JP2003319782A - イネの品種の識別方法 - Google Patents
イネの品種の識別方法Info
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Abstract
供して、さらに、これを用いたイネの品種識別手段を見
出すこと。 【解決手段】イネの遺伝子の特定のSSR配列を指標と
して、イネの品種を識別する、イネの品種の識別方法を
提供し、さらに、この識別方法に好適に用いることがで
きる、遺伝子増幅用プライマーを提供することにより、
数多くのイネの品種を識別することが可能であり、上記
の課題を解決し得ることを見出した。
Description
方法に関する発明である。
品種、産地、生産者によって規定され得るものであり、
これらを消費者に向けて明らかにするために、いわゆる
原産地表示がなされている。
は、販売者と消費者の間の信頼関係に頼らざるを得ず、
近年、この原産地表示の信憑性が揺らぎ始めており、原
産地表示の内容の確認手段の確立が急がれている。
イネが挙げられる。イネの種子(コメ)は、販売に際し
ては、品種名(ブランド)が優先され、食味品質も大き
く品種に依存する。それにもかかわらず、イネの種子
は、外観のみでは品種の識別が困難であり、客観的な手
段により、品種識別表示の確認を行うことが、特に、望
まれている。
種の識別手段の一つとして、DNA鑑定が挙げられる。
イネの品種を、DNA鑑定により識別することができれ
ば、上述したような品種識別表示の確認を行うことが可
能になり、さらに、流通過程におけるイネの品種の管理
を、客観的に行うことが可能になる。また、栽培用のイ
ネ種子の販売においても、客観的な品種管理を行うこと
が可能になる。
が開発されている。この多型の検出方法としては、例え
ば、RFLP法[Botstein,D,et al.,(1980)AM.J.Hum.Ge
net.32:314-331] 、AFLP法[Zabeau,M.and P.Vos(19
93)European Patent Apprication,EP0534858) 、RLG
S法[Hatada,I. et al.,(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA
88:9523-9527]等が提供されている。しかしながら、こ
れらの手段においては、イネの栽培品種間のような、極
近縁な品種間で品種識別を行うほどの多型の検出効率が
認められがたい面がある。
基の繰り返しのパターンにより構成されるSSR(Simpl
e sequence repeats) 配列領域は、近縁品種間において
も多型頻度が高く、極近縁間における品種識別を行うの
に適していると考えられる[Powell,W.et al.,(1996) Tr
ends Plant Sci 1:215-222、McCouch,SR.et al.,(1997)
Plant Mol Biol 35:89-99]。イネに対しては、SSR配
列を利用したDNAマーカーが特許出願されている(特
開平10−57073号公報)が、近縁間イネ品種の品
種識別を行うには、一層、多様なマーカーが提供される
ことが望ましい。
の品種識別能に優れるDNAマーカーを提供して、さら
に、これを用いたイネの品種識別手段を見出すことにあ
る。
解決に向けて、近縁の品種間においても多型が認められ
るイネの遺伝子のSSR(Simple sequence repeats) 配
列領域の存在に関して検討を重ね、相当種類の品種判別
マーカーとなり得るSSRマーカーを見出し、さらに、
これらのSSRマーカーを組み合わせて用いることによ
り、イネの近縁の品種間の識別を高い精度で行うことが
可能であることを見出し、本発明を完成した。
のSSR配列を指標として、イネの品種を識別する、イ
ネの品種の識別方法(以下、本品種識別方法ともいう)
を提供する発明である。また、本発明は、この識別方法
に好適に用いることができる、遺伝子増幅用プライマー
(以下、本増幅用プライマーともいう)を提供する発明
である。
ネの植物体全体(茎、葉、根部、イネ種子等)を意味す
るものとする。ここで、「イネ種子」とは、文字通り、
植物体として成立しているイネの種子という意味から、
精米処理を施した「コメ粒」(通常は加熱調理前)まで
を意味するものとする。
する。本品種識別方法は、多型の存在する遺伝子領域
(SSR領域)を、PCR法等の遺伝子増幅手段によ
り、その遺伝子領域を増幅させて、得られた遺伝子増幅
産物の塩基長の差異で、多型による遺伝子型の異同を検
出することにより、イネの品種を識別する方法である。
て用いるSSR領域は、配列番号1〜17で表される、
17種のイネの遺伝子の領域である。イネのSSR領域
については、既存のソフトウエアで検索を行うことがで
きる〔例えば、「SSRIT」(http://ars-genome.cor
nell.edu/cgi-bin/rice/ssrtool.pl) 等〕が、これらの
17種類のSSR領域を、イネの品種識別マーカーとし
て用い得ることは知られていない。
イネの品種は、少なくとも下記の品種である。なお、こ
れらの品種の他にも、配列番号1〜17で表される塩基
配列を含むSSRマーカーを用いることにより、識別可
能なイネの品種が数多く存在ことが予想される。
下、ILともいう)、「Dunghan Shali 」(以下、DS
ともいう)、「Arroz Da Terra」(以下、ADTともい
う)、「Fany」(以下、FANYともいう)または
「USSR22」(以下、U22ともいう) インド品種「Kasalath」(以下、カサラスともいう) 日本品種「きたいぶき」、「はやまさり」、「日本
晴」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「ほのか224 」、
「彩」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「ゆきま
る」、「キタヒカリ」、「キタアケ」、「巴まさり」、
「栄光」、「マツマエ」、「キヨカゼ」、「農林33
号」、「農林20号」、「農林11号」、「北海早
生」、「胆振早生」、「赤毛」、「はくちょうもち」ま
たは「たんねもち」
別を行うための要素となるSSR配列は、配列番号1〜
17で表される塩基配列を含む塩基配列であり、本品種
識別方法は、イネの遺伝子において、配列番号1〜17
で表されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マー
カーとして、被験イネの品種を識別する、イネの品種の
識別方法として提供される。なお、増幅遺伝子マーカー
となり得るSSR配列を増幅するための鋳型遺伝子は、
イネであれば、あらゆる部分から採取可能である。すな
わち、葉、茎、根の他、イネ種子等から採取可能であ
る。特に、イネ種子は、品種表示の内容の確認を、現品
から行うためには、不可欠の遺伝子原料である。
列を増幅遺伝子マーカーとして用いることにより、被験
イネが、下記i)〜iii)から選ばれるいずれの群の品種
であるかを識別することができる。
roz Da Terra」、「Fany」、「USSR22」、「日本
晴」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「ほのか224 」、
「彩」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「ゆきま
る」、「キタヒカリ」、「キタアケ」、「巴まさり」、
「栄光」、「マツマエ」、「キヨカゼ」、「農林33
号」、「農林20号」、「農林11号」、「北海早
生」、「胆振早生」、「赤毛」、「はくちょうもち」ま
たは「たんねもち」
列を含む遺伝子領域を、PCR法等の遺伝子増幅法で増
幅させて、増幅遺伝子マーカーとするため、増幅を行う
鋳型遺伝子の5’末端と3’末端に対して、実質的に相
補的な、遺伝子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プラ
イマーが必要である。かかる遺伝子増幅用プライマーの
選択は、目的とする遺伝子領域を、遺伝子増幅反応で増
幅可能なものである限り、特に限定されず、PCR法等
の遺伝子増幅反応を、一般的に行う際における、プライ
マー選択基準に基づき選択することができる。
のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカーと
する場合には、センスプライマーとして、1種または2
種以上の配列番号18で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態様
として挙げることができる。
1種または2種以上の配列番号19で表されるヌクレオ
チド鎖の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩
基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の
塩基長が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖、からなる
群から選ばれる、1種または2種以上のヌクレオチド鎖
とすることを好適な態様として挙げることができる。
クレオチド鎖は、共に、公開されているイネの遺伝子の
塩基配列に対して相補的な配列のヌクレオチド鎖であ
り、後述する実施例に示すように、これらのヌクレオチ
ド鎖を、遺伝子増幅反応のセンスプライマーとアンチセ
ンスプライマーとして用いることが好適である。しかし
ながら、例えば、これら連続する20塩基全体を用いな
くても、これらの配列のうち、少なくとも、連続する1
5塩基が、鋳型遺伝子における遺伝子増幅反応の開始点
において相補的であれば、プライマーの全ての部分が鋳
型遺伝子と、完全に相補的である必要はない(センスプ
ライマーであれば、5’末端側15塩基以上が配列番号
18の配列と一致し、アンチセンスプライマーであれば
3’末端側15塩基以上が配列番号19の配列と一致す
ることが好適である)。また、このような条件を満た
す、遺伝子増幅用プライマーの全塩基長は、50塩基以
下程度であることが、一般的である。
スプライマーが、配列番号18または19で表されるヌ
クレオチド鎖の塩基配列以外の塩基配列を有している場
合も、センスプライマーまたはアンチセンスプライマー
全体として、遺伝子増幅反応時に結合するイネ遺伝子に
対して相補的な配列であることが好適であることは、明
らかである(後述する、配列番号2〜17で表されるS
SR配列を増幅するために用いられる、他のセンスプラ
イマーまたはアンチセンスプライマーにおいても同様で
ある)。
スプライマーと、配列番号19にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の遺伝子増幅を行う
ことにより、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる
塩基長を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
伝子マーカーとして用いることにより、被験イネが、下
記i)〜iii)から選ばれるいずれの群の品種であるかを
識別することができる。
roz Da Terra」、「Fany」、「USSR22」、「日本
晴」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「ほのか224 」、
「彩」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「きたいぶ
き」、「はやまさり」、「ゆきまる」、「キタヒカ
リ」、「キタアケ」、「巴まさり」、「栄光」、「マツ
マエ」、「キヨカゼ」、「農林33号」、「農林20
号」、「農林11号」、「北海早生」、「胆振早生」ま
たは「赤毛」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号2で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカーと
する場合には、センスプライマーとして、1種または2
種以上の配列番号20で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態様
として挙げることができる。また、アンチセンスプライ
マーとしては、1種または2種以上の配列番号21で表
されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続し
た15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号21にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
幅遺伝子マーカーとして用いることにより、被験イネ
が、下記i)〜v)から選ばれるいずれの群の品種であ
るかを識別することができる。
尾」、「ほのか224 」、「きらら397 」、「ほしのゆ
め」、「きたいぶき」、「はやまさり」、「キタヒカ
リ」、「キタアケ」、「巴まさり」、「栄光」、「マツ
マエ」、「農林11号」、「北海早生」、「はくちょう
もち」または「たんねもち」 ii)「Kasalath」 iii)「Italica Livorno 」または「Arroz Da Terra」 iv)「Dunghan Shali 」 v)「Fany」、「日本晴」、「彩」、「ゆきま
る」、「キヨカゼ」、「農林33号」、「農林20
号」、「胆振早生」または「赤毛」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号3で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカーと
する場合には、センスプライマーとして、1種または2
種以上の配列番号22で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態様
として挙げることができる。また、アンチセンスプライ
マーとしては、1種または2種以上の配列番号23で表
されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続し
た15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号23にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
伝子マーカーとして用いることにより、被験イネが、下
記i)〜iv) から選ばれるいずれの群の品種であるかを
識別することができる。
「USSR22」または「日本晴」、「コシヒカリ」、「亀の
尾」、「彩」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「き
たいぶき」、「ゆきまる」、「キタヒカリ」、「キタア
ケ」、「巴まさり」、「栄光」、「キヨカゼ」、「農林
33号」、「農林20号」、「農林11号」、「北海早
生」、「赤毛」、「はくちょうもち」または「たんねも
ち」 iv) 「Dunghan Shali 」または「Arroz Da Terra」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号4で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカーと
する場合には、センスプライマーとして、1種または2
種以上の配列番号24で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態様
として挙げることができる。また、アンチセンスプライ
マーとしては、1種または2種以上の配列番号25で表
されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続し
た15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号25にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
伝子マーカーとして用いることにより、被験イネが、下
記i)〜iv) から選ばれるいずれの群の品種であるかを
識別することができる。
ノ尾」、「ほのか224 」、「きらら397 」、「ほしのゆ
め」、「きたいぶき」、「はやまさり」、「マツマ
エ」、「農林11号」、「北海早生」、「はくちょうも
ち」または「たんねもち」 ii) 「Italica Livorno 」、「Dunghan Shali 」、「F
any」、「日本晴」、「彩」、「ゆきまる」、「キタ
ヒカリ」、「キタアケ」、「巴まさり」、「栄光」、
「キヨカゼ」、「農林33号」、「農林20号」、「胆
振早生」または「赤毛」 iii)「Arroz Da Terra」 iv) 「USSR22」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号5で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカーと
する場合には、センスプライマーとして、1種または2
種以上の配列番号26で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態様
として挙げることができる。また、アンチセンスプライ
マーとしては、1種または2種以上の配列番号27で表
されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続し
た15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号27にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
伝子マーカーとして用いることにより、被験イネが、下
記i)〜iv) から選ばれるいずれの群の品種であるかを
識別することができる。
尾」、「ほのか224 」、「きらら397 」、「ほしのゆ
め」、「きたいぶき」、「はやまさり」、「マツマ
エ」、「農林11号」、「北海早生」、「はくちょうも
ち」または「たんねもち」 ii) 「Italica Livorno 」、「Dunghan Shali 」、「Ka
salath」、「ゆきまる」、「キタヒカリ」、「キタア
ケ」、「巴まさり」、「栄光」または「キヨカゼ」 iii)「Fany」、「日本晴」または「彩」 iv)「Arroz Da Terra」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号6で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカーと
する場合には、センスプライマーとして、1種または2
種以上の配列番号28で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態様
として挙げることができる。また、アンチセンスプライ
マーとしては、1種または2種以上の配列番号29で表
されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続し
た15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号29にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
遺伝子マーカーとして用いることにより、被験イネが、
下記i)〜iv) から選ばれるいずれの群の品種であるか
を識別することができる。
「キタヒカリ」、「キタアケ」、「栄光」、「農林11
号」または「北海早生」 iv) 「Italica Livorno 」、「Dunghan Shali 」、「Ar
roz Da Terra」、「Fany」、「USSR22」、「日本
晴」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「彩」、「ほしの
ゆめ」、「きたいぶき」、「はやまさり」、「巴まさ
り」、「マツマエ」、「キヨカゼ」、「農林33号」、
「農林20号」、「胆振早生」または「赤毛」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号7で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカーと
する場合には、センスプライマーとして、1種または2
種以上の配列番号30で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態様
として挙げることができる。また、アンチセンスプライ
マーとしては、1種または2種以上の配列番号31で表
されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続し
た15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号31にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
幅遺伝子マーカーとして用いることにより、被験イネ
が、下記i)〜iv) から選ばれるいずれの群の品種であ
るかを識別することができる。
22」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「ほのか224 」、
「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「きたいぶき」、
「はやまさり」、「ゆきまる」、「キタヒカリ」、「キ
タアケ」、「巴まさり」、「マツマエ」、「キヨカ
ゼ」、「農林33号」、「農林20号」、「農林11
号」、「北海早生」、「胆振早生」、「赤毛」、「はく
ちょうもち」または「たんねもち」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号8で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカーと
する場合には、センスプライマーとして、1種または2
種以上の配列番号32で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態様
として挙げることができる。また、アンチセンスプライ
マーとしては、1種または2種以上の配列番号33で表
されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続し
た15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号33にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
伝子マーカーとして用いることにより、被験イネが、下
記i)〜vi) から選ばれるいずれの群の品種であるかを
識別することができる。
ra」、「USSR22」、「日本晴」、「亀ノ尾」、「ほのか
224 」、「彩」、「はやまさり」、「キタヒカリ」、
「キタアケ」、「はくちょうもち」または「たんねも
ち」 ii)「Kasalath」 iii) 「コシヒカリ」、「きらら397 」、「ほしのゆ
め」、「きたいぶき」、「ゆきまる」、「巴まさり」、
「栄光」、「マツマエ」または「キヨカゼ」 iv)「USSR22」または「農林33号」、「農林20
号」、「農林11号」、「胆振早生」または「赤毛」 v)「北海早生」 vi)「Fany」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号9で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカーと
する場合には、センスプライマーとして、1種または2
種以上の配列番号34で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態様
として挙げることができる。また、アンチセンスプライ
マーとしては、1種または2種以上の配列番号35で表
されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続し
た15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号35にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
幅遺伝子マーカーとして用いることにより、被験イネ
が、下記i)〜vii)から選ばれるいずれの群の品種であ
るかを識別することができる。
「彩」、「キヨカゼ」または「北海早生」 v)「コシヒカリ」、「亀の尾」、「巴まさり」、「マツ
マエ」 vi) 「ほのか224 」または「キタヒカリ」 vii)「USSR22」または「きらら397 」、「ほしのゆ
め」、「きたいぶき」、「はやまさり」、「ゆきま
る」、「キタアケ」、「栄光」、「農林33号」、「農
林20号」、「農林11号」、「胆振早生」、「はくち
ょうもち」または「たんねもち」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号10で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
列のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカー
とする場合には、センスプライマーとして、1種または
2種以上の配列番号36で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態
様として挙げることができる。また、アンチセンスプラ
イマーとしては、1種または2種以上の配列番号37で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号37にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
遺伝子マーカーとして用いることにより、被験イネが、
下記i)〜vii)から選ばれるいずれの群の品種であるか
を識別することができる。
erra」または「Kasalath」 ii) 「Dunghan Shali 」 iii)「Fany」、「日本晴」、「彩」、「きらら397
」、「きたいぶき」、「はやまさり」、「ゆきま
る」、「キタヒカリ」、「栄光」または「キヨカゼ」 iv) 「USSR22」、「亀の尾」、「ほのか224 」、「マツ
マエ」、「農林33号」、「農林11号」、「胆振早
生」、「はくちょうもち」または「たんねもち」 v)「コシヒカリ」、「ほしのゆめ」または「農林20
号」 vi) 「北海早生」または「赤毛」 vii)「キタアケ」または「巴まさり」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号11で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
列のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカー
とする場合には、センスプライマーとして、1種または
2種以上の配列番号38で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態
様として挙げることができる。また、アンチセンスプラ
イマーとしては、1種または2種以上の配列番号39で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号39にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
SR配列を増幅遺伝子マーカーとして用いることによ
り、被験イネが、下記i)〜viii) から選ばれるいずれ
の群の品種であるかを識別することができる。
り」または「キヨカゼ」 iii)「Arroz Da Terra」 iv) 「Fany」、「日本晴」、「ほのか224 」、
「彩」または「はやまさり」 v)「USSR22」、「コシヒカリ」、「亀の尾」、「きら
ら397 」、「きたいぶき」、「キタヒカリ」、「キタア
ケ」、「栄光」、「マツマエ」、「農林11号」、「赤
毛」、「はくちょうもち」または「たんねもち」 vi)「Kasalath」 vii) 「ゆきまる」、「農林33号」、「農林20号」
または「胆振早生」 viii)「北海早生」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号12で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
列のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカー
とする場合には、センスプライマーとして、1種または
2種以上の配列番号40で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態
様として挙げることができる。また、アンチセンスプラ
イマーとしては、1種または2種以上の配列番号41で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号41にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
遺伝子マーカーとして用いることにより、被験イネが、
下記i)〜xi) から選ばれるいずれの群の品種であるか
を識別することができる。
「きらら397 」、「きたいぶき」または「はやまさり」 ii) 「Kasalath」 iii) 「Italica Livorno 」 iv) 「ゆきまる」、「キタヒカリ」、「キタアケ」、
「巴まさり」、「栄光」、「マツマエ」、「キヨカ
ゼ」、「農林33号」、「農林20号」、「胆振早
生」、「赤毛」、「はくちょうもち」または「たんねも
ち」 v)「ほしのゆめ」 vi) 「日本晴」または「彩」 vii)「亀の尾」 viii) 「USSR22」 ix) 「Arroz Da Terra」または「農林11号」 x)「Dunghan Shali 」または「北海早生」 xi) 「Fany」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号13で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
列のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカー
とする場合には、センスプライマーとして、1種または
2種以上の配列番号42で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態
様として挙げることができる。また、アンチセンスプラ
イマーとしては、1種または2種以上の配列番号43で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号43にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
遺伝子マーカーとして用いることにより、被験イネが、
下記i)〜xi) から選ばれるいずれの群の品種であるか
を識別することができる。
「きらら397 」、「きたいぶき」または「はやまさり」 ii) 「Kasalath」 iii) 「Italica Livorno 」 iv) 「ゆきまる」、「キタヒカリ」、「キタアケ」、
「巴まさり」、「栄光」、「マツマエ」、「キヨカ
ゼ」、「農林33号」、「農林20号」、「胆振早
生」、「赤毛」、「はくちょうもち」または「たんねも
ち」 v)「ほしのゆめ」 vi) 「日本晴」または「彩」 vii)「亀の尾」 viii) 「USSR22」 ix) 「Arroz Da Terra」または「農林11号」 x)「Dunghan Shali 」または「北海早生」 xi) 「Fany」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号14で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
列のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカー
とする場合には、センスプライマーとして、1種または
2種以上の配列番号44で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態
様として挙げることができる。また、アンチセンスプラ
イマーとしては、1種または2種以上の配列番号45で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号45にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
配列を増幅遺伝子マーカーとして用いることにより、被
験イネが、下記i)〜v) から選ばれるいずれの群の品
種であるかを識別することができる。
は「農林20号」 ii)「Kasalath」 iii)「Arroz Da Terra」、「Italica Livorno 」または
「日本晴」 iv)「きらら397 」、「ほしのゆめ」または「キタア
ケ」 v)「コシヒカリ」または「彩」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号15で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
列のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカー
とする場合には、センスプライマーとして、1種または
2種以上の配列番号46で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態
様として挙げることができる。また、アンチセンスプラ
イマーとしては、1種または2種以上の配列番号47で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号47にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
遺伝子マーカーとして用いることにより、被験イネが、
下記i)〜v) から選ばれるいずれの群の品種であるか
を識別することができる。
「農林20号」または「日本晴」 ii)「Kasalath」 iii)「Arroz Da Terra」または「Italica Livorno 」 iv)「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「キタアケ」ま
たは「コシヒカリ」 v)「彩」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号16で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
列のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカー
とする場合には、センスプライマーとして、1種または
2種以上の配列番号48で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態
様として挙げることができる。また、アンチセンスプラ
イマーとしては、1種または2種以上の配列番号49で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号49にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
遺伝子マーカーとして用いることにより、被験イネが、
下記i)〜v) から選ばれるいずれの群の品種であるか
を識別することができる。
「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「農林20号」、
「キタアケ」または「コシヒカリ」 ii) 「Kasalath」 iii)「Italica Livorno 」 iv) 「Arroz Da Terra」または「日本晴」 v)「彩」
ーカーと同様に、増幅を行う鋳型遺伝子である、配列番
号17で表されるSSR配列を含む遺伝子領域における
5’末端と3’末端に対して、実質的に相補的な、遺伝
子増幅反応を行うための遺伝子増幅用プライマーを、一
般的な遺伝子増幅用プライマー選択基準に基づき選択す
ることができる。
列のSSR配列を含む遺伝子領域を増幅遺伝子マーカー
とする場合には、センスプライマーとして、1種または
2種以上の配列番号50で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖とすることが好適な態
様として挙げることができる。また、アンチセンスプラ
イマーとしては、1種または2種以上の配列番号51で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以上
のヌクレオチド鎖とすることを好適な態様として挙げる
ことができる。
スプライマーと、配列番号51にかかわるアンチセンス
プライマーを用いて、イネの遺伝子の増幅を行うことに
より、被験イネの上記品種の別に応じて、異なる塩基長
を与える増幅遺伝子マーカーが得られる。
別可能な、異なる遺伝子増幅用プライマーを用いた本品
種識別方法を組み合わせて行うことにより、的確に、被
験イネの品種を識別することが可能である。
この実施例の記載により、本発明の技術的範囲が限定さ
れるものではない。 〔実施例1〕 特定SSRマーカーによるイネの品種の
識別識別対象品種 本実施例において、品種識別の対象としたイネは、上述
した日本内外の30品種である。すなわち、 欧州品種:「Italica Livorno 」(IL)、「Dungha
n Shali 」(DS)、「Arroz Da Terra」(ADT)、
「Fany」(FANY)および「USSR22」(U22) インド品種「Kasalath」(カサラス) 日本品種「きたいぶき」、「はやまさり」、「日本
晴」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「ほのか224 」、
「彩」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「ゆきま
る」、「キタヒカリ」、「キタアケ」、「巴まさり」、
「栄光」、「マツマエ」、「キヨカゼ」、「農林33
号」、「農林20号」、「農林11号」、「北海早
生」、「胆振早生」、「赤毛」、「はくちょうもち」お
よび「たんねもち」
は、各々のイネの緑葉から、CTAB法により、DNA
を抽出した。ここで行ったCTAB法は、マーレイ・ト
ンプソン法[Murray,H.G. and Thompson,W.F.(1980)Nucl
eic.Acid Res.8:4321-4325) の改変法であり、各々の緑
葉の凍結組織をホモジネートして、これから、DNAを
抽出した。このようにして得られた各品種のDNA試料
を、特定のSSRマーカーを遺伝子増幅するための鋳型
として、下記のPCR反応を行った。なお、ここでDN
A抽出のために用いたCTAB法は、イネ種子に対して
も用いることができる。
p://rgp.dna.affrc.go.jp)に対して、SSR検索ソフ
トウエア「SSRIT」(http://ars-genome.cornell.e
du/cgi-bin/rice/ssrtool.pl) を用いて、配列番号1〜
17に示すSSR配列の情報を得た。次いで、この配列
番号1〜17記載のSSR配列近傍の、イネ遺伝子にお
ける塩基配列を基に、このSSR近傍領域を、PCR法
により増幅可能なPCRプライマーを、コンピューター
ソフトウエア「Oligo4.04 」(National Bioscience社
製)を用いて設計し、下記の塩基配列のオリゴヌクレオ
チド(配列番号18〜51)を、DNAシンセサイザー
(System plus :ベックマン社製)で合成し〔アール・
エル・レンジャー等の方法(R.T.Letsinger,W.B.Lursfor
d,J.Am.Chem.Society.98,3655)に従う〕、これらをPC
R反応のセンスプライマーまたはアンチセンスプライマ
ーとして用いた。
ーとアンチセンスプライマーの対応関係を、下記に示
す。配列番号1(10TC12CA)で表されるSSRマー
カー (10TCと12CAの間に、他の塩基が入る可能
性あり) センスプライマー:CTTGTTAAATTTCCAT
TCCC(配列番号18) アンチセンスプライマー:ATCTCCTTAGCTC
ATCAAGC(配列番号19)
マーカー センスプライマー:GGCCGGATCTTTTTTT
AGCT(配列番号20) アンチセンスプライマー:GTCAACTCGAACC
TGCACAC(配列番号21)
SRマーカー センスプライマー:TTATTGAATAGGTGTA
AGTC(配列番号22) アンチセンスプライマー:ACTAATCCTATTG
ATTTAGG(配列番号23)
マーカー センスプライマー:GGCCCAGTTGACAAAC
AGGC(配列番号24) アンチセンスプライマー:CAGAGAGCATCAT
GGGCCAG(配列番号25)
マーカー センスプライマー:ATTTGTGTTGCTGCAT
GCAG(配列番号26) アンチセンスプライマー:ACTCGATCTCGTG
TGTGCCA(配列番号27)
マーカー センスプライマー:TTAGGTAAAATTAAGG
CACC(配列番号28) アンチセンスプライマー:TCTGTTGTAGGTG
TAGCAGC(配列番号29)
Rマーカー センスプライマー:GATTGCTCTGCTCAAG
TGTA(配列番号30) アンチセンスプライマー:CGACTTTTTTCAC
AGTTCTT(配列番号31)
SRマーカー センスプライマー:TGAGTTTGGAGTGATT
GGAT(配列番号32) アンチセンスプライマー:CTCAAAGAATGAC
ACCGATG(配列番号33)
マーカー センスプライマー:TCTCTCCCAAGTCCCA
ATCC(配列番号34) アンチセンスプライマー:CTAACCGTAGCGC
GCTCTCC(配列番号35)
SRマーカー センスプライマー:ATGATTTCCTAAATAA
ATTA(配列番号36) アンチセンスプライマー:TTTAAACACTAGC
AATATAT(配列番号37)
Rマーカー センスプライマー:CCTCTTCCCTTCTTGT
GTCA(配列番号38) アンチセンスプライマー:GGGATTTTTTCAT
CGAAATT(配列番号39)
で表されるSSRマーカー(51ATAと10AAGの
間に、他の塩基が入る可能性あり) センスプライマー:AGAGCATAACATCAAA
GCCA(配列番号40) アンチセンスプライマー:ATAGCTCCAATTC
GATCTTC(配列番号41)
Rマーカー センスプライマー:GATCCAGGAAATCGAA
CCTC(配列番号42) アンチセンスプライマー:GCAACTCTGCTAA
ACGAATT(配列番号43)
Rマーカー センスプライマー:TGTATGTTGTGTCTGC
TACG(配列番号44) アンチセンスプライマー:GCAACTCTGCTAA
ACGAATT(配列番号45)
されるSSRマーカー(20TAと20AGの間に、他
の塩基が入る可能性あり) センスプライマー:CCATAGAGGCCTACAA
GTAT(配列番号46) アンチセンスプライマー:CCAGATGATAGAA
GAGGTGT(配列番号47)
Rマーカー センスプライマー:AAAAGCATATAGAGGC
ACCG(配列番号48) アンチセンスプライマー:ACTCCGTCAGGTT
TTCATCT(配列番号49)
Rマーカー センスプライマー:GAAACGAGGTGAAGAG
GAAG(配列番号50) アンチセンスプライマー:CTAATCCACTCAA
TCCTCCC(配列番号51)
幅用のセンスプライマーとアンチセンスプライマーの対
応関係に従って、上記(1)に従って調製した、各品種
のイネの緑葉から抽出したDNAを鋳型として、PCR
反応を行い、配列番号1〜17で示すSSR配列近傍の
遺伝子増幅産物を、それぞれ調製して、被験イネ毎の、
これらの遺伝子増幅産物の塩基長の差異を検出すること
により、イネの品種の識別が可能か否かを検討した。
ズ(Williams)らの方法に従い、反応混液を調製し、ジー
ン・アンプPCR9700(パーキンエルマー社製)ま
たはiサイクラー(バイオラッド社製)を用いて、DN
Aの増幅を行った[Theor.Apple.Genet.82,489-498(199
0)]。このPCR反応より得られたDNA増幅産物の検
出は、PCR反応が終了した反応液に、泳動用色素液を
添加し、6%変性ポリアクリルアミドゲルにより、電気
泳動装置(Model S2,Gibco BRL 社製) を用い、960V
で、約3時間通電した。電気泳動終了後、銀染色(Silve
r Sequence、プロメガ社製)により、遺伝子増幅産物を
検出した。
が、上記の30品種のイネに対する識別マーカーとして
用いることが可能であることが見出された。
トは、表に示した各々のSSRマーカーを、各々の被験
イネ品種に対して用いた結果、電気泳動において現れた
バンドを区別するための記号である。例えば、No.1
のSSRマーカーにおいて、共に「A」で示されてい
る、「きたいぶき」と「はやまさり」では、同一のバン
ドが現れたことを意味し、「B」で示されている「カサ
ラス」や、「C」で示されている他の品種は、これとは
別の分子量を示すバンドが現れたことを意味している。
また、これらのアルファベットA〜Kは、同一のSSR
マーカーにおいて現れる異なるバンドを区別するための
記号であり、例えば、No,1のSSRマーカーの欄に
示されている「A」と、No.2のSSRマーカーの欄
に示されている「A」とは、各々、全く無関係のバンド
を表している。
マーカーを用いて、イネの品種識別を、品種毎、また
は、いくつかの品種の組毎に行うことができる。実際
上、これらのSSRマーカーを単独で用いるのみでは、
イネの品種識別の内容として十分でない場合が多い。す
なわち、実施例において示した、異なるイネの品種の識
別機能を有するSSRマーカー同士を組み合わせて用い
ることにより、イネの品種の識別を的確に行うことがで
きる。
て、配列番号1〜17で表されるSSR配列を含む塩基
配列から選ばれる1種または2種以上、好ましくは、2
種以上の塩基配列を増幅遺伝子マーカーとして、被験イ
ネの品種を識別するイネの品種の識別方法を提供する発
明であり、このイネの品種の識別方法により、上述の3
0品種のイネを、少なくとも3組以上に識別することが
できる。
いたイネの品種の識別(1) 本実施例においては、SSRマーカーとして、配列番号
13のSSRマーカー(第1マーカー)、配列番号11
のSSRマーカー(第2マーカー)、配列番号12のS
SRマーカー(第3マーカー)、配列番号10のSSR
マーカー(第4マーカー)、および、配列番号15のS
SRマーカー(第5マーカー)として、イネの品種の識
別を試みた。
下位のマーカー(第5マーカー)へと順番に、これらの
各々のマーカー単独で識別可能な品種については、その
マーカーに止めて、その上位マーカー単独では、単一
品種として識別ができない品種の群について、一つ下位
のマーカー(例えば、第1マーカーの一つ下位のマーカ
ーは、第2のマーカー)について、の作業を行った。
第5マーカーまで、繰り返し行った結果、第2表に示す
結果が得られた。
り、「カサラス」、「IL」、「FANY」、「ほしの
ゆめ」、「亀の尾」および「U22」を、それぞれ単独
で識別することが可能である。また、第1マーカーの依
存下、第2マーカーにより、「北海早生」、「DS」、
「ADT」、「農林11号」、「赤毛」、「農林20
号」、「コシヒカリ」および「ほのか224 」を、それぞ
れ単独で識別することが可能である。また、第1・第2
マーカーの依存下、第3マーカーにより、「キタア
ケ」、「巴まさり」、「キヨカゼ」、「ゆきまる」およ
び「はやまさり」を、それぞれ単独で識別することが可
能である。また、第1〜3マーカーの依存下、「キタヒ
カリ」、「栄光」、「マツマエ」、「はくちょうもち・
たんねもち」の組、および、「農林33号・胆振早生」
の組を、それぞれ識別することが可能である。また、第
1〜4マーカーの依存下、第5マーカーにより、「きた
いぶき」、「きらら397 」、「日本晴」および「彩」
を、それぞれ単独で識別することが可能である。
いたイネの品種の識別(2) 本実施例においては、SSRマーカーとして、配列番号
12のSSRマーカー(第1マーカー)、配列番号11
のSSRマーカー(第2マーカー)、および、配列番号
15のSSRマーカー(第3マーカー)として、「ほし
のゆめ」、「ゆきまる」、「ほのか224 」、「彩」、
「日本晴」、「きらら397 」、「はくちょうもち」およ
び「コシヒカリ」からなる群において、イネの品種の識
別を試みた。
を、上位のマーカー(第1マーカー)から、下位のマ
ーカー(第3マーカー)へと順番に、繰り返し行った結
果、第3表に示す結果が得られた。
り、「ほしのゆめ」および「ゆきまる」を、それぞれ単
独で識別することが可能である。また、第1マーカーの
依存下、第2マーカーにより、「ほのか224 」、「きら
ら397 」、「はくちょうもち」および「コシヒカリ」
を、それぞれ単独で識別することが可能である。また、
第1・第2マーカーの依存下、第3マーカ−により、
「彩」および「日本晴」を、それぞれ単独で識別するこ
とが可能である。
れる17種類のイネ遺伝子のSSR配列を、それぞれの
品種識別機能に着目して、必要に応じて組み合わせて遺
伝子マーカーとして用いることにより、イネの品種の識
別を行うことができることがわかる。
は、上記のSSRマーカーの異なる組を用いた品種識別
を、組み合わせて行い、互いの識別結果を確認すること
により、品種識別の確度を向上させることができる。
るDNAマーカーと、これを用いたイネの品種識別手段
が提供される。
Claims (67)
- 【請求項1】イネの遺伝子において、配列番号1で表さ
れるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカーと
して、被験イネが、下記i)〜iii)から選ばれるいずれ
の群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別方
法。 i)「Kasalath」 ii)「きたいぶき」または「はやまさり」 iii)「Italica Livorno 」、「Dunghan Shali 」、「Ar
roz Da Terra」、「Fany」、「USSR22」、「日本
晴」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「ほのか224 」、
「彩」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「ゆきま
る」、「キタヒカリ」、「キタアケ」、「巴まさり」、
「栄光」、「マツマエ」、「キヨカゼ」、「農林33
号」、「農林20号」、「農林11号」、「北海早
生」、「胆振早生」、「赤毛」、「はくちょうもち」ま
たは「たんねもち」 - 【請求項2】配列番号1で表されるSSR配列を含む遺
伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライマ
ーが、配列番号18で表されるヌクレオチド鎖の塩基配
列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオチ
ド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、15
〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセンスプ
ライマーが、配列番号19で表されるヌクレオチド鎖の
塩基配列から選ばれる、連続した15〜30塩基のヌク
レオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基長
が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項1
記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項3】配列番号1で表されるSSR配列を含む遺
伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライマ
ーが、配列番号18で表されるヌクレオチド鎖であり、
同アンチセンスプライマーが、配列番号19で表される
ヌクレオチド鎖である、請求項1記載のイネの品種の識
別方法。 - 【請求項4】1種または2種以上の配列番号18で表
されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続し
た15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、 1種または2種以上の配列番号19で表されるヌクレ
オチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20
塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体
の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖、からな
る群から選ばれる、1種または2種以上のヌクレオチド
鎖。 - 【請求項5】イネの遺伝子において、配列番号2で表さ
れるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカーと
して、被験イネが、下記i)〜iii)から選ばれるいずれ
の群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別方
法。 i)「Kasalath」 ii)「はくちょうもち」または「たんねもち」 iii)「Italica Livorno 」、「Dunghan Shali 」、「Ar
roz Da Terra」、「Fany」、「USSR22」、「日本
晴」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「ほのか224 」、
「彩」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「きたいぶ
き」、「はやまさり」、「ゆきまる」、「キタヒカ
リ」、「キタアケ」、「巴まさり」、「栄光」、「マツ
マエ」、「キヨカゼ」、「農林33号」、「農林20
号」、「農林11号」、「北海早生」、「胆振早生」ま
たは「赤毛」 - 【請求項6】配列番号2で表されるSSR配列を含む遺
伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライマ
ーが、配列番号20で表されるヌクレオチド鎖の塩基配
列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオチ
ド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、15
〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセンスプ
ライマーが、配列番号21で表されるヌクレオチド鎖の
塩基配列から選ばれる、連続した15〜30塩基のヌク
レオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基長
が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項5
記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項7】配列番号2で表されるSSR配列を含む遺
伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライマ
ーが、配列番号20で表されるヌクレオチド鎖であり、
同アンチセンスプライマーが、配列番号21で表される
ヌクレオチド鎖である、請求項5記載のイネの品種の識
別方法。 - 【請求項8】1種または2種以上の配列番号20で表
されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続し
た15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、 1種または2種以上の配列番号21で表されるヌクレ
オチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20
塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体
の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖、からな
る群から選ばれる、1種または2種以上のヌクレオチド
鎖。 - 【請求項9】イネの遺伝子において、配列番号3で表さ
れるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカーと
して、被験イネが、下記i)〜v) から選ばれるいずれ
の群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別方
法。 i)「USSR22」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「ほの
か224 」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「きたい
ぶき」、「はやまさり」、「キタヒカリ」、「キタア
ケ」、「巴まさり」、「栄光」、「マツマエ」、「農林
11号」、「北海早生」、「はくちょうもち」または
「たんねもち」 ii)「Kasalath」 iii) 「Italica Livorno 」または「Arroz Da Terra」 iv)「Dunghan Shali 」 v)「Fany」、「日本晴」、「彩」、「ゆきま
る」、「キヨカゼ」、「農林33号」、「農林20
号」、「胆振早生」または「赤毛」 - 【請求項10】配列番号3で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号22で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセンス
プライマーが、配列番号23で表されるヌクレオチド鎖
の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌ
クレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基長
が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項9
記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項11】配列番号3で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号22で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号23で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項9記載のイネの品種
の識別方法。 - 【請求項12】1種または2種以上の配列番号22で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号23
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項13】イネの遺伝子において、配列番号4で表
されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカー
として、被験イネが、下記i)〜iv) から選ばれるいず
れの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別方
法。 i)「ほのか224 」または「はやまさり」 ii)「Kasalath」 iii) 「Italica Livorno 」、「Fany」、「USSR2
2」、「日本晴」、「コシヒカリ」、「亀の尾」、
「彩」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「きたいぶ
き」、「ゆきまる」、「キタヒカリ」、「キタアケ」、
「巴まさり」、「栄光」、「キヨカゼ」、「農林33
号」、「農林20号」、「農林11号」、「北海早
生」、「赤毛」、「はくちょうもち」または「たんねも
ち」 iv) 「Dunghan Shali 」または「Arroz Da Terra」 - 【請求項14】配列番号4で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号24で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセンス
プライマーが、配列番号25で表されるヌクレオチド鎖
の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌ
クレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基長
が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項1
3記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項15】配列番号4で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号24で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号25で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項13記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項16】1種または2種以上の配列番号24で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号25
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項17】イネの遺伝子において、配列番号5で表
されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカー
として、被験イネが、下記i)〜iv) から選ばれるいず
れの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別方
法。 i)「Kasalath」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「ほ
のか224 」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「きた
いぶき」、「はやまさり」、「マツマエ」、「農林11
号」、「北海早生」、「はくちょうもち」または「たん
ねもち」 ii) 「Italica Livorno 」、「Dunghan Shali 」、「F
any」、「日本晴」、「彩」、「ゆきまる」、「キタ
ヒカリ」、「キタアケ」、「巴まさり」、「栄光」、
「キヨカゼ」、「農林33号」、「農林20号」、「胆
振早生」または「赤毛」 iii)「Arroz Da Terra」 iv) 「USSR22」 - 【請求項18】配列番号5で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号26で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセンス
プライマーが、配列番号27で表されるヌクレオチド鎖
の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌ
クレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基長
が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項1
7記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項19】配列番号5で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号26で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号27で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項17記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項20】1種または2種以上の配列番号26で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号27
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項21】イネの遺伝子において、配列番号6で表
されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカー
として、被験イネが、下記i)〜iv) から選ばれるいず
れの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別方
法。 i)「USSR22」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「ほの
か224 」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「きたい
ぶき」、「はやまさり」、「マツマエ」、「農林11
号」、「北海早生」、「はくちょうもち」または「たん
ねもち」 ii) 「Italica Livorno 」、「Dunghan Shali 」、「Ka
salath」、「ゆきまる」、「キタヒカリ」、「キタア
ケ」、「巴まさり」、「栄光」または「キヨカゼ」 iii) 「Fany」、「日本晴」または「彩」 iv)「Arroz Da Terra」 - 【請求項22】配列番号6で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号28で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセンス
プライマーが、配列番号29で表されるヌクレオチド鎖
の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌ
クレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基長
が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項2
1記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項23】配列番号6で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号28で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号29で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項21記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項24】1種または2種以上の配列番号28で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号29
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項25】イネの遺伝子において、配列番号7で表
されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカー
として、被験イネが、下記i)〜iv) から選ばれるいず
れの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別方
法。 i)「Kasalath」 ii)「はくちょうもち」または「たんね」 iii )「ほのか224 」、「きらら397 」、「ゆきま
る」、「キタヒカリ」、「キタアケ」、「栄光」、「農
林11号」または「北海早生」 iv) 「Italica Livorno 」、「Dunghan Shali 」、「Ar
roz Da Terra」、「Fany」、「USSR22」、「日本
晴」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「彩」、「ほしの
ゆめ」、「きたいぶき」、「はやまさり」、「巴まさ
り」、「マツマエ」、「キヨカゼ」、「農林33号」、
「農林20号」、「胆振早生」または「赤毛」 - 【請求項26】配列番号7で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号30で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセンス
プライマーが、配列番号31で表されるヌクレオチド鎖
の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌ
クレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基長
が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項2
5記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項27】配列番号7で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号30で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号31で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項25記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項28】1種または2種以上の配列番号30で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号31
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項29】イネの遺伝子において、配列番号8で表
されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカー
として、被験イネが、下記i)〜iv) から選ばれるいず
れの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別方
法。 i)「Kasalath」 ii)「Italica Livorno 」 iii )「Fany」、「日本晴」または「彩」 iv) 「Dunghan Shali 」、「Arroz Da Terra」、「USSR
22」、「コシヒカリ」、「亀ノ尾」、「ほのか224 」、
「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「きたいぶき」、
「はやまさり」、「ゆきまる」、「キタヒカリ」、「キ
タアケ」、「巴まさり」、「マツマエ」、「キヨカ
ゼ」、「農林33号」、「農林20号」、「農林11
号」、「北海早生」、「胆振早生」、「赤毛」、「はく
ちょうもち」または「たんねもち」 - 【請求項30】配列番号8で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号32で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセンス
プライマーが、配列番号33で表されるヌクレオチド鎖
の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌ
クレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基長
が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項2
9記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項31】配列番号8で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号32で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号33で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項29記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項32】1種または2種以上の配列番号32で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号33
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項33】イネの遺伝子において、配列番号9で表
されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカー
として、被験イネが、下記i)〜vi) から選ばれるいず
れの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別方
法。 i)「Dunghan Shali 」、「Arroz Da Terra」、「USSR
22」、「日本晴」、「亀ノ尾」、「ほのか224 」、
「彩」、「はやまさり」、「キタヒカリ」、「キタア
ケ」、はくちょうもち」または「たんねもち」 ii)「Kasalath」 iii) 「コシヒカリ」、「きらら397 」、「ほしのゆ
め」、「きたいぶき」、「ゆきまる」、「巴まさり」、
「栄光」、「マツマエ」または「キヨカゼ」 iv)「USSR22」、「農林33号」、「農林20号」、
「農林11号」、「胆振早生」または「赤毛」 v)「北海早生」 vi)「Fany」 - 【請求項34】配列番号9で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号34で表されるヌクレオチド鎖の塩基
配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレオ
チド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、1
5〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセンス
プライマーが、配列番号35で表されるヌクレオチド鎖
の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌ
クレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基長
が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項3
3記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項35】配列番号9で表されるSSR配列を含む
遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプライ
マーが、配列番号34で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号35で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項33記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項36】1種または2種以上の配列番号34で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号35
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項37】イネの遺伝子において、配列番号10で
表されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカ
ーとして、被験イネが、下記i)〜Vii)から選ばれるい
ずれの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別
方法。 i)「Italica Livorno 」または「赤毛」 ii) 「Dunghan Shali 」 iii)「Arroz Da Terra」 iv) 「Fany」、「Kasalath」、「日本晴」、
「彩」、「キヨカゼ」または「北海早生」 v)「コシヒカリ」、「亀の尾」、「巴まさり」または
「マツマエ」 vi) 「ほのか224 」または「キタヒカリ」 vii)「USSR22」、「きらら397 」、「ほしのゆめ」、
「きたいぶき」、「はやまさり」、「ゆきまる」、「キ
タアケ」、「栄光」、「農林33号」、「農林20
号」、「農林11号」、「胆振早生」、「はくちょうも
ち」または「たんねもち」 - 【請求項38】配列番号10で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号36で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセン
スプライマーが、配列番号37で表されるヌクレオチド
鎖の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基の
ヌクレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基
長が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項
37記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項39】配列番号10で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号36で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号37で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項38記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項40】1種または2種以上の配列番号36で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号37
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項41】イネの遺伝子において、配列番号11で
表されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカ
ーとして、被験イネが、下記i)〜Vii)から選ばれるい
ずれの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別
方法。 i)「Italica Livorno 」、「Arroz Da Terra」または
「Kasalath」 ii) 「Dunghan Shali 」 iii)「Fany」、「日本晴」、「彩」、「きらら397
」、「きたいぶき」、「はやまさり」、「ゆきま
る」、「キタヒカリ」、「栄光」または「キヨカゼ」 iv) 「USSR22」または「亀の尾」、「ほのか224 」、
「マツマエ」、「農林33号」、「農林11号」、「胆
振早生」、「はくちょうもち」または「たんねもち」 v)「コシヒカリ」、「ほしのゆめ」または「農林20
号」 vi) 「北海早生」または「赤毛」 vii)「キタアケ」または「巴まさり」 - 【請求項42】配列番号11で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号38で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセン
スプライマーが、配列番号39で表されるヌクレオチド
鎖の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基の
ヌクレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基
長が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項
41記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項43】配列番号11で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号38で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号39で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項41記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項44】1種または2種以上の配列番号38で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号39
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項45】イネの遺伝子において、配列番号12で
表されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカ
ーとして、被験イネが、下記i)〜viii) から選ばれる
いずれの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識
別方法。 i)「Italica Livorno 」 ii) 「Dunghan Shali 」、「ほしのゆめ」、「巴まさ
り」または「キヨカゼ」 iii)「Arroz Da Terra」 iv) 「Fany」、「日本晴」、「ほのか224 」、
「彩」または「はやまさり」 v)「USSR22」、「コシヒカリ」、「亀の尾」、「きらら
397 」、「きたいぶき」、「キタヒカリ」、「キタア
ケ」、「栄光」、「マツマエ」、「農林11号」、「赤
毛」、「はくちょうもち」または「たんねもち」 vi)「Kasalath」 vii) 「ゆきまる」、「農林33号」、「農林20号」
または「胆振早生」 viii)「北海早生」 - 【請求項46】配列番号12で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号40で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセン
スプライマーが、配列番号41で表されるヌクレオチド
鎖の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基の
ヌクレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基
長が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項
46記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項47】配列番号12で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号40で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号41で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項46記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項48】1種または2種以上の配列番号40で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号41
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項49】イネの遺伝子において、配列番号13ま
たは14で表されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺
伝子マーカーとして、被験イネが、下記i)〜xi) から
選ばれるいずれの群の品種であるかを識別する、イネの
品種の識別方法。 i)「コシヒカリ」、「ほのか224 」、「きらら397
」、「きたいぶき」または「はやまさり」 ii) 「Kasalath」 iii) 「Italica Livorno 」 iv) 「ゆきまる」、「キタヒカリ」、「キタアケ」、
「巴まさり」、「栄光」、「マツマエ」、「キヨカ
ゼ」、「農林33号」、「農林20号」、「胆振早
生」、「赤毛」、「はくちょうもち」または「たんねも
ち」 v)「ほしのゆめ」 vi) 「日本晴」または「彩」 vii)「亀の尾」 viii) 「USSR22」 ix) 「Arroz Da Terra」または「農林11号」 x)「Dunghan Shali 」または「北海早生」 xi) 「Fany」 - 【請求項50】配列番号13で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号42で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセン
スプライマーが、配列番号43で表されるヌクレオチド
鎖の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基の
ヌクレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基
長が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項
49記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項51】配列番号14で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号44で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセン
スプライマーが、配列番号45で表されるヌクレオチド
鎖の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基の
ヌクレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基
長が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項
49記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項52】配列番号13で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号42で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号43で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項49記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項53】配列番号14で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号44で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号45で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項49記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項54】1種または2種以上の配列番号42で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号43
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項55】1種または2種以上の配列番号44で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号45
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項56】イネの遺伝子において、配列番号15で
表されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカ
ーとして、被験イネが、下記i)〜v) から選ばれるい
ずれの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別
方法。 i)「はやまさり」、「きたいぶき」または「農林20
号」 ii) 「Kasalath」 iii) 「Arroz Da Terra」、「Italica Livorno 」また
は「日本晴」 iv) 「きらら397 」、「ほしのゆめ」または「キタア
ケ」 v)「コシヒカリ」または「彩」 - 【請求項57】配列番号15で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号46で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセン
スプライマーが、配列番号47で表されるヌクレオチド
鎖の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基の
ヌクレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基
長が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項
56記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項58】配列番号15で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号46で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号47で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項56記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項59】1種または2種以上の配列番号46で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号47
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項60】イネの遺伝子において、配列番号16で
表されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカ
ーとして、被験イネが、下記i)〜v) から選ばれるい
ずれの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別
方法。 i)「はやまさり」、「きたいぶき」、「農林20号」
または「日本晴」 ii) 「Kasalath」 iii) 「Arroz Da Terra」または「Italica Livorno 」 iv) 「きらら397 」、「ほしのゆめ」、「キタアケ」ま
たは「コシヒカリ」 v)「彩」 - 【請求項61】配列番号16で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号48で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセン
スプライマーが、配列番号49で表されるヌクレオチド
鎖の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基の
ヌクレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基
長が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項
60記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項62】配列番号16で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号48で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号49で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項60記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項63】1種または2種以上の配列番号48で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号49
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。 - 【請求項64】イネの遺伝子において、配列番号17で
表されるSSR配列を含む塩基配列を増幅遺伝子マーカ
ーとして、被験イネが、下記i)〜v) から選ばれるい
ずれの群の品種であるかを識別する、イネの品種の識別
方法。 i)「はやまさり」、「きたいぶき」、「きらら397
」、「ほしのゆめ」、「農林20号」、「キタアケ」
または「コシヒカリ」 ii) 「Kasalath」 iii) 「Italica Livorno 」 iv) 「Arroz Da Terra」または「日本晴」 v)「彩」 - 【請求項65】配列番号17で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号50で表されるヌクレオチド鎖の塩
基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基のヌクレ
オチド鎖を5’末端側に含み、かつ、全体の塩基長が、
15〜50塩基のヌクレオチド鎖であり、同アンチセン
スプライマーが、配列番号51で表されるヌクレオチド
鎖の塩基配列から選ばれる、連続した15〜20塩基の
ヌクレオチド鎖を3’末端側に含み、かつ、全体の塩基
長が、15〜50塩基のヌクレオチド鎖である、請求項
64記載のイネの品種の識別方法。 - 【請求項66】配列番号17で表されるSSR配列を含
む遺伝子領域の遺伝子増幅産物を得るためのセンスプラ
イマーが、配列番号50で表されるヌクレオチド鎖であ
り、同アンチセンスプライマーが、配列番号51で表さ
れるヌクレオチド鎖である、請求項64記載のイネの品
種の識別方法。 - 【請求項67】1種または2種以上の配列番号50で
表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連続
した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を5’末端側に含
み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレオ
チド鎖、および、1種または2種以上の配列番号51
で表されるヌクレオチド鎖の塩基配列から選ばれる、連
続した15〜20塩基のヌクレオチド鎖を3’末端側に
含み、かつ、全体の塩基長が、15〜50塩基のヌクレ
オチド鎖、からなる群から選ばれる、1種または2種以
上のヌクレオチド鎖。
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KR100713669B1 (ko) | 2005-07-29 | 2007-05-04 | 대한민국 | 국내외산 벼 품종 식별을 위한 snp 마커 |
CN100389209C (zh) * | 2006-05-22 | 2008-05-21 | 江苏明天种业科技有限公司 | 检测两优培九种子纯度的引物及其方法 |
JP2008237180A (ja) * | 2007-03-28 | 2008-10-09 | Japan Grassland Farming Forage Seed Association | イタリアンライグラスの品種識別に有用なssrプライマー対及びその利用 |
JP2010017085A (ja) * | 2008-07-08 | 2010-01-28 | Nippon Software Management Kk | 商品の判別方法 |
KR100974264B1 (ko) | 2007-10-05 | 2010-08-10 | 대한민국(국립농산물품질관리원장) | 벼 품종 식별용 프라이머 조합 및 이를 이용한 식별 방법 |
JP2012055253A (ja) * | 2010-09-10 | 2012-03-22 | National Agriculture & Food Research Organization | イネまたはそれに由来する組織、あるいはそれらの加工品の品種鑑定法 |
CN109652577A (zh) * | 2016-02-04 | 2019-04-19 | 山东省农业科学院生物技术研究中心 | 与水稻高杆qtl紧密连锁的ssr分子标记l08与应用 |
-
2002
- 2002-05-02 JP JP2002130645A patent/JP2003319782A/ja active Pending
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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KR100713669B1 (ko) | 2005-07-29 | 2007-05-04 | 대한민국 | 국내외산 벼 품종 식별을 위한 snp 마커 |
CN100389209C (zh) * | 2006-05-22 | 2008-05-21 | 江苏明天种业科技有限公司 | 检测两优培九种子纯度的引物及其方法 |
JP2008237180A (ja) * | 2007-03-28 | 2008-10-09 | Japan Grassland Farming Forage Seed Association | イタリアンライグラスの品種識別に有用なssrプライマー対及びその利用 |
KR100974264B1 (ko) | 2007-10-05 | 2010-08-10 | 대한민국(국립농산물품질관리원장) | 벼 품종 식별용 프라이머 조합 및 이를 이용한 식별 방법 |
JP2010017085A (ja) * | 2008-07-08 | 2010-01-28 | Nippon Software Management Kk | 商品の判別方法 |
JP2012055253A (ja) * | 2010-09-10 | 2012-03-22 | National Agriculture & Food Research Organization | イネまたはそれに由来する組織、あるいはそれらの加工品の品種鑑定法 |
CN109652577A (zh) * | 2016-02-04 | 2019-04-19 | 山东省农业科学院生物技术研究中心 | 与水稻高杆qtl紧密连锁的ssr分子标记l08与应用 |
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