FR3117128A1 - Produit comprenant au moins une microalgue capable d’être cultivée en eau salée - Google Patents

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microalgae
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Alain Guillou
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Odontella
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Odontella
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    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01GHORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G33/00Cultivation of seaweed or algae
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12Unicellular algae; Culture media therefor

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Abstract

L’invention concerne un produit destiné à la consommation humaine ou animale, sous forme d’aliment ou de boisson ou de complément alimentaire, comprenant au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, et/ou au moins un extrait d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis.

Description

Produit comprenant au moins une microalgue capable d’être cultivée en eau salée
L’invention concerne des produits destinés à l’alimentation humaine ou nutrition animale, en particulier sous forme d’aliment, de boisson ou de complément alimentaire, comprenant des microalgues spécifiques.
État de l’art
Les microalgues sont de plus en plus utilisées pour de nombreuses applications, du fait de leurs propriétés remarquables qui varient d’une microalgue à une autre.
Toutefois, pour pouvoir être utilisées pour l’alimentation humaine, les microalgues doivent bénéficier d’une autorisation règlementaire.
Actuellement, seules des souches de microalgues d’eau douce sont autorisées.
Parmi les microalgues d’eau douce, la plus connue est la spiruline, qui présente un profil protéinique élevé.
Certaines chlorelles sont également autorisées pour l’alimentation humaine. La taxonomie des Chlorelles évolue régulièrement depuis la découverte de Chlorella vulgaris en 1890 par Beijerinckle. En conséquence, les 3 espèces de Chlorella homologuées comme consommées en Europe avant 1997, à savoir Chlorella pyrenoidosa, Chlorella vulgaris et Chlorella luteoviridis, ont subi ces multiples révisions : certaines espèces ont été retirées du genre Chlorella, d’autres ont été transférées vers de nouveaux genres.
Les Chlorelles autorisées en alimentation humaines sont des souches cultivées dans l’eau douce, leurs profils en acides aminés essentiels et surtout en acides gras ne sont pas particulièrement intéressants pour l’alimentation humaine. Il en est de même pour Euglena, également autorisée pour l’alimentation humaine au Japon souche d’eau douce, cultivée en eau douce, qui possède un profil en acides gras peu intéressant sur l’aspect nutritionnel.
Les microalgues particulièrement intéressantes pour la nutrition humaine sont des microalgues marines notamment du fait de leur profil lipidique très différent de celui des microalgues d’eau douce. En particulier, les acides gras polyinsaturés à longues chaines de carbone sont principalement présents chez les souches marines. En effet, la majorité des microorganismes marins utilisent ces molécules notamment pour maintenir la plasticité, fluidité des membranes cellulaires en milieux salins et l’intégrité cellulaire lors de chocs osmotiques en milieux euryhalins. On peut citer le cas des Thraustochytrides qui font l’objet de cultures cellulaires intensives pour la production d’huile riche en DHA (acide docosahexaénoïque), ces Thraustochytrides proviennent de zones de mangroves intertidales. Grace au DHA, elles se sont adaptées pour faire face aux amples différences de salinité typique de ses zones. De même, les microalgues marines utilisent les acides gras polyinsaturés à longues chaines de carbone pour résister à des températures basses. On peut citer le cas des pingouins sur la banquise dont les pattes résistent au gel grâce à la présence de colonies de microalgues marines hautement productrices d’acides gras polyinsaturés à longues chaines de carbone.
Or, les acides gras polyinsaturés à longues chaines sont d’une grande importance pour l’équilibre et fonctionnement physiologique des humains ou des animaux. Le DHA est très difficilement synthétisé dans notre organisme avec de faibles rendements. Le cerveau des humains contient 60 % d’acide gras dont 14% de DHA et leur rétine est constituée à 93% de DHA.
Quelques champignons marins et quelques bactéries marines sont capables de produire des acides gras polyinsaturés à longues chaines de carbone, mais ce sont essentiellement les microalgues marines qui en sont les principales productrices. En servant d’aliment de base pour le zooplancton elles transmettent ces molécules à l’ensemble de la chaine alimentaire présente dans les océans.
L’être humain et l’animal ont un besoin important en acides gras polyinsaturés à longues chaines de carbone. Par exemple, en Europe, le besoin en apport journalier recommandé par les agences sanitaires est de 250 mg par jour, ce qui correspond à environ 250 000 tonnes annuel.
L’apport en acides gras polyinsaturés à longue chaîne des populations humaines à considérablement diminué depuis les 30 dernières années, principalement du fait de l’accroissement de la part de produits alimentaire issu de l’aquaculture marine. Les produits d’élevage n’apportant qu’une faible proportion de DHA et EPA comparativement aux produits sauvages issus de la pêche.
Un des objectifs de l’invention est donc de proposer des produits à base de microalgues marines, en particulier pour répondre au besoin d’apports en acides gras à longues chaînes et en acides aminés essentiels de l’être humain et de l’animal.
Or, jusqu’à aujourd’hui l’utilisation de microalgues marines en alimentation humaine n’existe pas. Même si en Europe deux souches de microalgues marines Odontella aurita et Tetraselmis chuii ont bien obtenu un agrément “novel food” (nouvel aliment) pour l’alimentation humaine, cet agrément ne concerne que des matrices d’utilisation très réduites puisqu’elles ne sont autorisées que pour le segment alimentaire des pâtés types terrines et quelques condiments.
De plus, ces microalgues sont des diatomées très difficiles à produire et donc non utilisables à l’échelle industrielle.
Il existe donc un besoin important en produits destinés à la consommation humaine ou animale à base de microalgues marines palliant les inconvénients de l’art antérieur.
Pour y répondre, l’invention propose d’utiliser des souches de microalgues spécifiques d’eau douce, préférentiellement des microalgues d’eau douce autorisées en alimentation humaine ou qui pourraient être autorisées (notamment du fait de l’évolution de la taxonomie), et de les acclimater à l’eau salée pour en faire des souches présentant les profils nutritionnels, notamment en acides gras et/ou en acides aminés, propres aux souches marines. Ces souches d’eau douce marinisées, du fait de leur adaptation à l’eau salée, présentent en effet des profils lipidiques et protéiques spécifiques de souches marines et peuvent être utilisées pour apporter des éléments nutritionnels essentiels pour l’être humain ou l’animal.
En particulier, l’invention vise l’utilisation de microalgues d’eau douce marinisées, c’est-à-dire capables d’être cultivées dans de l’eau salée, lesdites microalgues étant des microalgues de la classe des Trebouxiophyceae ou de la classe des Chlorophyceae choisies parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis et leurs mélanges.
Certaines Trebouxiophyceae et Chlorophyceae d’eau douce sont industriellement cultivées dans le monde et notamment la production annuelle de biomasse sèche de chlorelle dépasse les 2 500 tonnes.
Tous les travaux concernant l’alimentation humaine réalisés jusqu’à présent sur les Trebouxiophyceae et les Chlorophyceae et leurs méthodes de culture concernent l’utilisation d’eau douce et de souches qui proviennent d’environnent sans sel, d’une part parce que la très grande majorité des Trebouxiophyceae et des Chlorophyceae recensées proviennent d’environnent sans sel et d’autre part, parce que les technologies de production de souches en eau saline nécessitent de modifier de façon compliquée les technologies connues pour la production en eau douce.
Or, de façon surprenante, selon l’invention, les microalgues Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum ne sont jusqu’alors jamais décrites dans des produits de consommation humaine comme cultivées en milieu marin ou euryhalin, alors que, lorsqu’elles sont adaptées à l’eau de salée, elles présentent des caractéristiques remarquables, différentes de celles des souches d’eau douce, qui permettent une utilisation spécifique. En particulier, selon l’invention, les profils en lipides des microalgues dépendant principalement de la salinité de l’eau, les microalgues marines ou euryhalines comprenant des acides gras polyinsaturés à longue chaîne contrairement aux microalgues d’eau douce qui n’en produisent pas.
C’est pourquoi l’invention a pour objet un produit destiné à la consommation humaine ou animale, sous forme d’aliment ou de boisson ou de complément alimentaire, comprenant au moins une souche d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, et/ou au moins un extrait d’au moins une souche d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis.
Avantageusement, un tel produit peut être utilisé en alimentation ou comme complément alimentaire chez l’être humain ou l’animal, notamment comme exhausteur de goût, source de protéines d’origine marine et/ou source de lipides d’origine marine et/ou source de minéraux et d’oligo-éléments d’origine marine, dans les produits alimentaires, des boissons ou des compléments alimentaires.
Les Trebouxiophyceae et Chlorophyceae peut être cultivées en conditions autotrophes en plein air ou en photobioréacteur et en conditions hétérotrophes en cuve par fermentation en présence de matières organiques mais sans lumière. Elles peuvent aussi croitre en mixotrophie, c’est-à-dire en présence de matières organiques et d’un peu de lumière. Dans ce cas, la lumière n’intervient pas comme source d’énergie mais agit notamment sur des plastes pour activer des fonctions physiologiques spécifiques et notamment activer la voie lévulinique.
Les techniques de productions de plusieurs microalgues Trebouxiophyceae et Chlorophyceae d’eau douce tant en autotrophie, hétérotrophie que mixotrophie sont maintenant considérées comme parfaitement maitrisées. Adapter les souches Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis à une eau salée est possible dans la mesure où l’on acclimate graduellement les souches.
Néanmoins, l’utilisation de l’eau de salée présente une grande contrainte pour les techniques de production existantes du fait de son caractère très corrosif. Les techniques de production qui permettent d’atteindre des coûts de productions faibles concernent la production hétérotrophe ou mixotrophe en fermenteur métallique de type inox. L’eau salée du fait de sa capacité oxydo-réductrice attaque tant les cuves que les électrodes, tuyaux, canalisations, valves et rapidement les installations se dégradent et la stérilisation et l’axénie de la culture devient alors difficile à conserver voire impossible.
Il est par conséquent nécessaire de proposer une nouvelle approche de culture des microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, permettant de palier à la corrosion et contaminations des cultures.
La présente invention concerne donc préférentiellement les souches citées cultivées par hétérotrophie ou mixotrophie, dans des systèmes résistant à la corrosion des ions chlorures qui provoquent une importante corrosion sur de nombreux matériaux tels que les métaux. Les souches de microalgues selon l’invention sont produites en bioréacteur ne présentant pas de matériaux corrosifs, car à usage unique.
A cet effet, l’invention a aussi pour objet un procédé de production de microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée et cultivée ensuite par hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteurs présentant une ou plusieurs poches à usage unique, stériles, en matériau(x) non métallique(s) résistants à la corrosion et à l’oxydoréduction.
Avantageusement un tel procédé permet de produire de façon efficace et rentable les microalgues Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis.
L’invention est à présent décrite en détails.
Description détaillée de l’invention
L’invention a donc pour objet un produit destiné à la consommation humaine ou animale, sous forme d’aliment ou de boisson ou de complément alimentaire, comprenant au moins une souche de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis et/ou au moins un extrait d’au moins l’une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée.
Par microalgue d’eau douce ou souche de microalgue d’eau douce « acclimatée à l’eau salée » ou « marinisée » selon l’invention on entend une souche de microalgue qui est capable d’être cultivée dans l’eau salée, qui s’est adaptée pour être cultivée dans de l’eau salée, alors qu’il s’agit initialement d’une souche cultivée en eau douce. La souche cultivable en eau douce a été acclimatée à l’eau salée, pour pouvoir être cultivée en eau salée, de façon à développer un profil nutritionnel, notamment en acides gras et/ou en acides aminés essentiels, proche ou identique à celui des microalgues marines.
Le produit selon l’invention peut être tout type d’aliments tels que notamment des pâtes, barres de céréales, plats préparés, plats cuisinés, plats sous forme de poudres, de concentrés humides pâtes ou liquides ou de macérât huileux ou aqueux. Préférentiellement, le produit est un aliment choisi parmi les produits céréaliers, les produits de boulangerie, les gâteaux sucrés ou salés, les biscuits sucrés ou salés, les sucreries, les soupes, les sauces, les chips de légumes, les condiments, les huiles, les plats cuisinés, les produits transformés à partir de produits marins, les laitages. Il peut s’agir également d’une boisson telle que notamment une boisson choisie parmi les sodas, les jus de fruits, les boissons énergétiques, les eaux aromatisées, les sirops ou les boissons alcoolisées. Il peut s’agir aussi d’un complément alimentaire pouvant se présenter notamment sous forme de gélules souples ou dures, de cachets ou comprimés compressés choquables ou effervescents, de bonbons, de sucreries à mâcher ou d’ampoules buvables.
Préférentiellement le produit selon l’invention comprend entre 0,1 et 99 % en poids de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce de la classe des Trebouxiophyceae et ou de la classe des Chlorophyceae, acclimatée à l’eau salée, et choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis et/ou d’un extrait d’au moins une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée.
Pour se protéger de l’eau salée, les souches marinisées de microlagues obtenues à partir de souches d’eau douce, présentent des acides aminés polyinsaturés à longues chaines, tels que EPA et/ou DHA, qui rendent leurs membranes plus souple et plus adaptée à l’osmorégulation. Aussi, très préférentiellement, la ou les microalgues de la classe des Trebouxiophyceae et ou de la classe des Chlorophyceae d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie(s) parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, et/ou le ou les extraits d’au moins une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée, présente(s) dans le produit selon l’invention, comprennent de l’EPA et/ou du DHA, de façon préférée au moins 0,1% d’EPA et/ou au moins 0,1% de DHA en poids de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait, encore plus préférentiellement au moins m 0,2% d’EPA et/ou au moins 0,2% de DHA.
Le produit selon l’invention peut être caractérisé également par une saveur particulière apportée par la présence de microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis. En effet ces microalgues peuvent être utilisées comme rehausseur et/ou exhausteur de goût dans des produits alimentaires ou des boissons. Ainsi l’invention vise également l’utilisation de biomasse d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis et/ou d’au moins un extrait de ladite microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, comme rehausseur et/ou exhausteur de goût dans des produits alimentaires ou des boissons.
Selon un autre aspect, du fait de la composition particulière et remarquable des microalgues d’eau douce acclimatées à l’eau salée choisies parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, l’invention a également pour objet l’utilisation de biomasse choisie parmi une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, et/ou d’au moins un extrait de ladite microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, comme source de protéines, préférentiellement de protéines d’origine marine, et/ou de lipides, préférentiellement de lipides d’origine marine et/ou source de polysaccharides, préférentiellement de polysaccharides d’origine marine, et/ou de minéraux et/ou oligo-éléments, préférentiellement de minéraux et/ou d’oligo-éléments d’origine marine, dans des produits alimentaires ou des boissons ou des compléments alimentaires.
Ainsi, l’invention permet d’apporter à l’homme ou l’animal des lipides présents exclusivement dans les microalgues marines ou euryhalines comme notamment les polyinsaturés de la famille des oméga-3 (DHA et/ou EPA en particulier). De plus, les fortes teneurs en protéines de grande qualité nutritive, les polysaccharides particuliers et les nombreux oligo-nutriments de ces microalgues marines permettent d’obtenir des produits hautement nutritifs et très faiblement contaminés.
Préférentiellement, les souches utilisées selon l’invention sont obtenues à partir de souches d’eau douce qui sont acclimatées à l’eau salée par une dilution très lente du milieu de culture en faisant augmenter la salinité graduellement. De façon préférée, les souches utilisées sont obtenues à partir de souches d’eau douce qui sont acclimatées à l’eau salée par une dilution dans de l’eau dont on fait augmenter la salinité graduellement en allant préférentiellement de 0/1000 à maximum 34/1000 mais, préférentiellement environ 20/1000. De façon préférée l’acclimatation est réalisée sur 3 à 8 mois, préférentiellement environ 5 mois. Ceci permet de sélectionner graduellement les souches de plus en plus résistantes au sel jusqu’à la salinité recherchée. Selon un mode de réalisation adaptée, l’acclimatation se fait, selon les souches, par accroissement de la salinité dans le milieu de culture au minimum de 0,15 g à 0,4 g de sel par 24 heures. L’acclimatation permet de sélectionner graduellement des souches qui développent un métabolisme propre au milieu marin.
Préférentiellement, les souches citées utilisées selon l’invention sont acclimatées dans des contenants allant de plusieurs dizaines de millilitres à plusieurs litres avec un mode de culture autotrophe ou mixotrophe.
Préférentiellement, les souches citées utilisées selon l’invention sont acclimatées dans des contenants allant de plusieurs dizaines de millilitres à plusieurs litres dans lesquels une solution de 0,15g à 0,4 g de sel est apportée par période de 24 h à raison de 10% du volume de culture initial.
Ainsi, selon un mode de réalisation, l’invention vise un produit caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées, préférentiellement en introduisant dans le milieu de culture une solution de 0,15g à 0,4 g de sel par période de 24 h à raison de 10% du volume de culture initial.
De façon préférée, le produit selon l’invention est caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées de 0/1000 à maximum 34/1000.
Préférentiellement, le produit selon l’invention est caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées pendant 3 à 8 mois.
Selon un mode de réalisation, la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées de façon à sélectionner les souches de plus en plus résistantes au sel.
Selon une variante, l’acclimatation peut être réalisée notamment en ajoutant solution d’eau de mer ou une solution d’eau de mer reconstituée. Ainsi la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en introduisant dans le milieu de culture une solution d’eau de mer ou une solution d’eau de mer reconstituée.
L’invention a également pour objet le procédé d’acclimatation tel que décrit précédemment.
Préférentiellement, le milieu de culture des microalgues acclimatées à l’eau salée selon l’invention, est enrichi en solution nutritive adaptée au mode de culture autotrophe ou mixotrophe.
Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, la ou les microalgues d’eau douce acclimatée(s) à l’eau salée, et choisie(s) parmi les souches d’eau douce acclimatées à l’eau salée du genre Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, présente(s) dans le produit selon l’invention ou utilisées pour la production d’extraits(s) présent(s) dans le produit selon l’invention, ont été produites par hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteurs présentant une ou plusieurs poches, sacs et/ou chambres de culture à usage unique, stériles, en matériau(x) thermostables non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction à usage unique, stériles, en matériau(x) non métallique(s) résistants à la corrosion et à l’oxydoréduction.
L’invention a également pour objet un procédé de production de microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, susceptibles d’entrer dans la composition d’un produit selon l’invention, par hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteur(s) présentant une ou plusieurs poches, sacs ou chambres de culture à usage unique, stériles, en matériau(x) thermostables non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction.
Le bioréacteur est préférentiellement un appareil capable d’intégrer dans un récipient, un support permanent en acier inoxydable équipé d'une ceinture chauffant la ou les poches, sacs et/ou chambres de cultures de culture à usage unique.
Chaque bioréacteur comporte donc au moins une poche, sac ou chambre de culture à usage unique c’est-à-dire qui contient ou présente au moins une poche, un sac ou une chambre de culture stérile conçus en matériel polymérique thermostable souple ou rigide résistant jusqu’à 300°C et notamment conçus à partir de polymères thermoplastiques thermostables pouvant subir une stérilisation.
La poche, sac ou chambre de culture est stérile car constitué de plastiques comme des films polyéthylène mono couche ou multicouches thermostables ou de polymères thermoplastiques thermostables.
Le ou les matériau(x) non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction peuvent être choisi(s) parmi les plastiques et les films polyéthylène mono couche ou multicouches.
Les poches, sacs et/ou chambres de culture jetables permettent avantageusement de limiter l’oxydation, la contamination, les coûts et délais inféodés aux procédés connexes à la production (nettoyage et stérilisation notamment) et aux actions d’assurance-qualité associées (qualification des équipements, validation des procédés connexes…), optimisation des flux et des cycles de production.
Les poches, sacs et/ou chambres de culture peuvent présenter des volumes de quelques litres à plusieurs milliers de litre.
A la fin du cycle de culture (batch) la poche est vidée, la biomasse est récupérée et la poche éliminée.
Le procédé selon l’invention, utilise préférentiellement de l’eau de mer ou de l’eau de mer reconstituée.
Selon un mode de réalisation particulier de l’invention, des cultures préalables sont préférentiellement réalisées dans des petites cuves en verre, avec agitation sous éclairement, puis transférées en fermenteur contenant un sac stérile plastique en polyéthylène. Deux étapes d’amplification en Erlenmeyer et une étape d’amplification en pré-fermenteur précèdent la culture à l’échelle de fermentation. En fin de culture la biomasse est collectée, le sac vidé est éliminé.
Avantageusement, ce procédé permet de contourner les problèmes d’oxydation et de contamination due à l’utilisation de l’eau de mer la production de microalgues et notamment de Chlorelles marines ou euryhalines.
L’invention est à présent illustrée par des exemples non limitatifs de produits et procédés selon l’invention.
Exemple 1 : exemple de p rocédé de culture par hétérotrophie d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer selon l’invention.
Un exemple de procédé d’obtention d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovir selon l’invention est décrit en suivant.
I. Acclimatation
L’acclimatation à l’eau salée est réalisée par accroissement de la salinité dans le milieu de culture. Au départ la souche est cultivée dans de l’eau douce sans sel, puis on ajoute au minimum de 0,15 g à 0,4 g de sel par 24 heures à raison de 10% du volume de culture initial.
II. Conditions de culture
La culture peut être réalisée selon tout procédé adapté, comme par exemple le procédé particulièrement adapté aux chlorelles par exemple décrit dans le tableau 1.
En sortie du bioréacteur la biomasse peut être centrifugée puis séchée à 10 tours minutes et 80°C sur sécheur à cylindre.
Un exemple de composition de milieu de culture P1 par hétérotrophie pouvant être utilisé est décrit dans le [Tableau 2].
Exemple 3 : exemples d’extraits lipidiques
Les extraits selon l’invention peuvent être issus de macération de biomasses déshydratées ou fraiches ou par extraction au CO2 super critique ou pression à froid d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, selon l’invention contenant les composés lipidiques (lipides neutres et polaires, pigments chlorophylliens et caroténoïdes) de souches marines et destinés à entrer dans la formulation de préparations alimentaires, de plats cuisinés, de boissons ou de compléments alimentaires.
Exemple 4 : Extraits protéiques
Les extraits selon l’invention peuvent être des extraits protéiques d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, selon l’invention obtenue comme coproduit de l’extraction des lipides et des pigments (pression à froid ou CO2 supercritique) et destiné à entrer dans la formulation de préparations alimentaires, de plats cuisinés, de boissons ou de compléments alimentaires.
Exemple 5 : Soupe liquide ou déshydratée
Un exemple de produit selon l’invention est une soupe contenant de 5 à 90 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pure ou en mélange avec des ingrédients alimentaires (aromates, amidons, épices, algues, etc.) et/ou de microalgues marines (Odontella aurita, Tetraselmis chuii, Nannochloropsis sp., etc.).
Exemple 6 : Biscuits salés
Un exemple de produit selon l’invention est un biscuit salé contenant de 5 à 70 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, selon l’invention pure ou en mélange avec des ingrédients alimentaires (farines de céréales ou de protéagineux, épices et aromates, liants, etc.) et/ou de microalgues marines (Odontella aurita, Tetraselmis chuii, Nannochloropsis sp., etc.).
Exemple 7 : Bar re s énergétiques
Un exemple de produit selon l’invention est une barre énergétique contenant de 5 à 70 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, selon l’invention pure ou d’un extrait protéique en mélange avec des ingrédients alimentaires (Protéines de céréales ou de protéagineux, noix, fruits déshydratés, sucre, liants, etc.) et/ou de microalgues marines (Odontella aurita, Tetraselmis chuii, Nannochloropsis sp., etc.).
Exemple 8 : Smoothies
Un exemple de produit selon l’invention est un smoothie contenant de 5 à 40 % de poudre ou d’une pâte (30 à 50 % de matière sèche) d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, selon l’invention ou d’un extrait protéique de de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, et/ou Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum Chlorella saccharophila Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii Auxenochlorella protothecoides Parachlorella kessleri,Chlorella kessleriChlorella protothecoides Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanusChlorella lobophra en mélange avec des ingrédients alimentaires (fruits, lait ou boissons végétales, sucre, liants, etc.).
Exemple 9 : Pains et pâtes alimentaires (fraiches ou sèches)
Un exemple de produit selon l’invention est un pain ou des pâtes alimentaires contenant de 2 à 25 % de poudre ou d’une pâte (30 à 50 % de matières sèches) d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, selon l’invention ou d’un extrait protéique de de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, , Chlorella luteovirdis, et/ou d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, selon l’invention en mélange avec des ingrédients alimentaires (farines de céréales ou de protéagineux, amidon et/ou levure et/ou sel, etc.).
Exemple 10 : Plats cuisinés surgelés
Un exemple de produit selon l’invention est un plat cuisiné (type lasagne, hachis Parmentier, pizza, etc.) contenants de 2 à 20 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, selon l’invention pure ou d’un extrait protéique et/ou de microalgues nommées dans l’exemple 9 en mélange avec les ingrédients alimentaires utilisés traditionnellement pour la confection de ces plats.
Exemple 1 1 : Huile
Un exemple de produit selon l’invention est une huile obtenue par pression à froid ou par extraction au CO2 super critique de biomasses déshydratées d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, destinées à des assaisonnements ou des préparations alimentaires. Huile pure ou contenant de 1 à 90 % d’huile d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis,de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, , Chlorella luteovirdis, et/ou pure et/ou en mélange avec d’autres huiles et/ou d’autres ingrédients alimentaires et/ou de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, , Chlorella luteovirdis, e pure ou en mélange avec de la poudre d’Odontella aurita et/ou de la poudre de Tetraselmis chuii et/ou Nannochloropsis sp. ou en mélange avec de la poudre de spiruline.
Exemple 1 2 : Sodas
Un exemple de produit selon l’invention est un soda contenant 2 à 20 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis,de de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, , Chlorella luteovirdis, ou d’extrait protéique (60 à 90 % de la matière sèche) en mélange avec de l’eau pétillante (naturelle ou avec adjonction de CO2 gazeux) et des extraits de fruits et/ou sucre et/ou de colorants alimentaires.
Exemple 1 3 : Jus de fruit
Un exemple de produit selon l’invention est un jus de fruits additionné de 2 à 20 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, ou d’extrait protéique (60 à 90 % de la matière sèche) en mélange avec des ingrédients alimentaires (sucre et/ou pectine et/ou colorants alimentaires).
Exemple 1 4 : Compléments alimentaire sous forme de gélules rigides ou de comprimés
Un exemple de produit selon l’invention est complément alimentaire sous forme de gélule rigide ou de comprimé contenant de 10 à 100% de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis pure ou en mélange avec de la poudre d’Odontella aurita et/ou en mélange avec de la poudre de Tetraselmis chuii et/ou de spiruline.
Exemple 1 5 : Compléments alimentaires sous forme de gélules molles (soft gel) ou d’huile libre
Un exemple de produit selon l’invention est un complément alimentaire sous forme de gélule molle (soft gel) ou d’huile libre contenant de 10 à 100% d’huile d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis pure ou en mélange avec de l’huile d’Odontella aurita et/ou de Tetraselmis chuii et/ou de Nannochloropsis sp. et/ou en mélange avec de l’huile de Thraustochytrides (obtenues par les méthodes d’écrites dans l’exemple 8) associées ou non avec une huile végétale (Colza, olive, tournesol, noix, lin, chia, Grémil des champs, etc.)
.

Claims (15)

  1. Produit destiné à la consommation humaine ou animale, sous forme d’aliment ou de boisson ou de complément alimentaire, comprenant au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, et/ou au moins un extrait d’une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées.
  2. Produit selon la revendication 1, caractérisé en ce qu’il comprend entre 0,2 et 90 % en poids de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis et/ou d’au moins un extrait d’une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée.
  3. Produit selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en introduisant dans le milieu de culture une solution de 0,15g à 0,4 g de sel par période de 24 h à raison de 10% du volume de culture initial.
  4. Produit selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en introduisant dans le milieu de culture une solution d’eau de mer ou une solution d’eau de mer reconstituée.
  5. Produit selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées de 0/1000 à maximum 34/1000.
  6. Produit selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées pendant 3 à 8 mois.
  7. Produit selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées de façon à sélectionner les souches de plus en plus résistantes au sel.
  8. Produit selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatée(s) à l’eau salée ont été produite(s) par hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteur(s) présentant une ou plusieurs poche(s), sac(s) et/ou chambre(s) de culture à usage unique, stériles, en matériau(x) thermostables non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction.
  9. Produit selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu’il s’agit d’un produit céréalier, d’un produit de boulangerie, d’un gâteau sucré ou salé, d’un biscuit sucré ou salé, d’une sucrerie, d’une soupe, d’une sauce, d’une chips de légumes, d’un condiment, d’une huile, d’un plat cuisiné, d’un produit transformé à partir de produits marins, d’un laitage.
  10. Produit selon l’une des revendications 1 à 8, caractérisé en ce qu’il s’agit d’un soda, d’un jus de fruits, d’une boisson énergétique, d’une eau aromatisée, d’un sirop ou d’une boisson alcoolisée.
  11. Produit selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprennent de l’EPA et/ou du DHA.
  12. Produit selon la précédente revendication, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprennent au moins 0,1% d’EPA et/ou au moins 0,1% de DHA en poids de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait.
  13. Procédé de production d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées, ladite microalgue étant choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, cultivée par hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteur(s) présentant une ou plusieurs poches, sacs et/ou chambres de culture à usage unique, stériles, en matériau(x) thermostables non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction.
  14. Utilisation de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées, ladite microalgue étant choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, et/ou d’au moins un extrait d’au moins une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, comme rehausseur et/ou exhausteur de goût dans des produits alimentaires ou des boissons.
  15. Utilisation de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées, ladite microalgue étant choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovirdis, et/ou d’au moins un extrait d’au moins une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, comme source de protéines et/ou de lipides et/ou source de polysaccharides et/ou de minéraux et ou oligo-éléments dans des produits alimentaires ou des boissons ou des compléments alimentaires.
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