JP2002530355A - 炎症性疾患のための治療剤としてのαＥβ７インテグリンのアンタゴニスト - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、炎症の処置および炎症の予防の方法を提供し、α^Eβ₇に対するアンタゴニストを投与する工程を包含する。α^Eβ₇の炎症性効果の減少において有効な物質についてスクリーニングする方法もまた提供され、これにより炎症性疾患を有しかつ投与される物質を有しないコントロール動物の炎症性組織細胞によって分泌される、プロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカインまたはケモカインの量と比較した場合、その動物の炎症性組織細胞により分泌される、プロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカインまたはケモカインの量の減少は、その物質がα^Eβ₇の炎症性効果を減少するのに有効であることを示す。さらに、本発明は、α^Eβ₇の炎症性効果を予防するのに有効である物質についてスクリーニングする方法を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 （発明の背景） （発明の分野） 本発明は、自己免疫疾患、アレルギー疾患、対宿主性移植片病および移植拒絶
反応の炎症応答を処置する方法に関する。特に、本発明は、α^Eβ₇インテグリン
のアンタゴニストを投与することにより、自己免疫疾患、アレルギー疾患、対宿
主性移植片病および移植拒絶反応を処置および妨げるための方法を提供する。動
物モデルにおける自己免疫疾患、アレルギー疾患、対宿主性移植片病および移植
拒絶反応の炎症応答を減少および妨げることに効果的な物質をスクリーニングす
る方法をさらに提供する。

【０００２】 （背景技術） 自己免疫の、ヒトにおいて起こる自己免疫炎症反応、および種々のマウスモデ
ルにおいて起こる自己免疫炎症反応の両方の、自己免疫炎症反応の病因は、誘導
の部位から炎症の部位へのリンパ球の往来に依存し得る（１−４）。このような
往来は現在、少なくとも部分的に、リンパ球の循環の際のインテグリンα₄β₇と
内皮細胞におけるアドレッシン（ａｄｄｒｅｓｓｉｎ）ＭＡｄＣＡＭ−１との間
の相互作用により媒介されることが公知である（５−１０）。組織への細胞の侵
入を支配するこの「ホーミング」相互作用は、その標的組織において細胞の維持
を保証するさらなる付着を分子−リガンド相互作用を伴なう（１１）。

【０００３】 最近の研究において、ＩＬ−２−／−マウスを無病原体環境において維持した
場合、有意な大腸炎が発達しなかったが、完全フロイントアジュバント中のＴＮ
Ｐ置換タンパク質の腹腔内注射後、重篤な大腸炎が容易に、そして予測的に発達
すること誘導し得る（１２）。このような誘導された大腸炎は、Ｔｈ１ ＣＤ４
リンパ球駆動炎症であり、この炎症は、従来の環境において維持されたＩＬ−２
−／−マウスにおいて発達する自発的な大腸炎と同様である（１２−１４）。

【０００４】 慢性腸炎のこの実験モデルにおけるα^Eβ₇の役割は、ＩＬ−２−／−モデルに
おいて分析された。本発明は、抗α^Eβ₇の投与が、大腸炎を妨げることおよび抗
α^Eβ₇が既存の炎症を無効にすることを示す。

【０００５】 本発明は、α^Eβ₇インテグリンのアンタゴニストを投与することにより、自己
免疫疾患、アレルギー疾患、対宿主性移植片病および移植拒絶反応における炎症
反応を妨げるおよび処置するための新規の方法を提供する。本発明はさらに、α ^E β₇インテグリンの炎症効果を阻害するそれらの能力において、効果的な物質を
スクリーニングするための方法を提供する。

【０００６】 （発明の要旨） 本発明は、被験体における炎症を処置する方法（α^Eβ₇に対するアンタゴニス
トを被験体へ投与する工程を含む）を提供する。本発明はさらに、被験体におけ
る炎症を妨げる方法（α^Eβ₇に対するアンタゴニストを被験体へ投与する工程を
含む）を提供する。

【０００７】 確立した炎症性疾患を有する動物への物質を投与する工程；プロ炎症性サイト
カイン、炎症性サイトカインまたは炎症性ケモカインの分泌の量に関して、動物
由来の炎症性組織細胞をアッセイする工程を含む、α^Eβ₇の炎症効果を減少する
のに効果的な物質をスクリーニングする方法もまた提供する。これにより、炎症
性疾患を有するコントロール動物の炎症性組織細胞および投与されるこの物質を
有しないコントロール動物炎症性組織細胞により分泌されるプロ炎症性（ｐｒｏ
ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ）サイトカイン、炎症性サイトカインまたは炎症性ケ
モカインの量と比較して、動物の炎症性組織細胞により分泌されるプロ炎症性サ
イトカイン、炎症性サイトカインまたは炎症性ケモカインの量の減少は、この物
質が、αＥβ７の炎症効果を減少するのに効果的であることを示す。この方法は
さらに、炎症性組織へのαＥβ７＋炎症性細胞の接着／保持／流入の減少におけ
るαＥβ７のアンタゴニストの効果を評価する工程を含み得る。

【０００８】 さらに、本発明は、α^Eβ₇の炎症効果を妨げることに効果的な物質のスクリー
ニングの方法を提供し、それは、以下を含む：炎症性疾患に感受性の動物にこの
物質を投与する工程；この動物を炎症応答を誘導する処置に供する工程；プロ炎
症性サイトカイン、炎症性サイトカインまたは炎症性ケモカインの分泌量に関し
て、この動物由来の炎症性組織細胞をアッセイする工程。これにより、炎症性疾
患を有するコントロール動物および投与されるこの物質を有しないコントロール
動物の炎症性組織細胞により分泌されるプロ炎症性サイトカイン、炎症性サイト
カインまたは炎症性ケモカインの量の上昇と比較して、動物の炎症性組織細胞に
より分泌するプロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカインまたは炎症性ケモカ
インの量の上昇の欠失は、この物質が、α^Eβ₇の炎症効果を阻害することによっ
て炎症性疾患を妨げることに効果的であることを示す。この方法はさらに、炎症
性組織へのαＥβ７＋炎症性細胞の接着／保持／流入を減ずることにおいて、α
Ｅβ７のアンタゴニストの効果を評価する工程を含み得る。

【０００９】 （好ましい実施形態の説明） 本発明は、本発明および本明細書中に含まれる実施例の好ましい実施形態の以
下の詳細な説明を参照することによって、より容易に理解され得る。

【００１０】 本発明の化合物および方法が開示および記載される前には、この発明は、特定
のタンパク質または特定の方法に限定されていないことが理解されるべきである
。本明細書中で使用される用語法は記載する特定の実施形態のみの目的のためで
あり、そして制限されることを意味しないこともまた理解されるべきである。

【００１１】 本明細書および添付の特許請求の範囲において使用される場合、単数形「ａ」
、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、その文脈が他に明白に指示されなければ、複
数形の対応物を含むことに注意しなければならない。

【００１２】 本発明は、被験体における炎症を処置する方法（α^Eβ₇に対するアンタゴニス
トを被験体に投与する工程を含む）を提供する。本発明はさらに、被験体におけ
る炎症を妨げる方法（α^Eβ₇に対するアンタゴニストを被験体に投与する工程を
含む）を提供する。炎症応答は、少し例を挙げるなら、自己免疫疾患、アレルギ
ー疾患、対宿主性移植片病、または移植拒絶反応と関連し得る。

【００１３】 本発明はまた、自己免疫疾患、アレルギー疾患、ＧｖＨ病または移植拒絶反応
を有する被験体において、α^Eβ₇インテグリンのアンタゴニストおよびその公知
のリガンドならびに将来のリガンドを炎症性疾患を処置または妨げるために十分
な量、投与することにより、炎症性細胞の活性化、流入および保持を妨げる方法
を提供する。

【００１４】 本発明において、被験体は、任意の哺乳動物、好ましくは、ヒトであり得、そ
してマウス、ラット、モルモット、ブタ、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、ヤ
ギ、サル、ウマおよびチンパンジーを含み得るが、これらに限定されない。

【００１５】 本明細書中で使用される場合、「処置する」とは、患者の臨床的な状態におけ
る改善のことを記述する。この改善は、炎症応答の減少から炎症性疾患の完全な
回復までの範囲であり得る。

【００１６】 本明細書中で使用される場合、「自己免疫疾患」とは、疾患の状態または症候
群のことを記述し、これにより、被験体の体が、副作用と共に被験体自身の体の
構成成分に対して機能不全性免疫応答を生じる。これは、Ｂ細胞の産生を含み得
る。このＢ細胞は、全ての抗原、アレルゲンまたは主要組織適合性（ＭＨＣ）抗
原に特異性を有する抗体を産生するか、または、それは自己構成成分を認識し、
そして炎症の原因であるサイトカインを産生するＴ細胞保有レセプターの産生を
含み得る。自己免疫疾患の例は、潰瘍性大腸炎、クローン病、多発性硬化症、慢
性関節リウマチ、糖尿病、悪性貧血、自己免疫胃炎、乾癬、ベッヘト病（Ｂｅｃ
ｈｅｔ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、ヴェーゲナー肉芽腫症、サルコイドーシス、自
己免疫性甲状腺炎、自己免疫性卵巣炎、水疱性類天疱瘡、天疱瘡（ｐｈｅｍｐｈ
ｉｇｕｓ）、多発性内分泌腺症、スティル病、ランバート‐イートン筋無力症候
群、重症筋無力症、グッドパスチャー症候群、自己免疫精巣炎、自己免疫ブドウ
膜炎、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群および強直性脊椎炎を含む
が、これらに限定されない（１５−２２）。

【００１７】 本明細書中で使用される場合、「アレルギー疾患」は、それによって、身体が
、環境抗原に対する免疫グロブリンＥ（ＩｇＥ）抗体から構成され、アレルギー
症状を惹起する機能不全性の免疫応答を生ずる疾患状態または症候群を記載する
。アレルギー疾患の例としては、ぜん息、ブタクサ花粉症、食物物質に対するア
レルギー、アトピー性湿疹、過敏性肺炎、農夫肺、好酸球増多症候群、およびア
レルギー反応が挙げられるが、これらに限定されない（２３〜２５）。

【００１８】 本明細書中で使用される場合、「対宿主性移植片」（ＧｖＨ）病は、それによ
って、免疫応答が、移植された細胞によって開始され、有害な効果を伴って被験
体の身体に対して方向付けられる、疾患状態または症候群を記載する。ＧｖＨ病
の例としては、骨髄移植後の急性および慢性のＧｖＨ病が挙げられるが、これら
に限定されない（２６）。

【００１９】 移植拒絶は、それによって、移植片レシピエントの身体が、移植された組織に
対する免疫応答を生じ、拒絶を生じる、疾患状態または症候群を記載する。移植
拒絶は、例えば、腎臓移植、心臓移植、肺移植または肝臓移植、ならびに任意の
他の移植された組織について生じ得る（２７、３２）。

【００２０】 α^E β₇のアンタゴニストは、α^E β₇またはα^E β₇に結合するリガンドと特
異的に結合する抗体（ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体）であり得
る。抗イディオタイプ抗体および親和性成熟抗体もまた考えられる。α^E β₇の
他のアンタゴニストとしては、α^E β₇産生のインヒビター、α^E β₇発現のイン
ヒビター、およびα^E β₇の活性化または結合をブロックするように設計された
分子が挙げられ得るが、これらに限定されない。アンタゴニストは、α^E β₇の
活性、産生、発現、活性化および結合を阻害するタンパク質全体またはタンパク
質のフラグメントであり得る。例えば、α^E β₇結合をブロックする分子は、α^E β₇に対する細胞レセプターに結合する分子であり得る。α^E β₇の結晶構造お
よびそのリガンドであるＥ−カドヘリンは、α^E β₇−リガンド相互作用を破壊
し得る分子を設計するために利用され得る。

【００２１】 句α^E β₇と「特異的に結合する」とは、タンパク質および他の生物製剤の不
均一な集団内にα^E β₇が存在することを決定付ける結合反応をいう。従って、
指定された条件下で、特定のタンパク質（例えば、α^E β₇またはα^E β₇に対す
る細胞レセプター）と結合した指定された抗体は、被験体に存在する他のタンパ
ク質に対して有意な量において結合しない。そのような条件下における抗体への
選択的結合は、特定のタンパク質に対する抗体の特異性について選択される抗体
を必要とし得る。種々の免疫アッセイフォーマットが、特定のタンパク質（例え
ば、α^E β₇またはα^E β₇に対する細胞レセプター）と選択的に結合する抗体を
選択するために使用され得る。例えば、固相ＥＬＩＳＡ免疫アッセイは、慣用的
に使用されて、タンパク質と選択的に免疫応答する抗体を選択する。選択的結合
を決定するために使用され得る免疫アッセイフォーマットおよび条件の記載につ
いては、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒ
ａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ」Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｕｂｌ
ｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９８８）を参照のこと。

【００２２】 本発明の抗体は、任意の供給源に由来し得る。しかし、免疫グロブリン自体の
免疫原性を減少させるために、好ましくは、抗体は、ヒト起源であるか、または
他の種において生成され、そして実施例において記載されるようにヒトにおける
投与のために「ヒト化」された抗体である。本発明の抗体は、抗体の特異的抗原
と結合する能力を保持するフラグメントであり得る。例えば、α^E β₇結合活性
を維持する抗体フラグメント、ならびにα^E β₇結合活性（例えば、ホモダイマ
ー形成）を維持するが、レセプター−リガンド結合相互作用およびα^E β₇の活
性を阻害するように機能するα^E β₇フラグメントが、用語「抗体」の意味の内
に含まれる。そのような抗体およびフラグメントは、当該分野において公知の技
術によって、作製され得、そして本明細書中の実施例において示される方法に従
って、特異性および活性についてスクリーニングされ得る。例えば、抗体を産生
するための一般的な方法は、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅ
ｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ」Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａ
ｒｂｏｒ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、（１９８８）にて見
出され得る。

【００２３】 本発明において、α^E β₇のアンタゴニストは、ヒト被験体に対して薬学的に
受容可能なキャリアにおいて、経口的または非経口的に投与され得る。このα^E β₇のアンタゴニストはまた、浣腸において、または吸入剤、鼻内スプレーもし
くは点眼剤として投与され得る。α^E β₇のアンタゴニストの経口投与または吸
入投与のための適切なキャリアは、ヒト被験体に対して薬学的に受容可能な一つ
以上のキャリアを含み得る。抗原の経口投与のために適切なキャリアは、矯味矯
臭剤、滑沢剤、懸濁剤として、または保護剤としても作用し得る一つ以上の物質
を含む。適切な固体キャリアとしては、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ス
テアリン酸マグネシウム、糖、デンプン、ゼラチン、セルロース、カルボキシポ
リメチレンまたはシクロデキストランが挙げられる。適切な液体キャリアは、水
、発熱物質を含まない生理食塩水、薬学的に受容されるオイル、またはこれらの
任意の混合物であり得る。その液体はまた、他の適切な薬学的添加物（例えば、
緩衝液、保存剤、矯味矯臭剤、粘性または浸透圧調節剤、安定剤または懸濁剤）
を含み得る。適切な液体キャリアの例には、ｐＨ調節ゲルとしてカルボキシポリ
メチレンを含む、種々の添加剤を伴うか、もしくは伴わない水を含む。この抗体
は、胃での分解を避けるために腸に抗原を放出する腸溶性カプセル内に含まれ得
る。アンタゴニストの非経口投与については、滅菌溶液または懸濁液が、添加剤
（例えば、オレイン酸エチルまたはミリスチン酸イソプロピル）を含み得る生理
食塩液において調製されて、例えば、皮下組織または筋内組織ならびに静脈内に
注射され得る。α^E β₇のアンタゴニストまたはそのリガンドは、胃での分解を
避けるために腸にインヒビターを放出する腸溶性カプセル内に含まれ得る。

【００２４】 あるいは、α^E β₇のアンタゴニストは、天然のポリマーまたは合成ポリマー
のいずれかとともに直径４〜８μｍの微小粒子内にマイクロカプセル化され得、
これは腸のリンパ組織を標的とし、そして４週間までの間インヒビターの徐放を
生ずる。

【００２５】 ヒト被験体への抗原の経口投与に加えて、可溶形態においてα^E β₇に対する
アンタゴニストまたはそのリガンドが、体重１ｋｇ当り０．１ｍｇと１００ｍｇ
との間の単一投与量または複数投与量で代表的に非経口的に投与され、好ましい
投与量範囲は、１〜５０ｍｇ／ｋｇであり、そして最も好ましい投与量は２〜１
０ｍｇ／ｋｇである。被験体は、１週間と５２週間との間にわたってほぼ毎週、
単回注射としてα^E β₇に対する抗体を与えられ得る。経口投与については、５
００ｍｇ〜１０００ｍｇのα^E β₇に対する抗体が、ＰＯで与えられる。α^E β₇ に対する抗体を粒子形態において投与するために、５００ｍｇ〜１０００ｍｇが
、４週間から８週間にわたる徐放について、記載されたようにマイクロカプセル
化され得る。この処置は、いつでも反復され得る（特に再発の場合）。特定の炎
症性疾患および患者の状態に依存して、維持投与量が、再発を防止するために投
与され得る。この投与量は、急性の状態から維持状態まで変動し得る炎症の性質
に依存して、１週間おきから毎月投与され得る。

【００２６】 投与されるα^E β₇のアンタゴニストの量は、年齢、サイズ、体重、状態など
に基づき、個人間で変動する。当業者は、投与量は、開業医によって最良に最適
化されることを理解し、そして、投与量を決定するための方法が、例えば、Ｒｅ
ｍｉｎｇｔｏｎのＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅに記載される
。

【００２７】 当該分野において公知であるように、自己免疫疾患、アレルギー疾患、ＧｖＨ
病または移植を有すると診断された被験体における自己免疫疾患、アレルギー疾
患、ＧｖＨ病または移植拒絶を処置する際の特定の用量のα^E β₇のアゴニスト
の投与の効力が、特定の徴候、症状を評価する標準的な方法および特定の疾患に
ついての客観的研究室試験によって決定され得る。例えば、１）被験体の再発の
頻度または重症度が、改善されていることが示される場合、２）その疾患の進行
が、安定化されていることが示される場合、または３）他の免疫抑制薬物適用の
使用に対する必要性が、適切なコントロール群との比較、および一般的な集団ま
たは特定の個人における疾患の通常の進行の知識に基づいて、低下している場合
、特定の処置は、有効であると考えられる。

【００２８】 自己免疫疾患、アレルギー疾患、ＧｖＨ病または移植拒絶を有することが知ら
れていない被験体において自己免疫疾患、アレルギー疾患、ＧｖＨ病または移植
拒絶を予防する際のα^E β₇のアンタゴニストの効力は、当業者に公知のような
、標準的な徴候、症状および客観的研究室試験を評価することにより経時的に決
定され得る。この時間間隔は、自己免疫疾患またはアレルギー疾患の発達に関し
ては、長くてもよく（年／１０年）、またはＧｖＨ病または移植拒絶の発達に関
しては、短くてもよい（週／月）。だれが自己免疫疾患またはアレルギー疾患の
発症の危険にあるかという決定は、この分野の臨床医に良く知られる特定の疾患
に対する公知の危険因子の現在の知識に基づいてなされる（例えば、疾患の特に
強い家族歴）。ＧｖＨ病および移植拒絶について、移植手順を経験している患者
は、これらの疾患の発症の危険があると考えられる。

【００２９】 本発明は、さらに、炎症を処置するための方法を提供し、その方法は、α^E β ₇ に対するアンタゴニストおよび別の治療剤を投与する工程を含む。本発明はま
た、炎症を予防するための方法を提供し、その方法は、α^E β₇に対するアンタ
ゴニストおよび別の治療剤を投与する工程を含む。

【００３０】 他の治療剤としては、抗体（例えば、抗α⁴ β₇Ｍａｂ）、サイトカイン、免
疫抑制剤または免疫調節剤が挙げられ得るが、これらに限定されない。

【００３１】 免疫抑制薬物適用の例としては、コルチコステロイド、モフェチル（Ｍｏｆｅ
ｔｉｌ）、細胞傷害剤（アザチオプリン、クロラムブシル、シクロホスファミド
、メトトレキセート、シクロスポリン、ＦＫ−５０６、６−ＭＰ）およびサリド
マイドが挙げられるが、これらに限定されない（２７−２８）。コルチコステロ
イドを用いる組み合わせ治療の例としては、低用量レジメン２．５〜２０ｍｇ／
毎日または高用量レジメン０．５〜２ｍｇ／Ｋｇ／日のいずれかにおけるコルチ
コステロイドと組み合わせた、α^E β₇に対するインヒビターまたはそのリガン
ドの、経口的または静脈内投与が挙げられる。これはまた、任意の他のキャリア
（例えば、吸入剤または浣腸剤）におけるコルチコステロイドの使用を含む。ア
ザチオプリンを用いる組み合わせ治療の例は、１．２５〜２．５ｍｇ／Ｋｇ／日
の経口投与である。シクロホスファミドを用いる組み合わせ治療の例は、１〜３
ｍｇ／ｋｇ／日の経口用量または１０〜２０ｍｇ／Ｋｇ／１〜３ヶ月毎の静脈内
用量である。メトトレキセートを用いる組み合わせ治療の例は、毎週２．５〜２
５ｍｇの経口レジメンである。

【００３２】 免疫調節剤の例としては、ＩＶＩＧ、リンパ球膜抗原に対する抗血清の投与（
すなわち、抗胸腺細胞血清（ＡＴＳ）、抗胸腺グロブリン（ＡＴＧ）、抗リンパ
球血清（ＡＬＳ）、抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）、抗ＣＤ３、抗ＣＤ４、抗
ＣＤ８））、抗ＴＮＦα、抗ＩＬ−１２、抗ＩＦＮγ、アンチセンスＳＴＡＴ４
オリゴヌクレオチド、抗ＩＣＡＭ１、アンチセンスＩＣＡＭ−１オリゴヌクレオ
チド、抗ＣＤ４０Ｌ、抗ＣＤ２５（抗Ｔａｇ）およびＩＬ−１０が挙げられるが
、これらに限定されない（２９−３０）。免疫調節剤は、疾患の急性の症状発現
を処置する、または患者を維持するための両方で投与され得る。

【００３３】 自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ＧｖＨ病、または移植拒絶を有すると診断
された被験体における自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ＧｖＨ病、または移植
拒絶の治療において本明細書に記載される組み合わせ治療の投与の効力は、特定
の徴候、症状の評価の標準的な方法、および当該分野で公知の特定の疾患のため
の客観的な研究室での試験によって決定され得る。例えば、一般的な集団または
特定の個人における適切なコントロール群および疾患の正常な進行の知識との比
較に基づいて、１）被験体の再発の頻度または重篤度は、改善されることが示さ
れる、２）疾患の進行が安定化されることが示される、または３）他の免疫抑制
投薬の使用の必要性が減少され、次いで、特定の処置が効果的であると考えられ
る。

【００３４】 自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ＧｖＨ病または移植拒絶を有することがわ
かっていない被験体における自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ＧｖＨ病、また
は移植拒絶を予防することにおける抗体、免疫抑制医薬、または免疫調製剤およ
びα^Eβ₇のアンタゴニストとの組み合わせ治療の効力は、当業者に公知なように
、経時的に、標準的な徴候、症状、および客観的な研究室での試験を評価するこ
とによって決定され得る。この時間間隔は、自己免疫疾患またはアレルギー性疾
患の発症に関して大きく（年／１０年）、またはＧｖＨ病または移植拒絶の発症
に関して短く（週／月）あり得る。誰が自己免疫疾患またはアレルギー性疾患の
発症の危険にあるかの決定は、この分野の臨床医に周知の特定の疾患についての
公知の危険因子の現在の知識（例えば、特に強力な疾患の家族歴）に基づいてな
される。ＧｖＨ病および移植拒絶について、移植手順を経験する患者は、これら
の疾患の発症の危険にあると考えられる。

【００３５】 本発明は、α^Eβ₇抗体および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物をさら
に提供する。「薬学的に受容可能な」は、生物学的にまたはその他の様式で所望
でない材料を意味し、すなわち、その材料は、いかなる所望でない生物学的効果
なしに、またはそれが含有される薬学的組成物のその他の成分とともに、有害な
様式で相互作用せずに、アンタゴニストとともに被験体に投与され得る。そのキ
ャリアは、当業者に理解されるように、活性成分の任意の分解を最小化するため
に、そして被験体における任意の有害な効果を最小化するために、当然に選択さ
れる。

【００３６】 α^Eβ₇アンタゴニストおよび薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物もまた
提供され、ここで、そのアンタゴニストは、α^Eβ₇抗体ではない。

【００３７】 α^Eβ₇抗体および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物もまた提供され、
ここでそのキャリアは、ハイブリドーマ上清ではない。本発明において、薬学的
に受容可能なキャリアは、腹水ではない。

【００３８】 別の実施形態において、本発明は、α^Eβ₇抗体、第２抗炎症剤、および薬学的
に受容可能なキャリアを提供する。

【００３９】 別の実施形態において、本発明は、以下の工程を包含するα^Eβ₇の炎症効果を
減少するのに有効な物質をスクリーニングする方法を提供する：確立された炎症
性疾患を有する動物に物質を投与する工程；プロ炎症性サイトカイン、炎症性サ
イトカインまたはケモカインの分泌の量についてその動物からの炎症性組織細胞
をアッセイする工程であって、それにより投与される物質を有することなしに炎
症性疾患を有するコントロール動物の炎症性組織細胞によって分泌されるプロ炎
症性サイトカイン、炎症性サイトカインまたはケモカインの量と比較して、その
動物の炎症性の組織細胞によって分泌されるプロ炎症性サイトカイン、炎症性サ
イトカインまたはケモカインの量の減少が、その物質がα^Eβ₇の炎症性効果を減
少させることにおいて有効であることを示す工程。この方法は、α^Eβ₇＋炎症性
細胞の、炎症性組織への接着／保持／流入を減少させることにおけるα^Eβ₇のア
ンタゴニストの効果を評価する工程をさらに包含し得る。確立された炎症性疾患
の炎症応答を減少させることにおいて有効である物質は、当業者によって認識さ
れるように、炎症性疾患の組織学的および臨床的徴候を減少または逆転させる物
質である。さらに、α^Eβ₇炎症性細胞の接着、保持、または流入に対する物質の
効果を決定する工程を包含する独立した方法は、α^Eβ₇のアンタゴニストを同定
するために使用され得る。

【００４０】 炎症性組織細胞をアッセイするにおいて、いくつかの炎症性サイトカインおよ
びケモカインがアッセイされ得る。これらには、問題の炎症性疾患に依存してＩ
ＦＮ−γ、ＴＮＦ−α、Ｉｌ−４、ＩＬ−５、またはＩＬ−１２が含まれるが、
これらに限定されない。

【００４１】 本発明によって、α^Eβ₇の炎症性効果を予防するにおける効果的な物質をスク
リーニングする方法もまた提供される。この方法は、炎症性疾患に感受性である
動物に物質を投与する工程；その動物を炎症応答を誘導する処置に供する工程；
プロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカイン、またはケモカインの分泌物の量
についてその動物からの炎症性組織細胞をアッセイする工程を包含し、それによ
り、炎症性疾患を有するが投与される物質を有さないコントロール動物の炎症性
組織細胞によって分泌されるプロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカイン、ま
たはケモカインの量の増加と比較しての、その動物の炎症性組織によって分泌さ
れるプロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカイン、またはケモカインの量の増
加の欠如が、その物質が、α^Eβ₇の炎症性効果を阻害することによって炎症性疾
患を予防するにおいて有効であることを示す。その方法は、さらに、炎症性組織
へのα^Eβ₇＋炎症性細胞の接着／保持／流入を減少させることにおけるα^Eβ₇の
アンタゴニストの効果を評価する工程を包含する。さらに、α^Eβ₇炎症性細胞の
接着、保持、または流入に対する物質の効果を決定する工程を包含する独立した
方法は、α^Eβ₇のアンタゴニストを同定するために使用され得る。

【００４２】 本発明のスクリーニング方法において、その炎症が産生される動物は、任意の
哺乳動物であり得、そしてマウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウサギ、
ネコ、イヌ、ヤギ、サル、およびチンパンジーを含み得るが、これらに限定され
ない。炎症は、当該分野で公知の任意の方法によって動物において産生され得る
。例えば、その炎症は、その動物に有効量のハプテン試薬を導入することによっ
て産生され得る。ハプテン試薬は、キーホールリンペットヘモシアニンの２，４
，６−トリニトロフェノール結合体、２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン
酸、２，４，６−ジニトロクロロベンゼン、およびその他のトリニトロフェニル
アミン化合物であり得るが、これらに限定されない。

【００４３】 本発明はまた、α^Eβ₇に対するアンタゴニストのためのインビトロスクリーニ
ング方法を提供する。インビトロ細胞接着研究は、α^Eβ₇のそのリガンドへの結
合をブロックするための化学的に操作された化合物の効果を分析するために、ま
たは細胞活性化ならびにプロ炎症性サイトカインおよび炎症性サイトカイン産生
（２９，３１，３３）を減少する能力を分析するために、使用され得る。細胞活
性化のためのマーカーの例には、ＣＤ２５、ＣＤ４５、ＣＤ６９、およびＬ−セ
レクチンが含まれるが、これらに限定されない。

【００４４】 粘膜固有層、リンパ節、脾臓、肝臓、皮膚、肺、関節、ＣＮＳ、および炎症に
関与するその他の組織から得られる炎症性組織からの炎症誘発性および炎症性サ
イトカイン、およびケモカイン分泌の量をアッセイする方法もまた提供される。
これらの方法には、フローサイトメトリー、ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、逆転写酵素ポ
リメラーゼ連鎖反応、およびＥＬＩＳＰＯＴ、ノーザンブロット、サザンブロッ
ト、およびウエスタンブロット（３１）が含まれるが、これらに限定されない。
サイトカインまたはケモカインの量の減少は、α^Eβ₇のレベルで作用し得る物質
の存在を示す。

【００４５】 本発明は、多数の改変および変更が当業者に明らかとなるので、例示としての
み意図される以下の実施例においてより特異的に記載される。

【００４６】 （実施例） マウス 遺伝子ターゲッティング（３４）によってＩＬ−２欠損にしたマウスは、Ｗ．
Ｐａｕｌ（ＮＩＡＩＤ，ＮＩＨ）の好意により寄贈された。マウスのコロニーを
、ヘテロ接合性の親を繁殖させることによって生成し、そして誕生の４週間後に
、ホモ接合性のマウスを、記載されたように（１２）、消化した尾断片（ｔａｉ
ｌ ｓｎｉｐｓ）から単離したＤＮＡのＰＣＲ分析によって同定した。マウスを
、国立衛生研究所のＢｅｔｈｅｓｄａキャンパスにおける特定の病原を含まない
（ＳＰＦ）動物施設に収容した。研究の前に、全てのマウスを、クラスＩＩ通気
室下で手袋で扱い、滅菌した食物を与え、そして自由に水を採らせ、そして毎週
交換された滅菌マイクロアイソレーター中で維持した。種々のマウスの選択した
組織を組織病理学およびエンドテープ試験のために回収した；盲腸および結腸を
寄生虫学のために回収した。このような組織は、マウスアデノウイルス、カルボ
シラス（ｃａｒｂｏｃｉｌｌｕｓ）、奇肢症、ＥＤＩＭ（乳児マウスの伝染性下
痢）、ＧＤＶＩＩ（Ｇｅｏｒｇｅ疾患、ＶＩＩ）、リンフォサイトメガロウイル
ス（ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ）、マウス肝炎ウイルス、Ｍ
ｙｃｏｐｌａｓｍａ、マウス肺炎ウイルス、レオウイルス、センダイウイルス（
ｓｅｎｄａｖｉｒｕｓ）、マウスサイトメガロウイルス、およびパルボウイルス
において陰性であった。４〜８週齢の両方の性のマウスを使用した。

【００４７】 （α^Eβ₇に対するヒト化マウス抗体の産生） 齧歯類モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体は、Ｊｕｎｇｈａｎｓら
（３６）、Ｂｒｏｕｗｎら（３７）、Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈら（３８）に
示されるプロトコルに従って改変され得る。詳細には、齧歯類抗体は、当業者に
公知の組換えＤＮＡプロトコルによって、齧歯類可変領域およびヒト重鎖および
軽鎖定常領域から構成されるキメラ齧歯類−ヒト抗体を構築することによって、
ヒト投与のために改変され得る。ヒト化齧歯類抗体に対する別のアプローチは、
齧歯類可変領域からの齧歯類相補性決定領域（ＣＤＲ）を、ヒト可変領域に移植
することである。これらのアプローチのいずれかを使用することによって、齧歯
類抗体は、ヒト被験体への投与のためにヒト化され得る。

【００４８】 （マウスの免疫化および処置） マウス（４〜８週）を、完全フロイントアジュバント中、キーホールリンペッ
トヘモシアニン（ＫＬＨ）の２，４，６−トリニトロフェノール（ＴＮＰ）結合
体で一旦免疫した。その結合体を、以下のように調製した：２．０ｍｌの蒸留水
中で再構成した２０ｍｇのＯＶＡ（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，
Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）を、２．０ｍｌのホウ酸カリウム緩衝液（ｐＨ９．０
−９．３）に添加し、次いで、蒸留水中１ｍｇ／ｍｌの３．０ｍｌのＴＮＢＳ（
Ｊ．Ｉｎｍａｎ博士、ＮＩＡＩＤ，ＮＩＨから寄贈）溶液と混合させ、そして８
μｌの１Ｍ Ｎａ₂ＣＯ₃を添加した；その混合物を、暗室に８時間室温で放置し
、そして１２ｈ、１×ＰＢＳにおいて透析し、その後結合体の濃度をＢＣＡタン
パク質アッセイ試薬（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．）によって決定
した。マウスに、Ｆｒｅｕｎｄ完全アジュバント（Ｓｉｇｍａ ＩｍｍｕｎｏＣ
ｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）中にて乳化した１００μｇのＴＮ
Ｐ−ＯＶＡを腹腔内注射した。コントロールのために、マウスにフロイント完全
アジュバント中にて乳化したＰＢＳを注射した。

【００４９】 ＩＬ−２^-/-マウスにおける大腸炎の発症におけるα₄β₇およびα^Eβ₇の役割
を決定するために、後者に、０．５ｍｇの抗α₄β₇（ラットＩｇＧ２ａ ｍＡｂ
、クローンＤＡＴＫ３２，Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）、抗α^Eβ₇（ラットＩｇＧ２
ａ ｍＡｂ、クローンＭ２９０、Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）ｍＡｂまたはラットＩ
ｇＧ２ａ κコントロールＡｂ（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）を、ＴＮＰ−ＯＶＡ免
疫化（０日）の１時間前に腹腔内投与し、そして同じ量のｍＡｂを、マウスを屠
殺するまでの２、４、および６日目に再投与した。いくつかの研究において、以
前にＴＮＰ−ＯＶＡで免疫化し、そして大腸炎を発症させたマウスの群に、０．
５ｍｇの抗α^Eβ₇を、一日おきに３回注射し、そして最初の抗α^Eβ₇ｍＡｂ注射
から７日目に評価した。抗α₄β₇および抗α^Eβ₇ｍＡｂで二重染色したＬＰ細胞
のＦＡＣＳ分析により、抗α₄β₇と抗α^Eβ₇との間の交差反応性が明らかになっ
た。

【００５０】 （組織学的変化の段階付け） 結腸を、免疫したマウスから切開し、そして凍結切片の調製物に処理した。手
短に言うと、小切片（約３〜５ｍｍ）を、各組織から切り取り、そしてドライア
イスで冷却したＯ．Ｃ．Ｔ．Ｅｍｂｅｄｄｉｎｇ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ（Ｔｉｓｓ
ｕｅ Ｔｅｋ；Ｍｉｌｅｓ Ｉｎｃ．，Ｅｌｋｈａｒｔ，ＩＮ）中に浸した。包
理媒体の完全な凝固後、サンプルを−８０℃で保存した。

【００５１】 組織を、指定された時点で取り出し、低温保存し、固定化し、そしてパラフィ
ンに包理した。この包理した組織を切片化し、そしてヘマトキシリンおよびエノ
シン（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｈｉｓｔｏ Ｌａｂｓ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）
で染色した。この結腸の炎症の程度を、０〜４で半定量的に段階付けた（０、炎
症の徴候なし；１、非常に低レベルの単核細胞浸潤、および２、低レベルの単核
細胞浸潤；３、高レベルの単核細胞浸潤、高い血管密度、結腸壁の肥厚化；４、
経壁浸潤、杯細胞の損失、高い血管密度、結腸壁の肥厚化）。

【００５２】 （ＩＥＬ細胞および固有層細胞の単離） ＩＥＬ細胞およびＬＰ細胞の調製は、以前に記載されている（１２）。手短に
言うと、デトリタスを、鉗子を用いて結腸管腔から圧搾し、この組織を、滅菌し
た鋏でミンスし、そして片を、１００ｍｍナイロンメッシュボウル上でＨＢＳＳ
で洗浄して、残りのデトリタスおよび代謝物を除去した。その切り取った切片を
、０．１ｍＭ ＥＤＴＡを含む２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液（ＮＩＨ Ｍｅｄｉ
ａ Ｕｎｉｔ）および１０％ＦＣＳ（ＢｉｏＷｈｉｔｔａｌｅｒ，Ｗａｌｋｅｒ
ｓｖｉｌｌｅ，ＭＤ）を補充した、２５ｍｌのＣａ／Ｍｇを含まない温（３７℃
）ＨＢＳＳ培地（Ｂｉｏｆｌｕｉｄｓ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）
中で、３７℃で２０分間インキュベートすることによって、ＩＥＬを遊離させた
。濾過した細胞を、Ｐｅｒｃｏｌｌ勾配遠心分離によってリンパ球について富化
させた。結腸固有層リンパ球（ＬＰＬ）単離のために、結腸のその残りの切片を
、ナイロンメッシュ上で洗浄し、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液、１０％ＦＣＳ、
４００Ｕ／ｍｌ ＤＮＡｓｅ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｃａｌ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）、４００Ｕ／ｍｌ コ
ラーゲナーゼ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ）を補充した、ＲＰＭ
Ｉ１６４０培地（ＢｉｏＷｈｉｔｔａｋｅｒ）中に再懸濁し、そしてロッカー上
で３７℃で１．５時間インキュベートした。得られた細胞懸濁液を、１００ｍｍ
および４０ｍｍのナイロンメッシュフィルターで連続的にろ過し、次いで、２５
ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液および１０％ＦＣＳを補充した、ＲＰＭＩ１６４０中で
２回（２’）洗浄した。

【００５３】 （インビトロ細胞刺激およびサイトカインアッセイ） 単離した細胞を、１０％ ＦＣＳ、５％ ＮＣＴＣ（Ｍ．Ａ．Ｗｈｉｔｔａｋ
ｅｒ Ｂｉｏｐｒｏｄｕｃｔｓ）、１％ ペニシリン／ストレプトマイシン／０
．２５％ ファンジソゾン（ｆｕｎｇｉｓｏｚｏｎｅ）（ＧｉｂｃｏＢＲＬ、Ｇ
ａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）、２ｍＭ グルタミン（ＧｉｂｃｏＢＲＬ）、
５×１０⁵Ｍ ＭＥ（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉ
ｓ，ＭＯ）、および１５ｍＭ ＨＥＰＥＳを補充した、ＲＰＭＩ １６４０中で
、１．０ｍｌの最終容量あたり１×１０⁶細胞の密度で、刺激した。細胞を、可
溶性抗ＣＤ２８（１μｇ／ｍｌ；Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）およびＩＬ−２（５０
Ｕ／ｍｌ；Ｃｈｉｒｏｎ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を含む、プレートに結合
した抗ＣＤ−３（１０μｇ／ｍｌ；Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）の存在下の２４−ウ
ェル組織培養プレート（Ｃｏｓｔａｒ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）において、
加湿６％ＣＯ₂中、３７℃で培養した。培養上清を、４８時間後に収集し、そし
てアッセイまで−２０℃で凍結させた。培養上清を、４８時間に回収し、アッセ
イまでの間−２０℃で凍結した。培養上清におけるＩＦＮ−γ産生を、Ｐｈａｒ
ｍｉｎｇｅｎから入手した、コーティングＡｂ、標準Ａｂおよびビオチン化した
二次Ａｂ、とＺｙｍｅｄ（Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）か
ら入手したＨＲＰ−ストレプトアビジンとを組み合わせた、Ｐｈａｒｍｉｎｇｅ
ｎプロトコルを使用するＥＬＩＳＡによってアッセイした。

【００５４】 （フローサイトメトリー） 回収したＬＰＬ、ＬＥＬおよび脾細胞におけるＴ細胞表現型を特徴付けるため
に、マウス細胞表面決定基に対するＡｂ（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）を用いるフロ
ーサイトメトリー分析を使用した。この目的のために、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液
（ＮＩＨ Ｍｅｄｉａ Ｕｎｉｔ）中で２回洗浄し、ＦＡＣＳ緩衝液中に１０⁷
細胞／ｍｌで再懸濁し、そしてＦＡＣＳ管（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ
，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）に移した。Ａｂの非特異的ＦｃＲ媒介結
合を防止するために、５０〜１００μｇ／ｍｌの抗ＦｃεＲ（２．４Ｇ２；Ｐｈ
ａｒｍｉｎｇｅｎ）を、各管に染色３分前に添加した。細胞懸濁液を、１μｇ／
ｍｌの、ＦＩＴＣ結合体化ＣＤ３、ＦＩＴＣ結合体化ＣＤ４、ＰＥ結合体化ＣＤ
８、ＰＥ結合体化α₄β₇、ビオチン結合体化ＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）、または
ビオチン結合体化ＣＤ６９を用いて、氷上で３０分間染色した。その後、ビオチ
ン結合体化Ａｂで染色した細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液中で１回洗浄し、そして５μ
ｇ／ｍｌのストレプトアビジン−ＰＥで３０分間、氷上でインキュベートした。
染色した全ての細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液中で２回洗浄し、１×１０⁶細胞／ｍｌ
で再懸濁し、そしてＦＡＣＳＣＡＮ分析器、Ｌｙｓｉｓ ＩＩソフトウェア（Ｂ
ｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）上で試験した。非生存細胞を、前角（ｆｏｒ
ｗａｒｄ ａｎｇｌｅ）カッターまたはヨードプロピジウムの取り込みで排除し
た。

【００５５】 （統計学的分析） 差異の有意性についての記述統計学および試験は、ＳｔａｔＷｏｒｋｓおよび
Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ統計分析コンピュータープログラムを使用して
、スチューデントｔ検定によって評価した。

【００５６】 （抗α^Eβ₇ｍＡｂまたは抗α₄β₇ｍＡｂのいずれかによるＴＮＰ−ＯＶＡ誘導
性結腸炎の処置は、ＬＰＬの細胞メンバーおよびＩＥＬの細胞メンバーの減少と
関連するが、脾細胞メンバーの増加に関連する） 新しく発生させたＴＮＰ−ＯＶＡ／ＩＬ−２ −／−モデルの結腸炎における
、α^Eβ₇ 対 α₄β₇の役割を評価するために、無特定病原体条件下で維持した
ＩＬ−２ −／−マウスを、ＴＮＰ−ＯＶＡで免疫し、そして上記のように、免
疫と同時に抗α^Eβ₇ｍＡｂまたは抗α₄β₇ｍＡｂのいずれかを与えた。これによ
って、結腸炎を、無特定病原体環境下で維持されたＩＬ−２ −／−マウスにお
いて誘導し、そしてα^Eβ₇ｍＡｂの同時注射の影響を評価した。図１に示される
ように、重篤な結腸炎が、ＴＮＰ−ＯＶＡを注射したマウスにおいて観察された
が、ＴＮＰ−ＯＶＡを抗α^Eβ₇ｍＡｂと同時注射した場合には、この結腸炎が予
防され、そして結腸粘膜の顕微鏡試験は、ＰＢＳを注射したマウスで観察された
試験と類似した。これは、結腸炎重篤度スコア（ＣＳＳ）の有意な減少によって
反映される；ＴＮＰ−ＯＶＡを注射したＩＬ−２ −／−マウス、ＣＳＳ：３〜
４ 対 ＴＮＰ−ＯＶＡ＋抗α^Eβ₇を注射したＩＬ−２ −／−マウス、ＣＳＳ
：０〜２（表１）。さらに、この結腸炎の阻害は、α^Eβ₇ｍＡｂを同時注射した
マウスにおける、ＬＰＬメンバーの４倍の減少およびＩＥＬメンバーの２倍の減
少に関連した（ＩＬ−２ −／−ＬＰＬ：ＴＮＰ−ＯＶＡ；１８０±５×１０⁶
対 抗α^Eβ₇を同時注射したＴＮＰ−ＯＶＡ ６．５±０．６×１０⁶。ＩＬ
−２ −／−ＩＥＬ：ＴＮＰ−ＯＶＡ；５．２±１．８×１０⁶ 対 抗α^Eβ₇
を同時注射したＴＮＰ−ＯＶＡ；２．４±０．９×１０⁶）。興味深いことに、
細胞の総数を脾臓内で調べた場合に、わずかな総細胞数の増加が見られた（表１
）。同様に、結腸炎を樹立したマウスを、２回の抗α^Eβ₇ｍＡｂ注射で処置した
場合に、ＴＮＰ−ＯＶＡ−誘導性結腸炎は、有意に減少した；ＴＮＰ−ＯＶＡ
ＣＳＳ：３〜４ 対 ＴＮＰ−ＯＶＡ＋抗α^Eβ₇ｍＡｂ注射 ＣＳＳ：１〜２。
このモデルの結腸炎におけるα₄β₇の役割を評価するために、ＩＬ−２−／−マ
ウスに、ＴＮＰ−ＯＶＡおよび抗α₄β₇を同時注射した。表１に示されるように
、抗α^Eβ₇の注射はまた、ＩＬ−２ −／−マウスにおけるＴＮＰ−ＯＶＡ誘導
性結腸炎の発生を予防した。従って、上記データは、抗α^Eβ₇ｍＡｂの注射が、
ＩＬ−２ −／−マウスにおけるＴＮＰ−ＯＶＡ誘導性結腸炎を予防し得るのみ
ならず、樹立した結腸炎を直接的に緩和し得ることをまた実証する。

【００５７】 （ＩＬ−２ −／−マウスへの抗α^Eβ₇ｍＡｂの投与は、ＬＰＬ内の浸潤ＣＤ
４＋Ｔ細胞の数を減少するが、脾臓内ＣＤ４＋Ｔ細胞を増加する） ＣＤ４＋Ｔ細胞は、ＩＬ−２ −／−マウスにおけるＴＮＰ−ＯＶＡ誘導性結
腸炎の病理に関与する主要なエフェクター細胞であることが、以前に実証された
（１２、１７）。従って、抗α^Eβ₇ 対 抗α₄β₇の投与が、ＣＤ４＋Ｔ細胞お
よびＣＤ８＋Ｔ細胞のリンパ器官の区画化に対する異なる効果を有するか否かを
観察することが興味深い。表１に示されるように、抗α^Eβ₇ｍＡｂの注射は、Ｌ
Ｐ区画内の総細胞数の減少に最も関連した。これは、最も重篤な炎症が、結腸の
ＬＰ内に見出されるという以前の観察（ならびに本明細書中で表１および図１に
例証された観察）を反映する。さらに、図２に示されるように、抗α^Eβ₇ｍＡｂ
の注射は、ＬＰ ＣＤ４＋リンパ球の５倍の減少を導いた；ＴＮＰ−ＯＶＡ 対
ＴＮＰ−ＯＶＡ＋抗α^Eβ₇におけるＣＤ４＋ＬＰＬの総数は、それぞれ、２１
．７×１０⁶および４．７×１０⁶。ＩＥＬ区画において、抗ＩＥＬ処置は、ＣＤ
８＋Ｔ細胞の穏やかな減少に関連した；ＴＮＰ−ＯＶＡ：４×１０⁶ 対 ＴＮ
Ｐ−ＯＶＡ＋抗α^Eβ₇：１．６×１０⁶（図３）。興味深いことに、ＩＥ区画内
のＣＤ４＋Ｔ細胞の総数は、ＩＬ−２ −／−マウス内への抗α^Eβ₇ｍＡｂ注射
によって、有意に変化されなかった。さらに、本発明者らは、同様に処置したＩ
Ｌ−２ ＋／＋マウス内を分析した場合に、ＣＤ４＋Ｔ細胞の総数における変化
は、評価したいずれの区画においても観察されなかった（表１）。

【００５８】 抗α^Eβ₇ｍＡｂ処置後のＴＮＰ−ＯＶＡで免疫したＩＬ−２ −／−マウスの
ＬＰにおけるＣＤ４＋リンパ球の減少が、α^Eβ₇＋リンパ球の欠失、またはむし
ろリンパ球分布に対する効果に起因したか否かをさらに評価するために、末梢リ
ンパ器官内のＴ細胞数もまた、評価した。図４に示されるように、抗α^Eβ₇の注
射は、脾臓内のＣＤ４＋Ｔ細胞数の有意な増加に関連した；ＴＮＰ−ＯＶＡ：１
３．５×１０⁶ 対 ＴＮＰ−ＯＶＡ＋抗α^Eβ₇：３２．４×１０⁶。腸間膜リン
パ節区画において、総ＣＤ４＋Ｔ細胞数は、抗α^Eβ₇を受けたか否かに関わらず
、ＴＮＰ−ＯＶＡ免疫ＩＬ−２ −／−マウスにおいて同様であった。

【００５９】 （α^Eβ₇ｍＡｂの投与は、ＬＰＬ内のＩＦＮ−γ産生の減少を生じるが、脾臓
内でＩＦＮ−γ産生の増加を生じる） 慢性粘膜炎症の重篤度は、結腸炎の多くのマウスモデルにおける炎症性ＣＤ４
＋Ｔ細胞によるＩＦＮ−γ産生のレベルに相関することが、現在十分に確証され
ているので、抗α^Eβ₇ｍＡｂでの処置が、ＩＮＦ−γレベルに影響するか否かを
、さらに分析した。従って、最初の研究において、処置されたマウスから単離さ
れたＬＰＬのＩＮＦ−γ産生を、未処置マウスから単離されたＬＰＬと比較した
。単離後、ＬＰＬを、抗ＣＤ３ｍＡｂおよび抗ＣＤ２８ｍＡｂでインビトロで直
接的に刺激し、そして培養上清におけるおよびＩＦＮ−γ産生を分析した。図５
に実証されるように、抗α^Eβ₇ｍＡｂ処置したＩＬ−２ −／−マウス由来のＴ
細胞は、未処置のＴＮＶ−ＯＶＡ免疫マウスと比較した場合に、ＩＦＮ−γの５
倍の減少を示した：ＴＮＰ−ＯＶＡ＋抗α^Eβ₇ｍＡｂ：ＩＦＮ−γ ４６±１５
Ｕ／ｍｌ 対 ＩＦＮ−γ ２２５±７２Ｕ／ｍｌ（ｐ＝０．００３）。同様の
一連の研究において、処置ＩＬ−２ −／−マウス 対 未処置ＩＬ−２ −／
−マウスからの脾臓Ｔ細胞ＩＦＮ−γ産生を評価した。図５に示されるように、
ＴＮＶ−ＯＶＡ免疫単独では、ＰＢＳを注射したコントロールＩＬ−２ −／−
マウスと比較した場合に、脾臓Ｔ細胞におけるＩＦＮ−γ産生において３倍の増
加を誘導した。さらに、この脾臓ＩＮＦ−γの分泌の量は、ＴＮＰ−ＯＶＡおよ
び抗α^Eβ₇の同時注射後で、さらに高かった；ＴＮＰ−ＯＶＡ単独：ＩＦＮ−γ
９７±２０Ｕ／ｍｌ 対 ＴＮＰ−ＯＶＡ＋抗α^Eβ₇ｍＡｂ：ＩＦＮ−γ ２
０２±１４Ｕ／ｍｌ、ｐ＝０．００５。注目すべきは、上記条件下で、本発明者
らは、有意なＩＬ−４産生を見出さなかった。

【００６０】 上記データは、抗α^Eβ₇ｍＡｂの投与が、結腸ＬＰへのＴｈ１サイトカイン経
路に関連付けられ（ｃｏｍｍｉｔｔｅｄ）、Ｔ細胞の流入および／または滞留を
防止することを示す。

【００６１】 （抗α^Eβ₇ｍＡｂ処置は、ＴＮＰ−ＯＶＡ免疫ＩＬ−２ −／−マウスにおけ
るＣＤ３＋／ＣＤ５４＋ＬＰＬの蓄積を防止する） 接着分子の発現は、疑いなく、慢性粘膜炎症の誘導の間の重要な調節エレメン
トである。ＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）は、免疫グロブリンスーパーファミリーの
１つのメンバーであり、これは、Ｔｈ１媒介性炎症の間にＴ細胞を有意に上方制
御し、そしてそのリガンドＶＬＡ−１との結合が、Ｔ細胞接着を増強するのみな
らず、細胞内Ｔ細胞活性化を誘導することが例証されている（２７−３２）。さ
らに、ＩＬ−２ −／−マウスにおけるＴＮＰ−ＯＶＡ誘導性炎症応答の特徴の
１つが、ＣＤ５４およびＣＤ６９の誘導であることが、以前に示されている（２
１、２６）。抗α^Eβ₇ｍＡｂ処置は、ＬＰ区画内でのＩＦＮ−γ産生の減少のみ
を導き、脾臓において導かないので、本発明者らは、このことが、上記のＴ細胞
活性化マーカーの発現に反映されるか否かを観察することに興味をもった。表２
に例証されるように、ＴＮＰ−ＯＶＡおよび抗α^Eβ₇の同時注射後に、ＴＮＰ−
ＯＶＡ単独と比較して、ＣＤ３＋ＣＤ５４＋ＬＰＬの有意な減少が生じ（それぞ
れ、１６．４×１０⁶および２．６×１０⁶）、そしてこれは、抗α^Eβ₇処置後の
、ＣＤ５４を発現するより少ない数のＬＰＬによっても明らかであった。しかし
、脾臓内のＣＤ５４のＴ細胞発現を評価した場合、抗α^Eβ₇処置後に、ＣＤ３＋
ＣＤ５４＋リンパ球の顕著な増加が見られた；ＣＤ３＋ＣＤ５４＋リンパ球の総
数、ＴＮＰ−ＯＶＡおよび抗α^Eβ₇ｍＡｂの同時注射後１６５．６×１０⁶ 対 ＴＮＰ−ＯＶＡ単独注射後１３５×１０⁶。同様の知見が、別の（しかし、そ
れほど特徴付けられていない）活性化マーカーＣＤ６９の発現についても観察さ
れた（表２）。

【００６２】 本発明のプロセスを、その特定の実施形態の特定の詳細に関して記載してきた
が、このような詳細が、それらが添付の特許請求の範囲に含まれる場合以外の、
およびそれらが添付の特許請求の範囲に含まれる程度への、本発明の範囲に対す
る限定としてみなされるべきでない。

【００６３】 本出願を通して、種々の刊行物が参照される。これらの刊行物のその全体での
開示、ならびにこれらの刊行物に引用される参考文献が、本発明が関係する技術
の状態をより十分に記載するために、本出願への参考として本明細書によって援
用される。

【図面の簡単な説明】

【図１】 図１。抗α^Eβ₇ｍＡｂの投与は、ＩＬ−２−／−マウスにおけるＴＮＰ−ＯＶ
Ａ誘導大腸炎を、妨げかつ回復する。ヘマトキシリン／エオシン染色した結腸組
織の顕微鏡写真。Ａ、ＰＢＳおよびラットＩｇＧ２ａを注入したマウス由来の正
常結腸組織。Ｂ、ＣＦＡの状態でＴＮＰ−ＯＶＡで免疫化されたＩＬ−２−／−
マウスの結腸粘膜およびラットＩｇＧ２ａを共に同時注入されたＩＬ−２−／−
マウスの結腸粘膜において見られる有意な単核細胞炎症。ＣおよびＤ、それぞれ
、ＣＦＡの状態でＴＮＰ−ＯＶＡを注入したマウスにおける抗α^Eβ₇ｍＡｂの予
防的な養生法かまたは治療の養生法のいずれかの後の結腸粘膜の正常に近い外観
。１００倍率。結果は、各群において３〜４匹のマウスから得られたデータを示
す。

【図２】 図２。抗α^Eβ₇ｍＡｂでの処置後のＣＤ４＋ＬＰＬの漸減数。ＬＰＬを、フロ
ーサイトメトリーによりＣＤ４＋表現型およびＣＤ８＋表現型について単離し、
計数および分析した（実施例を参照のこと）。ＬＰＬの総数を、ＰＢＳ＋ラット
ＩｇＧ２ａ（ｎ＝３；白棒）、ＣＦＡの状態のＴＮＰ−ＯＶＡ＋ラットＩｇＧ２
ａ（ｎ＝４；黒棒）およびＣＦＡ状態のＴＮＰ−ＯＶＡ＋抗ａＥｂ７（ｎ＝４；
点線棒）を注入したＩＬ−２−／−マウスから分析した。^*ｐ＜０．０１。

【図３】 図３。抗α^Eβ₇ｍＡｂでの処置後のＣＤ４＋およびＣＤ８＋ＩＥＬの総数。Ｉ
ＥＬを、フローサイトメトリーによりＣＤ４＋表現型およびＣＤ８＋表現型につ
いて単離し、計数および分析した（実施例を参照のこと）。ＩＥＬの総数を、Ｐ
ＢＳ＋ラットＩｇＧ２ａ（ｎ＝３；白棒）、ＣＦＡの状態のＴＮＰ−ＯＶＡ＋ラ
ットＩｇＧ２ａ（ｎ＝４；黒棒）およびＣＦＡ状態のＴＮＰ−ＯＶＡ＋抗α^Eβ₇ （ｎ＝４；点線棒）を注入したＩＬ−２−／−マウスから分析した。

【図４】 図４。α^Eβ₇ｍＡｂでの処置後の脾臓内の、ＣＤ４＋リンパ球の漸増数。脾臓
リンパ球を、フローサイトメトリーによりＣＤ４＋表現型およびＣＤ８＋表現型
について単離し、計数および分析した（実施例を参照のこと）。脾臓リンパ球の
総数は、ＰＢＳ＋ラットＩｇＧ２ａ（ｎ＝３；白棒）、ＣＦＡの状態のＴＮＰ−
ＯＶＡ＋ラットＩｇＧ２ａ（ｎ＝４；黒棒）およびＣＦＡ状態のＴＮＰ−ＯＶＡ
＋抗α^Eβ₇（ｎ＝４；点線棒）を注入したＩＬ−２−／−マウスから分析した。 ^* ｐ＜０．０１。

【図５】 図５。抗α^Eβ₇ｍＡｂでの処置後の脾臓のリンパ球の漸増のＩＦＮ−γ産生。
脾臓リンパ球をＰＢＳ＋ラットＩｇＧ２ａ（ｎ＝３；白棒）、ＣＦＡの状態のＴ
ＮＰ−ＯＶＡ＋ラットＩｇＧ２ａ（ｎ＝４；黒棒）およびＣＦＡ状態のＴＮＰ−
ＯＶＡ＋抗α^Eβ₇（ｎ＝４；点線棒）を注入したＩＬ−２−／−マウスから単離
した。次いで、脾臓リンパ球を抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８を用いてインビトロで刺激
し、そして４８時間後の細胞培養上清において、ＩＦＮ−γ産生をＥＬＩＳＡに
より分析した（実施例を参照のこと）。^*ｐ＜０．０１。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 19/02 Ａ６１Ｐ 29/00 29/00 １０１ １０１ 37/06 37/06 37/08 37/08 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 ラッドビクソン， ブジョーン アール． アイスランド国 220 ハフナーフジョー ファー， ハーバーフ 10 (72)発明者 ストロバー， ワレン アメリカ合衆国 メリーランド 20817， ベセスダ， ホワイティア ブールバー ド 8301 (72)発明者 エールハルト， ロルフ オー． アメリカ合衆国 カリフォルニア 94114， サン フランシスコ， サンチェズ ス トリート 1676 Ｆターム(参考） 4C084 AA02 AA17 DA01 NA14 ZA592 ZA662 ZA962 ZB082 ZB112 ZB132 ZB152 4C085 AA13 BB31 CC03

Claims (43)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 被検体における炎症を処置する方法であって、該被検体にα
   Ｅβ７に対するアンタゴニストを投与する工程を包含する、方法。
2. 【請求項２】 前記アンタゴニストが抗体である、請求項１に記載の方法。
3. 【請求項３】 前記抗体がαＥβ７ Ｍａｂである、請求項２に記載の方法
   。
4. 【請求項４】 前記炎症が炎症性腸疾患に関連している、請求項１に記載の
   方法。
5. 【請求項５】 前記炎症が喘息に関連している、請求項１に記載の方法。
6. 【請求項６】 前記炎症が慢性関節リウマチに関連している、請求項１に記
   載の方法。
7. 【請求項７】 前記炎症が自己免疫疾患に関連している、請求項１に記載の
   方法。
8. 【請求項８】 前記炎症がアレルギーに関連している、請求項１に記載の方
   法。
9. 【請求項９】 前記炎症が移植片拒絶に関連している、請求項１に記載の方
   法。
10. 【請求項１０】 前記炎症が対宿主性移植片病に関連している、請求項１に
    記載の方法。
11. 【請求項１１】 被検体における炎症を予防する方法であって、該被検体に
    αＥβ７に対するアンタゴニストを投与する工程を包含する、方法。
12. 【請求項１２】 前記アンタゴニストが抗体である、請求項１１に記載の方
    法。
13. 【請求項１３】 前記抗体がαＥβ７ Ｍａｂである、請求項１２に記載の
    方法。
14. 【請求項１４】 前記炎症が炎症性腸疾患に関連している、請求項１１に記
    載の方法。
15. 【請求項１５】 前記炎症が喘息に関連している、請求項１１に記載の方法
    。
16. 【請求項１６】 前記炎症が慢性関節リウマチに関連している、請求項１１
    に記載の方法。
17. 【請求項１７】 前記炎症が自己免疫疾患に関連している、請求項１１に記
    載の方法。
18. 【請求項１８】 前記炎症がアレルギーに関連している、請求項１１に記載
    の方法。
19. 【請求項１９】 前記炎症が移植片拒絶に関連している、請求項１１に記載
    の方法。
20. 【請求項２０】 前記炎症が対宿主性移植片病に関連している、請求項１１
    に記載の方法。
21. 【請求項２１】 別の治療剤を投与する工程をさらに包含する、請求項１に
    記載の方法。
22. 【請求項２２】 前記別の治療剤が抗体である、請求項２１に記載の方法。
23. 【請求項２３】 前記抗体がα４β７ Ｍａｂである、請求項２２に記載の
    方法。
24. 【請求項２４】 前記別の治療剤がサイトカインである、請求項２１に記載
    の方法。
25. 【請求項２５】 前記別の治療剤が免疫調節剤である、請求項２１に記載の
    方法。
26. 【請求項２６】 別の治療剤を投与する工程をさらに包含する、請求項１１
    に記載の方法。
27. 【請求項２７】 前記別の治療剤が抗体である、請求項２６に記載の方法。
28. 【請求項２８】 前記抗体がα４β７ Ｍａｂである、請求項２７に記載の
    方法。
29. 【請求項２９】 前記別の治療剤がサイトカインである、請求項２６に記載
    の方法。
30. 【請求項３０】 前記別の治療剤が免疫調節剤である、請求項２６に記載の
    方法。
31. 【請求項３１】 αＥβ７の炎症性効果の減少に有効である物質についてス
    クリーニングする方法であって、以下： ａ）前記物質を確立された炎症性疾患を有する動物に対して投与する工程； ｂ）プロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカインまたはケモカインの分泌量
    について前記動物由来の炎症性組織細胞をアッセイする工程であって、これによ
    り、炎症性疾患を有しかつ投与される物質を有しないコントロール動物の炎症性
    組織細胞によって分泌される、プロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカインま
    たはケモカインの量と比較した場合、該動物の炎症性組織細胞により分泌される
    、プロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカインまたはケモカインの量の減少は
    、該物質がαＥβ７の炎症性効果を減少するのに有効であることを示す、工程； ｃ）炎症性組織へのαＥβ７＋炎症性細胞の接着／保持／流入の減少における
    αＥβ７のアンタゴニストの効果を評価する工程であって、減少は、該アンタゴ
    ニストがαＥβ７のレベルで作用していることを示す、工程、 を包含する、方法。
32. 【請求項３２】 前記動物がハプテン試薬により生じる確立された炎症性疾
    患を有する、請求項３１に記載の方法。
33. 【請求項３３】 前記ハプテン試薬がキーホールリンペットヘモシアニン（
    ＫＬＨ）の２，４，６トリニトロフェノール（ＴＮＰ）結合体である、請求項３
    ２に記載の方法。
34. 【請求項３４】 前記動物がマウスである、請求項３３に記載の方法。
35. 【請求項３５】 αＥβ７の炎症性効果の予防に有効である物質についてス
    クリーニングする方法であって、以下： ａ）前記物質を炎症性疾患に感受性である動物に対して投与する工程； ｂ）炎症応答を誘導する処置に該動物を供する工程；ならびに ｃ）プロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカインまたはケモカインの分泌量
    について前記動物由来の炎症性組織細胞をアッセイする工程であって、これによ
    り、炎症性疾患を有しかつ投与される物質を有しないコントロール動物の炎症性
    組織細胞によって分泌される、プロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカインま
    たはケモカインの量の増加と比較した場合、該動物の炎症性組織細胞により分泌
    される、プロ炎症性サイトカイン、炎症性サイトカインまたはケモカインの量の
    増加の欠如は、該物質がα^Eβ₇の炎症性効果を阻害することにより該炎症性疾患
    を予防するのに有効であることを示す、工程； ｄ）炎症性組織へのαＥβ７＋炎症性細胞の接着／保持／流入の減少における
    αＥβ７のアンタゴニストの効果を評価する工程、 を包含する、方法。
36. 【請求項３６】 前記動物がマウスである、請求項３５に記載の方法。
37. 【請求項３７】 前記炎症応答を誘導する前記処置が有効量のハプテン試薬
    の導入である、請求項３６に記載の方法。
38. 【請求項３８】 前記ハプテン試薬がリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）の
    ２，４，６トリニトロフェノール（ＴＮＰ）結合体である、請求項３７に記載の
    方法。
39. 【請求項３９】 前記サイトカインがＩＦＮ−γである、請求項３１に記載
    の方法。
40. 【請求項４０】 前記サイトカインがＩＦＮ−γである、請求項３５に記載
    の方法。
41. 【請求項４１】 αＥβ７アンタゴニストおよび薬学的に受容可能なキャリ
    アを含む、組成物であって、ここで該アンタゴニストは抗αＥβ７抗体ではない
    、組成物。
42. 【請求項４２】 αＥβ７抗体および薬学的に受容可能なキャリアを含む、
    組成物であって、ここで該キャリアはハイブリドーマ上清ではない、組成物。
43. 【請求項４３】 αＥβ７抗体、第２の抗炎症性薬剤および薬学的に受容可
    能なキャリアを含む、組成物。