FR3141349A1 - Principe actif comprenant des cyclitols obtenu d’un extrait de Ginkgo biloba et ses utilisations cosmétiques - Google Patents
Principe actif comprenant des cyclitols obtenu d’un extrait de Ginkgo biloba et ses utilisations cosmétiques Download PDFInfo
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Abstract
La présente invention concerne un principe actif comprenant des cyclitols obtenu à partir d’un extrait Ginkgo biloba, une composition cosmétique le comprenant et ses utilisations cosmétiques anti-âge.
Description
L’invention concerne un principe actif comprenant des cyclitols obtenu à partir d’un extraitGinkgo biloba, une composition cosmétique le comprenant et ses utilisations cosmétiques anti-âge.
Etat de l’art
Au cours des dernières décennies, la recherche a fait des avancées majeures dans la compréhension des mécanismes liés au vieillissement. Il est dorénavant bien établi que l’entrée des cellules en sénescence est un des facteurs centraux du vieillissement des tissus.
Au niveau de la peau, plus un fibroblaste se divise, plus il vieillit. Or, les fibroblastes disposent d’un capital de divisions qui, lorsqu’il est atteint, provoque une entrée de la cellule en sénescence. Ceux-ci ne peuvent plus se diviser mais restent métaboliquement actifs et capables d’influencer le devenir du tissu. Ils développent alors un phénotype particulier leurs permettant de communiquer avec les cellules présentes dans leur environnement (fibroblastes, cellules immunitaires, kératinocytes, etc). Cette communication passe notamment par la sécrétion d’une importante quantité de molécules inflammatoires regroupées sous le terme de SASP (senescence-associated secretory phenotype), comprenant l’interleukine 6 (IL-6), ou encore les métalloprotéases 1 et 3 (MMP-1 et MMP-3).
A terme, l’accumulation de ces molécules induit une altération de la fonctionnalité des cellules environnantes. La capacité des fibroblastes à synthétiser les composants de la matrice extracellulaire se détériore également. Le derme perd en densité, et l’épiderme peine à se renouveler, ce qui se traduit par une apparition des rides, une perte d’élasticité et d’homogénéité du teint.
Les cellules immunitaires sont capables de repérer et d’éliminer efficacement ces cellules sénescentes, afin qu’elles ne créent pas de dommages et donc un vieillissement prématuré des tissus. Dans une peau jeune, les cellules sénescentes, par l’intermédiaire des SASP, vont attirer les cellules immunitaires, qui vont les reconnaitre par l’intermédiaire de ligands spécifiques, appartenant à la famille MIC (MHC Class I Polypeptide-Related Sequence), notamment MICA et MICB, afin de les éliminer.
Parmi les cellules immunitaires responsables de l’élimination des cellules sénescentes, les cellules NK (Natural Killer) sont les plus connues. Elles possèdent à leur surface des récepteurs activateurs de mort cellulaire (récepteurs NKG2D) spécifiques des ligands MICA/B. Par l’action des cellules immunitaires sur les cellules sénescentes, la peau est préservée d’un vieillissement prématuré.
Dans une peau âgée, les fibroblastes sénescents ont mis en place des stratégies leur permettant de leurrer le système immunitaire, entraînant leur accumulation dans le derme, et favorisant le vieillissement cutané. Pour y parvenir, les fibroblastes sénescents ont développé un phénotype leur permettant de cliver le ligand spécifique (MICA/MICB), mais également d’augmenter l’expression à leur surface d’une protéine du « soi », nommée HLA-E (class I histocompatibility antigen, alpha chain E) spécifique du récepteur NKG2A des cellules NK, qui leur permet de reconnaître les fibroblastes sénescents comme des cellules saines à préserver.
Afin de lutter contre ce phénomène, l’industrie cosmétique a tout d’abord cherché des actifs capables de retarder l’entrée des cellules en sénescence, puis elle s’est intéressée à cibler ces cellules sénescentes. Toutefois, les molécules capables d’éliminer les cellules sénescentes présentent majoritairement une toxicité importante du fait de leur manque de spécificité.
Il existe donc un besoin pour un nouveau principe actif cosmétique permettant de cibler, de façon spécifique et non toxique, les cellules sénescentes afin de les éliminer.
C’est l’objectif de la présente invention. Dans ce contexte, l’inventeur s’est intéressé au mécanisme de sénolyse, c’est-à-dire l’élimination des fibroblastes sénescents de la peau, et a observé, les effets néfastes de la propagation prolongée des SASP sur leur environnement.
L’inventeur a alors découvert un nouvel actif, obtenu à partir deGinkgo biloba, ciblant spécifiquement les fibroblastes sénescents, restaurant la sénolyse par les cellules immunitaires, préservant ainsi la peau du vieillissement naturel. Par l’action de ce nouvel actif, la densité et l’élasticité du derme sont améliorées, les rides réduites et l’éclat du teint sublimé.
LeGinkgo bilobaest un arbre possédant une longévité exceptionnelle, puisqu’il peut vivre au-delà de 1000 ans, voire jusqu’à 3000 ans pour certains. Au-delà cette longévité remarquable, son système immunitaire, de façon étonnante, ne faiblit pas au cours du temps, le feuillage est toujours aussi exubérant, la croissance du tronc ne ralentit pas, et les graines demeurent toujours très fertiles.
Etant donné les qualités indéniables duGinkgo biloba, il est déjà connu des principes actifs cosmétiques à base deGinkgo bilobapour lutter contre le vieillissement, toutefois, à la différence de la présente invention, ceux-ci visent à retarder autant que possible l’entrée des cellules en sénescence en préservant les fibroblastes.
L’inventeur a identifié un extrait particulier deGinkgo bilobaenrichi en cyclitols, ce qui lui a permis de développer un nouveau principe actif cosmétique anti-âge, permettant de restaurer la sénolyse naturelle des fibroblastes, en rétablissant la capacité du système immunitaire à éliminer les cellules sénescentes et donc de répondre aux besoins de la présente invention.
En particulier, l’extrait selon l’invention permet de :
- réduire significativement la sécrétion de molécules inflammatoires centrales, en particulier la sécrétion d’IL-6, des MMP-1 et des MMP-3 ;
- limiter significativement le clivage du ligand immunogène MICA ; et
- améliorer la lyse des fibroblastes sénescents réfractaires par les cellules NK par rapport aux cellules non traitées.
Ainsi, l’invention concerne un principe actif cosmétique comprenant au moins un extrait deGinkgo biloba, ledit extrait comprenant des cyclitols.
Préférentiellement, ledit extrait est obtenu à partir des feuilles deGinkgo biloba, plus préférentiellement à partir des jeunes feuilles, c’est-à-dire les feuilles vertes, en particulier avant que celles-ci ne revêtent leur teinte jaune doré caractéristique.
Afin d’enrichir encore plus la teneur en cyclitols dans l’extrait, en permettant la libération des cyclitols difficilement accessibles, une hydrolyse, préférentiellement une hydrolyse enzymatique est réalisée. Ainsi, l’extrait selon l’invention est préférentiellement un hydrolysat, plus préférentiellement un hydrolysat enzymatique.
Selon un objet particulier de l’invention, l’extrait riche en cyclitols est un hydrolysat filtré, à la différence d’un extrait obtenu à partir d’une macération ou d’une infusion. La filtration réalisée est une filtration frontale qui peut être réalisée par criblage ou tamisage à l’aide d’un filtre membrane. Cette filtration peut être réalisée par osmose inverse, microfiltration ou ultrafiltration suivant la taille des molécules que l’homme du métier souhaite obtenir.
L’extrait selon l’invention est particulièrement riche en cyclitols, aussi, les cyclitols représentent préférentiellement au moins 5% en poids du poids total de matières sèches de l’extrait.
L’extrait selon l’invention peut également comprendre d’autre molécules, préférentiellement il comprend également des carbohydrates. Les carbohydrates peuvent être de différents types, sous différentes formes et être plus ou moins polymérisés. Ainsi, l’extrait selon l’invention comprend des monosaccharides.
Préférentiellement, l’extrait selon l’invention comprend aussi des carbohydrates de degré de polymérisation compris entre 2 et 34. Le degré de polymérisation (DP) permet de définir la longueur d’une chaîne polymérique, c’est à dire le nombre d’unités de monomères présents dans la chaîne. Un degré de polymérisation de 2 ou DP2 correspond à la présence de deux monomères. Plus préférentiellement, les monosaccharides représentent 80% en poids du poids total des carbohydrates, et/ou les carbohydrates ayant un degré de polymérisation compris entre 2 et 34 représentent 20% en poids du poids total des carbohydrates.
Le principe actif selon l’invention comprend avantageusement au moins un excipient choisi parmi un conservateur, un antioxydant, un stabilisant, un support d’atomisation, et/ou leur combinaison. Aussi, le principe actif selon l’invention est préférentiellement constitué par l’extrait deGingko bilobaet au moins un excipient.
Selon un objet particulièrement préféré, le principe actif cosmétique selon l’invention, est susceptible d’être obtenu par un procédé comprenant les étapes suivantes :
- solubilisation d’au moins 50 g/L deGinkgo bilobadans l’eau,
- hydrolyse enzymatique,
- séparation de la phase soluble et insoluble par filtration et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- éventuellement concentration et filtration stérilisante.
Aussi, selon un autre aspect, l’invention se rapporte également à un procédé de préparation comprenant les étapes ci-dessus, pour obtenir le principe actif selon l’invention.
Selon un autre aspect, l’invention se rapporte également à des utilisations cosmétiques anti-âge, préférentiellement lesdites utilisations cosmétiques anti-âge du principe actif selon l’invention, visent réduire les rides et/ou améliorer l’homogénéité du teint, et/ou raviver l’éclat du teint. Pour y parvenir, le principe actif selon l’invention agit sur les fibroblastes sénescents en les empêchant de leurrer le système immunitaire et évitant leur accumulation dans le derme.
Aussi, l’invention se rapporte également à l’utilisation du principe actif pour restaurer l’élimination naturelle des fibroblastes sénescents, ou la sénolyse, par les cellules immunitaires.
D’autre part, ledit principe actif selon l’invention est destiné à une application topique sur la peau, pour préférentiellement augmenter le renouvellement cellulaire et/ou la densité du derme, et/ou l’élasticité du derme.
L’invention se rapporte également à une composition cosmétique pour une application topique comprenant au moins le principe actif selon l’un des quelconques modes de réalisation précédent et un milieu physiologiquement acceptable, préférentiellement, le principe actif représente au moins 0,1% en poids du poids total de la composition.
D’autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description détaillée de l’invention, des exemples et des figures qui vont suivre.
Définition
Par « principe actif cosmétique » au sens de l’invention, on entend un extrait comprenant au moins une molécule, préférentiellement un ensemble de molécules présentant un effet cosmétique sur la peau, lorsqu’il est appliqué topiquement.
Par « ingrédient dérivé du naturel » au sens de l’invention, on entend un ingrédient cosmétique obtenu par des procédés chimiques et/ou biologiques définis visant à le modifier chimiquement. Ces modifications chimiques sont intentionnelles, et les structures des molécules obtenues ne sont donc plus identiques aux molécules présentes dans la nature.
Par « hydrolysat deGinkgo biloba» au sens de l’invention, on entend un principe actif issu d’un arbre de l’espèceGinkgo biloba, préférentiellement des feuilles deGinkgo biloba,obtenu par un procédé comprenant au moins une étape d'hydrolyse deGinkgo biloba. Le terme hydrolysat deGinkgo bilobaexclut les molécules produites uniquement par fermentation deGinkgo bilobapar un micro-organisme ou une infusion/décoction/macération deGinkgo biloba.
Par « hydrolysat filtré deGinkgo biloba» au sens de l’invention, on entend un principe actif issu d’un arbre de l’espèceGinkgo biloba, préférentiellement des feuilles deGinkgo biloba,obtenu par un procédé comprenant au moins une étape d'hydrolyse et de filtration deGinkgo biloba,plus préférentiellement l’étape de filtration est réalisée lors de l’étape de séparation de la phase soluble et insoluble après l’étape d’hydrolyse. Le terme d’hydrolysat filtré deGinkgo bilobaexclut les molécules produites uniquement par fermentation deGinkgo bilobapar un micro-organisme ou une infusion/décoction/macération deGinkgo biloba.
Par « jeunes feuilles deGinkgo biloba», au sens de l’invention, on entend des feuilles vertes deGinkgo bilobaobtenues/récoltées avant le jaunissement de celles-ci, en particulier l’apparition de leur teinte jaune doré caractéristique.
Principe actif selon l’invention
La présente invention a donc pour objet un principe actif cosmétique comprenant au moins un extrait deGinkgo biloba, caractérisé en ce que l’extrait comprend des cyclitols. Le principe actif cosmétique selon l’invention est un ingrédient dérivé du naturel au sens de la norme ISO 16128.
LeGinkgo bilobaest la plus ancienne espèce d’arbre connue sur Terre, il fait partie de la famille des Ginkgoacées, également connu sous le nom d’arbre aux 40 écus, ou d’abricotier d’argent. Originaire d’Asie, cet arbre comprend de puissants antioxydants tels que les flavonoïdes et les terpènes, notamment réputés pour ralentir le vieillissement des cellules. Il est également connu pour améliorer la circulation sanguine et est bénéfique pour le tonus. LeGinkgo bilobaest donc couramment utilisé pour ses nombreuses vertus chez l’être humain.
Grâce à ses propriétés et sa composition particulièrement riche en cyclitols, l’extrait selon l’invention a démontré une efficacité transversale sur le derme et l’épiderme de peaux matures. Ainsi, cet ingrédient, dérivé du naturel, obtenu à partir deGinkgo biloba, ciblant spécifiquement les fibroblastes sénescents, restaure la sénolyse naturelle de ces fibroblastes, en rétablissant la capacité du système immunitaire à éliminer les cellules sénescentes. Ce nouvel actif booste le renouvellement de l’épiderme, améliore la densité du derme, réduit les rides, aide la peau à retrouver son élasticité, et sublime l’éclat du teint.
Les cyclitols présents dans l’extrait selon l’invention sont des polyols cycliques, qui contiennent des groupes hydroxyle, particulièrement stables dans des conditions physiologiques ordinaires du fait de leur structure cyclique. Ils sont considérés comme étant des osmoprotecteurs, c’est-à-dire capable d’agir comme osmolyte dans les plantes afin de permettant à l’organisme de survivre à un stress osmotique important. Il s’agit d’une famille de molécules comprenant notamment le pinnitol, le myo inositol, le pinpollitol ou encore le cicéritol. Ce type de molécules est présent dans différentes plantes telles que leGinkgo bilobaou encore le frêneFraxinus excelsiora des concentrations et dans des proportions qui varient suivant les espèces.
Aussi, l’invention se rapporte à un principe actif comprenant au moins un extrait deGinkgo bilobariche en cyclitols, ainsi qu’à ses utilisations cosmétiques, préférentiellement pour réduire les rides et/ou améliorer l’homogénéité du teint, et/ou raviver l’éclat du teint.
Afin de développer un tel ingrédient dérivé du naturel (selon les définitions de la norme ISO 16128) enrichi en cyclitols, l’extrait compris dans le principe actif selon l’invention est préférentiellement obtenu à partir de feuilles deGinkgo biloba, plus préférentiellement à partir des jeunes feuilles deGinkgo biloba.
Afin d’augmenter la teneur en cyclitols, l’extrait est préférentiellement un hydrolysat, plus préférentiellement un hydrolysat filtré, encore plus préférentiellement un hydrolysat enzymatique filtré, ce qui permet de libérer les cyclitols difficilement accessibles.
Aussi, selon un objet particulièrement préféré de l’invention, l’extrait comprend au moins 5% de cyclitols, en poids du poids total de matières sèches de l’extrait.
La quantification en cyclitols peut être déterminée par chromatographie ionique. Des solutions de calibration sont préparées à partir d’un standard (le Pinnitol) entre 2 et 10 mg/L. L’extrait selon l’invention est préalablement dilué dans de l’eau, pour que la teneur en cyclitols corresponde à la gamme d’étalonnage. Enfin, la quantité de cyclitols des échantillons est déterminée grâce à une courbe de calibration.
La teneur en matières sèches de l’extrait peut être déterminée par la pesée des résidus issus du séchage de l’extrait selon l’invention à 105°C dans une étuve jusqu’à l’obtention d’un poids constant. Préférentiellement, l’extrait selon l’invention sous forme liquide a une teneur en matières sèches comprise entre 20g/l à 50g/l.
L’inventeur a poursuivi la caractérisation de l’extrait selon l’invention, celui-ci comprend préférentiellement des carbohydrates. La teneur en carbohydrate peut notamment être déterminée à l’aide de la méthode de DUBOIS (Dubois M. et al., Analytical chemistry, 28, 3, 350-356, 1956).
Les masses molaires des carbohydrates ont également été déterminées. Aussi, les carbohydrates présents dans l’extrait selon l’invention ont préférentiellement un degré de polymérisation compris entre 1 et 34.
De façon particulièrement préférée, les monosaccharides ayant un degré de polymérisation de 1 c’est à dire une masse molaire inférieure à 180 Da représentent 80% en poids du poids total des carbohydrates, et/ou les carbohydrates ayant un degré de polymérisation compris entre 2 et 34 et donc une masse molaire comprise entre 360 et 6 120 Da représentent au moins 20% en poids du poids total des carbohydrates.
L’extrait selon l’invention est également composé d’autres molécules, telles que des protéines, des acides uroniques, des acides organiques et des cendres minérales.
La répartition et la quantité de la fraction protéique peut être déterminée par le dosage de l’azote total selon la méthode de KJELDHAL (référence : Official method of analysis of the A.O.C., 12th ed. W Horwitz, E.D., New-York, 15-60, 1975). Préférentiellement, l’extrait comprend 2% de peptides en poids de matières sèches de l’extrait selon la méthode de KJELDHAL, ayant une masse moléculaire inférieure à 2 000 Da.
L’inventeur a également déterminé la teneur en cendres minérales. La teneur en cendres minérales peut être déterminée par la pesée des résidus issus de l’incinération des échantillons du principe actif selon l’invention à 550°C dans un four à moufle électrique. Préférentiellement, le principe actif selon l’invention présente une teneur en cendres minérales comprise entre 25% et 40% en poids de matières sèches du principe actif.
L’inventeur a également déterminé la teneur en acides organiques. Elle est déterminée par une chromatographie ionique (DIONEX). Préférentiellement, le principe actif selon l’invention présente une teneur en acides organiques comprise entre 20 et 40% en poids de matières sèches.
L’inventeur a enfin déterminé la teneur en acides uroniques. La réaction entre les acides uroniques et le tétraborate de sodium donne en présence de métahydroxydiphényl, une coloration rose permettant le dosage au spectrophotomètre à 250nm. Le principe actif selon l’invention contient entre 5% et 13% d’acides uroniques en poids de matières sèches.
Le principe actif selon l’invention peut également comprendre d’autres ingrédients ajoutés par l’Homme du métier, en particulier des excipients. Aussi, le principe actif selon l’invention comprend préférentiellement au moins un excipient choisi parmi un conservateur, un antioxydant, un stabilisant, un support d’atomisation, et leur combinaison. De tels excipients permettent de stabiliser, conserver, éviter la dégradation de l’extrait, en particulier des molécules comprises dans l’extrait, tels que les cyclitols responsables de l’efficacité cosmétique anti-âge dudit principe actif.
Le principe actif cosmétique selon l’invention peut se présenter sous différentes formes, préférentiellement sous forme liquide, sous forme solide ou sous forme de film.
Lorsqu’il se présente sous forme liquide, le principe actif selon l’invention est exclusivement constitué par l’extrait deGingko bilobaaccompagné d’excipients, préférentiellement de stabilisant et/ou conservateur, et/ou d’antioxydant.
L’extrait sous forme liquide se présente préférentiellement sous forme d’une solution aqueuse liquide limpide, avec une faible odeur et une couleur jaune clair à jaune. Il peut toutefois être plus coloré et/ou être décoloré par tout procédé connu de l’homme du métier.
Lorsqu’il se présente sous forme solide, le principe actif selon l’invention est préférentiellement constitué par l’extrait deGingko bilobatel que précédemment décrit et par au moins un excipient tel qu’un support d’atomisation choisi parmi la maltodextrine, la gomme arabique ou la lécithine de soja. Bien entendu, il peut également comprendre un stabilisant et/ou conservateur, et/ou un antioxydant en plus du support. Selon un mode de réalisation, particulièrement adapté, l’extrait représente au moins 10% en poids du principe actif et le support au plus 90% en poids du principe actif.
Dans le cas d’une forme solide dans laquelle le principe actif est associé à un support, les teneurs en protéines, en sucres, en cyclitols, en acides uroniques, en acides organiques et en cendres minérales dans le principe actif sont modifiées, le support étant généralement constitué majoritairement de sucres.
Le principe actif selon l’invention peut aussi être présenté sous forme d’un film. Dans ce cas, l’extrait deGingko bilobareprésente préférentiellement au moins 0,1% en poids du film.
Lorsqu’il se présente sous forme de film, le principe actif comprend :
- au moins l’extrait deGingko bilobaselon l’invention,
- au moins une charge minérale, et
- au moins un polymère d’origine naturelle, et
- au moins un plastifiant, et
- au moins un tensio-actif.
Le polymère d’origine naturelle peut être choisi parmi : Pectine, Gomme tamarin, Alginate, Pullulane, Psyllium, Xanthane, Guar, Tara, Caroube, Agar, Gomme arabique, Gellane, Dextran, Carraghénane, Cellulose, Konjac et Chitosan.
Le plastifiant peut être choisi parmi : Glycérol, Sorbitol, Saccharose, Erythritol, Urée, Propylène glycol et Butylene glycol.
La charge minérale peut être choisie parmi : Carbonate de calcium, argile verte, kaolin, perlite, talc, silicate de magnésium, mica, sericite diatomée, silice, sulfate de calcium chlorure de calcium, chlorure de potassium, oxyde de fer et oxyde de zinc.
Le principe actif sous forme de film peut comprendre en outre un pigment pour colorer ledit film.
Selon un mode de réalisation particulièrement préféré, l’extrait du principe actif cosmétique selon l’invention est susceptible d’être obtenu par un procédé d’extraction comprenant les étapes suivantes :
- solubilisation d’au moins 50 g/L deGinkgo bilobadans l’eau, ,
- hydrolyse enzymatique,
- séparation de la phase soluble et insoluble par filtration et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- éventuellement concentration et filtration stérilisante.
Composition cosmétique selon l’invention
Le principe actif selon l’invention peut éventuellement être intégré dans une composition cosmétique, notamment une composition comprenant au moins 0,1% en poids dudit principe actif et un milieu physiologiquement acceptable, préférentiellement un milieu cosmétiquement acceptable.
Ces compositions peuvent se présenter notamment sous forme d’émulsions huile-dans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersions, gels aqueux, poudres, ou fond de teint ou sous forme de film. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l’aspect de crèmes, émulsions, gels, masques ou tous autres aspects des cosmétiques de soin de la peau saine.
Il peut s’agir de compositions comprenant au moins 0,1% du principe actif liquide selon l’invention, préférentiellement entre 0,1 et 10%.
Ces compositions comprennent, outre le principe actif, un milieu physiologiquement acceptable tel qu’un milieu cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d’inconfort pour l’utilisateur telles que des rougeurs, tiraillements ou picotements.
Les compositions selon l’invention peuvent contenir comme adjuvant au moins un composé choisi parmi :
- les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles,
- les cires, telles que l’ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d’abeille ou la cire de carnauba,
- les élastomères de silicone,
- les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu’ils soient non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères,
- les co-tensioactifs, tels que les alcools gras linéaires,
- les épaississants et/ou gélifiants,
- les humectants, tels que les polyols comme la glycérine,
- les colorants, les conservateurs, les charges,
- les tenseurs,
- les séquestrants,
- les parfums,
- et leurs mélanges, sans que cette liste soit limitative.
Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook publié par le Personal Care Product Council).
Bien entendu, l’homme du métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non actifs, et leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l’adjonction envisagée.
Procédé d’extraction de l’extrait selon l’invention
L’extrait constituant ou contenu dans le principe actif selon l’invention peut être obtenu par tout moyen connu permettant d’obtenir un extrait riche en cyclitols.
Selon un mode de réalisation préféré, le procédé d’extraction comprend au moins une étape de solubilisation des feuilles deGinkgo biloba, une étape d’hydrolyse, préférentiellement une hydrolyse enzymatique, pour augmenter la teneur en cyclitols et une étape de filtration.
Préalablement au procédé d’obtention de l’extrait en tant que tel, les feuilles deGinkgo bilobasont récoltées à partir de culture deGinkgo bilobarespectueuse de l’environnement associant des cultures intercalaires, un enherbement permanent, l’utilisation raisonnée d’engrais vert respectueux de la flore, et la plantation de haies ensauvagées. Un tel mode de culture permet de protéger les cultures deGinkgo bilobades contaminations pesticides extérieures. Préférentiellement, les feuilles sont récoltées manuellement et sélectivement afin de ne récolter que les jeunes feuilles vertes avant que ces dernières ne revêtent leur teinte jaune doré caractéristique.
Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, le principe actif selon l’invention est obtenu par la mise en œuvre des étapes suivantes :
- Solubilisation d’au moins 50 g/L deGinkgo bilobadans l’eau, préférentiellement des feuilles vertes deGinkgo biloba,
- Hydrolyse, préférentiellement hydrolyse enzymatique,
- Séparation des phases solubles et insolubles par filtration et récupération de la phase soluble,
- Inactivation enzymatique, et
- éventuellement concentration et filtration stérilisante.
Les conditions d’hydrolyse sont choisies pour obtenir un extrait enrichi en cyclitols, préférentiellement au moins 5% en poids du poids total de la matière sèche.
La séparation de la phase soluble et insoluble est réalisée par filtration. La séparation des phases soluble et insoluble est réalisée pour récupérer la phase soluble contenant entre autres les cyclitols, c’est-à-dire l’hydrolysat filtré.
Eventuellement, une étape supplémentaire de traitement thermique peut être réalisée pour inactiver l’enzyme utilisée. Cette inactivation est alors réalisée selon les préconisations du fournisseur de l’enzyme utilisée.
Eventuellement, le procédé comprend une étape de filtration après la récupération de la phase soluble pour éliminer les particules encore en suspension. Ainsi, cette étape de filtration permet la purification de la phase soluble récupérée et est réalisée afin sélectionner les molécules actives.
L’hydrolysat obtenu à ce stade peut éventuellement être encore concentré et/ou purifié, préférentiellement par des étapes d’ultrafiltration successives à travers des membranes de porosité différentes, en conservant les molécules actives à chaque étape et/ou par une méthode de type chromatographique.
L’hydrolysat obtenu après hydrolyse et filtration, avant ou après concentration et filtration stérilisante, est un hydrolysat deGinkgo biloba, et constitue une première forme du principe actif selon l’invention, se présentant alors sous forme liquide.
L’hydrolysat obtenu peut ensuite être séché et associé ou non à un excipient ou un support, pour se présenter par exemple sous forme solide. Cette phase peut être réalisée par la mise en œuvre des étapes suivantes :
- un support d’atomisation, de préférence la maltodextrine, est ajouté dans l’hydrolysat deGinkgo biloba, d’au plus 90% (en masse/volume) ;
- cette solution est ensuite concentrée sous vide ;
- une élimination des bactéries éventuellement présentes est réalisée par traitement thermique ;
- l’atomisation permet d’obtenir une poudre.
Les étapes des procédés décrits ci-avant, prises individuellement sont usuelles dans le domaine des extractions d’actifs à partir de matières premières naturelles et l’homme du métier est à même d’en ajuster les paramètres réactionnels sur la base de ses connaissances générales.
Utilisation cosmétique
Le principe actif selon l’invention ou la composition selon l’invention est destiné à être utilisé sur des peaux saines, notamment des peaux saines matures, en particulier comme principe actif cosmétique anti-âge.
Préférentiellement, le principe actif selon l’invention est destiné à une application topique sur la peau pour réduire les rides et/ou améliorer l’homogénéité du teint, et/ou raviver l’éclat du teint.
Pour y parvenir, le principe actif selon l’invention restaure l’élimination naturelle des fibroblastes sénescents, ou sénolyse, par les cellules immunitaires.
Le principe actif augmente ainsi, le renouvellement cellulaire et/ou la densité du derme, et/ou l’élasticité du derme.
L’extrait selon l’invention permet de protéger l’environnement cellulaire du vieillissement. Bien que peu de cellules sénescentes soit présentes au sein du tissu, une seule de ces cellules peut en affecter de nombreuses autres étant donné la signalisation paracrine existante entre les différents types cellulaires. Ainsi, les fibroblastes sénescents ayant échappé à l’élimination par les cellules NK s’accumulent et sécrètent en abondance et sans interruption les marqueurs inflammatoires du SASP, accélérant le vieillissement cutané.
En outre, les fibroblastes produisent certains composants structuraux de la matrice extracellulaire (MEC), tels que le collagène. Or, l’accumulation de fibroblastes sénescents entraîne un déséquilibre de la balance entre synthèse et dégradation de la matrice. D’une part, la sécrétion prolongée de collagénases de type MMPs, notamment les MMP-1 et MMP-3, engendre la dégradation de la MEC en place. D’autre part, le SASP des fibroblastes sénescents perturbe également le métabolisme des fibroblastes environnants qui peinent alors à renouveler la matrice. Le réseau dense et ferme des fibres de collagène se désorganise, menant à terme à une perte des propriétés biomécaniques de la peau et à la formation de rides.
Or, l’extrait selon l’invention limite ces effets délétères ce qui se traduit par une amélioration significative de la densité du derme et de l’élasticité de peaux matures. En conséquence, l’extrait selon l’invention réduit significativement les rides.
Les fibroblastes sénescents perdurant dans le tissu fragilisent également les interactions épiderme-derme, conduisant ainsi à une altération du processus de renouvellement de l’épiderme. La sécrétion excessive des molécules inflammatoires du SASP induit la dégradation des structures protéiques permettant l’ancrage de l’épiderme au derme. Ce sécrétome délétère pour le tissu provoque notamment la perte d’un marqueur essentiel au maintien de l’homéostasie de l’épiderme et de la peau : le collagène XVII.
L’extrait selon l’invention limite également les effets délétères des fibroblastes sénescents sur la production de collagène XVII par les kératinocytes, ce qui se traduit par une amélioration significative du renouvellement cellulaire sur les peaux matures et donc un teint plus homogène et ravivé.
Ainsi, l’extrait selon l’invention par son action transversale permet d’une part de booster le renouvellement de l’épiderme, d’améliorer la densité du derme, et d’améliorer son élasticité, réduisant les rides et d’autre part de sublimer l’éclat du teint et d’améliorer l’homogénéité du teint. L’invention vise également l’utilisation du principe actif pour restaurer l’élimination naturelle des fibroblastes sénescents, ou la sénolyse, par les cellules immunitaires.
L’invention est à présent illustrée par des exemples non limitatifs de compositions selon l’invention et par des résultats.
Exemple 1 : Principe actif selon l’invention (PA)
Le principe actif de l’exemple 1 est obtenu à partir des feuilles deGingko biloba. Le principe actif de l’exemple 1 est obtenu par le procédé suivant :
- Solubilisation d’au moins 50 g/L des feuilles deGingko bilobadans l’eau,
- Hydrolyse enzymatique,
- Séparation des phases soluble et insoluble par filtration et récupération de la phase soluble, soit l’hydrolysat filtré,
- Traitement thermique
- Purification et concentration de la phase soluble,
- Filtration et filtration stérilisante.
Le principe actif obtenu possède les caractéristiques suivantes :
- Teneur en Matières Sèches = 31,4 g/L
- Teneur en cyclitols = 2,4 g/L, soit 8%, en poids par rapport à la matière sèche,
- Teneur en Sucres Totaux (selon la méthode de Dubois) = 6,7 g/L, soit 21%, en poids par rapport à la matière sèche,
- Teneur en acides galacturoniques = 2g/l, soit 6%, en poids par rapport à la matière sèche,
- Liquide limpide, jaune, faible odeur
Exemple 2 : Principe actif
hors
l’invention (
HI1
)
Le principe actif de l’exemple 2 est obtenu à partir des feuilles deGingko biloba. Le principe actif de l’exemple 2 est obtenu par le procédé suivant :
- Solubilisation d’au moins 50 g/L deGingko bilobadans l’eau,
- Séparation des phases soluble et insoluble par filtration et récupération de la phase soluble,
- Traitement thermique
- Purification et concentration de la phase soluble,
- Filtration et filtration stérilisante.
Le principe actif obtenu possède les caractéristiques suivantes :
- Teneur en Matières Sèches = 28,8 g/L
- Teneur en cyclitols = 1,74 g/L, soit 6%, en poids par rapport à la matière sèche,
- Teneur en Sucres Totaux (selon la méthode de Dubois) = 6,4 g/L, soit 22%, en poids par rapport à la matière sèche,
- Teneur en acides galacturoniques = 0,84g/l, soit 3%, en poids par rapport à la matière sèche,
- Liquide limpide, jaune très pâle, faible odeur
Exemple
3
: Principe actif hors invention (HI
2
)
Le principe actif de l’exemple 3 est obtenu à partir de frêne de l’espèceFraxinus excelsior. Ce principe actif a été réalisé à partir d’une espèce de plante différente duGingko bilobamais riche en cyclitols, selon le procédé décrit dans l’exemple 1.
Le principe actif obtenu possède les caractéristiques suivantes :
- Teneur en Matières Sèches = 22,6 g/L
- Teneur en cyclitols = 1,53 g/L, soit 7%, en poids par rapport à la matière sèche,
- Teneur en Sucres Totaux (selon la méthode de Dubois) = 5,8 g/L, soit 26%, en poids par rapport à la matière sèche,
- Teneur en acides galacturoniques = 2,4g/l, soit 11%, en poids par rapport à la matière sèche,
- Liquide limpide, jaune, faible odeur
Exemple
4
: Composition selon l’invention
Un exemple de formulation d’une crème onctueuse comprenant le principe actif selon l’invention est présenté dans le tableau 1 ci-après.
Ingrédients | % | |
A1 | Eau | qsp 100 |
Conservateur | qs | |
Butylène Glycol | 3,00 | |
A2 | Glycérine | 1,00 |
Gomme xanthane | 0,20 | |
B | PEG-100 Stearate & Glyceryl Stearate | 3,00 |
Myristyl Alcohol & Myristyl Glucoside | 2,00 | |
Cetearyl Alcohol | 2,00 | |
Hydrogenated Rapeseed Oil | 3,00 | |
Ethylhexyl Polyhydroxystearate | 2,00 | |
Isodecyl Neopentanoate | 8,00 | |
PPG-3 Benzyl Ether Myristate | 8,00 | |
Dimethicone | 2,00 | |
C | Polyacrylate-13 & Polyisobutene & Polysorbate 20 | 1,00 |
D | PRINCIPE ACTIF INVENTION | 2,00 |
La composition de l’exemple 4 peut notamment être obtenue par le procédé suivant :
- Ajouter A2 dans A1 sous agitation modérée, agiter jusqu’à homogénéité et chauffer à 80°C.
- Placer B sous agitation et chauffer à 80°C.
- Emulsionner B dans A sous agitation cisaillante pendant 10 minutes.
- A 30-40°C, sous agitation modérée, ajouter C puis D.
La composition se présente alors sous forme d’une émulsion blanche et brillante présentant un pH à 1 mois égal à 5,4, une viscosité (C/5rpm) égale à 118 000 cP.
Exemple
5
: Composition selon l’invention
Un exemple de formulation d’une crème anti-âge global comprenant le principe actif selon l’invention est présenté dans le tableau 2 ci-après.
Ingrédients | % | |
A1 | Eau Purifiée | qsp 100 |
Conservateur | qs | |
Butylène Glycol | 3,00 | |
A2 | Glycérine | 2,00 |
Xanthan Gum | 0,10 | |
B | Cetearyl Alcohol & Glyceryl Stearate & Jojoba Esters & Helianthus Annuus Seed Cera (Helianthus Annuus (Sunflower) Seed Wax) & Sodium Stearoyl Glutamate & Aqua (Water) & Polyglycerin-3 | 4,00 |
Garcinia Indica Seed Butter | 2,00 | |
Oleyl Erucate | 6,00 | |
Diisopropyl Adipate | 7,00 | |
Prunus Amygdalus Dulcis (Sweet Almond) Oil | 3,00 | |
Dimethicone | 1,50 | |
Tocopherol & Helianthus Annuus (Sunflower) Seed Oil | 0,05 | |
C | Hydroxyethyl Acrylate/Sodium Acryloyldimethyl Taurate Copolymer & Polyisobutene & PEG-7 Trimethylolpropane Coconut Ether | 1,50 |
D | PRINCIPE ACTIF INVENTION | 2,00 |
La composition de l’exemple 5 peut notamment être obtenue par le procédé suivant :
- Ajouter A2 dans A1 sous agitation modérée, agiter jusqu’à homogénéité et chauffer à 80°C.
- Placer B sous agitation et chauffer à 80°C.
- Emulsionner B dans A sous agitation cisaillante pendant 10 minutes.
- A 30-40°C sous agitation modérée, ajouter C puis D.
La composition se présente alors sous forme d’une émulsion souple et brillante de couleur blanc cassé présentant un pH à 1 mois égal à 6,1, une viscosité (C/5rpm) égale à 48 600 cP.
Exemple
6
: Composition selon l’invention
Un exemple de formulation d’un sérum anti-rides comprenant le principe actif selon l’invention est présenté dans le tableau 3 ci-après.
Ingrédients | % | |
A1 | Eau Purifiée | qsp 100 |
Butylène Glycol | 4,00 | |
A2 | Glycérine | 2,00 |
Xanthan Gum | 0,15 | |
B | Polyacrylate Crosspolymer-6 | 0,50 |
Polyacrylamide & C13-14 Isoparaffin & Laureth-7 | 2,00 | |
Dimethicone | 15,00 | |
Dimethicone & Dimethicone Crosspolymer | 7,00 | |
C | Conservateur | qs |
D | CI 77891 (Titanium Dioxide) & Mica & CI 77491 (Iron Oxides) | 0,50 |
E | PRINCIPE ACTIF INVENTION | 4,00 |
F | Solution Acide Citrique 10% | qsp pH |
La composition de l’exemple 6 peut notamment être obtenue par le procédé suivant :
- Ajouter A2 dans A1 sous agitation modérée, agiter jusqu’à homogénéité.
- Homogénéiser B sous agitation.
- Ajouter B dans A sous forte agitation. Agiter pendant 20 minutes.
- Sous agitation modérée, ajouter C puis D et E.
- Ajuster le pH à 4,8 – 5,2 avec F
La composition se présente alors sous forme d’un gel-crème épais, brillant corail nacré présentant un pH à 1 mois égal à 4,9, une viscosité (C/5rpm) égale à 42 200 cP.
Exemple
7
: Composition selon l’invention
Un exemple de formulation d’un fond de teint lissant comprenant le principe actif selon l’invention est présenté dans le tableau 4 ci-après.
Ingrédients | % | |
A | Propanediol Dicaprylate | 6,00 |
Magnesium Stearate | 0,80 | |
Polyglyceryl-6 Polyricinoleate & Polyglyceryl-3 Diisostearate & Disteardimonium Hectorite | 6,00 | |
Undecane & Tridecane | 7,00 | |
Tocopherol & Helianthus Annuus (Sunflower) Seed Oil | 0,10 | |
B | Pentaerythrityl Tetraisostearate | 2,00 |
Isocetyl Stearoyl Stearate | 5,00 | |
Pigments | 8,15 | |
C | Silica | 3,00 |
D1 | Eau Purifiée | qsp 100 |
Sodium Gluconate | 0,20 | |
Conservateur | qs | |
D2 | Acide Citrique Anhydre | 0,05 |
Glycérine | 3,00 | |
Pentylene Glycol | 3,00 | |
Sodium Chloride | 1,00 | |
D3 | PRINCIPE ACTIF INVENTION | 2,50 |
La composition de l’exemple 7 peut notamment être obtenue par le procédé suivant :
- Passer le mélange B à la tricylindre.
- Homogénéiser A à l’aide d’une défloculeuse puis, sous agitation vive, y ajouter B puis C.
- Mélanger D1 jusqu’à solubilisation. Ajouter les MP de D2 et D3 sous agitation.
- Ajouter lentement D dans ABC sous agitation vive. Agiter pendant 10 minutes puis homogénéiser 2 minutes au rotor/stator.
La composition se présente alors sous forme d’une émulsion souple et brillante de couleur beige clair présentant une viscosité (C/5rpm) égale à 19 500 cP.
Evaluation
in vitro
de l’efficacité du principe actif selon l’invention
Essai 1 - Effet du principe actif selon l’invention sur
le sécrétome des fibroblastes sénescents immunoévasifs.
L’objectif de cette étude est d’évaluer la capacité du principe actif selon l’invention (PA) à limiter la sécrétion des protéines du SASP, notamment MMP-1, MMP-3 et Il-6, par des fibroblastes sénescents immunoévasifs afin de limiter l’inflammation ainsi qu’une dégradation du microenvironnement cutané.
Les fibroblastes humains normaux et sénescents sont ensemencés et incubés à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. A J3, le phénotype immunoévasif est activé. Puis, les fibroblastes humains sénescents sont stressés tous les jours pour obtenir une population de fibroblastes sénescents immunoévasifs. A la fin de chaque stress, les cellules sont traitées ou non avec le principe actif selon l’invention à 0,25% et 0,50% (V/V). La sécrétion des 3 protéines du SASP (MMP-1, MMP-3, IL-6) est ensuite évaluée par dosage ELISA.
Les résultats sur la synthèse de MMP-1, MMP-3 et IL-6 par des fibroblastes sénescents immunoévasifs sont présentés dans le tableau 5 ci-après.
Synthèse de
MMP-1
(ng/mg protéines) |
Capacité à limiter la synthèse de MMP-1
(%) |
Synthèse de MMP-3 (ng/mg protéines) |
Capacité à limiter la synthèse de MMP-3
(%) |
Synthèse de IL-6
(pg/mg protéines) |
Capacité à limiter la synthèse de IL-6 (%) | |
Fibroblastes normaux | ||||||
Témoin | 639 | 263 | 118 | |||
Fibroblastes sénescents | ||||||
Témoin | 1597 | 714 | 186 | |||
Fibroblastes sénescents immunoévasifs | ||||||
Témoin | 3299 | 2451 | 264 | |||
PA 0,25% | 2691 | +36 | 2168 | +16 | 247 | +22 |
PA 0,50% | 2522 | +46 | 1967 | +28 | 196 | +87 |
HI1 0,50% | 3231 | +4 | 2434 | +1 | - | - |
HI2 0,50% | 3197 | +6 | 2434 | +1 | - | - |
En comparaison aux fibroblastes sénescents, les fibroblastes sénescents immunoévasifs sécrètent significativement plus de MMP-1, MMP-3 et IL-6.
Testé à 0,5% sur fibroblastes humains sénescents immunoévasifs, le principe actif selon l’invention limite significativement la synthèse de MMP-1, MMP-3, et d’IL-6 de respectivement 46%, 28% et 87% et limite ainsi la sécrétion des protéines dérégulées du SASP. Alors que les deux extraits hors invention n’ont pas d’effet sur la synthèse de MMP-1 et MMP-3.
Essai 2 - Effet du principe actif selon l’invention sur le clivage du ligand MICA par des fibroblastes sénescents immunoévasifs.
L’objectif de cette étude est d’évaluer la capacité du principe actif selon l’invention (PA) à limiter le clivage du ligand immunogène MICA, responsable du signal protéique reconnu par les cellules du système immunitaire permettant l’élimination des fibroblastes sénescents.
Le protocole est identique à celui de l’essai 1 à la différence que l’on évalue le taux de MICA clivé soluble dans le milieu de culture par dosage ELISA.
Les résultats sont présentés dans le tableau 6 ci-après.
Taux de MICA clivé
(ng/mg protéines) |
Capacité à limiter le clivage de MICA
(%) |
|
Fibroblastes normaux | ||
Témoin | 17 | |
Fibroblastes sénescents | ||
Témoin | 19 | |
Fibroblastes sénescents immunoévasifs | ||
Témoin | 70 | |
PA 0,25% | 61 | +18 |
PA 0,50% | 54 | +31 |
Les fibroblastes sénescents immunoévasifs présentent un taux de clivage de MICA significativement plus élevé que les fibroblastes sénescents. Testé à 0,5% sur fibroblastes humains sénescents immunoévasifs, le principe actif selon l’invention (PA) limite significativement le clivage de MICA de 31% et permet ainsi aux cellules sénescentes de conserver leur ligand de reconnaissance par le système immunitaire et donc leur élimination.
Essai 3 - Effet du principe actif selon l’invention sur la lyse des fibroblastes sénescents immunoévasifs.
L’objectif de cette étude est d’évaluer la capacité du principe actif selon l’invention (PA) à restaurer la lyse physiologique des fibroblastes sénescents immunoévasifs par les cellules Natural killer (NK) grâce à la reconnaissance du ligand MICA permettant leur fixation et la lyse des fibroblastes sénescents par l’action de molécules cytotoxiques libérées par les cellules NK.
Le protocole est identique à celui de l’essai 1. Une fois traitée par le principe actif selon l’invention, les fibroblastes humains sénescents ou sénescents immunoévasifs traités ou non sont marqués grâce à une sonde fluorescente marquant la cellule entière puis mis en contact avec des cellules NK pré-activées. La fluorescence est mesurée. L’étude permet ainsi de suivre l’évolution morphologique de fibroblastes humains sénescents ou sénescents immunoévasifs préalablement marqués et mis en contact avec des cellules NK.
Les résultats sont présentés dans le tableau 7 ci-après.
Lyse par les
cellules NK (%) |
Capacité à restaurer la lyse des cellules sénescentes immunoévasives
(%) |
|
Fibroblastes sénescents | ||
Témoin | 14,7 | |
Fibroblastes sénescents immunoévasifs | ||
Témoin | 5,1 | |
PA 0,5% | 14,8 | + 101 |
En comparaison aux fibroblastes sénescents, les fibroblastes sénescents immunoévasifs sont significativement moins lysés par les cellules NK. Testé à 0,5% sur fibroblastes humains sénescents immunoévasifs, le principe actif selon l’invention restaure significativement leur lyse par les cellules NK de 102%, et rétablit ainsi l’élimination par les cellules NK des cellules sénescentes résistantes.
Essai 4 - Effet du principe actif selon l’invention sur la matrice extracellulaire.
L’objectif de cette étude est d’évaluer l’effet du sécrétome de fibroblastes sénescents immunoévasifs pré-traités avec le principe actif selon l’invention (PA) sur le dépôt de matrice par des fibroblastes âgés.
Le dépôt et la structuration de la matrice extracellulaire (MEC) dermique est l’une des fonctions principales des fibroblastes. Avec l’âge, la structure des réseaux collagéniques et élastiques du derme est altérée, notamment due à l’accumulation de fibroblastes sénescents et de la sécrétion accrue de MMP-1 et MMP-3 principalement.
Les fibroblastes humains âgés sont ensemencés et incubés à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Puis, les fibroblastes humains âgés sont traités soit avec un sécrétome de fibroblastes sénescents (SFS), soit avec un sécrétome de fibroblastes sénescents immunoévasifs (SFSI) traités ou non avec le principe actif à 0,5% (V/V). Les cellules sont ensuite incubées dans une atmosphère contenant 5% de CO2 à 37°C. Enfin, le réseau de collagène I est analysé par immunocytofluorescence.
Les résultats sont présentés dans le tableau 8 ci-après.
Synthèse du réseau de collagène I
(x10 4 UA) |
Capacité à préserver la synthèse du réseau de collagène I
(%) |
|
Fibroblastes âgés | ||
SFS Témoin | 1125 | |
SFSI Témoin | 802 | |
SFSI + PA 0,5% | 1010 | +64 |
La synthèse du réseau de collagène I par des fibroblastes humains âgés traités avec le sécrétome de fibroblastes sénescents immunoévasifs diminue significativement. Appliqué sur des fibroblastes humains âgés, le sécrétome issu de fibroblastes sénescents immunoévasifs pré-traités avec le principe actif selon l’invention à 0,5% préserve significativement la synthèse de réseau de collagène I de 64%. Ainsi, en régulant la composition du SASP sécrété par les fibroblastes sénescents immunoévasifs, l’environnement matriciel est préservé.
Essai 5 - Effet du principe actif selon l’invention sur
le renouvellement kératinocytaire.
L’objectif de cette étude est d’évaluer l’effet du sécrétome de fibroblastes sénescents immunoévasifs traités avec le principe actif selon l’invention (PA) sur le renouvellement de kératinocytes âgés.
Avec l’âge, l’homéostasie épidermique est perturbée et la peau peine à se renouveler. Le collagène XVII, exprimé par les kératinocytes basaux, joue un rôle déterminant dans la prolifération de ces cellules, sa diminution est corrélée avec le vieillissement cutané.
Le protocole est identique à celui de l’essai 4 à la différence que les cellules sont des kératinocytes au lieu des fibroblastes. La synthèse de collagène XVII est analysée par Western Blot.
Les résultats sont présentés dans le tableau 9 ci-après.
Synthèse de
collagène XVII (UA) |
Capacité à préserver la synthèse de collagène XVII (%) | |
Kératinocytes âgés | ||
SFS Témoin | 4,1 | |
SFSI Témoin | 2,8 | |
SFSI + PA 0,25% | 3,6 | + 62 |
SFSI + PA 0,50% | 4,0 | +9 2 |
La synthèse de collagène XVII par des kératinocytes humains âgés traités avec le sécrétome de fibroblastes sénescents immunoévasifs est significativement réduite. Appliqué sur kératinocytes humains âgés, le sécrétome issu de fibroblastes sénescents immunoévasifs pré-traités avec le principe actif selon l’invention à 0,5% préserve significativement la synthèse de collagène XVII de 95%.
Ainsi, en régulant la composition du SASP sécrété par les fibroblastes sénescents immunoévasifs, le principe actif selon l’invention préserve le renouvellement des kératinocytes humains âgés.
Evaluation
in vivo
de l’activité biologique du principe actif selon l’invention
L'objectif des essais suivants est d’évaluerin vivoles activités biologiques du principe actif selon l’invention formulé à 2% en émulsion, en comparaison à une formule placebo, sur des peaux matures caucasiennes.
Le panel était composé de 18 volontaires sains, de sexe féminin âgés de 61 à 79 ans. L’effet a été évalué au niveau du visage après 28 jours d’application biquotidienne en analysant la densité du derme à partir d’acquisitions réalisées à l’aide d’un échographe haute fréquence, ainsi que les propriétés biomécaniques de la peau à l’aide d’un Cutomètre. La dynamique de renouvellement épidermique a également été déterminé au niveau des avant-bras de 16 des volontaires, après 28 jours d’application biquotidienne à l’aide d’un dermatoscope.
Essai 6 – Effet du principe actif selon l’invention sur
la densité du derme
Les résultats de la densité de la matrice dermique après 28 jours d’application biquotidienne sont présentés dans le tableau 10 ci-après.
Variation / J0 (%) | |
J28 | |
Placebo | -2,8 |
PA (2%) | 8,6 |
Variation / Placebo (%) | 11,4 |
Ainsi, dès 28 jours de traitement, sur des peaux matures caucasiennes, le principe actif selon l’invention formulé à 2% en émulsion améliore significativement la densité de la matrice dermique de 11,4% en comparaison au placebo.
Essai 7 – Effet du principe actif selon l’invention sur
l’élasticité de la peau
Les résultats de l’élasticité de la peau après 28 jours d’application biquotidienne sont présentés dans le tableau 11 ci-après.
Variation / J0 (%) | |
J28 | |
Placebo | -0,5 |
PA (2%) | 5,7 |
Variation / Placebo (%) | 6,2 |
Ainsi, dès 28 jours de traitement, le principe actif selon l’invention formulé à 2% en émulsion booste significativement l’élasticité de peaux matures caucasiennes de 6,2% en comparaison au placebo. Cet effet a été observé chez 83% des sujets.
Essai 7 – Effet du principe actif selon l’invention sur le renouvellement épidermique
Les résultats sur le renouvellement épidermique après 28 jours d’application biquotidienne sont présentés dans le tableau 12 ci-après.
Renouvellement cellulaire (%) | ||||||
J2 | J4 | J7 | J9 | J11 | J14 | |
Placebo | 7 | 19 | 38 | 50 | 57 | 70 |
PA (2%) | 9 | 22 | 45 | 57 | 64 | 77 |
Variation / Placebo (%) | 22 | 17 | 16 | 15 | 11 | 9 |
Ainsi, Dès 7 jours après application de la DHA, le principe actif selon l’invention formulé à 2% en émulsion favorise le renouvellement épidermique des volontaires caucasiens en augmentant significativement la capacité de leur peau à éliminer la DHA en comparaison au placebo.
Ainsi, le principe actif selon l’invention formulé à 2% en émulsion présente des effets rapides et significatifs sur les dynamiques matricielle et épidermique de volontaires caucasiens matures.
Dès 28 jours de traitement, Le principe actif selon l’invention permet de contrecarrer significativement les effets de l’âge sur des peaux matures :
- la densité de la matrice dermique est augmentée ;
- l’élasticité de la peau est améliorée ;
- le renouvellement épidermique est accéléré.
Essai 8 – Effet du principe actif selon l’invention pour son action anti-rides
Les résultats sont présentés dans le tableau 13 ci-après.
Variation / J0 (%) | ||
J14 | J28 | |
Placebo | 0,0 | -0,7 |
PA (2,5%) | -7,6 | -11,0 |
Variation / Placebo (%) | -7,6 | -10,3 |
Dès 14 jours de traitement, le principe actif selon l’invention formulé à 2% en émulsion réduit significativement le stade de rides de la patte d’oie de peaux caucasiennes matures, en comparaison au placebo de 7,6%. Cet effet se prolonge après 28 jours de traitement avec une diminution significative de 10,3%.
Essai 9 – Effet du principe actif selon l’invention pour sublimer l’éclat du teint
Les résultats sont présentés dans le tableau 14 ci-après.
Variation / J0 (%) | ||
J14 | J28 | |
Rayonnement | 6,4 | 6,7 |
Couleur rose | 12,8 | 15,7 |
Couleur olive | -7,7 | -12,2 |
Etat de fatigue des yeux | -5,5 | -6.9 |
En comparaison au placebo, le principe actif selon l’invention améliore rapidement de manière significative les paramètres caractéristiques de l’éclat du teint de peaux matures caucasiennes. En effet, dès 14 jours de traitement, Le principe actif selon l’invention formulé à 2% en émulsion rend le teint plus lumineux, plus frais et améliore l’aspect bonne mine en réduisant la couleur olive et la fatigue des yeux.
Ces effets s’intensifient après 28 jours d’application biquotidienne avec une augmentation de 6,7% du rayonnement de la peau et de 15,7% de la couleur rose chez respectivement 89% et 78% des volontaires. On observe également une diminution de la couleur olive de 12,2% et de l’état de fatigue des yeux de 6,9% chez 78% des volontaires.
Claims (15)
- Principe actif cosmétique comprenant au moins un extrait hydrolysé deGinkgo biloba, caractérisé en ce que l’extrait comprend des cyclitols.
- Principe actif cosmétique selon la revendication précédente, caractérisé en ce que l’extrait est un hydrolysat filtré deGinkgo biloba .
- Principe actif cosmétique selon l’une des revendications précédentes caractérisé en ce que l’extrait est un hydrolysat enzymatique.
- Principe actif cosmétique selon l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le principe actif est un extrait de feuilles deGinkgo biloba .
- Principe actif cosmétique selon l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce que les cyclitols représentent au moins 5% en poids du poids total de matières sèches de l’extrait.
- Principe actif cosmétique selon l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce que l’extrait comprend des carbohydrates.
- Principe actif cosmétique selon la revendication précédente, caractérisé en ce que 20% en poids du poids total des carbohydrates sont des carbohydrates ayant un degré de polymérisation compris entre 2 et 34.
- Principe actif cosmétique selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu’il est susceptible d’être obtenu par un procédé comprenant les étapes suivantes :
- solubilisation d’au moins 50 g/L deGinkgo bilobadans l’eau, et filtration,
- hydrolyse enzymatique,
- séparation de la phase soluble et insoluble par filtration et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- éventuellement concentration et filtration stérilisante.
- Principe actif cosmétique selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que le principe actif comprend au moins un excipient choisi parmi un conservateur, un antioxydant, un stabilisant, un support d’atomisation, et/ou leur combinaison.
- Principe actif cosmétique selon l’une des précédentes revendications pour son utilisation pour restaurer l’élimination naturelle des fibroblastes sénescents, ou la sénolyse, par les cellules immunitaires.
- Utilisation cosmétique d’un principe actif selon l’une des revendications 1 à 10, destinée à une application topique sur la peau pour réduire les rides et/ou améliorer l’homogénéité du teint, et/ou raviver l’éclat du teint.
- Utilisation cosmétique selon la revendication 11 pour augmenter le renouvellement cellulaire et/ou la densité du derme, et/ou l’élasticité du derme.
- Composition cosmétique pour une application topique comprenant au moins un principe actif selon l’une des revendications 1 à 10 et un milieu physiologiquement acceptable.
- Composition cosmétique selon la revendication précédente, dans laquelle le principe actif représente au moins 0,1% en poids du poids total de la composition.
- Procédé de préparation d’un principe actif selon l’une des revendications 1 à 10 comprenant les étapes suivantes :
- solubilisation d’au moins 50 g/L deGinkgo bilobadans l’eau,
- hydrolyse enzymatique
- séparation de la phase soluble et insoluble par filtration et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- éventuellement concentration et filtration stérilisante.
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Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR2211223A FR3141349A1 (fr) | 2022-10-27 | 2022-10-27 | Principe actif comprenant des cyclitols obtenu d’un extrait de Ginkgo biloba et ses utilisations cosmétiques |
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Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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FR2211223A FR3141349A1 (fr) | 2022-10-27 | 2022-10-27 | Principe actif comprenant des cyclitols obtenu d’un extrait de Ginkgo biloba et ses utilisations cosmétiques |
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---|---|---|---|---|
US5158770A (en) * | 1989-12-29 | 1992-10-27 | Freund Industrial Co., Ltd. | Aqueous solution containing ginkgo leaf extract |
-
2022
- 2022-10-27 FR FR2211223A patent/FR3141349A1/fr active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5158770A (en) * | 1989-12-29 | 1992-10-27 | Freund Industrial Co., Ltd. | Aqueous solution containing ginkgo leaf extract |
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