JP2001521011A - 治療成分送達のための磁気共鳴イメージング剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、条件付方法で生理学事象を検出し、治療的活性成分の送達および/または活性化を同時検出する、新規な磁気共鳴イメージングコントラスト剤に関する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 本発明は、１９９７年１０月２７日に出願の米国特許出願第６０／０６３,３ ２８号の継続出願である。

【０００２】 (発明の分野) 本発明は、新規磁気共鳴イメージングコントラスト剤、および治療的活性物質
を送達する方法に関する。

【０００３】 (発明の背景) 磁気共鳴映像法(ＭＲＩ)は、イメージを作るために高磁場および無線周波数信
号を使用する診断および研究法である。生物組織中で最も豊富な分子種は水であ
る。全てのイメージング実験においてシグナルを最終的に発生させる水プロトン
核の量子機械的“スピン”がある。ＭＲＩにおいて、イメージするサンプルを強
い静止磁場(１−１２テスラ)におき、スピンを無線周波数(ＲＦ)のパルスの放射
により励起させ、サンプルで正味の磁化を作る。次いで、種々の磁場勾配および
他のＲＦパルスがスピンに作用し、空間的情報を記録シグナルに暗号化する。Ｍ
ＲＩは、相対的に短い時間で３次元の構造情報を作ることができる。

【０００４】 (イメージ) ＭＲイメージは、典型的に黒が最低で白が最高の測定強度(Ｉ)であるグレース
ケールで示される。これは、強度Ｉ＝Ｃ^*Ｍ(式中、Ｃはスピンの濃度(この場合 、水濃度)およびＭは測定時間中に存在する磁化の目盛り)を測定する。水濃度( Ｃ)の変化によりＭＲイメージに差異を発生させ得るが、ＭＲＩのイメージ強度 変化の源である局所環境中のＭの変化の速度に強い依存性がある。二つの特徴的
緩和時間であるＴ₁およびＴ₂が、磁化が正確に測定できる速度を支配する。Ｔ₁ はＲＦパルスにより混乱させた後、減衰して平衡に戻るスピンの指数時間定数で
ある。シグナル対ノイズ比(ＳＮＲ)を増加させるために、典型的ＭＲイメージン
グスキャン(ＲＦおよび勾配パルス系列およびデータ獲得)を、予定した多くの時
間およびデータ平均に関して一定速度で繰り返す。任意のスキャンで記録された
シグナル増幅は、先のスキャンから平衡に減衰して戻るまでのスピンの数に比例
する。従って、急速に減衰するスピン(即ち、短Ｔ₁値)の領域は、連続的スキャ ンの間でそのシグナル増幅の全てを回収する。

【０００５】 最終イメージの測定強度は、スピン密度(即ち、水濃度)を正確に反映する。ス
キャンの間と比べて長いＴ₁値の領域は、固定状態条件に到達するまで漸増的に シグナルを損失させ、最終イメージで暗い領域として見える。Ｔ₂(スピン−スピ
ン緩和時間)の変化は、シグナルライン幅(短いＴ₂値)に変化をもたらし、より大
きいライン幅を産生する。極端な条件下で、ライン幅が、シグナルがバックグラ
ウンドノイズから区別がつかないほど大きくなり得る。臨床イメージングにおい
て、水緩和特性は組織毎に異なり、組織タイプの識別を可能にする定数を提供す
る。更に、ＭＲＩ実験は、短いＴ₁値および／または長いＴ₂値のサンプルの領域
が、いわゆるＴ₁−加重およびＴ₂−加重イメージングプロトコールを優先的に増
強するように構成できる。

【０００６】 ＭＲＩコントラスト剤 常磁性コントラスト剤の臨床的有効性を証明する文献の内容が急速に成長して
いる(現在、８種が臨床試験または使用されている)。磁気的には類似であるが、
組織学的に異なり得る領域／組織を区別する能力は、これらの薬剤を調製する主
な刺激である[１、２]。ＭＲＴ剤の設計において、コントラスト増強を提供する
能力とは別に、生理学的結果に最終的に作用する種々の特性を付与する徹底的な
試みをすべきである[３]。考慮しなければならない二つの基本的な特性は、生体
適合性およびプロトン緩和増強である。生体適合性は毒性、安定性(熱力学およ び動力学)、薬物動力学および体内分布を含む数個の因子により影響される。プ ロトン緩和増強(またはリラキシビティー)は、金属および回転相関時間の選択に
より主として支配される。

【０００７】 設計段階中に考慮すべき最初の性質は、複合体の測定リラキシビティーを支配
する金属原子の選択である。常磁性金属イオンは、その不対電子の結果、強力な
緩和増強剤として作用する。それらは近くの(ｒ⁶依存)スピンのＴ₁およびＴ₂緩 和時間を減少させる。ある常磁性イオンは、実質的にライン幅に作用することな
くＴ₁を減少し(例えば、ガドリニウム(III)、(Ｇｄ³⁺))、一方他のものは劇的な
ライン拡大を誘導する(例えば、超常磁性酸化鉄)。Ｔ₁緩和の機構は、一般に、 金属内部配位圏での速い水分子との変換である、常磁性体(不対電子を有する金 属)の不対電子と大量の水分子(金属原子に“結合”しない水分子)の間の空間双 極子−双極子相互作用を介している。

【０００８】 例えば、実験の連続的スキャンの時間が短い場合、Ｇｄ³⁺イオン(水の近く)に
関連する領域は、ＭＲイメージで明るく見え、一方通常の水性溶液は、暗いバッ
クグラウンドとして見える(即ち、Ｔ₁加重イメージ)。超常磁性粒子によりもた らされる局所Ｔ₂短縮は、これらの粒子の大磁気モーメントに関連する局所磁場 不均質性によるものであると考えられる。超常磁性酸化鉄粒子に関連する領域は
ＭＲイメージで暗く見え、通常水性溶液は、スピン−エコーパルス系列における
エコー時間(ＴＥ)が長い場合、高強度バックグラウンドとして見える(即ち、Ｔ₂ 加重イメージ)。ランタニド原子Ｇｄ³⁺は、非常に高い磁気モーメントを有し(ｕ ² ＝６３ＢＭ²)、対称的電子的基底状態(Ｓ⁸)のため、現在までＭＲＩコントラス
ト剤のために最も頻繁に選択される金属原子である。高スピンＭｎ(II)およびＦ
ｅ(III)のような遷移金属も、その高い磁気モーメントのため、候補物である。

【０００９】 適当な金属が選択されたら、適切なリガンドまたはキレートを、複合体を比毒
性にするために選択しなければならない。キレート化剤なる用語は、金属原子上
につかみ、保つために、その多くの“アーム”を使用する物質のための適当な記
載である、“カニのハサミ”を意味するギリシャ語のcheleに由来する(下記ＤＴ
ＰＡ参照)。キレート複合体の安定性に作用する数個の因子は、エンタルピーお よびエントロピー効果(例えば、配位基の数、電荷および塩基度、リガンド場お よび配座的効果)を含む。リガンドの種々の分子設計特性が、生理学的結果と直 接関連し得る。例えば、一定リガンド構造上の一つのメチル基の存在が、クリア
ランス速度に明白な作用を有する。一方、臭素基の付加は、複合体を、純粋な細
胞外の役割から、肝細胞に集まる有効剤とすることができる。

【００１０】 ジエチレントリアミンペンタアセティック(ＤＴＰＡ)はキレート化し、従って
解毒したランタニドイオンとして作用する。Ｇｄ(ＤＴＰＡ)^2-の安定定数(Ｋ)は
非常に高く(logＫ＝２２.４)、これは生成定数としてより一般的に知られている
(logＫが高いほど、複合体は安定である)。この熱力学パラメーターは、非結合 状態では事実上小さく、金属の損失が起こる速度(動的安定性)で混乱されるべき
でないＧｄ³⁺イオンのフラクションを示す(ｋ_ρ／ｋ_d)。水溶性Ｇｄ(ＤＴＰＡ)^{2 -} キレートは、安定であり、非毒性であり、実験および臨床イメージング研究に おいて最も広く使用されているコントラスト増強剤の一つである。１９８８年６
月に、成人患者への使用が認可された。還流支配法で組織に蓄積される細胞外剤
である。

【００１１】 今日まで、ジエチレントリアミンペンタアセティック(ＤＴＰＡ)、１,４,７, １０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ,Ｎ',Ｎ",Ｎ'"−四酢酸(ＤＯＴＡ)および その誘導体を含む多くのキレート化剤が使用されている。米国特許第５,１５５,
２１５号、第５,０８７,４４０号、第５,２１９,５５３号、第５,１８８,８１６
号、第４,８８５,３６３号、第５,３５８,７０４号、第５,２６２,５３２号およ
びMeyer et al., Invest. Radiol. 25:S53 (1990)参照。

【００１２】 Ｇｄ(ＤＴＰＡ)を使用したイメージ増強改善は、多くの出願(Runge et al., M
agn, Reson. Imag. 3:85 (1991); Russell et al., AJR 152:813 (1983); Mayer
et al., Invest. Radiol. 25:S53 (1990))に記載されており、占居性病変によ る血液脳関門崩壊の可視化および異常血管質の検出を含む。近年、局所的脳血行
力学の定義により、ヒト視覚皮質の機能的地図作成が試みられている(Belliveau
et al. (1991) 254:719)。

【００１３】 Ｇｄコントラスト剤で使用される他のキレート化剤は、大環状リガンド１,４,
７,１０−テトラアザシクロデカン−Ｎ,Ｎ',Ｎ"Ｎ'"−四酢酸(ＤＯＴＡ)である 。Ｇｄ−ＤＯＴＡ複合体は、動物およびヒトが関与する実験室試験で徹底的に試
験されている。本複合体は、配座が硬く、非常に高い生成定数(logＫ＝２８.５)
を有し、生理学的ｐＨで非常に遅い解離定数を有する。近年、ＧｄＤＯＴＡ複合
体は、フランスで成人および幼児への使用のためのＭＲＩコントラスト剤として
認可され、４５００名を超える患者に投与されている。

【００１４】 先の研究は、生物学的または他のタイプのサンプル内の生理学的または代謝的
処理が報告されたＭＲＩコントラスト剤をもたらしている。米国特許第５,７０ ７,６０５号、ＰＣＴＵＳ９６／０８５４９および米国特許出願第０９／１３４,
０７２号に記載されるように、ＭＲＩコントラスト剤は、薬剤に存在する遮断部
分と標的物質の相互作用の結果、コントラストの増加を可能にするように組み立
てられている。即ち、標的物質の存在下、コントラスト剤の内配位圏部位の１個
またはそれ以上の水の交換が増加し、明るいシグナルを導く；標的物質非存在下
では、水の交換は妨げられ、イメージは暗いままである。従って、先の研究は、
構造のみよりむしろ生理学的事象のイメージングを可能にする。

【００１５】 しかし、治療成分を送達させ、送達をそのＭＲＩを介して追跡することが可能
となれば更なる改善となろう。従って、動物、組織または細胞内での治療成分の
送達の可視化および検出を可能にするＭＲＩコントラストまたは増強剤の提供が
本発明の目的である。

【００１６】 (発明の要約) 上記目的に従って、本発明は、キレート化剤および、キレート化剤と治療的遮
断部分により同等に飽和された常磁性金属イオンを含み、該治療的遮断部分が、
少なくとも一つの配位部位における水の急速交換が妨害されるように該キレート
化剤に共有結合的に結合しており、該治療的遮断部分が少なくとも一つの治療的
活性成分を含み、少なくとも一つの配位部位における水の交換が、治療成分のそ
の治療作用をもたらす生理学的標的部位への送達により増加する、ＭＲＩ剤を提
供する。

【００１７】 更なる態様において、本発明は、式：

【化３】 〔式中、 ＭはＧｄ(III)、Ｆｅ(III)、Ｍｎ(II)、Ｙｔ(III)、Ｃｒ(III)およびＤｙ(III) からなる群から選択される常磁性金属イオン； Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは１重結合または２重結合； Ｘ₁、Ｘ₂、Ｘ₃およびＸ₄は−ＯＨ、−ＣＯＯ−、−ＣＨ₂ＯＨ−ＣＨ₂ＣＯＯ−、
置換基、治療的遮断部分または標的部分； Ｒ₁−Ｒ₁₂は水素、置換基、治療的遮断部分または標的部分； Ｘ₁−Ｘ₄およびＲ₁−Ｒ₁₂の少なくとも一つは治療的遮断部分である〕 を有するＭＲＩ剤を提供する。

【００１８】 更なる態様において、ＭＲＩ剤は、式：

【化４】 〔式中、 ＭはＧｄ(III)、Ｆｅ(III)、Ｍｎ(II)、Ｙｔ(III)、Ｃｒ(III)およびＤｙ(III) からなる群から選択される常磁性金属イオン； Ｈ、Ｉ、Ｊ、ＫおよびＬは−ＯＨ、−ＣＯＯ−、−ＣＨ₂ＯＨ−ＣＨ₂ＣＯＯ−、
置換基、治療的遮断部分または標的部分； Ｒ₁₃−Ｒ₂₁は水素、置換基、治療的遮断部分または標的部分； Ｈ、Ｉ、Ｊ、ＫおよびＬおよびＲ₁₃−Ｒ₂₁の少なくとも一つは治療的遮断部分で
ある〕 を有する。

【００１９】 更なる態様において、本発明は、細胞、組織または患者の磁気共鳴イメージを
作るための本発明のＭＲＩ剤の投与を含む、治療的活性成分に関連する疾病の処
置法を提供する。

【００２０】 更なる態様において、本発明は、ＭＲＩ剤を細胞、組織または患者に投与し、
該細胞、組織または患者の磁気共鳴イメージを表わすことを含む、細胞、組織ま
たは患者の磁気共鳴イメージングの方法を提供する。

【００２１】 (図面の簡単な説明) 図１Ａ、１Ｂおよび１Ｃは、本発明の態様を記載する。図１Ａは、医薬２０が
、キレート５中の金属イオン１０(ここでは、Ｇｄとして示す)に配位原子を提供
するが、配位原子は、リンカー、配位部位バリアーまたは開裂部位を付与され得
る状況を記載する(図１Ｂ)。生理学的標的３０にさらすと、配座変化が起こり、
水の急速交換をさせる。図１Ｂは、開裂部位４０を使用した以外は同様であり、
開裂剤にさらすことにより、医薬２０を切離す。図１Ｃは、配位部位バリアー５
０の使用を記載し、酵素のような開裂剤非存在下で、水の交換を妨害する。しか
し、開裂後、標的３０は医薬２０と相互作用が可能になる。記載していないが、
標的部分を本明細書中にいずれの態様にも含み得る；例えば、医薬の標的に使用
する標的部分を、金属キレートと医薬の間か、または医薬の“末端基”として図
１Ａの医薬２０に結合させ得る。あるいは、標的部分を、他の位置でキレート５
に結合させ得る。同様に、標的部分は、開裂部位４０と医薬２０の間に、または
末端基として、図１Ｂおよび１Ｃ態様に結合させ得る。

【００２２】 図２Ａ、２Ｂおよび２Ｃは、配位部位バリアー６０の使用を記載する。標的基
の使用を含む、一般に図１に記載のような種々の配座を使用し得る。例えば、図
２Ｃにおいて配座部位バリアー６０から医薬２０を開裂するための、更なる開裂
部位をシステム内に入れ得ることにも注目すべきである。

【００２３】 (発明の詳細な説明) 本発明は、生理学的標的剤と本発明のＭＲＩ剤との相互作用の結果、治療的活
性成分の送達を検出できる、磁気共鳴造影法(ＭＲＩ)コントラスト剤を提供する
。本発明のＭＲＩ剤は、生理学的標的物質非存在下においてはコントラスト増強
剤として、相対的に不活性であるか弱いリラキシビティーを有するが、治療的活
性成分の送達により活性化し、従ってＭＲイメージを変えるものである。

【００２４】 治療的活性成分の送達のイメージングは二つの基本的経路において生じ得る。
一つの態様においては、それはＭＲＩ剤を下記のように“オン”にする、治療的
活性成分とその標的との実際の相互作用である；即ち、生理学的標的の存在の結
果、ＭＲＩ剤は治療的活性成分をＭＲＩ剤の残部から開裂して離すことができる
再編成に付され、内部配位部位での水の交換の増加の結果としてシグナルを増加
させる。あるいは、それはイメージされる活性成分の送達事象である；即ち、治
療的活性成分を、プロテアーゼのような開裂剤にさらすことによりＭＲＩ剤から
開裂させ、治療的活性成分がその標的と相互作用するように遊離にする。一般に
、本明細書に記載のものは前者であるが、当業者には明らかなように、いずれも
起こり得ることがある。

【００２５】 単純化して観ると、コントラスト剤が治療的活性成分の送達により“オンにな
る”(即ち、リラキシビティーが増加する)、この“トリガー”機構は、本発明の
ＭＲＩコントラスト剤に含まれる常磁性金属イオンの１個またはそれ以上の配位
部位における水分子交換の速度に作用する動的平衡に基づく。次ぎに、水分子の
交換の速度は、ＭＲＩ剤上への治療的遮断部分の存在または不存在により決定さ
れる。このように、治療的活性成分の存在下、常磁性イオンをキレート化する本
発明の金属イオン複合体は、局所環境中の水分子と急速に交換できる利用可能な
配位部位が減少している。このような状況において、水配位部位は実質的にキレ
ート化剤の配位原子および少なくとも一つの治療的遮断部分により占拠されてい
るか、遮断されている。このように、常磁性イオンは本質的に“内部配位圏”で
水分子を有せず、すなわち、標的物質が不存在の場合、金属に実際に結合する。
それは常磁性金属イオンと内部配位圏水分子上のプロトンとの相互作用および常
磁性金属イオンの高い観察されるリラクシビティー従ってイメージング効果をも
たらすような水分子の急速な交換である。従って、治療的遮断部分が存在する場
合のように、金属イオン複合体中の金属イオンの全ての配位部位が水分子以外の
部分で占拠されている場合、本発明の金属イオン複合体によるイメージングシグ
ナルはあっても極僅かな正味の増強である。しかし、治療的活性成分が(その生 理学的標的との相互作用の結果または開裂により)除去されたとき、これらは金 属イオン複合体の内部配位圏部位の少なくとも一つを効率的に遊離させる。次い
で、局所環境中の水分子は、内部配位圏(複数もある)の可逆的占拠により利用可
能となり、これは水の交換の速度および金属イオン複合体の水に対するリラクシ
ビティーの増加をもたらし、それにより治療的活性成分の送達の尺度であるイメ
ージ増強を産生する。

【００２６】 一般に、イメージを産生するのに使用するＭＲＩシグナルの２から５％の変化
が、検出するのに十分である。従って、本発明の薬剤が、治療的活性成分がＭＲ
Ｉ剤上に存在するときのシグナルと比較して、治療的活性成分の送達により、少
なくとも２から５％のＭＲＩシグナルの増加を示すことが好ましい。治療的活性
成分の送達により各配位部位を利用可能とするのに、２から９０％のシグナル増
強が好ましく、１０から５０％がより好ましい。即ち、治療的遮断部分が２個ま
たはそれ以上の配位部位を占拠するとき、治療的遮断部分の放出は、シグナル配
位部位と比較して、シグナルの有意なまたはそれ以上の増加をもたらすことがで
きる。

【００２７】 治療的遮断部分の存在下でさえ、任意の特定配位部位で、治療的遮断部分の配
位原子と水分子との間の１個またはそれ以上の部位との動的平衡があることは理
解されるべきである。即ち、配位原子が金属に密接に結合しているときでさえ、
その部位での水分子のある程度の交換がある。しかし、殆どの場合、この水分子
の交換は、急速でも顕著でもなく、顕著なイメージ増強をもたらさない。しかし
、治療的活性成分の送達により、治療的遮断部分が配位部位から移動し、水の交
換が増加し、即ち、急速交換および従って、リラクシビティーの増加が、有意な
イメージ増強と共に起こり得る。

【００２８】 従って、本発明のＭＲＩ剤は、金属イオン複合体を含む。本発明の金属イオン
複合体は、キレート化剤および治療的遮断部分を含む複合体に結合する常磁性金
属イオンを含む。本明細書の“常磁性金属イオン”、“常磁性イオン”または“
金属性イオン”は、場と釣り合った程度に磁場に平行または逆平行に磁化されて
いる金属イオンを意味する。一般に、これらは不対電子を有する金属イオンであ
る；これは、当分野で理解される用語である。適切な常磁性金属イオンの例は、
ガドリニウムIII(Ｇｄ＋３またはＧｄ(III))、鉄III(Ｆｅ＋３またはＦｅ(III) 、マンガンII(Ｍｎ＋２またはＭｎ(II))、イットリウムIII(Ｙｔ＋３またはＹｔ
(III))、ジスプロシウム(Ｄｙ＋３またはＤｙ(III))、およびクロム(Ｃｒ(III) またはＣｒ＋３)を含むが、これらに限定されない。好ましい態様において、常 磁性イオンは、その高い磁気モーメント(ｕ²＝６３ＢＭ２)、対称的電子的基底 状態(Ｓ８)、およびそのヒトの診断への適用が現在認可されていることのため、
ランタニド原子Ｇｄ(III)である。

【００２９】 金属イオンに加えて、本発明の金属イオン複合体は、キレート化剤および、キ
レート化剤に共有結合的に結合する治療的遮断部分を含む。多くの常磁性イオン
の相対的に高い毒性のために、これらのイオンは、適当なキレート化剤との結合
により、生理学的システムで非毒性を付与される。従って、キレート化剤の配位
部位における治療的遮断部分の置換は、治療的活性成分の送達により、水分子の
ために配位部位を開け、金属イオン複合体の解離の半減期の減少により金属イオ
ンにより毒性を付与する。従って、好ましい態様において、シグナル配位部位の
みが治療的部分により占拠され、または遮断される。しかし、例えば、実験動物
、組織サンプル等への使用のためのある適用では、金属イオン複合体の毒性は、
最高の重要性ではないことがある。同様に、ある金属イオン複合体は、１個また
はそれ以上の付加的配位原子の治療的遮断部分での置換でさえ、解離の半減期に
作用しない程に安定である。例えば、下記のＤＯＴＡは、Ｇｄ(III)と複合体化 したとき、非常に安定である。従って、ＤＯＴＡがキレート化剤として作用する
とき、キレート化剤の数個の配位原子を、毒性を顕著に増加させることなく、治
療的遮断分子で置換し得る。更に、このような薬剤は、水を大量の溶媒と急速に
交換する２個またはそれ以上の配位部位を有するため、大きなシグナルを産生す
る可能性がある。

【００３０】 エンタルピーおよびエントロピー効果(例えば、配位グループの数、電荷およ び塩基度、リガンド場および配座的効果)を含む、キレート金属イオン複合体の 選択および安定性に作用する種々の因子が存在する。

【００３１】 一般に、キレート化剤は、金属イオンと結合する配位原子を含む多くの配位部
位を有する。配位部位の数、即ち、キレート化剤の構造は、金属イオンに依存す
る。本発明の金属イオン複合体に使用するキレート化剤は、金属イオン複合体の
少なくとも一つの配位部位が、下記のように治療的部分により占拠または遮断さ
れ、金属イオン複合体に官能性を付与するため、好ましくは、金属イオンが結合
できる(ｎ)よりも少なくとも一つ少ない配位原子(ｎ−１)を有する。従って、例
えば、Ｇｄ(III)は、８個の強く会合する配位原子またはリガンドを有し得、９ 番目のリガンドと弱く結合できる。従って、Ｇｄ(III)の適当なキレート化剤は 、９個以下の配位原子を有する。好ましい態様において、Ｇｄ(III)キレート化 剤は、８個の配位原子を有し、治療的部分が金属イオン複合体の残りの部位を占
拠または遮断する。別の態様において、本発明の金属イオン複合体に使用するキ
レート化剤は、金属イオンが結合できる(ｎ)よりも２個少ない配位原子(ｎ−２)
を有し、これらの配位部位は、１個またはそれ以上の治療的遮断部分により占拠
されている。従って、別の態様は、少なくとも５個の配位原子(少なくとも６個 が好ましく、少なくとも７個が特に好ましく、少なくとも８個が特別に好ましい
)を有し、治療的遮断部分が残りの部位を占拠または遮断しているＧｄ(III)キレ
ート化剤を利用する。キレート化剤および治療的遮断部分の正確な構造は決定す
るのが困難であり、従って、配位原子の正確な数は不明のままであり得ることは
理解される。例えば、キレート化剤が、配位原子に分数または非整数の配位原子
を提供することが可能である；即ち、キレート化剤は７.５個の配位原子を提供 し得、即ち、８個めの配位原子が、平均して、金属イオンに十分に結合していな
い。しかし、８個目の配位原子が、その部位での水の急速交換の防止のために十
分結合するおよび／または治療的遮断部分がその部位での水の急速交換を妨害す
る場合、金属イオン複合体はまだ官能性である。

【００３２】 ランタニドおよび常磁性イオンのキレート化に使用する、多くの既知の大環状
キレート化剤またはリガンドがある。例えば、多くの大環状キレート化剤および
その合成を記載する、本明細書に引用して包含させるAlexander, Chem. Rev. 95
:273-342 (1995)およびJackels, Pharm. Med. Imag. Section III, Chap. 20, p
645 (1990)参照。同様に、全て本明細書にまた引用して包含させる米国特許第５
,１５５,２１５号、第５,０８７,４４０号、第５,２１９,５５３号、第５,１８ ８,８１６号、第４,８８５,３６３号、第５,３５８,７０４号、第５,２６２,５ ３２号を含む本発明で使用するための適当なキレート化剤を記載する多くの特許
、およびMeyer et al., Invest. Radiol. 25:S53 (1990)参照。従って、当業者 には理解されるように、既知の常磁性金属イオンキレート化剤またはランタニド
キレート化剤が、更に少なくとも一つの治療的遮断部分を含むように、本明細書
の教示を使用して、容易に修飾できる。

【００３３】 金属イオンがＧｄ(III)である場合、好ましいキレート化剤は１,４,７,１０−
テトラアザシクロドデカン−Ｎ,Ｎ'，Ｎ",Ｎ'"−四酢酸(ＤＯＴＡ)または置換Ｄ
ＯＴＡである。ＤＯＴＡは下記の構造を有する：

【化５】

【００３４】 本明細書で、“置換ＤＯＴＡ”は、ＤＯＴＡが、下式の任意の位置で置換され
ていてもよいＤＯＴＡを意味する：

【化６】

【００３５】 適当なＲ置換基は、当業者に理解され、下に定義するような、広汎な基を含む
。例えば、適当な置換基は、米国特許第５,２６２,５３２号、第４,８８５,３６
３号および第５,３５８,７０４号のＤＯＴＡおよびＤＯＴＡタイプ化合物に関し
て記載の置換基を含む。これらの基は、水素、置換アルキル基およびヘテロアル
キル基を含むアルキル基、置換アリールおよびヘテロアリール基を含むアリール
基、塩素、臭素およびフッ素のようなハロゲン；アミン；アミド；エステル；エ
ーテル；エチレングリコールを含むグリコール；ヒドロキシ基；アルデヒド；ア
ルコール；カルボン酸；ニトロ基；スルホニル；シリコン部分；硫黄含有部分；
リン含有部分；カルボニル基；標的部分；治療的遮断部分および化学的官能基を
含む。当業者には明らかなように、上記の各位置は、結合した２つのＲ基(Ｒ'お
よびＲ")を有し得るが、好ましい態様において、一個のみの非水素Ｒ基が特定の
位置に結合している；即ち、好ましくは、各位置の少なくとも一つのＲは水素で
ある。このように、Ｒがアルキルまたはアリール基である場合、一般に、炭素に
結合した付加的水素が存在するが、本明細書には記載していない。好ましい態様
において、一つのＲ基は治療的遮断部分および他方のＲ基は水素である。

【００３６】 本明細書の“アルキル基”または文法上同等なものは、直鎖または分枝鎖アル
キル基を意味し、直鎖アルキル基が好ましい。分枝鎖の場合、１個またはそれ以
上の位置で、そして特記しない限り任意の位置で分枝し得る。アルキルの定義内
にはヘテロアルキル基も含まれ、ヘテロ原子は窒素、酸素、リン、硫黄およびシ
リコンから選択される。アルキル基の定義内に含まれるのはまたＣ５およびＣ６
環、およびヘテロシクロアルキルのようなシクロアルキル基である。

【００３７】 更に適切なヘテロ環式置換環は、本明細書に包含させる米国特許第５,０８７,
４４０号に記載されている。ある態様において、本明細書に包含させる、米国特
許第５,３５８,７０４号に記載のように、二つの隣接Ｒ基が互いに結合し、キレ
ート化剤の炭素原子と共に環構造を形成する。これらの環構造は、同様に置換さ
れ得る。

【００３８】 アルキル基は、１から２０炭素原子(Ｃ１−Ｃ２０)の範囲であり得、好ましい
態様では、約１から約１０炭素原子(Ｃ１−Ｃ１０)を使用し、約Ｃ１からＣ５が
好ましい。しかし、ある態様において、例えば、アルキル基が配位部位バリアー
である時、アルキル基は大きいことがある。

【００３９】 本明細書の“アルキルアミン”または文法上同等なものは、任意の位置をアミ
ン基で置換された、上記で定義のアルキル基を意味する。加えて、アルキルアミ
ンは、上記アルキル基で概説のように、更に置換基を有し得る。アミンは、１級
(−ＮＨ₂Ｒ)、２級(−ＮＨＲ₂)または３級(−ＮＲ₃)である。アミンが２級また は３級アミンである時、適当なＲ基は上記で定義のアルキル基である。好ましい
アルキルアミンはｐ−アミノベンジルである。アルキルアミンが、下記のように
、配位部位バリアーとして働く場合、例えば、アルキルアミンがピリジンまたは
ピロリン環を含むとき、好ましい態様は、配位原子としてアミンの窒素原子を使
用する。

【００４０】 本明細書の“アリール基”または文法状文法上同等なものは、フェニルのよう
な芳香族アリール環、ピリジン、フラン、チオフェン、ピロール、インドールお
よびプリンのようなヘテロ環式芳香族環、および窒素、酸素、硫黄またはリンと
のヘテロ環式環を意味する。

【００４１】 “アルキル”および“アリール”の定義に含まれるのは、置換アルキルおよび
アリール基である。即ち、アルキルおよびアリール基を、１個またはそれ以上の
置換基で置換し得る。例えば、フェニル基は、置換フェニル基であり得る。適当
な置換基は、塩素、臭素およびフッ素のようなハロゲン；アミン；アミド；エス
テル；エーテル；エチレングリコールを含むグリコール；ヒドロキシ基；アデヒ
ド；アルコール；カルボン酸；ニトロ基；スルホニル；シリコン部分；硫黄含有
部分；リン含有部分；カルボニルおよび本明細書で定義の他のアルキルおよびア
リール基、標的部分、治療的遮断部分および化学的官能基を含むが、これらに限
定されない。このように、アリールアルキルおよびヒドロキシアルキル基は、本
発明での使用にまた適当である。好ましい置換基は、アルキルアミンおよびアル
キルヒドロキシを含む。

【００４２】 本明細書の“リン含有部分”は、−ＰＯ(ＯＨ)(Ｒ₂₅)₂基を含む、ホスフィン およびホスフェートを含むが、これらに限定されないリン含有化合物を意味する
。リンは、アルキルリンであり得る；例えば、ＤＯＴＥＰは、ＤＯＴＡ上の置換
基としてエチルリンを使用する。Ｒ₂₅は、アルキル、置換アルキル、ヒドロキシ
であり得る。好ましい態様は、−ＰＯ(ＯＨ)(Ｒ₂₅)₂基を有する。

【００４３】 “アミノ基”または文法上同等なものは、Ｒが本明細書で定義したものである
、−ＮＨ₂、−ＮＨＲおよび−ＮＲ₂基を意味する。

【００４４】 本明細書の“ニトロ基”は、−ＮＯ₂基を意味する。 本明細書の“硫黄含有部分”は、チア−、チオ−およびスルフォ−化合物、チ
オール(−ＳＨおよび−ＳＲ)およびスルフィド(−ＲＳＲ−)を含むが、これらに
限定されない、硫黄原子含有化合物を意味する。

【００４５】 本明細書の“シリコン含有部分”は、シリコン含有化合物を意味する。 本明細書の“エーテル”は、−Ｏ−Ｒ基を意味する。好ましいエーテルは、ア
ルコキシ基を含み、−Ｏ−(ＣＨ₂)₂ＣＨ₃および−Ｏ−(ＣＨ₂)₄ＣＨ₃が好ましい
。 本明細書の“エステル”は−ＣＯＯＲ基を意味する。

【００４６】 「ハロゲン」とは、本書では臭素、ヨー素、塩素またはフッ素を意味する。好
ましい置換アルキルとしては、部分的にまたは全部ハロゲン化した例えばＣＦ₃ 等があげられる。

【００４７】 「アルデヒド」とは、本書では−ＲＣＯＨグループを意味する。

【００４８】 「アルコール」とは、本書では−ＯＨグループ、および、アルキルアルコール
類−ＲＯＨを意味する。

【００４９】 「アミド」とは、本書では−ＲＣＯＮＨ−またはＲＣＯＮＲ−グループを意味
する。

【００５０】 「エチレングリコール」または「（ポリ）エチレングリコール」とは、本書で
は−(Ｏ−ＣＨ₂−ＣＨ₂)_n−基を意味し、エチレン基の各炭素原子は一つまたは 二つがさらに置換されていても、即ち、−(Ｏ−ＣＲ₂−ＣＲ₂)_nであってもよく 、Ｒは上記したとおりである。酸素の代わりに他のヘテロ原子を有する、（即ち
、−(Ｎ−ＣＨ₂−ＣＨ₂)ｎ−または−(Ｓ−ＣＨ₂−ＣＨ₂)_n−、あるいは置換基 を有する）エチレングリコール誘導体も好適である。

【００５１】 本書では、「標的部分」の用語は、標的の役目を果たすか、または、特定の位
置または組合わせ、即ち、ある特異的結合のイベントで、複合体を指向させる官
能基を意味する。従って、例えば、ある標的部分は、ある分子を特定の標的蛋白
質または酵素、あるいは特定の細胞位置、または特定の細胞の型を標的とさせる
のに使用できる。好適な標的部分としては、ポリペプチド、核酸、炭水化物、脂
質、蛋白性またはステロイドホルモンを含むホルモン類、成長因子、レセプター
リガンド、抗原および抗体、その他の類似物があるが、それらに限定されない。
例えば、詳しくは後述するが、下記コバルト化合物のような治療的に活性な因子
は、特定の蛋白質と特異的に結合する標的部分を含有し得る。あるいは、詳しく
は後述するが、本発明のＭＲＩ因子は、多くの腫瘍細胞がその表面に明かなトラ
ンスフェリンレセプターを有しているので、例えば腫瘍細胞のような特定細胞型
に対して、該因子を標的化させる例えばトランスフェリン部分のような標的部分
を含み得る。同様に、標的部分は、ＭＲＩ因子または治療的に活性な因子（もし
遊離していれば）を細胞下の特定位置に対して標的化するのに有用な構成成分を
含み得る。当業者には明らかであるが、細胞内で蛋白質を局在化させることは単
純な有効濃度増加法である。例えば、ある医薬を核内で往復させ、それを小スペ
ース内に閉じ込めれば、濃度を増加させることとなる。結局、生理学的標的を単
純に特定の区域に局在化させることにより、医薬を適切に局在化させるのである
。

【００５２】 それ故、好適な標的配列には、発現生成物の生物学的活性を保持しながら、予
め定めた分子または分子のクラスのその場所との結合を起こさせ得る能力のある
結合配列（例えば、関連酵素クラスを標的化するのに酵素阻害剤または基質配列
を使用して）；それ自身のまたは共結合蛋白質の選択的分解を信号する配列；及
び、ａ）ゴルジ(Golgi)、小胞体、細胞核、核小体、核膜ミトコンドリア、クロ ルプラスト、分泌小胞、リゾソーム、及び細胞膜のような細胞下の位置；ｂ）分
泌信号を経由する細胞外の位置；を含む予め定めた位置に予定発現生成物を組織
的に局在化する能力のある信号配列が含まれるが、それらに限定されない。特に
好ましいのは各細胞下の位置に局在化させることである。

【００５３】 他の好適な置換基のクラスは、詳しくは後述する、本発明の構成成分を加入す
るのに一緒に使用する化学的官能基である。それ故、一般的には、本発明の構成
成分は、次いで結合のために使用し得る各位置上に官能基を使用することにより
結合させる。結合に好適な官能基はアミノ基、カルボキシ基、オキソ基およびチ
オール基である。これらの官能基は、次いでリンカーを使用して直接的または間
接的のいずれかで結合させ得る。リンカーは当業者によく知られているが、例え
ば、よく知られているホモ−またはヘテロ−２官能性リンカーである（引用して
本書の一部とする 1994 Pierce Chemical Company catalog, technical section
on cross-linkers, pages 155-200 参照）。好適なリンカーには、短いアルキ ル基を有するアルキル基（置換アルキル基およびヘテロ原子部分を含有するアル
キル基を含む）、エステル類、アミド、アミン、エポキシ基、核酸、ペプチドお
よびエチレングリコール及び好ましい誘導体が含まれるが、それらに限定されな
い。

【００５４】 置換基は水素または以下に記載するような治療的遮断部分であってもよい。

【００５５】 他の実施態様では、金属イオンがＧｄ(III)であるとき、好ましいキレート化 剤はジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）または置換ＤＴＰＡである。
ＤＴＰＡは下記構造を有する：

【００５６】

【化７】

【００５７】 「置換ＤＰＴＡ」とは、本書において、下記式の任意の位置で置換されている
ＤＰＴＡを意味する。

【００５８】

【化８】 例えば、米国特許Ｎｏ．５０８７４４０参照。

【００５９】 好適なＲ置換基には、ＤＯＴＡについて上記したものが含まれる。また、本書
でそう記載しているように、当業者には理解されるはずであるが、上記各定義位
置で少なくとも１つの基は水素であり、一般的には示さなくても各位置において
２つのＲ基（Ｒ’およびＲ”）があり得る。

【００６０】 別の実施態様では、金属イオンがＧｄ(III)である場合、好ましいキレート化 剤は1、4、7、10−テトラアザシクロドデカン−Ｎ,Ｎ’,Ｎ”,Ｎ’”−テトラエ
チルリン酸（ＤＯＴＥＰ）または置換ＤＯＴＥＰである（米国特許Ｎｏ．５１８
８８１６）。ＤＯＴＥＰは下記構造を有する。

【００６１】

【化９】 ＤＯＴＥＰ前記と同様のＲ置換基を有していてもよい。

【００６２】 他の適切なＧｄ(III)キレート化剤は、特に上記 Alexander, Jackelsらの米国
特許Ｎｏ．5,155,215、5,087,440、5,219,553、5,188,816、4,885,363、5,358,7
04、5,262,532、および Meyer et al., Invest. Radiol. 25: S53 (1990) 等に 記載されている。

【００６３】 常磁性イオンがＦｅ(III)である場合、Ｆｅ(III)が６つの配位原子を結合し得
るので、好適なキレート化剤は６以下の配位原子を有するものである。Ｆｅ(III
) イオンのキレート化剤として好適なのものは当業界でよく知られている。（La
uffer et al., J. Am. Chem. Soc. 109:1622 (1987); Lauffer, Chem. Rev. 87:
901-927 (1987);および米国特許Ｎｏ．4,885,363、5,358,704、5,262,532参照。
記載されているものはいずれもＦｅ(III)のキレート剤として好適である。）

【００６４】 常磁性イオンがＭｎ(II)(Mn+2)である場合、Ｍｎ(II) が６つまたは７つの配 位原子を結合し得るので、好適なキレート化剤は５または６以下の配位原子を有
するものである。Ｍｎ(II)イオン のキレート化剤として好適なのものは当業界 でよく知られている（Lauffer, Chem. Rev. 87:901-927 (1987)および米国特許 Ｎｏ．4,885,363、5,358,704、5,262,532参照）。

【００６５】 常磁性イオンがＹt(III)である場合、Ｙt(III)は、８個または９個の配位原子
を結合することができることから、適切なキレート化剤は、７個または８個未満
の配位原子を有する。Ｙt(III)イオンに適したキレート化剤には、限定されるも
のではないが、ＤＯＴＡおよびＤＰＴＡ、並びにそれらの誘導体(Ｍoiら、Ｊ. Ａm. Ｃhem. Ｓoc. １１０：６２６６−６２６７（１９８８）を参照)、並びに 上に概説した米国特許第４,８８５,３６３号および他の米国特許に記載されてい
るキレート化剤が含まれる。

【００６６】 常磁性イオンがＤy＋３(Ｄy(III))である場合、ＤyIIIは、８個または９個の 配位原子を結合することができることから、適切なキレート化剤は、７個または
８個未満の配位原子を有する。適当なキレート化剤は、上記のように、当業界で
知られている。

【００６７】 好ましい態様では、キレート化剤および治療的遮断部分が共有結合する；すな
わち、治療的遮断部分は、キレート化剤での置換基である。この態様では、結合
金属イオンをもつ置換キレート化剤は、標的物質の不存在下、占拠またはブロッ
クされた全ての可能な配位部位を有する金属イオン複合体を含んでなる；すなわ
ち、それは、配位上飽和されている。

【００６８】 別の態様では、キレート化剤および治療的遮断部分は共有結合しない。この態
様では、治療的遮断部分は、標的物質の不存在下、水分子の迅速な交換を妨げる
のに十分な金属イオンに対する親和性を有する。しかしながら、この態様では、
治療的遮断部分は、金属イオンに対してより標的物質に対して高い親和性を有す
る。従って、開裂剤または生理学的標的のいずれかの存在下、治療的遮断部分は
、金属イオンから取り除かれて、標的物質と相互作用する傾向を有することで、
金属イオン複合体における配位部位の自由度を上げて(freeing up)、水の迅速な
交換および緩和性の増大を可能にする。

【００６９】 重要なことは、治療的部分が金属イオンの分子内配位圏にある場合、金属イオ
ン、キレート化剤、および治療的遮断部分を含んでなる金属イオン複合体は、水
分子を容易に迅速に交換できないので、治療的遮断部分の存在下、実質的なイメ
ージの増強があまりまたはほとんどないことである。

【００７０】 本明細書中、「治療的遮断部分」という語または文法的同義語は、幾つかの必
須機能をもつ部分を意味する。第一に、治療的遮断部分の幾つかの成分は、金属
イオン複合体の金属イオンの少なくとも１つの分子内配位部位における水の交換
を実質的に阻止することができなければならない。第二に、治療的遮断部分の幾
つかの成分は、治療効果をあげる、すなわち、その生理学的標的物質の機能を変
えることができなければならない。加えて、さらなる要件は、治療的遮断部分の
生理学的標的物質との相互作用の結果として、または治療的遮断部分に存在する
開裂部位に対するプロテアーゼのような分離酵素作用の結果として、金属イオン
の少なくとも１つの分子内配位部位における水の交換が増大することである。以
下により十分記載するように、これは、キレート化剤からの治療的遮断部分の幾
つかまたは全ての開裂の結果として一般的に行われるが、他のタイプの相互作用
もまた利用することができる。以下により十分記載するように、これらの機能は
各々、単一成分により成し遂げられ得、または多成分を使用して、治療的遮断部
分を一緒に形成する。すなわち、例えば、治療上活性な成分が配位原子を与え得
る。さらにまた、以下により十分記載するように、治療的遮断部分は、ある特定
の標的に対する薬物部分の標的化を可能とする標的部分を含んでなり得る。最後
に、治療的遮断部分は、正しいスペーシングおよび必要とされる治療的遮断部分
の成分の結合を与える１つまたはそれ以上のリンカー基を含んでなり得る。

【００７１】 従って、治療的遮断部分は、本明細書中に概説するように、１つまたはそれ以
上の幾つかの成分を含んでなり得る。最低でも、治療的遮断部分は、治療効果を
もたらすことができる「治療上活性な成分」または「薬物部分」を含んでなり、
すなわち、それは、生理学的標的物質の生物学的機能を変える。以下に概説する
ように、この薬物部分は、治療的遮断部分の配位原子を与え得るか、または与え
得ない。本明細書中、「治療効果をもたらす」もしくは「治療上有効な」という
語または文法的同義語は、薬物がその意図する生理学的標的の生物学的機能を治
療および表現型効果をもたらすのに十分な方法で変えることを意味する。本明細
書中、「変える」または「生物学的機能を調節する」という語は、生理学的標的
がその生物学的活性の質または量のいずれかに変化を受けることを意味する；こ
れには、活性の増大または減少が含まれる。そこで、治療上活性な成分には、広
範囲にわたる様々な薬物が含まれ、アンタゴニスト(例えば、酵素阻害剤)および
アゴニスト(例えば、望ましい遺伝子産物の発現の増大を生ずる転写因子)(当業 者により認識されるように、アンタゴニスト転写因子を使用することもできるが
)を含め、全てが含まれる。

【００７２】 好ましい態様では、以下により十分記載するように、治療上活性な成分をＭＲ
Ｉ剤から開裂する。この態様では、治療的遮断部分の開裂および治療上活性な成
分の解離の結果として、ＭＲＩ剤の配位部位は、これ以上配位原子により占拠さ
れず、この部位において水が自由に交換され、シグナルの増強をもたらす。さら
にまた、薬物は、ここで、その標的と自由に相互作用し、これは、開裂を行う分
子と同じであってもよいし、または同じでなくてもよい；例えば、開裂部位は、
例えば、ＨＩＶプロテアーゼの酵素基質を含んでいてもよいし、薬物は、該酵素
の阻害剤を含んでいてもよい。従って、この態様では、相互作用の性質は不可逆
的である；ＭＲＩ剤から解離する配位原子は、再び会合せず、配位位置をブロッ
クまたは占拠しない。この態様は、単一開裂剤が多くの活性金属イオン複合体、
すなわち、治療的遮断部分が金属イオンの配位位置をこれ以上占拠またはブロッ
クしない金属イオン複合体の生成をもたらすことから、イメージの増強の増幅を
可能にする。

【００７３】 別の態様では、治療上活性な成分を活性とするのにＭＲＩ剤から開裂する必要
はない。従って、例えば、以下により十分記載するように、幾つかの成分は、Ｍ
ＲＩ剤と会合したままであり得る；この場合に重要なことは、薬物のその標的と
の会合が治療的遮断部分由来の配位原子により元々占拠されていた配位位置に生
ずる配座変化をもたらして、空となり、水の交換の増大を可能とすることで、イ
メージの増強を可能にすることである。すなわち、薬物のその標的に対する親和
性は、治療的遮断部分のＭＲＩ剤に対する親和性より大きい。薬物のその生理学
的標的との相互作用の性質により、これは可逆的相互作用であり得るか、または
可逆的相互作用ではあり得ない。すなわち、幾つかの場合において、例えば、あ
る酵素阻害剤の場合において、相互作用は有効に不可逆的であり、ＭＲＩ剤に結
合した薬物で占拠されている酵素活性部位をもたらす。あるいはまた、幾つかの
態様では、相互作用が可逆的であり、その標的と会合した薬物を有すること(イ メージの増強をもたらすこと)と、ＭＲＩ剤と会合した治療的遮断部分を有する こと(水の交換を妨げることで、シグナルの損失を妨げること)との間で平衡が確
立される。

【００７４】 治療上活性な部分と生理学的標的物質との間の治療効果の性質は、生理学的標
的物質および効果の性質の両方に依存する。一般に、適当な生理学的標的物質に
は、限定されるものではないが、なかでも、イオンチャンネルおよび酵素が含ま
れるタンパク質(ペプチドおよびオリゴペプチドを含む)；核酸；Ｃa＋２、Ｍg＋
２、Ｚn＋２、Ｋ＋、Ｃl−、Ｎa＋といったようなイオン、並びにＦe、Ｐb、Ｈg
、およびＳeのイオンが含まれる毒性イオン；cＡＭＰ；Ｇタンパク質結合レセプ
ターおよび細胞表面レセプターが含まれるレセプター、並びにリガンド；ホルモ
ン；抗原；抗体；ＡＴＰ；ＮＡＤＨ；ＮＡＤＰＨ；ＦＡＤＨ₂；ＦＮＮＨ₂；補酵
素Ａ(アシルＣoＡおよびアセチルＣoＡ)；およびビオチンが含まれる。生理学的
標的物質には、オルソミクソウイルス(例えば、インフルエンザウイルス)、パラ
ミクソウイルス(例えば、呼吸器合胞体ウイルス、おたふく風邪ウイルス、はし かウイルス)、アデノウイルス、ライノウイルス、コロナウイルス、レオウイル ス、トガウイルス(togaviruses)(例えば、風疹ウイルス)、パルボウイルス、ポ ックスウイルス(例えば、痘瘡ウイルス、ワクシニアウイルス)、エンテロウイル
ス(例えば、ポリオウイルス、コクスサッキーウイルス)、肝炎ウイルス(Ａ、Ｂ 、およびＣを含む)、ヘルペスウイルス(例えば、単純ヘルペスウイルス、水痘帯
状疱疹ウイルス、サイトメガロウイルス、エプスタインバーウイルス)、ロタウ イルス、ノーウォークウイルス、ハンタウイルス、アレナウイルス、ラブドウイ
ルス(例えば、狂犬病ウイルス)、レトロウイルス(ＨＩＶ、ＨＴＬＶ−ＩおよびI
Iを含む)、パポーバウイルス(例えば、パピローマウイルス)、ポリオーマウイル
ス、およびピコルナウイルス等が含まれる、広範囲にわたる様々なウイルスと関
連のある酵素およびタンパク質が含まれる。同様に、細菌標的は、バシラス属；
ビブリオ属、例えば、Ｖ. cholerae；大腸菌属、例えば、腸内毒素原性Ｅ. coli
；赤痢菌属、例えば、Ｓ. dysenteriae；サルモネラ属、例えば、Ｓ. typhi；マ
イコバクテリウム属、例えば、Ｍ. tuberculosis、Ｍ. leprae；クロストリジウ
ム属、例えば、Ｃ. botulinum、Ｃ. tetani、Ｃ. difficile、Ｃ. perfringens ；コルニエバクテリウム属(Ｃornyebacterium)、例えば、Ｃ. diphtheriae；連 鎖球菌属、Ｓ. pyogenes、Ｓ. pneumoniae；ブドウ球菌属、例えば、Ｓ. aureus
；ヘモフィルス属、例えば、Ｈ. influenzae；ナイセリア属、例えば、Ｎ. meni
ngitidis、Ｎ. gonorrhoeae；エルシニア属、例えば、Ｇ. lamblia、Ｙ. pestis
；シュードモナス属、例えば、Ｐ. aeruginosa、Ｐ. putida；クラミジア属、例
えば、Ｃ. trachomatis；ボルデテラ属、例えば、Ｂ. pertussis；トレポネーマ
属、例えば、Ｔ. palladium等が含まれる、広範囲にわたる様々な病原性および 非病原性の重要な原核生物から得ることができる。

【００７５】 生理学的標的物質を同定したら、対応する治療上活性な成分を選択する。これ
らの成分は、限定されるものではないが、酵素阻害剤、ホルモン、サイトカイン
、成長因子、レセプターリガンド、抗体、抗原、クラウンエーテルおよび他のキ
レート化剤が含まれるイオン結合化合物、実質的に相補的な核酸、転写因子が含
まれる核酸結合タンパク質、毒素等を含め、広範囲にわたる様々な薬物のいずれ
かである。適当な薬物には、エリスロポイエチン(ＥＰＯ)、トロンボポイエチン
(ＴＰＯ)、インターロイキン(ＩＬ−１からＩＬ−１７まで含む)といったような
サイトカイン、インスリン、インスリン様成長因子(ＩＧＦ−１および２を含む)
、上皮成長因子(ＥＧＦ)、腫瘍成長因子(ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−βを含む)、
ヒト成長ホルモン、トランスフェリン、上皮成長因子(ＥＧＦ)、低密度リポタン
パク質、高密度リポタンパク質、レプチン、ＶＥＧＦ、ＰＤＧＦ、毛様体神経栄
養性因子、プロラクチン、副腎皮質刺激ホルモン(ＡＣＴＨ)、カルシトニン、ヒ
ト絨毛性ゴナドトロピン、コルチゾール、エストラジオール、卵胞刺激ホルモン
(ＦＳＨ)、甲状腺刺激ホルモン(ＴＳＨ)、黄体形成ホルモン(ＬＨ)、プロゲステ
ロン、テストステロン、リシンが含まれる毒素、およびＰhysician's Ｄesk Ｒe
ference，Ｍedical Ｅconomics Ｄata Production Company，Ｍontvale，ＮＪ，
１９９８に概説されているいずれかの薬物が含まれる。

【００７６】 好ましい態様では、生理学的標的は、タンパク質の生物活性に重要であるヒス
チジン残基を含むタンパク質である。この場合、治療上活性な成分は、ＰＣＴ ＵＳ９５／１６３７７、ＰＣＴ ＵＳ９５／１６３７７、ＰＣＴ ＵＳ９６／１９
９００、ＰＣＴ ＵＳ９６／１５５２７、およびその中で引用されている文献(こ
れらに記載されている内容は全て、本発明の一部を明白に構成する)に一般的に 記載されているような金属イオン複合体(ＭＲＩ剤の金属イオン複合体と混同し てはならない)であり得る。これらの複合体は、以下に概説する一般構造をとり 、生物学的に重要なヒスチジン残基をもつタンパク質、特に酵素の生物活性を減
少させるのに有効であることが示された。これらのコバルト複合体は、アキシャ
ル位でのリガンドの置換または付加により、それらの生物学的活性を誘導するら
しい。これらの化合物の生物学的活性は、新たなアキシャルリガンド、最も好ま
しくは標的タンパク質によりその生物学的活性に必要とされるヒスチジンの側鎖
のイミダゾールの窒素原子の結合から生ずる。従って、活性部位におけるヒスチ
ジンを利用する酵素のようなタンパク質、例えば、必須金属イオンを結合するた
めにヒスチジンを使用するタンパク質を、コバルト化合物のアキシャルリガンド
位でのヒスチジンの結合により不活性化することで、ヒスチジンがその正常な生
物学的機能に関与しないようにすることができる。

【００７７】 構造６

【化１０】

【００７８】 構造６では、金属イオンをＣoとして示し、これは、Ｃo(II)もしくはＣo(III)
、またはＦe、Ａu、およびＣr(ＰＣＴ ＵＳ９６／１５５２７を参照)を含め、他
の四座(tetradentate)金属イオンのいずれかであり得る。Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、
Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、およびＲ₈は各々、本明細書中に定義する置換基であり、水素、
アルキル、アリール、または標的部分が好ましい。一般に、少なくとも１つのＲ
基には、コバルト複合体の残りのＭＲＩ剤への結合のための化学官能基が含まれ
る。

【００７９】 好ましい態様では、生理学的標的タンパク質が酵素である。当業者により認識
されるように、可能な酵素標的物質はかなり広範である。適当な酵素群には、限
定されるものではないが、プロテアーゼのようなヒドラーゼ、カルボヒドラーゼ
、リパーゼ、およびヌクレアーゼ；ラセマーゼ、エピメラーゼ、、トートメラー
ゼ、またはムターゼといったようなイソメラーゼ、；トランスフェラーゼ、キナ
ーゼ、およびホスファターゼが含まれる。本発明を使用して、循環系内での動脈
効果性斑および病変、炎症、創傷、免疫応答、腫瘍、アポトーシス、エキソサイ
トーシス等の発生または維持と関連のある酵素を全て処理することができる。ラ
クターゼー、マルターゼ、スクラーゼまたはインベルターゼ、セルラーゼ、α−
アミラーゼ、アルドラーゼ、グリコーゲンホスホリラーゼ、ヘキソキナーゼのよ
うなキナーゼ、セリン、システイン、アスパルチル、およびメタロプロテアーゼ
のようなプロテアーゼといったような酵素を検出することもでき、限定されるも
のではないが、トリプシン、キモトリプシン、並びにtＰＡのような他の治療上 関連のあるセリンプロテアーゼおよび血栓溶解カスケードの他のプロテアーゼ；
カテプシンＢ、Ｌ、Ｓ、Ｈ、Ｊ、Ｎ、およびＯを含め、カテプシン；およびカル
パイン：が含まれるシステインプロテアーゼ；並びにカスパーゼ(caspases)−３
、５、８といったようなカスパーゼ、およびインターロイキン変換酵素(ＩＣＥ)
のようなアポトーシス経路の他のカスパーゼが含まれる。同様に、細菌およびウ
イルス感染を特有の細菌およびウイルス酵素によって検出することができる。当
業者で認識されるように、このリストは、限定することを意味するものではない
。

【００８０】 標的酵素を同定または選択したら、酵素基質特異性の周知のパラメーターを使
用して、酵素阻害剤の治療上活性な成分を設計することができる。上に概説した
ように、阻害剤は、上に記載したコバルト複合体のような別の金属イオン複合体
であってもよい。他の適当な酵素阻害剤には、限定されるものではないが、ＰＣ
Ｔ ＵＳ９５／０２２５２、ＰＣＴ／ＵＳ９６／０３８４４、およびＰＣＴ／Ｕ Ｓ９６／０８５５９に記載されているシステインプロテアーゼ阻害剤、並びにＨ
ＩＶプロテアーゼの阻害剤といったような薬物として使用される既知のプロテア
ーゼ阻害剤が含まれる。

【００８１】 ある態様では、治療的活性成分は、核酸であり、例えば、遺伝子治療またはア
ンチセンス治療(antisense therapy)を行うものである。“核酸”または“オリ ゴヌクレオチド”または本明細書中で用いる用法的に同等なものは、同時に共有
結合した少なくとも２つのヌクレオチドを意味する。ある場合には、以下に概略
を示すように、核酸類似体は、例えばホスホルアミド(Beaucage et al., Tetrah
edron 49(10):1925 (1993) およびその参考文献; Letsinger, J. Org. Chem. 35
:3800 (1970); Sprinzl et al., Eur. J. Biochem. 81:579 (1977); Letsinger
et al., Nucl. Acids Res. 14:3487 (1986); Sawai et al, Chem. Lett. 805 (1
984), Letsinger et al., J. Am. Chem. Soc.110:4470 (1988); ならびに Pauwe
ls et al., Chemica Scripta 26:141 91986))、ホスホロチオネート(Mag et al.
, Nucleic Acids Res.19:1437 (1991); および米国特許番号 5,644,048)、ホス ホロジチオネート (Briu et al., J. Am. Chem. Soc.111:2321 (1989)、O-メチ ルホスホラミダイト連結 (Eckstein, Oligonucleotides and Analogues: A Prac
tical Approach, Oxford University Press参照)、ならびにペプチド核酸バック
ボーンおよび連結 (Egholm, J. Am. Chem. Soc. 114:1895 (1992); Meier et al
., Chem. Int. Ed. Engl. 31:1008 (1992); Nielsen, Nature, 365:566 (1993);
Carlsson et al., Nature 380:207 (1996)参照、すべて引用により本明細書に 加える。)を含む他のバックボーンであり得ることを含むけれども、本発明の核 酸は、通常ホスホジエステル結合を有する。他の類似核酸は、ポジティブバック
ボーン(Denpcy et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:6097 (1995); 非イオ ン性バックボーン (米国特許番号 5,386,023, 5,637,684, 5,602,240, 5,216,14
1 および 4,469,863; Kiedrowshi et al., Angew. Chem. Intl. Ed. English 30
:423 (1991); Letsinger et al., J. Am. Chem. Soc.110:4470 (1988); Letsing
er et al., Nucleoside & Nucleotide 13:1597 (1994); ２章および３章、 ASC
Symposium Series 580, "Carbohydrate Modifications in Antisense Research"
, Ed. Y.S. Sanghui and P. Dan Cook; Mesmaeker et al., Bioorganic & Medic
inal Chem. Lett. 4:395 (1994); Jeffs et al., J. Biomolecular NMR 34:17 (
1994); Tetrahedron Lett. 37:743 (1996))および非リボースバックボーンを有 するものを含み、それには、米国特許番号5,235,033および5,034,506、ならびに
６章および７章、ASC Symposium Series 580, "Carbobydrate Modifications in
Antisense Research", Ed. Y.S. Sanghui and P. Dan Cookに記載されているも
のを含む。１以上の炭素環糖(carbocyclic sugar)を含む核酸はまた、核酸の定 義の範囲内に含まれる(Jenkins et al., Chem. Soc. Rev. (1995) pp 169-176参
照)。幾つかの核酸類似体はRawls, C & E News June 2, 1997 page 35に記載さ れている。これら引用はすべて、本明細書中に引用により明らかに含まれている
。リボースホスフェートバックボーンのこれらの修飾により、その分子の生理学
的条件下での安定性および半減期が増大し、例えば、PNAアンチセンスの実施態 様が特に好ましい。

【００８２】 当業者には、本発明によりこれらの核酸類似体のすべてが有用であることが理
解されるはずである。加えて、天然に生じる核酸と類似体との混合物とすること
ができ、また、異なる核酸類似体の混合物とすることもでき得る。

【００８３】 核酸は、一本鎖または二本鎖であり得る。生理学的標的分子は、実質的な相補
性核酸またはタンパク質のような、核酸結合部分であり得る。

【００８４】 好ましい実施態様では、生理学的標的物質は、生理学的に活性なイオンであり
、治療的活性成分は、イオン結合リガンドまたはキレートである。例えば毒性金
属イオンは、例えば、クラウンエーテルを含む多種の既知キレート化を用い、キ
レート化され、毒性が低下する。

【００８５】 治療的活性成分に加えて、治療的遮断部分は、他の構成成分を含み得る。本明
細書で概略を示すように、好ましい実施態様により、金属イオンの配位原子は、
治療的活性成分により提供される。しかし、治療的活性成分が配位原子に寄与し
なければ、治療的遮断部分は、治療的活性成分の送達において解離し得る方法で
、複合体に共有結合的に連結される“配位部位バリアー”を更に含み得る。例え
ば、それは、1以上の酵素基質開裂部位により連結され得る。この実施態様では 、配位部位バリアーは、標的物質がないと、金属イオンの配位部位の少なくとも
1つをブロックするか、または占有する。配位原子がMRI剤の他の成分、即ち、治
療的活性成分、開裂部位、標的部分、リンカーなどにより提供されないとき、配
位部位バリアーが使用される。酵素開裂部位のような治療的遮断部分の他の構成
成分は、配位部位バリアーを金属イオン複合体と共有結合的に連結する鎖として
の役割をする。開裂または配置変化の何れかの結果が、治療的活性成分とその生
理学的標的との相互作用に起因するため、配位部位は、もはやブロックしなくな
り、バルク水は、金属イオンの配位部位の位置で自由に急速に交換され、そのた
めイメージを促進する。

【００８６】 ある実施態様では、図２Ａおよび２Ｂに示すように、配位部位バリアーは、一
方の端で金属イオンに結合している。図２Ａは、開裂点での酵素開裂が、配位部
位バリアーを開放する場合を示している。図２Ｂは、配位部位バリアー除去を誘
発する、薬剤と生理学的標的との相互作用の結果として配置が変化する場合であ
る。他の実施態様では、２つ結合している場合である図２Ｃに示すように、配位
部位バリアーは１箇所以上の開裂部位で金属イオン複合体と結合している。酵素
標的は、片側だけを開裂し得、そのようにして、配位部位バリアーを除去し、配
位部位で水を交換させるが、配位部位バリアーは金属イオン複合体に結合したま
まである。他に、酵素は、金属イオン複合体の配位部位バリアーを完全に開裂し
得る。

【００８７】 好ましい実施態様では、配位部位バリアーは、金属イオンの少なくとも１つの
配位部位を占有する。即ち、配位部位バリアーは、金属イオンに対し、少なくと
も１つの配位原子としての役割をする原子を少なくとも１つ含む。この実施態様
では、配位部位バリアーは、上記定義のようなアルキルアミン基のような、ヘテ
ロアルキル基であり得、アルキルピリジン、アルキルピロリン、アルキルピロリ
ジンおよびアルキルピロール(alkyl pyrole)またはカルボキシル基またはカルボ
ニル基を含む。配位原子に寄与しない配位部位バリアー部分はまた、リンカー基
とみなされ得る。

【００８８】 他の実施態様では、配位部位バリアーは配位部位を直接占有しないが、代わり
にその部位を立体的にブロックする。これはまた、治療的活性成分でも真実であ
り得る。この実施態様では、配位部位バリアーは、上記のようなアルキルまたは
置換基、またはペプチド、タンパク質、核酸などの他の基であり得る。

【００８９】 この実施態様では、配位部位バリアーは、好ましくは２つの酵素基質を通じて
金属イオン複合体の反対側と連結し、図２Ｃに示すように金属イオン複合体の配
位部位上に配位部位バリアーを効果的に“伸張させている”(stretching)。

【００９０】 幾つかの実施態様では、配位部位バリアーは、片側で酵素基質を通じて“伸張
”させ金属イオン複合体に共有結合させ得、下記定義のように他方の側上でリン
カー部分と結合させ得る。他の実施態様では、配位部位バリアーは、単一の酵素
基質を介して片側に結合する。すなわち、金属イオンに対する配位部位バリアー
の親和性は水とのそれよりも高く、そのため、配位部位バリアーおよび酵素基質
を含む治療的遮断部分は、標的酵素がないと、利用可能な配位部位をブロックす
るか、または占有する。

【００９１】 治療的活性成分および配位部位バリアーに加えて、治療的遮断部分はまた、開
裂部位を含み得る。本明細書に記載したように、治療的活性成分を送達する一つ
の方法は、それをMRI剤から切離することである。図１Ｃに総括的に示している ように、配位部位バリアーを開裂し、治療的活性成分をMRI剤に結合させたまま 残し、開裂前は行えなかった方法で薬剤がその標的と相互作用できるようになる
配置において、本発明のMRI剤を形作ることも可能である。幾つかの実施態様で は、配位部位における水の急速交換を弱める配位原子が開裂部位により寄与され
得る。そのため、例えば、タンパク質分解性開裂部位が用いられるとき、配位原
子はペプチド鎖の原子により提供され得る。

【００９２】 好ましい実施態様では、生理学的標的は酵素であり、その開裂部位はその酵素
に対応する。他の場合では、開裂部位は、生理学的標的とは無関係である。この
実施態様では、所望により、開裂部位は病状に特異的であり、例えば開裂部位が
ＨＩＶプロテアーゼ部位であり、治療的活性成分が別のウイルス機能(例えばウ イルス複製)を妨げるように選択されるか、または、特異性のための別のメカニ ズムに依存して非特異的であるか、何れかであり得る。例えば、開裂部位は、“
包括的な”細胞内プロテアーゼ部位であり得、特異性はMRI剤に連結した標的部 分により提供され得、例えば細胞特異的リガンドが使用され得、腫瘍細胞のよう
な特定の細胞セットを標的とするのに使用し得る。

【００９３】 そのため、例えば、タンパク質分解性部位は、プロテーゼによる開裂に使用さ
れ得る。そのため、開裂部位は、決められたプロテアーゼにより開裂され得るペ
プチドまたはポリペプチドを含む。本明細書中の“ペプチド”または“ポリペプ
チド”は、ペプチド結合により共有結合する約２ないし約１５のアミノ酸残基の
化合物を意味する。好ましい実施態様は、約２ないし約８のアミノ酸、最も好ま
しくは約２ないし約４のアミノ酸からなるポリペプチドを利用する。アミノ酸類
似体および擬似ペプチド構造も有用であるけれども、好ましくは、アミノ酸は天
然に生ずるアミノ酸である。ある環境下では、ペプチドは、単一アミノ酸残基の
みであり得る。

【００９４】 同様に、酵素がカルボヒドラーゼであるとき、開裂部位は、標的カルボヒドラ
ーゼにより開裂され得る炭水化物基である。例えば、酵素がラクターゼまたはβ
-ガラクトシダーゼであるとき、開裂部位はラクトースまたはガラクトースであ る。同様の対に、スクラーゼ／スクロース、マルターゼ／マルトース、およびα
-アミラーゼ／アミロースが含まれる。

【００９５】 好ましい実施態様では、開裂部位は、上記した、(OPO(OR₂))_n[式中、nは1ない
し約10の、好ましくは1ないし5、特に好ましくは1ないし3の整数である。]のよ うなリン酸部分である。各Rは、独立して、水素であるか、または本書中で定義 したような置換基であり、水素が好ましい。この実施態様は、開裂酵素がアルカ
リホスファターゼまたはホスホジエステラーゼであるとき、またはこれらのよう
なリン酸を含む部分を開裂することが知られている他の酵素であるときに、特に
有用である。

【００９６】 好ましい実施態様では、開裂部位に、光開裂性(photocleavable)部分を利用す
る。即ち、ある波長の光の照射にさらすことによって、開裂が生じ、その複合体
の少なくとも１つの配位部位における水の交換速度が速くなる。この実施態様は
、特定細胞の運命を追跡する能力が望まれる、特に発生学的生物学的分野(細胞 系譜、ニューロン発生など)に有用である。適切な光開裂性部分は、光照射によ り開裂される“封じ込められた”薬剤に類似する。特に好ましいクラスの光開裂
性部分は、O-ニトロベンジル化合物であり、それは、合成的に治療的遮断部分中
に、エーテル、チオエーテル、エステル(リン酸エステルを含む)、アミン、また
はヘテロ原子との同様な連結(特に酸素原子、窒素原子または硫黄原子)、を介し
て組込まれ得る。また、安息香を基礎とする光開裂性部分も使用される。多種の
適切な光開裂性部分について、上記Molecular Probes Catalogで概略が説明され
ている。

【００９７】 好ましい実施態様では、光開裂部位が以下の構造７に示す構造を有する。この
中ではニトロベンジル光開裂性基を示しているが、当業者に認識されるとおり、
様々な他の部分を使用することができる：

【００９８】

【化１１】

【００９９】 構造７はＤＯＴＡ型キレート化剤を示しているが、当業者に認識されるとおり
、他のキレート化剤も同様に使用することができる。Ｒ₂₆基は本明細書中で定義
するリンカーである。Ｘ₂基は、治療的活性成分および任意の配位部位バリアー など、他の治療的遮断部分も含む。同様に、芳香環上には当業者に公知である置
換基を含んでいても良い。

【０１００】 上述の構成成分に加えて、本発明の治療的遮断部分が、さらに、官能的治療的
遮断部分と同様にリンカー基を含んでいてもよい。また、治療的活性成分および
開裂部位について本明細書中で概説したとおり、配位原子は実際にリンカーによ
って提供され得る。

【０１０１】 リンカー基(本明細書中ではたびたびＲ₂₆で示される)は、金属イオン複合体の
立体的要件を最適にするために使用することができる。即ち、治療的遮断部分と
金属イオンとの相互作用を最適化するため、リンカーを導入して、配位部位を遮
断する。一般的に、リンカー基は構造柔軟性をある程度もたせるように選択され
る。例えば、治療的活性成分が生理学的標的と相互作用するとき、治療的活性成
分が複合体から開裂されない程度であるが、リンカーは治療的活性成分が複合体
からいくらか移動して離れられるようでなければならない(少なくとも一配位部 位での水分子の交換が増加するくらいに)。

【０１０２】 一般的に、適切なリンカー基は、上述のとおり、置換アルキルおよびアリール
基を含むアルキルおよびアリール基、およびアルキルアミン基を含むヘテロアル
キル基(部分的に酸素を含む基)およびヘテロアリール基を含むが、これらに限定
する意図ではない。好ましいリンカー基としてp-アミノベンジル、置換p-アミノ
ベンジル、ジフェニルおよび置換ジフェニル、ベンジルフランなどのアルキルフ
ラン、カルボキシル基、および炭素数１から１０の長さの直鎖アルキル基を含む
。特に好ましいリンカー基として、p-アミノベンジル、メチル、エチル、プロピ
ル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、酢酸、プロピオン酸、アミノブチル、p-アル
キルフェノール類、4-アルキルイミダゾールを含む。リンカー基の選択を、よく
知られている分子モデル技術を使用して一般的に行ない、配位部位および金属イ
オン部位の妨害を最適化する。加えてこのリンカーの長さは、最適結果を得るの
に非常に重要である。

【０１０３】 従って、本発明の治療的遮断部分は、必要であれば、治療的活性成分および所
望の開裂部位、配位部位バリアー、およびリンカーを含むものである。

【０１０４】 いくつかの実施態様では、本発明の金属イオン複合体は、単一の治療的遮断部
分と会合または結合している。この実施態様で、単一の治療的遮断部分は、少な
くとも一配位部位で水分子の交換を妨げる。あるいは、下記に示すように、単一
治療的遮断部分が１以上の配位部位で水分子の交換を妨げることができる。

【０１０５】 他の実施態様では、２以上の治療的遮断部分が単一金属イオン複合体と会合し
、少なくとも一またはそれ以上の配位部位で水分子の交換を妨げる。

【０１０６】 治療的遮断部分は様々な方法で金属イオン複合体に結合させることができ、そ
れらのいくつかを図中に示す。好ましい実施態様では、上述のとおり、治療的遮
断部分をリンカー基を介して金属イオン複合体に結合させる。あるいは、治療的
遮断部分を、直接金属イオン複合体に結合させる；例えば、以下に示すように、
治療的遮断部分はキレート化剤の置換基であり得る。

【０１０７】 好ましい実施態様では、少なくともＲ基の１つをキレート化剤の“アーム(arm
s)”部分に結合させる（例えば、ＤＯＴＡ構造のＲ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁またはＲ₁₂、 またはＤＴＰＡ構造のＲ₁₃、Ｒ₁₄、Ｒ₁₇、Ｒ₂₀またはＲ₂₁で、アルキル(置換お よびヘテロアルキル基を含む)、またはアリール(置換およびヘテロアルキル基を
含む)を含み、すなわち水素より立体的にかさ高い基である）。これは、標準的 なＭＲＩ造影剤について知られているように平衡を水分子の交換を妨げるのに適
切なアームの配位原子の“固定(locking)”位置して誘導するのに特に有用であ る。好ましい基は、炭素数１から６のアルキル基を含むが、とりわけメチル基が
好ましい。

【０１０８】 治療的遮断部分が“アーム”の１つを介して結合させる場合、例えば、治療的
遮断部分が構造８の位置Ｘ₁からＸ₄、または構造９の位置Ｈ、Ｉ、ＪまたはＫに
ある場合にとりわけ好ましい。

【０１０９】 しかし、多すぎる基を含むと、平衡が他の方向にずれて配位原子の効果的な固
定ができなくしてしまう。従って、好ましい実施態様では、結合に対して平衡化
させる他の方法を使用しない限り、これらの位置の１または２つのみが水素以外
の基である。

【０１１０】 様々なパラメーターを使用して、治療的遮断部分を選択し、設計する。配位部
位バリヤーを使用し、かつ、配位部位バリヤーが２面で固定しまたは動かないよ
うにしてある実施態様においては、所定位に固定されているため、治療的遮断部
分の金属イオン複合体に対する配位部位バリアーの親和力はそれほど大きくなく
てもよい。すなわち、この実施態様では、開裂剤がないとき複合体が“オフ”状
態である。しかし、治療的遮断部分がいくらか回転できまたは治療的遮断部分が
柔軟な形で複合体と結合している実施態様、例えば、１面のみに結合していると
きでは、治療的遮断部分はそれらが時間的に主として配位部位を占拠しているよ
うに設計すべきである。

【０１１１】 治療的遮断部分が２面に共有的に結合していないときは、治療的遮断部分の成
分は、治療的遮断部分が十分に複合体と会合し、複合体の少なくとも一配位部位
での水分子のすばやい交換を妨げるように、３つの基本的な相互作用が最大にな
るよう選択するべきである。第一は、治療的遮断部分を複合体と会合させる、治
療的遮断部分と金属イオンの静電気相互作用である。第二はファンデルワールス
および双極子間相互作用である。第三はリガンド相互作用であり、それは、治療
的遮断部分の１つまたはそれ以上の官能性が金属に対する配位原子として作用す
る。さらに、ある構造に強制的になるようにまたは適するようにリンカー基を選
択し、会合している治療的遮断部分方向に平衡化させる。同様に、分子内での脱
離自由度は、特定の構造が優勢となるようにする。従って、例えば、アルキル基
（特にメチル基）を、治療的遮断部分が“Ｘ”の位置に結合している構造６のＲ ₉ からＲ₁₂位と均等位置に加えると、治療的遮断部分が好ましい遮蔽位置になる 。当業者に認識されるとおり、同様の制限を他の実施態様で行うこともできる。

【０１１２】 さらに、治療的遮断部分を金属イオン上に着座させる効果的な“結合(tetheri
ng)”も、以下に概説するように治療的遮断部分のキレート化剤複合体に対する 親和力を増加させるように働く他の非共有相互作用で、工業的に行なうことがで
きる。

【０１１３】 強力な治療的遮断部分が官能的であるかどうか、すなわち、それらが複合体の
好ましい配位部位または配位部位群を十分に占拠しまたは遮断して、すばやい水
分子の交換を妨げているかどうかを容易に試験して知ることができる。従って、
例えば、複合体を強力な治療的遮断部分で作り、次いで治療的遮断部分を持たな
いキレート化剤と画像診断実験で比較する。一旦、治療的遮断部分が充分な“遮
断剤”であることが示されると、生理学的標的(標的と医薬との間の相互作用で あり、開裂または配座変化を起こし、配位部位上が開かれる場合)または開裂剤 どちらかの存在下で実験が繰り返され、水分子交換の増加およびそれにともなう
画像増強がみられる。

【０１１４】 従って、上述のとおり、本発明の金属複合体は、キレート化剤に結合している
常磁性金属イオンと少なくとも１つの治療的遮断部分を含む。好ましい実施態様
として、金属イオン複合体が構造８の式を有する：

【０１１５】

【化１２】

【０１１６】 構造８で、Ｍは、Ｇｄ(III)、Ｆｅ(III)、Ｍｎ(II)、Ｙｔ(III)、およびＤｙ(
III)を含むグループから選択される常磁性金属イオンである。Ａ、Ｂ、Ｃおよび
Ｄはそれぞれ一重または二重結合である。Ｒ₁からＲ₁₂の基は上述の置換基であ り、治療的遮断部分および標的部位を含む。Ｘ₁からＸ₄は-ＯＨ、-ＣＯＯ-、-( ＣＨ₂)_nＯＨ（-ＣＨ₂ＯＨが好ましい）、-(ＣＨ₂)_nＣＯＯ-（-ＣＨ₂ＣＯＯ-が好
ましい）、または治療的遮断部分および標的部位を含む置換基である。nは１か ら１０であり、１から５が好ましい。少なくともＲ₁からＲ₁₂およびＸ₁からＸ₄ の１つは治療的遮断部分である。

【０１１７】 上記の構造のうち、Ａ、Ｂ、ＣまたはＤの何れかまたはすべてが一重または二
重結合である。１つまたはそれ以上の結合が二重結合である場合、単一置換基の
みが二重結合の炭素原子に結合していると理解されるべきである。例えば、Ａが
二重結合のとき、それぞれの炭素へ結合している単一のＲ₁および単一のＲ₂基の
みが存在し得る；好ましい実施態様では、以下に記載するようにＲ₁およびＲ₂基
は水素原子である。好ましい実施態様では、Ａは単一結合であり、それぞれの炭
素が２つのＲ₁基および２つのＲ₂基を有することが可能である。好ましい実施態
様では、単一の治療的遮断部分を除いてこれらの基のすべてが水素原子であるが
、別の実施態様では同じかまたは異なる２つのＲ基を使用する。すなわち、Ｒ₁ の位置に１つの水素および治療的遮断部分が結合しており、Ｒ₂の位置に２つの 水素、２つのアルキル基、または１つの水素原子と１つのアルキル基が結合して
いてもよい。

【０１１８】 Ｘ₁−Ｘ₄基の正確な組成は金属イオンの存在に依存する。すなわち、これらの
基は、金属イオンが存在しない場合、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−（ＣＨ₂）_nＯＨま
たは−（ＣＨ₂）_nＣＯＯＨであり得るが、一方、金属イオンが存在する場合、−
ＯＨ、−ＣＯＯ−、−（ＣＨ₂）_nＯ−または−（ＣＨ₂）_nＣＯＯ−であり得る。

【０１１９】 別の態様では、構造９の式を有する金属イオン複合体を使用する。

【０１２０】

【化１３】 上記の式において、 Ｈ、Ｉ、Ｊ、ＫおよびＬ基の正確な組成は金属イオンの存
在に依存する。すなわち、これらの基は、金属イオンが存在しない場合、−ＯＨ
、−ＣＯＯＨ、−（ＣＨ₂）_nＯＨまたは−（ＣＨ₂）_nＣＯＯＨであり得るが、一
方、金属イオンが存在する場合、−ＯＨ、−ＣＯＯ−、−（ＣＨ₂）_nＯ−または
−（ＣＨ₂）_nＣＯＯ−であり得る。

【０１２１】 この態様において、Ｒ₁₃からＲ₂₁は上記に定義した置換基である。好ましい態
様において、Ｒ₁₃からＲ₂₁は水素である。少なくとも１つのＲ₁₃−Ｒ₂₁、Ｈ，Ｉ
、Ｊ、ＫまたはＬは上記に定義した治療的遮断部分である。

【０１２２】 さらに、本発明の複合体および金属イオン複合体は１以上の標的部分をさらに
含み得る。すなわち、標的部分はＲ位置（または、リンカーまたは治療的遮断部
分などに対して）のいずれかで結合し得るが、好ましい態様においては、標的部
分は配位原子に取って代わらない。

【０１２３】 好ましい態様において、本発明の金属イオン複合体は水溶性または水性溶液可
溶性である。「水性溶液可溶性」とは、ＭＲＩ剤が水性溶媒や他の生理的緩衝液
などの溶液に適当な溶解性を有することを意味する。溶解性は種々の方法で段階
付けできる。ある態様において、米国薬局方の溶解性分類を用いて、金属イオン
複合体を、きわめて溶けやすい（１部の溶質を溶かすのに１部未満の溶媒を要す
る）、溶けやすい（１部の溶質を溶かすのに１から１０部の溶媒を要する）、や
や溶けやすい（１部の溶質を溶かすのに１０から３０部の溶媒を要する）、やや
溶けにくい（１部の溶質を溶かすのに３０から１００部の溶媒を要する）、また
は溶けにくい（１部の溶質を溶かすのに１００から１０００部の溶媒を要する）
のいずれかに段階付けできる。

【０１２４】 特定の金属イオン複合体が水性溶液可溶性かどうかの試験は、日常的に行われ
ており、当業者によく知られている。例えば、ＭＲＩ剤の１部を溶かすの要する
溶媒の部数が測定され、ｇｍ／ｍｌでの溶解度が決められる。

【０１２５】 本発明の複合体は、よく知られた方法で一般に合成される。参照、例えば、Mo
i et al., supra; Tsien et al., supra; Borch et al., J. Am. Chem. Soc., p
2987 (1971); Alexander, (1995), supra; Jackels (1990), supra, U.S. Paten
t Nos. 5,155,215, 5,087,440, 5,219,553, 5,188,816, 4,885,363, 5,358,704,
5,262,532 および 5,707,605; Meyer et al., (1990), supra, Moi et al., (1
988), and McMurray et al., Bioconjugate Chem. 3(2):108-117 (1992));参照 、PCT US95/16377, PCT US96/19900,および PCT US96/15527（出典明示により本
明細書の一部とする）。

【０１２６】 ＤＯＴＡ誘導体についての合成方法は、シクレン環状骨格の窒素置換を望むの
か、炭素置換を望むのかによって変る。窒素置換の合成は、よく知られた方法で
もって、シクレンまたはその誘導体で開始する。参照、例えば、U.S. Patent No
s. 4,885,363 および 5,358,704. 炭素置換には、よく知られた方法を用いる。参照、例えば、Moi et al., supr
a, および Gansow, supra.

【０１２７】 本発明のコントラスト剤は既知の適当な金属イオンと複合される。本明細書に
おいて表示したすべての構造は金属イオンを含むが、本発明のコントラスト剤が
最初から存在する金属イオンを要するわけでない。金属イオンは、酸化物の形態
または塩化物の形態で水に加えて、等量のコントラスト剤組成物と処理すること
ができる。コントラスト剤の付加は水性の溶液または懸濁液として行い得る。中
性のｐＨを維持する必要があるとききは、希酸または希塩基を加えるとよい。温
度を１００℃まで加熱する必要があるかもしれない。

【０１２８】 本発明の複合体は、例えばＨＰＬＣ系を用いて単離および精製し得る。 コントラスト剤の薬学的に許容される塩を含む医薬組成物も、複合体が溶液中
に存在する間に塩基で中性にすることによりつくられる。複合体のいくつかは、
電荷を形式的に帯びていないので、対イオンを必要としない。

【０１２９】 さらに、本発明のＭＲＩ剤はポリマーに付加できる。その方法は、PCT US95/1
4621 および U.S.S.N. 08/690,612 (allowed)（出典明示により本明細書の一部 とする）に一般的に概記されている。簡単に述べると、化学的官能基をＭＲＩ剤
に付加しておくと、複数のＭＲＩ剤がポリマーに化学結合できる。「ポリマー」
は少なくとも２または３のサブユニットを含み、これらが共有結合する。少なく
ともいくつかのモノマーサブユニットは、ＭＲＩ剤の共有結合のための官能基を
含む。ある態様では、カプリング部分を利用して、サブユニットがＭＲＩ剤に共
有結合される。当業者によく知られているように、多種のポリマーが使用可能で
ある。適当なポリマーには、アミノスチレンなどの官能化スチレン、官能化デキ
ストラン、ポリアミノ酸がある。好ましいポリマーはポリシリンなどのポリアミ
ノ酸（ポリ−Ｄ−アミノ酸およびポリ−Ｌ−アミノ酸の両方）であり、リシンな
どのアミノ酸を含有するポリマーが特に好ましい。他の適当なポリアミノ酸とし
ては、ポリグルタミン酸、ポリアスパルギン酸、リシンとグルタミン酸またはア
スパラギン酸とのコポリマー、リシンとアラニン、チロシン、フェニルアラニン
トリプトファンおよび／またはプロリンとのコポリマーがある。

【０１３０】 同様に、ＭＲＩ剤の「多量体」をつくることが可能であり、直接結合するか、
またはリンカーを使用して行う。この方法は、U.S.S.N. 08/690,612 (allowed) （出典明示により本明細書の一部とする）に一般的に概記されている。

【０１３１】 本発明の金属イオン複合剤は、合成されると、磁気共鳴造影コントラストまた
は上昇剤として使用される。特に、本発明の官能性ＭＲＩ剤はいくつかの重要な
用途を有する。それには、薬剤送達の非侵襲的造影、生理的標的と薬剤との相互
作用の造影、遺伝子療法の監視、インビボ遺伝子発現（アンチセンス）、遺伝子
導入、薬剤送達の結果としての細胞内メッセンジャーの変更などがある。

【０１３２】 本発明の金属イオン複合体は、既知のガドリニウムＭＲＩ剤と同様にして用い
ることができる。参照、例えば、Meyer et al., supra; U.S. Patent No. 5,155
,215; U.S. Patent No. 5,087,440; Margerstadt et al., Magn. Reson. Med. 3
:808 (1986); Runge et al., Radiology 166:835 (1988); および Bousquet et
al., Radiology 166:693 (1988)。金属イオン複合体の細胞、組織、患者への投 与は既知の方法で行われる。本発明の目的における「患者」には、ヒトなどの動
物および実験動物などの生物の両方が含まれる。このように、本方法は、ヒト治
療的と獣医学的適用の両方で用いられる。さらに、本発明の金属イオン複合体を
用いて、組織または細胞が造影され得る。参照、例えば、Aguayo et al., Natur
e 322:190 (1986)

【０１３３】 一般的に、本発明のコントラスト剤複合体の無菌水性溶液は、患者に種々の方
法で投与される。経口投与または鞘内特に静脈内投与で、濃度が０．００３から
１．０モルで、用量が体重１ｋｇにつき０．０３、０．０５、０．１、０．２お
よび０．３ミリモルでなされることが推奨される。用量は造影される構造に依存
的である。類似の複合体についての適当な用量レベルがU.S. Patents 4,885,363
および 5,358,704に概記されている。

【０１３４】 さらに、本発明のコントラスト剤の送達は専門化した送達系を介してなされる
。例えば、リポソーム内（参照、Navon, Magn. Reson. Med. 3:876-880 (1986) ）やミクロスフェア内でなされる。これらは種々の臓器から選択的に採取される
(参照、U.S. Patent No. 5,155,215）。

【０１３５】 ある態様において、望ましいのは、本発明のＭＲＩ剤の血中クレアランス時間
（すなわち半減期）を増大することである。この増大には、例えば、炭水化物ポ
リマーをキレート剤に付加する（参照、U.S. Patent No. 5,155,215）。１つの 実施態様では、本発明の組成物の置換Ｒ基として多糖類を用いる。

【０１３６】 好ましい態様では、血液脳関門を通過し得る複合体を使用する。すなわち、知
られているように、ＤＯＴＡ誘導体のカルボン酸の１つをアルコールで置き換え
ると、中性ＤＯＴＡ誘導体が形成され、血液脳関門を通過するようになる。この
ようして、例えば、治療的遮断部分を有し、血液脳関門を通過する中性ＤＯＴＡ
を設計し、脳の障害を処置する。

【０１３７】 出典明示をした文献は全体を本明細書の一部とする。

【図面の簡単な説明】

【図１】 図１Ａ、１Ｂおよび１Ｃは、本発明の態様を記載する。

【図２】 図２Ａ、２Ｂおよび２Ｃは、配位部位バリアー６０の使用を記載
する。

【符号の説明】

５……キレート １０……金属イオン ２０……医薬 ３０……標的 ４０……開裂部位 ５０……配位部位バリアー ６０……配位部位バリアー

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ， ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，Ｄ Ｋ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ， ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，Ｌ Ｕ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ， ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，Ｕ Ｇ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ Ｆターム(参考） 4C085 GG01 GG08 HH07 KB07 KB08 KB11 KB12 KB56 LL20

Claims (13)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 キレート剤および該キレート剤と治療的遮断部分とによって
   配位的に飽和された常磁性金属イオンを含むＭＲＩ剤であって、該治療的遮断部
   分が該キレート剤に共有結合して、少なくとも１つの配位部位における迅速な水
   の交換が妨げられるようなり、該治療的遮断部分が少なくとも治療的活性成分を
   含み、少なくとも１つの配位部位における水の交換が、治療的効果をもたらす生
   理的な標的への該治療的活性成分の送達に際し増加される、ＭＲＩ剤。
2. 【請求項２】 該常磁性金属イオンがＧｄ（III）イオンである、請求項１ のＭＲＩ剤。
3. 【請求項３】 該キレート剤がＤＯＴＡまたは置換ＤＯＴＡである、請求項
   １のＭＲＩ剤。
4. 【請求項４】 該キレート剤がＤＴＰＡまたは置換ＤＴＰＡである、請求項
   １のＭＲＩ剤。
5. 【請求項５】 ＭＲＩ剤が下記式を有し、 【化１】 式中、 Ｍは、Ｇｄ（III）、Ｆｅ（III）、Ｍｎ（II）、Ｙｔ（III）、Ｃｒ（III）およ
   びＤｙ（III）よりなる群から選ばれる常磁性金属イオンであり、 Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは、単一結合または二重結合のいずれかであり、 Ｘ₁、Ｘ_{2 、}Ｘ₃およびＸ₄は、−ＯＨ、−ＣＯＯ−、−ＣＨ₂ＯＨ、−ＣＨ₂ＣＯＯ −、置換基、治療的遮断部分または標的部分であり、 Ｒ₁−Ｒ₁₂は、水素、置換基、治療的遮断部分または標的部分であり、 少なくとも１つのＸ₁−Ｘ₄およびＲ₁−Ｒ₁₂は、治療的遮断部分である、 ＭＲＩ剤。
6. 【請求項６】 Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁またはＲ₁₂の少なくとも１つがアルキル基 である、請求項５のＭＲＩ剤。
7. 【請求項７】 Ｘ１が治療的遮断部分であり、Ｒ９がアルキル基である、請
   求項５のＭＲＩ剤。
8. 【請求項８】 Ａ、Ｂ、ＣおよびＤが単一結合である、請求項５のＭＲＩ剤
   。
9. 【請求項９】 ＭＲＩ剤が下記式を有し、 【化２】 式中、 Ｍは、Ｇｄ（III）、Ｆｅ（III）、Ｍｎ（II）、Ｙｔ（III）、Ｃｒ（III）およ
   びＤｙ（III）よりなる群から選ばれる常磁性金属イオンであり、 Ｈ、Ｉ、Ｊ、ＫおよびＬは、−ＯＨ、−ＣＯＯ−、−ＣＨ₂ＯＨ、−ＣＨ₂ＣＯＯ
   −、置換基、治療的遮断部分または標的部分であり、 Ｒ₁₃−Ｒ₂₁は、水素、置換基、治療的遮断部分または標的部分であり、 少なくとも１つのＨ、Ｉ、Ｊ、Ｋ、ＬおよびＲ₁₃−Ｒ₂₁は、治療的遮断部分であ
   る、 ＭＲＩ剤。
10. 【請求項１０】 該治療的活性成分が酵素阻害剤，トキシン、タンパク質、
    抗体、転写因子および核酸よりなる群から選ばれる、請求項１、５または９のＭ
    ＲＩ剤。
11. 【請求項１１】 薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１、５また
    は９のＭＲＩ剤。
12. 【請求項１２】 治療的活性成分に関連する障害を処置する方法であって、
    請求項１、５または９のＭＲＩ剤を細胞、組織または患者に投与して該細胞、組
    織または患者の磁気共鳴像をつくることを含む、方法。
13. 【請求項１３】 細胞、組織または患者の磁気共鳴像をつくる方法であって
    、請求項１、５または９のＭＲＩ剤を細胞、組織または患者に投与し、そして該
    細胞、組織または患者の磁気共鳴像を起こす、方法。