HUT67006A - Buffered composition containing mammalian superoxide-dismutase/polyethylene glycol coniugate - Google Patents
Buffered composition containing mammalian superoxide-dismutase/polyethylene glycol coniugate Download PDFInfo
- Publication number
- HUT67006A HUT67006A HU9400328A HU9400328A HUT67006A HU T67006 A HUT67006 A HU T67006A HU 9400328 A HU9400328 A HU 9400328A HU 9400328 A HU9400328 A HU 9400328A HU T67006 A HUT67006 A HU T67006A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- peg
- buffer
- msod
- composition
- sod
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/96—Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/44—Oxidoreductases (1)
- A61K38/446—Superoxide dismutase (1.15)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
A találmány emlős szuperoxid-diszmutáz polietilénglikollal alkotott konjugátumát (PEG-SOD) tartalmazó vizes készítményre vonatkozik, amely PEG-SOD-t és egy nem kelátképző puffért tartalmaz pH 5,0 és pH 6,5 közötti tartományban. A találmány tárgya továbbá eljárás a fenti készítmény alkalmazására emlősökben oxidatív sérülések kezelésére és megelőzésére.
Számos közlemény vonatkozik a konjugálatlan emlős szuperoxid-diszmutáz (SÓD) oldatainak kis stabilitására. Johansen (US 4,341,867 és 4,390,628 számú szabadalmi leírás) marhából izolált SÓD 10 mmol/1 koncentrációjú nátrium-foszfát pufferrel (pH 7,5) és nátrium-acetát pufferrel (pH 4,8) készült oldatait ismerteti. Yasuda (Us 4,346,174 számú szabadalmi leírás) marhából izolált SÓD 2,5-10-3 - 7,5-10-2 mol/1 koncentrációjú kálium-foszfát pufferrel (pH 7,4) készült oldatát írja le. Sagai és munkatársai (US 4,818,698 számú szabadalmi leírás) rekombináns eredetű humán SÓD 0,1 mol/1 koncentrációjú, 50 mmol/1 szacharózt tartalmazó foszfát pufferrel (pH 7,0) készült oldatát ismerteti, amelynek stabilitása szobahőmérsékleten 1 hét. Rotilio és munkatársai [Biocehmistry 11, 2182-2187 (1972)] vizsgálták a réz és cink szerepét marha eredetű SÓD enzim aktivitására és a protein konformációjára. Leírták, hogy a natív marha enzimben a réz jellegzetes EPR jele a pH 3 és pH 10 közötti teljes pH-tartományban megmarad. Roe és munkatársai [Biochemistry 27, 950—958 (1988)] ismertették a marha réz/cink-SOD differenciál letapogató kalorimetriás analízisét nátrium-acetát pufferben, pH 5,5 értéken. Formán és Fridovich [J. Bioi. Chem.
• ·· ···* · * •X · · ♦· ·· « ··· · · · • · · · · · · ··· · · ·· ··* ·1 248, 2645-2649 (1973)] leírták a fémek hatását marha eredetű szuperoxid-diszmutáz stabilitására. A A pH és a szerves oldószerek hatása c. fejezetben azt állították, hogy a szuperoxid-diszmutáz pH 11,4 értéken, 24 °C-on 24 órán keresztül stabil nátrium-karbonát pufferben.
Hamaguchi és munkatársai (EP-A-225,130 számú szabadalmi leírás) 0,067 mol/1 koncentrációjú foszfáttal pufferolt vizes sóoldatot (pH 7,2, 287 mOsm) ismertettek, amely 25 mg, 5000 molekulatömegű polietilénglikollal konjugált mangán-SOD-t tartalmaz 5 ml desztillált vízben. Hamaguchi szerint ily módon egy liposzóma kompozíció kapható, amely stabil állapotban zárványként SOD-PEG(5000)-t tartalmaz. Ez az egyetlen olyan publikáció, amelyben a szerzők kifejezetten utalnak egy polietilénglikollal konjugált szuperoxid—diszmutáz oldatának stabilitására. Ez a találmány szerinti oldattól annyiban különbözik, hogy az SÓD nem egy emlős eredetű Cu/Zn-SOD, hanem egy mikroorganizmusból származó Mn—SÓD. Ezenkívül, a PEG egy amidkötéssel közvetlenül kapcsolódik a SOD-hoz, szemben a találmány szerinti PEG-SOD-zal, amelyben a PEG és a SÓD szukcinil-amid/észter kötésen keresztül kapcsolódik egymáshoz.
Ezidáig egyetlen utalás sem volt a szakirodalomban egy emlős szuperoxid-diszmutáz és egy polietilénglikol konjugátumának stabilitására. Egy emlős szuperoxid-diszmutáz és a polietilénglikol vagy egy (rövid szénláncú)alkoxi-polietilénglikol szukcinil-maradék által összekapcsolt konjugátumát - amely maradék a PEG-hoz észterkötéssel, és az SÓD egy aminocsoport jához amidkötéssel kapcsolódik - a továbbiakban ··· ·· .X *
• •4
PEG-S-mSOD-nak nevezzük. A leírásban polietilénglikol vagy PEG alatt egy
R-0-(CH2CH2O)nOH általános képletű vegyületet vagy vegyület-elegyet értünk, a képletben
R jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, és n értéke 80 és 25000 közötti egész szám.
A PEG-S-mSOD oldatokat - amelyeket az Enzon cégtől (South Plainfield, NJ, USA) szereztünk be - az Enzon. formálta pH 7,3 értékű foszfát pufferben. Felismertük, hogy ha a vizes PEG-S-mSOD oldatokat nem kelátképző puffrrekkel állítjuk elő pH 5,0 és 6,5 közötti, azaz enyhén savas pH értéken, akkor a stabilitás mintegy 7-szeresére nőhet az ismert, enyhén bázikus (Enzon által előállított) oldaténak.
A vizes PEG-S-mSOD készítmények hosszú távú stabilitásának jelentősége a PEG-S-mSOD különleges alkalmazásából adódik klinikai kísérletekben oxidatív sérülések megelőzésére és kezelésére. Az ilyen kezelések során előnyős a parenterális adagolás. A klinikailag alkalmazható parenterális készítménynek a szokásos tárolási körülmények között megfelelően hosszú élettartammal kell rendelkeznie, különben a parenterálisan alkalmazott oldatot minden egyes adagolás esetén frissen kell elkészíteni röviddel a beadás előtt. A parenterális adagolásra alkalmas találmány szerinti vizes oldat - ezidáig először - szokásos körülmények között gazdaságossági szempontból megfelelően hosszú időn keresztül tárolható.
·· »···· ·· · · *· · • ··· φ · • · · 9 ·· • •9 9· 9«···
- 5 A találmány egyrészt egy vizes PEG-S-mSOD készítményre vonatkozik, amely PEG-S-mSOD-t tartalmaz egy nem kelátképző pufferben, 5,0 és 6,5 közötti, előnyösen 5,8 és 6,2 közötti pH értéken.
A találmány továbbá eljárásra vonatkozik oxidatív sérülések kezelésére vagy megelőzésére emlősökben, amelynek jellemzője, hogy az emlősnek 5,0 és 6,5 közötti pH értékű, nem kelátképző pufferrel készült PEG-S-mSOD készítmény hatásos mennyiségét adagoljuk.
Az 1. ábrán látható a PEG-S-mSOD stabilitása (1) mint a kiindulási enzimaktivitás %-a a pH függvényében (üres négyszögek), és (2) mint a képződött szabad PEG koncentrációja (mg/ml) a pH függvényében (üres háromszögek), mindkettőt 37 °C-on 68 napon keresztüli tárolás után mértük.
A 2. ábra mutatja a szabad PEG és a metoxi-PEG képződésének (degradálódás) sebességét (mg/ml) az idő (nap) függvényében (1) a találmány szerinti oldatban pH 6,2 értéken (üres háromszögek) , és (2) az ismert oldatban pH 7,3 értéken (üres körök).
A találmány előnyös kiviteli alakjait az alábbiakban ismertetjük.
A szuperoxid-diszmutáz néven ismert enzimek a szuperoxid-anion gyök (O2”·) oxigénné és hidrogén-peroxiddá való lebomlását katalizálják.
Az SÓD az International Unión of Biochemistry szisztematikus nevezéktana szerint szuperoxid-oxidoreduktáz néven ismert, és az 1.15.1.1. osztályba sorolják. Az ilyen anyagok orgoteinek és hemokupreinek, valamint szuperoxid-diszmutáz néven is ismertek, és molekulatömegük mintegy 400-48000. A réz/cink-diszmutázok durva szerkezeti tulajdonságaikat tekintve erősen konzervatív családot képviselnek. A tisztított enzimek kivétel nélkül dinierek (molekulatömegük rendszerint 31000-33000), amelyek mólónként két mól réziont és két mól cinkiont tartalmaznak. A mangán/vas tartalmú enzimek nem ilyen egységesek alapvető tulajdonságaikat, így molekulatömegűket, alegység szerkezetüket és fémtartalmúkat tekintve. Egyesek dimerek, mások tetramerek. A fémtartalom mintegy 0,5 és 1 mól között változik 1 mól alegység polipeptid láncra vonatkoztatva. A természetben előforduló, emlős eredetű Zn/Cu-tartalmú enzimeket és ezek működőképes megfelelő analógjait és muteinjeit tekintjük a találmány szerinti célokra megfelelő emlős Zn/Cu-szuperoxid-diszmutáznak (mSOD).
A találmány szerinti készítményben az mSOD eredete nem kritikus. Kereskedelmi forgalomban kaphatók mind marha eritrocita vagy humán eritrocita eredetű, mind a rekombináns eredetű, mikroorganizmusokban, például E. coliban vagy élesztőben szintetizált enzimek. Előnyös a humán és a marha eredetű SÓD.
A találmány szerinti célokra az mSOD-t polimerekhez kovalensen kötve olyan konjugátumokat állítunk elő, amelyek az enzimatikus aktivitást megtartják. Ezek a konjugátumok a vérkeringésben sokkal hosszabb élettartammal rendelkeznek. Előnyösek azok a konjugátumok, amelyekben a rekombináns vagy natív eredetű humán SÓD vagy marha SÓD egy szukcinil-ma radékon keresztül kovalensen kötődik a polietilénglikolhoz (PEG), az US 4,179,337 számú szabadalmi leírásban ismertetett módon, amelyet referenciaként leírásunkba beépítettünk. A polietilénglikol előnyösen az
R-0-(CH2CH2O)nOH általános képlettel jellemezhető, a fenti képletben
R jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, és n értéke mintegy 112.
A PEG molekulatömege előnyösen 1-103 - 2-10^, előnyösebben 1-103 - 2-104, és a konjugátum a hozzáférhető lizin-maradékokat tekintve mintegy 25-99 %-ban, előnyösen mintegy 45-70 %-ban van módosítva. A PEG-S-mSOD specifikus aktivitása előnyösen mintegy 1000 egység/mg mSOD-nál nagyobb, Fridovich és McCord módszere szerint meghatározva [J. Bioi. Chem. 244, 6049-6055 (1969)].
A találmány szerinti készítmény másik kritikus komponensét képező pufferek gyógyászatilag elfogadható, nem kelátképző pufferek lehetnek, amelyek a pH-t 5,0 és 6,5 közötti értéken tartják. Gyógyászatilag elfogadható alatt olyan puffereket értünk, anelyek az állati szervezetre nézve viszonylag inerek a gyógyászati célokra alkalmazott dózisokban, ezáltal a PEG-S-mSOD gyógyászatilag előnyös tulajdonságait a pufférnék tulajdonítható mellékhatások nem rontják le. A találmány kivitelezése során előnyösen foszfát, adipát, maleát vagy glutamát puffereket alkalmazunk. A találmány oltalmi körébe tartoznak azonban az egyéb gyógyászatilag elfogadható pufferek, például az egyéb ásványi és szer8 vés savakból, előnyösen szerves dikarbonsavakból származó pufferek is. Különösen előnyösek a foszfát és az adipát pufferek. Nem kelátképző alatt azt értjük, hogy a puffer nem tartalmaz olyan - általában anionos - komponenst, amely a vizes oldatban lévő réz- vagy cinkionokkal kelátot képez vagy azokat szekvesztrálja.
A puffer olyan koncentrációban van jelent, amely elég magas ahhoz, hogy a pH-t a kívánt értéken tartsa, de elég alacsony, hogy a puffer maga ne fejtsen ki káros farmakológiai hatásokat. A puffer minimális koncentrációja, amely a pH kívánt értéken tartásához szükséges, az oldatban lévő PEG-S-mSOD mennyiségétől és formájától és a pufferben lévő konjugátum sav pKa értékének és az oldat kívánt pH-jának viszonyától függ. Több puffer szükséges minimális mennyiségként a kívánt pH beállítására és tartására akkor, ha a pH a puffer pKa értékétől távolabb van, vagy ha a PEG-S-mSOD koncentrációja nagyobb. A PEG-S-mSOD koncentrációja 100 és 150000 egység/ml között változhat. A találmány szerinti előnyös készítményekben - amelyek 8-10 mg/ml (20000-30000 egység/ml) PEG-S-mSOD-t tartalmaznak - a minimális puffer koncentráció mintegy 30 mmol/1 foszfát puffer esetén, pH 6,2 értéknél. A találmány értelmében alkalmazható egyéb oldatokban a puffer koncentrációjú mintegy 10 mmol/1 és mintegy 500 mmol/1, előnyösen 30 és 50 mmol/1 között változhat.
A találmány szerinti készítmény PEG-S-mSOD-t tartalmaz, szakemberek számára azonban magától értetődően egyéb komponenseket is tartalmazhat, amelyek további előnyöket biztosíthatnak a specifikus alkalmazáshoz. így például int9 ravénás és intraarteriális adagolás céljára a találmány szerinti készítmény a PEG-S-mSOD és a puffer mellett izotoniás szereket, előnyösen 140-150 mmol/1 nátrium-kloridot és kívánt esetben konzerválószereket is tartalmazhat.
Kísérleteinkben az mSOD marhamájból származó SÓD, amelyet a DDI Pharmaceuticals forgalmaz (Mountain View, CA) . A PEG-S-mSOD-t az Enzon Inc. gyártja (South Plainfield, NJ), aktivitása 3000 ± 600 nemzetközi egység/mg.
A találmány szerinti készítmények előállítását az alábbiakban szemléltetjük.
1. példa
Izotoniás poszfát puffer pH 6,2
5,071 g egybázisú nátrium-foszfát-monohidrátot (USN/NF), 3,552 g kétbázisú nátrium-foszfát-heptahidrátot (USN/NF) és 8,500 g nátrium-kloridot (USN/FN) 800 ml injekciókészítésre alkalmas vízben (USN/NF) oldunk, és az oldat térfogatát injekciókészítésre alkalmas vízzel 1,000 1-re állítjuk be. A pH-t ellenőrizzük, és ha az 6,1-6,3 pH-tartományon kívül esik, az oldatot elöntjük.
2. példa
Izotoniás adipát puffer pH 5,8
5,840 g adipinsavból, 8,500 g nátrium-kloridból és a pH 5,8 biztosításához elegendő nátrium-hidroxidból 800 ml injekciókészítésre alkalmas vízzel oldatot állítunk elő, és térfogatát injekciókészítésre alkalmas vízzel 1,000 1-re állítjuk be.
3. példa
Izotoniás foszfát puffer pH 6,0 • · *·«· • · • · · ·
5,623 g egybázisú nátrium-foszfát-monohidrátot, 2,48 g kétbázisú nátrium-foszfát-heptahidrátot és 8,500 g nátrium- kloridot 800 ml injekciókészítésre alkalmas vízben oldunk, és az oldat térfogatát injekciókészítésre alkalmas vízzel 1,000 1-re állítjuk be. A pH-t ellenőrizzük, és ha az 5,9-6,1 pH-tartományon kívül esik, az oldatot elöntjük.
Stabilitásvizsgálati minták előállítása
A PEG-S-mSOD-t a kérdéses pufferral szemben 4 °C-on 24 órán keresztül dializáljuk. A protein koncentrációja közelítőleg 3,3 mg/ml. Az oldatokot 4 mm-es steril Millex-GV 0,22 μτη-es szűrőn steril körülmények között közvetlenül az üvegcsékbe szűrjük. Kimble 2 ml-es vagy 5 ml-es USP I. típusú üvegcsét alkalmazunk West 4416/50 szürke teflonbenvonatos gumidugóval, és West FO Lacq peremszorító kupakkal. A töltőtérfogat rendszerint 1-3 ml. A mintákat sötét helyen, állandó hőmérsékleten tároljuk. A minták stabilitását az enzim aktivitásának, a szabad PEG mennyiségének és az oldat tisztaságának vizsgálatával határozzuk meg. Az oldat pH-ját szintén ellenőrizzük a megfelelő pufferkapacitás biztosítására.
Szabad PEG mennyiségének meghatározása
A szabad PEG (mind az R=H, mind az R=metil) koncentrációját az oldatban méret szerinti kirekesztésen alapuló HPLC eljárással határozzuk meg. TSK 2000 PWXL oszlopot és TSK 3000 PWXL oszlopot kötünk sorba. Mozgó fázisként 0,1 mol/1 NaCl-t tartalmazó 0,1 mol/1 koncentrációjú NaPi puffért (pH 6,7) alkalmazunk. A kromatográfiás eljárással elválasztjuk a szabad PEG-t a PEG-S-mSOD-tói. A PEG-S-mSOD « · · ··· csúcsot 230 nm-re állított UV detektorral, a szabad PEG csúcsot pedig törésmutató detektorral detektáljuk. A szabad PEG mennyiségét a mintában a csúcs alatti terület integrálásával határozzuk meg. A csúcs alatti terület - PEG koncentráció standard görbét ismert koncentrációjú PEG-5000 oldatok beinjektálásával vesszük fel.
SÓD aktivitás meghatározása
Az SÓD enzimaktivitását McCord és Fridovich fent idézett módszerével határozzuk meg.
A kísérleti pH-k kezdeti tartományát cirkuláris dichroimzmus (CD) spektroszkópiás, differenciál letapogató kalorimetriás (DSC), atomabszorpciós (AA) spektroszkópiás és különböző körülmények közötti stabilitási tesztekből származó formálási elővizsgálatok adatai alapján választottuk ki. A DSC adatok szerint az 5,5 és 7 közötti pH-tartomány mind az mSOD, mind a PEG-S-mSOD maximális stabilitását biztosítja. Az enzim stabilitásának csökkenése pH 5 alatti értéken a réz- és cinkion veszteségnek tulajdonítható, amelyet az AA vizsgálat adatai mutatnak. A CD vizsgálatok további megerősítő adatokat szolgáltattak arra vonatkozóan, hogy pH 5,0 alatt az SÓD hajtogatott szerkezete részlegesen megszűnik.
Az oldatban lévő szabad PEG HPLC analízise azt mutatja, hogy a szukcinil-kötőcsoport stabilitásának optimális pH-tartománya 6,5 alatt van. A fenti tartományon felüli pH esetén a PEG-S-mSOD-bői gyorsabban szabadul fel és kerül oldatba a PEG, legvalószínűbben a szukcinilcsoportok észterkötésének hidrolízise következtében. A kezdeti vizsgálatok eredményeit az 1. ábra mutatja.
- 12 Az 1. példa szerinti oldattal (pH 6,2) végzett hoszszútávú tárolási vizsgálat eredményeit az ismert készítménynyel (pH 7,3) összehasonlítva a 2. ábra mutatja.
A PEG-S-mSOD bomlásának sebessége a technika állásából ismert oldatban mintegy 7-szer nagyobb, mint a találmány szerinti oldatban.
Claims (10)
- Szabadalmi igénypontok1. PEG-S-mSOD-t tartalmazó vizes készítmények, amelyek PEG-S-mSOD-t és egy nem kelátképző puffért tartalmaznak pH 5,0 és pH 6,5 közötti tartományban.
- 2. Az 1. igénypont szerinti készítmény, amelyben a puffer koncentrációja 10 mmol/l - 500 mmol/l.
- 3. Az 1. igénypont szerinti készítmény, amely pufférként foszfát, adipát, maleát vagy glutarát puffért tartalmaz .
- 4. A 2. igénypont szerinti készítmény, amely pufferként foszfát puffért tartalmaz és a pH-tartomány 6,0 és 6,2 közötti.
- 5. A 2. igénypont szerinti készítmény, amely pufferként adipát puffért tartalmaz és a pH-tartomány 5,5 és 5,8 közötti.
- 6. A 4. igénypont szerinti készítmény, amely 2000030000 egység/ml PEG-S-mSOD-t, 30-50 mmol/l foszfát puffért és 140-150 mmol/l nátrium-kloridot tartalmaz.
- 7. Az 5. igénypont szerinti készítmény, amely 2000030000 egység/ml PEG-S-mSOD-t, 30-50 mmol/l adipát puffért és 140-150 mmol/l nátrium-kloridot tartalmaz.
- 8. Eljárás oxidatív sérülések kezelésére vagy megelőzésére emlősökben, azzal jellemezve, hogy az emlősnek egy 1. igénypont szerinti készítményt adagolunk.
- 9. Eljárás oxidatív sérülések kezelésére vagy megelőzésére emlősökben, azzal jellemezve, hogy az emlősnek egy6. igénypont szerinti készítményt adagolunk.
- 10. Eljárás oxidatív sérülések kezelésére vagy mege- lőzésére emlősökben, azzal jellemezve, hogy az emlősnek egy7. igénypont szerinti készítményt adagolunk.A meghatalmazott:
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US74025591A | 1991-08-05 | 1991-08-05 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9400328D0 HU9400328D0 (en) | 1994-05-30 |
| HUT67006A true HUT67006A (en) | 1995-01-30 |
Family
ID=24975708
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9400328A HUT67006A (en) | 1991-08-05 | 1992-08-04 | Buffered composition containing mammalian superoxide-dismutase/polyethylene glycol coniugate |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP0598037A1 (hu) |
| JP (1) | JPH06509582A (hu) |
| AU (1) | AU666325B2 (hu) |
| CA (1) | CA2114240A1 (hu) |
| HU (1) | HUT67006A (hu) |
| MX (1) | MX9204545A (hu) |
| WO (1) | WO1993002701A1 (hu) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2101361A1 (en) * | 1992-08-27 | 1994-02-28 | Robert A. Snow | Low diol polyalkylene oxide biologically active proteinaceous substances |
| GB0503337D0 (en) * | 2005-02-17 | 2005-03-23 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Compositions |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH084504B2 (ja) * | 1985-04-26 | 1996-01-24 | 味の素株式会社 | 安定化ス−パ−オキサイドジスムタ−ゼ |
| IE64284B1 (en) * | 1987-08-03 | 1995-07-26 | Ddi Pharmaceuticals | Conjugates of superoxide dismutase |
| JPH0610138B2 (ja) * | 1988-07-12 | 1994-02-09 | 日本化薬株式会社 | スーパーオキシドディスムターゼ組成物 |
| EP0424033A3 (en) * | 1989-10-19 | 1991-07-31 | Pola Chemical Industries Inc | External skin preparation |
-
1992
- 1992-08-04 HU HU9400328A patent/HUT67006A/hu unknown
- 1992-08-04 CA CA002114240A patent/CA2114240A1/en not_active Abandoned
- 1992-08-04 JP JP5503783A patent/JPH06509582A/ja active Pending
- 1992-08-04 AU AU24306/92A patent/AU666325B2/en not_active Ceased
- 1992-08-04 EP EP92917825A patent/EP0598037A1/en not_active Withdrawn
- 1992-08-04 EP EP92202423A patent/EP0535723A1/en not_active Withdrawn
- 1992-08-04 WO PCT/US1992/006433 patent/WO1993002701A1/en not_active Ceased
- 1992-08-05 MX MX9204545A patent/MX9204545A/es unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0535723A1 (en) | 1993-04-07 |
| WO1993002701A1 (en) | 1993-02-18 |
| MX9204545A (es) | 1993-02-01 |
| EP0598037A1 (en) | 1994-05-25 |
| JPH06509582A (ja) | 1994-10-27 |
| AU2430692A (en) | 1993-03-02 |
| AU666325B2 (en) | 1996-02-08 |
| CA2114240A1 (en) | 1993-02-18 |
| HU9400328D0 (en) | 1994-05-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5165826B2 (ja) | 非免疫原性ポリマー結合体の調製のための凝集体非含有尿酸オキシダーゼ | |
| US5334382A (en) | Lyophilized polyethylene oxide modified catalase composition, polypeptide complexes with cyclodextrin and treatment of diseases with the catalase compositions | |
| US5981485A (en) | Human growth hormone aqueous formulation | |
| US5283317A (en) | Intermediates for conjugation of polypeptides with high molecular weight polyalkylene glycols | |
| CA2139358C (en) | Human growth hormone aqueous formulation | |
| TW570981B (en) | PEG-urate oxidase conjugates and use thereof | |
| KR101752508B1 (ko) | 제8 인자 제형 | |
| NZ286300A (en) | Aqueous inferferon-alpha solution containing nonionic detergent, buffer, benzyl alcohol and optionally an isotonising agent | |
| AU675798B2 (en) | Low diol polyalkylene oxide biologically active proteinaceous substances | |
| CN103919736A (zh) | 冻干的重组vwf配方 | |
| CA1309046C (en) | Conjugates of superoxide dismutase coupled to high molecular weight polyalkylene glycols | |
| US20150329519A1 (en) | Formulations Comprising Lipoyl Compounds | |
| KR100700963B1 (ko) | 켐토테신의 다당체 유도체를 함유하는 동결건조된 액상제제 | |
| JPH05508640A (ja) | 線維芽細胞成長因子を含む安定な医薬組成物 | |
| EP0535723A1 (en) | Buffered formulation of capitals | |
| JP4887281B2 (ja) | 液体エリスロポエチン製剤 | |
| EP0419251B1 (en) | Protein-containing aqueous solutions | |
| Mao et al. | Superoxide dismutase: improving its pharmacological properties by conjugation with human serum albumin | |
| WO1988004925A1 (en) | Protection against aminoglycoside-induced nephrotoxicity | |
| ES2988461T3 (es) | Composición farmacéutica que comprende condroitinasa ABC liofilizada, envase y procedimiento de fabricación de los mismos | |
| US12163168B2 (en) | Engineered primate cystine/cysteine degrading enzymes for therapeutic uses | |
| WO2025106759A1 (en) | Conjugates of phenylalanine ammonia-lyase and poegma and methods for their use | |
| AU597955B2 (en) | Stable injectable antiemetic compositions | |
| WO2005027960A1 (en) | Liquid human growth hormone formulation containing polyethylene glycol | |
| KR100534622B1 (ko) | 에리트로포이에틴과 인간 혈청알부민의 포합체 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| DGB9 | Succession in title of applicant |
Owner name: SANOFI, FR |
|
| DFC4 | Cancellation of temporary prot. due to refusal |