【発明の詳細な説明】
レプチンレセプターリガンドによる不妊症の治療
発明の背景
1.発明の分野
本発明は一般的に、レプチンレセプターアゴニストの治療的有効量の投与によ
る、不適正な栄養に関連する不妊の治療を必要とする哺乳動物におけるそのよう
な治療のための方法に関する。
2.関連技術の記載
不適切な栄養（栄養失調および肥満の両方）は妊娠上の問題：女性における思
春期の開始の遅延、異常月経周期および不妊症、を起こし得る。また、肥満の男
性においては、授精能力が大きく減少する。肥満患者のレプチンレベルは細身の
患者よりも高いこと、および断食はレプチンの血中濃度を減少させること、が報
告されている。F．Chehab（Chehab，F.F.,ら（1996）、ヒト組換えレプチン処理
によるホモ接合肥満雌性マウスにおける不妊欠損の矯正、Nature Genetics，12:
318-320）はob／obマウスにおける不妊はヒトレプチン処理によって矯正され得
ることを示した。
レプチンレベルは、体脂肪の割合で補正したとしても、性別と思春期に関連が
あるという矛盾のない発見は、リポスタット（lipostat）に限られない規則を示
唆している（Hassink，S.G.、ら（1996）肥満児における血清レプチン：性と発
達への関連性、Pediatrics 98:201-203）。リポスタットという中枢性ホルモン
を性腺の発達と思春期に関連付けるという論理は、必要な体重の達成と思春期の
始まりの間の関連性により示唆されている（Kennedy，G.C.、ら（1963）、ラッ
トにおける思春期開始因子としての体重および摂餌量、J．Physiol．166:408-41
8;Frisch，R.E.、ら（1974）月経周期：維持または発症に必要な最小体重あるい
は身長の決定因子としての肥満度、Science，185:949-951;Frisch，R.E.（1980
）思春期の脂肪組織：それは正常な性的成熟のために必要か？ラット雌およびヒ
ト女性からの証拠、Fed．Proc.，39:2395-2400）。体重あるい
は脂肪は年齢よりも思春期により密接に関連している（Firsch，R.E.ら（1972）
初潮における体重：様々な年齢における富栄養および低栄養少女での類似性、な
らびに歴史的不変性の証拠、Pediatrics，50:445-450）、および低体重あるいは
低脂肪は思春期を遅延させることが知られている（Van der Spuy，Z.(1985)栄養
と生殖、Clin．Obstet．Gynaecol．12:579-604）。ob／obおよびdb／dbマウスは
体重が異常に高くても不妊である。欠損ob／obマウスにレプチンを投与すると生
殖能を回復する（Chehab，F.F.ら(1996)ヒト組換えレプチン処理によるホモ接合
肥満雌性マウスにおける妊娠欠如の矯正。Nature Genetics，12:318-3207）。飢
餓マウスへのレプチン投与はテストステロンおよびLHレベルにおいて飢餓効果を
逆転する傾向がある（Ahima，R.S.ら（1996）レプチンは絶食に対する神経内分
泌反応の主要メディエーターである。投稿中）。視床下部−下垂体−性腺軸（HP
G）におけるレプチンの役割に関する付加的証拠は、性腺ならびに視床下部に豊
富なOB−Rの長い形態の分布からも導かれる（Lee,G.H．ら(1996)糖尿病マウスに
おけるレプチンレセプターの異常スプライシング、Nature 379:632-635）。レプ
チン作用における神経ペプチドY（NPY）の役割は、また、HPGの関与の可能性を
示唆している（Weigle，D.S.ら（1995）、組換えobタンパク質はob／obマウスに
おける摂餌と体重を減少させる、J．Clin．Invest．96:2065-2070）。NPYは黄体
形成ホルモン放出ホルモン（LHRH）放出を変えることが長い間知られていた、そ
してLHRHニューロンを含む視床下部領域にレセプターを有していることが知られ
ている。
これらおよびその他のデータは、Ahimらを飢餓状態のやせたマウスにおける思
春期の開始に対するレプチンの効果の研究に導いた（Ahim，R.S.ら（1996）レプ
チンは正常雌性マウスにおける思春期の開始を促進する。投稿中）。彼らは、体
重増加に変化のない投与量でレプチンを皮下投与すると、膣の開口、発情期、お
よび周期の早期開始を誘起することを見出した。しかしながら、レプチンの血漿
レベルと膣開口またはエストラジオールの間には関連性は見られなかった。
発明の概要
従って、本発明の主要な目的は、不適切な栄養に伴う不妊の治療法を提供する
ことである。体重減少プログラムにおける付属物として使用されるレプチンは体
重減少それ自体に役立つばかりでなく、レプチンレベルの急速な低下により誘導
される生殖能の問題を予防することができる。
レプチンレセプターリガンドの使用は、異常な低または高脂肪症、あるいは相
対的なレプチン欠乏症のいずれかに関連する状態における治療の見込みを示すも
のである。例えば、低脂肪症の被験体における不妊は外部からのレプチン投与に
より回復させることができる。遅延性思春期はレプチン治療法で治療することが
できる。
本発明は、それゆえに、肥満あるいは脂肪不足の被験体における生殖不全およ
び遅延性思春期を治療するためのレプチン、レプチン模倣体あるいは新規レプチ
ン類縁体の有用性を開示するものである。あるいは、レプチンアンタゴニストま
たは中和抗レプチン抗体が性的早熟の治療に使用することができる。
以下において明らかになるであろう本発明の、前述の、および他の目的、利点
および特徴と共に、本発明の性状は本発明の好ましい実施態様の以下の詳細な記
載ならびに添付の請求の範囲を参照することにより、更に明解に理解することが
できるであろう。
発明の好ましい実施態様の詳細な説明
本発明は、不妊に対する安全で効果的な治療、特に、不適切な栄養に関連した
不妊を予防または阻止するための治療を必要とする哺乳動物におけるそのような
治療を提供するという、本発明者らの希望から生まれたものである。
ここに開示し、請求する本発明の目的のために、以下の用語および略号は、以
下のように定義される：
塩基対（bp）_ DNAまたはRNAを指す。略号A、C、G、およびTは、それらがDNA
分子中にあるときは、ヌクレオチドの（デオキシ）アデニン、（デオキシ）シチ
ジン、（デオキシ）グアニン、および（デオキシ）チミンの５’-一リン酸型に
それぞれ相当する。略号U、C、G、およびTは、それらがRNA分子中にあるときは
、ヌクレオシドのウラシル、シチジン、グアニン、およびチミンの５’-一リン
酸型にそれぞれ相当する。二本鎖DNAにおいて、塩基対とは、AはTと、あるいはC
はGと、組み合わされることを言う。DNA／RNAヘテロ二本鎖においては、塩基対
とは、TはUと、あるいはCはGと組み合わされることを言う。
キレートペプチド−多価金属イオンと複合体を形成し得るアミノ酸配列。
DNA−デオキシリボ核酸。
EDTA−エチレンジアミン四酢酸の略号。
ED50−半最大値の略号。
FAB-MS−高速原子衝撃法質量分析法の略号。
視床下部−下垂体−副腎−脂肪軸（HPAAA）：命名した要素（視床下部、下垂
体、副腎および脂肪組織）の各々が、他の活性を制御する化学物質を放出する生
理的調節系。例えば、視床下部により放出されるCRHはACTHの下垂体分泌を刺激
し、次にそれがグルココルチコイドの副腎分泌を刺激し、それが今度は脂肪組織
レプチン放出を調節し、これが最終的に視床下部に戻って作用する。
免疫反応性タンパク質−集合的に、抗体、抗体のフラグメントであって、それ
らが由来した元の抗体分子と類似の性質の抗原と結合することができる抗体のフ
ラグメント、およびPCT出願No．PCT／US８７／０２２０８、国際公開No．WO８８
／０１６４９に記載された一本鎖ポリペプチド結合分子。
mRNA−メッセンジャーRNA。
MWCO−分子量カットオフの略号。
モジュレーティング（転調）−レセプターまたは系の活性の刺激、増強または
阻害。
プラスミド−染色体外自己複製性遺伝子要素。
PMSF−フェニルメチルスルホニルフルオリドの略号。
リーディングフレーム（読み枠）−ヌクレオチド配列から翻訳が、ｔRNA、リ
ボソームおよび関連因子の翻訳装置によりトリプレットで、「読み」が始まるヌ
クレオチド配列で、各トリプレットは特定のアミノ酸に相当する。各トリプレッ
トは別個のものであり、同じ長さであるので、コードする配列は３の倍数でなけ
ればならない。塩基対の挿入または欠失（フレームシフト突然変異と呼ぶ）は同
一DNA分節（セグメント）により、コードされた二つの異なったタンパク質を生
じる。これに対して、安全を守るためには、所望のポリペプチドに相当するトリ
プレットコドンを開始コドンから３の倍数に正しい位置関係に並べなければなら
ない、即ち正確な「リーディングフレーム」が保たれなければならない。キレー
ティングペプチドを含む融合タンパク質の創生に当たっては、構造タンパク質を
コードするDNA配列のリーディングフレームがキレーティングペプチドをコード
するDNA配列に保持されなければならない。
レセプターアゴニスト−レセプターに結合し、レセプターの作用（通常、細胞
内シグナリングの事象であり、あるいは、膜貫通チャンネルを形成するレセプタ
ーの場合は、チャンネルを開くか、または、閉じること）を誘発する化合物。
レセプターアンタゴニスト−レセプターに結合し、そしてレセプターの作用を
（通常、レセプターの結合部位に対する内在性アゴニストと外部競合によって）
ブロックする化合物。
レセプターリガンド−レセプターに結合する化合物。
組換えDNAクローニングベクター−１ないしそれ以上の付加的なDNA分節（セグ
メント）を加えることができるか、または加えられたDNA分子を含む、プラスミ
ドおよびファージを包含する（但しこれらには限定されない）自律複製作用を有
するもの。
組換えDNA発現ベクター−プロモーターが組込まれている組換えDNAクローニン
グベクター。
レプリコン−プラスミドまたはその他のベクターの自律複製を制御し、作動さ
せるDNA配列。
RNA−リボ核酸。
RP-HPLC−逆相高速液体クロマトグラフィーの略号。
転写−DNAのヌクレオチド配列中に含まれている情報が相補的RNA配列に転移さ
れるプロセス。
翻訳−メッセンジャーRNAの遺伝情報がポリペプチド鎖の合成を特定し指図す
るために使用されるプロセス。
トリス−トリス−（ヒドロキシメチル）アミノメタンの略号。
治療−疾病、容態、または障害と闘う目的で被験体（患者）の管理および治療
を言い、本発明のレプチンレセプターリガンドを症状または合併症の発症を予防
するため、症状または合併症を緩和するため、あるいは疾病、容態、または障害
を除くために、投与することを包含する。例えば、肥満を治療するとは、それを
必要とする患者の摂食の阻害、体重増加の阻害および体重減少の誘起を含む。
ベクター−適切な調節配列と結合するとき、形質転換される宿主細胞に特異性
状を与える適当なタンパク質分子に相当するポリヌクレオチド配列を有する、遺
伝子操作における細胞の形質転換に使用されるレプリコン。プラスミド、ウイル
ス、およびバクテリオファージは、それ自身でレプリコンであるので好適なベク
ターである。人工ベクターは、制限酵素、およびリガーゼを用いて、様々な起源
からのDNA分子を切断および結合することにより構築される。ベクターには組換
えDNAクローニングベクター、および組換えDNA発現ベクターを含む。
X-gal−５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−β−D−ガラクトシドの略
号。
レプチンレセプターアゴニストは生殖能障害および遅延性思春期の治療に使用
することができる。あるいは、レプチンアンタゴニストは、単独またはレプチン
に対する特異抗体と結合させて、性的早熟の治療に使用することができる。完全
成熟タンパク質に加えて、タンパク質はMet-AspあるいはMet-Argのようなリーダ
ー配列、または高い物理的安定性を達成するための変換一次配列を含む。
本発明者らは、レプチンレセプターリガンド、特にレプチンレセプターアゴニ
ストまたはレプチンレセプターアンタゴニスト、を投与することにより、不適切
な栄養に関連する不妊の治療に、効果的に使用することができることを見出した
。本明細書で使用される、用語「レセプターリガンド」、「レセプターアゴニス
ト」、および「レセプターアンタゴニスト」は薬理学的に活性な化合物、および
それらの塩を言うものと理解される。本発明において使用される、好ましいレプ
チンレセプターアゴニストは内在性レプチン（即ち、内在性OBタンパク質−転写
および翻訳およびイントロンの除去、タンパク質への翻訳、および分泌性シグナ
ルペプチドが除去されることによる成熟タンパク質（例えば成熟タンパク質のN
−末端バリン−プロリンからC−末端システインまで）へのプロセッシングを行
って肥満遺伝子から生産されたタンパク質）を含む。マウスOBタンパク質および
ヒトOBタンパク質は、Zhang et al.，Nature 372:425-432（1994）に記載されて
いる。ラットOBタンパク質はMurakami et al．Biochem．Biophys．Res．Com．20
9:944-952（1995）に記載されている。ブタおよびウシOB遺伝子およびタン
パク質はEP ０７４３３２１に開示されており、その内容は、参照することによ
り本明細書に取り入れられている。種々の霊長類OB遺伝子およびタンパク質は米
国出願No．０８／７１０，４８３に開示されており、その内容は参照することに
より本明細書に取り入れられている。本発明においてまた、使用に好ましいもの
は、レプチン類似体、好ましくは、一ないしそれ以上のアミノ酸が置換されたレ
プチン類似体であり、より好ましくは５未満、そして最も好ましくは３未満の置
換を有するレプチン類似体である。本発明において使用される、特に好ましいレ
プチン類似体は、WO９６／２３５１５およびWO９６／２３５１７に、Basinskiら
により開示されている式（１）のタンパク質を含む（その内容は参照することに
より本明細書に取り入れられている）：
または、その医薬として許容される塩、式中：
２８番のXaaはGlnまたは欠失であり；
該タンパク質は以下の置換の少なくとも一つを有している：
４番のGlnはGluで置換される；
７番のGlnはGluで置換される；
２２番のAsnはGlnまたはAspで置換される；
２７番のThrはAlaで置換される；
２８番のXaaはGluで置換される；
３４番のGlnはGluで置換される；
５４番のMetはメチオニンスルホキシド、Leu、Ile、Val、AlaまたはGlyで置換
される；
５６番のGlnはGluで置換される；
６２番のGlnはGluで置換される；
６３番のGlnはGluで置換される；
６８番のMetはメチオニンスルホキシド、Leu、Ile、Val、AlaまたはGlyで置換
される；
７２番のAsnはGln、GluまたはAspで置換される；
７５番のGlnはGluで置換される；
７７番のSerはAlaで置換される；
７８番のAsnはGlnまたはAspで置換される；
８２番のAsnはGlnまたはAspで置換される；
９７番のHisはGln、Asn、Ala、Gly、Ser、またはProで置換される；
１００番のTrpはAla、Glu、Asp、Asn、Met、Ile、Phe、Tyr、Ser、Thr、Gly、
Gln、Val、またはLeuで置換される；
１０１番のAlaはSer、Asn、Gly、His、Pro、ThrまたはValで置換される；
１０２番のSerはArgで置換される；
１０３番のGlyはAlaで置換される；
１０５番のGluはGlnで置換される；
１０６番のThrはLysまたはSerで置換される；
１０７番のLeuはProで置換される；
１０８番のAspはGluで置換される；
１１１番のGlyはAspで置換される；
１１８番のGlyはLeuで置換される；
１３０番のGlnはGluで置換される；
１３４番のGlnはGluで置換される；
１３６番のMetはメチオニンスルホキシド、Leu、Ile、Val、AlaまたはGlyで置
換される；
１３８番のTrpはAla、Glu、Asp、Asn、Met、Ile、Phe、Tyr、Ser、Thr、Gly、
Gln、Val、またはLeuで置換され；または
１３９番のGlnはGluで置換される。
更に、本発明のレプチンレセプターリガンドは官能基で置換されていてもよい
。レプチンレセプターに結合する化合物の能力を除去したり著しく減少したりす
ることのない、いかなる公知の認められた官能基のいずれもが意図され、それに
はエステル、アミド、酸、アミン、アルコール、エーテル、チオエーテル等が包
含されるが、これらには限定されない。溶媒和物、例えば、本発明の方法におい
て有用な化合物の水和物も本発明の範囲内に包含される。そのような溶媒和物を
生成する溶媒和の方法は一般的に公知である。
種々の経路による投与に適したレプチンレセプターアゴニストおよびアンタゴ
ニストの医薬の塩はよく知られており、本明細書では詳細に記載する必要はない
。本発明によるレプチンレセプターリガンドおよびそれらの誘導体の医薬として
許容される塩の例としては、塩基塩、例えば適当な塩基から導かれたものを含む
。酸基またはアミノ基の医薬として許容される塩には、限定されるものではない
が、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、イソチオン酸、およびラクトビオン酸のよ
うな有機カルボン酸の塩；メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスル
ホン酸およびｐ−トリルスルホン酸のような有機スルホン酸、および塩酸、硫酸
、リン酸およびスルファミン酸のような無機酸の塩を含む。ヒドロキシ基を有す
る化
合物の医薬として許容される塩は、限定はされないが、Na+のような適当な陽イ
オンと組み合せた化合物の陰イオンを含む。
本発明の更なる実施態様においては、内在性レプチンレセプターアゴニストに
対する抗体を、不適切な栄養に関連した不妊の治療を必要とする哺乳動物に対し
て投与することによるそのような治療の方法を含む。そのような抗体は、レプチ
ンレセプターアゴニストに対する、またはそれらの抗原部位に対する、モノクロ
ーナルまたはポリクローナル抗体であってもよい。
レプチンレセプターアゴニストに対するポリクローナルおよびモノクローナル
抗体の両者は、精製レプチンレセプターアゴニスト、精製組換えレプチンレセプ
ターアゴニスト、これらタンパク質のフラグメント、またはレプチンレセプター
アゴニストと他のタンパク質の精製融合タンパク質で動物を免疫することにより
得ることができる。モノクローナル抗体の場合は、部分的に精製したタンパク質
またはフラグメントが免疫原として使用され得る。両方の型の抗体を得る方法は
、Harlow et al．（1988）Antibodies:A Laboratory Manual，Cold Spring Harb
or Laboratory，Cold Spring Harbor，NY,．726 pp、にあるように、抗体産生に
ついての優れたプロトコールの公知技術としてよく知られている。
ポリクローナル血清は、精製レプチンレセプターアゴニスト、またはそれらの
一部の有効量を適当な実験動物に注射し、動物から血清を採取し、公知の免疫吸
着技術のいずれかにより特異的血清を単離する、ことにより比較的容易に調製さ
れる。モノクローナル抗体は、大量に高い均一性で生産することができるので、
特に有用である。モノクローナル抗体を生産するハイブリドーマ細胞系は、不死
化細胞系と免疫原性調製物に対して感作されたリンパ球とを融合することにより
調製され、そして当業者にとって公知の技術によって行われる。（例えば、Doui
llard，I.Y．and Hoffman，T.，「ハイブリドーマに関する基礎」("Basic Facts
About Hybridomas")Compendium of Immunology，Vol．11，L．Schwartz（編）
（１９８１）：Kohler，G．and Milstein，C.，Nature 256:495-497(1975)、お
よびEuropean Journal of Immunology 6:511-519(1976);Harlow et al.;Koprows
ki，et al.，米国特許４，１７２，１２４;Koprowski et al.，米国特許４，１
９６，２６５およびWands、米国特許４，２７１，１４５参照、
これらの教示は参照することにより本明細書に取り入れられている。）
本発明の、また更なる部分は、上記したレプチンレセプターアゴニストまたは
アンタゴニスト、それらの混合物、および／またはそれらの医薬としての塩、お
よびそれらの医薬として許容される担体の少なくとも一つを含む、不適切な栄養
に関連する不妊を治療するための医薬組成物である。そのような組成物は、例え
ば、Remington's Pharmaceutical Sciences、１７版、Alfonso R．Gennaro編、M
ack Publishing Company，Easton，PA(1985)、に記載されているような、許容さ
れた医薬的手法に従って調製される。
不適切な栄養に関連する不妊の治療方法における治療的使用のために、レプチ
ンレセプターアゴニストまたはアンタゴニスト、あるいはその塩、は１つまたは
それ以上のレプチンレセプターアゴニストまたはアンタゴニスト、あるいはその
塩、およびその医薬として許容される担体を含む医薬組成物の形態で好都合に投
与することができる。適当なキャリアーは、当業界でよく知られており、医薬組
成物の所望の投与形式および方法により変化する。例えば、それらは、充填剤、
結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤等のような稀釈剤または添加剤を
含む。典型的には、担体は固体、液体、または揮発性担体、あるいはそれらの組
合せであってもよい。好ましい一実施態様において、組成物は治療用組成物であ
り、担体は医薬として許容される担体である。
本発明において使用されるレプチンレセプターリガンド、またはそれらの塩は
、担体と共に所定の単位剤型に製剤化される。典型的な単位剤型は錠剤、丸剤、
粉剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒、カプセル、座剤、注射液剤を含み、懸濁剤は
特に好ましい。
夫々の担体は製剤上、他の添加物と融和可能であるという意味において「許容
され得る」ものでなければならず、そして患者に対して障害がないものでなけれ
ばならない。担体は生物学的に許容されそして不活性でなければならない、即ち
細胞にその代謝反応を行わせることができ、それによって本発明の方法での使用
に適したレプチンレセプターリガンドがその阻害活性を発揮させるようなもので
なければならない。
製剤は、経口投与、座剤投与、経鼻投与、局所投与（口腔剤および舌下剤を含
む）、経膣投与および非経口投与（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、および経皮投
与を含む）に適したものを、局所軟膏剤と共に含み、そして経口投与に適切な製
剤が好ましい。
例えば、注射に適した製剤を調製するには、溶液および懸濁喫を滅菌し、好ま
しくは血液と等張にする。注射剤をつくるには、この分野において一般に使われ
ている担体も使用することができ、それらは例えば、水、エチルアルコール、プ
ロピレングリコール、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イ
ソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール、およびソルビテー
トエステル(sorbitate esters)である。これらの例において、塩化ナトリウム、
グルコースあるいはグリセリンのような等張化調節剤の適当量が製剤を等張にす
るために加えることができる。注射用水性滅菌液は、更に、非経口製剤に許容さ
れる抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、その他の添加剤を含有することができる。
製剤は、単位剤型で提供するのが好都合であり、医薬の技術上知られたいかな
る方法によっても調製することができる。そのような方法は、有効成分が、一な
いしそれ以上の付随添加成分を包含してもよい担体と会合するようにする工程を
含む。一般に、製剤は、有効成分と液体担体または細かく粉砕された固体担体、
あるいはそれら両方とが均一かつ近密に会合するように、そして、必要ならば、
製品を成形することによって、調製される。種々の一回投与および多回投与容器
、例えば、密封アンプルおよびバイアル、が当業界でよく知られているように、
使用される。
特に、上記した成分に加えて、本発明の製剤はこのタイプの医薬製剤に通常技
術である他の薬剤も含むことができる。
本発明で使用するのに適したレプチンレセプターリガンドは担体に対し広い割
合で組成物中に存在することができる。例えば、レプチンレセプターリガンドは
０．０１ないし９９．９重量％で存在することができ、より好ましくは、約０．
１ないし９９重量％で存在することができる。更により好ましくは、レプチンレ
セプターリガンドは、組成物の約１ないし７０重量％の量で存在することができ
る。
本発明に従って、患者に投与される、レプチンレセプターアゴニストまたはア
ンタゴニスト、それらの医薬として許容される塩、あるいはそれらの混合物の投
与量は、患者の年齢、体重および種、患者の一般的健康、症状の重症度、組成物
が単独で投与されるか他の治療剤と組み合せて投与されるか、副作用の発生等を
含む、但しこれらに限られるものではないが、いくつかの因子により変化する。
一般的に、不適切な栄養に関連する不妊の治療に適応される適当な投与量は一
日当たり、約０．００１ないし１００mg／kg体重／投与、好ましくは一日当り約
０．１ないし６０mg／kg体重／投与、更により好ましくは一日当り約０．１ない
し４０mg／kg体重／投与、である。所望の用量は、一日を通して適当な間隔で１
ないし６回、またはそれ以上の部分用量投与として投与することができる。レプ
チンレセプターリガンドは月または年にわたって、反復投与することができる、
あるいは患者にゆっくりと定常時に点滴することができる。高投与量および低投
与量でも投与できる。
一日投与量は、例えば、上記した種々のパラメーターを考慮して調節すること
ができる。典型的には、本発明の組成物は、約０．００１ないし１００mg／kg体
重／日の量で投与することができる。しかし、他の量もまた投与することができ
る。
良好な血漿濃度を達成するために、本発明で使用するのに適したレプチンレセ
プターリガンドは、例えば、有効成分の、必要により生理食塩水中、約０．１な
いし１％溶液の静脈注射、あるいは大型丸剤として、経口投与により、投与する
ことができる。
有効成分は、治療のために、局所、経口、経直腸、経鼻、経膣および非経口（
腹腔、皮下、筋肉内、静脈内、皮内、および経皮）経路を含む、いかなる適当な
経路によっても投与することができる。好ましい経路は、患者の状態および年齢
、障害の性質および他の治療剤を含む選択された有効成分により変化する。好ま
しいのは経口経路である。また好ましいのは、局所経路である。しかしながら、
患者の状態により、そして治療がどれ位続いていたかによって、他の経路も利用
し得る。
有効成分は単独で投与することも可能であるが、医薬製剤としての方が好まし
い。本発明の製剤は、上記で明らかにしたように、少なくとも一つの有効成分と
、
一またはそれ以上の許容し得る担体および必要により他の治療剤とを含む。
上記方法はレプチンレセプターリガンドそれ自体、または医薬組成物における
治療剤を含む他の有効成分との組合わせ、で投与することにより実行することが
できる。ここで使用に適した他の治療剤は、所定の目的のために同じかあるいは
別の機構によって有効となるようないずれかの適合性のある医薬、または本治療
剤の機構に相補的な医薬である。これらは、ヒトにおいて、不妊および／または
関連する状態の治療に有効な薬剤を含む。
併用療法に利用される化合物は、分離されたまたは併用した製剤のいずれかで
、同時に投与することができ、あるいは、本発明の化合物よりも異なった時機、
例えば、併用効果が達成されるように経時的に、投与することができる。投与の
量および方式は、好ましくは標準用量を最初は低くして、そして得られた結果を
力価測定することにより、実務医師により調整される。本発明の治療法は実務医
師により決定された他の治療と共に用いることができる。
本発明は、本明細書に種々の特定の材料、方法および実施例を参照して記載さ
れ説明されたが、本発明は、その目的のために選択された特定の材料、材料の組
合わせ、および手順に限定されるものでないことが理解される。そのような詳細
の多数の変形は、当業者によって、示唆されることができ、認識されるものであ
る。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION Treatment of Infertility with Leptin Receptor Ligand Background of the Invention 1. Field of the Invention The present invention generally relates to the administration of a therapeutically effective amount of a leptin receptor agonist to infertility associated with improper nutrition. And methods for such treatment in mammals in need of such treatment. 2. Description of the Related Art Inappropriate nutrition (both malnutrition and obesity) can cause pregnancy problems: delayed onset of puberty, abnormal menstrual cycle and infertility in women. In addition, in obese men, the insemination ability is greatly reduced. It has been reported that leptin levels in obese patients are higher than lean patients, and that fasting reduces blood leptin levels. F. Chehab (Chehab, FF, et al. (1996), Correction of Fertility Deficiency in Homozygous Obese Female Mice by Human Recombinant Leptin Treatment, Nature Genetics, 12: 318-320) Infertility in ob / ob Mice Is Corrected by Human Leptin Treatment Showed that you get. The consistent finding that leptin levels are linked to gender and puberty, even when corrected for body fat percentages, suggests rules that are not limited to lipostat (Hassink, SG, et al.). (1996) Serum leptin in obese children: link to gender and development, Pediatrics 98: 201-203). The logic of associating a central hormone, lipostat, with gonadal development and puberty has been suggested by an association between achieving required weight and onset of puberty (Kennedy, GC, et al. (1963); Weight and food intake as puberty factors in children, J. Physiol. 166: 408-418; Frisch, RE, et al. (1974) Menstrual cycle: as a determinant of minimum weight or height required for maintenance or onset Obesity, Science, 185: 949-951; Frisch, RE (1980) Adolescent adipose tissue: is it necessary for normal sexual maturation? Evidence from rat and human females, Fed.Proc., 39 : 2395-2400). Body weight or fat is more closely related to puberty than age (Firsch, RE et al. (1972) Body weight at menarche: similarities in eutrophic and malnourished girls at various ages, and evidence for historical constancy And Pediatrics, 50: 445-450), and low body weight or low fat are known to delay puberty (Van der Spuy, Z. (1985) Nutrition and reproduction, Clin. Obstet. Gynaecol. 12: 579-604). ob / ob and db / db mice are infertile even if they are overweight. Administration of leptin to defective ob / ob mice restores fertility (Chehab, FF et al. (1996) Correction of pregnancy deficiency in homozygous obese female mice by treatment with human recombinant leptin. Nature Genetics, 12: 318-3207). Leptin administration to starved mice tends to reverse the starvation effect on testosterone and LH levels (Ahima, RS et al. (1996) Leptin is a major mediator of the neuroendocrine response to fasting. Submitting). Additional evidence for a role for leptin in the hypothalamus-pituitary-gonad axis (HP G) is also derived from the distribution of long forms of OB-R, abundant in the gonads and hypothalamus (Lee, GH. Et al. (1996)). Abnormal splicing of leptin receptor in diabetic mice, Nature 379: 632-635). The role of neuropeptide Y (NPY) in leptin action also suggests a possible involvement of HPG (Weigle, DS et al. (1995) that recombinant ob protein regulates feeding and body weight in ob / ob mice. J. Clin. Invest. 96: 2065-2070). NPY has long been known to alter luteinizing hormone-releasing hormone (LHRH) release, and is known to have receptors in the hypothalamus region, including LHRH neurons. These and other data have led to the study of the effects of leptin on onset of puberty in Ahim et al. Starved lean mice (Ahim, RS et al. (1996) Leptin promotes puberty initiation in normal female mice. .Posting). They found that subcutaneous administration of leptin at a dose that did not alter weight gain induced vaginal opening, estrus, and early onset of the cycle. However, no relationship was found between leptin plasma levels and vaginal opening or estradiol. SUMMARY OF THE INVENTION Accordingly, a primary object of the present invention is to provide a method of treating infertility associated with inappropriate nutrition. Leptin, used as an adjunct in weight loss programs, not only serves weight loss itself, but can also prevent fertility problems induced by a rapid drop in leptin levels. The use of leptin receptor ligands shows promise for treatment in conditions associated with either abnormally low or hyperlipidemia, or relative leptin deficiency. For example, infertility in a hypolipidemic subject can be remedied by external leptin administration. Late puberty can be treated with leptin therapy. The present invention therefore discloses the utility of leptin, leptin mimetics or novel leptin analogs for treating reproductive dysfunction and delayed puberty in obese or fat deficient subjects. Alternatively, leptin antagonists or neutralizing anti-leptin antibodies can be used to treat sexual precociousness. For a description of the invention, together with the above and other objects, advantages and features of the invention, which will become apparent hereinafter, reference is made to the following detailed description of preferred embodiments of the invention and the appended claims. By doing so, you will be able to understand more clearly. DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS OF THE INVENTION The present invention provides a safe and effective treatment for infertility, particularly in mammals in need of such treatment to prevent or prevent inadequate nutrition-related infertility. It stems from the inventors' desire to provide treatment. For the purposes of the invention disclosed and claimed herein, the following terms and abbreviations are defined as follows: base pair (bp) _refers to DNA or RNA. The abbreviations A, C, G, and T are the 5'-monophosphates of the nucleotides (deoxy) adenine, (deoxy) cytidine, (deoxy) guanine, and (deoxy) thymine when they are in a DNA molecule. Each corresponds to a mold. The abbreviations U, C, G, and T correspond to the 5'-monophosphate forms of the nucleosides uracil, cytidine, guanine, and thymine, respectively, when they are in an RNA molecule. In double-stranded DNA, base pairing means that A is combined with T or C is combined with G. In DNA / RNA heteroduplexes, base pairing means that T is combined with U or C with G. Chelating peptide-an amino acid sequence capable of forming a complex with a polyvalent metal ion. DNA-deoxyribonucleic acid. EDTA-an abbreviation for ethylenediaminetetraacetic acid. ED50-Abbreviation for half maximum. FAB-MS-Abbreviation for fast atom bombardment mass spectrometry. Hypothalamic-pituitary-adrenal-fat axis (HPAAA): A physiological regulatory system in which each of the named elements (hypothalamus, pituitary, adrenal and adipose tissue) releases chemicals that control other activities. For example, CRH released by the hypothalamus stimulates pituitary secretion of ACTH, which in turn stimulates adrenal secretion of glucocorticoids, which in turn regulates adipose tissue leptin release, which eventually becomes hypothalamic. Acts back to. Immunoreactive Proteins-Collectively, antibodies, fragments of antibodies capable of binding antigens of similar properties to the antibody molecule from which they were derived, and PCT Application No. PCT / US87 / 02208, International Publication No. A single-chain polypeptide binding molecule as described in WO88 / 01649. mRNA-messenger RNA. MWCO-abbreviation for molecular weight cutoff. Modulating-the stimulation, enhancement or inhibition of the activity of a receptor or system. Plasmid-extrachromosomal self-replicating genetic element. Abbreviation for PMSF-phenylmethylsulfonyl fluoride. Reading frame-a nucleotide sequence whose translation starts from a nucleotide sequence in a triplet by the translator of tRNAs, ribosomes and related factors, where the "reading" begins, each triplet corresponding to a particular amino acid. Since each triplet is distinct and of the same length, the coding sequence must be a multiple of three. Base pair insertions or deletions (referred to as frameshift mutations) result in two different proteins encoded by the same DNA segment. On the other hand, in order to maintain safety, the triplet codon corresponding to the desired polypeptide must be arranged in the correct positional relationship to a multiple of 3 from the start codon, that is, if the correct "reading frame" is maintained. No. In creating a fusion protein containing a chelating peptide, the reading frame of the DNA sequence encoding the structural protein must be retained in the DNA sequence encoding the chelating peptide. Receptor agonist-a compound that binds to a receptor and triggers the action of the receptor (usually an event of intracellular signaling or, in the case of a receptor forming a transmembrane channel, opening or closing the channel). Receptor antagonist-a compound that binds to a receptor and blocks the action of the receptor (usually by external competition with an endogenous agonist for the binding site of the receptor). Receptor ligand-a compound that binds to the receptor. Recombinant DNA cloning vector-1 Autonomous, including, but not limited to, plasmids and phages, which can include or include additional DNA segments (segments). Having a duplicating effect. Recombinant DNA expression vector-A recombinant DNA cloning vector into which a promoter has been incorporated. Replicon-A DNA sequence that controls and activates autonomous replication of a plasmid or other vector. RNA-ribonucleic acid. RP-HPLC-abbreviation for reversed-phase high-performance liquid chromatography. Transcription-The process by which information contained in a nucleotide sequence of DNA is transferred to a complementary RNA sequence. Translation-The process by which the genetic information of messenger RNA is used to identify and direct the synthesis of polypeptide chains. Abbreviation for tris-tris- (hydroxymethyl) aminomethane. Treatment-refers to the management and treatment of a subject (patient) for the purpose of combating a disease, condition, or disorder, using the leptin receptor ligands of the invention to prevent the onset of symptoms or complications, or to alleviate symptoms or complications. Or to eliminate a disease, condition, or disorder. For example, treating obesity includes inhibiting eating, inhibiting weight gain and inducing weight loss in a patient in need thereof. Vector-A replicon used to transform cells in genetic engineering, having a polynucleotide sequence corresponding to the appropriate protein molecule that, when combined with the appropriate regulatory sequences, confers specificity on the host cell to be transformed. Plasmids, viruses, and bacteriophages are preferred vectors because they are replicons by themselves. Artificial vectors are constructed by cutting and joining DNA molecules from various sources using restriction enzymes, and ligases. Vectors include recombinant DNA cloning vectors and recombinant DNA expression vectors. X-gal-5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactoside. Leptin receptor agonists can be used to treat fertility disorders and delayed puberty. Alternatively, a leptin antagonist can be used alone or in combination with a specific antibody directed against leptin to treat precocious sexual maturity. In addition to the fully mature protein, the protein contains a leader sequence, such as Met-Asp or Met-Arg, or a converted primary sequence to achieve high physical stability. The present inventors have found that the administration of leptin receptor ligands, especially leptin receptor agonists or leptin receptor antagonists, can be used effectively for the treatment of infertility associated with inappropriate nutrition. As used herein, the terms "receptor ligand", "receptor agonist", and "receptor antagonist" are understood to refer to pharmacologically active compounds, and salts thereof. Preferred leptin receptor agonists for use in the present invention are endogenous leptin (i.e., endogenous OB protein-the mature protein (transcription and translation and removal of introns, translation into protein, and secretory signal peptide by removal of secretory signal peptides). For example, proteins produced from the obesity gene by processing the mature protein (from N-terminal valine-proline to C-terminal cysteine). Mouse and human OB proteins are described in Zhang et al., Nature 372: 425-432 (1994). Rat OB protein was obtained from Murakami et al. Biochem. Biophys. Res. Com. 20 9: 944-952 (1995). The porcine and bovine OB genes and proteins are disclosed in EP 0743321, the contents of which are incorporated herein by reference. Various primate OB genes and proteins are described in US Application No. 08 / 710,483, the contents of which are incorporated herein by reference. Also preferred for use in the present invention are leptin analogs, preferably leptin analogs in which one or more amino acids have been substituted, more preferably having less than 5 and most preferably having less than 3 substitutions. Leptin analog. Particularly preferred leptin analogs for use in the present invention include the proteins of formula (1) disclosed by Basinski et al. In WO 96/23515 and WO 96/23517, the contents of which are incorporated herein by reference. Has been incorporated): Or, a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein: Xaa at position 28 is a Gln or deletion; said protein has at least one of the following substitutions: Gln at position 4 is substituted with Glu Gln at position 7 is substituted with Glu; Asn at position 22 is substituted with Gln or Asp; Thr at position 27 is substituted with Ala; Xaa at position 28 is substituted with Glu; Is replaced with Glu; Met at position 54 is replaced with methionine sulfoxide, Leu, Ile, Val, Ala or Gly; Gln at position 56 is replaced with Glu; Gln at position 62 is replaced with Glu Gln at position 63 is replaced with Glu; Met at position 68 is replaced with methionine sulfoxide, Leu, Ile, Val, Ala or Gly; Asn at position 72 is replaced with Gln, Glu or Asp Gln at position 75 is replaced with Glu; Ser at position 77 is replaced with Ala; Asn at position 78 is replaced with Gln or Asp; Asn at position 82 is replaced with Gln or Asp; His at position 97 is replaced with Gln, Asn, Ala, Gly, Ser, or Pro; Trp at position 100 is Ala, Glu, Asp, Asn, Met, Ile, Phe, Tyr, Ser, Thr, Gly, Gln, Val, or Leu; Ala at position 101 is replaced with Ser, Asn, Gly, His, Pro, Thr, or Val; Is substituted with Arg; Gly at position 103 is substituted with Ala; Glu at position 105 is substituted with Gln; Thr at position 106 is substituted with Lys or Ser; Leu at position 107 is Pro Asp at position 108 is substituted with Glu; Gly at position 111 is substituted with Asp; Gly at position 118 is substituted with Leu; Gln at position 130 is substituted with Glu; 134 Gln at position 136 is replaced with Glu; Met at position 136 is replaced with methionine sulfoxide, Leu, Ile, Val, Ala or Gly; Trp at position 138 is Ala, Glu, Asp, Asn, Met Ile, Phe, Tyr, Ser, Thr, Gly, Gln, Val or substituted by Leu,; or 139 of Gln is substituted with Glu. Further, the leptin receptor ligand of the present invention may be substituted with a functional group. Any of the known recognized functional groups which do not abolish or significantly reduce the ability of the compound to bind to the leptin receptor are contemplated, including esters, amides, acids, amines, alcohols, ethers, Examples include, but are not limited to, thioethers and the like. Solvates, for example, hydrates of compounds useful in the methods of the present invention, are also included within the scope of the present invention. Methods of solvation to produce such solvates are generally known. Pharmaceutical salts of leptin receptor agonists and antagonists suitable for administration by various routes are well known and need not be described in detail here. Examples of pharmaceutically acceptable salts of the leptin receptor ligands and their derivatives according to the invention include base salts, for example those derived from a suitable base. Pharmaceutically acceptable salts of acid or amino groups include, but are not limited to, salts of organic carboxylic acids such as acetic acid, lactic acid, tartaric acid, malic acid, isothioic acid, and lactobionic acid; methanesulfonic acid And salts of organic sulfonic acids such as ethanesulfonic acid, benzenesulfonic acid and p-tolylsulfonic acid, and inorganic acids such as hydrochloric acid, sulfuric acid, phosphoric acid and sulfamic acid. Pharmaceutically acceptable salts of compounds having a hydroxy group include, but are not limited to, Na + And the anions of the compounds in combination with suitable cations such as A further embodiment of the present invention includes a method of such treatment by administering an antibody to an endogenous leptin receptor agonist to a mammal in need of treatment for inadequate nutrition-related infertility. . Such antibodies may be monoclonal or polyclonal antibodies against leptin receptor agonists or against their antigenic sites. Both polyclonal and monoclonal antibodies to a leptin receptor agonist can be obtained by immunizing an animal with a purified leptin receptor agonist, a purified recombinant leptin receptor agonist, a fragment of these proteins, or a purified fusion protein of a leptin receptor agonist and another protein. Can be. In the case of monoclonal antibodies, partially purified proteins or fragments can be used as immunogens. Methods for obtaining both types of antibodies are described in Harlow et al. (1988) Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, Laboratory, Cold Spring Harbor, NY,. 726 pp, as is well known in the art for excellent protocols for antibody production. Polyclonal sera are injected into a suitable experimental animal with an effective amount of a purified leptin receptor agonist, or a portion thereof, and the serum is collected from the animal and the specific serum is isolated by any of the known immunosorbent techniques. It is relatively easy to prepare. Monoclonal antibodies are particularly useful because they can be produced in large quantities with high uniformity. Hybridoma cell lines producing monoclonal antibodies are prepared by fusing immortalized cell lines with lymphocytes sensitized to an immunogenic preparation, and are performed by techniques known to those skilled in the art. (For example, Douillard, IY. And Hoffman, T., "Basic Facts About Hybridomas") Compendium of Immunology, Vol. 11, L. Schwartz (eds.) (1981): Kohler, G. and Milstein, C., Nature 256: 495-497 (1975), and European Journal of Immunology 6: 511-519 (1976); Harlow et al .; Koprows ki, et al., US Patent 4,172,124; Koprowski. et al., U.S. Pat. No. 4,196,265 and Wands, U.S. Pat. No. 4,271,145, the teachings of which are incorporated herein by reference.) Still further portions of the present invention Treats inadequate nutrition-related infertility comprising at least one of the leptin receptor agonists or antagonists described above, mixtures thereof, and / or their pharmaceutically acceptable salts, and their pharmaceutically acceptable carriers Pharmaceutical group to do Thing is. Such compositions are described, for example, in Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th edition, Alfonso R. It is prepared according to accepted pharmaceutical procedures, as described in Gennaro eds., Mack Publishing Company, Easton, PA (1985). For therapeutic use in methods of treating infertility associated with inadequate nutrition, leptin receptor agonists or antagonists, or salts thereof, may include one or more leptin receptor agonists or antagonists, or salts thereof, and pharmaceuticals thereof. It can be conveniently administered in the form of a pharmaceutical composition comprising an acceptable carrier. Suitable carriers are well known in the art and will vary with the desired mode of administration and method of pharmaceutical composition. For example, they include diluents or additives such as fillers, binders, wetting agents, disintegrants, surfactants, lubricants and the like. Typically, the carrier may be a solid, liquid, or volatile carrier, or a combination thereof. In one preferred embodiment, the composition is a therapeutic composition and the carrier is a pharmaceutically acceptable carrier. The leptin receptor ligand or a salt thereof used in the present invention is formulated together with a carrier into a predetermined unit dosage form. Typical unit dosage forms include tablets, pills, powders, solutions, suspensions, emulsions, granules, capsules, suppositories, injection solutions, with suspensions being particularly preferred. Each carrier must be pharmaceutically acceptable and "acceptable" in the sense that it is compatible with the other additives, and must not be harmful to the patient. The carrier must be biologically acceptable and inert, that is, capable of causing the cell to undergo its metabolic reaction, whereby a leptin receptor ligand suitable for use in the methods of the present invention exerts its inhibitory activity. It must be something that causes it. Formulations include oral, suppository, nasal, topical (including buccal and sublingual), vaginal and parenteral (subcutaneous, intramuscular, intravenous, intradermal, and transdermal) Suitable formulations include those with topical ointments, and formulations suitable for oral administration. For example, to prepare a formulation suitable for injection, solutions and suspensions are sterilized and are preferably made isotonic with blood. For preparing injections, carriers commonly used in this field can also be used, such as water, ethyl alcohol, propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene. Sorbitol and sorbitate esters. In these instances, an appropriate amount of a tonicity adjusting agent such as sodium chloride, glucose or glycerin can be added to render the formulation isotonic. The aqueous sterile liquid for injection can further contain an antioxidant, a buffer, a bacteriostat and other additives that are acceptable for parenteral preparations. The formulations may conveniently be presented in unit dosage form and may be prepared by any of the methods known in the art of pharmacy. Such methods include the step of bringing the active ingredient into association with a carrier which may contain one or more accessory ingredients. In general, the formulations are prepared by uniformly and intimately bringing into association the active ingredient with liquid carriers or finely divided solid carriers or both, and, if necessary, shaping the product. A variety of single and multi-dose containers, for example, sealed ampules and vials, are used as is well known in the art. In particular, in addition to the components described above, the formulations of the present invention may also contain other agents which are conventional in pharmaceutical preparations of this type. Leptin receptor ligands suitable for use in the present invention can be present in compositions in a wide variety of carriers. For example, the leptin receptor ligand can be present at 0.01 to 99.9% by weight, and more preferably, at about 0.1%. It can be present at 1 to 99% by weight. Even more preferably, the leptin receptor ligand can be present in an amount of about 1 to 70% by weight of the composition. In accordance with the present invention, the dosage of a leptin receptor agonist or antagonist, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a mixture thereof, administered to a patient may vary depending on the age, weight and species of the patient, general health of the patient, symptoms of the patient. The severity will vary depending on a number of factors, including but not limited to, whether the composition is administered alone or in combination with other therapeutic agents, occurrence of side effects, and the like. In general, a suitable dosage adapted for the treatment of infertility associated with inappropriate nutrition is about 0.001 to 100 mg / kg body weight per day, preferably about 0.1 to 60 mg / kg per day. Body weight / dose, even more preferably about 0.1 to 40 mg / kg body weight / dose per day. The desired dose can be administered as one to six, or more, partial dose administrations at appropriate intervals throughout the day. Leptin receptor ligands may be administered repeatedly over the course of a month or year, or may be slowly infused into a patient at a steady time. High and low doses can be administered. The daily dose can be adjusted, for example, taking into account the various parameters mentioned above. Typically, the compositions of the present invention can be administered in an amount of about 0.001 to 100 mg / kg body weight / day. However, other amounts can also be administered. In order to achieve good plasma concentrations, leptin receptor ligands suitable for use in the present invention include, for example, intravenous injections of about 0.1 to 1% solution of the active ingredient, optionally in saline, or large As a pill, it can be administered orally. The active ingredient may be administered by any suitable route for treatment, including topical, oral, rectal, nasal, vaginal and parenteral (peritoneal, subcutaneous, intramuscular, intravenous, intradermal, and transdermal) routes Can also be administered. The preferred route will depend on the condition and age of the patient, the nature of the disorder and the selected active ingredient, including other therapeutic agents. Preferred is the oral route. Also preferred is the local route. However, other routes may be available depending on the condition of the patient and how long the treatment has been ongoing. Although it is possible for the active ingredient to be administered alone, it is more preferable as a pharmaceutical preparation. The formulations of the present invention, as set forth above, comprise at least one active ingredient, one or more acceptable carriers and optionally other therapeutic agents. The above methods can be carried out by administering the leptin receptor ligand itself or in combination with other active ingredients, including therapeutic agents, in a pharmaceutical composition. Other therapeutic agents suitable for use herein include any compatible medicament that is effective by the same or another mechanism for a given purpose, or a medicament complementary to the mechanism of the therapeutic agent. It is. These include agents that are effective in treating infertility and / or related conditions in humans. The compounds utilized in combination therapy can be administered simultaneously, either in separate or combined preparations, or at different times than the compounds of the present invention, e.g., so that a combined effect is achieved. Over time, it can be administered. Dosage amount and mode are adjusted by the practitioner, preferably by lowering the standard dose initially and titrating the results obtained. The treatments of the present invention can be used with other treatments determined by the practitioner. Although the present invention has been described and described herein with reference to various specific materials, methods and examples, the present invention is not limited to the specific materials, combinations of materials selected for that purpose. It is understood that the invention is not limited to the procedure. Numerous variations of such details can be suggested and recognized by those skilled in the art.
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フロントページの続き
(81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，
ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ
Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ
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ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，Ｖ
Ｎ，ＹＵ，ＺＷ
(72)発明者 ヘイマン，マーク，エル.
アメリカ合衆国，インディアナ，インディ
アナポリス，ブルックビュー サークル
7523
(72)発明者 カロ，ジョセ，エフ.
アメリカ合衆国，インディアナ，カーメ
ル，ヘザーストーン プレース 12414────────────────────────────────────────────────── ───
Continuation of front page
(81) Designated countries EP (AT, BE, CH, DE,
DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, L
U, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF)
, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE,
SN, TD, TG), AP (GH, GM, KE, LS, M
W, SD, SZ, UG, ZW), EA (AM, AZ, BY)
, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM), AL, AM
, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY,
CA, CH, CN, CU, CZ, DE, DK, EE, E
S, FI, GB, GE, GH, GM, GW, HU, ID
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LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MD, M
G, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT
, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL,
TJ, TM, TR, TT, UA, UG, US, UZ, V
N, YU, ZW
(72) Inventor Hayman, Mark, L.
United States, Indiana, Indiana
Annapolis, Brookview Circle
7523
(72) Inventor Caro, Jose, F.
United States, Indiana, Carme
Le, Heatherstone Place 12414