JP2002209441A - 有用エンドファイト菌が感染したイタリアンライグラス - Google Patents
有用エンドファイト菌が感染したイタリアンライグラスInfo
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 有用エンドファイト菌が感染したイタリアン
ライグラスを提供する。 【解決手段】 メドウフェスクの植物体内に共生するエ
ンドファイト菌から、アルカロイドのロリンを産生し、
エルゴバリンとロリトレムＢは産生しない有用エンドフ
ァイト菌を選抜し、これをイタリアンライグラスに人為
的に感染させ、害虫に対する抵抗性を付与したことを特
徴とするイタリアンライグラス、及びその作出方法。
ライグラスを提供する。 【解決手段】 メドウフェスクの植物体内に共生するエ
ンドファイト菌から、アルカロイドのロリンを産生し、
エルゴバリンとロリトレムＢは産生しない有用エンドフ
ァイト菌を選抜し、これをイタリアンライグラスに人為
的に感染させ、害虫に対する抵抗性を付与したことを特
徴とするイタリアンライグラス、及びその作出方法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、有用エンドファイ
ト菌が感染した害虫抵抗性のイタリアンライグラスに関
するものであり、更に詳しくは、エンドファイト菌の中
から家畜毒性のない有用エンドファイト菌を選抜し、こ
の有用エンドファイト菌を人為的に感染させ、害虫抵抗
性を付与しイタリアンライグラス及びその作出方法に関
するものである。
ト菌が感染した害虫抵抗性のイタリアンライグラスに関
するものであり、更に詳しくは、エンドファイト菌の中
から家畜毒性のない有用エンドファイト菌を選抜し、こ
の有用エンドファイト菌を人為的に感染させ、害虫抵抗
性を付与しイタリアンライグラス及びその作出方法に関
するものである。
【０００２】
【従来の技術】エンドファイト菌は、糸状菌の一種であ
り、植物に共生する菌である。この菌の産生するアルカ
ロイドにより、エンドファイト菌に感染している植物体
は、耐虫性、耐病性が強まり、その結果、植物体の生長
が旺盛になる場合がある。エンドファイト菌が産生する
アルカロイドは、主にエルゴバリン、ロリトレムＢ、ペ
ラミン及びロリンがある。エルゴバリンとロリトレムＢ
は、家畜に対して毒性があるが、一方、ペラミンとロリ
ンは、家畜に対して毒性がないにも関わらず、植物体に
耐虫性を付与することができる。芝地などに利用される
緑化用品種については、殺虫剤や殺菌剤の農薬の軽減を
目的に、近年では積極的に植物体内のエンドファイト菌
の感染率を高くしている。このような観点から、エンド
ファイト菌は微生物資材として認識されるようになって
きた。そして、近年、家畜に対して毒性を持たない有用
エンドファイト菌として、例えば、エルゴバリンとロリ
トレムＢを産生しない菌の探索が国内外で行われるよう
になった。
り、植物に共生する菌である。この菌の産生するアルカ
ロイドにより、エンドファイト菌に感染している植物体
は、耐虫性、耐病性が強まり、その結果、植物体の生長
が旺盛になる場合がある。エンドファイト菌が産生する
アルカロイドは、主にエルゴバリン、ロリトレムＢ、ペ
ラミン及びロリンがある。エルゴバリンとロリトレムＢ
は、家畜に対して毒性があるが、一方、ペラミンとロリ
ンは、家畜に対して毒性がないにも関わらず、植物体に
耐虫性を付与することができる。芝地などに利用される
緑化用品種については、殺虫剤や殺菌剤の農薬の軽減を
目的に、近年では積極的に植物体内のエンドファイト菌
の感染率を高くしている。このような観点から、エンド
ファイト菌は微生物資材として認識されるようになって
きた。そして、近年、家畜に対して毒性を持たない有用
エンドファイト菌として、例えば、エルゴバリンとロリ
トレムＢを産生しない菌の探索が国内外で行われるよう
になった。
【０００３】イタリアンライグラスは、主に飼料作物に
利用されるイネ科牧草であり、国内で重要な基幹草種の
１つである。本草種の育種は、国内では１９５５年から
始められ、現在までの農林登録品種は１８品種である。
しかしながら、エンドファイト菌が産生するアルカロイ
ドが家畜に対して毒性があるのでエンドファイト菌の感
染品種を飼料作物に利用することは不適当との考えか
ら、又は、エンドファイト菌の存在を知らなかったこと
から、国内の公的研究機関及び民間研究機関において、
エンドファイト菌を積極的に利用した飼料作物用イタリ
アンライグラスの育種は行われておらず、これまで、エ
ンドファイト菌を利用した牧草育種法は見落とされてい
た。このことは、他の飼料作物用草種についても同様で
ある。
利用されるイネ科牧草であり、国内で重要な基幹草種の
１つである。本草種の育種は、国内では１９５５年から
始められ、現在までの農林登録品種は１８品種である。
しかしながら、エンドファイト菌が産生するアルカロイ
ドが家畜に対して毒性があるのでエンドファイト菌の感
染品種を飼料作物に利用することは不適当との考えか
ら、又は、エンドファイト菌の存在を知らなかったこと
から、国内の公的研究機関及び民間研究機関において、
エンドファイト菌を積極的に利用した飼料作物用イタリ
アンライグラスの育種は行われておらず、これまで、エ
ンドファイト菌を利用した牧草育種法は見落とされてい
た。このことは、他の飼料作物用草種についても同様で
ある。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】エンドファイト菌と植
物の間には草種親和性と呼ばれる現象がある。これは、
例えば、メドウフェスクの植物体内に共生するエンドフ
ァイト菌は、同草種の他個体の植物体内でも共生できる
場合があるが、他草種の植物体内で共生することは困難
で、特にイタリアンライグラスにおいて次世代の種子ま
で伝播した例は報告されていない。このような状況の中
で、本発明者らは、有用エンドファイト菌の探索と当該
エンドファイト菌を積極的に利用した飼料作物用イタリ
アンライグラスを作出することを目標として研究を重ね
た結果、イネ科植物のメドウフェスクの植物体内に共生
するエンドファイト菌のうちから有用エンドファイト菌
を発見し、次に、この有用エンドファイトをイタリアン
ライグラス育成系統に人工接種することにより、有用エ
ンドファイト菌が感染し、害虫抵抗性の付与された飼料
作物用イタリアンライグラスを作出し、更に有用エンド
ファイト菌が種子伝播により次世代に移行することを確
認し、本発明を完成するに至った。
物の間には草種親和性と呼ばれる現象がある。これは、
例えば、メドウフェスクの植物体内に共生するエンドフ
ァイト菌は、同草種の他個体の植物体内でも共生できる
場合があるが、他草種の植物体内で共生することは困難
で、特にイタリアンライグラスにおいて次世代の種子ま
で伝播した例は報告されていない。このような状況の中
で、本発明者らは、有用エンドファイト菌の探索と当該
エンドファイト菌を積極的に利用した飼料作物用イタリ
アンライグラスを作出することを目標として研究を重ね
た結果、イネ科植物のメドウフェスクの植物体内に共生
するエンドファイト菌のうちから有用エンドファイト菌
を発見し、次に、この有用エンドファイトをイタリアン
ライグラス育成系統に人工接種することにより、有用エ
ンドファイト菌が感染し、害虫抵抗性の付与された飼料
作物用イタリアンライグラスを作出し、更に有用エンド
ファイト菌が種子伝播により次世代に移行することを確
認し、本発明を完成するに至った。
【０００５】本発明は、アルカロイドのロリンを産生
し、エルゴバリンとロリトレムＢは産生しない有用エン
ドファイト菌を人為的にイタリアンライグラスに感染さ
せ、害虫抵抗性を付与したイタリアンライグラスを提供
することを目的とするものである。また、本発明は、上
記有用エンドファイト菌として、真菌類中の子のう菌の
無性世代でＮｅｏｔｙｐｈｏｄｉｕｍ属に属する菌株Ｅ
ｔｏ８（ＦＥＲＭ Ｐ−１８１７２）を人為的にイタリ
アンライグラスに感染させ、害虫に対する抵抗性を付与
したイタリアンライグラスを提供することを目的とする
ものである。更に、本発明は、上記有用エンドファイト
菌を人為的にイタリアンライグラスに感染させ、害虫抵
抗性を付与したイタリアンライグラスを作出する方法を
提供することを目的とするものである。
し、エルゴバリンとロリトレムＢは産生しない有用エン
ドファイト菌を人為的にイタリアンライグラスに感染さ
せ、害虫抵抗性を付与したイタリアンライグラスを提供
することを目的とするものである。また、本発明は、上
記有用エンドファイト菌として、真菌類中の子のう菌の
無性世代でＮｅｏｔｙｐｈｏｄｉｕｍ属に属する菌株Ｅ
ｔｏ８（ＦＥＲＭ Ｐ−１８１７２）を人為的にイタリ
アンライグラスに感染させ、害虫に対する抵抗性を付与
したイタリアンライグラスを提供することを目的とする
ものである。更に、本発明は、上記有用エンドファイト
菌を人為的にイタリアンライグラスに感染させ、害虫抵
抗性を付与したイタリアンライグラスを作出する方法を
提供することを目的とするものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】上記課題を解決するため
の本発明は、以下の技術的手段から構成される。 （１）メドウフェスクの植物体内に共生するエンドファ
イト菌から、アルカロイドのロリンを産生し、エルゴバ
リンとロリトレムＢは産生しない有用エンドファイト菌
を選抜し、これをイタリアンライグラスに人為的に感染
させ、害虫に対する抵抗性を付与したことを特徴とする
イタリアンライグラス。 （２）有用エンドファイト菌が、メドウフェスク品種か
ら分離した糸状菌Ｎｅｏｔｙｐｈｏｄｉｕｍに属する菌
株Ｅｔｏ８（ＦＥＲＭ Ｐ−１８１７２）である、前記
（１）に記載のイタリアンライグラス。 （３）メドウフェスクの植物体内に共生するエンドファ
イト菌から、アルカロイドのロリンを産生し、エルゴバ
リンとロリトレムＢは産生しない有用エンドファイト菌
を選抜し、これをイタリアンライグラスに人為的に感染
させ、害虫に対する抵抗性を付与したイタリアンライグ
ラスを作出することを特徴とする、害虫に対する抵抗性
を付与したイタリアンライグラスの作出方法。
の本発明は、以下の技術的手段から構成される。 （１）メドウフェスクの植物体内に共生するエンドファ
イト菌から、アルカロイドのロリンを産生し、エルゴバ
リンとロリトレムＢは産生しない有用エンドファイト菌
を選抜し、これをイタリアンライグラスに人為的に感染
させ、害虫に対する抵抗性を付与したことを特徴とする
イタリアンライグラス。 （２）有用エンドファイト菌が、メドウフェスク品種か
ら分離した糸状菌Ｎｅｏｔｙｐｈｏｄｉｕｍに属する菌
株Ｅｔｏ８（ＦＥＲＭ Ｐ−１８１７２）である、前記
（１）に記載のイタリアンライグラス。 （３）メドウフェスクの植物体内に共生するエンドファ
イト菌から、アルカロイドのロリンを産生し、エルゴバ
リンとロリトレムＢは産生しない有用エンドファイト菌
を選抜し、これをイタリアンライグラスに人為的に感染
させ、害虫に対する抵抗性を付与したイタリアンライグ
ラスを作出することを特徴とする、害虫に対する抵抗性
を付与したイタリアンライグラスの作出方法。
【０００７】
【発明の実施の形態】次に、本発明について更に詳細に
説明する。本発明では、イネ科植物のメドウフェスク
（Ｆｅｓｔｕｃａ ｐｒａｔｅｎｓｉｓ Ｈｕｄ．）の
植物体内に共生するエンドファイト菌であって、アルカ
ロイドのロリンを産生し、エルゴバリンとロリトレムＢ
は産生しない有用エンドファイト菌が用いられる。本発
明は、上記特定のアルカロイドを選択的に産生するエン
ドファイト菌を用いることが重要である。この有用エン
ドファイト菌は、メドウフェスクの植物体に共生するエ
ンドファイト菌から上記アルカロイドのうち、ロリンを
産生するが、エルゴバリンとロリトレムＢを産生しない
菌体を選抜することで得られる。上記メドウフェスクと
しては、上記エンドファイト菌が共生するものであれば
適宜の植物体が用いられ、その品種等は特に限定される
ものではない。上記有用エンドファイト菌は、例えば、
メドウフェスクについて、アルカロイド分析を行い、そ
の結果に基づき、目的のエンドファイト菌をスクリーニ
ングすることで選抜することができる。スクリーニング
方法は、第１段階として、植物組織に共生するエンドフ
ァイト菌を染色し、生物顕微鏡でエンドファイトが感染
する植物体を選別する方法、エンドファイト菌が共生す
る植物体の一部位からエンドファイト菌を分離すること
による感染植物体の選別方法、抗原抗体反応を利用した
選別方法がある。第２段階として、エンドファイトに感
染した植物体について、各種のアルカロイド含有率を化
学分析により求める。ロリンはガスクロマトグラフによ
り、エルゴバリンとロリトレムＢは高速液体クロマトグ
ラフにより測定する。
説明する。本発明では、イネ科植物のメドウフェスク
（Ｆｅｓｔｕｃａ ｐｒａｔｅｎｓｉｓ Ｈｕｄ．）の
植物体内に共生するエンドファイト菌であって、アルカ
ロイドのロリンを産生し、エルゴバリンとロリトレムＢ
は産生しない有用エンドファイト菌が用いられる。本発
明は、上記特定のアルカロイドを選択的に産生するエン
ドファイト菌を用いることが重要である。この有用エン
ドファイト菌は、メドウフェスクの植物体に共生するエ
ンドファイト菌から上記アルカロイドのうち、ロリンを
産生するが、エルゴバリンとロリトレムＢを産生しない
菌体を選抜することで得られる。上記メドウフェスクと
しては、上記エンドファイト菌が共生するものであれば
適宜の植物体が用いられ、その品種等は特に限定される
ものではない。上記有用エンドファイト菌は、例えば、
メドウフェスクについて、アルカロイド分析を行い、そ
の結果に基づき、目的のエンドファイト菌をスクリーニ
ングすることで選抜することができる。スクリーニング
方法は、第１段階として、植物組織に共生するエンドフ
ァイト菌を染色し、生物顕微鏡でエンドファイトが感染
する植物体を選別する方法、エンドファイト菌が共生す
る植物体の一部位からエンドファイト菌を分離すること
による感染植物体の選別方法、抗原抗体反応を利用した
選別方法がある。第２段階として、エンドファイトに感
染した植物体について、各種のアルカロイド含有率を化
学分析により求める。ロリンはガスクロマトグラフによ
り、エルゴバリンとロリトレムＢは高速液体クロマトグ
ラフにより測定する。
【０００８】次に、上記有用エンドファイト菌は、イタ
リアンライグラス（Ｌｏｌｉｕｍｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕ
ｍ Ｌａｍ．）の植物体に接種されるが、この被接種植
物としては、飼料作物用イタリアンライグラスであれば
適宜のものが用いられ、その育成系統は特に制限される
ものではない。本発明において、上記有用エンドファイ
ト菌は、例えば、被接種植物の無菌幼苗の分裂組織付近
に、穴をあけて挿入して接種する方法、又は被接種植物
体から誘導されたカルスに傷をつけて挿入する方法等が
例示されるが、それらに限らず、エンドファイト菌を接
種できる方法であれば適宜の接種方法が用いられる。上
記有用エンドファイト菌を接種した幼苗は、例えば、素
寒天培地、又は塩濃度が半分の１／２ＭＳ培地上で２週
間から２ヶ月の育苗と順化の後、移植して栽培すること
により目的のエンドファイト菌が感染したイタリアンラ
イグラス植物体を得ることができる。この有用エンドフ
ァイト菌が感染したイタリアンライグラスは、当該有用
エンドファイト菌の効果により、害虫抵抗性が向上する
ことが予測され、特に、アブラムシに対しては抵抗性が
確認されており、かつ、エンドファイト非感染植物に比
較して生育が旺盛であったため、飼料作物の重要育種目
標である飼料生産性も向上することが予測される。ま
た、上記有用エンドファイト菌を感染させる方法で、特
に、接種個体の草勢、草丈及び越冬性を向上させること
ができ、更に、有用エンドファイト菌を種子伝播によ
り、次世代へ移行させることができる。以上のことか
ら、本発明は、畜産農家に対して貢献するところは大き
い。
リアンライグラス（Ｌｏｌｉｕｍｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕ
ｍ Ｌａｍ．）の植物体に接種されるが、この被接種植
物としては、飼料作物用イタリアンライグラスであれば
適宜のものが用いられ、その育成系統は特に制限される
ものではない。本発明において、上記有用エンドファイ
ト菌は、例えば、被接種植物の無菌幼苗の分裂組織付近
に、穴をあけて挿入して接種する方法、又は被接種植物
体から誘導されたカルスに傷をつけて挿入する方法等が
例示されるが、それらに限らず、エンドファイト菌を接
種できる方法であれば適宜の接種方法が用いられる。上
記有用エンドファイト菌を接種した幼苗は、例えば、素
寒天培地、又は塩濃度が半分の１／２ＭＳ培地上で２週
間から２ヶ月の育苗と順化の後、移植して栽培すること
により目的のエンドファイト菌が感染したイタリアンラ
イグラス植物体を得ることができる。この有用エンドフ
ァイト菌が感染したイタリアンライグラスは、当該有用
エンドファイト菌の効果により、害虫抵抗性が向上する
ことが予測され、特に、アブラムシに対しては抵抗性が
確認されており、かつ、エンドファイト非感染植物に比
較して生育が旺盛であったため、飼料作物の重要育種目
標である飼料生産性も向上することが予測される。ま
た、上記有用エンドファイト菌を感染させる方法で、特
に、接種個体の草勢、草丈及び越冬性を向上させること
ができ、更に、有用エンドファイト菌を種子伝播によ
り、次世代へ移行させることができる。以上のことか
ら、本発明は、畜産農家に対して貢献するところは大き
い。
【０００９】本発明により、メドウフェスクの植物体か
ら分離した有用エンドファイト菌の菌株Ｅｔｏ８は、２
００１年１月１９日に経済産業省産業技術総合研究所生
命工学工業技術研究所に寄託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１８１
７２として寄託されている。この菌株Ｅｔｏ８は、イネ
科植物のメドウフェスク（Ｆｅｓｔｕｃａ ｐｒａｔｅ
ｎｓｉｓ Ｈｕｄ．）から分離され、分生子はかぎ型
で、長さが５．０〜７．０μｍ、幅が約１．０μｍであ
り、１２０℃、１５分のオートクレーブで殺菌したＰＤ
Ａ培地（ジャガイモエキス、ブドウ糖、寒天、水、ｐＨ
５．６±０．２）上で４０日間（約２３℃、暗黒条件）
培養した場合、菌叢の直径は約２ｃｍとなり、好気性、
２３℃の条件で培養し、保存することができる。
ら分離した有用エンドファイト菌の菌株Ｅｔｏ８は、２
００１年１月１９日に経済産業省産業技術総合研究所生
命工学工業技術研究所に寄託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１８１
７２として寄託されている。この菌株Ｅｔｏ８は、イネ
科植物のメドウフェスク（Ｆｅｓｔｕｃａ ｐｒａｔｅ
ｎｓｉｓ Ｈｕｄ．）から分離され、分生子はかぎ型
で、長さが５．０〜７．０μｍ、幅が約１．０μｍであ
り、１２０℃、１５分のオートクレーブで殺菌したＰＤ
Ａ培地（ジャガイモエキス、ブドウ糖、寒天、水、ｐＨ
５．６±０．２）上で４０日間（約２３℃、暗黒条件）
培養した場合、菌叢の直径は約２ｃｍとなり、好気性、
２３℃の条件で培養し、保存することができる。
【００１０】
【実施例】次に、実施例に基づいて本発明を具体的に説
明するが、本発明は、以下の実施例により何ら限定され
るものではない。 実施例１ （１）有用エンドファイト菌のイタリアンライグラスへ
の人工接種 １）接種した有用エンドファイト菌 有用エンドファイト菌として、イネ科植物のメドウフェ
スク（Ｆｅｓｔｕｃａｐｒａｔｅｎｓｉｓ Ｈｕｄ．）
の１個体から分離した菌株Ｅｔｏ８を用いた。このＥｔ
ｏ８は、電子顕微鏡による胞子の形態の観察、及び、培
地上での培養特性から、真菌類中の子のう菌の無性世
代、Ｎｅｏｔｙｐｈｏｄｉｕｍ ｕｎｃｉｎａｔｕｍと
同定された。Ｅｔｏ８が感染していた個体について、ア
ルカロイド分析を行った結果、エルゴバリンとロリトレ
ムＢは検出されず、ロリンが検出された。
明するが、本発明は、以下の実施例により何ら限定され
るものではない。 実施例１ （１）有用エンドファイト菌のイタリアンライグラスへ
の人工接種 １）接種した有用エンドファイト菌 有用エンドファイト菌として、イネ科植物のメドウフェ
スク（Ｆｅｓｔｕｃａｐｒａｔｅｎｓｉｓ Ｈｕｄ．）
の１個体から分離した菌株Ｅｔｏ８を用いた。このＥｔ
ｏ８は、電子顕微鏡による胞子の形態の観察、及び、培
地上での培養特性から、真菌類中の子のう菌の無性世
代、Ｎｅｏｔｙｐｈｏｄｉｕｍ ｕｎｃｉｎａｔｕｍと
同定された。Ｅｔｏ８が感染していた個体について、ア
ルカロイド分析を行った結果、エルゴバリンとロリトレ
ムＢは検出されず、ロリンが検出された。
【００１１】２）被接種植物 被接種植物として、イタリアンライグラス系統ＪＮＩＲ
−１を用いた。このＪＮＩＲ−１は、飼料作物用イタリ
アンライグラス品種を母材にした育成系統であり社団法
人日本草地畜産種子協会から入手可能である。
−１を用いた。このＪＮＩＲ−１は、飼料作物用イタリ
アンライグラス品種を母材にした育成系統であり社団法
人日本草地畜産種子協会から入手可能である。
【００１２】３）接種方法 接種に供試したエンドファイト菌株は、ＰＤＡ培地上で
増殖させたＥｔｏ８である。被接種植物は、素寒天培地
上、及び、１／２ＭＳ培地上で発芽させた育成系統ＪＮ
ＩＲ−１の無菌幼苗の合計２５４個体である。接種方法
は、幼苗の分裂組織付近にメスで穴をあけ、その穴にＥ
ｔｏ８の菌を挿入した。接種した幼苗は各培地上で２週
間から２ヶ月間の間、育苗を行い、順化後、土の詰めら
れた鉢に移植した。エンドファイト菌の感染の有無を、
被接種植物の葉鞘組織についてＳａｈａら（１９９８）
の方法により確認した結果、１４個体で感染が認められ
た。表１に、有用エンドファイト菌株Ｅｔｏ８のイタリ
アンライグラス育成系統ＪＮＩＲ−１への接種成功率を
示す。
増殖させたＥｔｏ８である。被接種植物は、素寒天培地
上、及び、１／２ＭＳ培地上で発芽させた育成系統ＪＮ
ＩＲ−１の無菌幼苗の合計２５４個体である。接種方法
は、幼苗の分裂組織付近にメスで穴をあけ、その穴にＥ
ｔｏ８の菌を挿入した。接種した幼苗は各培地上で２週
間から２ヶ月間の間、育苗を行い、順化後、土の詰めら
れた鉢に移植した。エンドファイト菌の感染の有無を、
被接種植物の葉鞘組織についてＳａｈａら（１９９８）
の方法により確認した結果、１４個体で感染が認められ
た。表１に、有用エンドファイト菌株Ｅｔｏ８のイタリ
アンライグラス育成系統ＪＮＩＲ−１への接種成功率を
示す。
【００１３】
【表１】
【００１４】これら１４個体を含む菌糸検出個体２６個
体について、植物体内でのＥｔｏ８の共生状況を調査し
た結果、２３個体は接種８ヶ月後の４月中旬の節間伸長
開始直後でも共生していることが確認された。表２に、
幼苗時に菌糸が検出された個体における節間伸長開始直
後の成植物体内での有用エンドファイト菌Ｅｔｏ８の検
出率を示す。
体について、植物体内でのＥｔｏ８の共生状況を調査し
た結果、２３個体は接種８ヶ月後の４月中旬の節間伸長
開始直後でも共生していることが確認された。表２に、
幼苗時に菌糸が検出された個体における節間伸長開始直
後の成植物体内での有用エンドファイト菌Ｅｔｏ８の検
出率を示す。
【００１５】
【表２】
【００１６】（２）菌糸検出個体のアブラムシ類の一種
（Ｓｃｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉ（Ｍｏｒ
ｄｖｉｌｋｏ））に対する抵抗性 次に、菌糸検出個体について、そのＳｃｈｉｚａｐｈｉ
ｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉに対する抵抗性を調べた。Ｓｃ
ｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉ ５個体と共に
菌糸検出個体と菌糸非検出個体の葉身を湿ったろ紙を敷
いたガラスシャーレ内に入れ、６、２４、３０及び４８
時間後の葉身上の個体数を調査した。この結果、菌糸非
検出個体に比較して菌糸検出個体の葉身上における２
４、３０及び４８時間後のＳｃｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａ
ｒｏｓｌａｖｉの個体数は１％水準で有意に少なかっ
た。表３に、菌糸検出個体及び菌糸非検出個体の葉身で
Ｓｃｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉ １５個体
を飼育した場合、６、２４、３０及び４８時間後の葉身
上におけるＳｃｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉ
の個体数を示す。この試験から、有用エンドファイト菌
株Ｅｔｏ８が共生したイタリアンライグラス系統ＪＮＩ
Ｒ−１は、Ｓｃｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉ
に対する抵抗性が付与されたことが明らかになった。
（Ｓｃｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉ（Ｍｏｒ
ｄｖｉｌｋｏ））に対する抵抗性 次に、菌糸検出個体について、そのＳｃｈｉｚａｐｈｉ
ｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉに対する抵抗性を調べた。Ｓｃ
ｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉ ５個体と共に
菌糸検出個体と菌糸非検出個体の葉身を湿ったろ紙を敷
いたガラスシャーレ内に入れ、６、２４、３０及び４８
時間後の葉身上の個体数を調査した。この結果、菌糸非
検出個体に比較して菌糸検出個体の葉身上における２
４、３０及び４８時間後のＳｃｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａ
ｒｏｓｌａｖｉの個体数は１％水準で有意に少なかっ
た。表３に、菌糸検出個体及び菌糸非検出個体の葉身で
Ｓｃｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉ １５個体
を飼育した場合、６、２４、３０及び４８時間後の葉身
上におけるＳｃｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉ
の個体数を示す。この試験から、有用エンドファイト菌
株Ｅｔｏ８が共生したイタリアンライグラス系統ＪＮＩ
Ｒ−１は、Ｓｃｈｉｚａｐｈｉｓ ｊａｒｏｓｌａｖｉ
に対する抵抗性が付与されたことが明らかになった。
【００１７】
【表３】
【００１８】（３）菌糸検出個体の農業特性 次に、菌糸検出個体の農業特性を調べるために、菌糸検
出２１個体と菌糸非検出２１個体を圃場で栽培し、草
勢、草丈及び越冬性を調査した。表４に、菌糸検出２１
個体と菌糸非検出２１個体における草勢、越冬性及び草
丈の比較を示す。この結果、菌糸非検出個体に比較して
菌糸検出個体の草勢、草丈及び越冬性は有意に優れる場
合が多く、有意差が認められなかった草丈の場合でも、
その平均値は、菌糸検出個体が菌糸非検出個体よりも高
かった。
出２１個体と菌糸非検出２１個体を圃場で栽培し、草
勢、草丈及び越冬性を調査した。表４に、菌糸検出２１
個体と菌糸非検出２１個体における草勢、越冬性及び草
丈の比較を示す。この結果、菌糸非検出個体に比較して
菌糸検出個体の草勢、草丈及び越冬性は有意に優れる場
合が多く、有意差が認められなかった草丈の場合でも、
その平均値は、菌糸検出個体が菌糸非検出個体よりも高
かった。
【００１９】
【表４】
【００２０】（４）有用エンドファイト菌の次世代への
移行 次に、有用エンドファイト菌の種子伝播、つまり、次世
代への移行を調査するために、菌糸検出２３個体から、
個体毎に採種を行った。採種種子各１９から２０粒と採
種種子からの幼苗各４から２０個体をＳａｈａら（１９
９８）の方法に従って調査した結果、採種種子中のＥｔ
ｏ８の検出率は１０〜９０％であり、幼苗のＥｔｏ８の
検出率は１１〜１００％であった。表５に、菌糸検出個
体の採種種子各１９から２０粒と採種種子からの幼苗各
４から２０個体におけるＥｔｏ８の検出率を示す。この
試験から、接種したＥｔｏ８は次世代へ移行したことが
明らかになった。
移行 次に、有用エンドファイト菌の種子伝播、つまり、次世
代への移行を調査するために、菌糸検出２３個体から、
個体毎に採種を行った。採種種子各１９から２０粒と採
種種子からの幼苗各４から２０個体をＳａｈａら（１９
９８）の方法に従って調査した結果、採種種子中のＥｔ
ｏ８の検出率は１０〜９０％であり、幼苗のＥｔｏ８の
検出率は１１〜１００％であった。表５に、菌糸検出個
体の採種種子各１９から２０粒と採種種子からの幼苗各
４から２０個体におけるＥｔｏ８の検出率を示す。この
試験から、接種したＥｔｏ８は次世代へ移行したことが
明らかになった。
【００２１】
【表５】
【００２２】
【発明の効果】以上詳述した通り、本発明は、メドウフ
ェスクの植物体内に共生するエンドファイト菌から、ア
ルカロイドのロリンを産生し、エルゴバリンとロリトレ
ムＢは産生しない有用エンドファイト菌を選抜し、これ
をイタリアンライグラスに人為的に感染させ、害虫に対
する抵抗性を付与したことを特徴とするイタリアンライ
グラスに係るものであり、本発明により、１）有用エン
ドファイト菌を積極的に利用した飼料作物用イタリアン
ライグラスの育種を行うことができる、２）有用エンド
ファイト菌を感染させた害虫抵抗性の飼料作物用イタリ
アンライグラスを提供することができる、３）アルカロ
イドのロリンを産生し、エルゴバリン、ロリトレムＢを
産生しない新規な有用エンドファイト菌の菌株Ｅｔｏ８
を提供することができる、４）上記有用エンドファイト
菌を感染させ、害虫抵抗性を付与した飼料作物用イタリ
アンライグラスの作出方法を提供することができる、
５）アブラムシ抵抗性が付与されたイタリアンライグラ
スを提供することができる、６）上記有用エンドファイ
ト菌を感染させることで、接種個体の草勢、草丈及び越
冬性を向上させることができる、７）有用エンドファイ
ト菌を種子伝播により、次世代へ移行させることができ
る、という格別の効果が奏される。
ェスクの植物体内に共生するエンドファイト菌から、ア
ルカロイドのロリンを産生し、エルゴバリンとロリトレ
ムＢは産生しない有用エンドファイト菌を選抜し、これ
をイタリアンライグラスに人為的に感染させ、害虫に対
する抵抗性を付与したことを特徴とするイタリアンライ
グラスに係るものであり、本発明により、１）有用エン
ドファイト菌を積極的に利用した飼料作物用イタリアン
ライグラスの育種を行うことができる、２）有用エンド
ファイト菌を感染させた害虫抵抗性の飼料作物用イタリ
アンライグラスを提供することができる、３）アルカロ
イドのロリンを産生し、エルゴバリン、ロリトレムＢを
産生しない新規な有用エンドファイト菌の菌株Ｅｔｏ８
を提供することができる、４）上記有用エンドファイト
菌を感染させ、害虫抵抗性を付与した飼料作物用イタリ
アンライグラスの作出方法を提供することができる、
５）アブラムシ抵抗性が付与されたイタリアンライグラ
スを提供することができる、６）上記有用エンドファイ
ト菌を感染させることで、接種個体の草勢、草丈及び越
冬性を向上させることができる、７）有用エンドファイ
ト菌を種子伝播により、次世代へ移行させることができ
る、という格別の効果が奏される。
フロントページの続き (72)発明者 岡崎 博 栃木県那須郡西那須野町東赤田388番地５ 社団法人日本草地畜産種子協会 飼料作 物研究所内 Ｆターム(参考） 4B065 AA58X AA88X AC14 AC20 BA30 CA18 CA53 CA60
Claims (3)
- 【請求項１】 メドウフェスクの植物体内に共生するエ
ンドファイト菌から、アルカロイドのロリンを産生し、
エルゴバリンとロリトレムＢは産生しない有用エンドフ
ァイト菌を選抜し、これをイタリアンライグラスに人為
的に感染させ、害虫に対する抵抗性を付与したことを特
徴とするイタリアンライグラス。 - 【請求項２】 有用エンドファイト菌が、メドウフェス
ク品種から分離した糸状菌Ｎｅｏｔｙｐｈｏｄｉｕｍに
属する菌株Ｅｔｏ８（ＦＥＲＭ Ｐ−１８１７２）であ
る、請求項１に記載のイタリアンライグラス。 - 【請求項３】 メドウフェスクの植物体内に共生するエ
ンドファイト菌から、アルカロイドのロリンを産生し、
エルゴバリンとロリトレムＢは産生しない有用エンドフ
ァイト菌を選抜し、これをイタリアンライグラスに人為
的に感染させ、害虫に対する抵抗性を付与したイタリア
ンライグラスを作出することを特徴とする、害虫に対す
る抵抗性を付与したイタリアンライグラスの作出方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001012513A JP2002209441A (ja) | 2001-01-19 | 2001-01-19 | 有用エンドファイト菌が感染したイタリアンライグラス |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001012513A JP2002209441A (ja) | 2001-01-19 | 2001-01-19 | 有用エンドファイト菌が感染したイタリアンライグラス |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002209441A true JP2002209441A (ja) | 2002-07-30 |
Family
ID=18879509
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2001012513A Pending JP2002209441A (ja) | 2001-01-19 | 2001-01-19 | 有用エンドファイト菌が感染したイタリアンライグラス |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2002209441A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004029227A1 (en) * | 2002-09-27 | 2004-04-08 | Grasslanz Technology Limited | Grass endophytes |
| JP2015517812A (ja) * | 2012-06-01 | 2015-06-25 | アグリカルチャー ビクトリア サービシーズ プロプライエタリー リミテッド | 共生体を含む人工種子の大規模生成のための方法 |
| JP2019151609A (ja) * | 2018-03-06 | 2019-09-12 | アヲハタ株式会社 | 植物の成長促進用組成物およびその利用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH10271930A (ja) * | 1997-03-28 | 1998-10-13 | Nippon Shiryo Sakumotsu Shiyushi Kyokai | フェスクおよびフェスクへの共生菌の導入方法 |
| US6111170A (en) * | 1997-05-27 | 2000-08-29 | New Zealand Pastoral Agriculture Research Institute Limited | Tall fescue endophytes |
-
2001
- 2001-01-19 JP JP2001012513A patent/JP2002209441A/ja active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH10271930A (ja) * | 1997-03-28 | 1998-10-13 | Nippon Shiryo Sakumotsu Shiyushi Kyokai | フェスクおよびフェスクへの共生菌の導入方法 |
| US6111170A (en) * | 1997-05-27 | 2000-08-29 | New Zealand Pastoral Agriculture Research Institute Limited | Tall fescue endophytes |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| JPN6011003300, 佐々木 亨ら他２名, "‘フェスク類及びライグラス類の牧草用国内流通品種におけるエンドファイト感染の調査’", Ｊａｐａｎｅｓｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｇｒａｓｓｌａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ, 2000, ４６（別）, ｐ．１６０−１６１, 日本草地学会 * |
| JPN6011003304, 大木 健広ら他２名, "‘植物と相利共生するエンドファイト’", 植物の化学調節, 1999, Ｖｏｌ．３４， Ｎｏ．１, ｐ．５５−６５ * |
| JPN6011003305, Ｒ．Ａ．ＰＲＥＳＴＩＤＧＥ, "‘Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｉｔａｌｉａｎ ｒｙｅｇｒａｓｓｅｓ（Ｌｏｌｉｕｍ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ Ｌａｍ．） ｔｏ Ａｒｇｅｎｔｉｎｅ ｓｔｅｍ ｗｅｅｖｉｌ（Ｌｉｓｔｒｏｎｏｔｕｓ", Ｎｅｗ Ｚｅａｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ, 1991, Ｖｏｌ．３４， Ｎｏ．１, ｐ．１１９−１２５ * |
| JPN6011003306, Ｈｉｒｏｎｏｒｉ Ｋｏｇａ ｅｔ ａｌ．, "‘Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ Ｆｕｎｇｕｓ， Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ ｕｎｃｉｎａｔｕｍ， ｉｎ Ｍｅａｄｏｗ Ｆｅｓｃｕｅ（Ｆｅｓｔｕｃａ ｐｒａｔｅｎｓｉｓ） Ｅｃｏｔ", 草地試験場研究報告, 1994, Ｎｏ．４９, ｐ．３５−４０ * |
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|---|---|---|---|---|
| WO2004029227A1 (en) * | 2002-09-27 | 2004-04-08 | Grasslanz Technology Limited | Grass endophytes |
| US7585660B2 (en) | 2002-09-27 | 2009-09-08 | Grasslanz Technology Limited | Grass endophytes |
| JP2015517812A (ja) * | 2012-06-01 | 2015-06-25 | アグリカルチャー ビクトリア サービシーズ プロプライエタリー リミテッド | 共生体を含む人工種子の大規模生成のための方法 |
| US10051777B2 (en) | 2012-06-01 | 2018-08-21 | Agriculture Victoria Services Pty Ltd | Method for large scale generation of artificial seeds comprising symbiota |
| JP2019151609A (ja) * | 2018-03-06 | 2019-09-12 | アヲハタ株式会社 | 植物の成長促進用組成物およびその利用 |
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