JP2002533105A - 線虫の生物学的殺虫薬 - Google Patents
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
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- A01K67/033—Rearing or breeding invertebrates; New breeds of invertebrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
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- A01N63/12—Nematodes
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Abstract
(57)【要約】
本発明は、一部の種類の昆虫学的病原性線虫種、Heterorliabditis zealandicaを利用した、コガネムシ、特にローンコガネムシ(lawn scarabs)を調節するための組成物および方法に関する。本発明は、任意に適切な農業用および／または園芸用のキャリアーと混合して、所定量の昆虫学的病原性線虫を含む、幼虫および／またはさなぎのコガネムシの個体群を調節するための組成物であって、前記昆虫学的病原性線虫は、Heterorhabditis zealandica種に属し、最終齢コガネムシ幼虫に対するポットアッセイで測定して３００ＩＪ未満のＬＤ５０値を備える組成物を提供する。また、作用エリアにおけるコガネムシの幼虫および／またはさなぎの個体群を調節する方法であって、前記エリアに、前記組成物を適用することを含む方法を提供する。
Description
【０００１】
本発明は、一部の種類の昆虫学的病原性線虫種、Heterorliabditis zealandic
aを利用した、コガネムシ、特にローンコガネムシ(lawn scarabs)の調節のため
の組成物および方法に関する。
aを利用した、コガネムシ、特にローンコガネムシ(lawn scarabs)の調節のため
の組成物および方法に関する。
【０００２】
「Scarabaeidae」として知られる甲虫のファミリーは、重要な農業および園芸
の害虫として知られる、多数の種類を含む。ローン（芝地）コガネムシ（例えば
、Cyclocephala signaticollis, Heteronychusarator, Adoryphorus couloni, A
ntitrogus morbillosus, Anoplognathus porosus, Ataenius imparalis, Serice
sthis geminata, S.pruinosus, S.nigrolineata, Scitylasericans, Saulostomu
s villosus, Aphodius tasmaniae, Heteronyx spp, Rhopoea magnicornis, Popi
llia japonica, Cyclocephala borealis, C.hirta, C.parallela, Melolontha m
elolontha, Anomala aenea, Phyllophaga phyllophaga, P. hirticula, Phyllop
ertha horticola, Haplididia etrusca, Maladea matrida, Costelytra zealand
ica, Amphimallon solstatialis, およびLigyrus subtropicus）の幼虫は、草の
根を餌とし、牧草、芝（ローン）および芝生に重大なダメージを与える。調節処
理は、通常、化学的殺虫スプレーの使用を含むが、これらは、多数の不利益を有
する。かかる不利益は、低効率（特に最終齢の幼虫に対して）、低特異性および
殺虫剤残留に関する公衆の関心を含む。結果的に、化学的殺虫スプレーによるロ
ーンコガネムシの調節に変わるものが必要とされている。これに関して、本発明
者らは、ローンコガネムシの生物学的調節剤として使用できる、昆虫学的病原性
線虫種、H. zealandicaの一部の種を同定した。
の害虫として知られる、多数の種類を含む。ローン（芝地）コガネムシ（例えば
、Cyclocephala signaticollis, Heteronychusarator, Adoryphorus couloni, A
ntitrogus morbillosus, Anoplognathus porosus, Ataenius imparalis, Serice
sthis geminata, S.pruinosus, S.nigrolineata, Scitylasericans, Saulostomu
s villosus, Aphodius tasmaniae, Heteronyx spp, Rhopoea magnicornis, Popi
llia japonica, Cyclocephala borealis, C.hirta, C.parallela, Melolontha m
elolontha, Anomala aenea, Phyllophaga phyllophaga, P. hirticula, Phyllop
ertha horticola, Haplididia etrusca, Maladea matrida, Costelytra zealand
ica, Amphimallon solstatialis, およびLigyrus subtropicus）の幼虫は、草の
根を餌とし、牧草、芝（ローン）および芝生に重大なダメージを与える。調節処
理は、通常、化学的殺虫スプレーの使用を含むが、これらは、多数の不利益を有
する。かかる不利益は、低効率（特に最終齢の幼虫に対して）、低特異性および
殺虫剤残留に関する公衆の関心を含む。結果的に、化学的殺虫スプレーによるロ
ーンコガネムシの調節に変わるものが必要とされている。これに関して、本発明
者らは、ローンコガネムシの生物学的調節剤として使用できる、昆虫学的病原性
線虫種、H. zealandicaの一部の種を同定した。
【０００３】
かくして、本発明の第一の態様においては、本発明は、幼虫および／またはさ
なぎのコガネムシの個体群を調節するための組成物を提供する。この組成物は、
任意に適切な農業および／または園芸用のキャリアーと混合して、所定量の昆虫
学的病原性線虫を含み、当該昆虫学的病原性線虫は、Heterorhabditis zealandi
ca種に属し、最終齢コガネムシ幼虫に対するポットアッセイで測定して３００未
満の感染性幼若（IJ）のＬＤ５０値を備える。
なぎのコガネムシの個体群を調節するための組成物を提供する。この組成物は、
任意に適切な農業および／または園芸用のキャリアーと混合して、所定量の昆虫
学的病原性線虫を含み、当該昆虫学的病原性線虫は、Heterorhabditis zealandi
ca種に属し、最終齢コガネムシ幼虫に対するポットアッセイで測定して３００未
満の感染性幼若（IJ）のＬＤ５０値を備える。
【０００４】 好ましくは、昆虫病原性線虫は、最終齢のCyclocephala signaticollis幼虫お
よび／または最終齢のPopillia japonica幼虫に対するポットアッセイで測定し
て３００IJ未満のＬＤ５０値を有するH.zealandicaの種に属する。
よび／または最終齢のPopillia japonica幼虫に対するポットアッセイで測定し
て３００IJ未満のＬＤ５０値を有するH.zealandicaの種に属する。
【０００５】 さらに好ましくは、昆虫病原性線虫は、最終齢のC. signaticollis幼虫および
／または最終齢のP. japonica幼虫に対して１７５IJ未満のＬＤ５０値を有するH
.zealandicaの種に属する。特に、ＪＢ１／Ｘ１、ＧＫＢおよびＪＢ３Ｄと称さ
れる系統が好ましい。
／または最終齢のP. japonica幼虫に対して１７５IJ未満のＬＤ５０値を有するH
.zealandicaの種に属する。特に、ＪＢ１／Ｘ１、ＧＫＢおよびＪＢ３Ｄと称さ
れる系統が好ましい。
【０００６】 組成物は、所定量の昆虫病原性線虫、通常は組成物のｍｌ当たり約５０〜１０
０００、好ましくは約５００〜１０００IJを含む。
０００、好ましくは約５００〜１０００IJを含む。
【０００７】 組成物は、通常、適切な農業的および／または園芸的キャリアーも含む。組成
物が水性スプレーの形態であることが望まれるのであれば、キャリアーは、例え
ば、水または、ポリエチレングリコールまたはグリセロール、少量の湿潤剤、ま
たはクエン酸、昆虫血液または低濃度の化学的農薬のような種々の物質の水溶液
から選択される。組成物が固形形態であることが望まれる場合には、キャリアー
は、例えばアルギン酸カルシウムおよびポリアクリルアミド（ゲル化ペレットに
適したもの）、アタプルギト(attapulgite)またはバーニキュライト(verniculit
e)（固形顆粒に適したもの）、または泥炭、海綿、おがくずまたはセルロースの
ような他の湿性物質から選択される。固形形態の組成物は、水性スプレーとして
使用するための水性キャリアー（上述のもの）に分散されても良い。
物が水性スプレーの形態であることが望まれるのであれば、キャリアーは、例え
ば、水または、ポリエチレングリコールまたはグリセロール、少量の湿潤剤、ま
たはクエン酸、昆虫血液または低濃度の化学的農薬のような種々の物質の水溶液
から選択される。組成物が固形形態であることが望まれる場合には、キャリアー
は、例えばアルギン酸カルシウムおよびポリアクリルアミド（ゲル化ペレットに
適したもの）、アタプルギト(attapulgite)またはバーニキュライト(verniculit
e)（固形顆粒に適したもの）、または泥炭、海綿、おがくずまたはセルロースの
ような他の湿性物質から選択される。固形形態の組成物は、水性スプレーとして
使用するための水性キャリアー（上述のもの）に分散されても良い。
【０００８】 組成物は、好気的条件下で、約Ａｗ０．９７の水分活性において、低温（例え
ば２〜１０℃）で貯蔵するのが好ましい。
ば２〜１０℃）で貯蔵するのが好ましい。
【０００９】 第二の態様では、本発明は、作用エリアにおける幼虫および／またはさなぎの
コガネムシの個体群を調節する方法を提供する。当該方法は、前記エリアに、第
一の態様にかかる組成物を適用することを含む。
コガネムシの個体群を調節する方法を提供する。当該方法は、前記エリアに、第
一の態様にかかる組成物を適用することを含む。
【００１０】 水性スプレー形態の組成物では、適用は、加圧、ファンスプレーヤー、ベンチ
ュリスプレーおよびブームスプレーヤーを含む通常の農業的および／または園芸
的スプレー装置を用いて実施することができる。固形形態で適用される組成物で
は、適用は、芝生に拡散肥料に使用されるもののような通常の農業的および／ま
たは園芸的拡散装置を用いて実施することができる。
ュリスプレーおよびブームスプレーヤーを含む通常の農業的および／または園芸
的スプレー装置を用いて実施することができる。固形形態で適用される組成物で
は、適用は、芝生に拡散肥料に使用されるもののような通常の農業的および／ま
たは園芸的拡散装置を用いて実施することができる。
【００１１】 組成物は、通常、５００００〜百万ＩＪ／ｍ2、さらに好ましくは１００００
０〜５０００００ＩＪ／ｍ2を与えるのに十分な量の大量の撒水に曝される作用
エリア似て起用される。組成物を幼虫のコガネムシが餌にする根の領域にしみ込
ませるために、適用後に、作用エリアを再び大量の撒水に曝すことも好ましい。
組成物の適用は、好ましくは夕暮れに実施される。
０〜５０００００ＩＪ／ｍ2を与えるのに十分な量の大量の撒水に曝される作用
エリア似て起用される。組成物を幼虫のコガネムシが餌にする根の領域にしみ込
ませるために、適用後に、作用エリアを再び大量の撒水に曝すことも好ましい。
組成物の適用は、好ましくは夕暮れに実施される。
【００１２】 本発明の組成物および方法は、ローン（芝地）コガネムシ（上述したもの）お
よび他の有害なコガネムシ（例えば、サトウキビコガネムシ、ブルーベリーコガ
ネムシ等）の調節に使用できる。
よび他の有害なコガネムシ（例えば、サトウキビコガネムシ、ブルーベリーコガ
ネムシ等）の調節に使用できる。
【００１３】 さらなる態様では、本発明は、実質的に精製された形態で、ＪＢ１／Ｘ１、Ｇ
ＫＢおよびＪＢ３Ｄと称されるH.zealandica系統から選択される線虫を提供する
。
ＫＢおよびＪＢ３Ｄと称されるH.zealandica系統から選択される線虫を提供する
。
【００１４】 幼虫および／またはさなぎのコガネムシの個体群に関連してここで用いられる
用語“調節”とは、前記個体群を維持（すなわち増加防止）および低減すること
の両方を指す。 明細書を通して用いられる用語“含む”とは、記述した工程、成分または特徴
、あるいは工程、成分または特徴の群にさらに別の工程、成分または特徴、ある
いは工程、成分または特徴の群を伴ったもの、または伴わないものを指す。 本発明を、以下に、非限定的な例および図面を参照しながら記述する。
用語“調節”とは、前記個体群を維持（すなわち増加防止）および低減すること
の両方を指す。 明細書を通して用いられる用語“含む”とは、記述した工程、成分または特徴
、あるいは工程、成分または特徴の群にさらに別の工程、成分または特徴、ある
いは工程、成分または特徴の群を伴ったもの、または伴わないものを指す。 本発明を、以下に、非限定的な例および図面を参照しながら記述する。
【００１５】
実施例１：H.zealandica線虫の単離および特徴決定 線虫が寄生する土壌サンプルを、オーストラリア中の多数の農場から回収した
。BeddingとAkhurst(1975)の方法を用いて、線虫を単離し、形態学的特徴（Wout
s(1979)参照）およびＤＮＡ分析（表１および２参照）に基づいて、一つの種に
指定した。単離された線虫の８つが、H.zealandica種に指定された。 ３つのH.zealandica種のサンプル、すなわちＪＢ１／Ｘ１、ＧＫＢおよびＪＢ
３Ｄは、ブダペスト条約の下に、オーストラリア政府分析研究所（ＡＧＡＬ）、
ピンブル(Pymble)、ニューサウスウェールズ、オーストラリアに寄託した。これ
らの寄託物は、それぞれ、受諾番号１０７２６、１０７２７および１０７２８が
与えられている。
。BeddingとAkhurst(1975)の方法を用いて、線虫を単離し、形態学的特徴（Wout
s(1979)参照）およびＤＮＡ分析（表１および２参照）に基づいて、一つの種に
指定した。単離された線虫の８つが、H.zealandica種に指定された。 ３つのH.zealandica種のサンプル、すなわちＪＢ１／Ｘ１、ＧＫＢおよびＪＢ
３Ｄは、ブダペスト条約の下に、オーストラリア政府分析研究所（ＡＧＡＬ）、
ピンブル(Pymble)、ニューサウスウェールズ、オーストラリアに寄託した。これ
らの寄託物は、それぞれ、受諾番号１０７２６、１０７２７および１０７２８が
与えられている。
【００１６】 多型ＤＮＡのランダム増幅（ＲＡＰＤ）実験を、Hashmi、GlazerおよびGangle
r(1996)の方法に従ってH.zealandica線虫からのＤＮＡに実施した。結果は、図
１−３に示されており、種々の系統がＲＡＰＤパターンに基づいて分離されるこ
とが分かる（例えば、系統ＪＢ１／Ｘ１およびＪＢ３Ｄは、プライマーＯＰ−Ｘ
１１を用いて得られたＲＡＰＤパターンに基づいて区別されうる）。
r(1996)の方法に従ってH.zealandica線虫からのＤＮＡに実施した。結果は、図
１−３に示されており、種々の系統がＲＡＰＤパターンに基づいて分離されるこ
とが分かる（例えば、系統ＪＢ１／Ｘ１およびＪＢ３Ｄは、プライマーＯＰ−Ｘ
１１を用いて得られたＲＡＰＤパターンに基づいて区別されうる）。
【００１７】
【表１】
【００１８】
【表２】
【００１９】 実施例２：H.zealandica線虫を用いたコガネムシの調節 数種のH.zealandicaと他の線虫を、コガネムシに対して用いて、種々の試みを
実施した。研究所ベースの試験は、各系統の同数の線虫で幼虫の均質なセレクシ
ョンに投与すること、および殺傷された幼虫の数を評価すること（比較試験参照
）、並びに、最終齢のCyclocephala signaticollisに対するポットアッセイから
得られたＬＤ５０を調べること（ＬＤ５０試験参照）により系統を比較すること
を含む。
実施した。研究所ベースの試験は、各系統の同数の線虫で幼虫の均質なセレクシ
ョンに投与すること、および殺傷された幼虫の数を評価すること（比較試験参照
）、並びに、最終齢のCyclocephala signaticollisに対するポットアッセイから
得られたＬＤ５０を調べること（ＬＤ５０試験参照）により系統を比較すること
を含む。
【００２０】 比較試験 １.Dermolepida Bedding、MolyneuxおよびAkhurst(1983)（ＬＤ５０試験参照）の方法を用いた
ポットアッセイを、H.zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１およびＪＢ１／Ｑを投与した
Dermolepidaの最終齢の幼虫を用いて実施した。ＪＢ１／Ｘ１は、７０％の殺傷
を達成したが、ＪＢ１／Ｑはほとんど効果がなかった（１０００ＩＪ／ポットに
おいて）。上記系統、並びに、H.zealandica NZH3およびS.glaseri NC34を、同
じ投与量で用いた次なる実験は（図４参照）、ＪＢ１／Ｘ１が優れた殺傷を達成
することを示した（ＪＢ１／Ｘ１が３週間後に９０％以上を殺傷したのに対して
、他の中で最も良いS.glaseri NC34でも３週間後に５７％だけであった）。調節
死亡率は、第一齢の幼虫に実施した試験ではあまりに高すぎるために、妥当な結
果を与えなかった。
ポットアッセイを、H.zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１およびＪＢ１／Ｑを投与した
Dermolepidaの最終齢の幼虫を用いて実施した。ＪＢ１／Ｘ１は、７０％の殺傷
を達成したが、ＪＢ１／Ｑはほとんど効果がなかった（１０００ＩＪ／ポットに
おいて）。上記系統、並びに、H.zealandica NZH3およびS.glaseri NC34を、同
じ投与量で用いた次なる実験は（図４参照）、ＪＢ１／Ｘ１が優れた殺傷を達成
することを示した（ＪＢ１／Ｘ１が３週間後に９０％以上を殺傷したのに対して
、他の中で最も良いS.glaseri NC34でも３週間後に５７％だけであった）。調節
死亡率は、第一齢の幼虫に実施した試験ではあまりに高すぎるために、妥当な結
果を与えなかった。
【００２１】 ２．Cyclocephala S.glaseriのＮＣ３４系統、H. bacteriophora HP88、およびH.zealandicaのNZ
H3およびＪＢ１／Ｘ１系統を用いて、最終齢のC.signaticollis幼虫にポットア
ッセイを行った（５００ＩＪ／ポット）。得られた結果（図５参照）は、ＪＢ１
／Ｘ１が優れた殺傷を達成することを示した。２００ＩＪ／ポットの投与量で、
ＪＢ１／Ｘ１と、H.zealandicaの一定範囲の他の系統（すなわち、ＪＢ３／Ｄ、
植物(Botany)、ＧＫＡ、ＧＫＢ、ＧＫＣおよびＪＢ３／Ｆ）とを比較する次なる
アッセイは、ＪＢ１／Ｘ１が、殺傷力において同等（ＪＢ３／Ｄ、Botany、ＧＫ
ＢおよびＧＫＣ）かそれ以上（ＪＢ３／ＦおよびＧＫＡ）であることを示した。
さらに、ＪＢ１／Ｘ１を、一定範囲の農場回収材料（すなわち、ＪＢ４／Ａから
ＪＢ４／Ｅ、Ｑｌｄ ＣＳ９およびＪＢ４／Ｈ、これら全てはH.zealandica）と
２００ＩＪ／ポットで比較したポットアッセイは、ＪＢ１／Ｘ１が優れた殺傷力
を達成することが再度確認された。
H3およびＪＢ１／Ｘ１系統を用いて、最終齢のC.signaticollis幼虫にポットア
ッセイを行った（５００ＩＪ／ポット）。得られた結果（図５参照）は、ＪＢ１
／Ｘ１が優れた殺傷を達成することを示した。２００ＩＪ／ポットの投与量で、
ＪＢ１／Ｘ１と、H.zealandicaの一定範囲の他の系統（すなわち、ＪＢ３／Ｄ、
植物(Botany)、ＧＫＡ、ＧＫＢ、ＧＫＣおよびＪＢ３／Ｆ）とを比較する次なる
アッセイは、ＪＢ１／Ｘ１が、殺傷力において同等（ＪＢ３／Ｄ、Botany、ＧＫ
ＢおよびＧＫＣ）かそれ以上（ＪＢ３／ＦおよびＧＫＡ）であることを示した。
さらに、ＪＢ１／Ｘ１を、一定範囲の農場回収材料（すなわち、ＪＢ４／Ａから
ＪＢ４／Ｅ、Ｑｌｄ ＣＳ９およびＪＢ４／Ｈ、これら全てはH.zealandica）と
２００ＩＪ／ポットで比較したポットアッセイは、ＪＢ１／Ｘ１が優れた殺傷力
を達成することが再度確認された。
【００２２】 ３．Antitrogus parvulus H.zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１およびＮＺＨ３並びにS.glaseri系統ＮＣ３４
を比較する、最終齢のAntitrogu parvulusに対するポットアッセイを行った。結
果（図６参照）は、ＮＺＨ３が短い期間で最も優れた殺傷を達成することを示し
た。さらに、ＮＺＨ３は、１週間でコントロールのほぼ最大レベルを達成したが
、ＪＢ１／Ｘ１は二週間を要した。より低い投与量（１０００の代わりに５００
）を用いた次なるアッセイでは、H.megidis系統MicroBio H.bacteriophora系統H
P88およびH.zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１およびＮＺＨ３の全てにおいて、非常
に僅かなレベルの殺傷しか示さなかった。
を比較する、最終齢のAntitrogu parvulusに対するポットアッセイを行った。結
果（図６参照）は、ＮＺＨ３が短い期間で最も優れた殺傷を達成することを示し
た。さらに、ＮＺＨ３は、１週間でコントロールのほぼ最大レベルを達成したが
、ＪＢ１／Ｘ１は二週間を要した。より低い投与量（１０００の代わりに５００
）を用いた次なるアッセイでは、H.megidis系統MicroBio H.bacteriophora系統H
P88およびH.zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１およびＮＺＨ３の全てにおいて、非常
に僅かなレベルの殺傷しか示さなかった。
【００２３】 ４．Lepidiota negatoria H.zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１およびS.glaseri系統ＮＣ３４を比較する、最
終齢のLepidiota negatoriaについてポットアッセイを実施した。この結果（図
７参照）は、ＪＢ１／Ｘ１が２週間後に幼虫当たり１００の線虫を用いて８０％
以上殺傷したのに対して、ＮＣ３４は、同じ期間後に１０００の線虫を用いて３
５％しか殺傷しなかった。
終齢のLepidiota negatoriaについてポットアッセイを実施した。この結果（図
７参照）は、ＪＢ１／Ｘ１が２週間後に幼虫当たり１００の線虫を用いて８０％
以上殺傷したのに対して、ＮＣ３４は、同じ期間後に１０００の線虫を用いて３
５％しか殺傷しなかった。
【００２４】 ５．Heteronychus arator １０００ＩＪ／ポットにおいて、H.zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１、ＮＣ３４、
ＮＺＨ３およびBotany、S.feltiaeおよびS.carpocapsae BWを比較する、成虫のH
eteronychus arator（アフリカクロ甲虫(African Black Beetle)）に対するポッ
トアッセイを行った。結果（図８参照）は、ＢＷがある程度調節できたのに対し
、その他は効果がないことを示した。
ＮＺＨ３およびBotany、S.feltiaeおよびS.carpocapsae BWを比較する、成虫のH
eteronychus arator（アフリカクロ甲虫(African Black Beetle)）に対するポッ
トアッセイを行った。結果（図８参照）は、ＢＷがある程度調節できたのに対し
、その他は効果がないことを示した。
【００２５】 ６．Xylotrupes gideon 予備的研究は、１０００ＩＪ／ポットの投与量において、H.zealandicaのＪＢ
１／Ｘ１が、Xylotrupes gideonの幼虫を殺傷できることを示した。
１／Ｘ１が、Xylotrupes gideonの幼虫を殺傷できることを示した。
【００２６】 ７．Anoplognathus sp. 予備的研究は、１０００ＩＪ／ポットの投与量において、H.zealandicaのＪＢ
１／Ｘ１が、Anoplognathus種を殺傷できることを示した。
１／Ｘ１が、Anoplognathus種を殺傷できることを示した。
【００２７】 C.signaticollisを用いたＬＤ５０試験 新たに回収した最終齢のC. signaticollisに対するH.zealandica系統Windsor
、JB1/X1、GKB、NZH3、GKA、JB6、JB3/DおよびHT390 (H.sp)のＬＤ５０を調べる
アッセイを、以下の方法に従って実施した。 C.signaticollisの幼虫（Austrarian National University, キャンベラ, Aus
tralian Capital Territoryの運動場から回収）を、湿気分約７％の約８０ｇの
細かい砂で上から１ｃｍ以内まで満たされたプラスチックスクリューキャップ資
料瓶（直径４．２ｃｍ、高さ６ｃｍ）内の線虫に個別に曝した（ｐＦ＝１．３）
。幼虫は瓶の底に配置された。線虫を、上の中心に配置されたウェル（０．５ｃ
ｍ直径、２ｃｍ深さ）に１ｍｌの水に導入し、次いで砂で満たした。線虫の数は
、希釈カウントにより推定した。各線虫系統につき各投与の２０の適用があった
。２３度の温度で１４日間インキュベーションした後、C.larvae（幼虫）を取り
出し、死んでいれば、昆虫リンガー溶液で線虫感染について、解剖して顕微鏡で
調べた。ＬＤ５０の値を、Finney 1971のプロビット分析を用いて計算した。
、JB1/X1、GKB、NZH3、GKA、JB6、JB3/DおよびHT390 (H.sp)のＬＤ５０を調べる
アッセイを、以下の方法に従って実施した。 C.signaticollisの幼虫（Austrarian National University, キャンベラ, Aus
tralian Capital Territoryの運動場から回収）を、湿気分約７％の約８０ｇの
細かい砂で上から１ｃｍ以内まで満たされたプラスチックスクリューキャップ資
料瓶（直径４．２ｃｍ、高さ６ｃｍ）内の線虫に個別に曝した（ｐＦ＝１．３）
。幼虫は瓶の底に配置された。線虫を、上の中心に配置されたウェル（０．５ｃ
ｍ直径、２ｃｍ深さ）に１ｍｌの水に導入し、次いで砂で満たした。線虫の数は
、希釈カウントにより推定した。各線虫系統につき各投与の２０の適用があった
。２３度の温度で１４日間インキュベーションした後、C.larvae（幼虫）を取り
出し、死んでいれば、昆虫リンガー溶液で線虫感染について、解剖して顕微鏡で
調べた。ＬＤ５０の値を、Finney 1971のプロビット分析を用いて計算した。
【００２８】 結果は図９に示されている。特に、図９は、一定範囲の投与量（死亡率コント
ロールについて修正）において、各系統により達成された殺傷レベルを示す。 これらの結果は、以下の表３のように、C.signaticollisに対するＬＤ５０の
算出を可能にした。
ロールについて修正）において、各系統により達成された殺傷レベルを示す。 これらの結果は、以下の表３のように、C.signaticollisに対するＬＤ５０の
算出を可能にした。
【００２９】
【表３】
【００３０】 他のコガネムシ種を用いたＬＤ５０試験 他種のコガネムシ（すなわち、日本の甲虫、P.japonica）に対するH.zealandi
ca系統ＪＢ１／Ｘ１のＬＤ５０を以下の方法により調べることができる。 １．甲虫の幼虫を、湿気分約７％とする水と慎重に混合した８０ｇの、清潔な、
細かい砂で上から１ｃｍ以内まで満たされたプラスチックスクリューキャップ資
料瓶（直径４．２ｃｍ、高さ６ｃｍ）内の線虫に個別に曝した（Ｐｆ＝１．３）
。幼虫は瓶の底に配置され、その上に軽く砂をかぶせ、蓋をしっかりと閉めた。
２．線虫を、中心に配置されたウェル（０．５ｃｍ直径、２ｃｍ深さ）に１ｍｌ
の水に導入し、次いで砂で満たした。 ３．５つの投与のＩＪを２０のコガネムシ幼虫に適用し、さらに４０の幼虫をコ
ントロールとして用いた（全部で１４０の幼虫）。用いた投与量は、１０、３３
、１００、３３０および１０００ＩＪ／ｍｌである。 ４．幼虫を、２３℃で１または２週間後に調べ、両方の機会に生死を記録した。
５．ＬＤ５０を、ソフトウェアパッケージ、Genstat 5(Genstat 5, Release 4.1
第３版 Lawes Agicultural Trust (IACR-Rothamsted), 1997)のプロビット分析
およびFieller処理を用いて算出する。
ca系統ＪＢ１／Ｘ１のＬＤ５０を以下の方法により調べることができる。 １．甲虫の幼虫を、湿気分約７％とする水と慎重に混合した８０ｇの、清潔な、
細かい砂で上から１ｃｍ以内まで満たされたプラスチックスクリューキャップ資
料瓶（直径４．２ｃｍ、高さ６ｃｍ）内の線虫に個別に曝した（Ｐｆ＝１．３）
。幼虫は瓶の底に配置され、その上に軽く砂をかぶせ、蓋をしっかりと閉めた。
２．線虫を、中心に配置されたウェル（０．５ｃｍ直径、２ｃｍ深さ）に１ｍｌ
の水に導入し、次いで砂で満たした。 ３．５つの投与のＩＪを２０のコガネムシ幼虫に適用し、さらに４０の幼虫をコ
ントロールとして用いた（全部で１４０の幼虫）。用いた投与量は、１０、３３
、１００、３３０および１０００ＩＪ／ｍｌである。 ４．幼虫を、２３℃で１または２週間後に調べ、両方の機会に生死を記録した。
５．ＬＤ５０を、ソフトウェアパッケージ、Genstat 5(Genstat 5, Release 4.1
第３版 Lawes Agicultural Trust (IACR-Rothamsted), 1997)のプロビット分析
およびFieller処理を用いて算出する。
【００３１】 表４および５は、上記方法を用いた種々のコガネムシ種に対するH.zealandica
のＬＤ５０の結果を与える。
のＬＤ５０の結果を与える。
【００３２】
【表４】
【００３３】
【表５】
【００３４】 実施例３：フィールドにおける種々のコガネムシに対するH. zealandica線虫の
効果 小さいスケールのフィールド試験を、生きているおよび死んでいるコガネムシ
および幼虫を数えるために周期的な“掘り起こし(digging up)”により小さな芝
地を処理することによって行った。
効果 小さいスケールのフィールド試験を、生きているおよび死んでいるコガネムシ
および幼虫を数えるために周期的な“掘り起こし(digging up)”により小さな芝
地を処理することによって行った。
【００３５】 １．ビクトリア（オーストラリア）のペニンスラゴルフクラブ(Peninsula Golf
Club)で１９９９年の２月に試験を行った。ここでは、クロ甲虫H.arator幼虫の
大量の発生があった。１０ｍ2の４つの芝地を、種々の別の処理を含むランダム
ブロックデザインの一部として２５００００ＩＪ／ｍ2の量でH.zealandica ＪＢ
１／Ｘ１で処理した。観察により、処理されたエリアの５０％の幼虫が二週間後
に殺傷され、三週間後に８０％が殺傷されたが（図１０参照）、コントロールプ
ロットでは無視できる線虫の死亡だけが観察された。この試験とは別に、ゴルフ
クラブ管理者が、僅かに１０００００ＩＪ／ｍ2を用いてより広範囲の芝地（約
２ヘクタール）を処理し、処理したエリアでは鳥の捕食によるダメージは見られ
なかったが、近くでは大きなダメージが見られた。
Club)で１９９９年の２月に試験を行った。ここでは、クロ甲虫H.arator幼虫の
大量の発生があった。１０ｍ2の４つの芝地を、種々の別の処理を含むランダム
ブロックデザインの一部として２５００００ＩＪ／ｍ2の量でH.zealandica ＪＢ
１／Ｘ１で処理した。観察により、処理されたエリアの５０％の幼虫が二週間後
に殺傷され、三週間後に８０％が殺傷されたが（図１０参照）、コントロールプ
ロットでは無視できる線虫の死亡だけが観察された。この試験とは別に、ゴルフ
クラブ管理者が、僅かに１０００００ＩＪ／ｍ2を用いてより広範囲の芝地（約
２ヘクタール）を処理し、処理したエリアでは鳥の捕食によるダメージは見られ
なかったが、近くでは大きなダメージが見られた。
【００３６】 ２．第二の試験では、５０００００ＩＪ／ｍ2を、アルゼンチンコガネムシ、C.s
ignaticollisが大量に発生したキャンベラサッカー場（Australian Capital Ter
ritory）の１００ｍ2以上に散布した。８日後、６つのサンプルエリアにわたっ
て、３３％の線虫が死亡し、２３日後には５２％が死亡し、３０日後には６１％
が死亡したが、乾燥した土壌エリアではわずかに３％しか死ななかった。６８日
後には、処理されたエリアの１３の２００ｃｍ2サンプルでは、生きたコガネム
シは全く見いだされず、１６の死んだコガネムシが見いだされたのに対して、未
処理のエリアでは１８の生きた幼虫が見いだされた。
ignaticollisが大量に発生したキャンベラサッカー場（Australian Capital Ter
ritory）の１００ｍ2以上に散布した。８日後、６つのサンプルエリアにわたっ
て、３３％の線虫が死亡し、２３日後には５２％が死亡し、３０日後には６１％
が死亡したが、乾燥した土壌エリアではわずかに３％しか死ななかった。６８日
後には、処理されたエリアの１３の２００ｃｍ2サンプルでは、生きたコガネム
シは全く見いだされず、１６の死んだコガネムシが見いだされたのに対して、未
処理のエリアでは１８の生きた幼虫が見いだされた。
【００３７】 ３．非常に豊富な草がはえ、C.signaticollisが深刻に発生した二つのキャンベ
ラバックガーデンの芝生（Australian Capital Territory）の小さなエリアを、
百万ＩＪ／ｍ2のH.zealandicaで処理した。第一のガーデンでは、１１日後に、
一つのプロットで３０％の線虫の死亡があり、３５日後には一つのプロットで７
４％の線虫の死亡があり、別のプロットでは９０％の死亡があった（それぞれ、
僅かに１９および１１の幼虫に基づく）。第二のガーデンでは、２０日後にコガ
ネムシの死亡は全く確認されなかったが、４０日後には全部で４２の死亡と４の
生存したコガネムシ（９１％）が、３つのプロットのサンプルにおいて見いださ
れた。
ラバックガーデンの芝生（Australian Capital Territory）の小さなエリアを、
百万ＩＪ／ｍ2のH.zealandicaで処理した。第一のガーデンでは、１１日後に、
一つのプロットで３０％の線虫の死亡があり、３５日後には一つのプロットで７
４％の線虫の死亡があり、別のプロットでは９０％の死亡があった（それぞれ、
僅かに１９および１１の幼虫に基づく）。第二のガーデンでは、２０日後にコガ
ネムシの死亡は全く確認されなかったが、４０日後には全部で４２の死亡と４の
生存したコガネムシ（９１％）が、３つのプロットのサンプルにおいて見いださ
れた。
【００３８】 ４．１９９９年２月に、Australian National University(Australian Capital
Territory)の中庭の芝地の４つのエリアを、５０００００ＩＪ／ｍ2のH.zealand
icaで処理した。二週間後、僅かな線虫の死亡があり、３週間後には平均で４８
％の線虫の死亡が３つのプロットにわたって観察され、４週間後には８１％、６
週間後には９０％の線虫の死亡があった
Territory)の中庭の芝地の４つのエリアを、５０００００ＩＪ／ｍ2のH.zealand
icaで処理した。二週間後、僅かな線虫の死亡があり、３週間後には平均で４８
％の線虫の死亡が３つのプロットにわたって観察され、４週間後には８１％、６
週間後には９０％の線虫の死亡があった
【００３９】 上記結果は、H.zealandicaの一部の系統が、コガネムシの生物学的調節剤とし
て使用できることを示している。H.zealandica線虫は、Bedding(1981, 1984)に
記載されているように固形培養を用いて容易かつ低コストで飼育できる。液体ま
たは固体組成物におけるそれらの使用は、化学農薬噴霧によるローン（芝地）コ
ガネムシ調節に変わる可能性を有する。
て使用できることを示している。H.zealandica線虫は、Bedding(1981, 1984)に
記載されているように固形培養を用いて容易かつ低コストで飼育できる。液体ま
たは固体組成物におけるそれらの使用は、化学農薬噴霧によるローン（芝地）コ
ガネムシ調節に変わる可能性を有する。
【００４０】 当業者であれば、広く記載した本発明の範囲または精神から離れることなく、
特定の実施態様に記載された発明に対して多くの変更および／または修正を加え
られることは自明である。それゆえ、本発明の実施態様は、例示であって制限す
るものではないと考えられるべきである。
特定の実施態様に記載された発明に対して多くの変更および／または修正を加え
られることは自明である。それゆえ、本発明の実施態様は、例示であって制限す
るものではないと考えられるべきである。
【００４１】 「参考文献」
【図１】 H.zealandicaおよび他の比較系統からのＤＮＡについて処理した
ＲＡＰＤゲルを示す。用いたプライマーは、ＯＰ−Ａ０４：５’ＡＡＴＣＧＧＧ
ＣＴＧ３’（Operon Technologies Inc.）（Key:1. 100bp DNA Ladder; 2. H.ze
alandica (Great Keppel A）; 3.H.zealandica (Great Keppel B); 4.H.zealand
ica (Great Keppel C); 5.H.zealandica (Windsor); 6. H.zealandica (NZH3);
7. H.zealandica (WA Het); 8. Heterorhabditis sp. (JB6); 9. H.zealandica
(JB3D); 10 H.zealandica (JBX1); 11. Heterorhabditis sp. (HT390); 12. H.m
egidis (Microbio); 13. H.bacteriophera (NJ))。
ＲＡＰＤゲルを示す。用いたプライマーは、ＯＰ−Ａ０４：５’ＡＡＴＣＧＧＧ
ＣＴＧ３’（Operon Technologies Inc.）（Key:1. 100bp DNA Ladder; 2. H.ze
alandica (Great Keppel A）; 3.H.zealandica (Great Keppel B); 4.H.zealand
ica (Great Keppel C); 5.H.zealandica (Windsor); 6. H.zealandica (NZH3);
7. H.zealandica (WA Het); 8. Heterorhabditis sp. (JB6); 9. H.zealandica
(JB3D); 10 H.zealandica (JBX1); 11. Heterorhabditis sp. (HT390); 12. H.m
egidis (Microbio); 13. H.bacteriophera (NJ))。
【図２】 H.zealandicaおよび他の比較系統からのＤＮＡについて処理した
ＲＡＰＤゲルを示す。用いたプライマーは、ＯＰ−Ｆ０３：５’ＣＣＴＧＡＴＣ
ＡＣＣ３’（Operon Technologies Inc.）（Key:1. 100bp DNA Ladder; 2. H.ze
alandica (Great Keppel A）; 3. H.zealandica (Great Keppel B); 4.H.zealan
dica (Great Keppel C); 5.H.zealandica (Windsor); 6. H.zealandica (NZH3);
7. H.zealandica (WA Het); 8. Heterorhabditis sp. (JB6); 9. H.zealandica
(JB3D); 10 H.zealandica (JBX1); 11. Heterorhabditis sp. (HT390); 12. H.
megidis (Microbio); 13. Heterorhabditis sp. (M145); 14. H.bacteriophera
(NJ))。
ＲＡＰＤゲルを示す。用いたプライマーは、ＯＰ−Ｆ０３：５’ＣＣＴＧＡＴＣ
ＡＣＣ３’（Operon Technologies Inc.）（Key:1. 100bp DNA Ladder; 2. H.ze
alandica (Great Keppel A）; 3. H.zealandica (Great Keppel B); 4.H.zealan
dica (Great Keppel C); 5.H.zealandica (Windsor); 6. H.zealandica (NZH3);
7. H.zealandica (WA Het); 8. Heterorhabditis sp. (JB6); 9. H.zealandica
(JB3D); 10 H.zealandica (JBX1); 11. Heterorhabditis sp. (HT390); 12. H.
megidis (Microbio); 13. Heterorhabditis sp. (M145); 14. H.bacteriophera
(NJ))。
【図３】 H.zealandicaおよび他の比較系統からのＤＮＡについて処理した
ＲＡＰＤゲルを示す。用いたプライマーは、ＯＰ−Ｘ１１：５’ＧＧＡＧＣＣＴ
ＣＡＧ３’（Operon Technologies Inc.）（Key:1. 100bp DNA Ladder; 2. H.ze
alandica (Great Keppel A）; 3. H.zealandica (Great Keppel B); 4.H.zealan
dica (Great Keppel C); 5.H.zealandica (Windsor); 6. H.zealandica (NZH3);
7. H.zealandica (WA Het); 8. Heterorhabditis sp. (JB6); 9. H.zealandica
(JB3D); 10 H.zealandica (JBX1); 11. Heterorhabditis sp. (HT390)。
ＲＡＰＤゲルを示す。用いたプライマーは、ＯＰ−Ｘ１１：５’ＧＧＡＧＣＣＴ
ＣＡＧ３’（Operon Technologies Inc.）（Key:1. 100bp DNA Ladder; 2. H.ze
alandica (Great Keppel A）; 3. H.zealandica (Great Keppel B); 4.H.zealan
dica (Great Keppel C); 5.H.zealandica (Windsor); 6. H.zealandica (NZH3);
7. H.zealandica (WA Het); 8. Heterorhabditis sp. (JB6); 9. H.zealandica
(JB3D); 10 H.zealandica (JBX1); 11. Heterorhabditis sp. (HT390)。
【図４】 H. zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１、ＪＢ１／ＱおよびＮＺＨ３お
よびSteinernema glaseri系統ＮＣ３４により得られたDermolepidaの死亡率を評
価するために実施したポットアッセイの図式的結果を示す。
よびSteinernema glaseri系統ＮＣ３４により得られたDermolepidaの死亡率を評
価するために実施したポットアッセイの図式的結果を示す。
【図５】 H. zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１およびＮＺＨ３、S. glaseri系
統ＮＣ３４およびH.bacteriophora HP88により得られたC.signaticollisの死亡
率を評価するために実施したポットアッセイの図式的結果を示す。
統ＮＣ３４およびH.bacteriophora HP88により得られたC.signaticollisの死亡
率を評価するために実施したポットアッセイの図式的結果を示す。
【図６】 H. zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１（１００、３３０および１００
線虫当たり）およびＮＺＨ３およびS. glaseri系統ＮＣ３４により得られたA. p
arvulusの死亡率を評価するために実施したポットアッセイの図式的結果を示す
。
線虫当たり）およびＮＺＨ３およびS. glaseri系統ＮＣ３４により得られたA. p
arvulusの死亡率を評価するために実施したポットアッセイの図式的結果を示す
。
【図７】 H. zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１およびS. glaseri系統ＮＣ３４
により得られたL. negatoriaの死亡率を評価するために実施したポットアッセイ
の図式的結果を示す。
により得られたL. negatoriaの死亡率を評価するために実施したポットアッセイ
の図式的結果を示す。
【図８】 H. zealandica系統ＪＢ１／Ｘ１、ＮＺＨ３および植物(Botany)
、 およびS. glaseri系統ＮＣ３４、S. feltiaeおよびS. carpocapsae BWにより
得られた成虫のH. aratorの死亡率を評価するための図式的結果を示す。
、 およびS. glaseri系統ＮＣ３４、S. feltiaeおよびS. carpocapsae BWにより
得られた成虫のH. aratorの死亡率を評価するための図式的結果を示す。
【図９】 最終齢のC.signaticollisに対するポットアッセイにおけるH.zea
landica系統のＬＤ５０を調べるために行われた実験の図式的結果を示す。
landica系統のＬＤ５０を調べるために行われた実験の図式的結果を示す。
【図１０】 実施例３におけるフィールドにおける種々のコガネムシに対す
るH. zealandica線虫の効果を示す。
るH. zealandica線虫の効果を示す。
【手続補正書】
【提出日】平成１３年６月２８日（２００１．６．２８）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 ロビン・アンソニー・ベディング オーストラリア・オーストラリアン・キャ ピタル・テリトリー・2514・クック・ブー ス・クレッセント・５ (72)発明者 シモン・ダニエラ・クラーク オーストラリア・オーストラリアン・キャ ピタル・テリトリー・2906・コンダー・ナ ーリ・プレイス・12 (72)発明者 カレン・ルイーズ・バトラー オーストラリア・オーストラリアン・キャ ピタル・テリトリー・2602・アインスリ ー・アンガス・ストリート・30 (72)発明者 ジャッケリン・ルイーズ・ヴェラ オーストラリア・オーストラリアン・キャ ピタル・テリトリー・2615・フライン・バ ーバー・コート・57 (72)発明者 フェリス・ドライヴァー オーストラリア・オーストラリアン・キャ ピタル・テリトリー・2614・アランダ・バ ナムビラ・ストリート・84 Ｆターム(参考） 4H011 AC01 BA01 BB23 DA22
Claims (14)
- 【請求項１】 任意に適切な農業および／または園芸用のキャリアーと混合
して、所定量の昆虫学的病原性線虫を含む、幼虫および／またはさなぎのコガネ
ムシの個体群を調節するための組成物であって、前記昆虫学的病原性線虫は、He
terorhabditis zealandica種に属し、最終齢コガネムシ幼虫に対するポットアッ
セイで測定して３００ＩＪ未満のＬＤ５０値を備える組成物。 - 【請求項２】 昆虫学的病原性線虫が、最終齢のCyclocephala signaticoll
is幼虫および／または最終齢のPopillia japonica幼虫に対するポットアッセイ
で測定して３００ＩＪ未満のＬＤ５０値を有するH.zealandicaの種に属する、請
求項１記載の組成物。 - 【請求項３】 昆虫学的病原性線虫が、最終齢のC. signaticollis幼虫およ
び／または最終齢のP. japonica幼虫に対して１７５ＩＪ未満のＬＤ５０値を有
するH.zealandicaの種に属する、請求項１記載の組成物。 - 【請求項４】 昆虫学的病原性線虫が、ＪＢ１／Ｘ１、ＧＫＢおよびＪＢ３
ＤからなるH.zealandica種の群から選択される、請求項１記載の組成物。 - 【請求項５】 昆虫学的病原性線虫の量が、組成物１ｍｌ当たり約５０ない
し１００００の線虫の範囲の量である、請求項１ないし４のいずれか一項に記載
の組成物。 - 【請求項６】 昆虫学的病原性線虫の量が、組成物１ｍｌ当たり約５００な
いし１０００の線虫の範囲の量である、請求項５記載の組成物。 - 【請求項７】 作用エリアにおけるコガネムシの幼虫および／またはさなぎ
の個体群を調節する方法であって、前記エリアに、請求項１ないし６のいずれか
一項に記載の組成物を適用することを含む方法。 - 【請求項８】 ５００００ないし１００００００ＩＪ／ｍ2の投与量を与え
るように、組成物を作用エリアに適用する、請求項７記載の方法。 - 【請求項９】 １０００００ないし５０００００ＩＪ／ｍ2の投与量を与え
るように、組成物を作用エリアに適用する、請求項８記載の方法。 - 【請求項１０】 組成物を日暮れに作用エリアに適用する、請求項７ないし
９のいずれか一項に記載の方法。 - 【請求項１１】 Cyclocephala signaticollis, Heteronychus arator, Ado
ryphorus couloni, Antitrogus morbillosus, Anoplognathus porosus, Ataeniu
s imparalis, Sericesthis geminata, S.pruinosus, S.nigrolineata, Scityla
sericans, Saulostomus villosus, Aphodius tasmaniae, Heteronyx spp, Rhopo
ea magnicornis, Popillia japonica, Cyclocephala borealis, C.hirta, C.par
allela, Melolontha melolontha, Anomala aenea, Phyllophaga phyllophaga, P
. hirticula, Phyllopertha horticola, Haplididia etrusca, Maladea matrida
, Costelytra zealandica, Amphimallon solstatialisおよびLigyrus subtropic
usからなるコガネムシ種の群から選択されたコガネムシの幼虫および／またはさ
なぎの個体群を調節するための、請求項７ないし１０のいずれか一項に記載の方
法。 - 【請求項１２】 C. signaticollis種のコガネムシの幼虫および／またはさ
なぎの個体群を調節するための、請求項１１記載の方法。 - 【請求項１３】 P. japonica種のコガネムシの幼虫および／またはさなぎ
の個体群を調節するための、請求項１０記載の方法。 - 【請求項１４】 ＪＢ１／Ｘ１、ＧＫＢおよびＪＢ３Ｄと称されるH.zealan
dica種の群から選択される、実質的に純粋な線虫。
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|---|---|---|---|
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| AUPP7927A AUPP792798A0 (en) | 1998-12-24 | 1998-12-24 | Biological control agent |
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|---|---|
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5241225A (en) * | 1975-08-26 | 1977-03-30 | Commw Scient Ind Res Org | Biological preventive means |
| AU3383993A (en) * | 1992-02-28 | 1993-09-02 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Preparations containing entomopathogenic nematodes for biological control of the banana weevil |
-
1998
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-
1999
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Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| AU3383993A (en) * | 1992-02-28 | 1993-09-02 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Preparations containing entomopathogenic nematodes for biological control of the banana weevil |
Non-Patent Citations (13)
| Title |
|---|
| JPN6009044878, Ｊ． Ｎｅｍａｔｏｌ．, 1992, Ｖｏｌ．２４， Ｎｏ．１, ｐｐ．９−１５ * |
| JPN6009044880, Ｅｘｐ． Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．, 1983, Ｖｏｌ．５５, ｐｐ．２４９−２５７ * |
| JPN6009044881, Ａｐｐｌ． Ｓｏｉｌ Ｅｃｏｌ．, 1997, Ｖｏｌ．５, ｐｐ．１３３−１４１ * |
| JPN6009044883, Ｊ． Ｉｎｖｅｒｔ． Ｐａｔｈｏｌ．, 1991, Ｖｏｌ．５８, ｐｐ．３９６−４０７ * |
| JPN6009044885, Ｉｎｔ． Ｊ． Ｐｅｓｔ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ, 1998, Ｖｏｌ．４４， Ｎｏ．３, ｐｐ．１３９−１４３ * |
| JPN6009044887, Ｎｅｍａｔｏｌ．, 1979, Ｖｏｌ．２５， Ｎｏ．２, ｐｐ．１９１−２０２ * |
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| JPN6009044892, Ｊ． Ｅｃｏｎｏｍ． Ｅｎｔｏｍｏｌ．, 1988, Ｖｏｌ．８１， Ｎｏ．１, ｐｐ．１５２−１５７ * |
| JPN6009044893, Ｊ． Ｅｃｏｎｏｍ． Ｅｎｔｏｍｏｌ．, 1988, Ｖｏｌ．８１， Ｎｏ．２, ｐｐ．４８４−４８７ * |
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