ITTO20070480A1 - Impiego di pidotimod, somministrato per via intranasale per potenziare la risposta immunitaria umorale e cellulare antigene-specifica - Google Patents
Impiego di pidotimod, somministrato per via intranasale per potenziare la risposta immunitaria umorale e cellulare antigene-specifica Download PDFInfo
- Publication number
- ITTO20070480A1 ITTO20070480A1 IT000480A ITTO20070480A ITTO20070480A1 IT TO20070480 A1 ITTO20070480 A1 IT TO20070480A1 IT 000480 A IT000480 A IT 000480A IT TO20070480 A ITTO20070480 A IT TO20070480A IT TO20070480 A1 ITTO20070480 A1 IT TO20070480A1
- Authority
- IT
- Italy
- Prior art keywords
- pidotimod
- cells
- administered
- intranasal
- specific
- Prior art date
Links
- 229960001163 pidotimod Drugs 0.000 title claims description 59
- UUTKICFRNVKFRG-WDSKDSINSA-N (4R)-3-[oxo-[(2S)-5-oxo-2-pyrrolidinyl]methyl]-4-thiazolidinecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CSCN1C(=O)[C@H]1NC(=O)CC1 UUTKICFRNVKFRG-WDSKDSINSA-N 0.000 title claims description 58
- 230000028993 immune response Effects 0.000 title claims description 11
- 230000032258 transport Effects 0.000 title 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 14
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 14
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 claims description 7
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 5
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 claims description 5
- 208000020029 respiratory tract infectious disease Diseases 0.000 claims description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 4
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 4
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 claims description 2
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 27
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 26
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 14
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 11
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 11
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 11
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 6
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 6
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 6
- 238000011510 Elispot assay Methods 0.000 description 5
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 5
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 4
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 3
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 3
- 102100035793 CD83 antigen Human genes 0.000 description 3
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 3
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 3
- 101000946856 Homo sapiens CD83 antigen Proteins 0.000 description 3
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 3
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 3
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 3
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 3
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000007402 cytotoxic response Effects 0.000 description 3
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 231100000023 Cell-mediated cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 206010057250 Cell-mediated cytotoxicity Diseases 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 2
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 2
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 230000005890 cell-mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 2
- PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N ionomycin Natural products O1C(CC(O)C(C)C(O)C(C)C=CCC(C)CC(C)C(O)=CC(=O)C(C)CC(C)CC(CCC(O)=O)C)CCC1(C)C1OC(C)(C(C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N ionomycin Chemical compound O1[C@H](C[C@H](O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)/C=C/C[C@@H](C)C[C@@H](C)C(/O)=C/C(=O)[C@@H](C)C[C@@H](C)C[C@@H](CCC(O)=O)C)CC[C@@]1(C)[C@@H]1O[C@](C)([C@@H](C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N 0.000 description 2
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-4-amino-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-azaniumyl-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-carboxylatobutanoyl]amino]-6-azaniumy Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N 0.000 description 1
- -1 5-oxo-2-pyrrolidinyl Chemical group 0.000 description 1
- OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 9-ethyl-3-carbazolamine Chemical compound NC1=CC=C2N(CC)C3=CC=CC=C3C2=C1 OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 1
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108091036414 Polyinosinic:polycytidylic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 1
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 230000000093 cytochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000003284 homeostatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002663 immature myeloid dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005965 immune activity Effects 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000037041 intracellular level Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011815 naïve C57Bl6 mouse Methods 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 210000005212 secondary lymphoid organ Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
- A61K2039/541—Mucosal route
- A61K2039/543—Mucosal route intranasal
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
Description
DESCRIZIONE dell'invenzione industriale dal titolo: "Impiego di Pidotimod, somministrato per via intranasale per potenziare la risposta immunitaria umorale e cellulare antigene-specifica"
DESCRIZIONE
La presente invenzione si riferisce ad un nuovo impiego, in campo terapeutico, del principio attivo Pidotimod ed a formulazioni farmaceutiche che lo comprendono .
Il Pidotimod (acido {R}-3-[(s)-(5-osso-2-pirrolidinil)]carbonài] -tiazolidin-4-carbossilico) è un dipeptide sintetico dotato di attività irnmunomodulante in vitro ed in vivo.
Il sistema immunitario interviene nel mantenimento di un equilibrio omeostatico tra il nostro organismo e tutte le sostanze ad esso estranee; pertanto, un'anormalità di questa sua funzione può tradursi in un difetto di risposta nei confronti di strutture non-self, oppure nella perdita di tolleranza verso antigeni self: in entrambi i casi, l'errore del sistema immunitario si manifesta con segni di malattia a livello clinico.
Il Pidotimod si è mostrato in grado di espletare un effetto protettivo nei confronti dei processi infettivi (pur essendo privo di attività antimicrobica e virale diretta), come è stato verificato in modelli di infezioni sperimentali batteriche e virali, e confermato da numerosi studi clinici controllati .
In particolare, il Pidotimod aumenta la proliferazione linfocitaria e la produzione di citochine proinfiammatorie da parte di linfociti preattivati prelevati da soggetto anziani. Inoltre, esso è in grado di aumentare il rilascio di molecole antivirali (lFN-α) indotte da stimoli specifici {Poli I:C) . Studi ex vivo hanno evidenziato la capacità del Pidotimod di incrementare la stimolazione di fagociti e la relativa attività fagocitarla, così come l'attività citotossica di cellule NK.
Il Pidotimod, somministrato in compresse per via orale, ha mostrato di poter indurre, in modelli animali, una maggiore resistenza alle infezioni virali e ad una maggiore efficacia nel trattamento di infezioni respiratorie ricorrenti nel paziente pediatrico .
Studi recenti dimostrano come le vaccinazioni a livello mucosale siano in grado di potenziare le difese immunitarie dell'organismo, stimolando un<1>efficiente risposta infiammatoria locale, quindi nel sito d'ingresso del patogeno esterno.
Tuttavia, la somministrazione della sola molecola antigenica talvolta non è in grado di indurre una risposta infiammatoria efficace a livello mucosale, e questo causa della parziale degradazione enzimatica delle molecole che avviene a livello locale. Pertanto, la co-somministrazione di sostanze cosiddette adiuvanti rappresenta una strategia di largo utilizzo e di notevole interesse, in grado dì potenziare la risposta immunitaria locale e sistemica .
La presente invenzione trae origine da uno studio sperimentale che ha consentito di evidenziare un'attività diretta di Pidotimod su cellule dendrìtiche umane e la sua capacità di potenziare la comunicazione tra tali cellule del sistema immunitario innato e le cellule del sistema immunitario acquisito; i risultati di tale studio indicano inoltre che Pidotimod, somministrato per vìa mucosale intranasale, agisce in vivo come farmaco adiuvante, in grado cioè di potenziare la risposta immunitaria sia umorale, sia cellulo-mediata specifica, nei confronti di un determinato antigene.
In vista dei risultati di tale studio, costituisce un primo oggetto dell'invenzione l'impiego di Pidotimod per la preparazione di un medicinale in forma somministrabile per via mucosale intranasale, utile come adiuvante nel potenziare la risposta immunitaria sia umorale, sia cellulo-mediata specifica, nei confronti di un determinato antigene.
Lo studio attuato nell'ambito dell'invenzione ha evidenziato che Pidotimod, quando invece somministrato per via orale, non è in grado di potenziare la risposta immunitaria locale, né sistemica, nei confronti di un antigene specifico; quest'osservazione suggerisce che il Pidotimod agisca sulle cellule della mucosa delle alte vie respiratorie, generando una risposta immunitaria specifica.
In particolare, il Pidotimod sotto forma di spray nasale può essere utilizzato come farmaco capace di potenziare le risposte immunitarie a livello mucosale e sistemico, sia per prevenire le infezioni del tratto respiratorio, sia per potenziare le risposte immunitarie in corso di infezioni acute del tratto respiratorio. Inoltre, il Pidotimod può essere usato come adiuvante di vaccini mucosali a livello intranasale.
La forma di somministrazione preferita è quella di una soluzione idonea per somministrazione a spruzzo o aerosol, consistente di Pidotimod e di un veicolo liquido farmaceuticamente accettabile. Preferibilmente, la forma di somministrazione consiste di Pidotimod in soluzione acquosa fisiologica eventualmente includente conservanti, antiossidanti, antisettici e/o agenti che favoriscono l'adesione alla mucosa o la penetrazione nella mucosa. Tipicamente, il Pidotimod è utilizzato in concentrazione da 1 mg/litro a 10 g/litro, preferibilmente da 500 mg/litro a 50 g/litro.
La dose di somministrazione nell'uomo è tipicamente di circa 0,5 mg/spruzzata (corrispondente a circa 0,130 mi).
Rientra altresì nell'ambito dell'invenzione un prodotto farmaceutico in forma di preparazione combinata, contenente un vaccino mucosale e Pidotimod, in forma somministrabile per via mucosale intranasale, per l'uso simultaneo, separato o sequenziale nella prevenzione di infezioni del tratto respiratorio .
L'attività del Pidotimod che ne giustifica l'impiego conformemente all'invenzione è stata dimostrata mediante le prove sperimentali che seguono .
1- Attività di Pidotimod su cellule dendritiche umane
a) Coltivazione di cellule dendritiche umane Cellule dendritiche umane (DCs) immature sono state generate in vitro a partire da cellule monocitarie circolanti come descritto in letteratura (1-2). I monociti venivano purificati da sangue periferico per selezione positiva attraverso l'utilizzo di biglie magnetiche specifiche per CD14 (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Germania) e coltivate per 6 giorni in presenza di GM-CSF (800 U/mL) e IL-4 {500 U/mL) (R&D Systems, Minneapolis, MN, Stati Uniti).
b) Maturazione in vitro delle cellule dendritiche Cellule dendritiche immature venivano lavate e coltivate per 24-72 ore in presenza ed in assenza di un appropriato stimolo maturaiivo, quale il lipopolisaccaride batterico o LPS, alla concentrazione di 1 μg/mL. Allo stesso modo, le cellule erano stimolate con Pidotimod, a concentrazioni comprese tra 10-0,5 gg/mL. La capacità di Pidotimod di indurre maturazione fenotipica delle DCs veniva messa in evidenza con metodiche di immunofluorescenza e citofluorimetria di flusso, valutando e quantificando l’espressione dei marcatori CD80, CD83, CD86 sulla superficie delle DCs mediante l'uso di anticorpi monoclonali coniugati con fluorocromi {Becton-Dickinson, Palo Alto, CA).
c) ELISA per la quantificazione di TNF-g ed MCP-1 L<1>aumento della sintesi di citochine è il segnale di una maturazione funzionale delle DCs. Le DCs immature vengono stimolate o meno con LPS 1 μg/mL o con Pidotimod 10-0,5 μg/mL ed il surnatante delle colture cellulari raccolto dopo 24 ore dall'inizio della stimolazione. La presenza di TNF-α e di MCP-1 veniva quantificato nel mezzo;di coltura mediante saggi ELISA (Endogen, Rockford, IL, Stati Uniti) .
d) Proliferazione dei linfociti T CD44 naive cocol tivati con DCs
DCs funzionalizzate sono capaci di indurre linfociti T CD4<+>allogenici naive a proliferare ed a differenziare in cellule T helper-1 (Th-l) producenti IFN-γ. Cellule T CD4<+>naive erano purificate per selezione negativa usando un<11>CD4<+>T-cell ìsolation kit" insieme a biglie specifiche per il CD45RO (Miltenyi). I linfociti così ottenuti venivano marcati con CellTrace CESE Celi proliferation kit {Molecular Probes Eugene, OR), quindi coltivati a diversi rapporti cellulari con DCs trattate con Pidotimod in piastre da 96 pozzetti con fondo piatto. La capacità proliferativa dei linfociti CD4 era stabilita dopo 4 giorni mediante analisi citofluorimetrica .
ej Produzione di citochine a livello in tracellulare
Per analizzare la polarizzazione citochimica dei linfociti T CD4<+>, DCs e linfociti T erano cocoltivati per 6 giorni in presenza ed in assenza di Pidotimod e quindi sottoposti a ristimolazione con PMA e ionomicina. La presenza di IL-2, IFN-γ ed IL-4 intracellulare veniva analizzata mediante cìtofluorimetria di flusso utilizzando anticorpi monoclonali marcati con fluorocromi quali reagenti specifici (Becton-Dickinson).
Studi effettuati in vitro hanno consentito di evidenziare un'attività diretta di Pidotimod su cellule dendritiche umane, e la sua capacità di potenziare la comunicazione tra tali cellule del sistema immunitario innato e le cellule del sistema immunitario acquisito. Ciò è stato fatto monitorando in vitro le fasi di maturazione delle cellule dendritiche mieloidi, la loro attività oitochinica e chemochinìca, e studiando la loro capacità di attivare linfociti CD4 naive a seguito di stimolazione con Pidotimod.
Dal punto di vista sperimentale, cellule dendritiche sono state generate in vitro stimolando cellule monocitarie CD14+ ottenute da sangue periferico di soggetti sani per 6 giorni con GM-CSF IL-4. I monociti cosi trattati vanno incontro dopo 6 giorni alla down-regolazione della molecola CD14 e ad una leggera up-regolazione delle molecole HLA-DR e CD86 acquisendo nel complesso l'aspetto macroscopico e il fenotipo tipico delle cellule dendritiche mieloidi immature (fig. 1).
Le cellule dendritiche immature così generate sono state stimolate con Pidotimod e con uno stimolo maturativo noto (lipopolisaccaride batterico o LPS) che agendo attraverso il TLR4 porta a maturazione fenotipica e funzionale le cellule dendritiche mieloidi derivate dai monociti. Dopo 24 ore tale maturazione si traduce, in senso fenotipico, nella acquisizione dell'espressione sulla superficie cellulare dì molecole CD83, CD86, e nella upregolazione delle molecole HLA-DR.
In tutti i campioni esaminati, provenienti da 6 diversi soggetti, si è potuto apprezzare un incremento della popolazione CD83+, CD86+ e HLA-DR+ dopo 24h di stimolazione maturativa con Pidotimod rispetto alle cellule dendritiche immature non trattate (fig. 2), ed un concomitante incremento delle molecole proinfiammatorie TNF-α e MCP-1 rilasciate nel surnatante di coltura cellulare (fig. 3).
Si è infine valutato se nell<1>ambito di una cocoltivazione tra cellule dendritiche e linfociti CD4 naive, Pidotimod fosse in grado di indurre in queste ultime una maggiore attività proliferativa ed un incremento della polarizzazione in senso T helper-1 con produzione di IFN-γ. I risultati mostrati in figura 4 evidenziano come cellule dendritiche maturate in presenza di Pidotimod siano in grado, dopo cinque giorni di co-coltivazione, di incrementare la percentuale di linfociti CD4 proliferanti, e come tale percentuale aumentava anche dopo espansione clonale di tali linfociti in un microambiente ricco di IL-2.
Dopo otto giorni, ì linfociti T CD4+ co-coltivati con le cellule dendritiche erano stimolati con PMA ionomicina per 9 h al fine di valutare 1'acquisita potenzialità di tipo T helper-1. La percentuale di linfociti T CD4+ producenti IFN-γ era significativamente maggiore se tali cellule venivano co-coltivati con cellule dendritiche maturate in presenza di Pidotimod (fig. 5).
Questi dati dimostrano che Pidotimod .è in grado di portare a maturazione fenotipica cellule dendritiche mieloidi generate in vitro e renderle funzionali ad attivare il sistema cellulare adattativo nella sua componente linfocitaria T.
2- Attività di Pidotimod come adiuvante mucosale nel potenziamento dell'attività immunitaria innata Allo scopo di valutare la capacità del Pidotimod di innescare in vivo una risposta immunitaria tale da rafforzare 1<1>immunogenicità di altre proteine, topi C57BL/6 sono stati immunizzati con 1'antigene Ovalbumina (Ova) a livello mucosale (intranasale) in combinazione e non con il Pidotimod.
Reagenti
L'Ovalbumina (Ova, Sigma, Stati Uniti, >98% di purezza) è usata come antigene per gli studi sia in vivo che in vitro. I peptidi rappresentanti gli epitopi dominante (Ova257-364- SIINFEKL), subdominante (Ova55-62, KWRFDKL) e criptico (0vau-i3, CFDVFKEL) dell'OVA, riconosciuti dal complesso MHC di classe I {H-2k<b>) [3-5], sono stati prodotti al HZI (Braunschweig, Germania).
Animali e colture cellulari
Topi femmine C57BL/6 (H-2<b>) di 6-8 settimane {Harlan-Winkeìmann GmbH, Borchen, Germania) sono stati utilizzati e trattati in accordo con le linee guida della Comunità Europea. Gli splenociti sono stati coltivati in RPMI 1640 con 10% FCS, 100 U/ml di penicillina, 50 pg/ml di streptomicina, 5x10<“5>M 2-mercaptoetanolo e 1 mM L-glutamìna (GBCO BRL, Karlsruhe, Germania).
Protocollo di immunizzazione
Gruppi di sei topi C57BL/6 (h-2<b>) di 6-8 settimane venivano immunizzati per via intranasale o orale ai giorni 0, 14 e 21, con 50 pg di Ovalbumina (Ova) da sola ed in co-somministrazìone con 100 pg (intranasale) o 1 mg (orale) di Pidotimod. I topi di controllo venivano immunizzati con PBD. Un giorno prima di ciascuna seduta (giorni 0, 13, 20) ed una settimana dopo l'ultima immunizzazione (giorno 28), quando gli animali venivano sacrificati per inalazione di C02, dalla vena della coda venivano prelevati campioni di sangue per la determinazione di anticorpi Ova-specifici nel serio.
Allo scopo di analizzare la risposta immunitaria di tipo cellulare, linfociti di derivazione splenica e midollare venivano isolati dopo rimozione asettica della milza e del midollo osseo dal femore e dalla tibia, e le cellule venivano successivamente opportunamente coltivate. Il protocollo sperimentale di immunizzazione e le tempistiche seguite sono riassunte nello Schema 1.
Schema 1
Raccolta campioni di sangue {giorni 0, 14, 21)
Sacrificio di tre topi per gruppo di immunizzazione (giorno 28)
- raccolta sangue
- lavaggio broncheo-alveolare
- lavaggio intestinale
- prelievo milza
Esperimenti di citotossicità in vivo {un topo per gruppo) (giorno 42)
Sacrificio di due topi per gruppo di immunizzazione (giorno 78)
- raccolta sangue
- prelievo midollo osseo
- prelievo milza.
Ricerca di anticorpi anti-Ova
Il dosaggio di anticorpi specifici anti-Ova è stato eseguito attraverso tecniche ELISA. In breve, su piastre da 96 pozzetti (Nunc-ImmunoMaxiSorp, Nunc, Roskilde, Danimarca) veniva lasciato assorbire l'antigene Ova {5 μ9/πι1 in tampone carbonato pH 9,6) per 18 ore a 4°C. In seguito, le piastre venivano lavate e diluizioni in base 2 dei sieri degli animali venivano dispensate nei pozzetti e lasciate per 1 ora a 37°C. Dopo i successivi quattro lavaggi, 1'anticorpo antì-mouse secondario, biotinilato {Sigma, Chemie, Deisenhofen, Germania) veniva aggiunto in ciascun pozzetto. Seguiva un'altra incubazione di 1 ora a 37°C. Dopo i successivi lavaggi, veniva dispensata in ciascun pozzetto la streptavidina coniugata all'enzima perossidasi (Pharmìngen). Dopo 45 minuti, la reazione enzimatica veniva sviluppata attraverso l'ABTS [2,2'-azino-bis{3-etilbenzolin-6-acido sulbonico)] e l'assorbanza letta a 405 nm. I risultati ottenuti rappresentano la media _ la deviazione standard di ciascun gruppo.
Identificazione delle cellule producenti immunoglobuline attraverso saggi ELISPOT
Il numero totale delle cellule antigene-specifiche producenti IgG veniva determinato due mesi dopo l'ultima immunizzazione attraverso saggi ELI-SPOT . In breve, su piastre PVDF (Millìpore, Bedford, Stati Uniti) venivano lasciati assorbire anticorpi isotipo-specifici (Sigma, Germania) alla concentrazione di 5 mg/ml, o 1'antigene Ova (5 pg/ml in tampone carbonato, pH 9,6) per determinare rispettivamente gli anticorpi totali e quelli antigene-specif ici. In seguito, cellule derivanti dalla milza e dal midollo osseo venivano seminate in quadruplicato a diverse concentrazioni e lasciate ad incubare per 6 ore. Dopo gli opportuni lavaggi delle piastre, veniva aggiunto l'anticorpo secondario biotinilato (Sigma) per 18 ore a 4°C ed in seguito era dispensata in ciascun pozzetto la streptavidina coniugata all'enzima perossidasi (Pharmingen). Gli spot venivano sviluppati usando il 3-ammino-9-etilcarbazolo (Sigma), analizzati attraverso 1<1>Immuno-Spot 3A Analyzer e contati con 1'ImmunoSpot Image Analyzer software v3.2 (C.T.L.).
Identificazione delle cellule producenti interferone-γ attraverso saggi ELISPOT
Dopo una e otto settimane dall'ultima immunizzazione, veniva determinato attraverso saggi ELI-SPOT il numero delle cellule splenìche e midollari producenti interferone-γ. In breve, le cellule venivano seminate alla concentrazione finale di 5xl0<5>e lxl0<6>/pozzetto, in quadruplicato, in presenza e non dei peptidi MCH-I ristretti (SIINFEKL, KW RFDKL, CFDVFKEL). Dopo 16 ore di coltura, le cellule venivano rimosse e veniva aggiunto 1'anticorpo anti-interferone-γ biotinilato. Gli spot venivano in seguito sviluppati ed analizzati come descritto sopra.
Determinazione della citotossicità cellulo-mediata in vivo
Allo scopo di valutare la citotossicità cellulo-mediata dei linfociti T dei topi iifununizzati, splenociti di topi naive C57BL/6 venivano isolati come descritto sopra. Dopo tre successivi lavaggi in PBS, un'aliquota di cellule veniva 'marcata con CFSE (Molecular Probes Eugene, OR) 0,1 μΜ ed un'altra aliquota con CFSE 1 μΜ . Una metà di ciascuna aliquota di cellule venivano pulsate per 1 ora a 37°C con i peptidi dominante, subdominante e criptico di OVA alla concentrazione di 15 μg/ml. 2xl0<7>cellule venivano inoculate i.v. nei topi immunizzati e dopo 16 ore gli splenociti venivano analizzati al citofluorimetro. La percentuale di lisi era proporzionale alla scomparsa di cellule pulsate con i peptidi .
Risultati
Pidotimod somministrato per via intranasale induce la produzione di igG Ova-specifiche nel siero Allo scopo di valutare se Pidotimod fosse in grado di incrementare la produzione di anticorpi OVA-specifici nel siero, gli animali venivano immunizzati per via intranasale ed orale con Pidotimod 100 pg in associazione con OVA. I risultati ottenuti evidenziano come Pidotimod somministrato per via intranasale sia in grado di implementare fortemente l'attività immunogenica dell’OVA generando, come mostrato nella fig. 6, titoli anticorpali di IgG OVA-secifiche nel siero 35 volte più alti rispetto ai topi trattati senza Pidotimod. La somministrazione di Pidotimod per via orale non dava, invece, titoli anticorpali significativamente più alti rispetto alla somministrazione con sola OVA (dati non mostrati) .
Differenziamento degli splenociti e delle cellule del midollo osseo in elementi IFM-y secernenti dopo immunizzazione con Pidotimod per via intranasale Dopo una (fig. 7A) ed otto (fig. 7B) settimane dall'ultima immunizzazione, è stato valutato il numero di splenociti secernenti INF-γ dopo stimolazione con ì peptidi rappresentanti gli epitopi MHC di classe I ristretti. Come evidenziato nella fig.
7 , il numero di cellule INF-γ producenti dopo 16 ore di stimolazione con i peptìdì dominante e subdominante era significativamente maggiore nei campioni derivati dagli animali immunizzati con OVA+Pidotimod per via intranasale rispetto a quelli immunizzati con OVA da sola. La somministrazione di Pidotimod per via orale non dava, invece, risultati significativi rispetto alla somministrazione con la sola OVA (dati non mostrati).
Produzione di igG OVA-specifiche da parte degli splenociti e delle cellule del midollo osseo dopo immunizzazione con Pidotimod per via intranasale E<1>noto che in seguito al primo incontro con un determinato antigene, i precursori immaturi delle plasmacellule danno inizio ad una breve risposta immunitaria di tipo umorale. La maggior parte di cellule secernenti anticorpi (ASCs) che si generano in seguito ad un secondo incontro con lo stesso antigene, lasciano gli organi linfoidi secondari e si dirigono nel midollo osseo, nei tessuti linfoidi associati alle mucose e nei tessuti cronicamente infiammati. Queste ASCs assumono il fenotipo proprio delle plasmacellule mature e possono sopravvivere per più di un anno. Dal momento che 1’emivita delle diverse sottoclassi di IgG è di circa tre settimane, è di rilevante importanza il mantenimento nel tempo di un elevato titolo anticorpale da parte delle ASC del midollo osseo. Per questo motivo si è valutato, attraverso saggi ELISPOT, la capacità delle cellule midollari dei topi immunizzati di secernere IgG totali ed OVA-specifiche dopo 6 ore dal ristimolo. La ragione di una ristimolazione di breve durata ha lo scopo di determinare esclusivamente le plasmacellule già mature ed attivamente secernenti. Come mostrato nella fig. 8, nel midollo osseo dei topi che avevano ricevuto OVA Pidotimod per via intranasale era significativamente più elevato il numero di cellule secernenti IgG ed igGl sia totali che OVA-specifiche e delle sole IgG2 totali rispetto agli animali trattati solo con OVA, mentre nessuna significativa differenza è stata rilevata nel numero di splenociti producenti IgG. La somministrazione di Pidotimod per vìa orale non dava risultati significativi rispetto alla somministrazione della sola OVA (dati non mostrati).
Pidotimod genera in vivo una risposta citotossica OVA-specifica
Allo scopo dì valutare la capacità di Pidotimod di generare una risposta citotossica specifica nei confronti dell<1>Ovalbumina, dopo 21 giorni dall'ultima immunizzazione venivano inoculati splenociti di topi naive pulsati con ì peptidi di OVA e marcati con CFSE e CMTMR, come descritto precedentemente. La capacità degli splenociti dei topi immunizzati di dare orìgine ad una specifica risposta citotossica nei confronti delle cellule pulsate con i peptidi dominante e criptico di OVA era maggiore nei topi trattati con OVA Pidotimod ìntranasale {fig. 9A e fìg. 9B, rispettivamente), mentre una percentuale di lisi trascurabile si aveva nei confronti delle cellule pulsate con il peptide subdominante (fig. 9C). La somministrazione di Pidotimod per via orale non dava risultati significativi rispetto alla somministrazione della sola OVA (dati non mostrati).
Riferimenti bibliografici
1. Sallusto F, Lanzavecchia A. 1994.. Efficient presentation of soluble antigen by cultured dendritic cells is maìntaìned by granulocyte/macrophage colony-stimulating factor plus interleukin 4 and downregulated by tumor necrosis factor a. J Exp Med, 179: 1109-18.
2. Dauer M, Obermaier B, Herten J, Haerle C, Pohl K, Rothenfusser S, Schnurr Max, Endres S, Eigler A.
2003. Mature dendritic cells derived from human monocytes within 48 hours: a novel strategy for dendritic celi differentiation from blood precursor. J Immunol, 170: 4069-76.
3. Coppi G, Mailland F, 1990, Immunopharmacolofical studied on PGT/lAm a new immunostimulating drug, Pharmacol Res, 22:16-8.
4. Barchielli M, Coppi G, 1990, Experimental studies on PGT/lA, a new immunostimulating drug, Eur J Pharmaco, 183:909-12.
5. Migliorati G, D'Adamio L, Coppi G, Nicoletti I, Riccardi C, 1992, Pidotimod stimulates naturai killer celi activity and inhibits thymocyte celi death, Immunopharmacol Immunotoxicol, 14:737-48.
Claims (10)
- RIVENDICAZIONI 1. Impiego di Pidotimod per la preparazione di un medicinale in forma somministrabile per via mucosale intranasale, utile come adiuvante nel potenziare la risposta immunitaria sia umorale, sia cellulomediata specifica, nei confronti di un determinato antìgene .
- 2. Impiego di Pidotimod per la preparazione di un medicinale somministrabile per via mucosale intranasale, per la prevenzione di infezioni del tratto respiratorio o per il potenziamento della risposta immunitaria in corso di infezioni del tratto respiratorio .
- 3. Impiego di Pidotimod per la preparazione di un medicinale somministrabile per via mucosàle intranasale come adiuvante di un vaccino mucosale.
- 4. Impiego secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1 a 3, in cui detto medicinale è somministrabile a spruzzo o aerosol.
- 5. Impiego secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1 a 4, in cui detto medicinale è in forma di soluzione acquosa fisiologica.
- 6. Impiego secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1 a 5, in cui detto medicinale è in forma di soluzione contenente da 1 mg/litro a 10 g/litro di Pidotimod, preferibilmente da 500 mg/litro a 5 g/litro.
- 7 . Prodotto farmaceutico comprendente un vaccino mucosale e Pidotimod in forma somministrabile per via mucosale intranasale, come preparazione combinata per l'uso simultaneo, separato o sequenziale nella prevenzione di infezioni del tratto respiratorio .
- 8. Prodotto farmaceutico secondo la rivendicazione 7, in cui il Pidotimod è in forma di soluzione somministrabile a spruzzo o aerosol.
- 9. Prodotto farmaceutico secondo le rivendicazioni 7 o 8, in cui il Pidotimod è in forma di soluzione fisiologica.
- 10. Prodotto farmaceutico secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 7 a 9, in cui il Pidotimod è in forma di soluzione contenente da 1 mg/litro a 1 g/litro di Pidotimod.
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT000480A ITTO20070480A1 (it) | 2007-07-02 | 2007-07-02 | Impiego di pidotimod, somministrato per via intranasale per potenziare la risposta immunitaria umorale e cellulare antigene-specifica |
| PCT/IB2008/052629 WO2009004569A1 (en) | 2007-07-02 | 2008-06-30 | Use of intranasally administered pidotimod to enhance antigen-specific humoral and cell-mediated immune response |
| EP20140152382 EP2724726A1 (en) | 2007-07-02 | 2008-06-30 | Use of intranasally administered Pidotimod to enhance antigen-specific humoral and cell-mediated immune response |
| EP08776561.6A EP2170386B1 (en) | 2007-07-02 | 2008-06-30 | Use of intranasally administered pidotimod to enhance antigen-specific humoral and cell-mediated immune response |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT000480A ITTO20070480A1 (it) | 2007-07-02 | 2007-07-02 | Impiego di pidotimod, somministrato per via intranasale per potenziare la risposta immunitaria umorale e cellulare antigene-specifica |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ITTO20070480A1 true ITTO20070480A1 (it) | 2009-01-03 |
Family
ID=39789292
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| IT000480A ITTO20070480A1 (it) | 2007-07-02 | 2007-07-02 | Impiego di pidotimod, somministrato per via intranasale per potenziare la risposta immunitaria umorale e cellulare antigene-specifica |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP2724726A1 (it) |
| IT (1) | ITTO20070480A1 (it) |
| WO (1) | WO2009004569A1 (it) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103182067A (zh) * | 2011-12-30 | 2013-07-03 | 齐鲁动物保健品有限公司 | 一种匹多莫德作为免疫促进剂在畜禽上应用 |
| JP6049938B2 (ja) | 2013-04-05 | 2016-12-21 | ポリケム・エスエイ | 過敏腸管症候群を治療するためのピドチモドの使用 |
| CN113855797B (zh) * | 2021-11-19 | 2023-11-10 | 安徽科技学院 | 一种兽用免疫疫苗的稀释剂及其制备方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1247529B (it) * | 1991-04-24 | 1994-12-17 | Poli Ind Chimica Spa | Composizioni farmaceutiche in forma di schiuma per somministrazione intravaginale, cutanea e orale |
| CN1840172A (zh) | 2006-01-25 | 2006-10-04 | 苏州长征－欣凯制药有限公司 | 可供静脉注射的匹多莫德溶液 |
-
2007
- 2007-07-02 IT IT000480A patent/ITTO20070480A1/it unknown
-
2008
- 2008-06-30 WO PCT/IB2008/052629 patent/WO2009004569A1/en active Application Filing
- 2008-06-30 EP EP20140152382 patent/EP2724726A1/en not_active Withdrawn
- 2008-06-30 EP EP08776561.6A patent/EP2170386B1/en not_active Not-in-force
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2170386A1 (en) | 2010-04-07 |
| EP2170386B1 (en) | 2016-08-10 |
| WO2009004569A1 (en) | 2009-01-08 |
| EP2724726A1 (en) | 2014-04-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ebensen et al. | Bis-(3′, 5′)-cyclic dimeric adenosine monophosphate: strong Th1/Th2/Th17 promoting mucosal adjuvant | |
| Chardes et al. | Toxoplasma gondii oral infection induces specific cytotoxic CD8 alpha/beta+ Thy-1+ gut intraepithelial lymphocytes, lytic for parasite-infected enterocytes. | |
| Lombardi et al. | Toll‐like receptor 2 agonist Pam3CSK4 enhances the induction of antigen‐specific tolerance via the sublingual route | |
| JP4111403B2 (ja) | 免疫刺激ポリヌクレオチド／免疫調節分子複合体 | |
| JP2023011840A (ja) | 異なる核酸アジュバントの組み合わせによる、新規Ｔｈ１誘導性アジュバントおよびその用途 | |
| Semmrich et al. | Directed antigen targeting in vivo identifies a role for CD103+ dendritic cells in both tolerogenic and immunogenic T-cell responses | |
| KR100913405B1 (ko) | Ｔｈ２－매개 면역 질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| US20100247557A1 (en) | Immunostimulant Composition Comprising At Least One Toll-Like Receptor 7 Or Toll-Like Receptor 8 Agonist And A Toll-Like Receptor 4 Agonist | |
| US20030143213A1 (en) | Methods for increasing a cytotoxic T lymphocyte response in vivo | |
| Giagulli et al. | Pidotimod promotes functional maturation of dendritic cells and displays adjuvant properties at the nasal mucosa level | |
| Negri et al. | Persistence of mucosal and systemic immune responses following sublingual immunization | |
| Luci et al. | Dendritic cell-mediated induction of mucosal cytotoxic responses following intravaginal immunization with the nontoxic B subunit of cholera toxin | |
| Mizukawa et al. | Fixed drug eruption: a prototypic disorder mediated by effector memory T cells | |
| JP2009197032A (ja) | 免疫抑制を逆転させるための免疫治療 | |
| De Melo et al. | Anti‐metastatic immunotherapy based on mucosal administration of flagellin and immunomodulatory P10 | |
| Etchart et al. | Safety and efficacy of transcutaneous vaccination using a patch with the live-attenuated measles vaccine in humans | |
| ITTO20070480A1 (it) | Impiego di pidotimod, somministrato per via intranasale per potenziare la risposta immunitaria umorale e cellulare antigene-specifica | |
| MXPA00010934A (es) | Vacuna. | |
| JP2005528899A (ja) | 抗原提示細胞の生成方法 | |
| Rodrı́guez et al. | B-and T-cell responses to the mycobacterium surface antigen PstS-1 in the respiratory tract and adjacent tissues: Role of adjuvants and routes of immunization | |
| TW202245834A (zh) | 基於控制細胞性免疫之新穎方法之新穎治療及預防 | |
| KR20020021375A (ko) | 미코박테리움 바카이를 활용하여 면역적으로 매개된질병을 치료하는 방법 및 조성물 | |
| US20220257752A1 (en) | New use of cyclic dinucleotides | |
| Alkadah et al. | Different profile and distribution of antigen specific T cells induced by intranasal and intrarectal immunization with rotavirus 2/6-VLP with and without LT-R192G | |
| Arshad | Vaccinating against Helicobacter pylori-induced gastritis |