JP2003004701A

JP2003004701A - 電気泳動用マイクロプレート

Info

Publication number: JP2003004701A
Application number: JP2001190873A
Authority: JP
Inventors: Hidemi Yoshida; 秀美吉田; Yusuke Miyazaki; 祐輔宮崎; Masayoshi Kodama; 正吉児玉; Hiroaki Machida; 浩昭町田
Original assignee: Hitachi Electronics Engineering Co Ltd
Current assignee: Hitachi High Tech Corp
Priority date: 2001-06-25
Filing date: 2001-06-25
Publication date: 2003-01-08

Abstract

(57)【要約】【課題】ゲル泳動媒体と接触することなくＰＣＲ増幅
反応を行うことができ、ＤＮＡサンプルやＰＣＲ反応試
薬類の蒸発を防止することができ、特別な加熱ヒータ装
置を必要としない新規なＤＮＡサンプル分析用マイクロ
プレートを提供する。【解決手段】一方の端部にグランド側泳動媒体用ウエ
ルを有し、他方の端部に高電圧側泳動媒体用ウエルを有
する分離用チャネルと、一方の端部に高電圧側泳動媒体
用ウエルを有し、前記分離用チャネルと交差する導入用
チャネルとを基板中に有する電気泳動用マイクロプレー
トにおいて、前記導入用チャネルの他方の端部はバッフ
ァ用ウエルを有し、該バッファ用ウエルと連通する反応
チャネルを更に有し、該反応チャネルの他方の端部には
ＰＣＲ増幅反応用反応液注入用ウエルが設けられてお
り、該反応液注入用ウエルと被分析サンプル注入用ウエ
ルとの間の反応チャネルの中間にＰＣＲ増幅反応用反応
ポットが設けられていることを特徴とする電気泳動用マ
イクロプレート。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明はマイクロプレートと
呼ばれるような超小型電気泳動部材に関する。更に詳細
には、本発明は、プレート上で、遺伝子断片などのよう
なＤＮＡサンプルをＰＣＲ法により増幅する機能を有
し、プレート上で生成されたＤＮＡ断片又は遺伝子断片
などの被分析サンプルを同時に電気泳動分析することが
できる電気泳動用マイクロプレートに関する。

【０００２】

【従来の技術】ＤＮＡ等の塩基配列を決定する方法とし
て、ゲル電気泳動法が広く実施されている。電気泳動す
る際に、従来は試料をラジオアイソトープでラベルし、
分析していたが、この方法では手間と時間がかかる難点
があった。更に、放射能管理の点から常に最大限の安全
性と管理が求められ、特別な施設内でなければ分析を行
うことができない。このため、最近では、試料を蛍光体
でラベルする方式が検討されている。

【０００３】光を用いる方法では、蛍光ラベルしたＤＮ
Ａ断片をゲル中を泳動させるが、泳動開始部から、１５
〜２０ｃｍ下方に各泳動路毎に光励起部と光検出器を設
けておき、ここを通過するＤＮＡ断片を順に計測する。
例えば、配列を決定しようとするＤＮＡ鎖を鋳型として
酵素反応（ダイデオキシ法）による操作で末端塩基種が
わかった種々の長さのＤＮＡを複製し、これらに蛍光体
を標識する。つまり、蛍光体で標識されたアデニン
（Ａ）断片群，シトシン（Ｃ）断片群，グアニン（Ｇ）
断片群およびチミン（Ｔ）断片群を得る。これらの断片
群を混合して電気泳動用ゲルの別々の泳動レーン溝に注
入し、電圧を印加する。ＤＮＡは負の電荷を持つ鎖状の
重合体高分子のため、ゲル中を分子量に反比例した速度
で移動する。短い（分子量の小さい）ＤＮＡ鎖ほど早
く、長い（分子量の大きい）ＤＮＡ鎖ほどゆっくりと移
動するので、分子量によりＤＮＡを分画できる。

【０００４】特開昭６３−２１５５６号公報には、レー
ザで照射される電気泳動装置のゲル上のラインと光ダイ
オードアレイの配列方向が電気泳動装置内のＤＮＡ断片
の泳動方向と直角となるように構成されたＤＮＡ塩基配
列決定装置が開示されている。この装置では、一対のガ
ラス板の間にポリアクリルアミドなどのゲル電解質を充
填し、ゲル電気泳動層を形成した後、該ゲル電気泳動層
の一端にＤＮＡサンプルを注入し、ゲル電気泳動層の両
端をバッファ液に浸漬させながら、その両端に電圧を印
加してＤＮＡサンプルを電気泳動させることによりゲル
電解質層上にＤＮＡ断片を展開する。光を用いる方法で
は、蛍光ラベルしたＤＮＡ断片をゲル中を泳動させる
が、泳動開始部から、１５〜２０ｃｍ下方に各泳動路毎
に光励起部と光検出器を設けておき、ここを通過するＤ
ＮＡ断片を順に計測する。例えば、配列を決定しようと
するＤＮＡ鎖を鋳型として酵素反応（ダイデオキシ法）
による操作で末端塩基種がわかった種々の長さのＤＮＡ
を複製し、これらに蛍光体を標識する。つまり、蛍光体
で標識されたアデニン（Ａ）断片群，シトシン（Ｃ）断
片群，グアニン（Ｇ）断片群およびチミン（Ｔ）断片群
を得る。これらの断片群を混合して電気泳動用ゲルの別
々の泳動レーン溝に注入し、電圧を印加する。ＤＮＡは
負の電荷を持つ鎖状の重合体高分子のため、ゲル中を分
子量に反比例した速度で移動する。短い（分子量の小さ
い）ＤＮＡ鎖ほど早く、長い（分子量の大きい）ＤＮＡ
鎖ほどゆっくりと移動するので、分子量によりＤＮＡを
分画できる。

【０００５】しかし、このような装置では一度に多量の
サンプルを取り扱うことができるという利点があるもの
の、泳動作業に数十時間も要し、ＤＮＡ診断などのよう
な迅速な分析を必要とするような要望には答えることが
できなかった。

【０００６】このような迅速分析という要求に応えるた
めに、図７に示されるようなマイクロプレートと呼ばれ
る超小型ＤＮＡ電気泳動部材が試作されている。従来の
マイクロプレート９０は、ガラス又は合成樹脂（例え
ば、アクリル樹脂）などの透明基板１００に分離用チャ
ネル１０２と、この分離用チャネル１０２と直交する導
入用チャネル１０４を有する。分離用チャネル１０２の
両端にはグランド側泳動媒体用ウエル１０６と高電圧側
泳動媒体用ウエル１０８が配設されている。また、導入
用チャネル１０４の一方の端部にはグランド側のＤＮＡ
サンプル用ウエル１１０と高電圧側泳動媒体用ウエル１
１２が配設されている。

【０００７】図８は図７における−線に沿った断面図で
ある。図示されているように、透明基板１００を貫通す
るように泳動媒体用ウエル１０６及び１０８が設けら
れ、この基板１００の下面側に、泳動媒体用ウエル１０
６及び１０８に連通する分離用チャネル１０２が配設さ
れている。基板１００の下面側に透明又は不透明な素材
（例えば、合成樹脂フィルム）からなる遮蔽シート１１
４が接着されている。この遮蔽シート１１４の存在によ
り、ウエル及び溝内に泳動媒体及びＤＮＡサンプルなど
を注入することができる。

【０００８】図９は図７に示されたマイクロプレートの
使用方法を示す模式図である。先ず、ステップ（１）
で、分離用チャネル１０２の高電圧側泳動媒体用ウエル
１０８に電気泳動用の分離用泳動路となるべき泳動媒体
（例えば、ゲル電解質）を分注する。次いで、ステップ
（２）において、このウエル１０８から静かに圧力をか
けて、分離用チャネル１０２及び導入用チャネル１０４
に泳動媒体を充填させる。次いで、ステップ（３）にお
いて、ウエル１０６とウエル１１２に泳動媒体を分注す
る。次いで、ステップ（４）において、ウエル１１０に
ＤＮＡサンプル（遺伝子断片）を分注する。その後、ス
テップ（５）において、導入用チャネル１０４のウエル
１１０をグランド側とし、ウエル１１２を高電圧側と
し、導入用チャネル１０４に電圧を印加し、ＤＮＡサン
プルをウエル１１０からウエル１１２に向かって泳動さ
せる。次いで、ステップ（６）において、導入用チャネ
ル１０４への電圧印加を止め、分離用チャネル１０２の
ウエル１０６をグランド側とし、ウエル１０８を高電圧
側とし、分離用チャネル１０２に電圧を印加し、チャネ
ルの交差部１１６に存在するＤＮＡサンプル（遺伝子断
片）をウエル１０８に向かって泳動させる。分離用チャ
ネル１０２の途中に光学測定位置１１８が存在し、この
位置まで泳動された分離断片に光源（図示されていな
い）から励起光が照射され、断片に標識された蛍光体か
ら発生された蛍光を受光手段（図示されていない）で受
光し、分析を行う。

【０００９】図１０は前記のステップ（１）〜ステップ
（４）で行われる作業の模式図である。（Ａ）におい
て、マイクロプレート９０のウエル１０８等に電気泳動
用の分離用泳動路となるべきゲル泳動媒体をマイクロピ
ペット１２０のような公知慣用の注入手段で分注する。
次いで、（Ｂ）において、先端にゴムパッド１２２を有
するシリンジ１２４をウエル１０８に向けて下降させ
る。その後、（Ｃ）において、ゴムパッド１２２をウエ
ル１０８の上面に密着させ、シリンジ１２４で静かに加
圧することにより、ウエル１０８内のゲル１２６をチャ
ネル１０２及び１０４へ充填する。その後、（Ｄ）にお
いて、マイクロピペット１２０によりウエル１０６とウ
エル１１２にゲル１２６を分注し、更に、ウエル１１０
にＤＮＡサンプル（遺伝子断片）を分注する。ウエル１
１０に分注されたＤＮＡ断片については、必要に応じて
ＰＣＲ法（ポリメラーゼ連鎖反応法）による増幅処理が
行われる。ＰＣＲ法が行われる場合、ウエル１１０には
ＤＮＡサンプルの他に、ＰＣＲ反応に必要な試薬類も添
加される。

【００１０】ＰＣＲ法の原理は、例えば、実験医学，Ｖ
ｏｌ．７，Ｎｏ．２，１４頁〜１８頁（１９８９）に詳
細に説明されている。このＰＣＲ法は基本的に、特定
のＤＮＡ領域を挟んだ２種類のプライマーが結合された
２本鎖ＤＮＡを熱変性により１本鎖に変性し、プライ
マーをアニーリングし、Ｔａｑポリメラーゼにより伸
長させることからなる一連のサイクルからなり、このサ
イクルを数十回繰り返すことにより、その特定ＤＮＡ領
域を数十万倍に増幅させることからなる。従って、ウエ
ル１１０内のＤＮＡ断片の温度を、熱変性、アニー
リング伸長にそれぞれ必要な温度に周期的に変化させ
る。例えば、熱変性の場合は約９４℃、アニーリン
グの場合は約５５℃、伸長の場合は約７２℃にされ
る。

【００１１】従って、図９におけるステップ（５）で
は、ＰＣＲ法の反応終了後に電気泳動により被分析増幅
ＤＮＡサンプルを泳動路へ泳動していた。このため、Ｄ
ＮＡサンプル導入用チャネル１０４内のゲル泳動媒体
が、ＰＣＲ反応のためのウエル１１０と常に接触してい
ることとなる。しかし、通常使用するゲル泳動媒体には
ＰＣＲ増幅反応を阻害する物質が含まれていることがあ
り、特殊なゲル泳動媒体を使用しないと十分なＰＣＲ増
幅反応効率が得られない場合があった。このようなＰＣ
Ｒ反応を阻害しない特殊なゲル泳動媒体は高コストであ
り、経済的な面を考慮すれば、あまり使用したくない材
料である。

【００１２】また、従来のマイクロプレート９０では、
ウエル１１０内でＰＣＲ増幅反応を実施するために、図
１１に示されるように、特別な加熱・冷却装置１２８を
マイクロプレート９０の裏面に配置し、この加熱・冷却
装置１２８をマイクロプレート９０の裏面に接触させた
り、分離させることにより加熱・冷却を行っていたが、
分析装置全体の構造が複雑になるなどの欠点があった。

【００１３】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、ゲル泳動媒体と接触することなくＰＣＲ増幅反応を
行うことができ、特別な加熱ヒータ装置を必要としない
新規なＤＮＡサンプル分析用マイクロプレートを提供す
ることである。

【００１４】

【課題を解決するための手段】前記課題は、一方の端部
にグランド側泳動媒体用ウエルを有し、他方の端部に高
電圧側泳動媒体用ウエルを有する分離用チャネルと、一
方の端部に高電圧側泳動媒体用ウエルを有し、前記分離
用チャネルと交差する導入用チャネルとを基板中に有す
る電気泳動用マイクロプレートにおいて、前記導入用チ
ャネルの他方の端部はバッファ用ウエルを有し、該バッ
ファ用ウエルと連通する反応チャネルを更に有し、該反
応チャネルの他方の端部にはＰＣＲ増幅反応用反応液注
入用ウエルが設けられており、該反応液注入用ウエルと
被分析サンプル注入用ウエルとの間の反応チャネルの中
間にＰＣＲ増幅反応用反応ポットが設けられていること
を特徴とする電気泳動用マイクロプレートにより解決さ
れる。

【００１５】前記ＰＣＲ増幅反応用反応ポットの配設位
置とほぼ同じ位置に、加熱手段を拝謁することが好まし
い。

【００１６】

【発明の実施の形態】以下、図面を参照しながら本発明
の電気泳動用マイクロプレートを具体的に説明する。本
発明のマイクロプレートにおいて従来のマイクロプレー
トと同じ構成部分については説明の便宜のために、同じ
符号を用いて説明する。

【００１７】図１は本発明による電気泳動用マイクロプ
レート１の上面図である。本発明のマイクロプレート１
も従来のマイクロプレート９０と同様に、透明基板１０
０に、ＤＮＡサンプル分離用チャネル１０２と、この分
離用チャネル１０２と直交するＤＮＡサンプル導入用チ
ャネル１０４を有する。分離用チャネル１０２の両端に
はグランド側泳動媒体用ウエル１０６と高電圧側泳動媒
体用ウエル１０８が配設されている。また、導入用チャ
ネル１０４の一方の端部には高電圧側泳動媒体用ウエル
１１２が配設されている。

【００１８】従来のマイクロプレート９０と異なる点
は、本発明のマイクロプレート１では、導入用チャネル
１０４の他方の端部のグランド側のＤＮＡサンプル用ウ
エル１１０の代わりに、グランド側となるべきバッファ
用ウエル９が配設されていることである。また、従来の
マイクロプレート９０と更に異なる点は、本発明のマイ
クロプレート１が、バッファ用ウエル９に連通するＰＣ
Ｒ増幅反応用の反応チャネル３を有することである。こ
の反応チャネル３の他方の端部には、ＰＣＲ増幅反応を
行うべきＤＮＡ断片及び反応チャネル３の、ＰＣＲ増幅
反応試薬類を注入するための反応液注入ウエル５が設け
られていること及び反応液注入ウエル５とバッファ用ウ
エル９との間にＰＣＲ増幅反応ポット７が設けられてい
ることである。ＤＮＡ断片のＰＣＲ増幅反応は実質的
に、このＰＣＲ増幅反応ポット７内で行われる。

【００１９】本発明のマイクロプレート１によれば、反
応チャネル３とサンプル導入用チャネル１０４との間に
バッファ用ウエル９が設けられている。分離用チャネル
１０２及び導入用チャネル１０４にゲル泳動媒体を充填
し、反応チャネル３にＰＣＲ増幅反応用反応液を充填し
た後、バッファ用ウエル９にバッファ液を分注する。バ
ッファ用ウエル９内では、導入用チャネル１０４からの
ゲル泳動媒体と反応チャネル３からの反応液が混合され
ていることもあるが、実際のＰＣＲ増幅反応が行われる
反応ポット７までは反応チャネル３で接続されているた
め、バッファ用ウエル９内のゲル泳動媒体による反応阻
害などの悪影響は反応ポット７には殆ど及ばない。

【００２０】ＰＣＲ増幅反応終了後は、ウエル１１２を
高圧側に、又、反応液注入ウエル５をグランド側にする
ことにより、増幅サンプルを反応ポット７からバッファ
用ウエル９を通して導入用チャネル１０４に電気泳動に
より移動させることができる。

【００２１】図２は図１における反応ポット７の部分拡
大図である。図示されているように、反応ポット７は略
Ｓ字状に蛇行させて形成されている。これは、ＰＣＲ増
幅反応に必要な反応容積を確保するため及びＰＣＲ増幅
反応用反応液充填時に、反応ポット内に気泡が入るのを
防止するためである。反応ポット７を単純な真円形に成
形すると、ＰＣＲ増幅反応用反応液充填時に反応ポット
７内に気泡が残りやすく、一度気泡ができると取り除く
ことは不可能であり、マイクロプレート自体を廃棄する
こととなる。反応ポット７を略Ｓ字状に蛇行させて形成
する別の利点は、反応ポット内の液面高さを低くするこ
とで、液内での温度ムラを小さくすることができる。従
来のポットの場合、基板厚さと同じ深さになるので液面
が高くなり、液の上面と下面で温度が異なりＰＣＲ増幅
反応が不均一に進行することがあった。更に別の利点
は、反応液の液面を下げることにより、加熱温度に対す
る追従性を向上させることができることである。その結
果、ＰＣＲ増幅反応を高速化させることができる。しか
し。前記のような目的と効果を達成できれば、図示され
たようなＳ字状以外の形状の反応ポット７も使用でき
る。反応チャネル３と反応ポット７との接続部は丸みを
おびさせるか又は鈍角に形成することが好ましい。ま
た、反応ポット７も角部が無く、全体的に曲線状である
ことが好ましい。反応チャネル３と反応ポット７との接
続部が丸みを帯び、更に反応ポット７が全体的に曲線状
であれば、反応ポット７のどこにも気泡が発生しない。
これに対して、この接続部が例えば、直角の場合、この
角部に空気などの気泡が発生し、反応チャネル３を閉塞
する危険性がある。また、本発明のマイクロプレート１
では、バッファ用ウエル９を介して導入用チャネル１０
４と反応チャネル３が接続されているので、導入用チャ
ネル１０４の深さを変えても、チャネル間に段差が生じ
ないため、ゲル泳動媒体及びＤＮＡサンプル注入時に段
差部に気泡が発生する危険性もない。

【００２２】反応チャネル３の溝は一般的に、深さが１
０μｍ〜１０００μｍの範囲内であり、幅（ｗ_１）は１
０μｍ〜５００μｍの範囲内である。反応ポット７の溝
の深さは反応チャネル３の溝の深さと同一であるが、そ
の溝幅（ｗ_２）は反応チャネル３の溝幅（ｗ_１）と同一
であるか又はこれよりも若干大きい程度である。反応ポ
ット７の溝幅ｗ_２が小さい場合は、ＰＣＲ増幅反応に必
要な反応容積を確保するためにＳ字の折り返し数を増や
して反応容積を確保することが好ましい。一方、反応ポ
ット７の溝幅ｗ_２が大きい場合は、ＰＣＲ増幅反応用反
応液充填時に気泡が混入し易くなるので、気泡混入防止
対策が必要になる。。

【００２３】分離用チャネル１０２及び導入用チャネル
１０４の各溝の幅は一般的に、深さが０．１μｍ〜１０
００μｍの範囲内であり、幅は１μｍ〜５００μｍの範
囲内である。各ウエル１０８，１１２，１０６，５及び
９の上部直径は一般的に、φ１〜φ４の範囲内である。
基板１００の厚さは一般的に、１ｍｍ〜３ｍｍの範囲内
である。従って、ウエルの深さも一般的に、１ｍｍ〜３
ｍｍの範囲内である。従って、図面では、各チャネル及
びウエルは説明のために正規の縮尺を無視して誇張して
図示されている。

【００２４】図３に示されるように、本発明のマイクロ
プレート１では、基板１００の下面に接着される遮蔽シ
ート１１４の一方の面にパターン形成された発熱部１８
が設けられている。熱効率の点から、発熱部１８は遮蔽
シート１１４の基板１００との接合面側に設けることが
好ましい。発熱部１８の両端には電源（図示されていな
い）と接続するための接続端子２０，２０が配設されて
いる。発熱部１８のパターン厚は例えば、０．５μｍ程
度である。発熱部１８の上面には例えば、テフロン（登
録商標）コーティング（図示されていない）などを施す
こともできる。発熱部１８は基板１００の上面に配設す
ることもできる。図示されているように、発熱部１８の
配設位置は反応ポット７の配設位置と同じ位置である。

【００２５】図４は発熱部の別の実施態様を示す平面図
である。図４に示されるように、発熱部１８に加えて、
温度測定部２２が発熱部１８の略中央部付近に配設され
ている。温度測定部２２の両端には温度表示計（図示さ
れていない）と接続するための接続端子２４，２４が配
設されている。発熱部１８及び温度測定部２２のパター
ン厚は例えば、０．５μｍ程度である。図３と同様に、
発熱部１８及び温度測定部２２の上面には例えば、テフ
ロンコーティング（図示されていない）などを施すこと
もできる。

【００２６】図５は図４に示された発熱部１８及び温度
測定部２２の部分拡大図である。発熱部１８は例えば、
白金（Ｐｔ）又はクロム（Ｃｒ）などの導電性金属から
なるパターンである。線幅は例えば、０．３ｍｍ程度で
ある。発熱部１８は反応ポット７を完全にカバーするの
に必要十分な平面積を有することが好ましい。例えば、
発熱部１８は１０ｍｍ×１０ｍｍ程度の面積を有するこ
とが好ましい。温度測定部１９は例えば、線幅が０．２
ｍｍ程度の銅パターン２６と、線幅が０．２ｍｍ程度の
コンスタンタンパターン２８とで構成される熱伝対であ
ることができる。銅パターン２６とコンスタンタンパタ
ーン２８とは中央で接続されている。銅及びコンスタン
タン以外の、例えば、クロメル・アルメル等のパターン
化可能な金属類からなる熱電対も使用できる。発熱部１
８及び温度測定部２２はスクリーン印刷、転写などの常
用の手段で遮蔽シート１１４又は基板９０の表面上に配
設することができる。

【００２７】図６は発熱部の更に別の実施態様を示す平
面図である。この場合、発熱部１８は、電源（図示され
ていない）と接続するための端子２０，２０の他に、温
度測定端子３０，３０を有する。この場合、発熱部１８
に用いる導電性金属は白金又はクロムなどの測温抵抗体
でなければならない。これらの測温抵抗体は温度に比例
して抵抗値が変化する特性を有するので、この特性を利
用した温度センサーなどに用いられている材料である。
従って、この実施態様では、発熱部１８を構成する導電
性金属パターンは、温度測定端子３０，３０にも接続さ
れている。発熱部１８を構成する導電性金属パターンの
端子２０，２０を加熱用電源（図示されていない）に接
続して加熱し、温度測定端子３０，３０の抵抗値を適当
な温度測定器（図示されていない）でモニターすること
により１種類の導電性金属パターンのみで、加熱と温度
測定の両方の機能を達成させることができる。

【００２８】

【発明の効果】以上説明したように、本発明のマイクロ
プレートによれば、反応チャネルとサンプル導入用チャ
ネルとの間にバッファ用ウエルが設けられているので、
分離用チャネル及び導入用チャネルにゲル泳動媒体を充
填し、反応チャネル３にＰＣＲ増幅反応用反応液を充填
した後、バッファ用ウエル９にバッファ液を分注して
も、バッファ用ウエル内では、導入用チャネルからのゲ
ル泳動媒体と反応チャネルからの反応液が混合されてい
ることもあるが、実際のＰＣＲ増幅反応が行われる反応
ポットまでは反応チャネルで接続されているため、バッ
ファ用ウエル内のゲル泳動媒体によるＰＣＲ増幅反応阻
害などの悪影響は反応ポットには殆ど及ばない。また、
マイクロプレート自体に加熱手段が配設されているの
で、ＰＣＲ増幅反応を迅速に進行させることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明による電気泳動用マイクロプレートの一
例の平面図である。

【図２】図１における反応ポットの部分拡大図である。

【図３】本発明による電気泳動用マイクロプレートにお
いて加熱手段が配設された実施態様の平面図である。

【図４】本発明による電気泳動用マイクロプレートにお
いて加熱手段の他に温度測定手段を併設した実施態様の
平面図である。

【図５】図４に示された加熱手段と温度測定手段の部分
拡大平面図である。

【図６】本発明による電気泳動用マイクロプレートにお
いて一つの導電性金属パターンが加熱手段と温度測定手
段の両方の機能を果たす実施態様の平面図である。

【図７】従来のＤＮＡ電気泳動用マイクロプレートの一
例の概要平面図である。

【図８】図７におけるVIII−VIII線に沿った断面図であ
る。

【図９】図７に示されたＤＮＡ電気泳動用マイクロプレ
ートの使用方法を示す概要模式図である。

【図１０】図９に示されたステップ（１）〜ステップ
（４）で行われる作業の模式図である。

【図１１】従来のＤＮＡ電気泳動用マイクロプレートの
加熱・冷却手段の構成の一例を示す概要図である。

【符号の説明】

１本発明の電気泳動用マイクロプレート３反応チャネル５反応液注入ウエル７反応ポット９バッファウエル１８発熱部２２熱電対

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ｇ０１Ｎ 27/26 ３３１Ｈ３１５Ｋ (72)発明者児玉正吉東京都渋谷区東３丁目16番３号日立電子エンジニアリング株式会社内 (72)発明者町田浩昭東京都渋谷区東３丁目16番３号日立電子エンジニアリング株式会社内Ｆターム(参考） 2G045 AA40 BB60 DA12 DA13 FA11 FB05 HA14 JA07 4B029 AA07 AA08 AA23 AA27 BB16 BB20 CC01 FA12 FA15 GA08 GB09 GB10

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一方の端部にグランド側泳動媒体用ウエ
ルを有し、他方の端部に高電圧側泳動媒体用ウエルを有
する分離用チャネルと、一方の端部に高電圧側泳動媒体
用ウエルを有し、前記分離用チャネルと交差する導入用
チャネルとを基板中に有する電気泳動用マイクロプレー
トにおいて、前記導入用チャネルの他方の端部はバッファ用ウエルを
有し、該バッファ用ウエルと連通する反応チャネルを更に有
し、該反応チャネルの他方の端部にはＰＣＲ増幅反応用反応
液注入用ウエルが設けられており、該反応液注入用ウエ
ルと被分析サンプル注入用ウエルとの間の反応チャネル
の中間にＰＣＲ増幅反応用反応ポットが設けられている
ことを特徴とする電気泳動用マイクロプレート。
【請求項２】前記ＰＣＲ増幅反応用反応ポットは前記
反応チャネルの溝の幅よりも広い幅を有する略Ｓ字状の
形状を有することを特徴とする請求項１に記載の電気泳
動用マイクロプレート。
【請求項３】前記ＰＣＲ増幅反応用反応ポットの配設
位置とほぼ同じ位置に、加熱手段を更に有することを特
徴とする請求項１に記載の電気泳動用マイクロプレー
ト。
【請求項４】前記加熱手段と共に、熱電対からなる温
度測定手段を更に有することを特徴とする請求項３に記
載の電気泳動用マイクロプレート。
【請求項５】前記加熱手段は誘電体パターンからな
り、前記誘電体パターンが温度測定手段としても兼用さ
れるされることを特徴とする請求項３に記載の電気泳動
用マイクロプレート。