HUT73665A - Bifunctional-chelating agents braked with calcogene atoms, pharmaceutical compositions containing them , and use of these compositions in radio- diagnosis and radiotherapy - Google Patents

Bifunctional-chelating agents braked with calcogene atoms, pharmaceutical compositions containing them , and use of these compositions in radio- diagnosis and radiotherapy Download PDF

Info

Publication number
HUT73665A
HUT73665A HU9502868A HU9502868A HUT73665A HU T73665 A HUT73665 A HU T73665A HU 9502868 A HU9502868 A HU 9502868A HU 9502868 A HU9502868 A HU 9502868A HU T73665 A HUT73665 A HU T73665A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
cys
asp
ile
leu
ser
Prior art date
Application number
HU9502868A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9502868D0 (en
Inventor
Ludger Dinkelborg
Christoph-Stephan Hilger
Wolfgang Kramp
Hans-Martin Schier
Original Assignee
Diagnostikforschung Inst
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Diagnostikforschung Inst filed Critical Diagnostikforschung Inst
Publication of HU9502868D0 publication Critical patent/HU9502868D0/hu
Publication of HUT73665A publication Critical patent/HUT73665A/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/0474—Organic compounds complexes or complex-forming compounds, i.e. wherein a radioactive metal (e.g. 111In3+) is complexed or chelated by, e.g. a N2S2, N3S, NS3, N4 chelating group
    • A61K51/0478—Organic compounds complexes or complex-forming compounds, i.e. wherein a radioactive metal (e.g. 111In3+) is complexed or chelated by, e.g. a N2S2, N3S, NS3, N4 chelating group complexes from non-cyclic ligands, e.g. EDTA, MAG3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C07B59/001—Acyclic or carbocyclic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C07B59/008—Peptides; Proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/57—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C323/58—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups with amino groups bound to the carbon skeleton
    • C07C323/59—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups with amino groups bound to the carbon skeleton with acylated amino groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/60—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton with the carbon atom of at least one of the carboxyl groups bound to nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D333/30—Hetero atoms other than halogen
    • C07D333/34—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F13/00—Compounds containing elements of Groups 7 or 17 of the Periodic Table
    • C07F13/005—Compounds without a metal-carbon linkage
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/57536—Endothelin, vasoactive intestinal contractor [VIC]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2121/00—Preparations for use in therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2123/00—Preparations for testing in vivo

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

ÚJ BIFUNKCIÓS, KALKOGÉNATOMMAL MEGSZAKÍTOTT KELÁTKÉPZŐ
VEGYÜLETEK, EZEKET TARTALMAZÓ FARMAKOLÓGIAI KÉSZÍTMÉNYEK,
VALAMINT A KÉSZÍTMÉNYEK RADIODIAGNOSZTIKAI ÉS RADIOTERÁPIÁS
ALKALMAZÁSA
A találmány tárgya új bifunkciós, kalkogénatommal megszakított kelátképző vegyületek, ezeket tartalmazó farmakológiái készítmények, valamint a készítmények radiodiagnosztikai és radioterápiás alkalmazása. A találmány tárgyát képezi továbbá eljárás e vegyületek és készítmények előállítására.
A radiodiagnosztikában és radioterápiában már régóta alkalmaznak radioaktív izotópokhoz komplexképzőket, ill. komplexképző ágensek radioaktív fémekkel képzett komplexeit.
Radiodiagnosztikai területen a technécium-99m radioizotópot használják leggyakrabban, mivel az előnyös fizikai tulajdonságokkal (nincs részecskesugárzása, felezési ideje - 6,02 óra - rövid és jól detektálható a 140 keV γ-sugárzás révén), rövid biológiai felezési idővel rendelkezik és egyszerűen hozzáférhető; ily módon különösen alkalmas in vivő körülmények között végzett vizsgálatokhoz. A technécium-99m-komplexekét úgy állítják elő, hogy radionuklid-generátorral egy pertechnetát terméket nyernek és ezt egy alkalmas redukálószerrel (pl. SnCl2, S2O4 2- vagy hasonló ágenssel) alacsonyabb oxidációfokú termékké alakítják, amelyet végül egy alkalmas kelátképzővel stabilizálnak. Mivel a technécium oxidációfoka többféle lehet (+7-től -1-ig terjedően), és ez a komplex töltésének megváltozása révén a farmakológiai tulajdonságokat is jelentősen megváltoztathatja, a technécium-99m-izotóp esetében olyan kelátképzőkre, illetve komplex-ligandumokra van szükség, amelyek a technéciumot meghatározott oxidációs állapotban biztonságosan, szorosan és stabilan képesek megkötni. Ezáltal lehetséges azt megakadályozni, hogy a megfelelő radiodiagnosztikumból in vivő körülmények között végbemenő redoxfolyamatok, ill.
technécium-felszabadulás disztribúció történjék, révén nemkívánt irányú bio ami az adott betegség biztos diagnosztizálását megnehezítené.
Technécium- és rénium-izotópok alkalmas komplexképzői, pl. a ciklusos aminok [Troutner, D.E. és munkatársai, J. Nucl. Med. 21, 443 (1980)], ezeknek hátránya azonban, hogy csak pH>9 pH-értékeknél kötik meg jó hozammal a technécium-99m-izotópot. Az N2O2 rendszereket [Pillái, M. R. A., Troutner, D.E. és munkatársai: Inorg. Chem. 29, 1850 (1990)] a klinikai gyakorlatban alkalmazzák. Az aciklusos N4
-rendszerek, ilyen például a HMPAO nagy hátránya, hogy csekély komplex-stabilitást mutatnak. A technécium-99m-HMPAO komplexet instabilitása miatt jelzése után azonnal alkalmazni kell, hogy a bomlástermékek - amelyek farmakokinetikája és kiválasztódása eltérő - szintje alacsony legyen. Az ilyen radiokémiái szennyeződések a diagnosztizálandó betegségek felismerését megnehezítik. E kelátok, ill. kelátképzők más, a • ·
betegséggócban szelektíven feldúsuló anyagokhoz való kapcsolása egyszerűen nem oldható meg, úgyhogy azok a szervezetben általában nemspecifikusan oszlanak meg.
Az N2S2-kelátképzők [Bormans, G. és munkatársai: Nucl. Med. Bioi., 17, 499 (1990)], ilyen pl. az etilén-dicisztein [rövidítve EC; Verbruggen, A. M. és munkatársai, J. Nucl. Med. 33, 551 (1992)], kielégítik azt a kívánalmat, hogy a technécium-99m izotóppal képzett komplexeik eléggé stabilak legyenek, azonban a radiodiagnosztikumok csak a 9-nél nagyobb pH-jú komplexáló közegben képződnek 69 %-nál nagyobb tisztaságban .
Az N3S-rendszerek (EP-0
173 424 A és
EP-0 250
013 A számon közzétett szabadalmi bej elentések) jóllehet stabil technécium-99m komplexeket képeznek, a radioizotóp beépüléséhez azonban mintegy
100 °C-ra történő hevítésre van szükség.
Az N2S2 és N3S típusú rendszerek további hátránya abban
áll, hogy ezek gyorsan és a szervezetben történő specifikus
feldúsulás nélkül kiválasztódnak, így csupán vesefunkció-
diagnosztikumként alkalmazhatók a klinikai gyakorlatban,
vagyis felhasználhatóságuk korlátozott. Az utóbbi években megnőtt az igény a beteg szövetben feldúsuló radiodiagnosztikumok iránt. Ez akkor valósítható meg, ha a komplexképző könnyedén hozzákapcsolható szelektíven feldúsuló anyagokhoz, miközben azzal előnyös komplexképző tulaj donságait nem veszíti el. Minthogy azonban igen gyakran előfordul, hogy a komplexképzőnek egy ilyen molekulához, a komplexképző valamely funkciós csoportján át történő kapcsolása után a komplex stabilitása csökken, a kelátképzőknek szelektíven feldúsuló anyagokhoz való kapcsolása egyelőre aligha tekinthető kielégítőnek, hiszen a konjugátumból az izotóp egy diagnosztikailag nem tolerálható hányada in vivő felszabadul [Brechbiel, M.W. és munkatársai: Inorg. Chem. 1986, 25, 2772] . így szükség van olyan bifunkciós komplexképzők előállítására, amelyek a kívánt fémionnal létesülő kötéshez szükséges funkciós csoporttal is rendelkeznek és emellett egy másik vagy több, a szelektíven feldúsuló molekulával létesülő kötéshez szükséges funkciós csoportot tartalmaznak. Az ilyen bifunkciós ligandumok lehetővé teszik a technécium- vagy rénium-izotópok különféle biológiai anyagokhoz történő, kémiailag definiált kötését, akkor is, amikor egy ún. előjelzést végeznek. Leírnak néhány olyan kelátképzőt, amelyeket monoklonális antitestekhez (lásd pl. EP-0 247 866 és EP-0 188 256 sz. szabadalmi bejelentések) vagy zsírsavakhoz (EP-0 200 492 sz. szabadalmi bejelentés) kapcsolnak. Kelátképzőként a már említett N2S2-rendszereket alkalmazzák, amelyek mérsékelt stabilitásuk miatt csak kevéssé alkalmasak. Mivel a szelektíven felhalmozódó anyagok esetében nagyok az eltérések mind tulajdonságaik, mind feldúsulásuk mechanizmusa tekintetében, szükség van arra is, • «· • · · • · · · ··« · · ··· • « · hogy a kelátképző kapcsolási készségét változtatni és a kapcsoló partner fiziológiai kívánalmaihoz igazodóan - így lipofil, ill. hidrofil, membrán-permeabilitási, illetve impermeabilitási sajátságait tekintetbe véve - igazodóan megválasztani lehessen.
A találmány alapját az a feladat képezi, hogy egyrészt olyan stabil komplexvegyületeket bocsássunk rendelkezésre, amelyek különféle szelektíven feldúsuló vegyületekhez kapcsolódnak vagy ilyenekhez hozzákapcsolódni képesek, másrészt olyan kapcsolható kelátképzőket vagy komplexeket biztosítsunk, amelyek a szubsztituensek nagyobb kémiai változatosságát nyújtják. E megoldások a fent említett követelményeket kielégítik. A találmány feladatkörébe tartozik továbbá ilyen vegyületek előállítása, a vegyületeket tartalmazó farmakológiai készítmények, valamint eljárás e készítmények előállítására.
E feladatok a találmány értelmében, meglepő módon, azáltal oldhatók meg, hogy új, szokatlan, bifunkciós, kalkogénatommal megszakított kelátképzők és azoknak specifikusan feldúsuló vegyületekkel képzett kapcsolási termékei, ún. konjugátumai kiválóan alkalmasak radiodiagnosztikumok, ill. radioterápiás szerek előállítására.
A találmány tárgya közelebbről (A) általános képletű vegyületek, ahol
M jelentése technécium vagy rénium radioizotópja;
L jelentése egy (I) általános képletű ligandum, ahol
A jelentése oxigén-, kén- vagy szelénatom,
R1, R2' R3 és R4 lehetnek azonosak vagy különbözőek és jelentésük egymástól függetlenül hidrogénatom és/vagy egy elágazó vagy egyenes 1-6 szénatomos alkilcsoport,
B jelentése egy (a) általános képletű csoport, ahol
R5 és R6 lehetnek azonosak vagy különbözőek és jelentésük hidrogénatom vagy egyenes vagy elágazó, ciklusos vagy policiklusos 1-60 szénatomos alkil-, alkenil-, polialkenil-, alkinil-, polialkinil-, arilcsoport, alkil-aril-csoport vagy aril-alkil-csoport, amelyek adott esetben hidroxi-, oxo-, oxi-, karboxi-, amino-, karbonilcsoporttal, alkoxi-karbonil-csoporttal, amino-, aldehid- vagy legfeljebb 20 szénatomos alkoxicsoporttal lehetnek helyettesítve és/vagy adott esetben egy vagy több oxigén-, nitrogén-, kén-, foszfor-, arzén- és/vagy szelénatommal lehetnek megszakítva és/vagy szubsztituálva;
R7 és R8 lehetnek azonosak vagy különbözőek és jelentésük hidrogénatom és/vagy elágazó vagy egyenes 1-6 szénatomos alkilcsoport;
R9 jelentése elágazó vagy egyenes 1-6 szénatomos alkilcsoport vagy egy kén-védőcsoport; és • ·
R9 és R5 adott esetben együttesen azokkal a csoportokkal, amelyekhez kötődnek egy adott esetben hidroxi-, OXO-, oxi- vagy legfeljebb hat szénatomos alkoxicsoporttal szubsztituált 4-8-tagú gyűrűt képeznek.
Előnyösek azok az (A) általános képletű vegyületek, amelyek képletében R1, R2, R3 és R4 hidrogénatom és A jelentése kénatom.
Különösen előnyös találmány szerinti (A) általános képletű vegyületek, amelyek képletében R5 és R6 jelentése különböző és R6, R7, valamint R8 jelentése hidrogénatom.
A találmány tárgyát képezik továbbá új, bifunkciós, kalkogénatommal megszakított (I) általános képletű ligandumok, ahol R1, R2, R3, R4, A és B jelentése a fentivel megegyező.
Előnyös találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek azok, amelyek képletében A jelentése kénatom és R1, R2, R3 és R4 jelentése hidrogénatom.
Különösen előnyös találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek, amelyek képletében R5 és R6 jelentése különböző és R6, R7, valamint R8 jelentése hidrogénatom.
A találmány tárgyát képezik továbbá egy (A) és/vagy (I) általános képletű vegyületet és a beteg szövetben feldúsuló anyagokat tartalmazó konjugátumok, amelyekben közöttük egy kovalens kötéses kapcsolat van, és az karboxi- vagy aminocso• ·· • · ··· • ·· ♦ · ··· portokat tartalmazó anyagok - így pl. peptidek, fehérjék és antitestek vagy ezek fragmensei - esetében amid-kötés, hidroxicsoportokat tartalmazó anyagok - így pl. zsíralkoholok - esetében észtertípusú kötés, míg aldehidcsoportokat tartalmazó anyagok esetében imid-kötés formájában létesül.
Különösen előnyösek azok a találmány szerinti konjugátumok, ahol a beteg szövetben feldúsuló anyagok peptideket, így endotelineket, endotelin-szekvenciákat, endotelin-analógokat, endotelin-származékokat vagy endotelin-antagonistákat jelentenek.
További előnyös találmány szerinti konjugátumok az alábbi
- peptid-szekvenciákat:
i--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------1
Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-C^s-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Trp-Leu-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Cys-Thr-Cys-Phe-Thr-Tyr-Lys-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrTyr-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Cvs-Ser-Alá-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Alá-Val-Tyr
Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp, | : |
Cys-Ser-Cys-Asn-Ser-Trp-Leu-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr*--------------;
Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp, ( j
Cys-Ser-Cys-Lys-Asp-Met-Thr-Asp-Lys-Glu-Cys-Leu-AsnPhe-Cys-His-Gln-Asp-Val-Ile-Trp,
Ala-Ser-C ys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-Alá -His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Ala-Ser-Ala-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-TyrPhe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Trp-Leu-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-TyrPhe-Alá-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
N-Acetyl-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr-Phe-Ala-HisLeu-Asp-Ile-Ile-Trp,
- rész-szekvenciát
His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp; vagy
- ciklusos aminosav-szekvenciákat:
Ciklo-(DTrp-DAsp-Pro-DVal-Leu),
Ciklo-(DGlu-Ala-alloDIle-Leu-DTrp) tartalmazzák.
A találmány szerinti (A) általános képletű vegyületeket olyan módon állítjuk elő, hogy technécium-99m izotópot vagy réniumot pertechnetát, ill. perrenát formában egy redukálószer és adott esetben egy segédligandum jelenlétében egy (I) általános képletű vegyülettel - ahol R* 1 , R2, R3, R4, A és B jelentése a fenti - reagáltatunk.
A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületet olyan módon állítjuk elő, hogy egy (II) általános képletű vegyületet egy (III) általános képletű vegyülettel az 1. re* « · · · ··· ·· ··· ···
...· ·..· ...· ·..· akcióvázlat szerint reagáltatunk. A (II) és (III) képletben R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, A és B jelentése a fenti.
E reakciókat poláris és nempoláris aprotikus oldószerben, pl. diklór-metánban, tetrahidrofuránban, kloroformban, 1,4-dioxánban, ' DMF-ben vagy DMSO-ban -30 és +100 °C közötti hőmérsékleten, egy, a szabaddá váló sav megkötésére szolgáló segédbázis jelenlétében végezzük. Ilyenek pl. tercier-aminok, alkáli- és alkáliföldfém-hidroxidok, valamint alkáli- és alkáliföldfém-karbonátok.
A találmány további tárgyát képezik készletek (a szakterületen meghonosodott idegen szóval: kitek) radiofarmakonok előállítására, amelyek tartalmaznak: egy (I) általános képletű vegyületet vagy egy (A) és/vagy (I) általános képletű vegyületeket és szövetekben szelektíven dúsuló anyagokat tartalmazó találmány szerinti konjugátumot, egy redukálószert és adott esetben egy segédligandumot, amelyek lehetnek száraz állapotban vagy oldatban, továbbá egy használati utasítást az ismertetett vegyületek technécium-99m izotóppal vagy réniummal pertechnetát-, ill. perrenát-oldat formában történő reakciójának leírásával.
A találmány ezen túlmenően radiofarmakológiai készítményekre vonatkozik, amelyek nem invazív módon, in vivő receptorok és receptorokat tartalmazó szövetek és/vagy ateroszklerotikus plakkok leképezésére alkalmazhatók. E készítmények egy (A) általános képletű vegyületet vagy egy (A) és/vagy (I) általános képletű vegyületeket és szövetekben szelektíven feldúsuló anyagokat tartalmazó találmány szerinti konjugátumot, és adott esetben a gyógyszertechnológiai gyakorlatban szokásos adalékanyagokat tartalmaznak, ahol a vegyület egy készletben technécium-99m- vagy rénium-izotóppal, pertechnetát-, ill. perrenát-oldat formában felhasználásra elő van készítve.
A találmány tárgyát képezi továbbá, eljárás radiodiagnosztikai vizsgálat kivitelezésére, amely abban áll, hogy a radiofarmakológiai készítményt 70 kg testtömegre vonatkoztatva 0,1-től 30 mCi-ig, előnyösen 0,5-től 30 mCi-ig terjedő mennyiségben egy egyénnek adagoljuk, majd az egyénből kijövő sugárzást mérjük.
Meglepő módon szokásos technécium-99m- vagy rénium-izotóppal jelzett szintetikus kelát stabilitása nagyobb, mint a szakirodalomban leírt N2S2- és N3S-rendszereké. így pl. egy találmány szerinti vegyület esetében (2a és 2b példa szerinti vegyület), amelyet egy zsíralkoholhoz kapcsoltunk, bomlástermékeket 23 óra múlva sem figyeltünk meg. Kompetitiv kísérletek révén megállapítottuk, hogy a találmányban leirt technécium-99m- vagy rénium-kelát-képzők az összevethető N2S2- és N3S- és propilénaminoxium-rendszereknél jobban komplexálnak. Ezáltal a találmány szerinti kelátok és kelátképzők az eddig ismert rendszereknél egyértelműen jobbak diagnosztikus és terápiás célokra. A találmány szerinti
kelátképzők különösen előnyösek abból a szempontból, hogy szintézisük kén-védőcsoport alkalmazása nélkül is elvégezhető. Ez szintézisüket igen egyszerűvé teszi, és egyszersmind további speciális előnyt jelent a találmány szerinti vegyületek javára, mivel a radiokémiái jelzés után további idegen anyagok a radiodiagnosztikai, ill. radioterápiai célokra, pl. intravénásán alkalmazandó oldatokban nincsenek jelen, amelyek a radiofarmokon biodisztribúcióját gyakran zavarják és ezzel a diagnosztikus információtartalmat hátrányosan befolyásolhatják. Ezen felül az ilyen ligandumok, ill. a beteg szövetben szelektíven feldúsuló anyagokkal képzett kapcsolási termékeik jelzése igen enyhe körülmények között hajtható végre. így a találmány szerinti ligandumok, ill. a beteg szövetben szelektíven felhalmozódó anyagokkal képzett kapcsolási termékeik jelzése szobahőmérsékleten és fiziológiás pH-értéknél végezhető el, anélkül, hogy előzetesen bázisok, savak vagy más, a szakember által ismert segédanyagok behatására a védőcsoportokat lehasítottuk volna. Ez biztosíték arra, hogy ilyen segédanyagok révén, amelyek gyakran nagyon érzékenyek, a beteg szövetben szelektíven feldúsuló anyagok nem mennek át kémiai változáson, ami szelektív feldúsulásukat a beteg szövetben gyakran mérsékli és így a radiodiagnosztikum információtartalmát hátrányosan befolyásolja.
Mindazonáltal, természetesen ez esetben is alkalmazhatók kén-védőcsoportok, amennyiben az előbbiekben ismertetett hátrányokat elfogadjuk. A védőcsoportok kénatomhoz kapcsolása, ill. lehasítása a szakember számára ismert módszerekkel történhet. A beteg szövetben feldúsuló anyagokhoz történő kapcsolást szintén a szakember számára ismert módszerekkel [lásd pl. Fritzberg és munkatársai: J. Nucl. Med. 2 6, 7 (1987], így pl. a komplexligandum elektrofil csoportjai és a beteg szövetben szelektíven feldúsuló vegyület nukleofil centrumjai közötti reakcióval végezhetjük. Egyébként a kelátképző ágens nukleofil csoportjait kapcsoljuk a beteg szövetben szelektíven feldúsuló vegyület elektrofil csoportj aihoz.
Kapcsoló ágensként többek között különféle biomolekulák jöhetnek számításba, így pl. olyan ligandumok, amelyek specifikus receptorokhoz kötődnek és tekintetében megváltozott szövetet ilyenek pl. a különféle peptidek egy a receptorsűrűség felismerni képesek, és szteroidhormonok, növekedési faktorok és neurotranszmitterek. Szteroidhormon receptor ligandumokkal a mell- és prosztata-karcinoma diagnosztikai lehetőségei javulhatnak (S.J. Brandes és J. A. Katzenellenbogen, Nucl. Med. Bioi., 15, 53, 1988).
Tumorsejtekben különbözőképpen változik meg a peptidhormon- és növekedési faktor (mint pl. epidermális növekedési faktor, rövidítve EgF) receptorok-sűrűsége. A koncent14
rációkülönbség kihasználható citosztatikumok tumorsejtekben történő szelektív feldúsítására [(E. Aboud-Pirak és munkatársai, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86: 3778, (1989)].
Pozitront emittáló izotópokkal jelzett neuroreceptor
ligandumok sokoldalúan alkalmazhatók különféle agytumorok
diagnosztizálására [(J.J. Forst, Trends in Pharmacol. Sci., Ί_, 490 (1989)]. További biomolekulák lehetnek a sejtmetabolizmusba beépülő metabolitok, amelyek révén a megváltozott anyagcserefolyamat felismerhető; ilyenek pl. a zsírsavak, szacharidok, peptidek és aminosavak. Az EP-0 200 492 számú szabadalmi bejelentésben az instabil N2S2-kelátképzőhöz kapcsolt zsírsavakat írnak le. Más anyagcseretermékeket, így szacharidokat (dezoxiglükózt), laktátot, piruvátot és aminosavakat (leucint, metil-metionint, glicint) PET-technika segítségével anyagcserezavarok leképezésére alkalmaznak [R. Weinreich, Swiss. Med. 8_, 10, (1986)]. Ezen túlmenően, nem-biológiai eredetű vegyületek, így pl. a misonidazol és származékai, amelyek szövetekben, ill. szövetrészekben a csökkent oxigénkoncentrációval összefüggésben irreverzibilisen sejtalkotó elemekhez kötődnek, radioizotópok specifikus dúsítására és ezáltal tumorok vagy iszkémiás területek leképzésére alkalmazhatók [M.E. Shelton,
J. Nucl. Med. 30, 351, (1989) ] .
Végül a bifunkciós kelátképzők monoklonális antitestekhez vagy ezek fragmenseihez való kapcsolására is lehetőség van. Különösen előnyö15 sek a találmány szerinti kelátképzőknek, technécium—99m- vagy rénium-izotóppal kapott ill. ezek komplexeinek zsíralkoholokkal, zsiralkohol-származékokkal vagy zsirsavaminokkal, ill. származékaikkal vagy endotelinekkel, endotelinek részszekvenciáival, endotelin-analógokkal, endotelin-származékokkal vagy endotelin-antagonistákkal képzett kapcsolási termékei ateroszklerotikus érbetegségek detektálására. E származékokat WHHL-nyulaknak adagolva a következőt figyeltük meg (a WHHL-nyulakban az LDL-receptorok genetikus defektusa miatt kialakuló magas LDL-koncentráció ateroszklerotikus léziók kialakulásához vezet). Az intravénás adagolás után mintegy 4-5 órával a származék feldúsulása az aterómás plakkokban az ép érszakhoz viszonyítva 3-40-szeres. Ezáltal az ateroszklerotikus érszakaszok a szokásos radio diagnosztikai módszerekkel azonosíthatók. Ezidáig az aterogenézis csupán igen késői stádiumait lehetett invazív eljárásokkal (pl. arteriográfiával) diagnosztizálni. A találmány szerinti vegyületek döntő előnye tehát az ateroszklerózis sokkal korábbi és nem-invazív diagnosztikájában mutatkozik meg.
Nincs jelentősége annak, hogy a kelátképző ágens technécium-99m- vagy rénium-izotóppal történő jelzése a szelektíven feldúsuló molekulához való kapcsolás előtt vagy után történik. Mégis a szelektíven dúsuló molekulához történő komplexálás utáni kapcsolásnak feltétele, hogy a radioaktív ·« · · komplex a szelektíven feldúsuló molekulával enyhe körülmények között és közel kvantitative reagál, és így nem szükséges további tisztítást végezni.
A találmány szerinti farmakológiai készítményeket önmagában ismert módon állíthatjuk elő. Ügy járhatunk el, hogy a találmány szerinti komplexképzőt egy redukálószer, előnyösen ón(II)-sók - pl. ón(II)-klorid vagy -tartarát - és adott esetben a galenikus készítmények esetében szokásos adalékanyagok hozzáadásával vizes közegben feloldjuk és végül az oldatot sterilen szűrjük. Alkalmas adalékanyagok pl. a fiziológiailag veszélytelen pufferek (pl. trometamin), kis mennyiségben vett elektrolitok (pl. nátrium-klorid), stabilizálószerek (pl. glükonát, foszfát vagy foszfonát). A találmány szerinti farmakológiai készítmények oldat vagy liofilizált formában fordulhatnak elő, és azokat röviddel a felhasználás előtt egy a kereskedelemben beszerezhető generátorból eluált technécium-99m-pertechnetát-oldattal, vagy egy perrenát-oldattal reagáltatjuk.
Nukleáris-gyógyászati in vivő alkalmazáskor a találmány szerinti készítményeket lxl0'5-től 5xl04 mmol/testtömeg kg-ig terjedő, előnyösen lxl0~3-tól 5xl02 mmol/testtömeg kg-ig terjedő mennyiségben adagoljuk. Egy átlagos felnőtt testtömegét 70 kilogrammal véve, diagnosztikai alkalmazáskor a radioaktivitás 0, 05 és 50 mCi közötti, előnyösen 5 és 30 mCi közötti egy felhasználásra vonatkoztatva. Terápiás :···:··· ·»» ·· ··« jr, célokra 5 és 500 mCi közötti, előnyösen 10 és 350 mCi közötti dózist alkalmazunk. Általában az adagolás intravénás, intraartériás, peritoneális vagy tumorba adott injekció formájában, a találmány szerinti készítmény 0,1 és 2 ml közötti térfogatú oldatával történik. Előnyös az intravénás adagolási mód.
A találmányt az alábbi példákkal világítjuk meg közelebbről, az oltalmi kör korlátozása nélkül.
1.a példa
N-[2-Merkapto-l-(metoxi-karbonil)-etil]-tiodiglikolsav-monoamid
17,16 g (0,1 mól) cisztein-metil-észter-hidroklorid 500 ml vízmentes diklór-metánnal és 20,24 g (0,2 mól) trietil-aminnal készített oldatához argonatmoszférában 13,21 g (0,1 mól) tiodiglikolsav-anhidridet csepegtetünk. A reakcióelegyet 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 2 %-os vizes citromsav-oldattal mossuk. A szerves fázist nátrium-szulfáton szárítjuk, majd az oldószert vákuumban lepároljuk és a kapott olajos maradékot dietil-éterrel kristályosítjuk. Hozam: 18,73 g (70,1 %) fehér por.
Analízis: vízmentes anyagra vonatkoztatva
C (%) H (%) N (%) 0 (%) S (%)
számított: 35, 95 4, 90 5, 24 29, 93 23, 99
talált: 35, 72 5, 12 5, 03 23,71
?··· ·· .....‘ ···’
1, b példa
N-[2-Merkapto-l-(metoxi-karbonil)-etil]-tiodiglikolsav-monoamid-technécium-99m-kompi ex mg az l.a példa szerinti ligandumot 1,0 ml 0,5 mólos foszfát-pufferban pH=7,5 feloldunk. A kapott oldatból 50 μΙ-t 250 μΐ foszfát-pufferral (pH=8,5), 50 μΐ oxigénmentesített vizes citrátoldattal (koncentrációja 50 mg/ml), 2,5 μΐ oxigénmentesített vizes ón(II)-klorid-oldattal (5 mg/ml, 0,05 normál sósavban) és 100 μΐ pertechnetát-oldattal (aktivitása 400-900 μθί) kezelünk. A reakcióelegyet 10 percen át állni hagyjuk, majd nagynyomású-folyadékkromatográfiával (rövidítve: HPLC) a képződött technécium-kompiex tisztaságát ellenőrizzük. A kromatográfiás vizsgálat körülményei: Hamilton PRP-1 típusú oszlop, méretei: 5 μιη, 125 x 4,6 mm; gradienselúció 100 % A-eluenssel kezdve és 100 % B-eluenssel befejezve, időtartam: 7,5 perc [A eluens: nátrium-hidrogénfoszfát 0,005 M, pH =7,4; B eluens: acetonitril/nátriumhidrogén-foszfát 0,005 M, pH=7,4 (75/25)]; sebesség: 2,0 ml/perc. Radiokémiái tisztaság >98 %.
2. a példa
N-[2-Merkapto-l-(decil-oxi-karbonil)-etil]-tiodiglikolsav-monoamid
2,98 g (10 mmól) cisztein-decil-észter-hidroklorid és 2,02 g (20 mmól) trietil-amin 250 ml vízmentes diklór-me19 tánnal készített oldatához argonatmoszférában 1,32 g (10 mmól) tiodiglikolsav-anhidrid 50 ml vízmentes diklór-metánnal készített oldatát csepegtetjük. A reakcióelegyet 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd az oldatot 2 %-os vizes citromsavoldattal mossuk. A szerves fázist nátrium-szulfáton szárítjuk, majd az oldószert vákuumban lepároljuk, és a kapott olajos maradékot dietil-éterrel kristályosítjuk. Hozam: 3,37 g (85,6 %) , fehér por.
Analízis: vízmentes C (%) anyagra H (%) vonatkoztatva
N (%) 0 (%) S (%)
számított: 51,88 7,94 3, 56 20, 33 16, 29
talált: 51, 63 8,07 3,37 16, 02
2.b példa
N-[2-Merkapto-l-(decil-oxi-karbonil)-etil]-tiodiglikolsav-monoamid-technécium-99m-komplex mg a 2.a példa szerinti ligandumot 1,0 ml 0,5 mólos foszfát-pufferban (pH=7,5) oldunk. Az oldatból 50 μΙ-t 250 μΐ foszfát-pufferral (pH=7,5), 50 μΐ oxigénmentesített vizes citrátoldattal (koncentrációja 50 mg/ml), 2,5 μΐ oxigénmentesített vizes ón(II)-klorid oldattal (5 mg/ml 0,05 normál sósavban) és 100 μΐ pertechnetát oldattal (aktivitása 400-900 pCi) kezelünk. A reakcióelegyben a képződött technéciumkomplex tisztaságát 10 perces inkubációs idő után HPLC analízissel vizsgáljuk. Az analízist az alábbiak szerint végezzük: Hamilton PRP-1 típusú oszlop, méretei: 5 pm, 125 x
4,6 mm; gradienselúció 100 % A-eluenssel kezdve és 100 %
B-eluenssel befejezve, időtartam: 7,5 perc [A eluens:
nátrium-hidrogén-főszfát 0,005 M, pH =7,4; B eluens:
acetonitril/nátrium-hidrogén-főszfát 0, 005 M, pH=7,4
(75/25)]; sebesség 2,0 ml/perc. Radiokémiái tisztaság 98 %.
3.a példa
N-(2-Oxo-l-tetrahidrotiofén-3-il)-tiodiglikolsav-monoamid
15,36 g (0,1 mól) homocisztein-tiolakton-hidroklorid és 20, 24 g (0,2 mól) trietil-amin 500 ml vízmentes diklór-metánnal készített oldatához argonatmoszférában 13,21 g (0,1 mól) tiodiglikolsav-anhidrid 250 ml vízmentes diklór-metánnal készített oldatát csepegtetjük. A reakcióelegyet 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 2 %-os vizes citromsavoldattal mossuk. A szerves fázist nátrium-szulfáton szárítjuk, majd az oldószert vákuumban lepároljuk és a kapott olajos maradékot dietil-éterrel kristályosítjuk. Hozam:
22,73 g (91,2 %), fehér por.
Analízis: vízmentes anyagra vonatkoztatva
C (%) H (%) N (%) 0 (%) S (%)
számított: 38,54 4,45 5, 62 25, 67 25,72
talált: 38,37 4, 68 5,41 25, 47
3.b példa
N-[3-Merkapto-l-(oktil-amino-karbonil)-propil]-tiodiglikolsav-monoamid
2,49 g (10 mmól) a 3.a példa szerinti tiodiglikolsav-monoamid tiolakton-származékát 30 ml etanolban feloldjuk, és argonatmoszférában 30 ml oktil-amint adunk hozzá. A reakcióelegyet 4 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd nagy vákuumban bepároljuk, és a kapott maradékot 200 ml 2 %-os vizes citromsav és 200 ml diklór-metán keverékével kezeljük. Az elegyet alaposan átkeverjük, és a szerves fázist elválasztás után nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldószert vákuumban lepároljuk, és a kapott olajos nyers terméket dietil-éterrel kristályosítjuk. Hozam: 878 mg (23,2 %) , fehér por.
Analízis: vízmentes C (%) anyagra H (%) vonatkoztatva
N (%) 0 (%) S (%)
számított: 50, 77 7, 99 7,40 16, 91 16, 94
talált: 50, 48 8,13 7,15 16,71
3.c példa
N-[3-Merkapto-l-(oktil-amino-karbonil) -propil]-tiodiglikolsav-monoamid-technécium-99m-komplex mg a 3.b példa szerinti ligandumot 1,0 ml etanolban oldunk. Az oldatból 50 μΐ-t 250 μΐ foszfát-pufferral (pH=8,5), 50 μΐ oxigénmentesített vizes citrátoldattal (50 mg/ml), 2,5 μΐ oxigénmentesített vizes ón(II)-klorid-oldattal
(5 mg/ml 0,05 normál sósavban) és 100 μΐ pertechnetát oldattal (aktivitása 400-900 gCi) kezelünk. A képződött technécium komplex tisztaságát 10 perces inkubációs idő után HPLC analízissel vizsgáljuk. Az analízist az alábbiak szerint végezzük: Hamilton PRP-1 típusú oszlop, méretei: 5 |xm, 125 x
4,6 mm; gradienselúció 100 % A-eluenssel kezdve és 100 % B-eluenssel befejezve, időtartam: 7,5 perc [A eluens: nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 M, pH =7,4; B eluens: acetonitril/nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 M, pH=7,4 (75/25)]; sebesség 2,0 ml/perc. Radiokémiái tisztaság >95 %.
4.a példa
N-[3-Merkapto-l-(2-metoxi-etil-amino-karbonil)-propil]-tiodiglikolsav-monoamid
2,49 g (10 mmól) a 3.a példa szerinti tiodiglikolsav-monoamid tiolakton származék 30 ml etanollal készített oldatához argonatmoszférában 30 ml 2-metoxi-etil-amint adunk. A reakcióelegyet 5 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd vákuumban bepároljuk, és a kapott maradékot 200 ml 2 %-os vizes citromsav és 200 ml diklór-metán keverékével kezeljük. Az elegyet alaposan átkeverjük, és a szerves fázist elkülönítés után nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldószer vákuumban lepároljuk, és a kapott olajos nyers terméket dietil-éterrel kristályosítjuk. Hozam: 734 mg (22,6 %), fehér por.
Analízis: vízmentes anyagra vonatkoztatva
C (%) H (%) N (%) 0 (%) S (%)
számított: 40, 73 6,21 8,64 24, 66 19, 76
talált: 40, 47 6, 49 8,38 19, 51
4.b példa
N-[3-Merkapto-l-(2-metoxi-etil-amino-karbonil)-propil]- tiodiglikolsav-monoamid-technécium-99ni-komplex mg a 4.a példa szerinti ligandumot 1,0 ml etanolban feloldunk. Az oldatból 50 μΐ-t 250 μΐ foszfát-pufferral (pH=8,5), 50 μΐ oxigénmentesitett vizes citrátoldattal (koncentrációja 50 mg/ml), 2,5 μΐ oxigénmentesitett vizes ón(II)-klorid oldattal (5 mg/ml 0,05 normál sósavban) és 100 μΐ pertechnetát-oldattal (aktivitása 400-900 μθί) kezelünk. A képződött technécium-komplex tisztaságát 10 perces inkubációs idő után HPLC analízissel vizsgáljuk. Az analízist az alábbiak szerinti végezzük: Hamilton PRP-1 típusú oszlop, méretei: 5 μιη, 125 x 4, 6 mm; gradienselúció 100 % A-eluenssel kezdve és 100 % B-eluenssel befejezve, időtartam: 7,5 perc [A eluens: nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 M, pH =7,4; B eluens: acetonitril/nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 M, pH=7,4 (75/25)]; sebesség 2,0 ml/perc. Radiokémiái tisztaság >95 %.
5.a példa
N-[3-Merkapto-l-(2-hidroxi-etil-amino-karbonil)-propil]-tiodiglikolsav-monoamid
2,49 g (10 mmól) a 3.a példa szerinti tiodiglikolsav-monoamid tiolakton származék 30 ml etanollal készített oldatához argonatmoszférában 30 ml 2-amino-etanolt adunk. A reakcióelegyet 4 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd nagyvákuumban bepároljuk, és a maradékot 200 ml 2 %-os citromsavval és 200 ml diklór-metánnal kezeljük. Az elegyet alaposan átkeverjük és a szerves fázist elválasztás után nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldószert vákuumban lepároljuk, és a kapott olajos nyers terméket dietil-éterrel kristályo-
sítjuk. Hozam: 435 mg (14,0 %), fehér por.
Analízis: vízmentes anyagra vonatkoztatva
C (%) H (%) N (%) 0 (%) S (%)
számított: 38,70 5, 85 9, 03 25, 77 20, 66
talált: 38,38 5, 74 8,91 20,43
5.b példa
N-[3-Merkapto-l-(2-hidroxi-etil-amino-karbonil)-propil]-tiodiglikolsav-monoamid-technécium-99m-kompiex mg az 5.a példa szerinti ligandumot 1,0 ml etanolban oldunk. Az oldatból 50 μΐ-t 250 μΐ foszfát-pufferral (pH=8,5), 50 μΐ oxigénmentesített vizes citrátoldattal (koncentrációja 50 mg/ml), 2,5 μΐ oxigénmentesített vizes ón(II)-klorid oldattal (5 mg/ml 0,05 normál sósavban) és 100 μΐ
pertechnetát-oldattal (aktivitása 400-900 pCi) kezelünk. A képződött technécium-kompiex tisztaságát 10 perces inkubációs idő után HPLC analízissel vizsgáljuk. Az analízist az alábbiak szerinti végezzük: Hamilton PRP-1 típusú oszlop, méretei: 5 pm, 125 x 4,6 mm; gradienselúció 100 % A-eluenssel kezdve és 100 % B-eluenssel befejezve, időtartam: 7,5 perc [A eluens: nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 M, pH =7,4; B eluens: acetonitril/nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 M, pH=7,4 (75/25)]; sebesség 2,0 ml/perc. Radiokémiái tisztaság >95 %.
6.a példa
N-[3-Merkapto-l-(karbonil-Gly-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp)-propil]-tiodiglikolsav-amid
853 mg (1 mmól) NH2-Gly-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp (analógia alapján állítjuk elő, lásd: Bárány és Merrifeld, The Peptides: Analysis, Biology, Academic Press, New York, 1980; Stewart and Yound, Solid Phase Peptides Syntheses, 2nded., Pierce Chemical W., Rockford, II, 1984) és 404 mg (4 mmól) trietil-amin 100 ml vízmentes dimetil-formamiddal készített oldatához argonatmoszférában 250 mg (1 mmól) a 3. a példa szerinti N-(2-oxo-tetrahidro-tiofen-3-il)-tiodiglikolsav-amidot adunk. A kapott reakcióelegyet 12 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezt követően az elegyet szűrjük, és az oldószert vákuumban lepároljuk. A kapott olajat háromszor 50 ml dimetil-formamiddal kezeljük, és az oldószert minden . :··· .·· • · · · · · • · ·
.....
alkalommal lepároljuk. A maradékot 200 ml vízmentes dietil-éterrel kezeljük, és a kapott szilárd anyagot szűréssel elkülönítjük. A terméket dimetil-formamid - dietil-éter oldószerelegyből történő átkristályosítással tisztítjuk. Hozam: 282 mg (25,6 %), fehér por.
Analízis: vízmentes anyagra vonatkoztatva
C (%) H (%) N (%) 0 (%) S (%
számított: 53,39 6, 49 13, 98 20, 32 5, 82
talált: 53,17 6, 63 13, 74 5, 61
6.b példa
N-[3-Merkapto-l-(karbonil-Gly-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp)-propil ] -tiodiglikolsav-amid-technécium-99m-komplex mg a 6.a példa szerint előállított ligandumot 1,0 ml etanolban oldunk. Az oldatból 50 μΐ-t 250 μΐ foszfát-pufferral (pH=8,5), 50 μΐ oxigénmentesített vizes citrátoldattal (koncentrációja 50 mg/ml), 2,5 μΐ oxigénmentesített vizes ón(II)-klorid oldattal (5 mg/ml 0,05 normál sósavban) és 100 μΐ pertechnetát-oldattal (aktivitása 400-900 pCi) kezelünk. A képződött technécium-komplex tisztaságát 10 perces inkubációs idő után HPLC analízissel vizsgáljuk. Az analízist az alábbiak szerinti végezzük: Hamilton PRP-1 típusú oszlop, méretei: 5 μη, 125 x 4,6 mm; gradienselúció 100 % A-eluenssel kezdve és 100 % B-eluenssel befejezve, időtartam: 7,5 perc [A eluens: nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 M, pH =7,4;
B eluens: acetonitril/nátrium-hidrogén-foszfát 0,005 Μ, pH=7,4 (75/25)]; sebesség 2,0 ml/perc. Radiokémiái tisztaság >97 %.
7. példa
Az N-[2-Merkapto-l-(decil-oxi-karbonil)-etil]-tiodiglikolsav-monoamid-technécium-99m-komplex feldúsulása WHHL-nyúl ateroszklerotikus érterületein
Az N-[2-merkapto-l-(decil-oxi-karbonil)-etil]-tiodiglikolsav-monoamid (2.a példa szerint állítjuk elő) jelzését a 3.b példa szerint végezzük. 99,9 Gbq (2,7 mCi) a 3.b példa szerint jelzett vegyületet foszfáttal pufferolt sóoldattal 1 ml-re hígítunk. Az oldattal WHHL-nyulat [Rompun/Ketavet (1:2)] egyik fülvénáján keresztül kezelünk. A kezelés után 5 órával a nyulat leöljük, és az aortáról autoradiográfiás vizsgálatot végzünk, valamint az ateroszklerotikus plakkok képződését Szudán-(III) festéssel vizsgáljuk (1. ábra). Az ép és ateroszklerotikus érfalak közötti dúsulási faktor értéke 3 és 8 közé esik, a plakk-képződésnek megfelelően (Szudán-(III) festés).

Claims (7)

  1. Szabadalmi igénypontok
    1. (I) általános képletű vegyületek, ahol
    A jelentése oxigén-, kén- vagy szelénatom,
    R1, R2, R3 és R4 lehetnek azonosak vagy különbözőek és jelentésük egymástól függetlenül hidrogénatom és/vagy egy elágazó vagy egyenes 1-6 szénatomos alkilcsoport,
    B jelentése egy (a) általános képletű csoport, ahol
    R5 és R5 lehetnek azonosak vagy különbözőek és jelentésük hidrogénatom vagy egyenes vagy elágazó, ciklusos vagy policiklusos 1-60 szénatomos alkil-, alkenil-, polialkenil-, alkinil-, polialkinil-, arilcsoport, alkil-aril-csoport vagy aril-alkil-csoport, amelyek adott esetben hidroxi-, oxo-, oxi-, karboxi-, amino-, karbonilesöpörttál, alkoxi-karbonil-csoporttal, amino-, aldehid- vagy legfeljebb 20 szénatomos alkoxicsoporttal lehetnek helyettesitve és/vagy adott esetben egy vagy több oxigén-, nitrogén-, kén-, foszfor-, arzén- és/vagy szelénatommal lehetnek megszakítva és/vagy szubsztituálva,·
    R7 és R8 lehetnek azonosak vagy különbözőek és jelentésük hidrogénatom és/vagy elágazó vagy egyenes 1-6 szénatomos alkilcsoport;
    • ·· *
    * · · • ·
    R9 jelentése elágazó vagy egyenes 1-6 szénatomos alkilcsoport vagy egy kén-védőcsoport; és
    R9 és R5 adott esetben együttesen azokkal a csoportokkal, amelyekhez kötődnek egy adott esetben hidroxi-, 0x0-, oxi- vagy legfeljebb hat szénatomos alkoxicsoporttal szubsztituált 4-8-tagú gyűrűt képeznek -;
    e vegyületeknek beteg szövetben vagy tumorokban szelektíven feldúsuló anyagokkal képzett konjugátumai, amelyekben közöttük egy kovalens kötéses kapcsolat van, és az karboxivagy aminocsoportokat tartalmazó anyagok - mint peptidek, fehérjék és antitestek vagy ezek fragmensei - esetében amidkötés, hidroxicsoportokat tartalmazó anyagok - mint zsiralkoholok - esetében észter-típusú kötés vagy aldehidcsoportokat tartalmazó anyagok esetében imid-kötés; valamint ezeknek technécium vagy rénium radioizotópokkal képzett komplexei.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti vegyületek, ahol R1, R2, R3 és R4 jelentése hidrogénatom, A jelentése kénatom.
  3. 3. Az 1. vagy 2. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, ahol R5 és R6 jelentése eltérő, és R6, R7 és R8 mindegyikének jelentése hidrogénatom.
  4. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, ahol a beteg szövetben feldúsuló anyagokként peptideket előnyösen endotelineket, endotelinek részszekvenciáit, endo telin-analógokat, endotelin-származékokat vagy endotelin-antagonistákat alkalmazunk.
  5. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, ahol a peptidek az alábbi szekvenciákkal vagy e szekvenciák részleteivel rendelkeznek:
    ---------------—------------------------1
    Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr^______________
    Phe-cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp, i1
    Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Trp-Leu-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrI,
    Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Cys-Thr-Cys-Phe-Thr-Tyr-Lys-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr|
    Tyr-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Cys-Ser-Alá-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Alá-Val-Tyr
    Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp, li
    Cvs-Ser-Cys-Asn-Ser-Trp-Leu-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp, ir
    C^sj-Ser-Cys-Lys-Asp-Met-Thr-Asp-Lys-Glu-Cys-Leu-AsnPhe-Cys-His-Gin-Asp-Val-Ile-Trp, i1
    Ala-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-TyrPhe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Ala-Ser-Ala-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-TyrPhe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Trp-Leu-Asp-Lys-Glu-Alá-Val-TyrPhe-Alá-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    C ys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    N-Acetyl-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Alá-Val-Tyr-Phe-Alá-HisLeu-Asp-Ile-Ile-Trp, »· V «
    V • ··
    His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Ciklo-(DTrp-DAsp-Pro-DVal-Leu),
    Ciklo-(DGlu-Ala-alloDIle-Leu-DTrp).
  6. 6. Eljárás az 1. igénypont szerinti vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy egy (II) általános képletű vegyületet egy (III) általános képletű vegyülettel - ahol R1, R2, R3, R4, R5, Rs, R7, R8, R9, A és B jelentése az 1. igénypontban megadottal megegyezik - az 1. reakcióvázlat szerint reagáltatunk; és adott esetben az így kapott vegyületeket a beteg szövetben vagy tumorokban szelektíven feldúsuló anyagokkal aminocsoportokat tartalmazó anyagok, mint peptidek, fehérjék és antitestek esetében amid-típusú, hidroxicsoportokat tartalmazó anyagok, mint alkoholok esetében észter-típusú vagy aldehidcsoportokat tartalmazó anyagok esetében imid-típusú - kovalens kötéssel konjugáljuk; és adott esetben az így kapott vegyületeket és konjugátumokat technécium-99m-mel vagy réniummal pertechnetát- vagy perrenát-formában egy redukálószer és adott esetben egy segédligandum jelenlétében reagáltatjuk.
  7. 7. Radiofarmakológiai készítmények, receptorok és receptortartalmú szövetek és/vagy ateroszklerotikus plakkok neminvazív in vivő leképzésére, ahol a készítmények egy 1-5. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet vagy konjugátumot !”* ,··, ··*· ► . ···. ·’ ···. :.. ..... ...· ·,.· és adott esetben galenikus készítmények esetében szokásos adalékanyagokat tartalmaznak.
HU9502868A 1993-03-31 1994-03-29 Bifunctional-chelating agents braked with calcogene atoms, pharmaceutical compositions containing them , and use of these compositions in radio- diagnosis and radiotherapy HUT73665A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4311023A DE4311023C2 (de) 1993-03-31 1993-03-31 Bifunktionelle chalkogenatom-unterbrochene Chelatbildner von Typ XN¶1¶S¶1¶O¶1¶ für radioaktive Isotope, deren Metallkomplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese enthaltende pharmazeutische Mittel

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9502868D0 HU9502868D0 (en) 1995-11-28
HUT73665A true HUT73665A (en) 1996-09-30

Family

ID=6484687

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9502868A HUT73665A (en) 1993-03-31 1994-03-29 Bifunctional-chelating agents braked with calcogene atoms, pharmaceutical compositions containing them , and use of these compositions in radio- diagnosis and radiotherapy

Country Status (11)

Country Link
EP (1) EP0692976B1 (hu)
JP (1) JPH08508263A (hu)
KR (1) KR960700777A (hu)
AT (1) ATE179076T1 (hu)
AU (1) AU691806B2 (hu)
CA (1) CA2156620A1 (hu)
DE (2) DE4311023C2 (hu)
HU (1) HUT73665A (hu)
NO (1) NO953867L (hu)
NZ (1) NZ263794A (hu)
WO (1) WO1994022497A1 (hu)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4311022C2 (de) * 1993-03-31 1996-07-11 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle chalkogenatom-unterbrochene Chelatbildner vom Typ S¶3¶N¶2¶ für radioaktive Isotope und deren Metallkomplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese enthaltende pharmazeutische Mittel
DE4310999C2 (de) * 1993-03-31 1996-07-18 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle chalkogenatom-unterbrochene Chelatbildner vom Typ XN¶1¶S¶1¶X' für radioaktive Isotope und deren Metallkomplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese enthaltende pharmazeutische Mittel
DE4425778A1 (de) * 1994-07-13 1996-01-18 Diagnostikforschung Inst Komplexverbindungen zur Diagnose von Gefäßerkrankungen
DE19652374A1 (de) * 1996-12-04 1998-06-10 Schering Ag Verwendung von Endothelin-Konjugaten in der Therapie, neue Endothelin-Konjugate, diese enthaltende Mittel, sowie Verfahren zu deren Herstellung
WO1998018497A2 (en) * 1996-10-28 1998-05-07 Nycomed Imaging As Contrast agents
US6537520B1 (en) 1998-03-31 2003-03-25 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Pharmaceuticals for the imaging of angiogenic disorders
EA200001007A1 (ru) 1998-03-31 2001-04-23 Дюпон Фармасьютикалз Компани Фармацевтические препараты для визуализации ангиогенных расстройств
US6548663B1 (en) 1998-03-31 2003-04-15 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Benzodiazepine vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
US6524553B2 (en) 1998-03-31 2003-02-25 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Quinolone vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
US6794518B1 (en) 1998-12-18 2004-09-21 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
US6569402B1 (en) 1998-12-18 2003-05-27 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
CA2349333A1 (en) 1998-12-18 2000-06-22 Du Pont Pharmaceuticals Company Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
US6511649B1 (en) 1998-12-18 2003-01-28 Thomas D. Harris Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
US6511648B2 (en) 1998-12-18 2003-01-28 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Vitronectin receptor antagonist pharmaceuticals
PT2260875E (pt) * 2002-05-06 2014-06-25 Endocyte Inc Agentes de imagiologia direcionados para recetor de folato
SE526214C2 (sv) 2003-02-28 2005-07-26 Amersham Biosciences Ab Ett sätt att generera metallkelaterande affinitetsligander

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS57188527A (en) * 1981-04-21 1982-11-19 Amersham Int Plc Diagnosis of kidney function
US4980147A (en) * 1984-06-25 1990-12-25 University Of Utah Research Foundation Radiolabeled technetium chelates for use in renal function determinations
DE3680924D1 (de) * 1985-01-14 1991-09-26 Neorx Corp Metall-radionuklid markiertes protein fuer diagnose und therapie.
DE3762624D1 (de) * 1986-05-28 1990-06-13 Mallinckrodt Inc Technetiumchelate fuer die bestimmung der nierenfunktion.
US4861869A (en) * 1986-05-29 1989-08-29 Mallinckrodt, Inc. Coupling agents for joining radionuclide metal ions with biologically useful proteins
US5198208A (en) * 1987-07-16 1993-03-30 Nycomed Imaging As Aminopolycarboxylic acids and derivatives thereof
JPH0570481A (ja) * 1991-09-12 1993-03-23 Hitachi Chem Co Ltd ペプチドおよびその塩

Also Published As

Publication number Publication date
EP0692976A1 (de) 1996-01-24
AU6501794A (en) 1994-10-24
CA2156620A1 (en) 1994-10-13
JPH08508263A (ja) 1996-09-03
DE4311023C2 (de) 1996-05-02
NO953867L (no) 1995-11-23
DE59408142D1 (de) 1999-05-27
HU9502868D0 (en) 1995-11-28
WO1994022497A1 (de) 1994-10-13
DE4311023A1 (de) 1994-10-06
EP0692976B1 (de) 1999-04-21
KR960700777A (ko) 1996-02-24
ATE179076T1 (de) 1999-05-15
NZ263794A (en) 1996-10-28
AU691806B2 (en) 1998-05-28
NO953867D0 (no) 1995-09-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5202451A (en) Anchimeric radiometal chelating compounds
KR100235137B1 (ko) 모노아민, 다아민, 티올-함유 금속 킬레이트제
US7674886B2 (en) Bridged aromatic substituted amine ligands with donor atoms
IE69543B1 (en) Chelating agents for forming complexes with radioactive isotopes metal complexes thereof and use thereof in diagnosis and therapy
HUT73665A (en) Bifunctional-chelating agents braked with calcogene atoms, pharmaceutical compositions containing them , and use of these compositions in radio- diagnosis and radiotherapy
US5986074A (en) Metal chelates as pharmaceutical imaging agents, processes of making such and uses thereof
US5120526A (en) Method of producing metal radionuclide labeled proteins for diagnosis and therapy
US4883862A (en) Mercaptosuccinyl glycyl-glycyl-glycine a complex thereof with Tc-99m, and methods of making the same
CA2232391A1 (en) Bifunctional sulfide-containing sulfonamide-chelating agents such as xsns for radioactive isotypes
CA2232340A1 (en) Bifunctional nicotinamide-chelating agents such as n2s2 for radioactive isotopes
WO1992019274A1 (en) Technetium chelates to be used for determining the renal function
CA2232315A1 (en) Bifunctional sulfide-containing sulfonamide-chelating agents such as s2 ny for radioactive isotopes
US6488909B1 (en) Chelating agents as well as their tricarbonyl complexes with technetium and rhenium
US5961954A (en) Chealators of type XN1 S1 X1 for radioactive isotopes, their metal complexes and their diagnostic and therapeutical uses
US6143275A (en) Type S3 N2 chelators for radioactive isotopes, their metal complexes and their diagnostic and therapeutical use
WO2003027148A1 (en) Disulfide-reduced neogalactosyl serum albumin and use of radiolabeled derivative thereof for liver imaging
CA2306179A1 (en) Fatty acid derivative labeled with a radioactive transition metal
JPH11505852A (ja) 隔離された画像診断剤
Pollack et al. Hydrazino-type N 2 S 2 chelators
WO1996007629A1 (en) Technetium chelates to be used for determining the renal function
CA2232620A1 (en) Bifunctional sulfide-containing sulfonamide-chelating agents such as xsny for radioactive isotopes

Legal Events

Date Code Title Description
DFC4 Cancellation of temporary protection due to refusal