JP2000256220A - Separating agent - Google Patents
Separating agentInfo
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- JP2000256220A JP2000256220A JP11061357A JP6135799A JP2000256220A JP 2000256220 A JP2000256220 A JP 2000256220A JP 11061357 A JP11061357 A JP 11061357A JP 6135799 A JP6135799 A JP 6135799A JP 2000256220 A JP2000256220 A JP 2000256220A
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は分離剤に関し、特に
含有イオン濃度が低い多糖から誘導した多糖誘導体から
なる、ラセミ体の光学分割に有用な分離剤に関するもの
である。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a separating agent, and more particularly to a separating agent comprising a polysaccharide derivative derived from a polysaccharide having a low ion concentration and useful for optical resolution of a racemate.
【０００２】[0002]
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】多糖誘
導体からなる分離剤は、光学異性体用分離剤として有用
であることは、従来から知られている（Y. OKAMOTO, M.
KAWASHITA AND K. HATADA, J. Am. Chem. Soc., 10
6, 53−57，1984、特公昭63−12850 号公報など）。こ
の多糖誘導体は、通常、シリカゲル担体に担持させて用
いられ、ラセミ体に対する光学分割能が非常に高く、光
学異性体の分析や分取に広く使われている。BACKGROUND OF THE INVENTION It has been known that a separating agent comprising a polysaccharide derivative is useful as a separating agent for optical isomers (Y. OKAMOTO, M. et al.
KAWASHITA AND K. HATADA, J. Am. Chem. Soc., 10
6, 53-57, 1984, JP-B-63-12850, etc.). This polysaccharide derivative is usually used by being supported on a silica gel carrier, has a very high optical resolution for a racemic form, and is widely used for analysis and fractionation of optical isomers.
【０００３】しかしながら、多糖類には塩素イオン、硝
酸イオン、燐酸イオン、硫酸イオン、ナトリウムイオ
ン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウム
イオン等のイオンを発生させる無機塩が多く含まれてお
り、これらのイオンを発生させる無機塩が多く含まれて
いる多糖、特に燐酸イオンを発生させる無機塩が多く含
まれている多糖から誘導した多糖誘導体からなる分離剤
をカラム等に充填した場合、分析対象の化合物、特に塩
基性化合物がテーリングを起こし、良好な分離が得られ
ないという問題があった。[0003] However, polysaccharides contain many inorganic salts that generate ions such as chloride ion, nitrate ion, phosphate ion, sulfate ion, sodium ion, potassium ion, calcium ion and magnesium ion. When a column or the like is filled with a separating agent consisting of a polysaccharide containing a large amount of an inorganic salt generating a polysaccharide derivative, particularly a polysaccharide containing a large amount of an inorganic salt generating a phosphate ion, the compound to be analyzed is Particularly, there has been a problem that a basic compound causes tailing and good separation cannot be obtained.
【０００４】したがって、本発明の課題は、多糖誘導体
からなる分離剤において、分析対象の化合物のテーリン
グがなく、良好な分離が得られる分離剤を提供すること
にある。[0004] Therefore, an object of the present invention is to provide a separating agent comprising a polysaccharide derivative, which does not tail the compound to be analyzed and can obtain a good separation.
【０００５】[0005]
【課題を解決するための手段】本発明者らは、多糖誘導
体のもつ有用な性質を最大限に発揮でき、かつ上記の問
題を克服した分離剤について鋭意研究した結果、本発明
に到達した。即ち、本発明は、含有イオン濃度が各イオ
ン単独で３ppm 以下である多糖から誘導した多糖誘導体
からなる分離剤を提供するものである。本発明において
は、多糖の含有イオン濃度を、多糖に含まれるそれぞれ
のイオン単独で３ppm 以下とすることにより、分析対象
の化合物のテーリングがなく、良好な分離が得られる。
いずれかのイオンの含有量が３ppm を超える多糖から誘
導した多糖誘導体では良好な分離性能が得られない。Means for Solving the Problems The present inventors have made intensive studies on a separating agent which can maximize the useful properties of polysaccharide derivatives and overcome the above problems, and as a result, have reached the present invention. That is, the present invention provides a separating agent comprising a polysaccharide derivative derived from a polysaccharide having an ion concentration of 3 ppm or less for each ion alone. In the present invention, by setting the concentration of the ion contained in the polysaccharide to 3 ppm or less for each ion contained in the polysaccharide alone, there is no tailing of the compound to be analyzed and good separation can be obtained.
Good separation performance cannot be obtained with polysaccharide derivatives derived from polysaccharides having a content of any ion exceeding 3 ppm.
【０００６】[0006]
【発明の実施の形態】以下本発明の実施の形態を詳細に
説明する。DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS The embodiments of the present invention will be described below in detail.
【０００７】多糖の含有イオンとしては、塩素イオン、
硝酸イオン、燐酸イオン、硫酸イオン、ナトリウムイオ
ン、アンモニウムイオン、カリウムイオン、カルシウム
イオン、マグネシウムイオン等が挙げられる。本発明に
おいて、含有イオン濃度が各イオン単独で３ppm 以下で
ある多糖を得るには、含有イオン濃度が各イオン単独で
３ppm 以下であるような市販の多糖を用いるか、あるい
は含有イオン濃度が各イオン単独で３ppm を超えるよう
な市販の多糖から、塩素イオン、硝酸イオン、燐酸イオ
ン、硫酸イオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、
カルシウムイオン、マグネシウムイオン等のイオンを発
生させる無機塩を除去する等の方法により得ることがで
きる。尚、本発明において、多糖の含有イオン濃度は、
下記の実施例において記載したような、イオンクロマト
グラフィー分析法を用いて算出することができる。[0007] Polysaccharide-containing ions include chloride ions,
Examples include nitrate ion, phosphate ion, sulfate ion, sodium ion, ammonium ion, potassium ion, calcium ion, magnesium ion and the like. In the present invention, in order to obtain a polysaccharide having a content ion concentration of 3 ppm or less for each ion alone, a commercially available polysaccharide having a content ion concentration of 3 ppm or less for each ion alone is used, or a content of each ion alone is 3 ppm or less. Chlorine ion, nitrate ion, phosphate ion, sulfate ion, sodium ion, potassium ion,
It can be obtained by a method such as removing inorganic salts that generate ions such as calcium ions and magnesium ions. In the present invention, the ion concentration of the polysaccharide is
It can be calculated using ion chromatography analysis, as described in the examples below.
【０００８】本発明における多糖とは、合成多糖、天然
多糖、及び天然物変性多糖のいずれかを問わず、光学活
性であればいかなるものでも良いが、好ましくは結合様
式の規則性の高いものである。例示すれば、β−1,4 −
グルカン（セルロース）、α−1,4 −グルカン（アミロ
ース、アミロペクチン）、α−1,6 −グルカン（デキス
トラン）、β−1,6 −グルカン（ブスッラン）、β−1,
3 −グルカン（カードラン、シゾフィラン）、α−1,3
−グルカン、β−1,2 −グルカン（Crown Gall多糖）、
β−1,4 −ガラクタン、β−1,4 −マンナン、α−1,6
−マンナン、β−1,2 −フラクタン（イヌリン）、β−
2,6 −フラクタン（レバン）、β−1,4−キシラン、β
−1,3 −キシラン、β−1,4 −キトサン、β−1,4−N−
アセチルキトサン（キチン）、ブルラン、アガロース、
アルギン酸、α−シクロデキストリン、β−シクロデキ
ストリン、γ−シクロデキストリンなどであり、アミロ
ースを含有する澱粉等も含まれる。この中、好ましいも
のは、高純度の多糖を容易に得ることのできるセルロー
ス、アミロース、β−1,4 −キトサン、キチン、β−1,
4 −マンナン、β−1,4 −キシラン、イヌリン、カード
ランなどであり、さらに好ましくは、セルロース、アミ
ロースである。[0008] The polysaccharide in the present invention is not particularly limited to any one of synthetic polysaccharide, natural polysaccharide and natural product-modified polysaccharide as long as it is optically active, but preferably has a high binding mode regularity. is there. For example, β-1,4 −
Glucan (cellulose), α-1,4-glucan (amylose, amylopectin), α-1,6-glucan (dextran), β-1,6-glucan (busulan), β-1,
3-glucan (curdlan, schizophyllan), α-1,3
-Glucan, β-1,2-glucan (Crown Gall polysaccharide),
β-1,4-galactan, β-1,4-mannan, α-1,6
-Mannan, β-1,2-fructan (inulin), β-
2,6-fructan (levan), β-1,4-xylan, β
-1,3-xylan, β-1,4-chitosan, β-1,4-N-
Acetyl chitosan (chitin), bull run, agarose,
Alginic acid, α-cyclodextrin, β-cyclodextrin, γ-cyclodextrin and the like, including amylose-containing starch and the like. Among them, preferred are cellulose, amylose, β-1,4-chitosan, chitin, β-1,
Examples thereof include 4-mannan, β-1,4-xylan, inulin, curdlan, and more preferably cellulose and amylose.
【０００９】本発明における多糖誘導体とは、多糖の水
酸基に、該水酸基と反応し得る官能基を有する化合物
を、公知の方法で、エステル結合、ウレタン結合などに
より結合させ、誘導体化したものである。ここで、水酸
基と反応し得る官能基を有する化合物とは、脂肪族、脂
環族、芳香族、ヘテロ芳香族などのイソシアン酸誘導
体、カルボン酸、エステル、酸ハライド、酸アミド、ハ
ロゲン化物、エポキシド、アルデヒド、アルコール、そ
の他脱離基を有する化合物などである。多糖誘導体とし
て特に好ましいものは、エステル誘導体またはカルバメ
ート誘導体である。The polysaccharide derivative in the present invention is a compound obtained by bonding a compound having a functional group capable of reacting with a hydroxyl group of a polysaccharide to an ester bond or a urethane bond by a known method. . Here, the compound having a functional group capable of reacting with a hydroxyl group includes aliphatic, alicyclic, aromatic and heteroaromatic isocyanic acid derivatives, carboxylic acids, esters, acid halides, acid amides, halides, and epoxides. Aldehydes, alcohols and other compounds having a leaving group. Particularly preferred as polysaccharide derivatives are ester derivatives or carbamate derivatives.
【００１０】本発明における多糖の平均重合度（１分子
中に含まれるピラノース又はフラノース環の平均数）は
５以上、好ましくは10以上であり、特に上限はないが、
500以下であることが取り扱いの容易さにおいて好まし
い。本発明における多糖誘導体の重量平均分子量（ポリ
スチレン換算）は、1,000〜500,000 が好ましく、さら
に好ましくは20,000〜500,000 である。本発明における
多糖誘導体の分子量分布（ポリスチレン換算）は、１〜
３であることが好ましく、さらに好ましくは1.1 以下で
ある。In the present invention, the average degree of polymerization of the polysaccharide (the average number of pyranose or furanose rings contained in one molecule) is 5 or more, preferably 10 or more, and there is no particular upper limit.
It is preferable that it is 500 or less in terms of ease of handling. The weight average molecular weight (in terms of polystyrene) of the polysaccharide derivative in the present invention is preferably from 1,000 to 500,000, more preferably from 20,000 to 500,000. The molecular weight distribution (polystyrene conversion) of the polysaccharide derivative in the present invention is 1 to
3, and more preferably 1.1 or less.
【００１１】本発明の分離剤は特に液体クロマトグラフ
ィー用に用いることが好ましく、本発明における多糖誘
導体を液体クロマトグラフィー用充填剤として使用する
には、これをそのままカラムに充填するか、担体に担持
させてから充填する。そのままカラムに充填するときに
は、充填剤は粒状であることが好ましいことから、多糖
誘導体を破砕するか、ビーズ状にすることが好ましい。
粒子の大きさは、使用するカラムの大きさによって異な
るが、１μm 〜10mmであり、好ましくは１μm 〜300μm
で、粒子は多孔質であることが好ましい。The separating agent of the present invention is particularly preferably used for liquid chromatography. In order to use the polysaccharide derivative of the present invention as a packing for liquid chromatography, the separating agent is packed in a column as it is or loaded on a carrier. Allow to fill. When the column is packed as it is, the filler is preferably in the form of granules. Therefore, it is preferable that the polysaccharide derivative is crushed or formed into beads.
Although the size of the particles varies depending on the size of the column used, it is 1 μm to 10 mm, preferably 1 μm to 300 μm.
Preferably, the particles are porous.
【００１２】さらに、分離剤の耐圧能力の向上、移動相
に用いる溶媒による膨潤、収縮の防止、理論段数の向上
のために、担体に担持させることが好ましい。用いる担
体の大きさは使用するカラムの大きさにより変わるが、
一般に粒径１μm 〜10mmであり、好ましくは１μm 〜30
0μmである。担体は多孔質であることが好ましく、平均
孔径は10Å〜100μmであり、好ましくは50Å〜50,000Å
である。Further, it is preferable that the separating agent is supported on a carrier in order to improve the pressure resistance of the separating agent, prevent swelling and shrinkage by the solvent used for the mobile phase, and increase the number of theoretical plates. The size of the carrier used depends on the size of the column used,
Generally, the particle size is 1 μm to 10 mm, preferably 1 μm to 30 mm.
0 μm. The carrier is preferably porous and has an average pore size of 10 to 100 μm, preferably 50 to 50,000 μm.
It is.
【００１３】担体材質としては、多孔性有機担体または
多孔性無機担体があり、多孔性有機担体として適当なも
のは、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリアクリ
レートなどからなる高分子物質が挙げられ、多孔性無機
担体として適当なものは、シリカゲル、アルミナ、マグ
ネシア、酸化チタン、ガラス、ケイ酸塩、カオリンなど
のような合成もしくは天然の物質が挙げられる。好まし
くは多孔性無機担体であり、特に好ましくはシリカゲル
である。これらの担体には多糖誘導体との親和性を良く
するために表面処理を施しても良い。表面処理の方法と
しては有機シラン化合物を用いたシラン化処理やプラズ
マ重合による表面処理法などがある。As the carrier material, there is a porous organic carrier or a porous inorganic carrier, and a suitable porous organic carrier is a polymer material such as polystyrene, polyacrylamide, and polyacrylate. Suitable carriers include synthetic or natural materials such as silica gel, alumina, magnesia, titanium oxide, glass, silicates, kaolin and the like. Preferably, it is a porous inorganic carrier, and particularly preferably, it is silica gel. These carriers may be subjected to a surface treatment in order to improve the affinity with the polysaccharide derivative. Examples of the surface treatment method include a silation treatment using an organic silane compound and a surface treatment method using plasma polymerization.
【００１４】多糖誘導体を担体に担持させる量は、担体
に対して１〜100 重量％、好ましくは５〜50重量％であ
る。多糖誘導体を担体に担持させる方法としては化学的
方法でも物理的方法でも良い。化学的な方法としては多
糖を誘導体化する際に一部の水酸基を保護しておき、誘
導体化したのち、脱保護し、これとシリカゲルとを化学
的に結合するという方法がある（Y. Okamoto et al.,
J. Liq. Chromatogr., 10(８＆９), 1613, 1987)）。物
理的方法としては、多糖誘導体を可溶性の溶剤に溶解さ
せ、担体と良く混和し、減圧下、加温下または気流下に
より溶剤を留去させる方法などがある。The amount of the polysaccharide derivative to be supported on the carrier is 1 to 100% by weight, preferably 5 to 50% by weight, based on the carrier. The method for supporting the polysaccharide derivative on the carrier may be a chemical method or a physical method. As a chemical method, there is a method in which some hydroxyl groups are protected when derivatizing a polysaccharide, derivatized, deprotected, and chemically bonded to silica gel (Y. Okamoto). et al.,
J. Liq. Chromatogr., 10 (8 & 9), 1613, 1987)). As a physical method, there is a method in which a polysaccharide derivative is dissolved in a soluble solvent, mixed well with a carrier, and the solvent is distilled off under reduced pressure, heated, or in an air stream.
【００１５】液体クロマトグラフィーを行う場合の溶離
液としては、本発明の分離剤を溶解またはこれと反応す
る液体を除いて特に制約はなく、また本発明の分離剤を
化学的に担体に結合した場合には反応性液体を除いては
制約はないが、好ましくはｎ−ヘキサン、各種アルコー
ル、テトラヒドロフランなどの混合溶液が用いられる。The eluent used in the liquid chromatography is not particularly limited, except for the liquid which dissolves or reacts with the separating agent of the present invention, and the separating agent of the present invention is chemically bound to a carrier. In this case, there is no limitation except for the reactive liquid, but preferably a mixed solution of n-hexane, various alcohols, tetrahydrofuran and the like is used.
【００１６】本発明の分離剤は、特にラセミ体を光学分
割して光学活性体を得る際に有用である。The separating agent of the present invention is particularly useful for obtaining an optically active substance by optically resolving a racemate.
【００１７】[0017]
【発明の効果】本発明の多糖誘導体からなる分離剤は、
分析対象の化合物のテーリングがなく、良好な分離が得
られる。The separating agent comprising the polysaccharide derivative of the present invention comprises:
There is no tailing of the compound to be analyzed and good separation is obtained.
【００１８】[0018]
【実施例】以下、実施例によって本発明を具体的に説明
するが、本発明がこれらに限定されるものではないこと
はいうまでもない。但し、実施例中で用いられるパラメ
ーターk'（容量比）、N(理論段数）、α（分離係数）及
びRs（分離度）は以下のように定義される。EXAMPLES Hereinafter, the present invention will be described specifically with reference to Examples, but it goes without saying that the present invention is not limited to these. However, the parameters k ′ (capacity ratio), N (the number of theoretical plates), α (separation coefficient), and Rs (separation degree) used in the examples are defined as follows.
【００１９】[0019]
【数１】 (Equation 1)
【００２０】実施例１ ＜多糖誘導体の合成＞含有イオン濃度が表１に示すよう
な値である合成単分散アミロース((株）中埜酢店製, Mw
／Mn＜1.1(ポリスチレン換算), Mw＝55,000（光散乱法
・超遠心沈降平衡法から算出))２ｇをピリジン中で、3,
5 −ジメチルフェニルイソシアネート17ｇと30時間加熱
反応させた。反応生成物をメタノール攪拌下に注ぎ込ん
で沈澱させ、Ｇ４グラスフィルターで濾取して、メタノ
ールで２回洗浄した後、80℃で５時間真空乾燥した。得
られた生成物にピリジンを加え完全に溶解させて、再び
メタノール攪拌下に注ぎ込み沈澱させ、Ｇ４グラスフィ
ルターで濾取して、メタノールで２回洗浄した後、80℃
で５時間真空乾燥し、精製された生成物アミローストリ
ス（3,5 −ジメチルフェニルカルバメート）を得た。Example 1 <Synthesis of polysaccharide derivative> Synthetic monodispersed amylose having an ion concentration as shown in Table 1 (manufactured by Nakano Vinegar Co., Ltd., Mw)
/Mn<1.1 (in terms of polystyrene), Mw = 55,000 (calculated from light scattering method and ultracentrifugation sedimentation method))
The mixture was reacted with 17 g of 5-dimethylphenyl isocyanate by heating for 30 hours. The reaction product was poured into the mixture with stirring under methanol to precipitate, collected by filtration through a G4 glass filter, washed twice with methanol, and dried in vacuo at 80 ° C. for 5 hours. Pyridine was added to the resulting product to dissolve it completely, and the mixture was poured under stirring with methanol again to precipitate the precipitate. The precipitate was collected by filtration with a G4 glass filter, washed twice with methanol, and then washed at 80 °
For 5 hours to obtain a purified product amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate).
【００２１】[0021]
【表１】 [Table 1]
【００２２】尚、表１の含有イオン濃度は、下記に示す
イオンクロマトグラフィー分析法を用いて算出した。イオンクロマトグラフィー分析法 (1) イオンクロマトグラフィー分析用試料の作成方法 合成単分散アミロース１ｇをビーカーに秤取り、純水50
mlを添加した後、スターラーで５分程度攪拌し、アミロ
ース懸濁水溶液とした。次のこの懸濁水溶液をクロマト
ディスク（0.45μm 、ジーエルサイエンス株式会社製）
で濾過し、イオンクロマトグラフィー分析用試料とし
た。The ion concentration in Table 1 was calculated by using the following ion chromatography analysis method. Ion chromatography analysis method (1) Method for preparing sample for ion chromatography analysis 1 g of synthetic monodispersed amylose was weighed into a beaker, and purified water 50
After adding ml, the mixture was stirred for about 5 minutes with a stirrer to obtain an aqueous amylose suspension. Next, this suspension aqueous solution was chromatodisc (0.45 μm, manufactured by GL Sciences Inc.)
To obtain a sample for ion chromatography analysis.
【００２３】(2) イオンクロマトグラフィー分析条件 ・使用機器 ＩＳ 7000 （横河アナリティカルシステムズ） ・陰イオン分析条件 本カラム ：YOKOGAWA ICS−A23 （φ4.6×75mm) プレカラム：YOKOGAWA ICS−A2G （φ2.7×25mm) 溶離液 ：3.0mM Na2CO3 除去液 ：15mM H2SO4 流 速 ：溶離液、除去液共に 1.0ml／min. 検出器 ：導電率検出器 カラム温度：40℃ 注入量 ：50μl ・陽イオン分析条件 本カラム ：YOKOGAWA ICS−C25 （φ4.6×125mm) プレカラム：YOKOGAWA ICS−C2G （φ2.7×25mm) 溶離液 ：1.0mM 2,6−ピリジンジカルボン酸＋５mM
酒石酸 流 速 ：1.0ml ／min. 検出器 ：導電率検出器 カラム温度：40℃ 注入量 ：50μl ＜多糖誘導体をシリカゲルへ担持させた分離剤の調製＞
上記のアミローストリス（3,5 −ジメチルフェニルカル
バメート）をクロロホルム／ N,N−ジメチルアセトアミ
ドに溶解し、この溶液を、カルバモイル処理を施したシ
リカゲルに均一にふりかけた後、溶媒を留去してアミロ
ーストリス（3,5 −ジメチルフェニルカルバメート）を
シリカゲル（ダイソー製、粒径７μm 、孔径1,000 Å）
へ担持させた分離剤を得た。(2) Ion chromatography analysis conditions-Equipment used IS 7000 (Yokogawa Analytical Systems)-Anion analysis conditions Main column: Yokogawa ICS-A23 (φ4.6 × 75 mm) Precolumn: Yokogawa ICS-A2G (φ2 .7 × 25mm) Eluent: 3.0mM Na 2 CO 3 remover: 15mM H 2 SO 4 Flow rate: 1.0ml / min for both eluent and remover. Detector: Conductivity detector Column temperature: 40 ℃ Injection volume ： 50μl ・ Cation analysis conditions This column ： YOKOGAWA ICS-C25 (φ4.6 × 125mm) Pre-column ： YOKOGAWA ICS-C2G (φ2.7 × 25mm) Eluent ： 1.0mM 2,6-pyridinedicarboxylic acid + 5mM
Tartaric acid Flow rate: 1.0 ml / min. Detector: Conductivity detector Column temperature: 40 ° C Injection volume: 50 μl <Preparation of separating agent with polysaccharide derivative supported on silica gel>
The above amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was dissolved in chloroform / N, N-dimethylacetamide, and this solution was uniformly sprinkled on carbamoyl-treated silica gel. Tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) is converted to silica gel (manufactured by Daiso Corporation, particle size 7 μm, pore size 1,000 mm)
To obtain a separating agent.
【００２４】＜光学分割カラムの作製＞上記のアミロー
ストリス（3,5 −ジメチルフェニルカルバメート）をシ
リカゲルへ担持させた分離剤を、長さ25cm、内径0.46cm
のステンレススチール製カラムにスラリー充填法で充填
して光学分割カラムを作製した。<Preparation of Optical Resolution Column> The above-mentioned separating agent having amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) supported on silica gel was applied to a column having a length of 25 cm and an inner diameter of 0.46 cm.
Was packed in a stainless steel column by a slurry filling method to produce an optically split column.
【００２５】＜光学分割カラムの性能評価＞上記の光学
分割カラムを用いて、下記式（Ｉ）で表されるベラパミ
ル、下記式（II）で表されるジメトチアジン及び下記式
(III) で表されるクロルフェニラミンの光学分割実験を
行った。性能評価には日本分光製JASCO 875-UVを使用
し、溶離液はヘキサン／２−プロパノール＝90／10（ｖ
／ｖ）、流速は1.0 ml／min.、温度は25℃の条件で行っ
た。結果を表６に示す。<Evaluation of Performance of Optical Resolution Column> Using the above-mentioned optical resolution column, verapamil represented by the following formula (I), dimethothiazine represented by the following formula (II) and the following formula
An optical resolution experiment of chlorpheniramine represented by (III) was performed. JASCO 875-UV manufactured by JASCO was used for performance evaluation, and the eluent was hexane / 2-propanol = 90/10 (v
/ V), the flow rate was 1.0 ml / min., And the temperature was 25 ° C. Table 6 shows the results.
【００２６】[0026]
【化１】 Embedded image
【００２７】実施例２ ＜多糖誘導体の合成＞実施例１と同様の方法で測定した
含有イオン濃度が表２に示す値である合成単分散アミロ
ース((株）中埜酢店製, Mw／Mn＜1.1(ポリスチレン換
算), Mw＝50,000（光散乱法・超遠心沈降平衡法から算
出))を用いて、実施例１と同様にしてアミローストリス
（3,5 −ジメチルフェニルカルバメート）を得た。Example 2 <Synthesis of Polysaccharide Derivative> Synthetic monodispersed amylose (manufactured by Nakano Vinegar Co., Ltd., Mw / Mn <) whose ion concentration measured by the same method as in Example 1 is the value shown in Table 2. Amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was obtained in the same manner as in Example 1 using 1.1 (in terms of polystyrene) and Mw = 50,000 (calculated from light scattering method / ultracentrifugal sedimentation method).
【００２８】[0028]
【表２】 [Table 2]
【００２９】＜多糖誘導体をシリカゲルへ担持させた分
離剤の調製＞上記のアミローストリス（3,5 −ジメチル
フェニルカルバメート）を用いて、実施例１と同様にし
て、シリカゲルへ担持させた分離剤を調製した。<Preparation of Separating Agent Supporting Polysaccharide Derivative on Silica Gel> Using the above amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate), the separating agent supported on silica gel was prepared in the same manner as in Example 1. Prepared.
【００３０】＜光学分割カラムの作製＞上記のアミロー
ストリス（3,5 −ジメチルフェニルカルバメート）をシ
リカゲルへ担持させた分離剤を用いて、実施例１と同様
にして、光学分割カラムを作製した。<Preparation of Optical Resolution Column> An optical resolution column was prepared in the same manner as in Example 1 using the above-mentioned separating agent in which amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was supported on silica gel.
【００３１】＜光学分割カラムの性能評価＞上記の光学
分割カラムを用いて、実施例１と同様にして、ベラパミ
ル、ジメトチアジン及びクロルフェニラミンの光学分割
実験を行った。結果を表６に示す。<Evaluation of Performance of Optical Resolution Column> Using the above-mentioned optical resolution column, an optical resolution experiment was performed on verapamil, dimethothiazine and chlorpheniramine in the same manner as in Example 1. Table 6 shows the results.
【００３２】実施例３ ＜多糖誘導体の合成＞実施例１と同様の方法で測定した
含有イオン濃度が表３に示す値である合成単分散アミロ
ース((株）中埜酢店製, Mw／Mn＜1.1(ポリスチレン換
算), Mw＝57,000（光散乱法・超遠心沈降平衡法から算
出))を用いて、実施例１と同様にしてアミローストリス
（3,5 −ジメチルフェニルカルバメート）を得た。Example 3 <Synthesis of Polysaccharide Derivative> Synthetic monodispersed amylose (manufactured by Nakano Vinegar Co., Ltd., Mw / Mn <) whose ion concentration measured by the same method as in Example 1 is the value shown in Table 3. Amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was obtained in the same manner as in Example 1 using 1.1 (in terms of polystyrene) and Mw = 57,000 (calculated from light scattering method / ultracentrifugal sedimentation equilibrium method).
【００３３】[0033]
【表３】 [Table 3]
【００３４】＜多糖誘導体をシリカゲルへ担持させた分
離剤の調製＞上記のアミローストリス（3,5 −ジメチル
フェニルカルバメート）を用いて、実施例１と同様にし
て、シリカゲルへ担持させた分離剤を調製した。<Preparation of Separating Agent Supporting Polysaccharide Derivative on Silica Gel> Using the above amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate), the separating agent supported on silica gel was prepared in the same manner as in Example 1. Prepared.
【００３５】＜光学分割カラムの作製＞上記のアミロー
ストリス（3,5 −ジメチルフェニルカルバメート）をシ
リカゲルへ担持させた分離剤を用いて、実施例１と同様
にして、光学分割カラムを作製した。<Preparation of Optical Resolution Column> An optical resolution column was prepared in the same manner as in Example 1 using the above-mentioned separating agent in which amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was supported on silica gel.
【００３６】＜光学分割カラムの性能評価＞上記の光学
分割カラムを用いて、実施例１と同様にして、ベラパミ
ル、ジメトチアジン及びクロルフェニラミンの光学分割
実験を行った。結果を表６に示す。<Evaluation of Performance of Optical Resolution Column> Using the above-mentioned optical resolution column, an optical resolution experiment was performed on verapamil, dimethothiazine and chlorpheniramine in the same manner as in Example 1. Table 6 shows the results.
【００３７】比較例１ ＜多糖誘導体の合成＞実施例１と同様の方法で測定した
含有イオン濃度が表４に示す値である合成単分散アミロ
ース((株）中埜酢店製, Mw／Mn＜1.1(ポリスチレン換
算), Mw＝54,300（光散乱法・超遠心沈降平衡法から算
出))を用いて、実施例１と同様にしてアミローストリス
（3,5 −ジメチルフェニルカルバメート）を得た。Comparative Example 1 <Synthesis of Polysaccharide Derivative> Synthetic monodispersed amylose (manufactured by Nakano Vinegar Co., Ltd., Mw / Mn <) whose ion concentration measured by the same method as in Example 1 is the value shown in Table 4. Amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was obtained in the same manner as in Example 1 using 1.1 (polystyrene equivalent), Mw = 54,300 (calculated from light scattering method and ultracentrifugation sedimentation method).
【００３８】[0038]
【表４】 [Table 4]
【００３９】＜多糖誘導体をシリカゲルへ担持させた分
離剤の調製＞上記のアミローストリス（3,5 −ジメチル
フェニルカルバメート）を用いて、実施例１と同様にし
て、シリカゲルへ担持させた分離剤を調製した。<Preparation of Separating Agent Supporting Polysaccharide Derivative on Silica Gel> Using the above amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate), a separating agent supported on silica gel was prepared in the same manner as in Example 1. Prepared.
【００４０】＜光学分割カラムの作製＞上記のアミロー
ストリス（3,5 −ジメチルフェニルカルバメート）をシ
リカゲルへ担持させた分離剤を用いて、実施例１と同様
にして、光学分割カラムを作製した。<Preparation of Optical Resolution Column> An optical resolution column was prepared in the same manner as in Example 1 using the above-mentioned separating agent in which amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was supported on silica gel.
【００４１】＜光学分割カラムの性能評価＞上記の光学
分割カラムを用いて、実施例１と同様にして、ベラパミ
ル、ジメトチアジン及びクロルフェニラミンの光学分割
実験を行った。結果を表６に示す。<Evaluation of Performance of Optical Resolution Column> Using the above-mentioned optical resolution column, an optical resolution experiment was performed on verapamil, dimethothiazine and chlorpheniramine in the same manner as in Example 1. Table 6 shows the results.
【００４２】比較例２ ＜多糖誘導体の合成＞実施例１と同様の方法で測定した
含有イオン濃度が表５に示す値である合成単分散アミロ
ース((株）中埜酢店製, Mw／Mn＜1.1(ポリスチレン換
算), Mw＝55,000（光散乱法・超遠心沈降平衡法から算
出))を用いて、実施例１と同様にしてアミローストリス
（3,5 −ジメチルフェニルカルバメート）を得た。Comparative Example 2 <Synthesis of Polysaccharide Derivative> Synthetic monodispersed amylose (manufactured by Nakano Vinegar Co., Ltd., Mw / Mn <) whose ion concentration measured by the same method as in Example 1 is the value shown in Table 5. Amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was obtained in the same manner as in Example 1 using 1.1 (polystyrene conversion), Mw = 55,000 (calculated from light scattering method / ultracentrifugal sedimentation equilibrium method).
【００４３】[0043]
【表５】 [Table 5]
【００４４】＜多糖誘導体をシリカゲルへ担持させた分
離剤の調製＞上記のアミローストリス（3,5 −ジメチル
フェニルカルバメート）を用いて、実施例１と同様にし
て、シリカゲルへ担持させた分離剤を調製した。<Preparation of Separating Agent Supporting Polysaccharide Derivative on Silica Gel> Using the above amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate), the separating agent supported on silica gel was prepared in the same manner as in Example 1. Prepared.
【００４５】＜光学分割カラムの作製＞上記のアミロー
ストリス（3,5 −ジメチルフェニルカルバメート）をシ
リカゲルへ担持させた分離剤を用いて、実施例１と同様
にして、光学分割カラムを作製した。<Preparation of Optical Resolution Column> An optical resolution column was prepared in the same manner as in Example 1 using the above-mentioned separating agent in which amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was supported on silica gel.
【００４６】＜光学分割カラムの性能評価＞上記の光学
分割カラムを用いて、実施例１と同様にして、ベラパミ
ル、ジメトチアジン及びクロルフェニラミンの光学分割
実験を行った。結果を表６に示す。<Evaluation of Performance of Optical Resolution Column> Using the above-mentioned optical resolution column, an optical resolution experiment was performed on verapamil, dimethothiazine and chlorpheniramine in the same manner as in Example 1. Table 6 shows the results.
【００４７】[0047]
【表６】 [Table 6]
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｃ 255/43 Ｃ０７Ｃ 255/43 Ｃ０７Ｄ 213/38 Ｃ０７Ｄ 213/38 279/28 279/28 Ｆターム(参考） 4C036 AA03 AA14 4C055 AA01 BA02 BA27 BB02 CA01 DA01 FA42 4G066 AA13B AA16B AA17B AA22C AA31B AA47B AA50B AA52B AA53B AC01B BA09 BA20 BA23 CA19 CA20 CA54 EA01 FA12 FA37 4H006 AA02 AA03 AB81 AC83 AD17 BA50 BA53 BA56 BA68 BA71──────────────────────────────────────────────────の Continued on the front page (51) Int.Cl. 7 Identification symbol FI Theme court ゛ (Reference) C07C 255/43 C07C 255/43 C07D 213/38 C07D 213/38 279/28 279/28 F-term (Reference) 4C036 AA03 AA14 4C055 AA01 BA02 BA27 BB02 CA01 DA01 FA42 4G066 AA13B AA16B AA17B AA22C AA31B AA47B AA50B AA52B AA53B AC01B BA09 BA20 BA23 CA19 CA20 CA54 EA01 FA12 BA37 A81 BA37 A81A37
Claims (6)
以下である多糖から誘導した多糖誘導体からなる分離
剤。1. The content ion concentration is 3 ppm for each ion alone.
A separating agent comprising a polysaccharide derivative derived from the following polysaccharide.
燐酸イオン、硫酸イオン、ナトリウムイオン、アンモニ
ウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン及びマ
グネシウムイオンからなる群から選ばれた１種又は２種
以上である請求項１記載の分離剤。2. The method according to claim 1, wherein the ions are chloride ions, nitrate ions,
The separating agent according to claim 1, wherein the separating agent is at least one member selected from the group consisting of phosphate ions, sulfate ions, sodium ions, ammonium ions, potassium ions, calcium ions, and magnesium ions.
イオンから選ばれたものである請求項１記載の分離剤。3. The separating agent according to claim 1, wherein the ions contained are selected from phosphate ions and sodium ions.
項１〜３のいずれか一項に記載の分離剤。4. The separating agent according to claim 1, wherein the polysaccharide derivative is supported on a carrier.
〜100 μm のシリカゲルである請求項４記載の分離剤。5. The carrier has a particle size of 1 μm to 10 mm and an average pore size of 10 mm.
The separating agent according to claim 4, wherein the separating agent is silica gel having a size of from 100 to 100 µm.
求項４または５記載の分離剤。6. The separating agent according to claim 4, which is used for liquid chromatography.
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