JP2002521073A - ｐ５３に欠陥があり、かつ、記憶欠損および／または行動障害を有する動物モデルの治療目的のための使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は欠陥のあるｐ５３遺伝子ならびに不安関連学習および記憶および／または行動障害を有する動物モデルの使用に関する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の背景】発明の分野 本発明は不安関連記憶欠損および／または行動障害を有する動物モデルに関す
る。また、記憶および／または不安に作用し得る分子のスクリーニングおよび特
性決定のための、この動物モデルの使用に関する。また、該治療を意図する医薬
の製造のための、化合物または組成物の使用も提案する。

【０００２】 本発明者らは、ｐ５３遺伝子の分子経路における機能的欠陥と、もう一方で、
不安関連の記憶および／または行動障害との間の関係を実際に確立した。

【０００３】背景技術 ｐ５３遺伝子の腫瘍抑制遺伝子としての役割は、一連の研究(Levine et al.,
1991; Eliyahu et al., 1989; Michalovitz et al., 1990; Hollstein et al.,
1991)によって十分に確立されているが、腫瘍形成で急死するｐ５３に欠陥のあ
るマウスに関する研究はこの観察結果を補強する一助となっている(Donchower e
t al., 1992)。興味深いことに、それらの発達の特定のレベルで、これらのマウ
スの相当な部分が脳ヘルニアおよび、さらに無頭症をもたらす神経管の異常な閉
鎖をはじめとする重大な障害を示す(Sah et al., 1995; Armstrong et al., 199
5)。

【０００４】

【発明の概要】

従って、本発明者らはそれらのｐ５３遺伝子には欠陥を有するが中枢神経系(C
NS)は損なわれずに生まれたマウスを研究することに焦点を当てた。これまでの
研究では甚だしい組織病理学的異常は全く記載されていないが、これは非機能的
ｐ５３遺伝子が分子レベルで形質導入経路に影響を及ぼし、中枢神経系が異常に
機能することを引き起こすという可能性を排除するものではない。

【０００５】 従って、本発明者らはそれらのｐ５３遺伝子の欠陥に関してホモ接合体または
ヘテロ接合体のマウスがそれらの神経学的および認識行動においていずれかの特
有の特徴を示すかどうかを決定することに焦点を当てた。

【０００６】

【発明の具体的説明】

動物群、ホモ接合体の若いマウスｐ５３−／−（すなわち、それではｐ５３遺
伝子の２つの対立遺伝子が機能していない）およびヘテロ接合体の成体マウスｐ
５３−／＋（それではｐ５３遺伝子の２つの対立遺伝子のうち１つのみが機能し
ていない）を研究した。この選択はホモ接合体マウスｐ５３−／−（または、い
わゆる「ノックアウト」マウス）はその生涯の初期段階で腫瘍が発達し、他方、
ヘテロ接合体マウスはかなり後で腫瘍が発達するということにより決定した。従
って、実験は動物が病気でない期間にわたって実施したが、これは腫瘍を保持す
るマウスが神経学的機能不全に起因しない、それらが腫瘍を患っているという事
実に起因する、異常な行動をとり得るからである。それらのｐ５３遺伝子に欠陥
があり、本発明の範囲において用いたマウスはTACONIC FARMS, USAにより市販さ
れている。

【０００７】 以下に詳細に示される２つの試験、すなわち、モーリス・スイミングプールお
よびオープンフィールドを実施した。

【０００８】 空間学習および記憶が評価される、モーリス・スイミングプール試験(Morris
et al., 1981, Morris et al., 1984)は最近の研究において、特にアルツハイマ
ー病の症状を有するモデルマウスに対して首尾よく用いられている(Nalbantoglu
et al., 1997, Hsiao et al., 1996)。

【０００９】 オープンフィールド試験では、行動パラメーターを測定する(Archer et al.,
1973, Walsh et al., 1976)。この手順は不安に関連した行動をとるマウスの心
理学的プロフィールの評価の範囲において(Gershenfeld et al., 1997)、および
エストロゲン受容体をコードする不活化遺伝子に関する行動に対する作用を研究
するために(Ogawa et al., 1997)すでに用いられている。

【００１０】 これらの試験はマウスの齢および遺伝子型に関して「盲験」として実施した。

【００１１】 モーリス・スイミングプール試験の結果 若いマウスｐ５３−／−および成体マウスｐ５３−／＋は同一齢の対照マウス
と比較できる方法で試験を行う。このことはこれらのマウスにおける空間学習は
それらのｐ５３遺伝子におけるいずれの欠陥の影響も受けないということを示す
（図１ａおよび図１ｃ）。これらのマウスの記憶を測定するために、さらなる訓
練をせずに２週間の期間の後それらに再度、モーリス・スイミングプール試験を
施した。若いマウスｐ５３−／−は低い空間指数を有するが同一齢の対照マウス
によって示されるものと有意には異ならない（図１ｂ）。他方、成体マウスｐ５
３−／＋は対照マウスによって示されるものよりも有意に低い空間指数を有する
（図１ｄ）。

【００１２】 １５日の期間の後の空間指数の実際のレベルはそれらの試験を想起する能力の
みによるので、これらの結果はこの動物群に記憶欠損が存在するということを示
す。成体マウスｐ５３−／＋の脳の組織学的検査を実施したが異常は全く認めら
れなかった（データは示されていない）。この記憶欠損が成体マウスｐ５３−／
＋においてのみ明白であり、若いマウスｐ５３−／−ではそうではないという事
実は、齢依存性因子、すなわち、脳の成熟段階が記憶欠損の検出において役割を
果たしている可能性があるということを示唆する。神経変性疾患において、行動
または記憶異常を検出するよう計画されるこの種のほとんどの研究は成体マウス
に対して実施されているが、成体ホモ接合体マウスは腫瘍発達のために研究でき
ないと考えられ、またそれがヘテロ接合体マウスに対して研究を実施した理由で
ある。

【００１３】 オープンフィールド試験の結果 若いマウスｐ５３−／−（図２ａ）および成体マウスｐ５３−／＋(図２ｃ）
は同一齢の対照群のマウスと比較して有意に少ない中央区域の横断数を示す。中
央区域の横断数はマウスの未知の領域を探検するために壁から離れて移動すると
いう不安を克服する能力に比例するので、これらの結果はｐ５３に欠陥のあるマ
ウスは対応する正常マウスよりもより接触走性が高い（すなわち、それらは壁の
近くに存在し続ける傾向が高い）ということを示唆する。少数の中央区域の横断
が全体的に低下した運動活動により得るという可能性を退けるために、中央区域
の横断数を総横断数のパーセンテージとして表した。この相対的中央活動もｐ５
３に欠陥のあるマウスの２つの群において有意に低下する（図２ｂおよび図２ｄ
）。 次いで、本発明者らはホモ接合体マウスｐ５３−／−に関して得られた前記で
報告されたモーリス・スイミングプール試験の結果に、それらの性別に従ってよ
り深く進むことに焦点を当てた。従って、本発明者らは雄のマウスに関して得ら
れた空間指数の測定値を雌のマウスに関して得られたものから分離し、それらを
対応する対照群と比較した（図３）。

【００１４】 雄のｐ５３−／−は雄および雌の野生型対照と有意な差を示さなかったが、雌
のｐ５３−／−は対照よりも有意に低い成績を示し、このことは低い記憶能力お
よび空間学習が乏しいことを示すものである。

【００１５】 次いで、本発明者らはｐ５３ノックアウトマウスにおいて中枢神経系の機能に
おける破壊が脳におけるｐ２１Ｗａｆ１およびＰＳ１の発現の変化と関連するか
どうかを決定するための研究を続けたが、これはこれらの２つの遺伝子が野生型
ｐ５３によって調節されており、アポトーシスのモジュレーターと考えられてい
るからである。本発明者らは齢に関連する著しい差異を検出した。若いマウスｐ
５３−／−（２ヶ月齢）は対照マウスと同様のｐ２１Ｗａｆ１およびＰＳ１に対
応するｍＲＮＡレベルを有する（図４ａ−ｃ）。これに対して、成体マウスｐ５
３−／−（２ヶ月前にモーリス・スイミングプールおよびオープンフィールド試
験が実施された同一の群）はｐ２１Ｗａｆ１発現の激しい増加およびＰＳ１発現
の激しい抑制を示す（図４ｄ−ｆ）。ＰＳ１がタンパク質分解的切断を受けると
いうことが事実として、本発明者らはタンパク質レベルでその発現を試験した。
図４ｈに示されるように、ｐ５３ノックアウトマウスにおいてＰＳ１タンパク質
の発現は実質的に極めて低下する。また、本発明者らはｐ５３ノックアウトマウ
スをＰＳ１のｃＤＮＡのコード領域における変異に関しても試験したが、何も認
められなかった。これらの観察結果はより齢の高いｐ５３ノックアウトマウスは
ｐ５３の欠失をｐ２１Ｗａｆの過剰発現によって過度に補い、その結果としてＰ
Ｓ１の抑制が伴われるということを示唆する。本発明者らによるこれまでの研究
により、ｐ２１Ｗａｆ１発現の増強はアポトーシスの誘導を伴うＰＳ１の抑制に
起因し、またアンチセンスｃＤＮＡによるＰＳ１産生の阻害はアポトーシスを誘
導するというを示した。このことは脳におけるＰＳ１発現の低下がアポトーシス
の増加により中枢神経系の機能に障害を引き起こし得るという考えを裏付けるも
のである。

【００１６】 若いｐ５３ノックアウトマウスが、測定可能なＰＳ１発現の低下に先立って、
すでに学習、記憶および行動に関して欠陥を有するという事実は神経変性疾患に
おいて認められたことと同様である。長期間アルツハイマー病患者においては、
神経変性が存在する、疾病の末期段階に先立って行動の異常が観察される。これ
らのデータから、徐々に進行し、ＰＳ１の抑制が測定可能となる前に記憶および
行動異常が起こるというプロセスが示唆される。

【００１７】 アポトーシスを評価するために、前記に示されたようにＰＳ１発現の低下を示
す年老齢個体の同一群に対してＴＵＮＥＬ技術と組み合わせた組織病理学的解析
を実施した。４個体のうちの３個体のマウスは著しい病理学的異常は何も示さな
かった。１個体のノックアウトマウス（雌）は、対照動物と比較して極めて拡大
した空洞を含む同種皮質の５０％以上の薄層化を示した（図５ａ−ｂ）。ＴＵＮ
ＥＬ実験により広範囲に及ぶアポトーシスを含まない脳において個別のアポトー
シス領域が示された（図５ｄ）。ＴＵＮＥＬによる陽性細胞の定量化（図５ｅ）
により、対照脳においては１つの事例でのみ、計数された１７４０個から５個の
陽性細胞が示されたのに対し、マウスｐ５３−／−はＴＵＮＥＬにより雄および
雌の動物においてはそれぞれ５．５％（２５／４６５）および１３％（３９／３
０５）までの陽性細胞を有する（図５ｅ）ということが示された。

【００１８】 アルツハイマー病患者およびＰＳ１に変異を有する形質転換マウスはアポトー
シスおよびアミロイドβ４２の蓄積を伴う神経変性を示すので、次ぎに、本発明
者らはｐ５３ノックアウトマウスの脳におけるアミロイドβ４２の存在に関して
試験した。図５ｈ−ｉに示されるようにｐ５３に欠陥のあるマウスは細胞質区画
に高レベルのアミロイドβ４２を示す。

【００１９】 結論として、これらの実験により中枢神経系の複雑な機能を確実にするにはｐ
５３の完全な発現が必要であるということが示される。これらの機能には記憶お
よび不安形成状況における標準的な行動が含まれる。ｐ５３の機能性の喪失が記
憶および行動を妨げる正確な機構はｐ５３代謝経路の分子レベルでの調節解除に
よるものである可能性がある。

【００２０】 さらに、記憶、それらの学習能力における欠損、ならびに異常行動を示すマウ
スｐ５３−／−はそれらの脳に個別のアポトーシス領域を有するということが示
された。これらの障害はＰＳ１の抑制をもたらすｐ２１Ｗａｆ１発現の増加によ
る長期のｐ５３欠陥の齢依存性の過度な補償を示すと考えられる。これにより、
次に、ＰＳ１の抗アポトーシス作用に欠陥を生じさせることとなる。これらのデ
ータは早期家族性アルツハイマー病において示されるような変異によるか、また
はｐ５３に欠陥のあるマウスの場合のような発現の調節解除のいずれかによるＰ
Ｓ１機能の喪失が細胞死のプログラムを活性化するということを示す。このこと
はアミロイドβ４２の蓄積をもたらすＡＰＰ（アミロイド前駆体タンパク質）の
損なわれた代謝と結びついている。従って、本発明者らは神経変疾患を治療する
ための新規な戦略の基礎を示した。

【００２１】 従って、驚くべきことに、本発明者らはｐ５３遺伝子に欠陥のあるマウスが学
習および記憶障害および／または不安などの行動障害を有するということを証明
した。

【００２２】 従って、本発明は記憶欠損を有する動物モデル、特にマウス、ｐ５３遺伝子の
対立遺伝子の少なくとも１つが非機能性である問題の動物に関する。これはマウ
スｐ５３−／＋に関する場合である。

【００２３】 問題のモデルはさらに不安などの行動障害を有すると考えられ、この場合には
、動物においてｐ５３遺伝子の両対立遺伝子が機能していない。これはホモ接合
体マウスｐ５３−／−に関する場合であるが、不安形成状況において行動障害も
有する前記に示されたマウスｐ５３−／＋に関する場合もある。

【００２４】 従って、抗不安活性を有し得る、および／または少なくとも部分的に記憶を回
復させる分子のスクリーニングのために問題の動物モデルを用いることができる
。 実際、マウスｐ５３−／＋にいずれかの学習試験を施した後に、２週間後にそ
れらが記憶欠損を示すということが分かる。次いで、それらを分子（好ましくは
記憶に作用すると思われる）で処理し、処理マウスに再び試験を施す。分子を、
それが該マウスの記憶を有意に回復させるのを可能にする場合にのみさらなる研
究のために選択する。

【００２５】 本分野で通常に実施される試験に関しては、本発明の動物モデルを用いて不安
および／または記憶に作用し得ることが分かっている分子の特性、これらの分子
の薬力学、薬物動力学および毒性に関する特性などを決定することもできる。

【００２６】 最後に、本発明はまた、記憶障害および不安性疾患および／または神経変性疾
患の治療を意図する医薬の製造のための、ｐ５３遺伝子の代謝経路（上流であっ
ても下流であっても）を誘導する薬剤の使用に関する。実際、ｐ５３遺伝子は互
いに相互作用する遺伝子のカスケードに関与している。このカスケードの均衡が
細胞増殖およびアポトーシスのプロセスの制御を特徴とする「正常な状態」の特
徴である。従って、所望の結果に従ってｐ５３遺伝子の種々のレベルの分子経路
に作用し得るということが利点であり得る。

【００２７】 従って、本発明はまた、ｐ５３遺伝子の代謝経路のかかる誘導がｐ５３遺伝子
によって活性化されるかまたは阻害される遺伝子発現の誘導である場合に関する
。

【００２８】 特に、前記の薬剤はｐ５３遺伝子の代謝または分子経路の活性化によってさら
に抗腫瘍活性を示し得る。この薬剤は、例えば、前記のカスケードに関与する遺
伝子のうちの１つの発現産物であり得る。

【００２９】 本発明は前記の記載および前記の実験の範囲において得られた結果に限定され
るものではなく、マウスに施した２つの試験の以下の記載によってより明確に理
解されよう。

【００３０】方法：行動測定 モーリス・スイミングプール(Morris, 1981)。アイボリー色で直径７０ｃｍで
深さ３０ｃｍのＰＶＣ製の円形のスイミングプールに２２±１℃にて、着色乳白
剤 Opacifier ６３１（商標）の添加によって白に着色した水を壁の端の下１２
ｃｍの高さまで満たす。目標地点となる直径５ｃｍの円形プラットフォームを壁
から７ｃｍ離して水の中に０．５ｃｍ浸漬させる。この装置を長方形の部屋に置
く。２個の長方形の目印（５０×３０ｃｍ）（１個は黒で１個は黒と白の縞）を
スイミングプールから１．５メートル離れた２つの隣接する壁に取り付ける。ス
イミングプールの垂直上部に置いたビデオカメラによりマウスの動きをビデオテ
ープに記録し、次いでそれを解析することが可能となる。実験者は白色のカーテ
ンに隠れる。擬似乱数法である試験から別の試験へと変化する四分円中の、水中
に、壁に向かって置かれると、マウスは部屋の中で利用できる遠くにある目に見
える目印を用いてプラットフォームに向かって進むことを学習しなければならな
い。試験の手順の構成要素を学習することを意図した３回の試みの練習期間の後
、マウスに１日あたり３回の連続試験を４日間施す。プラットフォームに到達す
るのに与えられる最大時間は６０秒に定めた。マウスがこの時間内にプラットフ
ォームに到達できない場合には、実験者がそれに導く。３回の遅い時間の合計が
この期間のスコアを構成する。３回目の期間の最後の試みの後、マウスに空間学
習の正確さをチェックすることを意図する空間傾向試験を施す（短期記憶）。次
いで、プラットフォームを装置から取り外し、反対側の四分円から出発するマウ
スはそれを探して１分間泳がなければならなくする。経路をビデオテープに記録
し、次いで空間傾向指数を算出する。それはプラットフォームの位置を取り囲む
８ｃｍの環を横断する回数とその他の３つの四分円に対照的に置かれた３個の環
を横断する平均回数との差に相当する。１５日の期間の後、さらなる訓練をしな
いで、新たな空間傾向試験を実施する（長期記憶）。

【００３１】 オープンフィールド(Archer, 1973; Walsh and Cummins, 1976)。白色紙のシ
ート（これによりオープンフィールドの床を同一の表面積を有する７つの区域（
１つの中央区域および６つの周辺区域）に分割する道筋を見分けることが可能と
なる）上に置いた、直径４０ｃｍで高さ３０ｃｍの灰色のＰＶＣシリンダーにマ
ウスを個々に入れる。霜降りガラスを通して散乱する白色光（１２５ルックス）
で照らされたこの装置はマウスにとって中程度の不安形成状況となる。マウスに
１日３回の４５分間隔の１５分のセッションを施し、これを連続４日間とする。
各々のセッションの最初の５分間、行動測定を実施する。それらは本質的にマウ
スがシリンダーの側壁から離れて移動し、オープンフィールドの中央区域を横断
するほど「十分に大胆である」回数を計数することからなる。

【００３２】参考文献

【表１】

【図面の簡単な説明】

【図１】 モーリス・スイミングプール試験により得られた結果を示す。マウスの遺伝子
型の関数としての空間傾向指数を示す。図１ａおよび１ｂはホモ接合対の若いマ
ウスｐ５３−／−に関するものであり、図１ｃおよび１ｄはヘテロ接合体の成体
マウスｐ５３−／＋に関するものである。双方の場合において、空間傾向指数は
試験の進行上の構成要素を学習した直後および、次いで、さらなる訓練をしない
で１５日後に算出されている。

【図２】 マウスがフィールドの中央部分を横切る回数を計数することからなるオープン
フィールド試験により得られた結果を示し、それによりマウスが示し得る不安は
そうすることを妨げるということがわかる。図２ａおよび２ｃは、対照マウスと
比較した、ｐ５３−／−およびｐ５３−／＋マウスそれぞれによる中央区域の横
断数を示す。図２ｂおよび２ｄは同一群のマウスの総横断数と比較した中央区域
の横断数のパーセンテージを表す。 図１ｅと２ｅは反復測定の一覧図を用いた変化の解析（ＡＮＯＶＡ）に関する
ものであり、マウスの行動と関連する。ｐ５３遺伝子の欠陥に起因する変化部分
を明白にするために平方相関関係（ｒ２）を算出した。

【図３】 これもまたモーリス・スイミングプール試験により得られた、マウスの性の関
数としての結果を示す。ひと度水に入れられれば、マウスは見えないプラットフ
ォームに向かって進むことを学習しなければならない。学習の最後に、マウスに
空間傾向指数試験を施す（Ｆ＝雌、Ｍ＝雄、ＷＴ＝野生型）。二方法の変化解析
により遺伝子型の性別に関する有意な相互作用が示された（Ｆ（１．４３）＝１
１．６３； ｐ＝０．００１； ｒ^２＝０．２６）。シェッフェｈｏｃ後試験：
Ｆｐ５３−／−対ＦＷＴ＝３．２５； ｐ＝０．０１； Ｆｐ５３−／−対Ｍｐ
５３−／−＝２．７７； ｐ＝０．０４３。

【図４】 成体マウスｐ５３−／−（これは若い間に前記に報告したようなモーリス・ス
イミングプールおよびオープンフィールド試験を実施したマウスｐ５３−／−を
含む。解析時には、これらのマウスにはまだ腫瘍が発達していないということが
分かっていた。）の脳におけるｐ２１Ｗａｆ１の活性化およびＰＳ１の抑制示す
。Ｗａｆ１、ＰＳ１およびＧＡＰＤＨ（対照として）のノーザンブロット解析（
ａ−ｆ）が若いマウス（ａ−ｃ）および成体マウス（ｄ−ｆ）の脳に対して実施
されている。レーン１は対照マウスに対応し、レーン２−３は雄および雌のｐ５
３ノックアウトマウスに対応する。（ａ−ｃ）は異なるプローブとハイブリダイ
ズした同一のノーザンブロットに対応する。対照およびノックアウトマウス間の
Ｗａｆ１およびＰＳ１の発現において相違は示されなかった。成体マウスに関し
ては、同一のノーザンブロットに対するハイブリダイゼーションも実施されてい
る（ｄ−ｆ）。（ＧＲＡＰＤＨ）および（ＰＳ１）の括弧は非ストリンジェント
条件下でのハイブリダイゼーション解離後にプローブに関して残るものを示す。
ｐ５３に欠陥のあるマウスにおいてｐ２１Ｗａｆ１の高い誘導（ｄ）およびＰＳ
１の抑制（ｅ）が示されている。 ウエスタンブロット解析が同一の成体の動物の脳からのタンパク質抽出物に対
して、抗Ｗａｆ１、抗ＰＳ１および抗βチューブリン（対照として）抗体を用い
て実施されている（ｇ−ｉ）。レーン１は対照マウスに対応し、レーン２−３は
ｐ５３ノックアウトマウスに対応する。ｐ５３に欠陥のあるマウスにおいてｐ２
１Ｗａｆ１発現の増強およびＰＳ１発現の低下が認められる。

【図５】 前記で定義された成体マウスｐ５３−／−の脳におけるアポトーシスおよびア
ミロイドβ４２の細胞質内蓄積を示す。 （ａ）および（ｂ）は対照マウスおよびノックアウトマウスそれぞれにおける
ヘマトキシリンおよびエオシンでの同種皮質の標識を表す。矢印はノックアウト
マウス（ｂ）における同種皮質の薄層化を示す。倍率は起源と比較して６．６で
ある。 （ｃ）および（ｄ）は、対照（ｃ）およびノックアウトマウス（ｄ）における
ＴＵＮＥＬ技術による染色およびハリスヘマトキシリン対比染色を表す。（ｄ）
では、ＴＵＮＥＬ技術によって２つの陽性核が認められる（矢印）。倍率は１３
２である。 （ｅ）はＴＵＮＥＬ技術による定量化を示す。 （ｆ−ｉ）は抗アミロイドβ４２特異的抗体を用いる免役組織化学解析を示す
。ｆおよびｈは対照マウスに、ｇおよびｉはｐ５３ノックアウトマウスに対応し
、これはアミロイドβ４２の細胞質内蓄積を示す（ｆ−ｇ：倍率×４０、ｈ−ｉ
倍率×１００）。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 アダム、テレルマン フランス国パリ、リュ、デュ、プレ−オ− クレール、６

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 抗不安活性を示し得る分子をスクリーニングするための、ｐ５３遺伝子の少な
   くとも１つの対立遺伝子が機能していない、記憶欠損および／または不安などの
   行動障害を示す動物モデルの使用。
2. 【請求項２】 抗不安活性を有する分子の、薬力学、薬物動力学および毒性のような特性を決
   定するための、請求項１に記載の動物モデルの使用。
3. 【請求項３】 ｐ５３遺伝子の２つの対立遺伝子が機能していない、請求項１または２に記載
   の動物モデルの使用。
4. 【請求項４】 少なくとも部分的に記憶を回復させ得る分子をスクリーニングするための、請
   求項１に記載の動物モデルの使用。
5. 【請求項５】 少なくとも部分的に記憶を回復させ得る分子の、薬力学、薬物動力学および毒
   性のような特性を決定するための、請求項１に記載の動物モデルの使用。
6. 【請求項６】 動物がマウスである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の動物モデルの使用
   。
7. 【請求項７】 記憶障害、不安性疾患および／または神経変性疾患の治療を意図した医薬の製
   造のための、ｐ５３遺伝子、該遺伝子の上流または下流の代謝経路を誘導する薬
   剤の使用。
8. 【請求項８】 ｐ５３遺伝子の代謝経路の誘導がｐ５３遺伝子によって活性化される遺伝子発
   現の誘導である、請求項７に記載の薬剤の使用。
9. 【請求項９】 ｐ５３遺伝子の代謝経路の誘導がｐ５３遺伝子によって阻害される遺伝子発現
   の誘導である、請求項７に記載の薬剤の使用。
10. 【請求項１０】 ｐ５３遺伝子の代謝経路の活性化により該薬剤がさらに抗腫瘍活性を有する、
    請求項７〜９のいずれか一項に記載の薬剤の使用。