ITMI20082069A1 - Composizione bioattiva derivata dal miele - Google Patents
Composizione bioattiva derivata dal mieleInfo
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Description
La presente invenzione si riferisce ad una composizione biologicamente attiva derivante dal miele, al suo uso in campo cosmetico e nutrizionale ed al procedimento per il suo ottenimento da mieli dì differente origine floreale, il miele è un alimento naturale prodotto dalle api dal nettare e dalla melata. La melata è un materiale ricco di zucchero prodotto dagli afidi presente in gocce sulle piante.
La parola 'miele” sembra derivare dall’antico Ittita “melit”. La prima evidenza dell’uso della parola miele ed alveare risale al sesto millennio A.C.
Recentemente è stato riscoperto l’uso del miele come sostanza curativa risolutiva di diverse patologie dermatologiche (ulcere e ferite della pelle, ustioni, arrossamenti, prurito) a causa delle sue proprietà antibatteriche, antinfiammatorie e antiossidanti.
La composizione media del miele, che tiene conto della diversità di origine, è la seguente:
Glucosio 30.3 %
fruttosio 38.4 %
HiO 17.2 %
Oligosaccaridi 12.0 %
Minerali 1 -93 %
Altro 0.17 %
Si ritiene che le sostanze riportate sotto la voce Altro siano essenziali per l’attività biologica del miele e siano responsabili delle attività antibatterica, antiossidante, antinfiammatoria e riepitelizzante. Tuttavìa la bassa concentrazione dì queste sostanze nel miele naturate, limita fortemente 1 uso del miele nelle applicazioni sopra riportate.
E stato ora trovato che è possibile superare questo inconveniente utilizzando particolari frazioni del miele, in cui sono presenti in elevate concentrazioni le sostanze bioattive.
In accordo con ciò la presente invenzione riguarda una composizione bioattiva derivante da miele di origine floreale caratterizzala dal fatto di comprendere, fatto 100 il peso totale della composizione,
* polifenoli, espressi come acido gallico, in quantità da 1 1 a 75% peso,preferibilmente da 18 a 55% peso; ;* acido chinurenico e suoi derivati in quantità da 0 a 25% peso,preferibilmente da 0.5 a 25% peso.
La composizione della presente invenzione si presenta come una polvere secca di colore giallo-bruno.
Con il termine “polifenoli” si intendono fenoli aventi uno o più gruppi idrossilici legati all’anello aromatico.
Con il termine “acido chinurenico e suoi derivati”, si intendono l<'>acido chinurenico stesso e composti derivanti da sostituzione di uno o più atomi di idrogeno con gruppi alchilici CI -CI 6, e/o con gruppi di natura diversa, ad esempio con il gruppo pirrol idi nico.
L’eventuale complemento a 100 della composizione bioattiva della presente invenzione comprende materiale lipidico di diversa natura (ad esempio fìtosteroli, acidi grassi saturi ed insaturi C8-C20 e fosfolipidi).
La bioattività della composizione della presente invenzione è principalmente dovuta ai composti sopraelencati, ossia all’acido chinurenico e ai polifenoli, e, fra questi ultimi, in particolare ai flavonoidi. Tipici esempi di flavonoidi sono, in particolare, Pinocembrina, Crisina, Calangina, Kampferolo.
L’acido chinurenico (KYNA) é un metabolita del triptofano, che agisce da antagonista al recettore α-7-nicotino acetiLcolina ed al sito di legame della glieina del recettore N-melil-D-aspartato. E’ stato dimostrato recentemente che KYNA può aiutare ad attenuare la sensibilizzazione cutanea e la nocicezione inattivando i recettori periferici del glutammato.
Le composizioni della presente invenzione sono prodotti naturali. Questo è un grande vantaggio dal momento che il mercato richiede sempre più prodotti naturali e non chimici.
Le composizioni della presente invenzione presentano un contenuto in monosaccaridi pressoché nullo, perciò eventuali soluzioni delle suddette composizioni non sono viscose mentre sono altamente attive rapportate al loro volume.
Le composizioni preferite della presente invenzione sono derivate dal miele di castagno. Queste composizioni derivanti dal miele di castagno sono preferibili dal momento che, rispetto alle altre composizioni derivanti da altri mieli, presentano una maggiore quantità dei componenti bioattivi sopra riportati, in particolare di acido chinurenico.
Le composizioni della presente invenzione derivanti da castagno hanno usualmente un contenuto in polifenoli da 30 a 55% peso, ed un contenuto in acido chinurenico da 5.5 a 25% peso.
11 contenuto in polifenoli è determinato secondo il metodo di Folin-Ciocalteu modificato (vedi Vinson et al, Methods Enzymol. 335 (2001 ) 103), mentre il tenore in acido chinurenico è determinato mediante analisi 'H NMR (500 MHz) facendo riferimento all’acido chinurenico puro (vedi Beretta et al, Anal. Chim. Acta. 620 (2008) 176).
E’ stato inoltre dimostrato (vedi tabelle 1 e 2) che il colore del miele nativo può essere collegato con il contenuto di polifenoli mediante analisi spettrofometrica a λ = 450 nm di una soluzione di miele nativo opportunamente diluito al 10 % in acqua.
Le composizioni della presente invenzione rappresentano circa Γ1% (o meno) del peso iniziale del miele nativo pur contenendo una quantità rilevante (circa il 65-70%) della bioattività del miele nativo.
La tabella 1 riporta le composizioni della presente invenzione ricavate a partire da campioni di miele di diversa origine floreale. La suddetta tabella riporta il colore ed il contenuto in polifenoti e in acido chinurenico delle composizioni della presente invenzione ed anche Pattività antiradicalica..
Infatti le composizioni della presente invenzione mostrano, in particolare, attività antiradicalica e antinfiammatoria.
L’attività antinfiammatoria delle composizioni della presente invenzione è stata detenninata usando il modello tridimensionale di epidermide umana ricostruita Epi-200 EpiDerm utilizzando una composizione delPinvenzione derivante da miele di castagno.
I risultati mostrano che il rilascio di IL-Ια (un mediatore dell’infiammazione) e di lattato deidrogenasi (LDH, un indicatore del danno cellulare) indotto dopo esposizione delle cellule al tensioattivo Triton-100 è stato inibito in modo dipendente dalla dose dall’estratto di miele: già la concentrazione dello 0.075 % (In acqua sterile) di composizione della presente invenzione era in grado:
Ì) di ridurre il danno cellulare con un recupero della vitalità cellulare dal 65.9% al 76.0% (determinazione MTT)
ii) di ripristinare il valore basale di LDH rilasciato in seguito al danno cellulare (metodo colorimetrico), e
ίϋ) di ridurre significativamente la produzione di citochine pro-inflammatorie (test ELISA).
Le composizioni delia presente invenzione mostrano anche una attività antìradicaliea, (vedi Tabella 1), espressa come % acido caffeico/g. Il suddetto potere antiradicalico viene determinato secondo il metodo di Brand- Williams (Brand-Wiiams et al, Lebensm. Weiss. U. Technol. 28 (1995) 25). La tabella 1 riporta l’attività antiradicalica di alcune composizioni della presente invenzione Le composizioni della presente invenzione, particolarmente quelle derivate dal miele di castagno, sono quindi particolarmente adatte per il trattamento e/o prevenzione delle affezioni della pelle come:
a. Invecchiamento accelerato dovuto all esposizione ai raggi del sole ed all’inquinamento
b. Affezioni della pelle e malattie causate dall’infiammazione
Rispetto al miele nativo, le composizioni della presente invenzione presentano il vantaggio di essere pressoché prive di zuccheri. Ne consegue che queste composizioni possono essere particolarmente utili, oltre che in campo cosmetico, anche in campo alimentare dal momento che le composizioni della presente invenzione possono essere assunte anche da pazienti diabetici in quanto il tenore zuccherino è irrilevante.
Le composizioni della presente invenzione possono includere composti o diluenti cosmeticamente/farmaceuticamente ammessi, altri composti di origine naturale, ciclodestrine (α, β, γ o 8). Tuttavia questo non dovrebbe costituire una limitazione; un preparatore abile sa che una grande quantità di agenti o composti può essere utilizzata per ottenere la consistenza desiderata.
In una forma di applicazione preferita, le composizioni della presente invenzione possono essere usate in formulazioni liquide. In alternativa, le suddette composizioni possono essere utilizzate anidre oppure sotto forma di emulsioni o di gel.
Nel caso di utilizzo in campo cosmetico, le formulazioni contenenti le composizioni della presente invenzione possono essere applicate dopo che il processo infiammatorio ha avuto luogo oppure per mantenere la corretta funzionalità dell'epidermide e prevenire fenomeni degenerativi.
Come indicato sopra, le formulazioni contenenti le composizioni della presente presentano un significativo numero di vantaggi rispetto al miele nativo o ad altri prodotti sintetici che imitano il miele.
Essi includono i seguenti:
- trattasi di prodotti naturali che richiedono un limitatissimo uso di sostanze chimiche ed aumentano il gradimento da parte del consumatore;
- usano solo una piccola parte di miele, ma con grande attività biologica cosicché può essere somministrata una dose naturale efficace di piccolo volume;
- sono più sicure se somministrate a persone che dovrebbero evitare gli zuccheri e sono adatte per persone di tutte le età e condizione;
- possono essere applicata direttamente, avendo quindi una risposta più veloce ed efficace;
- possono essere somministrate in una forma più concentrata;
~ il grado di dosaggio può essere controllato facilmente.
La presente invenzione riguarda altresì il procedimento per la preparazione delle composizioni della presente invenzione, che comprende:
1) diluizione del miele nativo con acqua distillata a dare una soluzione omogenea che viene portata a pH acido, preferibilmente ad un pH da 2 a 3;
2) eventuale filtrazione per eliminare particelle solide;
3) passaggio della soluzione acquosa attraverso una colonna cromatografica riempita con una fase stazionaria a fase inversa;
4) successivo lavaggio della colonna con acqua;
5) recupero delle sostanze trattenute in colonna mediante eluizione con un alcol scelto tra metanolo ed etanolo e relative miscele a dare una soluzione alcolica di estratto di miele;
6) eliminazione del solvente dalla soluzione alcolica ottenuta al termine dello stadio (5) sino all<'>ottenimento sotto forma di polvere della composizione bioattiva della presente invenzione.
Non si escludono tuttavia altri processi, in particolare processi di estrazione di soluzioni acquose di miele nativo con solventi o sostanze di natura idrofobica, ad esempio con il Olivoìl Glutamate di metalli alcalini, preferibilmente di potassio.
Tabella 2. Coefficienti di correlazione tra intensità di colore dei miele, contenuto totale di polifenoli e attività antiradicalica (analisi di correlazine secondo Pearson) e livelli di significatività.
I seguenti esempi sono riportati per una migliore comprensione della presente invenzione.
ESEMPI
Esempio 1 - Isolamento della composizione non-zuccherina della presente invenzione mediante cromatografia su colonna.
La frazione di miele è stata preparata diluendo 2.5 Kg di miele di castagno (campione castagno 4) con 25 litri di acqua distillata.
La soluzione viene mescolata sino a completa dissoluzione, filtrata su cotone per rimuovere particelle solide ed il pH aggiustato a 2.5 mediante aggiunta di acido cloridrico 6N.
11 filtrato viene quindi fatto passare attraverso una colonna cromatografica (diametro = 12.5 cm, lunghezza = 40 cm) riempita con 500 grammi di resina a fase inversa (silica-bonded CI 8). La frazione acquosa viene raccolta per una ulteriore lavorazione della frazione zuccherina.
Dopo lavaggio con acqua, le sostanze trattenute in colonna sono recuperata mediante eluizione con etanolo (1 litro). 11 volume della frazione etanolica viene ridotto sotto vuoto e quindi il residuo viene portato a secchezza ottenendo la frazione di miele sotto forma di polvere.
La procedura viene ripetuta 25 volte.
La tabella 3 riporta il tenore in acido chinurenico ed in polifenoli determinato mediante i metodi analitici di cui sopra. La presenza dell’acido chinurenico viene confermata dal confronto dello spettro UV e da iniezione di un campione sintetico puro dello stesso acido.
Esempio 2- Isolamento della composizione non-zuccherìna della presente invenzione mediante estrazione con un lipoamminoacido
1000 grammi di miele di castagno vengono portati a 5000 grammi totali con acqua distillata. Vi si aggiungono 60 grammi di Potassium Olivoil Glutamate (INCI name) al 30% peso. Si agita per 15 minuti a 40°C. Il prodotto si presenta limpido. Con una soluzione di acido fosforico si porta il pH a 3. Il prodotto si intorbidisce e si mette quindi in un imbuto separatore per una notte. Si osserva la formazione di due fasi: quella superiore lipofila e quella inferiore idrofila. Alla fine si spilla da sotto la soluzione zuccherina acquosa di miele sino ad arrivare ad una composizione di circa 20 grammi di glutammato di Olivoil Glutamate contenente circa 1 grammo di estratto lipofilo di miele.
Claims (9)
- RIVENDICAZIONI 1) Composizione bioattiva derivante da miele di origine floreale caratterizzata dal fatto di comprendere, fatto 100 il peso totale della composizione, ** polifenoli, espressi come acido gallico, in quantità da 1 1 a 75% peso; ** acido chinurenico e suoi derivati in quantità da 0 a 25% peso.
- 2) Composizione bioattiva secondo la rivendicazione 1, in cui: ** i potifenoli sono in quantità da 18 a 55% peso; ** l’acido chinurenico e i suoi derivati sono in quantità da 0.5 a 25% peso.
- 3) Composizione bioattiva secondo la rivendicazione 1, caratterizzate dal fatto di essere ricavate dal miele di castagno, il suo contenuto in polifenoli essendo da 30 a 55% peso ed il suo contenuto in acido chinurenico essendo da 5.5 a 25% peso.
- 4) Uso della composizione secondo la rivendicazione 1 in campo alimentare e cosmetico.
- 5) Uso delle composizioni secondo la rivendicazione 1 per la preparazione di formulati cosmetici per la cura e/o prevenzione di infiammazioni cutanee.
- 6) Uso delle composizioni secondo la rivendicazione 1 per la preparazione di formulati cosmetici ad attività antiradicalica ed antinfiammatoria verso l’epidermide.
- 7) Procedimento per la preparazione della composizione secondo la rivendicazione 1 , che comprende: a) diluizione del miele nativo con acqua distillata a dare una soluzione omogenea che viene portata a pH acido, preferibilmente ad un pH da 2 a 3; b) eventuale filtrazione per eliminare particelle solide; c) passaggio della soluzione acquosa attraverso una colonna cromatografica riempita con una fase stazionaria a fase inversa; d) successivo lavaggio con acqua della colonna; e) recupero delle sostanze trattenute in colonna mediante eluizione con un alcol scelto tra metanolo ed etanolo e relative miscele a dare una soluzione alcolica di estratto di miele; f) eliminazione del solvente dalla soluzione alcolica ottenuta al termine dello stadio (e) sino all’ottenimento sotto forma di polvere della composizione bioattiva della presente invenzione.
- 8) Procedimento per la preparazione della composizione secondo la rivendicazione 1 , che comprende l estrazione di soluzioni acquose di miele nativo con solventi o sostanze di natura idrofobica o lipoamminoacidi.
- 9) Procedimento secondo la rivendicazione 8, in cui il lipoamminoacido è l olivoil glutamate di metalli alcalini, preferibilmente di potassio.
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