JP2002543386A

JP2002543386A - ヒト腎臓疾患の診断

Info

Publication number: JP2002543386A
Application number: JP2000614035A
Authority: JP
Inventors: シャー，サドヒル，ブイ．
Original assignee: シヴァバイオメディカル，エルエルシー
Priority date: 1999-04-23
Filing date: 2000-04-21
Publication date: 2002-12-17
Also published as: ATE403862T1; EP1173757B1; CY1108468T1; WO2000065346A1; EP1173757A1; JP2010248242A; PT1173757E; AU4653400A; DK1173757T3; DE60039756D1; ES2311456T3; WO2000065346A9; CA2371242A1

Abstract

(57)【要約】腎臓疾患は、ヒトの尿触媒鉄を測定することにより診断される。進行性腎臓疾患は、ヒトに鉄キレート化剤を投与することにより治療される。特に、進行性腎臓疾患に罹患したヒトへの鉄キレート化剤の投与により、腎臓疾患の進行を本質的に停止することができ、そして腎臓疾患の重篤度を低減することができる。本方法は、進行性腎臓疾患に罹患したヒトの尿中の触媒鉄含量を測定する工程およびヒトに鉄キレート化剤を投与する工程を含む。本方法は、鉄キレート化剤の投与前、投与中または投与後に全尿蛋白質含量、血液サンプル中の血液尿素窒素またはクレアチニンを測定する工程を含み得る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】関連出願本出願は、共に１９９９年４月２３日に出願された米国仮特許出願第６０／１
３０，９０３号および第６０／１３０，９０８号の恩恵を主張する。これらの教
示は参照として本明細書にすべて組み込まれる。発明の背景腎臓疾患は進行性であり得、終末期の腎疾患、そして最終的には死に至る。毎
年、世界規模で約６５０，０００人のヒトの患者が終末期の腎疾患を患い、治療
コストは約２百億ドルになると見積もられている（Ｋｌａｈｒ，Ｓ．，Ｃｏｎｔ
ｒｉｂ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１１８：１−５（１９９６））。

【０００２】腎臓疾患、特に進行性腎臓疾患を診断する現行の方法には、蛋白質レベルの増
大について尿素をモニターし、腎生検を行なうことが含まれる。腎臓疾患、特に
進行性腎臓疾患の有用な治療には、ステロイド、アルキル化剤およびシクロスポ
リンの使用が含まれる（ｄｅＭａｔｔｏｓ，Ａ．Ｍ．ら、８６１−８８５頁、
Ｉｎ：“ＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃＲｅｎａｌＤｉｓｅａｓｅｓ，”、Ｎｅｉ
ｌｓｏｎ，Ｅ．Ｇ．ら編、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ−ＲａｖｅｎＰｕｂｌｉｓｈ
ｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ（１９９７））。上記の診断方法は、
診断の前に腎臓への有意なダメージが発生し得るので、不十分であることが多い
。同様に、上記の治療は、細胞毒性や全身性毒性などの有害な副作用を伴うこと
が多いため、頻繁に腎臓疾患の進行を停止するのに失敗し、したがって、不十分
なものである。

【０００３】動物モデルをいくつかの腎臓疾患を研究するために使用したが、ヒトの腎臓疾
患の診断や治療にまで拡大すると、動物モデルは多くの制限を受ける。例えば、
腎臓疾患の動物モデルは、ヒトの腎臓疾患を必ずしも描いておらず、ステロイド
の投与は、実験動物モデルにおける腎臓疾患の治療に適度に有効であるが、ヒト
における腎臓疾患の治療には比較的無効である（Ｓｉｅｇｅｌ，Ｎ．Ｊ．ら、Ｋ
ｉｄｎｅｙＩｎｔ．２５：９０６−９１１（１９８４）；Ｃｒｏｎｉｎ，Ｒ．
Ｅ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２４８：Ｆ３３２−Ｆ３３９（１９８５）
；Ｃｒｏｎｉｎ，Ｒ．Ｅ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２５１：Ｆ４０８−
Ｆ４１６（１９８６）；Ｓｅｉｋｅｎ，Ｇ．ら、ＫｉｄｎｅｙＩｎｔ．４５：
１６２２−１６２７（１９９４）；Ｓｈａｗ，Ｓ．Ｇ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎ
ｖｅｓｔ．８０：１２３２−１２３７（１９８７）；Ａｌｌｇｒｅｎ，Ｒ．Ｌ．
ら、Ｎ．Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３６：８２８−８３４（１９９７）；Ｐａｌｌ
ｅｒ，Ｍ．Ｓ．、Ｓｅｍ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１８：４８２−４８９（１９９８）
；Ｓａｖｉｌｌ，Ｊ．ら、Ｉｎ：“ＯｘｆｏｒｄＴｅｘｔｂｏｏｋｏｆＣ
ｌｉｎｉｃａｌＮｅｐｈｒｏｌｏｇｙ”、Ｄａｖｉｓｏｎ，Ａ．Ｍ．ら編、Ｏ
ｘｆｏｒｄＭｅｄｉｃａｌＰｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、４０３−４３９頁（
１９９８）；Ｈｉｒｓｃｈｂｅｒｇ，Ｒ．ら、ＫｉｄｎｅｙＩｎｔ．５５：２
４２３−２４３２（１９９９））。したがって、動物モデル系は、一般に、ヒト
において進行性腎臓疾患の進行を停止し、その重篤度を低減し、進行性腎臓疾患
を治療し、または診断する方法を規定し且つ同定するために使用することができ
ない。したがって、新規の、改善され、かつ有効な、ヒトにおける腎臓疾患の重
篤度を低減し、腎臓疾患を診断しかつ治療する方法を開発する必要がある。

【０００４】発明の要約本発明は、ヒトにおける腎臓疾患の診断方法および治療方法に関する。特に本
発明は、進行性腎臓疾患の治療方法に関する。

【０００５】一つの実施態様において、前記方法は、尿サンプル中の触媒鉄を測定する工程
を含む、ヒトの腎臓疾患の診断を包含する。好ましい実施態様において、前記触
媒鉄は、参照蛋白質に関して測定される。特に好ましい実施態様において、参照
蛋白質は尿クレアチニンである。

【０００６】別の実施態様において、本発明は、ヒトから採取された尿サンプル中の触媒鉄
含量を測定する工程、および尿サンプル中の触媒鉄含量を対照サンプル中の触媒
鉄含量と比較する工程を含むヒトの腎臓疾患の治療方法に関する。対照サンプル
中の触媒鉄含量より多い尿サンプル中の触媒鉄含量は腎臓疾患を示す。

【０００７】また、別の実施態様において、本発明は、ヒトに鉄キレート化剤を投与する工
程を含む、約１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋白質を超える尿中の触媒鉄含量を有する
ヒトにおける腎臓疾患の治療方法を含む。

【０００８】さらなる実施態様において、本発明は、対照サンプルの触媒鉄含量を超える尿
中の触媒鉄含量を有するヒトに投薬量の鉄キレート化剤を投与する工程およびヒ
トから初回尿サンプルを採取する工程を含むヒトにおける腎臓疾患の治療方法を
含む。初回尿サンプル中の触媒鉄含量を測定し、対照サンプル中の触媒鉄含量に
おける触媒鉄含量と比較する。

【０００９】前記方法は、少なくとも一つの第２投薬量の鉄キレート化剤を投与する工程を
さらに有することができる。前記第２投薬量の量は、尿サンプル中の測定された
触媒鉄含量と対照サンプル中の触媒鉄含量との比較により決定される。

【００１０】別の実施態様において、前記方法は、少なくとも一つの第２尿サンプルを採取
する工程および第２尿サンプル中の触媒鉄含量を測定する工程をさらに含む。第
２尿サンプル中の触媒鉄含量は、初回尿サンプル、対照サンプルまたはその両方
の中の触媒鉄含量と比較される。

【００１１】また、本発明の別の実施態様は、ヒトにおける腎臓疾患の進行を決定すること
を含む。ヒトから採取された初回尿サンプルおよび少なくとも一つの追加の尿サ
ンプル中の触媒鉄含量が測定される。追加の尿サンプル中の触媒鉄含量は、初回
尿サンプル中の触媒鉄含量と比較される。初回尿サンプル中の触媒鉄含量より多
い追加の尿サンプル中の触媒鉄含量の増大は、ヒトにおける腎臓疾患の進行を示
す。

【００１２】また、他の実施態様において、本発明は、進行性腎臓疾患に罹患したヒトを治
療するために鉄キレート化剤を投与する有効性を評価する方法に関する。ヒトか
ら採取された初回尿サンプル中の触媒鉄含量は、ヒトから採取された第２尿サン
プルの触媒鉄含量と比較される。第２尿サンプルは、初回尿サンプルを採取した
後および鉄キレート化剤の投与後に採取される。第２尿サンプル中と初回尿サン
プル中の触媒鉄含量の比較は、腎臓疾患の進行を軽減するための鉄キレート化剤
の投与の有効性を示す。

【００１３】別の実施態様において、本発明は、前記鉄キレート化剤を用いる進行性腎臓疾
患の治療の恩恵を受ける、進行性腎臓疾患に罹患するヒトを同定する方法に関す
る。ヒトから採取された尿サンプル中の触媒鉄含量を測定する。約１５ｎｍｏｌ
／ｍｇ参照蛋白質より多い尿サンプル中の触媒鉄含量は、前記鉄キレート化剤を
用いる進行性腎臓疾患の治療の恩恵を受ける、進行性腎臓疾患に罹患するヒトを
同定する。

【００１４】また、別の実施態様において、本発明は、対照サンプルを超える尿中の触媒鉄
含量を有する微量アルブミン尿症に罹患したヒトに、投薬量の鉄キレート化剤を
投与する工程を含む、ヒトにおける微量アルブミン尿症の治療方法に関する。初
回尿サンプルをヒトから採取し、そして初回尿サンプル中の触媒鉄含量を測定す
る。初回尿サンプル中の触媒鉄含量は、対照サンプル中の触媒鉄含量と比較され
る。

【００１５】本明細書で記載される発明は、ヒトにおける腎臓疾患の診断方法、治療方法、
その進行を停止する方法、およびその重篤度を低減する方法を提供する。請求さ
れる発明の利点には、例えば、動物モデルには記載されておらず、腎臓疾患の現
存の動物モデルからも予期しえない手法での、ヒトにおける進行性腎臓疾患の治
療が含まれる。本発明の方法は、有意な副作用なしに、ヒトにおいて進行性腎臓
疾患を治療することができる。本発明の方法は、腎臓疾患を治療し、最終的に終
末期の腎疾患を防ぐのに有効な手法を提供する。

【００１６】したがって、鉄キレート化剤を用いる対照レベルより多い尿中の触媒鉄含量を
有するヒトの治療は、腎臓疾患の進行を停止し、逆行させ、またはその重篤度を
低減することができ、それにより、生活の質や平均余命を増大する。

【００１７】発明の詳細な説明本発明の特徴および他の詳細を、本発明の工程または本発明の部分の組み合わ
せのいずれかとしてより詳しく記載し、特許請求の範囲において示す。本発明の
特定の実施態様は、説明のために示され、本発明の制限として示すのではない。
本発明の主な特徴は、本発明の範囲を逸脱することなく様々な実施態様に使用さ
れ得る。

【００１８】本発明は、ヒトの尿中の触媒鉄が腎臓疾患の存在の指標であり得るという発見
に関する。本発明は、さらに、鉄キレート化剤の投与が腎臓疾患に罹患するヒト
の尿中の蛋白質含量を低減するという発見に関する。特に、鉄キレート化剤であ
るデフェリプロン（deferiprone)は、進行性腎臓疾患に罹患するヒトから採取し
た尿中の蛋白質含量と血清クレアチニン、両方とも腎臓損傷の指標である、を低
減することがわかっている。

【００１９】「腎臓疾患」とは、一般に、ヒトにおける腎臓の機能（例えば、蛋白質の漏出
を防ぐ、窒素性老廃物の排泄を防ぐ）を傷つける少なくとも一つの腎臓の疾患を
意味する。腎臓疾患は、腎臓の初期の病状（例えば、糸球体または細管を損傷す
る）または生物学的な機能を行なう（例えば、蛋白質を保持する）腎臓の能力に
有害な影響を与える別の器官（例えば、膵臓）の初期の病状に由来しうる。した
がって、ヒトにおける腎臓疾患は、疾患の直接または間接の作用であり得る。腎
臓に対する間接的な作用の結果または帰結としての腎臓疾患の例は、糖尿病また
は全身性狼瘡の帰結としての腎臓疾患である。腎臓疾患という用語は、「腎臓の
疾患」という言い回しで、互換的に使用される。腎臓疾患は、例えば、腎臓の腎
皮質または腎髄質のいずれかにおける糸球体、細管または間質組織に対する何ら
かの変化、損傷、または外傷の結果または帰結であり得る。

【００２０】本発明の好ましい実施態様において、腎臓疾患は進行性腎臓疾患である。本明
細書に用いられるように「進行性腎臓疾患」は、経時的（例えば、数日、数週間
、数カ月、数年）に腎機能の欠損を導く腎臓のあらゆる疾患を意味する。「腎機
能」は、一般に、蛋白質を保持し、それにより蛋白尿を防ぐ能力のような、腎臓
の生理的な特徴を意味する（例えば、尿クレアチニン、約０．１５ｇ／２４時間
より大きな量の蛋白質の排出）。腎機能は、例えば、糸球体の濾過速度（例えば
、クレアチニンクリアランス）、尿中の蛋白質の排出、血液尿素窒素、血清また
は血漿クレアチニン、またはそれらの組み合わせにより評価され得る。

【００２１】糸球体濾過速度は、一般に、腎（本明細書では腎臓ともいう）排出能と呼ばれ
る腎機能の指標である。糸球体の濾過を評価するための指標には、例えば、クレ
アチニンクリアランスおよびイヌリンクリアランスが含まれる。糸球体濾過速度
（例えば、クレアチニンクリアランス）を含む、腎機能を評価するための技術の
実施例の記載および議論は、例えば、Ｌａｒｓｅｎ，Ｋ．Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．
Ａｃｔａ．４１：２０９−２１７（１９７２）；Ｔａｌｋｅ，Ｈ．ら、Ｋｌｉｎ
，Ｗｓｃｒ４１：１７４（１９６５）；Ｆｕｊｉｔａ，Ｙ．ら、Ｂｕｎｓｅｋ
ｉＫｇａｋｕ３２：３７９−３８６（１９８３）；Ｒｏｌｉｎ，Ｈ．Ａ．II
I,ら、Ｉｎ：“ＴｈｅＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏ
ｆＮｅｐｈｒｏｌｏｇｙ”、第２版、Ｊａｃｏｂｓｏｎ，Ｈ．Ｒ．ら、Ｍｏｓ
ｂｙ−ＹｅａｒＢｏｏｋ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，８−１３頁（
１９９５）；Ｃａｒｌｓｏｎ，Ｊ．Ａ．ら、Ｉｎ：“Ｄｉｓｅａｓｅｓｏｆ
ｔｈｅＫｉｄｎｅｙ”、第５版、Ｓｃｈｒｉｅｒ，Ｒ．Ｗ．ら編、Ｌｉｔｔｌ
ｅ，ＢｒｏｗｎａｎｄＣｏ．，Ｉｎｃ．，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ，３６１−４
０５頁（１９９３）に見られる、これらの全ての教示は、参照により、全て本明
細書に組み込まれる。例えば、内因性クレアチニンクリアランスは、以下のよう
にして決定される：Ｃｒ＝ＵｃｒＶ／ＰＣｒ〔式中、Ｃｒ＝クレアチニンのクリアランス（ｍｌ／ｍｉｎ）；Ｕｃｒ＝尿素ク
レアチニン（ｍｇ／ｄｌ）、Ｖ＝尿素の容量（ｍｌ／ｍｉｎ−２４時間の容量に
ついて１４００で割る、そしてＰＣｒ＝血漿クレアチニン（ｍｇ／ｄｌ）〕

【００２２】本明細書で記載された方法により治療される進行性腎臓疾患には、最終的に、
終末期の腎疾患を導き得るあらゆる腎臓疾患が含まれる。本発明の進行性腎臓疾
患は、例えば、地中海貧血または鎌状赤血球貧血などの疾患において輸血を繰り
返した結果として、外因性鉄過負荷に由来する腎臓の疾患ではない。本発明の方
法により診断されまたは治療され得る進行性疾患は、例えば、腎臓（例えば、糸
球体、細管）における内因性鉄沈着物に関連し得る。内因性鉄は、例えば、ヒト
におけるフェリチン、ミトコンドリアまたはシトクロームＰ４５０から放出され
得る。

【００２３】より好ましい実施態様において、腎臓疾患は、進行性糸球体腎臓疾患である。
本発明の方法による治療に特に好適な進行性糸球体腎臓疾患には、例えば、糖尿
病性腎症（例えば、Ｉ型もしくはII型の糖尿病、または全身性狼瘡の結果として
）、原発性糸球体腎炎（例えば、膜性腎症、巣状分節状糸球体硬化症、膜増殖性
糸球体腎炎、広汎増殖性糸球体腎炎、膜性巣状分節状糸球体硬化症) および続発
性糸球体腎炎（例えば、糖尿病性腎症、虚血性腎症）が含まれる。

【００２４】腎臓疾患は、ヒトの尿中の触媒鉄を測定することにより、本発明の方法によっ
てヒトにおいて診断され得る。ヒトは、本明細書において、患者または個体とも
いう。好ましい実施態様において、尿中の触媒鉄含量が約１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参
照蛋白質よりも大きい場合、腎臓疾患についてヒトを診断することができる。

【００２５】「触媒鉄」は、Ｆｅ²⁺をいう。触媒鉄は、フリーラジカル反応を触媒すること
が可能なものである。Ｆｅ²⁺状態の鉄は、ハーバー−ワイス反応を触媒すること
ができ、それは過酸化水素を還元し、ヒドロキシルラジカルの形成を促進する。
ハーバー−ワイス反応は、以下のように示される：Ｏ_2- ＋Ｆｅ³⁺ → Ｏ₂＋Ｆｅ²⁺ Ｆｅ²⁺ ＋Ｈ₂Ｏ₂→ Ｆｅ³⁺ ＋ＯＨ・＋ＯＨ^- Ｏ_2- ＋Ｈ₂Ｏ₂→ Ｏ₂＋ＯＨ・＋ＯＨ^-

【００２６】触媒鉄は、ハーバー−ワイス反応以外の反応においてヒドロキシラジカルの形
成を生じ得ることも想像される。

【００２７】触媒鉄含量を決定する方法は公知であり（例えば、Ｇｕｔｔｅｒｉｄｇｅ，Ｊ
．Ｍ．Ｃ．ら、ＢｉｏｃｈｅｍＪ．１９９：２６３−２６５（１９８１）；Ｙ
ｅｒｇｅｙ，Ａ．Ｌ．Ｊ．Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ１２６：３５５Ｓ−３６１Ｓ（
１９９６）；Ｉａｎｃｕ，Ｔ．Ｃ．ら、Ｂｉｏｍｅｔａｌｓ９：５７−６５（
１９９６）；Ａｒｔｉｓｓ，Ｊ．Ｄ．ら、Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１４：３
１１−３１５（１９８１）；Ｓｍｉｔｈ，Ｆ．Ｅ．ら、Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．１７：３０６−３１０（１９８４）；Ａｒｔｉｓｓ，Ｊ．Ｄ．ら、Ｍｉｃｒ
ｏｃｈｅｍ．Ｊ．２８：２７５−２８４（１９８３）を参照のこと、これらの教
示は全て参照により本明細書に組み込まれる）、実施例に記載されている。前記
方法には、分光測光、質量分析法（例えば、熱イオン化質量分析、レーザーミク
ロプローブ質量解析、誘導架橋化プラズマ質量分析法、原子衝撃二次イオン質量
分析）が含まれる。また、触媒鉄含量は、触媒鉄の量、レベルまたは濃度ともい
う。

【００２８】好ましい態様において、触媒鉄含量を尿サンプル中の参照蛋白質に関して測定
する。「参照蛋白質に関して」という言い回しは、本明細書に使用されるように
、尿中の蛋白質の濃度（例えば、ミリグラム）あたりの測定の単位（例えば、ナ
ノモル）として尿中の触媒鉄含量を示すことを意味する。触媒鉄は、例えば、尿
中の蛋白質のミリグラム（ｍｇ）あたりの触媒鉄のナノモル（ｎｍｏｌ）として
示され得る。好ましい態様において、参照蛋白質は、尿クレアチニンである。

【００２９】さらに、あるいはまた、触媒鉄含量を、糸状体濾過速度、特に前記のクレアチ
ニンクリアランスに関して測定する。

【００３０】好ましくは、腎臓疾患（例えば、蛋白尿、血液尿素窒素の増加、血清クレアチ
ニンの増加）の臨床的な症状（本明細書では腎臓疾患の臨床的徴候ともいう）の
発現前にヒト由来の尿サンプルで触媒鉄含量を測定する。さらに、あるいはまた
、腎臓疾患（例えば、蛋白尿）の臨床的な症状の発現後にヒトから採取した尿サ
ンプル中で触媒鉄含量を測定する。腎臓疾患に罹患しているヒトの触媒鉄を測定
し、腎臓疾患に罹患していないヒトと比較する（表１および２を参照）。

【００３１】「鉄キレート化剤」は、Ｆｅ³⁺由来の触媒鉄の形成を防ぐため、またはハーバ
ー−ワイス反応もしくはヒドロキシルラジカルを発生し得る他の反応において鉄
（Ｆｅ³⁺もしくはＦｅ²⁺）の相互作用、作用もしくは関与を妨げる、阻害するも
しくは妨害するために、鉄、Ｆｅ³⁺またはＦｅ²⁺のいずれか、と相互作用するこ
とができる分子をいう。鉄キレート化剤と鉄、Ｆｅ³⁺またはＦｅ²⁺のいずれか、
または両方との間の相互作用は、例えば、結合相互作用、立体障害の結果として
の相互作用または鉄と鉄キレート化剤との間の互変（reciprocal) 効果であり得
る。鉄キレート化剤は、例えば、Ｆｅ³⁺からＦｅ²⁺への変換を妨げることができ
、それにより、過酸化水素の還元とハーバー−ワイス反応におけるヒドロキシル
ラジカルの形成を間接的に妨げる。かわりに、あるいはまた、鉄キレート化剤は
Ｆｅ²⁺と直接的に相互作用し、例えば、ハーバー−ワイス反応においてヒドロキ
ルラジカルの形成を妨げることができる。

【００３２】鉄キレート化剤は天然または非天然（例えば、天然には見られないアミノ酸）
アミノ酸からなるペプチド、ポリエチレングリコールカルバメート、脂肪親和性
または非脂肪親和性のポリアミノカルボン酸、多価陰イオン性アミン類または置
換ポリアザ化合物であり得る。好ましい実施態様において、鉄キレート化剤は、
デフェリプロン（１，２−ジメチル−３−ヒドロキシ−ピリド−４−オン）Ｌ１
である。鉄キレート化剤は、市販のものであるか、または日常的な手法を用いて
生物学的供給源から合成もしくは精製され得る。鉄キレート化剤についての例示
的な記載および議論は、幾つかの参照文献、例えば、米国特許第５，０４７，４
２１号（１９９１）；米国特許第５，４２４，０５７号（１９９５）；米国特許
第５，７２１，２０９号（１９９８）；米国特許第５，８１１，１２７号（１９
９８）；Ｏｌｉｖｉｅｒｉ，Ｎ．Ｆ．ら、ＮｅｗＥｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３２
：９１８−９２２（１９９５）；Ｂｏｙｃｅ，Ｎ．Ｗ．ら、ＫｉｄｎｅｙＩｎ
ｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ．３０：８１３−８１７（１９８６）；Ｋｏｎｔｏｇｈ
ｉｏｒｇｈｅｓ，Ｇ．Ｊ．ＩｎｄｉａｎＪ．Ｐｅｄｉｔｒ．６０：４８５−５
０７（１９９３）；Ｈｅｒｓｈｋｏ，Ｃ．ら、Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ
ｏｇｙ１０１：３９９−４０６（１９９８）；Ｌｏｗｔｈｅｒ，Ｎ．ら、Ｐｈ
ａｒｍａｃ．Ｒｅｓ．１６：４３４（１９９９）に見られる、これらの教示は参
照により全て本明細書に取り込まれる。

【００３３】「有効量」は、鉄キレート化剤の量に関連する場合、腎臓疾患を患っているヒ
トに投与される際に、治療の有効性に十分な鉄キレート化剤の量（本明細書では
投薬量ともいう）として定義されている（例えば、尿中の触媒鉄含量、尿中の全
蛋白質含量、進行性腎臓疾患を有するヒトから採取された血液サンプル中の血液
尿素窒素またはクレアチニンを低減するのに十分な量）。鉄キレート化剤の有効
量は、ヒトに投与される場合、鉄キレート化剤を用いる治療の前、または治療の
間に測定される尿中の触媒鉄含量と比較された、尿触媒鉄含量のさらなるまたは
付加的な増加を妨げるような鉄キレート化剤の量も意味する。触媒鉄は、鉄キレ
ート化剤の投与の前、投与間または投与後に、鉄キレート化剤を用いる治療を受
けているヒトの尿において測定され得る。

【００３４】一つの実施態様において、鉄キレート化剤を単回投薬量で投与する。別の実施
態様において、鉄キレート化剤を反復投与する。好ましい実施態様において、鉄
キレート化剤を約２０ｍｇ／ｋｇヒト体重から約１５０ｍｇ／ｋｇヒト体重の間
の範囲の投薬量で経口投与する。特に好ましい実施態様において、鉄キレート化
剤を１日に３回、約２０ｍｇ／ｋｇヒト体重から約１５０ｍｇ／ｋｇヒト体重の
間の範囲の投薬量で少なくとも２〜６カ月間投与する。

【００３５】本発明の別の面は、鉄キレート化剤を用いる腎臓疾患の治療を受けている進行
性腎臓疾患を患っているヒトの尿中における蛋白質含量を測定することに関する
。蛋白質含量の測定は、尿中の全蛋白質（本明細書では全蛋白質含量ともいう）
であり得る。腎臓疾患に罹患しているヒトの尿中の蛋白質含量は、鉄キレート化
剤の投与前、投与間または投与後の１以上の時点で測定することができる。

【００３６】典型的には、尿中の蛋白質含量は、当業者に周知の日常的なアッセイを用いて
決定される。好適な方法には、計量棒、免疫沈降、比濁（例えば、スルホサリチ
ル酸(sulphosaliclic acid) 、トリコロラセチック(tricholoracetic) 、ベンゼ
トニウムクロライド）アッセイ、色素結合（例えば、クーマシーブルー、ポンソ
ー）アッセイ、ビウレット（例えば、ツチヤ試薬を用いる沈殿）アッセイおよび
フォーリン−ローリー(Folin-Lowry) アッセイが含まれる。（「Ｏｘｆｏｒｄ
ＴｅｘｔｂｏｏｋｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＮｅｐｈｒｏｌｏｇｙ”、Ｄａｖ
ｉｓｏｎ，Ａ．Ｍ．ら編、第２版、ＯｘｆｏｒｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒ
ｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹ（１９９８）；“ＰｒｉｍｅｒｏｎＫｉｄ
ｎｅｙＤｉｓｅａｓｅｓ”、Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ，Ａ．編，第２版、Ａｃａｄ
ｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹ（１９９８）、これらの教示は
参照により全て本明細書に取り込まれる）。

【００３７】別の態様において、クレアチニン、血液尿素窒素、またはその両方は、腎臓疾
患に罹患しているヒトへの鉄キレート化剤の投与前、投与間または投与後の１以
上の時点でヒトから採取された血液サンプルにおいて測定される。血液サンプル
は、動脈血液サンプルまたは静脈血液サンプルであり得る。血液サンプルは、血
清または血漿の血液サンプルであり得る。血液サンプルを採取するための方法お
よび血液尿素窒素含量やクレアチニン含量を決定するために血液サンプルを処理
する方法は、当業者に周知のものである。（例えば、Ｋａｒｌｉｎｓｋｙ，Ｍ．
Ｌ．ら、ＫｉｄｎｅｙＩｎｔ．１７：２９３−３０２（１９８０）；Ｔｏｍｆ
ｏｒｄ，Ｒ．Ｃ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．６８：６５５−６６４（１
９８１）；Ｂａｌｉｇａ，Ｒ．ら、ＢｉｏｃｈｅｍＪ．２９１：９０１−９０
５（１９９３）を参照のこと、これらの教示は参照により全て本明細書に組み込
まれる）。

【００３８】腎臓疾患に罹患しているヒトにおける血液尿素窒素、尿蛋白質含量または血清
クレアチニン含量は、腎臓疾患が進行するにつれて、ヒトにおいて増加しうる。
同様に、腎臓疾患に罹患しているヒトにおける血液尿素窒素、全尿蛋白質含量お
よび血清クレアチニン含量は、腎臓疾患の進行が本発明の方法を用いる鉄キレー
ト化剤の投与により停止されまたは妨げられる場合、減少または安定化（例えば
、同じ、実質的に一定に維持）し得る。

【００３９】好ましい実施態様において、尿中の全蛋白質含量、ヒトの血液サンプル中の血
液尿素窒素またはクレアチニン含量を対照のレベルのものとほぼ同じまで低下さ
せるのに有効な量で鉄キレート化剤を腎臓疾患を持つヒトに投与する。

【００４０】別の実施態様において、鉄キレート化剤を用いる治療の前の触媒鉄量（本明細
書において治療前尿中触媒鉄量ともいう）と比べて尿中の全蛋白質含量、ヒトの
血液サンプル中の血液尿素窒素およびクレアチニン含量のさらなる増加を妨げる
のに有効な量で鉄キレート化剤を腎臓疾患を持つヒトに投与する。

【００４１】また、別の実施態様において、尿中の全蛋白質含量、ヒトの血液サンプル中の
血液尿窒素およびクレアチニンを対照レベルよりも大きなレベルに増加するのを
妨げるのに有効な量で鉄キレート化剤を腎臓疾患もつヒトに投与する。

【００４２】特に、本発明は、投薬量の鉄キレート化剤（例えば、鉄キレート化剤約２０ｍ
ｇ／体重ｋｇおよび鉄キレート化剤約１５０ｍｇ／体重ｋｇの間の範囲）を対照
サンプル中の触媒鉄含量のものを超える（例えば、約１５ｎｍｏｌ触媒鉄／ｍｇ
参照蛋白質を超える）尿中の触媒鉄含量を有するヒトに投与する工程を含む、ヒ
トにおける腎臓疾患の治療方法に関する。ヒトが始めに処置される投薬量は、「
初回投薬量」ともいう。

【００４３】一つの実施態様において、鉄キレート化剤の投与前に尿サンプルをヒトから採
取する（本明細書では、治療前尿サンプルともいう）。別の実施態様において、
尿サンプルを鉄キレート化剤の投与後に採取する。したがって、尿サンプルは、
ヒトに鉄キレート化剤を投与し、触媒鉄含量を測定する前、測定中または測定後
にヒトから採取することができる。

【００４４】好ましい実施態様において、鉄キレート化剤（例えば、デフェリプロン）は、
尿サンプル中の触媒鉄含量を約１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋白質（例えば、尿クレ
アチニン）より多い量で約２０ｍｇ／ｋｇヒト体重から約１５０ｍｇ／ｋｇヒト
体重の間の範囲の投薬量でヒトに投与される。

【００４５】本明細書に規定されるように、「対照サンプル」は、腎臓疾患に罹患しておら
ず、必要であれば治療されるヒトと年齢、性別、民族性および健康履歴などの変
数が一致したヒトにおける目的のパラメーター（例えば、尿中の触媒鉄含量、尿
中の蛋白質含量、血液サンプル中の血液尿素窒素、血液サンプル中のクレアチニ
ン）のレベル（本明細書では量または含量ともいう）を意味する。対照サンプル
は、また、ヒトにおける目的のパラメータの予期されるレベルであり得る。本発
明の方法で治療されたヒトにおける目的のパラメーターの「予期されるレベル」
は、腎臓疾患に罹患していないヒトにおいて一般に観察されるレベルであり得、
または腎臓疾患をもつヒトより低いが、腎臓疾患に罹患しているヒトよりも高い
レベルであり得る。予期されたレベルは、治療前レベルよりも下であるかまたは
本明細書に規定された方法による治療を受けていないヒトにおける腎臓疾患の進
行の間に予期されるレベルよりも低い、目的のパラメーターの任意のレベルでも
あり得る。目的のパラメーターの「標的レベル」は腎臓疾患を患っているヒトに
ついて、ヒトが腎臓疾患を発症する前にヒトの目的のパラメーター（例えば、尿
中の触媒鉄含量）のレベルに基づいて、または腎臓疾患を呈していないヒトにお
いて観察されるレベルと比較して選択され得る。好ましい実施態様において、対
照サンプルは、約１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋白質（例えば、クレアチニン）の触
媒鉄含量を有する。

【００４６】鉄キレート化剤の投与後、ヒトにおける触媒鉄含量を初回尿サンプルにおいて
測定する。「初回尿サンプル」は、進行性腎臓疾患の治療法に関していう場合は
、鉄キレート化剤の投与後の任意の時間においてヒトから採取した尿サンプルを
いう。初回尿サンプルは、例えば、鉄キレート化剤の投与の数日後、数週後、数
ヶ月後または数年後に得てもよい。尿サンプル（例えば、初回尿サンプル）中に
おける触媒鉄含量を、対照サンプル中の触媒鉄含量と比較する。初回尿サンプル
中の触媒鉄含量はまた、鉄キレート化剤の初回投薬量の投与前または投与後にヒ
トから採取した尿サンプル中の触媒鉄含量と比較することもできる。

【００４７】該方法は、第２（subsequent）投薬量の鉄キレート化剤をヒトに投与する工程
をさらに含みうる。第２投薬量は、初回尿サンプル中の触媒鉄含量を対照サンプ
ル中の触媒鉄含量と比較することにより決定される。

【００４８】該方法は、ヒトから少なくとも１種の(as least one)第２尿サンプルを採取す
る工程をさらに含みうる。「第２尿サンプル」は、初回尿サンプル採取後の任意
の時間にヒトから採取した任意の尿サンプルである。１種以上の第２尿サンプル
をヒトから採取することができる。１種を超える第２尿サンプルを、１日で、ま
たは数日、数ヶ月もしくは数年にわたって採取することができる。

【００４９】ヒトの第２尿サンプル中の触媒鉄含量を、初回尿サンプル、対照サンプルまた
はその両方における触媒鉄含量と比較する。ヒトに投与する鉄キレート化剤の投
薬量は、ヒトの尿中の触媒鉄含量が対照サンプル中の触媒鉄含量とほぼ同じにな
るまで、または第２尿サンプル中の触媒鉄含量が本質的に一定となるまで調整し
うる（例えば、増加させうる）。調整された投薬量もまた「第２投薬量」という
。例えば、ヒトに対し、約７５ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量の鉄キレート化剤を投与
し、尿サンプルまたは初回尿サンプル中の参照サンプルが約５５ｎｍｏｌ／ｍｇ
であるのに対して第２尿サンプル中の触媒鉄含量が約３５ｎｍｏｌ／ｍｇの参照
蛋白質である場合、鉄キレート化剤の第２投薬量は、約７５ｍｇ／ｋｇ体重未満
に調整する。

【００５０】本発明の別の態様では、第２投薬量の鉄キレート化剤を、第２尿サンプル中の
触媒鉄が対照の触媒鉄とほぼ同じか、または本質的に一定となるまで投与する。
「本質的に一定」（本明細書では「本質的に一定値」もしくは安定化した、とも
いう）とは、尿中の触媒鉄含量が経時的に（例えば、数日、数週間、数ヶ月また
は数年）ほぼ同じ値であることをいう。

【００５１】好ましい態様では、尿中の触媒鉄含量が、対照サンプルの触媒鉄含量とほぼ同
じか、または本質的に一定である場合、少なくとも２種の第２投薬量における鉄
キレート化剤の投薬量は、約１０ｍｇ／ｋｇヒト体重だけ異なる。１０ｍｇ／ｋ
ｇ増加分の調整後、１種以上の第２尿サンプル中の触媒鉄含量を測定し、対照ま
たは本質的に一定値と比較し、第２尿サンプル中の触媒鉄含量が対照サンプルま
たは本質的に一定値を超える場合は鉄キレート化剤の投薬量を調整しうる（例え
ば、増加させうる）。例えば、一定投薬量の鉄キレート化剤において、ヒトの第
２尿サンプル中の触媒鉄含量が対照サンプル（例えば、約１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参
照蛋白質）を超える場合は、腎臓疾患に罹患したヒトの尿中の触媒鉄を低下させ
るために鉄キレート化剤の投薬量を増加しうる。同様に、第２尿サンプル中の触
媒鉄含量が変化しない（remain）場合（例えば、対照含量または本質的に一定で
ある場合）は、鉄キレート化剤の投薬量を減少することができる。

【００５２】さらにまた別の態様では、尿サンプル（例えば、鉄キレート化剤での治療前ま
たは治療後）および少なくとも１種の第２尿サンプル中の尿蛋白質含量（例えば
、総蛋白質含量）を測定する。第２尿サンプル中の尿蛋白質含量を決定し、鉄キ
レート化剤での治療前または治療後に採取した尿サンプル、対照サンプルまたは
その両方における蛋白質含量と比較する。第２尿サンプル中の尿蛋白質含量を対
照サンプルと比較し、治療の進行、さらなる治療の必要性（例えば、投与回数も
しくは投与期間）またはヒトに投与する鉄キレート化剤の投薬量の調整の必要性
（例えば、ｍｇ／ｋｇ体重）を決定しうる。

【００５３】鉄キレート化剤の「投薬量の調整」（本明細書では鉄キレート化剤の第２投薬
量ともいう）は、初回の鉄キレート化剤投薬量における任意の変更または修正（
例えば、増加または減少）をいう。鉄キレート化剤の量における変更は、例えば
、鉄キレート化剤の投与回数の増加または減少（例えば、１日の回数、日数、月
数、年数）でありうる。さらにまた、あるいはまた、鉄キレート化剤の量におけ
る変更は、例えば、ヒトに投与する鉄キレート化剤の投薬量の増加または減少（
例えば、ヒトの体重１キログラムあたりの鉄キレート化剤のミリグラム数）であ
りうる。

【００５４】本発明の別の態様では、ヒトから採取した血液サンプル中のクレアチニン含量
または血液尿素窒素含量を、対照サンプルよりも多い尿中触媒鉄含量を有する、
腎臓疾患に罹患したヒトへの鉄キレート化剤の投与前、投与中または投与後の一
回以上の時点で測定する。

【００５５】進行性腎臓疾患の重篤度の低下のさらなる指標は、例えば、血液尿素窒素、血
清クレアチニン増加、糸球体濾過速度低下、または終末期腎臓疾患発症の遅延の
予測される割合の低下でありうる。糸球体濾過速度低下は、例えば、全尿蛋白の
増加により評価しうる。

【００５６】鉄キレート化剤の投与前にヒトから採取した血液サンプルを「治療前血液サン
プル」という。また、鉄キレート化剤の投与後または投与中にヒトから採取した
血液サンプルを「第２血液サンプル」という。少なくとも１種の第２血液サンプ
ル中の血液尿素窒素含量およびクレアチニン含量を、少なくとも１種の治療前血
液サンプルまたは対照サンプル中の血液尿素窒素含量およびクレアチニン含量と
比較する。同様に、血液尿素窒素含量およびクレアチニン含量を、鉄キレート化
剤投与後の治療期間の異なる時間にヒトから採取した少なくとも１種の第２血液
サンプルにおいて比較する。

【００５７】鉄キレート化剤の投薬量は、尿中の蛋白質含量、第２血液サンプル中の血液尿
素窒素、クレアチニン含量、またはその任意の組み合せに応じて調整しうる。例
えば、治療前サンプルまたは対照サンプルと比べた第２尿サンプルまたは第２血
液サンプル中における尿蛋白、血液尿素窒素またはクレアチニン含量の低下（本
明細書では減少ともいう）は、腎臓疾患が鉄キレート化剤により治療されており
、鉄キレート化剤の投薬量を低減しうることを示す。

【００５８】本発明の別の態様では、ヒトにおける腎臓疾患を診断する。ヒトから採取した
尿サンプルにおいて触媒鉄含量を測定し、対照サンプルにおける触媒鉄含量と比
較する。この態様では、ヒトから採取した尿サンプル中の触媒鉄含量が対照サン
プル中の触媒鉄含量を超えることは、腎臓疾患を示す。

【００５９】別の態様では、本発明は、尿サンプル中に約１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋白質を
超える触媒鉄含量を有するヒトにおける進行性腎臓疾患の重篤度を低下する方法
に関する。進行性腎臓疾患（例えば、糖尿病性腎症、原発性糸球体腎炎、続発性
糸球体腎炎）に罹患したヒトに鉄キレート化剤を投与する。鉄キレート化剤は、
ヒトから採取した尿中の触媒鉄含量を低下させ、それにより進行性腎臓疾患の重
篤度を低減する。

【００６０】「重篤度を低減する」（本明細書では重篤度の低下ともいう）という用語は、
進行性腎臓疾患に関していう場合は、腎機能を損なう腎臓への進行性障害の任意
の減衰、改善または低減をいう。腎機能を評価するためのよく知られた指標を用
いて腎臓疾患の重篤度の低下を決定することができる。これらの指標には、鉄キ
レート化剤の投与前にヒトから採取したサンプルまたは対照サンプルと比べた、
例えば、尿中の蛋白質含量の低下、血液尿素窒素の低下、血清または血漿クレア
チニンの低下、糸球体濾過速度の低下、終末期腎臓疾患の発症の遅延またはそれ
らの任意の組み合せが含まれ得る。

【００６１】腎臓疾患の重篤度の低下は、例えば、腎臓の原発的病状（例えば、糸球体また
は細管の障害）、または腎臓が生物学的機能を発揮する能力（例えば、蛋白の保
持）に有害な影響を与えた別の臓器（例えば、膵臓）の原発的病状の改善により
生じうる。したがって、ヒトにおける腎臓疾患の重篤度の低下は、腎臓疾患の低
減の直接または間接的な効果でありうる。

【００６２】本発明の別の態様は、ヒトから採取した１種以上の尿サンプルにおける触媒鉄
を測定する工程を含む、ヒトにおける腎臓疾患の進行の決定方法である。ヒト由
来の尿サンプルにおける触媒鉄含量の経時的な（例えば、数週間、数ヶ月または
数年）増加は、腎臓疾患の進行を示す。尿中の触媒鉄含量は、参照蛋白質（例え
ば、クレアチニン）に対して測定しうる。

【００６３】「腎臓疾患の進行」は、腎臓の疾患の拡大または増加をいう。腎臓疾患の進行
には、例えば、ヒトが腎臓疾患に最初に罹患した時または罹患していると診断さ
れた時には障害されていなかった腎臓の区(segment) （例えば、ネフロン、細管
、間隙）に対する継続的または追加的な障害が含まれ得る。例えば、ヒトは、糸
球体障害を有しえないか、または経時的に、糸球体のみへの障害の増大につなが
るか、または腎臓疾患が進行するにつれて細管障害をもたらす腎臓疾患に至る糸
球体のみへの障害を有しうる。ヒトにおいて腎臓疾患が進行するにつれて、尿中
の触媒鉄含量は、腎臓へのさらなる障害前のレベルを超えて増加するか、または
進行性腎臓疾患に罹患していないヒトと比べて増加しうる。進行性腎臓疾患を有
するヒトから採取した尿中の触媒鉄含量を決定し、種々の段階の進行性腎臓疾患
を有する別の異なるヒトにおける尿中触媒鉄含量と比較して、腎臓疾患の進行を
識別することができる。

【００６４】腎臓疾患の進行はまた、例えば、触媒鉄含量に加え、腎臓疾患に罹患したヒト
の尿中の蛋白質含量を測定することによりモニターすることができる。腎臓疾患
が進行するにつれて、尿中の蛋白質含量は増加しうる。さらにまた、ヒトにおけ
る腎臓疾患の進行は、ヒトから採取した血液サンプル中の血液尿素窒素含量また
はクレアチニン含量を経時的に測定することにより評価することができる。ヒト
における経時的な血液尿素窒素含量またはクレアチニン含量の増加もまた、ヒト
における腎臓疾患の進行を示す。同様に、例えば上述のようなクレアチニンクリ
アランスにより評価される糸球体濾過の低下もまた、腎臓疾患の進行の指標とし
ての尿中触媒鉄含量と合わせて使用しうる。

【００６５】別の態様では、本発明は、ヒトから採取した初回尿サンプルおよび少なくとも
１種の追加の尿サンプル中における触媒鉄含量を測定する工程を含む、ヒトにお
ける腎臓疾患の進行の決定方法に関する。腎臓疾患の進行を決定する際において
、「初回尿サンプル」とは、腎臓疾患の進行を決定する前の任意の時点でヒトか
ら採取した尿の最初のサンプルをいう。「追加の尿サンプル」とは、初回尿サン
プル採取後の任意の時点でヒトから採取した尿サンプルをいう。

【００６６】追加の尿サンプル中の触媒鉄含量を少なくとも１種の追加の尿サンプル中の触
媒鉄含量と比較する。初回尿サンプルと比べた追加の尿サンプル中の触媒鉄の上
昇は、腎臓疾患の進行を示す。同様に、初回尿サンプルと比べた追加の尿サンプ
ル中の触媒鉄の低下は、腎臓疾患が進行していないか、または重篤度が低下して
いることを示す。

【００６７】ヒトにおける腎臓疾患の進行の測定方法は、腎臓疾患に罹患したヒトから採取
した初回尿サンプルおよび少なくとも１種の追加の尿サンプル中の蛋白質含量な
らびに初回血液サンプルおよび少なくとも１種の追加の血液サンプル中のクレア
チニン含量を測定する工程をさらに含みうる。「初回血液サンプル」とは、腎臓
疾患の進行を決定する前の任意の時点においてヒトから採取した最初の血液サン
プルをいう。「追加の血液サンプル」とは、初回血液サンプル採取後の任意の時
点でヒトから採取した血液サンプルをいう。

【００６８】追加の尿サンプル中の蛋白質含量を初回尿サンプル中の蛋白質含量と比較し、
追加の血液サンプル中のクレアチニン含量を初回血液サンプルと比較しうる。追
加の尿サンプル中の蛋白質含量が初回尿サンプル中の蛋白質含量を超えること、
および／または追加の血液サンプル中のクレアチニン含量が初回血液サンプル中
のクレアチニン含量を超えることは、ヒトにおける腎臓疾患の進行を示しうる。
また、追加の尿サンプル中の蛋白質含量が初回尿サンプル中の蛋白質含量未満に
減少すること、および／または追加の血液サンプル中のクレアチニン含量が初回
血液サンプル中のクレアチニン含量未満に減少することは、ヒトにおいて腎臓疾
患が進行していないことを示す。同様に、追加の尿サンプル中の蛋白質含量が本
質的に一定であることは、腎臓疾患が進行していないことを示しうる。

【００６９】さらにまた、ヒトにおける腎臓疾患の進行の決定方法は、追加の血液サンプル
中の血液尿素窒素を初回血液サンプルと比較する工程をさらに含みうる。追加の
血液サンプル中の血液尿素窒素含量が初回血液サンプル中の血液尿素窒素含量を
超えて上昇することは、ヒトにおける腎臓疾患の進行を示す。同様に、追加の血
液サンプル中の血液尿素窒素含量の減少または本質的に一定の血液尿素窒素含量
が初回血液サンプル中の血液尿素窒素未満であることは、腎臓疾患が進行してい
ないことを示す。

【００７０】本発明の別の態様では、腎臓疾患を患うヒトにおいて鉄キレート化剤での治療
の有効性を評価する。ヒトから採取した少なくとも２種の尿サンプルにおける触
媒鉄含量を比較する。「有効性の評価」とは、鉄キレート化剤により腎臓疾患、
特に進行性腎臓疾患、とりわけ進行性糸球体性腎臓疾患に罹患したヒトの腎臓疾
患が治療される（例えば、腎臓疾患が進行しない）程度の治療の成功の評価をい
う。

【００７１】鉄キレート化剤での治療の有効性を評価するためにヒトから採取した尿サンプ
ルには、治療前の時点でヒトから採取した治療前尿サンプル、および治療前尿サ
ンプル採取後の少なくとも１回の第２時点でヒトから採取した少なくとも１種の
第２尿サンプルが含まれる。「治療前の時点」とは、鉄キレート化剤投与前の任
意の時点をいう。「第２時点」とは、鉄キレート化剤投与後の任意の時点をいう
。

【００７２】第２尿サンプル中の触媒鉄含量が治療前尿サンプル中の触媒鉄含量未満の量に
減少することは、腎臓疾患の治療の有効性を示す。鉄キレート化剤での治療の有
効性の評価は、治療前尿サンプルおよび少なくとも１種の第２尿サンプル中の蛋
白質含量を比較する工程をさらに含み得る。第２尿サンプル中の蛋白質含量が治
療前尿サンプル中の蛋白質含量未満に減少することは、腎臓疾患を患うヒトにお
ける鉄キレート化剤での治療の有効性を示す。

【００７３】本発明のさらに別の態様では、鉄キレート化剤での治療の有効性の評価は、ヒ
トから採取した初回血液サンプルおよび第２血液サンプル中の血液尿素窒素含量
およびクレアチニン含量を測定する工程をさらに含みうる。第２血液サンプル中
の血液尿素窒素含量およびクレアチニン含量を、初回血液サンプル中の血液尿素
窒素含量およびクレアチニン含量と比較する。第２血液サンプル中の血液尿素窒
素含量またはクレアチニン含量が、初回血液サンプル中の血液尿素窒素含量また
はクレアチニン含量未満に低下することは、腎臓疾患を患うヒトにおける鉄キレ
ート化剤での治療の有効性を示す。

【００７４】したがって、鉄キレート化剤での治療の有効性は、治療前サンプルまたは対照
サンプルと比べた尿中触媒性含量、尿蛋白質含量、血液サンプル中の血液尿素窒
素含量およびクレアチニン含量の低下を評価することにより評価しうる。

【００７５】本発明の別の態様は、ヒトに鉄キレート化剤を投与する工程を含む、尿中に約
１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋白質を超える触媒鉄を有するヒトにおける腎臓疾患の
進行を遅延させる方法に関する。鉄キレート化剤は、尿から得た尿中の触媒鉄含
量を低下させ、それによりヒトにおける腎臓疾患の進行を遅延しうる。

【００７６】腎臓疾患の「進行を遅延させる」とは、腎臓疾患が進展または発生する割合も
しくは速度または程度が低下することをいう。例えば、さらなる糸球体障害また
は糸球体障害とともに始まる腎臓細管に対するさらなる障害が、鉄キレート化剤
を投与されていない腎臓疾患に罹患したヒトの腎臓に対する同様の障害発生より
後の時点まで生じないように、腎臓疾患の進行を遅延させうる。したがって、腎
臓疾患の進行の遅延はまた、鉄キレート化剤を投与されていないヒトにおいて、
進行性腎臓疾患、特に進行性糸球体性腎臓疾患または最終的には終末期腎臓疾患
をもたらすのに要する時間量（例えば、日数、月数、年数）の増加をいう。

【００７７】ヒトへの鉄キレート化剤投与後の触媒鉄含量が鉄キレート化剤の投与前に測定
した触媒鉄含量未満に減少することは、腎臓疾患の進行が遅延されているか否か
を評価する指標として使用しうる。さらにまた、あるいはまた、鉄キレート化剤
を投与したヒトにおける腎臓疾患の進行の遅延を示す他のパラメータには、例え
ば、鉄キレート化剤の投与前の尿蛋白質含量、ヒトから採取した血液サンプル中
の血液尿素窒素またはクレアチニン、あるいは対照サンプルとほぼ同じレベルと
比べた、鉄キレート化剤の投与中または投与後の尿蛋白質含量、ヒトから採取し
た血液サンプル中の血液尿素窒素またはクレアチニンの減少が含まれ得る。

【００７８】さらにまた別の態様では、本発明は、鉄キレート化剤による進行性腎臓疾患の
治療の恩恵を受ける、進行性腎臓疾患を患うヒトの同定方法に関する。「恩恵を
受ける（ヒト）」という用語は、尿中に約１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋白質を超え
る触媒鉄含量を有するヒト、またはヒトにおける腎臓疾患、特にヒトにおける進
行性糸球体性腎臓疾患の進行を遅延させるため、該腎臓疾患の重篤度を低下させ
るため、または該疾患の進行を停止するために鉄キレート化剤で治療しうるヒト
をいう。

【００７９】進行性腎臓疾患の治療の恩恵を受けるヒトを同定するため、ヒトから採取した
尿サンプル中の触媒鉄含量を測定する。尿サンプル中の触媒鉄含量が約１５ｎｍ
ｏｌ／ｍｇ参照蛋白質を超えることは、鉄キレート化剤による進行性腎臓疾患の
治療の恩恵を受けるか、または受けうる進行性腎臓疾患を患うヒトを同定する。

【００８０】さらに別の態様では、本発明は、ヒトにおける腎臓疾患の進行を停止する方法
に関する。「停止する」とは、ヒトにおける腎臓疾患の進行に関していう場合、
ヒトにおける腎臓疾患の進行を一時的または永続的に止めることをいう。腎臓疾
患の進行は、例えば、進行性腎臓疾患を有するヒトにおいて障害された腎臓の任
意の区（例えば、糸球体、細管、間隙）に対する任意のさらなる障害を予防また
は減衰することにより停止しうる。したがって、ヒトにおける腎臓疾患の進行の
停止は、糸球体障害の減衰、または他の場合では進行性腎臓疾患を有するヒトに
おいて障害されない腎臓の区に対する障害の予防（例えば、糸球体性腎障害を有
するヒトにおける細管障害を予防する）でありうる。

【００８１】ヒトにおける腎臓疾患の進行を停止するため、ヒトから採取した治療前尿サン
プル中の触媒鉄含量および蛋白質含量を測定する。治療前尿サンプル中に約１５
ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋白質を超える量の触媒鉄含量を有するヒトに鉄キレート化
剤を投与する。鉄キレート化剤は、約２０ｍｇ／ｋｇヒト体重〜約１５０ｍｇ／
ｋｇヒト体重の投薬量で投与しうる。好ましい態様では、鉄キレート化剤はデフ
ェリプロン（deferiprone ）である。

【００８２】ヒトにおける触媒鉄含量および蛋白質含量を、鉄キレート化剤の投与中または
投与後にヒトから採取した少なくとも１種の第２尿サンプルにおいて測定する。
このヒトの第２尿サンプル中の触媒鉄含量および蛋白質含量を、尿サンプル（例
えば、治療前尿サンプル、初回尿サンプル）中の触媒鉄含量および蛋白質含量と
比較する。一態様において、ヒトに投与する鉄キレート化剤の投薬量は、そのヒ
トの第２尿サンプル中の触媒鉄含量が対照（例えば、１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋
白質）未満となるまで調整（例えば、ヒトに最初に投与した投薬量に対して増加
または減少）する。第２尿サンプル中の蛋白質含量が対照サンプル中の蛋白質含
量の約２５パーセント（２５％）低い場合、尿中蛋白のさらなる低下が生じなく
なるまで、または尿中蛋白が本質的に一定となるまで（例えば、３〜４ヶ月間）
ヒトを鉄キレート化剤投与下に維持する。次いで、鉄キレート化剤の投薬量を約
１０ｍｇ／ｋｇ体重だけ低下させる。

【００８３】鉄キレート化剤の投薬量を１０ｍｇ／ｋｇ体重低減した後、尿中触媒鉄含量を
少なくとも１種の第２尿サンプルにおいて測定する。鉄キレート化剤の投薬量は
、触媒鉄が本質的に一定か、または対照レベルであれば、１０ｍｇ／ｋｇ体重だ
けさらに低減しうる。尿中触媒鉄含量、尿中蛋白、血液サンプル中の血液尿素窒
素およびクレアチニンは、鉄キレート化剤の投薬量を低下する度に以後モニター
する。尿中触媒鉄、全尿中蛋白、血液サンプル中の血液尿素窒素またはクレアチ
ニンが増加した場合、鉄キレート化剤の投薬量を１０ｍｇ／ｋｇヒト体重だけ増
加しうる。好ましい態様では、ほぼ３ヶ月毎に鉄キレート化剤の投薬量を約１０
ｍｇ／ｋｇ体重だけ低減する。尿中触媒鉄、全尿中蛋白、血液尿素窒素または血
清クレアチニンが本質的に一定量に至る、最後の投薬量より約１０ｍｇ／ｋｇ体
重多い鉄キレート化剤投与下にヒトを維持しうる（本明細書では、鉄キレート化
剤の「維持投与」ともいう）。

【００８４】ヒトを鉄キレート化剤の維持投与下においている間に尿中触媒鉄含量、尿中蛋
白質含量、血液尿素窒素または血中クレアチニンを測定することができ、例えば
、対照サンプルとほぼ同じ尿中蛋白質含量を達成するために鉄キレート化剤の投
薬量を調整することができる。同様に、鉄キレート化剤の維持投与下のヒトから
採取した第２尿サンプル中の触媒鉄含量が約１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋白質を超
える場合、鉄キレート化剤の投薬量を（例えば、２０〜１５０ｍｇ／ｋｇ体重に
）増加しうる。

【００８５】鉄キレート化剤の投薬量は、ヒトから採取した尿サンプル中の触媒鉄含量が、
鉄キレート化剤の投薬量を維持投薬量より大きく調整した後も上昇し続ける場合
、さらに増加しうる。同様に、維持投薬量に比較して鉄キレート化剤の投薬量を
増加した後に、ヒトから採取した尿サンプル中の触媒鉄含量が減少する場合は、
鉄キレート化剤の投薬量を減少しうる。鉄キレート化剤の投薬量のさらなる調整
の必要性は、尿中触媒鉄含量、尿中蛋白質含量、血液サンプル中の血液尿素窒素
、クレアチニン、またはその任意の組み合せをモニターすることにより決定しう
る。

【００８６】さらに、本発明は、微量アルブミン尿症（microalbuminuria）を呈するヒトを
診断および治療するための鉄キレート化剤の使用に関する。好ましい態様では、
鉄キレート化剤はデフェリプロンである。

【００８７】「微量アルブミン尿症」という用語は、尿中のアルブミンが約２０〜２００μ
ｇ／分または約３０〜３００ｍｇ／２４時間の割合で排泄される、任意の疾患、
障害、病気または健康状態をいう（例えば、Abbott, K.C.ら、Arch. Internal M
ed. 154:146-153 (1994)を参照のこと、その教示は参照によりそのまま本明細書
に取り込まれる）。微量アルブミン尿症を検出および診断する方法は、当業者に
周知であり、ラジオイムノアッセイ、ラテックス体（latex body）を使用するイ
ムノアッセイ、蛍光イムノアッセイ、酵素イムノアッセイ、凝集阻害、免疫比濁
分析（immunoturbidimetry）、免疫比濁分析（immunonephelometry）および放射
免疫拡散アッセイが含まれる。（Keen, H.ら、Lancet 2:913-916 (1968); Silve
r, A. ら、Clin. Chem 32:1303-1306(1986); Close, C.ら、Diabet. Med. 4:491
-492 (1987); Harmoinen, A.ら、Clin. Chim. Acta 166:85-89 (1987); Marre,
M.ら、Clin. Chem. 33:209-213 (1987); McCormik, C.P. ら、Ann. Clin. Lab S
ci. 19:944-951 (1989); Cambiaso, C.L. ら、Clin. Chem. 34:416-418 (1988);
Niwa, T. ら、Clin. Chim. Acta 186:391-396 (1990) 、これらすべての教示は
、そのまま本明細書に取り込まれる。）鉄キレート化剤での治療前および治療後
の尿中のアルブミンレベルまたは総蛋白レベルを決定することができ、微量アル
ブミン尿症を軽減するのに必要とされる投与回数または投薬量を、治療を受けて
いる各個人の必要に応じて調整することができる。微量アルブミン尿症は、糖尿
個体の糖尿病性腎症に関連しているため（Mattock, M.B. ら、Diabetes 41:736-
741(1992); Neil, A. ら、Diabetes Care 16:996-1003 (1993); Abbott, K.C.ら
、Arch. Intern. Med. 154:146-153(1994)、これらすべての教示は、そのまま本
明細書に取り込まれる）、本発明の方法は、微量アルブミン尿症の進行の停止に
使用でき、したがって、糖尿病性腎症の発症を予防できることが期待される。

【００８８】微量アルブミン尿症を軽減するのに有効な量は、尿中アルブミンレベルを回復
するか、または尿中アルブミンレベルのさらなる増加を抑制する鉄キレート化剤
の量でありうる。好ましい態様では、尿中アルブミンレベルは、対照個体とほぼ
同じレベルまで回復される。「回復する」という用語は、尿中アルブミンレベル
を、個体が微量アルブミン尿症を発現する前に観察されるレベル、または対照個
体において観察されるレベル程度まで戻すことをいう。微量アルブミン尿症に罹
患したヒトに鉄キレート化剤の投与は、微量アルブミン尿症の進行を停止するた
めに使用することができる。一態様では、微量アルブミン尿症の進行は、ヒトへ
の鉄キレート化剤（例えば、約２０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１５０ｍｇ／ｋｇ体重）
の投与により停止される。

【００８９】別の態様では、本発明は、ヒトから採取した治療前尿サンプル中の触媒鉄含量
を測定する工程、および治療前尿サンプル中に対照サンプル中の触媒鉄含量を超
える触媒鉄含量を有するヒトに対して投薬量の鉄キレート化剤を投与する工程を
含む、ヒトにおける微量アルブミン尿症の進行を停止する方法に関する。ヒトか
ら採取した少なくとも１種の第２尿サンプル中の触媒鉄含量を、鉄キレート化剤
の投与中または投与後に測定し、治療前尿サンプル、対照サンプルまたはその両
方における触媒鉄含量と比較する。ヒトに投与する鉄キレート化剤の投薬量は、
そのヒトの尿中の触媒鉄含量が対照サンプルの触媒鉄含量とほぼ同じになるまで
調整する。

【００９０】「対照」レベルとは、微量アルブミン尿症を発現しているヒトの治療に関して
いう場合、対照レベルが腎臓疾患に罹患したヒトで記載したように総蛋白レベル
でなく、尿中アルブミンレベルをいう以外は、腎臓疾患に罹患したヒトに関して
上述したように定義される。

【００９１】微量アルブミン尿症は進行しえ、最終的に糖尿病性腎症、進行性腎臓疾患につ
ながる（Mattock, M.B. ら、Diabetes 41:736-741 (1992); Neil, A.ら、Diabet
es Care 16:996-1003 (1993); Abbott, K.C.ら、Arch. Intern. Med. 154:146-1
53 (1994) 、これらすべての教示は、そのまま本明細書に取り込まれる）。した
がって、本発明の別の局面は、ヒトから採取した治療前尿サンプル中の触媒鉄含
量を測定する工程、および治療前尿サンプル中に約１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋白
質を超える量の触媒鉄含量を有するヒトに対し、デフェリプロンを約２０ｍｇ／
ｋｇヒト体重〜約１５０ｍｇ／ｋｇヒト体重の投薬量で投与する工程を含む、ヒ
トにおける微量アルブミン尿症の進行を停止する方法に関する。デフェリプロン
の投与中または投与後にヒトから採取した少なくとも１種の第２尿サンプルにお
いて触媒鉄含量を測定する。該ヒトの第２尿サンプル中の触媒鉄含量を、治療前
尿サンプル中の触媒鉄含量と比較し、ヒトに投与するデフェリプロンの投薬量を
、該ヒトの第２尿サンプル中の触媒鉄含量が約１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋白質未
満になるまで調整する。

【００９２】本発明の方法は、腸溶的または非経口的手段による鉄キレート化剤の投与によ
り行いうる。具体的には、投与経路は、経口摂取（例えば、錠剤、カプセル形態
）である。また、本発明により包含される他の投与経路には、筋肉内、静脈内、
動脈内、腹腔内または皮下経路および経鼻投与が含まれる。座剤または経皮的貼
布剤（transdermal patch ）もまた使用しうる。

【００９３】鉄キレート化剤は、ヒトに投与する際、単独で、または任意の組み合せで使用
しうる。例えば、腎臓疾患（例えば、糖尿病性腎症、原発性糸球体腎炎、続発性
糸球体腎炎、微量アルブミン尿症）を治療するために、デフェリプロンをデフェ
ロキシアミン（deferoxiamine ）などの別の鉄キレート化剤と共投薬することが
できる。また、例えば腎臓疾患を治療するため、腎臓疾患の進行を停止するため
、腎臓疾患の重篤度を低減するために、１種以上の鉄キレート化剤を別の治療薬
（例えば、ステロイド）と共投薬することも想定される。共投薬とは、２種以上
の鉄キレート化剤の同時投与または逐次投与を含むことが意図される。また、１
種以上の鉄キレート化剤を投与するために複数の投与経路（例えば、筋肉内、経
口、経皮）を使用しうることも想定される。

【００９４】鉄キレート化剤は、単独で、または従来の賦形剤、例えば、鉄キレート化剤と
有害な反応を起こさない、腸溶的投与または非経口投与に適した薬学的または生
理学的に許容されうる有機系または無機系担体物質との混合物として投与し得る
。好適な薬学的に許容されうる担体としては、水、塩溶液（リンゲル液など）、
アルコール、油、ゼラチンおよびラクトース、アミロースまたはデンプンなどの
炭水化物、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセスロース（hydroxymethycellul
ose ）、ならびにポリビニルピロリジンが挙げられる。かかる調製物は、滅菌す
ることができ、所望により、鉄キレート化剤と有害な反応を起こさない潤滑剤、
保存料、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与える塩類、バッファー、着
色剤および／または香料などの助剤（auxillary agent)と混合し得る。

【００９５】非経口投与が必要または所望される場合、鉄キレート化剤に特に好適な混合物
は、注射用滅菌溶液、好ましくは油性もしくは水性溶液ならびに懸濁液、エマル
ジョンまたは座剤を含む埋没物である。特に、非経口投与のための担体としては
、デキストロースの水溶液、生理食塩水、精製水、エタノール、グリセリン、プ
ロピレングリコール、ピーナツ油、ゴマ油、ポリオキシエチレンブロックポリマ
ーなどが挙げられる。アンプルは簡便な単位用量である。鉄キレート化剤はまた
、経皮的ポンプ（transdermal pump）または貼布剤により投与しうる。本発明に
おける使用に好適な医薬混合物は当業者に周知であり、例えば、Pharmaceutical
Sciences (17 版、Mack Pub. Co., Easton, PA)および国際特許出願第 WO 96/0
5309号（両者の教示は参照により本明細書に取り込まれる）に記載されている。

【００９６】ヒトに投与する鉄キレート化剤の用量および回数（単回投与または反復投与）
は、そのヒトの体格、年齢、性別、健康状態、体重、ボディマス指数および食事
；治療している腎臓疾患（例えば、糖尿病性腎症、微量アルブミン尿症）の性質
および症状の程度、併用療法（例えば、ステロイド）の種類、腎臓疾患、微量ア
ルブミン尿症による合併症または他の健康上の問題点を含む種々の要因により変
わりうる。好ましい態様では、腎臓疾患を有するヒトを、１日あたり約３０ｍｇ
／ｋｇ体重〜約７５ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量の鉄キレート化剤（例えば、デフェ
リプロン５００ｍｇのカプセル）を１日３回で、約２〜６ヵ月間治療する。他の
治療法または治療剤を、本発明の鉄キレート化剤治療法と組み合せて使用しうる
。例えば、鉄キレート化剤の投与は、ステロイド投与により行いうる。確立され
た投薬の調整および操作（例えば、頻度および継続時間）は、当業者の能力内で
十分である。

【００９７】本発明は以下の実施例によりさらに説明されるが、それはいかなる限定をも意
図しない。

【００９８】実施例実施例１：腎臓疾患を伴う患者における尿の触媒鉄腎臓疾患を伴う患者の選別ヒト患者（ｎ＝７０）をこれらの研究に使用した。対照は、腎臓疾患、高血圧
、糖尿病または腎臓に影響する他の疾患の病歴のない健康なヒト患者であった。
男性と女性を研究に使用した。ヒト患者の年齢は、４歳〜７０歳の範囲であった
。患者の民族性は、白色人種、アフリカ系アメリカ人およびスペイン系人を含ん
だ。

【００９９】尿中の異常な量の蛋白質および／または異常な腎臓機能の存在により、患者に
おける腎臓疾患を検出した。尿中の蛋白質の異常な量は、Fujita, Y.ら、Bunsek
i Kgaku 32:379-386(1983)（その教示は全体に参照により本明細書に組み込まれ
る）に記載されたピロガロールレッドモリデート（red-molydate）法の適応によ
る測定で、約０．１５ｇ／２４ｈより多い全蛋白質の量である。多くの患者が、
通常の精密検査の一部として、腎臓疾患の性質の診断を与える腎臓生検を受けた
。

【０１００】ヒトにおける腎糸球体濾過速度を、血清クレアチニン（正常値は、女性に対し
て０．９６ｍｇ／ｄｌ、および男性に対して１．１６ｍｇ／ｄｌ、値が１．４ｍ
ｇ／ｄｌを超えると異常とみなされる）、クレアチニンクリアランスまたはその
両方を測定することにより評価する。クレアチニンクリアランスを、標準式Ｃｒ
＝ＵｃｒＶ／ＰＣｒ、式中、Ｃｒ＝クレアチニンのクリアランス（ｍｌ／ｍｉ
ｎ）；Ｕｃｒ＝尿のクレアチニン（ｍｇ／ｄｌ）、Ｖ＝尿の容量、およびＰＣｒ
＝血漿クレアチニン（ｍｇ／ｄｌ）により計算した。

【０１０１】腎臓疾患を伴う患者は、以下の患者群を含む：

【０１０２】糸球体腎炎。この診断は、異常に多量の尿蛋白質（約１５０ｍｇ／２４時間よ
り多い）を有する患者に基づき、ネフローゼ症候群を伴う患者（約３．５ｇｍ蛋
白質より多い）を含む。糸球体腎炎の診断は、腎臓の組織学的な検査で行なわれ
、それは、通常の方法を用いる光学顕微鏡法、免疫蛍光法、電子顕微鏡法を含ん
だ。診断は、膜性腎症、巣状分節状硬化症、ＩｇＡ腎症、膜性増殖性糸球体腎炎
、および半月形糸球体腎炎等の一次原因、ならびに全身性エリテマトーデス（er
ythematosis ）、溶血性尿毒症症候群またはヘーノホ−シェーンライン紫斑病等
の二次原因の両方を含んだ。

【０１０３】微量アルブミン尿症を有し糖尿病を伴なう微量アルブミン尿症患者は、抗原−
抗体反応の間に形成された複合体の結果として溶液に懸濁した粒子由来の散乱光
での速度の増加を使用する方法により測定したときまたは軽量棒法により測定し
たとき、２４時間に約３０ｍｇ〜約３００ｍｇの間の範囲の尿アルブミンを有し
た。

【０１０４】糖尿病腎症。２４時間試料で明白な蛋白尿（約１５０ｍｇ／２４時間より多い
）がある糖尿病腎症を有した糖尿病を伴う患者。糖尿病腎症の診断は、明白な蛋
白尿の存在、糖尿病の病歴、および臨床検査における網膜症の存在に基づいた。

【０１０５】虚血症腎症は、臨床および放射線学の知見に基づいた。腎臓疾患を伴うおよび伴わない（対照）ヒトから尿試料を得て、以下に記載し
た確立された方法を用いて触媒鉄含量およびクレアチニン含量に対して評価した
。

【０１０６】腎臓疾患を伴うおよび伴わないヒトにおける尿の触媒鉄およびクレアチニン十分確立されたブレオマイシンアッセイ（ＧｕｔｔｅｒｉｄｇｅＪ．Ｍ．Ｃ
．ら、ＢｉｏｃｈｅｍＪ１９９：２６３−２６５（１９８１）、その教示は
全体として本明細書に組み込まれる）を用いて、尿中の触媒鉄含量を測定した。

【０１０７】インビボで、鉄は主にヘムまたは非ヘム蛋白質に結合し、ヒドロキシラジカル
または類似の酸化体の生成を直接触媒しない（ＧｕｔｔｅｒｉｄｇｅＪ．Ｍ．
Ｃ．ら、ＢｉｏｃｈｅｍＪ１９９：２６３−２６５（１９８１）、その教示
は全体として本明細書に組み込まれる）。これらの研究に使用される触媒鉄アッ
セイにおいて、抗生物質のブレオマイシンはフリーラジカル反応を触媒可能な鉄
の複合体を検出する。ブレオマイシンは、鉄の塩および適切な還元剤の存在下で
、チオバルビツール酸と反応してクロモゲンを形成する産物の形成とともにＤＮ
Ａに結合し、分解する。ブレオマイシン−鉄複合体のＤＮＡへの結合は反応部位
を特異的にし、抗酸化体はほとんど干渉しない。したがって、この方法により検
出される鉄は、試料から入手できる鉄のブレオマイシンに対する測定であった。
本アッセイ条件は、蛋白質を含む鉄による干渉を妨げる。トランスフェリン、ラ
クトフェリン、フェリチン、または鉄含有酵素に結合する鉄は、ブレオマイシン
アッセイで検出されない（ＧｕｔｔｅｒｉｄｇｅＪ．Ｍ．Ｃ．ら、Ｂｉｏｃｈ
ｅｍＪ１９９：２６３−２６５（１９８１）、その教示は全体として本明細
書に組み込まれる）。

【０１０８】詳細には、アッセイを以下のように行った：

【０１０９】試薬調製１．Ｃｈｅｌｅｘ−処理された発熱物質遊離Ｈ₂Ｏ（ＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏ）５ｇのｃｈｅｌｅｘ１００樹脂（Ｂｉｏ−Ｒａｄ、カタログ番号：１４２−２
８４２：２００〜４００メッシュ：ナトリウム形）を１００ｍｌの発熱物質遊離
水（Ｂａｘｔｅｒ）に添加し、十分に攪拌する。４℃で一晩放置して、ボトルフ
ィルターシステム（０．２２μｍフィルター）を用いてＣｈｅｌｅｘを濾過して
除く。アッセイに使用される全溶液のＣｈｅｌｅｘ処理の後、Ｃｈｅｌｅｘを注
意深く除去し、樹脂による汚染を避ける。

【０１１０】２．ＤＮＡ（１ｍｇ／ｍｌ）５０ｍｇのＤＮＡ（タイプＩ：コウシ胸腺、ＳｉｇｍａＤ−１５０１）を５
０ｍｌのＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏに添加し、４℃で一晩放置し、溶液を得る。この
溶液を１５ｍｇのＣｈｅｌｅｘ１００樹脂で４℃で一晩処理し、３０分間３０
００ｒｐｍで遠心分離してＣｈｅｌｅｘを除去する。溶液中にまだいくらかのＣ
ｈｅｌｅｘ粒子がある場合は、それを再び約１５分間３０００ｒｐｍで遠心分離
する。再構成ＤＮＡは、４℃で保存した場合、混合後約７日間アッセイでの使用
に適切である。

【０１１１】３．硫酸ブレオマイシン（１Ｕ／ｍｌ）１５ｍｌのＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏ中に１５Ｕの硫酸ブレオマイシン（Ｂｌｅｏ
ｘａｎｅ，ＮｉｐｐｏｎＫａｙａｋｕＣｏ．Ｌｔｄ，Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａ
ｎ）。再構成ブレオマイシンは、調製後約１ヶ月間アッセイでの使用に適切であ
る。

【０１１２】４．塩化マグネシウム（５０ｍＭ）１０ｍｌのＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏ中に０．１ｇのＭｇＣｌ₂・６Ｈ₂Ｏ（ＦＷ
．２０３．３）を添加する。溶液を３ｇのＣｈｅｌｅｘ１００樹脂と処理し、
１０分間３０００ｒｐｍで遠心分離してＣｈｅｌｅｘを除去する。

【０１１３】５．塩酸（４０ｍＭ）１０ｍｌのＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏ中に３３．２μｌのＨＣｌ（Ｕｌｔｒａｐｕ
ｒｅ，Ｂａｋｅｒ６９００−０５）。

【０１１４】６．ＮａＯＨ（４０ｍＭ）１０ｍｌのＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏ中に１６ｍｇのＮａＯＨ。

【０１１５】７．アスコルビン酸（８ｍＭ）１ｍｌのＣｈｅｌｅｘＨ２Ｏ中に７０ｍｇのアスコルビン酸（ＦＷ．１７６
．１）。５０ｍｇのＣｈｅｌｅｘ１００樹脂で溶液を処理し、３０分間３０００
ｒｐｍで遠心分離してＣｈｅｌｅｘを除去する。使用前にＣｈｅｌｅｘＨ２Ｏ
で１：５０に希釈する。アッセイに使用する直前に調製する。

【０１１６】８．ＥＤＴＡ（０．１Ｍ）１０ｍｌのＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏ中に０．３７ｇのＥＤＴＡ。

【０１１７】９．チオバルビツール酸（ＴＢＡ）（５０ｍＭＮａＯＨ中に１％ｗ／ｖ）１００ｍｌの５０ｍＭＮａＯＨ（ＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏで調製されたＮａＯ
Ｈ）中に１ｇのＴＢＡ。

【０１１８】１０．ＨＣｌ（２５％ｖ／ｖ）１００ｍｌのＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏ中に２５ｍｌＨＣｌ（Ｕｌｔｒａｐｕｒ
ｅ，Ｂａｋｅｒカタログ番号６９００−０５）。

【０１１９】１１．標準鉄１０ｍｌのＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏ中に１６ｍｇのＦｅＣｌ₃（ＦＷ．１６２．
２）。保存溶液（１００ｎｍｏｌ／ｍｌ）に対して１：１００に希釈し、次いで
１：１に希釈して５０．２５、１２．５、６．２５および３．１２５ｎｍｏｌ／
ｍｌの標準濃度ならびにＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏを作製した。アッセイに使用する
直前に標準物を調製した。

【０１２０】手順１．粒子を除去するために、尿試料を約１０分間約３０００ｒｐｍで遠心分離
して、得られた上清みをブレオマイシンアッセイで使用した。

【０１２１】２．以下のものをプラスチックチューブに以下の順番で入れる：０．５ｍｌＤＮＡ０．０５ｍｌ硫酸ブレオマイシン（ブランクにはＣｈｅｌｅｘＨ₂Ｏを添加）０．１ｍｌＭｇＣｌ₂ ０．１ｍｌ標準Ｆｅ溶液または尿試料０．１ｍｌアスコルビン酸

【０１２２】３．アスコルビン酸の添加の前後に十分混合する。各試料または標準物につい
て比較ブランクを調製する。試料と標準のブランクは、ブレオマイシンが除かれ
ている以外は同一の試験反応混合物である。

【０１２３】４．全ての標準物、試料およびそれらのブランクのｐＨを４０ｍＭＨＣｌま
たは４０ｍＭＮａＯＨを用いて約ｐＨ７．２〜７．８に調整する。

【０１２４】５．全てのチューブを１００ｒｐｍの温度調節攪拌器で、約２時間約３７℃で
インキュベートする。

【０１２５】６．０．１ｍｌＥＤＴＡの添加により反応を停止する。

【０１２６】７．１ｍｌＴＢＡおよび１ｍｌ２５％ＨＣｌを添加して、十分に混合する
。

【０１２７】８．新しいまたは酸で洗浄したガラスチューブに混合物を移し、約１５分間約
１００℃で加熱する。

【０１２８】９．冷却後溶液を４．５ｍｌのキュベットに移し、対応するブランク（ブレオ
マイシンなし）に対して５３２ｎｍの吸光度を読む。

【０１２９】１０．各実験で得られた標準曲線から、試験試料中のブレオマイシン−検出可
能な鉄含有量の量を計算する。試薬における鉄汚染を反映するゼロ標準（Ｃｈｅ
ｌｅｘＨ₂Ｏのみを含む）の吸光度を、全ての試験試料から差し引く。

【０１３０】１１．尿のブレオマイシン−検出可能な鉄をｎｍｏｌ／ｍｇクレアチニンとし
て表わす。尿試料におけるクレアチニンを、クレアチニンアッセイキット（Ｓｉ
ｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ５５５−Ａ）を用
いて測定する。

【０１３１】統計解析ナノモル触媒鉄／ｍｇクレアチニンの平均±ＳＥＭとしてデータを表わした。
非対ｔ検定を用いて群平均間の有意な差異を決定した。対のｔ検定を用いて患者
のデータを対照と比較し、０．０５未満のｐ値を有意とみなした。

【０１３２】結果および結論図１、表１および表２に示されるように、尿の触媒鉄は、腎臓疾患のない患者
に比較して、広範囲で様々な腎臓疾患を伴う患者において高められる。したがっ
て、尿の触媒鉄は、腎臓疾患において役割を果たし、ヒトにおける腎臓疾患を示
す。

【０１３３】実施例２：鉄キレート化剤を用いる腎臓疾患を伴う患者の治療腎臓疾患を伴う患者の選択腎臓生検を実施することにより腎臓疾患の診断を行なった。前記診断は、膜性
増殖性糸球体腎炎、膜性腎症、巣状分節状糸球体硬化症、ＩｇＡ腎症、および糖
尿病を伴う患者を包含した。

【０１３４】腎臓疾患を伴う患者の鉄キレート化剤治療異常に高い尿蛋白質を有する腎臓疾患を伴う患者を、鉄キレート化剤デフェリ
プロン（１，２−ジメチル−３−ヒドロキシピリド−４−オン）（Ｌ１）で治療
した。

【０１３５】デフェリプロンを以前記載したカプセルとして合成し（Kontoghiorghes A.J. ら
、Inorganica Chimica Acta 136 ：L11 −L12 （1987）、その教示は参照により
全体として本明細書に組み込まれる）、カプセル当たり５００ｍｇのデフェリプ
ロンを含有するカプセルに調剤した。

【０１３６】デフェリプロンの投与前に前記のように尿の蛋白質および血清クレアチニンを
測定した。１日３回、１日当たり体重１キログラム当たり約３０ｍｇ〜約７５ｍ
ｇの範囲のデフェリプロンの経口摂取により患者を治療した。尿の蛋白質および
血清クレアチニンを、鉄キレート化剤の投与から２〜６ヶ月後に得た。表３に示
されるように、鉄キレート化剤での治療は、腎臓疾患を伴う患者における全ての
尿蛋白質および血清クレアチニンの量を有意に低減した。デフェリプロンの投与
の前（例えば、治療前）および後に測定した全ての尿の蛋白質および血清クレア
チニンを対のｔ検定を用いて比較し、０．０５未満のｐ値を有意とみなした。

【０１３７】これらのデータは、鉄キレート化剤が腎臓疾患を治療したことを示す。したが
って、触媒鉄の効果は有意に低減されうるか、または腎臓に直接または間接に作
用して腎臓を損傷し、それにより治療されないまま（鉄キレート化剤なし）であ
ると全ての尿蛋白質含量および血清クレアチニンの増加を生じる腎臓疾患を引き
起こすのを妨ぎうると考えられる。

【０１３８】

【表１】

【０１３９】

【表２】

【０１４０】

【表３】

【０１４１】均等物本発明をその好ましい態様に関して特に示し、記述したが、添付した特許請求
の範囲に規定されたような本発明の意図および範囲から逸脱することなく、本明
細書で形態および詳細について種々の変更を行なうことができることが、当業者
により理解されるであろう。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、腎臓疾患を有していない（対照）、糖尿病性微量アルブミン尿症を有
している（ＤＭＭｉｃｒｏ）、糖尿病性（ＤＭ）蛋白尿、糸球体腎炎（ＧＭ）
および虚血性腎症を有しているヒトから採取した尿中の触媒鉄含量（ｎｍｏｌ／
ｍｇ尿クレアチニン）を示す。

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１３年２月２０日（２００１．２．２０）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】発明の名称

【補正方法】変更

【補正の内容】

【発明の名称】ヒト腎臓疾患の診断および治療

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０００１

【補正方法】変更

【補正の内容】

【０００１】発明の背景腎臓疾患は進行性であり得、終末期の腎疾患、そして最終的には死に至る。毎
年、世界規模で約６５０，０００人のヒトの患者が終末期の腎疾患を患い、治療
コストは約２百億ドルになると見積もられている（Ｋｌａｈｒ，Ｓ．，Ｃｏｎｔ
ｒｉｂ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１１８：１−５（１９９６））。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 3/10 Ａ６１Ｐ 3/10 13/12 13/12 39/06 39/06 Ｇ０１Ｎ 33/84 Ｇ０１Ｎ 33/84 Ｚ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷＦターム(参考） 2G045 AA16 AA25 CB03 DA42 DB11 FA26 FA29 GC10 JA02 4C084 AA17 MA52 NA10 NA14 ZA811 ZC212 ZC351 4C085 HH17 KA09 KB50 KB56 LL11 4C086 AA01 AA02 BC17 HA28 MA01 MA52 NA10 NA14 ZA81 ZC21 ZC35 4C206 AA01 AA02 HA16 MA01 MA72 NA10 NA14 ZA81 ZC21 ZC35

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ヒト由来の尿サンプル中の触媒鉄を測定する工程を含む、ヒ
トにおける腎臓疾患を診断するための方法。
【請求項２】触媒鉄を尿サンプル中の参照蛋白質に関して測定する、請求
項１記載の方法。
【請求項３】参照蛋白質が尿クレアチニンである、請求項２記載の方法。
【請求項４】尿サンプルを糖尿病性腎症、原発性糸球体腎炎および続発性
糸球体腎炎からなる群より選ばれる進行性腎臓疾患を有するヒトから採取する、
請求項１記載の方法。
【請求項５】（ａ）ヒトから採取した尿サンプル中の触媒鉄含量を測定す
る工程、および（ｂ）尿サンプル中の触媒鉄含量を対照サンプル中の触媒鉄含量と比較する工程
を含み、対照サンプル中の触媒鉄含量より多い尿サンプル中の触媒鉄含量が腎臓疾患であ
ることを示す、ヒトにおける腎臓疾患の診断方法。
【請求項６】鉄キレート化剤をヒトに投与する工程を含む、約１５ｎｍｏ
ｌ／ｍｇ参照蛋白質より多い尿中触媒鉄含量を有するヒトにおける腎臓疾患の治
療方法。
【請求項７】鉄キレート化剤が糖尿病性腎症、原発性糸球体腎炎および続
発性糸球体腎炎からなる群より選ばれる進行性腎臓疾患を有するヒトに投与され
る、請求項６記載の方法。
【請求項８】鉄キレート化剤がデフェリプロン（deferiprone)、デフェロ
キサミン、多価陰イオン性アミン類および置換ポリアザ(polyaza) 化合物からな
る群より選ばれる、請求項６記載の方法。
【請求項９】鉄キレート化剤が一日あたり約２０ｍｇ／ｋｇヒト体重から
約１５０ｍｇ／ｋｇヒト体重の間の範囲の投薬量で投与される、請求項６記載の
方法。
【請求項１０】鉄キレート化剤が反復投与される、請求項６記載の方法。
【請求項１１】鉄キレート化剤が経口投与される、請求項６記載の方法。
【請求項１２】参照蛋白質が尿クレアチニンである、請求項６記載の方法
。
【請求項１３】ヒトから採取した尿サンプル中の蛋白質含量を測定する工
程をさらに含む、請求項６記載の方法。
【請求項１４】ヒトから採取した尿サンプル中の触媒鉄含量を測定する工
程をさらに含む、請求項６記載の方法。
【請求項１５】ヒトから採取した血液サンプル中のクレアチニンを測定す
る工程をさらに含む、請求項６記載の方法。
【請求項１６】ヒトから採取した血液サンプル中の血液尿素窒素を測定す
る工程をさらに含む、請求項６記載の方法。
【請求項１７】ａ）対照サンプルの触媒鉄含量を超える尿中の触媒鉄含量
を有するヒトに投薬量の鉄キレート化剤を投与する工程、ｂ）ヒトから初回尿サンプルを採取する工程、ｃ）初回尿サンプル中の触媒鉄含量を測定する工程、およびｄ）初回尿サンプル中の触媒鉄含量を対照サンプル中の触媒鉄含量と比較する工
程を含む、ヒトにおける腎臓疾患の治療方法。
【請求項１８】第２投薬量の鉄キレート化剤を投与する工程をさらに含み
、前記第２投薬量の量が尿サンプル中の測定された触媒鉄含量と対照サンプル中
の触媒鉄含量との比較により決定される、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】ａ）少なくとも一つの第２尿サンプルをヒトから採取する
工程、ｂ）第２尿サンプル中の触媒鉄含量を測定する工程、およびｃ）第２尿サンプル中の触媒鉄含量を初回尿サンプル、対照サンプルまたはその
両方における触媒鉄含量と比較する工程をさらに有する、請求項１８記載の方法
。
【請求項２０】第２投薬量の鉄キレート化剤を、第２尿サンプル中の尿の
触媒鉄含量が本質的に一定となるまで投与する、請求項１９記載の方法。
【請求項２１】第２投薬量の鉄キレート化剤を、第２尿サンプル中の本質
的に一定の尿中触媒鉄含量が対照サンプルのものとほぼ同じとなるまで投与され
る、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】少なくとも２つの第２投薬量で投与される鉄キレート化剤
の投薬量が約１０ｍｇ／ｋｇヒト体重異なる、請求項２０記載の方法。
【請求項２３】ヒトから採取した血液サンプル中のクレアチニンを測定す
る工程をさらに有する、請求項１７記載の方法。
【請求項２４】ヒトから採取した血液サンプル中の血液尿素窒素を測定す
る工程をさらに有する、請求項１７記載の方法。
【請求項２５】鉄キレート化剤がデフェリプロン、デフェロキサミン、多
価陰イオン性アミン類および置換ポリアザ化合物からなる群より選ばれる、請求
項１７記載の方法。
【請求項２６】鉄キレート化剤が一日あたり約２０ｍｇ／ｋｇヒト体重か
ら約１５０ｍｇ／ｋｇヒト体重の間の範囲の投薬量で投与される、請求項１７記
載の方法。
【請求項２７】尿サンプルが糖尿病性腎症、原発性糸球体腎炎および続発
性糸球体腎炎からなる群より選ばれる進行性腎臓疾患を有するヒトから採取され
る、請求項１７記載の方法。
【請求項２８】尿サンプルが進行性糸球体腎臓疾患を有するヒトから採取
される、請求項１７記載の方法。
【請求項２９】触媒鉄含量が参照蛋白質に関して測定される、請求項１７
記載の方法。
【請求項３０】参照蛋白質が尿クレアチニンである、請求項２９記載の方
法。
【請求項３１】鉄キレート化剤の投与がヒトにおける腎臓疾患の進行を本
質的に停止させる、請求項１７記載の方法。
【請求項３２】鉄キレート化剤の投与がヒトにおける進行性腎臓疾患の重
篤度を低減する、請求項１７記載の方法。
【請求項３３】ａ）ヒトから採取された初回尿サンプルおよび少なくとも
一つの追加の尿サンプル中の触媒鉄含量を測定する工程、ならびにｂ）ヒトから採取された追加の尿サンプル中の触媒鉄含量を初回尿サンプル中の
触媒鉄含量と比較する工程を含み、初回尿サンプル中の触媒鉄含量より多い追加の尿サンプル中の触媒鉄含量の上昇
がヒトにおける腎臓疾患の進行を示す、ヒトにおける腎臓疾患の進行の測定方法
。
【請求項３４】ヒトから採取された初回尿サンプルの触媒鉄含量を第２尿
サンプルの触媒鉄含量と比較する工程を含み、前記第２尿サンプルが初回尿サン
プルを得た後であってかつ鉄キレート化剤の投与後に採取されたものであり、そ
れにより前記の比較が腎臓疾患の進行を軽減するための鉄キレート化剤の投与の
有効性を示す、進行性腎臓疾患に罹患しているヒトを治療するために鉄キレート
化剤を投与する有効性の評価方法。
【請求項３５】ヒト由来の尿サンプル中の触媒鉄含量を測定する工程を含
み、約１５ｎｍｏｌ／ｍｇ参照蛋白質を超える尿サンプル中の触媒鉄含量が、鉄
キレート化剤を用いる進行性腎臓疾患の治療の恩恵を受ける、進行性腎臓疾患に
罹患しているヒトを同定する、鉄キレート化剤による進行性腎臓疾患の治療の恩
恵を受ける、進行性腎臓疾患に罹患しているヒトを同定する方法。
【請求項３６】ａ）対照サンプルを超える尿中触媒鉄含量を有する微量ア
ルブミン尿症（microalbuminuria) に罹患しているヒトに投薬量の鉄キレート化
剤を投与する工程、ｂ）ヒトから初回尿サンプルを採取する工程、ｃ）初回尿サンプル中の触媒鉄含量を測定する工程、およびｄ）初回尿サンプル中の触媒鉄含量を対照サンプル中の触媒鉄含量と比較する工
程を含む、ヒトにおける微量アルブミン尿症の治療方法。
【請求項３７】第２投薬量の鉄キレート化剤を投与する工程をさらに有し
、前記第２投薬量の量が尿サンプル中の測定された触媒鉄含量と対照サンプル中
の触媒鉄含量との比較により決定される、請求項３６記載の方法。
【請求項３８】鉄キレート化剤の投与がヒトにおける微量アルブミン尿症
の進行を本質的に停止する、請求項３６記載の方法。