０−２Ｍ、５×１０−３ Ｍ、１０−３Ｍ、５×１０−４Ｍ、１０−４Ｍ、５×１０−５Ｍ、１０−５Ｍ、
５×１０−６Ｍ、１０−６Ｍ、５×１０−７Ｍ、１０−７Ｍ、５×１０−８Ｍ、
１０−８Ｍ、５×１０−９Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−１０Ｍ、
５×１０−１１Ｍ、１０−１１Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１２Ｍ、５×１０ −１３ Ｍ、１０−１３Ｍ、５×１０−１４Ｍ、１０−１４Ｍ、５×１０−１５Ｍ
、または１０−１５Ｍ未満の解離定数すなわちＫｄを有する結合親和性が挙げら
れる。
【０２９２】 本発明はまた、競合的な結合を決定するための当該分野で公知の任意の方法（
例えば、本明細書中に記載されるイムノアッセイ）によって決定されるような、
本発明のエピトープに対する抗体の結合を競合的に阻害する抗体を提供する。好
ましい実施形態において、この抗体は、少なくとも９５％、少なくとも９０％、
少なくとも８５％、少なくとも８０％、少なくとも７５％、少なくとも７０％、
少なくとも６０％、または少なくとも５０％、エピトープに対する結合を競合的
に阻害する。
【０２９３】 本発明の抗体は、本発明のポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストと
して作用し得る。例えば、本発明は、レセプター／リガンドと本発明のポリペプ
チドとの相互作用を部分的または完全にのいずれかで破壊する抗体を含む。好ま
しくは、本発明の抗体は、本明細書中に開示される抗原性のエピトープまたはそ
の部分に結合する。本発明は、レセプター特異的抗体およびリガンド特異的抗体
の両方を特徴とする。本発明はまた、リガンド結合を妨げないがレセプターの活
性化を妨げるレセプター特異的抗体を特徴とする。レセプターの活性化（すなわ
ち、シグナル伝達）は、本明細書中に記載される技術、またはさもなくば当該分
野で公知の技術によって決定され得る。例えば、レセプターの活性化は、（例え
ば、上記されたような）免疫沈降、続いてウエスタンブロット分析によって、レ
セプターのリン酸化（例えば、チロシンまたはセリン／スレオニン）あるいはそ
の基質を検出することによって決定され得る。特定の実施形態において、抗体の
非存在下の活性の少なくとも９５％、少なくとも９０％、少なくとも８５％、少
なくとも８０％、少なくとも７５％、少なくとも７０％、少なくとも６０％、ま
たは少なくとも５０％でリガンド活性またはレセプター活性を阻害する抗体を提
供する。
【０２９４】 本発明はまた、リガンド結合およびレセプター活性化の両方を妨げるレセプタ
ー特異的抗体、ならびにレセプター−リガンド複合体を認識し、そして、好まし
くは、結合していないレセプターまたは結合していないリガンドを特異的に認識
しない抗体を特徴とする。同様に、本発明には、リガンドに結合し、そしてリガ
ンドのレセプターへの結合を妨げる中和抗体、ならびにリガンドに結合し、それ
によってレセプター活性化を妨げるが、リガンドがレセプターに結合することは
妨げない抗体が含まれる。さらに本発明に含まれるのは、レセプターを活性化す
る抗体である。これらの抗体は、レセプターアゴニストとして作用し得、すなわ
ち、リガンド媒介のレセプター活性化の生物学的活性のすべてまたはサブセット
（ｓｕｂｓｅｔ）のいずれかを増強または活性化し得る（例えば、レセプターの
二量体化を誘導することによる）。この抗体は、本明細書中に開示される本発明
のペプチドの特定の生物学的活性を含む生物学的活性に対するアゴニスト、アン
タゴニストまたはインバース（ｉｎｖｅｒｓｅ）アゴニストとして特定化され得
る。上記の抗体アゴニストは、当該分野で公知の方法を用いて作製され得る。例
えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９６／４０２８１；米国特許第５，８１１，０９７号；Ｄ
ｅｎｇら、Ｂｌｏｏｄ ９２（６）：１９８１−１９８８（１９９８）；Ｃｈｅ
ｎら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５８（１６）：３６６８−３６７８（１９９８）
；Ｈａｒｒｏｐら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１（４）：１７８６−１７９４（
１９９８）；Ｚｈｕら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ：５８（１５）：３２０９−３２
１４（１９９８）；Ｙｏｏｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０（７）：３１７０
−３１７９（１９９８）；Ｐｒａｔら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．１１１（Ｐｔ２
）：２３７−２４７（１９９８）；Ｐｉｔａｒｄら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅ
ｔｈｏｄｓ ２０５（２）：１７７−１９０（１９９７）；Ｌｉａｕｔａｒｄら
、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ９（４）：２３３−２４１（１９９７）；Ｃａｒｌｓｏｎ
ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２（１７）：１１２９５−１１３０１（１９
９７）；Ｔａｒｙｍａｎら、Ｎｅｕｒｏｎ １４（４）：７５５−７６２（１９
９５）；Ｍｕｌｌｅｒら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ６（９）：１１５３−１１６７
（１９９８）；Ｂａｒｔｕｎｅｋら、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８（１）：１４−２０
（１９９６）（上記の文献はすべて、その全体が本明細書において参考として援
用される）を参照のこと。
【０２９５】 本発明の抗体は、例えば、インビトロおよびインビボの両方における診断方法
および治療方法を含む本発明のポリペプチドを精製、検出および標的化するのた
めに使用され得るが、これに限定されない。例えば、この抗体は、生物学的サン
プルにおいて本発明のポリペプチドのレベルを定性的および定量的に測定するた
めのイムノアッセイにおいて用途を有する。例えば、Ｈａｒｌｏｗら，Ａｎｔｉ
ｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒ
ｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，第２版，１９８８
）（その全体が参考として本明細書中に援用される）を参照のこと。
【０２９６】 以下により詳細が議論されるように、本発明の抗体は、単独で、または他の組
成物との組み合わせのいずれかで用いられ得る。この抗体は、さらに、Ｎ末端も
しくはＣ末端で異種ポリペプチドに組換え的に融合され得るか、またはポリペプ
チドもしくは他の組成物に化学的に結合（共有結合および非共有結合を含む）さ
れ得る。例えば、本発明の抗体は、検出アッセイにおける標識として有用な分子
およびエフェクター分子（例えば、異種ポリペプチド、薬物、放射性核種または
毒素）に、組換え的に融合または結合され得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９２／
０８４９５；ＷＯ９１／１４４３８；ＷＯ８９／１２６２４；米国特許第５，３
１４，９９５号；およびＥＰ３９６，３８７号を参照のこと。
【０２９７】 本発明の抗体は、改変された（すなわち、共有結合性付着（ｃｏｖａｌｅｎｔ
ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ）が、抗体が抗イディオタイプ応答を産生するのを妨げ
ないような、抗体に対する任意の型の分子の共有結合性付着による）誘導体を含
む。例えば、制限されないが、抗体誘導体としては、例えば、グリコシル化、ア
セチル化、ぺグ化（ｐｅｇｙｌａｔｉｏｎ）、リン酸化（ｐｈｏｓｐｈｙｌａｔ
ｉｏｎ）、アミド化、既知の保護基／ブロック基（ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｇｒｏｕ
ｐ）による誘導体化、タンパク質分解性切断、細胞性リガンドまたは他のタンパ
ク質への連結などによって改変された抗体が挙げられる。多数の任意の化学的改
変が、特異的化学切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝的合成
などを含むが、これらに制限されない公知の技術によって実行され得る。さらに
、誘導体は、１つ以上の非古典的アミノ酸を含み得る。
【０２９８】 本発明の抗体は、当該分野で公知の任意の適切な方法によって産生され得る。
目的の抗原に対するポリクローナル抗体は、当該分野で周知の種々の手順によっ
て産生され得る。例えば、本発明のポリペプチドが種々の宿主動物（ウサギ、マ
ウス、ラットなどを含むがこれらに限定されない）に投与されて、抗原に対して
特異的なポリクローナル抗体を含む血清の産生を誘導し得る。種々のアジュバン
トが、宿主種に依存して、免疫学的応答を増加させるために使用され得、そして
フロイント（完全および不完全）、水酸化アルミニウムのようなミネラルゲル（
ｍｉｎｅｒａｌ ｇｅｌ）、リゾレシチンのような界面活性物質、プルロニック
（ｐｌｕｒｏｎｉｃ）ポリオール、ポリアニオン、ペプチド、オイルエマルジョ
ン、キーホールリンペットヘモシアニン、ジニトロフェノール、ならびにＢＣＧ
（カルメット−ゲラン杆菌）およびｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐａｒｖ
ｕｍのような潜在的に有用なヒトアジュバントを含むが、これらに限定されない
。このようなアジュバントはまた、当該分野で周知である。
【０２９９】 モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ、組換え、およびファージディスプレ
イ技術、またはそれらの組み合わせの使用を含む、当該分野で公知の広範な種々
の技術を用いて調製され得る。例えば、モノクローナル抗体は、当該分野で公知
の以下に挙げられるハイブリドーマ技術を使用して産生され得、例えば、Ｈａｒ
ｌｏｗら、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，
（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ
，第２版、１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎ
ｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ５６３−６
８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．１９８１）（上記の参考文献は、その全体が
参考として援用される）に教示される。本明細書中で使用される場合、用語「モ
ノクローナル抗体」とは、ハイブリドーマ技術を通して生成された抗体に限定さ
れない。用語「モノクローナル抗体」とは、任意の真核生物、原核生物、または
ファージクローンを含む単一のクローンに由来する抗体をいい、そしてその生成
される方法ではない。
【０３００】 ハイブリドーマ技術を用いて特異的抗体を産生およびスクリーニングする方法
は、当該分野で慣用的かつ周知であり、そして実施例に詳細に議論される。非限
定的な実施例において、マウスは、本発明のポリペプチドまたはそのようなペプ
チドを発現する細胞を用いて免疫され得る。一旦免疫応答が検出される（例えば
、抗原に特異的な抗体がマウスの血清中に検出される）と、マウスの脾臓を収集
しそして脾細胞を単離する。次に、その脾細胞を周知の技術によって任意の適切
な骨髄腫細胞（例えば、ＡＴＣＣから入手可能な細胞株ＳＰ２０由来の細胞）に
融合させる。ハイブリドーマを限界希釈によって選択およびクローン化する。次
に、ハイブリドーマクローンを、本発明のポリペプチドに結合し得る抗体を分泌
する細胞について、当該分野で公知の方法によってアッセイする。一般的に高い
レベルの抗体を含む腹水（ａｓｃｉｔｅｓ ｆｌｕｉｄ）が、陽性ハイブリドー
マクローンを用いてマウスを免疫させることによって、産生され得る。
【０３０１】 従って、本発明は、モノクローナル抗体および本発明の抗体を分泌するハイブ
リドーマ細胞を培養する工程を包含する方法によって産生される抗体を、産生す
る方法を提供し、ここで、好ましくは、このハイブリドーマは、骨髄腫細胞と本
発明の抗原で免疫したマウスから単離された脾細胞とを融合させることによって
、次いで本発明のポリペプチドと結合し得る抗体を分泌するハイブリドーマクロ
ーンについて、融合物から生じるハイブリドーマをスクリーニングすることによ
って産生される。
【０３０２】 特定のエピトープを認識する抗体フラグメントは、公知の技術によって産生さ
れ得る。例えば、本発明のＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２フラグメントは、（Ｆａ
ｂフラグメントを産生するための）パパインまたは（Ｆ（ａｂ’）２フラグメン
トを産生するための）ペプシンのような酵素を使用して、免疫グロブリン分子の
タンパク質分解切断によって産生され得る。Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは、可
変領域、軽鎖定常領域および重鎖のＣＨ１ドメインを含む。例えば、本発明の抗
体はまた、当該分野で公知の種々のファージディスプレイ方法を用いて産生され
得る。ファージディスプレイ法において、機能的抗体ドメインは、それらをコー
ドするポリヌクレオチド配列を保有するファージ粒子の表面に提示される。特定
の実施形態において、そのようなファージは、レパートリーまたはコンビナトリ
アル抗体ライブラリー（例えば、ヒトまたはマウス）から発現される抗原結合ド
メインを提示するために利用され得る。目的の抗原に結合する抗原結合ドメイン
を発現するファージは、抗原を用いて選択または同定され得る（例えば、標識し
た抗体あるいは固体表面またはビーズに結合または捕捉された抗原を使用する）
。これらの方法において用いられるファージは、代表的には、ファージ遺伝子Ｉ
ＩＩタンパク質またはファージ遺伝子ＶＩＩＩタンパク質のいずれかに組換え的
に融合されたＦａｂ、Ｆｖまたはジスルフィド安定化されたＦｖの抗体ドメイン
を有するファージから発現されたｆｄおよびＭ１３結合ドメインを含む糸状ファ
ージ（ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ ｐｈａｇｅ）である。本発明の抗体を作製する
ために用いられ得るファージディスプレイ方法の例としては、以下に開示される
方法が挙げられる：Ｂｒｉｎｋｍａｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
１８２：４１−５０（１９９５）；Ａｍｅｓら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔ
ｈｏｄｓ １８４：１７７−１８６（１９９５）；Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈ
ら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：９５２−９５８（１９９４）；Ｐｅｒ
ｓｉｃら、Ｇｅｎｅ １８７ ９−１８（１９９７）；Ｂｕｒｔｏｎら、Ａｄｖ
ａｎｃｅｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ５７：１９１−２８０（１９９４）
；ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＧＢ９１／０１１３４；ＰＣＴ公開ＷＯ ９０／０２
８０９；ＷＯ ９１／１０７３７；ＷＯ ９２／０１０４７；ＷＯ ９２／１８
６１９；ＷＯ ９３／１１２３６；ＷＯ ９５／１５９８２；ＷＯ ９５／２０
４０１；ならびに米国特許第５，６９８，４２６号；同第５，２２３，４０９号
；同第５，４０３，４８４号；同第５，５８０，７１７号；同第５，４２７，９
０８号；同第５，７５０，７５３号；同第５，８２１，０４７号；同第５，５７
１，６９８号；同第５，４２７，９０８号；同第５，５１６，６３７号；同第５
，７８０，２２５号；同第５，６５８，７２７号；同第５，７３３，７４３号お
よび同第５，９６９，１０８号（これらの各々は、本明細書中でその全体が参考
として援用される）。
【０３０３】 上記参考文献に記載されるように、ファージ選択後、ファージ由来の抗体をコ
ードする領域は、ヒト抗体を含む抗体の全体または任意の他の所望の抗原結合フ
ラグメントを生成するために単離されかつ用いられ得、そして例えば、以下に詳
細が記載されるように、哺乳動物細胞、昆虫細胞、植物細胞、酵母および細菌を
含む任意の所望の宿主において発現され得る。例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’および
Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを組換え的に産生するための技術はまた、当該分野
で公知の方法を用いて使用され得、このような方法は、以下に開示される：ＰＣ
Ｔ公開ＷＯ ９２／２２３２４；Ｍｕｌｌｉｎａｘら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕ
ｅｓ １２（６）：８６４−８６９（１９９２）；およびＳａｗａｉら、ＡＪＲ
Ｉ ３４：２６−３４（１９９５）；およびＢｅｔｔｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ
２４０：１０４１−１０４３（１９９８）（これらの参考文献は、その全体が参
考として援用される）。
【０３０４】 単鎖のＦｖｓおよび抗体を産生するために用いられ得る技術の例としては、米
国特許第４，９４６，７７８号および同第５，２５８，４９８号；Ｈｕｓｔｏｎ
ら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ２０３：４６−８８（１９
９１）；Ｓｈｕら、ＰＮＡＳ ９０：７９９５−７９９９（１９９３）；および
Ｓｋｅｒｒａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０３８−１０４０（１９８８）に
記載される技術が挙げられる。ヒトにおける抗体のインビボにおける使用および
インビトロ検出アッセイを含むいくつかの用途のために、キメラ抗体、ヒト化抗
体またはヒト抗体の使用が好ましくあり得る。キメラ抗体とは、抗体の異なる部
分が、異なる動物種に由来する分子（例えば、マウスモノクローナル抗体由来の
可変領域およびヒト免疫グロブリン定常領域を有する抗体）である。キメラ抗体
を産生するための方法は、当該分野において公知である。例えば、Ｍｏｒｒｉｓ
ｏｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２（１９８５）；Ｏｉら、ＢｉｏＴｅｃ
ｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４（１９８６）；Ｇｉｌｌｉｅｓら、（１９８９）Ｊ
．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １２５：１９１−２０２；米国特許第５，
８０７，７１５号；同第４，８１６，５６７号；および同第４，８１６，３９７
号を参照のこと（これらはそれらの全体が、参考として本明細書中に援用される
）。ヒト化抗体は、非ヒト種由来の１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）および
ヒト免疫グロブリン分子由来のフレームワーク領域を有する所望された抗原に結
合する非ヒト種抗体由来の抗体分子である。しばしば、ヒトフレームワーク領域
内のフレームワーク残基（ｆｒａｍｅｗｏｒｋ ｒｅｓｉｄｕｅ）は、抗原結合
を変化させるため（好ましくは改善させるために）ＣＤＲドナー抗体由来の対応
残基と置換される。これらフレームワークの置換は、当該分野で周知の方法によ
って同定され、例えば、抗原結合に重要なフレームワーク残基を同定するための
ＣＤＲおよびフレームワーク残基の相互作用のモデリング、ならびに特定の位置
における異常なフレームワーク残基を同定するための配列比較による。（例えば
、Ｑｕｅｅｎら、米国特許第５，５８５，０８９号；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎ
ａｔｕｒｅ ３３２：３２３（１９８８）を参照のこと（これらはそれらの全体
が参考として本明細書中に援用される）。）抗体は、以下を含む当該分野で公知
の種々の技術を用いてヒト化され得る：例えば、ＣＤＲ−移植（欧州特許第２３
９，４００号；ＰＣＴ公開ＷＯ ９１／０９９６７；米国特許第５，２２５，５
３９号；同第５，５３０，１０１号および同第５，５８５，０８９号）、ベニヤ
リング（ｖｅｎｅｅｒｉｎｇ）またはリサーフェイシング（ｒｅｓｕｒｆａｃｉ
ｎｇ）（欧州特許第５９２，１０６号；同第５１９，５９６号；Ｐａｄｌａｎ、
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２８（４／５）：４８９−４９８
（１９９１）； Ｓｔｕｄｎｉｃｋａら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉ
ｎｇ ７（６）：８０５−８１４（１９９４）；Ｒｏｇｕｓｋａら、ＰＮＡＳ
９１：９６９−９７３（１９９４））、およびチェーンシャッフリング（ｃｈａ
ｉｎ ｓｈｕｆｆｌｉｎｇ）（米国特許第５，５６５，３３２号）。
【０３０５】 完全なヒト抗体は、ヒト患者の治療的処置に対して特に所望される。ヒト抗体
は、ヒト免疫グロブリン配列に由来する抗体ライブラリーを用いた上記のファー
ジディスプレイ法を含む当該分野で公知の種々の方法により作製され得る。米国
特許第４，４４４，８８７号、同第４，７１６，１１１号；およびＰＣＴ公開Ｗ
Ｏ ９８／４６６４５、ＷＯ ９８／５０４３３、ＷＯ ９８／２４８９３、Ｗ
Ｏ ９８／１６６５４、ＷＯ ９６／３４０９６、ＷＯ ９６／３３７３５、お
よびＷＯ ９１／１０７４１；（これらの各々はその全体が参考として本明細書
中に援用される）もまた参照のこと。
【０３０６】 ヒト抗体はまた、機能的内因性免疫グロブリンの発現は出来ないが、ヒト免疫
グロブリン遺伝子を発現し得るトランスジェニックマウスを用いて産生され得る
。例えば、ヒト重鎖免疫グロブリン遺伝子およびヒト軽鎖免疫グロブリン遺伝子
の複合体は、無作為にまたは相同組換えによってマウス胚性幹細胞に導入され得
る。あるいは、ヒト可変領域、定常領域および多様性領域（ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｒｅｇｉｏｎ）は、ヒト重鎖遺伝子およびヒト軽鎖遺伝子に加えて、マウスの
胚性幹細胞に導入され得る。マウス重鎖免疫グロブリン遺伝子およびマウス軽鎖
免疫グロブリン遺伝子は、相同組換えによるヒト免疫グロブリン座の導入と別々
にまたは同時に非機能的にされ得る。特に、ＪＨ領域のホモ接合性の欠失は、内
因性抗体の産生を妨げる。改変された胚性幹細胞を発展させ、そしてキメラマウ
スを産生するために胚盤胞中に微量注入する。次に、キメラマウスを、ヒト抗体
を発現するホモ接合性の子孫を産生するために繁殖させる。トランスジェニック
マウスを、選択された抗原（例えば、本発明のポリペプチドの全体または部分）
を用いて通常の様式で免疫する。抗原に対するモノクローナル抗体は、従来のハ
イブリドーマ技術を用いた免疫したトランスジェニックマウスから得られ得る。
トランスジェニックマウスに保持されたヒト免疫グロブリン導入遺伝子は、Ｂ細
胞分化の間に再編成し、そしてその後、クラススイッチングおよび体細胞変異を
受ける。従って、そのような技術の使用によって、治療的に有用なＩｇＧ抗体、
ＩｇＡ抗体、ＩｇＭ抗体およびＩｇＥ抗体の産生が可能である。ヒト抗体を産生
するためのこの技術の概要については、ＬｏｎｂｅｒｇおよびＨｕｓｚａｒ、Ｉ
ｎｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５−９３（１９９５）を参照のこと。
ヒト抗体およびヒトモノクローナル抗体を産生するためのこの技術のならびにそ
のような抗体を産生するためのプロトコールの詳細な議論については、例えば、
ＰＣＴ公開ＷＯ９８／２４８９３；ＷＯ９２／０１０４７；ＷＯ９６／３４０９
６；ＷＯ９６／３３７３５；欧州特許第０ ５９８ ８７７；米国特許第５，４
１３，９２３号；同第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；同第
５，５６９，８２５号；同第５，６６１，０１６号；同第５，５４５，８０６号
；同第５，８１４，３１８号；同第５，８８５，７９３号；同第５，９１６，７
７１号；および同第５，９３９，５９８号を参照のこと（これらはその全体が本
明細書中に参考として援用される）。さらに、Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｉｎｃ．（Ｆｒ
ｅｅｍｏｎｔ，ＣＡ）およびＧｅｎｐｈａｒｍ（Ｓａｎ Ｊｏｓｅ，ＣＡ）のよ
うな企業は、上記の技術に類似した技術を用いて選択された抗原に対するヒト抗
体を提供することに従事し得る。
【０３０７】 選択されたエピトープを完全に認識するヒト抗体を、「ガイドされた（ｇｕｉ
ｄｅｄ）選択」といわれる技術を用いて産生し得る。このアプローチにおいて、
選択された非ヒトモノクローナル抗体（例えば、マウス抗体）は、同じエピトー
プを完全に認識するヒト抗体の選択を導くために使用される。（Ｊｅｓｐｅｒｓ
ら、Ｂｉｏ／ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １２：８９９−９０３（１９８８））。
【０３０８】 さらに、本発明のポリペプチドに対する抗体は、当業者に周知の技術を用いて
本発明のポリペプチドを「模倣する」抗イディオタイプ抗体を産生するために順
々に利用され得る。（例えば、ＧｒｅｅｎｓｐａｎおよびＢｏｎａ、ＦＡＳＥＢ Ｊ．７（５）：４３７−４４４；（１９８９）およびＮｉｓｓｉｎｏｆｆ，Ｊ
．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７（８）：２４２９−２４３８（１９９１）を参照のこ
と。）例えば、結合し、そしてポリペプチドの多量体化（ｍｕｌｔｉｍｅｒｉｚ
ａｔｉｏｎ）および／またはリガンドに対する本発明のポリペプチドの結合を競
合的に阻害する抗体が、ポリペプチドの多量体化ドメインおよび／または結合ド
メインを「模倣する」抗イディオタイプを産生するために使用され得、そして結
果としてポリペプチドおよび／またはそのリガンドに結合し、そして中和する。
このような抗イディオタイプまたはそのような抗イディオタイプのＦａｂフラグ
メントの中和は、ポリペプチドリガンドを中和するための治療的レジメンに使用
され得る。例えば、そのような抗イディオタイプ抗体は、本発明のポリペプチド
に結合するためおよび／またはそのリガンド／レセプターに結合するために使用
され得、そしてそれによってその生物学的活性がブロックされる。
【０３０９】 （抗体をコードするポリヌクレオチド） 本発明はさらに、本発明の抗体およびそのフラグメントをコードするヌクレオ
チド配列を含むポリヌクレオチドを提供する。本発明はまた、ストリンジェント
な、またはより低いストリジェンシーなハイブリダイゼーション条件下で（例え
ば、上記に定義されるような）抗体（好ましくは、本発明のポリペプチドと特異
的に結合する、好ましくは、配列番号Ｙのアミノ酸配列を有するポリペプチドに
結合する抗体）をコードするポリヌクレオチドにハイブリダイズするポリヌクレ
オチドを含む。
【０３１０】 ポリヌクレオチドは、当該分野で公知の任意の方法によって得られ得、そして
そのポリヌクレオチドのヌクレオチド配列は決定される。例えば、抗体のヌクレ
オチド配列が知られている場合、この抗体をコードするポリヌクレオチドは、化
学的に合成されたオリゴヌクレオチドから構築され得（例えば、Ｋｕｔｍｅｉｅ
ｒら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １７：２４２（１９９４）に記載されるよ
うな）、これは、簡単にいうと、以下の工程を包含する：この抗体をコードする
配列の部分を含むオーバーラップするオリゴヌクレオチドの合成、これらのオリ
ゴヌクレオチドのアニーリングおよび連結、次いでＰＣＲによる連結されたオリ
ゴヌクレオチドの増幅。
【０３１１】 あるいは、抗体をコードするポリヌクレオチドは、適切な供給源からの核酸か
ら生成され得る。特定の抗体をコードする核酸を含むクローンは入手不可能だが
、その抗体分子の配列が既知である場合、その免疫グロブリンをコードする核酸
は、化学的に合成され得るか、あるいは適切な供給源（例えば、抗体ｃＤＮＡラ
イブラリー、または抗体を発現する任意の組織もしくは細胞（例えば、本発明の
抗体の発現のために選択されたハイブリドーマ細胞）から生成されたｃＤＮＡラ
イブラリー、またはそれから単離された核酸（好ましくはポリＡ＋ＲＮＡ））か
ら、例えば、その抗体をコードするｃＤＮＡライブラリーからのｃＤＮＡクロー
ンを同定するために、配列の３’末端および５’末端にハイブリダイズ可能な合
成プライマーを使用するＰＣＲ増幅によって、または特定の遺伝子配列に特異的
なオリゴヌクレオチドプローブを使用するクローニングによって得られ得る。Ｐ
ＣＲによって生成された増幅された核酸は、次いで、当該分野で周知の任意の方
法を用いて、複製可能なクローニングベクターにクローニングされ得る。
【０３１２】 一旦、抗体のヌクレオチド配列および対応するアミノ酸配列が決定されると、
抗体のヌクレオチド配列は、ヌクレオチド配列の操作について当該分野で周知の
方法（例えば、組換えＤＮＡ技術、部位指向性変異誘発、ＰＣＲなど（例えば、
Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９９０，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌ
ａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，第２版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒ
ｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ
およびＡｕｓｕｂｅｌら編、１９９８，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ
ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ
，ＮＹに記載の技術を参照のこと。これらは両方がその全体において本明細書に
参考として援用される。））を用いて操作され、例えば、アミノ酸の置換、欠失
、および／または挿入を作製するように異なるアミノ酸配列を有する抗体を生成
し得る。
【０３１３】 特定の実施形態では、重鎖および／または軽鎖の可変ドメインのアミノ酸配列
は、相補性決定領域（ＣＤＲ）の配列を同定するために、当該分野で周知の方法
、例えば、他の重鎖および軽鎖の可変領域の既知のアミノ酸配列を比較して、配
列超可変性領域を決定する方法、によって、調べられ得る。慣用的組換えＤＮＡ
技術を使用して、一つ以上のＣＤＲが、フレームワーク領域内、例えば、上記の
ように、非ヒト抗体をヒト化させるためにヒトフレームワーク領域内に挿入され
得る。このフレームワーク領域は、天然に存在、または共通するフレームワーク
領域であり得、そして好ましくはヒトフレームワーク領域であり得る（ヒトフレ
ームワーク領域の一覧については、例えばＣｈｏｔｈｉａら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉ
ｏｌ． ２７８：４５７−４７９（１９９８）を参照のこと）。好ましくは、フ
レームワーク領域およびＣＤＲの組合せによって生成するポリヌクレオチドは、
本発明のポリペプチドに特異的に結合する抗体をコードする。好ましくは、上で
考察したように、一つ以上のアミノ酸の置換は、フレームワーク領域内で起こり
、そして好ましくは、このアミノ酸置換は、その抗原への抗体の結合を改善する
。さらに、このような方法は、アミノ酸置換させるため、または鎖内ジスルフィ
ド結合に参加している一つ以上の可変領域システイン残基を欠失させて、一つ以
上の鎖内ジスルフィド結合が欠けた抗体分子を生成させるために、使用され得る
。ポリペプチドに対する他の改変は、本発明および当該分野の技術によって達成
される。
【０３１４】 さらに、適切な抗原特異性のマウス抗体分子からの遺伝子を、適切な生物学的
活性のヒト抗体分子からの遺伝子とともに、スプライシングすることによる、「
キメラ抗体」（Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．
８１：８５１−８５５（１９８４）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３
１２：６０４−６０８（１９８４）；Ｔａｋｅｄａら、Ｎａｔｕｒｅ ３１４：
４５２−４５４（１９８５））の産生のために開発された技術が、使用され得る
。上記のように、キメラ抗体は、異なる部分が異なる動物の種に由来する分子（
例えばマウスｍＡｂに由来する可変領域およびヒト免疫グロブリン定常領域を有
する分子）であり、例えばヒト化抗体である。
【０３１５】 あるいは、一本鎖抗体の産生について記載された技術（米国特許第４，９４６
，７７８号；Ｂｉｒｄ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３−４２（１９８８）；
Ｈｕｓｔｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８
７９−５８８３（１９９８）；およびＷａｒｄら、Ｎａｔｕｒｅ ３３４：５４
４−５４（１９８９））は、一本鎖抗体を産生するために適合され得る。一本鎖
抗体は、アミノ酸架橋を介して、Ｆｖ領域の重鎖および軽鎖フラグメントを連結
し、一本鎖ポリペプチドを生じることによって形成される。Ｅ．ｃｏｌｉにおけ
る機能的Ｆｖフラグメントのアセンブリのための技術もまた使用され得る（Ｓｋ
ｅｒｒａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：１０３８−１０４１（１９９８））。
【０３１６】 （抗体産生の方法） 本発明の抗体は、抗体の合成について当該技術分野で公知の方法によって、特
に化学合成によって、または好ましくは組換え発現技術によって、産生され得る
。
【０３１７】 本発明の抗体、またはそのフラグメント、誘導体もしくはアナログ（例えば、
本発明の抗体の重鎖もしくは軽鎖、または本発明の一本鎖抗体）の組換え発現は
、抗体をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターの構築を必要とする。
本発明の、抗体分子または抗体の重鎖もしくは軽鎖、またはそれらの部分（好ま
しくは重鎖もしくは軽鎖の可変ドメインを含む）をコードするポリヌクレオチド
が一旦得られれば、抗体分子の産生のためのベクターは、当該分野で周知の技術
を使用する組換えＤＮＡ技術によって産生され得る。従って、ヌクレオチド配列
をコードする抗体を含むポリヌクレオチドの発現によってタンパク質を調製する
ための方法は、本明細書中に記載される。当業者に周知の方法は、抗体コード配
列ならびに適切な転写および翻訳制御シグナルを含む発現ベクターを構築するた
めに使用され得る。これらの方法は、例えば，インビトロ組換えＤＮＡ技術、合
成技術、およびインビボ遺伝子組換えを含む。従って、本発明は、本発明の抗体
分子をコードするヌクレオチド配列、またはその重鎖もしくは軽鎖、またはプロ
モーターに作動可能に連結された、重鎖もしくは軽鎖の可変ドメイン、を含む複
製可能ベクターを提供する。このようなベクターは、抗体分子の定常領域をコー
ドするヌクレオチド配列を含み（例えば、ＰＣＴ国際公開第ＷＯ ８６／０５８
０７号；ＰＣＴ国際公開第ＷＯ ８９／０１０３６；および米国特許第５，１２
２，４６４号を参照のこと。）、そして、この抗体の可変領域は、重鎖または軽
鎖の全体の発現のためにこのようなベクター内にクローニングされ得る。
【０３１８】 発現ベクターは、従来の技術によって宿主細胞に移入され、次いでトランスフ
ェクト細胞は、従来の技術によって本発明の抗体を産生するために培養される。
従って、本発明は、本発明の抗体をコードするポリヌクレオチド、またはその重
鎖もしくは軽鎖、または異種のプロモーターに作動可能に連結された、本発明の
一本鎖抗体を含む宿主細胞を含む。二本鎖抗体の発現のための好ましい実施形態
では、重鎖および軽鎖の両方をコードするベクターは、下記の詳細のように、免
疫グロブリン分子全体の発現のための宿主細胞において共発現され得る。
【０３１９】 種々の宿主発現ベクター系は、本発明の抗体分子を発現させるために利用され
得る。このような宿主発現系は、目的のコード配列が産生され、かつ続いて精製
され得るビヒクルを表わすが、また、適切なヌクレオチドをコードする配列で形
質転換またはトランスフェクトされる場合に、インサイチュで本発明の抗体分子
を発現し得る細胞を表わす。これらには、以下が挙げられるが、これらに限定さ
れない：抗体をコードする配列を含む組換えバクテリオファージＤＮＡ発現ベク
ター、プラスミドＤＮＡ発現ベクターまたはコスミドＤＮＡ発現ベクターを用い
て形質転換された細菌（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のよう
な微生物；抗体をコードする配列を含む組換え酵母発現ベクターで形質転換され
た酵母（例えば、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｐｉｃｈｉａ）；抗体をコード
する配列を含む組換えウイルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）に感
染した昆虫細胞系；組換えウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイ
クウイルス、ＣａＭＶ；タバコモザイクウイルス、ＴＭＶ）に感染した植物細胞
系または抗体をコードする配列を含む組換えプラスミド発現ベクター（例えば、
Ｔｉプラスミド）で形質転換された植物細胞系；あるいは哺乳動物細胞のゲノム
に由来するプロモーター（例えば、メタロチオネインプロモーター）または哺乳
動物のウイルスに由来するプロモーター（例えば、アデノウイルス後期プロモー
ター；ワクシニアウイルス７．５Ｋプロモーター）を含む組換え発現構築物を保
有する哺乳動物細胞系（例えば、ＣＯＳ、ＣＨＯ、ＢＨＫ、２９３、３Ｔ３細胞
）。好ましくは、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉのような細菌細胞、そして
より好ましくは、特に、組換え抗体分子全体の発現のために真核生物細胞が、組
換え抗体分子の発現のために使用される。例えば、ヒトサイトメガロウイルス由
来の主要最初期遺伝子プロモーターエレメントのようなベクターと組み合わされ
た、チャイニーズハムスターの卵巣細胞（ＣＨＯ）のような哺乳動物細胞が、抗
体のための効果的な発現系である（Ｆｏｅｃｋｉｎｇら、Ｇｅｎｅ ４５：１０
１（１９８６）；Ｃｏｃｋｅｔｔら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ８：２（
１９９０））。
【０３２０】 細菌系において、多くの発現ベクターが、抗体分子の発現を意図する使用に依
存して有利に選択され得る。例えば、多量のこのようなタンパク質が産生される
場合、抗体分子の薬学的組成物の生成のために、容易に精製される融合タンパク
質産物の高レベルの発現を指向するベクターが所望され得る。このようなベクタ
ーには、以下が挙げられるが、これらに限定されない：抗体をコードする配列が
ｌａｃＺをコードする領域と共にベクターにインフレーム（ｉｎ ｆｒａｍｅ）
で個別に連結され得、その結果、融合タンパク質が産生されるＥ．ｃｏｌｉ発現
ベクターｐＵＲ２７８（Ｒｕｔｈｅｒら、ＥＭＢＯ Ｊ．２：１７９１（１９８
３））；ｐＩＮベクター（Ｉｎｏｕｙｅ＆Ｉｎｏｕｙｅ、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃ
ｉｄｓ Ｒｅｓ．１３：３１０１−３１０９（１９８５）；Ｖａｎ Ｈｅｅｋｅ
＆Ｓｃｈｕｓｔｅｒ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２４：５５０３−５５０９（１
９８９））など。ｐＧＥＸベクターもまた、グルタチオンＳ−トランスフェラー
ゼ（ＧＳＴ）との融合タンパク質として、外来性ポリペプチドを発現させるため
に使用され得る。一般に、このような融合タンパク質は可溶性であり、そして溶
解した細胞から、マトリックスグルタチオン−アガロースビーズへの吸着および
結合、それに続く遊離グルタチオン存在化での溶出によって容易に精製され得る
。このｐＧＥＸベクターは、トロンビンまたはＸａ因子プロテアーゼ切断部位を
含むように設計され、その結果、このクローニングされた標的遺伝子産物は、Ｇ
ＳＴ部分から放出され得る。
【０３２１】 昆虫系においては、Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ核多角体
病ウィルス（ＡｃＮＰＶ）は、異種遺伝子を発現するためのベクターとして使用
される。このウィルスは、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞に
おいて増殖する。抗体をコードする配列は、このウィルスの非必須の領域（例え
ばポリヘドリン遺伝子）に個々にクローニングされ得、そしてＡｃＮＰＶプロモ
ーター（例えばポリヘドリンプロモーター）の制御下に配置され得る。
【０３２２】 哺乳動物宿主細胞においては、多数のウィルスに基づく発現系が利用され得る
。アデノウィルスが発現ベクターとして使用される場合においては、目的の抗体
をコードする配列は、アデノウィルスの転写／翻訳制御複合体、例えば後期プロ
モーターおよび３つの部分に分かれるリーダー配列、に連結され得る。次いで、
このキメラ遺伝子は、インビトロまたはインビボでの組換えによって、アデノウ
ィルスゲノムに挿入され得る。ウィルスのゲノムの非必須領域（例えば、Ｅ１ま
たはＥ３領域）における挿入は、生存可能で、感染した宿主において抗体分子を
発現する能力のある組換えウィルスを生じる（例えば、Ｌｏｇａｎ＆Ｓｈｅｎｋ
、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：３５５−３５９（１
９８４）を参照のこと）。特異的開始シグナルはまた、挿入された抗体をコード
する配列の効率的な翻訳のために必要とされ得る。これらのシグナルは、ＡＴＧ
開始コドンおよび隣接する配列を含む。さらに、この開始コドンは、挿入部分全
体の翻訳を確実にするために、所望されるコード配列のリーディングフレーム（
ｒｅａｄｉｎｇ ｆｒａｍｅ）と相が同じでなければならない。これらの外因性
翻訳制御シグナルおよび開始コドンは、種々の起源、天然および合成の両方であ
り得る。発現の効率は、適切な転写エンハンサーエレメント、転写ターミネータ
ー、などの含有によって高められ得る（Ｂｉｔｔｎｅｒら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉ
ｎ Ｅｎｚｙｍｏｌ．１５３：５１−５４４（１９８７）を参照のこと）。
【０３２３】 さらに、宿主細胞系統は、選択され得、これは挿入配列の発現を調節し、また
は、所望される特異的な様式で遺伝子産物を改変し、そしてプロセシングする。
タンパク質産物のこのような改変（例えばグリコシル化）およびプロセシング（
例えば切断）は、タンパク質の機能のために重要であり得る。異なる宿主細胞は
、タンパク質および遺伝子産物の、翻訳後プロセシングおよび改変のための、特
徴的で特異的な機構を有する。適切な細胞株または宿主系は、発現された外来タ
ンパク質の正確な改変およびプロセシングを確実にするように選択され得る。こ
の目的のために、遺伝子産物の、第一の転写、グリコシル化、およびリン酸化の
正確なプロセシングのための細胞機構を有する、真核生物宿主細胞が、使用され
得る。このような哺乳動物宿主細胞は、ＣＨＯ、ＶＥＲＹ、ＢＨＫ、Ｈｅｌａ、
ＣＯＳ、ＭＤＣＫ、２９３、３Ｔ３、ＷＩ３８、そして特に、例えば、ＢＴ４８
３、Ｈｓ５７８Ｔ、ＨＴＢ２、ＢＴ２０およびＴ４７Ｄのような乳癌細胞株、な
らびに、例えば、ＣＲＬ７０３０およびＨｓ５７８Ｂｓｔのような正常な乳腺細
胞株を含むが、これらに限定されない。
【０３２４】 組換えタンパク質の長期間の高収率産生、安定発現が好ましい。例えば、安定
に抗体分子を発現する細胞株が操作され得る。ウィルスの複製起点を含む発現ベ
クターを使用するよりも、宿主細胞は、適切な発現制御エレメント（例えば、プ
ロモーター、エンハンサー、配列、転写ターミネーター、ポリアデニル化部位、
など）、および選択マーカーによって制御されるＤＮＡで形質転換され得る。外
来ＤＮＡの導入に続いて、操作された細胞は、１〜２日間富化培地で増殖させら
れ得、次いで、選択培地に切り替えられる。組換えプラスミドにおける選択マー
カーは、選択に対する耐性を与え、そして細胞が、プラスミドをその染色体内に
安定に組み込み、そして増殖して、細胞増殖巣を形成し、これを今度はクローニ
ングし得、細胞株に拡大され得ることを可能にする。この方法は、抗体分子を発
現する細胞株を操作するために、有利に使用され得る。このような操作された細
胞株は、直接的または間接的に抗体分子と相互作用する化合物のスクリーニング
および評価において、特に有用であり得る。
【０３２５】 多数の選択系が使用され得、この選択系は、単純ヘルペスウィルスチミジンキ
ナーゼ（Ｗｉｇｌｅｒら、Ｃｅｌｌ １１：２２３（１９７７））、ヒポキサン
チン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｓｚｙｂａｌｓｋａ＆Ｓｚ
ｙｂａｌｓｋｉ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ４８：２０
２（１９９２））、およびアデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｌｏｗ
ｙら、Ｃｅｌｌ ２２：８１７（１９８０））の遺伝子を含むが限定されず、こ
れらの遺伝子は、ｔｋ−、ｈｇｐｒｔ−またはａｐｒｔ−細胞においてそれぞれ
使用され得る。また、代謝拮抗物質耐性は、以下の遺伝子の選択の根拠として使
用され得る：ｄｈｆｒ、これはメトトレキサートに対する耐性を与える（Ｗｉｇ
ｌｅｒら、Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：３５７（１９８０）；
Ｏ’Ｈａｒｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７８：１５
２７（１９８１））；ｇｐｔ、これはミコフェノール酸に対する耐性を与える（
Ｍｕｌｌｉｇａｎ＆Ｂｅｒｇ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ
７８：２０７２（１９８１））；ｎｅｏ、これはアミノグリコシドＧ−４１８
に対する耐性を与える（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ １２：４８８−
５０５；Ｗｕ ａｎｄ Ｗｕ、Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ ３：８７−９５（１９９
１）；Ｔｏｌｓｔｏｓｈｅｖ、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉ
ｃｏｌ． ３２：５７３−５９６（１９９３）；Ｍｕｌｌｉｇａｎ、Ｓｃｉｅｎ
ｃｅ ２６０：９２６−９３２（１９９３）；およびＭｏｒｇａｎ ａｎｄ Ａ
ｎｄｅｒｓｏｎ、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６２：１９１−２１７（１
９９３）；Ｍａｙ、１９９３年、ＴＩＢ ＴＥＣＨ １１（５）：１５５−２１
５）；ならびにｈｙｇｒｏ、これはハイグロマイシンに対する耐性を与える（Ｓ
ａｎｔｅｒｒｅら、Ｇｅｎｅ ３０：１４７（１９８４））。組換えＤＮＡ技術
の分野で周知の方法は、所望の組換えクローンを選択するために、慣用的に適用
され得、そしてこのような方法は、以下に記載されている：例えば、Ａｕｓｕｂ
ｅｌら（編）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａ
ｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ＮＹ（１９９３）；Ｋ
ｒｉｅｇｌｅｒ、Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ、
ＮＹ（１９９０）；ならびに１２章および１３章、Ｄｒａｃｏｐｏｌｉら（編）
、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ
、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ＮＹ（１９９４）；Ｃｏｌｂｅｒｒｅ−Ｇ
ａｒａｐｉｎら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ． １５０：１（１９８１）（これらは
その全体が本明細書中に参考として援用される）。
【０３２６】 抗体分子の発現レベルは、ベクター増幅によって増大され得る（総説として、
ＢｅｂｂｉｎｇｔｏｎおよびＨｅｎｔｓｃｈｅｌ、Ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｖｅ
ｃｔｏｒｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｇｅｎｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｆｏ
ｒ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｌｏｎｅｄ ｇｅｎｅｓ ｉｎ
ｍａｍｍａｌｉａｎ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＤＮＡ ｃｌｏｎｉｎｇ、Ｖｏｌ．３
．（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８７）を参照のこ
と）。抗体を発現するベクター系におけるマーカーが、増幅可能であると、宿主
細胞の培養物に存在するインヒビターのレベルにおける増加は、マーカー遺伝子
のコピーの数を増加する。増幅領域は抗体遺伝子と結合しているので、抗体の産
生もまた増加する（Ｃｒｏｕｓｅら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．３：２５７
（１９８３））。
【０３２７】 宿主細胞は、本発明の二つの発現ベクター（重鎖由来のポリペプチドをコード
する第一のベクターおよび軽鎖由来のポリペプチドをコードする第二のベクター
）で、同時トランスフェクトされ得る。この二つのベクターは、重鎖および軽鎖
のポリペプチドの等しい発現を可能にする、同一の選択マーカーを含み得る。あ
るいは、単一のベクターが使用され得、これは重鎖および軽鎖両方のポリペプチ
ドをコードし、そして発現することができる。このような状況において、過剰の
毒性の遊離重鎖を避けるために、重鎖の前に軽鎖が配置されるべきである（Ｐｒ
ｏｕｄｆｏｏｔ、Ｎａｔｕｒｅ ３２２：５２（１９８６）；Ｋｏｈｌｅｒ、Ｐ
ｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：２１９７（１９８０））
。重鎖および軽鎖のためのコード配列はｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡを含み得る
。
【０３２８】 一旦本発明の抗体分子が、動物によって産生されるか、化学的に合成されるか
、または組換えにより発現されると、当該分野で公知の、免疫グロブリン分子の
精製のための任意の方法、例えば、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、
アフィニティー（特に、プロテインＡの後に特異的抗原に対するアフィニティー
による）、およびサイズカラムクロマトグラフィー）、遠心分離、溶解度差、ま
たはタンパク質精製のための任意の他の標準的な技術によって、精製され得る。
さらに、本発明の抗体またはそのフラグメントは、本明細書中に記載されるかま
たはそうでなければ当該分野において公知の、異種ポリペプチド配列に融合され
得、精製を容易にする。
【０３２９】 本発明は、本発明のポリペプチド（もしくはその部分、好ましくはこのポリペ
プチドの少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、
もしくは１００個のアミノ酸）に、組換えにより融合されるかまたは化学的に結
合されて（共有結合および非共有結合の両方を含む）、融合タンパク質を生成す
る抗体、を含む。この融合は、直接的である必要はないが、リンカー配列を介し
て起こり得る。この抗体は、本発明のポリペプチド（またはその部分、好ましく
はこのポリペプチドの少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、
８０、９０、もしくは１００個のアミノ酸）以外の抗原に特異的であり得る。例
えば、インビトロまたはインビボのいずれにおいても、本発明のポリペプチドを
特定の細胞表面のレセプターに特異的な抗体に融合または結合させることによっ
て、特定の細胞型に対して、本発明のポリペプチドを標的にするために、抗体が
使用され得る。本発明のポリぺプチドに融合または結合される抗体はまた、イン
ビトロ免疫アッセイおよび当該分野で公知の方法を使用する精製方法において使
用され得る。例えば、Ｈａｒｂｏｒら、上記、およびＰＣＴ公開ＷＯ９３／２１
２３２；ＥＰ４３９，０９５；Ｎａｒａｍｕｒａら、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔ
．３９：９１−９９（１９９４）；米国特許第５，４７４，９８１号；Ｇｉｌｌ
ｉｅｓら、ＰＮＡＳ ８９：１４２８−１４３２（１９９２）；Ｆｅｌｌら、Ｊ
．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４６：２４４６−２４５２（１９９１）を参照のこと。こ
れらは、その全体が参考として援用される。
【０３３０】 本発明はさらに、抗体の可変領域以外のドメインに融合または結合された、本
発明のポリぺプチドを含む組成物を含む。例えば、本発明のポリぺプチドは、抗
体のＦｃ領域、またはその部分に融合または結合され得る。本発明のポリぺプチ
ドに融合されたこの抗体の部分は、定常領域、ヒンジ領域、ＣＨ１ドメイン、Ｃ
Ｈ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、またはそのドメイン全体もしくは部分の
任意の組合せを含み得る。これらのポリぺプチドはまた、上記の抗体の部分に融
合または結合され得、多量体を形成する。例えば、本発明のポリぺプチドに融合
されたＦｃ部分は、このＦｃ部分の間のジスルフィド結合を通して二量体を形成
し得る。より高度の多量体形態は、ポリぺプチドをＩｇＡおよびＩｇＭの部分に
融合させることによって作製され得る。本発明のポリぺプチドを抗体部分に融合
または結合させるための方法は、当該分野において公知である。例えば、米国特
許第５，３３６，６０３号；同第５，６２２，９２９号；同第５，３５９，０４
６号；同第５，３４９，０５３号；同第５，４４７，８５１号；同第５，１１２
，９４６号；ＥＰ ３０７，４３４；ＥＰ ３６７，１６６；ＰＣＴ公開ＷＯ９
６／０４３８８；ＷＯ９１／０６５７０；Ａｓｈｋｅｎａｚｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：１０５３５−１０５３９（１９９１
）；Ｚｈｅｎｇら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：５５９０−５６００（１９９
５）；およびＶｉｌら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９
：１１３３７−１１３４１（１９９２）（前記の参考文献はその全体が参考とし
て援用される）を参照のこと。
【０３３１】 上記で考察されたように、ポリぺプチド、ポリぺプチドフラグメント、または
配列番号Ｙの変異体、に対応するポリぺプチドは、このポリぺプチドのインビボ
半減期を増大させるため、または当該分野で公知の方法を使用する免疫学的アッ
セイにおいて使用するために、上記の抗体部分に融合または結合体化され得る。
さらに、配列番号Ｙに対応するポリぺプチドを、上記の抗体部分に融合または結
合体化させて、精製を容易にし得る。１つの報告された例は、ヒトＣＤ４ポリペ
プチドの最初の２つのドメイン、および哺乳動物の免疫グロブリンの重鎖または
軽鎖の定常領域の種々のドメインからなるキメラタンパク質を記載している（Ｅ
Ｐ ３９４，８２７；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３３１：８４−
８６（１９８８））。ジスルフィド連結二量体構造（ＩｇＧに起因する）を有す
る抗体に融合または結合体化される本発明のポリぺプチドもまた、単量体分泌タ
ンパク質またはタンパク質フラグメント単独よりも、他の分子に結合しそして中
和するのにさらに効率的であり得る（Ｆｏｕｎｔｏｕｌａｋｉｓら、Ｊ．Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ．２７０：３９５８−３９６４（１９９５））。多くの場合、融合タン
パク質のＦｃ部分は、治療および診断において有益であり、従って、例えば、改
良された薬物動態学的な特性を生じ得る（ＥＰ Ａ ２３２，２６２）。あるい
は、融合タンパク質が発現され、検出され、そして精製された後に、Ｆｃ部分を
欠失させることが望ましい。例えば、融合タンパク質が免疫化のための抗原とし
て使用される場合、Ｆｃ部分は、治療および診断を妨害し得る。例えば、薬物の
発見において、ｈＩＬ−５のようなヒトタンパク質は、ｈＩＬ−５のアンタゴニ
ストを同定するための高スループットスクリーニングアッセイの目的のためにＦ
ｃ部分と融合されてきた（Ｂｅｎｎｅｔｔら、Ｊ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｒｅｃ
ｏｇｎｉｔｉｏｎ ８：５２−５８（１９９５）；Ｊｏｈａｎｓｏｎら、Ｊ．Ｂ
ｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：９４５９−９４７１（１９９５）を参照のこと）。
【０３３２】 さらに、本発明の抗体またはそのフラグメントは、精製を容易にするペプチド
のような、マーカー配列に融合され得る。好ましい実施形態において、マーカー
アミノ酸配列は、とりわけヘキサ−ヒスチジンペプチド（例えば、ｐＱＥベクタ
ー（ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．，９２５９ Ｅｔｏｎ Ａｖｅｎｕｅ，Ｃｈａｔｓ
ｗｏｒｔｈ，ＣＡ，９１３１１）において提供されるタグ）であり、これらの多
くのマーカーアミノ酸配列が市販されている。例えば、Ｇｅｎｔｚら、Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８２１−８２４（１９８９）に
記載されるように、ヘキサ−ヒスチジンは、融合タンパク質の都合の良い精製を
提供する。精製のために有用な別のペプチドタグは、インフルエンザ赤血球凝集
素タンパク質由来のエピトープに対応する「ＨＡ」タグ（Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅ
ｌｌ ３７：７６７（１９８４））、および「ｆｌａｇ」タグを含むが、これに
限定されない。
【０３３３】 本発明は、診断剤または治療剤に結合体化される、抗体またはそのフラグメン
トをさらに含む。抗体は、例えば、臨床上の試験手順（例えば、所定の処置レジ
メン（ｒｅｇｉｍｅｎ）の効力を決定するため）の一部として、腫瘍の発生また
は進行をモニターするために、診断的に使用され得る。検出は、抗体を検出可能
な物質と連結させることによって容易にされ得る。検出可能な物質の例としては
、種々の酵素、補欠分子団、蛍光物質、発光物質、生物発光物質、放射性物質、
種々の陽電子放射断層撮影を使用する陽電子放射金属、および非放射性常磁性金
属イオン、が挙げられる。この検出可能な物質は、抗体（またはそのフラグメン
ト）に対して、直接的または間接的のいずれかで、当該分野で公知の技術を使用
する媒介物（例えば、当該分野で公知のリンカーなど）を介して、連結または結
合体化され得る。例えば、本発明に従う診断薬としての使用のための抗体に結合
体化され得る金属イオンに関しては、米国特許第４，７４１，９００号を参照の
こと。適切な酵素の例としては、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスフ
ァターゼ、β−ガラクトシダーゼ、またはアセチルコリンエステラーゼが挙げら
れ；適切な補欠分子団複合体の例としては、ストレプトアビジン／ビオチンおよ
びアビジン／ビオチンが挙げられ；適切な蛍光物質の例としては、ウンベリフェ
ロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジク
ロロトリアジニルアミンフルオレセイン、ダンシルクロリドまたはフィコエリト
リンが挙げられ；発光物質の例としては、ルミノールが挙げられ；生物発光物質
の例としては、ルシフェラーゼ、ルシフェリンおよびエクオリンが挙げられ；な
らびに、適切な放射性物質の例としては、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１１１Ｉｎまた
は９９Ｔｃが挙げられる。
【０３３４】 さらに、抗体またはそのフラグメントは、治療用部分（例えば細胞毒（例えば
細胞増殖抑制性もしくは細胞殺傷性の薬剤））、治療剤または放射性金属イオン
（例えば、α−エミッタ−（例えば２１３Ｂｉ）など）に結合体化され得る。細
胞毒または細胞毒性薬剤は、細胞に対して有害な任意の薬剤を含む。例としては
、パクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｏｌ）、サイトカラシンＢ、グラミシジン
Ｄ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テニポシド（ｔ
ｅｎｏｐｏｓｉｄｅ）、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン（ｃｏｌ
ｃｈｉｃｉｎ）、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシン
ジオン（ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ ａｎｔｈｒａｃｉｎ ｄｉｏｎｅ）、ミトキサン
トロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１−デヒドロテストステロン、
グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロー
ル、およびピューロマイシン、ならびにそのアナログまたはホモログ、が挙げら
れる。治療剤は、代謝拮抗物質（例えば、メトトレキサート、６−メルカプトプ
リン、６−チオグアニン、シタラビン、５−フルオロウラシルデカルバジン（５
−ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ）、アルキル化剤（例え
ば、メクロレタミン、チオエパ（ｔｈｉｏｅｐａ）クロラムブシル、メルファラ
ン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）およびロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホスファ
ミド（ｃｙｃｌｏｔｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、ブスルファン、ジブロモマンニト
ール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ、ならびにｃｉｓ−ジクロロジア
ミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチン）、アントラサイクリン（例えば、ダ
ウノルビシン（以前はダウノマイシン）およびドキソルビシン）、抗生物質（例
えば、ダクチノマイシン（以前はアクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラ
マイシン、およびアントラマイシン（ａｎｔｈｒａｍｙｃｉｎ）（ＡＭＣ））、
ならびに抗有糸分裂剤（例えばビンクリスチンおよびビンブラスチン）、を含む
が、それらに限定されない。
【０３３５】 本発明の結合体は、所定の生物学的応答を改変するために使用され得、治療剤
または薬物部分は、古典的な化学的治療剤に限定されると解釈されない。例えば
、薬物部分は、所望の生物学的活性を有するタンパク質またはポリぺプチドであ
り得る。このようなタンパク質としては、例えば、毒素（例えばアブリン、リシ
ンＡ、シュードモナス外毒素、またはジフテリア毒素）；タンパク質（例えば、
腫瘍壊死因子、ａ−インターフェロン、β−インターフェロン、神経発育因子、
血小板由来増殖因子、組織プラスミノゲンアクチベーター、アポトーシス性薬剤
（例えば、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β、ＡＩＭ Ｉ（国際公開第ＷＯ９７／３３８
９９号を参照のこと）、ＡＩＭ ＩＩ（国際公開第ＷＯ９７／３４９１１号を参
照のこと）、Ｆａｓリガンド（Ｔａｋａｈａｓｈｉら、Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
．６：１５６７−１５７４（１９９４））、ＶＥＧＩ（国際公開第ＷＯ９９／２
３１０５号を参照のこと））、血栓症薬もしくは抗脈管形成薬（例えば、アンジ
オスタチンもしくはエンドスタチン）；または生物学的応答改変剤（例えばリン
ホカイン、インターロイキン−１（「ＩＬ−１」）、インターロイキン−２（「
ＩＬ−２」）、インターロイキン−６（「ＩＬ−６」）、顆粒球マクロファージ
コロニー刺激因子（「ＧＭ−ＣＳＦ」）、顆粒球コロニー刺激因子（「Ｇ−ＣＳ
Ｆ」）、または他の増殖因子など）、が挙げられ得る。
【０３３６】 抗体はまた、固体支持体に付着させられ得、この固体支持体は、標的抗原の免
疫アッセイまたは精製に特に有用である。このような固体支持体としては、ガラ
ス、セルロース、ポリアクリルアミド、ナイロン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニ
ルまたはポリプロピレン、が挙げられるがそれらに限定されない。
【０３３７】 このような治療部分を抗体に結合体化する技術は周知であり、例えば、Ａｒｎ
ｏｎら、「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｉｍｍｕｎ
ｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ｏｆ Ｄｒｕｇｓ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐ
ｙ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔ
ｈｅｒａｐｙ、Ｒｅｉｓｆｅｌｄら（編）、２４３−５６頁（Ａｌａｎ Ｒ．Ｌ
ｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９８５）；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍら、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ
Ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄ
ｅｌｉｖｅｒｙ（第２版）、Ｒｏｂｉｎｓｏｎら（編）、６２３−５３頁（Ｍａ
ｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．１９８７）；Ｔｈｏｒｐｅ、「Ａｎｔｉｂｏ
ｄｙ Ｃａｒｒｉｅｒｓ Ｏｆ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ａｇｅｎｔｓ Ｉｎ Ｃ
ａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ Ｒｅｖｉｅｗ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎ
ｔｉｂｏｄｉｅｓ’８４：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ
Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｐｉｎｃｈｅｒａら（編）、４７５−５０６頁（１
９８５）；「Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｒｅｓｕｌｔｓ，Ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ｐｒ
ｏｓｐｅｃｔｉｖｅ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｕｓｅ Ｏｆ
Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ
ａｐｙ」Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ
Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｂａｌｄｗｉｎら（編）、３
０３−１６頁（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ １９８５）、およびＴｈｏｒｐ
ｅら、「Ｔｈｅ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｐｒ
ｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｔｏｘｉｎ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ
ｓ」、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．６２：１１９−５８（１９８２）を参照のこと
。
【０３３８】 あるいは、抗体は第二の抗体に結合され、米国特許第４，６７６，９８０号（
これは、その全体が本明細書に参考として援用される）におけるＳｅｇａｌによ
る記載のような抗体異種結合体（ｈｅｔｅｒｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）を形成し得
る。
【０３３９】 単独、あるいは細胞傷害性因子および／またはサイトカインと組み合わせて投
与される、抗体に結合する治療部分を有するかまたは有さない抗体が、治療薬と
して使用され得る。
【０３４０】 （免疫表現型分類（ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｉｎｇ）） 本発明の抗体は、細胞株および生物学的サンプルの免疫表現型分類のために利
用され得る。本発明の遺伝子の翻訳生成物は、細胞特異的マーカーとして、ある
いはより詳細には、特定の細胞型の分化および／または成熟の種々の段階で差示
的に発現される細胞マーカーとして有用であり得る。特異的エピトープ、または
エピトープの組み合わせに対して指向されるモノクロナール抗体は、マーカーを
発現する細胞集団のスクリーニングを可能とする。種々の技術が、マーカーを発
現する細胞集団をスクリーニングするために、モノクロナール抗体を用いて利用
され得、そしてその技術には、抗体でコーティングされた磁気ビーズを用いる磁
気分離、固体マトリクス（すなわち、プレート）に付着した抗体を用いる「パン
ニング」、ならびにフローサイトメトリー（例えば、米国特許第５，９８５，６
６０号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎら、Ｃｅｌｌ，９６：７３７−４９（１９９９
）を参照のこと）が挙げられる。
【０３４１】 これらの技術は、血液学的悪性腫瘍（すなわち、急性白血病患者における最少
残留疾患（ｍｉｎｉｍａｌ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｄｉｓｅａｓｅ）（ＭＲＤ））
および対宿主性移植片病（ＧＶＨＤ）を予防するための移植術における「非自己
」細胞と共に見出され得るような、細胞の特定集団のスクリーニングを可能にす
る。あるいは、これらの技術は、ヒト臍帯血において見出され得るような増殖お
よび／または分化を受け得る、造血幹細胞および先祖細胞のスクリーニングを可
能にする。
【０３４２】 （抗体結合についてのアッセイ） 本発明の抗体は、当該分野において公知の任意の方法により、免疫特異的結合
についてアッセイされ得る。用いられ得る免疫アッセイとしては、いくつかのも
のについてだけ名称を挙げると、ウエスタンブロット、ラジオイムノアッセイ、
ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）、「サンドイッチ」免疫アッセイ、免
疫沈降アッセイ、沈降反応、ゲル拡散沈降反応、免疫拡散アッセイ、凝集アッセ
イ、補体結合アッセイ、免疫放射定量アッセイ、蛍光免疫アッセイ、プロテイン
Ａ免疫アッセイのような技術を用いる競合アッセイ系および非競合アッセイ系が
挙げられるが、これらに限定されない。このようなアッセイは慣用的であり、そ
して当該分野において周知である（例えば、その全体が本明細書中に参考として
援用される、Ａｕｓｕｂｅｌら編，１９９４，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏ
ｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌ
ｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照のこと）。例示的な免疫ア
ッセイが、以下に簡潔に記載される（が、これらは限定を目的とすることが意図
されない）。
【０３４３】 免疫沈降プロトコルは、一般に、タンパク質ホスファターゼインヒビターおよ
び／またはプロテアーゼインヒビター（例えば、ＥＤＴＡ、ＰＭＳＦ、アプロチ
ニン、バナジン酸ナトリウム）を補充したＲＩＰＡ緩衝液（１％ ＮＰ−４０ま
たはＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、１％ デオキシコール酸ナトリウム、０．１％ ＳＤＳ、０．１５Ｍ ＮａＣｌ、０．０１Ｍ リン酸ナトリウム（ｐＨ７．２
）、１％ Ｔｒａｓｙｌｏｌ）のような溶解緩衝液中で、細胞の集団を溶解する
工程、目的の抗体を細胞溶解物に添加する工程、一定時間（例えば、１〜４時間
）４℃でインキュベートする工程、プロテインＡセファロースビーズおよび／ま
たはプロテインＧセファロースビーズを細胞溶解物に添加する工程、約１時間以
上４℃でインキュベートする工程、溶解緩衝液中でビーズを洗浄する工程、およ
びＳＤＳ／サンプル緩衝液中でビーズを再懸濁する工程を包含する。目的の抗体
の、特定の抗原を免疫沈降する能力は、例えば、ウエスタンブロット分析により
、アッセイされ得る。当業者は、抗体の抗原への結合を増加するように、そして
バックグラウンドを減少させるように改変され得るパラメータ（例えば、セファ
ロースビーズを用いて細胞溶解物を事前にきれいにする工程）に関して、認め得
る。免疫沈降プロトコルに関するさらなる考察については、例えば、Ａｕｓｕｂ
ｅｌら編，１９９４、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ
．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１０．１６．１を参照のこと。
【０３４４】 ウエスタンブロット分析は、一般に、タンパク質サンプルを調製する工程、ポ
リアクリルアミドゲル（例えば、抗原の分子量に応じた８％〜２０％ ＳＤＳ−
ＰＡＧＥ）中でのそのタンパク質サンプルの電気泳動、そのタンパク質サンプル
をそのポリアクリルアミドゲルからニトロセルロース、ＰＶＤＦまたはナイロン
のような膜に移す工程、ブロッキング溶液（例えば、３％ ＢＳＡまたは脱脂粉
乳を有するＰＢＳ）中でその膜をブロックする工程、洗浄緩衝液（例えば、ＰＢ
Ｓ−Ｔｗｅｅｎ ２０）中でその膜を洗浄する工程、ブロッキング緩衝液中で希
釈された一次抗体（目的の抗体）を用いてその膜をブロックする工程、洗浄緩衝
液中でその膜を洗浄する工程、ブロッキング緩衝液中で希釈された酵素基質（例
えば、西洋ワサビペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼ）あるいは放
射性分子（例えば、３２Ｐまたは１２５Ｉ）に結合した二次抗体（一次抗体を認
識する、例えば、抗ヒト抗体）を用いて、その膜をブロックする工程、洗浄緩衝
液中でその膜を洗浄する工程、ならびにその抗原の存在を検出する工程を包含す
る。当業者は、検出されるシグナルを増加させるように、そしてバックグラウン
ドノイズを減少させるように改変され得るパラメータに関して、認め得る。ウエ
スタンブロットプロトコルに関するさらなる考察については、例えば、Ａｕｓｕ
ｂｅｌら編，１９９４，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅ
ｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎ
ｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１０．８．１を参照のこと。
【０３４５】 ＥＬＩＳＡは、抗原を調製する工程、９６ウェルマイクロタイタープレートの
ウェルをその抗原でコーティングする工程、酵素基質（例えば、西洋ワサビペル
オキシダーゼまたはアルカリホスファターゼ）のような検出可能な化合物に結合
した目的の抗体をそのウェルに添加し、そして一定時間インキュベートする工程
、およびその抗原の存在を検出する工程を包含する。ＥＬＩＳＡにおいて、目的
の抗体は、検出可能な化合物に結合している必要はない；その代わり、検出可能
な化合物に結合した第二の抗体（目的の抗体を認識する）が、ウェルに添加され
得る。さらに、ウェルを抗原でコーティングする代わりに、抗体がウェルにコー
ティングされ得る。この場合、検出可能な化合物に結合した第二の抗体が、コー
ティングされたウェルへの目的の抗原の添加に続いて、添加され得る。当業者は
、検出されるシグナルを増加させるように改変され得るパラメータ、および当該
分野において公知のＥＬＩＳＡの他のバリエーションに関して、認め得る。ＥＬ
ＩＳＡに関するさらなる考察については、例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら編，１９９
４，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏ
ｌｏｇｙ，第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏ
ｒｋ，１１．２．１を参照のこと。
【０３４６】 抗原に対する抗体の結合親和性および抗体−抗原相互作用のオフレート（ｏｆ
ｆ−ｒａｔｅ）が、競合結合アッセイにより決定され得る。競合結合アッセイの
一つの例は、ラジオイムノアッセイであり、ラジオイムノアッセイは、標識抗原
（例えば、３Ｈまたは１２５Ｉ）と、漸増量の非標識抗原の存在下での、目的の
抗体を用いるインキュベーション、および標識抗原に結合した抗体の検出を含む
。特定の抗原に対する目的の抗体の親和性、および結合オフレートは、スキャッ
チャードプロット分析によるデータから決定され得る。第二の抗体との競合はま
た、ラジオイムノアッセイを用いて決定され得る。この場合、抗原は、漸増量の
非標識の第二の抗体の存在下で、標識化合物（例えば、３Ｈまたは１２５Ｉ）に
結合した目的の抗体とともにインキュベートされる。
【０３４７】 （治療用途） 本発明はさらに、抗体ベースの治療に関し、この治療は、１つ以上の開示され
た疾患、障害、または状態を処置するために、動物、好ましくは哺乳動物、そし
て最も好ましくはヒトの患者に、本発明の抗体を投与する工程を包含する。本発
明の治療化合物としては、本発明の抗体（本明細書中に記載されるような、それ
らのフラグメント、アナログおよび誘導体を含む）ならびに本発明の抗体をコー
ドする核酸（本明細書中に記載されるような、それらのフラグメント、アナログ
および誘導体ならびに抗イディオタイプ抗体を含む）が挙げられるが、これらに
限定されない。本発明の抗体は、本発明のポリペプチドの異常な発現および／ま
たは活性に関連した疾患、障害または状態（本明細書中に記載される任意の１つ
以上の疾患、障害、または状態を含むがこれらに限定されない）を処置、阻害ま
たは予防するために使用され得る。本発明のポリペプチドの異常な発現および／
または活性に関連した疾患、障害または状態の処置および／または予防は、それ
らの疾患、障害または状態に関連した症状を緩和する工程を含むが、これに限定
されない。本発明の抗体は、当該分野で公知であるか、または本明細書中に記載
されるように、薬学的に受容可能な組成物中に提供され得る。
【０３４８】 本発明の抗体が治療的に使用され得る方法の要約は、身体内で局所的にまたは
全身的に、あるいは（例えば、補体（ＣＤＣ）により、またはエフェクター細胞
（ＡＤＣＣ）により媒介されるような）抗体の直接的細胞傷害性により、本発明
のポリヌクレオチドまたはポリペプチドを結合させることを含む。これらのアプ
ローチのいくつかは、より詳細に以下に記載される。本明細書中で提供される教
示を与えられれば、当業者は、過度の実験なしに、診断上の目的、モニタリング
の目的あるいは治療上の目的のために、本発明の抗体を使用する方法がわかる。
【０３４９】 本発明の抗体は、例えば、抗体と相互作用するエフェクター細胞の数または活
性を増加させるために役立つ、他のモノクローナル抗体またはキメラ抗体、ある
いはリンホカインまたは造血増殖因子（例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−３およびＩＬ
−７のような）と組み合わせて有利に利用され得る。
【０３５０】 本発明の抗体は、単独で、または他の型の処置（例えば、放射線療法、化学療
法、ホルモン治療、免疫治療および抗腫瘍剤）との組み合わせで投与され得る。
一般的に、（抗体の場合には）患者の種と同じ種である種起源または種反応性の
生成物の投与が好ましい。従って、好ましい実施形態においては、ヒトの抗体、
フラグメント誘導体、アナログ、または核酸が、治療または予防のために、ヒト
の患者に投与される。
【０３５１】 本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド（そのフラグメントを含む）に
関する免疫アッセイ、およびそれらに関連した障害の治療の両方のために、本発
明のポリペプチドまたはポリヌクレオチドに対する、高親和性および／または強
力な、インビボでの阻害抗体および／または中和抗体、それらのフラグメント、
またはそれらの領域を使用することが好ましい。このような抗体、フラグメント
、または領域は、好ましくは、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド（
そのフラグメントを含む）に対して親和性を有する。好ましい結合親和性として
は、５×１０−２Ｍ、１０−２Ｍ、５×１０−３Ｍ、１０−３Ｍ、５×１０−４ Ｍ、１０−４Ｍ、５×１０−５Ｍ、１０−５Ｍ、５×１０−６Ｍ、１０−６Ｍ、
５×１０−７Ｍ、１０−７Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−９Ｍ、
１０−９Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−１０Ｍ、５×１０−１１Ｍ、１０−１１ Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１２Ｍ、５×１０−１３Ｍ、１０−１３Ｍ、５×
１０−１４Ｍ、１０−１４Ｍ、５×１０−１５Ｍ、および１０−１５Ｍより小さ
い解離定数すなわちＫｄを有する結合親和性が挙げられる。
【０３５２】 （遺伝子治療） 特定の実施形態において、抗体またはその機能的誘導体をコードする配列を含
む核酸は、本発明のポリペプチドの異常な発現および／または活性に関連した疾
患または障害を処置、阻害または予防するために、遺伝子治療の目的で投与され
る。遺伝子治療とは、発現したか、または発現可能な核酸の、被験体への投与に
より行われる治療をいう。本発明のこの実施形態において、核酸は、それらのコ
ードされたタンパク質を産生し、そのタンパク質は治療効果を媒介する。
【０３５３】 当該分野で利用可能な遺伝子治療のための任意の方法は、本発明に従って使用
され得る。例示的な方法が以下に記載される。
【０３５４】 遺伝子治療の方法の一般的な概説については、Ｇｏｌｄｓｐｉｅｌら，Ｃｌｉ
ｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ １２：４８８−５０５（１９９３）；Ｗｕおよ
びＷｕ，Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ ３：８７−９５（１９９１）；Ｔｏｌｓｔｏｓ
ｈｅｖ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３２：５７３
−５９６（１９９３）；Ｍｕｌｌｉｇａｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６０：９２６−
９３２（１９９３）；ならびにＭｏｒｇａｎおよびＡｎｄｅｒｓｏｎ，Ａｎｎ．
Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６２：１９１−２１７（１９９３）；Ｍａｙ，ＴＩＢ
ＴＥＣＨ １１（５）：１５５−２１５（１９９３）を参照のこと。使用され得
る、組換えＤＮＡ技術分野において一般的に公知である方法は、Ａｕｓｕｂｅｌ
ら（編），Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ（１９９３）；および
Ｋｒｉｅｇｌｅｒ，Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏ
ｎ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ
，ＮＹ（１９９０）に記載される。
【０３５５】 好ましい局面において、化合物は抗体をコードする核酸配列を含有し、上記核
酸配列は、適切な宿主において、抗体、またはそのフラグメントもしくはキメラ
タンパク質、あるいはその重鎖もしくは軽鎖を発現する発現ベクターの一部であ
る。特に、このような核酸配列は、抗体コード領域に作動可能に連結したプロモ
ーターを有し、上記プロモーターは誘導性であるかまたは構成性であり、そして
必要に応じて組織特異的である。別の特定の実施形態においては、抗体をコード
する配列および任意の他の所望の配列がゲノム中の所望の部位での相同組換えを
促進する領域に隣接した核酸分子が使用され、従って抗体をコードする核酸の染
色体内の発現を提供する（ＫｏｌｌｅｒおよびＳｍｉｔｈｉｅｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：８９３２−８９３５（１９８９）；
Ｚｉｊｌｓｔｒａら，Ｎａｔｕｒｅ ３４２：４３５−４３８（１９８９））。
特定の実施形態において、発現した抗体分子は単鎖抗体であるか；あるいはこの
核酸配列は、この抗体の重鎖および軽鎖の両方をコードする配列またはそのフラ
グメントを含む。
【０３５６】 核酸の患者への送達は、直接的（この場合、患者は核酸または核酸保有ベクタ
ーに直接的に曝される）か、または間接的（この場合、細胞は最初にインビトロ
で核酸で形質転換され、次いで患者に移植される）のいずれかであり得る。これ
らの２つのアプローチは、インビボ遺伝子治療として、またはエキソビボ遺伝子
治療としてそれぞれ公知である。
【０３５７】 特定の実施形態において、核酸配列はインビボで直接的に投与され、そこで核
酸配列は発現されて、コードされた生成物を産生する。これは、当該分野で公知
の多数の方法（例えば、それらを適切な核酸発現ベクターの一部分として構築し
、そしてそれを（例えば、欠損性または弱毒化したレトロウイルスまたは他のウ
イルスベクター（米国特許第４，９８０，２８６号を参照のこと）を用いる感染
により）細胞内になるように投与することにより、あるいは、裸のＤＮＡの直接
注射により、あるいは、微粒子ボンバードメント（例えば、遺伝子銃；Ｂｉｏｌ
ｉｓｔｉｃ、Ｄｕｐｏｎｔ）の使用により、あるいは脂質または細胞表面のレセ
プターでコーティングするか、もしくは薬剤をトランスフェクトすることにより
、あるいは、リポソーム、微粒子、またはマイクロカプセル中へのカプセル化に
より、あるいは、それらを核に入ることが公知であるペプチドと結合させて投与
することにより、レセプター媒介のエンドサイトーシスを受けるリガンドと結合
させて投与することにより（例えば、ＷｕおよびＷｕ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ
．２６２：４４２９−４４３２（１９８７）を参照のこと）（レセプターを特異
的に発現する細胞の型を標的にするために用いられ得る）などのいずれかにより
達成され得る。別の実施形態において、核酸−リガンド複合体が形成され得、こ
こで、このリガンドはエンドソームを破壊するフソジェニック（ｆｕｓｏｇｅｎ
ｉｃ）ウイルス性ペプチドを含み、この核酸がリソゾーム分解を回避することを
可能にする。さらに別の実施形態において、核酸は、特定のレセプターを標的化
することにより、細胞特異的な取り込みおよび発現についてインビボで標的化さ
れ得る（例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ９２／０６１８０号；同第ＷＯ９２／２２６
３５号；同第ＷＯ９２／２０３１６号；同第ＷＯ９３／１４１８８号、同第ＷＯ
９３／２０２２１号を参照のこと）。あるいは、核酸は、細胞内部に導入され得
、そして相同組換えにより、発現のために宿主細胞ＤＮＡ中に組み込まれ得る（
ＫｏｌｌｅｒおよびＳｍｉｔｈｉｅｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ
．ＵＳＡ ８６：８９３２−８９３５（１９８９）；Ｚｉｊｌｓｔｒａら，Ｎａ
ｔｕｒｅ ３４２：４３５−４３８（１９８９））。
【０３５８】 特定の実施形態において、本発明の抗体をコードする核酸配列を含むウイルス
ベクターが使用される。例えば、レトロウイルスベクターが用いられ得る（Ｍｉ
ｌｌｅｒら，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２１７：５８１−５９９（１９９３）
を参照のこと）。これらのレトロウイルスベクターは、ウイルス性ゲノムの正確
なパッケージングおよび宿主細胞ＤＮＡへの正確な組込みのために必要な構成要
素を含む。遺伝子治療において使用される抗体をコードする核酸配列は、一つ以
上のベクター中にクローニングされ、これは、患者内への遺伝子の送達を容易に
する。レトロウイルスベクターに関するさらなる詳細は、Ｂｏｅｓｅｎら，Ｂｉ
ｏｔｈｅｒａｐｙ ６：２９１−３０２（１９９４）（これは、幹細胞を化学療
法に対してより耐性にするために、ｍｄｒ１遺伝子を造血性幹細胞に送達するた
めの、レトロウイルスベクターの使用を記載する）に見出され得る。遺伝子治療
におけるレトロウイルスベクターの使用を説明する他の参考文献は、以下である
：Ｃｌｏｗｅｓら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９３：６４４−６５１（１９
９４）；Ｋｉｅｍら，Ｂｌｏｏｄ ８３：１４６７−１４７３（１９９４）；Ｓ
ａｌｍｏｎｓおよびＧｕｎｚｂｅｒｇ，Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ
４：１２９−１４１（１９９３）；ならびにＧｒｏｓｓｍａｎおよびＷｉｌｓ
ｏｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．ｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌ．３
：１１０−１１４（１９９３）。
【０３５９】 アデノウイルスは、遺伝子治療において使用され得る他のウイルスベクターで
ある。アデノウイルスは、特に、気道上皮へ遺伝子を送達するための魅力的なビ
ヒクルである。アデノウイルスは、自然に気道上皮に感染し、そこで軽い疾患を
起こす。アデノウイルスに基づく送達システムの他の標的は、肝臓、中枢神経系
、内皮細胞、および筋肉である。アデノウイルスは、非分裂細胞に感染すること
ができるという利点を有する。ＫｏｚａｒｓｋｙおよびＷｉｌｓｏｎ，Ｃｕｒｒ
ｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍ
ｅｎｔ ３：４９９−５０３（１９９３）は、アデノウイルスに基づく遺伝子治
療の概説を示す。Ｂｏｕｔら，Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ５：３
−１０（１９９４）は、アカゲザルの気道上皮に遺伝子を移入するためのアデノ
ウイルスベクターの使用を証明した。遺伝子治療におけるアデノウイルスの使用
の他の例は、Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄら，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５２：４３１−４３４
（１９９１）；Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄら，Ｃｅｌｌ ６８：１４３−１５５（１９
９２）；Ｍａｓｔｒａｎｇｅｌｉら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９１：２２
５−２３４（１９９３）；ＰＣＴ公開第ＷＯ９４／１２６４９号；およびＷａｎ
ｇら，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ２：７７５−７８３（１９９５）に見出され
得る。好ましい実施形態において、アデノウイルスベクターが使用される。
【０３６０】 アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）はまた、遺伝子治療における使用について提案
されてきた（Ｗａｌｓｈら，Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．２
０４：２８９−３００（１９９３）；米国特許第５，４３６，１４６号）。
【０３６１】 遺伝子治療に対する別のアプローチは、エレクトロポレーション、リポフェク
ション、リン酸カルシウム媒介トランスフェクション、またはウイルス感染のよ
うな方法により、組織培養中の細胞へ遺伝子を移入する工程を含む。通常、移入
の方法は、選択マーカーの細胞への移入を含む。次いで、細胞は、移入された遺
伝子を取り込みそして発現している細胞を単離するために選沢下に置かれる。そ
れらの細胞は次いで、患者に送達される。
【０３６２】 この実施形態においては、得られた組換え細胞のインビボ投与の前に、核酸が
細胞に導入される。このような導入は、当該分野において公知の任意の方法によ
り実施され得、それらの方法としては以下が挙げられるがこれらに限定されない
：トランスフェクション、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション
、核酸配列を含むウイルスベクターまたはバクテリオファージベクターでの感染
、細胞融合、染色体媒介の遺伝子移入、マイクロセル（ｍｉｃｒｏｃｅｌｌ）媒
介の遺伝子移入、スフェロプラスト融合など。外来遺伝子の細胞への導入につい
ては、当該分野において多数の技術が公知であり（例えば、Ｌｏｅｆｆｌｅｒお
よびＢｅｈｒ，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２１７：５９９−６１８（１９９３
）；Ｃｏｈｅｎら，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２１７：６１８−６４４（１９
９３）；Ｃｌｉｎｅ，Ｐｈａｒｍａｃ．Ｔｈｅｒ．２９：６９−９２ｍ（１９８
５）を参照のこと）、そしてレシピエント細胞の必要な発生的および生理学的機
能が破壊されない場合、本発明に従って使用され得る。この技術は、核酸の細胞
への安定した移入を提供するはずであり、その結果、核酸は、細胞により発現可
能であり、そして好ましくは、その細胞の子孫により遺伝性でかつ発現可能であ
る。
【０３６３】 得られた組換え細胞は、当該分野において公知の様々な方法により、患者へ送
達され得る。組換え血球（例えば、造血幹細胞または造血前駆細胞）は、好まし
くは、静脈内に投与される。使用が考えられる細胞の量は、所望の効果、患者の
状態などに依存し、そして当業者により決定され得る。
【０３６４】 遺伝子治療の目的のために核酸が導入され得る細胞は、任意の所望の入手可能
な細胞型を包含し、そして以下を含むがそれらに限定されない：上皮細胞、内皮
細胞、ケラチノサイト、線維芽細胞、筋肉細胞、肝細胞；Ｔリンパ球、Ｂリンパ
球、単球、マクロファージ、好中球、好酸球、巨核球、顆粒球のような血球；種
々の幹細胞または前駆細胞、特に、造血幹細胞または造血前駆細胞（例えば、骨
髄、臍帯血、末梢血、胎児の肝臓などから得られるような細胞）。
【０３６５】 好ましい実施形態において、遺伝子治療に使用される細胞は、患者に対して自
己である。
【０３６６】 遺伝子治療において組換え細胞が使用される実施形態において、抗体をコード
する核酸配列は、細胞またはそれらの子孫により核酸配列が発現可能であるよう
に細胞に導入され、次いで組換え細胞は、治療的効果のためにインビボで投与さ
れる。特定の実施形態において、幹細胞または前駆細胞が用いられる。インビト
ロで単離され、かつインビトロで維持され得る任意の幹細胞および／または前駆
細胞は、本発明のこの実施形態に従って潜在的に使用され得る（例えば、ＰＣＴ
公開第ＷＯ９４／０８５９８号：ＳｔｅｍｐｌｅおよびＡｎｄｅｒｓｏｎ，Ｃｅ
ｌｌ ７１：９７３−９８５（１９９２）；Ｒｈｅｉｎｗａｌｄ，Ｍｅｔｈ．Ｃ
ｅｌｌ Ｂｉｏ．２１Ａ：２２９（１９８０）；ならびにＰｉｔｔｅｌｋｏｗお
よびＳｃｏｔｔ，Ｍａｙｏ Ｃｌｉｎｉｃ Ｐｒｏｃ．６１：７７１（１９８６
）を参照のこと）。
【０３６７】 特定の実施形態において、遺伝子治療の目的で導入される核酸は、コード領域
に作動可能に連結された誘導性プロモーターを含有し、その結果、核酸の発現は
、適切な転写誘導因子の存在または非存在を制御することにより制御可能である
。治療活性または予防活性の照明。
【０３６８】 本発明の化合物または薬学的組成物は、好ましくは、ヒトでの使用の前にイン
ビトロで、次いでインビボで、所望の治療活性または予防活性について試験され
る。例えば、化合物または薬学的組成物の、治療有用性または予防有用性を証明
するためのインビトロアッセイとしては、細胞株または患者組織サンプルに対す
る化合物の効果が挙げられる。細胞株および／または組織サンプルに対する化合
物または組成物の効果は、当業者に公知である技術（ロゼット形成アッセイおよ
び細胞溶解アッセイが挙げられるがこれらに限定されない）を利用して決定され
得る。本発明に従って、特定の化合物の投与が示されるかどうかを決定するため
に用いられ得るインビトロアッセイとしては、インビトロ細胞培養アッセイが挙
げられ、このアッセイでは、患者組織サンプルが培養において増殖され、そして
化合物に曝されるか、そうでなければ化合物が投与され、そして、組織サンプル
に対するそのような化合物の効果が観察される。
【０３６９】 （治療的／予防的な投与および組成物） 本発明は、被験体への有効量の本発明の化合物または薬学的組成物、好ましく
は本発明のポリペプチドまたは抗体の投与による処置、阻害および予防の方法を
提供する。好ましい局面において、化合物は実質的に精製される（例えば、その
効果を制限するかまたは望ましくない副作用を生じる物質を実質的に含まない）
。被験体は好ましくは、ウシ、ブタ、ウマ、ニワトリ、ネコ、イヌなどのような
動物が挙げられるがそれらに限定されない動物であり、そして好ましくは哺乳動
物であり、そして最も好ましくはヒトである。
【０３７０】 化合物が核酸または免疫グロブリンを含む場合に使用され得る処方および投与
方法は、上記に記載され；さらなる適切な処方および投与経路は、本明細書中で
以下に記載されたものの中から選択され得る。
【０３７１】 種々の送達システムが公知であり、そして本発明の化合物を投与するために用
いられ得る（例えば、リポソーム中でのカプセル化、微粒子、マイクロカプセル
、この化合物の発現が可能な組換え細胞、レセプター媒介エンドサイトーシス（
例えば、ＷｕおよびＷｕ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：４４２９−４４３
２（１９８７）を参照のこと）、レトロウイルスまたは他のベクターの一部とし
ての核酸の構築など）。導入方法としては、皮内、筋内、腹腔内、静脈内、皮下
、鼻腔内、硬膜外、および経口の経路が挙げられるがそれらに限定されない。化
合物または組成物は、任意の好都合な経路により（例えば、注入またはボーラス
注射により、上皮または粘膜内層（例えば、口腔粘膜、直腸粘膜および腸粘膜な
ど）を通しての吸収により）投与され得、そして他の生物学的に活性な薬剤と一
緒に投与され得る。投与は、全身的または局所的であり得る。さらに、本発明の
薬学的化合物または組成物を、任意の適切な経路（脳室内注射および髄腔内注射
を包含し；脳室内注射は、例えば、Ｏｍｍａｙａリザーバのようなリザーバに取
り付けられた脳室内カテーテルにより容易にされ得る）により中枢神経系に導入
することが望まれ得る。例えば、吸入器または噴霧器の使用、およびエアゾール
化剤を用いた処方により、肺投与もまた使用され得る。
【０３７２】 特定の実施形態において、本発明の薬学的化合物または組成物を、処置の必要
な領域に局所的に投与することが望まれ得る；これは、制限する目的ではないが
、例えば、手術中の局部注入、局所適用（例えば、手術後の創傷包帯と組み合わ
せて）により、注射により、カテーテルにより、坐剤により、またはインプラン
ト（このインプラントは、シアラスティック（ｓｉａｌａｓｔｉｃ）膜のような
膜または繊維を含む、多孔性、非多孔性、または膠様材料である）により達成さ
れ得る。好ましくは、抗体を含む本発明のタンパク質を投与する場合、タンパク
質が吸収されない材料を使用するために注意が払われなければならない。
【０３７３】 別の実施形態において、化合物または組成物は、小胞、特に、リポソーム中へ
送達され得る（Ｌａｎｇｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３（
１９９０）；Ｔｒｅａｔら，Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐ
ｙ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ，Ｌ
ｏｐｅｚ−ＢｅｒｅｓｔｅｉｎおよびＦｉｄｌｅｒ（編），Ｌｉｓｓ，Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ，３５３〜３６５頁（１９８９）；Ｌｏｐｅｚ−Ｂｅｒｅｓｔｅｉｎ，
同書３１７〜３２７頁を参照のこと；広く同書を参照のこと）。
【０３７４】 さらに別の実施形態において、化合物または組成物は制御された放出システム
中で送達され得る。１つの実施形態において、ポンプが用いられ得る（Ｌａｎｇ
ｅｒ（前出）；Ｓｅｆｔｏｎ，ＣＲＣ Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎ
ｇ．１４：２０１（１９８７）；Ｂｕｃｈｗａｌｄら，Ｓｕｒｇｅｒｙ ８８：
５０７（１９８０）；Ｓａｕｄｅｋら，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５
７４（１９８９）を参照のこと）。別の実施形態において、ポリマー材料が用い
られ得る（Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌ
ｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ，ＬａｎｇｅｒおよびＷｉｓｅ（編），ＣＲＣ Ｐｒｅ
ｓ．，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，Ｆｌｏｒｉｄａ（１９７４）；Ｃｏｎｔｒｏｌｌ
ｅｄ Ｄｒｕｇ Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，Ｄｒｕｇ Ｐｒｏｄｕｃｔ
Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，ＳｍｏｌｅｎおよびＢａｌ
ｌ（編），Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９８４）；ＲａｎｇｅｒおよびＰ
ｅｐｐａｓ，Ｊ．、Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｓｃｉ．Ｒｅｖ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃ
ｈｅｍ．２３：６１（１９８３）を参照のこと；Ｌｅｖｙら，Ｓｃｉｅｎｃｅ
２２８：１９０（１９８５）；Ｄｕｒｉｎｇら，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．２５：
３５１（１９８９）；Ｈｏｗａｒｄら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７１：１０５
（１９８９）もまた参照のこと）。さらに別の実施形態において、制御された放
出システムは、治療標的、即ち、脳の近くに置かれ得、従って、全身用量の一部
のみを必要とする（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ，Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａ
ｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ（前出），第２巻，
１１５〜１３８頁（１９８４）を参照のこと）。
【０３７５】 他の制御された放出システムは、Ｌａｎｇｅｒにより総説において議論される
（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３（１９９０））。
【０３７６】 本発明の化合物がタンパク質をコードする核酸である、具体的な実施形態にお
いて、その核酸は、それを適切な核酸発現ベクターの一部として構成し、そして
それが細胞内になるように投与することにより（例えば、レトロウイルスベクタ
ーの使用により（米国特許第４，９８０，２８６号を参照のこと）、または直接
注射により、または微粒子ボンバードメント（例えば、遺伝子銃；Ｂｉｏｌｉｓ
ｔｉｃ，Ｄｕｐｏｎｔ）の使用により、または脂質もしくは細胞表面レセプター
もしくはトランスフェクト剤でコーティングすることにより、または核に入るこ
とが公知であるホメオボックス様ペプチドと結合させて投与すること（例えば、
Ｊｏｌｉｏｔら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：１８
６４−１８６８（１９９１）を参照のこと）などにより、そのコードされたタン
パク質の発現を促進するようにインビボで投与され得る。あるいは、核酸は、細
胞内に導入され得、そして、発現のために相同組換えにより宿主細胞ＤＮＡ内に
組み込まれ得る。
【０３７７】 本発明はまた、薬学的組成物を提供する。このような組成物は、治療有効量の
化合物、および薬学的に受容可能なキャリアを含む。具体的な実施形態において
、用語「薬学的に受容可能な」とは、動物における、そしてさらに特にヒトにお
ける使用のために、連邦規制当局もしくは米国政府により認められたか、または
米国薬局方もしくは他の一般に認められた薬局方に列挙されたことを意味する。
用語「キャリア」とは、治療剤とともに投与される、希釈剤、アジュバンド、賦
形剤、またはビヒクルをいう。このような薬学的なキャリアは、水および油（石
油起源、動物起源、植物起源、または合成起源の油（例えば、ピーナッツ油、大
豆油、鉱油、ゴマ油など）を含む）のような滅菌した液体であり得る。水は、薬
学的組成物が静脈内に投与される場合に、好ましいキャリアである。生理食塩水
溶液、ならびにデキストロースおよびグリセロールの水溶液はまた、特に注射可
能な溶液のために、液体キャリアとして使用され得る。適切な薬学的賦形剤とし
ては、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、イネ
、フラワー、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン
酸グリセロール、滑石、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン
、グリコール、水、エタノールなどが挙げられる。組成物はまた、所望されるな
らば、少量の湿潤剤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤を含み得る。これらの組
成物は、液剤、懸濁剤、乳剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、徐放性処方物な
どの形態を取り得る。この組成物は、従来の結合剤およびトリグリセリドのよう
なキャリアとともに、坐剤として処方され得る。経口処方物は、薬学的等級のマ
ンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナ
トリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどのような標準キャリアを含み得る
。適切な薬学的キャリアの例は、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる「Ｒｅｍｉｎｇｔ
ｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」に記載される。
このような組成物は、治療有効量の化合物を、好ましくは精製された形態で、適
切な量のキャリアとともに含んで、患者への適切な投与のための形態を提供する
。処方物は、投与形態に適するべきである。
【０３７８】 好ましい実施形態において、組成物は、慣用手順に従って、ヒトへの静脈内投
与のために採用された薬学的組成物として、処方される。代表的には、静脈内投
与のための組成物は、滅菌等張水性緩衝液の溶液である。必要な場合、組成物は
また、可溶化剤および注射の部位での痛みを緩和するリグノカインのような局部
麻酔を含み得る。一般的には、成分は、別々にかまたは単一投薬形態で一緒に混
合してのどちらかで、例えば、一定量の活性薬剤を示すアンプルまたは小袋（ｓ
ａｃｈｅｔｔｅ）のような密封された容器中の凍結乾燥粉末または水を含まない
濃縮物として供給される。組成物が注入により投与されるべき場合には、組成物
は、滅菌した薬学的等級の水または生理食塩水を含む注入ボトルに分配され得る
。組成物が注射により投与される場合、成分が投与の前に混合され得るように、
注射用滅菌水または生理食塩水のアンプルが提供され得る。
【０３７９】 本発明の化合物は、中性のまたは塩の形態として処方され得る。薬学的に受容
可能な塩としては、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などに由来するもの
のようなアニオンとともに形成される塩、およびナトリウム、カリウム、アンモ
ニウム、カルシウム、水酸化第２鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、
２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどに由来するもののよ
うなカチオンとともに形成される塩が挙げられる。
【０３８０】 この処置（本発明のポリペプチドの異常な発現および／または活性と関連する
疾患または障害の抑制および予防）において効果的である本発明の化合物の量は
、標準的な臨床技術により決定され得る。さらに、インビトロアッセイは、必要
に応じて、使用して最適な投薬量の範囲を同定するのを助け得る。処方において
使用されるべき正確な用量はまた、投与の経路、および疾患または障害の重篤さ
に依存し、そして開業医の判断および各患者の状況に従って決定されるべきであ
る。有効用量は、インビトロまたは動物モデル試験系から得られた用量反応曲線
から外插され得る。
【０３８１】 抗体に関して、患者に投与される投薬量は、代表的に、患者の体重１ｋｇあた
り０．１ｍｇ〜１００ｍｇである。好ましくは、患者に投与される投薬量は、患
者の体重１ｋｇあたり０．１ｍｇと２０ｍｇとの間であり、より好ましくは、患
者の体重１ｋｇあたり１ｍｇ〜１０ｍｇである。一般に、ヒト抗体は、外来ポリ
ペプチドへの免疫応答に起因して、他種由来の抗体よりもヒト体内で長い半減期
を有する。従って、ヒト抗体の低い投薬量および頻度の低い投与は、しばしば可
能である。さらに、本発明の抗体の投与の投薬量および頻度は、改変（例えば、
脂溶化（ｌｉｐｉｄａｔｉｏｎ）のような）による抗体の取り込みおよび組織浸
透（例えば、脳への）を増強することにより減少され得る。
【０３８２】 本発明はまた、本発明の薬学的組成物の一つ以上の成分で満たされている一つ
以上の容器を備える薬学的パックまたはキットを提供する。薬学的製品または生
物学的製品の製造、使用または販売を規制している政府機関により規定される形
式における通告は、このような容器に、必要に応じて伴い得る。この通告は、ヒ
トの投与のための製造、使用または販売のこの機関による認可を反映する。
【０３８３】 （診断および画像化） 目的のポリペプチドに特異的に結合する標識化抗体、ならびにそれらの誘導体
およびそれらのアナログは、診断目的のために使用されて、本発明のポリペプチ
ドの異常な発現および／または活性に関連する疾患、障害および／または状態を
検出、診断またはモニターし得る。本発明は、目的のポリペプチドの異常な発現
の検出について提供し、これは、（ａ）目的のポリペプチドに特異的な１つ以上
の抗体を使用して、個体の細胞または体液中の目的のポリペプチドの発現をアッ
セイする工程、および（ｂ）この遺伝子発現レベルと標準的な遺伝子発現のレベ
ルを比較する工程、を包含し、これによって、その標準的な発現レベルと比較さ
れるアッセイされたポリペプチド遺伝子発現レベルの増加または減少が、異常な
発現を示す。
【０３８４】 本発明は、障害を診断するための診断アッセイを提供し、このアッセイは、（
ａ）目的のポリペプチドに特異的な１つ以上の抗体を使用して、個体の細胞また
は体液中の目的のポリペプチドの発現をアッセイする工程、および（ｂ）この遺
伝子発現レベルと標準的な遺伝子発現のレベルを比較する工程、を包含し、これ
によって、その標準的な発現レベルと比較されるアッセイされたポリペプチド遺
伝子発現レベルの増加または減少が、特定の障害を示す。癌に関して、個体由来
の生検組織における比較的高い量の転写物の存在は、疾患の発生のための素因を
示し得るか、または実際の臨床症状の出現前に疾患を検出するための手段を提供
し得る。この型のより決定的な診断は、保健専門家に予防手段を使用させること
、または早期の積極的な処置を可能にし得、これにより、癌の発生またはさらな
る進行を予防する。
【０３８５】 本発明の抗体を使用して、当業者に公知の古典的な免疫組織学的方法を使用し
て生物学的サンプル中のタンパク質レベルをアッセイし得る（例えば、Ｊａｌｋ
ａｎｅｎら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０１：９７６−９８５（１９８５）；
Ｊａｌｋａｎｅｎら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０５：３０８７−３０９６（
１９８７）を参照のこと）。タンパク質遺伝子発現を検出するために有用な、抗
体に基づく他の方法としては、イムノアッセイ（例えば、酵素結合イムノソルベ
ント検定法（ＥＬＩＳＡ）および放射免疫測定法（ＲＩＡ））が挙げられる。適
切な抗体アッセイ標識は、当該分野において公知であり、そして酵素標識（例え
ば、グルコースオキシダーゼ）；放射性同位体（例えば、ヨウ素（１２５Ｉ、１
２１Ｉ）、炭素（１４Ｃ）、硫黄（３５Ｓ）、トリチウム（３Ｈ）、インジウム
（１１２Ｉｎ）、およびテクネチウム（９９Ｔｃ））；発光標識（例えば、ルミ
ノール）；ならびに蛍光標識（例えば、フルオレセインおよびローダミン）、な
らびにビオチンが挙げられる。
【０３８６】 本発明の１つの局面は、動物、好ましくは哺乳動物、そして最も好ましくはヒ
トにおける、目的のポリペプチドの異常な発現と関連する疾患または障害の検出
および診断である。１つの実施形態において、診断は、ａ）目的のポリペプチド
に特異的に結合する有効量の標識化分子を被験体に（例えば、非経口的に、皮下
に、または腹腔内に）投与する工程；ｂ）このポリペプチドが発現する被験体内
の部位でこの標識化分子が優先的に濃縮することを可能にするために（および結
合していない標識化分子がバックグラウンドレベルまで除去されるために）投与
後、時間間隔を待つ工程；ｃ）バックグラウンドレベルを決定する工程；および
ｄ）この被験体中の標識化分子を検出する工程、を包含し、その結果、このバッ
クグラウンドレベルを越える標識化分子の検出は、この被験体が目的のポリペプ
チドの異常な発現と関連する特定の疾患または障害を有することを示す。バック
グラウンドレベルは、特定の系について以前に決定された標準的な値と、検出さ
れた標識化分子の量を比較する工程を包含する種々の方法により決定され得る。
【０３８７】 被験体の大きさおよび使用される画像化システムが、診断の画像を産生するた
めに必要である画像化部分の量を決定するということは、当該分野において理解
される。放射性同位体部分の場合、ヒト被験体について、注入される放射能の量
は、通常、約５〜２０ミリキュリーの範囲の９９ｍＴｃである。次いで、標識化
抗体または標識化抗体フラグメントは、特定のタンパク質を含む細胞の位置で優
先的に蓄積する。インビボでの腫瘍の画像化は、Ｓ．Ｗ．Ｂｕｒｃｈｉｅｌら、
「Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌａｂｅ
ｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ」（
Ｔｕｍｏｒ Ｉｍａｇｉｎｇ、第１３章：Ｔｈｅ Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ
Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ，Ｓ．Ｗ．Ｂｕｒｃｈｉｅｌおよび
Ｂ．Ａ．Ｒｈｏｄｅｓ編、Ｍａｓｓｏｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｉｎｃ．（１
９８２）において、記載される。
【０３８８】 使用する標識の型および投与の様式を含む、いくつかの変動に依存して、標識
化分子が被験体中の部位に優先的に濃縮することを可能にするため、および結合
していない標識化分子がバックグラウンドレベルまで除去されるための投与後の
時間間隔は、６〜４８時間もしくは６〜２４時間または６〜１２時間である。別
の実施形態において、投与後の時間間隔は、５〜２０日間または５〜１０日間で
ある。
【０３８９】 １つの実施形態において、疾患または障害をモニターすることは、疾患または
障害（ｄｉｓｅａｓｅ）を診断するための方法を繰り返すことによって実施され
る（例えば、最初の診断から１ヶ月後、最初の診断から６ヶ月後、最初の診断か
ら１年後、など）。
【０３９０】 標識化分子の存在は、インビボスキャニングについての当該分野で公知の方法
を使用して患者中で検出され得る。これらの方法は、使用される標識の型に依存
する。当業者は、特定の標識を検出するための適切な方法を決定することができ
る。本発明の診断方法において使用され得る方法およびデバイスは、コンピュー
ター連動断層撮影法（ＣＴ）、体全体のスキャン（例えば、陽子（ｐｏｓｉｔｉ
ｏｎ）放射断層撮影法（ＰＥＴ））、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、および超音波
診断法を含むが、これらに限定されない。
【０３９１】 特定の実施形態において、分子を放射性同位体で標識し、そして放射応答外科
的機器（ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｉｎ
ｓｔｒｕｍｅｎｔ）（Ｔｈｕｒｓｔｏｎら、米国特許第５，４４１，０５０号）
を使用して患者中で検出する。別の実施形態において、分子を蛍光化合物で標識
し、そして蛍光応答スキャニング機器を使用して患者中で検出する。別の実施形
態において、分子を陽電子射出金属で標識し、そして陽電子射出断層撮影法を使
用して患者中で検出する。さらに別の実施形態において、分子を常磁性標識で標
識し、そして磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）を使用して患者中で検出する。
【０３９２】 （キット） 本発明は、上記の方法において使用され得るキットを提供する。１つの実施形
態において、キットは、１つ以上の容器において、本発明の抗体、好ましくは精
製した抗体を備える。特定の実施形態において、本発明のキットは、エピトープ
を含む実質的に単離されたポリペプチドを備える。このエピトープは、キット中
に含まれる抗体と特異的に免疫反応する。好ましくは、本発明のキットは、目的
のポリペプチドと反応しないコントロール抗体をさらに備える。別の特定の実施
形態において、本発明のキットは、目的のポリペプチドへの抗体の結合を検出す
るための手段を備える（例えば、この抗体は、検出可能な基質（例えば、蛍光化
合物、酵素基質、放射性化合物もしくは発光化合物）に結合体化され得るか、ま
たは一次抗体を認識する二次抗体が、検出可能な基質と結合体化され得る）。
【０３９３】 本発明の別の特定の実施形態において、キットは、増殖性および／または癌性
のポリヌクレオチドおよびポリペプチドに対して特異的な抗体を含む血清のスク
リーニングに使用するための診断キットである。このようなキットは、目的のポ
リペプチドと反応しないコントロール抗体を備え得る。このようなキットは、エ
ピトープを含む実質的に単離されたポリペプチド抗原を備え得る。このエピトー
プは、少なくとも１つの抗ポリペプチド抗原抗体と特異的に免疫反応する。さら
に、このようなキットは、抗原に対する上記の抗体の結合を検出するための手段
を備える（例えば、抗体は、蛍光化合物（例えば、フローサイトメトリーにより
検出され得るフルオレセインまたはローダミン）と結合体化され得る）。特定の
実施形態において、キットは、組換え的に産生されたポリペプチド抗原または化
学的に合成されたポリペプチド抗原を備え得る。キットのポリペプチド抗原はま
た、固体支持体に付着され得る。
【０３９４】 より特定の実施形態において、上記のキットの検出手段は、上記のポリペプチ
ド抗原が付着する固体支持体を備える。このようなキットはまた、非付着レポー
ター標識化抗ヒト抗体を備え得る。この実施形態において、ポリペプチド抗原へ
の抗体の結合は、上記のレポーター標識化抗体の結合によって検出され得る。
【０３９５】 さらなる実施形態において、本発明は、本発明のポリペプチドの抗原を含む血
清のスクリーニングにおいて使用するための、診断キットを含む。この診断キッ
トは、ポリペプチド抗原またはポリヌクレオチド抗原と特異的に免疫反応する実
質的に単離された抗体、およびこの抗体へのこのポリヌクレオチド抗原またはポ
リペプチド抗原の結合を検出するための手段を備える。１つの実施形態において
、抗体は、固体支持体に付着される。特定の実施形態において、抗体は、モノク
ロナール抗体であり得る。キットのこの検出手段は、二次標識化モノクロナール
抗体を含み得る。あるいは、またはさらに、この検出手段は、標識化競合抗原を
含み得る。
【０３９６】 １つの診断構成において、試験血清を、本発明の方法により得られる表面結合
抗原を有する固相試薬と反応させる。特定の抗原抗体とこの試薬との結合、およ
び洗浄することによる結合していない血清成分の除去の後、この試薬をレポータ
ー標識化抗ヒト抗体と反応させて、固体支持体上に、結合した抗抗原抗体の量に
比例して、この試薬にレポーターを結合させる。この試薬を再び洗浄して、結合
していない標識化抗体を除去し、そしてこの試薬と会合するレポーターの量を決
定する。代表的に、レポーターは、酵素であり、この酵素は、適切な蛍光性基質
、発光性基質または比色用基質（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）の存在
下で固相をインキュベートすることにより検出される。
【０３９７】 上記のアッセイにおける固体表面試薬は、タンパク質材料を固体支持体材料（
例えば、高分子ビーズ、計深棒、９６ウェルプレートまたは濾過材料）に付着さ
せるための公知の技術により調製される。これらの付着方法としては、一般的に
、支持体へのタンパク質の非特異的な吸着または固体支持体上の化学的に活性な
基（例えば、活性化カルボキシル基、ヒドロキシル基、またはアルデヒド基）と
のタンパク質の共有結合（ｃｏｖａｌｅｎｔ ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ）（代表的
には、遊離アミン基を介する）が挙げられる。あるいは、ストレプトアビジンで
コートされたプレートが、ビオチン化された抗原と共に使用され得る。
【０３９８】 従って、本発明は、この診断方法を行うためのアッセイ系またはキットを提供
する。このキットは、一般的に、表面結合された組換え抗原を有する支持体、お
よび表面結合された抗抗原抗体を検出するための、レポーター標識された抗ヒト
抗体を備える。
【０３９９】 （ポリヌクレオチドの使用） 本明細書中で同定された各々のポリヌクレオチドは、試薬として多数の方法に
おいて使用され得る。以下の説明は例示的であるとみなされるべきであり、そし
て公知の技術を利用する。
【０４００】 本発明のポリヌクレオチドは、染色体同定のために有用である。実際の配列デ
ータ（反復多型性）に基づく染色体マーキング試薬は現在ほとんど利用可能では
ないため、新しい染色体マーカーを同定する必要性が存在するままである。各々
の配列は、個々のヒト染色体上の特定の位置に特に標的化され、そしてこの位置
にハイブリダイズされ得る。従って、本発明の各々のポリヌクレオチドは、当該
分野で公知の技術を用いて染色体マーカーとして慣用的に使用され得る。
【０４０１】 簡単に言うと、配列は、配列番号Ｘで示される配列からＰＣＲプライマー（好
ましくは、少なくとも１５ｂｐ（例えば、１５〜２５ｂｐ））を調製することに
よって染色体にマッピングされ得る。プライマーが、ゲノムＤＮＡ中の１つより
多くの予測されたエキソンにまたがらないように、プライマーは、コンピュータ
ー分析を使用して必要に応じて選択され得る。次いで、これらのプライマーは、
個々のヒト染色体を含む体細胞ハイブリッドのＰＣＲスクリーニングのために使
用される。配列番号Ｘに対応するヒト遺伝子を含むハイブリッドのみが、増幅さ
れたフラグメントを産生する。
【０４０２】 同様に、体細胞ハイブリッドは、特定の染色体に対してポリヌクレオチドをＰ
ＣＲマッピングする迅速な方法を提供する。単一のサーマルサイクラーを使用し
て１日あたり３つ以上のクローンが割り当てられ得る。さらに、ポリヌクレオチ
ドの下位位置決定（ｓｕｂｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ）は、特定の染色体フラグ
メントのパネルを用いて達成され得る。使用され得る他の遺伝子マッピング戦略
は、インサイチュハイブリダイゼーション、標識フローソート（ｌａｂｅｌｅｄ ｆｌｏｗ−ｓｏｒｔｅｄ）染色体でのプレスクリーニング、染色体特異的ｃＤ
ＮＡライブラリーを構築するためのハイブリダイゼーションによる前選択、およ
びコンピューターマッピング技術（例えば、その全体が本明細書中に参考として
援用される、Ｓｈｕｌｅｒ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ １６：４５
６−４５９（１９９８）を参照のこと）を含む。
【０４０３】 ポリヌクレオチドの正確な染色体位置はまた、中期染色体スプレッド（ｓｐｒ
ｅａｄ）の蛍光インサイチュハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）を使用して達
成され得る。この技術は５００または６００塩基ほどの短さのポリヌクレオチド
を使用する；しかし２，０００〜４，０００ｂｐのポリヌクレオチドが好ましい
。この技術の総説に関しては、Ｖｅｒｍａら、「Ｈｕｍａｎ Ｃｈｒｏｍｏｓｏ
ｍｅｓ：ａ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｂａｓｉｃ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ」，Ｐｅ
ｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ （１９８８）を参照のこと。
【０４０４】 染色体マッピングについては、ポリヌクレオチドは、個々に（単一染色体また
はその染色体上の単一部位をマークするために）またはパネルで（複数部位およ
び／または複数染色体をマークするために）使用され得る。
【０４０５】 従って、本発明はまた、染色体の位置決定のための方法も提供し、この方法は
、（ａ）表１におけるポリヌクレオチド配列および配列番号ＸからＰＣＲプライ
マーを調製する工程、ならびに（ｂ）個々の染色体を含む体細胞ハイブリッドを
スクリーニングする工程を包含する。
【０４０６】 本発明のポリヌクレオチドは、同様に、放射線ハイブリッドマッピング、ＨＡ
ＰＰＹマッピング、および長範囲制限マッピングに有用である。これらの技術お
よび当該分野で公知の他の技術の概説について、例えば、Ｄｅａｒ「Ｇｅｎｏｍ
ｅ Ｍａｐｐｉｎｇ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ」ＩＲＬ Ｐ
ｒｅｓｓ ａｔ Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｌｏｎｄ
ｏｎ（１９９７）；Ａｙｄｉｎ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．７７：６９１〜６９４（
１９９９）；Ｈａｃｉａら、Ｍｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ ３：４８３〜４９
２（１９９８）；Ｈｅｒｒｉｃｋら、Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ Ｒｅｓ．７：４０
９〜４２３（１９９９）；Ｈａｍｉｌｔｏｎら、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂ
ｉｏｌ．６２：２６５〜２８０（２０００）；および／またはＯｔｔ、Ｊ．Ｈｅ
ｒｅｄ．９０：６８〜７０（１９９９）（これらの各々は、その全体が参考とし
て本明細書中に援用される）を参照のこと。
【０４０７】 一旦、ポリヌクレオチドが正確な染色体位置にマップされると、ポリヌクレオ
チドの物理的位置は、連鎖分析において使用され得る。連鎖分析は、染色体位置
と特定の疾患の提示との間の同時遺伝（ｃｏｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ）を確立す
る。（疾患マッピングデータは、例えば、Ｖ．ＭｃＫｕｓｉｃｋ，Ｍｅｎｄｅｌ
ｉａｎ Ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ ｉｎ Ｍａｎ（Ｊｏｈｎｓ Ｈｏｐｋｉｎｓ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｗｅｌｃｈ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｌｉｂｒａｒｙを通し
てオンラインで利用可能である）において見出される）。１メガベースマッピン
グ解像度および２０ｋｂあたり１遺伝子と仮定すると、疾患と関連する染色体領
域に正確に位置決定されるｃＤＮＡは、５０〜５００の潜在的な原因遺伝子のう
ちの１つであり得る。
【０４０８】 従って、一旦、同時遺伝が確立されると、罹患個体と非罹患個体との間での本
発明のポリヌクレオチドおよび対応する遺伝子における差異が試験され得る。ま
ず、染色体中の可視的構造変化（例えば、欠失または転座）は染色体スプレッド
において、またはＰＣＲによって試験される。構造的変化が存在しない場合、点
変異の存在が確認される。何人かのまたは全ての罹患個体で観察されたが、正常
な個体では観察されなかった変異は、この変異がこの疾患を引き起こし得ること
を示す。しかし、いくつかの正常な個体由来のポリペプチドおよび対応する遺伝
子の完全な配列決定は、変異を多型性と区別するために要求される。新しい多型
性が同定される場合、この多型ポリペプチドはさらなる連鎖分析のために使用さ
れ得る。
【０４０９】 さらに、非罹患個体と比較した、罹患個体の遺伝子の増加または減少した発現
が、本発明のポリヌクレオチドを使用して評価され得る。任意のこれらの変化（
変化した発現、染色体再配置、または変異）は、診断マーカーまたは予後マーカ
ーとして使用され得る。
【０４１０】 従って、本発明はまた、障害の診断の間に有用な診断方法を提供し、この方法
は、個体由来の細胞または体液中の本発明のポリヌクレオチドの発現レベルを測
定する工程、および測定された遺伝子発現レベルを標準のポリヌクレオチド発現
レベルと比較する工程を包含し、これによって、標準と比較して、遺伝子発現レ
ベルの増加または減少が、障害の指標になる。
【０４１１】 なお別の実施形態では、本発明は、サンプルを、試験被験体に由来する増殖性
および／またはガン性のポリヌクレオチドの存在について分析するためのキット
を含む。一般的実施形態において、このキットは、本発明のポリヌクレオチドと
特異的にハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む少なくとも１つのポリヌク
レオチドプローブ、および適切な容器を備える。この特定の実施形態では、この
キットは、本発明のポリヌクレオチドの内部領域を規定する２つのポリヌクレオ
チドプローブを含み、ここで各プローブは、この領域に対して内部に３１’マー
末端を含む１つの鎖を有する。さらなる実施形態では、このプローブは、ポリメ
ラーゼ連鎖反応増幅のためのプライマーとして有用であり得る。
【０４１２】 例えば、腫瘍の診断を含む、関連障害の診断が既に従来方法によって行われて
いる場合、本発明は、予後インジケーターとして有用であり、それによって増強
または抑制された本発明のポリヌクレオチドの発現を示す患者が、標準レベルに
より近いレベルでこの遺伝子を発現する患者と比較して悪い臨床結果を経験する
。
【０４１３】 「本発明のポリヌクレオチドの発現レベルを測定する（こと）」によって、本
発明のポリペプチドのレベルまたは本発明のポリペプチドをコードするｍＲＮＡ
のレベルを、第１の生物学的サンプルにおいて直接的（例えば、絶対のタンパク
質レベルまたはｍＲＮＡレベルを決定または評価することによって）または相対
的（例えば、第２の生物学的サンプル中のポリペプチドレベルまたはｍＲＮＡレ
ベルに対して比較することによって）のいずれかで定性的または定量的に測定ま
たは評価することが意図される。好ましくは、第１の生物学的サンプル中のポリ
ペプチドレベルまたはｍＲＮＡレベルが測定または評価され、そして標準のポリ
ペプチドレベルまたはｍＲＮＡレベルに対して比較され、この標準は、関連障害
を有さない個体から得られる第２の生物学的サンプルから得られるかまたは関連
障害を有さない個体の集団由来のレベルを平均することによって決定される。当
該分野で認識されるように、一旦標準的なポリペプチドレベルまたはｍＲＮＡレ
ベルが公知になれば、これを、比較のための標準として反復して用い得る。
【０４１４】 「生物学的サンプル」によって、本発明のポリペプチドまたは対応するｍＲＮ
Ａを含む、個体、体液、細胞株、組織培養物または他の供給源から得られる任意
の生物学的サンプルが意図される。示されるように、生物学的サンプルは、本発
明のポリペプチドを含む体液（例えば、精液、リンパ、血清、血漿、尿、滑液お
よび髄液）、および本発明のポリペプチドを発現することが見出された組織供給
源を含む。哺乳動物から組織生検および体液を得るための方法は、当該分野で周
知である。生物学的サンプルがｍＲＮＡを含む場合、組織生検が好ましい供給源
である。
【０４１５】 上記で提供された方法は好ましくは、本発明のポリヌクレオチドおよび／また
はポリペプチドが固体支持体に結合される、診断方法および／またはキットに適
用され得る。１つの例示的な方法では、この支持体は、米国特許第５，８３７，
８３２号、同第５，８７４，２１９号および同第５，８５６，１７４号に記載さ
れる、「遺伝子チップ」または「生物学的チップ」であり得る。さらに、本発明
のポリヌクレオチドが結合されたこのような遺伝子チップを用いて、単離された
本発明のポリヌクレオチド配列と、試験被験体から単離されたポリヌクレオチド
との間の多型性を同定し得る。このような多型の知識（すなわち、その多型の位
置、およびその多型の存在）は、多くの障害（例えば、神経障害、免疫系障害、
筋肉障害、生殖障害、胃腸障害、肺障害、心血管障害、腎障害、増殖性障害、な
らびに／または癌性疾患および癌性状態）について、疾患遺伝子座を同定する際
に有益である。このような方法は、米国特許第５，８５８，６５９号および同第
５，８５６，１０４号に記載される。上記に参照した米国特許は、その全体が本
明細書中に参考として援用される。
【０４１６】 本発明は、化学的に合成された、または、ペプチド核酸（ＰＮＡ）として再現
された）または当該分野で公知の他の方法に従って、本発明のポリヌクレオチド
を包含する。ＰＮＡの使用は、本発明のポリヌクレオチドが固体支持体、または
、遺伝子チップに取り込まれる場合、好ましい形態として役立つ。本発明の目的
のために、ペプチド核酸（ＰＮＡ）は、ポリアミド型のＤＮＡアナログであり、
そしてアデニン、グアニン、チミンおよびシトシンについてのモノマー単位が市
販されている（Ｐｅｒｃｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）。ＤＮＡの特定
の成分（例えば、リン、酸化リンまたはデオキシリボース誘導体）は、ＰＮＡ中
に存在しない。Ｐ．Ｅ．Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｍ．Ｅｇｈｏｌｍ，Ｒ．Ｈ．Ｂｅｒｇ
およびＯ．Ｂｕｃｈａｒｄｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５４，１４９７（１９９１）
；ならびにＭ．Ｅｇｈｏｌｍ，Ｏ．Ｂｕｃｈａｒｄｔ，Ｌ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓ
ｅｎ，Ｃ．Ｂｅｈｒｅｎｓ，Ｓ．Ｍ．Ｆｒｅｉｅｒ，Ｄ．Ａ．Ｄｒｉｖｅｒ，Ｒ
．Ｈ．Ｂｅｒｇ、Ｓ．Ｋ．Ｋｉｍ，Ｂ．ＮｏｒｄｅｎおよびＰ．Ｅ．Ｎｉｅｌｓ
ｅｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６５，６６６（１９９３）によって開示されるように、
ＰＮＡは、相補的なＤＮＡ鎖に対して特異的かつ緊密に結合し、そしてヌクレア
ーゼによって分解されない。実際、ＰＮＡは、ＤＮＡ自体が結合するよりも強力
にＤＮＡに結合する。これはおそらく、２つの鎖の間に静電斥力が存在せず、そ
してまたポリアミド骨格がより可撓性が高いことによる。これによって、ＰＮＡ
／ＤＮＡ二重鎖は、ＤＮＡ／ＤＮＡ二重鎖よりも広範囲のストリンジェンシー条
件下で結合し、多重鎖ハイブリダイゼーションを行うのをより容易にする。強力
な結合に起因して、ＤＮＡを用いてよりも小さいプローブが用いられ得る。さら
に、おそらく、単一の塩基ミスマッチが、ＰＮＡ／ＤＮＡハイブリダイゼーショ
ンを用いて決定され得る。なぜなら、ＰＮＡ／ＤＮＡの１５マーにおける単一の
ミスマッチは、ＤＮＡ／ＤＮＡの１５マー二重鎖については４℃〜１６℃である
のに対して、融点（Ｔ．ｓｕｂ．ｍ）を８〜２０℃低下させるからである。また
、ＰＮＡ中に電荷基が存在しないことは、ハイブリダイゼーションが、低いイオ
ン強度で行われ得、そして分析の間の塩によって可能な妨害を減少させることを
意味する。
【０４１７】 本発明は、哺乳動物におけるガンの検出を含むがこれらに限定されない用途を
有する。特に、本発明は、以下を含むがこれらに限定されない、病理学的細胞増
殖新形成の診断の間に有用である：急性骨髄性白血病（急性単球性白血病、急性
骨髄芽球性白血病、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄単球性白血病、急性赤白血
病、急性巨核球性白血病、および急性未分化白血病などを含む）；および慢性骨
髄性白血病（慢性骨髄単球性白血病、慢性顆粒球性白血病などを含む）。好まし
い哺乳動物としては、有尾猿（ｍｏｎｋｅｙ）、無尾猿（ａｐｅ）、ネコ、イヌ
、ウシ、ブタ、ウマ、ウサギおよびヒトが挙げられる。特に好ましいのは、ヒト
である。
【０４１８】 病理学的細胞増殖障害はしばしば、原癌遺伝子の不適切な活性化に関連する（
Ｇｅｌｍａｎｎ，Ｅ．Ｐ．ら，「Ｔｈｅ Ｅｔｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ａｃｕｔｅ Ｌｅｕｋｅｍｉａ：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｖｉｒ
ａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ」，Ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ Ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｆ
ｔｈｅ Ｂｌｏｏｄ，第１巻，Ｗｉｅｒｎｉｋ、Ｐ．Ｈ．ら編，１６１−１８２
（１９８５））。新形成は現在、ウイルス配列の染色体への挿入、より活性に転
写される領域への遺伝子の染色体転座、または何らかの他の機構による、正常な
細胞遺伝子産物の定性的変化から、または遺伝子発現の定量的改変から生じると
考えられている（Ｇｅｌｍａｎｎら、前出）。特定の遺伝子の変異または変更さ
れた発現が、他の組織および他の細胞型の中でも、いくつかの白血病の病因と関
与するようである（Ｇｅｌｍａｎｎら、前出）。実際、いくつかの動物新形成に
関与する癌遺伝子のヒト対応物は、ヒトの白血病および癌のいくつかの症例にお
いて増幅または転座されている（Ｇｅｌｍａｎｎら、前出）。
【０４１９】 例えば、ｃ−ｍｙｃ発現は、非リンパ球性白血病細胞株ＨＬ−６０において高
度に増幅される。ＨＬ−６０細胞が増幅を止めるように化学的に誘導される場合
、ｃ−ｍｙｃのレベルは、ダウンレギュレートされることが見出される（国際公
開番号ＷＯ９１／１５５８０）。しかし、ｃ−ｍｙｃまたはｃ−ｍｙｂの５’末
端に相補的であるＤＮＡ構築物へのＨＬ−６０細胞の暴露が、ｃ−ｍｙｃタンパ
ク質またはｃ−ｍｙｂタンパク質の発現をダウンレギュレートする対応するｍＲ
ＮＡの翻訳をブロックし、そして処理した細胞の細胞増殖および分化の停止を引
き起こすことが示されている（国際公開番号ＷＯ９１／１５５８０；Ｗｉｃｋｓ
ｔｒｏｍら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：１０２８（１９８
８）；Ａｎｆｏｓｓｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８６：３３
７９（１９８９））。しかし、当業者は、増殖表現型を示すことが公知である種
々の起源の多数の細胞および細胞型を考慮すれば、本発明の有用性が造血性の細
胞および組織の増殖性障害の処置に限定されないことを認識する。
【０４２０】 前記に加えて、本発明のポリヌクレオチドは、三重らせん形成を通して、また
はアンチセンスＤＮＡもしくはＲＮＡを通して遺伝子発現を制御するために使用
され得る。アンチセンス技術は、例えば、Ｏｋａｎｏ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ
．５６：５６０（１９９１），「Ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ
ａｓ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐ
ｒｅｓｓｉｏｎ」，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ（１９８
８）において考察される。三重らせん形成は例えば、Ｌｅｅら、Ｎｕｃｌｅｉｃ
Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６：３０７３（１９７９）；Ｃｏｏｎｅｙら
、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４１：４５６（１９８８）；およびＤｅｒｖａｎら、Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ ２５１：１３６０（１９９１）において考察される。両方の方法は
、相補的ＤＮＡまたは相補的ＲＮＡへのポリヌクレオチドの結合に依存する。こ
れらの技術に関して、好ましいポリヌクレオチドは通常、２０〜４０塩基長のオ
リゴヌクレオチドであり、そして転写に関与する遺伝子領域（三重らせん−Ｌｅ
ｅら，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．６：３０７３（１９７９）；Ｃｏｏｎｅ
ｙら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４１：４５６（１９８８）；およびＤｅｒｖａｎら、
Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５１：１３６０（１９９１）を参照のこと）またはｍＲＮＡ
自体（アンチセンス−Ｏｋａｎｏ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．５６：５６０（１
９９１）；Ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙ−ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ａｓ Ａｎｔｉｓ
ｅｎｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，Ｃ
ＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ（１９８８））のいずれかに相
補的である。三重らせん形成は、最適にはＤＮＡからのＲＮＡ転写の遮断を生じ
るが、アンチセンスＲＮＡハイブリダイゼーションは、ポリペプチドへのｍＲＮ
Ａ分子の翻訳を阻止する。上記に記載のオリゴヌクレオチドはまた、アンチセン
スＲＮＡまたはＤＮＡが、インビボで発現されて本発明の抗原のポリペプチド産
生を阻害し得るように細胞に送達され得る。両方の技術は、モデル系において効
果的であり、そして本明細書に開示される情報は、疾患を処置するための試みに
おいて、特に、増殖性疾患および／または状態の処置のために、アンチセンスま
たは三重らせんポリヌクレオチドを設計するために使用され得る。
【０４２１】 本発明のポリヌクレオチドはまた、遺伝子治療において有用である。遺伝子治
療の１つの目標は、遺伝欠損を修正する試みにおいて、欠損遺伝子を有する生物
へ正常遺伝子を挿入することである。本発明に開示されるポリヌクレオチドは、
高度に正確な様式でこのような遺伝欠損を標的とする手段を提供する。別の目標
は、宿主ゲノム中には存在しなかった新しい遺伝子を挿入し、それによって宿主
細胞中に新しい形質を生成することである。
【０４２２】 ポリヌクレオチドはまた、微小な生物学的サンプルから個体を同定するために
有用である。例えば、米国軍は、その職員を同定するために制限フラグメント長
の多型性（ＲＦＬＰ）の使用を考慮している。この技術において、個体のゲノム
ＤＮＡは１つ以上の制限酵素で消化され、そして職員を同定するため固有なバン
ドを生じるためのサザンブロットについてプローブされる。この方法は、「認識
票（Ｄｏｇ ｔａｇ）」（これは、失われたり、交換されたり、または盗まれた
りすることにより、ポジティブな同定を困難にし得る）の現在の限界を受けない
。本発明のポリヌクレオチドは、ＲＦＬＰのためのさらなるＤＮＡマーカーとし
て使用され得る。
【０４２３】 本発明のポリヌクレオチドはまた、個体のゲノムの選択された部分の実際の塩
基ごとのＤＮＡ配列を決定することによって、ＲＦＬＰに対する代替物として使
用され得る。これらの配列は、このような選択されたＤＮＡを増幅しそして単離
するためにＰＣＲプライマーを調製するために使用され得、次いで、この選択さ
れたＤＮＡは、配列決定され得る。各個体が固有のセットのＤＮＡ配列を有する
ので、この技術を使用して、個体が同定され得る。一旦、固有のＩＤデータベー
スが個体について確立されると、その個体が生存していようとまたは死亡してい
ようと、その個体のポジティブ同定が、極めて小さな組織サンプルからなされ得
る。
【０４２４】 法医学生物学もまた、本明細書に開示されるようなＤＮＡに基づく同定技術を
使用して利益を得る。組織（例えば、髪または皮膚）、または体液（例えば、血
液、唾液、精液、滑液、羊水、乳汁、リンパ、肺痰（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｓｐ
ｕｔｕｍ）またはサーファクタント、尿、糞便物質など）のような非常に小さな
生物学的サンプルから得られたＤＮＡ配列は、ＰＣＲを使用して増幅され得る。
ある先行技術において、ＤＱａクラスＩＩ ＨＬＡ遺伝子のような多型性遺伝子
座から増幅された遺伝子配列は、個体を同定するための法医学生物学において使
用される。（Ｅｒｌｉｃｈ，Ｈ．，ＰＣＲ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｆｒｅｅｍ
ａｎ ａｎｄ Ｃｏ．（１９９２））。一旦、これらの特異的多型性遺伝子座が
増幅されると、これらは１つ以上の制限酵素で消化される。これは、ＤＱａクラ
スＩＩ ＨＬＡ遺伝子に対応するＤＮＡでプローブされたサザンブロットについ
てのバンドの同定セットを生じる。同様に、本発明のポリヌクレオチドは、法医
学的目的のための多型性マーカーとして使用され得る。
【０４２５】 また、特定の組織の供給源を同定し得る試薬についての必要性が存在する。例
えば、未知の起源の組織が提供される場合、法医学においてこのような必要性が
生じる。適切な試薬は、例えば、本発明の配列から調製される、ＤＮＡプローブ
またはプライマーを含み得る。このような試薬のパネルは、種および／または器
官型によって組織を同定し得る。同様の様式で、これらの試薬は、夾雑物につい
て組織培養物をスクリーニングするために使用され得る。
【０４２６】 本発明のポリヌクレオチドはまた、生物学的サンプル中に存在する組織または
細胞型の示差的同定のためのハイブリダイゼーションプローブとして有用である
。同様に、本発明のポリペプチドに関するポリペプチドおよび抗体は、組織（例
えば、免疫組織化学アッセイ）または細胞型（例えば、免疫細胞学アッセイ）の
示差的同定のための免疫学的プローブを提供するのに有用である。さらに、「標
準」遺伝子発現レベル（すなわち、障害を有しない個体由来の健康組織の発現レ
ベル）と比較して、上記の組織または細胞の多くの障害に対して、本発明のポリ
ヌクレオチド／ポリペプチドの有意に高いかまたは低いレベルの遺伝子発現が、
このような障害を有する個体から採取された特定の組織（例えば、本発明のポリ
ペプチドおよび／またはポリヌクレオチドを発現する組織、および／または癌性
組織および／または創傷組織）または体液（例えば、血清、血漿、尿、滑液また
は髄液）において検出され得る。
【０４２７】 従って、本発明は、以下の工程を含む障害の診断方法を提供する：（ａ）個体
の細胞または体液中の遺伝子発現レベルをアッセイする工程；（ｂ）標準的な遺
伝子発現レベルと、この遺伝子発現レベルを比較し、それにより、標準の発現レ
ベルと比較して、アッセイされた遺伝子発現レベルの増加または減少が障害を示
す、工程。
【０４２８】 少なくとも、本発明のポリヌクレオドは、サザンブロットのゲル上の分子量マ
ーカーとして、特定の細胞型における特異的ｍＲＮＡの存在についての診断プロ
ーブとして、新規のポリヌクレオドを発見するプロセスにおける「減算した（ｓ
ｕｂｔｒａｃｔ−ｏｕｔ）」公知の配列に対するプローブとして、「遺伝子チッ
プ」または他の支持体に付着するためのオリゴマーを選択および作製するために
、ＤＮＡ免疫技術を用いて抗ＤＮＡ抗体を惹起するために、および免疫応答を惹
起する抗原として使用され得る。
【０４２９】 （ポリペプチドの使用） 本明細書中で同定される各々のポリペプチドは、多くの方法において使用され
得る。以下の記述は、例示として考慮されるべきであり、そして公知の技術を利
用する。
【０４３０】 本発明のポリペプチドに対して指向されるポリペプチドおよび抗体は、組織（
例えば、ＡＢＣ免疫ペルオキシダーゼのような免疫組織化学アッセイ（Ｈｓｕら
、Ｊ．Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｃｙｔｏｃｈｅｍ．２９：５７７−５８０（１９８
１））または細胞型（例えば、免疫細胞化学アッセイ）の示差的同定のための免
疫学的プローブを提供するために有用である。
【０４３１】 抗体を使用して、当業者に公知の古典的な免疫組織学的な方法を用いて、生物
学的サンプル中の本発明のポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドの
レベルをアッセイし得る。（例えば、Ｊａｌｋａｎｅｎら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉ
ｏｌ．１０１：９７６−９８５（１９８５）；Ｊａｌｋａｎｅｎら、Ｊ．Ｃｅｌ
ｌ．Ｂｉｏｌ．１０５：３０８７−３０９６（１９８７）を参照のこと）。タン
パク質の遺伝子発現を検出するのに有用な、他の抗体に基づく方法には、免疫学
的検定（例えば、酵素結合イムノソルベント検定（ＥＬＩＳＡ）およびラジオイ
ムノアッセイ（ＲＩＡ））が含まれる。適切な抗体アッセイの標識は、当該分野
で公知であり、そして酵素標識（例えば、グルコースオキシダーゼ）；放射性同
位体（例えば、ヨウ素（１３１Ｉ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２１Ｉ）、炭素（１ ４ Ｃ）、硫黄（３５Ｓ）、トリチウム（３Ｈ）、インジウム（１１５ｍＩｎ、１ １３ｍ Ｉｎ、１１２Ｉｎ、１１１Ｉｎ）、およびテクネチウム（９９Ｔｃ、９９ ｍ Ｔｃ）、タリウム（２０１Ｔｌ）、ガリウム（６８Ｇａ、６７Ｇａ）、パラジ
ウム（１０３Ｐｄ）、モリブデン（９９Ｍｏ）、キセノン（１３３Ｘｅ）、フッ
素（１８Ｆ）、１５３Ｓｍ、１７７Ｌｕ、１５９Ｇｄ、１４９Ｐｍ、１４０Ｌａ
、１７５Ｙｂ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、４７Ｓｃ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１４ ２ Ｐｒ、１０５Ｒｈ、９７Ｒｕ；発光標識（例えば、ルミノール）；ならびに蛍
光標識（例えば、フルオレセインおよびローダミン）ならびにビオチンが挙げら
れる。
【０４３２】 生物学的サンプル中の本発明のポリペプチドのレベルをアッセイすることに加
えて、タンパク質はまた、画像化によりインビボで検出され得る。タンパク質の
インビボ画像化のための抗体の標識またはマーカーは、Ｘ線撮影法、ＮＭＲ、ま
たはＥＳＲにより検出可能なものを含む。Ｘ線撮影法のために適切な標識は、放
射性同位体（例えば、バリウムまたはセシウム）を含み、これは検出可能な放射
線を放射するが、被験体に対して明らかに有害ではない。ＮＭＲおよびＥＳＲの
ための適切なマーカーは、検出可能な特徴的なスピンを有するマーカー（例えば
、重水素）を含み、これは、関連するハイブリドーマのための栄養分を標識する
ことにより抗体中に取り込まれ得る。
【０４３３】 放射性同位体（例えば、１３１Ｉ、１１２Ｉｎ、９９ｍＴｃ、（１３１Ｉ、１ ２５ Ｉ、１２３Ｉ、１２１Ｉ）、炭素（１４Ｃ）、硫黄（３５Ｓ）、トリチウム
（３Ｈ）、インジウム（１１５ｍＩｎ、１１３ｍＩｎ、１１２Ｉｎ、１１１Ｉｎ
）、およびテクネチウム（９９Ｔｃ、９９ｍＴｃ）、タリウム（２０１Ｔｌ）、
ガリウム（６８Ｇａ、６７Ｇａ）、パラジウム（１０３Ｐｄ）、モリブデン（９ ９ Ｍｏ）、キセノン（１３３Ｘｅ）、フッ素（１８Ｆ）、１５３Ｓｍ、１７７Ｌ
ｕ、１５９Ｇｄ、１４９Ｐｍ、１４０Ｌａ、１７５Ｙｂ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、 ４７ Ｓｃ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１４２Ｐｒ、１０５Ｒｈ、９７Ｒｕ）、放
射線不透過性物質、または核磁気共鳴により検出可能な材料のような適切な検出
可能な画像化部分で標識された、タンパク質特異的抗体または抗体フラグメント
は、免疫系の障害について検査されるべき哺乳動物に（例えば、非経口的、皮下
、または腹腔内に）導入される。被験体のサイズおよび用いられる画像化システ
ムは、診断画像を生成するために必要な画像化部分の量を決定することが当該分
野で理解される。放射性同位体部分の場合には、ヒト被験体について、注射され
る放射能の量は、通常、９９ｍＴｃの約５〜２０ミリキュリーの範囲である。次
いで、標識された抗体または抗体フラグメントは、本発明のポリヌクレオチドに
よりコードされるポリペプチドを発現する細胞の位置に優先的に蓄積される。イ
ンビボ腫瘍画像化は、Ｓ．Ｗ．Ｂｕｒｃｈｉｅｌら、「Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍ
ａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉ
ｅｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ」（Ｔｕｍｏｒ Ｉｍａｇｉｎ
ｇの第１３章：Ｔｈｅ Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏ
ｆ Ｃａｎｃｅｒ、Ｓ．Ｗ．ＢｕｒｃｈｉｅｌおよびＢ．Ａ．Ｒｈｏｄｅｓ編、
Ｍａｓｓｏｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｉｎｃ．（１９８２））に記載される。
【０４３４】 １つの実施形態において、本発明は、異種ポリペプチドまたは核酸と会合する
本発明のポリペプチド（例えば、本発明のポリヌクレオチドによりコードされる
ポリペプチドおよび／または抗体）を投与することによる、本発明の組成物の細
胞への特異的な送達のための方法を提供する。１つの例において、本発明は、治
療タンパク質を標的化細胞中へ送達するための方法を提供する。別の例において
、本発明は、一本鎖核酸（例えば、アンチセンスまたはリボザイム）または二本
鎖核酸（例えば、細胞のゲノムに組み込み得るか、またはエピソームにて複製し
得、そして転写され得るＤＮＡ）を、標的化細胞に送達するための方法を提供す
る。
【０４３５】 別の実施形態において、本発明は、毒素または細胞傷害性プロドラッグに関連
する本発明のポリペプチドを投与することによる細胞の特異的な破壊（例えば、
腫瘍細胞の破壊）のための方法を提供する。
【０４３６】 「毒素」とは、内因性の細胞傷害性エフェクタ系、放射性同位体、ホロ毒素（
ｈｏｌｏｔｏｘｉｎ）、改変型毒素、毒素の触媒サブユニット、または規定の条
件下で細胞死を引き起こす細胞中もしくは細胞表面には通常存在しない任意の分
子もしくは酵素を結合および活性化する１つ以上の化合物を意味する。本発明の
方法に従って使用され得る毒素としては、以下が挙げられるが、これらに限定さ
れない：当該分野で公知の放射性同位体、固有のまたは誘導された内因性の細胞
傷害性エフェクタ系に結合する化合物（例えば、抗体（またはその補体固定含有
部分））、チミジンキナーゼ、エンドヌクレアーゼ、ＲＮＡｓｅ、α毒素、リシ
ン、アブリン、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素Ａ、ジフテリア毒素、サポリン、
モモルジン（ｍｏｍｏｒｄｉｎ）、ゲロニン（ｇｅｌｏｎｉｎ）、ヤマゴボウ抗
ウイルスタンパク質、αサルシン（ｓａｒｃｉｎ）およびコレラ毒素。「毒素」
はまた、細胞分裂停止剤もしくは細胞破壊剤、治療薬または放射活性金属イオン
（例えば、α−放射体（例えば、２１３Ｂｉ））もしくは他の放射性同位体（例
えば、１０３Ｐｄ、１３３Ｘｅ、１３１Ｉ、６８Ｇｅ、５７Ｃｏ、６５Ｚｎ、８ ５ Ｓｒ、３２Ｐ、３５Ｓ、９０Ｙ、１５３Ｓｍ、１５３Ｇｄ、１６９Ｙｂ、５１ Ｃｒ、５４Ｍｎ、７５Ｓｅ、１１３Ｓｎ、９０イットリウム、１１７スズ、１８ ６ レニウム、１６６ホルミウム、および１８８レニウム）；発光標識（例えば、
ルミノール）；および蛍光標識（例えば、フルオレセインおよびローダミン）、
ならびにビオチンを含む。
【０４３７】 当該分野において公知の技術は、本発明のポリペプチド（抗体を含む）を標識
化するために適用され得る。このような技術としては、二官能性結合剤の使用（
例えば、米国特許第５，７５６，０６５号；同第５，７１４，６３１号；同第５
，６９６，２３９号；同第５，６５２，３６１号；同第５，５０５，９３１号；
同第５，４８９，４２５号；同第５，４３５，９９０号；同第５，４２８，１３
９号；同第５，３４２，６０４号；同第５，２７４，１１９号；同第４，９９４
，５６０号；および同第５，８０８，００３号を参照のこと；これら各々の内容
は、本明細書中に参考としてその全体を援用する）が挙げられるが、これに限定
されない。
【０４３８】 従って、本発明は、障害の診断方法を提供し、これは以下を含む：（ａ）個体
の細胞または体液における本発明のポリペプチドの発現レベルをアッセイする工
程；および（ｂ）アッセイされたポリペプチドの発現レベルを標準のポリペプチ
ドの発現レベルと比較し、それによって標準の発現レベルと比較してアッセイさ
れたポリペプチドの発現レベルにおける増加または減少が障害を示す工程。癌に
関しては、個体由来の生検された組織中の相対的に高い量の転写物の存在は、疾
患の発症の素因を示し得るか、または実際の臨床的な症状が明らかとなる前に疾
患を検出するための手段を提供し得る。より決定的なこのタイプの診断は、保健
専門家がより早く予防策または積極的な処置を使用し、それによって癌の発症ま
たはさらなる進行を防ぐことを可能にし得る。
【０４３９】 さらに、本発明のポリペプチドを用いて疾患または状態（例えば、神経障害、
免疫系障害、筋肉障害、生殖障害、胃腸障害、肺障害、心血管障害、腎臓障害、
増殖障害ならびに／または癌性疾患および状態など）を処置または予防し得る。
例えば、患者は、ポリペプチドの非存在またはレベルの減少を元に戻すこと（例
えば、インスリン）、異なるポリペプチドの非存在またはレベルの減少を補充す
ること（例えば、ヘモグロビンＢに対するヘモグロビンＳ、ＳＯＤ、カタラーゼ
、ＤＮＡ修復タンパク質）、ポリペプチドの活性を阻害すること（例えば、癌遺
伝子または腫瘍抑制因子）、ポリペプチドの活性を活性化すること（例えば、レ
セプターに結合することによって）、遊離リガンドについて膜結合レセプターと
競合させることによって膜結合レセプターの活性を減少させること（例えば、炎
症を低減させる際に用いられる可溶性ＴＮＦレセプター）、または所望の応答を
もたらすこと（例えば、血管の成長の阻害、増殖細胞または組織に対する免疫応
答の増強）の試みにおいて、本発明のポリペプチドが投与され得る。
【０４４０】 同様に、本発明のポリペプチドに対して指向される抗体もまた用いられ、疾患
（上記、および本明細書中のどこかに記載されるような）を処置し得る。例えば
、本発明のポリペプチドに対して指向される抗体の投与には、ポリペプチドを結
合して、そして／またはポリペプチドを中和し、そして／またはポリペプチドの
過剰産生を低減し得る。同様に、抗体の投与は、例えば、膜に結合したポリペプ
チド（レセプター）へ結合することにより、ポリペプチドを活性化し得る。
【０４４１】 最も少ない程度に、本発明のポリペプチドは、当該分野で周知の方法を使用し
て、ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル上または分子ふるいゲルろ過カラム上の分子量マーカ
ーとして使用され得る。ポリペプチドはまた、抗体を惹起するために使用され得
、これは、次いで、宿主細胞の形質転換を評価する方法として組換え細胞由来の
タンパク質発現を測定するために使用され得る。さらに、本発明のポリペプチド
は、以下の生物学的活性を試験するために使用され得る。
【０４４２】 （診断アッセイ） 本発明の化合物は、哺乳動物（好ましくは、ヒト）における様々な障害の診断
、処置、予防および／または予後に有用である。このような障害は、神経性疾患
（例えば、以下の「神経活性および神経性疾患」に記載される）、免疫系障害（
例えば、以下の「免疫活性」に記載される）、筋障害（例えば、以下の「神経活
性および神経性疾患」に記載される）、生殖障害（例えば、以下の「抗新脈管形
成活性」に記載される）、肺障害（例えば、以下の「免疫活性」に記載される）
、心臓血管障害（例えば、以下の「心臓血管障害」に記載される）、感染性疾患
（例えば、以下の「感染性疾患」に記載される）、増殖性障害（例えば、以下の
「過剰増殖性障害」、「抗新脈管形成活性」および「細胞レベルの疾患」に記載
される）、および／または癌性疾患および状態（例えば、以下の「過剰増殖性障
害」、「抗新脈管形成活性」および「細胞レベルの疾患」に記載される）を含む
が、これらに限定されない。
【０４４３】 好ましい実施形態において、本発明の組成物（本発明のポリヌクレオチド、ポ
リペプチドおよび抗体ならびにそれらのフラグメントおよび改変体を含む）は、
免疫学的障害（例えば、本明細書中の「免疫活性」に記載される）、心臓血管障
害（例えば、本明細書中の「心臓血管障害」に記載される）、過剰増殖性障害（
例えば、本明細書中の「過剰増殖性障害」に記載される）、神経性障害（例えば
、本明細書中の「神経活性および神経性疾患」に記載される）、内分泌障害（例
えば、本明細書中の「内分泌障害」に記載される）、および表題「本発明のポリ
ヌクレオチドおよびポリペプチド」の節において特異的タンパク質の特徴に関し
て議論される疾患および／または障害の診断、予後予測、予防、および／または
処置において使用され得る。
【０４４４】 別の実施形態において、本発明のポリペプチド、またはこのポリペプチドに対
応するポリヌクレオチド、抗体、アゴニスト、またはアンタゴニストは、本発明
のポリペプチドが発現される組織（「本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプ
チド」において開示される組織、および／または表３、２行目（ライブラリーコ
ード）において開示される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、またはそれを超える
組織を含む）に関連する障害を診断、予後予測、予防、および／または処置する
ために使用され得る。
【０４４５】 多くの障害に関して、「標準の」遺伝子発現レベル（すなわち、障害を有さな
い個体由来の組織または体液中の発現レベル）に対して有意に変化した（増加し
たかまたは減少した）レベルの本発明のポリヌクレオチドの発現が、このような
障害を有する個体から採取された組織、細胞または体液（例えば、血清、血漿、
尿、精液、滑液または髄液）において検出され得る。従って、本発明は、障害の
診断の間に有用な診断方法を提供し、この方法は、個体由来の組織、細胞または
体液における本発明のヒトポリペプチドをコードする遺伝子の発現レベルを測定
する工程、および標準的な遺伝子発現レベルと測定された遺伝子発現レベルを比
較する工程を包含し、それにより、標準と比較した遺伝子発現レベルにおける増
加または減少が、障害の指標である。これらの診断アッセイは、インビボまたは
インビトロで行なわれ得る（例えば、血液サンプル、生検組織または剖検組織上
で）。
【０４４６】 本発明はまた、診断指標としてもまた有用であり、それにより、強化または抑
制された本発明のポリヌクレオチド発現を示す患者は、標準レベルにより近いレ
ベルで遺伝子を発現する患者と比較して悪い臨床結果を経験する。
【０４４７】 「ポリヌクレオチドをコードする遺伝子の発現レベルをアッセイする（こと）
」によって、本発明のヒトポリペプチドのレベルまたは本発明のヒトポリペプチ
ドをコードするｍＲＮＡのレベルを、第１の生物学的サンプルにおいて直接的（
例えば、絶対的なタンパク質レベルまたはｍＲＮＡレベルを決定または評価する
ことによって）または相対的（例えば、第２の生物学的サンプル中のポリペプチ
ドレベルまたはｍＲＮＡレベルに対して比較することによって）のいずれかで定
性的または定量的に測定または評価することが意図される。好ましくは、第１の
生物学的サンプル中のポリペプチド発現レベルまたはｍＲＮＡレベルが測定また
は評価され、そして標準のポリペプチドレベルまたはｍＲＮＡレベルに対して比
較され、この標準は、障害を有さない個体から得られる第２の生物学的サンプル
から得られるかまたは障害を有さない個体の集団由来のレベルを平均することに
よって決定される。当該分野で認識されるように、一旦標準的なポリペプチドレ
ベルまたはｍＲＮＡレベルが公知になれば、これは、比較のための標準として反
復して用いられ得る。
【０４４８】 「生物学的サンプル」によって、本発明のヒトポリペプチド（その一部を含む
）またはｍＲＮＡを含む、個体、細胞株、組織培養物または他の供給源から得ら
れる任意の生物学的サンプルが意図される。示されるように、生物学的サンプル
は、体液（例えば、血清、血漿、尿、滑液および髄液）、および本発明のポリペ
プチドの全長またはそのフラグメントを発現することが見出された組織供給源を
含む。哺乳動物から組織生検および体液を得るための方法は、当該分野で周知で
ある。生物学的サンプルがｍＲＮＡを含む場合、組織生検が好ましい供給源であ
る。
【０４４９】 総細胞性ＲＮＡは、ＣｈｏｍｃｚｙｎｓｋｉおよびＳａｃｃｈｉ、Ａｎａｌ．
Ｂｉｏｃｈｅｍ．１６２：１５６−１５９（１９８７）に記載される一工程グア
ニジウム−チオシアネート−フェノール−クロロホルム法のような任意の適切な
技術を使用して生物学的サンプルから単離され得る。次いで、本発明のヒトポリ
ペプチドをコードするｍＲＮＡのレベルは、任意の適切な方法を使用してアッセ
イされる。これらとしては、ノーザンブロット分析、Ｓ１ヌクレアーゼマッピン
グ、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、ポリメラーゼ連鎖反応と組み合わせた逆
転写（ＲＴ−ＰＣＲ）およびリガーゼ連鎖反応と組み合わせた逆転写（ＲＴ−Ｌ
ＣＲ）が挙げられる。
【０４５０】 本発明はまた、ポリペプチドの正常および異常なレベルの決定を含む、生物学
的サンプル（例えば、細胞および組織）中の本発明のポリペプチドのレベルを検
出するための定量および診断アッセイのような診断アッセイに関する。従って、
例えば、正常コントロール組織サンプルと比較した本発明のポリペプチドの過剰
発現を検出するための本発明に従う診断アッセイは、腫瘍の存在を検出するため
に使用され得る。宿主由来のサンプル中の本発明のヒトポリペプチドのようなポ
リペプチドのレベルを決定するために使用され得るアッセイ技術は、当業者に周
知である。このようなアッセイ方法としては、ラジオイムノアッセイ、競合結合
アッセイ、ウエスタンブロット分析およびＥＬＩＳＡアッセイが挙げられる。生
物学的サンプル中の本発明のポリペプチドレベルのアッセイは、任意の当該分野
で公知の方法を使用して行なわれ得る。
【０４５１】 生物学的サンプル中の本発明のポリペプチドレベルのアッセイは、抗体ベース
の技術を使用して行なわれ得る。例えば、組織における本発明のポリペプチド発
現は、古典的な免疫組織学的方法を用いて研究され得る（Ｊａｌｋａｎｅｎら、
Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０１：９７６−９８５（１９８５）；Ｊａｌｋｎｅ
ｎ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．，１０５：３０８７−３０９６（１９８
７））。ポリペプチド遺伝子発現を検出するために有用な他の抗体ベースの方法
としては、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）およびラジオイムノアッセ
イ（ＲＩＡ）のようなイムノアッセイが挙げられる。適切な抗体アッセイ標識が
、当該分野で公知であり、グルコースオキシダーゼのような酵素標識、およびヨ
ウ素（１２５Ｉ、１２１Ｉ）、炭素（１４Ｃ）、硫黄（３５Ｓ）、トリチウム（ ３ Ｈ）、インジウム（１１２Ｉｎ）、およびテクネチウム（９９ｍＴｃ）のよう
な放射線同位体、フルオレセインおよびローダミンのような蛍光標識、ならびに
ビオチンが挙げられる。
【０４５２】 分析される組織および細胞型は、遺伝子を発現することが一般的に公知である
かまたは疑われる組織および細胞型を含む（例えば、癌など）。本明細書中で使
用されるタンパク質単離方法は、例えば、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（Ｈａｒ
ｌｏｗ，Ｅ．およびＬａｎｅ，Ｄ．，１９８８，「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ」、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏ
ｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏ
ｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）（これは、本明細書中においてその全体が参考として援
用される）において記載されるような方法であり得る。単離された細胞は、細胞
培養由来であるかまたは患者由来であり得る。培養物から採取された細胞の分析
は、細胞ベースの遺伝子治療技術の一部としてか、あるいは遺伝子の発現に対す
る化合物の効果を試験するために使用され得る細胞の評価における必要な工程で
あり得る。
【０４５３】 例えば、本明細書中で記載されるような抗体、または抗体のフラグメントは、
本発明の遺伝子産物または保存された改変体またはそのペプチドフラグメントの
存在を定量的および定性的に検出するために使用され得る。これは、例えば、光
学顕微鏡、フローサイトメトリー、または蛍光定量的検出と結合した蛍光性標識
抗体を使用する免疫蛍光法によって達成され得る。
【０４５４】 好ましい実施形態において、本発明のポリペプチドの推定されたエピトープド
メインのいずれか１つまたは全部に対する抗体、または抗体のフラグメントは、
本発明の遺伝子産物または保存的な改変体、またはそのフラグメントの存在を定
量的または定性的に検出するために使用され得る。これは、例えば、光学顕微鏡
、フローサイトメトリー、または蛍光定量的検出と結合した蛍光性標識抗体を使
用する免疫蛍光法によって達成され得る。
【０４５５】 さらなる好ましい実施形態において、本発明のポリペプチドのコンフォメーシ
ョンエピトープに対する抗体または抗体のフラグメントを使用して、本発明の遺
伝子産物またはその保存的改変体あるいはそれらのペプチドフラグメントの存在
を、定量的または定性的に検出し得る。これは、例えば、蛍光標識した抗体を光
学顕微鏡検出、フローサイトメトリー検出または蛍光定量的検出と結合した蛍光
性標識抗体を使用する免疫蛍光法によって達成され得る。
【０４５６】 本発明の抗体（または、それらのフラグメント）および／またはポリペプチド
は、さらに、本発明の遺伝子産物またはその保存的改変体あるいはそれらのペプ
チドフラグメントのインサイチュ検出のために、組織学的（免疫蛍光アッセイ、
免疫電子顕微鏡アッセイまたは非免疫学的アッセイにおけるように）に使用され
得る。インサイチュ検出は、患者から組織学的標本を取り出し、そしてこの標本
に対して本発明の標識した抗体またはポリペプチドを適用することによって、達
成され得る。抗体（または、そのフラグメント）またはポリペプチドは、好まし
くは、生物学的サンプル上に標識した抗体（またはフラグメント）を重層するこ
とによって適用され得る。このような手順の使用を介して、試験組織における、
遺伝子産物、あるいは保存的改変体またはペプチドフラグメントの存在、あるい
はポリペプチド結合のみならず、その分布もまた決定することが可能である。本
発明を使用して、当業者は、任意の広範な種々の組織学的方法（例えば、染色手
順）が、このようなインサイチュ検出を達成するように改変され得ることを容易
に認識する。
【０４５７】 本発明の遺伝子産物またはその保存的改変体あるいはそれらのペプチドフラグ
メントに対する免疫アッセイおよび非免疫アッセイは、代表的に、サンプル（例
えば、生物学的流体、組織抽出物、新鮮に収集した細胞、または細胞培養物中で
インキュベートした細胞の溶解物）を、本発明の遺伝子産物またはその保存的改
変体あるいはそれらのペプチドフラグメントに結合し得る検出可能に標識した抗
体の存在下でインキュベートする工程、および当該分野で周知の多くの技術のい
ずれかによってその結合した抗体を検出する工程、を包含する。
【０４５８】 この生物学的サンプルは、固相支持体またはキャリア（例えば、ニトロセルロ
ース）、あるいは細胞、細胞粒子または可溶性タンパク質を固定し得る他の固体
支持体との接触下に置かれ、そしてそれらの上に固定され得る。次いで、この支
持体を適切な緩衝液で洗浄し、その後、検出可能に標識した抗ポリペプチド抗体
または検出可能なポリペプチドで処理する。次いで、この固相支持体に対して、
この緩衝液での２回目の洗浄を行い、結合されなかった抗体またはポリペプチド
を除去する。必要に応じて、この抗体は、その後、標識される。次いで、固体支
持体上に結合された標識の量を、従来の手段によって検出し得る。
【０４５９】 「固相支持体またはキャリア」によって、抗原または抗体を結合し得る任意の
支持体が意図される。周知の支持体またはキャリアとしては、ガラス、ポリスチ
レン、ポリプロピレン、ポリエチレン、デキストラン、ナイロン、アミラーゼ、
天然および改変セルロース、ポリアクリルアミド、斑レイ岩および磁鉄鉱が挙げ
られる。キャリアの性質は、本発明の目的のために幾分可溶性であるかまたは不
溶性であり得る。この支持体材料は、その結合された分子が抗原または抗体に結
合し得る限り、実質的に任意の可能な構造配置を有し得る。従って、支持体の構
造は、球形（ビーズのような）または円柱形（試験管の内面またはロッドの外面
のような）であり得る。あるいは、その表面は、フラットであり得る（例えば、
シート、試験小片など）。好ましい支持体としては、ポリスチレンビーズが挙げ
られる。当業者は、抗体または抗原を結合し得る、他の多くの適切なキャリアを
認識しているか、または慣用的な実験を使用してその結合を確かめ得る。
【０４６０】 所定量の本発明のポリペプチドに対する抗体または本発明の抗原ポリペプチド
の結合活性は、周知の方法に従って決定され得る。当業者は、慣用的な実験を使
用することによって各決定のための作動的かつ最適なアッセイ条件を決定し得る
。
【０４６１】 個体から得られた生物学的サンプル中の本発明のポリペプチドレベルまたはポ
リヌクレオチドレベルをアッセイすることに加えて、ポリペプチドまたはポリヌ
クレオチドはまた、画像化によってインビボで検出され得る。例えば、本発明の
１つの実施形態において、本発明のポリペプチドおよび／または抗体を使用して
、疾患細胞（例えば、新生物）を画像化する。別の実施形態において、本発明の
ポリヌクレオチド（例えば、特定のｍＲＮＡ転写物の全てまたは一部に相補的な
ポリヌクレオチド）および／または抗体（例えば、本発明のポリペプチドのエピ
トープのうちのいずれか１つまたは組み合わせに対する抗体、本発明のポリペプ
チドのコンフォメーションエピトープに対する抗体、または哺乳動物細胞の細胞
表面上に発現される全長ポリペプチドに対する抗体）を使用して、疾患細胞また
は新生物細胞を画像化する。
【０４６２】 本発明のポリペプチドのインビボ画像化のための抗体標識またはマーカーは、
Ｘ線撮影法、ＮＭＲ、ＭＲＩ、ＣＡＴスキャンまたはＥＳＲによって検出可能な
ものを含む。Ｘ線撮影法について、適切な標識には、検出可能な放射線を放射す
るが、被験体には明白に有害ではないバリウムまたはセシウムのようなラジオア
イソトープが含まれる。ＮＭＲおよびＥＳＲのための適切なマーカーには、関連
するハイブリドーマの栄養素を標識することによって抗体中に取り込まれ得る、
検出可能な特徴的なスピンを有するもの（例えば、デュウテリウム）が含まれる
。インビボ画像化を使用して、ヒトにおける診断のために本発明のポリペプチド
の増強されたレベルを検出する場合、ヒト化抗体または「ヒト化」キメラモノク
ローナル抗体を使用することが好ましい場合がある。このような抗体は、本明細
書中に記載されるかまたは当該分野で公知の技術を使用して産生され得る。例え
ば、キメラ抗体を産生する方法は、当該分野で公知である。総説については、Ｍ
ｏｒｒｉｓｏｎ， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２（１９８５）； Ｏｉら
、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４（１９８６）； Ｃａｂｉｌｌｙら
、米国特許第４，８１６，５６７号；Ｔａｎｉｇｕｃｈｉら、ＥＰ １７１４９
６；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、ＥＰ １７３４９４；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、ＷＯ
８６０１５３３；Ｒｏｂｉｎｓｏｎら，ＷＯ ８７０２６７１；Ｂｏｕｌｉａｎ
ｎｅら、Ｎａｔｕｒｅ ３１２：６４３（１９８４）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、
Ｎａｔｕｒｅ ３１４：２６８（１９８５）を参照のこと。
【０４６３】 さらに、その保存が検出され得る任意の本発明のポリペプチドが、投与され得
る。例えば、放射線不透過物質または他の適切な化合物で標識された本発明のポ
リペプチドを、標識した抗体について上記で議論したように、インビボで投与お
よび可視化し得る。さらに、このようなポリペプチドは、インビトロ診断手順に
利用され得る。
【０４６４】 ラジオアイソトープ（例えば、１３１Ｉ、１１２Ｉｎ、９９ｍＴｃ）、放射線
不透過性物質、または核磁気共鳴によって検出可能な物質のような適切な検出可
能な画像化部分で標識した本発明のポリペプチドに対するポリペプチド特異的抗
体または抗体フラグメントは、障害について検査される哺乳動物中に導入される
（例えば、非経口的に、皮下に、または腹腔内に）。被験体のサイズおよび使用
される画像化系が、診断画像を生成するために必要とされる画像化部分の量を決
定することが当該分野において理解される。ラジオアイソトープ部分の場合、ヒ
ト被験体について、注入される放射能の量は、通常、９９ｍＴｃの約５〜２０ミ
リキュリーの範囲である。次いで、標識された抗体または抗体フラグメントは、
標的タンパク質を含有する細胞の位置に優先的に蓄積する。インビボ腫瘍画像化
は、Ｓ．Ｗ．Ｂｕｒｃｈｉｅｌら、「Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ
ｉｃｓ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｉｅｓ ａｎｄ Ｔｈｅ
ｉｒ Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ」に記載されている（第１３章、Ｔｕｍｏｒ Ｉｍａ
ｇｉｎｇ：Ｔｈｅ Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ
Ｃａｎｃｅｒ，Ｓ．Ｗ．Ｂｕｒｃｈｉｅｌ，およびＢ．Ａ．Ｒｈｏｄｅｓ，編、
Ｍａｓｓｏｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｉｎｃ． （１９８２））。
【０４６５】 抗体に関して、ポリペプチド特異的抗体が検出可能に標識され得る方法の１つ
は、その抗体をレポーター酵素に連結しそして酵素免疫アッセイ（ＥＩＡ）にお
いてその連結産物を使用することによる（Ｖｏｌｌｅｒ，Ａ．，「Ｔｈｅ Ｅｎ
ｚｙｍｅ Ｌｉｎｋｅｄ Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ Ａｓｓａｙ（ＥＬＩＳ
Ａ）」，１９７８，Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｈｏｒｉｚｏｎｓ ２：１−７，Ｍ
ｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ Ｑｕａｒｔｅｒｌｙ
Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ，Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ，ＭＤ）；Ｖｏｌｌｅｒら
，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．３１：５０７−５２０（１９７８）；Ｂｕｔｌ
ｅｒ，Ｊ．Ｅ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．７３：４８２−５２３（１９８１
）；Ｍａｇｇｉｏ，Ｅ．（編），１９８０，Ｅｎｚｙｍｅ Ｉｍｍｕｎｏａｓｓ
ａｙ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ；Ｉｓｈｉｋａｗａ，
Ｅ．ら，（編），１９８１，Ｅｎｚｙｍｅ Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，Ｋｇａｋ
ｕ Ｓｈｏｉｎ，Ｔｏｋｙｏ）。抗体に結合されるレポーター酵素は、例えば、
分光光度的手段または蛍光定量手段あるいは可視的手段によって検出され得る化
学部分を生成するような様式で、適切な基質（好ましくは、色素産生期質）と反
応する。抗体を検出可能に標識するために使用され得るレポーター酵素としては
、以下が挙げられるが、これらに限定されない：リンゴ酸デヒドロゲナーゼ、ブ
ドウ球菌ヌクレアーゼ、Δ−５−ステロイドイソメラーゼ、酵母アルコールデヒ
ドロゲナーゼ、α−グリセロリン酸デヒドロゲナーゼ、トリオースリン酸イソメ
ラーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、アスパラギナ
ーゼ、グルコースオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、リボヌクレアーゼ、ウ
レアーゼ、カタラーゼ、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、グルコアミ
ラーゼおよびアセチルコリンエステラーゼ。さらに、検出は、レポーター酵素に
対する色素産生基質を使用する比色方法によって達成され得る。検出はまた、同
様に調製した標準と比較する、基質の酵素反応の程度の可視的比較によって達成
され得る。
【０４６６】 検出はまた、種々の他の免疫アッセイのいずれかを使用して達成され得る。例
えば、抗体または抗体フラグメントを放射性標識することによって、放射免疫ア
ッセイ（ＲＩＡ）（例えば、Ｗｅｉｎｔｒａｕｂ，Ｂ．，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ，Ｓｅｖｅｎｔｈ Ｔｒａｉｎｉ
ｎｇ Ｃｏｕｒｓｅ ｏｎ Ｒａｄｉｏｌｉｇａｎｄ Ａｓｓａｙ Ｔｅｃｈｎ
ｉｑｕｅｓ，Ｔｈｅ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ，１９８６年３月（
これは、参考として本明細書中に援用される）を参照のこと）の使用を介して本
発明のポリペプチドを検出することが可能である。放射性同位体は、γカウンタ
ー、シンチレーションカウンターまたはオートラジオグラフィーが挙げられるが
これらに限定されない手段によって、検出され得る。
【０４６７】 抗体を蛍光化合物で標識することもまた可能である。蛍光標識した抗体を、適
切な波長の光に曝露した場合に、次いで、その存在が、蛍光に起因して検出され
得る。とりわけ、最も一般的に使用されている蛍光標識化合物は、フルオレセイ
ンイソチオシアネート、ローダミン、フィコエリトリン、フィコシアニン、アロ
フィコシアニン、ｏ−フタルアルデヒド（ｏｐｈｔｈａｌｄｅｈｙｄｅ）および
フルオレセインである。
【０４６８】 抗体はまた、蛍光放出金属（例えば、１５２Ｅｕまたはランタニドシリーズの
他の金属）を使用して、検出可能に標識され得る。これらの金属は、金属キレー
ト基（例えば、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）またはエチレンジアミ
ン四酢酸（ＥＤＴＡ））を使用して抗体に付着され得る。
【０４６９】 抗体はまた、化学発光化合物に抗体を結合させることによって、検出可能に標
識され得る。次いで、この化学発光タグ化抗体の存在を、この化学反応の過程中
に生じる発光の存在を検出することによって決定される。特に有用な化学発光標
識化合物の例は、ルミノール、イソルミノール、セロマティック（ｔｈｅｒｏｍ
ａｔｉｃ）アクリジニウムエステル、イミダゾール、アクリジニウム塩およびシ
ュウ酸エステルである。
【０４７０】 同様に、生物発光化合物を使用して、本発明の抗体を標識し得る。生物発光は
、触媒タンパク質が化学発光反応の効率を増強する、生物学的系において見出さ
れる化学発光の型である。生物発光タンパク質の存在は、発光の存在を検出する
ことによって決定される。標識目的のための重要な生物発光化合物は、ルシフェ
リン、ルシフェラーゼおよびエクオリンである。
【０４７１】 （疾患を検出するための方法） 一般に、疾患は、患者から得られた生物学的サンプル（例えば、血液、血清、
尿、および／または腫瘍生検）中の、本発明の１以上のタンパク質および／また
はこのようなタンパク質をコードするポリヌクレオチドの存在に基づいて、その
患者において検出され得る。言い換えると、このようなタンパク質は、疾患また
は障害（癌および／または本明細書中他の箇所に記載のような疾患または障害を
含む）の存在または非存在を示すマーカーとして使用される。さらに、このよう
なタンパク質は、他の疾患および癌の検出に有用であり得る。本明細書中に提供
される結合因子は、一般に、生物学的サンプル中のその因子に結合する抗原のレ
ベルの検出を可能にする。ポリヌクレオチドプライマーおよびプローブを使用し
て、本発明のポリペプチドをコードするｍＲＮＡのレベルを検出し、これはまた
、疾患または障害（癌を含む）の存在または非存在を示す。一般に、本発明のポ
リペプチドは、正常な組織中よりも疾患組織中で少なくとも３倍高いレベルで存
在する。
【０４７２】 結合因子を使用してサンプル中のポリペプチドマーカーを検出するための、当
業者に公知の種々のアッセイ形式が存在する。例えば、ＨａｒｌｏｗおよびＬａ
ｎｅ、前出を参照のこと。一般に、患者中の疾患の存在または非存在は、（ａ）
患者から得た生物学的サンプルに結合因子を接触させる工程；（ｂ）このサンプ
ル中でこの結合因子に結合するポリペプチドのレベルを検出する工程；および（
ｃ）ポリペプチドのレベルを所定のカットオフ値と比較する工程、によって決定
され得る。
【０４７３】 好ましい実施形態において、このアッセイは、本発明のポリペプチドに結合し
そしてそのサンプル中の残余物からこのポリペプチドを取り出すために、固体支
持体に固定した結合因子の使用を含む。次いで、この結合したポリペプチドは、
レポーター基を含みそして結合因子／ポリペプチド複合体に特異的に結合する検
出試薬を使用して、検出され得る。このような検出試薬は、例えば、このポリペ
プチドに特異的に結合する結合因子あるいはこの結合因子に特異的に結合する抗
体または他の因子（例えば、抗免疫グロブリン、プロテインＧ、プロテインＡま
たはレクチン）を含み得る。あるいは、競合アッセイを使用し、ここで、ポリペ
プチドは、レポーター基で標識され、そしてサンプルと結合因子のインキュベー
ション後にその固定された結合因子に結合させる。サンプルの成分がその結合因
子への標識ポリペプチドの結合を阻害する程度は、その固定された結合因子との
サンプルの反応性を示す。このようなアッセイにおける使用に適切なポリペプチ
ドとしては、本発明のポリペプチドおよびその部分、あるいは抗体が挙げられ、
上記のように、これらに対して結合因子が結合する。
【０４７４】 固体支持体は、本発明のポリペプチドが付着され得る、当業者に公知の任意の
材料であり得る。例えば、固体支持体は、マイクロタイタープレート中の試験ウ
ェルあるいはニトロセルロースまたは他の適切な膜であり得る。あるいは、この
支持体は、ビーズまたはディスク（例えば、ガラスファイバーガラス、ラテック
スまたはプラスチック材料（例えば、ポリスチレンまたはポリ塩化ビニル））で
あり得る。支持体はまた、磁気粒子または光ファイバーセンサー（例えば、米国
特許第５，３５９，６８１号に開示されるような）であり得る。結合因子は、当
業者に公知の種々の技術（これらは、特許および科学文献に十分記載される）を
使用して固体支持体に固定され得る。本発明の状況下で、用語「固定」とは、非
共有結合会合（例えば、吸着）および共有結合会合（これは、因子と支持体上の
官能基との間の直接連結であり得るか、または架橋剤による連結であり得る）の
両方をいう。マイクロタイタープレート中のウェルまたは膜への吸着による固定
化が、好ましい。このような場合において、吸着は、結合因子を、適切な緩衝液
中で、固体支持体に適切な時間で接触させることによって達成され得る。接触時
間は、温度と共に変化するが、代表的には、約１時間〜約１日である。一般に、
約１０ｎｇ〜約１０μｇ（好ましくは、約１００ｎｇ〜約１μｇ）の範囲の量の
結合因子をプラスチックマイクロタイタープレート（例えば、ポリスチレンまた
はポリ塩化ビニル）のウェルに接触させることが、十分な量の結合因子を固定す
るのに十分である。
【０４７５】 一般的に、結合試薬の固体支持体への共有結合的な接触は、支持体および結合
試薬上の官能基（例えば、ヒドロキシル基またはアミノ基）の両方と反応する２
官能基試薬と支持体とを最初に反応させることによって達成され得る。例えば、
結合試薬は、共有結合的に、ベンゾキノンを使用した、または結合パートナー上
にアミンおよび活性水素を有する支持体上のアルデヒドキ基の濃縮による、適切
なポリマーコーティングを有する支持体に接触され得る。（例えば、Ｐｉｅｒｃ
ｅ Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃａｔａｌｏｇ ａｎｄ Ｈａｎｄｂ
ｏｏｋ，１９９１，Ａ１２−Ａ１３を参照のこと）。
【０４７６】 （遺伝子治療方法） 本発明の別の局面は、障害、疾患および状態を処置または予防するための遺伝
子治療方法である。この遺伝子治療方法は、本発明のポリペプチドの発現を達成
するための、核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡおよびアンチセンスＤＮＡまたはＲＮＡ）配
列の動物への導入に関する。この方法は、標的組織によるこのポリペプチドの発
現のために必要なプロモータおよび他の任意の遺伝因子と、作動可能に連結した
本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを必要とする。このような
遺伝子治療および送達技術は当該分野において公知である（例えば、本明細書中
に参考として援用される、ＷＯ９０／１１０９２を参照のこと）。
【０４７７】 従って、例えば、患者由来の細胞は、エキソビボで本発明のポリヌクレオチド
と作動可能に連結したプロモーターを含むポリヌクレオチド（ＤＮＡまたはＲＮ
Ａ）を用いて操作され得、次いで、操作された細胞は、本発明のポリペプチドを
用いて処置される患者に提供される。このような方法は、当該分野において周知
である。例えば、Ｂｅｌｌｄｅｇｒｕｎ，Ａ．ら、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ
Ｉｎｓｔ．８５：２０７−２１６（１９９３）；Ｆｅｒｒａｎｔｉｎｉ，Ｍ．
ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５３：１１０７−１１１２（１９９３）
；Ｆｅｒｒａｎｔｉｎｉ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １５３：４６０
４−４６１５（１９９４）；Ｋａｉｄｏ，Ｔ．ら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ
６０：２２１−２２９（１９９５）；Ｏｇｕｒａ，Ｈ．ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅ
ｓｅａｒｃｈ ５０：５１０２−５１０６（１９９０）；Ｓａｎｔｏｄｏｎａｔ
ｏ，Ｌ．ら、Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ７：１−１０（１９９６
）；Ｓａｎｔｏｄｏｎａｔｏ，Ｌ．ら、Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ４：１２４
６−１２５５（１９９７）；およびＺｈａｎｇ，Ｊ．−Ｆ．ら、Ｃａｎｃｅｒ
Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ３：３１−３８（１９９６）を参照のこと。これら
は、本明細書中に参考として援用される。１つの実施形態においては、操作され
る細胞は、動脈細胞である。この動脈細胞は、動脈、動脈の周囲の組織への直接
的な注射を介して、またはカテーテル注入を介して患者に再導入され得る。
【０４７８】 以下により詳細に考察されるように、このポリヌクレオチド構築物は、注射可
能な物質を動物の細胞に送達する任意の方法（例えば、組織（心臓、筋肉、皮膚
、肺、肝臓など）の間質空間への注射）により送達され得る。このポリヌクレオ
チド構築物は、薬学的に受容可能な液体または水性のキャリア中で送達され得る
。
【０４７９】 １つの実施形態においては、本発明のポリヌクレオチドは、裸のポリヌクレオ
チドとして送達される。用語「裸の」ポリヌクレオチド、ＤＮＡまたはＲＮＡと
は、細胞への侵入を補助し、促進し、または容易にするために作用するいかなる
送達ビヒクル（ウイルス配列、ウイルス粒子、リポソーム処方物、リポフェクチ
ンまたは沈殿剤などを含む）も含まない配列をいう。しかし、本発明のポリヌク
レオチドはまた、当業者に周知の方法により調製され得るリポソーム処方物中お
よびリポフェクチン処方物中などで送達され得る。このような方法は、例えば、
米国特許第５，５９３，９７２号、同第５，５８９，４６６号および同第５，５
８０，８５９号（これらは、本明細書中に参考として援用される）に記載される
。
【０４８０】 遺伝子治療方法において使用されるポリヌクレオチドベクター構築物は、好ま
しくは、宿主ゲノム中に組み込まれないかまたは複製を可能にする配列を含まな
い構築物である。適切なベクターとしては、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅから入手可能
なｐＷＬＮＥＯ、ｐＳＶ２ＣＡＴ、ｐＯＧ４４、ｐＸＴ１およびｐＳＧ；Ｐｈａ
ｒｍａｃｉａから入手可能なｐＳＶＫ３、ｐＢＰＶ、ｐＭＳＧおよびｐＳＶＬ；
ならびにＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎから入手可能なｐＥＦ１／Ｖ５、ｐｃＤＮＡ３．
１、およびｐＲｃ／ＣＭＶ２が挙げられる。他の適切なベクターは、当業者に容
易に明らかである。
【０４８１】 当業者に公知の任意の強力なプロモーターは、ポリヌクレオチド配列の発現を
駆動するために用いられ得る。適切なプロモーターとしては、アデノウイルスプ
ロモーター（例えば、アデノウイルス主要後期プロモーター）；または異種プロ
モーター（例えば、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター）；ＲＳウイ
ルス（ＲＳＶ）プロモーター；誘導性プロモーター（例えば、ＭＭＴプロモータ
ー、メタロチオネインプロモーター）；熱ショックプロモーター；アルブミンプ
ロモーター；ＡｐｏＡＩプロモーター；ヒトグロビンプロモーター；ウイルスチ
ミジンキナーゼプロモーター（例えば、単純ヘルペスチミジンキナーゼプロモー
ター）；レトロウイルスＬＴＲ；ｂ−アクチンプロモーター；およびヒト成長ホ
ルモンプロモーターが挙げられる。このプロモーターはまた、本発明のポリヌク
レオチドについてネイティブなプロモーターであり得る。
【０４８２】 他の遺伝子治療技術とは異なり、裸の核酸配列を標的細胞に導入する１つの主
要な利点は、その細胞におけるポリヌクレオチド合成の一過性の性質である。研
究によって、非複製ＤＮＡ配列が細胞に導入されて、６ヶ月までの期間の間、所
望のポリペプチドの産生を提供し得ることが示された。
【０４８３】 ポリヌクレオチド構築物は、動物内の組織（筋肉、皮膚、脳、肺、肝臓、脾臓
、骨髄、胸腺、心臓、リンパ、血液、骨、軟骨、膵臓、腎臓、胆嚢、胃、腸、精
巣、卵巣、子宮、直腸、神経系、眼、腺、および結合組織を包含する）の間隙空
間に送達され得る。この組織の間隙空間は、器官組織の細網線維間の、細胞間の
流体、ムコ多糖類基質、血管または室の壁における弾性線維、線維性組織のコラ
ーゲン線維、あるいは結合組織鞘性筋肉細胞（ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ ｔｉｓｓ
ｕｅ ｅｎｓｈｅａｔｈｉｎｇ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ）内または骨の裂孔中
の同じ基質を包含する。これは、同様に、循環の血漿およびリンパチャンネルの
リンパ液により占められた空間である。筋肉組織の間隙空間への送達は、以下で
議論される理由のために好ましい。本発明のポリヌクレオチド構築物は、これら
の細胞を含む組織への注射によって、好都合に送達され得る。本発明のポリヌク
レオチド構築物は、好ましくは、分化した持続性の非分裂細胞に送達され、そし
てその細胞において発現されるが、送達および発現は、非分化細胞または完全に
は分化していない細胞（例えば、血液の幹細胞または皮膚線維芽細胞）において
達成され得る。インビボでの筋肉細胞は、ポリヌクレオチドを取り込み、そして
発現する能力において、特に適格である。
【０４８４】 裸の核酸配列注射のために、ＤＮＡまたはＲＮＡの有効投薬量は、約０．０５
ｍｇ／ｋｇ体重から約５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲にある。好ましくは、この投薬
量は、約０．００５ｍｇ／ｋｇから約２０ｍｇ／ｋｇであり、そしてより好まし
くは約０．０５ｍｇ／ｋｇから約５ｍｇ／ｋｇである。もちろん、当業者が認識
するように、この投薬量は、注射の組織部位に応じて変化する。核酸配列の適切
かつ有効な投薬量は、当業者によって容易に決定され得、そして処置される状態
および投与経路に依存し得る。
【０４８５】 好ましい投与経路は、組織の間隙空間への非経口注射経路による。しかし、他
の非経口経路もまた用いられ得、これには、例えば、特に、肺または気管支の組
織、咽喉または鼻の粘膜への送達のためのエアロゾル処方物の吸入が挙げられる
。さらに、裸のＤＮＡ構築物が、血管形成術の間にこの手順において用いられる
カテーテルによって動脈に送達され得る。
【０４８６】 裸のポリヌクレオチドは、送達部位での直接の針注射、静脈内注射、局所投与
、カテーテル注入、およびいわゆる「遺伝子銃」を含むがこれらに限定されない
、当該分野で公知の任意の方法によって送達される。これらの送達方法は、当該
分野で公知である。
【０４８７】 この構築物はまた、ウイルス配列、ウイルス粒子、リポソーム処方物、リポフ
ェクチン、沈殿剤などのような送達ビヒクルを用いて送達され得る。このような
送達方法は、当該分野で公知である。
【０４８８】 特定の実施形態において、ポリヌクレオチド構築物は、リポソーム調製物中で
複合体化している。本発明にて使用するためのリポソーム調製物は、カチオン性
（正に荷電した）、アニオン性（負に荷電した）および中性の調製物を包含する
。しかしながら、カチオン性リポソームとポリアニオン性核酸との間で強固な荷
電複合体を形成し得るので、カチオン性リポソームが特に好ましい。カチオン性
リポソームは、機能的形態において、プラスミドＤＮＡ（本明細書中で参考とし
て援用される、Ｆｅｌｇｎｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ
ＳＡ（１９８７）８４：７４１３〜７４１６）；ｍＲＮＡ（本明細書中で参考と
して援用される、Ｍａｌｏｎｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ
ＳＡ（１９８９）８６：６０７７〜６０８１）；および精製された転写因子（本
明細書中で参考として援用される、Ｄｅｂｓら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１
９９０）２６５：１０１８９〜１０１９２）の細胞内送達を媒介することが示さ
れている。
【０４８９】 カチオン性リポソームは容易に入手可能である。例えば、Ｎ［１−２，３−ジ
オレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリエチルアンモニウム（ＤＯＴＭ
Ａ）リポソームは特に有用であり、そして商標ＬｉｐｏｆｅｃｔｉｎのもとにＧ
ＩＢＣＯ ＢＲＬ，Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ，Ｎ．Ｙ．（本明細書中で参考と
して援用される、Ｆｅｌｇｎｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．
ＵＳＡ（１９８７）８４：７４１３〜７４１６をもまた参照のこと、）より入手
可能である。他の市販のリポソームとしては、トランスフェクテース（ｔｒａｎ
ｓｆｅｃｔａｃｅ）（ＤＤＡＢ／ＤＯＰＥ）およびＤＯＴＡＰ／ＤＯＰＥ（Ｂｏ
ｅｈｒｉｎｇｅｒ）が挙げられる。
【０４９０】 当該分野で周知の技術を使用して、他のカチオン性リポソームを、容易に入手
可能な物質より調製し得る。ＤＯＴＡＰ（１，２−ビス（オレオイルオキシ）−
３−（トリメチルアンモニオ）プロパン）リポソームの合成の記述に関して、例
えばＰＣＴ公開番号ＷＯ９０／１１０９２（本明細書中で参考として援用される
）を参照のこと。ＤＯＴＭＡリポソームの調製は文献にて説明されており、例え
ば、本明細書中で参考として援用される、Ｐ．Ｆｅｌｇｎｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８４：７４１３〜７４１７を参照のこと。
類似した方法を使用して、他のカチオン性脂質物質よりリポソームを調製し得る
。
【０４９１】 同様に、アニオン性リポソームおよび中性リポソームは、例えば、Ａｖａｎｔ
ｉ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，Ａｌａ．）から容易に
入手可能であり、または容易に入手可能な物質を使用して簡単に調製され得る。
そのような物質としてはとりわけ、ホスファチジルコリン、コレステロール、ホ
スファチジルエタノールアミン、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ
）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジオレオイルホス
ファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）が挙げられる。これらの物質はまた、
ＤＯＴＭＡ出発物資およびＤＯＴＡＰ出発物質と適切な割合において混合され得
る。これらの物質を使用してリポソームを生成する方法は、当該分野で周知であ
る。
【０４９２】 例えば、商業的に、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジオレ
オイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、およびジオレオイルホスファ
チジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）を種々の組み合わせにおいて使用し、コレ
ステロールを添加してもしなくても、従来のリポソームを生成し得る。従って、
例えば、超音波処理バイアル中への窒素ガス流下で、各５０ｍｇのＤＯＰＧおよ
びＤＯＰＣを乾燥することにより、ＤＯＰＧ／ＤＯＰＣ小胞を調製し得る。この
サンプルを一晩真空ポンプ下に置き、そして次の日、脱イオン水で水和する。次
いで、浴を、１５ＥＣで循環させながら、最大設定にて、逆位カップ（浴タイプ
）プローブを装備したＨｅａｔ Ｓｙｓｔｅｍｓ モデル３５０超音波処理器を
使用して、このサンプルを栓をしたバイアル中にて２時間超音波処理する。ある
いは、負に荷電した小胞を、超音波処理なしで調製して多重膜小胞を生成し得る
か、または核孔膜（ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ ｍｅｍｂｒａｎｅ）を通して押し出
すことにより別々の大きさの単膜小胞を生成し得る。他の方法は、当業者に公知
でありそして利用可能である。
【０４９３】 このリポソームとしては、多重膜小胞（ＭＬＶ）、小さな単膜小胞（ＳＵＶ）
または大きな単膜小胞（ＬＵＶ）が挙げられ得、ＳＵＶが好ましい。当該分野で
周知の方法を使用して、種々のリポソーム−核酸複合体が調製される。例えば、
本明細書中で参考として援用される、Ｓｔｒａｕｂｉｎｇｅｒら、Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（１９８３）、１０１：５１２〜５２７を参照
のこと。例えば、核酸を含有するＭＬＶは、ガラスチューブの壁面にリン脂質の
薄膜を堆積させ、そしてその後、カプセル化されるべき物質の溶液で水和するこ
とによって調製され得る。ＳＵＶはＭＬＶの長期超音波処理により調製され、単
膜リポソームの均質集団を生成する。封入されるべき物質を、予め形成されたＭ
ＬＶの懸濁液に添加し、次いで、超音波処理する。カチオン性脂質を含むリポソ
ームを使用する場合、乾燥した脂質膜を、滅菌水または１０ｍＭ Ｔｒｉｓ／Ｎ
ａＣｌのような等張性緩衝溶液のような適切な溶液中に再懸濁し、超音波処理し
、次いで、予め形成されたリポソームをＤＮＡと直接混合する。正に荷電したリ
ポソームのカチオン性ＤＮＡへの結合に起因して、リポソームおよびＤＮＡは非
常に安定な複合体を形成する。ＳＵＶは、小核酸フラグメントを用いての用途を
見出す。ＬＵＶは、当該分野で周知の多くの方法により調製される。一般に使用
される方法としては、Ｃａ２＋−ＥＤＴＡキレート化（Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏ
ｕｌｏｓら、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ（１９７５）３９４：
４８３；Ｗｉｌｓｏｎら、Ｃｅｌｌ（１９７９））１７：７７）；エーテル注入
（Ｄｅａｍｅｒ，Ｄ．およびＢａｎｇｈａｍ，Ａ．、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐ
ｈｙｓ．Ａｃｔａ（１９７６）４４３：６２９；Ｏｓｔｒｏら、Ｂｉｏｃｈｅｍ
．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｍ．（１９７７）７６：８３６；Ｆｒａ
ｌｅｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９７９）７６：
３３４８）；界面活性剤透析（Ｅｎｏｃｈ，Ｈ．およびＳｔｒｉｔｔｍａｔｔｅ
ｒ，Ｐ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９７９）７６：
１４５）；および逆相エバポレーション（ＲＥＶ）（Ｆｒａｌｅｙら、Ｊ．Ｂｉ
ｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９８０）２５５：１０４３１；Ｓｚｏｋａ、Ｆ．およびＰ
ａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓ，Ｄ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ
．ＵＳＡ（１９７８）７５：１４５；Ｓｃｈａｅｆｅｒ−Ｒｉｄｄｅｒら、Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ（１９８２）２１５：１６６）が挙げられ、これらの文献は本明細書
中で参考として援用される。
【０４９４】 一般に、ＤＮＡのリポソームに対する割合は約１０：１から約１：１０までで
ある。好ましくは、その割合（ｒａｔｉｏｎ）は約５：１から約１：５までであ
る。より好ましくは、その割合は約３：１から約１：３までである。さらにより
好ましくは、その割合は約１：１である。
【０４９５】 米国特許第５，６７６，９５４号（本明細書中で参考として援用される）はカ
チオン性リポソームキャリアと複合体化された遺伝物質のマウスへの注入につい
て報告する。米国特許第４，８９７，３５５号、同第４，９４６，７８７号、同
第５，０４９，３８６号、同第５，４５９，１２７号、同第５，５８９，４６６
号、同第５，６９３，６２２号、同第５，５８０，８５９号、同第５，７０３，
０５５号および国際公開第ＷＯ９４／９４６９号（これらは本明細書中で参考と
して援用される）は、ＤＮＡを細胞および哺乳動物にトランスフェクトする際に
使用するためのカチオン性脂質を提供する。米国特許第５，５８９，４６６号、
同第５，６９３，６２２号、同第５，５８０，８５９号、同第５，７０３，０５
５号および国際公開第ＷＯ９４／９４６９号（これらは本明細書中で参考として
援用される）は、ＤＮＡ−カチオン性脂質複合体を哺乳動物に送達する方法を提
供する。
【０４９６】 特定の実施形態において、本発明のポリペプチドをコードする配列を含むＲＮ
Ａを含むレトロウイルス粒子を使用して、エキソビボまたはインビボで細胞を操
作する。レトロウイルスプラスミドベクターが由来し得るレトロウイルスとして
は、モロニーマウス白血病ウイルス、脾臓壊死ウイルス、ラウス肉腫ウイルス、
ハーベイ肉腫ウイルス、ニワトリ白血病ウイルス、テナガザル白血病ウイルス、
ヒト免疫不全ウイルス、骨髄増殖性肉腫ウイルス、および乳癌ウイルスが挙げら
れるが、これらに限定されない。
【０４９７】 このレトロウイルスプラスミドベクターを使用して、パッケージング細胞株を
形質導入し、プロデューサー細胞株を形成する。トランスフェクトされ得るパッ
ケージング細胞株の例としては、その全体が本明細書中で参考として援用される
、Ｍｉｌｌｅｒ、Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅａｐｙ、１：５〜１４（１９９
０）にて記載されるようなＰＥ５０１、ＰＡ３１７、Ｒ−２、Ｒ−ＡＭ、ＰＡ１
２、Ｔ１９−１４Ｘ、ＶＴ−１９−１７−Ｈ２、ＲＣＲＥ、ＲＣＲＩＰ、ＧＰ＋
Ｅ−８６、ＧＰ＋ｅｎｖＡｍ１２およびＤＡＮ細胞株が挙げられるが、これらに
限定されない。このベクターは、当該分野で公知の任意の手段により、パッケー
ジング細胞を形質導入し得る。そのような手段としては、エレクトロポレーショ
ン、リポソームの使用、およびＣａＰＯ４沈殿が挙げられるが、それらに限定さ
れない。１つの代替法において、このレトロウイルスプラスミドベクターをリポ
ソームにカプセル化し得るか、または脂質に結合し得て、次いで宿主に投与し得
る。
【０４９８】 このプロデューサー細胞株は、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレ
オチドを含む感染性レトロウイルスベクター粒子を産生する。次いで、そのよう
なレトロウイルスベクター粒子を使用して、インビトロまたはインビボのどちら
かで、真核生物細胞を形質導入し得る。この形質導入された真核生物細胞は、本
発明のポリペプチドを発現する。
【０４９９】 特定の他の実施形態において、アデノウイルスベクター中に含まれるポリヌク
レオチドを用いて、エキソビボまたはインビボで細胞を操作する。アデノウイル
スは、それが本発明のポリペプチドをコードし、そして発現し、それと同時に通
常の溶菌性ウイルス生活環にて複製するその能力に関して不活性化されるように
操作され得る。アデノウイルス発現は、そのウイルスＤＮＡの宿主細胞染色体へ
の組み込み無しに達成され、その結果、挿入性変異誘発についての心配が軽減さ
れる。さらに、アデノウイルスは、何年もの間、腸の生ワクチンとして優れた安
全側面を伴って使用されている（Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ａ．Ｒ．ら（１９７４）、
Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．、１０９：２３３−２３８）。最終的に
、アデノウイルス媒介性遺伝子移入が、コトンラットの肺へのα−１−アンチト
リプシンおよびＣＦＴＲの移入を含む多くの例において実証されている（Ｒｏｓ
ｅｎｆｅｌｄ，Ｍ．Ａ．ら（１９９１）、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５２：４３１〜４
３４；Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄら（１９９２）、Ｃｅｌｌ、６８：１４３〜１５５）
。さらに、ヒト癌における原因物質としてアデノウイルスを確立しようとする広
範な研究は、一様に否定的であった（Ｇｒｅｅｎ，Ｍ．ら（１９７９）Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７６：６６０６）。
【０５００】 本発明において有用である適切なアデノウイルスベクターが、例えば、Ｋｏｚ
ａｒｓｋｙおよびＷｉｌｓｏｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｇｅｎｅｔ．Ｄｅｖｅｌ
． ３：４９９〜５０３（１９９３）；Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄら、Ｃｅｌｌ ６８
：１４３〜１５５（１９９２）；Ｅｎｇｅｌｈａｒｄｔら、Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎ
ｅｔ．Ｔｈｅｒ． ４：７５９〜７６９（１９９３）；Ｙａｎｇら、Ｎａｔｕｒ
ｅ Ｇｅｎｅｔ． ７：３６２〜３６９（１９９４）；Ｗｉｌｓｏｎら、Ｎａｔ
ｕｒｅ ３６５：６９１〜６９２（１９９３）；および米国特許第５，６５２，
２２４号に記載されており、これらの文献および特許は本明細書中で参考として
援用される。例えば、アデノウイルスベクターＡｄ２が有用であり、そしてヒト
２９３細胞にて増殖され得る。これらの細胞は、アデノウイルスのＥ１領域を含
み、そして構成的にＥｌａおよびＥｌｂを発現し、このことは、このベクターか
ら欠失している遺伝子の産物を提供することによって欠損アデノウイルスを補完
する。Ａｄ２に加えて、他の多様なアデノウイルス（例えば、Ａｄ３、Ａｄ５、
およびＡｄ７）もまた、本発明において有用である。
【０５０１】 好ましくは、本発明において使用されるアデノウイルスは、複製欠損性である
。複製欠損アデノウイルスは、感染性粒子を形成するために、ヘルパーウイルス
および／またはパッケージング細胞株の助けを必要とする。得られたウイルスは
、細胞に感染する能力があり、そしてプロモーターに作動可能に連結された目的
のポリヌクレオチドを発現し得るが、ほとんどの細胞にて複製し得ない。複製欠
損アデノウイルスは、次の遺伝子のすべてまたは一部のうちの１つ以上にて欠失
され得る：Ｅ１ａ、Ｅ１ｂ、Ｅ３、Ｅ４、Ｅ２ａまたはＬ１〜Ｌ５。
【０５０２】 特定の他の実施形態において、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を使用して、エ
キソビボまたはインビボでこの細胞を操作する。ＡＡＶは、感染性粒子を生成す
るためにヘルパーウイルスを必要とする、天然に存在する欠損ウイルスである（
Ｍｕｚｙｃｚｋａ，Ｎ．，Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ
．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５８：９７（１９９２））。ＡＡＶはまた、非分裂細胞の
中にそのＤＮＡを組み込み得る数少ないウイルスの中の１つである。３００塩基
対程度の小さいＡＡＶを含むベクターがパッケージされ得、そして組み込み得る
が、外来性ＤＮＡのためのスペースは約４．５ｋｂに限られる。そのようなＡＡ
Ｖの生成および使用の方法は当該分野で公知である。例えば、米国特許第５，１
３９，９４１号、同第５，１７３，４１４号、同第５，３５４，６７８号、同第
５，４３６，１４６号、同第５，４７４，９３５号、同第５，４７８，７４５号
および同第５，５８９，３７７号を参照のこと。
【０５０３】 例えば、本発明において使用するために適切なＡＡＶベクターは、ＤＮＡ複製
、キャプシド形成、および宿主細胞組み込みに必要な配列すべてを含む。Ｓａｍ
ｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ（１９
８９）において見い出される方法のような、標準的クローニング方法を使用して
、ポリヌクレオチド構築物を、このＡＡＶベクターに挿入する。次いで、リポフ
ェクション、エレクトロポレーション、リン酸カルシウム沈殿などを含む、任意
の標準的技術を使用して、この組換えＡＡＶベクターを、ヘルパーウイルスに感
染しているパッケージング細胞にトランスフェクトする。適切なヘルパーウイル
スとしては、アデノウイルス、サイトメガロウイルス、ワクシニアウイルス、ま
たはヘルペスウイルスが挙げられる。一旦パッケージング細胞がトランスフェク
トおよび感染されると、それらはそのポリヌクレオチド構築物を含む感染性ＡＡ
Ｖウイルス粒子を生成する。次いで、エキソビボまたはインビボのいずれかで、
これらのウイルス粒子を使用して真核生物細胞を形質導入する。この形質導入細
胞は、そのゲノムに組み込まれたポリヌクレオチド構築物を含み、そして本発明
のポリペプチドを発現する。
【０５０４】 遺伝子治療の別の方法は、相同組換え（例えば、米国特許第５，６４１，６７
０号、１９９７年６月２４日発行；国際公開第ＷＯ９６／２９４１１号、１９９
６年９月２６日公開；国際公開第ＷＯ９４／１２６５０号、１９９４年８月４日
公開；Ｋｏｌｌｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６
：８９３２〜８９３５（１９８９）；およびＺｉｊｌｓｔｒａら、Ｎａｔｕｒｅ
３４２：４３５〜４３８（１９８９）を参照のこと）を介して、異種制御領域
および内在性ポリヌクレオチド配列（例えば、本発明のポリペプチドをコードし
ている配列）を作動可能に連結する工程を含む。この方法は、標的細胞中に存在
しているが、通常はその細胞中で発現しないかまたは所望するよりも低いレベル
で発現する、遺伝子の活性化を含む。
【０５０５】 当該分野で既知の標準的技術を使用して、ポリヌクレオチド構築物を作製する
。この構築物は、プロモーターを、そのプロモーターに隣接した標的化配列とと
もに含む。適切なプロモーターが、本明細書中に記載されている。標的化配列は
、プロモーター−標的化配列と内在性配列との相同組換えを可能にするにその内
在性配列に対して十分に相補的である。標的化配列は、所望される内在性ポリヌ
クレオチド配列の５’末端の十分近くに存在し、それゆえ、相同組換えに際して
、そのプロモーターは、その内在性配列に作動可能に連結される。
【０５０６】 このプロモーターおよび標的化配列は、ＰＣＲを使用して増幅され得る。好ま
しくは、この増幅されたプロモーターは、５’末端および３’末端に別の制限酵
素部位を含む。好ましくは、第１の標的化配列の３’末端は、増幅されたプロモ
ーターの５’末端と同じ制限酵素部位を含み、そして第２の標的化配列の５’末
端は、増幅されたプロモーターの３’末端と同じ制限部位を含む。増幅されたプ
ロモーターおよび標的化配列を消化し、そしてともに連結する。
【０５０７】 裸のポリヌクレオチドとしてか、もしくは上記により詳細に記載されるような
リポソーム、ウイルス配列、ウイルス粒子、ウイルス全体、リポフェクション、
沈殿剤などのようなトランスフェクション促進剤と一緒にかのいずれかで、この
プロモーター−標的化配列構築物を細胞に送達する。直接針注射、静脈内注射、
局所投与、カテーテル注入、粒子加速器などを含む任意の方法により、Ｐプロモ
ーター−標的化配列を送達し得る。この方法を、下記により詳細に記載する。
【０５０８】 プロモーター−標的化配列構築物は、細胞により取り込まれる。この構築物と
内在性配列との間に相同組換えが起こり、その結果、内在性配列は、このプロモ
ーターの制御下に配置される。次いで、このプロモーターは、内在性配列の発現
を駆動する。
【０５０９】 好ましくは、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、そのタ
ンパク質の分泌を促進する分泌シグナル配列を含む。代表的に、このシグナル配
列は、コード領域の５’末端に向かってかまたは５’末端で発現される、そのポ
リヌクレオチドのコード領域に位置する。このシグナル配列は、目的のポリヌク
レオチドに対して同種であってもよいしまたは異種であってもよく、そしてトラ
ンスフェクトされる細胞に対して同種であってもよいしまたは異種であってもよ
い。さらに、当該分野で公知の方法を使用して、このシグナル配列は化学合成さ
れ得る。
【０５１０】 その投与形態によって、治療効果を提供するのに十分な量にて１つ以上の分子
が発現される限り、上記のポリヌクレオチド構築物のうちのいずれかの任意の投
与形態が使用され得る。これは、直接針注射、全身性注射、カテーテル注入、バ
イオリスティック（ｂｉｏｌｉｓｔｉｃ）注射器、粒子加速器（すなわち、「遺
伝子銃」）、ゲルフォームスポンジデポー（ｄｅｐｏｔ）、他の市販デポー（ｄ
ｅｐｏｔ）物質、浸透圧ポンプ（例えば、Ａｌｚａミニポンプ）、経口用または
坐剤用の固形（錠剤または丸剤）薬学的処方物、および手術中のデカンティング
（ｄｅｃａｎｔｉｎｇ）または局所適用を含む。例えば、ラット肝臓およびラッ
ト脾臓へのリン酸カルシウム沈澱した裸のプラスミドの直接注射、または門脈へ
のタンパク質被覆プラスミドの直接注射は、ラット肝臓における外来遺伝子の遺
伝子発現をもたらした（Ｋａｎｅｄａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４３：３７５（１
９８９））。
【０５１１】 局所投与の好ましい方法は、直接注射によるものである。好ましくは、送達ビ
ヒクルと複合体を形成した本発明の組換え分子は、動脈領域内部に直接注射によ
り投与されるか、または動脈領域内部に局所投与される。動脈領域内部での組成
物の局所投与とは、その組成物を動脈内に数センチメートル、好ましくは数ミリ
メートルで注射することを言う。
【０５１２】 局所投与の別の方法は、本発明のポリヌクレオチド構築物を外科的創傷中また
は外科的創傷の周囲に接触させることである。例えば、患者は手術を経験し得、
そしてこのポリヌクレオチド構築物がその創傷の内側の組織の表面上にコーティ
ングされ得るか、またはこの構築物が、その創傷の内側の組織の領域に注入され
得る。
【０５１３】 全身投与に有用な治療組成物は、本発明の標的化された送達ビヒクルと複合体
を形成した本発明の組換え分子を含む。全身投与で使用するために適切な送達ビ
ヒクルは、特定部位に対してそのビヒクルを標的化するリガンドを含むリポソー
ムを含む。
【０５１４】 全身投与の好ましい方法としては、静脈内注射、エアロゾル、経口および経皮
（局所的）送達が挙げられる。当該分野で標準的な方法を使用して、静脈内注射
が実行され得る。当該分野で標準的な方法を使用して、エアロゾル送達もまた実
行され得る（例えば、本明細書中で参考として援用される、Ｓｔｒｉｂｌｉｎｇ
ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １８９：１１２７７〜１
１２８１（１９９２）を参照のこと）。動物の腸内の消化酵素による分解に耐え
る能力をもつキャリアに対して本発明のポリヌクレオチド構築物を複合体形成す
ることにより、経口送達は実行され得る。そのようなキャリアの例としては、当
該分野で公知であるもののような、プラスチックカプセルまたは錠剤が挙げられ
る。皮膚内へ通過可能な親油性試薬（例えば、ＤＭＳＯ）と本発明のポリヌクレ
オチド構築物を混合することによって、局所的送達は実行され得る。
【０５１５】 送達される物質の有効量を決定することは、例えば、その物質の化学構造およ
び生物学的活性、動物の年齢および体重、処置を必要とする正確な状態およびそ
の重症度、ならびに投与経路を含む、多数の因子に依存し得る。処置の頻度は、
１用量あたりの投与されるポリヌクレオチド構築物の量ならびに被験体の健康お
よび病歴のような、多くの因子に依存する。正確な量、投薬回数および投薬のタ
イミングは、主治医または主治獣医により決定される。
【０５１６】 本発明の治療的組成物は、任意の動物に、好ましくは哺乳動物および鳥類に投
与され得る。好ましい哺乳動物としては、ヒト、イヌ、ネコ、マウス、ラット、
ウサギ、ヒツジ、ウシ、ウマおよびブタが挙げられ、特にヒトが好ましい。
【０５１７】 （生物学的活性） 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはアゴニストもしくは
アンタゴニストをアッセイに使用し、１つ以上の生物学的活性について試験し得
る。本発明のこれらのポリヌクレオチドもしくはポリペプチドまたはアゴニスト
もしくはアンタゴニストが特定のアッセイにおいて活性を示す場合、これらの分
子はその生物学的活性に関連した疾患に関与し得るようである。従って、このポ
リヌクレオチドおよびポリペプチド、ならびにアゴニストもしくはアンタゴニス
トを使用し、その関連した疾患を処置し得る。
【０５１８】 好ましい実施形態において、本発明の組成物（本発明のポリヌクレオチド、ポ
リペプチドおよび抗体、ならびにそれらのフラグメントおよび改変体を含む）は
、免疫学的障害（例えば、本明細書中の「免疫活性」の下で記載される障害）、
心臓血管障害（例えば、本明細書中の「心臓血管障害」の下で記載される障害）
、過剰増殖障害（例えば、本明細書中の「過剰増殖性障害」の下で記載される障
害）、神経学的障害（例えば、本明細書中の「神経活性および神経学的疾患」の
下で記載される障害）、内分泌障害（例えば、本明細書中の「内分泌障害」の下
で記載される障害）、および節の表題「本発明のポリヌクレオチドおよびポリペ
プチド」の下でタンパク質の特定の特徴に関して考察される疾患および／または
障害の診断、予後診断、予防、および／または処置において用いられ得る。
【０５１９】 別の実施形態において、本発明のポリペプチド、またはこのポリペプチドに対
応するポリヌクレオチド、抗体、アゴニスト、またはアンタゴニストは、本発明
のポリペプチドが発現される組織（「本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプ
チド」に開示される組織、および／あるいは表３、カラム２（ライブラリコード
）に開示される、１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたはそれ以上の組織を含む）
に関連する障害を診断、予後診断、予防および／または処置するために使用され
得る。
【０５２０】 従って、本発明のポリヌクレオチド、翻訳産物および抗体は、免疫障害、心臓
血管障害、過剰増殖障害、神経学的障害、および内分泌障害を含むがこれに限定
されない疾患および／または障害の診断、予後診断、予防および／または処置に
有用である。
【０５２１】 より一般的には、この遺伝子に対応するポリヌクレオチド、翻訳産物および抗
体は、以下の系に関連する疾患および／または障害の診断、検出および／または
処置に有用であり得る。
【０５２２】 （免疫活性） 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体および／またはアゴニストも
しくはアンタゴニストは、例えば、免疫細胞の増殖、分化、もしくは動員（走化
性）を活性化または阻害することにより、免疫系の疾患、障害および／または状
態の処置、予防および／または診断において有用であり得る。免疫細胞は、造血
と呼ばれるプロセスを介して発達し、多能性幹細胞から骨髄性細胞（血小板、赤
血球、好中球およびマクロファージ）およびリンパ系細胞（Ｂリンパ球およびＴ
リンパ球）を生成する。これら免疫の疾患、障害および／または状態の病因は、
遺伝的、体細胞的（ｓｏｍａｔｉｃ）（例えば、癌またはいくつかの自己免疫性
の疾患）、後天的（例えば、化学療法もしくは毒素による）または感染的であり
得る。さらに、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体および／または
アゴニストもしくはアンタゴニストは、特定の免疫系の疾患または障害のマーカ
ーまたは検出物質（ｄｅｔｅｃｔｏｒ）として使用され得る。
【０５２３】 別の実施形態において，本発明のポリペプチドまたはそのポリペプチドに対応
するポリヌクレオチド、抗体、アゴニスト、またはアンタゴニストを用いて、免
疫系の疾患および障害を処置して、そして／または組織（本発明のポリペプチド
が発現される組織であって、「本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド」
と表題される節において開示される組織を含む）に関連する細胞によって引き起
こされる免疫応答を阻害または増強し得る。
【０５２４】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体および／またはアゴニストあ
るいはアンタゴニストは、免疫不全（先天性および後天性免疫不全を含む）の処
置、予防および／または診断に有用であり得る。免疫グロブリンレベルＢ細胞機
能および／またはＢ細胞数が減少されるＢ細胞免疫不全の例としては以下が挙げ
られる：Ｘ連鎖無ガンマグロブリン血症（Ｂｒｕｔｏｎ’ｓ病）、Ｘ連鎖乳児無
ガンマグロブリン血症、過剰ＩｇＭを伴うＸ連鎖免疫欠損、過剰ＩｇＭを伴う非
Ｘ連鎖免疫欠損、Ｘ連鎖リンパ球増殖症候群（ＸＬＰ）、先天性および後天性無
ガンマグロブリン血症を含む無ガンマグロブリン血症、成人発症無ガンマグロブ
リン血症、後期発症無ガンマグロブリン血症、異常ガンマグロブリン血症、低ガ
ンマグロブリン血症、非特異的低ガンマグロブリン血症、退縮無ガンマグロブリ
ン血症（Ｓｗｉｓｓ型）、選択的ＩｇＭ欠損、選択的ＩｇＡ欠損、選択的ＩｇＧ
サブクラス欠損、ＩｇＧサブクラス欠損（ＩｇＡ欠損を伴うかまたは伴わない）
、上昇したＩｇＭを伴うＩｇ欠損、上昇したＩｇＭを伴うＩｇＧ欠損およびＩｇ
Ａ欠損、正常なＩｇまたは上昇したＩｇを伴う抗体欠損、Ｉｇ重鎖欠失、κ鎖欠
損、Ｂ細胞リンパ球増殖性障害（ＢＬＰＤ）、分類不能性免疫不全症（ＣＶＩＤ
）、分類不能型免疫不全（ＣＶＩ）（後天性）および一過性乳児低ガンマグロブ
リン血症。
【０５２５】 特定の実施形態において、毛細血管拡張性運動失調または毛細血管拡張性運動
失調と関連する状態は、本発明のポリペプチドもしくはポリヌクレオチドおよび
／またはそのアゴニストを投与することで緩和されるか処置される。
【０５２６】 Ｔ細胞および／もしくはＢ細胞機能、ならびに／または数が減少される先天的
免疫不全の例としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：ディジョー
ジ奇形、重症複合型免疫不全（ＳＣＩＤ）（Ｘ連鎖ＳＣＩＤ、常染色体ＳＣＩＤ
、アデノシンデアミナーゼ不全症、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠損（Ｐ
ＮＰ）、ＭＨＣクラスＩＩ欠失（不全リンパ球症候群）、ヴィスコット−オール
ドリッチ症候群および毛細血管拡張性運動失調を含むが、これに限定されない）
、胸腺発育不全、第３および第４咽頭嚢症候群、２２ｑ１１．２欠損、慢性粘膜
皮膚カンジダ症、ナチュラルキラー細胞欠損（ＮＫ）、特発性ＣＤ４＋ Ｔリン
パ球減少、顕著なＴ細胞欠損を伴う免疫欠損（不特定）、および細胞媒介免疫の
不特定の免疫欠損。
【０５２７】 特定の実施形態において、ディジョージ奇形またはディジョージ奇形に関連す
る状態は、例えば、本発明のポリペプチドもしくはポリヌクレオチド、またはそ
のアンタゴニストもしくはアゴニストを投与することによって、緩和されるか処
置される。
【０５２８】 本発明のポリペプチドもしくはポリヌクレオチド、および／またはそれらのア
ゴニストを投与することによって寛解または処置され得る他の免疫不全症として
は、慢性肉芽腫症、チェディアック−東症候群、ミエロペルオキシダーゼ欠損、
白血球グルコース−６−ホスフェートデヒドロゲナーゼ欠損、Ｘ連鎖リンパ球増
多症症候群（ＸＬＰ）、白血球接着不全、補体成分欠損（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ
４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８および／またはＣ９欠損を含む）、網様発育不全、
胸腺リンパ形成不全−発育不全、胸腺腫を伴う免疫欠損、重篤な先天性白血球減
少症、免疫欠損を伴う形成異常、新生児好中球減少症、短肢（ｓｈｏｒｔ ｌｉ
ｍｂｅｄ）小人症およびＩｇを伴うネゼロフ症候群複合免疫欠損が挙げられるが
、これらに限定されない。
【０５２９】 好ましい実施形態において、免疫欠損および／または上記に列挙される免疫欠
損に関連する状態は、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体および／
またはアゴニストもしくはそのアンタゴニストを用いて処置、予防および／また
は診断される。
【０５３０】 好ましい実施形態において、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体
および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストを薬剤として用いて、免疫欠
損個体間の免疫応答性をブーストし得る。特定の実施形態において、本発明のポ
リヌクレオチド、ポリペプチド、抗体および／またはアゴニストもしくはアンタ
ゴニストを薬剤として用いて、Ｂ細胞および／またはＴ細胞の免疫欠損個体間の
免疫応答性をブーストし得る。
【０５３１】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体および／またはアゴニストあ
るいはアンタゴニストは、自己免疫障害の処置、予防および／または診断に有用
であり得る。多数の自己免疫疾患は、免疫細胞による外来物質として、それ自体
の不適用な認識から生じる。この不適用な認識から、宿主細胞の破壊を導く免疫
応答が生じる。従って、免疫応答（特にＴ細胞の増殖、分化または走化）を阻害
し得る本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチドの投与は、自己免疫障害を
予防する際の効果的治療であり得る。
【０５３２】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体および／またはアゴニストあ
るいはアンタゴニストによって処置、予防および／または診断され得る、自己免
疫疾患および自己免疫障害には、以下の１つ以上が挙げられるがこれに限定され
ない：全身性エリテマトーデス、慢性関節リウマチ、強直性脊椎炎、多発性硬化
症、自己免疫甲状腺炎、橋本甲状腺炎、自己免疫溶血性貧血、溶血性貧血、血小
板減少、自己免疫血小板減少紫斑病、自己免疫性新生児血小板減少、特発性血小
板減少性紫斑病、紫斑病（例えば、ヘノッホ−シェーンライン（Ｈｅｎｌｏｃｈ
−Ｓｃｏｅｎｌｅｉｎ）紫斑病）、自己免疫性血球減少症、グッドパスチャー症
候群、尋常性天疱瘡、重症筋無力症、グレーヴズ病（甲状腺機能亢進）、および
インシュリン依存性糖尿病（ｍｅｌｌｉｔｕｓ）。
【０５３３】 本発明の組成物で処置、予防および／または診断され得る自己免疫成分を有し
得るさらなる障害には、以下が挙げられるがこれに限定されない：ＩＩ型コラー
ゲン誘導関節炎、抗リン脂質症候群、皮膚炎、アレルギー性脳脊髄炎、心筋炎、
再発性多発性軟骨炎、リウマチ性心疾患、神経炎、ブドウ膜炎眼炎、多発性内分
泌腺症、ライター病、Ｓｔｉｆｆ−Ｍａｎ症候群、自己免疫肺炎症、自閉症、ギ
ヤン−バレー症候群、インスリン依存性糖尿病および自己免疫炎症性眼。
【０５３４】 本発明の組成物で処置、予防および／または診断され得る自己免疫成分を有し
得るさらなる障害には、以下が挙げられるがこれに限定されない：抗コラーゲン
抗体を伴う強皮症（例えば、核小体および他の核抗体によって特徴付けられる）
、混合結合組織病（例えば、可溶性核抗原（例えば、リボ核タンパク質）に対す
る抗体によってしばしば特徴付けられる）、多発性筋炎（例えば、非ヒストンＡ
ＮＡによってしばしば特徴付けられる）、悪性貧血（例えば、抗壁細胞、ミクロ
ソーム、および内因子抗体によってしばしば特徴付けられる）、特発性アジソン
病（例えば、体液および細胞媒介性副腎細胞傷害性によってしばしば特徴付けら
れる）、不妊症（例えば、抗精子抗体によってしばしば特徴付けられる）、糸球
体腎炎（例えば、糸球体基底膜抗体または免疫複合体によってしばしば特徴付け
られる）、水疱性類天疱瘡（例えば、基底膜中のＩｇＧおよび補体によってしば
しば特徴付けられる）、シェーグレン症候群（例えば、多重組織抗体、および／
または特定の非ヒストンＡＮＡ（ＳＳ−Ｂ）によってしばしば特徴付けられる）
、糖尿病（例えば、細胞媒介性および体液性島細胞抗体によってしばしば特徴付
けられる）、ならびにアドレナリン作動性薬剤抵抗性（喘息または嚢胞性線維症
を伴うアドレナリン作動性薬剤抵抗性を含む）（例えば、βアドレナリンレセプ
ター抗体によってしばしば特徴付けられる）。
【０５３５】 本発明の組成物で処置、予防および／または診断され得る自己免疫成分を有し
得るさらなる障害には、以下が挙げられるがこれに限定されない：慢性活性肝炎
（例えば、平滑筋抗体によってしばしば特徴付けられる）、原発性胆汁性肝硬変
（例えば、ミトコンドリア抗体によってしばしば特徴付けられる）、他の内分泌
腺不全（例えば、いくつかの場合は、特定の組織抗体によってしばしば特徴付け
られる）、白斑（例えば、メラノサイト抗体によってしばしば特徴付けられる）
、脈管炎（例えば、脈管壁におけるＩｇおよび補体ならびに／または低血清補体
によってしばしば特徴付けられる）、ＭＩ後（例えば、心筋抗体によってしばし
ば特徴付けられる）、心臓切開症候群（例えば、心筋抗体によってしばしば特徴
付けられる）、じんま疹（例えば、ＩｇＥに対するＩｇＧ抗体およびＩｇＭ抗体
によってしばしば特徴付けられる）、アトピー性皮膚炎（例えば、ＩｇＥに対す
るＩｇＧ抗体およびＩｇＭ抗体によってしばしば特徴付けられる）、喘息（例え
ば、ＩｇＥに対するＩｇＧ抗体およびＩｇＭ抗体によってしばしば特徴付けられ
る）、ならびに多くの他の炎症性障害、肉芽種性障害、変性障害、および萎縮性
障害。
【０５３６】 好ましい実施形態においては、自己免疫性疾患および障害ならびに／または上
記に列挙された疾患および障害に関連する状態は、例えば、本発明のアンタゴニ
ストまたはアゴニスト、ポリペプチドもしくはポリヌクレオチド、または抗体を
用いて、処置、予防、および／または診断される。特定の好ましい実施形態にお
いては、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体、および／またはアゴ
ニストもしくはアンタゴニストを用いて、慢性関節リウマチは処置、予防および
／または診断される。別の特定の好ましい実施形態において、本発明のポリヌク
レオチド、ポリペプチド、抗体、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニ
ストを用いて、全身性エリテマトーデスは処置、予防および／または診断される
。別の特定の好ましい実施形態において、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプ
チド、抗体、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストを用いて、特発
性血小板減少性紫斑病は処置、予防および／または診断される。別の特定の好ま
しい実施形態において、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体、およ
び／またはアゴニストもしくはアンタゴニストを用いて、ＩｇＡ腎症は処置、予
防および／または診断される。
【０５３７】 好ましい実施形態において、自己免疫疾患および自己免疫障害ならびに／また
は上に列挙される疾患および障害に関連する状態が、本発明のポリヌクレオチド
、ポリペプチド、抗体および／またはアゴニストもしくはそれらのアンタゴニス
トによって処置、予防および／または診断され得る。
【０５３８】 好ましい実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド
および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、免疫抑制性薬剤として使
用され得る。
【０５３９】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体および／またはアゴニストも
しくはアンタゴニストは、造血細胞の疾患、障害および／または状態の処置、予
防および／または診断において有用であり得る。本発明のポリヌクレオチド、ポ
リペプチド、抗体および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストを使用して
、造血細胞（それらの疾患、障害および／または特定の（または多数の）型の造
血細胞における減少に関連する状態を処置または予防するための多能性幹細胞を
含み、これは白血球減少、好中球減少、貧血、血小板減少を含むが、これに限定
されない）の分化または増殖を増加させ得る。あるいは、本発明のポリヌクレオ
チド、ポリペプチド、抗体および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは
、造血細胞（それらの疾患、障害および／または特定の（または多数の）型の造
血細胞における増加に関連する状態を処置または予防するための多能性幹細胞を
含み、これは組織球増殖を含むが、これに限定されない）の分化および増殖を増
加するため使用され得る。
【０５４０】 アレルギー反応および状態（例えば、喘息（特にアレルギー性喘息）または他
の呼吸障害）はまた、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、および
／またはそれらのアゴニストもしくはアンタゴニストを用いて、処置、予防およ
び／または診断され得る。さらに、これらの分子は、アナフィラキシー、抗原性
分子に対する過敏性、または血液型不適合を処置、予防および／または診断する
ために用いられ得る。
【０５４１】 さらに、本発明のポリペプチドまたはポリヌクレオチド、および／またはその
アゴニストは、ＩｇＥ媒介アレルギー応答を処置または予防するために使用され
得る。このようなアレルギー反応としては、ぜん息、鼻炎および湿疹が挙げられ
るが、これらに限定されない。特定の実施形態において、本発明のポリヌクレオ
チド、ポリペプチド、抗体、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニスト
を使用して、インビトロまたはインビボにおいてＩｇＥ濃度を調節しうる。
【０５４２】 さらに、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体、および／またはア
ゴニストもしくはアンタゴニストは、炎症状態の診断、予後、予防、および／ま
たは処置に用途を有する。例えば、本発明のポリペプチド、抗体、もしくはポリ
ヌクレオチド、および／または本発明のアゴニストもしくはアンタゴニストは、
炎症応答に関与する細胞の活性、増殖および／または分化を阻害し得るので、こ
れらの分子を使用して、慢性および急性の両方の状態の炎症状態を診断、予後診
断、予防および／または処置し得る。このような炎症状態には、例えば以下が挙
げられるがそれらに限定されない：感染に関連する炎症（例えば、敗血症性ショ
ック、敗血症、または全身炎症応答症候群）、虚血再灌流傷害に関連する炎症、
内毒素致死に関連する炎症、補体媒介性超急性拒絶に関連する炎症、腎炎に関連
する炎症、サイトカインまたはケモカインが誘導する肺傷害に関連する炎症、炎
症性腸疾患に関連する炎症、クローン病に関連する炎症、サイトカイン（例えば
、ＴＮＦまたはＩＬ−１）の過剰生成から生じる炎症、呼吸障害に関連する炎症
（例えば、ぜん息およびアレルギー）；胃腸障害（例えば、炎症性腸障害）；癌
（例えば、胃癌、卵巣癌、肺癌、膀胱癌、肝臓癌、および乳癌など）；ＣＮＳ障
害（例えば、多発性硬化症、虚血性脳損傷、および／または発作、外傷性脳損傷
、神経変性性障害（例えば、パーキンソン病およびアルツハイマー病など）、Ａ
ＩＤＳ関連痴呆、およびプリオン病）；心血管障害（例えば、アテローム性動脈
硬化症、心筋炎、心血管疾患、および心肺バイパス合併症など）；ならびに炎症
によって特徴付けられる多くのさらなる疾患、状態、および障害（例えば、慢性
肝炎、慢性関節リウマチ、痛風、外傷、膵炎、サルコイドーシス、皮膚炎、腎虚
血再還流障害、グレーヴス病、全身性エリテマトーデス、真性糖尿病、および同
種異系移植拒絶）。
【０５４３】 炎症は、基本的な防御機構なので、炎症は実質的に身体の任意の組織で影響し
得る。従って、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および抗体、ならび
にそれらのアゴニストまたはアンタゴニストは、以下を含むがそれらに限定され
ない組織特異的な炎症疾患の処置に用途を有する：副腎炎、肺胞炎、胆管胆嚢炎
、虫垂炎、亀頭炎、眼瞼炎、気管支炎、滑液包炎、心臓炎、蜂巣炎、子宮頸管炎
、胆嚢炎、声帯炎、蝸牛炎（ｃｏｃｈｌｉｔｉｓ）、大腸炎、結膜炎、膀胱炎、
皮膚炎、憩室炎、脳炎、心内膜炎、食道炎、耳管炎、結合組織炎、毛包炎、胃炎
、胃腸炎、歯肉炎、舌炎、肝脾炎、角膜炎、迷路炎、喉頭炎、リンパ管炎、乳腺
炎、中耳炎（ｍｅｄｉａ ｏｔｉｔｉｓ）、髄膜炎、子宮炎、粘膜炎、心筋炎、
筋炎、鼓膜炎、腎炎、神経炎、精巣炎、骨軟骨炎、耳炎、心膜炎、腱周囲炎、腹
膜炎、喉頭炎、静脈炎、灰白髄炎、前立腺炎、歯髄炎、網膜炎、鼻炎、卵管炎、
強膜炎、強膜脈絡膜炎、陰嚢炎、静脈洞炎、脊椎炎（ｓｐｏｎｙｌｉｔｉｓ）、
脂肪組織炎、口内炎、滑膜炎、耳管炎、腱炎、扁桃炎、尿道炎、および膣炎。
【０５４４】 特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、またはポリヌクレオ
チドおよび／またそれらのアゴニストもしくはアンタゴニストは、器官移植拒絶
または対宿主性移植片病（を処置、診断および／または予防に有用である。器官
拒絶は、免疫応答を介して宿主免疫細胞による移植組織の破壊によって起こる。
同様に、免疫応答はＧＶＨＤにもまた関与しているが、この場合、外来性の移植
免疫細胞が宿主組織を破壊する。免疫応答、特にＴ細胞の活性、増殖、分化また
は走化性を阻害する、本発明のポリペプチド、抗体、またはポリヌクレオチド、
および／またそれらのアゴニストもしくはアンタゴニストは、器官拒絶またはＧ
ＶＨＤの予防において効果的な治療であり得る。特定の実施形態において、免疫
応答、特にＴ細胞の活性、増殖、分化または走化性を阻害する、本発明のポリペ
プチド、抗体、またはポリヌクレオチドおよび／またそれらのアゴニストもしく
はアンタゴニストは、実験的アレルギーおよび超急性異種移植拒絶の予防におい
て効果的な治療であり得る。
【０５４５】 他の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、またはポリヌクレオチ
ドおよび／またそれらのアゴニストもしくはアンタゴニストは、免疫複合体病（
血清病、後期連鎖球菌性（ｐｏｓｔ ｓｔｅｐｔｏｃｏｃｃａｌ）糸球体腎炎お
よび結節性多発性動脈炎、免疫複合体誘導脈管炎を含むがそれらに限定されない
）処置、診断および／または予防に有用である。
【０５４６】 本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、および／またはアゴニスト
もしくはアンタゴニストを使用して、感染因子を処置、検出、および／または予
防し得る。例えば、免疫応答を上昇させることによって、特にＢ細胞および／ま
たはＴ細胞の増殖活性および／または分化を増加させることによって、感染性疾
患が処置、検出および／または予防され得る。免疫応答は、既存の免疫応答を上
昇させるか、または新たな免疫応答を開始させるかのいずれかにより上昇され得
る。あるいは、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体および／または
アゴニストもしくはアンタゴニストはまた、必ずしも免疫応答を誘発することな
く、感染因子（感染因子を列挙する応用の節で引用される）を直接阻害し得る。
【０５４７】 別の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、お
よび／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、特異的な免疫応答を上昇す
るワクチンアジュバントとして使用される。特定の実施形態において、本発明の
ポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、および／またはアゴニストもしくはア
ンタゴニストは、癌特異的免疫応答を増強するアジュバントとして使用される。
【０５４８】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、抗ウイルス免疫応答
を増強するアジュバントとして使用される。アジュバントとして本発明の組成物
を用いて増強され得る抗ウイルス免疫応答としては、ウイルスおよび本明細書に
おいて記載されるかさもなければ当該分野で公知のウイルス関連疾患および症状
が挙げられる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、以下：ＡＩＤＳ、
髄膜炎、デング熱、ＥＢＶ、および肝炎（例えば、Ｂ型肝炎）からなる群より選
択される、ウイルス、疾患または症状に対する免疫応答を増強するためのアジュ
バントとして用いられる。別の特定の実施形態において、本発明の組成物は、以
下：ＨＩＶ／ＡＩＤＳ、ＲＳウイルス、デング熱、ロタウイルス、日本脳炎、イ
ンフルエンザＡおよびＢ、パラインフルエンザ、麻疹、サイトメガロウイルス、
狂犬病、Ｊｕｎｉｎウイルス、チクングニヤウイルス、リフトバレー熱、単純疱
疹、および黄熱病からなる群より選択されるウイルス、疾患または症状に対する
免疫応答を増強するアジュバントとして用いられる。
【０５４９】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、抗細菌免疫応答また
は抗真菌免疫応答を増大し得るアジュバントとして使用される。アジュバントと
して本発明の組成物を使用して増大され得る抗細菌免疫応答または抗真菌免疫応
答としては、細菌または真菌、および本明細書中に記載されるか、またはさもな
くば当該分野で公知の疾患または症状に関連する細菌または真菌が挙げられる。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、細菌または真菌、疾患、または症
状（これは、破傷風、ジフテリア、ボツリスム、およびＢ型髄膜炎からなる群か
ら選択される）に対する免疫応答を増大するためのアジュバントとして使用され
る。
【０５５０】 別の特定の実施形態において、本発明の組成物は、細菌または真菌、疾患、ま
たは症状（これは、Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ ｌｅｐｒａｅ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌ
ａ ｐａｒａｔｙｐｈｉ、Ｍｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｇｒｏｕｐ Ｂ ｓｔｒｅ
ｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｓｐｐ．、Ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅ
ｎｉｃ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、Ｅｎｔｅｒｏｈｅｍｏｒｒｈａｇ
ｉｃ Ｅ．ｃｏｌｉ、およびＢｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉからな
る群から選択される）に対する免疫応答を増大するためのアジュバントとして使
用される。
【０５５１】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、抗寄生生物免疫応答
を増大するためのアジュバントとして使用される。アジュバントとして本発明の
組成物を使用して増大され得る抗寄生生物免疫応答としては、寄生生物、および
本明細書中に記載されるかまたはさもなくば当該分野で公知の疾患または症状に
関連する寄生生物が挙げられる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、
寄生生物に対する免疫応答を増大するためのアジュバントとして使用される。別
の特定の実施形態において、本発明の組成物は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ（マラリ
ア）またはＬｅｉｓｈｍａｎｉａに対する免疫応答を増大するためのアジュバン
トとして使用される。
【０５５２】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、例えば、単核食細胞
の補充および活性化を妨げることによって、珪肺症、サルコイドーシス、特発性
肺線維症を含む、感染性疾患を処置するために使用され得る。
【０５５３】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、本発明のポリペプチ
ドに対する免疫媒介応答を阻害または増強するための抗体を生成するための抗原
として使用される。
【０５５４】 １つの実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、
および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、免疫系をブーストし、１
つ以上の抗体（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、およびＩｇＥ）の量の増大を
生じ、そして免疫グロブリンのクラススイッチ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡ、Ｉｇ
ＭおよびＩｇＥ）を誘導し、および／または免疫応答を増大するための動物（例
えば、マウス、ラット、ウサギ、ハムスター、モルモット、ブタ、ミニブタ、ニ
ワトリ、ラクダ、ヤギ、ウマ、ウシ、ヒツジ、イヌ、ネコ、非ヒト霊長類、およ
びヒト、最も好ましくはヒト）に投与される。
【０５５５】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、病原に対するＢ細胞
応答性の刺激物質として使用される。
【０５５６】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、Ｔ細胞のアクチベー
ターとして使用される。
【０５５７】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、免疫抑制性治療を受
ける前の、個体の免疫状態を増大させる薬剤として使用される。
【０５５８】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、より高い親和性抗体
を誘導するための薬剤として使用される。
【０５５９】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、血清免疫グロブリン
濃度を増加するための薬剤として使用される。
【０５６０】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、免疫無防備状態の個
体の回復を促進するための薬剤として使用される。
【０５６１】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、高齢の集団の間の免
疫応答性をブーストするための薬剤として使用される。
【０５６２】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、骨髄移植および／ま
たは他の移植（例えば、同種異系または外因性の器官移植）の前、間、または後
の免疫系エンハンサーとしてとして使用される。移植に関して、本発明の組成物
は、移植の前、同時、および／または後に投与され得る。特定の実施形態におい
て、本発明の組成物は、移植の後、Ｔ細胞集団の回復の開始前に投与される。別
の特定の実施形態において、本発明の組成物は、移植の後、Ｔ細胞集団の回復の
開始後であるが、Ｂ細胞集団の完全な回復の前に最初に投与される。
【０５６３】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、Ｂ細胞機能の後天的
欠損を有する個体間で免疫応答性をブーストするための薬剤としてとして使用さ
れる。ポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチドおよび／またはそれらのアゴニス
トもしくはアンタゴニストを投与することによって寛解または処置され得る、Ｂ
細胞機能の後天的欠損を生じる状態としては、ＨＩＶ感染、ＡＩＤＳ、骨髄移植
、およびＢ細胞慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）が挙げられるが、これらに限定
されない。
【０５６４】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、一時的な免疫不全を
有する個体間で免疫応答性をブーストするための薬剤としてとして使用される。
ポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチドおよび／またはそれらのアゴニストもし
くはアンタゴニストを投与することによって寛解または処置され得る、一時的な
免疫不全を生じる状態としては、ウイルス感染（例えば、インフルエンザ）から
の回復、栄養失調に関連する状態、感染性単核細胞症からの回復、またはストレ
スに関連する状態、麻疹からの回復、輸血からの回復、手術からの回復が挙げら
れるが、これらに限定されない。
【０５６５】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、単球、樹状細胞およ
び／またはＢ細胞による抗原提示のレギュレーターとして使用される。１つの実
施形態において、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体、および／ま
たはアゴニストもしくはアンタゴニストは、インビトロまたはインビボで抗原提
示を増強するかまたは抗原提示をアンタゴナイズする。さらに、関連する実施形
態において、この抗原提示の増強またはアンタゴナイズは、抗腫瘍処置としてか
または免疫系を調節するために有用であり得る。
【０５６６】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、個体の免疫系を、Ｔ
Ｈ１細胞性応答とは反対に、体液性応答（すなわち、ＴＨ２）の発生に指向する
ための薬剤として使用される。
【０５６７】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、腫瘍増殖を誘導し、
従って、腫瘍を抗腫瘍性薬剤に対してより感受性にするための手段として使用さ
れる。例えば、多発性骨髄腫は、緩慢な細胞分裂（ｄｉｖｉｄｉｎｇ）の疾患で
あり、従って、実質的に全ての抗腫瘍性レジメンに対して不応性である。これら
の細胞は、より迅速に増殖させた場合、これらの感受性プロフィールは、おそら
く変化するようである。
【０５６８】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、ＡＩＤＳ、慢性リン
パ球障害および／または分類不能性免疫不全症（Ｃｏｍｍｏｎ Ｖａｒｉａｂｌ
ｅ Ｉｍｍｕｎｏｄｉｆｉｃｉｅｎｃｙ）のような病理におけるＢ細胞の産生の
刺激因子として使用される。
【０５６９】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、手術、外傷または遺
伝的欠陥後のリンパ組織の生成および／または再生のための治療としてとして使
用される。別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌ
クレオチド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、移植前の骨
髄サンプルの前処理として使用される。
【０５７０】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、ＳＣＩＤ患者の間で
観察されるような免疫不全を生じる遺伝性の障害のための遺伝子ベースの治療と
して使用される。
【０５７１】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、単球に影響を及ぼす
寄生生物疾患（リーシュマニア属（Ｌｅｓｈｍａｎｉａ））に対して防御するた
めに単球／マクロファージを活性化する手段として使用される。
【０５７２】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、本発明のポリペプチ
ドによって惹起される分泌サイトカインを調節する手段として用いられる。
【０５７３】 上記の適用の全ては、獣医学的医療に適用され得る。
【０５７４】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、外来性因子または自
己に対する種々の局面の免疫応答をブロックする手段として用いられる。免疫応
答の特定の局面が所望され得る疾患または条件の例としては、狼瘡および関節炎
のような自己免疫障害、ならびに皮膚アレルギー、炎症、腸疾患、損傷および病
原体に関連する疾患／障害に対する免疫応答が挙げられる。
【０５７５】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、自己免疫疾患（例え
ば、特発性血小板減少性紫斑病、全身性エリテマトーデスおよび多発性硬化症）
に関連するＢ細胞増殖およびＩｇ分泌を妨げるための治療として用いられる。
【０５７６】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、内皮細胞におけるＢ
細胞および／またはＴ細胞の遊走のインヒビターとして用いられる。この活性は
、組織構造または同属の応答を破壊し、そして例えば、免疫応答の破壊および敗
血症のブロックにおいて有用である。
【０５７７】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、未定量有意性の単一
クローン性高ガンマグロブリン血症（ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌｇａｍｍｏｐａｔｈ
ｙ ｏｆ ｕｎｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ）（ＭＧＵＳ
）、ヴァルデンストレーム疾患、関連する特発性単一クローン性高ガンマグロブ
リン血症、およびプラスマ細胞腫のような疾患における、慢性の高ガンマグロブ
リン血症事象のための治療として用いられる。
【０５７８】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、例えば、特定の自己
免疫疾患および慢性炎症疾患および感染性疾患における、マクロファージおよび
その前駆体、ならびに好中球、好塩基球、Ｂリンパ球およびいくつかのＴ細胞サ
ブセット（例えば、活性化Ｔ細胞およびＣＤ８細胞傷害性Ｔ細胞ならびにナチュ
ラルキラー細胞）の、ポリペプチド走化性および活性化を阻害するために使用さ
れ得る。自己免疫疾患の例は、本明細書中に記載され、これらには、多発性硬化
症およびインスリン依存性糖尿病が挙げられる。
【０５７９】 本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、および／またはアゴニスト
もしくはアンタゴニストはまた、好酸球の産生および遊走を妨げることによって
、特発性好酸球増多症候群を処置するために使用され得る。
【０５８０】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、補体媒介性細胞溶解
を増強または阻害するために用いられる。
【０５８１】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、抗体依存性細胞傷害
性を増強または阻害するために用いられる。
【０５８２】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストはまた、例えば、動脈壁
における単球浸潤を妨げることによって、アテローム性動脈硬化症を処置するた
めに使用され得る。
【０５８３】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、成人呼吸窮迫症候群
（ＡＲＤＳ）を処置するために使用され得る。
【０５８４】 別の特定の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、創傷および組織の修
復の刺激、新脈管形成の刺激、血管またはリンパの疾患または障害の修復の刺激
に有用であり得る。さらに、本発明のアゴニストおよびアンタゴニストは、粘膜
表面の再生を刺激するために使用され得る。
【０５８５】 特定の実施形態において、ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、および／
またはそれらのアゴニストは、原発性または後天性の免疫不全症、欠損性の血清
免疫グロブリン産生、再発性の感染および／または免疫機能不全によって特徴付
けられる障害を処置または予防するために使用される。さらに、ポリヌクレオチ
ドまたはポリペプチド、ならびに／あるいはそれらのアゴニストは、関節、骨、
皮膚および／または耳下腺の感染、血液由来の感染（例えば、敗血症、髄膜炎、
敗血症性関節炎および／または骨髄炎）、自己免疫疾患（例えば、本明細書中に
開示されるような自己免疫疾患）、炎症性障害、および悪性疾患、ならびに／あ
るいはこれらの感染、疾患および／または悪性疾患に関連する任意の疾患または
障害または状態（ＣＶＩＤ、他の原発性免疫不全、ＨＩＶ疾患、ＣＬＬ、再発性
気管支炎、静脈洞炎、中耳炎、結膜炎、肺炎、肝炎、髄膜炎、帯状ヘルペス（例
えば、重篤な帯状ヘルペス）および／またはニューモシスティスを含むが、これ
らに限定されない）を処置または予防するために使用され得る。本発明のポリペ
プチド、抗体、ポリヌクレオチド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴ
ニストを用いて、予防、診断または処置され得る他の疾患および障害としては、
ＨＩＶ感染、ＨＴＬＶ−ＢＬＶ感染、リンパ球減少症、食細胞殺菌性機能不全貧
血、血小板減少症、およびヘモグロビン尿が挙げられるがこれらに限定されない
。
【０５８６】 別の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、お
よび／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、分類不能性免疫不全症（ｃ
ｏｍｍｏｎ ｖａｒｉａｂｌｅ Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｄｉｓｅ
ａｓｅ）（「ＣＶＩＤ」；「後天性無ガンマグロブリン血症」および「後天性低
ガンマグロブリン血症」としても公知である）またはこの疾患のサブセットを有
する個体を、処置および／または診断するために使用される。
【０５８７】 特定の実施形態において、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体な
らびに／あるいはアゴニストまたはアンタゴニストは、自己免疫細胞または組織
関連癌もしくは新生物を含む癌または新生物を処置、診断、および／または予防
するために用いられ得る。本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体なら
びに／あるいはアゴニストまたはアンタゴニストによって予防、診断、または処
置され得る癌または新生物の例は、本明細書に記載されており、そして急性骨髄
性白血病、慢性骨髄性白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、急性リンパ球
性貧血（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病、プラスマ細胞腫、多発性骨髄腫、バ
ーキットリンパ腫、およびＥＢＶ変態疾患が挙げられる。好ましい実施形態にお
いて、毒素または放射性同位体に結合体化された本発明のポリヌクレオチド、ポ
リペプチド、抗体ならびに／あるいはアゴニストまたはアンタゴニストは、癌お
よび新生物を処置、診断、および／または予防するために用いられ得る。さらに
好ましい実施形態において、毒素または放射性同位体に結合体化された本発明の
ポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体ならびに／あるいはアゴニストまたはア
ンタゴニストは、本明細書に記載のように、急性骨髄性白血病を処置、診断、お
よび／または予防するために用いられ得る。
【０５８８】 別の特定の実施形態において、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗
体ならびに／あるいはアゴニストまたはアンタゴニストは、ラージＢ細胞リンパ
腫の細胞増殖を減少するための治療として用いられる。
【０５８９】 別の特定の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチ
ド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、慢性骨髄性白血病に
関連するＢ細胞およびＩｇの関与を減少する手段として用いられる。
【０５９０】 特定の実施形態において、本発明の組成物は、例えば、部分的または完全な脾
臓切除を蒙った個体のような、Ｂ細胞免疫不全個体の間で免疫反応性をブースト
するための薬剤として用いられる。
【０５９１】 本発明のアンタゴニストとしては、例えば、本発明のポリペプチドの結合抗体
および／または阻害性抗体、アンチセンス核酸、リボザイムまたは可溶性形態（
例えば、Ｆｃ融合タンパク質）が挙げられる（例えば、実施例９を参照のこと）
。本発明のアゴニストとしては、例えば、このポリペプチドの結合抗体および／
または刺激性抗体、および可溶性形態（例えば、Ｆｃ融合タンパク質）が挙げら
れる（例えば、実施例９を参照のこと）。本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌ
クレオチド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、例えば、本
明細書に記載されるような、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて使用さ
れ得る。
【０５９２】 別の実施形態において、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、お
よび／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、例えば機能的な内因性抗体
分子を産生し得ないか、またはさもなければ障害された内因性免疫系を有し、た
だし、別の動物由来の再構成された、または部分的に再構成された免疫系によっ
てヒト免疫グロブリン分子を産生し得る動物（上記した動物を含むがこれに限定
されず、トランスジェニック動物も含む）に投与される（例えば、公開ＰＣＴ出
願番号ＷＯ９８／２４８９３、ＷＯ／９６３４０９６、ＷＯ／９６３３７３５、
およびＷＯ／９１１０７４１を参照のこと）。本発明のポリペプチド、抗体、ポ
リヌクレオチド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストをこのよう
な動物へ投与することは、本発明のポリペプチド、抗体、ポリヌクレオチド、お
よび／またはアゴニストもしくはアンタゴニストに対するモノクローナル抗体を
生成するために有用である。
【０５９３】 さらに、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチドおよび／またはアンタゴニ
ストは、アポトーシスに影響し得、従って、細胞生存の増大あるいはアポトーシ
スの阻害に関連する多くの疾患の処置において有用である。例えば、本発明のポ
リヌクレオチド、ポリペプチドおよび／またはアンタゴニストによって処置また
は検出され得る、細胞生存の増大あるいはアポトーシスの阻害に関連する疾患と
しては、癌（例えば、濾胞性リンパ腫、ｐ５３変異を有する癌腫、およびホルモ
ン依存性腫瘍、これらは以下：結腸癌、心臓腫瘍、膵臓癌、黒色腫、網膜芽細胞
腫、神経膠芽細胞腫、肺癌、腸の癌、精巣癌、胃癌、神経芽細胞腫、粘液腫、筋
腫、リンパ腫、内皮腫、骨芽細胞腫、骨巨細胞腫、骨肉腫、軟骨肉腫、腺腫、乳
癌、前立腺癌、カポージ肉腫および卵巣癌を含むが、これらに限定されない）；
自己免疫障害（例えば、多発性硬化症、シェーグレン症候群、橋本甲状腺炎、胆
汁性肝硬変、ベーチェット病（Ｂｅｈｃｅｔ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、クローン
病、多発性筋炎、全身性エリテマトーデスおよび免疫関連糸球体腎炎ならびに慢
性関節リウマチ）およびウイルス感染（例えば、ヘルペスウイルス、ポックスウ
イルスおよびアデノウイルス）、炎症、対宿主性移植片病、急性移植片拒絶、な
らびに慢性移植片拒絶、が挙げられる。
【０５９４】 好ましい実施形態において、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチドおよび
／またはアンタゴニストは、特に上記に列挙される癌の増殖、進行、および／ま
たは転移を阻害するために使用される。
【０５９５】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチドおよび／またはアンタゴニストによ
って処置または検出され得る、細胞生存の増大に関連するさらなる疾患または状
態としては、悪性疾患ならびに以下のような関連する障害の進行および／または
転移が挙げられるが、これらに限定されない：白血病（急性白血病（例えば、急
性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（骨髄芽球性、前骨髄球性、骨髄単球性、
単球性および赤白血病を含む）を含む）ならびに慢性白血病（例えば、慢性骨髄
性（顆粒球性）白血病および慢性リンパ球性白血病））、真性赤血球増加症、リ
ンパ腫（例えば、ホジキン病および非ホジキン病）、多発性骨髄腫、ヴァルデン
ストレームマクログロブリン血症、Ｈ鎖病、ならびに固形腫瘍（肉腫および癌腫
（例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血
管肉腫、内皮肉腫（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ）、リンパ管肉腫、リ
ンパ管内皮腫、骨膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結
腸癌腫、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗
腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原生癌、腎
細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、
頸部癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、神経膠星状
細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、
聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫（ｍｅｎａｎｇｉｏｍａ）、黒色腫、神経芽
細胞腫、および網膜芽細胞腫）を含むが、これらに限定されない）。
【０５９６】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチドおよび／またはアンタゴニストによ
って処置または検出され得る、アポトーシスの増大に関連するさらなる疾患とし
ては、以下が挙げられる：ＡＩＤＳ；神経変性障害（例えば、アルツハイマー病
、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、色素性網膜炎、小脳変性および脳腫瘍
または以前に関連した疾患）；自己免疫障害（例えば、多発性硬化症、シェーグ
レン症候群、橋本甲状腺炎、胆汁性肝硬変、ベーチェット病（Ｂｅｈｃｅｔ’ｓ
ｄｉｓｅａｓｅ）、クローン病、多発性筋炎、全身性エリテマトーデスおよび
免疫関連糸球体腎炎ならびに慢性関節リウマチ）、脊髄形成異常症候群（例えば
、再生不良性貧血）、対宿主性移植片病、虚血性傷害（心筋梗塞、発作および再
灌流傷害によって生じるようなもの）、肝臓傷害（例えば、肝炎関連肝臓傷害、
虚血／再灌流傷害、胆汁うっ滞（ｃｈｏｌｅｓｔｏｓｉｓ）（胆管傷害）および
肝臓癌）；毒物誘導性肝臓疾患（アルコールによって引き起こされるようなもの
）、敗血症性ショック、悪液質ならびに食欲不振。
【０５９７】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、ならびに／あるいはアンタゴニス
トによって検出および／または処置され得る過剰増殖の疾患および／または障害
の例としては、肝臓、腹部、骨、乳房、消化器系、膵臓、腹膜、内分泌腺（副腎
、上皮小体、下垂体、精巣、卵巣、胸腺、甲状腺）、眼、頭部および頸部、神経
（中枢および末梢）、リンパ系、骨盤、皮膚、軟組織、脾臓、胸部、ならびに泌
尿生殖器に位置する新生物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０５９８】 同様に、他の過剰増殖障害もまた、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド
、ならびに／あるいはアンタゴニストにより処置または検出され得る。このよう
な過剰増殖性障害の例としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：高
ガンマグロブリン血症、リンパ球増殖性障害、パラプロテイン血症、紫斑、サル
コイドーシス、セザリー症候群、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、
ゴシェ病、組織球増殖症、および任意の他の過剰増殖性疾患、加えて上記に列挙
した器官系に見出される新生物。
【０５９９】 （過剰増殖障害） 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはアゴニストもしくは
アンタゴニストを使用し、新生物を含む過剰増殖障害を処置または検出し得る。
本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはアゴニストもしくはア
ンタゴニストは、直接的または間接的な相互作用を介してこの障害の増殖を阻害
し得る。あるいは、本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはア
ゴニストもしくはアンタゴニストは、過剰増殖障害を阻害し得る他の細胞を増殖
し得る。
【０６００】 例えば、免疫応答を増大させること、特に過剰増殖障害の抗原性の質を増大さ
せることによって、またはＴ細胞を増殖、分化、もしくは動員することによって
、過剰増殖障害を処置し得る。既存の免疫応答を増強するか、または新たな免疫
応答を開始するかのいずれかによって、この免疫応答を増大させ得る。あるいは
、免疫応答を減少させることもまた、化学療法剤のような、過剰増殖障害を処置
する方法であり得る。
【０６０１】 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはアゴニストもしくは
アンタゴニストによって処置または検出され得る過剰増殖障害の例としては、結
腸、腹部、骨、乳房、消化器系、肝臓、膵臓、腹膜、内分泌腺（副腎、上皮小体
、下垂体、精巣、卵巣、胸腺、甲状腺）、眼、頭部および頸部、神経（中枢およ
び末梢）、リンパ系、骨盤、皮膚、軟組織、脾臓、胸部、ならびに泌尿生殖器に
位置する新生物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０６０２】 同様に、他の過剰増殖障害もまた、本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペ
プチド、またはアゴニストもしくはアンタゴニストにより処置または検出され得
る。このような過剰増殖性障害の例としては、以下が挙げられるがこれらに限定
されない：高ガンマグロブリン血症、リンパ球増殖性障害、パラプロテイン血症
、紫斑、サルコイドーシス、セザリー症候群、ヴァルデンストレームマクログロ
ブリン血症、ゴシェ病、組織球増殖症、および任意の他の過剰増殖性疾患、加え
て上記に列挙した器官系に見出される新生物。
【０６０３】 本発明のポリヌクレオチドを利用する１つの好ましい実施形態は、本発明およ
び／または融合タンパク質もしくはそのフラグメントを用いる遺伝子治療によっ
て、異常な細胞分裂を阻害することである。
【０６０４】 従って、本発明は、本発明のポリヌクレオチドを異常に増殖している細胞に挿
入することによって、細胞増殖性障害を処置するための方法を提供し、ここでこ
のポリヌクレオチドはこの発現を示す。
【０６０５】 本発明の別の実施形態は、個体における細胞増殖性障害を処置する方法を提供
し、この方法は、本発明の１以上の活性遺伝子コピーを異常に増殖している１つ
の細胞または複数の細胞に投与することを包含する。好ましい実施形態において
は、本発明のポリヌクレオチドは、このポリヌクレオチドをコードするＤＮＡ配
列の発現において有効な組換え発現ベクターを含むＤＮＡ構築物である。本発明
の別の好ましい実施形態においては、本発明のポリヌクレオチドをコードするＤ
ＮＡ構築物は、レトロウイルスベクター、またはより好ましくは、アデノウイル
スベクターを用いて、処理されるべき細胞に挿入される（Ｇ Ｊ．Ｎａｂｅｌら
、ＰＮＡＳ １９９９ ９６：３２４−３２６（これは、本明細書中に参考とし
て援用される）を参照のこと）。最も好ましい実施形態においては、ウイルスベ
クターは不完全であり、非増殖性細胞ではなく増殖性細胞のみを形質転換する。
さらに、好ましい実施形態においては、単独、または他のポリヌクレオチドと組
み合わされたかもしくは融合されたかのいずれかで増殖性細胞に挿入される本発
明のポリヌクレオチドは、次いで外部刺激（すなわち、磁気、特異的小分子、化
学的、または薬物投与など）を介して調節され得、これはこのポリヌクレオチド
の上流のプロモーターに作用し、コードされたタンパク質産物の発現を誘導する
。このように、本発明の有益な治療効果は、この外部刺激に基づいて明確に調節
され得る（すなわち、本発明の発現を増加、減少、または阻害する）。
【０６０６】 本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、他の脈管形成タンパ
ク質をコードする他のポリヌクレオチドと一緒に投与され得る。脈管形成タンパ
ク質としては、酸性および塩基性の線維芽細胞増殖因子、ＶＥＧＦ−１、ＶＥＧ
Ｆ−２、ＶＥＧＦ−３、上皮増殖因子αおよびβ、血小板由来の内皮細胞増殖因
子、血小板由来増殖因子、腫瘍壊死因子α、肝細胞増殖因子、インスリン様増殖
因子、コロニー刺激因子、マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球／マクロフ
ァージコロニー刺激因子、および一酸化窒素シンターゼが挙げられるが、これら
に限定されない。
【０６０７】 本発明のポリヌクレオチドは、発癌遺伝子または抗原の発現の抑制において有
用であり得る。「発癌遺伝子の発現の抑制」によって、遺伝子の転写の抑制、遺
伝子転写物の分解（プレメッセージ（ｐｒｅ−ｍｅｓｓａｇｅ）ＲＮＡ）、スプ
ライシングの阻害、メッセンジャーＲＮＡの破壊、タンパク質の翻訳後修飾の予
防、タンパク質の破壊、またはタンパク質の正常な機能の阻害が意図される。
【０６０８】 異常に増殖している細胞への局所的投与のために、本発明のポリヌクレオチド
は当業者に公知の任意の方法によって投与され得、この方法としては、トランス
フェクション、エレクトロポレーション、細胞の微量注入、またはビヒクル（例
えば、リポソーム、リポフェクチン）中で、または裸のポリヌクレオチドとして
、または本明細書を通して記載される任意の他の方法が挙げられるが、これらに
限定されない。本発明のポリヌクレオチドは、公知の遺伝子送達系（例えば、レ
トロウイルスベクター（Ｇｉｌｂｏａ，Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ４４：８４５（
１９８２）；Ｈｏｃｋｅ，Ｎａｔｕｒｅ ３２０：２７５（１９８６）；Ｗｉｌ
ｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：３０１
４）、ワクシニアウイルス系（Ｃｈａｋｒａｂａｒｔｙら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ
Ｂｉｏｌ．５：３４０３（１９８５））または当業者に公知の他の有効なＤＮＡ
送達系（Ｙａｔｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ ３１３：８１２（１９８５））があるが
、これらに限定されない）によって送達され得る。これらの参考文献は、例示の
みであり、本明細書中に参考として援用される。異常に増殖している細胞を特異
的に送達またはトランスフェクトし、そして非分裂細胞を使わないために、当業
者に公知のレトロウイルス、またはアデノウイルス（当該分野および本明細書中
の他のいずれかに記載のような）送達系を使用することが好ましい。宿主ＤＮＡ
複製は、組み込みのためにレトロウイルスＤＮＡを必要とし、レトロウイルスは
そのライフサイクルに必要なレトロウイルス遺伝子を欠くために自己複製できな
いからである。このようなレトロウイルス送達系を本発明のポリヌクレオチドの
ために用いることによって、この遺伝子および構築物は異常に増殖している細胞
を標的とし、そして非分裂正常細胞を使用しない。
【０６０９】 本発明のポリヌクレオチドは、注射針を疾患部位に直接導くために使用される
画像化デバイスの使用によって、内部器管、体腔などにおける細胞増殖性障害／
疾患部位へ直接送達され得る。本発明のポリヌクレオチドはまた、外科的処置の
ときに疾患部位へ投与され得る。
【０６１０】 「細胞増殖性疾患」によって、器管、腔、または身体の部分の任意の１つまた
は任意の組み合わせに影響を与える、任意のヒトまたは動物の疾患もしくは障害
が意味され、これは良性であるか悪性であるかに関わらず、細胞、細胞の群、ま
たは組織の単一または複数の局所的異常増殖によって特徴付けられる。
【０６１１】 本発明のポリヌクレオチドが処置される細胞の増殖に対して生物学的に阻害す
る効果を有する限り、本発明のポリヌクレオチドの任意の量が投与され得る。さ
らに、本発明のポリヌクレオチドの１つより多くを、同じ部位へ同時に投与する
ことが可能である。「生物学的に阻害する」によって、細胞の部分的または全体
的な増殖阻害および細胞の増殖（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）または成長（ｇ
ｒｏｗｔｈ）の速度における減少が意味される。生物学的阻害用量は、組織培養
物における標的悪性細胞増殖もしくは異常増殖細胞増殖、動物および細胞培養物
における腫瘍増殖に対する本発明のポリヌクレオチドの効果を評価することによ
って、または当業者に公知の任意の他の方法によって決定され得る。
【０６１２】 本発明はさらに、抗体に基づく治療に関し、この治療は、１以上の記載された
障害を処置するために、抗ポリペプチド抗体および抗ポリヌクレオチド抗体を哺
乳動物（好ましくは、ヒト）患者に投与する工程を包含する。抗ポリペプチド抗
体および抗ポリヌクレオチド抗体のポリクロナール抗体およびモノクロナール抗
体を生成するための方法は、本明細書中のいずれかに詳細に記載される。このよ
うな抗体は、当該分野において公知であるかまたは本明細書中に記載されるよう
な薬学的に受容可能な組成物中に提供され得る。
【０６１３】 本発明の抗体が治療的に使用され得る方法の要旨は、本発明のポリヌクレオチ
ドまたはポリペプチドを、身体中で局所的もしくは全体的に、または抗体の直接
的な細胞傷害性によって（例えば、相補細胞（ＣＤＣ）またはエフェクター細胞
（ＡＤＣＣ）によって媒介されるように）結合させる工程を包含する。これらの
アプローチのいくつかは、以下により詳細に記載される。本明細書中に提供され
る教示によって、当業者は過度の実験なしで、本発明の抗体を診断目的、モニタ
リング目的または治療目的のために使用する方法を理解する。
【０６１４】 特に、本発明の抗体、フラグメントおよび誘導体は、本明細書中に記載される
ような細胞増殖性障害および／または細胞分化障害を有しているかまたは発症し
ている被験体を処置するために有用である。このような処置は、抗体もしくはフ
ラグメント、誘導体またはそれらの結合体の単一または複数の用量を投与する工
程を包含する。
【０６１５】 本発明の抗体は、例えば、他のモノクロナール抗体もしくはキメラ抗体と組み
合わせて、またはリンホカインもしくは造血成長因子と組み合わせて有利に使用
され得、これは抗体と相互作用するエフェクター細胞の数または活性を増加させ
るために役立つ。
【０６１６】 本発明のポリペプチドまたはポリヌクレオチドに対して高親和性および／また
は強力なインビボ阻害および／または中和抗体、それらのフラグメントもしくは
領域を、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド（それらのフラグメント
を含む）に関するイムノアッセイおよびそれらに関連する障害の治療の両方のた
めに使用することが好ましい。このような抗体、フラグメントまたは領域は、好
ましくは、ポリヌクレオチドまたはポリペプチド（それらのフラグメントを含む
）に対する親和性を有する。好ましい結合親和性としては、５×１０−６Ｍ、１
０−６Ｍ、５×１０−７Ｍ、１０−７Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−８Ｍ、５×１
０−９Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−１０Ｍ、５×１０−１１Ｍ、
１０−１１Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１２Ｍ、５×１０−１３Ｍ、１０−１ ３ Ｍ、５×１０−１４Ｍ、１０−１４Ｍ、５×１０−１５Ｍおよび１０−１５Ｍ
未満の解離定数すなわちＫｄを伴う結合親和性が挙げられる。
【０６１７】 さらに、本明細書中のいずれかに記載されるように、本発明のポリペプチドは
、単独で、融合タンパク質として、または他のポリペプチドと組み合わせて、直
接的または間接的のいずれかで、増殖性細胞または組織の新脈管形成の阻害にお
いて有用である。最も好ましい実施形態においては、この抗新脈管形成効果は、
例えば造血性細胞、腫瘍特異的細胞（例えば、腫瘍関連マクロファージ）の阻害
を通して、間接的に達成され得る（Ｊｏｓｅｐｈ ＩＢら、Ｊ Ｎａｔｌ Ｃａ
ｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ，９０（２１）：１６４８−５３（１９９８）（これは本明
細書中に参考として援用される）を参照のこと）。本発明のポリペプチドまたは
ポリヌクレオチドを指向する抗体はまた、直接的または間接的に新脈管形成の阻
害を生じ得る（Ｗｉｔｔｅ Ｌら、Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ Ｒｅ
ｖ．１７（２）：１５５−６１（１９９８）（これは本明細書中に参考として援
用される）を参照のこと）。
【０６１８】 本発明のポリペプチド（融合タンパク質を含む）またはそのフラグメントは、
アポトーシスの誘導を介した増殖性細胞または組織の阻害において有用であり得
る。このポリペプチドは、例えば、デスドメインレセプター（例えば、腫瘍壊死
因子（ＴＮＦ）レセプター１、ＣＤ９５（Ｆａｓ／ＡＰＯ−１）、ＴＮＦレセプ
ター関連アポトーシス媒介タンパク質（ＴＲＡＭＰ）およびＴＮＦ関連アポトー
シス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）レセプター１およびレセプター２）の活性化に
おいて、直接的または間接的のいずれかで、増殖性細胞および組織のアポトーシ
スを誘導するために作用し得る（Ｓｃｈｕｌｚｅ−Ｏｓｔｈｏｆｆ Ｋら、Ｅｕ
ｒ Ｊ Ｂｉｏｃｈｅｍ ２５４（３）：４３９−５９（１９９８）（これは本
明細書中に参考として援用される）を参照のこと）。さらに、本発明の別の好ま
しい実施形態においては、このポリペプチドは、他の機構を介して（例えば、ア
ポトーシスを活性化する他のタンパク質の活性化において）、あるいは単独また
は小分子薬物もしくはアジュバント（例えば、アポプトニン（ａｐｏｐｔｏｎｉ
ｎ）、ガレクチン、チオレドキシン、抗炎症タンパク質）との組み合わせのいず
れかで、このタンパク質の発現の刺激を介して、アポトーシスを誘導し得る（例
えば、Ｍｕｔａｔ Ｒｅｓ ４００（１−２）：４４７−５５（１９９８）、Ｍ
ｅｄ Ｈｙｐｏｔｈｅｓｅｓ．５０（５）：４２３−３３（１９９８）、Ｃｈｅ
ｍ Ｂｉｏｌ Ｉｎｔｅｒａｃｔ．Ａｐｒ ２４；１１１−１１２：２３−３４
（１９９８）、Ｊ Ｍｏｌ Ｍｅｄ．７６（６）：４０２−１２（１９９８）、
Ｉｎｔ Ｊ Ｔｉｓｓｕｅ Ｒｅａｃｔ；２０（１）：３−１５（１９９８）（
これらはすべて本明細書中に参考として援用される）を参照のこと）。
【０６１９】 本発明のポリペプチド（それとの融合タンパク質もしくはそのフラグメントを
含む）は、増殖性細胞または組織の転移の阻害において有用である。阻害は、ポ
リペプチド、または本明細書中のいずれかに記載されるようなこのポリペプチド
を指向する抗体の投与の直接的な結果として、あるいは間接的に（例えば、転移
を阻害することが知られているタンパク質（例えば、α４インテグリン）の発現
の活性化）生じ得る（例えば、Ｃｕｒｒ Ｔｏｐ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ １９９８；２３１：１２５−４１（これは本明細書中に参考として援
用される）を参照のこと）。本発明のこのような治療的効果は、単独、または小
分子薬物もしくはアジュバントとの組み合わせのいずれかで達成され得る。
【０６２０】 別の実施形態においては、本発明は、本発明のポリペプチドを含有する組成物
（例えば、異種ポリペプチド、異種核酸、毒素、またはプロドラッグに会合する
ポリペプチドまたはポリペプチド抗体を含有する組成物）を、本発明のポリペプ
チドを発現する標的細胞に送達する方法を提供する。本発明のポリペプチドまた
はポリペプチド抗体は、疎水性、親水性、イオン性および／または共有結合性相
互作用を介して、異種ポリペプチド、異種核酸、毒素、またはプロドラッグに会
合し得る。
【０６２１】 本発明のポリペプチド、それらとの融合タンパク質またはそれらのフラグメン
トは、直接的（例えば、本発明のポリペプチドが増殖性抗原および免疫原に応答
するために、免疫応答を「ワクチン接種した」場合に起こるように）、または間
接的（例えば、この抗原および免疫原に対する免疫応答を増強することが知られ
ているタンパク質（例えば、ケモカイン）の発現の活性化におけるように）のい
ずれかで、増殖細胞または組織の免疫原性および／または抗原性の増強において
有用である。
【０６２２】 （心臓血管障害） 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはアゴニストもしくは
アンタゴニストを使用して、四肢虚血のような末梢動脈疾患を含む、心臓血管障
害を処置し得る。
【０６２３】 心臓血管障害としては、動動脈瘻（ａｒｔｅｒｉｏ−ａｒｔｅｒｉａｌ ｆｉ
ｓｔｕｌａ）、動静脈瘻、大脳動静脈先天異常、先天性心欠陥（ｃｏｎｇｅｎｉ
ｔａｌ ｈｅａｒｔ ｄｅｆｅｃｔｓ）、肺動脈弁閉鎖症、およびシミター症候
群のような心臓血管異常が挙げられる。先天性心欠陥としては、大動脈縮窄、三
房心、冠状脈管奇形（ｃｏｒｏｎａｒｙ ｖｅｓｓｅｌ ａｎｏｍａｌｉｅｓ）
、交差心、右胸心、開存性動脈管（ｐａｔｅｎｔ ｄｕｃｔｕｓ ａｒｔｅｒｉ
ｏｓｕｓ）、エブスタイン奇形、アイゼンメンガー複合体、左心室発育不全症候
群、左胸心、ファロー四徴症、大血管転位症、両大血管右室起始症、三尖弁閉鎖
症、動脈管遺残、および心中隔欠損症（ｈｅａｒｔ ｓｅｐｔａｌ ｄｅｆｅｃ
ｔｓ）（例えば、大動脈肺動脈中隔欠損症（ａｏｒｔｏｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｓ
ｅｐｔａｌ ｄｅｆｅｃｔ）、心内膜床欠損症、リュタンバッシェ症候群、ファ
ロー三徴症、心室心中隔欠損症（ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ｈｅａｒｔ ｓｅｐ
ｔａｌ ｄｅｆｅｃｔｓ））が挙げられる。
【０６２４】 心臓血管障害としてはまた、不整脈、カルチノイド心臓病、高心拍出量（ｈｉ
ｇｈ ｃａｒｄｉａｃ ｏｕｔｐｕｔ）、低心拍出量（ｌｏｗ ｃａｒｄｉａｃ
ｏｕｔｐｕｔ）、心タンポナーデ、心内膜炎（細菌性を含む）、心臓動脈瘤、
心停止、うっ血性心不全、うっ血性心筋症、発作性呼吸困難、心臓水腫、心肥大
、うっ血性心筋症、左心室肥大、右心室肥大、梗塞後心破裂（ｐｏｓｔ−ｉｎｆ
ａｒｃｔｉｏｎ ｈｅａｒｔ ｒｕｐｔｕｒｅ）、心室中隔破裂、心臓弁疾患、
心筋疾患、心筋虚血、心内膜液浸出、心外膜炎（梗塞性および結核性を含む）、
気心膜症、心膜切開後症候群、右心疾患、リウマチ性心疾患、心室機能不全、充
血、心臓血管妊娠合併症（ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｐｒｅｇｎａｎｃｙ
ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ）、シミター症候群、心血管梅毒、および心血管
結核（ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）のような心
臓病が挙げられる。
【０６２５】 不整脈としては、洞性不整脈、心房性細動、心房粗動、徐脈、期外収縮、アダ
ムズ−ストークス症候群、脚ブロック、洞房ブロック、長ＱＴ症候群（ｌｏｎｇ
ＱＴ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、副収縮、ローン−ギャノング−レヴァイン症候群
、マヘーム型早期興奮症候群（Ｍａｈａｉｍ−ｔｙｐｅ ｐｒｅ−ｅｘｃｉｔａ
ｔｉｏｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ウルフ−パーキンソン−ホワイト症候群、洞不
全症候群、頻拍、および心室性細動が挙げられる。頻拍としては、発作性頻拍、
上室性頻拍、心室固有調律促進、房室結節性再入頻拍（ａｔｒｉｏｖｅｎｔｒｉ
ｃｕｌａｒ ｎｏｄａｌ ｒｅｅｎｔｒｙ ｔａｃｈｙｃａｒｄｉａ）、異所心
房性頻拍、異所接合部頻拍、洞房結節性再入頻拍（ｓｉｎｏａｔｒｉａｌ ｎｏ
ｄａｌ ｒｅｅｎｔｒｙ ｔａｃｈｙｃａｒｄｉａ）、洞性頻拍、トルサード・
ド・ポワント、および心室性頻拍が挙げられる。
【０６２６】 心臓弁疾患としては、大動脈弁機能不全症、大動脈弁狭窄症、心雑音（ｈｅａ
ｒ ｍｕｒｍｕｒｓ）、大動脈弁逸脱症、僧帽弁逸脱症、三尖弁逸脱症、僧帽弁
機能不全、僧帽弁狭窄症、肺動脈弁閉鎖症、肺動脈弁機能不全、肺動脈弁狭窄症
、三尖閉鎖症、三尖弁機能不全、および三尖弁狭窄症が挙げられる。
【０６２７】 心筋疾患としては、アルコール性心筋症、うっ血性心筋症、肥大型心筋症、弁
下部性大動脈狭搾症、弁下部性肺動脈狭搾症、拘束型心筋症、シャーガス心筋症
、心内膜線維弾性症、心内膜心筋線維症、キーンズ症候群、心筋再灌流障害、お
よび心筋炎が挙げられる。
【０６２８】 心筋性虚血としては、狭心症、冠動脈瘤、冠動脈硬化、冠動脈血栓症、冠動脈
血管痙攣、心筋梗塞、および心筋気絶（ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｓｔｕｎｎｉｎ
ｇ）のような冠動脈疾患が挙げられる。
【０６２９】 心臓血管疾患としてはまた、動脈瘤、血管形成異常、血管腫症、細菌性血管腫
症状、ヒッペル−リンダラ疾患（Ｈｉｐｐｅｌ−Ｌｉｎｄａｕ Ｄｉｓｅａｓｅ
）、クリペル−トルノネー−ウェーバー症候群、スタージ−ウェーバー症候群、
血管運動神経性水腫、大動脈疾患、高安動脈炎、大動脈炎、ルリーシュ症候群、
動脈閉塞疾患、動脈炎、動脈内膜炎（ｅｎａｒｔｅｒｉｔｉｓ）、結節性多発性
動脈炎、脳血管障害、糖尿病性血管障害、糖尿病性網膜症、塞栓症、血栓症、先
端紅痛症、痔、肝静脈閉塞障害、高血圧、低血圧、虚血、末梢血管障害、静脈炎
、肺静脈閉塞疾患、高血圧、低血圧、虚血、末梢血管疾患、静脈炎、肺静脈閉塞
疾患、レーノー病、ＣＲＥＳＴ症候群、網膜静脈閉塞、シミター症候群、上大静
脈症候群、毛細血管拡張症、毛細血管拡張性運動失調（ａｔａｃｉａ ｔｅｌａ
ｎｇｉｅｃｔａｓｉａ）、遺伝性出血性毛細管拡張症、精索静脈瘤、拡張蛇行静
脈、静脈瘤性潰瘍、脈管炎、および静脈機能不全のような血管疾患が挙げられる
。
【０６３０】 動脈瘤としては、解離性動脈瘤、偽動脈瘤、感染した動脈瘤、破裂した動脈瘤
、大動脈性動脈瘤、大脳性動脈瘤、冠動脈瘤、心動脈瘤、および腸骨性動脈瘤が
挙げられる。
【０６３１】 動脈閉塞疾患としては、動脈硬化症、間欠性跛行、頸動脈狭窄症、線維筋性形
成異常、腸間膜性血管閉塞、モヤモヤ病、腎動脈閉塞、網膜動脈閉塞、および閉
塞性血栓性血管炎が挙げられる。
【０６３２】 脳血管障害としては、頸動脈疾患、脳のアミロイドアンギオパチー、大脳動脈
瘤、大脳無酸素症、大脳動脈硬化、大脳動静脈先天異常、大脳動脈疾患、大脳の
塞栓症および血栓症、頸動脈血栓症、洞血栓症、ヴァレンベルク症候群、大脳出
血、硬膜上血腫、硬膜下血腫、クモ膜下出血（ｓｕｂａｒａｘｈｎｏｉｄ ｈｅ
ｍｏｒｒｈａｇｅ）、大脳梗塞、大脳虚血（一過性を含む）、鎖骨下動脈盗血症
候群、室周白軟化症（ｐｅｒｉｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ｌｅｕｋｏｍａｌａｃ
ｉａ）、血管性頭痛、群発性頭痛、片頭痛、および椎骨基部（ｖｅｒｔｅｂｒｏ
ｂａｓｉｌａｒ）機能不全が挙げられる。
【０６３３】 塞栓症としては、空気塞栓症、羊水塞栓症、コレステロール塞栓症、爪先チア
ノーゼ症候群、脂肪塞栓症、肺動脈塞栓症、および血栓塞栓症が挙げられる。血
栓症としては、冠状動脈血栓症、肝静脈血栓症、網膜静脈閉塞、頸動脈血栓症、
洞血栓症、ヴァレンベルク症候群、および血栓性静脈炎が挙げられる。
【０６３４】 虚血としては、大脳虚血、虚血性大腸炎、仕切り症候群（ｃｏｍｐａｒｔｍｅ
ｎｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、前仕切り症候群（ａｎｔｅｒｉｏｒ ｃｏｍｐａｒ
ｔｍｅｎｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、心筋虚血、再灌流傷害、および末梢四肢虚血
が挙げられる。脈管炎としては、大動脈炎、動脈炎、ベーチェット（Ｂｅｈｃｅ
ｔ）症候群、チャーグ−ストラウス症候群、粘膜皮膚リンパ節症候群、閉塞性血
栓性血管炎、過敏性血管炎、シェーンライン−ヘーノホ紫斑病（Ｓｃｈｏｅｎｌ
ｅｉｎ−Ｈｅｎｏｃｈ ｐｕｒｐｕｒａ）、アレルギー性皮膚血管炎およびヴェ
ーゲナー肉芽腫症が挙げられる。
【０６３５】 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはアゴニストもしくは
アンタゴニストは、危険な四肢虚血および冠状動脈疾患の処置に対して特に有効
である。
【０６３６】 ポリペプチドは、当該分野で公知である任意の方法を使用して投与され得、こ
れらの方法としては、送達部位における直接的針注射、静脈内注射、局所投与、
カテーテル注入、微粒子銃（ｂｉｏｌｉｓｔｉｃ）注射、粒子加速器、ゲルフォ
ームスポンジデポー、他の市販デポー物質、浸透圧ポンプ、経口または坐剤の固
形薬学的処方物、手術中のデカンティングまたは局所適用、エアロゾル送達が挙
げられるが、これらに限定されない。そのような方法は当該分野で公知である。
ポリペプチドは、下記でより詳細に記載される、治療剤（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉ
ｃ）の一部として投与され得る。ポリヌクレオチドを送達する方法は本明細書中
でより詳細に記載される。
【０６３７】 （抗新脈管形成活性） 新脈管形成の内因性の、刺激因子とインヒビターとの間の天然に存在する平衡
は、阻害影響が優勢である平衡である。Ｒａｓｔｉｎｅｊａｄら、Ｃｅｌｌ ５
６：３４５〜３５５（１９８９）。新生血管形成が正常な生理学的条件下におい
て生じるまれな場合（例えば、創傷治癒、器官再生、胚発生、および雌性生殖プ
ロセス）において、新脈管形成は、厳密に調節され、そして空間的および時間的
に定められる。病的な新脈管形成の状態（例えば、固形腫瘍増殖を特徴付ける）
の下において、これらの調節の制御はできない。調節されていない新脈管形成は
病的になり、そして多くの新生物性疾患および非新生物性疾患の進行を維持する
。多くの重篤な疾患は、固形腫瘍の増殖および転移、関節炎、いくつかの型の眼
の障害および乾癬を含む、異常な新生血管形成により支配される。例えば、Ｍｏ
ｓｅｓら、Ｂｉｏｔｅｃｈ．９：６３０〜６３４（１９９１）；Ｆｏｌｋｍａｎ
ら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３３３：１７５７〜１７６３（１９９５）；
Ａｕｅｒｂａｃｈら、Ｊ．Ｍｉｃｒｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．２９：４０１〜４１１
（１９８５）；Ｆｏｌｋｍａｎ、Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅ
ｓｅａｒｃｈ、ＫｌｅｉｎおよびＷｅｉｎｈｏｕｓｅ編、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐ
ｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１７５〜２０３頁（１９８５）；Ｐａｔｚ、Ａｍ
．Ｊ．Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ．９４：７１５〜７４３（１９８２）；およびＦｏｌ
ｋｍａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２１：７１９〜７２５（１９８３）による概説
を参照のこと。多くの病的状態において、新脈管形成のプロセスは、その疾患状
態に寄与する。例えば、固形腫瘍の増殖が新脈管形成に依存することを示唆する
有意なデータが蓄積されている。ＦｏｌｋｍａｎおよびＫｌａｇｓｂｒｕｎ、Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ ２３５：４４２〜４４７（１９８７）。
【０６３８】 本発明は、本発明のポリヌクレオチドおよび／またはポリペプチド、ならびに
本発明のアゴニストまたはアンタゴニストの投与による新生血管形成に関連する
疾患または障害の処置を提供する。本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチ
ド、またはアゴニストもしくはアンタゴニストを用いて処置し得る悪性状態およ
び転移性状態には、本明細書に記載の悪性疾患、固形腫瘍、および癌、ならびに
当該分野で公知の他のもの（このような障害の総説については、Ｆｉｓｈｍａｎ
ら、Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第２版、Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｃｏ．，Ｐｈ
ｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（１９８５）を参照のこと）が挙げられるが、これらに限
定されない。従って、本発明は、新脈管形成関連疾患および／または障害の処置
の方法を提供し、この方法は、治療有効量の、本発明のポリヌクレオチド、ポリ
ペプチド、アンタゴニストおよび／またはアゴニストを、その処置の必要な個体
に投与する工程を包含する。例えば、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、アンタ
ゴニストおよび／またはアゴニストは、癌または腫瘍を治療的に処置するために
、種々のさらなる方法で利用され得る。ポリヌクレオチド、ポリペプチド、アン
タゴニストおよび／またはアゴニストで処置され得る癌としては、前立腺癌、肺
癌、乳癌、卵巣癌、胃癌、膵臓癌、喉頭癌、食道癌、精巣癌、肝臓癌、耳下腺癌
、胆管癌、結腸癌、直腸癌、頸部癌、子宮癌、子宮内膜癌、腎臓癌、膀胱癌、甲
状腺癌を含む固形腫瘍；原発性腫瘍および転移；黒色腫；膠芽腫；カポージ肉腫
；平滑筋肉腫；非小細胞肺癌；結腸直腸癌；進行性（ａｄｖａｎｃｅｄ）悪性疾
患；および血液から生じる腫瘍（例えば、白血病）が挙げられるが、これらに限
定されない。例えば、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、アンタゴニストおよび
／またはアゴニストは、皮膚癌、頭頸部腫瘍、乳房腫瘍およびカポージ肉腫のよ
うな癌を処置するために、局所送達され得る。
【０６３９】 なお他の局面において、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、アンタゴニストお
よび／またはアゴニストは、例えば膀胱内投与によって膀胱癌の表面形態を処置
するために利用され得る。ポリヌクレオチド、ポリペプチド、アンタゴニストお
よび／またはアゴニストは、腫瘍に直接的に、または注射もしくはカテーテルを
介して腫瘍部位付近に送達され得る。当然のことながら、当業者が理解するよう
に、適切な投与様式は、処置されるべき癌によって変化する。他の送達様式は本
明細書中において議論される。
【０６４０】 ポリヌクレオチド、ポリペプチド、アンタゴニストおよび／またはアゴニスト
は、癌に加えて、他の障害（新脈管形成を含む）を処置する際に有用であり得る
。これらの障害としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：良性腫
瘍（例えば、血管腫、聴神経腫、神経線維腫、トラコーマ、および化膿性肉芽腫
）；動脈硬化プラーク；眼の脈管形成疾患（例えば、糖尿病性網膜症、未熟網膜
症、黄斑変性、角膜移植拒絶、血管新生緑内障、水晶体後線維増殖、ルベオーシ
ス、網膜芽細胞腫、ブドウ膜炎（ｕｖｉｅｔｉｓ）および眼の翼状片（Ｐｔｅｒ
ｙｇｉａ）（異常な血管増殖））；慢性関節リウマチ；乾癬；遅延型創傷治癒；
子宮内膜症；脈管形成；顆粒化；過形成性瘢痕（ケロイド）；偽関節骨折；強皮
症；トラコーマ；血管接着；心筋の新脈管形成；冠状側副枝（ｃｏｒｏｎａｒｙ
ｃｏｌｌａｔｅｒａｌｓ）；大脳側副枝；動静脈奇形；虚血性四肢新脈管形成
；オースラー−ウェーバー（Ｏｓｌｅｒ−Ｗｅｂｂｅｒ）症候群；プラーク新生
血管形成；毛細血管拡張症；血友病性関節；血管線維腫；線維筋性形成異常；創
傷顆粒化；クローン病；およびアテローム性動脈硬化症。
【０６４１】 例えば、本発明の１つの局面において、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプ
チド、アンタゴニストおよび／またはアゴニストを過形成性瘢痕またはケロイド
に投与する工程を包含する、過形成性瘢痕およびケロイドを処置するための方法
が提供される。
【０６４２】 本発明の１つの実施形態において、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、アンタ
ゴニストおよび／またはアゴニストは、過形成性瘢痕またはケロイドに、これら
の病変の進行を妨げるために直接注射される。この治療は、過形成性瘢痕および
ケロイド（例えば、やけど）の発生を生じることが知られている状態の予防処置
において特に価値があり、そして好ましくは、増殖期が進行する時間（最初の傷
害の約１４日後）を有した後であるが、過形成性瘢痕またはケロイドの発生の前
に開始される。上述のように、本発明はまた、眼の新生血管形成疾患（例えば、
角膜新生血管形成、血管新生緑内障、増殖性糖尿病網膜症、水晶体後線維増殖お
よび黄斑変性を含む）を処置するための方法を提供する。
【０６４３】 さらに、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（アゴニストおよび／
またはアンタゴニストを含む）を用いて処置され得る新生血管形成に関連する眼
の障害としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：血管新生緑内障
、糖尿病網膜症、網膜芽細胞腫、水晶体後線維増殖症、ブドウ膜炎、未熟網膜症
、黄斑変性、角膜移植新生血管形成、ならびに他の眼の炎症性疾患、眼の腫瘍、
および脈絡膜または虹彩の新生血管形成に関連する疾患。例えば、Ｗａｌｔｍａ
ｎら、Ａｍ．Ｊ．Ｏｐｈｔｈａｌ．８５：７０４〜７１０（１９７８）およびＧ
ａｒｔｎｅｒら、Ｓｕｒｖ．Ｏｐｈｔｈａｌ．２２：２９１〜３１２（１９７８
）による総説を参照のこと。
【０６４４】 従って、本発明の１つの局面において、治療有効量の化合物（上記）を患者に
対して、血管の形成が阻害されるように角膜に投与する工程を包含する、角膜新
生血管形成（角膜移植新生血管形成を含む）のような眼の新生血管形成疾患を処
置するための方法が、提供される。簡潔には、角膜は、通常には血管を欠く組織
である。しかし、特定の病的状態において、毛細血管は、縁の角膜周囲脈管叢か
ら角膜に伸長し得る。角膜が血管化されるようになる場合、角膜はまた混濁され
るようになり、患者の視力の衰えを生じる。角膜が完全に不透明になる（ｏｐａ
ｃｉｔａｔｅ）場合に、視力喪失が完全になり得る。広範な種々の障害は、例え
ば、以下を含む角膜新生血管形成を生じ得る：角膜感染（例えば、トラコーマ、
単純ヘルペス角膜炎、リーシュマニア症およびオンコセルカ症）、免疫学的プロ
セス（例えば、移植片拒絶およびスティーヴンズ−ジョンソン症候群）、アルカ
リやけど、外傷、炎症（任意の原因による）、毒性および栄養欠乏状態、ならび
にコンタクトレンズを装着することの合併症として。
【０６４５】 特に好ましい実施形態において、本発明は、生理食塩水（眼に用いる調製物に
おいて一般に使用される任意の保存剤および抗菌剤と組合せて）中で局所投与の
ために調製され得、そして点眼剤形態で投与され得る。溶液または懸濁液は、そ
の純粋な形態で調製され得、そして１日に数回投与され得る。あるいは、上記の
ように調製される抗脈管形成組成物はまた、角膜に直接投与され得る。好ましい
実施形態において、抗脈管形成組成物は、角膜に結合する粘膜接着性ポリマーと
ともに調製される。さらなる実施形態において、抗脈管形成因子または抗脈管形
成組成物は、従来のステロイド治療に対する補助剤として利用され得る。局所治
療はまた、脈管形成応答（例えば、化学的やけど）を誘導する高い可能性を有す
ることが公知である角膜病変において予防的に有用であり得る。これらの場合に
おいて、処置（おそらくステロイドと組み合わせられる）は、その後の合併症を
予防するのを補助するために直ちに開始され得る。
【０６４６】 他の実施形態において、上記の化合物は、角膜支質に直接、顕微鏡の案内の下
で眼科医によって注入され得る。好ましい注射部位は、個々の病巣の形態で変化
し得るが、投与の目標は、脈管構造の前進している面に組成物を置くこと（すな
わち、血管と正常な角膜との間に分散される）である。ほとんどの場合において
、これは、前進している血管から角膜を「防御」するための縁周囲（ｐｅｒｉｌ
ｉｍｂｉｃ）角膜注射を含む。この方法はまた、角膜新生血管形成を予防的に防
ぐために、角膜傷害の直後に利用され得る。この状況において、この物質は、角
膜病巣とその所望されない潜在的な血液供給の縁との間に分散して縁周囲角膜に
注射され得る。このような方法はまた、類似の様式で、移植された角膜の毛細血
管浸潤を予防するために利用され得る。徐放形態において、注射は、１年に２〜
３回のみ必要とされ得る。ステロイドもまた、注射溶液に添加され、その注射自
体から生じる炎症を低減し得る。
【０６４７】 本発明の別の局面において、患者に、血管の形成を阻害するように、治療有効
量のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アンタゴニストおよび／またはアゴニス
トを眼に投与する工程を包含する、血管新生緑内障を処置するための方法が提供
される。１つの実施形態において、化合物は、血管新生緑内障の早期形態を処置
するために、眼に局所投与され得る。他の実施形態において、化合物は、前方角
（ａｎｔｅｒｉｏｒ ｃｈａｍｂｅｒ ａｎｇｌｅ）の領域に注射によって移植
され得る。他の実施形態において、化合物はまた、化合物が眼房水に連続的に放
出されるように、任意の位置に置かれ得る。本発明の別の局面において、患者に
、血管の形成が阻害されるように、治療有効量のポリヌクレオチド、ポリペプチ
ド、アンタゴニストおよび／またはアゴニストを眼に投与する工程を包含する、
増殖性糖尿病性網膜症を処置するための方法が提供される。
【０６４８】 本発明の特に好ましい実施形態において、増殖性糖尿病性網膜症は、網膜にお
けるポリヌクレオチド、ポリペプチド、アンタゴニストおよび／またはアゴニス
トの局所濃度を増加させるために、眼房水または硝子体への注射によって処置さ
れ得る。好ましくは、この処置は、光凝固を必要とする重篤な疾患の獲得の前に
開始されるべきである。
【０６４９】 本発明の別の局面において、血管の形成が阻害されるように、患者に、治療有
効量のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アンタゴニストおよび／またはアゴニ
ストを眼に投与する工程を包含する、水晶体後線維増殖症を処置するための方法
が、提供される。化合物は、硝子体内注射を介して、および／または眼内移植を
介して局所投与され得る。
【０６５０】 さらに、このポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニストおよび／またはア
ゴニストで処置され得る障害としては、以下が挙げられるが、それらに限定され
ない：血管腫、関節炎、乾癬、血管線維腫、アテローム性プラーク、遅延型創傷
治癒、顆粒化、血友病性関節、過形成性瘢痕、偽関節骨折、オースラー−ウェー
バー（Ｏｓｌｅｒ−Ｗｅｂｅｒ）症候群、化膿性肉芽腫、強皮症、トラコーマ、
および血管接着。
【０６５１】 さらに、このポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニストおよび／またはア
ゴニストで処置され得る障害および／または状態としては、以下が挙げられるが
、それらに限定されない：固形腫瘍、血液由来の（ｂｌｏｏｄ ｂｏｒｎ）腫瘍
（例えば、白血病）、腫瘍転移、カポージ肉腫、良性腫瘍（例えば、血管腫、聴
神経腫、神経線維腫、トラコーマ、および化膿性肉芽腫）、慢性関節リウマチ、
乾癬、眼の脈管形成疾患（例えば、糖尿病性網膜症、未熟網膜症、黄斑変性、角
膜移植拒絶、血管新生緑内障、水晶体後線維増殖症、ルベオーシス、網膜芽細胞
腫、およびブドウ膜炎）、遅延型創傷治癒、子宮内膜症、脈管形成、顆粒化、過
形成性瘢痕（ケロイド）、偽関節骨折、強皮症、トラコーマ、血管接着、心筋の
新脈管形成、冠状側副枝（ｃｏｒｏｎａｒｙ ｃｏｌｌａｔｅｒａｌｓ）、大脳
側副枝、動静脈奇形、虚血性四肢新脈管形成、オースラー−ウェーバー症候群、
プラーク新生血管形成、毛細血管拡張症、血友病性関節、血管線維腫、線維筋性
形成異常、創傷顆粒化、クローン病、アテローム性動脈硬化症、産児制限薬剤（
月経を制御する、胎芽着床のために必要な血管新生を予防することによる）、病
原性の結果（例えば、ネコ引っかき病（Ｒｏｃｈｅｌｅ ｍｉｎａｌｉａ ｑｕ
ｉｎｔｏｓａ）、潰瘍（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）、バルトネ
ラ症および細菌性血管腫症状）のような新脈管形成を有する疾患。
【０６５２】 出産制限方法の１つの局面において、胎芽着床をブロックするに十分な化合物
の量は、性交および受精が起こる前またはその後に投与され、従って産児制限の
有効な方法、おそらく「事後用（ｍｏｒｎｉｎｇ ａｆｔｅｒ）」方法を提供す
る。ポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニストおよび／またはアゴニストは
また、月経を制御することにおいて使用され得るか、または子宮内膜症の処置に
おける腹膜洗浄液として、もしくは腹膜移植のためのいずれかで投与され得る。
【０６５３】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニストおよび／またはアゴニ
ストは、縫合（ｓｔｉｔｃｈ）肉芽腫を予防するために、外科縫合に組み込まれ
得る。
【０６５４】 ポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニストおよび／またはアゴニストは、
広範な種々の外科手順において利用され得る。例えば、本発明の１つの局面にお
いて、組成物（例えば、スプレーまたはフィルムの形態において）は、悪性組織
から正常な周囲の組織を分離するため、そして／または周囲の組織への疾患の広
がりを予防するために、腫瘍の除去の前に、領域をコートまたはスプレーするた
めに利用され得る。本発明の他の局面において、組成物（例えば、スプレーの形
態において）は、腫瘍をコートするため、または所望の場所において新脈管形成
を阻害するために、内視鏡手順を介して送達され得る。本発明のなお他の局面に
おいて、本発明の抗脈管形成組成物でコートされている外科メッシュが、外科メ
ッシュが利用され得る任意の手順において利用され得る。例えば、本発明の１つ
の実施形態において、抗脈管形成組成物を有した外科メッシュレーデン（ｌａｄ
ｅｎ）は、構造に対する支持を提供するため、そして一定の量の抗脈管形成因子
を放出するために、腹部癌切除手術の間（例えば、結腸切除の後）に利用され得
る。
【０６５５】 本発明のさらなる局面において、癌の局所的再発およびその部位での新しい血
管の形成が阻害されるように、切除後にポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴ
ニストおよび／またはアゴニストを腫瘍の切除縁に投与する工程を包含する、腫
瘍切除部位を処置するための方法が提供される。本発明の１つの実施形態におい
て、抗脈管形成化合物は、腫瘍切除部位に直接投与される（例えば、塗布、ブラ
ッシング（ｂｒｕｓｈｉｎｇ）、または他の方法で抗脈管形成化合物で腫瘍の切
除縁をコートすることによって適用される）。あるいは、抗脈管形成化合物は、
投与前に公知の外科ペーストに組み込まれ得る。本発明の特に好ましい実施形態
において、抗脈管形成化合物は、悪性疾患についての肝切除後および神経外科手
術後に適用される。
【０６５６】 本発明の１つの局面において、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニスト
および／またはアゴニストは、広範な種々の腫瘍（例えば、乳房腫瘍、結腸腫瘍
、脳腫瘍および肝腫瘍を含む）の切除縁に投与され得る。例えば、本発明の１つ
の実施形態において、抗脈管形成化合物は、切除後に、神経学的腫瘍の部位に、
その部位での新しい血管の形成が阻害されるように投与され得る。
【０６５７】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニストおよび／またはアゴニ
ストはまた、他の抗脈管形成因子とともに投与され得る。他の抗脈管形成因子の
代表的な例としては以下が挙げられる：抗侵襲性因子、レチノイン酸およびその
誘導体、パクリタキセル、スラミン、メタロプロテイナーゼ−１の組織インヒビ
ター、メタロプロテイナーゼ−２の組織インヒビター、プラスミノーゲン活性化
インヒビター−１、プラスミノーゲン活性化インヒビター−２および種々の形態
のより軽い「ｄ群」遷移金属。
【０６５８】 より軽い「ｄ群」遷移金属には、例えばバナジウム、モリブデン、タングステ
ン、チタン、ニオブおよびタンタル種が挙げられる。そのような遷移金属種は、
遷移金属錯体を形成し得る。上記の遷移金属種の適切な錯体としては、オキソ遷
移金属錯体が挙げられる。
【０６５９】 バナジウム錯体の代表的な例としては、バナデート錯体およびバナジル錯体の
ようなオキソバナジウム錯体が挙げられる。適切なバナデート錯体としては、例
えばメタバナジン酸アンモニウム、メタバナジン酸ナトリウムおよびオルトバナ
ジン酸ナトリウムのようなメタバナデート錯体およびオルトバナデート錯体が挙
げられる。適切なバナジル錯体としては、例えばバナジルアセチルアセトネート
および硫酸バナジル（硫酸バナジル一水和物および硫酸バナジル三水和物のよう
な硫酸バナジル水和物を含む）が挙げられる。
【０６６０】 タングステン錯体およびモリブデン錯体の代表的な例としてはまた、オキソ錯
体が挙げられる。適切なオキソタングステン錯体としては、タングステート錯体
およびタングステンオキシド錯体が挙げられる。適切なタングステート錯体とし
ては、タングステン酸アンモニウム、タングステン酸カルシウム、タングステン
酸ナトリウム二水和物およびタングステン酸が挙げられる。適切なタングステン
オキシドとしては、タングステン（ＩＶ）オキシドおよびタングステン（ＶＩ）
オキシドが挙げられる。適切なオキソモリブデン錯体としては、モリブデート、
モリブデンオキシドおよびモリブデニル錯体が挙げられる。適切なモリブデート
錯体としては、モリブデン酸アンモニウムおよびその水和物、モリブデン酸ナト
リウムおよびその水和物、ならびにモリブデン酸カリウムおよびその水和物が挙
げられる。適切なモリブデンオキシドとしては、モリブデン（ＶＩ）オキシド、
モリブデン（ＶＩ）オキシドおよびモリブデン酸が挙げられる。適切なモリブデ
ニル錯体としては、例えばモリブデニルアセチルアセトネートが挙げられる。他
の適切なタングステン錯体およびモリブデン錯体としては、例えばグリセロール
、酒石酸および糖由来のヒドロキソ誘導体が挙げられる。
【０６６１】 広範な種々の他の抗脈管形成因子もまた、本発明の状況において利用され得る
。代表的な例としては、以下が挙げられる：血小板因子４；硫酸プロタミン；硫
酸化キチン誘導体（クイーンクラブ（ｑｕｅｅｎ ｃｒａｂ）の殻から調製され
る）（Ｍｕｒａｔａら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５１：２２〜２６、１９９１）
；硫酸化多糖ペプチドグリカン複合体（ＳＰ−ＰＧ）（この化合物の機能は、ス
テロイド（例えば、エストロゲン）およびクエン酸タモキシフェンの存在によっ
て、増強され得る）；スタウロスポリン；基質代謝の調節因子（例えば、プロリ
ンアナログ、シスヒドロキシプロリン、ｄ，Ｌ−３，４−デヒドロプロリン、チ
アプロリン、α，α−ジピリジル，アミノプロピオニトリルフマレートを含む）
；４−プロピル−５−（４−ピリジニル）−２（３Ｈ）−オキサゾロン；メトト
レキサート；ミトザントロン；ヘパリン；インターフェロン；２マクログロブリ
ン−血清；ＣｈＩＭＰ−３（Ｐａｖｌｏｆｆら、Ｊ．Ｂｉｏ．Ｃｈｅｍ．２６７
：１７３２１〜１７３２６、１９９２）；キモスタチン（Ｔｏｍｋｉｎｓｏｎら
、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ．２８６：４７５〜４８０、１９９２）；シクロデキスト
リンテトラデカサルフェート；エポネマイシン；カンプトテシン；フマギリン（
Ｉｎｇｂｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５５〜５５７、１９９０）；チオリ
ンゴ酸金ナトリウム（「ＧＳＴ」；ＭａｔｓｕｂａｒａおよびＺｉｆｆ、Ｊ．Ｃ
ｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．７９：１４４０〜１４４６、１９８７）；アンチコラゲ
ナーゼ−血清；α２−抗プラスミン（Ｈｏｌｍｅｓら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ
．２６２（４）：１６５９〜１６６４、１９８７）；ビサントレン（Ｎａｔｉｏ
ｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）；ロベンザリット二ナトリウム（
Ｎ−（２）−カルボキシフェニル−４−クロロアントロニル酸（ｃｈｌｏｒｏａ
ｎｔｈｒｏｎｉｌｉｃ ａｃｉｄ）二ナトリウム、すなわち「ＣＣＡ」；Ｔａｋ
ｅｕｃｈｉら、Ａｇｅｎｔｓ Ａｃｔｉｏｎｓ ３６：３１２〜３１６、１９９
２）；サリドマイド；Ａｎｇｏｓｔａｔｉｃステロイド；ＡＧＭ−１４７０；カ
ルボキシアミノイミダゾール（ｃａｒｂｏｘｙｎａｍｉｎｏｌｍｉｄａｚｏｌｅ
）；およびメタロプロテイナーゼインヒビター（例えば、ＢＢ９４）。
【０６６２】 （細胞レベルでの疾患） 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにアンタゴニストも
しくはアゴニストによって処置または検出され得る細胞生存の増大あるいはアポ
トーシスの阻害に関連する疾患には、癌（例えば、濾胞性リンパ腫、ｐ５３変異
を有する癌腫、およびホルモン依存性腫瘍、これらは以下：結腸癌、心臓腫瘍、
膵臓癌、黒色腫、網膜芽細胞腫、神経膠芽細胞腫、肺癌、腸癌、精巣癌、胃癌、
神経芽細胞腫、粘液腫、筋腫、リンパ腫、内皮腫、骨芽細胞腫、骨巨細胞腫、骨
肉腫、軟骨肉腫、腺腫、乳癌、前立腺癌、カポージ肉腫および卵巣癌を含むが、
これらに限定されない）；自己免疫障害（例えば、多発性硬化症、シェーグレン
症候群、橋本甲状腺炎、胆汁性肝硬変、ベーチェット病（Ｂｅｈｃｅｔ’ｓ ｄ
ｉｓｅａｓｅ）、クローン病、多発性筋炎、全身性エリテマトーデスおよび免疫
関連糸球体腎炎ならびに慢性関節リウマチ）およびウイルス感染（例えば、ヘル
ペスウイルス、ポックスウイルスおよびアデノウイルス）、炎症、対宿主性移植
片病、急性移植片拒絶、ならびに慢性移植片拒絶、が挙げられる。好ましい実施
形態において、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、および／またはアン
タゴニストは、特に上記に列挙される、癌の増殖、進行、および／または転移（
ｍｅｔａｓｉｓ）を阻害するために使用される。
【０６６３】 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはアゴニストもしくは
アンタゴニストによって処置あるいは検出され得る細胞生存の増大に関連するさ
らなる疾患または状態には、悪性疾患の進行および／または転移ならびに以下の
ような関連する障害が挙げられるが、これらに限定されない：白血病（急性白血
病（例えば、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（骨髄芽球性、前骨髄球性
、骨髄単球性、単球性および赤白血病を含む）を含む）ならびに慢性白血病（例
えば、慢性骨髄性（顆粒球性）白血病および慢性リンパ球性白血病））、真性赤
血球増加症、リンパ腫（例えば、ホジキン病および非ホジキン病）、多発性骨髄
腫、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、Ｈ鎖病、ならびに固形腫瘍（
肉腫および癌腫（例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉
腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ）、リ
ンパ管肉腫、リンパ管内皮腫、骨膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、
横紋筋肉腫、結腸癌腫、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細
胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気
管支原生癌、腎細胞癌、肝細胞癌腫、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胎生期癌、
ウィルムス腫瘍、頸部癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経
膠腫、神経膠星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣細胞腫、松果体腫
、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫（ｍｅｎａｎｇｉｏｍａ）
、黒色腫、神経芽細胞腫、および網膜芽細胞腫）を含むが、これらに限定されな
い）。
【０６６４】 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにアゴニストもしく
はアンタゴニストによって処置あるいは検出され得るアポトーシスの増大に関連
する疾患には、以下が挙げられる：ＡＩＤＳ；神経変性障害（例えば、アルツハ
イマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、色素性網膜炎、小脳変性およ
び脳腫瘍または以前に関連した疾患）；自己免疫障害（例えば、多発性硬化症、
シェーグレン症候群、橋本甲状腺炎、胆汁性肝硬変、ベーチェット病（Ｂｅｈｃ
ｅｔ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、クローン病、多発性筋炎、全身性エリテマトーデ
スおよび免疫関連糸球体腎炎ならびに慢性関節リウマチ）、脊髄形成異常症候群
（例えば、再生不良性貧血）、対宿主性移植片病、虚血性傷害（心筋梗塞、発作
および再灌流傷害によって生じるようなもの）、肝臓傷害（例えば、肝炎関連肝
臓傷害、虚血／再灌流傷害、胆汁うっ滞（ｃｈｏｌｅｓｔｏｓｉｓ）（胆管傷害
）および肝臓癌）；毒物誘導性肝臓疾患（アルコールによって引き起こされるよ
うなもの）、敗血症性ショック、悪液質ならびに食欲不振。
【０６６５】 （創傷治癒および上皮細胞増殖） 本発明のなおさらなる局面に従って、本発明のポリヌクレオチドもしくはポリ
ペプチド、ならびにアゴニストもしくはアンタゴニストを、治療目的のため、例
えば、創傷治癒の目的のために上皮細胞増殖および基底ケラチノサイトを刺激す
るため、ならびに毛包産生および皮膚創傷の治癒を刺激するために、利用するた
めのプロセスが提供される。本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、な
らびにアゴニストまたはアンタゴニストは、以下を含む創傷治癒を刺激すること
において臨床的に有用であり得る：外科的創傷、切除の創傷、深い創傷（真皮お
よび表皮の損傷を含む）、眼組織の創傷、歯の組織の創傷、口腔の創傷、糖尿病
性潰瘍、皮膚の潰瘍、肘の潰瘍、動脈性の潰瘍、静脈うっ滞潰瘍、熱への曝露ま
たは化学物質による熱傷、および他の異常な創傷治癒状態（例えば、尿毒症、栄
養失調、ビタミン欠乏、ならびにステロイド、放射能療法および抗腫瘍性薬物お
よび代謝拮抗物質を用いる全身性処置に関連する合併症。本発明のポリヌクレオ
チドもしくはポリペプチド、ならびにアゴニストもしくはアンタゴニストは、皮
膚の欠失後の皮膚の回復を促進するために使用され得る。
【０６６６】 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにアゴニストもしく
はアンタゴニストは、創傷床（ｗｏｕｎｄ ｂｅｄ）への皮膚移植片の付着を増
大するため、および創傷床からの再上皮形成を刺激するために使用され得る。以
下は、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、アゴニストまたはアンタ
ゴニストが創傷床への付着を増大するために使用され得る、移植片の型である：
自家移植片、人工皮膚、同種移植片（ａｌｌｏｇｒａｆｔ）、自己植皮片、自己
表皮移植片（ａｕｔｏｅｐｄｅｒｍｉｃ ｇｒａｆｔ）、無血管性（ａｖａｃｕ
ｌａｒ）移植片、ブレア−ブラウン移植片、骨移植片、胚胎組織移植片、真皮移
植片、遅延移植片、皮膚移植片、表皮移植片、筋膜移植片、全層皮膚移植片、異
種移植片（ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ ｇｒａｆｔ）、異種移植片（ｘｅｎｏｇ
ｒａｆｔ）、同種移植片（ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ ｇｒａｆｔ）、増殖性移植片
、層板状の移植片、網状移植片、粘膜移植片、オリエ−ティールシュ移植片、大
網移植片（ｏｍｅｎｐａｌ ｇｒａｆｔ）、パッチの移植片、茎状移植片、全層
移植片（ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ ｇｒａｆｔ）、分層植皮片、分層皮膚移植片
。本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにアゴニストもしく
はアンタゴニストは、皮膚の強度を助長するため、および高齢の皮膚の外見を改
善するために使用され得る。
【０６６７】 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにアゴニストもしく
はアンタゴニストはまた、肝細胞増殖、および肺、乳房、膵臓、胃、小腸（ｓｍ
ａｌｌ ｉｎｔｅｓｔｉｎｇ）、および大腸における上皮細胞増殖における変化
を生じると考えられる。本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、なら
びにアゴニストもしくはアンタゴニストは、上皮細胞（例えば、皮脂細胞（ｓｅ
ｂｏｃｙｔｅ）、毛包、肝実質細胞、肺胞上皮細胞ＩＩ型（ｔｙｐｅ ＩＩ ｐ
ｎｅｕｍｏｃｙｔｅ）、ムチン産生杯細胞、および他の上皮細胞、ならびに皮膚
、肺、肝臓、および胃腸管内に含まれるそれらの先祖）の増殖を促進し得る。本
発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、アゴニストもしくはアンタゴニ
ストは、内皮細胞、ケラチノサイト、および基底ケラチノサイトの増殖を促進し
得る。
【０６６８】 本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびにアゴニストまたはア
ンタゴニストはまた、照射、化学療法処置またはウイルス感染から生じる腸の毒
性の副作用を低減するために使用され得る。本発明のポリヌクレオチドまたはポ
リペプチド、ならびにアゴニストまたはアンタゴニストは、小腸粘膜上で細胞保
護的な効果を有し得る。本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならび
にアゴニストまたはアンタゴニストはまた、化学療法およびウイルス感染から生
じる粘膜炎（ｍｕｃｏｓｉｔｉｓ）（口粘膜）の治癒を刺激し得る。
【０６６９】 本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびにアゴニストまたはア
ンタゴニストは、熱傷を含む、完全なおよび部分的な厚さの皮膚欠損における皮
膚の十分な再生（すなわち、毛包、汗腺、および皮脂腺の再増殖）、乾癬のよう
な他の皮膚欠損の処置においてさらに使用され得る。本発明のポリヌクレオチド
またはポリペプチド、ならびにアゴニストまたはアンタゴニストは、表皮水疱症
、これらの損傷の再上皮形成を促進することによる頻繁な開放性かつ疼痛性の水
疱を生じる内在的な真皮への表皮の接着における欠損を処置するために使用され
得る。本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびにアゴニストまた
はアンタゴニストはまた、胃潰瘍および十二指腸潰瘍を処置し、そして粘膜の内
層の瘢痕形成ならびにより迅速な腺の粘膜および十二指腸の粘膜の内層の再生に
よる治癒を助けるために使用され得る。炎症性腸疾患（例えば、クーロン病およ
び潰瘍性大腸結腸炎）は、それぞれ、小腸または大腸の粘膜表面の崩壊を生じる
疾患である。従って、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびに
アゴニストまたはアンタゴニストは、粘膜表面の再表面化（ｒｅｓｕｌｆａｃｉ
ｎｇ）を促進して、より迅速な治癒を助けるため、および炎症性腸疾患の進行を
予防するために、使用され得る。本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド
、ならびにアゴニストまたはアンタゴニストを用いる処置は、胃腸管全体の粘膜
の産生に対して有意な効果を有することが予測され、そして腸粘膜を、摂取され
たかまたは外科手術後の有害な物質から保護するために使用され得る。本発明の
ポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびにアゴニストまたはアンタゴニス
トは、本発明のポリヌクレオチドの発現下に関連する疾患を処置するために使用
され得る。
【０６７０】 さらに、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびにアゴニスト
またはアンタゴニストは、種々の病的状態に起因する肺への損傷を予防および治
癒するために使用され得る。本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、な
らびにアゴニストまたはアンタゴニストは、急性または慢性の肺損傷を予防また
は処置するために、増殖および分化を刺激し得、そして肺胞および気管支（ｂｒ
ｏｃｈｉｏｌａｒ）上皮の修復を促進し得る。例えば、気管支上皮および肺胞（
ａｖｅｏｌｉ）の壊死を生じる、気腫（これは、肺胞の進行性の損失を生じる）
および吸入損傷（すなわち、煙の吸入および熱傷から生じる）は、本発明のポリ
ヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびにアゴニストまたはアンタゴニストを
使用して効果的に処置され得る。また、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペ
プチド、ならびにアゴニストまたはアンタゴニストは、肺胞上皮細胞ＩＩ型の増
殖および分化を刺激するために使用され得、これは、未熟な乳児における硝子膜
疾患（例えば、乳児呼吸窮迫症候群および気管支肺異形成症）のような疾患を処
置または予防することを助け得る。
【０６７１】 本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびにアゴニストまたはア
ンタゴニストは、肝実質細胞の増殖および分化を刺激し得、そして従って、肝臓
疾患および病状（例えば、肝硬変により生じる劇症肝不全、肝炎ウイルスおよび
毒性物質（すなわち、アセトアミノフェン、四塩化炭素（ｃａｒｂｏｎ ｔｅｔ
ｒａｈｏｌｏｒｉｄｅ）、および他の当該分野で公知の肝臓毒素）により生じる
肝臓損傷）を緩和または処置するために使用され得る。
【０６７２】 さらに、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびにアゴニスト
またはアンタゴニストは、真性糖尿病の発症を処置または予防するために使用さ
れ得る。新たにＩ型糖尿病およびＩＩ型糖尿病と診断された患者において、いく
つかの島細胞機能が残っている場合、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプ
チド、ならびにアゴニストまたはアンタゴニストは、その疾患の持続性の発現を
緩和、遅延または予防するように、その島機能を維持するために使用され得る。
また、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびにアゴニストまた
はアンタゴニストは、島細胞機能を改善または促進するための島細胞移植におけ
る補助として使用され得る。
【０６７３】 （内分泌障害） 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはアゴニストもしくは
アンタゴニストを使用して、ホルモンバランスに関連する障害および／または疾
患、ならびに／あるいは内分泌系の障害または疾患を処置、診断、および／また
は予後し得る。
【０６７４】 内分泌系の腺により分泌されるホルモンは、身体発育、性的機能、代謝、およ
び他の機能を制御する。障害は、２つの方法で分類される：ホルモンの産生にお
ける障害、およびホルモンに応答する組織の不全。これらのホルモンアンバラン
スおよび内分泌系疾患、障害または状態の病因は、遺伝的、体細胞性（例えば、
癌およびいくつかの自己免疫疾患）、後天性（例えば、化学治療、損傷または毒
素によって）、または感染性であり得る。さらに、本発明のポリヌクレオチド、
ポリペプチド、抗体、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、内
分泌系および／またはホルモンアンバランスに関連する特定の疾患または障害の
マーカーまたはディテクターとして使用され得る。
【０６７５】 内分泌系および／またはホルモンアンバランスおよび／または疾患は、子宮運
動の障害を含み、これには以下が挙げられるが、これらに限定されない：妊娠お
よび分娩時の合併症（例えば、早期分娩、過期妊娠、自然流産、ならびに遅延分
娩およびとめられた分娩）；ならびに月経周期の障害および／または疾患（例え
ば、月経困難症および子宮内膜症）。
【０６７６】 内分泌系および／またはホルモンアンバランス障害および／または疾患として
は、膵臓の障害および／または疾患（例えば、真性糖尿病、尿崩症、先天性白内
障欠損、褐色細胞腫−島細胞症候群）；副腎の障害および／または疾患（例えば
、アディソン病、コルチコステロイド欠損、男性化作用疾患、多毛症、クッシン
グ症候群、高アルドステロン症、褐色細胞腫）；下垂体の障害および／または疾
患（例えば、下垂体機能亢進症、下垂体機能低下症、下垂体性小人症、下垂体腺
腫、汎下垂体機能低下症、先端巨大症、巨人症）；甲状腺の障害および／または
疾患（甲状腺機能亢進症、甲状腺機能低下症、プラマー病、グレーヴズ病（毒性
散在甲状腺腫）、毒性小結節甲状腺種、甲状腺炎（橋本甲状腺炎、亜急性肉芽腫
性甲状腺炎、およびサイレントリンパ球性甲状腺炎）、ペンドレッド症候群、粘
液水腫、クレチン病、甲状腺中毒症、甲状腺ホルモン縮合障害、チミン形成不全
症、甲状腺のヒュルトレ細胞腫瘍、甲状腺癌、甲状腺悪性腫瘍、髄様甲状腺癌が
挙げられるが、これらに限定されない）；副甲状腺の障害および／または疾患（
例えば、上皮小体機能亢進症、上皮小体機能低下症）；視床下部の障害および／
または疾患。
【０６７７】 特定の実施形態において、この遺伝子に対応するポリヌクレオチドおよび／も
しくはポリペプチドならびに／またはこれらのポリペプチドのアゴニストもしく
はアンタゴニスト（抗体を含む）ならびにこれらのポリヌクレオチド、ポリペプ
チド、アゴニストおよびアンタゴニストのフラグメントおよび改変体を用いて、
異常なグルコース代謝または異常なグルコースの細胞内への取り込みに関係する
疾患および障害を、診断、予後、処置、予防、または回復し得る。
【０６７８】 特定の実施形態において、この遺伝子に対応するポリヌクレオチドおよび／も
しくはポリペプチドならびに／またはこれらのアゴニストおよび／もしくはアン
タゴニストを用いて、Ｉ型糖尿病（インシュリン依存性糖尿病、ＩＤＤＭ）を、
診断、予後、処置、予防、および／または回復し得る。
【０６７９】 別の実施形態において、この遺伝子に対応するポリヌクレオチドおよび／もし
くはポリペプチドならびに／またはこれらのアゴニストおよび／もしくはアンタ
ゴニストを用いて、ＩＩ型糖尿病（インシュリン抵抗性糖尿病）を、診断、予後
、処置、予防、および／または回復し得る。
【０６８０】 さらに、他の実施形態において、この遺伝子に対応するポリヌクレオチドおよ
び／もしくはポリペプチドならびに／またはこれらのアンタゴニスト（特に、中
和抗体もしくは拮抗性抗体）を用いて、以下を含むがこれらに限定されない（Ｉ
型またはＩＩ型）糖尿病に関係する状態を、診断、予後、処置、予防、または回
復し得る：糖尿病性ケトアシドーシス、糖尿病性昏睡、非ケトン性高血糖−高浸
透圧性昏睡、発作、精神錯乱、嗜眠状態、心臓血管疾患（例えば、心疾患、アテ
ローム性動脈硬化症、微小血管疾患、高血圧、発作、および「心臓血管障害」の
節に記載されるような他の疾患および障害）、異脂肪血症、腎臓疾患（例えば、
腎不全、腎症、「腎障害」の節に記載されるような他の疾患および障害）、神経
損傷、ニューロパシー、視力欠陥（例えば、糖尿病性網膜症および失明）、潰瘍
および創傷治癒機能障害、感染（例えば、感染性疾患および「感染性疾患」の節
に記載されるような障害（特に、尿路および皮膚の障害））、手根管症候群、デ
ュプュイトラン拘縮。
【０６８１】 他の実施形態において、この遺伝子に対応するポリヌクレオチドおよび／もし
くはポリペプチドならびに／またはこれらのアゴニストもしくはアンタゴニスト
は、動物の体重を調節するために、動物（好ましくは、哺乳動物、そして最も好
ましくは、ヒト）に投与される。特定の実施形態において、この遺伝子に対応す
るポリヌクレオチドおよび／もしくはポリペプチドならびに／またはこれらのア
ゴニストもしくはアンタゴニストは、インシュリンに関連する生化学的経路を調
節することによって動物の体重を制御するために、動物（好ましくは、哺乳動物
、そして最も好ましくは、ヒト）に投与される。なお他の実施形態において、こ
の遺伝子に対応するポリヌクレオチドおよび／もしくはポリペプチドならびに／
またはこれらのアゴニストもしくはアンタゴニストは、インシュリン様増殖因子
に関連する生化学的経路を調節することによって動物の体重を制御するために、
動物（好ましくは、哺乳動物、そして最も好ましくは、ヒト）に投与される。
【０６８２】 さらに、内分泌系および／またはホルモンアンバランス障害および／または疾
患はまた、癌を含む精巣または卵巣の障害および／または疾患を含み得る。他の
精巣または卵巣の障害および／または疾患としては、例えば、卵巣癌、多嚢胞性
卵巣症候群、クラインフェルター症候群、バニシング精巣症候群（両側性無精巣
）、ライディヒ細胞の先天性欠損、停留精巣、ヌーナン症候群、筋緊張性ジスト
ロフィー、精巣の毛細血管腫（良性）、精巣の新形成および新精巣（ｎｅｏ−ｔ
ｅｓｔｉｓ）がさらに挙げられる。
【０６８３】 さらに、内分泌系およびまたはホルモンアンバランス障害および／または疾患
はまた、例えば、多内分泌腺機能低下症候群、褐色細胞腫、神経芽細胞腫、多発
性内分泌腺腫症、ならびに内分泌組織の障害および／または癌のような傷害およ
び／または疾患を含み得る。
【０６８４】 （神経活性および神経学的疾患） 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチドおよびアゴニストもしくはアンタゴ
ニストは、脳および／または神経系の疾患、障害、損傷、または傷害の診断およ
び／または処置に用いられ得る。本発明の組成物（例えば、ポリペプチド、ポリ
ヌクレオチド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニスト）を用いて処
置され得る神経系の障害としては、軸索の切断、ニューロンの減少もしくは変性
、または脱髄のいずれかを引き起こす、神経系損傷および疾患または障害が挙げ
られるが、これらに限定されない。本発明の方法に従って、患者（ヒト患者およ
び非ヒト哺乳動物患者を含む）において処置され得る神経系病変には、以下の中
枢神経系（脊髄、脳を含む）または末梢神経系のいずれかの病変が挙げられるが
、これらに限定されない：（１）虚血病変（ここで、神経系の一部における酸素
不足により、ニューロンの損傷または死が生じ、これには大脳梗塞もしくは虚血
、または脊髄梗塞もしくは虚血が挙げられる）；（２）外傷病変（身体的損傷に
より生じるかまたは手術に関連する病変、例えば、神経系の一部分を切断する病
変、または圧縮損傷を含む）；（３）悪性病変（ここで、神経系の一部分は、神
経系関連悪性疾患もしくは非神経系組織由来の悪性疾患のいずれかである悪性組
織により破壊または損傷される）；（４）感染性病変（ここで、神経系の一部分
は、例えば、膿瘍による感染の結果として、破壊または損傷されるか、あるいは
ヒト免疫不全ウイルス、帯状ヘルペスもしくは単純ヘルペスウイルスによる感染
と関連するか、ライム病、結核、梅毒に関連する）；（５）変性病変（ここで、
神経系の一部分は、変性プロセスの結果として破壊または損傷され、これには、
パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンティングトン舞踏病または筋萎縮性側
索硬化症（ＡＬＳ）に関連する変性が挙げられるが、これらに限定されない）；
（６）栄養性の疾患または障害に関連する病変（ここで、神経系の一部分は、栄
養障害または代謝障害によって破壊または損傷され、これには、ビタミンＢ１２
欠乏症、葉酸欠乏症、ヴェルニッケ病、タバコ−アルコール弱視、マルキアファ
ーヴァ−ビニャーミ病（脳梁の一次変性）およびアルコール小脳変性が挙げられ
るが、これらに限定されない）；（７）全身性疾患に関連する神経性病変（糖尿
病（糖尿病性ニューロパシー、ベル麻痺）、全身性エリテマトーデス、癌または
類肉腫症が挙げられるが、これらに限定されない）；（８）毒性物質（アルコー
ル、鉛または特定の神経毒を含む）により生じる病変；ならびに（９）脱髄性病
変（ここで、神経系の一部分は、脱髄性疾患によって破壊または損傷され、これ
には、多発性硬化症、ヒト免疫不全ウイルス関連脊髄障害、横断脊髄障害または
種々の病因、進行性多病巣性白質脳症、および橋中央ミエリン溶解が挙げられる
が、これらに限定されない）。
【０６８５】 １つの実施形態において、本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、または
アゴニストもしくはアンタゴニストは、低酸素症の損傷効果から神経細胞を保護
するために用いられる。さらに好ましい実施形態では、本発明のポリペプチド、
ポリヌクレオチド、またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、大脳低酸素症
の損傷効果から神経細胞を防御するために用いられる。この実施形態によると、
本発明の組成物は、大脳低酸素症に関連する神経細胞損傷を処置または予防する
ために用いられる。この実施形態の１つの非排他的局面において、本発明のポリ
ペプチド、ポリヌクレオチド、またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、大
脳虚血と関連する神経細胞損傷を処置、または予防するために用いられる。この
実施形態の非限定的な別の局面において、本発明のポリペプチド、ポリヌクレオ
チド、またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、大脳梗塞症に関連する神経
細胞損傷を処置または予防するために用いられる。
【０６８６】 別の好ましい実施形態において、本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、
またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、発作に関連する神経細胞損傷を処
置または予防するために用いられる。特定の実施形態において、本発明のポリペ
プチド、ポリヌクレオチド、またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、発作
に関連する大脳神経細胞損傷を処置または予防するために用いられる。
【０６８７】 別の好ましい実施形態において、本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、
またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、心臓発作に関連する神経細胞損傷
を処置または予防するために使用される。特定の実施形態において、本発明のポ
リペプチド、ポリヌクレオチド、またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、
心臓発作に関連する大脳神経細胞損傷を処置または予防するために使用される。
【０６８８】 神経系障害を処置または予防するために有用な本発明の組成物は、ニューロン
の生存または分化の促進における生物学的活性について試験することによって選
択され得る。（限定の目的ではないが）例えば、以下の効果のいずれかを誘発す
る本発明のガレクチン１１組成物は、本発明に従って有用であり得る：（１）培
養物中のニューロンの増加した生存時間；（２）培養物中またはインビボにおけ
るニューロンの増加した出芽；（３）培養物中またはインビボにおけるニューロ
ン関連分子（例えば、運動ニューロンに関しては、コリンアセチルトランスフェ
ラーゼまたはアセチルコリンエステラーゼ）の増加した生成；あるいは（４）イ
ンビボにおけるニューロン機能不全減少した症状。このような効果は、当該分野
において公知の任意の方法によって測定され得る。好ましい、非限定的な実施形
態においては、ニューロンの増加した生存は、本明細書中に記載されるか、そう
でなければ当該分野において公知の方法（例えば、Ａｒａｋａｗａら（Ｊ．Ｎｅ
ｕｒｏｓｃｉ．１０：３５０７−３５１５（１９９０））に記載される方法）を
用いて慣習的に測定され得；ニューロンの増加した出芽は、当該分野において公
知の方法（例えば、Ｐｅｓｔｒｏｎｋら（Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．７０：６５−
８２（１９８０））またはＢｒｏｗｎら（Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．
４：１７−４２（１９８１））に記載される方法）によって検出され得；ニュー
ロン関連分子の増加した生成は、当該分野で公知であり、測定されるべき分子に
依存した技術を用いて、バイオアッセイ、酵素アッセイ、抗体結合、ノーザンブ
ロットアッセイなどによって測定され得；そして運動ニューロン機能不全は、運
動ニューロン障害の物理的症状（例えば、弱さ、運動ニューロン伝導速度または
機能的障害）を評価することによって測定され得る。
【０６８９】 特定の実施形態において、本願発明に従って処置され得る運動ニューロン障害
としては、以下のような障害が挙げられるが、それらに限定されない：梗塞形成
、感染、毒素への曝露、外傷、外科的損傷、変性疾患または運動ニューロンなら
びに神経系の他の構成要素に影響し得る悪性疾患のような障害、ならびに筋萎縮
性側索硬化症および、これらに限定されないが、進行性脊髄性筋萎縮症、進行性
球麻痺、原発性側索硬化症、乳児性および若年性筋萎縮、小児の進行性球麻痺（
ファチオ・ロンデ症候群）、ポリオおよびポリオ後症候群、ならびに遺伝性運動
感覚性ニューロパシー（シャルコー−マリー−ツース病）を含む、ニューロンに
選択的に影響する障害。
【０６９０】 さらに、本発明のポリペプチドまたはポリヌクレオチドは、ニューロン生存、
シナプス形成；伝達；神経分化などにおいて役割を果たし得る。従って、本発明
の組成物（ポリヌクレオチド、ポリペプチド、およびアゴニストまたはアンタゴ
ニストを含む）は、学習および/または認識の障害を含むがこれに限定されない
、これらの役割に関連する疾患または障害を、診断、および/または処置または
予防するのに用いられ得る。本発明の組成物は、神経変性性疾患状態および/ま
たは行動障害の処置または予防において有用であり得る。このような神経変性性
疾患状態および/または行動障害としては以下が挙げられるがこれらに限定され
ない：アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、ツレット症候群、
髄膜炎、精神分裂病、躁病、痴呆、偏執症、強迫性障害、鬱病、恐慌性障害、学
習障害、ＡＬＳ、精神病、自閉、および行動変化（栄養補給、睡眠パターン、平
衡、および知覚の障害を含む）。さらに、本発明の組成物は、発生中の胚、また
は伴性障害に関連する発生の障害の処置、予防および/または検出において役割
を果たし得る。
【０６９１】 さらに、本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、および/またはアゴニス
トまたはアンタゴニストは、以下を含むが挙げられるがこれらに限定されない脳
血管障害に関連する、疾患、傷害、障害または、損傷から、神経細胞を防御する
のに有用であり得る：脳血管障害（例えば、頸動脈血栓症、頸動脈狭窄およびモ
ヤモヤ病を含む頸動脈疾患）、脳のアミロイドアンギオパチー、大脳動脈瘤、脳
低酸素症、大脳動脈硬化症、大脳動静脈奇形、大脳動脈疾患、脳塞栓症および血
栓（例えば、頸動脈血栓症、洞血栓症およびヴァレンベルク症候群）、硬膜上血
腫（例えば、硬膜外血腫または硬膜下血腫およびクモ膜下出血）、脳亀裂骨折、
脳虚血（例えば、一過性脳虚血、鎖骨下動脈盗血症候群、または椎骨脳底不全（
ｖｅｒｔｅｂｒｏｂａｓｉｌａｒ ｉｎｓｕｆｆｉｃｉｅｎｃｙ））、血管性痴
呆（たとえば、多発脳梗塞性痴呆）、脳室周囲白質軟化症、ならびに血管性頭痛
（例えば、群発性頭痛）。
【０６９２】 本発明のなおさらなる局面によれば、治療目的で、神経学的細胞増殖および/
または分化を刺激するために、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、
ならびにアゴニストまたはアンタゴニストを利用するためのプロセスが提供され
る。従って、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニストおよび/ま
たはアンタゴニストは、神経学的疾患を処置、および/または検出するために用
いられ得る。さらに、本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、または
アゴニストもしくはアンタゴニストは、特定の神経系疾患または傷害のマーカー
または検出因子として用いられ得る。
【０６９３】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニスト、および／またはアン
タゴニストを用いて処置または検出され得る神経性疾患の例としては、以下が挙
げられる：脳疾患（例えば、代謝脳疾患（母体性フェニルケトン尿症のようなフ
ェニルケトン尿症、ピルビン酸カルボキシラーゼ欠損、ピルビン酸デヒドロゲナ
ーゼ複合体欠損、ヴェルニッケ脳障害、脳水腫を含む）、小脳新生物のような脳
新生物（テント下新生物、脈絡叢新生物のような脳室新生物、視床下部新生物、
テント上新生物、キャナヴァン病を含む）、小脳性運動失調のような小脳疾患（
脊髄小脳変性（例えば、毛細血管拡張性運動失調）、小脳性共同運動障害、フリ
ートライヒ運動失調、マチャド−ジョセフ病、オリーブ橋小脳萎縮を含む）、テ
ント下新生物のような小脳新生物、広汎性脳硬化症（例えば、軸周囲性脳炎、球
様細胞白質萎縮症、異染性白質萎縮症および亜急性硬化性汎脳炎）。
【０６９４】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニスト、および／またはアン
タゴニストを用いて処置または検出され得るさらなる神経性疾患のとしては、以
下が挙げられる：脳血管障害（例えば、頸動脈疾患（頸動脈血栓症、頸動脈狭窄
症およびモヤモヤ病を含む）、脳のアミロイドアンギオパチー、大脳動脈瘤、脳
酸素欠乏症、大脳動脈硬化症、大脳動静脈先天異常、大脳動脈疾患、脳塞栓症お
よび血栓症（例えば、頸動脈血栓症、洞血栓症およびヴァレンベルク症候群）、
脳出血（例えば、硬膜上血腫、硬膜下血腫およびクモ膜下出血）、脳梗塞、脳虚
血（例えば、一過性脳虚血、鎖骨下動脈盗血症候群および椎骨基部不全）、血管
性痴呆（例えば、多発脳梗塞性痴呆）、室周白斑、および血管性頭痛（例えば、
群発性頭痛、片頭痛）。
【０６９５】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニスト、および／またはアン
タゴニストを用いて処置または検出され得るさらなる神経性疾患としては、以下
が挙げられる：痴呆（例えば、ＡＩＤＳ痴呆複合症、初老期痴呆（例えば、アル
ツハイマー病およびクロイツフェルト−ヤーコプ病）、老年痴呆（例えば、アル
ツハイマー病および進行性核上性麻痺）、血管性痴呆（例えば、多発脳梗塞性痴
呆））、脳炎（軸周囲性脳炎、ウイルス性脳炎（例えば、流行性脳炎、日本脳炎
、セントルイス脳炎、ダニ媒介脳炎および西ナイル熱）を含む）、急性播種性脳
脊髄炎、髄膜脳炎（例えば、ブドウ膜脳炎症候群、脳炎後のパーキンソン病およ
び亜急性硬化性汎脳炎）、脳軟化症（例えば、室周白斑）、てんかん（例えば、
全身てんかん（点灯麻痺を含む）、アプサンスてんかん、ミオクローヌスてんか
ん（ＭＥＲＲＦ症候群、強直性間代性てんかんを含む）、部分てんかん（例えば
、複雑部分てんかん、前頭葉てんかんおよび側頭葉てんかん）、外傷後てんかん
、てんかん重積持続状態（例えば、持続性部分てんかん）を含む）、およびハレ
ルフォルデン−シュパッツ症候群。
【０６９６】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニスト、および／またはアン
タゴニストを用いて処置または検出され得るさらなる神経性疾患としては、以下
が挙げられる：水頭症（例えば、ダンディ−ウォーカー症候群および正常圧水頭
症）、視床下部疾患（例えば、視床下部新生物）、大脳マラリア、ナルコレプシ
ー（脱力発作を含む）、延髄ポリオ、大脳偽腫瘍、レット症候群、ライ症候群、
視床疾患、トキソプラスマ症、頭蓋内結核腫およびツェルヴェーガー症候群、中
枢神経系感染（例えば、ＡＩＤＳ痴呆複合症、ブレーン膿瘍、硬膜下蓄膿、脳脊
髄炎（例えば、ウマ脳脊髄炎、ベネズエラウマ脳脊髄炎、壊死性出血性脳脊髄炎
）、ビスナ、および大脳マラリア。
【０６９７】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニスト、および／またはアン
タゴニストを用いて処置または検出され得る神経性疾患のさらなる例としては、
以下が挙げられる：髄膜炎（例えば、クモ膜炎、無菌性髄膜炎（例えば、ウイル
ス性髄膜炎（リンパ球性脈絡髄膜炎を含む）、細菌性髄膜炎（ヘモフィルス髄膜
炎、リステリア髄膜炎を含む）、髄膜炎菌性髄膜炎（例えば、ウォーターハウス
−フリーデリックセン症候群、肺炎球菌髄膜炎および髄膜結核）、真菌類髄膜炎
（例えば、クリプトコックス髄膜炎）、硬膜下滲出、髄膜脳炎（例えば、ブドウ
膜髄膜脳炎症候群）、脊髄炎（例えば、横断脊髄炎）、神経梅毒（例えば、脊髄
ろう）、ポリオ（延髄ポリオおよびポリオ後症候群を含む）、プリオン疾患およ
び（例えば、クロイツフェルト−ヤーコプ症候群、ウシ海綿状脳症、ゲルストマ
ン−シュトロイスラー症候群、クールー、スクラピー）。
【０６９８】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニスト、および／またはアン
タゴニストを用いて処置または検出され得るさらなる神経性疾患としては、以下
が挙げられる：大脳トキソプラスマ症、中枢神経系新生物（例えば、脳新生物（
小脳新生物（例えば、テント下新生物）、脳室新生物（例えば、脈絡叢新生物）
、視床下部新生物およびテント上新生物を含む）、髄膜新生物、脊髄新生物（硬
膜外新生物を含む）、脱髄疾患（例えば、キャナヴァン病）、広汎性脳硬化症（
副腎脳白質ジストロフィー、軸周囲性脳炎、球様細胞白質萎縮症、異染性白質萎
縮症のような広汎性脳硬化症を含む）、アレルギー性脳脊髄炎、壊死性出血性脳
脊髄炎、進行性多病巣性白質脳障害、多発性硬化症、橋中央ミエリン溶解、横断
脊髄炎、視神経脊髄炎、スクラピー、脊柱前弯症、慢性疲労症候群、ビスナ、高
圧神経症候群、髄膜症、脊髄疾患（例えば、先天性筋無緊張症、筋萎縮性側索硬
化症）、棘筋萎縮症（例えば、ヴェルドニッヒ−ホフマン病）、脊髄圧迫、脊髄
新生物（例えば、硬膜外新生物）、脊髄空洞症、脊髄ろう、スティッフマン症候
群、精神遅滞（例えば、Ａｎｇｅｌｍａｎ症候群、ネコ鳴き症候群、ド・ランゲ
症候群、ダウン症候群）、ガングリオシドーシス（例えば、ガングリオシドーシ
スＧ（Ｍ１）、ザントホフ病、テイ−サックス病）、ハートナップ病、ホモシス
チン尿症、ローレンス−ムーン−ビードル症候群、レッシュ−ナイハン症候群、
カエデシロップ病、ムコリピドーシス（例えば、フコース蓄積症）、セロイド脂
褐素沈着症、眼脳腎症候群、フェニルケトン尿症（例えば、母体フェニルケトン
尿症）、プラーダー−ヴィリ症候群、レット症候群、ルービンスタイン−テービ
症候群、結節硬化症、ＷＡＧＲ症候群、神経系異常（例えば、全前脳症、神経管
欠損（例えば、無脳症（水無脳症（ｈｙｄｒａｎｇｅｎｃｅｐｈａｌｙ）を含む
）））、アルノルト−キアーリ奇形、脳ヘルニア、髄膜瘤、髄膜脊髄瘤、および
脊椎癒合不全（例えば、嚢胞性二分脊椎および潜在性二分脊椎）。
【０６９９】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニスト、および／またはアン
タゴニストを用いて処置または検出され得るさらなる神経性疾患としては、以下
が挙げられる：遺伝性感覚ニューロン障害および運動ニューロン障害（シャルコ
ー−マリー病を含む）、遺伝性眼萎縮症、レフサム病、遺伝性痙性対麻痺、ヴェ
ルドニッヒ−ホフマン病、遺伝性運動ニューロン障害および感覚ニューロン障害
（例えば、先天性痛覚脱失症および家族性自律神経障害）、神経症的発現（例え
ば、認知不能症（ゲルストマン症候群を含む）、健忘症（例えば、逆向性健忘症
）、失行症、神経因性膀胱障害、脱力発作、伝達障害（例えば、聴覚障害（難聴
、部分的聴力欠損、大声（ｌｏｕｄｎｅｓｓ）レクルートメントおよび耳鳴を含
む）、言語障害（例えば、失語症（失書症、名称失語症、ブロカ失語症およびヴ
ェルニッケ失語症を含む）、失読症（例えば、後天性失読症）、言語発達障害、
発語障害（例えば、失語症（名称失語症、ブロカ失語症およびヴェルニッケ失語
症を含む））、構音障害、伝達障害（例えば、発語障害（構語障害、反響言語、
無言症およびどもりを含む）、発声障害（例えば、失声症および嗄声））、除脳
硬直状態、せん妄、束形成、幻覚、髄膜症、運動障害（例えば、Ａｎｇｅｌｍａ
ｎ症候群、運動失調、アテトーシス、舞踏病、失調症、運動低下症、筋緊張低下
、ミオクロヌス、チック、斜頸および振せん）、筋緊張亢進（例えば、筋硬直（
例えば、スティッフマン症候群）、筋痙性、麻痺（例えば、顔面神経麻痺（耳帯
状疱疹を含む）、胃不全麻痺、片麻痺、眼筋麻痺（例えば、複視、デュエーン症
候群、ホルナー症候群、慢性進行性外眼筋麻痺症（例えば、キーンズ症候群））
、延髄麻痺、熱帯性痙性不全対麻痺、対麻痺（例えば、ブラウン−セカール症候
群、四肢麻痺）、呼吸性麻痺および声帯麻痺、不全麻痺）、幻影肢、味覚障害（
例えば、無味覚症および味覚不全）、視覚障害（例えば、弱視、失明、色覚障害
、複視、半盲、暗点および正常以下の視覚）、睡眠障害（例えば、睡眠過剰（ク
ライネ−レヴィン症候群を含む）、不眠症、および夢遊症）、痙縮（例えば、開
口障害）、意識消失（例えば、昏睡、持続性植物状態および失神）および眩暈、
神経筋障害（例えば、先天性筋無緊張症、筋萎縮性側索硬化症、ランバート−イ
ートン筋無力症症候群、運動ニューロン疾患、筋萎縮（例えば、棘筋萎縮、シャ
ルコー−マリー病およびヴェルドニッヒ−ホフマン病）、ポリオ後症候群、筋ジ
ストロフィー、重症筋無力症、萎縮性ミオトニー、先天性ミオトニー、ネマリン
ミオパシー、家族性周期性四肢麻痺、多発性パラミオクロヌス（ｐａｒａｍｙｌ
ｏｃｌｏｎｕｓ）、熱帯性痙性不全対麻痺およびスティッフマン症候群）、末梢
神経系障害（例えば、先端疼痛症）、アミロイドニューロパシー、自律神経系疾
患（例えば、アーディー症候群、Ｂａｒｒｅ−Ｌｉｅｏｕ症候群、家族性自律神
経障害、ホルナー症候群、反射性交感神経性ジストロフィーおよびシャイ−ドレ
ーガー症候群）、脳神経疾患（例えば、聴神経疾患（例えば、聴神経腫（２型神
経線維腫症を含む））、顔面神経疾患（例えば、顔面神経痛、メルカーソン−ロ
ーゼンタール症候群、眼球運動障害（弱視、眼振、動眼神経麻痺を含む）、眼筋
麻痺（例えば、デュエーン症候群、ホルナー症候群、慢性進行性外眼筋麻痺症（
キーンズ症候群を含む））、斜視（例えば、内斜視および外斜視）、視神経麻痺
、視神経疾患（例えば、眼萎縮症（遺伝性眼萎縮症を含む）、視神経円板結晶腔
、視神経炎（例えば、視神経脊髄炎、乳頭水腫））、三叉神経痛、声帯麻痺、脱
髄疾患（例えば、視神経脊髄炎および脊柱前弯症）、および糖尿病性ニューロパ
シー（例えば、糖尿病足）。
【０７００】 本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニスト、および／またはアン
タゴニストを用いて処置または検出され得るさらなる神経性疾患としては、以下
が挙げられる：神経圧挫症候群（例えば、手根管症候群、足根管症候群）、胸郭
出口症候群（例えば、頸肋症候群）、尺骨神経圧挫症候群、神経痛（例えば、カ
ウザルギー、頸腕神経痛、顔面神経痛および三叉神経痛）、神経炎（例えば、実
験的アレルギー性神経炎、眼神経炎、多発性神経炎、多発神経根神経炎および神
経根炎（例えば、多発性神経根炎））、遺伝性運動ニューロン障害および感覚ニ
ューロン障害（例えば、シャルコー−マリー病）、遺伝性眼萎縮症、レフサム病
、遺伝性痙性対麻痺およびヴェルドニッヒ−ホフマン病、遺伝性感覚ニューロン
障害および自律神経ニューロン障害（先天性痛覚脱失症および家族性自律神経障
害を含む）、ＰＯＥＭＳ症候群、坐骨神経痛、味覚性発汗症およびテタニー）。
【０７０１】 （感染性疾患） 本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびにアゴニストまたはア
ンタゴニストは、感染因子を処置または検出するために用いられ得る。例えば、
免疫応答を上昇させることによって、特にＢ細胞および／またはＴ細胞の増殖お
よび分化を増加させることによって、感染性疾患が処置され得る。免疫応答は、
既存の免疫応答を上昇させるか、または新たな免疫応答を開始させるかのいずれ
かにより上昇され得る。あるいは、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチ
ド、ならびにアゴニストまたはアンタゴニストはまた、必ずしも免疫応答を誘発
することなく、感染因子を直接阻害し得る。
【０７０２】 ウイルスは、本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、および／また
はアゴニストもしくはアンタゴニストにより処置または検出され得る疾患または
症状を引き起こし得る感染因子の一例である。ウイルスの例としては、以下のＤ
ＮＡおよびＲＮＡのウイルスおよびウイルス科が挙げられるがこれらに限定され
ない：アルボウイルス、アデノウイルス科、アレナウイルス科、アルテリウイル
ス、ビルナウイルス科、ブンヤウイルス科、カルシウイルス科、サルコウイルス
科（Ｃｉｒｃｏｖｉｒｉｄａｅ）、コロナウイルス科、デング熱、ＥＢＶ、ＨＩ
Ｖ、フラビウイルス科、ヘパドナウイルス科（肝炎）、ヘルペスウイルス科（例
えば、サイトメガロウイルス、単純ヘルペス、ヘルペス帯状疱疹）、モノネガウ
イルス（Ｍｏｎｏｎｅｇａｖｉｒｕｓ）（例えば、パラミクソウイルス科、麻疹
ウイルス、ラブドウイルス科）、オルソミクソウイルス科（例えば、インフルエ
ンザＡ、インフルエンザＢ、およびパラインフルエンザ）、パピローマウイルス
、パポバウイルス科、パルボウイルス科、ピコルナウイルス科、ポックスウイル
ス科（例えば、痘瘡またはワクシニア）、レオウイルス科（例えば、ロタウイル
ス）、レトロウイルス科（ＨＴＬＶ−Ｉ、ＨＴＬＶ−ＩＩ、レンチウイルス）、
およびトガウイルス科（例えば、ルビウイルス属）。これらの科内に入るウイル
スは、以下を含むがこれらに限定されない種々の疾患または症状を引き起こし得
る：関節炎、細気管支炎（ｂｒｏｎｃｈｉｏｌｌｉｔｉｓ）、呼吸性シンシチウ
ムウイルス、脳炎、眼性感染症（例えば、結膜炎、角膜炎）、慢性疲労症候群、
肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｅ型、慢性活動性、デルタ）、日本脳炎Ｂ型、アルゼ
ンチン出血熱、チングニア、リフトバレー熱、黄熱病、髄膜炎、日和見感染症（
例えば、ＡＩＤＳ）、肺炎、バーキットリンパ腫、水痘、出血熱、麻疹、流行性
耳下腺炎、パラインフルエンザ、狂犬病、感冒、ポリオ、白血病、風疹、性感染
症、皮膚病（例えば、カポージ、いぼ）、およびウイルス血症。本発明のポリヌ
クレオチドもしくはポリペプチド、またはアゴニストもしくはアンタゴニストを
用いて、任意のこれらの症状または疾患が処置または検出され得る。特定の実施
形態において、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、またはアゴニストも
しくはアンタゴニストは、以下の処置に使用される：髄膜炎、デング熱、ＥＢＶ
、および／または肝炎（例えば、Ｂ型肝炎）。さらなる具体的な実施形態におい
て、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、またはアゴニストもしくはアン
タゴニストは、１以上の他の市販の肝炎ワクチンに非応答性の患者を処置するた
めに使用される。さらに具体的な実施形態において、本発明のポリヌクレオチド
、ポリペプチド、またはアゴニストもしくはアンタゴニストは、ＡＩＤＳを処置
するために使用される。
【０７０３】 同様に、疾患または症状を引き起こし得、かつ本発明のポリヌクレオチドもし
くはポリペプチド、および／またはアゴニストもしくはアンタゴニストによって
処置または検出され得る細菌性因子あるいは真菌性因子は、以下のグラム陰性お
よびグラム陽性細菌および細菌科ならびに真菌を含むがこれらに限定されない：
Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ（例えば、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ、
Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｎｏｒｃａｒｄｉａ）、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕ
ｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｏｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌａｃｅ
ａｅ（例えば、Ａｎｔｈｒａｘ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、Ｂａｃｔｅｒｏｉ
ｄａｃｅａｅ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｏｓｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ、Ｂｏｒｒ
ｅｌｉａ（例えば、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、Ｂｒｕｃｅ
ｌｌｏｓｉｓ、Ｃａｎｄｉｄｉａｓｉｓ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ、Ｃｏｃ
ｃｉｄｉｏｉｄｏｍｙｃｏｓｉｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｏｓｉｓ、Ｄｅｒｍａ
ｔｏｃｙｃｏｓｅｓ、Ｅ．ｃｏｌｉ（例えば、Ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃ
Ｅ．ｃｏｌｉおよびＥｎｔｅｒｏｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ Ｅ．ｃｏｌｉ）、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｓａｌｍｏｎ
ｅｌｌａ（例えば、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉ、およびＳａｌｍｏｎｅ
ｌｌａ ｐａｒａｔｙｐｈｉ）、Ｓｅｒｒａｔｉａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ）、Ｅｒ
ｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌｏ
ｓｉｓ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒｏｓｉｓ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍ
ａｔａｌｅｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ、Ｖｉｂｒｉｏ ｃ
ｈｏｌｅｒａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｃｅａｅ（例えば、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃ
ｔｅｒ、Ｇｏｎｏｒｒｈｅａ、Ｍｅｎｉｇｏｃｏｃｃａｌ）、Ｍｅｉｓｓｅｒｉ
ａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａｃｅａの感染症（例え
ば、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｈｅａｍｏｐｈｉｌｕｓ（例えば、Ｈｅａ
ｍｏｐｈｉｌｕｓインフルエンザＢ型）、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ）、Ｐｓｅｕ
ｄｏｍｏｎａｓ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｃｅａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｃｅａｅ
、Ｓｙｐｈｉｌｉｓ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｓｐｐ．、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃ
ａｌ、Ｍｅｎｉｎｇｉｏｃｏｃｃａｌ、ＰｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌならびにＳｔ
ｒｅｐｔｏｃｏｃｃａｌ（例えば、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏ
ｎｉａｅおよびＢ群Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）。これらの細菌または真菌の
科は、以下を含むがこれらに限定されない疾患または症状を引き起こし得る：菌
血症、心内膜炎、眼感染症（結膜炎、結核、ブドウ膜炎）、歯肉炎、日和見感染
症（例えば、ＡＩＤＳに関連した感染症）、爪周囲炎、プロテーゼ関連感染症、
ライター病、気道感染症（例えば、百日咳または蓄膿症）、敗血症、ライム病、
ネコ引っ掻き病、赤痢、パラチフス熱、食中毒、腸チフス、肺炎、淋病、髄膜炎
（例えば、髄膜炎Ａ型およびＢ型）、クラミジア、梅毒、ジフテリア、ライ病、
パラ結核、結核、狼瘡、ボツリヌス中毒、壊疽、破傷風、膿痂疹、リウマチ熱、
猩紅熱、性感染病、皮膚病（例えば、蜂巣炎、皮膚真菌症（ｄｅｒｍａｔｏｃｙ
ｃｏｓｅｓ））、毒血症、尿路感染症、創傷感染症。本発明のポリペプチドもし
くはポリヌクレオチド、アゴニストもしくはアンタゴニストを用いて、これらの
症状もしくは疾患のいずれかを処置または検出し得る。具体的な実施形態におい
て、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、アゴニストまたはアンタゴニス
トは、以下を処置するために使用される：破傷風、ジフテリア、ボツリヅム、お
よび／またはＢ型髄膜炎。
【０７０４】 さらに、本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、および／またはア
ゴニストもしくはアンタゴニストにより処置または検出され得る、寄生生物性因
子が引き起こす疾患または症状としては以下のファミリーまたはクラスが挙げら
れるがこれらに限定されない：アメーバ症、バベシア症、コクシジウム症、クリ
プトスポリジウム症、二核アメーバ症（Ｄｉｅｎｔａｍｏｅｂｉａｓｉｓ）、交
疫、外部寄生生物性、ジアルジア鞭毛虫症、蠕虫症、リーシュマニア症、タイレ
リア症、トキソプラスマ症、トリパノソーマ症、およびトリコモナス（Ｔｒｉｃ
ｈｏｍｏｎａｓ）症、ならびに胞子虫症（Ｓｐｏｒｏｚｏａｎ）（例えば、Ｐｌ
ａｓｍｏｄｉｕｍ ｖｉｒａｘ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｉｕ
ｍ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｍａｌａｒｉａｅおよびＰｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｏ
ｖａｌｅ）。これらの寄生生物は、以下を含むがこれらに限定されない種々の疾
患または症状を引き起こし得る：疥癬、ツツガムシ病、眼性感染症、腸疾患（例
えば、赤痢、ジアルジア鞭毛虫症）、肝臓疾患、肺疾患、日和見感染症（例えば
、ＡＩＤＳ関連）、マラリア、妊娠合併症、およびトキソプラスマ症。本発明の
ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、またはアゴニストもしくはアンタゴニ
ストを用いて、これらの症状または疾患のいずれかを処置または検出し得る。特
定の実施形態において、本発明のポリヌクレオチド、ポリペプチド、またはアゴ
ニストもしくはアンタゴニストは、マラリアを処置するために使用される。
【０７０５】 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにアゴニストもしく
はアンタゴニストは、患者に有効量のポリペプチドを投与するか、または患者か
ら細胞を取り出して、本発明のポリヌクレオチドをこの細胞に供給し、そして操
作した細胞を患者に戻す（エキソビボ治療）かのいずれかによるものであり得る
。さらに、本発明のポリペプチドまたはポリヌクレオチドはワクチン中の抗原と
して用いられて、感染性疾患に対する免疫応答を惹起し得る。
【０７０６】 （再生） 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにアゴニストもしく
はアンタゴニストを用いて、細胞を分化させ、増殖させ、そして誘引して、組織
の再生を導き得る（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７６：５９−８７（１９９７）を参照の
こと）。組織の再生を用いて、先天性欠損、外傷（創傷、熱傷、切開、または潰
瘍）、加齢、疾患（例えば、骨粗鬆症、変形性関節炎（ｏｓｔｅｏｃａｒｔｈｒ
ｉｔｉｓ）、歯周病、肝不全）、美容形成手術を含む手術、線維症、再灌流傷害
、もしくは全身性サイトカイン損傷により損傷を受けた組織を修復、置換、また
は保護し得る。
【０７０７】 本発明を用いて再生し得る組織としては、以下が挙げられる：器官（例えば、
膵臓、肝臓、腸、腎臓、皮膚、内皮）、筋肉（平滑筋、骨格筋、または心筋）、
血管系（血管およびリンパ管を含む）、神経、造血、および骨格（骨、軟骨、腱
、および靭帯）の組織。好ましくは、再生は、瘢痕なく、または瘢痕が低減され
て生じる。再生はまた、新脈管形成を含み得る。
【０７０８】 さらに、本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにアゴニス
トもしくはアンタゴニストは、治癒するのが困難な組織の再生を増加させ得る。
例えば、腱／靭帯の再生を増大させることによって、損傷後の回復時間が早まる
。本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、ならびにアゴニストもしく
はアンタゴニストはまた、損傷を回避する試みにおいて予防的に使用され得る。
処置され得る特定の疾患は、腱炎、手根管症候群、および他の腱欠損または靭帯
欠損を含む。非治癒創傷の組織再生のさらなる例としては、褥瘡性潰瘍、脈管不
全、外科的創傷、および外傷性創傷に関連する潰瘍が挙げられる。
【０７０９】 同様に、神経および脳組織はまた、神経細胞を増殖および分化させるために本
発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチドならびにアゴニストもしくはアン
タゴニストを使用することによって再生され得る。本方法を用いて処置され得る
疾患としては、中枢神経系疾患および末梢神経系疾患、神経障害、または機械的
および外傷性障害（例えば、脊髄障害、頭部外傷、脳血管疾患、および発作（ｓ
ｔｏｋｅ））が挙げられる。詳細には、末梢神経傷害と関連する疾患、末梢神経
障害（例えば、化学療法または他の医学的療法から生じる）、局在神経障害、お
よび中枢神経系疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチント
ン病、筋萎縮性側索硬化症、およびシャイ−ドレーガー症候群）はすべて、本発
明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチドならびにアゴニストもしくはアンタ
ゴニストを用いて処置され得る。
【０７１０】 （走化性） 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチドならびにアゴニストもしくは
アンタゴニストは、走化性活性を有し得る。走化性分子は、細胞（例えば、単球
、線維芽細胞、好中球、Ｔ細胞、肥満細胞、好酸球、上皮細胞および／または内
皮細胞）を、身体中の特定の部位（例えば、炎症、感染、または過剰増殖の部位
）に誘引または動員する。次いで、動員された細胞は、特定の外傷または異常性
を撃退および／または治癒し得る。
【０７１１】 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチドならびにアゴニストもしくは
アンタゴニストは、特定の細胞の走化性活性を増大し得る。次いで、これらの走
化性分子を使用して、身体中の特定の位置に標的化した細胞の数を増加させるこ
とによって、炎症、感染、過剰増殖性障害、または任意の免疫系障害を処置し得
る。例えば、走化性分子を使用して、傷害を受けた位置に免疫細胞を誘引するこ
とによって、組織に対する創傷および他の外傷を処置し得る。本発明の走化性分
子はまた、線維芽細胞を誘引し得、これは創傷を処置するために使用され得る。
【０７１２】 本発明のポリヌクレオチドもしくはポリペプチドならびにアゴニストもしくは
アンタゴニストが走化性活性を阻害し得ることもまた意図される。これらの分子
はまた、障害を処置するために使用され得る。従って、本発明のポリヌクレオチ
ドもしくはポリペプチドならびにアゴニストもしくはアンタゴニストは、走化性
のインヒビターとして使用され得る。
【０７１３】 （結合活性） 本発明のポリペプチドは、このポリペプチドに結合する分子、またはこのポリ
ペプチドが結合する分子についてスクリーニングするために使用され得る。この
ポリペプチドとこの分子との結合は、結合したポリペプチドまたは分子の活性を
活性化（アゴニスト）、増大、阻害（アンタゴニスト）、または減少させ得る。
そのような分子の例としては、抗体、オリゴヌクレオチド、タンパク質（例えば
、レセプター）、または低分子が挙げられる。
【０７１４】 好ましくは、この分子は、このポリペプチドの天然のリガンド（例えば、リガ
ンドのフラグメント）、または天然の基質、リガンド、構造的模倣物、もしくは
機能的模倣物に密接に関連する（Ｃｏｌｉｇａｎら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔ
ｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １（２）：第５章（１９９１）を参
照のこと）。同様に、この分子は、このポリペプチドが結合する天然のレセプタ
ー、または少なくとも、このポリペプチドによって結合され得るレセプターのフ
ラグメント（例えば、活性部位）に密接に関連し得る。いずれの場合においても
、この分子は、公知の技術を用いて合理的に設計され得る。
【０７１５】 好ましくは、これらの分子についてのスクリーニングは、ポリペプチドを発現
する適切な細胞を産生する工程を包含する。好ましい細胞としては、哺乳動物、
酵母、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ、またはＥ．ｃｏｌｉ由来の細胞が挙げられる。次
いで、このポリペプチドを発現する細胞（または、発現されたポリペプチドを含
む細胞膜）を、好ましくは、このポリペプチドまたはこの分子のいずれかの結合
、活性の刺激、または活性の阻害を観察するための分子を潜在的に含む試験化合
物と接触させる。
【０７１６】 アッセイは、このポリペプチドへの候補化合物の結合を単純に試験し得、ここ
で結合は、標識によって、または標識された競合物との競合に関するアッセイに
おいて検出される。さらに、アッセイは、候補化合物がこのポリペプチドへの結
合によって生成されるシグナルを生じるか否かを試験し得る。
【０７１７】 あるいは、アッセイは、無細胞調製物、固体支持体に接着されたポリペプチド
／分子、化学ライブラリー、または天然産物の混合物を用いて実施され得る。ア
ッセイはまた、候補化合物を、ポリペプチドを含む溶液と混合する工程、ポリペ
プチド／分子の活性または結合を測定する工程、およびポリペプチド／分子の活
性または結合を、標準と比較する工程を単純に包含し得る。
【０７１８】 好ましくは、ＥＬＩＳＡアッセイは、モノクローナル抗体またはポリクローナ
ル抗体を用いて、サンプル（例えば、生物学的サンプル）におけるポリペプチド
のレベルまたは活性を測定し得る。この抗体は、ポリペプチドへの直接的もしく
は間接的のいずれかの結合、または基質についてのポリペプチドとの競合によっ
て、ポリペプチドのレベルまたは活性を測定し得る。
【０７１９】 さらに、本発明のポリペプチドが結合するレセプターは、当業者に公知の多く
の方法（例えば、リガンドパニングおよびＦＡＣＳソーティング（Ｃｏｌｉｇａ
ｎら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎ．，１（２）、
第５章（１９９１））によって同定され得る。例えば、発現クローニングを用い
、ここで、ポリアデニル化ＲＮＡがこのポリペプチドに応答する細胞（例えば、
ＮＩＨ３Ｔ３細胞（これは、ＦＧＦファミリータンパク質に対する複数のレセプ
ターを含むことが公知である）、およびＳＣ−３細胞）から調製される、そして
このＲＮＡから作製されたｃＤＮＡライブラリーは、プールに分けられ、そして
このポリペプチドに応答性でないＣＯＳ細胞または他の細胞をトランスフェクト
するために使用される。ガラススライド上で増殖しているトランスフェクトされ
た細胞は、それらを標識化した後に、本発明のポリペプチドに曝露される。この
ポリペプチドは、種々の手段（部位特異的プロテインキナーゼに対する認識部位
のヨウ素化または封入を含む）によって標識化され得る。
【０７２０】 固定化およびインキュベーション後、このスライドは、オートラジオグラフィ
ー分析に供される。陽性プールを同定し、そしてサブプールを、反復性のサブプ
ール化および再スクリーニングプロセスを使用して調製および再びトランスフェ
クトして、最終的に推定レセプターをコードする単一のクローンを生じる。
【０７２１】 レセプター同定のための代替のアプローチとして、この標識ポリペプチドは、
レセプター分子を発現する細胞膜および抽出調製物と光親和性に連結し得る。架
橋された材料は、ＰＡＧＥ分析によって分離され、そしてＸ線フィルムに曝露さ
れる。このポリペプチドのレセプターを含む標識複合体が切り出され得、ペプチ
ドフラグメントへと分離され得、そしてタンパク質微小配列決定に供され得る。
微小配列決定から得られるアミノ酸配列を使用して、１組の縮重オリゴヌクレオ
チドプローブを設計してｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングし、推定レセプ
ターをコードする遺伝子を同定する。
【０７２２】 さらに、遺伝子シャッフリング、モチーフシャッフリング、エキソンシャッフ
リング、および／またはコドンシャッフリングの技術（集合的に「ＤＮＡシャッ
フリング」という）を利用して、本発明のポリペプチドの活性を調節し得、それ
によって本発明のポリペプチドのアゴニストおよびアンタゴニストを効果的に生
成する。一般に、米国特許第５，６０５，７９３号、同第５，８１１，２３８号
、同第５，８３０，７２１号、同第５，８３４，２５２号、および同第５，８３
７，４５８号、ならびにＰａｔｔｅｎ，Ｐ．Ａ．ら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ
Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８：７２４〜３３（１９９７）；Ｈａｒａｙａｍａ，
Ｓ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６（２）：７６〜８２（１９９８
）；Ｈａｎｓｓｏｎ，Ｌ．Ｏ．ら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２８７：２６５〜７
６（１９９９）；ならびにＬｏｒｅｎｚｏ，Ｍ．Ｍ．およびＢｌａｓｃｏ，Ｒ．
Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ２４（２）：３０８〜１３（１９９８）（これら
の特許および刊行物の各々は、本明細書において参考として援用される）を参照
のこと。１つの実施形態において、ポリヌクレオチドの変更および対応するポリ
ペプチドの変更は、ＤＮＡシャッフリングによって達成され得る。ＤＮＡシャッ
フリングは、相同組換えまたは部位特異的な組換えによる、２つ以上のＤＮＡセ
グメントの、所望の分子への構築に関連する。別の実施形態において、ポリヌク
レオチドおよび対応するポリペプチドは、組換えの前に、誤りがちな（ｅｒｒｏ
ｒ−ｐｒｏｎｅ）ＰＣＲ、ランダムヌクレオチド挿入または他の方法によるラン
ダム変異誘発に供することによって、変更され得る。別の実施形態において、本
発明のポリペプチドの１つ以上の成分、モチーフ、切片、部分、ドメイン、フラ
グメントなどは、１つ以上の異種分子の１つ以上の成分、モチーフ、切片、部分
、ドメイン、フラグメントなどと組換えられ得る。好ましい実施形態において、
この異種分子は、ファミリーのメンバーである。さらに好ましい実施形態におい
て、この異種分子は、例えば、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、インスリン様
増殖因子（ＩＧＦ−Ｉ）、トランスホーミング増殖因子（ＴＧＦ）−α、表皮増
殖因子（ＥＧＦ）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、ＴＧＦ−β、骨形成タンパ
ク質（ＢＭＰ）−２、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、アク
チビンＡおよびアクチビンＢ、デカペンタプレジック（ｄｅｃａｐｅｎｔａｐｌ
ｅｇｉｃ）（ｄｐｐ）、６０Ａ、ＯＰ−２、ドーサリン（ｄｏｒｓａｌｉｎ）、
増殖分化因子（ＧＤＦ）、結節（ｎｏｄａｌ）、ＭＩＳ、インヒビン−α、ＴＧ
Ｆ−β１、ＴＧＦ−β２、ＴＧＦ−β３、ＴＧＦ−β５、および神経膠由来神経
栄養因子（ＧＤＮＦ）のような増殖因子である。
【０７２３】 他の好ましいフラグメントは、本発明のポリペプチドの生物学的に活性なフラ
グメントである。生物学的に活性なフラグメントは、本発明のポリぺプチドの活
性に類似の活性を示すが、必ずしも同一である必要はないフラグメントである。
このフラグメントの生物学的活性は、改善された所望の活性、または減少した所
望されない活性を含み得る。
【０７２４】 さらに、本発明は、本発明のポリペプチドの作用を調節する化合物を同定する
ために化合物をスクリーニングする方法を提供する。このようなアッセイの例は
、哺乳動物線維芽細胞、本発明のポリペプチド、スクリーニングされるべき化合
物および３［Ｈ］チミジンを、線維芽細胞が通常増殖する細胞培養条件下で合わ
せる工程を包含する。コントロールアッセイは、スクリーニングされるべき化合
物の非存在下で実施され得、そしてこの化合物の存在下での線維芽細胞の増殖の
量と比較して、各々の場合における３［Ｈ］チミジンの取り込みの決定によって
、この化合物が増殖を刺激するか否かを決定し得る。線維芽細胞の増殖の量は、 ３ ［Ｈ］チミジンの取り込みを測定する液体シンチレーションクロマトグラフィ
ーによって測定される。アゴニスト化合物およびアンタゴニスト化合物の両方が
、この手順により同定され得る。
【０７２５】 別の方法において、本発明のポリペプチドに対するレセプターを発現する哺乳
動物細胞または膜調製物は、この化合物の存在下において標識化した本発明のポ
リペプチドとともにインキュベートされる。次いで、この化合物がこの相互作用
を増強またはブロックする能力が、測定され得る。あるいは、スクリーニングさ
れるべき化合物の相互作用に従う既知のセカンドメッセンジャー系の応答および
レセプターが測定され、そしてこの化合物がこのレセプターに結合し、そしてセ
カンドメッセンジャー応答を誘発する能力を測定して、この化合物が潜在的なア
ゴニストまたはアンタゴニストであるか否かを決定する。このようなセカンドメ
ッセンジャー系には、ｃＡＭＰグアニル酸シクラーゼ、イオンチャネルまたはホ
スホイノシチド加水分解が挙げられるが、これらに限定されない。
【０７２６】 これらの上記のアッセイの全ては、診断マーカーまたは予後マーカーとして使
用され得る。これらのアッセイを用いて発見される分子は、ポリペプチド／分子
を活性化または阻害することによって、疾患を処置するか、または患者における
特定の結果（例えば、血管増殖）をもたらすために使用され得る。さらに、この
アッセイは、適切に操作された細胞または組織からの本発明のポリペプチドの産
生を阻害または増強し得る因子を発見し得る。
【０７２７】 従って、本発明は、以下の工程を含む本発明のポリペプチドに結合する化合物
を同定する方法を包含する：（ａ）候補結合化合物を本発明のポリペプチドとと
もにインキュベートする工程；および（ｂ）結合が生じたか否かを決定する工程
。さらに、本発明は、以下の工程を含むアゴニスト／アンタゴニストを同定する
方法を包含する：（ａ）候補化合物を本発明のポリペプチドとともにインキュベ
ートする工程、（ｂ）生物学的活性をアッセイする工程、および（ｂ）ポリペプ
チドの生物学的活性が変更されているか否かを決定する工程。
【０７２８】 （標的化された送達） 別の実施形態において、本発明は、組成物を、本発明のポリペプチドについて
のレセプターを発現する標的化細胞、または本発明のポリペプチドの細胞結合形
態を発現する細胞に送達する方法を提供する。
【０７２９】 本明細書中で議論される場合、本発明のポリペプチドまたは抗体は、異種ポリ
ペプチド、異種核酸、毒素またはプロドラッグと、疎水性、親水性、イオン性お
よび／または共有結合性の相互作用を介して会合し得る。１つの実施形態におい
て、本発明は、異種ポリペプチドまたは核酸と会合した本発明のポリペプチド（
抗体を含む）を投与することによる、本発明の組成物の細胞への特異的な送達の
ための方法を提供する。１つの例において、本発明は、治療タンパク質を標的化
細胞中へ送達するための方法を提供する。別の例において、本発明は、一本鎖核
酸（例えば、アンチセンスまたはリボザイム）あるいは二本鎖核酸（例えば、細
胞のゲノムに組み込まれ得るか、またはエピソームにて複製し得、そして転写さ
れ得る、ＤＮＡ）を、標的化細胞に送達するための方法を提供する。
【０７３０】 別の実施形態において、本発明は、毒素または細胞傷害性プロドラッグと会合
した本発明のポリペプチド（例えば、本発明のポリペプチドまたは本発明の抗体
）を投与することによる細胞の特異的破壊（例えば、腫瘍細胞の破壊）のための
方法を提供する。
【０７３１】 「毒素」とは、内因性の細胞傷害性エフェクター系、放射性同位体、ホロ毒素
（ｈｏｌｏｔｏｘｉｎ）、改変型毒素、毒素の触媒サブユニット、または規定の
条件下で細胞死を引き起こす細胞中もしくは細胞表面には通常存在しない任意の
分子もしくは酵素を、結合および活性化する化合物を意味する。本発明の方法に
従って使用され得る毒素としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない
：当該分野で公知の放射性同位体、固有のまたは誘導された内因性の細胞傷害性
エフェクター系を結合する化合物（例えば、抗体（またはその補体固定を含む部
分））、チミジンキナーゼ、エンドヌクレアーゼ、ＲＮＡｓｅ、α毒素、リシン
、アブリン、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素Ａ、ジフテリア毒素、サポリン、モ
モルジン（ｍｏｍｏｒｄｉｎ）、ゲロニン（ｇｅｌｏｎｉｎ）、ヨウシュヤマゴ
ボウ抗ウイルスタンパク質、α−サルシン（ｓａｒｃｉｎ）およびコレラ毒素。
「細胞傷害性プロドラッグ」とは、通常細胞内に存在する酵素によって、細胞傷
害性化合物へと変換される非毒性の化合物を意味する。本発明の方法に従って使
用され得る細胞傷害性プロドラッグとしては、安息香酸マスタードアルキル化剤
のグルタミル誘導体、エトポシドまたはマイトマイシンＣのリン酸誘導体、シト
シンアラビノシド、ダウノルビシン、およびドキソルビシンのフェノキシアセト
アミド誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。
【０７３２】 （薬物スクリーニング） 本発明のポリペプチドの活性を改変する分子についてスクリーニングするため
の、本発明のポリペプチド、またはこれらのポリペプチドをコードするポリヌク
レオチドの使用が、さらに意図される。このような方法は、本発明のポリペプチ
ドを、アンタゴニスト活性またはアゴニスト活性を有することが疑われる選択さ
れた化合物と接触させる工程、および結合に続いてこれらのポリペプチドの活性
をアッセイする工程を包含する。
【０７３３】 本発明は、種々の薬物スクリーニング技術のいずれかにおいて、本発明のポリ
ペプチド、またはそれらの結合フラグメントを使用することによって治療用化合
物をスクリーニングするために特に有用である。このような試験に用いられるポ
リペプチドまたはフラグメントは、固体支持体に固定化され得、細胞表面上に発
現され得、溶液中で遊離であり得、または細胞内に局在化され得る。薬物スクリ
ーニングの１つの方法は、ポリペプチドまたはフラグメントを発現する組換え核
酸を用いて安定に形質転換される真核生物宿主細胞または原核生物宿主細胞を利
用する。薬物は、競合結合アッセイにおいて、このような形質転換細胞に対して
スクリーニングされる。例えば、試験されている薬剤と本発明のポリペプチドと
の間の複合体の形成（ｆｏｒｍｕｌａｔｏｎ）を測定し得る。
【０７３４】 従って、本発明は、本発明のポリペプチドによって媒介される活性に影響を及
ぼす薬物または任意の他の薬剤についてのスクリーニング方法を提供する。これ
らの方法は、当該分野で周知の方法によって、このような薬剤を本発明のポリペ
プチドもしくはそのフラグメントと接触させる工程、およびこの薬剤とこのポリ
ペプチドもしくはそのフラグメントとの間の複合体の存在についてアッセイする
工程を包含する。このような競合結合アッセイにおいて、スクリーニングされる
薬剤は、代表的に、標識化される。インキュベーション後に、遊離の薬剤は、結
合形態で存在する薬剤から分離され、そして遊離または複合体化されていない標
識の量は、特定の薬剤が本発明のポリペプチドに結合する能力の尺度である。
【０７３５】 薬物スクリーニングについての別の技術は、本発明のポリペプチドに対する適
切な結合親和性を有する化合物に対するハイスループットスクリーニングを提供
し、そして欧州特許出願８４／０３５６４（１９８４年９月１３日公開）（これ
は、本明細書中で参考として援用される）に非常に詳細に記載される。簡潔にい
うと、大量の異なる小さなペプチド試験化合物は、固体基材（例えば、プラスチ
ックピンまたは何らかの他の表面）上で合成される。ペプチド試験化合物を、本
発明のポリペプチドと反応させ、そして洗浄する。次いで、結合したポリペプチ
ドは、当該分野で周知の方法によって検出される。精製されたポリペプチドは、
前述の薬物スクリーニング技術での使用のためにプレート上に直接コーディング
される。さらに、非中和抗体を使用して、このペプチドを捕捉し得、そして固体
支持体上にそれを固定し得る。
【０７３６】 本発明はまた、競合薬物スクリーニングアッセイの使用を意図し、ここで、本
発明のポリペプチドを結合し得る中和抗体は、ポリペプチドまたはそのフラグメ
ントに対する結合について試験化合物と特異的に競合する。この様式において、
抗体を使用して、本発明のポリペプチドと１つ以上の抗原性エピトープを共有す
る任意のペプチドの存在を検出する。
【０７３７】 （アンチセンスおよびリボザイム（アンタゴニスト）） 特定の実施形態において、本発明に従うアンタゴニストは、配列番号Ｘに含ま
れる配列またはその相補鎖に対応する核酸、および／あるいは表１で同定するｃ
ＤＮＡプラスミドＶに含まれるヌクレオチド配列に対応する核酸である。１つの
実施形態において、アンチセンス配列は、生物体により内部で生成され、別の実
施形態において、アンチセンス配列は別々に投与される（例えば、Ｏ’Ｃｏｎｎ
ｏｒ，Ｊ．，Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．５６：５６０（１９９１）。Ｏｌｉｇｏｄｅ
ｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ａｓ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏ
ｒｓ ｏｆ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ
Ｒａｔｏｎ，ＦＬ（１９８８）を参照のこと）。アンチセンス技術を使用して
、アンチセンスＤＮＡもしくはＲＮＡを通してか、または３重らせんの形成を通
して遺伝子発現を制御し得る。アンチセンス技術は、例えば、Ｏｋａｎｏ，Ｊ．
，Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．５６：５６０（１９９１）；Ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕ
ｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ａｓ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ
Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏ
ｎ，ＦＬ（１９８８）に考察される。３重らせん形成は、例えば、Ｌｅｅら、Ｎ
ｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６：３０７３（１９７９）；Ｃ
ｏｏｎｅｙら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４１：４５６（１９８８）；およびＤｅｒｖ
ａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５１：１３００（１９９１）において考察される。
これらの方法は、相補的なＤＮＡまたはＲＮＡへのポリヌクレオチドの結合に基
づく。
【０７３８】 例えば、非リンパ性白血病細胞株ＨＬ−６０および他の細胞株の増殖を阻害す
るためのｃ−ｍｙｃおよびｃ−ｍｙｂアンチセンスＲＮＡ構築物の使用は、以前
に記載された（Ｗｉｃｋｓｔｒｏｍら（１９８８）；Ａｎｆｏｓｓｉら（１９８
９））。これらの実験は、細胞をオリゴリボヌクレオチドとインキュベーション
することによってインビトロで行われた。インビボ用途のための類似の手順は、
ＷＯ９１／１５５８０に記載される。簡単には、所定のアンチセンスＲＮＡにつ
いてのオリゴヌクレオチドの対は、以下のように生成される：オープンリーディ
ングフレームの最初の１５塩基に相補的な配列を、５末端のＥｃｏＲＩ部位およ
び３末端のＨｉｎｄＩＩＩ部位に隣接させる。次に、オリゴヌクレオチドの対は
、９０℃で１分間加熱され、次いで２×連結緩衝液（２０ｍＭ ＴＲＩＳ ＨＣ
ｌ ｐＨ７．５、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、１０ｍＭ ジチオスレイトール（ＤＴ
Ｔ）および０．２ｍＭ ＡＴＰ）中でアニーリングされ、次いで、レトロウイル
スベクターＰＭＶ７のＥｃｏＲ１／ＨｉｎｄＩＩＩ部位に連結される（ＷＯ９１
／１５５８０）。
【０７３９】 例えば、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの５’コード部
分を使用して、約１０〜４０塩基対長のアンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオチド
を設計し得る。ＤＮＡオリゴヌクレオチドは、転写に関与する遺伝子の領域に相
補的であるように設計され、それにより転写およびレセプターの産生を阻害する
。アンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオチドは、インビボでｍＲＮＡにハイブリダ
イズし、そしてｍＲＮＡ分子のレセプターポリペプチドへの翻訳をブロックする
。
【０７４０】 １つの実施形態において、本発明のアンチセンス核酸は、外来の配列からの転
写により細胞内で産生される。例えば、ベクターまたはその一部が転写され、本
発明のアンチセンス核酸（ＲＮＡ）を産生する。このようなベクターは、このア
ンチセンス核酸をコードする配列を含む。このようなベクターは、それが転写さ
れて所望のアンチセンスＲＮＡを産生し得る限り、エピソームを保持し得るか、
または染色体に組込まれ得る。このようなベクターは、当該分野において標準的
な組換えＤＮＡ技術方法により構築され得る。ベクターは、脊椎動物細胞におい
て複製および発現のために使用される、当該分野で公知のプラスミド、ウイルス
などであり得る。本発明のポリペプチドをコードする配列またはそのフラグメン
トの発現は、脊椎動物、好ましくはヒト細胞において作用することが当該分野で
公知の任意のプロモーターにより得る。そのようなプロモーターは、誘導性また
は構成性であり得る。このようなプロモーターとしては、ＳＶ４０初期プロモー
ター領域（ＢｅｒｎｏｉｓｔおよびＣｈａｍｂｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ、２９：３０
４−３１０（１９８１））、ラウス肉腫ウイルスの３’長末端反復に含まれるプ
ロモーター（Ｙａｍａｍｏｔｏら、Ｃｅｌｌ、２２：７８７−７９７（１９８０
））、ヘルペスチミジンプロモーター（Ｗａｇｎｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．７８：１４４１−１４４５（１９８１））、メ
タロチオネイン遺伝子の調節配列（Ｂｒｉｎｓｔｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ、２９６
：３９−４２（１９８２））などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０７４１】 本発明のアンチセンス核酸は、少なくとも本発明の遺伝子のＲＮＡ転写物の一
部に相補的な配列を含む。しかし、完全に相補的であることは好ましいが、必要
ではない。本明細書中で言及される「少なくともＲＮＡの一部に相補的な」配列
は、ＲＮＡとハイブリダイズし得るに十分な相補性を有し、安定な二重鎖を形成
する配列を意味し；従って、本発明の二本鎖アンチセンス核酸の場合において、
二重鎖ＤＮＡの一本鎖が試験され得るか、または三重鎖形成がアッセイされ得る
。ハイブリダイズする能力は、相補性の程度およびアンチセンス核酸の長さの両
方に依存する。一般的に、ハイブリダイズする核酸が長いほど、ＲＮＡとのより
多くの塩基ミスマッチを含み得、これは、安定な二重鎖（または三重鎖の場合も
あり得る）を含み得、そしてなお形成し得る。当業者は、ハイブリダイズ複合体
の融点を決定するために標準的な手順を使用することによりミスマッチの許容の
程度を確認し得る。
【０７４２】 メッセージの５’末端に相補的であるオリゴヌクレオチド（例えば、ＡＵＧ開
始コドンまででかつＡＵＧ開始コドンを含む５’非翻訳配列）は、翻訳の阻害の
際に最も効率的に働くべきである。しかし、ｍＲＮＡの３’非翻訳配列に相補的
な配列は、同様にｍＲＮＡの翻訳を阻害する際に有効であることが示された。一
般的に、Ｗａｇｎｅｒ，Ｒ．、Ｎａｔｕｒｅ ３７２：３３３−３３５（１９９
４）を参照のこと。従って、本明細書中に記載されるポリヌクレオチド配列の５
’−または３’−の非翻訳非コード領域のいずれかに相補的なオリゴヌクレオチ
ドは、内因性ｍＲＮＡの翻訳を阻害するアンチセンスアプローチに使用され得る
。ｍＲＮＡの５’非翻訳領域に相補的なオリゴヌクレオチドは、ＡＵＧ開始コド
ンの相補物を含むべきである。ｍＲＮＡコード領域に相補的なアンチセンスオリ
ゴヌクレオチドは、翻訳のあまり効率的でないインヒビターであるが、本発明に
従って使用され得る。本発明のｍＲＮＡの５’領域、３’領域またはコード領域
にハイブリダイズするように設計されるか否かにかかわらず、アンチセンス核酸
は、少なくとも６ヌクレオチド長であるべきであり、そして好ましくは６〜約５
０ヌクレオチド長にわたるオリゴヌクレオチドである。特定の局面において、こ
のオリゴヌクレオチドは、少なくとも１０ヌクレオチド、少なくとも１７ヌクレ
オチド、少なくとも２５ヌクレオチドまたは少なくとも５０ヌクレオチドである
。
【０７４３】 本発明のポリヌクレオチドは、ＤＮＡ、もしくはＲＮＡ、またはキメラ混合物
、あるいはそれらの誘導体もしくは改変バージョン、一本鎖、または二本鎖であ
り得る。このオリゴヌクレオチドは、塩基部分、糖部分、またはリン酸骨格で改
変されて、例えば、分子の安定性、ハイブリダーゼーションなどを改善し得る。
このオリゴヌクレオチドは、ペプチドのような他の付加基（例えば、インビボに
おいて宿主細胞レセプターを標的化するために）、または細胞膜を通した輸送を
促進する因子（例えば、Ｌｅｔｓｉｎｇｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ
．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８６：６５５３−６５５６（１９８９）；Ｌｅｍａｉｔ
ｒｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８４：６４８−６５２（１９
８７）；ＰＣＴ公開番号ＷＯ８８／０９８１０（１９８８年１２月１５日公開）
を参照のこと）、または血液脳関門（例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ８９／１０１
３４（１９８８年４月２５日公開）を参照のこと）、ハイブリダイゼーション誘
引切断剤（ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ−ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ ｃｌｅａｖａｇ
ｅ ａｇｅｎｔ）（例えば、Ｋｒｏｌら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、６：９
５８−９７６（１９８８）を参照のこと）、またはインターカレート剤（例えば
、Ｚｏｎ，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．５：５３９−５４９（１９８８）を参照のこと
）を含み得る。この目的のために、オリゴヌクレオチドは、別の分子（例えば、
ペプチド、ハイブリダーゼーション誘引架橋剤、輸送剤、ハイブリダイゼーショ
ン誘引切断剤など）に結合体化され得る。
【０７４４】 アンチセンスオリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの改変された塩基部分を
含み得、この塩基部分は、以下を含むがそれらに限定されない群から選択される
：５−フルオロウラシル、５−ブロモウラシル、５−クロロウラシル、５−ヨー
ドウラシル、ヒポキサンチン、キサンチン、４−アセチルシトシン、５−（カル
ボキシヒドロキシルメチル）ウラシル、５−カルボキシメチルアミノメチル−２
−チオウリジン、５−カルボキシメチルアミノメチルウラシル、ジヒドロウラシ
ル、β−Ｄ−ガラクトシルキューオシン、イノシン、Ｎ６−イソペンテニルアデ
ニン、１−メチルグアニン、１−メチルイノシン、２，２−ジメチルグアニン、
２−メチルアデニン、２−メチルグアニン、３−メチルシトシン、５−メチルシ
トシン、Ｎ６−アデニン、７−メチルグアニン、５−メチルアミノメチルウラシ
ル、５−メトキシアミノメチル−２−チオウラシル、β−Ｄ−マンノシルキュー
オシン、５’−メトキシカルボキシメチルウラシル、５−メトキシウラシル、２
−メチルチオ−Ｎ６−イソペンテニルアデニン、ウラシル−５−オキシ酢酸（ｖ
）、ワイブトキソシン（ｗｙｂｕｔｏｘｏｓｉｎｅ）、プソイドウラシル、キュ
ーオシン、２−チオシトシン、５−メチル−２−チオウラシル、２−チオウラシ
ル、４−チオウラシル、５−メチルウラシル、ウラシル−５−オキシ酢酸メチル
エステル、ウラシル−５−オキシ酢酸（ｖ）、５−メチル−２−チオウラシル、
３−（３−アミノ−３−Ｎ−２−カルボキシプロピル）ウラシル、（ａｃｐ３）
ｗ、および２，６−ジアミノプリン。
【０７４５】 アンチセンスオリゴヌクレオチドはまた、以下を含むがそれらに限定されない
群から選択される少なくとも１つの改変された糖部分を含み得る：アラビノース
、２−フルオロアラビノース、キシルロース、およびヘキソース。
【０７４６】 さらなる別の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、以下を
含むがそれらに限定されない群から選択される少なくとも１つの改変されたリン
酸骨格を含む：ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロアミドチ
オエート、ホスホロアミデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄａｔｅ）、ホスホロ
ジアミデート、メチルホスホネート、アルキルホスホトリエステル、およびホル
ムアセタール（ｆｏｒｍａｃｅｔａｌ）またはそれらのアナログ。
【０７４７】 さらに別の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ａ−アノ
マーオリゴヌクレオチドである。ａ−アノマーオリゴヌクレオチドは、相補的な
ＲＮＡと特異的な二本鎖ハイブリッドを形成し、通常のｂ−ユニットとは反対に
、その鎖は互いに平行にする（Ｇａｕｔｉｅｒら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅ
ｓ．、１５：６６２５−６６４１（１９８７））。このオリゴヌクレオチドは、
２’−０−メチルリボヌクレオチドであるか（Ｉｎｏｕｅら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉ
ｄｓ Ｒｅｓ．、１５：６１３１−６１４８（１９８７））、またはキメラＲＮ
Ａ−ＤＮＡアナログである（Ｉｎｏｕｅら、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．２１５：３２
７−３３０（１９８７））。
【０７４８】 本発明のポリヌクレオチドは当該分野で公知の標準的な方法（例えば、自動Ｄ
ＮＡ合成機（このような装置はＢｉｏｓｅａｒｃｈ，Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓ
ｙｓｔｅｍｓなどから市販されている）の使用により）合成され得る。例えば、
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、Ｓｔｅｉｎらの方法（Ｎｕｃｌ．Ａ
ｃｉｄｓ Ｒｅｓ．、１６：３２０９（１９８８））により合成され得、メチル
ホスホネートオリゴヌクレオチドは、コントロールドポアガラス（ｃｏｎｔｒｏ
ｌｌｅｄ ｐｏｒｅ ｇｌａｓｓ）ポリマー支持体（Ｓａｒｉｎら、Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．、８５：７４４８−７４５１（１９
８８））などの使用により調製され得る。
【０７４９】 コード領域配列に相補的なアンチセンスヌクレオチドが使用され得るが、転写
された非翻訳領域に相補的なアンチセンスヌクレオチドが最も好ましい。
【０７５０】 本発明による潜在的なアンタゴニストはまた、触媒ＲＮＡ、すなわちリボザイ
ムを含む（例えば、ＰＣＴ国際公開ＷＯ９０／１１３６４、１９９０年１０月４
日公開；Ｓａｒｖｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４７：１２２２−１２２５（１９
９０）を参照のこと）。一方、部位特異的認識配列でｍＲＮＡを切断するリボザ
イムを使用して、ｍＲＮＡを破壊し得るが、ハンマーヘッド型リボザイムの使用
が好ましい。ハンマーヘッド型リボザイムは、標的ｍＲＮＡと相補的な塩基対を
形成する隣接領域により決定される位置で、ｍＲＮＡを切断する。たった１つの
必要条件は、標的ｍＲＮＡが以下の２つの塩基配列を有することである：５’−
ＵＧ−３’。ハンマーヘッド型リボザイムの構築および生成は当該分野で周知で
あり、そしてＨａｓｅｌｏｆｆおよびＧｅｒｌａｃｈ、Ｎａｔｕｒｅ、３３４：
５８５−５９１（１９８８）により十分に記載される。配列番号Ｘのヌクレオチ
ド配列内に多くの潜在的なハンマーヘッド型リボザイム切断部位が存在する。好
ましくは、このリボザイムは、切断認識部位がｍＲＮＡの５’末端付近に位置す
るように；すなわち、効率を増大し、そして非機能的ｍＲＮＡ転写物の細胞内蓄
積を最小化するように、操作される。
【０７５１】 アンチセンスアプローチの場合、本発明のリボザイムは、改変されたオリゴヌ
クレオチド（例えば、安定性、標的化などを改良するために）から構成され得、
そしてインビボにおいて本発明のポリペプチドを発現する細胞に送達されるべき
である。リボザイムをコードするＤＮＡ構築物は、ＤＮＡをコードするアンチセ
ンスの導入のための上記と同じ様式において細胞中に導入され得る。送達の好ま
しい方法は、強力な構成性プロモーター（例えば、ｐｏｌ ＩＩＩまたはｐｏｌ
ＩＩプロモーターのような）の制御下で、リボザイムを「コードする」ＤＮＡ
構築物を使用することを含み、その結果トランスフェクトした細胞が、十分な量
のリボザイムを生成し、そして内因性メッセージを破壊し、翻訳を阻害する。リ
ボザイムはアンチセンス分子と異なり触媒性であるので、より低い細胞内濃度が
効率のために必要とされる。
【０７５２】 アンタゴニスト／アゴニスト化合物を利用して、腫瘍性の細胞および組織に対
する本発明のポリペプチドの細胞増殖（ｇｒｏｗｔｈ）および増殖（ｐｒｏｌｉ
ｆｅｒａｔｉｏｎ）効果を阻害し得る。すなわち、腫瘍の新脈管形成を刺激し、
それにより異常な細胞成長および増殖を（例えば、腫瘍形成または増殖において
）遅延または防止する。
【０７５３】 このアンタゴニスト／アゴニストをまた利用して、血管過多の疾患を予防し得
、そして水晶体嚢外白内障（ｅｘｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ ｃａｔａｒａｃｔ）
手術後の上皮レンズ細胞の増殖を防止し得る。本発明のポリペプチドのマイトジ
ェン活性の防止はまた、例えば、バルーン血管形成術後の再狭窄のような場合に
要求され得る。
【０７５４】 アンタゴニスト／アゴニストをまた利用して、創傷治癒の間の瘢痕組織の増殖
を防止し得る。
【０７５５】 アンタゴニスト／アゴニストをまた利用して、本明細書中に記載される疾患を
処置し得る。
【０７５６】 従って、本発明は、障害または疾患（本発明のポリヌクレオチドの過剰発現に
関連する、本願の全体に渡って列挙される障害または疾患が含まれるが、これら
に限定されない）を、（ａ）本発明のポリヌクレオチドに関するアンチセンス分
子、および／または（ｂ）本発明のポリヌクレオチドに関するリボザイムを患者
に投与することによって、処置する方法を提供する。
【０７５７】 （結合ペプチドおよび他の分子） 本発明はまた、本発明のポリペプチドに結合するポリペプチドおよび非ポリペ
プチドを同定するためのスクリーニング方法、およびそれによって同定された結
合分子を含む。これらの結合分子は、例えば、本発明のポリペプチドのアゴニス
トおよびアンタゴニストとして有用である。そのようなアゴニストおよびアンタ
ゴニストは、本発明に従って、以下に詳細に記載される治療実施形態において使
用され得る。
【０７５８】 この方法は、以下の工程を包含する： ａ．本発明のポリペプチドを多数の分子と接触させる工程；および ｂ．この本発明のポリペプチドに結合する分子を同定する工程。
【０７５９】 本発明のポリペプチドを多数の分子と接触させる工程は、多数の方法によって
もたらされ得る。例えば、当業者は、本発明のポリペプチドを固体支持体上に固
定化させ、そして多数の分子の溶液を固定化した本発明のポリペプチドと接触さ
せることを考え得る。このような手順は、固定化ポリペプチドから構成される親
和性マトリックスを用いるアフィニティークロマトグラフィープロセスに類似し
ている。次いで、本発明のポリペプチドに対して選択的な親和性を有する分子が
、親和性選択によって精製され得る。固体支持体の性質、このポリペプチドのこ
の固体支持体への付着に関するプロセス、溶媒、および親和性単離または親和性
選択の条件は、大部分が慣用的であり、そして当業者に周知である。
【０７６０】 あるいは、当業者はまた、多数のポリペプチドを、ポリペプチドのサブセット
または個々のポリペプチドを含む実質的に別々の分画へ分離し得る。例えば、多
数のポリペプチドは、ゲル電気泳動、カラムクロマトグラフィーなどポリペプチ
ドの分離に関して当業者に公知の方法によって、分離され得る。個々のポリペプ
チドはまた、宿主細胞の外部表面上またはほぼ外部表面に発現されるような様式
で、形質転換された宿主細胞（例えば、組換えファージ）によって産生され得る
。次いで、個々の単離物は、本発明のポリペプチドによって「プローブ化」され
得、必要に応じて発現に必要とされるであろうインデューサーの存在下で、本発
明のポリペプチドと個々のクローンとの間で任意の選択的親和性相互作用が起こ
ったか否かが決定される。本発明のポリペプチドを個々のポリペプチドを含む各
分画と接触させる前に、これらのポリペプチドはまず、さらなる簡便性のために
固体支持体に移され得る。そのような固体支持体は、単に、例えばニトロセルロ
ースまたはナイロンでできたフィルター膜の断片であり得る。この様式において
、陽性クローンは、形質転換宿主細胞の発現ライブラリーの集団（これらは、本
発明のポリペプチドに対して選択的親和性を有するポリペプチドをコードするＤ
ＮＡ構築物を持つ）から同定され得る。さらに、本発明のポリペプチドに対して
選択的親和性を有するポリペプチドのアミノ酸配列が、従来の手段によって直接
決定され得るか、またはこのポリペプチドをコードするＤＮＡのコード配列が、
頻繁により簡便に決定され得る。次いで、一次配列が、対応するＤＮＡ配列から
推定され得る。アミノ酸配列がポリペプチド自身から決定されるものである場合
、微小配列決定技術を使用し得る。この配列決定技術は、質量分析法を含み得る
。
【０７６１】 特定の状況において、選択的親和性相互作用の存在を決定または検出しようと
試みる前に、いずれの未結合ポリペプチドを、本発明のポリペプチドおよび多数
のポリペプチドの混合物から洗浄除去することが望ましくあり得る。このような
洗浄工程は、本発明のポリペプチドまたは多数のポリペプチドが固体支持体に結
合している場合に、特に望ましくあり得る。
【０７６２】 本方法に従って提供される多数の分子は、多様性ライブラリー（例えば、本発
明のポリペプチドへ特異的に結合する分子をスクリーニングし得る無作為または
コンビナトリアルの、ペプチドライブラリーまたは非ペプチドライブラリー）と
して提供され得る。使用され得る多くのライブラリー（例えば、化学合成ライブ
ラリー、組換えライブラリー（例えば、ファージディスプレイライブラリー）、
およびインビトロ翻訳ベースのライブラリー）が、当該分野で公知である。化学
合成ライブラリーの例は、以下に記載される：Ｆｏｄｏｒら、１９９１、Ｓｃｉ
ｅｎｃｅ ２５１：７６７−７７３；Ｈｏｕｇｈｔｅｎら、１９９１、Ｎａｔｕ
ｒｅ ３５４：８４−８６；Ｌａｍら、１９９１、Ｎａｔｕｒｅ ３５４：８２
−８４；Ｍｅｄｙｎｓｋｉ、１９９４、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １２：
７０９−７１０；Ｇａｌｌｏｐら、１９９４、Ｊ．Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅ
ｍｉｓｔｒｙ ３７（９）：１２３３−１２５１；Ｏｈｌｍｅｙｅｒら、１９９
３、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：１０９２２−１０
９２６；Ｅｒｂら、１９９４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ
９１：１１４２２−１１４２６；Ｈｏｕｇｈｔｅｎら、１９９２，Ｂｉｏｔｅ
ｃｈｎｉｑｕｅｓ １３：４１２；Ｊａｙａｗｉｃｋｒｅｍｅら、１９９４、Ｐ
ｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：１６１４−１６１８；Ｓ
ａｌｍｏｎら、１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９
０：１１７０８−１１７１２；ＰＣＴ公開ＷＯ９３／２０２４２；ならびにＢｒ
ｅｎｎｅｒおよびＬｅｒｎｅｒ、１９９２、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓ
ｃｉ．ＵＳＡ ８９：５３８１−５３８３。
【０７６３】 ファージディスプレイライブラリーの例は、以下に記載される：Ｓｃｏｔｔお
よびＳｍｉｔｈ、１９９０、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：３８６−３９０；Ｄｅｖ
ｌｉｎら、１９９０、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４９：４０４−４０６；Ｃｈｒｉｓｔ
ｉａｎ，Ｒ．Ｂ．ら、１９９２、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：７１１−７１
８）；Ｌｅｎｓｔｒａ、１９９２、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．１５２：１
４９−１５７；Ｋａｙら、１９９３、Ｇｅｎｅ １２８：５９−６５；ならびに
ＰＣＴ公開番号ＷＯ９４／１８３１８（１９９４年８月１８日）。
【０７６４】 インビトロ翻訳ベースのライブラリーとしては、以下：ＰＣＴ公開番号ＷＯ９
１／０５０５８（１９９１年４月１８日）；およびＭａｔｔｈｅａｋｉｓら、１
９９４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：９０２２−９
０２６に記載されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０７６５】 非ペプチドライブラリーの例として、ベンゾジアゼピンライブラリー（例えば
、Ｂｕｎｉｎら、１９９４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ
９１：４７０８−４７１２を参照のこと）が、使用のために適応され得る。ペプ
トイドライブラリー（Ｓｉｍｏｎら、１９９２，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ
．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：９３６７−９３７１）がまた使用され得る。使用され
得るライブラリーの別の例は、Ｏｓｔｒｅｓｈら（１９９４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ
ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：１１１３８−１１１４２）によって記載
され、ここでは、ペプチド中のアミド官能基が、過剰にメチル化（ｐｅｒｍｅｔ
ｈｙｌａｔｅ）されて、化学的に形質転換されたコンビナトリアルライブラリー
を生成する。
【０７６６】 本発明において有用である種々の非ペプチドライブラリーは、大きい。例えば
、ＥｃｋｅｒおよびＣｒｏｏｋｅ（１９９５，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
１３：３５１−３６０）は、種々のライブラリーの基礎を形成する化学種の間と
して、ベンゾジアゼピン、ヒダントイン、ピペラジンジオン、ビフェニル、糖ア
ナログ、β−メルカプトケトン、アリール酢酸、アシルピペラジン、ベンゾピラ
ン、キューバン（ｃｕｂａｎｅ）、キサンチン、アミンイミドおよびオキサゾロ
ンを列挙している。
【０７６７】 非ペプチドライブラリーは、２つの型に大きく分類され得る：修飾されたモノ
マーおよびオリゴマー。修飾モノマーライブラリーは、比較的単純な骨格構造を
使用し、この上に種々の官能基が付加される。しばしば、骨格は、既知の有用な
薬理学的活性を有する分子である。例えば、骨格は、ベンゾジアゼピン構造であ
り得る。
【０７６８】 非ペプチドオリゴマーライブラリーは、モノマーの順序に依存する新規な形状
を作製する様式で共にアセンブルされる、多数のモノマーを使用する。使用され
るモノマー単位の間には、カルバメート、ピロリノン（ｐｙｒｒｏｌｉｎｏｎｅ
）およびモルホリノがある。ペプトイド（側鎖がα炭素よりもαアミノ基に結合
するペプチド様オリゴマー）は、非ペプチドオリゴマーライブラリーの別のバー
ジョンの基礎を形成する。最初の非ペプチドオリゴマーライブラリーは、単一型
のモノマーを使用し、従って、反復骨格を含んだ。近年のライブラリーは、１つ
より多くのモノマーを使用し、自由度が添加されたライブラリーを与える。
【０７６９】 ライブラリーをスクリーニングすることは、多様な一般的に公知の方法のいず
れかによって達成され得る。例えば、ペプチドライブラリーのスクリーニングを
開示する以下の参考文献：ＰａｒｍｌｅｙおよびＳｍｉｔｈ、１９８９、Ａｄｖ
．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２５１：２１５−２１８；ＳｃｏｔｔおよびＳｍ
ｉｔｈ、１９９０、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：３８６−３９０；Ｆｏｗｌｋｅｓ
ら、１９９２；ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １３：４２２−４２７；Ｏｌｄｅ
ｎｂｕｒｇら、１９９２、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８
９：５３９３−５３９７；Ｙｕら、１９９４、Ｃｅｌｌ ７６：９３３−９４５
；Ｓｔａｕｄｔら、１９８８、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４１：５７７−５８０；Ｂｏ
ｃｋら、１９９２、Ｎａｔｕｒｅ ３５５：５６４−５６６；Ｔｕｅｒｋら、１
９９２、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：６９８８−６
９９２；Ｅｌｌｉｎｇｔｏｎら、１９９２、Ｎａｔｕｒｅ ３５５：８５０−８
５２；米国特許第５，０９６，８１５号、米国特許第５，２２３，４０９号、お
よび米国特許第５，１９８，３４６号（全てＬａｄｎｅｒらに対して）；Ｒｅｂ
ａｒおよびＰａｂｏ、１９９３、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６３：６７１−６７３；な
らびにＰＣＴ公開番号ＷＯ９４／１８３１８を参照のこと。
【０７７０】 特定の実施形態において、本発明のポリペプチドを結合する分子を同定するた
めのスクリーニングは、ライブラリーのメンバーを固相に固定化された本発明の
ポリペプチドと接触させ、そして本発明のポリペプチドに結合するこれらのライ
ブラリーのメンバーを収集することによって実行され得る。そのようなスクリー
ニング方法の例の、「パニング」と呼ばれる技術は、例として、Ｐａｒｍｌｅｙ
およびＳｍｉｔｈ，１９８８，Ｇｅｎｅ ７３：３０５−３１８；Ｆｏｗｌｋｅ
ｓら、１９９２，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １３：４２２−４２７；ＰＣＴ
公開番号ＷＯ９４／１８３１８；ならびにその中に引用される参考文献に記載さ
れる。
【０７７１】 別の実施形態において、酵母中の相互作用タンパク質を選択するためのツーハ
イブリッドシステム（ＦｉｅｌｄｓおよびＳｏｎｇ，１９８９，Ｎａｔｕｒｅ
３４０：２４５−２４６；Ｃｈｉｅｎら、１９９１，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃ
ａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：９５７８−９５８２）が、本発明のポリペプチド
に特異的に結合する分子を同定するために使用され得る。
【０７７２】 この結合分子がポリペプチドである場合、このポリペプチドは、任意のペプチ
ドライブラリー（ランダムペプチドライブラリー、コンビナトリアルペプチドラ
イブラリー、またはバイアスペプチドライブラリーを含む）から簡便に選択され
得る。用語「バイアス（ｂｉａｓｅｄ）」は、この場合のペプチドにおいて、ラ
イブラリーを作製する方法が、生じる分子収集の多様性を支配する１つ以上のパ
ラメーターを制限するように操作されることを意味するために本明細書中に使用
される。
【０７７３】 従って、本当にランダムなペプチドライブラリーは、ペプチドの所定の位置に
特定のアミノ酸を見出す可能性が全て２０のアミノ酸に関して同じである、ペプ
チドの収集物を作製する。しかし、例えば、リジンが５番目のアミノ酸毎に生じ
ることを特定するかまたはデカペプチドライブラリーの４位、８位および９位が
アルギニンのみを含むように固定して特定することによって、バイアスがライブ
ラリーに導入され得る。ライブラリー中へ導入され得る。明らかに、バイアスの
多くの型は、意図され得、そして本発明は、任意の特定のバイアスに制限されな
い。さらに、本発明は、特定の型のペプチドライブラリー（例えば、ファージデ
ィスプレイペプチドライブラリーおよびＤＮＡ挿入物と共にλファージベクター
を含むＤＮＡ構築物を使用するライブラリー）を意図する。
【０７７４】 上記のように、ポリペプチドであるトランスフェリン結合分子の場合、このポ
リペプチドは、約６から約６０より少ないアミノ酸残基を有し、好ましくは約６
〜約１０アミノ酸残基、そしてより好ましくは約６〜約２２アミノ酸であり得る
。別の実施形態において、トランスフェリン結合ポリペプチドは、１５〜１００
の範囲のアミノ酸、または２０〜５０の範囲のアミノ酸を有する。
【０７７５】 選択された結合ポリペプチドは、化学合成または組換え発現によって得られ得
る。
【０７７６】 （他の活性） 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニスト、またはアンタゴニス
トは、血管内皮細胞増殖を刺激する能力の結果として、種々の疾患状態（例えば
、血栓症、動脈硬化、および他の心臓血管の状態）に起因する虚血組織の血管再
生を刺激するための処置において利用され得る。本発明のポリペプチド、ポリヌ
クレオチド、アゴニスト、またはアンタゴニストをまた利用して、上記で議論さ
れるように新脈管形成および肢の再形成を刺激し得る。
【０７７７】 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニスト、またはアンタゴニス
トを、傷害、火傷、手術後組織修復、および瘢痕に起因する創傷の処置にもまた
利用し得る。なぜなら、それらは異なる起源の種々の細胞（例えば、線維芽細胞
および骨格筋細胞）に対してマイトジェン性であり、それゆえダメージを受けた
組織または疾患組織の修復または置換を促進するからである。
【０７７８】 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストまたはアンタゴニスト
をまた利用して、ニューロンの成長を刺激し、そして特定のニューロンの障害ま
たは神経変性状態（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、およびＡＩＤ
Ｓ関連複合体）において生じるニューロンの損傷を処置および予防し得る。本発
明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストまたはアンタゴニストは、軟
骨細胞増殖を刺激する能力を有し得、それゆえ、骨および歯周の再形成を増強し
、そして組織移植片または骨の移植片における補助のためにされ得る。
【０７７９】 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストまたはアンタゴニスト
をまた利用して、ケラチノサイト増殖を刺激することにより、日焼けに起因する
皮膚の老化を予防し得る。
【０７８０】 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストまたはアンタゴニスト
をまた、抜け毛を予防するために利用し得る。なぜなら、ＦＧＦファミリーのメ
ンバーは、髪形成細胞を活性化し、そしてメラノサイト増殖を促進するからであ
る。同じ方針で、本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストまたは
アンタゴニストを利用して、他のサイトカインと組み合わせて使用した場合、造
血細胞および骨髄細胞の増殖および分化を刺激し得る。
【０７８１】 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストまたはアンタゴニスト
をまた使用して、移植前の器官を維持するか、または初代組織の細胞培養を支持
し得る。本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストまたはアンタゴ
ニストはまた使用して、初期胚において分化するように中胚葉起源の組織を誘導
し得る。
【０７８２】 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストもしくはアンタゴニス
トはまた、先に議論されるような造血系統に加えて、胚性幹細胞の分化もしくは
増殖を増加または減少し得る。
【０７８３】 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストもしくはアンタゴニス
トをまた使用して、哺乳動物の特徴（例えば、身長、体重、毛の色、眼の色、皮
膚、脂肪組織の割合、色素沈着、大きさ、および形（例えば、美容外科））を調
節し得る。同様に、本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストもし
くはアンタゴニストは、異化作用、同化作用、プロセシング、利用、およびエネ
ルギーの貯蔵に影響を及ぼす哺乳動物の代謝を調節するために使用され得る。
【０７８４】 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストもしくはアンタゴニス
トをまた使用して、肥満、悪液質、消耗病、食欲不振および過食症を含むがこれ
らに限定されない体重障害を処置し得る。
【０７８５】 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストもしくはアンタゴニス
トを使用して、バイオリズム、心臓（ｃａｒｉｃａｄｉｃ）リズム、うつ病（抑
うつ性の障害を含む）、暴力の傾向、痛みへの耐性、生殖能力（好ましくは、ア
クチビンまたはインヒビン様活性によって）、ホルモンレベルもしくは内分泌レ
ベル、食欲、性欲、記憶、ストレス、または他の認知の質に影響を及ぼすことに
よって、哺乳動物の精神状態または身体状態を変更し得る。
【０７８６】 本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、アゴニストもしくはアンタゴニス
トはまた、例えば、貯蔵能力、脂肪含有量、脂質、タンパク質、炭水化物、ビタ
ミン、ミネラル、補因子、または他の栄養成分を増加または減少させるような食
品添加物または保存剤として使用され得る。
【０７８７】 上記の適用は、広範な種類の宿主における用途を有する。このような宿主とし
ては、ヒト、マウス、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、ウマ、マウス、ラッ
ト、ハムスター、ブタ、ミニブタ（ｍｉｃｒｏ−ｐｉｇ）、ニワトリ、ヤギ、ウ
シ、ヒツジ、イヌ、ネコ、非ヒト霊長類、およびヒトが挙げられるが、これらに
限定されない。特定の実施形態において、この宿主は、マウス、ウサギ、ヤギ、
モルモット、ニワトリ、ラット、ハムスター、ブタ、ヒツジ、イヌまたはネコで
ある。好ましい実施形態において、この宿主は哺乳動物である。最も好ましい実
施形態において、この宿主はヒトである。
【０７８８】 （他の好ましい実施形態） 本願発明の他の好ましい実施形態は、配列番号Ｘのヌクレオチド配列またはそ
の相補鎖および／もしくはｃＤＮＡプラスミドＶのヌクレオチド配列中の少なく
とも約５０個連続したヌクレオチドの配列と少なくとも９５％同一であるヌクレ
オチド配列を含む、単離された核酸分子を含む。
【０７８９】 上記連続したヌクレオチドの配列が、表１中の配列番号Ｘについて同定された
位置の範囲で、配列番号Ｘのヌクレオチド配列に含まれる、核酸分子もまた好ま
しい。
【０７９０】 配列番号Ｘのヌクレオチド配列またはその相補鎖および／もしくはｃＤＮＡプ
ラスミドＶのヌクレオチド配列中の少なくとも約１５０個連続したヌクレオチド
の配列と少なくとも９５％同一であるヌクレオチド配列を含む、単離された核酸
分子もまた好ましい。
【０７９１】 配列番号Ｘのヌクレオチド配列またはその相補鎖および／もしくはｃＤＮＡプ
ラスミドＶのヌクレオチド配列中の少なくとも約５００個連続したヌクレオチド
の配列と少なくとも９５％同一であるヌクレオチド配列を含む、単離された核酸
分子はさらに好ましい。
【０７９２】 さらに好ましい実施形態は、表１中の配列番号Ｘについて同定された位置の範
囲で配列番号Ｘのヌクレオチド配列と少なくとも９５％同一であるヌクレオチド
配列を含む核酸分子である。
【０７９３】 さらに好ましい実施形態は、配列番号Ｘの完全なヌクレオチド配列またはその
相補鎖および／もしくはｃＤＮＡプラスミドＶのヌクレオチド配列と少なくとも
９５％同一であるヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子である。
【０７９４】 ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号Ｘのヌクレオチ
ド配列またはその相補鎖および／もしくはｃＤＮＡプラスミドＶのヌクレオチド
配列を含む核酸分子にハイブリダイズする単離された核酸分子もまた好ましく、
ここで上記のハイブリダイズする核酸分子は、ストリンジェントなハイブリダイ
ゼーション条件下で、Ａ残基のみまたはＴ残基のみからなるヌクレオチド配列を
有する核酸分子にハイブリダイズしない。
【０７９５】 ｃＤＮＡプラスミドＶを含むＤＮＡ分子を含む組成物もまた好ましい。
【０７９６】 ｃＤＮＡプラスミドＶのヌクレオチド配列中の少なくとも５０個連続したヌク
レオチドの配列と少なくとも９５％同一であるヌクレオチド配列を含む単離され
た核酸分子もまた好ましい。
【０７９７】 上記の少なくとも５０個連続したヌクレオチドの配列が、ｃＤＮＡプラスミド
Ｖによってコードされるオープンリーディングフレームの配列のヌクレオチド配
列中に含まれる、単離された核酸分子もまた好ましい。
【０７９８】 ｃＤＮＡプラスミドＶによってコードされるヌクレオチド配列中の少なくとも
１５０個連続したヌクレオチドの配列と少なくとも９５％同一であるヌクレオチ
ド配列を含む、単離された核酸分子もまた好ましい。
【０７９９】 さらに好ましい実施形態は、ｃＤＮＡプラスミドＶによってコードされるヌク
レオチド配列中の少なくとも５００個連続したヌクレオチドの配列と少なくとも
９５％同一であるヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子である。
【０８００】 さらに好ましい実施形態は、ｃＤＮＡプラスミドＶによってコードされる完全
なヌクレオチド配列と少なくとも９５％同一であるヌクレオチド配列を含む、単
離された核酸分子である。
【０８０１】 さらに好ましい実施形態は、以下：配列番号Ｘのヌクレオチド配列またはその
相補鎖およびｃＤＮＡプラスミドＶによりコードされるヌクレオチド配列からな
る群から選択される配列中の少なくとも５０個連続したヌクレオチドの配列と少
なくとも９５％同一であるヌクレオチド配列を含む核酸分子を、生物学的サンプ
ルにおいて検出するための方法であって、上記の方法は、上記の群から選択され
る配列と、上記のサンプル中の少なくとも１つの核酸分子のヌクレオチド配列と
を比較する工程、および上記サンプル中の上記核酸分子の配列が、上記の選択さ
れた配列に対して少なくとも９５％同一であるか否かを決定する工程を包含する
。
【０８０２】 上記の配列を比較する工程が、上記サンプル中の核酸分子と、上記の群から選
択される上記の配列を含む核酸分子との間の核酸ハイブリダイゼーションの程度
を決定する工程を包含する、上記方法もまた好ましい。同様に、上記の配列を比
較する工程が、上記サンプル中の核酸分子から決定されるヌクレオチド配列と、
上記の群から選択される配列とを比較する工程によって実施される、上記方法も
また好ましい。この核酸分子は、ＤＮＡ分子またはＲＮＡ分子を含み得る。
【０８０３】 さらに好ましい実施形態は、生物学的サンプルの種、組織、または細胞型を同
定するための方法であって、この方法は、以下からなる群から選択される配列中
の少なくとも５０個連続したヌクレオチドの配列と少なくとも９５％同一である
ヌクレオチド配列を含む上記サンプル中の核酸分子を（もしあれば）検出する工
程を包含する：配列番号Ｘのヌクレオチド配列またはその相補鎖およびｃＤＮＡ
プラスミドＶによりコードされるヌクレオチド配列。
【０８０４】 生物学的サンプルの種、組織、または細胞型を同定するための方法は、少なく
とも２つのヌクレオチド配列のパネル中のヌクレオチド配列を含む核酸分子を検
出する工程を包含し得、ここで上記パネル中の少なくとも１つの配列は、上記の
群から選択される配列中の少なくとも５０個連続したヌクレオチドの配列と少な
くとも９５％同一である。
【０８０５】 タンパク質をコードする、配列番号Ｘのヌクレオチド配列もしくはその相補鎖
またはｃＤＮＡプラスミドＶのヌクレオチド配列の、異常な構造または発現と関
連する病理学的状態を、被験体において診断するための方法もまた好ましく、こ
の方法は、以下からなる群から選択される配列中の少なくとも５０個連続したヌ
クレオチドの配列と少なくとも９５％同一であるヌクレオチド配列を含む、核酸
分子を、（もしあれば）上記被験体から得られる生物学的サンプルにおいて検出
する工程を包含する：配列番号Ｘのヌクレオチド配列またはその相補鎖およびｃ
ＤＮＡプラスミドＶのヌクレオチド配列。
【０８０６】 病理学的状態を診断するための方法は、少なくとも２つのヌクレオチド配列の
パネル中のヌクレオチド配列を含む核酸分子を検出する工程を包含し得、ここで
、上記パネル中の少なくとも１つの配列は、上記群から選択される配列中の少な
くとも５０個連続したヌクレオチドの配列と少なくとも９５％同一である。
【０８０７】 上記の核酸分子のヌクレオチド配列が、少なくとも２つのヌクレオチド配列の
パネルを含む、単離された核酸分子を含む組成物もまた好ましく、ここで上記の
パネル中の少なくとも１つの配列は、以下からなる群から選択される配列中の少
なくとも５０個連続したヌクレオチドの配列と少なくとも９５％同一である：配
列番号Ｘのヌクレオチド配列またはその相補鎖およびｃＤＮＡプラスミドＶによ
りコードされるヌクレオチド配列。この核酸分子は、ＤＮＡ分子またはＲＮＡ分
子を含み得る。
【０８０８】 配列番号Ｙのポリペプチド配列；配列番号Ｘもしくはその相補鎖によりコード
されるポリペプチドおよび／またはｃＤＮＡプラスミドＶによりコードされるポ
リペプチド中の少なくとも約１０個連続したアミノ酸の配列と少なくとも９０％
同一のアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチドもまた好ましい。
【０８０９】 配列番号Ｙのアミノ酸配列；配列番号Ｘもしくはその相補鎖によりコードされ
るポリペプチドのアミノ酸配列および／またはｃＤＮＡプラスミドＶによりコー
ドされるポリペプチドのアミノ酸配列中の少なくとも約３０個連続したアミノ酸
の配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチド
もまた好ましい。
【０８１０】 配列番号Ｙのアミノ酸配列；配列番号Ｘもしくはその相補鎖によりコードされ
るポリペプチドのアミノ酸配列および／またはｃＤＮＡプラスミドＶによりコー
ドされるポリペプチドのアミノ酸配列中の少なくとも約１００個連続したアミノ
酸の配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチ
ドはさらに好ましい。
【０８１１】 配列番号Ｙの完全アミノ酸配列；配列番号Ｘもしくはその相補鎖によりコード
されるポリペプチドの完全アミノ酸配列および／またはｃＤＮＡプラスミドＶに
よりコードされるポリペプチドの完全アミノ酸配列と少なくとも９５％同一のア
ミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチドはさらに好ましい。
【０８１２】 ｃＤＮＡプラスミドＶによりコードされるポリペプチドの完全アミノ酸配列中
の少なくとも約１０個連続したアミノ酸の配列と少なくとも９０％同一のアミノ
酸配列を含む、単離されたポリペプチドはさらに好ましい。
【０８１３】 上記の連続したアミノ酸の配列が、ｃＤＮＡプラスミドＶによってコードされ
るポリペプチド；配列番号Ｘもしくはその相補鎖によりコードされるポリペプチ
ドおよび／または配列番号Ｙのポリペプチド配列の一部のアミノ酸配列に含まれ
る、ポリペプチドもまた好ましい。
【０８１４】 ｃＤＮＡプラスミドＶによってコードされるポリペプチドのアミノ酸配列中の
少なくとも約３０個連続したアミノ酸の配列と少なくとも９５％同一であるアミ
ノ酸配列を含む、単離されたポリペプチドもまた、好ましい。
【０８１５】 ｃＤＮＡプラスミドＶによってコードされるポリペプチドのアミノ酸配列中の
少なくとも約１００個連続したアミノ酸の配列と少なくとも９５％同一であるア
ミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチドもまた、好ましい。
【０８１６】 ｃＤＮＡプラスミドＶによってコードされるポリペプチドのアミノ酸配列と少
なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチドもまた
、好ましい。
【０８１７】 以下からなる群から選択される配列中の、少なくとも１０個連続したアミノ酸
の配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドに対して
特異的に結合する単離された抗体は、さらに好ましい：配列番号Ｙのポリペプチ
ド；配列番号Ｘもしくはその相補鎖によりコードされるポリペプチドおよびｃＤ
ＮＡプラスミドＶによりコードされるポリペプチド。
【０８１８】 以下：配列番号Ｙのポリペプチド配列；配列番号Ｘもしくはその相補鎖により
コードされるポリペプチドおよびｃＤＮＡプラスミドＶによりコードされるポリ
ペプチドからなる群から選択された配列中の、少なくとも１０個連続したアミノ
酸の配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドを、生
物学的サンプルにおいて検出する方法はさらに好ましく；この方法は、このサン
プル中における少なくとも１つのポリペプチド分子のアミノ酸配列をこの群から
選択された配列と比較する工程およびこのサンプル中におけるこのポリペプチド
分子の配列が、少なくとも１０個連続したアミノ酸のこの配列と少なくとも９０
％同一であるかどうかを決定する工程を含む。
【０８１９】 このサンプル中における少なくとも１つのポリペプチド分子のアミノ酸配列を
、この群から選択された配列と比較するこの工程が、このサンプル中のポリペプ
チドの、以下：配列番号Ｙのポリペプチド配列；配列番号Ｘもしくはその相補鎖
によりコードされるポリペプチドおよびｃＤＮＡプラスミドＶによりコードされ
るポリペプチドからなる群から選択された配列中の少なくとも１０個連続したア
ミノ酸の配列に対して、少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むポリペ
プチドと特異的に結合する抗体に対する特異的な結合の程度を決定することを含
む、上記の方法もまた、好ましい。
【０８２０】 配列を比較する工程が、このサンプル中のポリペプチド分子から決定されたア
ミノ酸配列を、この群から選択されたこの配列と比較することによって行われる
、上記の方法もまた好ましい。
【０８２１】 生物学的サンプルの種、組織または細胞型を同定する方法もまた好ましく、こ
こでこの方法は、もし存在するならば、以下からなる群から選択される配列にお
ける少なくとも１０個連続したアミノ酸の配列と少なくとも９０％同一であるア
ミノ酸配列を含むポリペプチド分子をこのサンプル中で検出する工程を含む：配
列番号Ｙのポリペプチド配列；配列番号Ｘもしくはその相補鎖によりコードされ
るポリペプチドおよびｃＤＮＡプラスミドＶによりコードされるポリペプチド。
【０８２２】 生物学的サンプルの種、組織または細胞型を同定する上記の方法もまた好まし
く、ここでこの方法は、少なくとも２つのアミノ酸配列のパネルにおけるアミノ
酸配列を含むポリペプチド分子を検出する工程を含み、ここでこのパネル中の少
なくとも１つの配列は、上記の群から選択された配列における少なくとも１０個
連続したアミノ酸の配列と少なくとも９０％同一である。
【０８２３】 被験体において、表１において同定された、ポリペプチドをコードする核酸配
列の異常な構造または発現に関連する病的状態を診断する方法もまた、好ましく
、ここで、この方法は、この被験体から得られた生物学的サンプルにおいて、少
なくとも２つのアミノ酸配列のパネルにおけるアミノ酸配列を含むポリペプチド
分子を検出する工程を含み、ここでこのパネル中の少なくとも１つの配列は、以
下からなる群から選択される配列における少なくとも１０個連続したアミノ酸の
配列と少なくとも９０％同一である：配列番号Ｙのポリペプチド配列；配列番号
Ｘもしくはその相補鎖によりコードされるポリペプチドおよびｃＤＮＡプラスミ
ドＶによりコードされるポリペプチド。
【０８２４】 これらの方法のいずれかにおいて、上記ポリペプチド分子を検出する工程は、
抗体を使用することを包含する。
【０８２５】 以下からなる群から選択された配列中の、少なくとも１０個連続したアミノ酸
の配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコード
するヌクレオチド配列と、少なくとも９５％同一であるヌクレオチド配列を含む
、単離された核酸分子もまた、好ましい：配列番号Ｙのポリペプチド配列；配列
番号Ｘもしくはその相補鎖によりコードされるポリペプチドおよびｃＤＮＡプラ
スミドＶによりコードされるポリペプチド。
【０８２６】 ポリペプチドをコードする上記ヌクレオチド配列が、原核生物宿主でのこのポ
リペプチドの発現について最適化されている、単離された核酸分子もまた、好ま
しい。
【０８２７】 上記ポリペプチドが以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、単離
された核酸分子もまた、好ましい：配列番号Ｙのポリペプチド配列；配列番号Ｘ
もしくはその相補鎖によりコードされるポリペプチドおよびｃＤＮＡプラスミド
Ｖによりコードされるポリペプチド。
【０８２８】 上記の単離された核酸分子のいずれかをベクター中に挿入する工程を含む、組
換えベクターの作製方法はさらに好ましい。この方法によって生成された組換え
ベクターも、好ましい。宿主細胞中にベクターを導入する工程を含む、組換え宿
主細胞を作製する方法、ならびにこの方法によって生成された組換え宿主細胞も
また、好ましい。
【０８２９】 単離されたポリペプチドを作製する方法であって、このポリペプチドが発現さ
れるような条件下でこの組換え宿主細胞を培養する工程、およびこのポリペプチ
ドを回収する工程を包含する、方法もまた好ましい。この組換え宿主細胞が真核
生物細胞であり、そしてこのポリペプチドが以下からなる群から選択されたアミ
ノ酸配列を含むヒトタンパク質である、単離されたポリペプチドを作製するこの
方法もまた好ましい：配列番号Ｙのポリペプチド配列；配列番号Ｘもしくはその
相補鎖によりコードされるポリペプチドおよびｃＤＮＡプラスミドＶによりコー
ドされるポリペプチド。この方法によって生成された単離されたポリペプチドも
また、好ましい。
【０８３０】 増加したレベルのタンパク質活性を必要とする個体を処置する方法もまた、好
ましく、ここで、この方法は、このような個体に、この個体においてこのタンパ
ク質の活性のレベルを増加させるのに有効な量の、本願発明の単離されたポリペ
プチド、ポリヌクレオチド、その免疫原性フラグメントもしくはアナログ、結合
因子、抗体、あるいは抗原結合フラグメントを含む治療剤を投与する工程を包含
する。
【０８３１】 減少したレベルのタンパク質活性を必要とする個体を処置する方法もまた、好
ましく、ここで、この方法は、このような個体に、この個体においてこのタンパ
ク質の活性のレベルを減少させるのに有効な量の、本願発明の単離されたポリペ
プチド、ポリヌクレオチド、その免疫原性フラグメントもしくはアナログ、結合
因子、抗体、あるいは抗原結合フラグメントを含む治療剤を投与する工程を包含
する。
【０８３２】 本発明の特定の実施形態では、表２の４番目の列に列挙される各「コンティグ
ＩＤ」について、好ましくは、表２の５番目の列で参照されるヌクレオチド配列
、および一般式ａ−ｂにより記載されるヌクレオチド配列（ここでａおよびｂは
、表２の列３で参照される対応する配列番号Ｘについて独自に決定される）を含
むか、またはそのようなヌクレオチド配列からなる、１つ以上のポリヌクレオチ
ドが除外される。さらに特定の実施形態は、表２の５列目において言及される特
定のポリヌクレオチド配列の１、２、３、４個、またはそれ以上を除外するポリ
ヌクレオチド配列に関する。
【０８３３】 好ましくは、一般式ｃ−ｄによって記載されるヌクレオチド配列を含む１つ以
上のポリヌクレオチドが本発明から除外され、ここでｃおよびｄの両方は、配列
番号Ｘに示されるヌクレオチド残基の位置に対応し、そしてｄは、ｃ＋１４以上
である。
【０８３４】 この列挙は、この一般式により除外され得る配列の全てを含むことを決して意
味せず、この表は、単に例示的な例である。これらの登録を通じて利用可能な全
ての文献は、本明細書中でその全体が参考として援用される。
【０８３５】
【表２】
【０８３６】
【表３】
【０８３７】
【表４】 概して、本発明を記載してきたが、本発明は以下の実施例を参照することによ
って容易に理解される。この実施例は例示の目的のために提供されるものであり
、限定することを意図するものではない。
【０８３８】 （実施例） （実施例１：選択されたｃＤＮＡクローンの寄託されたサンプルからの単離） 引用されるＡＴＣＣ寄託物中の各ｃＤＮＡクローンは、プラスミドベクター中
に含まれる。表１は、各クローンが単離されたｃＤＮＡライブラリーを構築する
ために用いられたベクターを示す。多くの場合において、ライブラリーを構築す
るために使用されたベクターは、プラスミドが切り出されたファージベクターで
ある。直下の表は、ｃＤＮＡライブラリーを構築する際に使用される各ファージ
ベクターについて関連するプラスミドを相関づける。例えば、特定のクローンが
ベクター「Ｌａｍｂｄａ Ｚａｐ」中に単離されていると表１に示される場合、
対応する寄託クローンは、「ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ」である。
【０８３９】
【表５】 ベクターＬａｍｂｄａ Ｚａｐ（米国特許第５，１２８，２５６号および同第
５，２８６，６３６号）、Ｕｎｉ−Ｚａｐ ＸＲ（米国特許第５，１２８，２５
６号および同第５，２８６，６３６号）、Ｚａｐ Ｅｘｐｒｅｓｓ（米国特許第
５，１２８，２５６号および同第５，２８６，６３６号）、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉ
ｐｔ（ｐＢＳ）（Ｓｈｏｒｔら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，１６
：７５８３−７６００（１９８８）；Ａｌｔｉｎｇ−Ｍｅｅｓら、Ｎｕｃｌｅｉ
ｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，１７：９４９４（１９８９））ならびにｐＢＫ（Ａ
ｌｔｉｎｇ−Ｍｅｅｓら、Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，５：５８−６１（１９９２）
）は、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．、１
１０１１ Ｎ．Ｔｏｒｒｅｙ Ｐｉｎｅｓ Ｒｏａｄ、Ｌａ Ｊｏｌｌａ，ＣＡ
，９２０３７から市販されている。ｐＢＳは、アンピシリン耐性遺伝子を含み、
そしてｐＢＫはネオマイシン耐性遺伝子を含む。両方とも、Ｅ．ｃｏｌｉ株ＸＬ
−１ Ｂｌｕｅ（これもまた、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅから入手可能である）に形
質転換され得る。ｐＢＳは、ＳＫ＋、ＳＫ−、ＫＳ＋およびＫＳの４形態で入荷
する。ＳおよびＫとは、ポリリンカー領域（「Ｓ」とはＳａｃＩであり、そして
「Ｋ」とは、ＫｐｎＩのことであり、これらは、それぞれのリンカーの各末端で
の最初の部位である）に隣接するＴ７およびＴ３プライマー配列に対するポリリ
ンカーの配向をいう。「＋」または「−」とは、ある方向においてｆ１ ｏｒｉ
から開始される一本鎖レスキューがセンス鎖ＤＮＡを生成し、そして他方におい
てアンチセンス鎖ＤＮＡを生成するようなｆ１複製起点（「ｏｒｉ」）の配向を
いう。
【０８４０】 ベクターｐＳｐｏｒｔ１、ｐＣＭＶＳｐｏｒｔ２．０およびｐＣＭＶＳｐｏｒ
ｔ３．０をＬｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ．、Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ６
００９、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ ２０８９７から入手した。全てのＳ
ｐｏｒｔベクターはアンピシリン耐性遺伝子を含み、そしてＥ．ｃｏｌｉ株ＤＨ
１０Ｂ（これもまた、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから入手可能である
）に形質転換され得る。（例えば、Ｇｒｕｂｅｒ，Ｃ．Ｅ．ら、Ｆｏｃｕｓ １
５：５９（１９９３）を参照のこと）。ベクターｌａｆｍｉｄ ＢＡ（Ｂｅｎｔ
ｏ Ｓｏａｒｅｓ、Ｃｏｌｕｍｂｉａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ、ＮＹ）は、アン
ピシリン耐性遺伝子を含み、そしてＥ．ｃｏｌｉ株ＸＬ−１ Ｂｌｕｅに形質転
換され得る。ベクターｐＣＲ（登録商標）２．１（これはＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ
、１６００ Ｆａｒａｄａｙ Ａｖｅｎｕｅ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ ９２０
０８から入手可能である）は、アンピシリン耐性遺伝子を含み、そしてＥ．ｃｏ
ｌｉ株ＤＨ１０Ｂ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから入手可能である）
に形質転換され得る（例えば、Ｃｌａｒｋ、Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，１
６：９６７７−９６８６（１９８８）およびＭｅａｄら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏ
ｌｏｇｙ，９：（１９９１）を参照のこと）。好ましくは、本発明のポリヌクレ
オチドは、表１における特定のクローンについて同定されたファージベクター配
列、ならびに上記に示された対応するプラスミドベクター配列を含まない。
【０８４１】 表１に引用される、任意の所定のｃＤＮＡクローンについてＡＴＣＣ受託番号
を与えられたサンプルにおける寄託された物質はまた、１つ以上のさらなるプラ
スミド（これは各々、その所定のクローンとは異なるｃＤＮＡクローンを含む）
を含み得る。従って、同じＡＴＣＣ受託番号を共有する寄託物は、表１に示され
る各ｃＤＮＡクローンのためのプラスミドを少なくとも含む。代表的には、表１
に引用される各ＡＴＣＣ寄託物のサンプルは、ほぼ等量（重量で）の約５０個の
プラスミドＤＮＡ（これは各々、異なるｃＤＮＡクローンを含む）の混合物を含
む；しかし、このような寄託サンプルは、５０個よりも多いかまたは少ないｃＤ
ＮＡクローン（約５００個までのｃＤＮＡクローン）のためのプラスミドを含み
得る。
【０８４２】 表１における特定のクローンについて引用されるプラスミドＤＮＡの寄託サン
プルからそのクローンを単離するために２つのアプローチが使用され得る。第一
に、プラスミドを、配列番号Ｘに対応するポリヌクレオチドプローブを使用して
、クローンをスクリーニングすることによって直接単離する。
【０８４３】 特に、３０〜４０ヌクレオチドを有する特定のポリヌクレオチドを、報告され
ている配列に従って、Ａｐｐｌｉｅｄ ＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓのＤＮＡ合成装置
を使用して合成する。オリゴヌクレオチドを、例えば、３２Ｐ−γ−ＡＴＰで、
Ｔ４ポリヌクレオチドキナーゼを用いて標識し、そして慣用の方法に従って精製
する。（例えば、Ｍａｎｉａｔｉｓら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：
Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂ
ｏｒ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ、ＮＹ（１９８２））。プラスミド
混合物を、当業者に公知の技術（例えば、ベクター供給者によって提供される技
術または上記で引用された関連の刊行物もしくは特許において提供される技術）
を用いて、上記のような適切な宿主（例えば、ＸＬ−１ Ｂｌｕｅ（Ｓｔｒａｔ
ａｇｅｎｅ））に形質転換する。形質転換体を１．５％寒天プレート（適切な選
択薬剤、例えば、アンピシリンを含む）に、１プレートあたり約１５０の形質転
換体（コロニー）の密度でプレートする。これらのプレートを、細菌コロニース
クリーニングについての慣用の方法（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第２版
、（１９８９）、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｙ Ｐｒｅｓｓ、１．９３〜１．１０４頁）または当業者に公知の他の技術に従
って、ナイロンメンブレンを使用してスクリーニングする。
【０８４４】 あるいは、配列番号Ｘの両端（すなわち、表１に規定されるクローンの５’Ｎ
Ｔおよび３’ＮＴによって囲まれる配列番号Ｘの領域内）に由来する、１７〜２
０ヌクレオチドの２つのプライマーを合成し、そしてこれらを使用して、寄託さ
れたｃＤＮＡプラスミドを鋳型として用いて、所望のｃＤＮＡを増幅する。ポリ
メラーゼ連鎖反応を、慣用の条件下で、例えば、０．５μｇの上記ｃＤＮＡ鋳型
との反応混合物の２５μｌ中で実施する。簡便な反応混合物は、１．５〜５ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．０１％（ｗ／ｖ）ゼラチン、それぞれ２０μＭのｄＡＴＰ、
ｄＣＴＰ、ｄＧＴＰ、ｄＴＴＰ、２５ｐｍｏｌの各プライマーおよび０．２５ユ
ニットのＴａｑポリメラーゼである。３５サイクルのＰＣＲ（９４℃での変性を
１分間；５５℃でのアニールを１分間；７２℃での伸長を１分間）を、Ｐｅｒｋ
ｉｎ−Ｅｌｍｅｒ Ｃｅｔｕｓ自動化サーマルサイクラーを用いて実施する。増
幅産物をアガロースゲル電気泳動により分析し、そして予想される分子量のＤＮ
Ａバンドを切り出し、そして精製する。ＰＣＲ産物を、ＤＮＡ産物をサブクロー
ニングおよび配列決定することによって選択された配列であることを確認する。
【０８４５】 寄託されたクローンに存在し得ない遺伝子の５’非コード部分または３’非コ
ード部分の同定のために、いくつかの方法が利用可能である。これらの方法は、
以下を含むがこれらに限定されない：フィルタープローブ探索、特異的プローブ
を使用するクローン富化、および当該分野で周知である５’および３’「ＲＡＣ
Ｅ」プロトコルと類似するかまたは同一のプロトコル。例えば、５’ＲＡＣＥに
類似する方法は、所望の全長転写物の５’末端の欠失を生成するために利用可能
である（Ｆｒｏｍｏｎｔ−Ｒａｃｉｎｅら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅ
ｓ．，２１（７）：１６８３−１６８４（１９９３））。
【０８４６】 簡潔には、特定のＲＮＡオリゴヌクレオチドを、全長遺伝子ＲＮＡ転写物をお
そらく含むＲＮＡの集団の５’末端に連結する。連結されたＲＮＡオリゴヌクレ
オチドに特異的なプライマーおよび目的の遺伝子の公知の配列に特異的なプライ
マーを含むプライマーセットを使用して、所望の全長遺伝子の５’部分をＰＣＲ
増幅する。次いで、この増幅した産物を配列決定し得、そしてこれを使用して全
長遺伝子を生成し得る。
【０８４７】 この上記の方法は、所望の供給源から単離された全ＲＮＡを用いて開始するが
、ポリＡ＋ＲＮＡをも使用し得る。次いで、ＲＮＡ調製物を、必要ならばホスフ
ァターゼで処理して、後のＲＮＡリガーゼ工程を妨害し得る分解または損傷ＲＮ
Ａの５’リン酸基を排除し得る。次いで、ホスファターゼを不活化するべきであ
り、そしてＲＮＡをメッセンジャーＲＮＡの５’末端に存在するキャップ構造を
除去するために、タバコ酸ピロホスファターゼを用いて処理するべきである。こ
の反応は、次いでＴ４ ＲＮＡリガーゼを用いてＲＮＡオリゴヌクレオチドに連
結され得る、キャップ切断ＲＮＡの５’末端に５’リン酸基を残す。
【０８４８】 この改変型ＲＮＡ調製物を、遺伝子特異的なオリゴヌクレオチドを用いる、第
一鎖ｃＤＮＡ合成のための鋳型として使用する。第一鎖合成反応物を、連結され
たＲＮＡオリゴヌクレオチドに特異的なプライマーおよび目的の遺伝子の公知の
配列に特異的なプライマーを用いる、所望の５’末端のＰＣＲ増幅のための鋳型
として使用する。次いで、得られた生成物を配列決定し、そして分析して５’末
端配列が所望の遺伝子に属することを確認する。
【０８４９】 （実施例２：ポリヌクレオチドに対応するゲノムクローンの単離） ヒトゲノムＰ１ライブラリー（Ｇｅｎｏｍｉｃ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｉｎｃ．）
を、実施例１に記載される方法に従って、配列番号Ｘに対応するｃＤＮＡ配列に
ついて選択されたプライマーを用いるＰＣＲによってスクリーニングする（Ｓａ
ｍｂｒｏｏｋもまた参照のこと）。
【０８５０】 （実施例３：ポリペプチドの組織分布） 本発明のポリヌクレオチドのｍＲＮＡ発現の組織分布を、とりわけ、Ｓａｍｂ
ｒｏｏｋらによって記載されるノーザンブロット分析についてのプロトコルを用
いて決定する。例えば、実施例１に記載される方法によって生成されるｃＤＮＡ
プローブを、ｒｅｄｉｐｒｉｍｅＴＭ ＤＮＡ ｌａｂｅｌｉｎｇ ｓｙｓｔｅ
ｍ（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ）を用いて、製造者の指示に
従って、Ｐ３２で標識する。標識後、プローブを、ＣＨＲＯＭＡ ＳＰＩＮ−１
００ＴＭカラム（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｉｎｃ．）を
使用して、製造者のプロトコル番号ＰＴ１２００−１に従って精製する。次いで
、この精製した標識プローブを使用して、種々のヒト組織をｍＲＮＡ発現につい
て試験する。
【０８５１】 種々のヒト組織（Ｈ）またはヒト免疫系組織（ＩＭ）を含む多重組織ノーザン
（ＭＴＮ）ブロット（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）を、ＥｘｐｒｅｓｓＨｙｂＴＭハイブ
リダイゼーション溶液（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）を用いて、製造者のプロトコル番号
ＰＴ１１９０−１に従って、標識プローブで試験する。ハイブリダイゼーション
および洗浄後、ブロットをマウントして、そして−７０℃で一晩フィルムに曝露
し、そしてフィルムを標準的な手順に従って現像する。
【０８５２】 （実施例４：ポリヌクレオチドの染色体マッピング） オリゴヌクレオチドプライマーのセットを、配列番号Ｘの５’末端の配列に従
って設計する。このプライマーは、好ましくは約１００ヌクレオチドにわたる。
次いで、このプライマーセットを、以下のセットの条件下でポリメラーゼ連鎖反
応に使用する：９５℃で３０秒；５６℃で１分；７０℃で１分。このサイクルを
３２回反復し、次いで１回、７０℃で５分間のサイクルを行う。個々の染色体ま
たは染色体フラグメントを含む体細胞ハイブリッドパネル（Ｂｉｏｓ，Ｉｎｃ）
に加えて、ヒト、マウス、およびハムスターのＤＮＡを鋳型として使用する。反
応物を、８％ポリアクリルアミドゲルまたは３．５％アガロースゲルのいずれか
で分析する。染色体マッピングを、特定の体細胞ハイブリッドにおける約１００
ｂｐのＰＣＲフラグメントの存在によって決定する。
【０８５３】 （実施例５：ポリペプチドの細菌発現） 本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを、実施例１に概説する
ように、ＤＮＡ配列の５’および３’末端に対応するＰＣＲオリゴヌクレオチド
プライマーを使用して増幅し、挿入フラグメントを合成する。ｃＤＮＡ挿入物を
増幅するために使用されるプライマーは、発現ベクターに増幅産物をクローニン
グするために、好ましくはＢａｍＨＩおよびＸｂａＩのような制限部位、ならび
に必要な場合、開始／終止コドンを含むべきである。例えば、ＢａｍＨＩおよび
ＸｂａＩは、細菌発現ベクターｐＱＥ−９（Ｑｉａｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｃｈａｔ
ｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ）の制限酵素部位に対応する。このプラスミドベクターは、
抗生物質耐性（Ａｍｐｒ）、細菌の複製起点（ｏｒｉ）、ＩＰＴＧで調節可能な
プロモーター／オペレーター（Ｐ／Ｏ）、リボソーム結合部位（ＲＢＳ）、６−
ヒスチジンタグ（６−Ｈｉｓ）、および制限酵素クローニング部位をコードする
。
【０８５４】 ｐＱＥ−９ベクターをＢａｍＨＩおよびＸｂａＩで消化し、そして、増幅され
たフラグメントを細菌性ＲＢＳにおいて開始されるリーディングフレームを維持
するｐＱＥ−９ベクターに連結する。次いで、連結混合物を、ｌａｃＩリプレッ
サーを発現し、またカナマイシン耐性（Ｋａｎｒ）を与えるプラスミドｐＲＥＰ
４の多重コピーを含む、Ｅ．ｃｏｌｉ株Ｍ１５／ｒｅｐ４（Ｑｉａｇｅｎ，Ｉｎ
ｃ．）を形質転換するために使用する。形質転換体を、それらのＬＢプレート上
で生育できる能力によって同定し、そしてアンピシリン／カナマイシン耐性コロ
ニーを選択する。プラスミドＤＮＡを単離し、そして制限分析によって確認する
。
【０８５５】 所望の構築物を含むクローンを、Ａｍｐ（１００μｇ／ｍｌ）およびＫａｎ（
２５μｇ／ｍｌ）の両方を補充したＬＢ培地における液体培養で一晩（Ｏ／Ｎ）
増殖させる。Ｏ／Ｎ培養物を、１：１００〜１：２５０の比で大量培養に接種す
るために使用する。細胞を、０．４〜０．６の間の吸光度６００（Ｏ．Ｄ．６０ ０ ）まで増殖させる。次いで、ＩＰＴＧ（イソプロピル−Ｂ−Ｄ−チオガラクト
ピラノシド）を最終濃度１ｍＭになるように加える。ＩＰＴＧは、ｌａｃＩリプ
レッサーの不活化によりＰ／Ｏの活性化（ｃｌｅａｒｉｎｇ）を誘導し、遺伝子
発現の増加を導く。
【０８５６】 細胞を、さらに３〜４時間増殖させる。次いで、細胞を遠心分離（６０００×
ｇで２０分間）によって収集する。細胞ペレットを、カオトロピック試薬である
６ＭグアニジンＨＣｌ中に、４℃で３〜４時間攪拌することによって可溶化させ
る。細胞細片を遠心分離によって取り除き、そしてポリペプチドを含む上清を、
ニッケル−ニトリロ−三酢酸（「Ｎｉ−ＮＴＡ」）アフィニティー樹脂カラムに
ロードする（ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．（前出）より入手可能）。６×Ｈｉｓタグ
を有するタンパク質は、Ｎｉ−ＮＴＡ樹脂に高い親和性で結合し、そして単純な
１工程手順で精製され得る（詳細については、Ｔｈｅ ＱＩＡｅｘｐｒｅｓｓｉ
ｏｎｉｓｔ（１９９５）ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．（前出）を参照のこと）。
【０８５７】 手短に言えば、上清を、６Ｍグアニジン−ＨＣｌ、ｐＨ８のカラムにロードし
、カラムを、最初に１０容量の６Ｍグアニジン−ＨＣｌ、ｐＨ８で洗浄し、次い
で１０容量の６Ｍグアニジン−ＨＣｌ、ｐＨ６で洗浄し、最後にポリペプチドを
、６Ｍグアニジン−ＨＣｌ、ｐＨ５で溶出する。
【０８５８】 次いで、精製したタンパク質を、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）または５
０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６の緩衝液および２００ｍＭ ＮａＣｌに対して透
析することにより再生させる。あるいは、タンパク質はＮｉ−ＮＴＡカラムに固
定化している間に、首尾よく再折り畳みされ得る。推奨条件は以下の通りである
：プロテアーゼインヒビターを含む、５００ｍＭ ＮａＣｌ、２０％グリセロー
ル、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ ｐＨ７．４中の６Ｍ〜１Ｍ尿素の直線勾配を
使用する再生。再生は１．５時間以上の時間をかけて行うべきである。再生後、
タンパク質を２５０ｍＭイミダゾールの添加によって溶出する。イミダゾールを
、ＰＢＳまたは５０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ６の緩衝液および２００ｍＭ Ｎａ
Ｃｌに対する最終の透析工程によって除去する。精製したタンパク質を、４℃で
保存するか、または−８０℃で凍結する。
【０８５９】 上記の発現ベクターに加えて、本発明はさらに、本発明のポリヌクレオチドに
作動可能に連結されたファージオペレーターおよびプロモーターエレメントを含
む、ｐＨＥ４ａと呼ばれる発現ベクターを含む（ＡＴＣＣ受託番号２０９６４５
、１９９８年２月２５日に寄託。）。このベクターは以下を含む：１）選択マー
カーとしてのネオマイシンホスホトランスフェラーゼ遺伝子、２）Ｅ．ｃｏｌｉ
複製起点、３）Ｔ５ファージプロモーター配列、４）２つのｌａｃオペレーター
配列、５）シャイン−ダルガーノ配列、および６）ラクトースオペロンリプレッ
サー遺伝子（ｌａｃＩｑ）。複製起点（ｏｒｉＣ）は、ｐＵＣ１９（ＬＴＩ，Ｇ
ａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）に由来する。プロモーター配列およびオペレー
ター配列を合成的に作製する。
【０８６０】 ＮｄｅＩおよびＸｂａＩ、ＢａｍＨＩ、ＸｈｏＩ、またはＡｓｐ７１８によっ
てベクターを制限処理し、制限生成物をゲルで泳動し、そしてより大きなフラグ
メント（スタッファー（ｓｔｕｆｆｅｒ）フラグメントは約３１０塩基対である
べきである）を単離することによって、ＤＮＡをｐＨＥａに挿入し得る。ＤＮＡ
挿入物を、ＮｄｅＩ（５’プライマー）およびＸｂａＩ、ＢａｍＨＩ、ＸｈｏＩ
、またはＡｓｐ７１８（３’プライマー）に対する制限部位を有するＰＣＲプラ
イマーを使用して、実施例１に記載のＰＣＲプロトコールに従って生成する。Ｐ
ＣＲ挿入物を、ゲル精製し、そして適合する酵素で制限処理する。挿入物および
ベクターを標準的なプロトコールに従って連結する。
【０８６１】 操作されたベクターは、上記のプロトコールにおいて、細菌系でタンパク質を
発現させるために容易に置換され得る。
【０８６２】 （実施例６：封入体からのポリペプチドの精製） 以下の代替的な方法は、ポリペプチドが封入体の形態で存在する場合に、Ｅ．
ｃｏｌｉ中で発現されたポリペプチドを精製するために使用され得る。他に指定
されない場合には、以下のすべての工程は４〜１０℃で行われる。
【０８６３】 Ｅ．ｃｏｌｉ発酵の生産期の完了後、細胞培養物を４〜１０℃に冷却し、そし
て１５，０００ｒｐｍの連続遠心分離（Ｈｅｒａｅｕｓ Ｓｅｐａｔｅｃｈ）に
よって細胞を収集する。細胞ペーストの単位重量あたりのタンパク質の予想され
る収量および必要とされる精製タンパク質の量に基づいて、細胞ペーストの適切
な量（重量による）を、１００ｍＭ Ｔｒｉｓ、５０ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ７．
４を含む緩衝溶液に懸濁する。細胞を、高剪断ミキサーを使用して均質な懸濁液
に分散させる。
【０８６４】 次いで、細胞をマイクロフルイダイザー（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）（
Ｍｉｃｒｏｆｕｉｄｉｃｓ，Ｃｏｒｐ．またはＡＰＶ Ｇａｕｌｉｎ，Ｉｎｃ．
）に２回、４０００〜６０００ｐｓｉで溶液を通すことによって溶解する。次い
でホモジネートを、最終濃度０．５Ｍ ＮａＣｌになるようにＮａＣｌ溶液と混
合し、続いて７０００×ｇで１５分間遠心分離を行う。得られたペレットを、０
．５Ｍ ＮａＣｌ、１００ｍＭ Ｔｒｉｓ、５０ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４を
使用して再度洗浄する。
【０８６５】 得られた洗浄した封入体を、１．５Ｍ塩酸グアニジン（ＧｕＨＣｌ）で２〜４
時間可溶化する。７０００×ｇで１５分間の遠心分離の後、ペレットを廃棄し、
そしてポリペプチドを含む上清を４℃で一晩インキュベートしてさらなるＧｕＨ
Ｃｌ抽出を可能にする。
【０８６６】 不溶性粒子を除去するための高速遠心分離（３０，０００×ｇ）に続き、Ｇｕ
ＨＣｌ可溶化タンパク質を、ＧｕＨＣｌ抽出物と、５０ｍＭナトリウム、ｐＨ４
．５、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、２ｍＭ ＥＤＴＡを含む２０容量の緩衝液とを、
激しい攪拌で迅速に混合することによって、再折畳みさせる。再折畳みした希釈
タンパク質溶液を、さらなる精製工程の前の１２時間、混合しないで４℃で保つ
。
【０８６７】 再折畳みされたポリペプチド溶液を清澄にするために、予め調製した４０ｍＭ
酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０で平衡化された、適切な表面積を有する０．１６μ
ｍメンブレンフィルターを備える接触濾過ユニット（ｔａｎｇｅｎｔｉａｌ ｆ
ｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｕｎｉｔ）（例えば、Ｆｉｌｔｒｏｎ）を使用する。濾過
したサンプルを、カチオン交換樹脂（例えば、Ｐｏｒｏｓ ＨＳ−５０，Ｐｅｒ
ｓｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）上にロードする。カラムを４０ｍＭ酢
酸ナトリウム、ｐＨ６．０で洗浄し、そして同じ緩衝液中の２５０ｍＭ、５００
ｍＭ、１０００ｍＭ、および１５００ｍＭ ＮａＣｌで、段階的な様式で溶出す
る。溶出液の２８０ｎｍにおける吸光度を継続的にモニターする。画分を収集し
、そしてＳＤＳ−ＰＡＧＥによってさらに分析する。
【０８６８】 次いでポリペプチドを含む画分をプールし、そして４容量の水と混合する。次
いで希釈されたサンプルを、予め調製した強アニオン（Ｐｏｒｏｓ ＨＱ−５０
，Ｐｅｒｓｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）および弱アニオン（Ｐｏｒｏ
ｓ ＣＭ−２０，Ｐｅｒｓｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）交換樹脂の直
列カラムのセットにロードする。カラムを４０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０
で平衡化する。両方のカラムを、４０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０、２００
ｍＭ ＮａＣｌで洗浄する。次いでＣＭ−２０カラムを、１０カラム容量の直線
的勾配（０．２Ｍ ＮａＣｌ、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０から１．０
Ｍ ＮａＣｌ、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．５の範囲）を用いて溶出する
。画分を、溶出液の定常Ａ２８０モニタリング下で収集する。次いで、（例えば
、１６％ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって判明した）ポリペプチドを含む画分をプール
する。
【０８６９】 得られたポリペプチドは、上記の再折畳みおよび精製工程の後で９５％より高
い純度を示すべきである。５μｇの精製タンパク質がロードされる場合、いかな
る主たる夾雑バンドも、クマシーブルー染色した１６％ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルか
ら観察されないはずである。精製タンパク質はまた、エンドトキシン／ＬＰＳ夾
雑物について試験され得、そして代表的には、ＬＰＳ含量はＬＡＬアッセイに従
って、０．１ｎｇ／ｍｌ未満である。
【０８７０】 （実施例７：バキュロウイルス発現系におけるポリペプチドのクローニングお
よび発現） この実施例では、ポリペプチドを発現するために、プラスミドシャトルベクタ
ーｐＡ２を使用してポリヌクレオチドをバキュロウイルスに挿入する。この発現
ベクターは、Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ核多核体病ウイル
ス（ＡｃＭＮＰＶ）の強力なポリヘドリンプロモーター、続いてＢａｍＨＩ、Ｘ
ｂａＩ、およびＡｓｐ７１８のような便利な制限部位を含む。シミアンウイルス
４０（「ＳＶ４０」）のポリアデニル化部位を、効率的なポリアデニル化のため
に使用する。組換えウイルスの容易な選択のために、プラスミドは、同方向にあ
る弱いＤｒｏｓｏｐｈｉｌａプロモーターの制御下でＥ．ｃｏｌｉ由来のβ−ガ
ラクトシダーゼ遺伝子、続いてポリヘドリン遺伝子のポリアデニル化シグナルを
含む。挿入された遺伝子は、クローニングしたポリヌクレオチドを発現する生存
可能なウイルスを生成する、野生型ウイルスＤＮＡとの細胞媒介性の相同組換え
のためのウイルス配列と両側で隣接する。
【０８７１】 多くの他のバキュロウイルスベクター（例えば、ｐＡｃ３７３、ｐＶＬ９４１
、およびｐＡｃＩＭ１）は、当業者が容易に理解するように、構築物が転写、翻
訳、分泌などのために適切に配置されたシグナル（必要とされる場合、シグナル
ペプチドおよびインフレームなＡＵＧを含む）を提供する限りにおいて、上記の
ベクターの代わりに使用され得る。このようなベクターは、例えば、Ｌｕｃｋｏ
ｗら、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ １７０：３１−３９（１９８９）に記載される。
【０８７２】 具体的には、寄託されたクローンに含まれるｃＤＮＡ配列を、適切な制限部位
および開始／終止コドンを含むプライマーを用いて、実施例１に記載されるＰＣ
Ｒプロトコルを使用して増幅させる。天然に存在するシグナル配列を使用して分
泌タンパク質を産生する場合、ｐＡ２ベクターは第２のシグナルペプチドを必要
としない。あるいは、ベクターは、Ｓｕｍｍｅｒｓら、「Ａ Ｍａｎｕａｌ ｏ
ｆ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ Ｖｅｃｔｏｒｓ ａｎ
ｄ Ｉｎｓｅｃｔ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ」、Ｔｅ
ｘａｓ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｓｔａｔｉｏ
ｎ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ Ｎｏ．１５５５（１９８７）に記載される標準的な方法
を用いて、バキュロウイルスリーダー配列を含むように改変され得る（ｐＡ２
ＧＰ）。
【０８７３】 増幅されたフラグメントを、市販のキット（「Ｇｅｎｅｃｌｅａｎ」ＢＩＯ
１０１ Ｉｎｃ．，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａ）を使用して、１％アガロースゲル
から単離する。次いでフラグメントを適切な制限酵素で消化し、そして再度１％
アガロースゲルで精製する。
【０８７４】 プラスミドを対応する制限酵素で消化し、そして必要に応じて、当該分野で公
知の慣用の手順を用いて、仔ウシ腸ホスファターゼを用いて脱リン酸化し得る。
次いでＤＮＡを、市販のキット（「Ｇｅｎｅｃｌｅａｎ」ＢＩＯ １０１ Ｉｎ
ｃ．，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａ）を使用して、１％アガロースゲルから単離する
。
【０８７５】 フラグメントおよび脱リン酸化したプラスミドを、Ｔ４ ＤＮＡリガーゼを用
いて共に連結する。Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＢ１０１またはＸＬ−１ Ｂｌｕｅ（Ｓｔ
ｒａｔａｇｅｎｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，ＣＡ
）細胞のような他の適切なＥ．ｃｏｌｉ宿主を、連結混合液で形質転換し、そし
て培養プレート上に拡げる。プラスミドを含む細菌を、個々のコロニー由来のＤ
ＮＡを消化し、そして消化産物をゲル電気泳動によって分析することにより同定
する。クローニングしたフラグメントの配列をＤＮＡ配列決定によって確認する
。
【０８７６】 このポリヌクレオチドを含む５μｇのプラスミドを、Ｆｅｌｇｎｅｒら、Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：７４１３−７４１７（１９
８７）によって記載されたリポフェクション法を使用して、１．０μｇの市販の
線状化バキュロウイルスＤＮＡ（「ＢａｃｕｌｏＧｏｌｄＴＭ ｂａｃｕｌｏｖ
ｉｒｕｓ ＤＮＡ」，Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）とと
もに同時トランスフェクトする。１μｇのＢａｃｕｌｏＧｏｌｄＴＭウイルスＤ
ＮＡおよび５μｇのプラスミドを、５０μｌの無血清グレース培地（Ｌｉｆｅ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）を含
む、マイクロタイタープレートの滅菌したウェル中で混合する。その後、１０μ
ｌのリポフェクチンおよび９０μｌグレース培地を加え、混合し、そして室温で
１５分間インキュベートする。次いで、トランスフェクション混合液を、無血清
グレース培地１ｍｌを加えた３５ｍｍ組織培養プレートに播種したＳｆ９昆虫細
胞（ＡＴＣＣ ＣＲＬ １７１１）に滴下して加える。次いでプレートを２７℃
で５時間インキュベートする。次いで、トランスフェクション溶液をプレートか
ら除去し、そして１０％ウシ胎仔血清を補充した１ｍｌのグレース昆虫培地を添
加する。次いで培養を２７℃で４日間継続する。
【０８７７】 ４日後、上清を収集し、そしてＳｕｍｍｅｒｓおよびＳｍｉｔｈ（前出）によ
って記載されたようにプラークアッセイを行う。「Ｂｌｕｅ Ｇａｌ」（Ｌｉｆ
ｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ）を含む
アガロースゲルを、ｇａｌ発現クローン（青色に着色したプラークを生ずる）の
容易な同定および単離を可能にするために使用する。（この型の「プラークアッ
セイ」の詳細な説明はまた、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，
Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，によって配布される、昆虫細胞培養およびバキュロ
ウイルス学のための使用者ガイド（９−１０頁）の中に見出され得る）。適切な
インキュベーションの後、青色に着色したプラークをマイクロピペッター（例え
ば、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）のチップで拾う。次いで、組換えウイルスを含む寒天
を、２００μｌのグレース培地を含む微小遠心分離チューブ中で再懸濁し、そし
て組換えバキュロウイルスを含む懸濁液を、３５ｍｍディッシュに播種したＳｆ
９細胞に感染させるために使用する。４日後、これらの培養ディッシュの上清を
収集し、次いで４℃で保存する。
【０８７８】 ポリペプチドの発現を確認するために、１０％熱非働化ＦＢＳを補充したグレ
ース培地中でＳｆ９細胞を増殖させる。細胞を、約２の感染多重度（「ＭＯＩ」
）でポリヌクレオチドを含む組換えバキュロウイルスに感染させる。放射性標識
したタンパク質を所望する場合には、６時間後に培地を除去し、そしてメチオニ
ンおよびシステインを含まないＳＦ９００ ＩＩ培地（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏ
ｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤから入手可能）に置き換え
る。４２時間後、５μＣｉの３５Ｓ−メチオニンおよび５μＣｉの３５Ｓ−シス
テイン（Ａｍｅｒｓｈａｍから入手可能）を添加する。細胞をさらに１６時間イ
ンキュベートし、次いで遠心分離によって収集する。上清中のタンパク質および
細胞内タンパク質を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、次いで（放射性標識した場合）オート
ラジオグラフィーによって分析する。
【０８７９】 精製タンパク質のアミノ末端のアミノ酸配列の微量配列決定法を使用して、産
生されたタンパク質のアミノ末端配列を決定し得る。
【０８８０】 （実施例８：哺乳動物細胞におけるポリペプチドの発現） 本発明のポリペプチドを、哺乳動物細胞中で発現させ得る。代表的な哺乳動物
発現ベクターは、ｍＲＮＡの転写の開始を仲介するプロモーターエレメント、タ
ンパク質コード配列、ならびに転写の終結および転写物のポリアデニル化に必要
なシグナルを含む。さらなるエレメントは、エンハンサー、コザック配列、およ
び、ＲＮＡスプライシングのドナーおよびアクセプター部位に隣接する介在配列
を含む。非常に効率的な転写は、ＳＶ４０由来の初期および後期プロモーター、
レトロウイルス（例えばＲＳＶ、ＨＴＬＶＩ、ＨＩＶＩ）由来の長い末端反復（
ＬＴＲ）、およびサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の初期プロモーターを用いて
達成される。しかし、細胞エレメント（例えば、ヒトアクチンプロモーター）も
また、使用され得る。
【０８８１】 本発明を実施する際の使用に適切な発現ベクターは、例えば、ｐＳＶＬおよび
ｐＭＳＧ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）、ｐＲＳＶｃ
ａｔ（ＡＴＣＣ ３７１５２）、ｐＳＶ２ｄｈｆｒ（ＡＴＣＣ ３７１４６）、
ｐＢＣ１２ＭＩ（ＡＴＣＣ ６７１０９）、ｐＣＭＶＳｐｏｒｔ２．０、ならび
にｐＣＭＶＳｐｏｒｔ３．０のようなベクターを含む。使用され得る哺乳動物宿
主細胞としては、ヒトＨｅｌａ細胞、２９３細胞、Ｈ９細胞およびＪｕｒｋａｔ
細胞、マウスＮＩＨ３Ｔ３細胞およびＣ１２７細胞、Ｃｏｓ １細胞、Ｃｏｓ
７細胞およびＣＶ１細胞、ウズラＱＣ１−３細胞、マウスＬ細胞、ならびにチャ
イニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞が挙げられる。
【０８８２】 あるいは、ポリペプチドは、染色体に組み込まれたポリヌクレオチドを含む、
安定な細胞株中で発現され得る。ｄｈｆｒ、ｇｐｔ、ネオマイシン、ハイグロマ
イシンのような選択可能なマーカーを用いる同時トランスフェクションは、トラ
ンスフェクトされた細胞の同定および単離を可能にする。
【０８８３】 トランスフェクトされた遺伝子はまた、大量のコードされたタンパク質を発現
するために増幅され得る。ＤＨＦＲ（ジヒドロ葉酸還元酵素）マーカーは、目的
の遺伝子の数百または数千さえものコピーを有する細胞株の開発に有用である。
（例えば、Ａｌｔら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５３：１３５７−１３７０（
１９７８）；Ｈａｍｌｉｎ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ
、１０９７：１０７−１４３（１９９０）：Ｐａｇｅら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ
ｏｇｙ ９：６４−６８（１９９１）を参照のこと）。別の有用な選択マーカー
は、酵素グルタミンシンターゼ（ＧＳ）である（Ｍｕｒｐｈｙら、Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ Ｊ．２２７：２７７−２７９（１９９１）；Ｂｅｂｂｉｎｇｔｏｎら、Ｂｉ
ｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：１６９−１７５（１９９２））。これらのマ
ーカーを使用して、哺乳動物細胞を選択培地中で増殖させ、そしてもっとも高い
耐性を有する細胞を選択する。これらの細胞株は、染色体に組み込まれた増幅さ
れた遺伝子を含む。チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）およびＮＳＯ細胞は
、タンパク質の産生のためにしばしば使用される。
【０８８４】 プラスミドｐＳＶ２−ｄｈｆｒ（ＡＴＣＣ受託番号３７１４６）の誘導体であ
る、発現ベクターｐＣ４（ＡＴＣＣ受託番号２０９６４６）およびｐＣ６（ＡＴ
ＣＣ受託番号２０９６４７）は、ラウス肉腫ウイルス（Ｃｕｌｌｅｎら、Ｍｏｌ
ｅｃｕｌａｒ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４３８−４４７（
１９８５年３月））の強力なプロモーター（ＬＴＲ）、およびＣＭＶエンハンサ
ー（Ｂｏｓｈａｒｔら、Ｃｅｌｌ ４１：５２１−５３０（１９８５））のフラ
グメントを含む。例えば、ＢａｍＨＩ、ＸｂａＩ、およびＡｓｐ７１８の制限酵
素切断部位を有する複数のクローニングサイトは、目的の遺伝子のクローニング
を容易にする。ベクターはまた、３’イントロン、ラットプレプロインシュリン
遺伝子のポリアデニル化および終結シグナル、ならびに、ＳＶ４０初期プロモー
ターの制御下にあるマウスＤＨＦＲ遺伝子を含む。
【０８８５】 具体的には、例えば、プラスミドｐＣ６は、適切な制限酵素によって消化され
、次いで当該分野で公知の手順に従って、仔ウシ腸ホスファターゼ（ｐｈｏｓｐ
ｈａｔｅ）を使用して脱リン酸化される。次いで、ベクターを１％アガロースゲ
ルから単離する。
【０８８６】 本発明のポリヌクレオチドは、必要ならば適切な制限部位およ開始／終止コド
ンを有するプライマーを使用して、実施例１に概説するプロトコルに従って増幅
される。分泌のために必要な場合、ベクターは異種シグナル配列を含むように改
変され得る（例えば、ＷＯ９６／３４８９１を参照のこと）。
【０８８７】 増幅フラグメントを、市販のキット（「Ｇｅｎｅｃｌｅａｎ」、ＢＩＯ １０
１ Ｉｎｃ．，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａ．）を使用して１％アガロースゲルから
単離する。次いで、フラグメントを、適切な制限酵素で消化し、そして再度１％
アガロースゲル上で精製する。
【０８８８】 次いで、増幅フラグメントを同じ制限酵素で消化し、そして１％アガロースゲ
ルで精製する。次いで、単離されたフラグメントおよび脱リン酸化したベクター
を、Ｔ４ ＤＮＡリガーゼで連結する。次いで、Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＢ１０１また
はＸＬ−１ Ｂｌｕｅ細胞を形質転換し、そしてプラスミドｐＣ６に挿入された
フラグメントを含む細菌を、例えば、制限酵素分析を用いて同定する。
【０８８９】 活性なＤＨＦＲ遺伝子を欠失するチャイニーズハムスター卵巣細胞を、トラン
スフェクションに使用する。５μｇの発現プラスミドｐＣ６を、リポフェクチン
を用いて、０．５μｇのプラスミドｐＳＶｎｅｏとともに同時トランスフェクト
する（Ｆｅｌｇｎｅｒら、前出）。プラスミドｐＳＶ２−ｎｅｏは、優性選択マ
ーカーであるところの、Ｇ４１８を含む抗生物質の群に対する耐性を付与する酵
素をコードするＴｎ５由来のｎｅｏ遺伝子を含む。細胞を、１ｍｇ／ｍｌのＧ４
１８を補充したαマイナスＭＥＭに播種する。２日後、細胞をトリプシン処理し
、そして１０、２５、または５０ｎｇ／ｍｌのメトトレキサートおよび１ｍｇ／
ｍｌのＧ４１８を補充したαマイナスＭＥＭ中のハイブリドーマクローニングプ
レート（Ｇｒｅｉｎｅｒ，Ｇｅｒｍａｎｙ）中に播種する。約１０〜１４日後、
単一のクローンをトリプシン処理し、次いでメトトレキサートの異なる濃度（５
０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、４００ｎＭ、８００ｎＭ）を使用して、６ウ
ェルのペトリ皿または１０ｍｌのフラスコに播種する。次いで、メトトレキサー
トの最高濃度で増殖するクローンを、さらに高い濃度（１μＭ、２μＭ、５μＭ
、１０ｍＭ、２０ｍＭ）のメトトレキサートを含む新たな６ウェルプレートに移
す。同じ手順を、１００〜２００μＭの濃度で増殖するクローンが得られるまで
繰り返す。所望の遺伝子産物の発現を、例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウエス
タンブロットによって、または逆相ＨＰＬＣ分析によって分析する。
【０８９０】 （実施例９：タンパク質融合物） 本発明のポリぺプチドは、好ましくは、他のタンパク質に融合される。これら
の融合タンパク質は、種々の適用について使用され得る。例えば、本発明のポリ
ぺプチドの、Ｈｉｓタグ、ＨＡタグ、プロテインＡ、ＩｇＧドメイン、およびマ
ルトース結合タンパク質への融合は、精製を容易にする（実施例５を参照のこと
；ＥＰ Ａ ３９４，８２７；Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３３１
：８４−８６（１９８８）もまた参照のこと）。これらのポリぺプチドはまた、
分泌または細胞内往来（ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ）（例えば、ＫＤＥＬ）を促進
するために、異種ポリぺプチド配列に融合され得る。さらに、ＩｇＧ−１、Ｉｇ
Ｇ−３、およびアルブミンへの融合は、インビボでの半減期を増大させる。本発
明のポリぺプチドに融合した核局在化シグナルは、タンパク質を特定の細胞下（
ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ）局在に標的化し得る。一方、共有結合ヘテロダイマー
またはホモダイマーは、融合タンパク質の活性を増大または減少させ得る。融合
タンパク質はまた、１つより多い機能を有するキメラ分子を作製し得る。最後に
、融合タンパク質は、非融合タンパク質と比較して、融合タンパク質の可溶性お
よび／または安定性を増大させ得る。上記の融合タンパク質の全ての型は、ポリ
ぺプチドのＩｇＧ分子への融合を概説する以下のプロトコル、または実施例５に
記載されるプロトコルを改変することによって作製され得る。
【０８９１】 簡単には、ＩｇＧ分子のヒトＦｃ部分は、以下に記載の配列の５’および３’
末端にわたるプライマーを使用してＰＣＲ増幅され得る。これらのプライマーは
また、発現ベクター（好ましくは、哺乳動物発現ベクター）へのクローニングを
容易にする都合の良い制限酵素部位および必要であれば開始／終止コドンを有す
るべきである。
【０８９２】 例えば、ｐＣ４（受託番号第２０９６４６号）が使用される場合、ヒトＦｃ部
分は、ＢａｍＨＩクローニング部位に連結され得る。３’ＢａｍＨＩ部位が破壊
されるべきであることに注意のこと。次に、ヒトＦｃ部分を含有するベクターが
、ＢａｍＨＩによって再び制限処理され、ベクターを線状化し、そして実施例１
に記載するＰＣＲプロトコルによって単離された本発明のポリヌクレオチドが、
このＢａｍＨＩ部位に連結される。ポリヌクレオチドは、終止コドンなしにクロ
ーニングされ、そうでなければ、融合タンパク質は産生されないことに注意する
こと。
【０８９３】 天然に存在するシグナル配列が分泌タンパク質を産生するために使用される場
合、ｐＣ４は、第二のシグナルペプチドを必要としない。あるいは、天然に存在
するシグナル配列が使用されない場合、ベクターは、異種シグナル配列を含むよ
うに改変され得る（例えば、ＷＯ ９６／３４８９１を参照のこと）。
【０８９４】
【化１】 （実施例１０：ポリペプチドの処方） 本発明はまた、被験体に有効量の治療剤を投与することにより疾患または障害
（例えば、本明細書中に開示される疾患または障害の任意の１つ以上のような）
を処置および／または予防する方法を提供する。治療剤により、薬学的に受容可
能なキャリア型（例えば、滅菌キャリア）と組み合わせた、本発明のポリヌクレ
オチドまたはポリペプチド（フラグメントおよび改変体を含む）、そのアゴニス
トまたはアンタゴニスト、および／またはそれらに対する抗体を意味する。
【０８９５】 ポリペプチド組成物を、個々の患者の臨床状態（特に、分泌ポリペプチド単独
処置の副作用）、送達部位、投与方法、投与計画および当業者に公知の他の因子
を考慮に入れ、医療実施基準（ｇｏｏｄ ｍｅｄｉｃａｌ ｐｒａｃｔｉｃｅ）
を遵守する方式で処方および投薬する。従って、本明細書において目的とする「
有効量」は、このような考慮により決定される。
【０８９６】 一般的提案として、用量当り、非経口的に投与されるポリペプチドの合計薬学
的有効量は、患者体重の、約１μｇ／ｋｇ／日〜１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲にあ
るが、上記のようにこれは治療的裁量に委ねられる。さらに好ましくは、このホ
ルモンについて、この用量は、少なくとも０．０１ｍｇ／ｋｇ／日、そして最も
好ましくはヒトに対して約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日と約１ｍｇ／ｋｇ／日との間
である。連続投与する場合、代表的には、ポリペプチドを約１μｇ／ｋｇ／時間
〜約５０μｇ／ｋｇ／時間の投薬速度で１日に１〜４回の注射かまたは連続皮下
注入（例えばミニポンプを用いる）のいずれかにより投与する。静脈内用バッグ
溶液もまた使用し得る。変化を観察するために必要な処置期間および応答が生じ
る処置後の間隔は、所望の効果に応じて変化するようである。
【０８９７】 本発明のポリぺプチドを含む薬学的組成物を、経口的、直腸内、非経口的、槽
内（ｉｎｔｒａｃｉｓｔｅｍａｌｌｙ）、膣内、腹腔内、局所的（粉末、軟膏、
ゲル、点滴剤、または経皮パッチによるなど）、口内あるいは経口または鼻腔ス
プレーとして投与する。「薬学的に受容可能なキャリア」とは、非毒性の固体、
半固体または液体の充填剤、希釈剤、被包材または任意の型の製剤補助剤をいう
。本明細書で用いる用語「非経口的」とは、静脈内、筋肉内、腹腔内、胸骨内、
皮下および関節内の注射および注入を含む投与の様式をいう。
【０８９８】 ポリペプチドはまた、徐放性システムにより適切に投与される。徐放性組成物
の適切な例は、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの成形品の形態の半透
過性ポリマーマトリックスを包含する。徐放性マトリックスとしては、ポリラク
チド（米国特許第３，７７３，９１９号、ＥＰ５８，４８１）、Ｌ−グルタミン
酸およびγ−エチル−Ｌ−グルタメートのコポリマー（Ｓｉｄｍａｎら、Ｂｉｏ
ｐｏｌｙｍｅｒｓ２２：５４７−５５６（１９８３））、ポリ（２−ヒドロキシ
エチルメタクリレート）（Ｌａｎｇｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒ
ｅｓ．１５：１６７−２７７（１９８１）、およびＬａｎｇｅｒ，Ｃｈｅｍ．Ｔ
ｅｃｈ．１２：９８−１０５（１９８２））、エチレンビニルアセテート（Ｒ．
Ｌａｎｇｅｒら）またはポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸（ＥＰ１３３，
９８８）が挙げられる。徐放性組成物はまた、リポソームに封入されたポリペプ
チドを包含する。分泌ポリペプチドを含有するリポソームは、それ自体が公知で
ある方法により調製される：ＤＥ３，２１８，１２１；Ｅｐｓｔｅｉｎら、Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：３６８８−３６９２（１９
８５）；Ｈｗａｎｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７
：４０３０−４０３４（１９８０）；ＥＰ５２，３２２；ＥＰ３６，６７６；Ｅ
Ｐ８８，０４６；ＥＰ１４３，９４９；ＥＰ１４２，６４１；日本国特許出願第
８３−１１８００８号；米国特許第４，４８５，０４５号および同第４，５４４
，５４５号；ならびにＥＰ第１０２，３２４号。通常、リポソームは、小さな（
約２００〜８００オングストローム）単層状型であり、脂質含有量は、約３０モ
ル％コレステロールよりも多く、選択された割合が、最適分泌ポリペプチド治療
のために調整される。
【０８９９】 非経口投与のために、１つの実施態様において、一般に、分泌ポリペプチドは
、それを所望の程度の純度で、薬学的に受容可能なキャリア、すなわち、用いる
投薬量および濃度でレシピエントに対して毒性がなく、かつ処方物の他の成分と
適合するものと、単位投薬量の注射可能な形態（溶液、懸濁液または乳濁液）で
混合することにより処方される。例えば、この処方物は、好ましくは、酸化剤、
およびポリペプチドに対して有害であることが知られている他の化合物を含まな
い。
【０９００】 一般に、ポリペプチドを液体キャリアまたは微細分割固体キャリアあるいはそ
の両方と均一および緊密に接触させて処方物を調製する。次に、必要であれば、
生成物を所望の処方物に成形する。好ましくは、キャリアは、非経口的キャリア
であり、より好ましくはレシピエントの血液と等張である溶液である。このよう
なキャリアビヒクルの例としては、水、生理食塩水、リンゲル溶液およびデキス
トロース溶液が挙げられる。不揮発性油およびオレイン酸エチルのような非水性
ビヒクルもまた、リポソームと同様に本明細書において有用である。
【０９０１】 キャリアは、等張性および化学的安定性を増強する物質のような微量の添加剤
を適切に含有する。このような物質は、用いる投薬量および濃度でレシピエント
に対して毒性がなく、そしてこのような物質としては、リン酸塩、クエン酸塩、
コハク酸塩、酢酸および他の有機酸またはその塩類のような緩衝剤；アスコルビ
ン酸のような抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド（例えば、ポ
リアルギニンまたはトリペプチド）；血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロ
ブリンのようなタンパク質；ポリビニルピロリドンのような親水性ポリマー；グ
リシン、グルタミン酸、アスパラギン酸またはアルギニンのようなアミノ酸；セ
ルロースまたはその誘導体、ブドウ糖、マンノースまたはデキストリンを含む、
単糖類、二糖類、および他の炭水化物；ＥＤＴＡのようなキレート剤；マンニト
ールまたはソルビトールのような糖アルコール；ナトリウムのような対イオン；
および／またはポリソルベート、ポロキサマーもしくはＰＥＧのような非イオン
性界面活性剤が挙げられる。
【０９０２】 ポリペプチドは、代表的には約０．１ｍｇ／ｍｌ〜１００ｍｇ／ｍｌ、好まし
くは１〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度で、約３〜８のｐＨで、このようなビヒクル中に
処方される。前記の特定の賦形剤、キャリアまたは安定化剤を使用することによ
り、ポリペプチド塩が形成されることが理解される。
【０９０３】 治療的投与に用いられる任意のポリペプチドは無菌状態であり得る。滅菌濾過
膜（例えば０．２ミクロンメンブレン）で濾過することにより無菌状態は容易に
達成される。一般に、治療用ポリペプチド組成物は、滅菌アクセスポートを有す
る容器、例えば、皮下用注射針で穿刺可能なストッパー付の静脈内用溶液バッグ
またはバイアルに配置される。
【０９０４】 ポリペプチドは、通常、単位用量または複数用量容器、例えば、密封アンプル
またはバイアルに、水溶液または再構成するための凍結乾燥処方物として貯蔵さ
れる。凍結乾燥処方物の例として、１０ｍｌのバイアルに、滅菌濾過した１％（
ｗ／ｖ）ポリペプチド水溶液５ｍｌを充填し、そして得られる混合物を凍結乾燥
する。凍結乾燥したポリペプチドを注射用静菌水を用いて再構成して注入溶液を
調製する。
【０９０５】 本発明はまた、本発明の薬学的組成物の１つ以上の成分を満たした一つ以上の
容器を備える薬学的パックまたはキットを提供する。医薬品または生物学的製品
の製造、使用または販売を規制する政府機関が定めた形式の通知が、このような
容器に付属し得、この通知は、ヒトへの投与に対する製造、使用または販売に関
する政府機関による承認を表す。さらに、本発明のポリペプチドを他の治療用化
合物と組み合わせて使用し得る。
【０９０６】 本発明の治療剤は、単独で、またはアジュバントと組み合わせて投与され得る
。本発明の治療剤とともに投与され得るアジュバントとしては、以下が挙げられ
るが、それらに限定されない：ミョウバン、ミョウバン＋デオキシコール酸（Ｉ
ｍｍｕｎｏＡｇ）、ＭＴＰ−ＰＥ（Ｂｉｏｃｉｎｅ Ｃｏｒｐ．）、ＱＳ２１（
Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）、ＢＣＧ（例えば、ＴＨＥＲＡＣＹＳ（登録商
標））、ＭＰＬ、およびＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐａｒｖｕｍの生育
不能な調製物。特定の実施形態において、本発明の治療剤は、ミョウバンと組み
合わせて投与される。別の特定の実施形態において、本発明の治療剤は、ＱＳ−
２１と組み合わせて投与される。本発明の治療剤とともに投与され得るさらなる
アジュバントとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：モノホス
ホリル脂質免疫調節剤、ＡｄｊｕＶａｘ １００ａ、ＱＳ−２１、ＱＳ−１８、
ＣＲＬ１００５、アルミニウム塩、ＭＦ−５９、およびＶｉｒｏｓｏｍａｌアジ
ュバント技術。本発明の治療剤とともに投与され得るワクチンとしては、以下が
挙げられるが、これらに限定されない：ＭＭＲ（麻疹、流行性耳下腺炎，風疹）
、ポリオ（ｐｏｌｉｏ）、水痘、破傷風／ジフテリア、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｂ
型インフルエンザ、百日咳（ｗｈｏｏｐｉｎｇ ｃｏｕｇｈ）、肺炎、インフル
エンザ、ライム病、ロタウイルス、コレラ、黄熱病、日本脳炎、ポリオ（ｐｏｌ
ｉｏｍｙｅｌｉｔｉｓ）、狂犬病、腸チフス、および百日咳（ｐｅｒｔｕｓｉｓ
）に対する防御に指向するワクチン。組み合わせは、例えば、混合物として同時
に、別々であるが同時にもしくは並行して；または逐次的にかのいずれかで投与
され得る。これは、組み合わされた薬剤が治療混合物としてともに投与される提
示を含み、そして組み合わせた薬剤が、別々であるが同時に（例えば、同じ個体
へ別々の静脈ラインを通じてのように）投与される手順もまた含む。「組み合わ
せ」投与は、第１に、続いて第２に与えられる化合物または薬剤のうちの１つを
別々に投与することをさらに含む。
【０９０７】 本発明の治療剤は、単独で、または他の治療的薬剤と組み合わせて投与され得
る。本発明の治療剤とともに投与され得る治療的薬剤としては、以下が挙げられ
るが、それらに限定されない：化学療法剤、抗生物質、ステロイド性および非ス
テロイド性の抗炎症剤、従来の免疫療法剤、および／または以下に記載される治
療的処置。組み合わせは、例えば、混合物として同時に、別々であるが同時にも
しくは並行して；または逐次的にかのいずれかで投与され得る。これは、組み合
わされた薬剤が、治療混合物としてともに投与される提示を含み、そして組み合
わせた薬剤が、別々であるが同時に（例えば、同じ個体へ別々の静脈ラインを通
じてのように）投与される手順もまた含む。「組み合わせ」投与は、第１に、続
いて第２に与えられる化合物または薬剤のうちの１つを別々に投与することをさ
らに含む。
【０９０８】 １つの実施形態において、本発明の治療剤は、抗凝血剤と組み合わせて投与さ
れる。本発明の組成物と共に投与され得る抗凝血剤としては以下が挙げられるが
これらに限定されない：ヘパリン、低分子量ヘパリン、ワルファリンナトリウム
（例えば、ＣＯＵＭＡＤＩＮ（登録商標））、ジクマロール、４−ヒドロキシク
マリン、アニシンジオン（例えば、ＭＩＲＡＤＯＮＴＭ）、アセノクマロール（
例えば、ニクマロン、ＳＩＮＴＨＲＯＭＥＴＭ）、インダン−１，３−ジオン、
フェンプロクーモン（例えば、ＭＡＲＣＵＭＡＲＴＭ）、エチルビスクマセテー
ト（ｅｔｈｙｌ ｂｉｓｃｏｕｍａｃｅｔａｔｅ（例えば、ＴＲＯＭＥＸＡＮＴ Ｍ ）、およびアスピリン。特定の実施形態において、本発明の組成物は、ヘパリ
ンおよび／またはワルファリンと組み合わせて投与される。別の特定の実施形態
において、本発明の組成物は、ワルファリンと組み合わせて投与される。別の特
定の実施形態において、本発明の組成物は、ワルファリンおよびアスピリンと組
み合わせて投与される。別の特定の実施形態において、本発明の組成物は、ヘパ
リンと組み合わせて投与される。別の特定の実施形態において、本発明の組成物
は、ヘパリンおよびアスピリンと組み合わせて投与される。
【０９０９】 別の実施形態において、本発明の治療剤は、血栓溶解剤と組み合わせて投与さ
れる。本発明の組成物と共に投与され得る血栓溶解剤としては以下が挙げられる
がこれらに限定されない：プラスミノゲン、ライスプラスミノゲン（ｌｙｓｐｌ
ａｓｍｉｎｏｇｅｎ）、α２−抗プラスミン、ストレプトキナーゼ（例えば、Ｋ
ＡＢＩＫＩＮＡＳＥＴＭ）、抗レスプレイス（ａｎｔｉｒｅｓｐｌａｃｅ）（例
えば、ＥＭＩＮＡＳＥＴＭ）、組織プラスミノゲンアクチベーター（ｔ−ＰＡ、
アルテベイス（ａｌｔｅｖａｓｅ）、ＡＣＴＩＶＡＳＥＴＭ）、ウロキナーゼ（
例えば、ＡＢＢＯＫＩＮＡＳＥＴＭ）、サウルプレイス（ｓａｕｒｕｐｌａｓｅ
）（プロウロキナーゼ、単鎖ウロキナーゼ）およびアミノカプロン酸（例えば、
ＡＭＩＣＡＲＴＭ）。特定の実施形態において、本発明の組成物は、組織プレス
ミノゲンアクチベーターおよびアスピリンと組み合わせて投与される。
【０９１０】 別の実施形態において、本発明の治療剤は、抗血小板剤と組み合わせて投与さ
れる。本発明の組成物と共に投与され得る抗血小板剤としては以下が挙げられる
がこれらに限定されない：アスピリン、ジピリダモール（例えば、ＰＥＲＳＡＮ
ＴＩＮＥＴＭ）、およびチクロピジン（例えば、ＴＩＣＬＩＤＴＭ）。
【０９１１】 特定の実施形態において、本発明の治療剤との組み合わせにおいて抗凝血剤、
血栓溶解剤および／または抗血小板剤の使用は、血栓症、動脈血栓症、静脈血栓
症、血栓塞栓症、肺塞栓症、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、一過性脳虚血
発作、不安定狭心症の予防、診断および／または処置が考えられる。特定の実施
形態において、本発明の治療剤との組み合わせにおける抗凝血剤、血栓溶解剤お
よび／または抗血小板剤の使用は、血管形成手順に伴い得るような手術周辺の血
栓症の危険を軽減するために、非リウマチ性心房細動を含む心房細動を有する患
者における発作の危険を軽減するために、人工心臓弁および／または僧帽弁疾患
に関連する塞栓症の危険を軽減するために、伏在性の移植片の閉塞の予防が考え
られる。単独または抗血小板薬剤、抗凝固薬剤および／または血栓溶解薬剤と組
み合わせにおける本発明の治療剤の他の使用としては、体外装置（例えば、脈管
内カニューレ、血液透析の患者における脈管アクセスシャント、血液透析機、お
よび心肺バイパス機）における閉塞の予防が挙げられるが、それらに限定されな
い。
【０９１２】 特定の実施形態において、本発明の治療剤は、抗レトロウイルス薬剤、ヌクレ
オシド／ヌクレオチド逆転写酵素インヒビター（ＮＲＴＩ）、非ヌクレオシド逆
転写酵素インヒビター（ＮＮＲＴＩ）、および／またはプロテアーゼインヒビタ
ー（ＰＩ）と組み合わせて投与される。本発明の治療剤と組み合わせて投与され
得るＮＲＴＩとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ＲＥＴＲ
ＯＶＩＲＴＭ（ジドブジン／ＡＺＴ）、ＶＩＤＥＸＴＭ（ジダノシン／ｄｄＩ）
、ＨＩＶＩＤＴＭ（ザルシタビン／ｄｄＣ）、ＺＥＲＩＴＴＭ（スタブジン／ｄ
４Ｔ）、ＥＰＩＶＩＲＴＭ（ラミブジン／３ＴＣ）、およびＣＯＭＢＩＶＩＲＴ Ｍ （ジドブジン／ラミブジン）。本発明の治療剤と組み合わせて投与され得るＮ
ＮＲＴＩとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ＶＩＲＡＭＵ
ＮＥＴＭ（ネビラピン）、ＲＥＳＣＲＩＰＴＯＲＴＭ（デラビルジン）、および
ＳＵＳＴＩＶＡＴＭ（エファビレンズ）。本発明の治療剤と組み合わせて投与さ
れ得るプロテアーゼインヒビターとしては、以下が挙げられるが、これらに限定
されない：ＣＲＩＸＩＶＡＮＴＭ（インディナビル（ｉｎｄｉｎａｖｉｒ））、
ＮＯＲＶＩＲＴＭ（リトナビル（ｒｉｔｏｎａｖｉｒ））、ＩＮＶＩＲＡＳＥＴ Ｍ （サキナビル（ｓａｑｕｉｎａｖｉｒ））、およびＶＩＲＡＣＥＰＴＴＭ（ネ
ルフィナビル（ｎｅｌｆｉｎａｖｉｒ））。特定の実施形態において、抗レトロ
ウイルス薬剤、ヌクレオシド逆転写酵素インヒビター、非ヌクレオシド逆転写酵
素インヒビター、および／またはプロテアーゼインヒビターは、ＡＩＤＳを処置
するため、および／またはＨＩＶ感染を予防もしくは処置するために、本発明の
治療剤との任意の組み合わせで使用され得る。
【０９１３】 さらなるＮＲＴＩとしては、以下が挙げられる：ＬＯＤＥＮＯＳＩＮＥＴＭ（
Ｆ−ｄｄＡ；酸安定性アデノシンＮＲＴＩ；Ｔｒｉａｎｇｌｅ／Ａｂｂｏｔｔ；
ＣＯＶＩＲＡＣＩＬＴＭ（エムトリシタビン（ｅｍｔｒｉｃｉｔａｂｉｎｅ）／
ＦＴＣ；ラミブジン（ｌａｍｉｖｕｄｉｎｅ）（３ＴＣ）と構造的に関連するが
、インビトロにおいて３〜１０倍強い活性を有する；Ｔｒｉａｎｇｌｅ／Ａｂｂ
ｏｔｔ）；ｄＯＴＣ（ＢＣＨ−１０６５２，同様に、ラミブジンと構造的に関連
するが、ラミブジン耐性分離菌のかなりの部分に対する活性を有する；Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ Ｐｈａｒｍａ）；Ａｄｅｆｏｖｉｒ（ＦＤＡによって、抗ＨＩＶ治療に
ついての認可を拒絶された；Ｇｉｌｅａｄ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）；ＰＲＥＶＥＯ
Ｎ（登録商標）（Ａｄｅｆｏｖｉｒ Ｄｉｐｉｖｏｘｉｌ，アデノフォビル（ａ
ｄｅｆｏｖｉｒ）の活性なプロドラッグ；その活性形態はＰＭＥＡ−ｐｐである
）；ＴＥＮＯＦＯＶＩＲＴＭ（ビス−ＰＯＣ ＰＭＰＡ，ＰＭＰＡプロドラッグ
；Ｇｉｌｅａｄ）；ＤＡＰＤ／ＤＸＧ（ＤＡＰＤの活性な代謝産物；Ｔｒｉａｎ
ｇｌｅ／Ａｂｂｏｔｔ）；Ｄ−Ｄ４ＦＣ（３ＴＣと関連，ＡＺＴ／３ＴＣ−耐性
ウイルスに対する活性を有する）；ＧＷ４２０８６７Ｘ（Ｇｌａｘｏ Ｗｅｌｌ
ｃｏｍｅ）；ＺＩＡＧＥＮＴＭ（アバカビル（ａｂａｃａｖｉｒ）／１５９Ｕ８
９；Ｇｌａｘｏ Ｗｅｌｌｃｏｍｅ Ｉｎｃ．）；ＣＳ−８７（３’アジド−２
’，３’−ジデオキシウリジン；ＷＯ ９９／６６９３６）；ならびに、β−Ｌ
−ＦＤ４Ｃおよびβ−Ｌ−ＦｄｄＣのＳ−アシル−２−チオエチル（ＳＡＴＥ）
−保有プロドラッグ形態（ＷＯ ９８／１７２８１）。
【０９１４】 さらなるＮＮＲＴＩとしては、以下が挙げられる：ＣＯＡＣＴＩＮＯＮＴＭ（
Ｅｍｉｖｉｒｉｎｅ／ＭＫＣ−４４２，ＨＥＰＴクラスの強力なＮＮＲＴＩ；Ｔ
ｒｉａｎｇｌｅ／Ａｂｂｏｔｔ）；ＣＡＰＲＡＶＩＲＩＮＥＴＭ（ＡＧ−１５４
９／Ｓ−１１５３，Ｋ１０３Ｎ変異を含むウイルスに対して活性を有する、次世
代のＮＮＲＴＩ；Ａｇｏｕｒｏｎ）；ＰＮＵ−１４２７２１（その前駆体デラビ
ルジン（ｄｅｌａｖｉｒｄｉｎｅ）よりも２０〜５０倍高い活性を有し、そして
Ｋ１０３Ｎ変異体に対して活性である；Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＆ Ｕｐｊｏｈｎ
）；ＤＰＣ−９６１およびＤＰＣ−９６３（エファビレンツ（ｅｆａｖｉｒｅｎ
ｚ）の第二世代誘導体，Ｋ１０３Ｎ変異を有するウイルスに対して活性であるよ
うに設計された；ＤｕＰｏｎｔ）；ＧＷ−４２０８６７Ｘ（ＨＢＹ０９７よりも
２５倍高い活性を有し、そしてＫ１０３Ｎ変異体に対して活性である；Ｇｌａｘ
ｏ Ｗｅｌｌｃｏｍｅ）；ＣＡＬＡＮＯＬＩＤＥ Ａ（ラテックス樹木由来の天
然に存在する因子；Ｙ１８１ＣおよびＫ１０３Ｎ変異のいずれかまたは両方を含
むウイルスに対して活性）；ならびに、Ｐｒｏｐｏｌｉｓ（ＷＯ ９９／４９８
３０）。
【０９１５】 さらなるプロテアーゼインヒビターとしては以下が挙げられる：ＬＯＰＩＮＡ
ＶＩＲＴＭ（ＡＢＴ３７８／ｒ；Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）；
ＢＭＳ−２３２６３２（アザペプチド；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｒｅｓ Ｓｑｕｉ
ｂｂ）；ＴＩＰＲＡＮＡＶＩＲＴＭ（ＰＮＵ−１４０６９０，非ペプチド性（ｎ
ｏｎ−ｐｅｐｔｉｃ）ジヒドロピロン；Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＆ Ｕｐｊｏｈｎ
）；ＰＤ−１７８３９０（非ペプチド性ジヒドロピロン；Ｐａｒｋｅ−Ｄａｖｉ
ｓ）；ＢＭＳ ２３２６３２（アザペプチド；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓ
ｑｕｉｂｂ）；Ｌ−７５６，４２３（インディナビル（ｉｎｄｉｎａｖｉｒ）の
アナログ；Ｍｅｒｃｋ）；ＤＭＰ−４５０（サイクリック尿素化合物；Ａｖｉｄ
＆ ＤｕＰｏｎｔ）；ＡＧ−１７７６（プロテアーゼインヒビター耐性ウイル
スに対してインビトロで活性を有するペプチド模倣物；Ａｇｏｕｒｏｎ）；ＶＸ
−１７５／ＧＷ−４３３９０８（アンプレナビル（ａｍｐｒｅｎａｖｉｒ）のホ
スフェートプロドラッグ；Ｖｅｒｔｅｘ ＆ Ｇｌａｘｏ Ｗｅｌｃｏｍｅ）；
ＣＧＰ６１７５５（Ｃｉｂａ）；およびＡＧＥＮＥＲＡＳＥＴＭ（アンプレナビ
ル（ａｍｐｒｅｎａｖｉｒ）；Ｇｌａｘｏ Ｗｅｌｌｃｏｍｅ Ｉｎｃ．）。
【０９１６】 さらなる抗レトロウイルス薬剤としては、融合インヒビター／ｇｐ４１結合剤
が挙げられる。融合インヒビター／ｇｐ４１結合剤としては、Ｔ−２０（その休
止状態においてｇｐ４１に結合し、そしてフソジェニック（ｆｕｓｏｇｅｎｉｃ
）状態への形質転換を妨げるＨＩＶ ｇｐ４１膜貫通タンパク質の外部ドメイン
の残基６４３〜６７８由来のペプチド；Ｔｒｉｍｅｒｉｓ）およびＴ−１２４９
（第二世代の融合インヒビター；Ｔｒｉｍｅｒｉｓ）が挙げられる。
【０９１７】 さらなる抗レトロウイルス薬剤としては、融合インヒビター／ケモカインレセ
プターアンタゴニストが挙げられる。融合インヒビター／ケモカインレセプター
アンタゴニストとしては、以下が挙げられる：ＣＸＣＲ４アンタゴニスト（例え
ば、ＡＭＤ ３１００（バイサイクラム（ｂｉｃｙｃｌａｍ）），ＳＤＦ−１お
よびそのアナログ，ならびにＡＬＸ４０−４Ｃ（カチオン性ペプチド），Ｔ２２
（１８アミノ酸のペプチド；Ｔｒｉｍｅｒｉｓ）ならびにＴ２２アナログである
Ｔ１３４およびＴ１４０）；ＣＣＲ５アンタゴニスト（例えば、ＲＡＮＴＥＳ（
９−６８），ＡＯＰ−ＲＡＮＴＥＳ，ＮＮＹ−ＲＡＮＴＥＳ，およびＴＡＫ−７
７９）；ならびにＣＣＲ５／ＣＸＣＲ４アンタゴニスト（例えば、ＮＳＣ ６５
１０１６（ジスタマイシンアナログ）。ＣＣＲ２Ｂ，ＣＣＲ３，およびＣＣＲ６
アンタゴニストもまた含まれる。ケモカインレセプターアゴニスト（例えば、Ｒ
ＡＮＴＥＳ，ＳＤＦ−１，ＭＩＰ−１α，ＭＩＰ−１βなど）もまた融合を阻害
し得る。
【０９１８】 さらなる抗レトロウイルス薬剤は、インテグラーゼインヒビターを含む。イン
テグラーゼインヒビターとしては、以下が挙げられる：ジカフェオイルキナ（Ｄ
ＦＱＡ）酸（ｄｉｃａｆｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃ（ＤＦＱＡ）ａｃｉｄｓ）；Ｌ
−チコリ酸（Ｌ−ｃｈｉｃｏｒｉｃ ａｃｉｄ）（ジカフェオイル酒石（ＤＣＴ
Ａ）酸）；キナリザリン（ｑｕｉｎａｌｉｚａｒｉｎ；ＱＬＣ）および関連のア
ントラキノン；ＺＩＮＴＥＶＩＲＴＭ（ＡＲ１７７、真のインテグラーゼインヒ
ビターではなく、細胞表面で恐らく作用するオリゴヌクレオチド；Ａｒｏｎｄｅ
ｘ）；ならびにＷＯ ９８／５０３４７に開示されるようなナフトール。
【０９１９】 さらなる抗レトロウイルス薬剤としては、以下が挙げられる：ヒドロキシ尿素
様化合物（例えば、ＢＣＸ−３４（プリンヌクレオシドホスホリラーゼインヒビ
ター；Ｂｉｏｃｒｙｓｔ））；リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター（例
えば、ＤＩＤＯＸＴＭ（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｆｏｒ Ｈｅａｌｔｈ））；イノ
シンモノホスフェートデヒドロゲナーゼ（ＩＭＰＤＨ）インヒビター（例えば、
ＶＸ−４９７（Ｖｅｒｔｅｘ））；ならびにマイコフォリック酸（ｍｙｃｏｐｈ
ｏｌｉｃ ａｃｉｄ）（例えば、ＣｅｌｌＣｅｐｔ（マイコフェノラートモフェ
チル（ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌａｔｅ ｍｏｆｅｔｉｌ）；Ｒｏｃｈｅ）。
【０９２０】 さらなる抗レトロウイルス薬剤としては、以下が挙げられる：ウイルスインテ
グラーゼのインヒビター、ウイルスゲノム核転座のインヒビター（例えば、アリ
ーレンビス（メチルケトン）化合物）；ＨＩＶ侵入のインヒビター（例えば、Ａ
ＯＰ−ＲＡＮＴＥＳ，ＮＮＹ−ＲＡＮＴＥＳ，ＲＡＮＴＥＳ−ＩｇＧ融合タンパ
ク質，ＲＡＮＴＥＳおよびグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）の可溶性複合体，お
よびＡＭＤ−３１００）；ヌクレオカプシドジンクフィンガーインヒビター（例
えば、ジチアン（ｄｉｔｈｉａｎｅ）化合物）；ＨＩＶ ＴａｔおよびＲｅｖの
標的；ならびに薬剤エンハンサー（ｐｈａｒｍａｃｏｅｎｈａｎｃｅｒ）（例え
ば、ＡＢＴ−３７８）。
【０９２１】 他の抗レトロウイルス治療剤および補助治療剤としては、以下が挙げられる：
サイトカインおよびリンホカイン（例えば、ＭＩＰ−１α，ＭＩＰ−１β，ＳＤ
Ｆ−１α，ＩＬ−２，ＰＲＯＬＥＵＫＩＮＴＭ（アルデスロイキン（ａｌｄｅｓ
ｌｅｕｋｉｎ）／Ｌ２−７００１；Ｃｈｉｒｏｎ），ＩＬ−４，ＩＬ−１０，Ｉ
Ｌ−１２，およびＩＬ−１３）；インターフェロン（例えば、ＩＦＮ−α２ａ）
；ＴＮＦｓ，ＮＦκＢ，ＧＭ−ＣＳＦ，Ｍ−ＣＳＦ，およびＩＬ−１０のアンタ
ゴニスト；免疫活性を調節する薬剤（例えば、シクロスポリンおよびプレドニゾ
ン）；ワクチン、例えば、ＲｅｍｕｎｅＴＭ（ＨＩＶ免疫原），ＡＰＬ ４００
−００３（Ａｐｏｌｌｏｎ），組換えｇｐ１２０およびフラグメント，二価（Ｂ
／Ｅ）組換えエンベロープ糖タンパク質，ｒｇｐ１２０ＣＭ２３５，ＭＮ ｒｇ
ｐ１２０，ＳＦ−２ ｒｇｐ１２０，ｇｐ１２０／可溶性ＣＤ４複合体，Ｄｅｌ
ｔａ ＪＲ−ＦＬタンパク質，不連続ｇｐ１２０ Ｃ３／Ｃ４ドメイン由来の分
枝合成ペプチド，融合能を有する免疫原，ならびにＧａｇ，Ｐｏｌ，Ｎｅｆ，お
よびＴａｔワクチン；遺伝子に基づく治療、例えば、遺伝的抑制エレメント（Ｇ
ＳＥ；ＷＯ ９８／５４３６６），およびイントラカイン（ｉｎｔｒａｋｉｎｅ
）（遺伝子改変されたＣＣケモカイン（ＥＲへと標的化されて、新たに合成され
たＣＣＲ５の表面発現をブロックする（Ｙａｎｇら，ＰＮＡＳ ９４：１１５６
７−７２（１９９７）；Ｃｈｅｎら，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．３：１１１０−１６（１
９９７））；抗体、例えば、抗ＣＸＣＲ４抗体１２Ｇ５，抗ＣＣＲ５抗体２Ｄ７
，５Ｃ７，ＰＡ８，ＰＡ９，ＰＡ１０，ＰＡ１１，ＰＡ１２，およびＰＡ１４，
抗ＣＤ４抗体Ｑ４１２０およびＲＰＡ−Ｔ４，抗ＣＣＲ３抗体７Ｂ１１，抗ｇｐ
１２０抗体１７ｂ，４８ｄ，４４７−５２Ｄ，２５７−Ｄ，２６８−Ｄおよび５
０．１，抗Ｔａｔ抗体，抗ＴＮＦ−α抗体，およびモノクローナル抗体３３Ａ；
アリール炭化水素（ＡＨ）レセプターアゴニストおよびアンタゴニスト、例えば
、ＴＣＤＤ，３，３’，４，４’，５−ペンタクロロビフェニル，３，３’，４
，４’−テトラクロロビフェニル，およびα−ナフトフラボン（ＷＯ ９８／３
０２１３）；ならびに、抗酸化剤、例えば、γ−Ｌ−グルタミル−Ｌ−システイ
ンエチルエステル（γ−ＧＣＥ；ＷＯ ９９／５６７６４）。
【０９２２】 さらなる実施形態では、本発明の治療剤は、抗ウイルス薬剤と組み合わせて投
与される。本発明の治療剤と共に投与され得る抗ウイルス薬剤としては、アシク
ロビル、リバビリン、アマンタジン、およびレマンチジン（ｒｅｍａｎｔｉｄｉ
ｎｅ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０９２３】 他の実施形態では、本発明の治療剤は、抗日和見感染症薬剤と組み合わせて投
与され得る。本発明の治療剤と組み合わせて投与され得る抗日和見感染症薬剤と
しては、以下が挙げられるが、これらに限定されないＴＲＩＭＥＴＨＯＰＲＩＭ
−ＳＵＬＦＡＭＥＴＨＯＸＡＺＯＬＥＴＭ，ＤＡＰＳＯＮＥＴＭ，ＰＥＮＴＡＭ
ＩＤＩＮＥＴＭ，ＡＴＯＶＡＱＵＯＮＥＴＭ，ＩＳＯＮＩＡＺＩＤＴＭ，ＲＩＦ
ＡＭＰＩＮＴＭ，ＰＹＲＡＺＩＮＡＭＩＤＥＴＭ，ＥＴＨＡＭＢＵＴＯＬＴＭ，
ＲＩＦＡＢＵＴＩＮＴＭ，ＣＬＡＲＩＴＨＲＯＭＹＣＩＮＴＭ，ＡＺＩＴＨＲＯ
ＭＹＣＩＮＴＭ，ＧＡＮＣＩＣＬＯＶＩＲＴＭ，ＦＯＳＣＡＲＮＥＴＴＭ，ＣＩ
ＤＯＦＯＶＩＲＴＭ，ＦＬＵＣＯＮＡＺＯＬＥＴＭ，ＩＴＲＡＣＯＮＡＺＯＬＥ ＴＭ ，ＫＥＴＯＣＯＮＡＺＯＬＥＴＭ，ＡＣＹＣＬＯＶＩＲＴＭ，ＦＡＭＣＩＣ
ＯＬＶＩＲＴＭ，ＰＹＲＩＭＥＴＨＡＭＩＮＥＴＭ，ＬＥＵＣＯＶＯＲＩＮＴＭ ，ＮＥＵＰＯＧＥＮＴＭ（フィルグラスチム（ｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）／Ｇ−Ｃ
ＳＦ），およびＬＥＵＫＩＮＥＴＭ（サルグラモスチン（ｓａｒｇｒａｍｏｓｔ
ｉｍ）／ＧＭ−ＣＳＦ）。特定の実施形態において、本発明の治療剤は、日和見
Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｃａｒｉｎｉｉ肺炎感染を予防的に処置または予防
するために、ＴＲＩＭＥＴＨＯＰＲＩＭ−ＳＵＬＦＡＭＥＴＨＯＸＡＺＯＬＥＴ Ｍ 、ＤＡＰＳＯＮＥＴＭ、ＰＥＮＴＡＭＩＤＩＮＥＴＭ、および／またはＡＴＯ
ＶＡＱＵＯＮＥＴＭとの任意の組み合わせで使用される。別の特定の実施形態に
おいて、本発明の治療剤は、日和見Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｖｉｕｍ複
合感染を予防的に処置または予防するために、ＩＳＯＮＩＡＺＩＤＴＭ、ＲＩＦ
ＡＭＰＩＮＴＭ、ＰＹＲＡＺＩＮＡＭＩＤＥＴＭ、および／またはＥＴＨＡＭＢ
ＵＴＯＬＴＭとの任意の組み合わせで使用される。別の特定の実施形態において
、本発明の治療剤は、日和見Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏ
ｓｉｓ感染を予防的に処置または予防するために、ＲＩＦＡＢＵＴＩＮＴＭ、Ｃ
ＬＡＲＩＴＨＲＯＭＹＣＩＮＴＭ、および／またはＡＺＩＴＨＲＯＭＹＣＩＮＴ Ｍ との任意の組み合わせで使用される。別の特定の実施形態において、本発明の
治療剤は、日和見サイトメガロウイルス感染を予防的に処置または予防するため
に、ＧＡＮＣＩＣＬＯＶＩＲＴＭ、ＦＯＳＣＡＲＮＥＴＴＭ、および／またはＣ
ＩＤＯＦＯＶＩＲＴＭとの任意の組み合わせで使用される。別の特定の実施形態
において、本発明の治療剤は、日和見真菌感染を予防的に処置または予防するた
めに、ＦＬＵＣＯＮＡＺＯＬＥＴＭ、ＩＴＲＡＣＯＮＡＺＯＬＥＴＭ、および／
またはＫＥＴＯＣＯＮＡＺＯＬＥＴＭとの任意の組み合わせで使用される。別の
特定の実施形態において、本発明の治療剤は、日和見単純ヘルペスウイルスＩ型
および／またはＩＩ型感染を予防的に処置または予防するために、ＡＣＹＣＬＯ
ＶＩＲＴＭおよび／またはＦＡＭＣＩＣＯＬＶＩＲＴＭとの任意の組み合わせで
使用される。別の特定の実施形態において、本発明の治療剤は、日和見Ｔｏｘｏ
ｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ感染を予防的に処置または予防するために、ＰＹＲ
ＩＭＥＴＨＡＭＩＮＥＴＭおよび／またはＬＥＵＣＯＶＯＲＩＮＴＭとの任意の
組み合わせで使用される。別の特定の実施形態において、本発明の治療剤は、日
和見細菌感染を予防的に処置または予防するために、ＬＥＵＣＯＶＯＲＩＮＴＭ および／またはＮＥＵＰＯＧＥＮＴＭとの任意の組み合わせで使用される。
【０９２４】 さらなる実施形態において、本発明の治療剤は、抗生物質薬剤と組み合わせて
投与される。本発明の治療剤とともに投与され得る抗生物質としては、アモキシ
シリン、β−ラクタマーゼ、アミノ配糖体、β−ラクタム（糖ペプチド）、β−
ラクタマーゼ、クリンダマイシン、クロラムフェニコール、セファロスポリン、
シプロフロキサシン、シプロフロキサシン、エリスロマイシン、フルオロキノロ
ン類、マクロライド系抗生物質、メトロニダゾル、ペニシリン、キノロン類、ラ
パマイシン、リファンピン、ストレプトマイシン、スルホンアミド、テトラサイ
クリン、トリメトプリム、トリメトプリム−スルファメトキサゾール、およびバ
ンコマイシンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０９２５】 他の実施形態において、本発明の治療剤は、免疫刺激物質と組み合わせて投与
される。本発明の治療剤と組み合わせて投与され得る免疫刺激物質としては、レ
バミゾール（例えば、ＥＲＧＡＭＩＳＩＬＴＭ）、イソプリノシン（例えば、Ｉ
ＮＯＳＩＰＬＥＸＴＭ）、インターフェロン（例えば、インターフェロンα）、
およびインターロイキン（例えば、ＩＬ−２）が挙げられるが、これらに限定さ
れない。
【０９２６】 他の実施形態では、本発明の治療剤は、免疫抑制剤と組み合わせて投与される
。本発明の治療剤と組み合わせて投与され得る免疫抑制剤としては、ステロイド
類、シクロスポリン、シクロスポリンアナログ、シクロホスファミドメチルプレ
ドニゾン、プレドニゾン、アザチオプリン、ＦＫ−５０６、１５−デオキシスペ
ルグアリン（１５−ｄｅｏｘｙｓｐｅｒｇｕａｌｉｎ）、および応答Ｔ細胞の機
能を抑制することによって作用する他の免疫抑制剤が挙げられるが、これらに限
定されない。本発明の治療剤と組み合わせて投与され得る他の免疫抑制剤として
は、以下が挙げられるが、これらに限定されない：プレドニゾロン、メトトレキ
サート、サリドマイド、メトキサレン、ラパマイシン、レフルノミド、ミゾリビ
ン（ＢＲＥＤＩＮＩＮＴＭ）、ブレキナル、デオキシスペルグアリン（ｄｅｏｘ
ｙｓｐｅｒｇｕａｌｉｎ）、およびアザスピラン（ａｚａｓｐｉｒａｎｅ）（Ｓ
ＫＦ １０５６８５），ＯＲＴＨＯＣＬＯＮＥ ＯＫＴ（登録商標）３（マウス
モノクローナル抗ＣＤ３抗体），ＳＡＮＤＩＭＭＵＮＥＴＭ，ＮＥＯＲＡＬＴＭ ，ＳＡＮＧＤＹＡＴＭ（シクロスポリン），ＰＲＯＧＲＡＦ（登録商標）（ＦＫ
５０６，タクロリムス），ＣＥＬＬＣＥＰＴ（登録商標）（マイコフェノラート
モフェチル（ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌａｔｅ ｍｏｔｅｆｉｌ），その活性な代謝
産物は、ミコフェノール酸である），ＩＭＵＲＡＮＴＭ（アザチオプリン），グ
ルココルチコステロイド，副腎皮質ステロイド（例えば、ＤＥＬＴＡＳＯＮＥＴ Ｍ （プレドニゾロン）およびＨＹＤＥＬＴＲＡＳＯＬＴＭ（プレドニゾロン），
ＦＯＬＥＸＴＭおよびＭＥＸＡＴＥＴＭ（メトトレキサート），ＯＸＳＯＲＡＬ
ＥＮ−ＵＬＴＲＡＴＭ（メトキサレン）ならびにＲＡＰＡＭＵＮＥＴＭ（シロリ
ムス（ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ））。特定の実施形態では、免疫抑制剤は、器官また
は骨髄移植の拒絶を予防するために使用され得る。
【０９２７】 さらなる実施形態において、本発明の治療剤は、単独でかまたは１以上の静脈
内免疫グロブリン調製物と組み合わせて投与される。本発明の治療剤とともに投
与され得る静脈内免疫グロブリン調製物としては、ＧＡＭＭＡＲＴＭ、ＩＶＥＥ
ＧＡＭＴＭ、ＳＡＮＤＯＧＬＯＢＵＬＩＮＴＭ、ＧＡＭＭＡＧＡＲＤ Ｓ／ＤＴ Ｍ 、ＡＴＧＡＭＴＭ（抗胸腺細胞グロブリン）およびＧＡＭＩＭＵＮＥＴＭが挙
げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、本発明の治療剤
は、移植治療（例えば、骨髄移植）において静脈内免疫グロブリン調製物と組み
合わせて投与される。
【０９２８】 特定の実施形態では、本発明の治療剤は、単独または抗炎症性薬剤と組み合わ
せて投与される。本発明の治療剤と共に投与され得る抗炎症性薬剤としては、以
下が挙げられるが、これらに限定されない：コルチコステロイド（例えば、ベタ
メタゾン、ブデソニド、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチ
ルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、およびトリアムシノロン）
、非ステロイド性抗炎症薬物（例えば、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトド
ラク、フェノプロフェン、フロクタフェニン、フルルビプロフェン、イブプロフ
ェン、インドメタシン、ケトプロフェン、メクロフェナム酸塩、メフェナム酸、
メロキシカム、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、フェニルブタゾン
、ピロキシカム、スリンダク、テノキシカム、チアプロフェン酸、およびトルメ
チン）、ならびに抗ヒスタミン薬、アミノアリールカルボン酸誘導体、アリール
酢酸誘導体、アリール酪酸誘導体、アリールカルボン酸、アリールプロピオン酸
誘導体、ピラゾール類、ピラゾロン類、サリチル酸誘導体、チアジンカルボキサ
ミド類、ｅ−アセトアミドカプロン酸、Ｓ−アデノシルメチオニン、３−アミノ
−４−ヒドロキシ酪酸、アミキセトリン（ａｍｉｘｅｔｒｉｎｅ）、ベンダザッ
ク、ベンジダミン、ブコローム、ジフェンピラミド、ジタゾール、エモルファゾ
ン、グアイアズレン、ナブメトン、ニメスリド、オルゴテイン、オキサセプロー
ル、パラニリン（ｐａｒａｎｙｌｉｎｅ）、ペリソキサール、ピフオキシム、プ
ロカゾン、プロキサゾール、およびテニダプ。
【０９２９】 さらなる実施形態において、本発明の組成物は、単独でかまたは抗脈管形成薬
剤と組み合わせて投与される。本発明の組成物とともに投与され得る抗脈管形成
薬剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：アンジオスタチン
（Ｅｎｔｒｅｍｅｄ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）、トロポニン−１（Ｂｏｓｔ
ｏｎ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）、抗侵襲性因子、レ
チノイン酸およびその誘導体、パクリタキセル（タキソール）、スラミン、メタ
ロプロテイナーゼ−１の組織インヒビター、メタロプロテイナーゼ−２の組織イ
ンヒビター、ＶＥＧＩ、プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター−１、プ
ラスミノーゲンアクチベーターインヒビター−２および種々の形態のより軽い「
ｄ群」遷移金属。
【０９３０】 より軽い「ｄ群」遷移金属としては、例えばバナジウム、モリブデン、タング
ステン、チタン、ニオブおよびタンタル種が挙げられる。そのような遷移金属種
は、遷移金属錯体を形成し得る。上記の遷移金属種の適切な錯体としては、オキ
ソ遷移金属錯体が挙げられる。
【０９３１】 バナジウム錯体の代表的な例としては、バナデート錯体およびバナジル錯体の
ようなオキソバナジウム錯体が挙げられる。適切なバナデート錯体としては、例
えばメタバナジン酸アンモニウム、メタバナジン酸ナトリウムおよびオルトバナ
ジン酸ナトリウムのようなメタバナデート錯体およびオルトバナデート錯体が挙
げられる。適切なバナジル錯体としては、例えばバナジルアセチルアセトネート
および硫酸バナジル（硫酸バナジル一水和物および硫酸バナジル三水和物のよう
な硫酸バナジル水和物を含む）が挙げられる。
【０９３２】 タングステン錯体およびモリブデン錯体の代表的な例としてはまた、オキソ錯
体が挙げられる。適切なオキソタングステン錯体としては、タングステート錯体
およびタングステンオキシド錯体が挙げられる。適切なタングステート錯体とし
ては、タングステン酸アンモニウム、タングステン酸カルシウム、タングステン
酸ナトリウム二水和物およびタングステン酸が挙げられる。適切なタングステン
オキシドとしては、タングステン（ＩＶ）オキシドおよびタングステン（ＶＩ）
オキシドが挙げられる。適切なオキソモリブデン錯体としては、モリブデート、
モリブデンオキシドおよびモリブデニル錯体が挙げられる。適切なモリブデート
錯体としては、モリブデン酸アンモニウムおよびその水和物、モリブデン酸ナト
リウムおよびその水和物、ならびにモリブデン酸カリウムおよびその水和物が挙
げられる。適切なモリブデンオキシドとしては、モリブデン（ＶＩ）オキシド、
モリブデン（ＶＩ）オキシドおよびモリブデン酸が挙げられる。適切なモリブデ
ニル錯体としては、例えばモリブデニルアセチルアセトネートが挙げられる。他
の適切なタングステン錯体およびモリブデン錯体としては、例えばグリセロール
、酒石酸および糖由来のヒドロキソ誘導体が挙げられる。
【０９３３】 広範な種々の他の抗脈管形成因子もまた、本発明の状況において利用され得る
。代表的な例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：血小板因
子４；硫酸プロタミン；硫酸化キチン誘導体（クイーンクラブ（ｑｕｅｅｎ ｃ
ｒａｂ）の殻から調製される）（Ｍｕｒａｔａら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５１
：２２〜２６、１９９１）；硫酸化多糖ペプチドグリカン複合体（ＳＰ−ＰＧ）
（この化合物の機能は、ステロイド（例えば、エストロゲン）およびクエン酸タ
モキシフェンの存在によって、増強され得る）；スタウロスポリン；基質代謝の
調節因子（例えば、プロリンアナログ、シスヒドロキシプロリン、ｄ，Ｌ−３，
４−デヒドロプロリン、チアプロリン、α，α−ジピリジル，アミノプロピオニ
トリルフマレートを含む）；４−プロピル−５−（４−ピリジニル）−２（３Ｈ
）−オキサゾロン；メトトレキサート；ミトザントロン；ヘパリン；インターフ
ェロン；２マクログロブリン−血清；ＣｈＩＭＰ−３（Ｐａｖｌｏｆｆら、Ｊ．
Ｂｉｏ．Ｃｈｅｍ．２６７：１７３２１〜１７３２６、１９９２）；キモスタチ
ン（Ｔｏｍｋｉｎｓｏｎら、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ．２８６：４７５〜４８０、１
９９２）；シクロデキストリンテトラデカサルフェート；エポネマイシン；カン
プトテシン；フマギリン（Ｉｎｇｂｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５５〜５
５７、１９９０）；チオリンゴ酸金ナトリウム（「ＧＳＴ」；Ｍａｔｓｕｂａｒ
ａおよびＺｉｆｆ、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．７９：１４４０〜１４４６、
１９８７）；アンチコラゲナーゼ−血清；α２−抗プラスミン（Ｈｏｌｍｅｓら
、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２（４）：１６５９〜１６６４、１９８７）；
ビサントレン（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）；ロベ
ンザリット二ナトリウム（Ｎ−（２）−カルボキシフェニル−４−クロロアント
ロニル酸（ｃｈｌｏｒｏａｎｔｈｒｏｎｉｌｉｃ ａｃｉｄ）二ナトリウム、す
なわち「ＣＣＡ」；Ｔａｋｅｕｃｈｉら、Ａｇｅｎｔｓ Ａｃｔｉｏｎｓ ３６
：３１２〜３１６、１９９２）；およびメタロプロテイナーゼインヒビター（例
えば、ＢＢ９４）。
【０９３４】 本発明の状況において同様に利用され得るさらなる抗脈管形成因子としては、
サリドマイド（Ｃｅｌｇｅｎｅ，Ｗａｒｒｅｎ，ＮＪ）；血管拡張性ステロイド
；ＡＧＭ−１４７０（Ｈ．ＢｒｅｍおよびＪ．Ｆｏｌｋｍａｎ Ｊ Ｐｅｄｉａ
ｔｒ．Ｓｕｒｇ．２８：４４５−５１（１９９３））；インテグリンαｖβ３ア
ンタゴニスト（Ｃ．Ｓｔｏｒｇａｒｄら，Ｊ Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０３
：４７−５４（１９９９））；カルボキシアミノイミダゾール（ｃａｒｂｏｘｙ
ｎａｍｉｎｏｌｍｉｄａｚｏｌｅ）；カルボキシアミドトリアゾール（ＣＡＩ）
（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，
ＭＤ）；Ｃｏｎｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎ Ａ−４（ＣＡ４Ｐ）（ＯＸｉＧＥＮＥ
，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）；Ｓｑｕａｌａｍｉｎｅ（Ｍａｇａｉｎｉｎ Ｐｈａｒ
ｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｐｌｙｍｏｕｔｈ Ｍｅｅｔｉｎｇ，ＰＡ）；ＴＮＰ
−４７０，（Ｔａｐ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ，
ＩＬ）；ＺＤ−０１０１ ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ（Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫ）；Ａ
ＰＲＡ（ＣＴ２５８４）；Ｂｅｎｅｆｉｎ，Ｂｙｒｏｓｔａｔｉｎ−１（ＳＣ３
３９５５５）；ＣＧＰ−４１２５１（ＰＫＣ ４１２）；ＣＭ１０１；Ｄｅｘｒ
ａｚｏｘａｎｅ（ＩＣＲＦ１８７）；ＤＭＸＡＡ；エンドスタチン；Ｆｌａｖｏ
ｐｒｉｄｉｏｌ；Ｇｅｎｅｓｔｅｉｎ；ＧＴＥ；ＩｍｍＴｈｅｒ；Ｉｒｅｓｓａ
（ＺＤ１８３９）；Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ（ソマトスタチン）；Ｐａｎｒｅｔｉ
ｎ；Ｐｅｎａｃｉｌｌａｍｉｎｅ；Ｐｈｏｔｏｐｏｉｎｔ；ＰＩ−８８；Ｐｒｉ
ｎｏｍａｓｔａｔ（ＡＧ−３３４０）Ｐｕｒｌｙｔｉｎ；Ｓｕｒａｄｉｓｔａ（
ＦＣＥ２６６４４）；タモキシフェン（Ｎｏｌｖａｄｅｘ）；Ｔａｚａｒｏｔｅ
ｎｅ；テトラチオモリブデート；Ｘｅｌｏｄａ（Ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）；
および５−フルオロウラシルが挙げられる。
【０９３５】 本発明の組成物と組み合わせて投与され得る抗脈管形成薬剤は、種々の機構を
通じて作用し得、これらの機構としては、以下が挙げられるが、これらに限定さ
れない：細胞外マトリックスのタンパク質分解の阻害、内皮細胞−細胞外マトリ
ックス接着分子の機能のブロック、増殖因子のような脈管形成誘導因子の機能と
拮抗すること、および増殖している内皮細胞において発現されるインテグリンレ
セプタ−の阻害。細胞外マトリックスタンパク質分解を妨害し、そして本発明の
組成物と組み合わせて投与され得る抗脈管形成インヒビターの例としては、以下
が挙げられるが、これらに限定されない：ＡＧ−３３４０（Ａｇｏｕｒｏｎ，Ｌ
ａ Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）、ＢＡＹ−１２−９５６６（Ｂａｙｅｒ，Ｗｅｓｔ Ｈ
ａｖｅｎ，ＣＴ）、ＢＭＳ−２７５２９１（Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒｓ Ｓｑ
ｕｉｂｂ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ）、ＣＧＳ−２７０３２Ａ（Ｎｏｖａｒｔ
ｉｓ，Ｅａｓｔ Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪ）、Ｍａｒｉｍａｓｔａｔ（Ｂｒｉｔｉ
ｓｈ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｏｘｆｏｒｄ，ＵＫ）およびＭｅｔａｓｔａｔ（Ａｅｔ
ｅｒｎａ，Ｓｔ−Ｆｏｙ，Ｑｕｅｂｅｃ）。内皮細胞−細胞外マトリックス接着
分子の機能をブロックすることにより作用し、そして本発明の組成物と組み合わ
せて投与され得る抗脈管形成インヒビターの例としては、以下が挙げられるが、
これらに限定されない：ＥＭＤ−１２１９７４（Ｍｅｒｃｋ ＫｃｇａＡ Ｄａ
ｒｍｓｔａｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）およびＶｉｔａｘｉｎ（Ｉｘｓｙｓ，Ｌａ
Ｊｏｌｌａ，ＣＡ／Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）。
脈管形成誘導因子と直接拮抗するかまたはこの誘導因子を阻害することにより作
用し、そして本発明の組成物と組み合わせて投与され得る抗脈管形成薬剤の例と
しては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：Ａｎｇｉｏｚｙｍｅ（Ｒ
ｉｂｏｚｙｍｅ，Ｂｏｕｌｄｅｒ，ＣＯ）、抗ＶＥＧＦ抗体（Ｇｅｎｅｎｔｅｃ
ｈ，Ｓ．Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）、ＰＴＫ−７８７／ＺＫ−２２５
８４６（Ｎｏｖａｒｔｉｓ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、ＳＵ−１
０１（Ｓｕｇｅｎ，Ｓ．Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）、ＳＵ−５４１６
（Ｓｕｇｅｎ／Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｕｐｊｏｈｎ，Ｂｒｉｄｇｅｗａｔｅｒ，
ＮＪ）、およびＳＵ−６６６８（Ｓｕｇｅｎ）。他の抗脈管形成薬剤は、脈管形
成を間接的に阻害するように作用する。本発明の組成物と組み合わせて投与され
得る脈管形成の間接的インヒビターの例としては、以下が挙げられるが、これら
に限定されない：ＩＭ−８６２（Ｃｙｔｒａｎ，Ｋｉｒｋｌａｎｄ，ＷＡ）、イ
ンターフェロン−α、ＩＬ−１２（Ｒｏｃｈｅ，Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ）、および
ペントサンポリスルフェ−ト（Ｇｅｏｒｇｅｔｏｗｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ）。
【０９３６】 特定の実施形態において、抗脈管形成薬剤と組み合わせた本発明の組成物の使
用は、自己免疫疾患（例えば、本明細書中に記載の自己免疫疾患）の処置、予防
、および／または回復のために企図される。
【０９３７】 特定の実施形態において、抗脈管形成薬剤と組み合わせた本発明の組成物の使
用は、関節炎の処置、予防、および／または回復のために企図される。さらに特
定の実施形態において、抗脈管形成薬剤と組み合わせた本発明の組成物の使用は
、慢性関節リウマチの処置、予防、および／または回復のために企図される。
【０９３８】 別の実施形態において、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド
は、脈管形成タンパク質または脈管形成タンパク質をコードする他のポリヌクレ
オチドと一緒に投与され得る。本発明の組成物とともに投与され得る脈管形成タ
ンパク質としては、酸性および塩基性の線維芽細胞増殖因子、ＶＥＧＦ−１、Ｖ
ＥＧＦ−２、ＶＥＧＦ−３、上皮増殖因子αおよびβ、血小板由来内皮細胞増殖
因子、血小板由来増殖因子、腫瘍壊死因子α、肝細胞増殖因子、インスリン様増
殖因子、コロニー刺激因子、マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球／マクロ
ファージコロニー刺激因子、および一酸化窒素シンターゼが挙げられるが、これ
らに限定されない。
【０９３９】 さらなる実施形態において、本発明の組成物は、化学療法剤と組み合わせて投
与される。本発明の治療剤とともに投与され得る化学療法剤としては、アルキル
化剤（例えば、ナイトロジェンマスタ−ド（例えば、メクロレタミン、シクロホ
スファミド、シクロホスファミドイホスファミド（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍ
ｉｄｅ Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、メルファラン（Ｌ−サルコリジン）、および
クロラムブシル）、エチレンイミン、およびメチルメルアミン（例えば、ヘキサ
メチルメラミンおよびチオテパ）、硫酸アルキル（例えば、ブスルファン）、ニ
トロソ尿素類（例えば、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、
セムスチン（メチルＣＣＮＵ）、およびストレプトゾシン（ストレプトゾトシン
）、トリアゼン（ｔｒｉａｚｅｎｅ）（例えば、ダカルバジン、（ＤＴＩＣ；ジ
メチルトリアゼノイミダゾ−ルカルボキシアミド（ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｒｉａｚ
ｅｎｏｉｍｉｄａｚｏｌｅｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ））、葉酸アナログ（例えば
、メトトレキセート（アメトプテリン）、ピリミジンアナログ（例えば、フルオ
ロウラシル（５−フルオロウラシル；５−ＦＵ）、フロクスリジン（フルオロデ
オキシウリジン；ＦｕｄＲ）、およびシタラビン（シトシンアラビノシド））、
プリンアナログおよびプリン関連阻害剤（例えば、メルカプトプリン（６−メル
カプトプリン；６−ＭＰ）、チオグアニン（６−チオグアニン；ＴＧ）、および
ペントスタチン（２’−デオキシコフォルマイシン）、ビンカアルカロイド（例
えば、ビンブラスチン（ＶＬＢ、硫酸ビンブラスチン））およびビンクリスチン
（硫酸ビンクリスチン））、エピポドフィルロトキシン（ｅｐｉｐｏｄｏｐｈｙ
ｌｌｏｔｏｘｉｎ）（例えば、エトポシドおよびテニポシド）、抗生物質（例え
ば、ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ）、ダウノルビシン（ダウノマイシ
ン；ルビドマイシン）、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリカマイシン（Ｐ
ｌｉｃａｍｙｃｉｎ）（ミトラマイシン）、およびマイトマシン（マイトマイシ
ンＣ）、酵素（例えば、Ｌ−アスパラギナ−ゼ）、生物学的応答変更因子（例え
ば、インタ−フェロンαおよびインタ−フェロンα−２ｂ）、白金錯体組成物（
例えば、シスプラチン（ｃｉｓ−ＤＤＰ）およびカルボプラチン）、アントラシ
ンジオン（ａｎｔｈｒａｃｅｎｅｄｉｏｎｅ）（ミトキサントロン）、置換尿素
（例えば、ヒドロキシ尿素）、メチルヒドラジン誘導体（例えば、プロカルバジ
ン（Ｎ−メチルヒドラジン；ＭＩＨ）、アドレノコルチコステロイド（例えば、
プレドニゾロン）、プロゲスチン（例えば、ヒドロキシプロゲステロンカプロエ
−ト（Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ ｃａｐｒｏａｔｅ）、メドロ
キシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、および酢酸メゲストロ−
ル）、エストロゲン（例えば、ジエチルスチルベストロ−ル（ＤＥＳ）、ジエチ
ルスチルベストロ−ルジホスフェ−ト、エストラジオ−ル、およびエチニルエス
トラジオ−ル）、抗エストロゲン（例えば、タモキシフェン）、アンドロゲン（
プロピオン酸テストステロン、およびフルオキシメステロン）、抗アンドロゲン
（例えば、フルタミド）、ゴナドトロピン放出ホルモンアナログ（例えば、ロイ
プロリド）、他のホルモンおよびホルモンアナログ（例えば、メチルテストステ
ロン、エストラムスチン、エストラムスチンリン酸ナトリウム、クロロトリアニ
セン、およびテストラクトン）、および他のもの（例えば、ジカルバジン（ｄｉ
ｃａｒｂａｚｉｎｅ）、グルタミン酸、およびミトタン）が挙げられるが、これ
らに限定されない。
【０９４０】 １つの実施形態において、本発明の組成物は、１つ以上の以下の薬物と組み合
わせて投与される：インフリキシマブ（ｉｎｆｌｉｘｉｍａｂ）（これはまた、
ＲｅｍｉｃａｄｅＴＭＣｅｎｔｏｃｏｒ，Ｉｎｃ．として公知である）、トロケ
イド（Ｔｒｏｃａｄｅ）（Ｒｏｃｈｅ，ＲＯ−３２−３５５５）、レフルノミド
（Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ）（これはまた、Ｈｏｅｃｈｓｔ Ｍａｒｉｏｎ Ｒ
ｏｕｓｓｅｌ製のＡｒａｖａＴＭとして公知である）、ＫｉｎｅｒｅｔＴＭ（こ
れは、Ａｍｇｅｎ，Ｉｎｃ製のアナキンラ（Ａｎａｋｉｎｒａ）として、また公
知である、ＩＬ−１レセプタ−アンタゴニスト）。
【０９４１】 特定の実施形態において、本発明の組成物は、ＣＨＯＰ（シクロホスファミド
、ドキソルビシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾン）と組み合わせて投与
されるか、またはＣＨＯＰの成分の１以上の組み合わせで投与される。ある実施
形態において、本発明の組成物は、抗ＣＤ２０抗体（ヒトモノクロ−ナル抗ＣＤ
２０抗体）と組み合わせて投与される。別の実施形態において、本発明の組成物
は、抗ＣＤ２０抗体およびＣＨＯＰと共に、または抗ＣＤ２０抗体およびＣＨＯ
Ｐの１以上の成分（特に、シクロホスファミドおよび／またはプレドニゾロン）
の任意の組み合わせと共に投与される。特定の実施形態において、本発明の組成
物は、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）と組み合わせて投与される。さらな
る実施形態において、本発明の組成物は、リツキシマブおよびＣＨＯＰと共に、
またはリツキシマブおよびＣＨＯＰの１以上の成分（特に、シクロホスファミド
および／またはプレドニゾロン）の任意の組み合わせと共に投与される。特定の
実施形態において、本発明の組成物は、トシツモマブ（ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ
）と組み合わせて投与される。さらなる実施形態において、本発明の組成物は、
トシツモマブおよびＣＨＯＰと共に、またはトシツモマブおよびＣＨＯＰの１以
上の成分（特に、シクロホスファミドおよび／またはプレドニゾロン）の任意の
組み合わせと共に投与される。抗ＣＤ２０抗体を、放射性同位元素、毒素、また
は細胞毒性プロドラッグと任意に結合され得る。
【０９４２】 別の特定の実施形態において、本発明の組成物は、ＺｅｖａｌｉｎＴＭと組み
合わせて投与される。さらなる実施形態において、本発明の治療剤は、Ｚｅｖａ
ｌｉｎＴＭおよびＣＨＯＰと共に、またはＺｅｖａｌｉｎＴＭおよびＣＨＯＰの
１以上の成分（特に、シクロホスファミドおよび／またはプレドニゾロン）の任
意の組み合わせと共に投与される。ＺｅｖａｌｉｎＴＭを、１以上の放射性同位
元素と結合させ得る。特に好ましい同位元素は、９０Ｙおよび１１１Ｉｎである
。
【０９４３】 さらなる実施形態において、本発明の治療剤は、サイトカインと組み合わせて
投与される。本発明の治療剤とともに投与され得るサイトカインとしては、ＩＬ
２、ＩＬ３、ＩＬ４、ＩＬ５、ＩＬ６、ＩＬ７、ＩＬ１０、ＩＬ１２、ＩＬ１３
、ＩＬ１５、抗ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＩＦＮ−γおよびＴＮＦ−αが挙げられ
るが、これらに限定されない。別の実施形態において、本発明の治療剤は、任意
のインタ−ロイキン（ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４
、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１
１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１
７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０およびＩＬ−２１を含むが、これらに
限定されない）と共に投与され得る。
【０９４４】 １つの実施形態において、本発明の治療剤は、ＴＮＦファミリ−のメンバ−と
組み合わせて投与される。本発明の治療剤とともに投与され得るＴＮＦ分子、Ｔ
ＮＦ関連分子、またはＴＮＦ様分子としては、以下が挙げられるが、これらに限
定されない：可溶性形態のＴＮＦ−α、リンホトキシン−α（ＬＴ−α、ＴＮＦ
−βとしても公知）、ＬＴ−β（複合ヘテロトリマ−ＬＴ−α２−β中に見出さ
れる）、ＯＰＧＬ、ＦａｓＬ、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０Ｌ、４−１Ｂ
ＢＬ、ＤｃＲ３、ＯＸ４０Ｌ、ＴＮＦ−γ（国際公開番号ＷＯ９６／１４３２８
）、ＡＩＭ−Ｉ（国際公開番号ＷＯ９７／３３８９９）、エンドカイン−α（国
際公開番号ＷＯ９８／０７８８０）、ＯＰＧ、およびニュートロカイン−α（国
際公開番号ＷＯ９８／１８９２１）、ＯＸ４０、および神経成長因子（ＮＧＦ）
、ならびに可溶性形態のＦａｓ、ＣＤ３０、ＣＤ２７、ＣＤ４０および４−ＩＢ
Ｂ、ＴＲ２（国際公開番号ＷＯ９６／３４０９５）、ＤＲ３（国際公開番号ＷＯ
９７／３３９０４）、ＤＲ４（国際公開番号ＷＯ９８／３２８５６）、ＴＲ５（
国際公開番号ＷＯ９８／３０６９３）、ＴＲＡＮＫ、ＴＲ９（国際公開番号ＷＯ
９８／５６８９２）、ＴＲ１０（国際公開番号ＷＯ９８／５４２０２）、３１２
Ｃ２（国際公開番号ＷＯ９８／０６８４２）、およびＴＲ１２、ならびに可溶性
形態のＣＤ１５４、ＣＤ７０、およびＣＤ１５３。
【０９４５】 さらなる実施形態において、本発明の治療剤は、脈管形成タンパク質と組み合
わせて投与される。本発明の治療剤とともに投与され得る脈管形成タンパク質と
しては、欧州特許番号ＥＰ−３９９８１６に開示されるようなグリオ−ム由来増
殖因子（ＧＤＧＦ）；欧州特許番号ＥＰ−６８２１１０に開示されるような血小
板由来増殖因子Ａ（ＰＤＧＦ−Ａ）；欧州特許番号ＥＰ−２８２３１７に開示さ
れるような血小板由来増殖因子Ｂ（ＰＤＧＦ−Ｂ）；国際公開番号ＷＯ９２／０
６１９４号に開示されるような胎盤増殖因子（ＰｌＧＦ）；Ｈａｕｓｅｒら、Ｇ
ｏｒｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ、４：２５９−２６８（１９９３）に開示されるよ
うな胎盤増殖因子２（ＰｌＧＦ−２）；国際公開番号ＷＯ９０／１３６４９号に
開示されるような血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）；欧州特許番号ＥＰ−５０６４
７７に開示されるような血管内皮増殖因子Ａ（ＶＥＧＦ−Ａ）；国際公開番号Ｗ
Ｏ９６／３９５１５号に開示されるような血管内皮増殖因子２（ＶＥＧＦ−２）
；血管内皮増殖因子Ｂ（ＶＥＧＦ−３）；国際公開番号ＷＯ９６／２６７３６号
に開示されるような血管内皮増殖因子Ｂ−１８６（ＶＥＧＦ−Ｂ１８６）；国際
公開番号ＷＯ９８／０２５４３号に開示されるような血管内皮増殖因子Ｄ（ＶＥ
ＧＦ−Ｄ）；国際公開番号ＷＯ９８／０７８３２号に開示されるような血管内皮
増殖因子Ｄ（ＶＥＧＦ−Ｄ）；およびドイツ国特許番号ＤＥ１９６３９６０１に
開示されるような血管内皮増殖因子Ｅ（ＶＥＧＦ−Ｅ）が挙げられるが、これら
に限定されない。上記の参考文献は、本明細書で参考として援用される。
【０９４６】 さらなる実施形態において、本発明の治療剤は、線維芽細胞増殖因子と組み合
わせて投与される。本発明の治療剤とともに投与され得る線維芽細胞増殖因子と
しては、ＦＧＦ−１、ＦＧＦ−２、ＦＧＦ−３、ＦＧＦ−４、ＦＧＦ−５、ＦＧ
Ｆ−６、ＦＧＦ−７、ＦＧＦ−８、ＦＧＦ−９、ＦＧＦ−１０、ＦＧＦ−１１、
ＦＧＦ−１２、ＦＧＦ−１３、ＦＧＦ−１４、およびＦＧＦ−１５が挙げられる
が、これらに限定されない。
【０９４７】 さらなる実施形態において、本発明の治療剤は、造血系成長因子と組み合わせ
て投与される。本発明の治療剤とともに投与され得る造血系成長因子としては、
顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）（サルグラモスチム（
ｓａｒｇｒａｍｏｓｔｉｍ）、ＬＥＵＫＩＮＥＴＭ、ＰＲＯＫＩＮＥＴＭ）、顆
粒球コロニ−刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）（フィルグラスチム、ＮＥＵＰＯＧＥＮＴ Ｍ ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ、ＣＳＦ−１）、エリスロ
ポエチン（エポエチンα、ＥＰＯＧＥＮＴＭ、ＰＲＯＣＲＩＴＴＭ）、幹細胞因
子（ＳＣＦ、ｃ−ｋｉｔリガンド、鉄剤（ｓｔｅｅｌ ｆａｃｔｏｒ））、巨核
球コロニ−刺激因子、ＰＩＸＹ３２１（ＧＭＣＳＦ／ＩＬ−３融合タンパク質）
、インタ−ロイキン、特にＩＬ−１からＩＬ−１２までのいずれか１つ以上、イ
ンタ−フェロンγまたはトロンボポエチンが挙げられるが、これらに限定されな
い。
【０９４８】 特定の実施形態において、本発明の治療剤は、アドレナリン遮断薬（例えば、
アセブトロ−ル、アテノロ−ル、ベタキソロール、ビソプロ−ル（ｂｉｓｏｐｒ
ｏｌｏｌ）、カルテロ−ル（ｃａｒｔｅｏｌｏｌ）、ラベタロ−ル、メトプロロ
ール、ナドロ−ル、オクスプレノロール、ペンブトロ−ル（ｐｅｎｂｕｔｏｌｏ
ｌ）、ピンドロ−ル、プロプラノロ−ル、ソタロール、およびチモロ−ル）と組
み合わせて投与される。
【０９４９】 別の実施形態において、本発明の治療剤は、抗不整脈薬（例えば、アデノシン
、アミドアロン、ブレチリウム、ジキタリス、ジゴキシン、ジギトキシン、ジリ
アゼム（ｄｉｌｉａｚｅｍ）、ジソピラミド、エスモロール、フレカイニド、リ
ドカイン、メキシレチン、モリシジン（ｍｏｒｉｃｉｚｉｎｅ）、フェニトイン
、ナロカインアミド、Ｎ−アセチルプロカインアミド、プロパフェノン、プロプ
ラノロ−ル、キニジン、ソタロ−ル、トカイニド、およびベラパミル）と組み合
わせて投与される。
【０９５０】 別の実施形態において、本発明の治療剤は、利尿薬（例えば、炭酸脱水酵素阻
害薬（例えば、アセタゾラミド、ジクロルフェナミド、およびメタゾルアミド）
、浸透圧性利尿薬（例えば、グリセリン、イソソルビド、マンニト−ル、および
尿素）、Ｎａ＋−Ｋ＋−２Ｃｌ−共輸送阻害利尿薬（例えば、フロセミド、ブメ
タニド、アゾセミド（ａｚｏｓｅｍｉｄｅ）、ピレタニド、トリパミド、エタク
リン酸、ムゾリミン（ｍｕｚｏｌｉｍｉｎｅ）、およびトルセミド（ｔｏｒｓｅ
ｍｉｄｅ））、チアジドおよびチアジド様利尿薬（例えば、ベンドロフルメサイ
アザイド、ベンズサイアザイド、クロロチアジド、ヒドロクロロチアジド、ヒド
ロフルメチアジド、メチルクロチアジド、ポリチアジド、トリクロメチアジド（
ｔｒｉｃｈｏｒｍｅｔｈｉａｚｉｄｅ）、クロルタリドン、インダパミド、メト
ラゾン、およびキネサゾン）、カリウム保持性利尿薬（例えば、アミロライドお
よびトリアムテレン）、および鉱質コルチコイドレセプタ−アンタゴニスト（例
えば、スピロノラクトン、カンレノン（ｃａｎｒｅｎｏｎｅ）、およびカンレノ
エ−トカリウム（ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｃａｎｒｅｎｏａｔｅ））と組み合わせ
て投与される。
【０９５１】 １つの実施形態において、本発明の治療剤は、内分泌物および／またはホルモ
ンの不均衡障害のための処置剤と組み合わせて投与される。内分泌物および／ま
たはホルモンの不均衡障害のための処置剤としては、以下が挙げられるが、これ
らに限定されない：１２７Ｉ、ヨウ素の放射性同位元素（例えば、１３１Ｉおよ
び１２３Ｉ）；組換え成長ホルモン（例えば、ＨＵＭＡＴＲＯＰＥＴＭ（組換え
ソマトロピン）；成長因子アナログ（例えば、ＰＲＯＴＲＯＰＩＮＴＭ（ソマト
レム）；ド−パミンアゴニスト（例えば、ＰＡＲＬＯＤＥＬＴＭ（ブロモクリプ
チン）；ソマトスタチンアナログ（例えば、ＳＡＮＤＯＳＴＡＴＩＮＴＭ（オク
トレオチド）；ゴナドトロピン調製物（例えば、ＰＲＥＧＮＹＬＴＭ、Ａ．Ｐ．
Ｌ．ＴＭ およびＰＲＯＦＡＳＩＴＭ（絨毛性ゴナドトロピン（ＣＧ））、ＰＥ
ＲＧＯＮＡＬＴＭ（メノトロピン）、およびＭＥＴＲＯＤＩＮＴＭ（尿性卵胞性
刺激ホルモン（ｕＦＳＨ））；合成ヒトゴナドトロピン放出ホルモン調製物（例
えば、ＦＡＣＴＲＥＬＴＭおよびＬＵＴＲＥＰＵＬＳＥＴＭ（塩酸ゴナドレリン
）；合成ゴナドトロピンアゴニスト（例えば、ＬＵＰＲＯＮＴＭ（酢酸ロイプロ
リド）、ＳＵＰＰＲＥＬＩＮＴＭ（酢酸ヒストレリン（ｈｉｓｔｒｅｌｉｎ ａ
ｃｅｔａｔｅ））、ＳＹＮＡＲＥＬＴＭ（酢酸ナファレリン（ｎａｆａｒｅｌｉ
ｎ ａｃｅｔａｔｅ））、およびＺＯＬＡＤＥＸＴＭ（酢酸ゴセレリン（ｇｏｓ
ｅｒｅｌｉｎ ａｃｅｔａｔｅ））；甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン合成調製
物（例えば、ＲＥＬＥＦＡＣＴ ＴＲＨＴＭおよびＴＨＹＰＩＮＯＮＥＴＭ（プ
ロチレリン）；組換えヒトＴＳＨ（例えば、ＴＨＹＲＯＧＥＮＴＭ）；甲状腺ホ
ルモンの天然異性体のナトリウム塩の合成調製物（例えば、Ｌ−Ｔ４ ＴＭ、ＳＹ
ＮＴＨＲＯＩＤＴＭおよびＬＥＶＯＴＨＲＯＩＤＴＭ（レボチロキシンナトリウ
ム（ｌｅｖｏｔｈｙｒｏｘｉｎｅ ｓｏｄｉｕｍ））、Ｌ−Ｔ３ ＴＭ、ＣＹＴＯ
ＭＥＬＴＭおよびＴＲＩＯＳＴＡＴＴＭ（リオチロインナトリウム（ｌｉｏｔｈ
ｙｒｏｉｎｅ ｓｏｄｉｕｍ））、およびＴＨＹＲＯＬＡＲＴＭ（リオトリック
ス）；抗甲状腺組成物（例えば、６−ｎ−プロピルチオウラシル（プロピルチオ
ウラシル）、１−メチル−２−メルカプトイミダゾ−ルおよびＴＡＰＡＺＯＬＥ ＴＭ （メチマゾ−ル）、ＮＥＯ−ＭＥＲＣＡＺＯＬＥＴＭ（カルビマゾ−ル）；
βアドレナリン作用性レセプタ−アンタゴニスト（例えば、プロプラノロ−ルお
よびエスモロ−ル；Ｃａ２＋チャネル阻害剤；デキサメタゾンおよびヨウ素の放
射線医学的造影剤（例えば、ＴＥＬＥＰＡＱＵＥＴＭ（ヨ−パン酸）およびＯＲ
ＡＧＲＡＦＩＮＴＭ（イポダ−トナトリウム）。
【０９５２】 さらなる内分泌物および／またはホルモンの不均衡障害のための処置剤として
は、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ＥＳＴＲＡＣＥＴＭ（エスト
ラジオ−ル）、ＥＳＴＩＮＹＬＴＭ（エチニルエストラジオ−ル）、ＰＲＥＭＡ
ＲＩＮＴＭ、ＥＳＴＲＡＴＡＢＴＭ、ＯＲＴＨＯ−ＥＳＴＴＭ、ＯＧＥＮＴＭお
よびエストロピペイト（ｅｓｔｒｏｐｉｐａｔｅ）（エストロン）、ＥＳＴＲＯ
ＶＩＳＴＭ（キネストロ−ル）、ＥＳＴＲＡＤＥＲＭＴＭ（エストラジオ−ル）
、ＤＥＬＥＳＴＲＯＧＥＮＴＭおよびＶＡＬＥＲＧＥＮＴＭ（吉草酸エストラジ
オール）、ＤＥＰＯ−ＥＳＴＲＡＤＩＯＬ ＣＹＰＩＯＮＡＴＥＴＭおよびＥＳ
ＴＲＯＪＥＣＴ ＬＡＴＭ（エストラジオールシピオネート）；抗エストロゲン
（例えば、ＮＯＬＶＡＤＥＸＴＭ（タモキシフェン）、ＳＥＲＯＰＨＥＮＥＴＭ およびＣＬＯＭＩＤＴＭ（クロミフェン）；プロゲスチン（例えば、ＤＵＲＡＬ
ＵＴＩＮＴＭ（カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン）（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏ
ｇｅｓｔｅｒｏｎｅ ｃａｐｒｏａｔｅ））、ＭＰＡＴＭおよびＤＥＰＯ−ＰＲ
ＯＶＥＲＡＴＭ（酢酸メドロキシプロゲステロン）、ＰＲＯＶＥＲＡＴＭおよび
ＣＹＣＲＩＮＴＭ（ＭＰＡ）、ＭＥＧＡＣＥＴＭ（酢酸メゲストロ−ル）、ＮＯ
ＲＬＵＴＩＮＴＭ（ノルエチンドロン），ならびにＮＯＲＬＵＴＡＴＥＴＭおよ
びＡＹＧＥＳＴＩＮＴＭ（酢酸ノルエチンドロン）；プロゲステロンインプラン
ト（例えば、ＮＯＲＰＬＡＮＴ ＳＹＳＴＥＭＴＭ（ノルゲストレルの皮下移植
）；抗黄体ホルモン（例えば、ＲＵ ４８６ＴＭ（ミフェプリストン）；ホルモ
ン避妊薬（例えば、ＥＮＯＶＩＤＴＭ（ノルエチノドレル＋メストラノ−ル）、
ＰＲＯＧＥＳＴＡＳＥＲＴＴＭ（プロゲステロンを放出する子宮内器具）、ＬＯ
ＥＳＴＲＩＮＴＭ、ＢＲＥＶＩＣＯＮＴＭ、ＭＯＤＩＣＯＮＴＭ、ＧＥＮＯＲＡ ＴＭ 、ＮＥＬＯＮＡＴＭ、ＮＯＲＩＮＹＬＴＭ、ＯＶＡＣＯＮ−３５ＴＭおよび
ＯＶＡＣＯＮ−５０ＴＭ（エチニルエストラジオ−ル／ノルエチンドロン）、Ｌ
ＥＶＬＥＮＴＭ、ＮＯＲＤＥＴＴＥＴＭ、ＴＲＩ−ＬＥＶＬＥＮＴＭおよびＴＲ
ＩＰＨＡＳＩＬ−２１ＴＭ（エチニルエストラジオ−ル／レボノルゲストレル（
ｌｅｖｏｎｏｒｇｅｓｔｒｅｌ）） ＬＯ／ＯＶＲＡＬＴＭおよびＯＶＲＡＬＴ Ｍ （エチニルエストラジオ−ル／ノルゲストレル）、ＤＥＭＵＬＥＮＴＭ（エチ
ニルエストラジオ−ル／二酢酸エチノジオ−ル）、ＮＯＲＩＮＹＬＴＭ、ＯＲＴ
ＨＯ−ＮＯＶＵＭＴＭ、ＮＯＲＥＴＨＩＮＴＭ、ＧＥＮＯＲＡＴＭ，およびＮＥ
ＬＯＶＡＴＭ（ノルエチンドロン／メストラノ−ル）、ＤＥＳＯＧＥＮＴＭおよ
びＯＲＴＨＯ−ＣＥＰＴＴＭ（エチニルエストラジオ−ル／デソゲステレル（ｄ
ｅｓｏｇｅｓｔｒｅｌ））、ＯＲＴＨＯ−ＣＹＣＬＥＮＴＭおよびＯＲＴＨＯ−
ＴＲＩＣＹＣＬＥＮＴＭ（エチニルエストラジオ−ル／ノルゲスチメ−ト（ｎｏ
ｒｇｅｓｔｉｍａｔｅ））、ＭＩＣＲＯＮＯＲＴＭおよびＮＯＲ−ＱＤＴＭ（ノ
ルエチンドロン），およびＯＶＲＥＴＴＥＴＭ（ノルゲストレル）。
【０９５３】 さらなる内分泌物および／またはホルモンの不均衡障害のための処置剤として
は、以下が挙げられるが、これらに限定されない：テストステロンエステル（例
えば、酢酸メテノロン（ｍｅｔｈｅｎｏｌｏｎｅ ａｃｅｔａｔｅ）およびテス
トステロンアンデカノエ−ト（ｕｎｄｅｃａｎｏａｔｅ）；非経口および経口ア
ンドロゲン（例えば、ＴＥＳＴＯＪＥＣＴ−５０ＴＭ（テストステロン）、ＴＥ
ＳＴＥＸＴＭ（プロピオン酸テストステロン）、ＤＥＬＡＴＥＳＴＲＹＬＴＭ（
エナンタ−トテストステロン）、ＤＥＰＯ−ＴＥＳＴＯＳＴＥＲＯＮＥＴＭ（シ
ピオネ−トテストステロン）、ＤＡＮＯＣＲＩＮＥＴＭ（ダナゾ−ル）、ＨＡＬ
ＯＴＥＳＴＩＮＴＭ（フルオキシメステロン）、ＯＲＥＴＯＮ ＭＥＴＨＹＬＴ Ｍ 、ＴＥＳＴＲＥＤＴＭおよびＶＩＲＩＬＯＮＴＭ（メチルテストステロン）、
およびＯＸＡＮＤＲＩＮＴＭ（オキサンドロロン）；テストステロン経皮的シス
テム（例えば、ＴＥＳＴＯＤＥＲＭＴＭ；アンドロゲンレセプタ−アンタゴニス
トおよび５−α−レダクタ−ゼ阻害剤（例えば、ＡＮＤＲＯＣＵＲＴＭ（酢酸シ
プロテロン）、ＥＵＬＥＸＩＮＴＭ（フルタミド），およびＰＲＯＳＣＡＲＴＭ （フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ））；副腎皮質刺激ホルモン調製物
（例えば、ＣＯＲＴＲＯＳＹＮＴＭ（コシントロピン）；副腎皮質ステロイドお
よびこれらの合成アナログ（例えば、ＡＣＬＯＶＡＴＥＴＭ（ジプロピオン酸ア
ルクロメタゾン）、ＣＹＣＬＯＣＯＲＴＴＭ（アムシノニド）、ＢＥＣＬＯＶＥ
ＮＴＴＭおよびＶＡＮＣＥＲＩＬＴＭ（ジプロピオン酸ベクロメタゾン）、ＣＥ
ＬＥＳＴＯＮＥＴＭ（ベタメタゾン）、ＢＥＮＩＳＯＮＥＴＭおよびＵＴＩＣＯ
ＲＴＴＭ（安息香酸ベタメタゾン）、ＤＩＰＲＯＳＯＮＥＴＭ（ジプロピオン酸
ベタメタゾン）、ＣＥＬＥＳＴＯＮＥ ＰＨＯＳＰＨＡＴＥＴＭ（ベタメタゾン
リン酸ナトリウム塩）、ＣＥＬＥＳＴＯＮＥ ＳＯＬＵＳＰＡＮＴＭ（ベタメタ
ゾンリン酸ナトリウムおよび酢酸ベタメタゾン）、ＢＥＴＡ−ＶＡＬＴＭおよび
ＶＡＬＩＳＯＮＥＴＭ（吉草酸塩ベタメタゾン）、ＴＥＭＯＶＡＴＥＴＭ（プロ
ピオン酸クロベタゾ−ル）、ＣＬＯＤＥＲＭＴＭ（クロコルトロンピバレ−ト）
、ＣＯＲＴＥＦＴＭ およびＨＹＤＲＯＣＯＲＴＯＮＥＴＭ（コルチソル（ヒド
ロコルチゾン））、ＨＹＤＲＯＣＯＲＴＯＮＥ ＡＣＥＴＡＴＥＴＭ（酢酸コル
チソル（ヒドロコルチゾン））、ＬＯＣＯＩＤＴＭ（酪酸コルチソル（ヒドロコ
ルチゾン））、ＨＹＤＲＯＣＯＲＴＯＮＥ ＰＨＯＳＰＨＡＴＥＴＭ（コルチソ
ル（ヒドロコルチゾン）リン酸ナトリウム塩）、Ａ−ＨＹＤＲＯＣＯＲＴＴＭお
よびＳＯＬＵ ＣＯＲＴＥＦＴＭ（コルチソル（ヒドロコルチゾン）コハク酸ナ
トリウム塩）、ＷＥＳＴＣＯＲＴＴＭ（吉草酸コルチソル（ヒドロコルチゾン）
）、ＣＯＲＴＩＳＯＮＥ ＡＣＥＴＡＴＥＴＭ（酢酸コルチゾン）、ＤＥＳＯＷ
ＥＮＴＭおよびＴＲＩＤＥＳＩＬＯＮＴＭ（デソニド）、ＴＯＰＩＣＯＲＴＴＭ （デスオキシメタゾン）、ＤＥＣＡＤＲＯＮＴＭ（デキサメタゾン）、ＤＥＣＡ
ＤＲＯＮ ＬＡＴＭ（酢酸デキサメタゾン）、ＤＥＣＡＤＲＯＮ ＰＨＯＳＰＨ
ＡＴＥＴＭおよびＨＥＸＡＤＲＯＬ ＰＨＯＳＰＨＡＴＥＴＭ（デキサメタゾン
リン酸ナトリウム塩）、ＦＬＯＲＯＮＥＴＭおよびＭＡＸＩＦＬＯＲＴＭ（酢酸
ジフロラゾン）、ＦＬＯＲＩＮＥＦ ＡＣＥＴＡＴＥＴＭ（酢酸フルドロコルチ
ゾン）、ＡＥＲＯＢＩＤＴＭおよびＮＡＳＡＬＩＤＥＴＭ（フルニソリド）、Ｆ
ＬＵＯＮＩＤＴＭおよびＳＹＮＡＬＡＲＴＭ（フルオシノロンアセトニド）、Ｌ
ＩＤＥＸＴＭ（フルオシノニド）、ＦＬＵＯＲ−ＯＰＴＭおよびＦＭＬＴＭ（フ
ルオロメトロン）、ＣＯＲＤＲＡＮＴＭ（フルランドレノリド）、ＨＡＬＯＧＴ Ｍ （ハルシノニド）、ＨＭＳ ＬＩＺＵＩＦＩＬＭＴＭ（メドリゾン）、ＭＥＤ
ＲＯＬＴＭ（メチルプレドニゾロン）、ＤＥＰＯ−ＭＥＤＲＯＬＴＭおよびＭＥ
ＤＲＯＬ ＡＣＥＴＡＴＥＴＭ（酢酸メチルプレドニゾロン）、Ａ−ＭＥＴＨＡ
ＰＲＥＤＴＭおよびＳＯＬＵＭＥＤＲＯＬＴＭ（メチルプレドニゾロンコハク酸
ナトリウム塩）、ＥＬＯＣＯＮＴＭ（モメタゾン（ｍｏｍｅｔａｓｏｎｅ）フロ
エ−ト）、ＨＡＬＤＲＯＮＥＴＭ（酢酸パラメタゾン）、ＤＥＬＴＡ−ＣＯＲＴ
ＥＦＴＭ（プレドニゾロン）、ＥＣＯＮＯＰＲＥＤＴＭ（酢酸プレドニゾロン）
、ＨＹＤＥＬＴＲＡＳＯＬＴＭ（プレドニゾロンリン酸ナトリウム塩）、ＨＹＤ
ＥＬＴＲＡ−Ｔ．Ｂ．ＡＴＭ（プレドニゾロンテブテ−ト）、ＤＥＬＴＡＳＯＮ
ＥＴＭ（プレドニゾン）、ＡＲＩＳＴＯＣＯＲＴＴＭおよびＫＥＮＡＣＯＲＴＴ Ｍ （ｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅ）、ＫＥＮＡＬＯＧＴＭ（ｔｒｉａｍｃｉｎｏ
ｌｏｎｅ ａｃｅｔｏｎｉｄｅ）、ＡＲＩＳＴＯＣＯＲＴＴＭおよびＫＥＮＡＣ
ＯＲＴ ＤＩＡＣＥＴＡＴＥＴＭ（トリアムシノロンジアセテ−ト）、およびＡ
ＲＩＳＴＯＳＰＡＮＴＭ（ヘキサアセトニド（ｈｅｘａｃｅｔｏｎｉｄｅ）トリ
アムシノロン）；副腎皮質ステロイドの生合成阻害剤および作用阻害剤（例えば
、ＣＹＴＡＤＲＥＮＴＭ（アミノグルテチミド）、ＮＩＺＯＲＡＬＴＭ（ケトコ
ナゾ−ル）、ＭＯＤＲＡＳＴＡＮＥＴＭ（トリロスタン）、およびＭＥＴＯＰＩ
ＲＯＮＥＴＭ（メチラポン）。
【０９５４】 さらなる内分泌物および／またはホルモンの不均衡障害のための処置剤として
は、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ウシ、ブタもしくはヒトイン
スリンまたはそれらの混合物；インスリンアナログ；組換えヒトインスリン（例
えば、ＨＵＭＵＬＩＮＴＭおよびＮＯＶＯＬＩＮＴＭ；経口低血糖症薬物（例え
ば、ＯＲＡＭＩＤＥＴＭおよびＯＲＩＮＡＳＥＴＭ（トルブタミド）、ＤＩＡＢ
ＩＮＥＳＥＴＭ（クロルプロパミド）、ＴＯＬＡＭＩＤＥＴＭおよびＴＯＬＩＮ
ＡＳＥＴＭ（トラザミド）、ＤＹＭＥＬＯＲＴＭ（アセトヘキサミド）、グリベ
ンクラミド（ｇｌｉｂｅｎｃｌａｍｉｄｅ）、ＭＩＣＲＯＮＡＳＥＴＭ、ＤＩＢ
ＥＴＡＴＭおよびＧＬＹＮＡＳＥＴＭ（グリブリド）、ＧＬＵＣＯＴＲＯＬＴＭ （グリピジド）、およびＤＩＡＭＩＣＲＯＮＴＭ（グリクラジド）、ＧＬＵＣＯ
ＰＨＡＧＥＴＭ（メトホルミン）、ＰＲＥＣＯＳＥＴＭ（アカルボース）、ＡＭ
ＡＲＹＬＴＭ（グリメピライド）およびシグリタゾン（ｃｉｇｌｉｔａｚｏｎｅ
））；（トリアゾリジネジオン（ｔｉｒａｚｏｌｉｄｉｎｅｄｉｏｎｅ）（ＴＺ
Ｄ）（例えば、ロシグリタゾン（ｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅ）、ＡＶＡＮＤＩ
ＡＴＭ（マレイン酸ロシグリタゾン）、ＡＣＴＯＳＴＭ（ピオグリタゾン（ｐｉ
ｏｇｌｉａｔａｚｏｎｅ）、およびトログリタゾン（ｔｒｏｇｌｉｔａｚｏｎｅ
）およびα−グルコシダ−ゼ阻害剤；ウシもしくはブタのグルカゴン；ソマトス
タチン（例えば、ＳＡＮＤＯＳＴＡＴＩＮＴＭ（オクテオチド（ｏｃｔｒｅｏｔ
ｉｄｅ））；およびジアゾキシド（例えば、ＰＲＯＧＬＹＣＥＭＴＭ（ジアゾキ
シド））。また他の実施形態において、本発明の治療剤は、１つ以上の以下：ビ
グアナイド抗糖尿病薬剤、グリタゾン抗糖尿病薬剤、およびスルホニル尿素抗糖
尿病薬剤と組み合わせて投与される。
【０９５５】 １つの実施形態において、本発明の治療剤は、子宮運動性障害のための処置剤
と組み合わせて投与される。子宮運動性障害のための処置剤としては、以下が挙
げられるが、これらに限定されない：エストロゲン薬物（例えば、抱合エストロ
ゲン （例えば、ＰＲＥＭＡＲＩＮ（登録商標） およびＥＳＴＲＡＴＡＢ（登
録商標））、エストラジオ−ル（例えば、ＣＬＩＭＡＲＡ（登録商標）およびＡ
ＬＯＲＡ（登録商標））、エストロピペイト（ｅｓｔｒｏｐｉｐａｔｅ）、およ
びクロロトリアニセン；プロゲスチン薬物（例えば、ＡＭＥＮ（登録商標）（メ
ドロキシプロゲステロン）、ＭＩＣＲＯＮＯＲ（登録商標） （酢酸ノルエチド
ロン（ｎｏｒｅｔｈｉｄｒｏｎｅ））、ＰＲＯＭＥＴＲＩＵＭ（登録商標） プ
ロゲステロン，および酢酸メゲストロ−ル）；およびエストロゲン／プロゲステ
ロン併用治療（例えば、結合体化エストロゲン／メドロキシプロゲステロン（例
えば、ＰＲＥＭＰＲＯＴＭおよびＰＲＥＭＰＨＡＳＥ（登録商標））および酢酸
ノルエチドロン／エチニルエストラジオ−ル（例えば、ＦＥＭＨＲＴＴＭ）。
【０９５６】 さらなる実施形態において、本発明の治療剤は、鉄欠乏性貧血および低色性貧
血のための処置に有用な薬物とともに投与され、これらの薬物としては、以下が
挙げられるが、これらに限定されない：硫酸第一鉄（硫酸鉄、ＦＥＯＳＯＬＴＭ ）、フマル酸第一鉄（例えば、ＦＥＯＳＴＡＴＴＭ）、グルコン酸第一鉄（例え
ば、ＦＥＲＧＯＮＴＭ）、多糖類−鉄複合体（例えば、ＮＩＦＥＲＥＸＴＭ）、
鉄デキストラン注入（例えば、ＩＮＦＥＤＴＭ）、硫酸銅、ピロキシジン（ｐｙ
ｒｏｘｉｄｉｎｅ）、リボフラビン、ビタミンＢ１２、シアノコバラミン（ｃｙ
ａｎｃｏｂａｌａｍｉｎ）注入（例えば、ＲＥＤＩＳＯＬＴＭ、ＲＵＢＲＡＭＩ
Ｎ ＰＣＴＭ）、ヒドロキソコバラミン、葉酸（例えば、ＦＯＬＶＩＴＥＴＭ）
、ロイコボリン（フォリン酸、５−ＣＨＯＨ４ＰｔｅＧｌｕ、シトロボラム因子
） またはＷＥＬＬＣＯＶＯＲＩＮ（ロイコボリンのカルシウム塩）、トランス
フェリンまたはフェリチン。
【０９５７】 特定の実施形態において、本発明の治療剤は、精神障害のための処置剤と組み
合わせて投与される。本発明の治療剤とともに投与され得る精神障害のための処
置剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：抗精神病薬（例え
ば、クロルプロマジン、クロルプロチキセン、クロザピン、フルフェナジン、ハ
ロペリド−ル、ロクサピン、メソリダジンベシレ−ト、モリンドン、オランザピ
ン（ｏｌａｎｚａｐｉｎｅ）、パ−フェナジン、ピモジド、クエチアピン（ｑｕ
ｅｔｉａｐｉｎｅ）、リスペリドン（ｒｉｓｐｅｒｉｄｏｎｅ）、チオリダジン
、チオチキセン、トリフルオペラジン、およびトリフルプロマジン）、抗躁病薬
（例えば、カルバマゼピン、ジバルプロックスナトリウム、炭酸リチウム、およ
びクエン酸リチウム）、抗うつ薬（例えば、アミトリプチリン、アモキサピン、
ビュ−プロピオン、シタロプラム（ｃｉｔａｌｏｐｒａｍ）、クロミプラミン、
デシプラミン、ドキセピン、フルボキサミン（ｆｌｕｖｏｘａｍｉｎｅ）、フル
オキセチン、イミプラミン、イソカルボキサジド、マプロチリン、ミルタザピン
（ｍｉｒｔａｚａｐｉｎｅ）、ネフォゾドン（ｎｅｆａｚｏｄｏｎｅ）、ノルト
リプチリン、パロキセチン（ｐａｒｏｘｅｔｉｎｅ）、フェネルジン、プロトリ
プチリン、セルトラリン、トラニルシプロミン、トラゾドン、トリミプラミン、
および ベンラファキシン（ｖｅｎｌａｆａｘｉｎｅ））、抗不安薬（例えば、
アルプラゾラム、ブスピロン、クロルジアゼポキシド、クロラゼペ−ト、ジアゼ
パム、ハラゼパム、ロラゼパム、オキサゼパム、およびプラゼパム）、ならびに
興奮薬（例えば、ｄ−アンフェタミン、メチルフェニデ−ト、およびペモリン）
。
【０９５８】 他の実施形態において、本発明の治療剤は、神経性疾患を処置するための薬剤
と組み合わせて投与される。本発明の治療剤とともに投与され得る神経性疾患の
ための処置剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：鎮痙薬（
例えば、カルバマゼピン、クロナゼパム、エトスクシミド、フェノバルビタ−ル
、フェニトイン、プリミドン、バルプロ酸、ジバルプロックスナトリウム、フェ
ルバメ−ト、ガバペンチン（ｇａｂａｐｅｎｔｉｎ）、ラモトリジン、レベチラ
セタム（ｌｅｖｅｔｉｒａｃｅｔａｍ）、オキシカルバゼピン（ｏｘｃａｒｂａ
ｚｅｐｉｎｅ）、チアガビン（ｔｉａｇａｂｉｎｅ）、トピラメイト（ｔｏｐｉ
ｒａｍａｔｅ）、ゾニサミド（ｚｏｎｉｓａｍｉｄｅ）、ジアゼパム、ロラゼパ
ム、およびクロナゼパム）、抗パ−キンソン症候群薬（例えば、レボドパ／カル
ビドパ、セレジリン、アマンチジン（ａｍａｎｔｉｄｉｎｅ）、ブロモクリプチ
ン、ペルゴリド（ｐｅｒｇｏｌｉｄｅ）、ロピニロ−ル（ｒｏｐｉｎｉｒｏｌｅ
）、プラミペキソ−ル（ｐｒａｍｉｐｅｘｏｌｅ）、ベンズトロピン；ビペリデ
ン；エトプロパジン；プロシクリジン；トリヘキシフェニジル、トルカポン（ｔ
ｏｌｃａｐｏｎｅ））、およびＡＬＳ治療剤（例えば、リルゾ−ル（ｒｉｌｕｚ
ｏｌｅ））。
【０９５９】 別の実施形態において、本発明の治療剤は、血管弛緩薬および／またはカルシ
ウムチャネル阻害剤と組み合わせて投与される。本発明の治療剤とともに投与さ
れ得る血管弛緩薬としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：アン
ギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）インヒビター（例えば、パパベリン、イソクス
プリン、ベナゼプリル（ｂｅｎａｚｅｐｒｉｌ）、カプトプリル、シラザプリル
（ｃｉｌａｚａｐｒｉｌ）、エナラプリル、エナラプリラ−ト、ホシノプリル（
ｆｏｓｉｎｏｐｒｉｌ）、リジノプリル、モエキシプリル（ｍｏｅｘｉｐｒｉｌ
）、ペリインドプリル（ｐｅｒｉｎｄｏｐｒｉｌ）、キナプリル（ｑｕｉｎａｐ
ｒｉｌ）、ラミプリル（ｒａｍｉｐｒｉｌ）、スピラプリル（ｓｐｉｒａｐｒｉ
ｌ）、トランドラプリル（ｔｒａｎｄｏｌａｐｒｉｌ），およびナイリドリン）
、ならびに硝酸塩（例えば、イソソルビドジニトレ−ト、イソソルビドモノニト
レ−ト，およびニトログリセリン）。本発明の治療剤とともに投与され得るカル
シウムチャネル阻害剤の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されな
い：アムロジピン、ベプリジル（ｂｅｐｒｉｄｉｌ）、ジルチアゼム、フェロジ
ピン、フルナリジン、イスラジピン（ｉｓｒａｄｉｐｉｎｅ）、ニカルジピン、
ニフェジピン、ニモジピン、およびベラパミル。
【０９６０】 特定の実施形態において、本発明の治療剤は、胃腸の障害ための処置と組み合
わせて投与される。本発明の治療薬と共に投与され得る胃腸の障害のために処置
としては以下が挙げられるがこれらに限定されない：Ｈ２ヒスタミンレセプター
アンタゴニスト（例えば、ＴＡＧＡＭＥＴＴＭ（シメチジン）、ＺＡＮＴＡＣＴ Ｍ （ラニチジン）、ＰＥＰＣＩＤＴＭ（ファモチジン）、およびＡＸＩＤＴＭ（
ニザチジン））；Ｈ＋，Ｋ＋ ＡＴＰａｓｅのインヒビター（例えば、ＰＲＥＶ
ＡＣＩＤＴＭ（ランソプラゾール）およびＰＲＩＬＯＳＥＣＴＭ（オメプラゾー
ル））；ビスマス化合物（例えば、ＰＥＰＴＯ−ＢＩＳＭＯＬＴＭ（次サリチル
酸ビスマス）およびＤＥ−ＮＯＬＴＭ（次硝酸ビスマス））；種々の制酸薬；ス
クラルファート；プロスタグランジンアナログ（例えば、ＣＹＴＯＴＥＣＴＭ（
ミソプロストール）；ムスカリン様コリン作用アンタゴニスト；緩下薬（例えば
、界面活性剤緩下薬、刺激性緩下薬、塩性緩下薬（ｓａｌｉｎｅ ｌａｘａｔｉ
ｖｅ）および浸透圧性緩下薬）；下痢止め薬剤（例えば、ＬＯＭＯＴＩＬＴＭ（
ジフェノキシラート）、ＭＯＴＯＦＥＮＴＭ（ジフェノキシン）、およびＩＭＯ
ＤＩＵＭＴＭ（塩酸ロペラミド））、ＳＡＮＤＯＳＴＡＴＩＮＴＭ（オクトレオ
チド）のようなソマトスタチンの合成アナログ、制吐薬（例えば、ＺＯＦＲＡＮ ＴＭ （オンダンセトロン）、ＫＹＴＲＩＬＴＭ（塩酸グラニセトロン）、トロピ
セトロン（ｔｒｏｐｉｓｅｔｒｏｎ）、ドラセトロン（ｄｏｌａｓｅｔｒｏｎ）
、メトクロプラミド、クロルプロマジン、パーフェナジン、プロクロルペラジン
、プロメタジン、トリフルプロマジン、ドンペリドン、ハロペリドール、トリメ
トベンズアミド、デキサメタゾン、メチルプレドニゾロン、ドロナビノールおよ
びナビロン）；Ｄ２アンタゴニスト（例えば、メトクロプラミド、トリメトベン
ズアミドおよびクロルプロマジン）；胆汁酸塩；ケノデオキシコール酸；ウルソ
デオキシコール酸；ならびにパンクレアチンおよびパンクレリパーゼのような膵
臓酵素調製物。
【０９６１】 さらなる実施形態において、本発明の治療剤は、他の治療法または予防療法（
例えば、放射線療法）と組み合わせて投与される。
【０９６２】 （実施例１１：ポリペプチドのレベル低下を処置する方法） 個体におけるポリペプチドの標準の発現レベルまたは正常発現レベルの低下に
より引き起こされる状態は、本発明のポリペプチドを好ましくは分泌形態および
／または可溶性形態で投与することにより処置し得ることが理解される。従って
、本発明はまた、このポリペプチドのレベルの増加が必要な個体の処置方法を提
供する。この方法は、このような個体に、このような個体でこのポリペプチドの
活性レベルを増加させる量のポリペプチドを含む治療的組成物を投与する工程を
包含する。
【０９６３】 例えば、ポリペプチドのレベルが低下した患者は、そのポリペプチドを、１日
用量０．１〜１００μｇ／ｋｇで６日間続けて服用する。好ましくは、ポリペプ
チドは分泌形態である。投与および処方物に基づく投薬計画の正確な詳細は、実
施例１０に提供されている。
【０９６４】 （実施例１２：ポリペプチドのレベル上昇を処置する方法） アンチセンス技術を使用して本発明のポリペプチドの産生を阻害する。この技
術は、ガンのような様々な病因に起因する、好ましくは分泌形態のポリペプチド
のレベルを低下させる方法の１つの例である。
【０９６５】 例えば、ポリペプチドのレベルが異常に上昇したと診断された患者に、アンチ
センスポリヌクレオチドを、０．５、１．０、１．５、２．０および３．０ｍｇ
／ｋｇ／日で２１日間、静脈内投与する。この処置が十分に耐えられた場合は、
７日間の休薬期間後に、この処置を繰り返す。本発明のアンチセンスポリヌクレ
オチドは、本明細書に記載されている技術および処方物（例えば、実施例１０を
参照のこと）を用いて、さもなければ当該分野で公知の技術および処方物を用い
て処方され得る。
【０９６６】 （実施例１３：遺伝子治療を使用する処置方法−エキソビボ） 遺伝子治療の１つの方法は、ポリペプチドを発現し得る線維芽細胞を患者に移
植する。一般に、線維芽細胞は、皮膚生検により被験者から得られる。得られた
組織を組織培養培地中に配置し、小片に分割する。組織の小塊を組織培養フラス
コの湿潤表面に置き、約１０片を各フラスコに置く。このフラスコを倒置し、し
っかりと閉め、そして、室温で一晩放置する。室温で２４時間後、フラスコを反
転させ、そして組織塊をフラスコの底に固定させたままにし、そして新鮮な培地
（例えば、１０％ＦＢＳ、ペニシリンおよびストレプトマイシンを含有するＨａ
ｍのＦ１２培地）を添加する。次に、フラスコを３７℃で約１週間インキュベー
トする。
【０９６７】 この時点で、新鮮な培地を添加し、次いで数日ごとに取り換える。さらに二週
間培養した後に、単層の線維芽細胞が出現する。この単層をトリプシン処理し、
さらに大きなフラスコにスケールアップする。
【０９６８】 モロニーマウス肉腫ウイルスの長末端反復が隣接するｐＭＶ−７（Ｋｉｒｓｃ
ｈｍｅｉｅｒ，Ｐ．Ｔ．ら、ＤＮＡ，７：２１９−２５（１９８８））をＥｃｏ
ＲＩおよびＨｉｎｄＩＩＩで消化した後、仔ウシ腸ホスファターゼで処理する。
線状ベクターをアガロースゲル上で分画し、そしてガラスビーズを使用して精製
する。
【０９６９】 本発明のポリペプチドをコードするｃＤＮＡを、プライマーを用い、そして必
要な場合、適切な制限部位および開始／終止コドンを有する、実施例１に記載の
それぞれ５’末端配列および３’末端配列に対応するＰＣＲプライマーを使用し
て増幅し得る。好ましくは、この５’プライマーはＥｃｏＲＩ部位を含み、そし
てこの３’プライマーはＨｉｎｄＩＩＩ部位を含む。等量の、モロニーマウス肉
腫ウイルスの線状骨格および増幅したＥｃｏＲＩおよびＨｉｎｄＩＩＩフラグメ
ントを、Ｔ４ ＤＮＡリガーゼの存在下で一緒に加える。得られた混合物を、こ
の２つのフラグメントを連結するのに適した条件下で維持する。次に、連結混合
物を使用し、細菌ＨＢ１０１を形質転換する。次に、それを、カナマイシンを含
む寒天上にプレーティングし、ベクターが正確に挿入された目的の遺伝子を有す
ることを確認する。
【０９７０】 両種指向性ｐＡ３１７またはＧＰ＋ａｍ１２パッケージング細胞を、１０％仔
ウシ血清（ＣＳ）、ペニシリンおよびストレプトマイシンを含むダルベッコ改変
イーグル培地（ＤＭＥＭ）中、組織培養でコンフルエントな密度まで増殖させる
。次に、その遺伝子を含むＭＳＶベクターを培地に加え、そしてパッケージング
細胞をこのベクターで形質導入する。このとき、このパッケージング細胞は、そ
の遺伝子を含む感染性ウイルス粒子を産生する（ここで、このパッケージング細
胞をプロデューサー細胞という）。
【０９７１】 形質導入されたプロデューサー細胞に新鮮な培地を添加し、次いでこの培地を
１０ｃｍプレートのコンフルエントなプロデューサー細胞から採取する。感染性
ウイルス粒子を含む使用済み培地を、ミリポアフィルターを通して濾過し、はが
れたプロデューサー細胞を除去した後、この培地を使用して、線維芽細胞を感染
させる。線維芽細胞のサブコンフルエントなプレートから培地を除去し、そして
プロデューサー細胞からの培地で速やかに置き換える。この培地を除去し、そし
て新鮮な培地と置き換える。ウイルスの力価が高ければ、実質的にすべての線維
芽細胞が感染され、選択は必要ではない。力価が非常に低ければ、ｎｅｏまたは
ｈｉｓのような選択マーカーを有するレトロウイルスベクターを使用することが
必要である。一旦、線維芽細胞が効率的に感染したなら、その線維芽細胞を分析
し、タンパク質が産生されているか否かを決定する。
【０９７２】 次に、操作された線維芽細胞を、単独で、またはサイトデックス３マイクロキ
ャリアビーズ上でコンフルエントに増殖させた後のいずれかで、宿主に移植する
。
【０９７３】 （実施例１４：内因性トランスフェリン遺伝子を使用する遺伝子治療） 本発明に従う遺伝子治療の別の方法は、内因性トランスフェリン遺伝子配列を
、例えば、米国特許番号５，６４１，６７０（１９９７年６月２４日発行）；国
際公開番号ＷＯ ９６／２９４１１（１９９６年９月２６日公開）；国際公開番
号ＷＯ ９４／１２６５０（１９９４年８月４日公開）；Ｋｏｌｌｅｒら、Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８６：８９３２〜８９３５（１９
８９）；およびＺｉｊｌｓｔｒａら、Ｎａｔｕｒｅ，３４２：４３５〜４３８（
１９８９）に記載されるように、相同組換えを介してプロモーターに作動可能に
結合する工程を包含する。この方法は、その標的細胞中に存在するが、その細胞
中では発現されないかまたは所望されるよりも低いレベルで発現される、遺伝子
の活性化を包含する。
【０９７４】 プロモーターおよび標的化配列を含むポリヌクレオチド構築物を作製する。こ
の標的化配列は、プロモーターに隣接する、内因性トランスフェリン遺伝子の５
’非コード配列に相同である。この標的化配列は、このトランスフェリン遺伝子
の５’末端に十分に近く、その結果、このプロモーターは、相同組換えの際にこ
の内因性配列に作動可能に連結される。このプロモーターおよび標的化配列を、
ＰＣＲを使用して増幅し得る。好ましくは、この増幅したプロモーターは、５’
末端および３’末端上に異なる制限酵素部位を含む。好ましくは、第１の標的化
配列の３’末端は、増幅したプロモーターの５’末端と同じ制限酵素部位を含み
、そして第２の標的化配列の５’末端は、増幅したプロモーターの３’末端と同
じ制限部位を含む。
【０９７５】 この増幅したプロモーターおよび増幅した標的化配列を、適切な制限酵素で消
化し、続いて仔ウシ腸ホスファターゼで処理する。消化したプロモーターおよび
消化した標的化配列を、Ｔ４ ＤＮＡリガーゼの存在下でともに加える。生じた
混合物を、これら２つのフラグメントの連結に適切な条件下で維持する。この構
築物をアガロースゲルでサイズ分画し、次いでフェノール抽出およびエタノール
沈殿により精製する。
【０９７６】 この実施例において、このポリヌクレオチド構築物を、エレクトロポレーショ
ンを介して裸のポリヌクレオチドとして投与する。しかし、このポリヌクレオチ
ド構築物はまた、トランスフェクション促進剤（例えば、リポソーム、ウイルス
配列、ウイルス粒子、沈殿剤など）とともに投与され得る。送達のこのような方
法は、当該分野で公知である。
【０９７７】 一旦、細胞をトランスフェクトすると、相同組換えが生じて、このプロモータ
ーがこの内因性トランスフェリン遺伝子配列に作動可能に連結される。これは、
この細胞中におけるこのトランスフェリンの発現を生じる。発現は、免疫学的染
色または当該分野で公知の他の任意の方法により、検出され得る。
【０９７８】 線維芽細胞を、皮膚生検により被験者から得る。得られた組織を、ＤＭＥＭ＋
１０％ウシ胎仔血清中に配置する。対数増殖期または定常期初期の線維芽細胞を
、トリプシン処理し、そしてプラスチックの表面から栄養培地でリンスする。細
胞懸濁液のアリコートを、計数のために取り出し、そして残りの細胞を遠心分離
に供する。上清を吸引し、そしてペレットを５ｍｌのエレクトロポレーション緩
衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．３、１３７ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ Ｋ
Ｃｌ、０．７ｍＭ Ｎａ２ＨＰＯ４、６ｍＭデキストロース）に再懸濁する。こ
の細胞を再遠心分離し、上清を吸引し、そして細胞をアセチル化ウシ血清アルブ
ミン１ｍｇ／ｍｌを含むエレクトロポレーション緩衝液に再懸濁する。この最終
細胞懸濁物は、約３×１０６細胞／ｍｌを含む。エレクトロポレーションを、再
懸濁直後に実施すべきである。
【０９７９】 プラスミドＤＮＡを、標準的技術に従って調製する。例えば、本発明のポリヌ
クレオチドの遺伝子座を標的化するためのプラスミドを構築するために、プラス
ミドｐＵＣ１８（ＭＢＩ Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ、Ａｍｈｅｒｓｔ、ＮＹ）をＨｉ
ｎｄＩＩＩで消化する。ＣＭＶプロモーターを、５’末端にＸｂａＩ部位および
３’末端にＢａｍＨＩ部位を備えてＰＣＲにより増幅する。配列番号Ｘの２つの
非コード遺伝子配列をＰＣＲを介して増幅する：一方の非コード配列（フラグメ
ント１）を、５’末端にＨｉｎｄＩＩＩ部位および３’末端にＸｂａ部位を備え
て増幅する；他方の非コード配列（フラグメント２）を、５’末端にＢａｍＨＩ
部位および３’末端にＨｉｎｄＩＩＩ部位を備えて増幅する。このＣＭＶプロモ
ーターおよび配列フラグメントを、適切な酵素（ＣＭＶプロモーター−ＸｂａＩ
およびＢａｍＨＩ；フラグメント１−ＸｂａＩ；フラグメント２−ＢａｍＨＩ）
で消化し、そしてともに連結する。生じた連結生成物をＨｉｎｄＩＩＩで消化し
、そしてＨｉｎｄＩＩＩで消化したｐＵＣ１８プラスミドと連結する。
【０９８０】 プラスミドＤＮＡを、０．４ｃｍの電極ギャップを備える滅菌キュベット（Ｂ
ｉｏ−Ｒａｄ）に添加する。最終ＤＮＡ濃度は、一般的に、少なくとも１２０μ
ｇ／ｍｌである。次いで、この細胞懸濁液の０．５ｍｌ（約１．５×１０６細胞
を含む）をこのキュベットに添加し、そしてこの細胞懸濁液およびＤＮＡ溶液を
、穏やかに混合する。エレクトロポレーションを、Ｇｅｎｅ−Ｐｕｌｓｅｒ装置
（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を用いて実施する。キャパシタンスおよび電圧を、それぞれ
、９６０μＦおよび２５０〜３００Ｖに設定する。電圧が増加すると、細胞の生
存が減少するが、導入されたＤＮＡをそれらのゲノム中に安定に組込む生存細胞
の割合が劇的に増加する。これらのパラメーターを考慮すると、パルス時間約１
４〜２０ｍＳｅｃが観察されるはずである。
【０９８１】 エレクトロポレーションした細胞を、室温で約５分間維持し、次いで、このキ
ュベットの中身を、滅菌した移動ピペットを用いて穏やかに取り出す。この細胞
を、１０ｃｍのディッシュ中の、予め温めた栄養培地（１５％仔ウシ血清を含む
ＤＭＥＭ）１０ｍｌに直接加え、そして３７℃でインキュベートする。翌日、こ
の培地を吸引し、そして１０ｍｌの新鮮な培地で置換し、そしてさらに１６〜２
４時間インキュベートする。
【０９８２】 次いで、操作された線維芽細胞を、宿主中に、単独か、またはサイトデックス
（ｃｙｔｏｄｅｘ）３マイクロキャリア（ｍｉｃｒｏｃａｒｒｉｅｒ）ビーズ上
でコンフルエントになるまで増殖させた後かのいずれかで、注入する。ここで、
この線維芽細胞は、タンパク質産物を生成する。次いで、この線維芽細胞を、上
記のような患者に導入し得る。
【０９８３】 （実施例１５：遺伝子治療を使用する処置方法−インビボ） 本発明の別の局面は、障害、疾患、および状態を処置するためにインビボ遺伝
子治療方法を使用することである。この遺伝子治療法は、本発明のポリペプチド
の発現を増大または減少させるための、動物への本発明のポリヌクレオチドに対
応する裸の核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ、およびアンチセンスＤＮＡまたはＲＮＡ）配
列の導入に関する。ポリヌクレオチドは、プロモーター、または標的組織による
ポリペプチドの発現に必要な任意の他の遺伝子エレメントに、作動可能に連結さ
れ得る。このような遺伝子治療および送達の技術および方法は、当該分野で公知
であり、例えば、ＷＯ９０／１１０９２、ＷＯ９８／１１７７９；米国特許第５
６９３６２２号、同第５７０５１５１号、同第５５８０８５９号；Ｔａｂａｔａ
ら、Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．３５（３）：４７０−４７９（１９９７）
；Ｃｈａｏ Ｊら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｓ．３５（６）：５１７−５２２
（１９９７）；Ｗｏｌｆｆ、Ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕｌ．Ｄｉｓｏｒｄ．７（５）
：３１４−３１８（１９９７）、Ｓｃｈｗａｒｔｚら、Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．，
３（５）：４０５−４１１（１９９６）；Ｔｓｕｒｕｍｉ Ｙ．ら、Ｃｉｒｃｕ
ｌａｔｉｏｎ ９４（１２）：３２８１−３２９０（１９９６）（本明細書中に
参考として援用される）を参照のこと。
【０９８４】 ポリヌクレオチド構築物は、注入可能な物質を動物の細胞に送達する任意の方
法（例えば、組織（心臓、筋肉、皮膚、肺、肝臓、腸など）の間隙空間への注入
）によって送達され得る。ポリヌクレオチド構築物は、薬学的に受容可能な液体
または水性キャリア中で送達され得る。
【０９８５】 用語「裸の」ポリヌクレオチド、ＤＮＡまたはＲＮＡは、細胞への侵入を補助
、促進、または容易にするように作用するいかなる送達ビヒクル（ウイルス配列
、ウイルス粒子、リポソーム処方物、リポフェクチン、または沈澱剤などを含む
）も含まない配列をいう。しかし、本発明のポリヌクレオチドはまた、当業者に
周知の方法によって調製され得るリポソーム処方物（例えば、Ｆｅｌｇｎｅｒら Ａｎｎ．ＮＹ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，７７２：１２６−１３９（１９９５）お
よびＡｂｄａｌｌａｈら Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ ８５（１）：１−７（１９９５
）で教示されたもの）中で送達され得る。
【０９８６】 この遺伝子治療方法において使用されるポリヌクレオチドベクター構築物は、
好ましくは、宿主ゲノムに組み込まれず、複製を可能にする配列も含まない構築
物である。当業者に公知の任意の強力なプロモーターが、ＤＮＡの発現を駆動す
るために用いられ得る。他の遺伝子治療技術とは異なり、裸の核酸配列を標的細
胞に導入する１つの主要な利点は、その細胞におけるポリヌクレオチド合成の一
過性の性質である。研究によって、非複製ＤＮＡ配列が細胞に導入されて、６ヶ
月までの間の期間、所望のポリペプチドの産生を提供し得ることが示された。
【０９８７】 ポリヌクレオチド構築物を、動物内の組織（筋肉、皮膚、脳、肺、肝臓、脾臓
、骨髄、胸腺、心臓、リンパ、血液、骨、軟骨、膵臓、腎臓、胆嚢、胃、腸、精
巣、卵巣、子宮、直腸、神経系、眼、腺、および結合組織を含む）の間隙空間に
送達され得る。組織の間隙空間は、細胞間液、器官組織の細網線維間のムコ多糖
マトリクス、血管または室の壁における弾性線維、線維性組織のコラーゲン線維
、あるいは筋肉細胞を囲む結合組織内の同じマトリクス（ｔｈａｔ ｓａｍｅ
ｍａｔｒｉｘ）または骨の裂孔中の結合組織内の同じマトリクス（ｔｈａｔ ｓ
ａｍｅ ｍａｔｒｉｘ）を含む。これは、同様に、循環の血漿およびリンパチャ
ンネルのリンパ液により占められた空間である。筋肉組織の間隙空間への送達は
、以下に記載の理由のために好ましい。このポリヌクレオチド構築物を、これら
の細胞を含む組織への注射によって、好都合に送達し得る。このポリヌクレオチ
ド構築物は、好ましくは、持続性の分化した非分裂細胞に送達され、その細胞に
おいて発現されるが、送達および発現は、非分化細胞または完全には分化してい
ない細胞（例えば、血液の幹細胞または皮膚線維芽細胞）において達成され得る
。インビボ筋肉細胞は、ポリヌクレオチドを取り込み、そしてこのポリヌクレオ
チドを発現する能力において、特に適格である。
【０９８８】 裸のトランスフェリンポリヌクレオチド注射のために、ＤＮＡまたはＲＮＡの
有効投薬量は、約０．０５ｇ／ｋｇ体重〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲にある。
好ましくは、投薬量は、約０．００５ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇであり、そ
してより好ましくは、約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇである。もちろん
、当業者が認識するように、この投薬量は、注射の組織部位に従って変動する。
核酸配列の適切かつ有効な投薬量は、当業者によって容易に決定され得、そして
処置される状態および投与経路に依存し得る。好ましい投与経路は、組織の間隙
空間への非経口注射経路によってである。しかし、他の非経口経路もまた用いら
れ得、これには、例えば、特に肺または気管支組織、咽喉または鼻の粘膜への送
達のためのエアロゾル処方物の吸入が挙げられる。さらに、裸のトランスフェリ
ンポリヌクレオチド構築物を、血管形成術の間にこの手順において用いられるカ
テーテルによって動脈に送達し得る。
【０９８９】 インビボでの筋肉における注射されたトランスフェリンポリヌクレオチドの用
量応答効果を、以下のようにして決定する。トランスフェリンポリペプチドをコ
ードするｍＲＮＡの生成のために適切なトランスフェリン鋳型ＤＮＡを、標準的
な組換えＤＮＡ方法論に従って調製する。鋳型ＤＮＡ（これは環状または直鎖状
のいずれかであり得る）を裸のＤＮＡとして使用するか、またはリポソームと複
合体化するかのいずれかを行う。次いで、マウスの四頭筋に、多様な量のこの鋳
型ＤＮＡを注射する。
【０９９０】 ５〜６週齢の雌性および雄性のＢａｌｂ／Ｃマウスに、０．３ｍｌの２．５％
Ａｖｅｒｔｉｎを腹腔内注射することにより麻酔する。１．５ｃｍの切開を大腿
前部で行い、そして四頭筋を直接可視化する。トランスフェリン鋳型ＤＮＡを、
０．１ｍｌのキャリアに入れて、１ｃｃ注射器で２７ゲージ針を通して１分間に
わたって、この筋肉の遠位挿入部位から約０．５ｃｍの位置で膝に、約０．２ｃ
ｍの深さで注射する。縫合を、将来の位置確認のために注射部位の上で行い、そ
して皮膚をステンレス鋼クリップで閉じる。
【０９９１】 適切なインキュベーション時間（例えば、７日）後、筋肉抽出物を、四頭全体
を切り出すことによって調製する。個々の四頭筋の５枚目毎の１５μｍ切片を、
トランスフェリンタンパク質発現について組織化学的に染色する。トランスフェ
リンタンパク質発現についての時間経過は、異なるマウスから四頭筋を異なる時
間に採取すること以外は、同様な様式で行い得る。注射後の筋肉中のトランスフ
ェリンＤＮＡの持続性を、注射したマウスおよびコントロールマウスから総細胞
性ＤＮＡおよびＨＩＲＴ上清を調製した後、サザンブロット分析によって決定し
得る。マウスにおける上記実験の結果は、トランスフェリンの裸のＤＮＡを用い
て、ヒトおよび他の動物において適切な投薬量および他の処置パラメーターを推
定するために使用し得る。
【０９９２】 （実施例１６：抗体の産生） ａ）ハイブリドーマ技術 本発明の抗体を、種々の方法によって調製し得る。（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏ
ｔｏｃｏｌｓ、第２章を参照のこと）。このような方法の１つの例として、本発
明のポリペプチドを発現する細胞を、ポリクローナル抗体を含む血清の産生を誘
導するために、動物に投与する。好ましい方法において、本発明のポリペプチド
の調製物を調製し、そしてその調製物が、天然の夾雑物を実質的に含まないよう
にするために精製する。ついで、このような調製物を、より大きな比活性のポリ
クローナル抗体を産生するために、動物に導入する。
【０９９３】 本発明のポリペプチドに特異的なモノクローナル抗体を、ハイブリドーマ技術
を使用して調製する（Ｋｏｈｌｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５（１９７
５）；Ｋｏｈｌｅｒら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：５１１（１９７６）
；Ｋｏｈｌｅｒら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：２９２（１９７６）；Ｈ
ａｍｍｅｒｌｉｎｇら：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ
Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、Ｎ．Ｙ．、５６３
〜６８１頁（１９８１））。一般的に、動物（好ましくは、マウス）を、本発明
のポリペプチドまたはより好ましくは本発明の分泌ポリペプチド発現細胞で、免
疫する。このようなポリペプチド発現細胞を、適切な任意の組織培養培地（好ま
しくは、１０％ウシ胎仔血清（約５６℃にて不活化）を補充し、そして約１０ｇ
／ｌの非必須アミノ酸、約１，０００Ｕ／ｍｌのペニシリン、および約１００μ
ｇ／ｍｌのストレプトマイシンを補充した、Ｅａｒｌｅ’ｓ改変Ｅａｇｌｅ’ｓ
培地）にて培養する。
【０９９４】 このようなマウスの脾細胞を抽出し、そして適切な骨髄腫細胞株と融合させる
。適切な任意の骨髄腫細胞株を、本発明に従って使用し得るが、しかし、親骨髄
腫細胞株（ＳＰ２Ｏ）（ＡＴＣＣから入手可能）を使用することが好ましい。融
合後、生じたハイブリドーマ細胞を、ＨＡＴ培地にて選択的に維持し、ついで、
Ｗａｎｄｓら（Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ８０：２２５〜２３２（１
９８１））により記載されるように、限界希釈によってクローン化する。ついで
、このような選択を介して得たハイブリドーマ細胞をアッセイして、トランスフ
ェリンポリペプチドを結合し得る抗体を分泌するクローンを同定する。
【０９９５】 あるいは、本発明のポリペプチドに結合し得るさらなる抗体を、抗イディオタ
イプ抗体を使用して２段階工程の手順において生成し得る。このような方法は、
抗体それ自体が抗原であり、それゆえ二次抗体に結合する抗体を得ることが可能
であるという事実を利用する。この方法に従って、タンパク質特異的抗体を使用
して、動物（好ましくは、マウス）を免疫する。次いで、このような動物の脾細
胞を使用して、ハイブリドーマ細胞を産生する。そして、このハイブリドーマ細
胞は、本発明のタンパク質特異的抗体に結合する能力が本発明のポリペプチドに
よってブロックされ得る抗体を産生するクローンを同定するためにスクリーニン
グされる。このような抗体は、タンパク質特異的抗体に対する抗イディオタイプ
抗体を含み、そして動物を免疫してさらなるトランスフェリンタンパク質特異的
抗体の形成を誘導するために使用される。
【０９９６】 ヒトにおける抗体のインビボ使用のために、抗体は、「ヒト化」される。この
ような抗体は、上記のモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞に由来
する遺伝的構築物を使用することによって産生され得る。キメラ抗体およびヒト
化抗体を産生するための方法は当該分野で公知であり、そして本明細書に議論さ
れる（総説については、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２
（１９８５）；Ｏｉら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４（１９８６）
；Ｃａｂｉｌｌｙら、米国特許第４，８１６，５６７号；Ｔａｎｉｇｕｃｈｉら
、ＥＰ １７１４９６；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、ＥＰ １７３４９４；Ｎｅｕｂｅ
ｒｇｅｒら、ＷＯ ８６０１５３３；Ｒｏｂｉｎｓｏｎら、ＷＯ ８７０２６７
１；Ｂｏｕｌｉａｎｎｅら、Ｎａｔｕｒｅ ３１２：６４３（１９８４）；Ｎｅ
ｕｂｅｒｇｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３１４：２６８（１９８５）を参照のこと）
。
【０９９７】 ｂ）ｓｃＦｖのライブラリーからの本発明のポリペプチドに対して指向される
抗体フラグメントの単離 ヒトＰＢＬから単離した天然に存在するＶ遺伝子を、トランスフェリンポリペ
プチド（ドナーは、これらに対して曝露されていても曝露されていなくともよい
）に対する反応性を含む抗体フラグメントのライブラリーに構築する（例えば、
米国特許第５，８８５，７９３号（その全体が参考として本明細書に援用される
）を参照のこと）。
【０９９８】 （ライブラリーのレスキュー（ｒｅｓｃｕｅ）） ＰＣＴ公開ＷＯ ９２／０１０４７に記載のように、ヒトＰＢＬのＲＮＡから
ｓｃＦｖのライブラリーを構築する。抗体フラグメントを提示するファージをレ
スキューするため、ファージミドを保有する約１０９個のＥ．ｃｏｌｉを用いて
、５０ｍｌの２×ＴＹ（１％グルコースおよび１００μｇ／ｍｌのアンピシリン
を含有する）（２×ＴＹ−ＡＭＰ−ＧＬＵ）を接種し、そして振盪しながら０．
８のＯ．Ｄ．まで増殖させる。この培養物の５ｍｌを用いて５０ｍｌの２×ＴＹ
−ＡＭＰ−ＧＬＵに接種し、２×１０８ＴＵのΔ遺伝子３ヘルパー（Ｍ１３Δ遺
伝子ＩＩＩ、ＰＣＴ公開ＷＯ９２／０１０４７を参照のこと）を添加し、そして
培養物を振盪なしで３７℃で４５分間インキュベートし、次いで振盪しながら３
７℃で４５分間インキュベートする。この培養物を１０分間４０００ｒ．ｐ．ｍ
．で遠心分離し、そしてペレットを２リットルの２×ＴＹ（１００μｇ／ｍｌア
ンピシリンおよび５０μｇ／ｍｌカナマイシンを含有する）中に再懸濁し、そし
て一晩増殖させる。ファージをＰＣＴ公開ＷＯ９２／０１０４７に記載のように
調製する。
【０９９９】 Ｍ１３Δ遺伝子ＩＩＩを以下のように調製する：Ｍ１３Δ遺伝子ＩＩＩヘルパ
ーファージは、遺伝子ＩＩＩタンパク質をコードしない。それゆえ、抗体フラグ
メントを提示するファージ（ファージミド）は、抗原に対するより大きい結合ア
ビディティーを有する。ファージ形態形成の間、野生型遺伝子ＩＩＩタンパク質
を供給するｐＵＣ１９誘導体を保有する細胞においてヘルパーファージを増殖さ
せることにより、感染性Ｍ１３Δ遺伝子ＩＩＩ粒子を作製する。培養物を振盪な
しで３７℃で１時間インキュベートし、次いで振盪しながら３７℃でさらに１時
間インキュベートする。細胞を遠心沈殿（ＩＥＣ−Ｃｅｎｔｒａ ８，４００ｒ
．ｐ．ｍ．で１０分間）し、１００μｇ／ｍｌのアンピシリンおよび２５μｇ／
ｍｌのカナマイシンを含有する２×ＴＹブロス（２×ＴＹ−ＡＭＰ−ＫＡＮ）３
００ｍｌ中で再懸濁し、そして３７℃で振盪しながら一晩増殖させた。ファージ
粒子を、２回のＰＥＧ沈殿（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９９０）により培養培地か
ら精製および濃縮し、２ｍｌ ＰＢＳに再懸濁し、そして０．４５μｍのフィル
ター（Ｍｉｎｉｓａｒｔ ＮＭＬ；Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）を通過させ、約１０１ ３ 形質導入単位／ｍｌ（アンピシリン耐性クローン）の最終濃度を得る。
【１０００】 （ライブラリーのパニング） １００μｇ／ｍｌまたは１０μｇ／ｍｌのいずれかの本発明のポリペプチドの
４ｍｌを用いてＰＢＳ中でイムノチューブ（Ｉｍｍｕｎｏｔｕｂｅ）（Ｎｕｎｃ
）を、一晩コートした（被覆した）。チューブを、３７℃で２時間２％Ｍａｒｖ
ｅｌ−ＰＢＳでブロックし、次いでＰＢＳ中で３回洗浄した。約１０１３ＴＵの
ファージを、このチューブに加え、そして反転ターンテーブル（回転盤）上で反
転しながら室温で３０分間インキュベートし、次いでさらに１．５時間静置させ
た。チューブをＰＢＳ ０．１％ Ｔｗｅｅｎ−２０を用いて１０回そしてＰＢ
Ｓで１０回洗浄した。１ｍｌの１００ｍＭトリエチレンアミンを加え、そして反
転ターンテーブル上で１５分間回転させ、その後この溶液を０．５ｍｌの１．０
Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４で直ちに中和する。次いで、抽出したファー
ジを３７℃で３０分間Ｅ．ｃｏｌｉとともに培養して用いて、１０ｍｌのｍｉｄ
−ｌｏｎｇ Ｅ．ｃｏｌｉ ＴＧ１を感染させた。次いでこのＥ．ｃｏｌｉを１
％グルコースおよび１００μｇ／ｍｌアンピシリンを含有するＴＹＥプレート上
にプレートした。ついでこの得られた細菌のライブラリーを、上記のように、デ
ルタ遺伝子３ヘルパーファージを用いてレスキューし、次の回の選択のためのフ
ァージを調製する。次いで、このプロセスを全部で４回のアフィニティー精製（
ＰＢＳ、０．１％ Ｔｗｅｅｎ−２０での２０回まで、そして３回目および４回
目のＰＢＳでの２０回まで増加したチューブ洗浄を伴う）のために繰り返す。
【１００１】 （結合剤の特徴付け） ３回目および４回目の選択から抽出したファージを用いてＥ．ｃｏｌｉ ＨＢ ２１５１を感染し、そしてアッセイのために単一のコロニーから可溶性ｓｃＦ
ｖを生成する（Ｍａｒｋｓら、１９９１）。本発明の１０ｐｇ／ｍｌのポリペプ
チドを含有する５０ｍＭ重炭酸塩ｐＨ９．６を用いて被覆したマイクロタイター
プレートで、ＥＬＩＳＡを実施する。ＥＬＩＳＡで陽性のクローンは、ＰＣＲフ
ィンガープリント（例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ ９２／０１０４７を参照のこと）
によって、次いで配列決定によってさらに特徴付けられる。これらのＥＬＩＳＡ
陽性のクローンはまた、当該分野で公知の技術（例えば、エピトープマッピング
、結合親和性（バインディングアフィニティー）、レセプターシグナル伝達、抗
体／抗原結合をブロックするかまたは競合阻害する能力、および競合アゴニスト
活性またはアンタゴニスト活性など）によってさらに特徴付けられ得る。
【１００２】 本発明を、前述の説明および実施例に詳細に記載された以外の方法で実施し得
ることは、明らかである。本発明の多数の改善および改変が、上記の教示を考慮
して可能であり、従って、それは、添付の特許請求の範囲の範囲内にある。
【１００３】 発明の背景、詳細な説明および実施例において引用された各文書の全開示（特
許、特許出願、学術文献、要約、実験マニュアル、書籍または他の開示を含む）
は、本明細書中に参考として援用される。さらに、本明細書で提示された配列表
のハードコピーおよび対応するコンピューター読み出し形態は、本明細書中に参
考として援用される。
【１００４】 本発明の特定のポリヌクレオチドおよびポリペプチド（抗体を含む）は、米国
仮出願番号第６０／１８４，６６４号および米国仮出願番号第６０／１８９，８
７４号（これは、本明細書にその全体が参考として援用される）に開示された。
さらに、米国仮出願番号第６０／１８４，６６４号および米国仮出願番号第６０
／１８９，８７４号の配列表のハードコピーおよびコンピューターで読み取り可
能な形式もまた、その全体が本明細書に参考として援用される。
【１００５】
【表６】 ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１３５０ （カナダ） 出願人は、出願に基づきカナダ国特許が発行されるか、あるいは同出願が拒絶
または放棄されて回復され得なくなるかもしくは取り下げられるまでは、特許庁
長官（Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎｅｒ ｏｆ Ｐａｔｅｎｔｓ）が、長官により指名
された独立の専門家に対してのみ出願中で言及された寄託済みの生物学的材料の
サンプルの供与を許可する旨を請求し、出願人は、国際出願の公表のための規則
上の準備が完了する前に、書面によりその旨を国際事務局に告知しなければなら
ない。
【１００６】 （ノルウェー） 出願人はここにおいて、出願が（ノルウェー特許庁により）公開に付されるか
あるいは公開を経ずにノルウェー特許庁による決定を受けるまでは、サンプルの
供与は当該技術の専門家に対してのみ行われる旨を、請求する。この旨の請求は
、ノルウェー特許法第２２条および第３３条（３）に基づき出願が公に利用可能
にされる時点以前に、出願人によりノルウェー特許庁に対してなされるものとす
る。そのような請求が出願人によりなされた場合は、第三者によるサンプルの供
与のいかなる請求においても、利用される専門家を表示するものとする。専門家
は、ノルウェー特許庁により作成された公認専門家のリスト（ｌｉｓｔ ｏｆ
ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ ｅｘｐｅｒｔｓ）に記載された任意の者か、あるいは、
個々の場合において出願人により承認された任意の者であり得る。
【１００７】 （オーストラリア） 出願人はここにおいて、微生物のサンプルの供与は、特許の付与前において、
あるいは出願の放棄（ｌａｐｓｉｎｇ）、拒絶あるいは取り下げ前において、発
明に対し利害関係を有さない当業者である対象者（ｓｋｉｌｌｅｄ ａｄｄｒｅ
ｓｓｅｅ）に対してのみ行われる旨を、告知するものである（オーストラリア国
特許法第３．２５（３）号規定）。
【１００８】 （フィンランド） 出願人はここにおいて、出願が（特許および統制委員会（Ｎａｔｉｏｎａｌ
Ｂｏａｒｄ ｏｆ Ｐａｔｅｎｔｓ ａｎｄ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ）により
）公開に付されるかあるいは公開を経ずに国立特許および法規委員会による決定
を受けるまでは、サンプルの供与は当該技術の専門家に対してのみ行われる旨を
、請求する。
【１００９】 （英国） 出願人はここにおいて、微生物のサンプルの供与は専門家に対してのみ利用可
能にされる旨を、請求する。この旨の請求は、出願の国際公表のための規則上の
準備が完了する前に、出願人により国際事務局に対してなされなければならない
。 ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−６２２ （デンマーク） 出願人はここにおいて、出願が（デンマーク特許庁により）公開に付されるか
あるいは公開を経ずにデンマーク特許庁による決定を受けるまでは、サンプルの
供与は当該技術の専門家に対してのみ行われる旨を、請求する。この旨の請求は
、デンマーク特許法第２２条および第３３条（３）に基づき出願が公に利用可能
にされる時点以前に、出願人によりデンマーク特許庁に対してなされるものとす
る。そのような請求が出願人によりなされた場合は、第三者によるサンプルの供
与のいかなる請求においても、利用される専門家を表示するものとする。専門家
は、デンマーク特許庁により作成された公認専門家のリスト（ｌｉｓｔ ｏｆ
ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ ｅｘｐｅｒｔｓ）に記載された任意の者か、あるいは、
個々の場合において出願人により承認された任意の者であり得る。
【１０１０】 （スウェーデン） 出願人はここにおいて、出願が（スウェーデン特許庁により）公開に付される
かあるいは公開を経ずにスウェーデン特許庁による決定を受けるまでは、サンプ
ルの供与は当該技術の専門家に対してのみ行われる旨を、請求する。この旨の請
求は、優先日から１６ヶ月が経過するよりも前に、出願人により国際事務局に対
してなされるものとする（好ましくはＰＣＴ Ａｐｐｌｉｃａｎｔ’ｓ Ｇｕｉ
ｄｅのＶｏｌｕｍｅ Ｉのａｎｎｅｘ Ｚに記載された書式ＰＣＴ／ＲＯ／１３
４による）。そのような請求が出願人によりなされた場合は、第三者によるサン
プルの供与のいかなる請求においても、利用される専門家を表示するものとする
。専門家は、スウェーデン特許庁により作成された公認専門家のリスト（ｌｉｓ
ｔ ｏｆ ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ ｅｘｐｅｒｔｓ）に記載された任意の者か、
あるいは、個々の場合において出願人により承認された任意の者であり得る。
【１０１１】 （オランダ） 出願人はここにおいて、オランダ特許の発行日まで、あるいは出願が拒絶、取
り下げあるいは放棄（ｌａｐｓｅｄ）される日までは、特許法３１Ｆ（１）の規
定に基づき、微生物は専門家へのサンプル供与の形でのみ行われる旨を、請求す
る。この旨の請求は、オランダ王国特許法の第２２Ｃ条または第２５条に基づき
出願が公に利用可能にされる日のうちいずれか早い方の日付よりも前に、出願人
によりオランダ工業所有権局に対して提出されるものとする。
【１０１２】
【表７】 ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１４７７ （カナダ） 出願人は、出願に基づきカナダ国特許が発行されるか、あるいは同出願が拒絶
または放棄されて回復され得なくなるかもしくは取り下げられるまでは、特許庁
長官（Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎｅｒ ｏｆ Ｐａｔｅｎｔｓ）が、長官により指名
された独立の専門家に対してのみ出願中で言及された寄託済みの生物学的材料の
サンプルの供与を許可する旨を請求し、出願人は、国際出願の公表のための規則
上の準備が完了する前に、書面によりその旨を国際事務局に告知しなければなら
ない。
【１０１３】 （ノルウェー） 出願人はここにおいて、出願が（ノルウェー特許庁により）公開に付されるか
あるいは公開を経ずにノルウェー特許庁による決定を受けるまでは、サンプルの
供与は当該技術の専門家に対してのみ行われる旨を、請求する。この旨の請求は
、ノルウェー特許法第２２条および第３３条（３）に基づき出願が公に利用可能
にされる時点以前に、出願人によりノルウェー特許庁に対してなされるものとす
る。そのような請求が出願人によりなされた場合は、第三者によるサンプルの供
与のいかなる請求においても、利用される専門家を表示するものとする。専門家
は、ノルウェー特許庁により作成された公認専門家のリスト（ｌｉｓｔ ｏｆ
ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ ｅｘｐｅｒｔｓ）に記載された任意の者か、あるいは、
個々の場合において出願人により承認された任意の者であり得る。
【１０１４】 （オーストラリア） 出願人はここにおいて、微生物のサンプルの供与は、特許の付与前において、
あるいは出願の放棄（ｌａｐｓｉｎｇ）、拒絶あるいは取り下げ前において、発
明に対し利害関係を有さない当業者である対象者（ｓｋｉｌｌｅｄ ａｄｄｒｅ
ｓｓｅｅ）に対してのみ行われる旨を、告知するものである（オーストラリア国
特許法第３．２５（３）号規定）。
【１０１５】 （フィンランド） 出願人はここにおいて、出願が（特許および統制委員会（Ｎａｔｉｏｎａｌ
Ｂｏａｒｄ ｏｆ Ｐａｔｅｎｔｓ ａｎｄ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ）により
）公開に付されるかあるいは公開を経ずに国立特許および法規委員会による決定
を受けるまでは、サンプルの供与は当該技術の専門家に対してのみ行われる旨を
、請求する。
【１０１６】 （英国） 出願人はここにおいて、微生物のサンプルの供与は専門家に対してのみ利用可
能にされる旨を、請求する。この旨の請求は、出願の国際公表のための規則上の
準備が完了する前に、出願人により国際事務局に対してなされなければならない
。 ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−６２２ （デンマーク） 出願人はここにおいて、出願が（デンマーク特許庁により）公開に付されるか
あるいは公開を経ずにデンマーク特許庁による決定を受けるまでは、サンプルの
供与は当該技術の専門家に対してのみ行われる旨を、請求する。この旨の請求は
、デンマーク特許法第２２条および第３３条（３）に基づき出願が公に利用可能
にされる時点以前に、出願人によりデンマーク特許庁に対してなされるものとす
る。そのような請求が出願人によりなされた場合は、第三者によるサンプルの供
与のいかなる請求においても、利用される専門家を表示するものとする。専門家
は、デンマーク特許庁により作成された公認専門家のリスト（ｌｉｓｔ ｏｆ
ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ ｅｘｐｅｒｔｓ）に記載された任意の者か、あるいは、
個々の場合において出願人により承認された任意の者であり得る。
【１０１７】 （スウェーデン） 出願人はここにおいて、出願が（スウェーデン特許庁により）公開に付される
かあるいは公開を経ずにスウェーデン特許庁による決定を受けるまでは、サンプ
ルの供与は当該技術の専門家に対してのみ行われる旨を、請求する。この旨の請
求は、優先日から１６ヶ月が経過するよりも前に、出願人により国際事務局に対
してなされるものとする（好ましくはＰＣＴ Ａｐｐｌｉｃａｎｔ’ｓ Ｇｕｉ
ｄｅのＶｏｌｕｍｅ Ｉのａｎｎｅｘ Ｚに記載された書式ＰＣＴ／ＲＯ／１３
４による）。そのような請求が出願人によりなされた場合は、第三者によるサン
プルの供与のいかなる請求においても、利用される専門家を表示するものとする
。専門家は、スウェーデン特許庁により作成された公認専門家のリスト（ｌｉｓ
ｔ ｏｆ ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ ｅｘｐｅｒｔｓ）に記載された任意の者か、
あるいは、個々の場合において出願人により承認された任意の者であり得る。
【１０１８】 （オランダ） 出願人はここにおいて、オランダ特許の発行日まで、あるいは出願が拒絶、取
り下げあるいは放棄（ｌａｐｓｅｄ）される日までは、特許法３１Ｆ（１）の規
定に基づき、微生物は専門家へのサンプル供与の形でのみ行われる旨を、請求す
る。この旨の請求は、オランダ王国特許法の第２２Ｃ条または第２５条に基づき
出願が公に利用可能にされる日のうちいずれか早い方の日付よりも前に、出願人
によりオランダ工業所有権局に対して提出されるものとする。
【配列表】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 1/18 Ａ６１Ｐ 7/02 ４Ｃ０８４ 5/10 9/00 ４Ｈ０４５ 7/02 9/10 9/00 11/06 9/10 17/00 11/06 17/02 17/00 17/06 17/02 19/02 17/06 19/10 19/02 21/00 19/10 25/14 21/00 25/16 25/14 25/18 25/16 25/24 25/18 25/28 25/24 29/00 25/28 31/04 29/00 31/18 31/04 35/00 31/18 35/02 35/00 35/04 35/02 37/00 35/04 Ｃ０７Ｋ 14/47 37/00 16/18 Ｃ０７Ｋ 14/47 Ｃ１２Ｎ 1/15 16/18 1/19 Ｃ１２Ｎ 1/15 1/21 1/19 Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ 1/21 Ｃ１２Ｑ 1/68 Ａ 5/10 Ｇ０１Ｎ 33/15 Ｚ Ｃ１２Ｐ 21/02 33/50 Ｚ Ｃ１２Ｑ 1/68 Ｃ１２Ｎ 15/00 Ａ Ｇ０１Ｎ 33/15 5/00 Ａ 33/50 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ， ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，Ｇ Ｍ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ， ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，Ｂ Ｚ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ， ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，Ｊ Ｐ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ， ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，Ｒ Ｏ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ， ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 ニ， ジアン アメリカ合衆国 メリーランド 20874， ジャーマンタウン， フェア レディー ウェイ 17815 (72)発明者 シ， ヤング アメリカ合衆国 メリーランド 20878， ゲイザースバーグ， ウエスト サイド ドライブ 437， アパートメント 102 (72)発明者 エプナー， ラインハルト アメリカ合衆国 メリーランド 20878， ゲイザースバーグ， シェルバーン テ ラス 9906 ナンバー316 (72)発明者 チョイ， ジル エイチ． アメリカ合衆国 メリーランド 20850， ロックビル， ポトマック オークス ドライブ 11429 (72)発明者 ルーベン， スティーブン エム． アメリカ合衆国 メリーランド 20832， オルネイ， ヘリテイジ ヒルズ ドラ イブ 18528 Ｆターム(参考） 2G045 AA25 AA29 AA40 BA13 BB03 BB20 CA26 CB01 CB03 CB17 CB21 DA12 DA13 DA14 DA36 DA77 FB02 FB04 4B024 AA01 AA11 BA80 CA04 CA11 CA12 DA02 DA03 DA06 EA02 HA11 HA17 4B063 QA13 QA19 QQ42 QQ53 QR32 QR36 QR55 QS34 4B064 AG01 BH09 CA19 CC24 CE02 CE04 CE07 CE11 CE12 CE14 DA01 DA05 DA13 4B065 AA90X AA91X AA93X AA93Y AB01 CA24 CA44 CA46 4C084 AA02 AA06 AA07 AA13 BA01 BA08 BA19 BA20 BA21 BA22 DA41 DB10 DC02 DC50 MA13 MA17 MA22 MA23 MA24 MA31 MA35 MA37 MA52 MA56 MA59 MA66 ZA022 ZA122 ZA162 ZA182 ZA362 ZA452 ZA542 ZA592 ZA662 ZA892 ZA942 ZA962 ZA972 ZB012 ZB112 ZB262 ZB272 ZB352 ZC042 ZC552 4H045 AA10 AA20 AA30 BA10 CA40 EA20 EA50 FA74 GA22 GA23 GA26 GA30

Claims (22)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 単離された核酸分子であって、以下： （ａ）配列番号Ｘに示されるポリヌクレオチド、またはＡＴＣＣ受託番号Ｚに
    含まれるｃＤＮＡによってコードされるポリヌクレオチド； （ｂ）配列番号Ｙの生物学的に活性なポリペプチドフラグメント、またはＡＴ
    ＣＣ受託番号Ｚに含まれるｃＤＮＡ配列によってコードされる生物学的に活性な
    ポリペプチドフラグメントをコードする、ポリヌクレオチド； （ｃ）配列番号Ｙのポリペプチドエピトープ、またはＡＴＣＣ受託番号Ｚに含
    まれるｃＤＮＡ配列によってコードされるポリペプチドエピトープをコードする
    、ポリヌクレオチド； （ｄ）（ａ）〜（ｃ）において特定されるポリヌクレオチドのいずれか１つに
    ストリンジェント条件下でハイブリダイズし得るポリヌクレオチドであって、こ
    こで、該ポリヌクレオチドは、Ａ残基のみまたはＴ残基のみのヌクレオチド配列
    を有する核酸分子に、ストリンジェント条件下でハイブリダイズしない、ポリヌ
    クレオチド、 からなる群より選択されるポリヌクレオチドを含む、単離された核酸分子。
  2. 【請求項２】 前記ポリヌクレオチドが、可溶性ポリペプチドをコードする
    ヌクレオチド配列を含む、請求項１に記載の単離された核酸分子。
  3. 【請求項３】 前記ポリヌクレオチドが、配列番号Ｙとして同定される配列
    、またはＡＴＣＣ受託番号Ｚに含まれるｃＤＮＡ配列によってコードされるポリ
    ペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、請求項１に記載の単離された核
    酸分子。
  4. 【請求項４】 前記ポリヌクレオチドが、配列番号Ｘのヌクレオチド配列全
    体またはＡＴＣＣ受託番号Ｚに含まれるｃＤＮＡを含む、請求項１に記載の単離
    された核酸分子。
  5. 【請求項５】 前記ポリヌクレオチドがＤＮＡである、請求項２に記載の単
    離された核酸分子。
  6. 【請求項６】 前記ポリヌクレオチドがＲＮＡである、請求項３に記載の単
    離された核酸分子。
  7. 【請求項７】 請求項１に記載の単離された核酸分子を含む、ベクター。
  8. 【請求項８】 請求項７に記載のベクターを含む、宿主細胞。
  9. 【請求項９】 遺伝子発現を制御する異種調節エレメントに作動可能に連結
    されている請求項１に記載の核酸分子を含む、組換え宿主細胞。
  10. 【請求項１０】 請求項９に記載の宿主細胞からコードされたポリペプチド
    を発現する工程、および該ポリペプチドを回収する工程を包含する、ポリペプチ
    ドの産生方法。
  11. 【請求項１１】 単離されたポリペプチドであって、以下： （ａ）配列番号Ｙに示されるポリペプチド、またはｃＤＮＡによってコードさ
    れるポリペプチド； （ｂ）配列番号Ｙのポリペプチドフラグメント、または該ｃＤＮＡによってコ
    ードされるポリペプチド； （ｃ）配列番号Ｙのポリペプチドエピトープ、または該ｃＤＮＡによってコー
    ドされるポリペプチド；および （ｄ）配列番号Ｙの改変体、 からなる群より選択される配列に少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む、
    単離されたポリペプチド。
  12. 【請求項１２】 配列番号Ｙを有するポリペプチドを含む、請求項１１に記
    載の単離されたポリペプチド。
  13. 【請求項１３】 請求項１１に記載の単離されたポリペプチドに特異的に結
    合する、単離された抗体。
  14. 【請求項１４】 請求項１１に記載の単離されたポリペプチドを発現する、
    組換え宿主細胞。
  15. 【請求項１５】 単離されたポリペプチドを作製する方法であって、以下： （ａ）該ポリペプチドが発現されるような条件下で、請求項１４に記載の組換
    え宿主細胞を培養する工程；および （ｂ）該ポリペプチドを回収する工程、 を包含する、方法。
  16. 【請求項１６】 請求項１５に記載の方法によって産生される、ポリペプチ
    ド。
  17. 【請求項１７】 医学的状態を予防、処置、または緩和する方法であって、
    請求項１に記載のポリヌクレオチドの治療有効量を、哺乳動物被験体に投与する
    工程を包含する、方法。
  18. 【請求項１８】 被験体における病理学的状態、または病理学的状態に対す
    る感受性を診断する方法であって、以下： （ａ）請求項１に記載のポリヌクレオチドにおける変異の存在または非存在を
    決定する工程；および （ｂ）該変異の存在または非存在に基づいて病理学的状態、または病理学的状
    態に対する感受性を診断する工程、 を包含する、方法。
  19. 【請求項１９】 被験体において病理学的状態、または病理学的状態に対す
    る感受性を診断する方法であって、以下： （ａ）生物学的サンプルにおける請求項１１に記載のポリペプチドの発現の存
    在または量を決定する工程；および （ｂ）該ポリペプチドの発現の存在または量に基づいて病理学的状態、または
    病理学的状態に対する感受性を診断する工程、 を包含する、方法。
  20. 【請求項２０】 請求項１１に記載のポリペプチドに対する結合パートナー
    を同定する方法であって、以下： （ａ）請求項１１に記載のポリペプチドを結合パートナーと接触させる工程；
    および （ｂ）該結合パートナーが該ポリペプチドの活性をもたらすか否かを決定する
    工程、 を包含する、方法。
  21. 【請求項２１】 請求項１１に記載のポリペプチドの活性を改変する分子を
    スクリーニングする方法であって、以下： （ａ）該ポリペプチドを、アゴニスト活性またはアンタゴニスト活性を有する
    と疑われる化合物と接触させる工程；および （ｂ）該ポリペプチドの活性をアッセイする工程； を包含する、方法。
  22. 【請求項２２】 医学的状態を予防、処置、または緩和する方法であって、
    請求項１１に記載のポリペプチドの治療有効量を、哺乳動物被験体に投与する工
    程を包含する、方法。
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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002036808A2 (en) * 2000-11-03 2002-05-10 Diadexus, Inc. Compositions and methods relating to prostate specific genes and proteins
US20020150924A1 (en) * 2000-11-21 2002-10-17 Susana Salceda Compositions and methods relating to prostate specific genes and proteins
CA2466020A1 (en) * 2001-09-28 2003-04-10 University Of South Florida Rsv gene expression vaccine
GB0207224D0 (en) * 2002-03-27 2002-05-08 Novartis Forschungsstiftung Tenascin-W compositions and uses thereof
US7789908B2 (en) * 2002-06-25 2010-09-07 Boston Scientific Scimed, Inc. Elastomerically impregnated ePTFE to enhance stretch and recovery properties for vascular grafts and coverings
US20070116767A1 (en) * 2003-02-14 2007-05-24 Mohapatra Shyam S Chitosan-microparticles for ifn gene delivery
EP1599602B1 (en) * 2003-02-14 2015-01-14 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Predicting graft rejection
US20110059069A1 (en) * 2005-09-22 2011-03-10 Biogen Idec Ma Inc Gapr-1 Methods
WO2015057403A2 (en) * 2013-10-17 2015-04-23 Tarix Pharmaceuticals Ltd. Compositions and methods for treatment of inflammatory bowel disease

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5457038A (en) * 1988-11-10 1995-10-10 Genetics Institute, Inc. Natural killer stimulatory factor

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