JP3746315B2

JP3746315B2 - Separating agent

Info

Publication number: JP3746315B2
Application number: JP17076095A
Authority: JP
Inventors: 達史村上
Original assignee: Daicel Chemical Industries Ltd
Current assignee: Daicel Corp
Priority date: 1994-07-07
Filing date: 1995-07-06
Publication date: 2006-02-15
Anticipated expiration: 2015-07-06
Also published as: JPH08113541A

Description

【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は分離剤に関し、特に分子量分布の程度を示す値Mw／Mn（Mwは重量平均分子量、Mnは数平均分子量（ポリスチレン換算））が１〜３の多糖誘導体からなる、ラセミ体の光学分割に有用な分離剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】
多糖誘導体からなる充填剤は、光学異性体用分離剤として有用であることは、従来から知られている（Y.OKAMOTO, M.KAWASHIMA and K.HATADA, J. Am. Chem.Soc.；106, 53 〜57, 1984、特公昭63−12850 号公報など）。この多糖誘導体は、通常、シリカゲル担体に担持させて用いられ、ラセミ体に対する光学分割能が非常に高く、光学異性体の分析や分取に広く使われている。しかしながら、用いる多糖誘導体の分子量分布の巾が広いため、カラムから低分子量の多糖誘導体の溶出があり、カラム操作時のベースラインの安定性に欠ける、溶離液として使用できる溶媒の範囲が狭いなどの問題があった。
したがって、本発明の目的は、多糖誘導体からなる分離剤において、低分子量の多糖誘導体の溶出がなく、カラム操作時のベースラインの安定性がよく、溶離液として使用できる溶媒の範囲が広いような分離剤を提供することにある。
【０００３】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、多糖誘導体のもつ有用な性質を最大限に発揮でき、かつ上記の問題を克服した分離剤について鋭意研究した結果、本発明に到達した。
即ち、本発明は、分子量分布の程度を示す値Mw／Mn（Mwは重量平均分子量、Mnは数平均分子量（ポリスチレン換算））が１〜３の多糖誘導体からなり、前記多糖誘導体の重量平均分子量が 54,300 〜 500,000 （ポリスチレン換算）であり、前記多糖誘導体が担体に担持されている光学異性体用分離剤を提供するものである。
【０００４】
本発明における多糖とは、合成多糖、天然多糖、及び天然物変性多糖のいずれかを問わず、光学活性であればいかなるものでもよいが、好ましくは結合様式の規則性の高いものである。例示すれば、β−1,4 −グルカン（セルロース）、α−1,4 −グルカン（アミロース、アミロペクチン）、α−1,6 −グルカン（デキストラン）、β−1,6 −グルカン（プスッラン）、β−1,3 −グルカン（カードラン、シゾフィラン）、α−1,3 −グルカン、β−1,2 −グルカン（Crown Gall多糖）、β−1,4 −ガラクタン、β−1,4 −マンナン、α−1,6 −マンナン、β−1,2 −フラクタン（イヌリン）、β−2,6 −フラクタン（レバン）、β−1,4 −キシラン、β−1,3 −キシラン、β−1,4 −キトサン、β−1,4 −Ｎ−アセチルキトサン（キチン）、プルラン、アガロース、アルギン酸、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリンなどであり、アミロースを含有する澱粉等も含まれる。この中、好ましいものは、高純度の多糖を容易に得ることのできるセルロース、アミロース、β−1,4 −キトサン、キチン、β−1,4 −マンナン、β−1,4 −キシラン、イヌリン、カードランなどであり、さらに好ましくは、セルロース、アミロースである。
【０００５】
本発明における多糖誘導体とは、多糖の水酸基に、該水酸基と反応し得る官能基を有する化合物を、公知の方法で、エステル結合、ウレタン結合などにより結合させ、誘導体化したものである。ここで、水酸基と反応し得る官能基を有する化合物とは、脂肪族、脂環族、芳香族、ヘテロ芳香族などのイソシアン酸誘導体、カルボン酸、エステル、酸ハライド、酸アミド、ハロゲン化物、エポキシド、アルデヒド、アルコール、その他脱離基を有する化合物などである。
多糖誘導体として特に好ましいものは、エステル誘導体またはカルバメート誘導体である。
【０００６】
高分子物質は、一般に重合同族列の混合物で、重合度または分子量の異なる多数の分子からなる。分子量の広がりを分子量分布といい、広がり具合は分子量分布曲線で示される。平均分子量には、重量平均分子量（Mw）と数平均分子量（Mn）があり、その比率Mw／Mnは分子量分布が広い範囲にわたるとき、大きい値を示すので、この数値は、分子量分布の程度を示す。単分散に近い程、Mw／Mnは１に近づく。単位体積中に、Miなる分子量の分子がNi個存在するものとすれば、重量平均分子量（Mw）および数平均分子量（Mn）は次式で定義される。
Mw＝Σ（Mi²・Ni）／Σ（Mi・Ni）
Mn＝Σ（Mi・Ni）／Σ（Ni）
本発明における多糖の平均重合度（１分子中に含まれるピラノース又はフラノース環の平均数）は５以上、好ましくは10以上であり、特に上限はないが、500 以下であることが取り扱いの容易さにおいて好ましい。
本発明における多糖誘導体の重量平均分子量（ポリスチレン換算）は、1,000 〜500,000 が好ましく、更に好ましくは20,000〜500,000 である。
【０００７】
本発明における多糖誘導体は、分子量分布の巾が狭いことが特徴で、Mw／Mnの値が１〜３であることが必要である。この範囲にあれば、光学異性体分離用液体クロマトグラフィーカラムの充填剤に用いたとき、低分子量の多糖誘導体の溶出がなく、本発明の目的が達せられる。
本発明における多糖誘導体を得るための具体的方法としては、原料として単分散の多糖を用いて製造する方法が挙げられる。このような単分散の多糖は酵素法合成により得ることができる。天然多糖は分子量分布の巾が広く、高度の分別精製が必要である。
【０００８】
本発明における多糖誘導体を液体クロマト用充填剤として使用するには、これをそのままカラムに充填するか、担体に担持させてから充填する。
そのままカラムに充填するときは、充填剤は粒状であることが好ましいことから、多糖誘導体を破砕するか、ビーズ状にすることが好ましい。粒子の大きさは、使用するカラムの大きさによって異なるが、１μm 〜10mmであり、好ましくは１μm 〜300 μm で、粒子は多孔質であることが好ましい。
【０００９】
さらに、分離剤の耐圧能力の向上、収縮の防止、理論段数の向上のために、本発明における多糖誘導体は、担体に担持させることが好ましい。適当な担体の大きさは、一般に粒径１μm 〜10mmであり、好ましくは１μm 〜300 μm である。担体は多孔質であることが好ましく、平均孔径は10Å〜100 μm であり、好ましくは50Å〜50,000Åである。担体材質としては、シリカゲル、アルミナなどの無機物質、ポリスチレン、ポリアクリルアミドなどの有機物質が挙げられるが、好ましくはシリカゲルである。
【００１０】
【発明の効果】
本発明の多糖誘導体からなる分離剤は、低分子量の多糖誘導体の溶出がなく、カラム操作時のベースラインの安定性に優れ、即ちベースラインの安定化時間が短く、操作時間が非常に短縮される。また、溶離液に使用できる溶媒の範囲が、従来ヘキサン、エタノール、プロパノールなどに限られていたのが、他の溶媒も使用可能となった。
【００１１】
【実施例】
以下に本発明を実施例によって詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００１２】
実施例１
＜多糖誘導体の合成＞
合成単分散アミロース（Mw／Mn＜1.1 、Mw＝24,848（光散乱法・超遠心沈降平衡法から算出））２ｇをピリジン中で、3,5 −ジメチルフェニルイソシアネート17ｇと30時間加熱反応させた。反応生成物をメタノール攪拌下に注ぎ込んで沈澱させ、G4グラスフィルターで濾取して、メタノールで２回洗浄した後、80℃で５時間真空乾燥した。得られた生成物にクロロホルムとジメチルアセトアミドを加え完溶させて、再び、メタノール攪拌下に注ぎ込み沈澱させ、G4グラスフィルターで濾取して、メタノールで２回洗浄した後、80℃で５時間真空乾燥し、精製された生成物アミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）を得た。Mw／Mn＝1.22、Mw＝55,500（いずれもポリスチレン換算）であった。
【００１３】
＜多糖誘導体をシリカゲルへ担持させた分離剤の調製＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）をクロロホルム／ジメチルアセトアミドに溶解し、この溶液を、カルバモイル処理を施したシリカゲルに均一にふりかけた後、溶媒を留去してアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）をシリカゲル（ダイソー製、粒径７μm 、孔径1,000 Å）へ担持させた。
【００１４】
＜光学分割カラムの作製＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）をシリカゲルへ担持させた分離剤を、長さ25cm、内径0.46cmのステンレススチール製カラムにスラリー充填法で充填して光学分割カラムを作製した。
【００１５】
＜光学分割カラムの性能評価＞
上記の光学分割カラムを用いて、標準化合物トランススチルベンオキシドの光学分割実験を行った。性能評価には日本分光製JASCO 875-UVを使用し、溶離液はヘキサン／２−プロパノール＝90／10（ｖ／ｖ）、流速は 1.0ml／min 、温度は25℃の条件下で行った。結果を表１に示す。
なお、表中における用語の定義は次の通りである。
分離係数（α）：
より強く吸着される対掌体の容量比／より弱く吸着される対掌体の容量比
分離度（Rs）：
２×（より強く吸着される対掌体とより弱く吸着される対掌体の両ピーク間の距離）／両ピークのバンド巾の合計
ベースラインの安定化時間：
UV検出器の感度を0.16、レコーダーのフルスケールを10mVにして、ベースラインが30分間水平になったときを安定したとみなして、それまでに要する時間。例えば、溶離液を通液し始めて30分後からベースラインが水平になったときは、安定化時間は１時間とする。
溶出量：
溶離液ヘキサン／エタノール＝75／25（ｖ／ｖ）、流速 1.0ml／min 、温度40℃の条件下で、10時間通液したときの排出液を全量濃縮した残渣の量。
【００１６】
実施例２
＜多糖誘導体の合成＞
合成単分散アミロース（Mw／Mn＜1.1 、Mw＝27,603（光散乱法・超遠心沈降平衡法から算出））を用いて、実施例１と同様にしてアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）を得た。Mw／Mn＝1.25、Mw＝54,300（いずれもポリスチレン換算）であった。
＜多糖誘導体をシリカゲルへ担持させた分離剤の調製＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）を用いて、実施例１と同様にして、シリカゲルへ担持させた分離剤を調製した。
【００１７】
＜光学分割カラムの作製＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）をシリカゲルへ担持させた分離剤を用いて、実施例１と同様にして、光学分割カラムを作製した。
＜光学分割カラムの性能評価＞
上記の光学分割カラムを用いて、実施例１と同様にして、標準化合物トランススチルベンオキシドの光学分割実験を行った。結果を表１に示す。
【００１８】
実施例３
＜多糖誘導体の合成＞
合成単分散アミロース（Mw／Mn＜1.1 、Mw＝52,268（光散乱法・超遠心沈降平衡法から算出））を用いて、実施例１と同様にしてアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）を得た。Mw／Mn＝1.47、Mw＝159,300(いずれもポリスチレン換算）であった。
＜多糖誘導体をシリカゲルへ担持させた分離剤の調製＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）を用いて、実施例１と同様にして、シリカゲルへ担持させた分離剤を調製した。
【００１９】
＜光学分割カラムの作製＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）をシリカゲルへ担持させた分離剤を用いて、実施例１と同様にして、光学分割カラムを作製した。
＜光学分割カラムの性能評価＞
上記の光学分割カラムを用いて、実施例１と同様にして、標準化合物トランススチルベンオキシドの光学分割実験を行った。結果を表１に示す。
【００２０】
＜溶出量の実験＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）をシリカゲルへ担持させた分離剤を用いて、長さ25cm、内径1.0cm のステンレススチール製カラムにスラリー充填法で充填して光学分割カラムを作製した。この光学分割カラムを用いて、前記の要領にて溶出量の実験を行った。結果を表１に示す。
【００２１】
実施例４
＜多糖誘導体の合成＞
合成単分散アミロース（Mw／Mn＜1.1 、Mw＝74,510（光散乱法・超遠心沈降平衡法から算出））を用いて、実施例１と同様にしてアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）を得た。Mw／Mn＝2.21、Mw＝367,600(いずれもポリスチレン換算）であった。
＜多糖誘導体をシリカゲルへ担持させた分離剤の調製＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）を用いて、実施例１と同様にして、シリカゲルへ担持させた分離剤を調製した。
【００２２】
＜光学分割カラムの作製＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）をシリカゲルへ担持させた分離剤を用いて、実施例１と同様にして、光学分割カラムを作製した。
＜光学分割カラムの性能評価＞
上記の光学分割カラムを用いて、実施例１と同様にして、標準化合物トランススチルベンオキシドの光学分割実験を行った。結果を表１に示す。
【００２３】
比較例１
＜多糖誘導体の合成＞
分子量分布の広い天然アミロースを用いて、実施例１と同様にしてアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）を得た。Mw／Mn＝5.29、Mw＝272,700(いずれもポリスチレン換算）であった。
＜多糖誘導体をシリカゲルへ担持させた分離剤の調製＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）を用いて、実施例１と同様にして、シリカゲルへ担持させた分離剤を調製した。
【００２４】
＜光学分割カラムの作製＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）をシリカゲルへ担持させた分離剤を用いて、実施例１と同様にして、光学分割カラムを作製した。
＜光学分割カラムの性能評価＞
上記の光学分割カラムを用いて、実施例１と同様にして、標準化合物トランススチルベンオキシドの光学分割実験を行った。結果を表１に示す。
【００２５】
＜溶出量の実験＞
上記のアミローストリス(3,5−ジメチルフェニルカルバメート）をシリカゲルへ担持させた分離剤を用いて、長さ25cm、内径1.0cm のステンレススチール製カラムにスラリー充填法で充填して光学分割カラムを作製した。この光学分割カラムを用いて、前記の要領にて溶出量の実験を行った。結果を表１に示す。
【００２６】
【表１】

[0001]
[Industrial application fields]
The present invention relates to a separating agent, and in particular, optical resolution of a racemate comprising a polysaccharide derivative having a value Mw / Mn (Mw is a weight average molecular weight, Mn is a number average molecular weight (polystyrene conversion)) of 1 to 3 indicating the degree of molecular weight distribution. It relates to a separating agent useful in
[0002]
[Background Art and Problems to be Solved by the Invention]
It has been conventionally known that fillers composed of polysaccharide derivatives are useful as separation agents for optical isomers (Y. OKAMOTO, M. KAWASHIMA and K. HATADA, J. Am. Chem. Soc .; 106 , 53-57, 1984, JP-B 63-12850, etc.). This polysaccharide derivative is usually used by being supported on a silica gel carrier, has a very high optical resolution for a racemate, and is widely used for analysis and fractionation of optical isomers. However, because the molecular weight distribution of the polysaccharide derivatives used is wide, elution of low molecular weight polysaccharide derivatives from the column results in lack of baseline stability during column operation, and the range of solvents that can be used as eluents is narrow. There was a problem.
Therefore, an object of the present invention is that a separating agent comprising a polysaccharide derivative does not elute low molecular weight polysaccharide derivatives, has a good baseline stability during column operation, and has a wide range of solvents that can be used as an eluent. It is to provide a separating agent.
[0003]
[Means for Solving the Problems]
The inventors of the present invention have reached the present invention as a result of diligent research on a separating agent that can maximize the useful properties of polysaccharide derivatives and overcome the above problems.
That is, the present invention, the value indicates the degree of molecular weight distribution Mw / Mn (Mw is weight average molecular weight, Mn: number-average molecular weight (polystyrene equivalent)) Ri is Do the polysaccharide derivative of 1-3, the weight average of the polysaccharide derivative The present invention provides a separating agent for optical isomers having a molecular weight of 54,300 to 500,000 (polystyrene equivalent) and having the polysaccharide derivative supported on a carrier .
[0004]
The polysaccharide in the present invention may be any optical activity regardless of any of a synthetic polysaccharide, a natural polysaccharide, and a natural product-modified polysaccharide, but preferably has a high regularity of the binding mode. For example, β-1,4-glucan (cellulose), α-1,4-glucan (amylose, amylopectin), α-1,6-glucan (dextran), β-1,6-glucan (pusullan), β-1,3-glucan (curdlan, schizophyllan), α-1,3-glucan, β-1,2-glucan (Crown Gall polysaccharide), β-1,4-galactan, β-1,4-mannan , Α-1,6-mannan, β-1,2-fructan (inulin), β-2,6-fructan (levan), β-1,4-xylan, β-1,3-xylan, β-1 , 4-chitosan, β-1,4-N-acetylchitosan (chitin), pullulan, agarose, alginic acid, α-cyclodextrin, β-cyclodextrin, γ-cyclodextrin, etc., starch containing amylose, etc. included. Among these, preferred are cellulose, amylose, β-1,4-chitosan, chitin, β-1,4-mannan, β-1,4-xylan, inulin, from which high-purity polysaccharide can be easily obtained. Curdlan and the like, more preferably cellulose and amylose.
[0005]
The polysaccharide derivative in the present invention is a derivative obtained by bonding a compound having a functional group capable of reacting with a hydroxyl group of a polysaccharide by an ester bond, a urethane bond or the like by a known method. Here, the compound having a functional group capable of reacting with a hydroxyl group includes aliphatic, alicyclic, aromatic and heteroaromatic isocyanate derivatives, carboxylic acids, esters, acid halides, acid amides, halides, epoxides. Aldehydes, alcohols, and other compounds having a leaving group.
Particularly preferred as polysaccharide derivatives are ester derivatives or carbamate derivatives.
[0006]
The polymeric material is generally a mixture of polymerized homologous sequences and consists of a number of molecules having different degrees of polymerization or molecular weight. The molecular weight spread is called a molecular weight distribution, and the extent of the spread is indicated by a molecular weight distribution curve. The average molecular weight includes weight average molecular weight (Mw) and number average molecular weight (Mn), and the ratio Mw / Mn shows a large value when the molecular weight distribution covers a wide range. Show. The closer to monodispersion, the closer Mw / Mn is to 1. If there are Ni molecules having a molecular weight of Mi in the unit volume, the weight average molecular weight (Mw) and the number average molecular weight (Mn) are defined by the following equations.
Mw = Σ (Mi ² · Ni) / Σ (Mi · Ni)
Mn = Σ (Mi · Ni) / Σ (Ni)
The average degree of polymerization of the polysaccharide in the present invention (average number of pyranose or furanose rings contained in one molecule) is 5 or more, preferably 10 or more, and there is no upper limit, but 500 or less is easy to handle. Is preferable.
The weight average molecular weight (polystyrene conversion) of the polysaccharide derivative in the present invention is preferably 1,000 to 500,000, more preferably 20,000 to 500,000.
[0007]
The polysaccharide derivative in the present invention is characterized by a narrow molecular weight distribution, and it is necessary that the value of Mw / Mn is 1 to 3. Within this range, when used as a packing material for a liquid chromatography column for optical isomer separation, there is no elution of low molecular weight polysaccharide derivatives and the object of the present invention can be achieved.
A specific method for obtaining the polysaccharide derivative in the present invention includes a method of producing using a monodispersed polysaccharide as a raw material. Such monodisperse polysaccharides can be obtained by enzymatic synthesis. Natural polysaccharides have a wide molecular weight distribution and require a high degree of fractional purification.
[0008]
In order to use the polysaccharide derivative in the present invention as a liquid chromatographic packing material, it is packed in a column as it is or is loaded on a carrier.
When the column is packed as it is, it is preferable that the packing material is granular, and therefore it is preferable to crush the polysaccharide derivative or make it into beads. The particle size varies depending on the size of the column used, but is 1 μm to 10 mm, preferably 1 μm to 300 μm, and the particles are preferably porous.
[0009]
Furthermore, the polysaccharide derivative in the present invention is preferably supported on a carrier in order to improve the pressure resistance of the separating agent, prevent shrinkage, and improve the number of theoretical plates. Suitable carrier sizes are generally 1 μm to 10 mm particle size, preferably 1 μm to 300 μm. The carrier is preferably porous, and the average pore size is 10 to 100 μm, preferably 50 to 50,000. Examples of the carrier material include inorganic substances such as silica gel and alumina, and organic substances such as polystyrene and polyacrylamide, with silica gel being preferred.
[0010]
【The invention's effect】
The separation agent comprising the polysaccharide derivative of the present invention has no elution of low molecular weight polysaccharide derivatives and is excellent in baseline stability during column operation, that is, the stabilization time of the baseline is short and the operation time is greatly shortened. The In addition, the range of solvents that can be used in the eluent is conventionally limited to hexane, ethanol, propanol, etc., but other solvents can also be used.
[0011]
【Example】
EXAMPLES The present invention will be described in detail below by examples, but the present invention is not limited to these examples.
[0012]
Example 1
<Synthesis of polysaccharide derivatives>
2 g of synthetic monodisperse amylose (Mw / Mn <1.1, Mw = 24,848 (calculated from light scattering method / ultracentrifugation equilibrium method)) was reacted with 17 g of 3,5-dimethylphenyl isocyanate in pyridine for 30 hours. The reaction product was poured into methanol under stirring, precipitated, filtered through a G4 glass filter, washed twice with methanol, and then vacuum dried at 80 ° C. for 5 hours. Chloroform and dimethylacetamide were added to the resulting product to completely dissolve it, poured again into methanol under stirring, precipitated, filtered through a G4 glass filter, washed twice with methanol, and then vacuumed at 80 ° C. for 5 hours. Drying gave the purified product amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate). Mw / Mn = 1.22 and Mw = 55,500 (both in terms of polystyrene).
[0013]
<Preparation of separating agent with polysaccharide derivative supported on silica gel>
The above amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was dissolved in chloroform / dimethylacetamide, and this solution was uniformly sprinkled onto carbamoyl-treated silica gel. Then, the solvent was distilled off to remove amylose tris (3,3 5-Dimethylphenylcarbamate) was supported on silica gel (manufactured by Daiso, particle size 7 μm, pore size 1,000 mm).
[0014]
<Preparation of optical resolution column>
An optical resolution column was prepared by packing the separation agent in which the above amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was supported on silica gel into a stainless steel column having a length of 25 cm and an inner diameter of 0.46 cm by a slurry packing method.
[0015]
<Performance evaluation of optical resolution column>
An optical resolution experiment of the standard compound transstilbene oxide was performed using the above optical resolution column. JASCO 875-UV manufactured by JASCO Corporation was used for performance evaluation, the eluent was hexane / 2-propanol = 90/10 (v / v), the flow rate was 1.0 ml / min, and the temperature was 25 ° C. . The results are shown in Table 1.
The definitions of terms in the table are as follows.
Separation factor (α):
Volume ratio of enantiomers adsorbed more strongly / Volume ratio resolution (Rs) of enantiomers adsorbed weaker:
2 × (distance between both peaks of stronger and less strongly adsorbed enantiomers) / total bandwidth of both peaks Baseline stabilization time:
The time required until the baseline is leveled for 30 minutes with the UV detector sensitivity set to 0.16 and the recorder full scale set to 10mV. For example, when the baseline becomes horizontal 30 minutes after starting to pass the eluent, the stabilization time is 1 hour.
Elution volume:
Eluent hexane / ethanol = 75/25 (v / v), flow rate 1.0 ml / min, temperature of 40 ° C. The amount of residue obtained by concentrating the whole amount of the discharged liquid when passed for 10 hours.
[0016]
Example 2
<Synthesis of polysaccharide derivatives>
Using synthetic monodispersed amylose (Mw / Mn <1.1, Mw = 27,603 (calculated from light scattering method / ultracentrifugation equilibrium method)), amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was obtained in the same manner as in Example 1. Got. Mw / Mn = 1.25 and Mw = 54,300 (both in terms of polystyrene).
<Preparation of separating agent with polysaccharide derivative supported on silica gel>
Using the amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate), a separating agent supported on silica gel was prepared in the same manner as in Example 1.
[0017]
<Preparation of optical resolution column>
An optical resolution column was prepared in the same manner as in Example 1 using a separating agent in which the above amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was supported on silica gel.
<Performance evaluation of optical resolution column>
Using the above optical resolution column, an optical resolution experiment of the standard compound transstilbene oxide was conducted in the same manner as in Example 1. The results are shown in Table 1.
[0018]
Example 3
<Synthesis of polysaccharide derivatives>
Using synthetic monodispersed amylose (Mw / Mn <1.1, Mw = 52,268 (calculated from light scattering method / ultracentrifugation equilibrium method)), amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was obtained in the same manner as in Example 1. Got. Mw / Mn = 1.47, Mw = 159,300 (both in terms of polystyrene).
<Preparation of separating agent with polysaccharide derivative supported on silica gel>
Using the amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate), a separating agent supported on silica gel was prepared in the same manner as in Example 1.
[0019]
<Preparation of optical resolution column>
An optical resolution column was prepared in the same manner as in Example 1 using a separating agent in which the above amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was supported on silica gel.
<Performance evaluation of optical resolution column>
Using the above optical resolution column, an optical resolution experiment of the standard compound transstilbene oxide was conducted in the same manner as in Example 1. The results are shown in Table 1.
[0020]
<Elution experiment>
Using the above-mentioned separating agent with amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) supported on silica gel, a 25 cm long and 1.0 cm inner diameter stainless steel column is packed by slurry packing to produce an optical resolution column. did. Using this optical resolution column, the elution amount was tested as described above. The results are shown in Table 1.
[0021]
Example 4
<Synthesis of polysaccharide derivatives>
Using synthetic monodisperse amylose (Mw / Mn <1.1, Mw = 74,510 (calculated from light scattering method / ultracentrifugation equilibrium method)), amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) in the same manner as in Example 1. Got. Mw / Mn = 2.21 and Mw = 367,600 (both in terms of polystyrene).
<Preparation of separating agent with polysaccharide derivative supported on silica gel>
Using the amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate), a separating agent supported on silica gel was prepared in the same manner as in Example 1.
[0022]
<Preparation of optical resolution column>
An optical resolution column was prepared in the same manner as in Example 1 using a separating agent in which the above amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was supported on silica gel.
<Performance evaluation of optical resolution column>
Using the above optical resolution column, an optical resolution experiment of the standard compound transstilbene oxide was conducted in the same manner as in Example 1. The results are shown in Table 1.
[0023]
Comparative Example 1
<Synthesis of polysaccharide derivatives>
Using natural amylose with a wide molecular weight distribution, amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was obtained in the same manner as in Example 1. Mw / Mn = 5.29 and Mw = 272,700 (both in terms of polystyrene).
<Preparation of separating agent with polysaccharide derivative supported on silica gel>
Using the amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate), a separating agent supported on silica gel was prepared in the same manner as in Example 1.
[0024]
<Preparation of optical resolution column>
An optical resolution column was prepared in the same manner as in Example 1 using the separating agent in which the above amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) was supported on silica gel.
<Performance evaluation of optical resolution column>
Using the above optical resolution column, an optical resolution experiment of the standard compound transstilbene oxide was conducted in the same manner as in Example 1. The results are shown in Table 1.
[0025]
<Elution experiment>
Using the above-mentioned separating agent with amylose tris (3,5-dimethylphenylcarbamate) supported on silica gel, a stainless steel column with a length of 25 cm and an inner diameter of 1.0 cm is packed by slurry packing to produce an optical resolution column. did. Using this optical resolution column, the elution amount was tested as described above. The results are shown in Table 1.
[0026]
[Table 1]

Claims

The value indicates the degree of molecular weight distribution Mw / Mn (Mw is weight average molecular weight, Mn: number-average molecular weight (polystyrene equivalent)) Ri is Do the polysaccharide derivative 1 to 3, weight average molecular weight of said polysaccharide derivative is 54,300 to 500,000 ( A separation agent for optical isomers, wherein the polysaccharide derivative is supported on a carrier .

The separating agent according to claim 1, wherein the polysaccharide derivative is an ester derivative or a carbamate derivative.

Carrier particle size 1Myuemu～10mm, separating agent according to claim 1, wherein the silica gel pore size 10A～100myuemu.

The separating agent of claim 1 for use in liquid chromatography.