ITFI20130074A1 - Soluzione acquosa di contrasto per rendere visibile mediante metodica fotografica il canale di schlemm e le vie di deflusso dell¿umore acqueo e metodo diagnostico che utilizza detta soluzione. - Google Patents

Description

Soluzione acquosa di contrasto per rendere visibile mediante metodica fotografica il canale di Schlemm e le vie di deflusso dell’umore acqueo e metodo diagnostico che utilizza detta soluzione.

Campo dell’invenzione.

La presente invenzione si riferisce al campo dei mezzi di contrasto in particolare a quelli utilizzati in oftalmologia.

Stato dell’arte

Nei soggetti sani la pressione oculare à ̈ mantenuta costante dall'equilibrio fra la continua formazione di umore acqueo, da parte del corpo ciliare, e il deflusso di una medesima quantità di umore acqueo attraverso il trabecolato irido corneale, il canale di Schlemm e le vene acquose. Questo equilibrio tra produzione ed eliminazione consente all'occhio di avere una sua tonicità.

Il mancato o insufficiente deflusso del liquido umorale attraverso il canale di Schlemm può portare ad un aumento della pressione oculare che può essere ridotta mediante terapia medica, terapia parachirurgica e terapia chirurgica. La terapia medica agisce essenzialmente o riducendo la quantità di umor acqueo prodotta nell’unità di tempo o facilitando il deflusso dello stesso dall’occhio attraverso la via convenzionale di deflusso trabecolare o attraverso la via non convenzionale di deflusso uveo-sclerale che in condizioni fisiologiche à ̈ responsabile di meno del 5% del deflusso dell’umor acqueo nell’uomo.

La chirurgia riduce la pressione intraoculare rimuovendo gli ostacoli al deflusso, ampliando i percorsi naturali di filtrazione oppure creandone di nuovi, alternativi mediante by pass. Nei glaucomi ad angolo chiuso si apre una comunicazione praticando un foro nell'iride periferica (iridectomia) con YAG laser che chirurgicamente; nei casi secondari o congeniti si effettua la discissione delle membrane, dei residui mesodermici (goniotomia), delle aderenze iridee (sinechiotomia) o vitreali (vitrectomia) al fine di riaprire l'angolo irido-corneale. La trabeculectomia, la tecnica più praticata al mondo nel glaucoma cronico ad angolo aperto, prevede la rimozione di un bottone di tessuto e la creazione di un canale di filtrazione nelle strutture anatomiche interne (la sclera e il trabecolato), che poi viene protetto con uno sportello esterno di sclera e un lembo di congiuntiva.

Un tasso significativo di complicanze connesse alla perforazione della parete oculare ha motivato la progressiva affermazione della chirurgia 'non perforante', che implementa il deflusso uveo-sclerale e l'attività del principale dotto collettore dell'umor acqueo, il canale di Schlemm, che viene dilatato con una sostanza viscoelastica nella variante chiamata viscocanalostomia.

E' ovvio da quanto detto che, sia per misurare l'eventuale occlusione del canale di Schlemm come pure per intervenire chirurgicamente sarebbe estremamente utile possedere un mezzo di contrasto capace di evidenziarlo in vivo.

In oftalmologia sono noti vari coloranti chiamati, coloranti vitali, che sono utilizzati per l’angiografia retina, per colorare la capsula anteriore del cristallino nella capsuloressi e per visualizzare la membrana limitante interna nella chirurgia vitreoretinica.

Fra i coloranti vitali più utilizzati sono: il verde indocianina, il verde infracianina, la fluoresceina sodica, il trypan blu, il Patent blu, il bromfenolo blu, il brillant blu G. Le quantità di colorante utilizzate nella pratica chirurgica sono, però, tali da indurre un effetto tossico, sia direttamente sia da parte di metaboliti, sulle cellule dell’epitelio pigmentato retinico.

L’iniezione intravitreale del colorante alle concentrazioni richieste può infatti alterare l’osmolarità nella cavità vitreale danneggiando la retina neurosensoriale, con possibilità di causare un danno iatrogeno sugli strati retinici interni, un’alta incidenza di emorragie retiniche e difetti del campo visivo. Sono stati segnalati, inoltre, disturbi al campo visivo dopo vitrectomia con l’utilizzo del verde di indocianina nella rimozione della membrana limitante interna.

Alla luce di quanto detto sopra à ̈ evidente l'importanza di poter disporre di un mezzo capace di permettere il sicuro utilizzo dei coloranti suddetti per l'indagine diagnostica e intervento chirurgico sul canale di Schlemm.

Breve descrizione delle figure

La Figura 1 mostra schematicamente l’interno di un occhio in condizioni normali ed in caso di glaucoma con interruzione di deflusso dell'umore acqueo.

La Figura 2 riporta lo spettro fotometrico di mezzi dei contrasto secondo l'invenzione a varie concentrazioni di colorante (verde indocianina).

La Figura 3 mostra la progressiva colorazione del canale dello Schlemm e della via di deflusso trabecolare dell’umore acqueo dopo applicazione di un mezzo di contrasto secondo l’invenzione.

La Figura 4 mostra lo spettro di un mezzo di contrasto secondo l'invenzione (soluzione ialuronato-verde indocianina 0.25%).

Sommario dell’invenzione

E' descritto un mezzo di contrasto costituito da una soluzione acquosa viscoelastica comprendente solfato di condroitina e ialuronato sodico o idrossipropilmetilcellulosa, ed un colorante vitreo-retinico. Una dose molto piccola di verde indocianina rende visibile in fluorescenza il canale stesso e le vie di deflusso trabecolari, rendendo possibili valutazioni di tipo diagnostico (per esempio, si evidenziano malformazioni) e di più sicura e facile esecuzione interventi di canaloplastica.

Descrizione dettagliata dell’invenzione

E' stato ora sorprendentemente trovato che una soluzione acquosa viscoelastica contenente una piccola quantità di colorante vitale utilizzato in oftalmologia consente di evidenziare, a fini diagnostici o terapeutici, il canale di Schlemm evitando tutte le controindicazioni ampiamente commentate nello stato dell'arte.

Secondo l'invenzione per soluzione acquosa viscoelastica si intende una soluzione acquosa contenente solfato di condrotina e ialuronato sodico, ialuronato di sodio o idrossipropilmetilcellulosa, in soluzione tamponata a pH=7.2.

Preferibilmente secondo l'invenzione il solfato di condroitina à ̈ presente nella soluzione in quantità compresa fra 4 a 40mg per ml, lo ialuronato sodico in quantità compresa fra 1.0 e 17 mg per ml, l'idrossipropilmetilcellulosa in quantità compresa fra 2.4 a 24 mg per ml. Preferibilmente la quantità di condroitina à ̈ 20 mg per ml e la quantità di ialuronato di sodio à ̈ 8 mg per ml quando associati, quando usato da solo lo ialuronato à ̈ preferibile alla concentrazione di 10 mg per ml, invece la idrossipropilmetilcellulosa da migliori risultati alla concentrazione di 12 mg per ml.

Il colorante vitreo-retinico utilizzato nel mezzo di contrasto secondo l'invenzione à ̈ uno di quelli sopra menzionati ed à ̈ scelto ad esempio fra: il verde verde indocianina, il verde infrocianina, la fluoresceina sodica, il trypan blu, il Patent blu, il bromfenolo blu, il brillant blu G.

La quantità di colorante dipende dalla tipologia utilizzata; per il verde indocianina la concentrazione à ̈ normalmente compresa fra 0.125 Î1⁄4g (microgrammi) a 25mg (milligrammi) per ml; preferibilmente la quantità utilizzata à ̈ stata 2.5 Î1⁄4g per ml.

La soluzione secondo l'invenzione può essere formulata sia per la somministrazione iniettabile, direttamente nel canale di Schlemm al momento dell’intervento chirurgico, sia per somministrazione topica effettuata quale ausilio diagnostico.

Nel caso di formulazione per via iniettabile si prepara da una soluzione madre di 5 mg/ml di verde indocianina da cui si ottiene, in ambiente sterile, per diluizione la concentrazione desiderata pronta per essere iniettata nel canale di Schlemm, al momento dell’atto chirurgico.

Nel caso di formulazione per via topica (collirio) detta soluzione à ̈ incapsulata in carrier nanomolecolari costituiti da liposomi di fosfatidilcolina, nel rapporto molare lipide/colorante variabile da 200 a 300.

Parte sperimentale

Lo studio, in vitro, à ̈ stato effettuato per valutare come la viscoelasticità e la capacità di assorbimento del colorante si modifichino al variare della concentrazione del viscoelastico o della quantità del colorante stesso.

Per evitare effetti spuri, legati alle impurità delle sostanze, sono stati utilizzati gli stessi prodotti attualmente impiegati in diagnostica e chirurgia oftalmica.

Nella fattispecie una fiala da 1 ml di DiscoVisc® (miscela di solfato di condraitina e ialuronato sodico) era diluita 10, 20, 30, 50, 200 volte, in modo da ridurre viscosità di circa tre ordini di grandezza.

Ad 1ml di ciascuna di queste soluzioni erano aggiunti 25 Î1⁄4g di verde indocianina, per ottenere una soluzione risultante di 2.5% di colorante.

Anche per il colorante negli esperimenti sono stati utilizzati campioni attualmente in uso in oftalmologia con il nome di Pulsion®.

I risultati sono riprodotti in Fig. 2, dove lo spettro fotometrico del colorante à ̈ riportato per tutte le diverse concentrazioni di viscoelastico.

Come à ̈ evidente nella regione 600-900 nm sono presenti ben tre picchi di assorbimento. Per tutti i picchi, la curva spettrale corrispondente alla maggiore quantità di ialuronato di sodio risulta avere una maggiore assorbanza, ovviamente la più bassa à ̈ legata al minore contenuto di ialuronato e quindi di viscosità. Il massimo picco di assorbanza a 694 nm (visibile) equivale ad 82.6% di assorbimento della luce incidente e questo rende possibile l’utilizzo di una macchina fotografica per l’acquisizione dell’immagini, come mostrato nelle foto di figura 3.

Le concentrazioni finali risultavano ancora sufficientemente alte da dover costantemente monitorare i pazienti rispetto agli effetti collaterali del colorante. Al fine di ridurre ulteriormente la concentrazione del colorante di un ordine di grandezza, sono state effettuate altre prove in vitro. In particolare, lasciando inalterate le viscosità del mezzo, la quantità di colorante si riduceva da 25 a 2.5 Î1⁄4g per ml finale di miscela. Lo spettro risultante à ̈ rappresentato in figura 4. In questo caso à ̈ scomparso il picco di massima assorbanza a 694 nm, ma era ben visibile, sebbene ad una intensità più bassa, il picco a 790 nm. L’intensità di tale picco corrisponde al 29.5% di assorbimento della luce incidente, peraltro sufficiente per essere catturato da una pellicola fotografica sensibile all’infrarosso. Tale riduzione à ̈ scevra da rischi di tossicità propri del colorante. L’invenzione sarà ora meglio illustrata alla luce degli esempi qui di seguito riportati:

Esempio 1:

Pazienti affetti da glaucoma primario ad angolo aperto sottoposti ad intervento di viscocanalostomia nei quali il canale di Schlemm e le vie di deflusso trabecolari sono state evidenziate durante l’intervento chirurgico mediante iniezione di una soluzione di verde indocianina/sodio ialuronato con concentrazione pari a 1.25 Î1⁄4g/ml.

Esempio 2:

Pazienti affetti da glaucoma primario ad angolo aperto sottoposti ad intervento di viscocanalostomia nei quali il canale di Schlemm e le vie di deflusso trabecolari sono state evidenziate durante l’intervento chirurgico mediante iniezione di una soluzione di verde indocianina/sodio ialuronato con concentrazione pari a 2.5 Î1⁄4g/ml

Esempio 3:

Pazienti affetti da glaucoma primario ad angolo aperto sottoposti ad intervento di viscocanalostomia nei quali il canale di Schlemm e le vie di deflusso trabecolari sono state evidenziate durante l’intervento chirurgico mediante iniezione di una soluzione di verde indocianina/sodio ialuronato con concentrazione pari a 25 Î1⁄4g/ml.

Claims (11)

1. RIVENDICAZIONI 1) Soluzione acquosa di contrasto per rendere visibile mediante metodica fotografica il canale di Schlemm e le vie di deflusso dell'umor acqueo comprendente un viscoelastico ed un colorante vitale.
2. 2) Soluzione secondo la rivendicazione 1 in cui detto viscoelastico à ̈ una soluzione acquosa di solfato di condrotina e ialuronato sodico, ialuronato di sodio o idrossipropilmetilcellulosa.
3. 3) Soluzione secondo la rivendicazione 2 in cui il solfato di condrotina à ̈ in quantità compresa fra 4 a 40mg per ml, lo ialuronato sodico in quantità compresa fra 1.0 e 17 mg per ml, la idrossipropilmetilcellulosa in quantità compresa fra 2.4 a 24 mg per ml.
4. 4) Soluzione secondo la rivendicazione 2 in cui la quantità di solfato di condroitina à ̈ 20 mg/ml e la quantità di ialuronato di sodio à ̈ 8 mg/ ml quando associati.
5. 5) Soluzione secondo la rivendicazione 2 in cui la quantità di ialuronatosodico (utilizzato da solo) à ̈ di 10 mg/ml.
6. 6) Soluzione secondo la rivendicazione 2 in cui la quantità di idrossipropilmetilcellulosa à ̈ di 12 mg/ml.
7. 7) Soluzione secondo le rivendicazioni 1 –6 in cui il colorante vitale à ̈ scelto fra: verde indocianina, verde infracianina, fluoresceina sodica, trypan blu, Patent blu, bromfenolo blu, brillant blu G.
8. 8) Soluzione secondo la rivendicazione 7 in cui la quantità di colorante verde indocianina à ̈ compresa fra 0.125 Î1⁄4g a 25mg/ml.
9. 9) Soluzione secondo le rivendicazioni 1–7 in formulazione adatta per somministrazione iniettabile.
10. 10) Soluzione secondo le rivendicazioni 1–7 in formulazione adatta per la somministrazione topica.
11. 11) Soluzione secondo la rivendicazione 10 in cui detta soluzione adatta per la somministrazione topica à ̈ incapsulata in carrier nanomolecolari costituiti da liposomi di fosfatidilcolina, nel rapporto molare lipide/colorante variabile da 200 a 300.