JP2003521481A

JP2003521481A - 新生児壊死性腸炎及び他の消化管粘膜損傷の予防における経口グルタミン

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Publication number: JP2003521481A
Application number: JP2001532760A
Authority: JP
Inventors: ピナキ・パニグラヒ; カロリー・ホルバト; アイラ・エイチ・ジェウォルブ
Original assignee: プロビオティックス・インコーポレイテッド
Priority date: 1999-10-22
Filing date: 1999-10-22
Publication date: 2003-07-15
Also published as: EP1244439A1; CA2388724A1; EP1244439A4; AU1130300A

Abstract

(57)【要約】経口でグルタミンを投与することを含む、消化管における壊死性の組織損傷を予防する方法を示す。バクテリア（例えばグラム陰性菌）、他の感染性病原体、毒物、化学薬品、及び有害物質のトランスロケーションを阻害することにより、グルタミンは消化管に沿った組織を保護する。グルタミンの管腔内／アピカル側の存在は、粘膜保護を最適化し、栄養吸収を増進する。グルタミンは、早産児あるいは満期出産児、子供、成人に対して投与され得る。経腸的なグルタミンは、新生児壊死性腸炎の処置において、バクテリアトランスロケーション及び損傷により引き起こされる炎症を低減させるのに有益である。経口グルタミンは、消化管の機能不全の処置においてもまた有益である。グルタミンが経口で投与されると、グルタミンが消化管を被覆し、それにより消化管の感染及び／あるいは炎症状態を処置する。グルタミンは、治療薬として作用することにより、経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）の低下した病理状態の処置に有益である。グルタミンは粉末、カプセル、酸耐性型で徐放性のマイクロカプセル、液体で再構成した形態等、任意の形態で供給してもよい。グルタミンはまた、混合物として経口で投与してもよい。また処置用の他の薬を、グルタミンと一緒に投与してもよい。グルタミンは、特には早産児に対しては、経鼻胃チューブを介して投与可能である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（本発明の属する分野）本発明は、インビボでバクテリアトランスロケーション及び新生児壊死性腸炎
（ＮＥＣ）の予防において管腔のグルタミンを用いる方法に関する。同じ処置は
、他の感染性病原体、毒物、化学薬品、及び有害物質により引き起こされる損傷
から腸管細胞を保護するのにもまた有益である。

【０００２】（発明の背景）グルタミンは「条件下の必須アミノ酸」である：グルタミンは非必須アミノ酸
とされているけれども、我々の研究所の最近の報告及び研究は、管腔内（アピカ
ル）のグルタミンの存在が、最適な腸管上皮機能のために必須であることを支持
する（Horvath K, Jami MM, Hill ID, Papadimitriou JC, Magder LS, Chanason
gcram S. Glutamine-free oral diet and the morphology and function of the
rat small intestine, J Parent Ent Nutr 1996; 20: 128-134)。

【０００３】小腸上皮細胞（エンテロサイト）は、体内において細胞代謝回転が３番目に速
く、常に高いエネルギー源を必要とする。グルタミンは、エンテロサイトの好ましい燃料となる（Williamson RCN. Intestinal adaptation. Structural, funct
ional and cytokinetic changes, N Engl J Med, 1978; 298: 1393-1402; Nygaa
rd K. Resection of the small intestine in rats. 3. Morphological changes
in the intestinal tract. Acta Chir Scad 1967; 133: 233-248; Windmueller
HG., Spaeth AE.: Uptake and metabolism of plasma glutamine by the small
intestine. J. Biol. Chem. 1974; 249: 5070-5079）。

【０００４】エンテロサイトは、肝臓（５.９４μmol/g）あるいは骨格筋（３.３μmol/g）
と比較して小腸（０.２μmol/g 組織）中の粘膜のグルタミンプールのサイズが
小さいために外部からのグルタミンの供給に大いに依存している。粘膜のグルタ
ミンシンテターゼ活性はまた非常に低い（Windmueller HG., Spaeth AE.: Uptak
e and metabolism of plasma glutamine by the small intestine. J. Biol. Ch em. 1974; 249: 5070-5079; Lund P.: A radiochemical assay for glutamine s
ynthetase, and activity of the enzyme in the rat tissues. Biochem. J. 19
70; 118: 35-39）。

【０００５】エンテロサイトは、グルタミンを管腔及び循環血液の双方から得ることが可能
ではあるけれども、これら２種のグルタミン源は、理想的には利用されない。グ
ルタミンなしの完全静脈栄養（ＴＰＮ）中、血清中のＬ-グルタミン値は有意に
減少しないという事実にもかかわらず、３日以内に腸管萎縮及び機能不全がおこ
る。Ｌ-グルタミンは、必須アミノ酸とはみなされていないけれども、ＴＰＮ中
での必要性から、ヒトにおいて条件下必須アミノ酸とされる（Hughes CA, Dowli
ng RH. Speed of onset of adaptive mucosal hypoplasia and hypofunction in
the intestine of parenterally fed rats. Clin Sci 1980; 59: 317-327）。

【０００６】腸管の萎縮は、エンテロサイト以外の細胞及びオルガネラをも含む。粘膜中の
リンパ球及びマクロファージのような免疫細胞はまた、グルタミンを代謝する。
線維芽細胞も同様に、最適な機能のためにグルタミンを必要とする（Ardawi MSM
, Newsholme EA. Glutamine metabolism in lymphocytes of the rat. Biochem J. 1983; 212: 835-842; Caldwell MD. Local glutamine metabolism in wound
and inflammation. Metabolism 1989; 38(suppl); 34-39; Zielke HR, Ozand PT
, Tildon JT, Sevdalian DA, Cornblath M. Reciprocal regulation of glucose
and glutamine utilization by cultured human diploid fibroblasts. J Cell Physiol 1978; 95: 41-48）。

【０００７】グルタミンの非存在下では、ＤＮＡ中への(^３Ｈ)チミジン取り込み率は、腸間
膜リンパ球中においては非常に低く、少量のグルタミン（１μＭ）でさえ、取り
込みを４倍に増大させる。グルタミンなしのＴＰＮ方式の結果、腸管からのバク
テリアトランスロケーションと関係のある分泌型ＩｇＡ値は有意に減少する。Ｔ
ＰＮ中の２％のグルタミンにより、回腸及び大腸へのバクテリアの粘着には有意
差はなかったけれども（Ardawi MSM, Newsholme EA. Glutamine metabolism in
lymphocytes of the rat. Biochem J. 1983; 212: 835-842; Alverdy JC, Chi H
S, Sheldon GS. The effect of parenteral nutrition on gastrointestinal im
munity, the importance of enteral stimulation. Ann. Surg. 1985; 202: 681
-684; Alverdy JC, Aoys E, Moss GS. Total parenteral nutrition promotes b
acterial translocation from the gut. Surgery 1988; 104: 185-190）、ラッ
トにおいて腸間膜リンパ節へのバクテリア（大腸菌、Proteus mirabilis）のト
ランスロケーションが減少した（Burke DJ, Alverdy JC, Aoys E, Moss G. Glut
amine-supplemented total parenteral nutrition improves gut immune functi
on. Arch Surg 1989; 124: 1396-1399）。

【０００８】グルタミンを補給したＴＰＮは、胆汁中の標準ＳＩｇＡ値を回復させた。グル
タミン補給は、粘膜障害（放射線、メトトレキサート）モデルにおいても、動物
の死亡率を有意に減少させ、粘膜の回復を速めることによりまた有益であった。
これらのデータにより、小腸の２つの異なる機能に対するグルタミンの重要性が
強調される：（Ｉ）栄養吸収、及び（II）粘膜保護（Burke DJ, Alverdy JC, Ao
ys E, Moss G. Glutamine-supplemented total parenteral nutrition improves
gut immune function. Arch Surg 1989; 124: 1396-1399; Fox AD, Kripke SA,
De Paula J, Berman JM, Settle RG, Rombeau JL. Effect of a glutamine-sup
plemented enteral diet on methotrexate-induced enterocolitis. J Parent E nteral Nutr 1988; 12: 325-331; Klimberg VS, Souba WW, Dolson D, Copeland
EM. Oral glutamine supports crypt cell turnover and accelerates intesti
nal healing following abdominal radiation. JPEN 1989; 115: 38(abstract)
）。

【０００９】グルタミンの小腸粘膜に及ぼす効果グルタミンを補給した成分栄養を食餌した動物において、グルタミンは陰窩（
crypt）に対する有糸分裂の数を増加させる。このことは、グルタミンが陰窩細胞の代謝回転を支持し、絨毛の高さを増大さ
せることを意味する。Burkeらは、ＴＰＮにグルタミンを添加することにより、
ＩｇＡ標準値が維持されることを実証した（Barber AE, Jones WG, Minei JP, M
oldawer LL, Fahey TJ, Lowry SF, Shires GT. Composition and functional co
nsequences of fiber and glutamine supplementation of enteral diets. Surg Forum 1989; 40: 15-16; Klimberg VS, Souba WW, Dolson D, Copeland EM. Or
al glutamine supports crypt cell turnover and accelerates intestinal hea
ling following abdominal radiation. JPEN 1989; 115: 38(abstract)）。（Hw
ang TL, O'Dwyer S, Smith RJ, Wilmore DW. Preservation of the small intes
tinal mucosa using glutamine supplemented parenteral nutrition. Surg For um 1986; 37: 56-58; Burke DJ, Alverdy JC, Aoys E, Moss G. Glutamine-supp
lemented total parenteral nutrition improves gut immune function. Arch S urg 1989; 124: 1396-1399）。

【００１０】腸管粘膜上でのグルタミンの作用の基本的なメカニズムは、まだ分かっていな
い。Liらは、グルタミン含有ＴＰＮを受けているラットの門脈中におけるグルカ
ゴン濃度の上昇を報告した。グルカゴンはグルタミナーゼの調節において重要な
役割を果たしている。O'Dwyerは、グルタミンの栄養効果は、エンテログルカゴ
ン分泌を刺激する分泌促進作用と関連し得ることを示唆した（Li S, Nussbaum M
S, McFadden DW, Zhang F-S, LaFrance RJ, Dayal R, Fischer JE. Addition of
L-glutamine to total parenteral nutrition and its effect on portal insu
lin and glucagon and the development of hepatic steatosis in rats. J Sur g Res 1990; 48: 421-426）; Geer RJ, Williams PE, Lairmore T, Abumrad NN.
Glucagon: an important stimulator of gut and hepatic glutamine metaboli
sm. Surg Forum 1987; 38: 27-28; O'Dwyer ST, Smith RJ, Hwang TL, Wilmore
DW. Maintenance of small bowel mucosa with glutamine enriched parenteral
nutrition. JPEN 1989; 13: 579-585）。

【００１１】グルタミンと新生児の腸管腸管の発達におけるグルタミンの役割に関する有益なデータはほとんどない。
Kimuraは、発達過程でのグルタミンの需要がより高いことを示して、成人動物に
対して新生児ラットの腸においてグルタミン酸化が増大することを実証した（Ki
mura RE. Glutamine oxidation by developing rat small intestine . Pediatr Res 1987; 21: 214-217）。

【００１２】母乳蛋白質のグルタメート酸含有量は非常に高く、種々のミルク蛋白質（カゼ
イン、血清アルブミン、ラクトフェリン、ＩｇＡ、及びα−ラクトアルブミン）
の中ではアミノ酸が最も豊富である。グルタミン、グルタミン酸、及びタウリン
は、母乳において最も豊富な遊離アミノ酸である。おそらく、グルタミン及びグ
ルタミン酸の含有量が高いことはは、小腸の発達に有利である（Harzer G, Bind
els JG. Main compositional criteria of human milk and their implications
on nutrition in early infancy.）: New aspects of nutrition in preonancy , infancy and prematurity. (Xanthou M 編集)中. Elsevier Science Publisher
s, Amsterdam, 1987, p83-94; Rassin DK. Protein requirements in neonate.
: Textbook of Gastroenterology and Nutrition in Infancy (Labenthal E. 編
集）中. Raven Press, Ltd., New York, 1989, pp281-292; Harzer D, Franzke
V, Bindels JG. Human milk nonprotein nitrogen components: changing patte
rns of free amino acid and urea in the course of early lactation. Am J C lin Nutr 1984; 40: 303-309。

【００１３】つい最近、Neuらが早産児におけるグルタミン代謝を研究し、早産児が経口で
（経腸で）供給された場合にグルタミンを耐容し利用可能であることを示した。
免疫機能を検討して、当該著者らは、補強的な経口グルタミンが受け取れない早
産児においてＨＬＡ-ＤＲ(＋)のＴ細胞群が減少し、とそれに伴い院内感染が増
加することを報告した。

【００１４】バクテリアトランスロケーションバクテリアトランスロケーションは、腸管上皮細胞層を越えて通常では生殖不
能な過剰の腸管組織中へ生存可能な腸内バクテリアが進入すること定義される。
トランスロケーションするバクテリアは、通常は、小腸及び大腸の下部に普通に
いる寄生虫である。バクテリアのトランスロケーションは、経細胞によっても傍
細胞によっても起こりう得る（Alexander JW, Bryce ST, Babock GF et al. The
process of microbial translocation. Ann Surg 1990; 212: 496-512）。

【００１５】トランスロケーション過程の第１段階は、上皮細胞（エンテロサイト）の単層
を越えるバクテリアの進入である。バクテリアのトランスロケーションは通常の
過程であることはほとんどなく、トランスロケーションによりおこる免疫活性化
に加えて粘膜免疫系（防御の第一線としてのマクロファージ）が更なるトランス
ロケーションを予防する。分泌型イムノグロブリンは、粘膜表面中への同じバク
テリアの粘着を予防し得る。

【００１６】グルタミン（ＴＰＮ）の非存在下において、分泌型ＩｇＡの発現は減少する。
ゴルジ装置は、分泌型ＩｇＡの生成において重要な役割をする。分泌型成分の生
成は、粗面小胞体中で行われ、ゴルジ装置における更なる成熟を必要とする。

【００１７】我々のグループにより示されたゴルジ装置における形態的な変化により、ＴＰ
Ｎの患者において見られるＳＩｇＡ生成の減少の理由が説明され得る。免疫防御
の低下の結果、バクテリアの湿潤はより深くなり、それらは、腸間膜リンパ節、
肝臓、脾臓において検出され得る（Horvath K, Jami MM, Hill ID, Paradimitri
ou JC, Magder LS, Chanasongcram S. Glutamine-free oral diet and the morp
hology and function of the rat small intestine. J Parent Ent Nutr 1996;
20: 128-134: Burke DJ, Alverdy JC, Aoys E, Moss G. Glutamine-supplemente
d total parenteral nutrition improves gut immune function. Arch Surg 198
9; 124: 1396-1399; Brandtzaeg P, Halstensen TS, Kett K, Kraj_i P, Kvale
D, Rognum TO, Scott H, Sollid LM. Immunobiology and immunopathology of h
uman gut mucosa: humoral immunity and intraepithelail lymphocytes. Gastr oenterology 1989; 97: 1562-84）。

【００１８】早産児における壊死性腸炎ＮＥＣは、早産児における最も深刻な消化管障害であり、新生児集中治療室（
ＮＩＣＵ）における死の主要原因の１つである。それは、新生児期における最も
一般的な外科救急であり、早産児人口における罹患率及び死亡率の第２の主要な
原因となっている。無作為調査においてＮＥＣの発症率は、１％未満からＮＩＣ
Ｕ入院患者の５％程度までと幅があった。体重が５０１〜１５００グラムの新生
児２６８１名の最近の多施設調査より、１０.１％においてＮＥＣが確定（Bell
ステージ２−３）され、集団の更に１７.２％においてＮＥＣが疑われ（Bell ス
テージ１）；重症の（ステージ３）ＮＥＣである新生児において死亡率は５４％
であった。

【００１９】これらのデータは、ＮＥＣが新生児における主要な公衆衛生の問題であること
を示している：合衆国において〜４００万人の誕生／年と仮定すると、ＮＥＣは
、１２００〜９６００人の新生児において進行し、そのうちの９〜２８％が当該
病気の結果死亡すると予想される。早期の研究により、早産児において１０〜５
５％の死亡率が示された。ＮＥＣの生存者はまた、当該疾病の結果、短腸症候群
、成長障害、腸管狭窄を含む相当長期間罹患し、繰り返し手術が必要となること
もあり得る。

【００２０】臨床的有意性幾つかの研究により、腸管中、特にはエンテロサイト上でのグルタミンの有益
な効果が実証されている（Barber AE, Jones WG, Minei JP, Moldawer LL, Fahe
y TJ, Lowry SF, Shires GT. Composition and functional consequences of fi
ber and glutamine supplementation of enteral diets. Surg Forum 1989; 40:
15-16; Klimberg VS, Souba WW, Dolson D, Copeland EM. Oral glutamine sup
ports crypt cell turnover and accelerates intestinal healing following a
bdominal radiation. JPEN 1989; 115: 38(abstract); Souba WW, Klimberg VS,
Hautamaki RD, Meddenhall WH, Bova FC, Howard RJ, Bland KI, Copeland EM.
Oral glutamine reduces bacterial translocation following abdominal radi
ation. J Surg Res 1990; 48: 1-5）が、これらの効果の分子メカニズムはまだ
明らかにされていない（Hwang TL, O'Dwyer S, Smith RJ, Wilmore DW. Preserv
ation of the small intestinal mucosa using glutamine supplemented parent
eral nutrition. Surg Forum 1986; 37: 56-58）。

【００２１】別の実験動物モデルにおいて、内毒血症、虚血、出血性ショックがバクテリア
トランスロケーションを引き起こし得ることが示されている（Deitch EA, Berg
RD, Specian R. Endotoxin promotes the translocation of bacteria from the
gut. Arch Surg 1987; 122: 185; Redan JA, Rush BF, Lysz TW, Smith S, Mac
hiedo GW. Organ distribution of gut-derived bacteria caused by bowel man
ipulation or ischemia. Am J surg 1990; 159: 85-89; Deitch EA, Bridges W,
Baker J, Ma JW, Ma I, Grisham MB, Grenger DN, Specian RD, Berg Rd. Hemo
rrhagic shock induced bacterial translocation is reduced by xanthine oxi
dase inhibition or inactivation. Surgery 1988; 104: 191)、火傷及び感染症
、化学療法、腹部照射。（Jones II WG, Minei JP, Barber AE, Raybern J, Fah
ey III TJ, Shires III GT, Shires GT. Bacterial translocation and intesti
nal atrophy after injury and burn wound sepsis. Ann Surg 1990; 211: 399;
Berg RD. Bacterial translocation from the gastrointestinal tract of mic
e receiving immunosuppressive chemotherapeutic agents. Curr Microbiol 19
83; 8: 285-589; Fox AD, Kripke SA, De Paula J, Berman JM, Settle RG, Rom
beau JL. Effect of a glutamine-supplemented enteral diet on methotrexxat
e-induced enterocolitis. J Parent Enteral Nutr 1988; 12: 325-331; Guzman
-Stein G, Bonsack M, Liberty J, Delaney JP）。腹部照射はバクテリアトラン
スロケーションの原因となり、完全静脈栄養、完全静栄養に加えて麻薬、及び腸
管運動の低下は、腸間膜リンパ節、腹腔、肝臓、脾臓、血液へのバクテリアトラ
ンスロケーションの原因となり得、その結果敗血症及びしに至る。当該バクテリ
アトランスロケーションの増加の原因が特定されている（J surg Res 1989; 46:
104; Souba WW, Klimberg VS, Hautamaki RD, Meddenhall WH, Bova FC, Howar
d RJ, Bland KI, Copeland EM. Oral glutamine reduces bacterial translocat
ion following abdominal radiation. J surg Res 1990; 48: 1-5; Alverdy JC,
Aoys E, Moss GS. Total parenteral nutrition promotes bacterial transloc
ation from the gut. Surgery 1988; 104: 185-190; Kueppers PM, Miller TA,
Chen CYK et al. Effect of total parenteral nutrition plus morphine on ba
cterial translocation in rats. Ann Surg 1993；217：286-292）。

【００２２】前向き無作為臨床試験は、経口的に与えられた患者と比較して、経腸的に与え
られた火傷や外傷の方が、主要な感染性合併症の発生率は低いことを実証してい
る（Alexander JW, MacMillan JC, Stinnet JD. et el. Beneficial effect of
aggressive protein feeding in severely burned children. Ann Surg 1980; 1
92: 505-517; Kudsk KA, Groce MA, Fabian TC et al. Enteral versus parente
ral feeding: Effects on septic morbidity after blunt and penetrating abd
ominal trauma. Ann Surg 1992; 215: 503-513; Moore FA., Moore EE, Jones T
N et al. TEN versus TPN following major torso trauma: reduced septic mor
bidity. J Trauma 1989; 29: 916-923）。

【００２３】 Sedmanらは、手術中にバクテリアトランスロケーションについて２４２名の一
般の外科患者を調査した。患者の１０.３％が腸管の漿膜上あるいは腸間膜リン
パ節中にトランスロケーションが検出された。腸閉塞及び感染性腸疾患は、トラ
ンスロケーションの素因であったが、これらの病気ではない患者の５％がトラン
スロケーションしていた。術後敗血性合併症の発症は、一般にトランスロケーシ
ョンした患者はトランスロケーションしてない患者の２倍であった（Sedman PC,
Macfie J, Sagar P, Mitchell CJ, May J, Mancey-Jones B, Johnstone D. The
prevalence of gut translocation in humans. Gastroenterology 1994; 107:
643-649）。

【００２４】（発明の概要）我々のCaco-２細胞及び回腸ループモデルに基づいて、本発明は、管腔のグル
タミンの非存在の結果、ＮＥＣ及び粘膜損傷がおこることを実証する。

【００２５】本発明の目的は、経腸側から（経口投与で）グルタミンを添加することにより
早産児を処置して、バクテリアロケーション及びその結果おこるＮＥＣの発症を
低減することである。第２の目的は、完全静脈栄養（静脈摂取）のもとで、集中治療室の成人及び小
児患者において同様の処方（高経口グルタミン）を利用して、粘膜の機能障害及
び更なるバクテリアトランスロケーションを回避することである。第３の目的は、化学療法、放射線照射、骨髄移植を受けている患者においてそ
れを利用することである。

【００２６】更に別の目的は、その前処置を利用して、細菌性病因性成分を有し得る消化管
の他の炎症性粘膜病変を予防したり処置したりすることである。別の目的は、食事制限し静脈栄養中の術後患者に利用することである。当該患
者においては、グルタミン療法がないと腸管のバクテリアのトランスロケーショ
ンし、その結果全身性敗血症及び多臓器不全となり得る。

【００２７】更なる目的は、バクテリアトランスロケーションが病変の進行を誘発したり支
援したりし得る感染及び／あるいは炎症源の消化管機能不全において、満期出産
児、子供、及び成人にその前処理を利用することである。

【００２８】消化管における壊死性の組織損傷を予防する好ましい方法は、経口的なグルタ
ミンの投与を包含する。グルタミンでバクテリアトランスロケーションを阻害す
ることにより消化管に沿って組織が保護される。消化管に沿った組織が、バクテ
リア（例えばグラム陰性菌）、他の感染性病原体、毒物、化学薬品、及び有害物
質のトランスロケーションを阻害する投与されたグルタミンで保護されるのが好
ましい。経口のグルタミンはまた、管腔内／アピカル側でのアベイラビリティー
により粘膜保護を最適化し、栄養吸収を増進させる。

【００２９】グルタミンは、消化管の機能不全及び病理状態を予防したり処置したりするた
めに投与される。グルタミンは、早産児、満期出産児、子供、及び成人といった個人に投与して
もよい。グルタミンは、経口で投与可能であればいかなる形態で供給してもよい
。それは、粉末形態や液体で再構成した混合物の形態をも包含する。別の形態と
してはグルタミンをカプセルとして投与してもよい。腸管のような消化管中の必
要とされる領域に到達できるぐらい長く存続する酸耐性型で徐放性のマイクロカ
プセルであるのが好ましい。カプセルは、腸溶性コーティングされた徐放性カプ
セルであってもよい。また、病気の処置のための他の薬をグルタミンと一緒に投
与してもよい。

【００３０】新生児壊死性腸炎を処置する好ましい方法は、バクテリアの粘着、浸潤、及び
損傷により引き起こされる炎症を低減させるために経腸的にグルタミンを供給す
ることを含む。消化管機能不全を処置する好ましい方法は、生理的機能を改善するためにアピ
カルのグルタミンを供給することを含む。

【００３１】経口投与によりグルタミンを消化管粘膜に被覆させ、それにより消化管の感染
及び／あるいは炎症状態を処置するのが好ましい。経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）の低下した病理状態を処置する好ましい方法は、
治療薬として経口でグルタミンを投与することによる。

【００３２】本発明のこれらの、更なる、そして他の目的及び特徴は、本開示において明ら
かであり、請求項及び図面と共に、上述及び以下に記載される明細書を包含する
。

【００３３】（図面の簡単な説明）図１は、アピカル及びバソラテラル側を有するエンテロサイトの概略図である
。図２は、分化したCaco−２細胞と同様のジサッカリダーゼの発現を示している
。図３Ａ〜Ｅは、グルタミンのディプライベーション及びレプレニッシュメント
の期間中におけるジサッカリダーゼ及びグルコアミラーゼ活性を示している。図４は、アピカル（０／０.６）及びバソラテラル（６.０／０）双方のグルタ
ミンディプライベーションの効果を示している。図５は、アピカルとバソラテラルとのグルタミンディプライベーションのバク
テリアトランスサイトーシスに及ぼす効果を示している。図６は、グルタミンレプレニッシュメントの効果を対比して示している。図７Ａ、７Ｂ、及び７Ｃは、離乳児ラビット回腸ループの病理組織を示してい
る。７Ａ：ＰＢＳを播種したコントロールループを示している。７Ｂ：ＮＥＣの患者から単離した１０^９ＣＦＵの大腸菌２１−１系統を播種し
たループを示している。７Ｃは、４ｍＭのグルタミン及び１０^９ＣＦＵの大腸菌を同時に播種したルー
プを示している。

【００３４】（好ましい実施例の詳細な説明）本発明において管腔側（エンテロサイトに対してアピカル側）からのグルタミ
ンの供給は、バクテリアトランスロケーションを低下させ、健全な生理機能を維
持することが示されている。

【００３５】本発明者らは、アピカル（管腔）からエンテロサイトへのグルタミンの供給が
生理機能の維持に非常に重要で不可欠であることを示している。当該アピカルの
グルタミンの欠乏の結果、経上皮抵抗が低下しインシュリン通過が増大し、そし
て腸管細胞の単層を通過するバクテリアトランスロケーションが増大する。本発
明は、有害な効果がグルタミンディプライベーション後２４〜４８時間で最も顕
著であることから、それがエネルギーに関連した現象ではないことも実証してい
る。本発明は、同じ系におけるグルタミンのレプレニッシュメントによりこの効
果が逆転し、再び完全に回復するのに２４時間以上かかる工程であることを示し
ている。これらのデータは、本発明によりエンテロサイトに及ぼすグルタミン作
用の新規な現象を特定していることを強調する。

【００３６】エンテロサイトがなぜバソラテラル側からのグルタミンを利用できないかに関
する根本的なメカニズムは、未解決のままである。しかしながら、これらの組織
培養の結果は、ＮＥＣの離乳児ラビット回腸ループにおいて再現される。

【００３７】一般的にエンテロサイトに対するグルタミンの効果は、本発明には不可欠では
ない。当該アミノ酸がエンテロサイトの主要なエネルギー源であることは周知で
ある。ヒト、及び実験動物モデルにおいて、グルタミンの有益な役割は、免疫機
能の改善を通じて示されてきた。しかしながら本発明において、一部は未知であ
る細胞のメカニズムによってエンテロサイトが、アピカル（管腔）側から供給さ
れた場合、非常に効果的にグルタミンを利用することが初めて実証される。

【００３８】臨床的な見地から、本発明は、アピカル側のグルタミンの欠乏の結果、組織培
養系においてバクテリアトランスロケーションが増大することも実証している。
インビボでの当該効果を説明すると、グルタミンを用いたのラットループの注入
により、グラム陰性菌誘発型壊死性腸炎のようなバクテリアから当該ループが保
護される。

【００３９】添付される図面は以下に示すとおりである：図１：アピカル及びバソラテラル側を有するエンテロサイトの概略図である。図２：分化したCaco−２細胞と同様のジサッカリダーゼの発現を示している。８
日後に酵素発現が上昇し、１２日後までに、ヒト生検試料に対して高い値にする
ことが注目される。図３Ａ〜Ｅ：図３Ｂ〜Ｅ：グルタミンのディプライベーション及びレプレニッシ
ュメントの期間中のジサッカリダーゼ及びグルコアミラーゼ活性を示している。
４時間ディプライベーション後、全ての酵素の活性値は低下した。ラクターゼお
ける低下は、統計上の有意差には達していないが、一方、４〜４８時間ディプラ
イベーションの時点の他の全ての値は、コントロールに対して有意差がある、ｐ
＜０.０５（ｎ＝４）。４〜４８時間レプレニッシュメントにおいて酵素発現は
直線的に上昇し、４８時間後にはベースライン値に達する。４〜４８時間の値は
コントロールとは統計上、有意差はなかったｐ＜０.０５（ｎ＝４）。図３Ａ：Ｎａ^＋／Ｋ^＋−ＡＴＰアーゼ活性の低下はまた、グルタミンディプラ
イベーション４時間ぐらいは顕著であり、４８時間の間有意に低下し続けた、ｐ
＜０.０１（ｎ＝４）。レプレニッシュメントにより引き起こされる上昇は、１
２時間後のみ有意差があり（ｐ、０.０１）、２４時間後にベースラインに達し
た。図４：アピカル（０／０.６）及びバソラテラル（６.０／０）双方のグルタミン
ディプライベーションの結果、コントロールの単層に対してＴＥＥＲは有意に低
下した。^＊＝ｐ＜０.０１、アピカルディプライベーション及びバソラテラルデ
ィプライベーションとコントロールとの対比。アピカルディプライベーションと
バソラテラルディプライベーションとの間には統計上、有意差はなかった（ｎ＝
４〜７）。図５：アピカルとバソラテラルとを対比してグルタミンディプライベーションの
バクテリアトランスサイトーシスに及ぼす効果を示している。アピカルのグルタ
ミンディプライベーションの４８時間後に感染させると、その後１、３、６時間
後のバクテリアトランスロケーションは直線的に上昇した。３、及び６時間後に
おいて、アピカルのディプライベーションに伴なうトランスサイトーシスは、統
計上有意に上昇した；^＃＝ｐ＜０.０５、３時間後のアピカルディプライベーシ
ョン群と３時間後のコントロール群との対比；^＊＝ｐ＜０.０１、６時間アピカ
ルのディプライベーションと６時間コントロールとの対比（ｎ＝４〜７）。図６：グルタミンレプレニッシュメントの効果を示している。ディプライベーシ
ョンの４８時間後、トランスサイトーシスは有意に上昇し、レプレニッシュメン
ト後４時間は上昇し続けた。１８時間のグルタミンレプレニッシュメントすると
バクテリアトランスロケーションは有意に低下し、４８時間後にベースラインに
達した。^＊＝ｐ＜０.０１、４８時間のディプライベーション及び４時間のレプ
レニッシュメントとコントロールとの対比（ｎ＝９〜１８）。図７：離乳児ラビット回腸ループの病理組織である。Ａ：健常な絨毛とより深い層が示されているＰＢＳを播種したコントロールル
ープである（倍率４０Ｘ）。Ｂ：ＮＥＣの患者から単離した１０^９ＣＦＵの大腸
菌２１−１系統を播種したループである。広範な粘膜下の浮腫、及び多核細胞の
固有層中への浸潤を伴なう粘膜に対する重篤な障害が見られる。Ｃ：４ｍＭのグ
ルタミン及び１０^９ＣＦＵの大腸菌を同時に播種したループである。粘膜下の全
般的に軽度の浮腫を除いてはほぼ完全に保護されていることが注目される。

【００４０】実施例１：Ｃａｒｏ−２細胞培養モデルグルタミンディプライベーション(deprivation)の影響を、分化後の成熟小腸
上皮細胞のすべての形態学上および機能的特徴を示すヒト腺癌細胞由来のＣａｒ
ｏ−２細胞で研究した。我々のシステムでは、高い酵素活性をともなう同様の結
果を、１０−１２日間の成長の後に観察した（図２）。十分に分化したＣａｒｏ
−２−細胞をグルタミン・フリー培地で４８時間維持し、刷子縁膜酵素（ジサッ
カリダーゼおよびグルコアミラーゼ）（図３Ｂ−Ｅ）、および（Ｎａ^＋、Ｋ^＋−
ＡＴＰアーゼ）酵素活性（図３Ａ）の有意な減少が発生することを見出した。本
発明者は、細胞から、アピカル（apical）またはバソラテラル(basolateral)側
のいずれかからグルタミンをディプライベーションした（deprived）とき、細胞
モノレイヤーにわたる経上皮電気抵抗の低下を観察した（図４）。（Panigrahi
P, Tall BD, Russell RG, Detolla LJ, Morris Jr JG Development of an in vi
tro model for study of non-01 Vibrio cholerae virulence using Caro-2 cel
ls. Infect Immun 1990; 58:3415-3424; Panigrahi P, Gupta S, Gewolb S, Gew
olb IH, Morris JG。

【００４１】壊死性全腸炎の発生は、細菌の固着および腸管コロナイゼーションのパターン
に依存し得る：studies in Caro-2 tissue culture and weanling rabbit model
. Pediatr Res 1994; 36: 115-121; Panigrahi P,Bamford P, Horvath K, Glenn
Morris J, Gewolb IH. E. coli transcytosis in a Caro-2 cell model: impli
cations in neonatal necrotizing enterocolitis. Ped res 1996; 40: 415-421
; Pinto MS, Robine-Leon MD, Appay M et al. Enterocyte-like differentiati
on and polarization of the human colon carcinoma cell line Caro-2 in cul
ture. Biol Cell 1983; 47: 323-330)。

【００４２】実施例２：Ｃａｒｏ−２トランスウェルシステムにおける細菌の転位細菌の転位（translocation）を、ポリカーボネートフィルター上で成長した
細胞を使用する同じ条件で測定した。細胞から、アピカル側からグルタミンをデ
ィプライベーションしたとき、それぞれ第１および第６時間に細菌のトランスサ
イトーシスの〜１０および５倍の増加があった（図５）。アピカルのレプレニッ
シュメントによって、１８時間後に、細菌転位の通常レベルへの回復を生じる（
図６）。壊死性全腸炎を有する幼児から単離したE. coli株２１−１をこの研究
に使用した。このインビトロシステムは、免疫系の混乱させる影響を排除し、そ
して初めてのこれらの結果は、グルタミンが本質的に腸管上皮細胞（enterocyte
）に影響を及ぼし、こうして細菌の転位の最初のステップに影響することを実証
している。１８時間後にのみレプレニッシュメントの影響が明らかであることに
注目されたい。

【００４３】トランスサイトーシス・レベルは、４８時間後にベースラインとなる。これら
の結果をさらに補充するために、細胞内ＡＴＰ濃度を、商業的なSigma キットを
使用して検定した。グルタミンで処理され、または処理されていないＣａｒｏ−
２細胞のＡＴＰレベルには有意な変化はなかった。ただし、グルタミンディプラ
イベーション性細胞における４時間後の一過性の増加はこの限りではない。これ
らの結果は、グルタミンをアピカル（管腔）側から腸管上皮細胞に供給するとき
、グルタミンの優先的な影響があり、そしてそれは単純なエネルギー関連性現象
よりも、細胞におけるより複雑な作用であることを指摘している。

【００４４】実施例３：インビボの、離乳したてのウサギ回腸ループ研究標準的プロトコルにしたがって、回腸ループ（ileal loop）研究を離乳したて
のウサギにおいて実施した。３５０−４００ｇｍの離乳したてのウサギを使用し
た。我々の以前記載した方法に本質的に同一である外科的および接種手順にした
がった。１および４ｍＭのグルタミンを、E. coli株とともに処置したループに
使用した。ＰＢＳおよびE. coliのみを接種した非感染性ループを、ネガティブ
およびポジティブコントロールとしてそれぞれの動物中で維持した。両方の濃度
のグルタミンを受容しているループにおいてE. coli誘導性損害（induced damag
ed）に対する完全な防御があった。（Panigrahi P, Gupta S, Gewolb IH, Morri
s JG. Occurrence of necrotizing enterocolitis may be depenedent on patte
rns of bacterial adherence and intestinal colonization: studies in Caro-
2 tissue culture and weanling rabbit models Pediatr Res 1994; 36:115-121
）。

【００４５】壊死性全腸炎（ＮＥＣ）を有する幼児から単離したE. coli株（実験室株２１
−１）を、Ｃａｒｏ−２細胞でのインビトロ・転位研究および離乳したてのウサ
ギ回腸ループ実験のために使用した。

【００４６】Ｃａｒｏ−２細胞培養システムＣａｒｏ−２細胞を、１％の非必須アミノ酸、１％のピルビン酸ナトリウム、
１０％のウシ胎児血清（ＦＣＳ）、１００Ｕのペニシリンおよび１００μｇのス
トレプトマイシン／ｍＬで補足した、Dulbecco's修飾Eagle's培地（ＤＭＥＭ）
中で、３７℃で５％ＣＯ_２環境下で成長させた。グルタミン補足を、定義された
実験条件にしたがって実施した。酵素分析のために、３×１０１の細胞を、６０
ｍｍの組織培養皿上に播き、そして１２日間成長させた。トランスサイトーシス
研究のために、０．３ｍＬの培地中の０．２×１０^６の細胞を、０．６ｃｍ^２ポ
リカーボネートトランスウェルフィルター／クラスター（Costar, Cambridge, M
A）のアピカル側に播いた。それぞれのバソラテラルチャンバーは１ｍＬの培地
を受容した。培地は３日ごとに交換した。

【００４７】Ｃａｒｏ−２細胞成長および複製ポストコンフルエンスの種々の日に、モノレイヤーのトリプシン処理後、細胞
をヘモサイトメーターでカウントした。総ＤＮＡ含量を、過塩素酸法によって測
定した。

【００４８】モノレイヤー浸透性およびインテグリティー経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）およびインスリン輸送を試験し、播種後２ないし
１４日の間、Ｃａｒｏ−２細胞モノレイヤーの構造的インテグリティーを評価し
た。Milli Cell ERS（Millipore）装置を、製造者の指示にしたがって使用し、
細胞モノレイヤーにわたる電気的抵抗を記録した。アピカルおよびバソラテラル
側の両方の培地とともにあるポリカーボネート膜をコントロールとして使用し、
そして抵抗性をオーム／平方センチメートルで算出した。

【００４９】Ｃａｒｏ−２細胞の酵素評価刷子縁マーカー酵素の発現が、我々のものを含む種々の実験室から報告されて
いる。この研究のために、分化したＣａｒｏ−２細胞を、冷リン酸バッファー生
食水（ＰＢＳ）中で洗浄し、ゴム冠ポリスマンを使用して収集し、３０００×ｇ
で５分間遠心分離し、細胞ペレットを凍結保存した。ジサッカリダーゼ（スクラ
ーゼ、マルターゼ、ラクターゼ、およびパラチナーゼ）活性を、Dahlquistの方
法によって決定した。グルコアミラーゼを、マルトオリゴ糖類混合物（３ないし
１０グルコース単位）を基質として使用する（ICN, Irvine, CA）Azad et alの
方法によって検定した。細胞ペレットのタンパク質含量を、Bradford Coomassie
検定(Pierce Co,Rocldord,IL)によって測定し、そして内部コントロールとして
使用した。時間経過によるグルタミンディプライベーション(deprivation)／レ
プレニッシュメント(replenishment)実験を実施した。

【００５０】グルタミンの「アピカル対バソラテラル」影響の実験３つの定義された実験条件を創出し、そしてトランスサイトーシス研究のため
のトランスウェルシステムにおいて使用した。（１）コントロール（６．０：０
．６）：上方チャンバーに６ｍｍｏｌ／Ｌのグルタミン、下方チャンバーに０．
６ｍｍｏｌ／Ｌ（バソラテラル側は０．６ｍｍｏｌ／Ｌの生理学的濃度でグルタ
ミンを受容し、上方チャンバーは管腔に見出される高濃度のグルタミンを受容す
ると考える）；（２）アピカルディプライベーション（０：０．６）：上方チャ
ンバーに０ｍｍｏｌ／Ｌのグルタミン、下方チャンバーに０．６ｍｍｏｌ／Ｌ；
および（３）バソラテラルディプライベーション（６．０：０）：上方チャンバ
ーに６ｍｍｏｌ／Ｌのグルタミン、下方チャンバーに０ｍｍｏｌ／ｍＬ。種々の
時点にわたるグルタミンディプライベーションおよびレプレニッシュメント後、
１ないし６時間の期間にわたり転位研究を実施した。それぞれのインキュベーシ
ョン期間の終わりに、クラスターをＤＭＥＭを含む新鮮ウェルに移した。

【００５１】細菌のトランスサイトーシスの研究トランスウェルクラスターを、滅菌ＰＢＳで洗浄し、そして抗体またはＦＣＳ
のない新鮮ＤＭＥＭを再補給した。ＴＥＥＲを測定し、そして３×１０１ＣＦＵ
の細菌株を、０．３ｍＬのＤＭＥＭ中のアピカル側に適用した。１０分間のおだ
やかなアジテーションの後、クラスターを６時間インキュベーションした。それ
ぞれの時間の終わりに、クラスターを新鮮ＤＭＥＭを含む新しいウェルに移した
。サンプルをバソラテラル側から種々のインキュベーション期間の終わりに取得
し、そしてＬアガープレート上に希釈物を置くことによって定量した。コロニー
を、３７℃のプレートの終夜のインキュベーション後にカウントした。S. typhi
murium株ＳＯ１３４４およびE. coli株ＤＨ５−αをコントロールとして使用し
た。４８時間のグルタミンディプライベーションの後、グルタミンレプレニッシュ
メントの影響を試験するために、モノレイヤーに、６ｍｍｏｌ／Ｌのグルタミン
を含む新鮮ＤＭＥＭを再補給した。転位実験を、４、１８、２４、および４８時
間のレプレニッシュメントの後に実施した。

【００５２】離乳したてのウサギにおける回腸ループモデル回腸ループを、我々の以前記載した方法にしたがって、＜５００ｇの離乳した
てのウサギ（New Zealand White）に調製した。種々の濃度のグルタミン（１お
よび４ｍｍｏｌ／Ｌ）とともに、またはそれなしで、E. coli株２１−１（１０
^９ＣＦＵ）を２反復の動物で、２反復のループに接種した。コントロールループ
をＰＢＳのみを受容したそれぞれの動物中で維持した。ウサギを１６ないし１８
時間後にと殺し、ループにおける大まかな変化を記録し、流体蓄積を測定し、そ
して組織サンプルを組織病理学研究のためにホルマリンで固定した。結紮部位か
ら十分に離れたループのセンター部分のみを収集し、身体外傷によって生じた局
所炎症性変化を回避した。すべての研究はInstitutional Animal CareおよびUse
Committee of the University of Maryland at Baltimoreによって承認された
ものである。

【００５３】統計的分析統計的分析を、SigmaStat（Jandel Scientific, San Rafael, CA）を使用する
、Student'sテストおよびStudent-Newman-KeulsまたはDnnett's（コントロール
に対する多重比較のため）post hocテストによる分散分析（ＡＮＯＶＡ）を使用
して実施した。＜．０５のｐ値は統計的に有意であると考えられた。

【００５４】グルタミンのＣａｒｏ−２細胞成長および複製に及ぼす影響グルタミンは、細胞成長または増殖に影響がなかった。１２日間の期間の間の
グルタミンとともに、またはそれなしで成長させたモノレイヤーの細胞カウント
およびＤＮＡ含量の間には有意な相違はなかった（データー示さず）。しかし、
グルタミンディプライベーション性細胞の総タンパク質含量の有意な低下はなか
った。

【００５５】グルタミンの腸管上皮細胞（enterocyte）酵素活性に及ぼす影響４時間のグルタミンディプライベーションの後にテストしたすべての酵素の発
現の低下はなかった。これは、２４ないし４８時間に最下点に達した（図３、ト
ップパネル）。ジサッカリダーゼの発現における線形的な増加が、レプレニッシ
ュメントの間の４ないし４８時間にわたり記録された（図３、トップパネル）。
しかし、１２時間後にのみ、ＡＴＰアーゼの回復が存在し、２４ないし４８時間
後にベースラインに達した（図３、下のパネル）。

【００５６】モノレイヤー浸透性およびインテグリティー２日齢のポストコンフルエンスのモノレイヤーは、インタクトのヒト胃腸粘膜
のＴＥＥＲと比較して、高いＴＥＥＲの発生を示した（１７２±２０．２Ω／ｃ
ｍ^２）。これは、１２日間の期間にわたり持続した。グルタミンディプライベー
ションは、モノレイヤーのＴＥＥＲの減少を引き起こした。アピカルおよびバソ
ラテラルディプライベーションの両方は、コントロールと比較してＴＥＥＲにお
ける有意な減少を生じた。アピカルおよびバソラテラルディプライベーションの
間のＴＥＥＲにおける統計的な相違はなかった（図４）。

【００５７】バソラテラル転位グルタミンディプライベーションは、E. coli転位の増加を生じ、そしてその
増加は、４８時間のディプライベーションの後、統計的に有意となった。さらな
る実験を、４８時間のディプライベーションのみの後に実行し、そしてE. coli
転位が１−６時間の期間にわたり記録された。１時間後、コントロールおよびグ
ルタミンディプライベーション性細胞の間に相違は記録されなかったようである
。３および６時間後、アピカルディプライベーションによって、細菌のトランス
サイトーシスにおける統計的に有意な増加があった。トランスサイトーシスの上
昇があったが、統計的な有意差は、時間３および６のバソラテラルディプライベ
ーションの後に観察されなかった（図５）。グルタミンをレプレニッシュメント
すると、最初の１２時間の期間の間に調整的な（corrective）影響はなかった（
６おおよび１２時間のデータは示さず）。しかし、トランスサイトーシスのレベ
ルは、１８時間後に通常レベルまで減少した。４８時間後にベースラインに到達
したが、コントロールおよび１８、２４、および４８時間のレプレニッシュメン
トの間に統計的に有意な相違はなかった（図６）。

【００５８】離乳したばかりのウサギにおけるグルタミンの粘膜損傷（injury）モデルにおけ
る影響 E. coli感染は、回腸ループに典型的な壊死性損傷を生じる（図７）。全虚脱
を生じる場合に、重度な損害（damage）、壊死、および粘膜の出血があった。ま
た、多形核細胞の粘膜下および固有層への浸透をともなう、大規模な粘膜下浮腫
があった。１および４ｍｍｏｌ／Ｌのグルタミンを受容しているループは、E. c
oli誘導性損傷に対するほとんど完全な防御を示した。さらなるより高い濃度の
グルタミンは使用しなかった。インタクトな粘膜およびより深い層に、ある種の
急性の炎症性の変化および軽い粘膜下出血があった。流体蓄積は最小であり（２
ないし３ｍＬ）、そしてＰＢＳのみを受容しているコントロールのループを含む
すべてのループで記録された。

【００５９】グルタミンの経口投与の好ましい範囲は、少なくとも３回に分割した投与６．
で、近似的に０．２−０．９ｇｍ／ｋｇ／日の間である。好ましくは、約０．３
ｇｍ／ｍｇ／日を投与する。それは、任意の媒体中で、混合物として、戻した液
体で、またはその他により投与され得る。投与は、経口的に、または経鼻胃管を
経由してなされ得る。グルタミンは、また、カプセル形態において与えられ得る
。カプセルは、酸抵抗性緩放出性マイクロカプセルであってよい。

【００６０】本発明は、特定の実施態様を引用して記載したが、本発明の修飾および変形が
本発明の範囲から離れることなく構成され得、それは以下のクレームに定義され
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】アピカル及びバソラテラル側を有するエンテロサイトの概略図である。

【図２】分化したCaco−２細胞と同様のジサッカリダーゼの発現を示す。

【図３Ａ】グルタミンのディプライベーション及びレプレニッシュメント期間に
おけるＮａ^＋／Ｋ^＋−ＡＴＰアーゼ活性を示す。

【図３Ｂ】グルタミンのディプライベーション及びレプレニッシュメント期間に
おけるラクターゼ活性を示す。

【図３Ｃ】グルタミンのディプライベーション及びレプレニッシュメント期間に
おけるスクラーゼ活性を示す。

【図３Ｄ】グルタミンのディプライベーション及びレプレニッシュメント期間に
おけるグルコアミラーゼ活性を示す。

【図３Ｅ】グルタミンのディプライベーション及びレプレニッシュメント期間に
おけるマルターゼ活性を示す。

【図４】アピカル及びバソラテラルの双方におけるグルタミンディプライベーシ
ョンの効果を示す。

【図５】アピカルとバソラテラルを対比したグルタミンディプライベーションの
バクテリアトランスサイトーシスに及ぼす効果を示す。

【図６】グルタミンレプレニッシュメントの効果を示す。

【図７Ａ】コントロールの離乳児ラビット回腸ループの病理組織である。

【図７Ｂ】ＮＥＣの患者から単離した１０^９ＣＦＵの大腸菌２１−１系統を播種
したを播種した離乳児ラビット回腸ループの病理組織である。

【図７Ｃ】４ｍＭのグルタミン及び１０^９ＣＦＵの大腸菌を同時に播種した離乳
児ラビット回腸ループの病理組織である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 9/52 Ａ６１Ｋ 9/52 Ａ６１Ｐ 1/00 Ａ６１Ｐ 1/00 31/04 31/04 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者カロリー・ホルバトアメリカ合衆国21209メリーランド州ボルティモア、サンゾ・ロード・ナンバー・シー6652番 (72)発明者アイラ・エイチ・ジェウォルブアメリカ合衆国21208メリーランド州パイクスビル、オールド・クロッシング・ドライブ503番Ｆターム(参考） 4C076 AA11 AA29 AA53 AA60 AA67 BB01 BB05 CC16 FF68 4C206 AA01 AA02 GA20 MA01 MA04 MA36 MA57 MA58 MA63 MA72 NA10 ZA66 ZC51

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】経口でグルタミンを投与することを含む、消化管における壊
死性の組織損傷を予防する方法。
【請求項２】グルタミンでバクテリアトランスロケーションを阻害するこ
とにより、消化管に沿った組織を保護することを更に含む、請求項１に記載の方
法。
【請求項３】投与されたグルタミンで消化管に沿った組織を保護し、それ
によりバクテリア、他の感染性病原体、毒物、化学薬品、及び有害物質のトラン
スロケーションを阻害することを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】グルタミンの管腔内／アピカル側の存在により、粘膜保護を
最適化することを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】該投与が、早産児、満期出産児、子供、及び成人からなる集
団から抽出した個人に投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】該投与が、粉末でグルタミンを投与することを含む、請求項
１に記載の方法。
【請求項７】該投与が、液体中で混合したグルタミンを投与することを含
む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】該投与が、カプセルとしてグルタミンを投与することを含む
、請求項１に記載の方法。
【請求項９】該カプセルが、酸耐性型で徐放性のマイクロカプセルである
、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】該カプセルが、コーティングされた酸耐性型で徐放性のカ
プセルである、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】消化管の病気の処置のために、グルタミンと一緒に他の薬
を投与することを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】該バクテリアトランスロケーションの阻害が、グラム陰性
菌を阻害することを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１３】経腸的にグルタミンを供給することを含む新生児壊死性腸
炎を処置する方法。
【請求項１４】グルタミンを経口で投与することを含み、グルタミンに消
化管を被覆させることにより、消化管の機能不全を予防する方法。