JP2002504362A - 移植治療のための前駆胚幹細胞からの細胞および組織の誘導体 - Google Patents

移植治療のための前駆胚幹細胞からの細胞および組織の誘導体

Info

Publication number
JP2002504362A
JP2002504362A JP2000533525A JP2000533525A JP2002504362A JP 2002504362 A JP2002504362 A JP 2002504362A JP 2000533525 A JP2000533525 A JP 2000533525A JP 2000533525 A JP2000533525 A JP 2000533525A JP 2002504362 A JP2002504362 A JP 2002504362A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
cells
embryonic stem
stem cells
cell
medium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
JP2000533525A
Other languages
English (en)
Inventor
ギャリー・ディ・ホッジェン
Original Assignee
メディカル・カレッジ・オブ・ハンプトン・ローズ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by メディカル・カレッジ・オブ・ハンプトン・ローズ filed Critical メディカル・カレッジ・オブ・ハンプトン・ローズ
Publication of JP2002504362A publication Critical patent/JP2002504362A/ja
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0603—Embryonic cells ; Embryoid bodies
    • C12N5/0606—Pluripotent embryonic cells, e.g. embryonic stem cells [ES]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

(57)【要約】 桑実胚（前駆幹）もしくは胚盤胞（ＩＣＭ幹細胞）のいずれかから得られた胚幹細胞株を単離し、増殖させる新規な方法を、細胞、組織または臓器移植のために開示する。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、移植治療のための、前駆胚幹細胞からの細胞および組織の誘導体に
関する。
【０００２】
【従来の技術】
本発明は、胚盤胞からの内部細胞塊（ＩＣＭ）に優先して、分散させた桑実胚
細胞の使用に関する。桑実胚期は、いかなる分化も発現しない最後の前駆胚期で
あり、これらの細胞（前駆幹細胞）を、後に胚盤胞に存在する胚幹細胞（ＥＳＣ
ｓ）の全先祖とする。逆に、胚盤胞からのＩＣＭは、既に栄養膜細胞から分化し
、その時までに、胎盤の一部となることが運命づけられている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題および課題を解決するための手段】
また、本発明は、培養前駆幹細胞および培養における増殖幹細胞へのキメラ導
入の使用に関する。すなわち、他の供給源（例えば、成体、臍帯血、胎児組織な
ど）から得た「教示（ｔｅａｃｈｅｒ）細胞」もしくはそれらからの廃培地は、
未分化な前駆幹細胞に、我々が求める治療後細胞に、より速くかつより優先的に
、いかに転換するかを教示するであろう。
【０００４】 また、本発明は、幹細胞の分化のある種の初期マーカー、例えばＦｅ＋＋の分
離、ヘモグロビンの蓄積、骨髄性線維、インスリン合成、ドーパミン負荷などの
同定および使用に関する。
【０００５】 本発明の他の特徴および利点は、本発明の以下の説明により明らかになるであ
ろう。
【０００６】
【発明の実施の形態】
本発明は、桑実胚（前駆幹）もしくは胚盤胞（ＩＣＭ幹細胞）から得られる胚
幹細胞株を単離し、増殖する方法を提供する。従って、桑実期で、未分化な前駆
幹細胞は、幹細胞数の増殖因子として用いられるであろう。次いで、増殖させた
胚幹細胞株は、細胞、組織または臓器の移植のために用いられる。
【０００７】 幹細胞の増殖は、キメラ内部細胞塊細胞の形成によって開始させることができ
る。キメラのＩＣＭは、胚盤胞から発生するであろう。そのようなＩＣＭから、
優れた培養幹細胞が得られる。好ましくは、キメラ内部細胞塊細胞の形成は、核
移植、ミトコンドリア置換、または細胞質除去を含む。
【０００８】 好ましくは、少なくとも一つの制御因子が、胚幹細胞株の増殖のために用いら
れる。より好ましくは、制御因子は、「教示細胞」または「教示細胞の廃培地」
から得られる。「教示細胞」は、標的幹細胞の増殖を促進させるために、未分化
な前駆幹細胞または初期幹細胞に導入されるであろう。あるいは、「教示細胞」
からの廃培地は、標的幹細胞の増殖を促進するために用いられることができる。
【０００９】 好ましい実施態様において、胚幹細胞は、特定の標的細胞または組織に分化さ
せるために、少なくとも一つの試薬またはサイトカインが存在する培地中で培養
される。好ましくは、試薬またはサイトカインは、ＩＬ−１、ＴＮＦ−α、ＩＬ
−６、ＰＴＨ、ＰＤＧＦ、ＰＧＥ2、ｃＡＭＰ、エストロゲン、抗エストロゲン 、プロゲスチン、抗プロゲスチン、コルチゾール、ＧＨ、アンドロゲン、Ｉ3／ Ｔ3、ＶＧＥＦおよびシクロスポリンからなる群から選択される。また好ましく は、培地中における試薬またはサイトカインの濃度は、約１．０ｐｇ／ｍｌから
約１０．０ｎｇ／ｍｌである。
【００１０】 他の好ましい実施態様において、標的細胞は、神経細胞、骨細胞、免疫細胞お
よび脾臓β細胞からなる群から選択される。
【００１１】 初期代謝マーカーの広いスペクトルの使用のための技術とパラメーターが開発
されている。いくつかのそのようなマーカーは、例えば：Ｆｅ＋＋分離、Ｈｇ蓄
積、骨髄性線維、神経成長因子、アポートーシス因子、インスリン合成、ドーパ
ミン負荷、ヘモグロビン負荷など、である。さらに、胚幹細胞の他の初期マーカ
ーを、同定することができる。
【００１２】 前記事項は証明するための特定の技術が開発されている。−本発明の一実施態
様において、細胞を線維芽支持細胞層上に播種することによって、桑実胚期もし
くは胚盤胞期から、胚幹（ＥＳ）細胞が得られる。コロニーは、受容されたマー
カーを用い、分化状態について評価する。ＥＳ細胞を代理の胚に注入し、キメラ
を生成させ、成体組織へのＥＳ細胞の寄与を評価することによって、さらに評価
を行う。最後に、ＥＳ細胞の理想的なコロニーを、核移植のための核ドナーとし
て用いる。
【００１３】 増殖させた幹細胞のクローン特性は、適正に分化しなかった幹細胞の混入メン
バーを排除するために、アポトーシス因子、サイトカインまたは他の試薬を、培
地に添加することによって得ることができる。好ましくは、サイトカインまたは
試薬は、ＩＬ−１、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＰＴＨ、ＰＤＧＦ、ＰＧＥ2、ｃＡ ＭＰ、エストロゲン、抗エストロゲン、プロゲスチン、抗プロゲスチン、コルチ
ゾル、ＧＨ、アンドロゲン、Ｉ3／Ｔ3、ＶＧＥＦおよびシクロスポリンからなる
群から選択される。
【００１４】 あるいは、ｉｎ ｖｉｖｏにおいて、教示細胞によって生成された少なくとも
一つの制御因子が胚細胞と接触できるように、「教示細胞」を、胚幹細胞に十分
に密接した部位に移植することによって、胚幹細胞株を増殖させる。
【００１５】 異なるカルシウム濃度の存在または不在が、胚幹細胞株の増殖を制御するため
に用いることができる。
【００１６】 好ましくは、増殖させた胚幹細胞株は、移植のために使用する前に、三次元様
式で培養する。
【００１７】 本発明は、移植治療のための、前駆胚幹細胞からの細胞および組織の、有効か
つ安全で、商業的に実用できる誘導体を許容するであろう。具体的には、前駆胚
の二細胞期から５０％を超える割合で、ヒト胚盤胞からの生育させることができ
るであろう。また、桑実胚期前駆幹細胞、および／または胚盤胞の内部細胞塊か
ら単離された幹細胞を有効に回収することができるであろう。これらの前駆胚幹
細胞および幹細胞の個体数は、好ましくは、一週間以上の培養において、実用的
に保持されるであろう。
【００１８】 実施例１ 幹細胞のクローン産生が行われるであろう。これらのクローンは、環境中にお
ける周囲のグルコースレベルに反応するであろうし、次に、これらの幹細胞株を
移植することによって、抹消血の供給によって作用し、インスリン依存性糖尿病
を治療するであろう。インスリン分泌細胞は、マイトジェンの増殖を介して、増
殖を回復する。
【００１９】 実施例２ 多能性幹細胞は単離され、分化して造血性に導かれるであろう。従って、血液
細胞群から得られた組織もしくは免疫応答系のβ細胞を、ＨＩＶ感染、化学療法
後もしくは放射線治療による消耗などの病状を患っている欠損患者に置換される
であろう。例えば、「教示細胞」の存在またはサイトカインなどのある種の培地
への添加など、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの培養条件は、これらの多能性幹細胞によっ
て発現される分化の速度および程度を方向付けるであろう。
【００２０】 実施例３ 幹細胞の固有の性能は、移植した時に、移植受容体に、臓器／組織欠損を長期
間緩和するであろう「ハイブリッド」代謝機能を組み込んだキメラ細胞株の形成
によって、改変されるであろう。例えば、局部でのドーパミン生成により、パー
キンソン病などの病状において、筋肉の硬直および運動制御の消失などがみられ
る患者の神経学的治療を改変することができる。一過性に一部有効である薬学的
治療と異なり、ドーパミンおよびセロトニン因子の生成を制御するキメラ幹細胞
の移植は、これらの患者に優れた結果を提供するであろう。
【００２１】 本発明は、それらの好ましい実施態様に関して記載されているが、当業者によ
って理解されるように、より広く適用される。従って、本発明の範囲は、以下の
特許請求の範囲によってのみ限定されない。
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１２年４月１０日（２０００．４．１０）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正内容】
【特許請求の範囲】

Claims (18)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 桑実胚（前駆幹）または胚盤胞（ＩＣＭ幹細胞）から得られ
    る胚幹細胞株を単離し、増殖させる方法。
  2. 【請求項２】 該増殖させた胚幹細胞株が、細胞、組織または臓器の移植の
    ために用いられる請求項１に記載の方法。
  3. 【請求項３】 少なくとも一つの制御因子が、胚幹細胞株の増殖のために用
    いられる請求項１に記載の方法。
  4. 【請求項４】 該制御因子が、教示細胞もしくは教示細胞の廃培地から得ら
    れる請求項３に記載の方法。
  5. 【請求項５】 該増殖が、キメラ内部細胞塊細胞の形成によって開始される
    請求項３に記載の方法。
  6. 【請求項６】 該キメラ内部細胞塊細胞の形成が、核移植、ミトコンドリア
    置換、または細胞質除去を含む請求項５に記載の方法。
  7. 【請求項７】 該胚幹細胞が、特定の細胞または組織に分化させるために、
    少なくとも一つの試薬またはサイトカインの存在する培地中で培養される請求項
    １に記載の方法。
  8. 【請求項８】 試薬またはサイトカインが、ＩＬ−１、ＴＮＦ−α、ＩＬ−
    ６、ＰＴＨ、ＰＤＧＦ、ＰＧＥ2、ｃＡＭＰ、エストロゲン、抗エストロゲン、 プロゲスチン、抗プロゲスチン、コルチゾール、ＧＨ、アンドロゲン、Ｉ3／Ｔ3 、ＶＧＥＦおよびシクロスポリンからなる群から選択される請求項７に記載の方
    法。
  9. 【請求項９】 培地中における試薬またはサイトカインの濃度が、約１．０
    ｐｇ／ｍｌから１０．０ｎｇ／ｍｌまでである請求項７に記載の方法。
  10. 【請求項１０】 特定の細胞が、神経細胞、骨細胞、免疫細胞、および脾臓
    β細胞からなる群から選択される請求項７に記載の方法。
  11. 【請求項１１】 胚幹細胞の分化が、培地中に蓄積する、少なくとも一つの
    マーカー物質によって同定される請求項７に記載の方法。
  12. 【請求項１２】 マーカー物質が、鉄分離物質、インスリン、ドーパミン、
    骨髄性線維、およびヘモグロビンからなる群から選択される請求項１１に記載の
    方法。
  13. 【請求項１３】 キメラ内部細胞塊細胞の形成が、必須の生体機能を回復さ
    せる代謝機能を複製し、実行する、幹細胞の成熟を増強する請求項５に記載の方
    法。
  14. 【請求項１４】 増殖させた幹細胞のクローン特性が、適正に分化しなかっ
    た幹細胞の混入メンバーを排除するために、アポトーシス因子を培地中に添加す
    ることによって実現される請求項１に記載の方法。
  15. 【請求項１５】 増殖させた幹細胞のクローン特性が、適正に分化しなかっ
    た幹細胞の混入メンバーを排除するために、少なくとも一つの試薬またはサイト
    カインを培地に添加することによって実現され、該試薬またはサイトカインが、
    ＩＬ−１、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＰＴＨ、ＰＤＧＦ、ＰＧＥ2、ｃＡＭＰ、エ ストロゲン、抗エストロゲン、プロゲスチン、抗プロゲスチン、コルチゾール、
    ＧＨ、アンドロゲン、Ｉ3／Ｔ3、ＶＧＥＦおよびシクロスポリンからなる群から
    選択される請求項１に記載の方法。
  16. 【請求項１６】 胚幹細胞株の増殖が、ｉｎ ｖｉｖｏにおいて、教示細胞
    によって生成される少なくとも一つの制御因子が胚細胞に接触できるように、教
    示細胞を、胚幹細胞と十分に密接した部位に移植することによって行われる請求
    項１に記載の方法。
  17. 【請求項１７】 異なるカルシウム濃度の存在または不在が、胚幹細胞株の
    増殖を制御するために用いられる請求項１に記載の方法。
  18. 【請求項１８】 増殖される胚幹細胞株が、移植される前に、三次元様式で
    培養される請求項１に記載の方法。
JP2000533525A 1998-02-27 1999-02-26 移植治療のための前駆胚幹細胞からの細胞および組織の誘導体 Withdrawn JP2002504362A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US7627398P 1998-02-27 1998-02-27
US60/076,273 1998-02-27
PCT/US1999/004188 WO1999043785A1 (en) 1998-02-27 1999-02-26 Derivation of cells and tissues from embryonic pre-stem cells for transplantation therapies

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2002504362A true JP2002504362A (ja) 2002-02-12

Family

ID=22130951

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2000533525A Withdrawn JP2002504362A (ja) 1998-02-27 1999-02-26 移植治療のための前駆胚幹細胞からの細胞および組織の誘導体

Country Status (5)

Country Link
EP (1) EP1056835A4 (ja)
JP (1) JP2002504362A (ja)
AU (1) AU757036B2 (ja)
CA (1) CA2320423A1 (ja)
WO (1) WO1999043785A1 (ja)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030113303A1 (en) * 1998-02-05 2003-06-19 Yitzhack Schwartz Homing of embryonic stem cells to a target zone in tissue using active therapeutics or substances
US6667176B1 (en) 2000-01-11 2003-12-23 Geron Corporation cDNA libraries reflecting gene expression during growth and differentiation of human pluripotent stem cells
US7410798B2 (en) 2001-01-10 2008-08-12 Geron Corporation Culture system for rapid expansion of human embryonic stem cells
US20050042749A1 (en) 2001-05-16 2005-02-24 Carpenter Melissa K. Dopaminergic neurons and proliferation-competent precursor cells for treating Parkinson's disease
US7455983B2 (en) 2000-01-11 2008-11-25 Geron Corporation Medium for growing human embryonic stem cells
US7250294B2 (en) 2000-05-17 2007-07-31 Geron Corporation Screening small molecule drugs using neural cells differentiated from human embryonic stem cells
GB2379447B (en) 2000-05-17 2004-12-29 Geron Corp Neural progenitor cell populations
AU2002246132A1 (en) * 2002-03-13 2003-09-22 Fundacion Ivi Para El Estudio De La Reproduccion Humana (Fivier) Method of producing cell lines
CN107189980B (zh) 2005-06-22 2021-07-09 阿斯特利亚斯生物治疗股份公司 人胚胎干细胞的悬浮培养物

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5453366A (en) * 1990-07-26 1995-09-26 Sims; Michele M. Method of cloning bovine embryos
GB9308271D0 (en) * 1993-04-21 1993-06-02 Univ Edinburgh Method of isolating and/or enriching and/or selectively propagating pluripotential animal cells and animals for use in said method
US5914268A (en) * 1994-11-21 1999-06-22 National Jewish Center For Immunology & Respiratory Medicine Embryonic cell populations and methods to isolate such populations

Also Published As

Publication number Publication date
CA2320423A1 (en) 1999-09-02
EP1056835A1 (en) 2000-12-06
AU2879999A (en) 1999-09-15
EP1056835A4 (en) 2003-01-15
WO1999043785A1 (en) 1999-09-02
AU757036B2 (en) 2003-01-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2006304274B2 (en) Production of oligodendrocytes from placenta-derived stem cells
Vats et al. Stem cells: sources and applications
AU2002243980B2 (en) Renovation and repopulation of decellularized tissues and cadaveric organs by stem cells
CN109486751B (zh) 用于无饲养细胞培养牛和猪的精原干细胞的方法
US20070243172A1 (en) Multipotent stem cells derived from placenta tissue and cellular therapeutic agents comprising the same
BG107770A (bg) Извлечени от кръв на човешка пъпна връв свободни соматични стволови клетки
CN102186971A (zh) 利用分离的胎盘细胞治疗中风
WO2007016245A2 (en) Reprogramming of adult or neonic stem cells and methods of use
JP2009544313A (ja) 網膜幹細胞由来の合成角膜
JP6545690B2 (ja) 栄養膜基底層から由来した幹細胞及びそれを含む細胞治療剤
Kuzan et al. Blastocyst expansion, hatching, and attachment of porcine embryos cocultured with bovine fibroblasts in vitro
JP2002504362A (ja) 移植治療のための前駆胚幹細胞からの細胞および組織の誘導体
KR20090131677A (ko) 신규한 줄기세포주, 이의 이용 및 배양 방법
Saxena et al. Role of stem cell research in therapeutic purpose--a hope for new horizon in medical biotechnology.
WO1998021313A1 (fr) Procede pour la mise en culture de cellules souches hematopoïetiques
De Boer et al. Tissue engineering
US20110263013A1 (en) Compositions And Methods For Growing Embryonic Stem Cells
US20020159975A1 (en) Derivation of cells and tissues from embryonic pre-stem cells for transplantation therapies
US20110250236A1 (en) Stem cells derived from the carotid body and uses thereof
Sadri-Ardekani et al. Regenerative medicine for the male reproductive system
Sadri-Ardekani et al. Male reproductive organs
US20120107927A1 (en) Methods and devices for isolating embryonic stem cells
JPWO2008026548A1 (ja) テラトーマの発生を抑制する方法
WO2009139881A2 (en) Compositions and methods for growing embryonic stem cells
Ghosn et al. Stem Cell Technology Update

Legal Events

Date Code Title Description
A300 Withdrawal of application because of no request for examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300

Effective date: 20060509