HUT60751A

HUT60751A - Process for producing fibrinogen receptor antagonists and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient

Info

Publication number: HUT60751A
Application number: HU913074A
Authority: HU
Inventors: Mark E Duggan
Original assignee: Merck & Co Inc
Priority date: 1990-09-27
Filing date: 1991-09-26
Publication date: 1992-10-28
Also published as: EP0479481A2; CA2052057A1; KR920006373A; EP0479481A3; CN1060293A; JPH0517498A; PT99095A; FI914532A0; NO913786L; HU913074D0; IE913380A1; AU8477891A; FI914532A; NO913786D0; IL99539A0; ZA917695B; MX9101311A; CS294791A3

Description

A találmány olyan (I) általános képletű fibrinogén receptor antagonistákra vonatkozik, amelyek emlősöknél, előnyösen embereknél a fibrinogén vérlemezkékhez való kötődésének és a vérlemezkék agglomerálódásának megakadályozására alkalmasak.

A hemosztázis fenntartására szolgáló koaguláló és fibrinolitikus rendszerek vérlemezkékkel való kölcsönhatása megelőzést és kezelést igénylő patogén folyamattá is válhat.

Az (I) általános képletű fibrinogén receptor antagonisták a vérlemezke agglomerációval és fibrinképződéssel kapcsolatos különböző betegségek kezelésére alkalmazhatók.

A vérlemezke inhibitorokkal kapcsolatos megújult érdeklődés a vérlemezkék és trombózis érrendszeri betegségek, ezen belül instabil angina, akut miokardinális infarktus és szélütés körfolyamatában játszott, mindjobban megismert szerepükhöz kapcsolódik.

A vérlemezkék olyan, az összes emlősben megtalálható sejtszerű fragmentek, amelyek a vér koagulálásában játszanak szerepet. A fibrinogén a vérplazma normál komponenseként jelenlévő glikoprotein. A fibrinogén a véralvasztó mechanizmusban a lemezke aggregációban és a fibrin képződésben játszik szerepet. A lemezkék érsérülés esetén lerakódnak a sérülés helyén, ahol számos fiziológiai agonista tevékenykedik azon céllal, hogy a lemezkék vérveszteség minimalizálásra szolgáló lemezkedugót alakítsanak ki. Ha a véredényben lemezkedugó alakul ki, akkor a normál véráramlás legyengül.

A lemezke összetapadás és aggregáció folyamatában fontos szerepet játszanak a lemezkemembrán receptorok.

:

- 3 A normál lemezke funkció közismerten fontos eleme a fibrinogén és a Ilb/IIIa lemezke membrán komplexen lévő receptor kölcsönhatása.

A 4 683 291 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban olyan peptideket ismertetnek, amelyek a fibrinogénlemezke, lemezke-lemezke és sejt-sejt kölcsönhatás tanulmányozására alkalmasak. A peptidek olyan esetben alkalmazhatók, amelyekben a vér trombózis vagy alvadás kialakulás megelőzése vagy megakadályozása kívánatos.

A peptidek olyan

H₂N-(Ch)-Arg-Gly-Asp-(Cx)-H általános képletű vegyületek, amelyekben Ch és Cx jelentése aminosav-szekvencia.

A 4 589 881 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban egy olyan fibronektin polipeptid fragment 11,5 kD-os szekvenciát ismertetnek, amely a fibronektin sejtkapcsolódás elősegítő hatását testesítik meg. Ilyen speciffikus fragment például a következő fragment:

H-Tyr-Ala-Val-Thr-Gly-Arg-Gly-AspSer-Pro-Ala-Ser-Ser-Lys-Pro-IleSer-Ile-Asn-Tyr-Arg-Thr-Glu-IleAsp-Lys-Pro-Ser-Gln-Met-OH.

A 4 614 517 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban olyan tetrapeptideket ismertetnek, amelyek módosítják a sejtek különböző anyagokhoz való kötődésének hatását. A peptidek lényegében a következő szekvenciából állnak:

X-Arg-Gly-Asp-Ser-Y

- a képletben • ·

- 4 • · • · *

• · · · • ·· • ·· • · · ·· • · ··

X jelentése hidrogénatom vagy egy vagy több aminosav; és

Y jelentése hidroxilcsoport vagy egy vagy több aminosav.

A fenti leírás 1. ábráján olyan polipeptideket ismertetnek, amelyeket a legkisebb méretű sejtkötő hatású peptidként mutatnak be.

A 4 578 079 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban Thr vagy Cys elemekkel helyetesített Ser-t tartalmazó, hasonló tetrapeptideket ismertetnek.

Pierschbacher és munkatársai (Proc. Natl. Acad, Sci. USA, 81. kötet, 5985-5988. oldalak, 1984. október) olyan fibronektin sejtfelismerő hely változatokat ismertetnek, amelyek megtartják kötéssegítő hatásukat. Pierschbacher és munkatársai számos, az Arg-Gly-Asp-Ser peptiddel közeli rokonságban lévő szerkezet sejtkötés elősegítő hatását is vizsgálták, és azt tapasztalták, hogy az arginin-, glicin- és aszpartátcsoportok még a közeli rokonságban lévő aminosavakkal sem helyettesíthetők, de a szerin számos aminosawal helyettesíthető hatáscsökkenés nélkül.

Ruoslahti és munkatársai, (Science, 238. kötet, 491-497. oldalak, 1987. október 23.) kizárólag sejtragasztó fehérjéket ismertetnek. Azt állítják, hogy a fibronektin sejtkötő tartomány aminosav szekvenciájának feltárása és annak szintetikus peptidekkel való duplikálása a fibronektinben lévő, a sejtek által felismert fő szerkezetnek tartott Arg-Gly-Asp (RGD) létrehozását eredményezi.

A Cheresh, Proc, Natl. Acad. Sci. USA, 84. kötet, 6471-6475 oldal, 1987. szeptember kiadványban a fibrinogénhez és a von Willebrand faktorhoz való kötődésben résztvevő Arg-Gly-Aspirányításű ragasztó receptort ismertetik.

·· ··· ·· · ···· • · · · · · · • ··· ····« · « « «···«· · ······· · · · · ·

- 5 A 4 857 508 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban olyan tetrapeptideket ismertetnek, amelyek a lemezke aggregációt és a trombusképződést gátolják. A tetrapeptidek olyan X-Gly-Asp-Y általános képletű vegyületek, amelyekben X jelentése H2NC(=NH)NH(CH2)_n ^CH(Z)COOH vagy Ac-Arg általános képletű csoport - a képletben

Z jelentése hidrogénatom, amino- vagy NH-Acil-csoport, és n értéke 1-4; és

Y jelentése Tyr-NH2, Phe-NH;2; vagy egy speciálisan meghatározott csoport.

A jelen találmány tárgya olyan fibrinogén receptor antagonista, amely megakadályozza a fibrinogén vérlemezkékhez való kötődést és a vérlemezkék aggregálódását.

A találmány további tárgya eljárás új fibrinogén receptor antagonista vegyületek előállítására.

A találmány következő tárgya eljárás a fibrinogén vérlemezkékhez való kötődésének és a vérlemezkék aggregálódásának új fibrinogén receptor antagonista vegyületek alkalmazásával megvalósított megakadályozására.

A találmány olyan (I) általános képletű fibrinogén receptor antagonistákra vonatkozik, amelyek megakadályozzák a fibrinogén vérlemezkékhez való kötődését és a vérlemezkék agglomerálódását.

A fentiekben ismertetett hatóanyagok olyan, fibrinogén receptorokra ható eljárásokban alkalmazhatók, amelyekben egy emlősnek, elsősorban embernek, gyógyászatilag hatásos, de nem mérgező mennyiségű hatóanyagot adunk.

A találmány egyik tárgyát az olyan gyógyszerkészítmények képezik, amelyek egy gyógyászatilag elfogadható hordozót és ebben • ·

- 6 • · · · · · · • ··« ·«· · · · • · ······ · ······· · ♦ 4 ·· diszpergálva hatásos, de nem mérgező mennyiségű, fentiekben ismertetett hatóanyagot tartalmaznak.

Az (I) általános képletű fibrinogén receptor antagonista ha> tóanyagok a fibrinogén vérlemezkékhez való kötődésének és a vérlemezkék aggregálódásának megakadályozására alkalmazott eljárásokban használhatók.

A találmány szerinti fibrinogén receptor antagonisták olyan (I) általános képletű vegyületekkel és ezek gyógyászatilag elfogadható sóival jellemezhetők, amelyekben

X jelentése (a), (b), (c), (d), (e) vagy (f) általános képletű csoport, amelyekben

A vagy B jelentése N-R általános képletű csoport, azzal kikötéssel, hogy amennyiben A jelentése N-R általános képletű csoport, akkor B jelentése -CH2-csoport, és ha B jelentése N-R általános képletű csoport, akkor A jelentése -CH- csoport;

jelentése (g) általános képletű csoport, -CO-NH csoport, oxigénatom, N-R² általános képletű csoport, -C0-,

-S(0)q-CH2 képletű csoport, (h) képletű csoport, -C=C, -S02~NH-csoport, vagy (i) általános képletű csoport, R, R¹, R² és R³ jelentése egymástól függetlenül alkil-, aril-, alkil-aril-, helyettesített alkilcsoport vagy hidrogénatom;

AA jelentése L-aminosav;

értéke

1-10;

értéke

0-9;

értéke

0-2 és értéke

1-6.

• · *·· ·· · ···· • · · · · · · « ♦ ·« ···«· · • · ······ · ···«··· · · · ··

Előnyösek az olyan (I) általános képletű fibrinogén receptor antagonisták, és gyógyászatilag elfogadható sóik, amelyekben jelentése (a) vagy (b) általános képletű csoport;

jelentése oxigénatom vagy (g) általános képletű csoport vagy -S(O)q-CH2 csoport, amelyekben

R, R¹, R² és R³ jelentése egymástól függetlenül alkil-, aril-, alkil-aril-, helyettesített alkilcsoport vagy hidrogénatom;

AA jelentése L-aminosav;

értéke

1-5;

értéke

0-5;

értéke

0-2; és értéke

2-4.

Előnyös találmány szerinti vegyület a (II) képletű vegyület,

Alá,

Giy, amelyet más néven Pib-Gly-Asp-Trp vegyületnek nevezünk.

A találmány szerinti vegyület AA aminosavcsoportja lehet:

alanin; Arg, arginin; Asn, aszpargin; Asp, aszpartinsav;

glicin; His, hisztidin; Ile, izoleucin; Leu, leucin; Lys, lizin; Met, metionin; Phe, fenil-alanin; Pro, prolin; Ser, szerin; Thr, threonin; Trp, triptofán; Tyr, tirozin; és Val, valin. A rövidítések a peptidkémiában elfogadott szabvány rövidítések. A találmány szerinti (I) általános képletű vegyület Asp komponense egy L-aminosav.

A leírásban az aminosavak azonosítására alkalmazott három betűs rövidítések mellett a következő rövidítéseket is alkalmazzuk: Bn, benzilesöpört; NMM, N-metil-morflin; HOBt, 1-hidroxi-benzotriazol; EDC, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil·· ··· ·· · · · · · • · · · · · · • ··« ····« · • · ······ · ······· ·· · ··

- 8 karbodiimid-hidroklorid; DMF, dimetil-formamid; Pib, 4-(4piperidil)-butanoil; és Boc-Asp(Bn), N-Boc-Asp-B-benzilészter.

Az (I) általános képletű vegyületek gyógyászatilag elfogadható sói közé tartoznak a például nem mérgező szervetlen és szerves savakkal alkotott hagyományos nem mérgező sók és kvaterner ammóniumsók. Ilyen hagyományos, nem mérgező sók a például sósav, hidrogén-bromid, kénsav, szulfaminsav, foszforsav vagy salétromsav szervetlen savakkal és a például ecetsav, propionsav, borostyánkősav, glikolinsav, sztearinsav, laktinsav, malinsav, borkősav, hidroxi-maleinsav, fenil-acetinsav, glutaminsav, benzoesav, szalicilsav, szulfanilinsav, 2-acetoxibenzoesav, fumársav, toluol-szulfaminsav, etán-diszulfonsav, oxálsav, izetoninsav szerves savakkal alkotott sók.

A találmány szerinti gyógyászatilag elfogadható sók savvagy báziscsoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek hagyományos kémiai eljárásokkal megvalósított átalakításával állíthatók elő. A sókat általában úgy állítjuk elő, hogy a szabad savat vagy bázist megfelelő oldószerben vagy oldószer elegyben, sztöchiometrikus vagy feleslegben lévő mennyiségű szervetlen vagy szerves savval vagy bázissal reagáltatjuk.

Az (I) általános képletű vegyületek gyógyászatilag elfogadható sóit úgy is előállíthatjuk, hogy (I) általános képletű savat megfelelő menyiségű bázissal, mint pl. alkálifémvagy alkáliföldfém-hidroxiddal, például nátrium-, kálium-, lítium-, kalcium- vagy magnézium-hidrroxiddal vagy szerves bázissal, mint pl. valamilyen aminnal, például dibenzil-etilén-diaminnal, trimetil-aminnal, piperidinnel, pirrolidinnel vagy • · ·· • ··« ·«· · · · • ♦ ···««· » ······· ·· · ··

- 9 benzil-aminnal vagy egy kvaterner ammónium-hidroxiddal, például tetrametil-ammónium-hidroxiddal reagáltatjuk.

Az (I) általános képletű vegyület megakadályozza a fibrinogén vérlemezkékhez való kötődését és a vérlemezkék aggregálódását. Ezek a vegyületek emlősök, elsősorban emberek gyógyítására alkalmazható hatásos anyagok. A hatóanyagokat olyan esetekben alkalmazzuk, amikor a fibrinogén lemezke membrán glikoprotein komplex Ilb/IIIa receptorhoz való kötődésének megakadályozásával a trombózis megelőzése kívánatos. Jól alkalmazhatók a sebészetben perifériás artériák (ártériális átültetés, kartoid endarterektomia) kezelésére, valamint a szívérrendszeri sebészetben, ahol az artériák és szervek kezelése és/vagy a lemezkék mesterséges felületekkel való érintkezése lemezke aggregációhoz és fogyáshoz vezet. Az aggregálódott lemezkék trombus és tromboembolia kialakuláshoz vezethetnek.

Az extrakorporeális cirkuláció a szívérrendszeri sebészetben a vér oxigénezésére alkalmazott gyakori eljárás. A lemezkék az extrakorporeális kör felületeihez tapadnak. A tapadás a lemezke membránokon lévő GBIIb/IIIa és a kör felületére adszorbeálódott fibrinogén kölcsönhatás függvénye (Gluszko és munkatársai, Amer. J. Physiol., 1987, 252:H, 615—621. oldal) A mesterséges felületről leváló lemezkék csökkentett hemosztatikus működésre utalnak. A találmány szerinti hatóanyagok a tapadás megelőzésére szolgálhatnak.

A hatóanyagok egyéb alkalmazási területéhez tartoznak a lemezke trombózis, tromboembolizmus, trombolitikus kezelés közben és után kialakuló újraelőfordulás és újraszűkülés és koronáriás és egyéb artériás angioplasztikai eljárások után,

9 99 ·· «9999

9 9 9 9 99

999 999999

9 9999999

9999999 99 ··· valamint koronáriás artéria átkötési eljárások után kialakuló újraelőfordulás és újraszűkülés megelőzésére alkalmazott eljárások is. Az alkalmazás kiterjed a miokardiális infarktus, instabil angina és trombolitikus szélütés folyamatok megelőzési vagy módosító kezelésére is.

Az (I) általános képletű hatóanyagok emlősöknek, előnyösen embereken való alkalmazása történhet önmagukban vagy előnyösen a szabvány gyógyászati eljárásokban alkalmazható gyógyszerkészítményekben gyógyászatilag elfogadható hordozókkal vagy hígítókkal, adott esetben ismert hatásjavító adalékokkal kombinálva. Az alkalmazás történhet szájon át vagy parenterális, például intravénás, intramuszkuláris, intraperitoneális, szubkután vagy helyi kezeléssel.

A találmány szerinti fibrinogén receptor antagonista szájon át való alkalmazása esetén a kiválasztott hatóanyagot tabletta, kapszula vagy vizes oldat és szuszpenzió alakban használhatjuk. A szájon át alkalmazott tablettakészítmény szokásosan hordozóanyagot, például laktózt és kukoricakeményítőt és csúsztatószert, például magnézium-sztearátot tartalmaz. A szájon át alkalmazott kapszula szokásosan higitószert, például laktózt és szárított kukoricakeményítőt tartalmaz.

A szájon át alkalmazott vizes szuszpenziók a hatóanyagot emulgeáló- és szuszpendálószerrel kombinálva tartalmazzák. Ezek a készítmények kívánság esetén édesítő- és/vagy ízesítőszereket is tartalmazhatnak. Az intramuszkuláris, intraperitoneális, szubkután és intravénás alkalmazásra szánt készítmények esetén általában steril hatóanyag oldatokat készítünk, és ezek pH-ját megfelelően beállítjuk és pufferezzük.

• ·

- 11 • · • · « « · « « · ·· • « ·

Az intravénás alkalmazásra szánt készítmények esetén az oldott anyagok összkoncentrációját kell megfelelően beállítani, hogy izotóniás készítményt kapjunk.

A találmány tárgyát képezi továbbá a lemezke aggregációval és fibrinképződéssel kapcsolatos betegségek találmány szerinti gyógyszerkészítménnyel megvalósított olyan kezelési eljárása is, amelyben a beteget gyógyászatilag hatásos, de nem mérgező mennyiségű, (I) általános képletű hatóanyagot gyógyászatilag elfogadható hordozóval vagy hígítóval kombinálva tartalmazó vagy ezek nélküli készítménnyel kezeljük.

A találmány szerinti készítmények fibrinogén receptor antagonista hatóanyagokat és gyógyászatilag elfogadható hordozókat, például a lemezke aggregáció megakadályozására alkalmas 7,4 pH-jú sóoldatot tartalmaznak. A készítmények a lemezke aggregálódás megakadályozására trombolitikus szerekkel, mint pl. plazminogén aktivátorokkal vagy sztreptokinázzal kombinálhatok. Kombinálhatók még koagulálódás elleni szerekkel, mint pl. heparinnal, aszpirinnel vagy warfarinnal is. A készítmények előnyös alkalmazása az intravénás kezelési eljárás. A készítmények vizes közegben oldódnak, ezért oldatban hatásosan alkalmazhatók.

A találmány szerinti (I) általános képletű fibrinogén receptor antagonista hatóanyag embernek való alkalmazásakor a hatóanyag napi mennyiségét a beteg korától, súlyától, egyedi reakciójától, valamint a betegség tüneteitől függően az orvos határozza meg. Például egy szívrohamon átesett beteg angioplasztikai kezelésekor megfelelő mennyiségű, intravénásán alkalmazott hatóanyagot alkalmazunk.

Az alkalmazást az angioplasztikai folyamat során vagy néhány ·· • 4 ··«♦«· • · 9 4 * ·· • «·« ·4· · ·· « · <··*··4 ······· · * ·4 4

- 12 perccel előtte végezzük, és annyi hatóanyagot alkalmazunk, amennyi a lemezke aggregáció megakadályozásához szükséges azaz kb. 0,01-30 μιηοΐ/kg, előnyösen 0,3-3 μιηοΐ/kg állandó plazma koncentrációt. Ennek elérése után a lemezke aggregáció megakadályozás fenntartásához egy kb. 1-100 nmol/kg/perc, előnyösen 10-30 nmol/kg/perc infúzió szükséges. Ha a betegnél átkötést kellene végezni, akkor az adagolást azonnal le lehet állítani, és így a beavatkozás alatt nem okoz olyan komplikációkat, mint az aszpirin vagy a monoklonális antitestek, amelyek hatása néhány órával az alkalmazás abbahagyása után jelentkezik.

A találmány tárgyát képezik az olyan gyógyszerkészítmények is, amelyek egy találmány szerinti hatóanyagot és szövettípusú plazminogén aktivátort vagy sztreptokinázt tartalmaznak.

A találmány tárgyát képezik továbbá a trombolízist elősegítő és újraelőfordulás megakadályozására szolgáló olyan eljárások is, amelyekben a beteget hatásos mennyiségű találmány szerinti hatóanyaggal kezeljük.

A találmány szerinti (I) általános képletű hatóanyag előállítása az 1. és 2. reakcióvázlat szerint történik.

A következő példákat a találmány részletesebb bemutatására ismertetjük, anélkül, hogy találmányunkat ezekre szándékoznánk korlátozni. Az összes oszlopkromatográfiás és vékonyrétegkromatográfiás analízist szilikagélen hajtottuk végre. Az összes ^-H NMR spektrumot Varian 300 MHz berendezésen vettük fel.

1. példa

Boc-Asp(Bn)-Trp(Bn) (2) előállítása g (80 mmol) (1) (Trp (Bn)-t, 9 ml (85 mmol) N-metil13 • V · ·4 ·« ···*·

-t · · < · 4· a «·· ··· · ·« • · ··*··« · ·<«<*·* · · · ··

-morfolint (NMM) és 800 ml etil-acetátot tartalmazó oldathoz, -15 °C-on (jég/etanol), keverés közben 10,4 ml (80 mmol) klórhangyasav-izobutil-észter gőzt adunk. A heterogén elegyhez 20 perc múlva 25 g (75 mmol) Trp(Bn)-t, majd 9,3 ml NMM-t adunk. Az így kapott elegyet 2 óra múlva vízzel hígítjuk, és elválasztó tölcsérbe tesszük. Kirázás és elválasztás után a szerves részt rendre 5 tömeg/térfogat%-oldószer kálium-hidrogén-szulfát oldattal telített nátríum-hidrogén-karbonát—oldattal és nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és koncentráljuk. így 41 g, barna, olajos (2) dipeptidet kapunk, amelynek vékonyrétegkromatográfiás (TLC) elemzési eredménye: 0,73 (50:50 térfogatarányú etil-acetát: :hexán eleggyel).

2. példa

Asp(Bn)-Trp(Bn).HC1 (3) előálllítás

670 ml etil-acetátban oldott 40 g (67 mmol) (2) vegyületet és 14,5 ml (135 mmol) anizolt tartalmazó elegyhez mechanikus keverés közben erőteljes buborékoltatással hidrogén-klorid gázt adunk. Az elegy belső hőmérsékletét kezdetben -40 °C-ra (izopropanol/száraz jég) állítjuk, a hőmérséklet 30 perc múlva -20 °C-ra emelkedik. Ekkor a sósavadagolást csökkentjük, és a reakcióelegy hőmérsékletét 1 óra alatt hagyjuk -5 ’C-ra melegedni. A reakcióelegyen a feleslegben lévő sósav eltávolítására 2,5 órán át nitrogéngázt buborékoltatunk át. A heterogén elegyhez a hatékony kicsapatáshoz megfelelő 400 ml mennyiségű étert adunk. A szilárd anyagot leszűrjük, vízzel mossuk, és egy éjszakán át vákuumban tartjuk. így 34,8 g, piszkosfehér színű (3) vegyület-sósavsót kapunk, amelynek vékonyrétegkromatográfiás (TLC) elemzési eredménye; 0,51: (9:1:1 térfogatarányú diklór14 • 4 * «4 ·· · ·’·· ♦ · · * 4 4 » « ··· ··· · · • · · ···· * · ·«*· ··· ·· · ·«

-etán : metanol : ecetsav elegygyel).

3. példái

Boc-Gly-Asp(Bn)-Trp(Bn) (4) előállítás

650 ml etil-acetátot, 12,3 g (70 mmol) Boc-Gly-t és 8,2 ml (75 mmol) NMM-t tartalmazó elegyhez, -15 °C-on (etanol/jég) 9,1 ml (70 mmol) klór-hangyasav-izobutil-észter gőzt adunk a finom csapadék kialakulásáig. Az elegyhez 15 perc múlva 34 g (64 mmol) (3) amin.HCl-t, majd 8,2 ml NMM-t adunk. A reakcióelegyet 1,5 óra múlva rendre vízzel, 5 tömeg/térfogat%-os kálium-hidrogén-szulfáttal, telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és telített nátrium-klorid oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és koncentráljuk. A kapott olajat éterrel fehér szilárd anyaggá dörzsöljük. Szűrés után 37,8 g fehér szilárd (4) tripeptidet kapunk, amelynek TLC elemzési eredménye: Rf = 0,27: (50:50 térfogatarányú etil-acetát/hexán eléggyel) ¹ NMR (CDC1₃) <5 = 8,76 (d, J = 7Hz, 1H) , 8,66 (d, J=7Hz,

1H), 8,10 (m, 2H), 7,49 =d, J=8Hz, 1H), 7,18 - 7,40 (m), 7,08 (6, J=7Hz, 1H), 7,00 (t, J=7Hz, 1H) , 5,07 (d, J=2Hz, 2H), 5,02 (d, J=3Hz, 2H), 4,80 (m, 1H), 4,56 (m, 1H), 3,70 (m, 2H), 3,50 (m, 2H), 3,14 (m, 2H), 2,73 (dd, J=17 és 4 Hz, 1H), 2,56 (dd, J=17 és 8Hz), 1H), 2,50 (m, 2H).

4. példa

Gly-Asp(Bn)-Trp(Bn).HC1 (5) előállítás g (56 mmol (4) tripeptidet, 500 ml etil-acetátot és 12,1 ml (0,11 mól) anizolt tartalmazó elegybe -30 °C-on mechanikai keverés közben 15 percig sósavgázt buborékoltatunk. Ezután a hűtő fürdőt eltávolítjuk, és a sárga oldaton 2 órán át argongázt • · · • · · · · · · • ··· ····· · • · ······ · ······· ·· · ··

-15buborékoItatunk át. A kapott piszkosfehér csapadékot leszűrjük, etil-acetáttal mossuk és vákuumban 5,0 órán át szárítjuk. így 30 g (5) amin.HCl vegyületet kapunk, amelynek TLC elemzési eredménye: Rf = 0,42 =9:1:1 térfogatarányú diklór-metán:metanol: ecetsav eleggyel).

5. példa

N-Boc-4-piperidin-etanol (7) előállítás

18,7 g (0,14 mól) (6) 4-piperidin-etanolt és 200 ml DMF-t tartalmazó elegyhez 0 °C-on 31 g (0,14 mól) N-terc-butoxi-karbonil-anhidridet adunk. 1 órán át tartó hűtés után a hűtő fürdőt eltávolítjuk és a reakcióelegyet 20 órán át keverjük. A reakcióelegyet éterrel hígítjuk, majd kétszer vízzel és egyszer sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk és koncentráljuk. így 26 g színtelen olajos (7) vegyületet kapunk, amelynek elemzési eredményei a következők:

TLC:Rf = 0,25 (40:60 térfogatarányú etil-acetát:hexán eleggyel).

¹ NMR (CDC1₃) S = 4,09 (széles s, 2H), 3,72 (t, J=7Hz, 2H),

2,70 (m, 2H), 1,75-1,10 (m, 7H), 1,46 (s, 9H).

6. példa

Etil-4-(N-Boc-4-piperidil)-transz-krotonát (8) előállítás ml diklór-metánban oldott 0,43 ml (5,0 mmol) oxalil-kloridhoz keverés közben -78 °C-on 0,52 ml (7 mmol) DMSO-t csepegtetünk. Az elegyhez a gázfejlődés befejezése után (5 perc) 0,8 g (3,5 mmol), 20 ml diklór-metánban oldott (7) alkoholt adunk gőzalakban. A reakcióelegyhez 20 perc múlva 1,4 g (12 mmol) (karboxi-metilén)-trifenil-foszfátot csepegtetünk, majd a hűtő fürdőt eltávolítjuk. A reakcióelegyet 2 óra múlva

- 16 • · ··· ·· · ···· • · · · · · · • ··· ··· · ♦ · • · ······ · ······· ·· · ·· petroléterrel hígítjuk, majd rendre vízzel, 5 tömeg/térfogat%-os kálium-hidrogén-szulfát oldattal és nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd magnézium-szulfáton szárítjuk, és koncentráljuk. Flash-kromatográfiás tisztítással (szilikagél oszlop, 15 térfogat%-os etil-acetát:hexán elegy) 0,57 g színtelen, olajos (8) észtert kapunk, amelynek elemzési eredményei a következők: TLC:Rf =0,79 (50 térfogat%-os etil-acetát:hexán elegy) : ¹ NMR (CDC1₃) δ - 6,91 = dt, J=16 és 7Hz, 1H), 5,81 (széles d, J=7Hz, 1H), 4,18 (g, J=7Hz, 2H), 4,08 (m, 2H), 2,67 (m, 2H), 2,14 (t, J=7Hz, 2H), 1,70-1,05 (m, 5H), 1,44 (s, 9H), 1,28 (t, J=7H, 3H).

7. példa

Ί

Etil-4-(N-Boc-4-piperidil)-butirát (^) előállítás

500 ml etil-acetátban oldott 26 g (87 mmol) (8) olefint szobahőmérsékleten 1 bar hidrogénnyomáson 5 g 10 % Pd/C katalizátor jelenlétében hidrogénezünk egy éjszakán át. A reakcióelegyet argongázzal átöblítjük, majd cellitpárnán leszűrjük. A szűrlettet koncentráljuk, majd flash-kromatografáljuk (szilikagél, 10 térfogat%-os etil-acetát:hexán elegy). így 29 g, kristtályos szilárd (9) észtert kapunk, amelynek elemzési eredményei a következők: TLC:Rf = 0,52 (20 térfogat%-os etilacetát: hexán elegy);

¹ NMR (CDCI3) δ = 4,16 (q, J=7Hz, 2H), 4,10 (m, 2H), 2,69 (m, 2H), 32,31 (t, J=7Hz, 2H) , 1,68 (m, 4H), 1,38 (s, 9H), 1,40 (m, 1H), 1,11 (m, 2H).

8. példa

4-(N-Boc-4-piperidil)-butánsav (10) előállítás g (63 mmol) (9) észtert, 300 ml etanolt és 100 ml • ·

- 17 (100 mmol) IN nátrium-hidroxidot tartalmazó elegyet szobahőmérsékleten keverünk 2,5 órán át, majd koncentráljuk. A maradékot 5 tömeg/térfogat%-os kálium-hidrrogén-szulfáttal és vízzel hígítjuk, majd a kapott elegyet elválasztó töltjük. A fázisokat kirázás után elválasztjuk, és a szerves fázist sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és koncentráljuk. így 18 g színtelen olajos (10) savat kapunk, amelyet állással kristályosítunk. A termék TLC elemzési eredménye: Rf = 0,68 (etil-acetát).

9. példa

N-Boc-Pib-Gly-Asp(Bn)-Trp(Bn) (11) előállítás

Egy 3,5 g (12,9 mmol) (10) savat, 7,1 g (11,7 mmol) (5) tripeptidet, 2,1 g (15,5 mmol) 1-hidroxi-benzotriazol-hidrátot, 4,9 ml (44 mmol) N-metil-morfolint és 130 ml DMF-t tartalmazó elegyet 0 ’C-on 3,2 g (16,7 mmol) EDC-vel kezelünk, majd a hűtő fürdőt eltávolítjuk. A sárga oldatot 18 óra múlva etilacetáttal hígítjuk, majd rendre vízzel, 5 tömeg/térfogat%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és nátrium-klórid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és koncentráljuk. Flash-kromatográfiás tisztítással (szilikagél, 4-4,5 térfogat%-os izopropanol:triklór-metán elegy) 6,3 g, habalakú (11) vegyületet kapunk, amelynek elemzési eredményei a következők:

TLC:Rf =0,24 (5 térfogat%-os izopropanol:triklór-metán elegy);

¹ NMR (CDC1₃) S = 8,54 (széles s, 1H), 7,50 (d, J=8Hz, 1H) ,

7,35-6,95 (m, 16H), 6,81 (d, J=2Hz, 1H), 5,98 (t, J=5Hz,

1H), 5,06 (m, 4H), 4,86 (m, 1H), 4,80 (m, 1H) , 4,05 (m, • · · · · · · • · · · «···« · • · ·*···· · ······· ·· · ··

- 18 2Η), 3,62 (m, 2Η), 3,28 (m, 2Η), 2,89 (dd, J=17 és 5Hz),

1H), 2,63 (m, 3H), 2,13 (t, J=7Hz, 2H), 1,68-0,98 (m, 7H),

I, 44 (s, 9H).

10. példa

N-Boc-Pib-Gly-Asp-Trp (12) előállítás

6,1 g (7,4 mmol) (11) dibenzil-észtert, etanolt, 200 ml etil-acetátot és 1,2 g 10 % Pd/C katalizátort tartalmazó elegyet szobahőmérsékleten, 1 bar hidrogénnyomáson keverünk 3 órán át. A reakcióelegyet ezután argonnal öblítjük, cellitpárnán leszűrjük, és koncentráljuk. A kapott rózsaszín olajat flash-kromatografáljuk (szilikagél, 10:0,8:0,8 térfogatarányú triklór-metán:ecetsav:metanol elegy), és így 3,8 g, enyhén rózsaszínű (12) diacidot kapunk, amelynek TLC elemzési eredménye a következő: Rf = 0,30 (9:1:1 térfogatarányú diklór-metán:ecetsav:metanol elegy).

II. példa

Pib-Gly-Asp-Trp.HCl (1) előállítás

150 ml etil-acetátban szuszpendált 3,7 g (5,8 mmol (12) diacidhoz -60 °C-on, 10 percen át erőteljes buborékoltatással sósavgázt adunk, míg az elegy belső hőmérséklete eléri a -20 °Ct. Az eredeti szuszpenzió feloldódik, és bézsszínű csapadék jelenik meg. A reakcióelegyet ezután 20 perc alatt -20 - (-5) °Cra hagyjul felmelegedni, majd a szuszpenzión 30 percig argont vezetünk át. A szilárd anyagot leszűrjük, etil-acetáttal mossuk, és egy éjszakán át vákuumban tároljuk. így 3,0 g, bézsszínű (13) amin.HC1-vegyületet kapunk, amelynek elemzési eredményei a következők: TLC:Rf = 0,42 (9:1:1 térfogatarányú metanol:ammóniumhidroxid:

• · · ·

- 19 :víz elegy):

¹ NMR (CDC1₃) δ = 7,82 (d, J=8Hz

1H) , 7,58 (d, J=8Hz

7,37 (s, 1H), 7,32 (t, J=8Hz, 1H), 7,26 (t, J=8Hz, 1H),

5,00 (t, J=6Hz, 1H) , 4,90 (t, J=6Hz, 1H) , 4,03 (s, 2H) ,

3,53 (m) , 3,10 (m, 2H), 2,98 (m, 2H), 2,50 (t, J=7HZ, 2H) ,

2,12 (m, 2H), 1,87 (m, 2H), 1,78 (m, 1H), 1,57 (m, 2H).

Claims

Szabadalmi igénypontok

1. (I) általános képletű és gyógyászatilag elfogadható , hogy jelentése (a), (b), (c), • · ·c · · « ···· • · · · · · • · · · ····· · • ······ · fibrinogén receptor antagonisták sóik, azzal jellemez(d), (e) vagy (f) általános képletű csoport, amelyekben

A vagy B jelentése N-R általános képletű csoport, azzal kikötéssel, hogy amennyiben A jelentése N-R általános képletű csoport, akkor B jelentése -CH2-csoport, és ha B jelentése N-R általános képletű csoport, akkor A jelentése -CH- csoport;

jelentése (g) általános képletű csoport, -CO-NH csoport, oxigénatom, N-R² általános képletű csoport, -CO-,

-S(O)q-CH2 képletű csoport, (h) képletű csoport, -C=C, -S02“NH-csoport, vagy (i) általános képletű csoport, R, R¹, R² és R³ jelentése egymástól függetlenül alkil-, aril-, alkil-aril-, helyettesített alkilcsoport vagy hidrogénatom;

AA jelentése L-aminosav;

értéke

1-10;

értéke

0-9;

értéke

0-2 és értéke

1-6.
2. Az 1. igénypont szerinti (I) fibrinogén receptor antagonistták és általános képletű gyógyászatilag elfogadható sóik, azzal jellemezve, hogy

X jelentése (a) vagy (b) általános képletű csoport;

Y jelentése oxigénatom vagy (g) általános képletű csoport, ···

- 21 • · * · · · · • · · ♦ ·«·»· «

Λ « ·««·<« » ·««···· »· < ·« vagy -S(Ο)q-CH2~csoport, amelyekben R, R¹, R² és R³ jelentése egymástól függetlenül alkil-, aril-, alkil-aril-, helyettesített alkilcsoport vagy hidrogénatom;

AA jelentése L-aminosav;

m értéke1-5;

n értéke0-5;

q értéke 0-2; és p értéke2-4.
3. Az 1. igénypont szerinti fibrinogén receptor antagonista, azzal jellemezve, hogy a (II) képlettel jellemezhető vegyület.
4. Gyógyszerkészítmény, amely emlősöknél a fibrinogén vérlemezkékhez való kötődésének megakadályozására alkalmas, azzal jellemezve, hogy egy, a fenti igénypont szerinti hatóanyagot és egy gyógyászatilag elfogadható hordozót tartalmaz.
5. Eljárás a fibrinogén vérlemezékhez való kötődésének emlősöknél létrejövő megakadályozására, azzal jellemezve , hogy a kezelendő emlőst a 4. igénypont szerinti készítménnyel kezeljük.
6. Gyógyszerkészítmény, amely emlősöknél a vérlemezkék aggregálódásának megakadályozására alkalmas, azzal jellemezve, hogy egy, az 1. igénypont szerinti hatóanyagot és egy gyógyászatilag elfogadható hordozót tartalmaz.
7. Eljárás a vérlemezék aggregálódásának emlősöknél létrejövő megakadályozására, azzal jellemezve, hogy a kezelendő emlőst a 6. igénypont szerinti készítménnyel kezeljük.

• V · · • * · · * · « » ··· ··♦ · · · • · ·····*·· ·<·«*»··« -»· “ ««
8. Gyógyszerkészítmény, amely emlősöknél a vérlemezék aggregálódásának megakadályozására alkalmas, azzal jellemezve, hogy egy, az 1. igénypont szerinti hatóanyagot, egy trombolitikus szert és egy gyógyászatilag elfogadható hordozót tartalmaz.
9. Eljárás a vérlemezék aggregálódásának emlősöknél létrejövő megakadályozására, azzal jellemezve , hogy a kezelendő emlőst a 8. igénypont szerinti készítménnyel kezeljük.
10. A 8. igénypont szerinti készítmény, azzal jellemezve, hogy trombolitikus szerként egy plazminogén aktivátort tartalmaz.
11. Gyógyszerkészítmény, amely emlősöknél a vérlemezkék aggregálódásának megakadályozására alkalmas, azzal jellemezve , hogy egy, az 1. igénypont szerinti hatóanyagot egy koagulálódáselleni szert és egy gyógyászatilag elfogadható hordozót tartalmaz.
12. Eljárás a vérlemezék aggregálódásának emlősöknél létrejövő megakadályozására, azzal jellemezve , hogy a kezelendő emlőst a 11. igénypont szerinti készítménnyel kezeljük.
13. A 11. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy koagulálódáselleni szerként heparint, aszpirint vagy warfarint tartalmaz.