FR3141332A1 - Ingrédient actif cosmétique issu d’une fraction non volatile d’exsudat de Canarium, plus particulièrement de Canarium schweinfurthii. - Google Patents

Ingrédient actif cosmétique issu d’une fraction non volatile d’exsudat de Canarium, plus particulièrement de Canarium schweinfurthii. Download PDF

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Michel BONNARD
Jean-Pierre Solignac
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Flore Scola
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Flore Scola
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Abstract

TITRE : Ingrédient actif cosmétique issu d’une fraction non volatile d’exsudat de Canarium, plus particulièrement de Canarium schweinfurthii. L’invention porte principalement sur un ingrédient actif destiné à conférer un effet au moins cosmétique non thérapeutique, qui est essentiellement caractérisé en ce qu’il est issu d’une fraction non volatile d’exsudat de Canarium, de préférence de Canarium schweinfurthii. L’invention porte également sur l’utilisation d’un ingrédient actif issu d’une fraction non volatile d’exsudat de Canarium comme agent cosmétique pour un usage par application topique conférant un effet réparateur et/ou anti-inflammatoire.

Description

Ingrédient actif cosmétique issu d’une fraction non volatile d’exsudat deCanarium, plus particulièrement deCanarium schweinfurthii.
L'invention s’inscrit dans le domaine cosmétique en proposant un ingrédient cosmétique naturel issu d’une fraction non volatile d’exsudat, ou oléorésine, deCanarium.
L’invention porte principalement sur un tel ingrédient cosmétique, sur son procédé de préparation et son utilisation pour un usage par application topique conférant un effet cicatrisant et/ou anti-inflammatoire.
ART ANTERIEUR ET INCONVENIENTS DE L’ART ANTERIEUR
Dans le domaine cosmétique et plus particulièrement pour les produits cosmétiques appliqués sur la peau, il est de plus en plus recherché l’utilisation de produits d’origine naturelle respectueux de l’environnement et de l’utilisateur, qui limitent les risques d’allergie et qui sont d’avantage éco-responsables.
OBJECTIF DE L’INVENTION
Dans ce contexte, l’invention propose un nouvel ingrédient actif cosmétique d’origine naturelle, éco-responsable, dont la préparation est facilement reproductible, peu couteuse, et qui présente des propriétés notables de réparation cutanée et anti-inflammatoires.
À cet effet, l’ingrédient actif de l’invention est essentiellement caractérisé en ce qu’il est issu d’une fraction non volatile d’exsudat deCanarium.
L’ingrédient de l’invention peut également comporter les caractéristiques optionnelles suivantes considérées isolément ou selon toutes les combinaisons techniques possibles :
  • l’ingrédient est issu d’un résidu d’hydrodistillation ou de vapodistillation d’exsudat deCanarium.
  • l’ingrédient présente une teneur en lanostérol au moins égale à 55 milligrammes par gramme
  • l’ingrédient est issu d’une fraction non volatile deCanarium schweinfurthii.
L’invention porte également sur une composition cosmétique caractérisée en ce qu’elle comporte au moins un ingrédient selon l’une quelconque des revendications précédentes.
L’invention porte en outre sur l’utilisation d’une fraction non volatile d’exsudat deCanariumcomme agent cosmétique pour un usage par application topique conférant un effet réparateur et/ou anti-inflammatoire.
L’utilisation de l’invention peut également comporter les caractéristiques optionnelles suivantes considérées isolément ou selon toutes les combinaisons techniques possibles :
  • la fraction non volatile est issue d’un résidu d’hydrodistillation ou de vapodistillation d’exsudat deCanarium.
  • la fraction non volatile d’exsudat deCanariumprésente une teneur en lanostérol au moins égale à 55 milligrammes par gramme.
  • la fraction non volatile d’exsudat deCanariumest issue d’un résidu d’hydrodistillation ou de vapodistillation deCanarium schweinfurthii.
L’invention porte enfin sur un procédé de fabrication d’un ingrédient tel que précédemment défini qui comprend au moins les étapes de :
  • hydrodistillation ou vapodistillation de l’exsudat deCanarium
  • obtention d’un résidu d’hydrodistillation formant fraction non volatile deCanarium,
  • extraction du résidu d’hydrodistillation au solvant, ledit solvant étant un solvant polaire autre que l’eau ou non polaire, et
  • obtention de l’ingrédient.
Le procédé de l’invention peut également comporter les caractéristiques optionnelles suivantes considérées isolément ou selon toutes les combinaisons techniques possibles :
  • l’opération d’extraction au solvant est réalisée au moins deux fois, de préférence trois fois.
  • le procédé comporte en outre au moins une étape d’élimination du solvant, par exemple par évaporation sous vide.
  • l’exsudat deCanariumest un exsudat deCanarium schweinfurthii.
DESCRIPTION DETAILLEE DE L’INVENTION
L’invention repose sur la découverte de propriétés cicatrisantes et anti-inflammatoires d’une fraction non volatile d’exsudat deCanarium, en particulier duCanarium schweinfurthii .Cette fraction non volatile permet de fabriquer un ingrédient actif possédant de telles propriétés cicatrisantes et anti-inflammatoires. Le domaine d’application de l’ingrédient est le domaine cosmétique non thérapeutique, plus particulièrement dans le cadre d’un usage par application topique présentant un effet cicatrisant de réparation cutanée et anti-inflammatoire.
Dans le cadre de l’invention, on entend par fraction non volatile d’exsudat deCanariumla fraction ne comprenant pas les composés volatils formant l’huile essentielle. La séparation de ces deux fractions, volatile et non volatile, peut être réalisée par hydrodistillation ou vapodistillation de l’exsudat. On obtient alors d’un côté l’huile essentielle, et de l’autre coté la fraction non volatile, objet de la présente invention. L’utilisation d’un extrait deCanariumconfère à l’ingrédient obtenu un caractère éco-responsable, notamment en raison de l’utilisation d’une ressource végétale renouvelable et de sa collecte non destructive. L’utilisation d’un résidu d’hydrodistillation ou de vapodistillation présente également un caractère éco-responsable puisque les résidus sont normalement considérés comme des déchets, l’invention assurant au contraire la valorisation de ce co-produit.
L’exsudat, ou oléorésine, utilisé dans le cadre de l’invention provient de plantes du genreCanariumqui regroupe une centaine d’espèces d’arbres, et peut être récupérée par incision non destructive de l’écorce de l’arbre. L’invention porte plus particulièrement, sans y être limitée, sur la fraction non volatile deCanarium luzonicum, dont la résine odorante est appelée élémi d’Asie, et la fraction non volatile deCanarium schweinfurthii(élémi d’Afrique). On préfèreraCanarium schweinfurthiipour l’efficacité accrue de ses propriétés comme démontré dans l’exemple 4.
Le procédé de préparation de l’ingrédient de l’invention présente deux étapes principales : une opération d’hydrodistillation ou de vapodistillation, et une opération d’extraction au solvant qui peut être répétée plusieurs fois.
On prélève l’exsudat, ou oléorésine deCanarium schweinfurthiiou deCanarium luzonicumpar incision non destructive. L’exsudat est placé à basse température, par exemple -20°C, et fractionné en morceaux.
Pour une hydrodistillation, les morceaux d’exsudat sont introduits dans le ballon du montage d’hydrodistillation ou dans la curcubite de l’alambic. On utilise par exemple un dispositif de Clevenger. De l’eau distillée, osmosée ou ultrapure est ajoutée jusqu’à recouvrement de l’exsudat et portée à ébullition, laquelle ébullition est maintenue pour que l’hydrodistillation s’effectue pendant une durée comprise entre 2 et 24h.
Le ballon d’hydrodistillation ou la cucurbite est ensuite vidangé à chaud ou à froid pour récupérer le résidu en mélange avec l’eau résiduelle d’hydrodistillation. On laisse alors refroidir le résidu jusqu’à sa solidification à partir de 35°C, puis l’eau résiduelle est éliminée.
Alternativement à une opération d’hydrodistillation menée à pression atmosphérique, on peut procéder à une opération d’hydrodistillation sous vide ou encore de vapodistillation connue de l’homme du métier par mise en contact de l’exsudat avec de la vapeur d’eau.
A l’issu des opérations d’hydrodistillation ou de vapodistillation, le résidu refroidi peut alors être concassé grossièrement, éventuellement séché pour éliminer la présence potentielle d’eau résiduelle et permettre l’obtention d’une poudre par broyage.
L’extraction au solvant de la poudre de résidu ainsi obtenue est réalisée par mise en contact avec un solvant non polaire, par exemple de l’hexane, ou polaire, par exemple de l’éthanol. L’éthanol est préféré puisqu’il peut être d’origine naturelle, issu d’agro-ressources comme par exemple de betteraves ou de céréales. Un mélange de solvants peut également être utilisé. Le rapport entre la poudre de résidu et le solvant, ou le mélange de solvants, est au minimum de 1 gramme de poudre de résidu pour 4 millilitres de solvant mais peut être porté jusqu’à 1 gramme de poudre de résidu pour 100 millilitres de solvant par exemple. L’ensemble est mis sous agitation à vitesse comprise entre 50 et 700 tours par minutes pendant au moins 5 minutes à température ambiante ou à une température supérieure à 25°C en veillant, dans ce dernier cas, à utiliser un montage à reflux pour condenser les vapeurs de solvants dans le milieu réactionnel.
On procède alors à la récupération des résidus solides par centrifugation du milieu pendant au moins 20 minutes entre 2 000 et 6 000 tours par minutes. Alternativement, l’opération de récupération des résidus solides peut être réalisée par filtration.
Le surnageant (centrifugation) ou filtrat (filtration) est ensuite évaporé pour obtenir un extrait sec de résidu sous forme d’une mousse solide. L’évaporation peut être conduite sous vide ou à pression atmosphérique, en chauffant ou à température ambiante ou encore à froid.
Avantageusement, l’opération d’extraction peut être reconduite au moins une fois, de préférence deux fois, sur les résidus solides issus de l’opération de centrifugation ou filtration précédemment indiquée. L’opération d’évaporation du surnageant ou filtrat est alors réalisée une nouvelle fois. On pourra regrouper les surnageants ou filtrats obtenus lors des étapes de récupération des résidus solides et procéder à une nouvelle évaporation pour récupérer un maximum de résidu solide non solubilisé. On obtient alors l’ingrédient de l’invention.
Enfin, si l’on souhaite obtenir l’ingrédient sous forme de poudre, on pourra procéder à une mise en forme par broyage de l’extrait sec issu des opérations d’extraction, de séparation des résidus solides et d’évaporation.
L’ingrédient de l’invention présente des propriétés cicatrisantes et anti-inflammatoire, comme démontré dans les exemples 2, 3 et 4. Dans le domaine de la cosmétique, les propriétés cicatrisantes sont généralement associées à des propriétés de réparation et de régénération cutanée, le processus de régénération cutanée permettant d’assurer la restructuration de l’intégrité et des fonctions de tissus affectés.
L’exsudat deCanarium, comme l’ingrédient de l’invention, est principalement constitué de triterpènes neutres et acides, principalement de lanostérol, β-amyrine et α-amyrine pour les triterpènes neutres, et d’acide élémolique, d’acide élémonique et d’acide tsugarique pour les triterpènes acides. Comme démontré aux exemples 3 et 4, les triterpènes neutres jouent un rôle fondamental dans les propriétés cicatrisantes de l’ingrédient de l’invention. C’est encore plus particulièrement le cas pour le lanostérol présent en plus grande quantité dans la fraction non volatile deCanarium schweinfurthiicomparée à la fraction non volatile deCanarium luzonicum .Avantageusement, pour conférer à ingrédient de l’invention des propriétés optimales, sa teneur en lanostérol est au moins égale à 55 milligrammes par gramme d’ingrédient ou autrement exprimée, au moins égale à 5,5% massique. Les triterpènes neutres et acides de l’ingrédient ne sont pas classifiés comme irritant ou allergisant selon le règlement CE 1272/2008.
L’invention porte également sur une composition cosmétique comportant l’ingrédient de l’invention et se présentant sous une forme appropriée pour une application topique (Exemple 5).
Exemple 1 : Procédé de préparation d’une fraction non volatile d’exsudat de Canarium sc h weinfurthii
Hydrodistillation:
L’exsudat, ou oléorésine deCanarium schweinfurthiiqui a été préalablement prélevé après incision non destructive, est placé à -20°C et fractionné en morceaux. Les morceaux d’exsudat sont introduits dans le panier de la curcubite de l’alambic. De l’eau déminéralisée est ajoutée dans la curcubite jusqu’à recouvrement de l’exsudat. L’eau est ensuite portée à ébullition, laquelle ébullition est maintenue pendant une durée d’hydrodistillation de 8h.
L’eau résiduelle présente dans cucurbite est ensuite vidangée et le panier contenant le résidu d’hydrodistillation est déchargé puis refroidi jusqu’à température ambiante pour solidification du résidu. Le résidu solide est alors récupéré.
Le résidu est concassé grossièrement, l’humidité résiduelle éliminée par séchage à 40°C pendant 12h et enfin un broyage est réalisé jusqu’à l’obtention d’une poudre de résidu.
Extraction au solvant :
L’extraction au solvant de la poudre de résidu ainsi obtenue est réalisée par mise en contact avec de l’éthanol à 96° dans un rapport de 1 gramme de poudre pour 4 millilitres d’éthanol. Le milieu réactionnel est mis sous agitation à une vitesse de 500 rotations par minutes pendant 45 minutes à température ambiante.
On procède alors à la centrifugation du milieu pendant 20 minutes à 4 400 tours par minutes. Le surnageant est ensuite prélevé et évaporé sous vide à une pression inférieure à 60 mbars à 25°C pour obtenir un extrait sec.
Les opérations d’extraction, de centrifugation et d’élimination du solvant sont renouvelées deux fois.
On procède enfin au broyage de l’extrait sec pour obtenir l’ingrédient de l’invention sous forme de poudre.
Exemple 2 : Composition et propriétés anti-inflammatoires et cicatrisantes d e l’ingrédient issu d’ une fraction non volatile d’exsudat de Canarium sc h weinfurthii
L’ingrédient sous forme de poudre obtenu à l’exemple 1 a été analysé. L’identification de ses composés majoritaires ainsi que leur quantification ont été réalisées par chromatographies gaz et liquide, combinées à une détection par spectrométrie de masse et UV-visible. Les composés majoritaires de l’ingrédient ainsi que leur teneur massique sont indiqués dans le Tableau 1 ci-dessous. [Table 1]
% massique
Lanostérol (triterpène neutre) 9.56 ± 1.91
β-amyrine (triterpène neutre) 10.67 ± 0.88
α-amyrine (triterpène neutre) 23.91 ± 0.89
Acide élemolique (triterpène acide) 3.07 ± 0.38
Acide β-elemonique (triterpène acide) 5.47 ± 0.21
Acide tsugarique A (triterpène acide) 3.58 ± 0.15
Tableau 1 : Composition en triterpènes de l’ingrédient
Mise en évidence de l’effet cicatrisant
Les tests sont menés par mesure de la capacité d’une population de cellules monocouches cultivées en absence et en présence de l’ingrédient à fermer une plaie artificielle réalisée par grattage (scratch technique). Cette technique permet de créer manuellement un espace artificiel exempt de cellules dans une monocouche cellulaire. On évalue alors la capacité des cellules à combler cet espace en suivant l’évolution de la surface de la plaie.
Quatre solutions sont testées. Chacune d’entre elle est obtenue par dilution dans un milieu de culture et obtention d’une concentration finale d’éthanol à 1%. La solution témoin ne contient pas l’ingrédient. Les deuxième, troisième et quatrième solutions diffèrent par la concentration de l’ingrédient (respectivement 1,4 μg/ml, 3,5 μg/ml et 7,0 μg/ml).
A J0 (Jour 0), une plaie artificielle est réalisée par grattage du tapis cellulaire. Après lavage pour éliminer les débris cellulaires, les échantillons reçoivent du milieu d’essai DMEM (milieu de Eagle modifié par Dulbecco) comportant l’une des solutions testée (témoin éthanol, solution 1, solution 2 ou solution 3). Pour chaque plaie, une zone spécifique est sélectionnée à l’aide d’un microscope inversé et enregistrée après capture de l’image à l’aide d’une caméra. Après acquisition et enregistrement des images, les cultures sont replacées à l’étuve et incubées à 37°C pendant 2 à 3 jours. Les milieux sont renouvelés tous les jours après mesure biquotidienne des plaies à l’aide d’un système d’analyse d’images.
Les essais sont réalisés sur des kératinocytes épidermiques humains HaCat. Les solutions testées sont introduites au contact des cellules épidermiques immédiatement après la formation des plaies superficielles.
Pour chaque échantillon, la surface des plaies est mesurée par analyse d’images à J0, J1 et J2 donnant respectivement des résultats à T1 (8h), T2 (24h), T3 (32h) et T4 (48h). La surface des plaies aux différents temps T1, T2, T3 et T4 est évaluée en pourcentage de la surface initiale de la plaie considérée (soit 100% à T0). Un pourcentage de cicatrisation associé est également évalué.
Les résultats sont présentés dans le Tableau 2 ci-après. [Table 2]
T0 T1 (8h) T2 (24h) T3 (32h) T4 (48h)
Surf* %Ci** Surf* %Ci** Surf* %Ci** Surf* %Ci** Surf* %Ci**
Témoin éthanol 100±0 0±0 84±3 15,87±2,71 51±3 48,96±1,29 35±3 64,57±1,03 0±0 100,00 ±5,53
Sol 1
(1,4 μg/ml)
100±0 0±0 79±4 20,49±2,88 28±5 71,88±2,62 0±0 99,93±8,50 0±0 100,00±8,41
Sol 2
(3,5 μg/ml)
100±0 0±0 82±1 17,53±1,38 25±4 74,52±4,19 0±0 99,98±1,07 0±0 100,00 ±1,09
Sol 3
(7,0 μg/ml)
100±0 0±0 81±3 18,68±0,74 23±9 76,45±11,11 0±0 100 ±14,27 0±0 100 ±14,27
*Surface des plaies exprimées en % de la surface initiale de la plaie considérée
** Pourcentage de cicatrisation
Tableau 2 : Résultats d’activité cicatrisante de l’ingrédient de l’invention selon trois concentrations différentes
On constate une augmentation substantielle de la cinétique de cicatrisation des plaies sur lesquelles sont appliquées les solutions contenant l’ingrédient de l’invention en comparaison avec le témoin éthanol. L’effet cicatrisant est comparable pour les trois solutions 1, 2 et 3. Les différences enregistrées aux temps T2 et T3 pour les trois solutions 1, 2 et 3 sont statistiquement significatives par rapport au témoin éthanol. Les solutions 1, 2 et 3 permettent d’assurer une fermeture complète de la plaie artificielle à T3 (32h).
Ces résultats montrent que l’ingrédient de l’invention présente un effet cicatrisant notable et est donc capable d’augmenter significativement la cinétique de réparation cutanée.
Mise en évidence de l’effet anti-inflammatoire
Cet essai consiste à évaluer la production de médiateurs de l’inflammation par des kératinocytes humains en réponse à un stress irritatif. La méthode est basée sur la mesure du taux de libération de l’interleukine 6 (IL-6) par des kératinocytes cultivés en en présence de l’ingrédient et stimulés par les UV.
Cinq solutions sont testées. Chacune d’entre elles est obtenue par dilution dans un milieu de culture et obtention d’une concentration finale d’éthanol à 1%. La solution témoin ne contient pas l’ingrédient. Les deuxième, troisième et quatrième solutions diffèrent par la concentration du résidu final (respectivement 1,4 μg/ml, 3,5 μg/ml et 7,0 μg/ml). La cinquième solution est la dexaméthasone (Dexa) (SIGMA Ref D1756) qui est testée à 100μM comme contrôle positif.
A J0, 48h après ensemencement, les cellules sont rincées avec du tampon phosphate salin (PBS) puis exposées aux UVB à travers le PBS. Immédiatement après l’irradiation, le PBS est remplacé par le milieu d’essai DMEM (milieu de Eagle modifié par Dulbecco) comprenant la solution à tester. Les cellules sont replacées à 37°C et incubées 24h.
A J1 (T 24h), les milieux d’incubation sont prélevés et le taux de IL-6 est mesuré avec le kit de dosage ELISA (IL-6 HIGH SENSITIVITY ELISA KIT, ENZO). Parallèlement, les tapis cellulaires correspondants sont rincés avec une solution saline équilibrée de Hank (HBSS) et traités pour un dosage des protéines cellulaires. Une solution de NaOH est ajoutée dans chaque échantillon. Après incubation, les extraits cellulaires sont prélevés puis congelés à -20°C en attente du dosage avec le kit de dosage (BC Protein Assay - PIERCE®).
Les taux bruts d’IL-6 (pg par échantillon) sont déduits par interpolation à partir de la courbe étalon établie avec le standard IL-6 du kit. La moyenne des taux IL-6 est calculés dans chaque échantillon.
Le taux de protéines (μg par échantillon) est déduit par interpolation à partir de la courbe étalon établie avec un standard d’albumine de sérum bovin afin d’exprimer le taux d’IL-6 rapporté au taux moyen de protéines. La moyenne des taux est calculée dans chaque échantillon.
Le taux moyen d’IL-6 est rapporté au taux moyen de protéines. Les valeurs finales sont exprimées en pg/mg.prot. et en pourcentages par rapport au pourcentage en IL-6 induit dans le témoin éthanol. Les résultats sont présentés dans le Tableau 3 ci-après. [Table 3]
IL-6 induit (pg/mg prot.) IL-6 induit (%)
Témoin éthanol 1305,14 100%
Sol 1 (1,4 μg/ml) 643,87 49%
Sol 1 (3,5 μg/ml) 602,05 46%
Sol 1 (7,0 μg/ml) 546,65 42%
Dexa (100μM) 105,10 8%
Tableau 3 : Résultats d’activité anti-inflammatoire de l’ingrédient de l’invention selon trois concentrations d’application différentes
Les taux d’IL-6 enregistrés pour les solutions contenant l’ingrédient de l’invention sont nettement inférieurs au taux d’IL-6 enregistré pour le témoin éthanol. Les différences observées sont statistiquement significatives. On constate également que les résultats sont dépendants de la concentration en ingrédient. Dans les même conditions expérimentales, l’échantillon de Dexa inhibe de 92% la libération d’IL-6 induites par les UVs ce qui confirme la bonne réactivité du système et valide ces essais.
Il est ainsi démontré que l’ingrédient de l’invention présente un effet anti-inflammatoire notable vis-à-vis, au moins, de la production d’IL-6.
Exemple 3 : P ropriétés cicatrisantes de s triterpènes neutres extraits de l’ingrédient issu d’une fraction non volatile d’exsudat de Canarium sc h weinfurthii
On prépare un extrait riche en triterpènes neutres de l’ingrédient obtenu à l’exemple 1 par séparation de l’ingrédient sur gel de silice en chromatographie ouverte, suivie d’une évaporation de la fraction riche en triterpènes neutres. La composition en triterpènes de l’extrait ainsi obtenu est indiquée dans le Tableau 4 ci-dessous. [Table 4]
% massique
Lanostérol (triterpène neutre) 15.89 ± 0.14
β-amyrine (triterpène neutre) 12.72 ± 0.39
α-amyrine (triterpène neutre) 28.59 ± 0.75
Acide élémolique (triterpène acide) 0
Acide β-élémonique (triterpène acide) 0
Acide tsugarique A (triterpène acide) 1.57 ± 0.01
Tableau 4 : Composition en triterpènes de l’extrait riche en triterpènes neutres de l’ingrédient.
Mise en évidence de l’effet cicatrisant
Les tests sont menés de la même façon qu’explicité à l’exemple 2.
Les résultats sont présentés dans le Tableau 5 ci-après. [Table 5]
T0 T1 (8h) T2 (24h) T3 (32h) T4 (48h)
Surf* %Ci** Surf* %Ci** Surf* %Ci** Surf* %Ci** Surf* %Ci**
Témoin éthanol 100±0 0±0 84±3 15,87±2,71 51±4 48,96±1,29 35±3 64,57±1,03 0±0 100,00 ±5,53
Sol 1
(1,0 μg/ml)
100±0 0±0 90±3 10,53±2,70 48±4 51,91±3,37 26±2 74,24±0,37 0±0 100,00±2,37
Sol 2
(2,5 μg/ml)
100±0 0±0 89±3 10,80±3,02 43±4 57,11±4,64 22±2 77,82±2,33 0±0 100,00 ±1,07
Sol 3
(5,0 μg/ml)
100±0 0±0 85±2 14,97±1,67 34±3 65,77±4,60 14±2 85,66±5,41 0±0 100 ±5,35
*Surface des plaies exprimées en % de la surface initiale de la plaie considérée
** Pourcentage de cicatrisation
Tableau 5 : Résultats d’activité cicatrisante de l’extrait riche en triterpènes neutres de l’ingrédient de l’invention selon trois concentrations d’application différentes
On constate une augmentation de la cinétique de cicatrisation des plaies sur lesquelles sont appliquées les solutions contenant l’ingrédient de l’invention en comparaison avec le témoin éthanol. L’effet cicatrisant est dépendant de la concentration des solutions utilisées. Les différences enregistrées aux temps T2, en particulier pour les solutions 2 et 3, et T3 pour les trois solutions sont statistiquement significatives par rapport au témoin éthanol. Les solutions 1, 2 et 3 permettent par ailleurs d’assurer une fermeture complète de la plaie artificielle à T4 (48h).
Ces résultats montrent que les triterpènes neutres de l’agent actif de l’invention participent activement à l’effet cicatrisant de l’ingrédient.
Exemple 4 : Comparaison des p ropriétés cicatrisantes d e l’ingrédient issu d’une fraction non volatile de Canarium schweinfurthii et de l’ingrédient issu d’une fraction non volatile d’un résidu d’exsudat de Canarium luzonicum
L’ingrédient sous forme de poudre issu de l’exsudat deCanarium schweinfurthii est obtenu selon l’exemple 1 et l’ingrédient sous forme de poudre issu de l’exsudat de deCanarium luzonicumest obtenu selon les mêmes conditions opératoires que celles de l’exemple 1 à partir d’un exsudat de deCanarium luzonicum.
La composition en triterpènes des deux ingrédients est indiquée dans le Tableau 6 ci-dessous, ainsi que les résultats de variabilité obtenus à partir d’une pluralité d’échantillons d’ingrédients. [Table 6]
Canarium schweinfurthii Canarium luzonicum
(% massique du résidu de l’exemple 1) Variabilité (% massique) (% massique du résidu de l’exemple 1) Variabilité (% massique)
Lanostérol (triterpène neutre) 9,56 ± 1.91 entre 6,62 et 10,66 2,85 ± 0,37 entre 2,12 et 3,57
β-Amyrine (triterpène neutre) 10,67 ± 0.88 entre 7,83 et 14,57 19,49 ± 0,57 entre 18,37 et 20,61
α-Amyrine (triterpène neutre) 23,91 ± 0.89 entre 18,99 et 29,15 28,32 ± 0,66 entre 27,03 et 29,61
Acide élémolique (triterpène acide) 3,07 ± 0.38 entre 1,45 et 3,85 9,37 ± 0.47 entre 8,45 et 10,29
Acide β-élémonique (triterpène acide) 5,47 ± 0.21 entre 2,49 et 6,69 4,48 ± 0.22 entre 4,05 et 4,91
Acide tsugarique A (triterpène acide) 3,58 ± 0.15 entre 1,02 et 3,87 2.06 ± 0.11 entre 1,84 et 2,27
Tableau 6 : Composition en triterpènes des ingrédients issus deCanarium schweinfurthii et deCanarium luzonicum
Comparaison de l’effet cicatrisant
Les tests sont menés sur les deux ingrédients de la même façon qu’explicité à l’exemple 2.
Les résultats sont présentés dans le Tableau 7 ci-après, sont issus d’essais sur trois plaies et sont exprimés en pourcentage de cicatrisation. [Table 7]
T0 T1 (8h) T2 (24h) T3 (32h) T4 (48h)
C.S* C.L* C.S* C.L* C.S* C.L* C.S* C.L* C.S* C.L*
Sol 1
(0,014 μg/ml)
0±0 0±0 25,01±0,42 21,02±0,23 100,00±3,44 85,66±8,14 100,00±3,44 100,00±6,23 100,00±3,44 100,00±6,23
Sol 2
(0,07 μg/ml)
0±0 0±0 24,77±0,72 24,99±0,56 100,00±4,11 80,31±4,11 100,00±4,11 100,00±2,35 100,00±4,11 100,00±2,35
C.S* :Canarium schweinfurthii
C.L* :Canarium luzonicum
Tableau 7 : Comparaison des résultats d’activité cicatrisante des ingrédients respectivement issus d’exsudats deCanarium schweinfurthii et deCanarium luzonicumselon deux concentrations d’application différentes
Si les solutions 1 et 2 issues deCanarium schweinfurthiiet deCanarium luzonicumpermettent d’assurer une fermeture complète de la plaie artificielle au plus à T3(48h), on constate une cinétique de cicatrisation significativement plus importante pour le résidu d’exsudat deCanarium schweinfurthiipour lequel, et pour les deux concentrations testées, la cicatrisation est de 100% à T2 alors qu’elle est, respectivement et pour ce même temps, de 86% et 80% pour le résidu d’exsudat deCanarium luzonicum .
En corrélation avec la composition en triterpènes de ces deux résidus (Tableau 6), et étant entendu qu’il a été démontré à l’exemple 3 que les triterpènes neutres étaient activement impliqués dans l’effet cicatrisant, il apparait que la teneur plus élevée en lanostérol dans le résidu d’exsudat deCanarium schweinfurthiipermet d’assurer un accroissement des propriétés cicatrisantes. Cela est d’autant plus appuyé par le fait que les teneurs en β-amyrine et α-amyrine sont plus élevées dans le résidu d’exsudat deCanarium luzonicum .
Il en résulte que l’ingrédient issu de la fraction non volatile de l’exsudat deCanarium schweinfurthiiprésente des propriétés cicatrisantes plus importantes que l’ingrédient issu de la fraction non volatile de l’exsudat deCanarium luzonicum, conséquence, au moins, de sa plus importante teneur en lanostérol.
Exemple 5 : Composition cosmétique comprenant l’ingrédient de l’invention
Un exemple de formulation de composition cosmétique est indiqué dans le Tableau 8 ci-dessous. Le nom de chaque composant tel qu’il est référencé dans la liste INCI (International Nomenclature of Cosmetic Ingredients) est indiqué dans le Tableau, ainsi que le pourcentage massique associé. [Table 8]
Nom INCI % massique
Huile de pépins de raisin VITIS VINIFERA SEED OIL 20.0 %
Alcool cétéarylique CETEARYL ALCOHOL 2.0 %
Eau AQUA QSP 100%
Ester de sucre SUCROSE STEARATE 2.0 %
Gomme xanthane XANTHAN GUM 0.3 %
Acide benzoïque BENZOIC ACID 0.5 %
C. schweinfurthii* 0.1 à 2.0 %
*Ingrédient de l’invention préparé selon l’exemple 1
Tableau 8 : Formulation de la composition cosmétique de l’invention

Claims (11)

  1. Ingrédient actif cosmétique comprenant un extrait deCanarium schweinfurthii, caractérisé en ce que l’extrait est une fraction non volatile d’exsudat deCanarium schweinfurthii.
  2. Ingrédient actif selon la revendication 1, caractérisé en ce que l’extrait est un résidu d’hydrodistillation ou de vapodistillation d’exsudat deCanarium schweinfurthii.
  3. Ingrédient actif selon la revendication précédente, caractérisé en ce qu’il présente une teneur en lanostérol au moins égale à 55 milligrammes par gramme.
  4. Composition cosmétique, caractérisée en ce qu’elle comporte au moins un ingrédient selon l’une quelconque des revendications précédentes.
  5. Ingrédient actif comprenant un extrait deCanarium,ledit extrait est une fraction non volatile d’exsudat deCanarium, pour son utilisation pour un usage par application topique conférant un effet réparateur et/ou anti-inflammatoire.
  6. Ingrédient actif pour son utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que l’ingrédient est un résidu d’hydrodistillation ou de vapodistillation d’exsudat deCanarium.
  7. Ingrédient actif pour son utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que l’ingrédient présente une teneur en lanostérol au moins égale à 55 milligrammes par gramme.
  8. Ingrédient actif pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 5 à 7, caractérisée en ce que l’ingrédient est un résidu d’hydrodistillation ou de vapodistillation deCanarium schweinfurthii.
  9. Procédé de préparation d’un ingrédient selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu’il comprend au moins les étapes de :
    • hydrodistillation ou vapodistillation de l’exsudat deCanarium schweinfurthii
    • obtention d’un résidu d’hydrodistillation formant fraction non volatile deCanarium schweinfurthii, et
    • extraction du résidu d’hydrodistillation au solvant, ledit solvant étant un solvant polaire autre que l’eau, ou non polaire, et
    • obtention de l’ingrédient.
  10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que l’opération d’extraction au solvant est réalisée au moins deux fois, de préférence trois fois.
  11. Procédé selon l’une quelconque des revendications 9 et 10, caractérisé en ce qu’il comporte en outre au moins une étape d’élimination du solvant, par exemple par évaporation sous vide.
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