IT201800002990A1 - Composizione a base di una miscela di fattori biologici isolata dal colostro e oli vegetali ozonizzati per l’uso nel trattamento di vaginiti e vaginosi - Google Patents

Description

“COMPOSIZIONE A BASE DI UNA MISCELA DI FATTORI BIOLOGICI ISOLATA DAL COLOSTRO E OLI VEGETALI OZONIZZATI PER L’USO

NEL TRATTAMENTO DI VAGINITI E VAGINOSI”

DESCRIZIONE

La presente invenzione ha per oggetto composizioni topiche vaginali, per l’uso nel trattamento delle vaginiti e delle vaginosi.

Campo tecnico dell’invenzione

Per molti anni l'ecosistema vaginale è stato considerato un’entità statica e omogenea costituita essenzialmente dal bacillo di Döderlein (o Lactobacillus), batterio Gram positivo anaerobio, e tutte le variazioni rispetto a tale quadro tipico erano considerate patologiche. Più tardi però ci si rese conto che in questa nicchia ecologica risiede un insieme di microrganismi in equilibrio dinamico con l'ambiente che lo ospita e la cui composizione subisce frequenti e notevoli mutamenti nel corso della vita di una donna, risentendo principalmente delle variazioni fisiologiche dell'assetto ormonale, in particolare del livello circolante degli estrogeni, e di altri fattori non meno importanti quali: attività sessuale, gravidanza, condizioni igieniche sanitarie, patologie sistemiche, trattamenti farmacologici (terapie antibiotiche o immunosoppressive), terapia radiante, traumi.

Al raggiungimento della maturità sessuale, con la ricomparsa ematica degli estrogeni e le successive modificazioni fisiologiche strutturali della mucosa vaginale (ispessimento epiteliale, picnosi cellulare e sintesi di glicogeno), la donna acquisisce la tipica microflora dell'età fertile dominata da lattobacilli (95%); le specie più comuni sono L. iners, L. crispatus, L. gasseri, L. jenesenii, seguite da L. acidophilus, L. fermentum, L. plantarum, L. brevis, L. casei, L. vaginalis, L. delbrueckii, L. salivarius, L. reuteri e L. rhamnosus. Insieme al sistema immunitario locale, tali microrganismi svolgono un ruolo chiave nella difesa dell'ospite, sia attraverso la formazione di un “biofilm” che ostacola l'adesione degli agenti patogeni, sia grazie alla competizione per i metaboliti, sia per la produzione di diverse sostanze come perossido di idrogeno, batteriocine e acido lattico. Quest'ultimo metabolita rende il pH endoluminale acido e ciò costituisce il più importante fattore limitante la colonizzazione vaginale da parte di microrganismi esogeni e la crescita di commensali potenzialmente patogeni. L'acido lattico, la cui presenza è strettamente correlata al trofismo vaginale e quindi indirettamente agli estrogeni, deriva principalmente dal metabolismo anaerobico del glucosio ad opera dei lattobacilli.

Un altro importante meccanismo di difesa è rappresentato dal perossido d'idrogeno prodotto da alcuni ceppi di lattobacilli, principalmente L. crispatus e L. jenseii, una sostanza tossica per un gran numero di cellule batteriche prive di catalasi-perossidasi tra cui Gardnerella vaginalis, Escherichia coli e Staphylococcus aureus. Inoltre l’azione combinata di perossido di idrogeno e perossidasi uterina (prodotta dalla cervice e dall'endometrio) limita la crescita batterica per attivazione dei polimorfonucleati che esplicano la loro azione battericida negli spazi intercellulari epiteliali.

L’ecosistema vaginale in condizioni fisiologiche rappresenta quindi un equilibrio dinamico di flora microbica modulato dall’assetto ormonale, dal pH e dalla risposta immunitaria, fattori tra loro strettamente interdipendenti. Le cellule della parete vaginale hanno un ruolo importante nel mantenimento di tale equilibrio, in particolare gli strati superficiale ed intermedio dell’epitelio, la cui proliferazione e maturazione è ormono-correlata.

Un ruolo importante è esercitato anche dal fluido che, in condizioni fisiologiche, umetta la mucosa vaginale, visibile all’ispezione come secreto chiaro costituito da trasudato del plasma, da muco cervicale e dalle secrezioni delle ghiandole vestibolari. Tale fluido infatti contiene sostanze antimicrobiche quali anticorpi (IgG e IgA), citochine e fattori antibatterici, che gli conferiscono una funzione di interfaccia protettiva ed ostacola la colonizzazione microbica per un’azione meccanica, mediante le sue proprietà di viscosità e di eluizione.

Quando questo delicato equilibrio viene meno insorgono svariate patologie di diversa entità che possono essere classificate come 1) vaginite atrofica 2) vaginiti infettive (Candida spp., Trichomonas vaginalis, Chlamydia trachomatis, Escherichia coli, Herpes genitalis, etc.); 3) vaginosi batterica (Gardnerella vaginalis, etc.); 4) vaginiti irritatative/allergiche da detergenti, saponi, salvaslip, lubrificanti, indumenti non traspiranti; 5) sindrome di Sjögren. La diagnosi si basa sull’attenta ispezione dei genitali esterni alla ricerca dei segni di infiammazione (rubor, tumor, calor, dolor) o dei segni di atrofia vulvo-vaginale; in particolare sono segni di involuzione, a livello vulvare: ridotta elasticità e turgore cutaneo, diradamento dei peli pubici, secchezza e riduzione delle labbra. L’epitelio vaginale atrofico appare pallido, lucido, assottigliato e fragile. Accertata la alcalinizzazione del pH vaginale, gli esami colturali e la colpocitologia possono essere di ausilio nel rilevare evidenze di Candida, Trichomonas o vaginosi batterica; la valutazione del livello degli estrogeni sierici può essere di aiuto nelle forme di menopausa precoce.

I sintomi consistono in dolore, bruciore e prurito, particolarmente durante il rapporto sessuale e/o durante la minzione; i disturbi tendono, poi, a protrarsi nel tempo, soprattutto se presente una carenza di lubrificazione vaginale e vulvare.

Normalmente il trattamento si basa, oltre che sulla antibiotico-terapia mirata e su precise norme igienicocomportamentali, anche sull’utilizzo di estrogeni topici a fini preventivi e, se necessario, sulla terapia ormonale sostitutiva: numerosi sono i farmaci su base ormonale proposti per curare queste affezioni, malauguratamente per tutti questi esiste il sospetto di un’aumentata incidenza di neoplasie mammarie.

L'esigenza di approcci terapeutici alternativi nasce dal frequente riscontro nella pratica clinica delle recidive, che comportano per la paziente un importante disagio psicofisico, alterandone significativamente la qualità della vita con costi sanitari non indifferenti. Il fallimento della terapia antibiotica, comunemente impiegata nel trattamento delle patologie di origine infettiva, è legato a due fattori principali, quali: lo sviluppo da parte dei microrganismi patogeni di resistenza ai chemioterapici, favorito negli ultimi anni dall'ampia diffusione di farmaci da banco sempre più spesso pubblicizzati sui “blog” e “forum” femminili che ne promuovono l'utilizzo in maniera impropria come automedicazione, e l'impatto negativo degli antibiotici sulla microflora vaginale, complicando così la rigenerazione dei lattobacilli che costituiscono la principale linea di difesa dell'ecosistema vaginale nella donna in età fertile. Una flora alterata facilita infatti sia la colonizzazione da parte di microrganismi esogeni che la virulentazione dei batteri commensali potenzialmente patogeni presenti di norma a basse concentrazioni.

La domanda di brevetto internazionale WO 2012/076409 descrive preparazioni a base di colostro per il trattamento della secchezza vaginale, ma non descrive l’uso di tali formulazioni anche per il trattamento di vaginiti e vaginosi.

Esiste pertanto la necessità di disporre di preparazioni a base di sostanze naturali che non alterino l’ecosistema vaginale e aiutino a ripristinare e mantenere l’equilibrio potenziandone le difese, che favoriscano la ricostruzione e il mantenimento dell’integrità funzionale della mucosa vaginale (atrofica o danneggiata da agenti batterici, virali, detergenti, saponi, salvaslip, lubrificanti, indumenti non traspiranti, trattamenti farmacologici, etc.) e che contrastino la moltiplicazione di batteri e virus patogeni nelle vaginiti e vaginosi.

Riassunto dell’invenzione

Gli inventori della presente domanda di brevetto hanno sorprendentemente trovato che una formulazione secondo le rivendicazioni annesse è in grado di risolvere i problemi delle composizioni note nell’arte.

Oggetto dell’invenzione

In un primo oggetto, la presente invenzione riguarda una composizione topica vaginale comprendente una miscela isolata dal colostro, ricca di fattori biologici, e oli vegetali ozonizzati.

In un aspetto preferito, la composizione può comprendere ulteriori composti aventi proprietà specifiche.

Secondo un aspetto dell’invenzione, le formulazioni descritte sono nella forma di gel, ovuli, lavande o altre formulazioni adatte.

In un secondo oggetto, la presente invenzione riguarda l’uso medico della composizione descritta.

In un aspetto preferito, la composizione trova impiego nel trattamento della secchezza vaginale, delle vaginiti e delle vaginosi.

E’ inoltre descritto un metodo per il trattamento della secchezza vaginale, delle vaginiti e delle vaginosi comprendente l’impiego delle formulazioni dell’invenzione.

Breve descrizione delle figure

La figura 1 riporta gli indici di classificazione della salute vaginale;

le figure da 2 a 5 riportano i risultati delle sperimentazioni condotte.

Descrizione dettagliata dell’invenzione

Secondo un primo oggetto dell’invenzione, la composizione descritta comprende una miscela isolata dal colostro, ricca di fattori biologici, e oli vegetali ozonizzati.

In particolare, tali fattori biologici comprendono: citochine, fattori di crescita, fattori chemiotattici, fattori stimolanti le cellule staminali, proteine del complemento, fattori antibatterici e antivirali e immunoglobuline.

In particolare, la miscela comprende:

- Lattoferrina e transferrina

Sono coinvolte nella regolazione del metabolismo e della concentrazione del ferro, con attività antimicrobica diretta, esercitata contro un'ampia gamma di batteri e virus.

- Citochine

Sono piccole proteine solubili che agiscono in modo autocrino/paracrino legandosi a specifici recettori cellulari, operando in network e orchestrando lo sviluppo e la funzione del sistema immunitario. Le citochine agiscono a concentrazioni picomolari. Esperimenti dimostrano che il colostro bovino può modulare l'attività delle cellule immunitarie umane in vitro. Le citochine, sia quelle legate all'immunità innata, come TNF, IL-1, MCP-1 e IL-15, sia quelle legate alla regolazione dell'immunità acquisita, come IL-2, IL-4, IFN-y, IL-9, e IL-17, sono state evidenziate come componenti importanti della miscela isolata dal colostro. Tra le citochine identificate, IL-17, che è la citochina distintiva per le cellule T helper 17 (Th17), è presente in alte concentrazioni nella miscela. L'interleuchina 17 ha un ruolo fondamentale contro le infezioni batteriche e fungine e possiede una rilevante attività proinfiammatoria. Recentemente è stato dimostrato che IL-17 possiede un ruolo regolatore nell'ematopoiesi, essendo coinvolta nella modulazione di entrambe le cellule staminali ematopoietiche e mesenchimali. Sono stati anche misurati alti livelli di IL-15, che induce la proliferazione di cellule T, B e natural killer (NK), stimolando la maturazione del sistema immunitario e possiede inoltre un'attività antitumorale unica. È interessante notare che sia la stimolazione proinfiammatoria (IL-1, TNF, IFN-y e IL-12) che le citochine inibitorie antiinfiammatorie (IL-10, IL-1RA e TGF-ȕ) sono presenti nella miscela di fattori biologici isolata dal colostro. Pertanto, l'uso di questo prodotto così bilanciato, sia in vitro che in vivo, dovrebbe garantire di evitare un'eccessiva stimolazione/inibizione per quanto riguarda la delicata regolazione delle risposte immunitarie.

- Fattore stimolante le colonie di granulociti (granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF) e il Fattore stimolante le colonie di granulociti e macrofagi (granulocyte-macrophage colony stimulating factor, GM-CSF)

Sono sostanze cardine per la proliferazione, la maturazione e il potenziamento delle cellule progenitrici del midollo osseo, e il loro ruolo come fattori stimolanti le cellule staminali è abbastanza chiaro<.>

- Fattori di crescita

Comprendenti peptidi appartenenti ai fattori di crescita dei fibroblasti (Fibroblast Growth Factors – FGF), i fattori di crescita insulino-simili (Insulin-like Growth Factor – IGF) e i fattori di crescita derivati dalle piastrine (Platelet-Derived Growth Factor – PDGF). Poiché il ruolo fisiologico di questi fattori trofici nel colostro è quello di regolare la proliferazione e la differenziazione cellulare nella mucosa gastrointestinale del neonato, è verosimile che giochino un ruolo primario relativamente alle proprietà rigenerative e riparative del colostro nella guarigione delle ferite.

In un aspetto preferito, il colostro impiegato per gli scopi della presente invenzione è ottenuto dall’uomo o da un mammifero e, preferibilmente, è ottenuto da bovini.

Infatti, è stato trovato che il colostro degli erbivori contiene in maggior misura diversi fattori di crescita e citochine.

Il colostro bovino risulta la fonte più ricca di fattori biologici e, quindi, la più vantaggiosa.

In particolare, è stato provato che le vacche di razza Holstein (Frisona) producono colostro con la maggior concentrazione di citochine, fattori di crescita, fattori chemiotattici, fattori stimolanti le cellule staminali, proteine del complemento, fattori antibatterici/antivirali e immunoglobuline.

Il colostro impiegato per gli scopi della presente invenzione è preferibilmente raccolto nelle prime ore dopo la nascita, preferibilmente entro le cinque ore.

In un aspetto preferito, le vacche sono preferibilmente al secondo o al terzo parto ed il colostro è preferibilmente raccolto entro la quinta ora dal parto, in quanto in questo periodo si assiste alla maggior concentrazione di attivi.

Vantaggiosamente, il metodo per la preparazione della miscela ricca in fattori biologici dal colostro non prevede passaggi o operazioni che potrebbero danneggiare i fattori biologici riducendone l’attività.

Ad esempio, non vengono condotti passaggi di sterilizzazione al calore che possono portare alla perdita di grosse quantità di fattori biologici nel prodotto finale in seguito alla degradazione provocata dalle alte temperature.

Oppure, la separazione della caseina, necessaria in quanto può portare a reazioni allergiche, non prevede una fase di coagulazione/precipitazione seguita da filtrazione a bassi valori di pH, che possono comportare la denaturazione di molte proteine, tra cui diversi fattori biologici presenti nel colostro.

Infatti, per la preparazione della miscela ricca in fattori biologici isolati dal colostro secondo la presente invenzione, verranno utilizzati processi di estrazione che permettano di ottenere una miscela di fattori in una forma biologicamente attiva.

Processi che possono essere impiegati per la preparazione della miscela ricca in fattori biologici per gli scopi della presente invenzione sono descritti ad esempio da P. Sacerdote et al. (“Biological components in a standardized derivative of bovine colostrum” - Journal of Dairy Science, Volume 96, Issue 3, 1 March 2013, pages 1745 – 1754) e nella domanda di brevetto internazionale WO 2011/064114, che descrive un processo per ottenere una miscela di fattori biologici isolati da colostro basato su un passaggio iniziale di microfiltrazione con una membrana a porosità molecolare compresa fra 2-6 micron, un passaggio di raccolta del permeato contenente i principi biologici, un opzionale passaggio di filtrazione sterilizzante del permeato e un opzionale passaggio di rimozione dell’acqua contenuta nel permeato.

Un analogo processo di estrazione da colostro viene descritto nelle domande di brevetto WO 2013/098331, WO 2013/098333 e WO 2017/134559.

Altri processi di estrazione potranno essere impiegati, fintanto che vengono soddisfano i requisiti sopra indicati.

In un aspetto preferito dell’invenzione, la miscela isolata dal colostro e ricca di fattori biologici è ottenuta secondo il processo descritto da P. Sacerdote et al. che comprende le fasi di:

1) diluizione;

2) scrematura;

3) ultrafiltrazione;

4) dialisi;

5) microfiltrazione.

Per quanto concerne la fase 1), una quantità di 100 Kg di colostro viene posta in un reattore e diluita 1:10 con acqua deionizzata addizionata di NaCl fino a raggiungere la concentrazione dello 0,9%.

Nella fase 2) di scrematura, l’intera massa viene centrifugata a 12.400 g ad una temperatura di 20-25°C per rimuovere la parte grassa.

Nella fase 3), la fase liquida precedentemente ottenuta viene sottoposta ad ultrafiltrazione attraverso una membrana con cut-off di 300 KDa, sempre mantenendo la temperatura di 20-25°C, per rimuovere le proteine di grandi dimensioni (tipicamente le caseine) e i microorganismi patogeni.

Nella fase 4) di dialisi, la miscela isolata dal colostro e ricca di fattori biologici così ottenuta viene quindi dializzata con una membrana da 5 KDa per rimuovere eventuali conservanti o residui di farmaci presenti nel colostro di partenza.

Nella fase 5) di microfiltrazione, il prodotto ottenuto è sottoposto ad una serie di passaggi di filtrazione tangenziale sterilizzante con membrane da 0,2 µm e successivamente congelato.

Il prodotto ottenuto è quindi caratterizzato da una miscela di fattori biologici, comprendente anche le immunoglobuline specifiche della specie (IgG, IgA e IgM) dotate di una specificità naturale contro molti batteri e virus.

Come ultimo passaggio del processo preparativo, la miscela è sottoposta ad una fase di liofilizzazione.

Si ottiene in questo modo una polvere sterile, priva di conservanti, anallergica (caseina e lattoalbumina sono i responsabili di oltre il 95% dell’allergia al latte bovino) di altissima solubilità e con la massima concentrazione possibile di fattori attivi.

In un aspetto preferito, è previsto anche un controllo qualitativo e quantitativo dei fattori biologici sia in vitro che in vivo.

Per valutare la qualità dei processi implementati per ottenere un prodotto finale standardizzato, sono utilizzati come marcatori alcuni fattori chiave del colostro, come la lattoferrina e la transferrina, che sono presenti in alte concentrazioni; inoltre, può essere anche eseguita sul prodotto finale una ricerca per un gran numero di fattori bioattivi sfruttando singoli test ELISA noti.

In un aspetto particolarmente preferito dell’invenzione, la miscela derivata dal colostro è caratterizzata da un contenuto di:

- Citochine: da 45 a 300 pg/mg, preferibilmente da 50 a 250;

- Fattori di crescita: da 600 a 1900 pg/mg, preferibilmente da 650 a 1850;

- Fattori chemiotattici: da 2 a 20 pg/mg;

preferibilmente da 3 a 15;

- Fattori stimolanti le cellule staminali: da 100 a 1200 pg/mg, preferibilmente da 130 a 1100;

- Fattori antibatterici/antivirali: da 20 a 80 μg/mg, preferibilmente da 22 a 70;

- Proteine del complemento C3a/C4a: da 1 a 5 pg/mg, preferibilmente da 1,20 a 3;

- Immunoglobuline: da 0,3 to 0,9 mg/mg, preferibilmente da 0,35 a 0,80.

Per quanto concerne l’olio vegetale ozonizzato, si tratta di un prodotto ottenuto dal trattamento di oli vegetali con ozono.

L’ozono è un gas termodinamicamente instabile ed un energico ossidante (Eo = 2,07 V), spesso usato come germicida per purificare l’acqua. L’ozono danneggia gli acidi nucleici della cellula batterica. Le proteine e i lipidi delle membrane batteriche sono anch’essi importanti bersagli dell’ozono. A causa della sua ridotta stabilità, l’ozono gassoso deve essere utilizzato prontamente ed in modo adeguato poiché presenta rischi di tossicità respiratoria. In alternativa, questo gas può essere incorporato ai liquidi come il sangue, l’acqua o veicoli oleosi. I prodotti di reazione con veicolo oleoso sono in grado di conservare potere terapeutico per lungo tempo.

Gli oli vegetali sono caratterizzati da un’elevata percentuale di acidi grassi insaturi e modesto contenuto di acidi grassi saturi. In tutti gli oli vegetali la composizione può variare in funzione della cultivar, delle condizioni ambientali, della raccolta e della lavorazione.

Secondo la presente invenzione, l’olio vegetale impiegato per la preparazione della formulazione descritta è scelto nel gruppo che comprende: olio di girasole, olio di oliva, olio di argan, olio di jojoba, olio di semi di lino, olio di macadamia, o un altro olio vegetale.

In un aspetto preferito, l’olio, in particolare di oliva o di argan, è un olio extravergine.

In un aspetto preferito dell’invenzione è impiegato olio di girasole.

Esistono diversi oli di girasole con composizione differente, come:

● SO olio di semi di girasole, Helianthus annuus,

● SOHO olio ad alto tenore di acido oleico da semi di una varietà derivata dal girasole,

● SOMO olio a medio tenore di acido oleico da semi di una varietà derivata dal girasole.

La composizione in acidi grassi di questi oli è riportata nella tabella seguente:

acido palmitico 16:0 6,3 3,8 4,8 acido stearico 18:0 4,6 4,55 3,55

Gli acidi grassi, quando sottoposti ad ozonizzazione, producono monoozonuri dell'acido oleico e monoozonuri e diozonuri dell'acido linoleico come determinato tramite spettrofotometria infrarossa.

Il numero medio di perossidi dell’olio di girasole ozonizzato espressi come meq di ossigeno/kg di olio è uguale a 700.

Prove di tossicità hanno dimostrato che la DL50 dell’olio ozonizzato di girasole è elevata, pari a 16,5 g/kg and 1,6 mL/kg, quando somministrata intra peritonealmente e per os, rispettivamente.

L’ozonizzazione degli oli vegetali, preferibilmente dell’olio di girasole, da utilizzarsi quale componente delle composizioni topiche vaginali per l’uso nel trattamento delle vaginiti e delle vaginosi, oggetto della presente invenzione, viene realizzata secondo le tecniche note allo stato dell’arte.

La standardizzazione della preparazione viene effettuata secondo i seguenti parametri:

- Indice di Perossido (IP), indica la quantità di perossido all’interno dell’olio ozonizzato. Viene definito come la quantità di ossigeno attivo per chilogrammo di preparazione (mmol Kg<-1>). In un aspetto preferito, l’IP è tra 500 e 800 mmol Kg<-1>, preferibilmente 650 mmol Kg<-1>.

- Indice di Acidità, indica l’acido grasso libero all’interno dell’olio ozonizzato. Viene definito come il numero di milligrammi di idrossido di potassio necessari per neutralizzare l’acido grasso libero in un milligrammo di olio ozonizzato.

Nell’olio di girasole il valore deve variare tra 6 e 8 unità.

Nella preparazione della presente invenzione, in cui l’olio è ozonizzato, non deve superare preferibilmente le 30 unità.

- Concentrazione di aldeidi. Viene misurata aggiungendo idrossilammina libera al gruppo carbossilico aldeidico. I risultati sono espressi in mmol g<-1 >di olio ozonizzato; l’intervallo deve essere compreso tra 0.4 e 0.9 mmol g<-1>.

- Indice di Iodio, è una misura del tasso di insaturazione del’olio di girasole espresso come il numero di grammi di iodio che reagisce con 100 grammi di olio di girasole. Nell’olio di girasole il valore varia tra 125 e 135 unità.

Nella preparazione della presente invenzione, invece, il valore è compreso tra 50 e 90 unità.

- Viscosità, è una misura della polimerizzazione per condensazione dei perossidi che si formano nel processo di ozonizzazione dell’olio di girasole. I valori sono espressi in mPa.s (centipoise o valore cP; Institute of Standards and Technology). Per ottenere un olio di girasole ozonizzato con un IP compreso tra 500 e 800, la viscosità deve essere compresa tra 100 e 450 mPa.s.

Secondo un aspetto preferito della presente invenzione, l’olio ozonizzato può essere ulteriormente potenziato e avere un numero di perossidi > 800 meqO2/kg. In questo caso gli altri parametri di cui sopra vanno adattati e standardizzati di conseguenza.

Nelle preparazioni dell’invenzione, le due componenti possono essere presenti nelle seguenti quantità:

miscela isolata da colostro e ricca 3-10% in fattori biologici (peso/peso) Oli vegetali ozonizzati 5-75%

(peso/peso) In un aspetto preferito dell’invenzione, le due componenti sono presenti nelle seguenti quantità:

miscela isolata da colostro e ricca 4-6%

in fattori biologici (peso/peso) Oli vegetali ozonizzati 10-50%

(peso/peso) Ad esempio, le due componenti possono essere presenti nelle seguenti quantità:

Secondo la presente invenzione, la miscela isolata da colostro ricca di fattori biologici insieme a oli vegetali ozonizzati è impiegata per la preparazione di una formulazione per uso vaginale.

In un aspetto preferito, tali formulazioni sono rappresentate da gel, ovuli, lavande o altre forme adatte all’uso vaginale.

La persona esperta nel settore saprà individuare gli additivi, eccipienti e gli altri componenti necessari all’ottenimento di tali formulazioni scegliendoli dalla tecnica nota.

In un aspetto preferito della presente invenzione, la formulazione descritta può contenere altri ingredienti in concentrazione efficace.

In particolare, potranno essere inclusi uno o più dei seguenti componenti.

Acido lattico

L’acido lattico esogeno, sostituendosi a quello normalmente prodotto in condizioni fisiologiche dai lattobacilli per degradazione del glucosio, contribuisce a rendere il pH vaginale acido.

In un aspetto dell’invenzione, l’acido lattico è una preparazione al 90% e può essere presente in una quantità di circa lo 0,2% (peso/peso).

Betaina

La Betaina o Trimetilglicina (TMG) è una sostanza di origine vegetale estratta dalla barbabietola da zucchero. Dal punto di vista strutturale la Trimetilglicina si differenzia dalla Dimetilglicina (vitamina B15) per la presenza di un terzo gruppo metilico.

La Trimetilglicina interviene nella transmetilazione, processo biochimico indispensabile per il metabolismo e la rigenerazione cellulare, per mezzo del quale i gruppi metilici (CH3) sono trasferiti da una molecola ad un’altra.

In un aspetto dell’invenzione, la betaina può essere presente in una quantità di circa il 4% (peso/peso).

Pantenolo

Il Pantenolo è la forma alcolica ridotta dell’acido pantotenico (vitamina B5). In diverse formulazioni l’utilizzo del pantenolo è preferito rispetto a quello dell’acido pantotenico, per la maggior stabilità della forma alcolica. Il pantenolo possiede caratteristiche chimico-fisiche che ne rendono facile l’uso, come la solubilità in acqua.

In un aspetto dell’invenzione, il pantenolo può essere presente in una quantità di circa lo 0,2% (peso/peso).

Sericina Integra (MW 400.000)

E’ idratante, filmante ed ha capacità tamponanti dell’acidità, nonché riduce l’aggressività dei tensioattivi.

In un aspetto dell’invenzione, la sericina può essere presente in una quantità di circa il 4% (peso/peso).

Vitamina E (o Tocoferolo)

L'azione biologica della vitamina E è dovuta principalmente alle sue proprietà antiossidanti: essa previene l'ossidazione degli acidi grassi poliinsaturi (PUFA), sequestrando i radicali perossilipidici. Questa sembra essere la funzione fondamentale della vitamina E nei tessuti animali ed in particolare nelle membrane cellulari, dove il tocoferolo si trova associato ai PUFA nei fosfolipidi. La vitamina E entra inoltre nei processi di respirazione cellulare, fortifica le pareti dei vasi sanguigni, ha importanti effetti positivi sull’apparato riproduttivo.

In un aspetto dell’invenzione, la vitamina E può essere presente in una quantità di circa lo 0,5% (peso/peso).

Estratti vegetali

Possono essere scelti fra gli estratti di aloe, camomilla, calendula, etc… o altre sostanze vegetali con effetti positivi sulla salute vaginale.

Questi possono essere aggiunti nella forma di estratti secchi, oli essenziali o altre preparazioni.

In un aspetto dell’invenzione, l’estratto vegetale può essere presente in una quantità di circa 0,5-1% (peso/peso).

Ad esempio, l’olio essenziale di camomilla può essere aggiunto in una quantità dell’1% (peso/peso), mentre l’aloe vera sotto forma di gel (10:1) può essere aggiunto in una quantità dello 0,5% (peso/peso).

Acido ialuronico

L'acido ialuronico è un polisaccaride costituito da glicosaminoglicani a catena non ramificata largamente presente nella matrice extracellulare dei tessuti in grado di legare grandi quantità di acqua contribuendo a mantenere turgido ed elastico l'epitelio. L’apporto di acido ialuronico esogeno, per le sue capacità di ripristinare il tono e l'elasticità dei tessuti, nonché di migliorare ed accelerare il processo di riepitelizzazione, rappresenta un approccio non farmacologico al trattamento delle patologie della vagina e in particolar modo dell'atrofia vaginale.

In un aspetto dell’invenzione, l’acido ialuronico può essere presente in una quantità di circa lo 0,2% (peso/peso).

Metalli

Possono essere scelti nel gruppo che comprende: argento (argento colloidale, argento metallico o in altra forma terapeuticamente accettabile), zinco (zinco solfato o in altra forma terapeuticamente accettabile).

Ad esempio, l’argento metallico (puro 99,9%) o lo zinco solfato possono essere presenti, soli o in combinazione, in una quantità di circa lo 0,05% (peso/peso) ciascuno.

In un aspetto preferito dell’invenzione, la formulazione descritta comprende:

Secondo un oggetto della presente invenzione, le composizioni descritte sono vantaggiosamente impiegate per il trattamento di secchezza vaginale, di vaginiti e vaginosi in donne in premenopausa, in menopausa, isterectomizzate, adolescenti, donne in puerperio o in allattamento, donne affette da stress o che abusano di trattamenti locali squilibrati.

Secondo un aspetto dell’invenzione, le formulazioni descritte trovano impiego in un metodo per il trattamento della secchezza vaginale, di vaginiti e vaginosi.

In particolare, tale metodo può riguardare donne in premenopausa, in menopausa, isterectomizzate, adolescenti, donne in puerperio o in allattamento, donne affette da secchezza da stress o che abusano di trattamenti locali squilibrati.

L’invenzione è qui a seguito descritta in maggior dettaglio dalla seguente parte sperimentale.

ESEMPIO 1

Formulazione

La composizione può essere eventualmente modificata per aggiunta dei seguenti componenti riducendo conseguentemente la quantità di additivi, eccipienti e conservanti:

ESEMPIO 2

Prove cliniche

Un totale di 45 donne in età fertile, in premenopausa e in menopausa da almeno un anno, affette da vaginiti e vaginosi per cause infettive, ormonali, meccaniche, da stress, da trattamenti locali squilibrati, allattamento, contraccettivi ecc. sono state suddivise in tre gruppi omogenei da 15 pazienti ciascuno. Uno dei tre gruppi è stato trattato con la composizione dell’Esempio 1 sotto forma di gel vaginale, il secondo gruppo è stato trattato con lo stesso gel vaginale contenente però quale principio attivo unicamente il derivato del colostro ed il terzo gruppo è stato trattato con lo stesso gel vaginale contenente però quale principio attivo unicamente l’olio vegetale ozonizzato (per tutte le tre formulazioni la terapia è consistita in una singola somministrazione giornaliera per 20 giorni consecutivi). Le condizioni patologiche della vagina, pre- e posttrattamento, sono state valutate utilizzando il Vaginal Health Index (Bachman et al., Clin. Pr. Sex., 1992).

Il Vaginal Health Index è uno strumento validato che può essere utilizzato per valutare il livello di atrofia vaginale conseguente a vaginiti e vaginosi da varie cause. Prevede l’utilizzo di 5 parametri (elasticità vaginale, secrezioni vaginali, pH, integrità della mucosa vaginale ed idratazione della vagina) a cui assegnare dei singoli punteggi la cui somma definisce lo stato di salute vaginale. Se il punteggio è < 15, la vagina è considerata atrofica.

Nella Figura 1 sono riportati i punteggi da assegnare a ciascun parametro (o indice) sulla base di quanto evidenziato all’esame clinico.

Nelle tabelle delle figure 2A, 3A e 4A sono riportate le medie dei punteggi assegnati ai 5 parametri che definiscono il Vaginal Health Index, prima e dopo il relativo trattamento con uno dei tre prodotti testati (derivato del colostro da solo, olio vegetale ozonizzato da solo e derivato del colostro olio vegetale ozonizzato). Per confrontare i dati ottenuti dalle analisi effettuate è stato utilizzato il t di Student (p < 0,005). I dati ottenuti hanno dimostrato che il prodotto contenente il derivato del colostro olio vegetale ozonizzato, oggetto della presente invenzione, ha procurato dal punto di vista clinico i benefici maggiori rispetto agli altri due prodotti di riferimento, come dimostrato anche dall’analisi statistica (Fig. 5A). Il composto oggetto della presente invenzione quindi ha permesso di ripristinare un ambiente vaginale sano, normalizzando il pH, rigenerando l’epitelio vaginale e aumentando la lubrificazione naturale della vagina, oltre ad alleviare i sintomi correlati a vaginiti e vaginosi, quali la secchezza e il dolore durante i rapporti sessuali o la minzione. Inoltre, il trattamento locale con il prodotto oggetto della presente invenzione non ha dato origine a nessun effetto collaterale né a stimolazione endometriale, rivelandosi così non solo efficace ma anche sicuro.

Dalla descrizione sopra fornita della presente invenzione saranno immediatamente evidenti i vantaggi offerti dalle formulazioni proposte.

In particolare, è stato osservato come l’efficacia di queste formulazioni sia strettamente legata alla sinergia dei due componenti ed alla loro interdipendenza funzionale.

Le sostanze bioattive estratte dal colostro infatti, e in questo caso soprattutto i fattori di crescita, agiscono favorendo la ricostruzione e il mantenimento dell’integrità funzionale della mucosa vaginale (atrofica o danneggiata da agenti batterici, virali, detergenti, saponi, salvaslip, lubrificanti, indumenti non traspiranti, trattamenti farmacologici, etc.). L’epitelio vaginale così rigenerato, può riprendere la sua funzione fisiologica, vengono ripristinate le normali secrezioni protettive e lubrificanti e tutto l’ecosistema vaginale viene ricondotto ad uno stato ottimale.

L’olio vegetale ozonizzato, in piena sinergia con le sostanze antibatteriche, antivirali e immunostimolanti derivate dal colostro, agisce da potente antibatterico naturale, possedendo notevoli proprietà inattivanti verso virus, miceti e forme protozoarie, ed ancor meglio, per la sua funzione di “conservante naturale” dimostrata dalle numerose applicazioni in campo alimentare, protegge le delicate sostanze bioattive isolate dal colostro.

Le prove cliniche eseguite hanno dimostrato una attività notevolmente superiore delle composizioni qui descritte rispetto ad un prodotto comprendente la sola porzione derivata dal colostro o la sola porzione a base di olio ozonizzato.

Alla presente invenzione sopra descritta, la persona esperta, allo scopo di soddisfare esigenze contingenti e specifiche, potrà apportare adattamenti, modifiche e sostituzioni con altri componenti simili, senza tuttavia uscire dall’ambito delle rivendicazioni di seguito riportate.

Ad esempio, uno o più eccipienti potranno essere modificati a seconda della forma farmaceutica selezionata.

Claims (16)

1. RIVENDICAZIONI 1. Una composizione topica vaginale comprendente una miscela isolata dal colostro, ricca di fattori biologici, e oli vegetali ozonizzati.
2. 2. La composizione topica vaginale secondo la rivendicazione precedente comprendente detta miscela isolata dal colostro ricca di fattori biologici in una quantità di circa 3-10% e preferibilmente di circa 4-6% (peso/peso).
3. 3. La composizione topica vaginale secondo la rivendicazione 1 o 2 comprendente oli vegetali ozonizzati in una quantità di circa 5-75% e preferibilmente di circa 10-50% (peso/peso).
4. 4. La composizione topica vaginale secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui detta miscela isolata dal colostro ricca di fattori biologici è isolata dal colostro di mammifero, umano o animale, preferibilmente animale e più preferibilmente bovino.
5. 5. La composizione topica vaginale secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui detta miscela isolata dal colostro ricca di fattori biologici è isolata dal colostro di vacche della razza Holstein (Frisone).
6. 6. La composizione topica vaginale secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui detta miscela isolata dal colostro ricca di fattori biologici è isolata dal colostro raccolto entro la quinta ora del parto al secondo o al terzo parto.
7. 7. La composizione topica vaginale secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui detta miscela isolata dal colostro ricca di fattori biologici comprende citochine, fattori di crescita, fattori chemiotattici, fattori stimolanti le cellule staminali, proteine del complemento, fattori antibatterici e antivirali, immunoglobuline.
8. 8. La composizione topica vaginale secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui detti oli vegetali ozonizzati sono oli vegetali di girasole.
9. 9. La composizione topica vaginale secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui detti oli vegetali ozonizzati sono rappresentati da una miscela comprendente monoozonuri dell’acido oleico, monoozonuri e diozonuri dell’acido linoleico.
10. 10. La composizione topica vaginale secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, comprendente ulteriormente uno o più dei seguenti composti: acido lattico; idratanti; emollienti; lubrificanti, ad esempio scelti nel gruppo che comprende: betaina, pantenolo, sericina; vitamine, preferibilmente la vitamina E; estratti vegetali; acido ialuronico; metalli.
11. 11. La composizione topica vaginale secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti in una opportuna formulazione scelta nel gruppo che comprende: gel, ovuli, lavande o altre formulazioni adatte.
12. 12. La composizione topica vaginale secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti avente la seguente composizione:
13. 13. La composizione topica vaginale secondo la rivendicazione precedente comprendente ulteriormente:
14. 14. La composizione topica vaginale secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti per l’uso medico.
15. 15. La composizione topica vaginale secondo la rivendicazione precedente per l’uso medico nel trattamento della secchezza vaginale.
16. 16. La composizione topica vaginale secondo la rivendicazione 14 per l’uso medico nel trattamento delle vaginiti e delle vaginosi.