JP2001231542A - 振盪培養容器及び振盪培養方法 - Google Patents
振盪培養容器及び振盪培養方法Info
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 高い換気能、高い酸素供給能を有する長期培
養が可能な振盪容器を提供することを目的とする。 【構成】 換気手段を有する円筒形状をした振盪培養容
器であって、該容器の内面に液流動を制御する誘導部材
を少なくとも一カ所以上に突設したことを特徴とする振
盪培養容器である。
養が可能な振盪容器を提供することを目的とする。 【構成】 換気手段を有する円筒形状をした振盪培養容
器であって、該容器の内面に液流動を制御する誘導部材
を少なくとも一カ所以上に突設したことを特徴とする振
盪培養容器である。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は優れた通気効果を有
する振盪培養容器に関する。
する振盪培養容器に関する。
【０００２】
【従来技術】従来より微生物、植物組織の振盪培養を行
うに際しては、培養液中に細胞（組織）を入れ振盪させ
て気体と培養液との接触を良くして行っている。そし
て、この好気培養を行う容器としては、三角フラスコが
広く使用されてきた。しかしながら、三角フラスコの換
気性を調べたところ、三角フラスコには外部の空気と内
部の気相ガスを換気する能力が欠けていることを見出し
た。つまり従来好気条件として考えられてきた三角フラ
スコ内が、実は培養中に発生する炭酸ガスにより嫌気条
件になってしまうのである。
うに際しては、培養液中に細胞（組織）を入れ振盪させ
て気体と培養液との接触を良くして行っている。そし
て、この好気培養を行う容器としては、三角フラスコが
広く使用されてきた。しかしながら、三角フラスコの換
気性を調べたところ、三角フラスコには外部の空気と内
部の気相ガスを換気する能力が欠けていることを見出し
た。つまり従来好気条件として考えられてきた三角フラ
スコ内が、実は培養中に発生する炭酸ガスにより嫌気条
件になってしまうのである。
【０００３】このような三角フラスコの問題点の解決策
として、先に箱型フラスコを振盪容器として使用するこ
とを提案した（特開平１０−９９０７１号公報参照）。
この箱型フラスコは底面が正方形の柱状の形状で、その
上部側面２ヵ所にガス移動用のメンブランフィルターを
取付けたフラスコである。この箱型フラスコは、高い換
気効果を有しており、同時に高い酸素供給能を示し、酵
母や細菌の培養に優れている。反面、この箱型フラスコ
においては回転時の液流動に伴い培養液が激しく飛散す
るためメンブランフィルターに付着することがあり、長
期の培養には適さない場合がある。また、円筒型フラス
コは高い換気効果を有するが、酸素供給能が低いことが
わかり、好気培養フラスコとして適しているものとはい
えない。
として、先に箱型フラスコを振盪容器として使用するこ
とを提案した（特開平１０−９９０７１号公報参照）。
この箱型フラスコは底面が正方形の柱状の形状で、その
上部側面２ヵ所にガス移動用のメンブランフィルターを
取付けたフラスコである。この箱型フラスコは、高い換
気効果を有しており、同時に高い酸素供給能を示し、酵
母や細菌の培養に優れている。反面、この箱型フラスコ
においては回転時の液流動に伴い培養液が激しく飛散す
るためメンブランフィルターに付着することがあり、長
期の培養には適さない場合がある。また、円筒型フラス
コは高い換気効果を有するが、酸素供給能が低いことが
わかり、好気培養フラスコとして適しているものとはい
えない。
【０００４】本発明は上記の問題を解決すべく高い酸素
供給能と換気能を有し、且つ長期培養が可能な振盪容器
の開発について検討した結果、従来の換気効果が高く酸
素供給効果の高かった箱型フラスコに換えて新規な振盪
培養用容器を開発し本発明を完成したもので、本発明の
目的は、高い換気能、高い酸素供給能を有する長期培養
が可能な振盪培養用容器を提供することである。
供給能と換気能を有し、且つ長期培養が可能な振盪容器
の開発について検討した結果、従来の換気効果が高く酸
素供給効果の高かった箱型フラスコに換えて新規な振盪
培養用容器を開発し本発明を完成したもので、本発明の
目的は、高い換気能、高い酸素供給能を有する長期培養
が可能な振盪培養用容器を提供することである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明の要旨は、換気手
段を有する円筒形状をした振盪培養容器であって、該容
器の内面に液流動に乱れを発生し、且つ必要以上の液の
飛散を防止しつつ乱れを誘導する（以下、これを「制御
する」と表現する）誘導部材を少なくとも一カ所以上に
突設したことを特徴とする振盪培養容器である。
段を有する円筒形状をした振盪培養容器であって、該容
器の内面に液流動に乱れを発生し、且つ必要以上の液の
飛散を防止しつつ乱れを誘導する（以下、これを「制御
する」と表現する）誘導部材を少なくとも一カ所以上に
突設したことを特徴とする振盪培養容器である。
【０００６】即ち、本発明は円筒状の振盪培養容器の内
周面に沿って誘導部材を突設することにより振盪に際し
て培養液の液流動の不要な培養液の飛散を抑えつつ制御
されて乱れを誘導し気液接触面積の増大を図るのであ
る。誘導部材としては板状のものを培養容器内の液面に
対して斜めに傾斜しているのが好ましく、また、その形
状としては波形に撓んでいるものが好ましく、正弦曲線
状に撓んでいるものがより好ましい
周面に沿って誘導部材を突設することにより振盪に際し
て培養液の液流動の不要な培養液の飛散を抑えつつ制御
されて乱れを誘導し気液接触面積の増大を図るのであ
る。誘導部材としては板状のものを培養容器内の液面に
対して斜めに傾斜しているのが好ましく、また、その形
状としては波形に撓んでいるものが好ましく、正弦曲線
状に撓んでいるものがより好ましい
【０００７】
【発明の実施の態様】以下、本発明について詳細に説明
する。本発明の振盪培養用容器は、円筒形状であって、
その材質は金属、ガラス、合成樹脂シート、耐水性を有
する紙管等何れでも良いが、特にステンレス鋼などの金
属製のものが耐食性を有し、滅菌等の処理が施しやすい
ので好ましい。そして、その容器の大きさとしては特に
限定されるのもではなく、通常使用されている培養フラ
スコと同様に実験室で使用する数ｍｌの物からプラント
用として使用する数十ｋｌまでの何れでも良い。この容
器には換気手段を設けておくが、換気手段としては開口
部を設け、これにフィルターを取り付けたり、或いは、
送気管により容易に送気する等の手段によって行なう。
する。本発明の振盪培養用容器は、円筒形状であって、
その材質は金属、ガラス、合成樹脂シート、耐水性を有
する紙管等何れでも良いが、特にステンレス鋼などの金
属製のものが耐食性を有し、滅菌等の処理が施しやすい
ので好ましい。そして、その容器の大きさとしては特に
限定されるのもではなく、通常使用されている培養フラ
スコと同様に実験室で使用する数ｍｌの物からプラント
用として使用する数十ｋｌまでの何れでも良い。この容
器には換気手段を設けておくが、換気手段としては開口
部を設け、これにフィルターを取り付けたり、或いは、
送気管により容易に送気する等の手段によって行なう。
【０００８】図面をもって本発明にかかる培養容器を説
明する。図１は本発明にかかる培養容器の正面図を示
す。図１において円筒形状の硝子槽１の上部に開口部と
それを覆うフィルター３を有するステンレス胴部を載せ
て培養容器を構成する。培養容器の内面に沿って誘導部
材吊棒５を設け、その先端に誘導部材４を固定する。誘
導部材４の設置位置は誘導部材吊棒５を高さ方向に移動
することによって調整する。本発明において使用する誘
導部材は円筒形状の容器内の液流動に乱れを発生し且つ
必要以上の波の飛散を防止しつつ乱れを誘導するもので
あれば良いのであるが、誘導部材としては、板状部材を
培養容器内の液面に対して斜めになるように突設したも
のが液の流動を大きく変化させるので好ましく、板状部
材の形状としては特に正弦曲線状に撓んだ所謂波型形状
のものが好ましい。更に、正弦曲線状に撓んだ所謂波型
形状のもの中でも、波型の湾曲点近傍で切除したものが
好ましい。切除部分としては下部を切除したもの、ある
いは上部と下部を切除したもの等がある。図２には、そ
の誘導部材４の形状の一例として、波型形状の誘導板で
その上部の湾曲点近傍と下部の湾曲点近傍で切除した波
型形状の誘導板を示す。
明する。図１は本発明にかかる培養容器の正面図を示
す。図１において円筒形状の硝子槽１の上部に開口部と
それを覆うフィルター３を有するステンレス胴部を載せ
て培養容器を構成する。培養容器の内面に沿って誘導部
材吊棒５を設け、その先端に誘導部材４を固定する。誘
導部材４の設置位置は誘導部材吊棒５を高さ方向に移動
することによって調整する。本発明において使用する誘
導部材は円筒形状の容器内の液流動に乱れを発生し且つ
必要以上の波の飛散を防止しつつ乱れを誘導するもので
あれば良いのであるが、誘導部材としては、板状部材を
培養容器内の液面に対して斜めになるように突設したも
のが液の流動を大きく変化させるので好ましく、板状部
材の形状としては特に正弦曲線状に撓んだ所謂波型形状
のものが好ましい。更に、正弦曲線状に撓んだ所謂波型
形状のもの中でも、波型の湾曲点近傍で切除したものが
好ましい。切除部分としては下部を切除したもの、ある
いは上部と下部を切除したもの等がある。図２には、そ
の誘導部材４の形状の一例として、波型形状の誘導板で
その上部の湾曲点近傍と下部の湾曲点近傍で切除した波
型形状の誘導板を示す。
【０００９】誘導部材の設置位置は誘導部材の形状と共
に液流動に大きく影響する。従って、誘導部材の設置位
置は高さ方向、即ち液面に対してその位置が変更できる
ように設けることが好ましい。特に気体と液体の接触面
積の増大をはかり、酸素供給能を増大するために、液面
近傍に取付けることが好ましい。そのため誘導部材の一
部は液面下に、残り部分は液面上になるように設置する
ことが好ましい。また、設置する誘導部材の数は１つも
しくは２個以上何れでも良いが、円筒型容器の中心点を
対称に２個程度設けることが好ましい。また、誘導部材
の大きさとしては培養液容器の大きさにより異なるが、
板状部材の場合、通常突出幅が容器直径の５〜３０％、
長さが設置された誘導部材を合計した長さで容器円周の
２０％〜２００％である。図３は誘導部材を設置した円
筒型容器の概念図である。
に液流動に大きく影響する。従って、誘導部材の設置位
置は高さ方向、即ち液面に対してその位置が変更できる
ように設けることが好ましい。特に気体と液体の接触面
積の増大をはかり、酸素供給能を増大するために、液面
近傍に取付けることが好ましい。そのため誘導部材の一
部は液面下に、残り部分は液面上になるように設置する
ことが好ましい。また、設置する誘導部材の数は１つも
しくは２個以上何れでも良いが、円筒型容器の中心点を
対称に２個程度設けることが好ましい。また、誘導部材
の大きさとしては培養液容器の大きさにより異なるが、
板状部材の場合、通常突出幅が容器直径の５〜３０％、
長さが設置された誘導部材を合計した長さで容器円周の
２０％〜２００％である。図３は誘導部材を設置した円
筒型容器の概念図である。
【００１０】円筒形状の容器内に誘導部材を突設する方
法としては、容器の材質によって種々の方法で行なうこ
とが出来るが、先に述べたように、設置位置は液流動に
大きく影響するので、高さ方向に移動できる誘導板吊棒
を容器上部より垂設し、誘導板吊棒の先端部に誘導部材
を固定し、容器内の液面の変動により誘導部材の位置を
調整することが好ましい。例えば、誘導部材を２個設け
た場合、その一方の誘導部材の大部分を液面下に残余の
部分を液面上になるように設置し、他方の誘導部材の少
部分を液面下に残余の部分を液面上になるように設置す
ることにより液流動の制御がされやすい。
法としては、容器の材質によって種々の方法で行なうこ
とが出来るが、先に述べたように、設置位置は液流動に
大きく影響するので、高さ方向に移動できる誘導板吊棒
を容器上部より垂設し、誘導板吊棒の先端部に誘導部材
を固定し、容器内の液面の変動により誘導部材の位置を
調整することが好ましい。例えば、誘導部材を２個設け
た場合、その一方の誘導部材の大部分を液面下に残余の
部分を液面上になるように設置し、他方の誘導部材の少
部分を液面下に残余の部分を液面上になるように設置す
ることにより液流動の制御がされやすい。
【００１１】次に、容器の形状による換気能、酸素供給
能及び長期の培養の適否について参考例をもって説明す
る。 参考例１ 図４に示されている寸法を有する容積５００ｍｌの三角
フラスコ（エルレンマイヤーフラスコ）、容積１．８ｌ
の箱型フラスコ及び容積１．８ｌの円筒型フラスコの３
種類のフラスコに、揮発性のアセトアルデヒドを添加し
た液を、その容器の容積の１／３の量を注入し、１３０
ｒｐｍの回転数で１２時間回転振盪を行ない、アセトア
ルデヒドの揮散量を測定したところ、図５の結果を得
た。図５において、▲は三角フラスコ、■は箱型フラス
コ、●は円筒型フラスコのそれぞれ場合を示す。なお、
箱型フラスコとは、箱型のフラスコの上部側面２ヶ所に
ガス移動用のメンブランフィルターを取り付けたフラス
コであり、円筒状フラスコとは、円筒フラスコの上部側
面２ヶ所にガス移動用のメンブランフィルターを取り付
けたフラスコである。そして、三角フラスコには綿栓を
用いた。上記の測定結果より、三角フラスコは外部の空
気の取り込みにより内部の気相ガスを換気する能力が欠
けていることを示しており、このことは、従来好気条件
として考えられていた三角フラスコ内は、培養中に発生
する炭酸ガスが徐々に充満することにより嫌気条件にな
ることを示している。更に、上記３種類のフラスコにつ
いて、回転数１４０、１７０及び２００ｒｐｍの場合の
Working VolumeとＫLａ（酸素移動容量係数）との関係
について測定したところ、図６の結果が得られ、箱型フ
ラスコは何れの回転振盪速度でも高いＫLａを有するこ
とが明らかになった。なお、図６において、○、●及び
◎は１４０ｒｐｍ、△及び▲１７０ｒｐｍ、□及び■２
００ｒｐｍのそれぞれの回転数による回転振盪の場合で
あって、○、△、□は三角フラスコ、◎は円筒型フラス
コ、●、▲、■は箱型フラスコの場合を示す。
能及び長期の培養の適否について参考例をもって説明す
る。 参考例１ 図４に示されている寸法を有する容積５００ｍｌの三角
フラスコ（エルレンマイヤーフラスコ）、容積１．８ｌ
の箱型フラスコ及び容積１．８ｌの円筒型フラスコの３
種類のフラスコに、揮発性のアセトアルデヒドを添加し
た液を、その容器の容積の１／３の量を注入し、１３０
ｒｐｍの回転数で１２時間回転振盪を行ない、アセトア
ルデヒドの揮散量を測定したところ、図５の結果を得
た。図５において、▲は三角フラスコ、■は箱型フラス
コ、●は円筒型フラスコのそれぞれ場合を示す。なお、
箱型フラスコとは、箱型のフラスコの上部側面２ヶ所に
ガス移動用のメンブランフィルターを取り付けたフラス
コであり、円筒状フラスコとは、円筒フラスコの上部側
面２ヶ所にガス移動用のメンブランフィルターを取り付
けたフラスコである。そして、三角フラスコには綿栓を
用いた。上記の測定結果より、三角フラスコは外部の空
気の取り込みにより内部の気相ガスを換気する能力が欠
けていることを示しており、このことは、従来好気条件
として考えられていた三角フラスコ内は、培養中に発生
する炭酸ガスが徐々に充満することにより嫌気条件にな
ることを示している。更に、上記３種類のフラスコにつ
いて、回転数１４０、１７０及び２００ｒｐｍの場合の
Working VolumeとＫLａ（酸素移動容量係数）との関係
について測定したところ、図６の結果が得られ、箱型フ
ラスコは何れの回転振盪速度でも高いＫLａを有するこ
とが明らかになった。なお、図６において、○、●及び
◎は１４０ｒｐｍ、△及び▲１７０ｒｐｍ、□及び■２
００ｒｐｍのそれぞれの回転数による回転振盪の場合で
あって、○、△、□は三角フラスコ、◎は円筒型フラス
コ、●、▲、■は箱型フラスコの場合を示す。
【００１２】参考例２ 上記各種類のフラスコにおいて、箱型フラスコ及び円筒
型フラスコに６００ｍｌの蒸留水を、三角フラスコに２
００ｍｌの蒸留水をそれぞれ投入し、振盪時間に伴う蒸
留水の減少経過を測定した。その理由は換気効果の高い
フラスコは、培養において、湿度の低い外気と飽和湿度
のフラスコ内気体が換気するためにフラスコ内の液量の
減少が考えられるからである。測定条件は３０℃、１７
０ｒｐｍの回転速度であった。その結果を図７に示し
た。図７において、▲は三角フラスコ、●は円筒型フラ
スコ、■は箱型フラスコのそれぞれ場合である。この結
果、三角フラスコでは水の減少が少なかったのに対し、
箱型フラスコの場合は激しい減少を示した。これは、箱
型フラスコでは液流動に伴い、しばしば水が激しく飛散
し、メンブランフィルターに直接付着し、フィルターを
通して漏れ出ることに原因があると考えられる。これに
対し円筒型フラスコの場合は液が直接フィルターに付着
することなく、徐々に水が減少することが明らかになっ
た。以上の３種類のフラスコについて酸素供給能、換気
能、長期間の培養の適否という点について比較した結果
を表１に示した。この結果より換気効果が高く酸素供給
能の高い箱型フラスコでは長期の培養に適さない。円筒
型フラスコは高い換気能と長期間の培養が可能と考えら
れるので、円筒型フラスコをベースとしこのフラスコに
高い酸素供給能を付与することによって本発明は完成さ
れたのである。
型フラスコに６００ｍｌの蒸留水を、三角フラスコに２
００ｍｌの蒸留水をそれぞれ投入し、振盪時間に伴う蒸
留水の減少経過を測定した。その理由は換気効果の高い
フラスコは、培養において、湿度の低い外気と飽和湿度
のフラスコ内気体が換気するためにフラスコ内の液量の
減少が考えられるからである。測定条件は３０℃、１７
０ｒｐｍの回転速度であった。その結果を図７に示し
た。図７において、▲は三角フラスコ、●は円筒型フラ
スコ、■は箱型フラスコのそれぞれ場合である。この結
果、三角フラスコでは水の減少が少なかったのに対し、
箱型フラスコの場合は激しい減少を示した。これは、箱
型フラスコでは液流動に伴い、しばしば水が激しく飛散
し、メンブランフィルターに直接付着し、フィルターを
通して漏れ出ることに原因があると考えられる。これに
対し円筒型フラスコの場合は液が直接フィルターに付着
することなく、徐々に水が減少することが明らかになっ
た。以上の３種類のフラスコについて酸素供給能、換気
能、長期間の培養の適否という点について比較した結果
を表１に示した。この結果より換気効果が高く酸素供給
能の高い箱型フラスコでは長期の培養に適さない。円筒
型フラスコは高い換気能と長期間の培養が可能と考えら
れるので、円筒型フラスコをベースとしこのフラスコに
高い酸素供給能を付与することによって本発明は完成さ
れたのである。
【００１３】
【表１】
【００１４】
【実施例及び比較例】次に本発明を実施例をもって、具
体的に説明する。 実施例 １ 直径１０７ｍｍ、高さ２００ｍｍの円筒型容器の上部側
面に２０ｃｍ2のメンブランフィルター２枚を中心点に
対し対称の位置に取り付けた培養容器に培養液６００ｍ
ｌを入れた。培養容器の内面には長さ９０ｍｍの誘導部
材の２枚が容器の中心点に対して対称の位置に突設して
いる。誘導部材として正弦曲線状に撓んだ所謂波型誘導
板を使用し、液面上に２０ｍｍ、液面下に１０ｍｍで液
面に対する傾斜角が２０〜２５゜になるように設けた
（図８参照）。このような誘導部材の配置をＨという。
この培養溶液を回転振盪により容器内の液量の減少過程
を測定した結果を図９の●印で示した。同時に容器内の
換気能を測定した。その測定方法は揮発性のアセトアル
デヒドを液中に添加して８時間回転振盪を行った時、ア
セトアルデヒドの時間の経過に対するアセトアルデヒド
の通気量（ｖｅｎｔｉｌａｔｉｏｎ）を測定した。測定
結果を図１０の■印で示した。なお、図１０におけるｋ
ｖは揮発速度定数である。
体的に説明する。 実施例 １ 直径１０７ｍｍ、高さ２００ｍｍの円筒型容器の上部側
面に２０ｃｍ2のメンブランフィルター２枚を中心点に
対し対称の位置に取り付けた培養容器に培養液６００ｍ
ｌを入れた。培養容器の内面には長さ９０ｍｍの誘導部
材の２枚が容器の中心点に対して対称の位置に突設して
いる。誘導部材として正弦曲線状に撓んだ所謂波型誘導
板を使用し、液面上に２０ｍｍ、液面下に１０ｍｍで液
面に対する傾斜角が２０〜２５゜になるように設けた
（図８参照）。このような誘導部材の配置をＨという。
この培養溶液を回転振盪により容器内の液量の減少過程
を測定した結果を図９の●印で示した。同時に容器内の
換気能を測定した。その測定方法は揮発性のアセトアル
デヒドを液中に添加して８時間回転振盪を行った時、ア
セトアルデヒドの時間の経過に対するアセトアルデヒド
の通気量（ｖｅｎｔｉｌａｔｉｏｎ）を測定した。測定
結果を図１０の■印で示した。なお、図１０におけるｋ
ｖは揮発速度定数である。
【００１５】実施例 ２ 実施例１と同様の培養容器及び誘導部材を用いて回転培
養を行なった。ただ、この場合の誘導部材の配置は液面
上と液面下とがそれぞれ１５ｍｍで、液面に対する傾斜
角が２０〜２５゜になるに設けた。このような誘導部材
の配置をＭという（図８参照）。この培養溶液を実施例
１と同様に回転培養を行ない容器内の液量の減少過程を
測定した。その結果を図９の■印で示した。実施例１の
場合と同様に換気能についても測定しその結果を図１０
の●印で示した。
養を行なった。ただ、この場合の誘導部材の配置は液面
上と液面下とがそれぞれ１５ｍｍで、液面に対する傾斜
角が２０〜２５゜になるに設けた。このような誘導部材
の配置をＭという（図８参照）。この培養溶液を実施例
１と同様に回転培養を行ない容器内の液量の減少過程を
測定した。その結果を図９の■印で示した。実施例１の
場合と同様に換気能についても測定しその結果を図１０
の●印で示した。
【００１６】実施例 ３ 実施例１と同様の培養容器及び誘導部材を用いて回転培
養を行なった。ただ、この場合の誘導部材の配置は液面
上に１０ｍｍ、液面下に２０ｍｍで液面に対する傾斜角
が２０〜２５゜になるよう設けた。この誘導部材の配置
を以下Ｌという（図８参照）。この培養溶液を実施例１
と同様に回転培養を行ない容器内の液量の減少過程及び
換気能を測定した。その結果を図９の□印で、換気能を
図１０の□印で示した。
養を行なった。ただ、この場合の誘導部材の配置は液面
上に１０ｍｍ、液面下に２０ｍｍで液面に対する傾斜角
が２０〜２５゜になるよう設けた。この誘導部材の配置
を以下Ｌという（図８参照）。この培養溶液を実施例１
と同様に回転培養を行ない容器内の液量の減少過程及び
換気能を測定した。その結果を図９の□印で、換気能を
図１０の□印で示した。
【００１７】実施例 ４ 実施例１と同様の培養容器及び誘導部材を用いて回転培
養を行なった。ただ、この場合の誘導部材の配置とし
て、一方の誘導部材は液面上に１０ｍｍ、液面下に２０
ｍｍであり、他の誘導部材は液面上に２０ｍｍ、液面下
に１０ｍｍで両方の液面に対する傾斜角は２０〜２５゜
になるようにした。この誘導部材の配置をＨ＆Ｌとい
う。この培養溶液を実施例１と同様に回転培養を行ない
容器内の液量の減少過程及び換気能を測定した。その結
果を図９の▲印、及び図１０の▲印で示した。
養を行なった。ただ、この場合の誘導部材の配置とし
て、一方の誘導部材は液面上に１０ｍｍ、液面下に２０
ｍｍであり、他の誘導部材は液面上に２０ｍｍ、液面下
に１０ｍｍで両方の液面に対する傾斜角は２０〜２５゜
になるようにした。この誘導部材の配置をＨ＆Ｌとい
う。この培養溶液を実施例１と同様に回転培養を行ない
容器内の液量の減少過程及び換気能を測定した。その結
果を図９の▲印、及び図１０の▲印で示した。
【００１８】実施例 ５ 上述の実施例１〜４に示した４組の誘導部材を取り付け
た円筒型容器の酸素供給能について測定した。測定方法
は亜硫酸酸化法によって行なった。亜硫酸酸化法とは、
発酵液を使用しない間接法であり、Ｃｏｏｐｅｒらによ
って通気撹拌槽の性能を比較するのに提案された方法で
ある。培養条件は３０℃で培養液６００ｍｌ，回転数１
３０ｒｐｍの回転培養であった。この結果を表２に示
す。
た円筒型容器の酸素供給能について測定した。測定方法
は亜硫酸酸化法によって行なった。亜硫酸酸化法とは、
発酵液を使用しない間接法であり、Ｃｏｏｐｅｒらによ
って通気撹拌槽の性能を比較するのに提案された方法で
ある。培養条件は３０℃で培養液６００ｍｌ，回転数１
３０ｒｐｍの回転培養であった。この結果を表２に示
す。
【００１９】
【表２】
【００２０】以上の結果より、液量の減少量は、（Ｌ）
＜（Ｈ＆Ｌ）＜（Ｍ）＜（Ｈ）の順に増加した。また、
酸素供給能については、誘導部材なしの場合に比べ、
Ｌ、Ｍ、Ｈ＆Ｌの順で酸素供給能が増加した。
＜（Ｈ＆Ｌ）＜（Ｍ）＜（Ｈ）の順に増加した。また、
酸素供給能については、誘導部材なしの場合に比べ、
Ｌ、Ｍ、Ｈ＆Ｌの順で酸素供給能が増加した。
【００２１】比較例 １ 円筒型容器の下部側面に液面に対して垂直方向に２枚の
誘導部材を突設させ、実施例１と同様に回転培養を行な
ったところ、液流動に伴い、しばしば邪魔板にぶつかっ
た液が飛散して上部のメンブランに付着することが観測
され、長期間の培養には不適であることが分かった。
誘導部材を突設させ、実施例１と同様に回転培養を行な
ったところ、液流動に伴い、しばしば邪魔板にぶつかっ
た液が飛散して上部のメンブランに付着することが観測
され、長期間の培養には不適であることが分かった。
【００２２】実施例 ６ 実施例１と同じ大きさの円筒容器に誘導部材をＨ＆Ｌに
配置し、グリセロールを炭素源（栄養源）とした培地を
用い、その中に放線菌（ストレプトマイセス）を添加し
振盪培養を行い、容器内のグリセロールの濃度及び細胞
濃度を測定した。その結果を図１１に示した。比較の
為、三角容器（エルレンマイヤーフラスコ）を用いて、
同様の測定を行ないその結果を図１１に併記した。この
図より明らかなように、細胞の増殖及びグリセロール濃
度のいずれも本発明の誘導板付き円筒型容器の方が従来
より使用されているエルレンマイヤーフラスコよりも優
れており、４日間培養の最終細胞量が、本発明の培養容
器において誘導板をＨ＆Ｌに配置したものはエルレンマ
イヤーフラスコの約１．５倍を示した。
配置し、グリセロールを炭素源（栄養源）とした培地を
用い、その中に放線菌（ストレプトマイセス）を添加し
振盪培養を行い、容器内のグリセロールの濃度及び細胞
濃度を測定した。その結果を図１１に示した。比較の
為、三角容器（エルレンマイヤーフラスコ）を用いて、
同様の測定を行ないその結果を図１１に併記した。この
図より明らかなように、細胞の増殖及びグリセロール濃
度のいずれも本発明の誘導板付き円筒型容器の方が従来
より使用されているエルレンマイヤーフラスコよりも優
れており、４日間培養の最終細胞量が、本発明の培養容
器において誘導板をＨ＆Ｌに配置したものはエルレンマ
イヤーフラスコの約１．５倍を示した。
【００２３】
【発明の効果】以上述べたように、本発明においては、
換気手段を有する円筒形状の振盪培養容器に液流動を制
御する誘導部材を少なくとも一カ所以上に突設したこと
より、換気効果が高く酸素供給効果が高く、しかも長期
培養に適した振盪培養用容器を提供することが出来、特
に誘導板をＨ＆Ｌに設置したときは従来使用されている
エルレンマイヤーフラスコの場合に比して１．５倍の細
胞量を得ることが出来た。
換気手段を有する円筒形状の振盪培養容器に液流動を制
御する誘導部材を少なくとも一カ所以上に突設したこと
より、換気効果が高く酸素供給効果が高く、しかも長期
培養に適した振盪培養用容器を提供することが出来、特
に誘導板をＨ＆Ｌに設置したときは従来使用されている
エルレンマイヤーフラスコの場合に比して１．５倍の細
胞量を得ることが出来た。
【図１】 本発明にかかる培養容器の１例の正面図
【図２】 誘導部材の１例の形状を示す断面図
【図３】 誘導部材を設置した本発明にかかる円筒型容
器の概念図
器の概念図
【図４】 参考例１及び２で使用した三角フラスコ（エ
ルレンマイヤーフラスコ）、箱型フラスコ及び円筒型フ
ラスコの３種類のフラスコの形状及び寸法を示す図
ルレンマイヤーフラスコ）、箱型フラスコ及び円筒型フ
ラスコの３種類のフラスコの形状及び寸法を示す図
【図５】 参考例１で行った３種類のフラスコの時間経
過に伴うアセトアルデヒドの揮散量を測定結果の図
過に伴うアセトアルデヒドの揮散量を測定結果の図
【図６】 参考例１で行なったWorking VolumeとＫLａ
（酸素移動容量係数）との関係についての測定結果の図
（酸素移動容量係数）との関係についての測定結果の図
【図７】 参考例２の３種のフラスコ内の振盪時間に対
する液量の関係図
する液量の関係図
【図８】 実施例１〜４における誘導部材の配置を示し
た説明図
た説明図
【図９】 実施例１〜４における容器内の液量の減少過
程を測定した図
程を測定した図
【図１０】実施例１〜４におけるアセトアルデヒドの通
気量を示した図
気量を示した図
【図１１】実施例６における培養容器内のグリセロール
の濃度及び細胞濃度の測定結果の図
の濃度及び細胞濃度の測定結果の図
１ 硝子槽（容器） ２ ステンレス胴 ３
フィルター ４ 誘導部材 ５ 誘導部材吊棒
フィルター ４ 誘導部材 ５ 誘導部材吊棒
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 加藤 勲 茨城県つくば市天王台１−１−１ 筑波大 学 応用生物化学系 内 (72)発明者 小川 洋子 茨城県つくば市天王台１−１−１ 筑波大 学 応用生物化学系 内 (72)発明者 ジェームス シー． オグボンナ 茨城県つくば市天王台１−１−１ 筑波大 学 応用生物化学系 内 (72)発明者 須藤 禎子 東京都中央区日本橋馬喰町１丁目４番16号 藤森工業株式会社内 (72)発明者 永田 政令 東京都中央区日本橋馬喰町１丁目４番16号 藤森工業株式会社内 Ｆターム(参考） 4B029 AA08 BB03 BB04 BB06 BB12 CC01 GA02 GA08 GB07 GB10
Claims (7)
- 【請求項１】 換気手段を有する円筒形状をした振盪培
養容器であって、該容器の内面に液流動を制御する誘導
部材を少なくとも一カ所以上に突設したことを特徴とす
る振盪培養容器。 - 【請求項２】 前記誘導部材が板状部材を培養液面に対
して斜めになるように突設したものであることを特徴と
する請求項１記載の振盪培養容器。 - 【請求項３】 前記誘導部材が波形に撓んでいることを
特徴とする請求項１または２のいずれかの項記載の振盪
培養容器。 - 【請求項４】 前記誘導部材が少なくとも高さ方向の位
置を変更可能に突設されていることを特徴とする振盪培
養容器。 - 【請求項５】 前記誘導部材が少なくとも二種類の異な
る高さの位置に突設されていることを特徴とする請求項
１ないし４のいずれかの項に記載の振盪培養容器。 - 【請求項６】 請求項１ないし５のいずれかの項に記載
の振盪培養容器を用いる振盪培養方法であって、少なく
とも一の誘導部材の少なくとも一部が培養液の液面下に
存在するように培養液液面及び／または誘導部材の位置
を調整した後、回転振盪を行う振盪培養方法。 - 【請求項７】 請求項５に記載の振盪培養容器を用いる
振盪培養方法であって、少なくとも一の誘導部材の大部
分が培養液の液面下に存在し、他の誘導部材の小部分が
液面下に存在するように培養液液面及び／または誘導部
材の位置を調整した後、回転振盪を行う振盪培養方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000044540A JP2001231542A (ja) | 2000-02-22 | 2000-02-22 | 振盪培養容器及び振盪培養方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000044540A JP2001231542A (ja) | 2000-02-22 | 2000-02-22 | 振盪培養容器及び振盪培養方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001231542A true JP2001231542A (ja) | 2001-08-28 |
Family
ID=18567279
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000044540A Pending JP2001231542A (ja) | 2000-02-22 | 2000-02-22 | 振盪培養容器及び振盪培養方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2001231542A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005019406A1 (ja) * | 2003-08-22 | 2005-03-03 | Astec Co., Ltd. | インキュベータ用収容容器及びインキュベータ |
| JP2007209920A (ja) * | 2006-02-10 | 2007-08-23 | Nagoya Institute Of Technology | 大量培養用の酸素吸収効率の高い振とう容器 |
| CN103614298A (zh) * | 2013-12-11 | 2014-03-05 | 常州英德生物科技有限公司 | 一种细胞培养方法及其使用的细胞培养板 |
-
2000
- 2000-02-22 JP JP2000044540A patent/JP2001231542A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005019406A1 (ja) * | 2003-08-22 | 2005-03-03 | Astec Co., Ltd. | インキュベータ用収容容器及びインキュベータ |
| JP2007209920A (ja) * | 2006-02-10 | 2007-08-23 | Nagoya Institute Of Technology | 大量培養用の酸素吸収効率の高い振とう容器 |
| CN103614298A (zh) * | 2013-12-11 | 2014-03-05 | 常州英德生物科技有限公司 | 一种细胞培养方法及其使用的细胞培养板 |
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