FR3111543A1 - NEW USES OF A ROSEWOOD EXTRACT - Google Patents
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Abstract
La présente invention concerne un extrait aqueux de bois de rose, de préférence de bois de rose d’été, obtenu par extraction enzymatique au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable, pour une utilisation pour favoriser et/ou améliorer la régénération et/ou la réparation et/ou la cicatrisation de la peau et/ou des lèvres, en particulier d’une peau et/ou de lèvres lésées et/ou altérées.The present invention relates to an aqueous extract of rosewood, preferably summer rosewood, obtained by enzymatic extraction using a cosmetically acceptable polar solvent, for use in promoting and/or improving regeneration and/or the repair and/or the healing of the skin and/or the lips, in particular damaged and/or altered skin and/or the lips.
Description
DOMAINE DE L'INVENTIONFIELD OF THE INVENTION
La présente invention concerne l’utilisation d’un extrait aqueux de bois de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, pour favoriser et/ou améliorer la régénération, la réparation et/ou la cicatrisation de la peau et/ou des lèvres, en particulier de la peau.The present invention relates to the use of an aqueous extract of rosewood, in particular of the Evanrat or Jardin de Granville® rose variety, for promoting and/or improving the regeneration, repair and/or healing of the skin and /or the lips, in particular the skin.
ETAT DE LA TECHNIQUESTATE OF THE ART
La peau est la première barrière de protection de l'organisme vis-à-vis de l'environnement. Elle peut être altérée par les processus intrinsèque ou extrinsèque, consécutivement à une agression, par exemple une agression physique ou une brûlure (exposition intense aux UVB). Par ailleurs, certaines maladies de peau telles que l’acné, peuvent, même après guérison, laisser des lésions cutanées. Ces cicatrises ou lésions se traduisent par différents signes cliniques, notamment par une altération de la barrière cutanée, une diminution de l’épaisseur de la peau, une dépigmentation et/ou une peau plus sèche. La persistance de ces signes cliniques est souvent mal vécue par les personnes qui en ont, notamment lorsque les lésions sont présentes au niveau de zones visibles et en particulier au niveau du visage.The skin is the body's first protective barrier against the environment. It can be altered by intrinsic or extrinsic processes, following an attack, for example a physical attack or a burn (intense exposure to UVB). In addition, certain skin diseases such as acne can, even after healing, leave skin lesions. These scars or lesions result in various clinical signs, in particular an alteration of the skin barrier, a reduction in the thickness of the skin, depigmentation and/or drier skin. The persistence of these clinical signs is often badly experienced by people who have them, especially when the lesions are present in visible areas and in particular in the face.
Il existe donc le besoin constant de trouver de nouveaux composés ou extraits capables de favoriser la régénération et/ou les capacités cicatricielles du tissu cutané.There is therefore a constant need to find new compounds or extracts capable of promoting the regeneration and/or the healing capacities of the cutaneous tissue.
La Demanderesse a justement développé un extrait de bois de rose (bois de rosier) qui, de manière surprenante, stimule les phénomènes de prolifération et de migration cellulaire impliquées dans les phénomènes de régénération et cicatrisation de la peau. Plus précisément, elle a observé un effet du bois de rose sur le recouvrement d’une blessure générée sur des cultures de monocouches de fibroblastes.The Applicant has precisely developed an extract of rosewood (rosewood) which, surprisingly, stimulates the phenomena of cell proliferation and migration involved in the phenomena of regeneration and healing of the skin. More specifically, she observed an effect of rosewood on the recovery of a wound generated on cultures of fibroblast monolayers.
Elle a également montré que cet extrait aqueux de bois de rose de la variété Evanrat comprenait une concentration très importante de molécules végétales, en particulier en flavonols, catéchines, et minéraux, plus importante encore que la concentration en ces molécules dans l’extrait de fleurs de rose de la même variété. Cet extrait de bois de rose comprend au moins 65 métabolites dont 11 molécules non détectées jusqu’à lors dans les autres extraits de la Rose de Granville : acides uroniques, fucose, galactose, cellobiose, cellobionate, tyrosine, arginine, beta-hydroxypropiovanillone, acide galloylquinique, acide coumarique et acide férulique.It also showed that this aqueous extract of rosewood of the Evanrat variety included a very high concentration of plant molecules, in particular flavonols, catechins, and minerals, even higher than the concentration of these molecules in the flower extract. rose of the same variety. This rosewood extract contains at least 65 metabolites, including 11 molecules not previously detected in other Rose de Granville extracts: uronic acids, fucose, galactose, cellobiose, cellobionate, tyrosine, arginine, beta-hydroxypropiovanillone, acid galloylquinic acid, coumaric acid and ferulic acid.
Cette concentration moléculaire en composés actifs sur la prolifération, migration et adhésion cellulaire, permette à cet extrait d’activer à lui seul de très nombreuses cibles biologiques impliquées dans la jeunesse et la santé de la peau.This molecular concentration of active compounds on cell proliferation, migration and adhesion, allows this extract to activate on its own a large number of biological targets involved in the youthfulness and health of the skin.
La présente invention porte donc sur un extrait aqueux de bois de rose, de préférence de bois de rose d’été, obtenu par extraction enzymatique au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable, ou composition le contenant, pour favoriser et/ou améliorer la régénération de la peau et/ou des lèvres, en particulier de la peau.The present invention therefore relates to an aqueous extract of rosewood, preferably summer rosewood, obtained by enzymatic extraction using a cosmetically acceptable polar solvent, or a composition containing it, to promote and/or improve the regeneration of the skin and/or of the lips, in particular of the skin.
Elle porte également sur un extrait aqueux de bois de rose, de préférence de bois de rose d’été, obtenu par extraction enzymatique au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable, ou composition le contenant, pour favoriser et/ou améliorer la réparation et/ou la cicatrisation de la peau et/ou des lèvres, en particulier la cicatrisation de la peau.It also relates to an aqueous extract of rosewood, preferably summer rosewood, obtained by enzymatic extraction using a cosmetically acceptable polar solvent, or a composition containing it, to promote and/or improve the repair and /or the scarring of the skin and/or the lips, in particular the scarring of the skin.
On entend par ‘peau’ selon l’invention, l’épiderme et le derme.By “skin” is meant according to the invention, the epidermis and the dermis.
En particulier, il s’agira de la peau du visage, des mains, du cou et/ou du corps, et des lèvres.In particular, it will be the skin of the face, hands, neck and/or body, and lips.
Selon un mode particulier de l’invention, la peau et/ou les lèvres sont lésées et/ou altérées.According to a particular mode of the invention, the skin and/or the lips are injured and/or altered.
Par ‘peau et/ou lèvres lésées et/ou altérées’, on entend notamment une peau et/ou des lèvres présentant des lésions et/ou altérations superficielles, liées notamment à des traitements chimiques et/ou abrasifs, comme des traitements laser, peeling, dermabrasions, et/ou des brûlures du 1erdegré, et/ou des maladies de la peau, telles que l’acné en particulier. On parlera notamment de lésions d’acné ou cicatrices d’acné.By 'damaged and/or altered skin and/or lips' is meant in particular skin and/or lips showing superficial lesions and/or alterations, linked in particular to chemical and/or abrasive treatments, such as laser treatments, peeling , dermabrasions, and/or 1st degree burns, and/or skin diseases, such as acne in particular. Reference will be made in particular to acne lesions or acne scars.
Selon un mode de réalisation préféré, ledit extrait de bois de rose, ou la composition en contenant, est destiné à améliorer la qualité de la peau pendant et/ou après la cicatrisation.According to a preferred embodiment, said rosewood extract, or the composition containing it, is intended to improve the quality of the skin during and/or after healing.
Selon un mode particulier et préféré, ledit extrait est obtenu à partir de bois de rose de la variété Evanrat, en particulier de la variété rose Jardin de Granville®.According to a particular and preferred mode, said extract is obtained from rosewood of the Evanrat variety, in particular of the Jardin de Granville® rose variety.
DESCRIPTION DES FIGURESDESCRIPTION OF FIGURES
DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTIONDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
EXTRAIT AQUEUX DE BOIS DE ROSEAQUEOUS EXTRACT OF ROSEWOOD
Matériel végétalplant material
Les extraits de l’invention sont des extraits de bois de rose. On parlera indifféremment selon l’invention d’un extrait de rose, d’un extrait de bois de rose, d’un extrait de rosier, d’un extrait de bois de rosier ou d’un extrait en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®.The extracts of the invention are extracts of rosewood. We will speak indifferently according to the invention of a rose extract, a rosewood extract, a rosebush extract, an extract of rosewood or an extract in particular of the Evanrat variety or rose Jardin de Granville®.
Le bois de rose au sens de bois de rosier selon l’invention est à distinguer du bois de rose au sens de bois parfumé utilisé en parfumerie ou bois de couleur rose ou à veine rosée utilisés en ébénisterie.Rosewood in the sense of rosewood according to the invention is to be distinguished from rosewood in the sense of scented wood used in perfumery or wood of pink color or with a pink vein used in cabinetmaking.
L’homme du métier choisira de préférence des roses sélectionnées dont les propriétés sont préservées par un environnement et un mode d’agriculture biologique. Selon un mode particulier et préféré, on utilisera un extrait de pétales de rose de la variété Evanrat ou rose ‘Jardin de Granville®’.The person skilled in the art will preferably choose selected roses whose properties are preserved by an environment and an organic farming method. According to a particular and preferred method, an extract of rose petals of the Evanrat variety or ‘Jardin de Granville®’ rose will be used.
Le rosier ou rose ‘Jardin de Granville®’ est une variété hybride proposée exclusivement par « Roses anciennes André Eve S.A.S » et protégée par Certificat d’Obtention Végétale sous le N°20110345 avec pour espèce la dénomination Rosa L. et pour la variété la dénomination EVANRAT. Ce rosier buisson appartient au groupe des hybrides modernes, qui, de mai à octobre, se couvre de roses en permanence, montrant ainsi un excellent caractère remontant.The rosebush or rose 'Jardin de Granville®' is a hybrid variety offered exclusively by "Roses Anciennes André Eve S.A.S" and protected by Plant Variety Certificate under No. 20110345 with the name Rosa L. for the species and the variety the denomination EVANRAT. This shrub rose belongs to the group of modern hybrids, which, from May to October, is permanently covered with roses, thus showing an excellent repeating character.
Ainsi, selon un mode particulier et préféré de l’invention, l’extrait aqueux de bois de rose autrement nommé extrait de bois de rosier est un extrait de bois de rose de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®.Thus, according to a particular and preferred embodiment of the invention, the aqueous extract of rosewood, otherwise known as rosewood extract, is an extract of rosewood of the Evanrat variety or rose Jardin de Granville®.
On distingue deux types de bois de rose selon le moment de l’année où ils sont récoltés :There are two types of rosewood depending on the time of year when they are harvested:
- Les bois d’hiver, généralement récoltés entre les mois de novembre et d’avril- Winter timber, generally harvested between November and April
- Les bois d’été, généralement récoltés entre les mois de mai et d’octobre.- Summer timber, generally harvested between the months of May and October.
Selon un mode particulier et préféré, on utilisera des bois d’été. On parlera indifféremment dans la description de bois de rose ou bois de rose d’été.According to a particular and preferred method, summer wood will be used. We will speak interchangeably in the description of rosewood or summer rosewood.
Dans un mode de réalisation particulier, les bois de rose sont directement utilisés en vue de l’extraction.In a particular embodiment, the rosewoods are used directly for the extraction.
Dans un autre mode de réalisation, les bois de rose sont préalablement séchés avant extraction. Ils peuvent également être congelés avant extraction.In another embodiment, the rosewoods are dried beforehand before extraction. They can also be frozen before extraction.
Selon un mode particulier et préféré, le bois de rose est broyé préalablement à l’étape d’extraction.According to a particular and preferred method, the rosewood is ground prior to the extraction step.
Les bois de rose comprennent des sucres monosaccharides (fructose, glucose), et polysaccharides en particulier disaccharides, des polyphénols (catéchine) notamment des flavonoïdes (pour la plupart glycosylés) et des tanins, des acides aminés (majoritairement acide aspartique tyrosine et arginine), des minéraux (sodium, potassium, calcium).Rosewoods include monosaccharide sugars (fructose, glucose), and polysaccharides in particular disaccharides, polyphenols (catechin) in particular flavonoids (mostly glycosylated) and tannins, amino acids (mainly aspartic acid tyrosine and arginine), minerals (sodium, potassium, calcium).
En particulier, le calcium améliore la différenciation épidermique et renforce la structure de la peau, tandis que le potassium amplifie l’hydratation cutanée et booste l’assimilation de l’énergie. Les sucres (fructose, glucose) sont destinés à gorger les cellules cutanées d’énergie.In particular, calcium improves epidermal differentiation and strengthens skin structure, while potassium amplifies skin hydration and boosts energy assimilation. Sugars (fructose, glucose) are intended to fill the skin cells with energy.
Selon un mode particulier, l’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention comprend en outre en faible proportion un extrait de fleurs de rose représentant de 0,01 à 1%, de préférence de 0,05 à 0,5%, de préférence 0,1 à 0,2% de l’extrait aqueux total de rose selon l’invention. Dans ce mode de réalisation, le matériel végétal d’origine comprend des bois de rose et des fleurs de rose dans une proportion 0,01% fleurs pour 99,99% de bois à 1% fleurs pour 99% de bois.According to a particular mode, the aqueous extract of rosewood according to the invention also comprises, in a small proportion, an extract of rose flowers representing from 0.01 to 1%, preferably from 0.05 to 0.5%, preferably 0.1 to 0.2% of the total aqueous rose extract according to the invention. In this embodiment, the original plant material comprises rosewood and rose flower in a ratio of 0.01% flower to 99.99% wood to 1% flower to 99% wood.
Extrait de bois de rose et procédé de préparationRosewood extract and method of preparation
L’extrait de bois de rose selon l’invention est un extrait aqueux de bois de rose de préférence de bois de rose d’été, obtenu de préférence par extraction enzymatique au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable.The rosewood extract according to the invention is an aqueous extract of rosewood, preferably summer rosewood, preferably obtained by enzymatic extraction using a cosmetically acceptable polar solvent.
L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est un extrait concentré en composés naturels polaires. L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est distinct d’une eau de rose. Il s’agit ici d’un extrait de bois de rose mettant en œuvre l’extraction de composés naturels de bois de rose en présence de solvants aqueux (polaire) avec ou sans ajout de modificateur de pH, et une mise en œuvre, dans la formulation, sous la forme d’une solution ou concentré aqueux, le solvant du concentré pouvant être le solvant d’extraction et/ou un solvant additionnel.The aqueous extract of rosewood according to the invention is an extract concentrated in natural polar compounds. The aqueous extract of rosewood according to the invention is distinct from rose water. This is a rosewood extract implementing the extraction of natural rosewood compounds in the presence of aqueous solvents (polar) with or without the addition of a pH modifier, and an implementation, in the formulation, in the form of an aqueous solution or concentrate, the solvent of the concentrate possibly being the extraction solvent and/or an additional solvent.
On parlera indifféremment d’extrait aqueux ou d’extrait polaire ou d’extrait hydrophile de rose ou d’éco-extrait dans la description. L’extrait aqueux de bois de rose est obtenu avantageusement au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable.We will speak indifferently of aqueous extract or polar extract or hydrophilic extract of rose or eco-extract in the description. The aqueous extract of rosewood is advantageously obtained by means of a cosmetically acceptable polar solvent.
Par « extrait de bois de rose » ou « extrait aqueux de bois de rose » selon l’invention, on comprend notamment que les composés polaires (hydrophiles) des bois de rose se sont solubilisés et/ou ont été extraits dans un solvant polaire. Avantageusement, cet extrait de bois de rose est obtenu par un procédé d’éco-extraction. On parlera ainsi d’éco-extrait de bois de rose.By “rosewood extract” or “aqueous extract of rosewood” according to the invention, it is understood in particular that the polar (hydrophilic) compounds of rosewood have dissolved and/or have been extracted in a polar solvent. Advantageously, this rosewood extract is obtained by an eco-extraction process. We will thus speak of eco-extract of rosewood.
L’expression « solvant polaire » signifie que le solvant a une valeur d’indice de Polarité qui est égale ou supérieure à une valeur de 4. L’indice de polarité est une grandeur calculée sur la base de grandeurs thermodynamiques (de solubilité et de changement d’état) qui met en évidence le caractère plus ou moins polaire d’une molécule. On se reportera, pour les indices de polarité des solvants, à l'article deL.R. SNYDER : Classification of the solvent properties of common liquids ; Journal of Chromatography, 92 (1974), 223-230.The expression “polar solvent” means that the solvent has a Polarity index value which is equal to or greater than a value of 4. The polarity index is a quantity calculated on the basis of thermodynamic quantities (of solubility and change of state) which highlights the more or less polar character of a molecule. For the solvent polarity indices, see the article by L.R. SNYDER: Classification of the solvent properties of common liquids; Journal of Chromatography, 92 (1974), 223-230 .
Les solvants polaires préférés sont ceux constitués d’un composé comprenant au moins une liaison covalente polaire de type O-H.The preferred polar solvents are those consisting of a compound comprising at least one polar covalent bond of the O-H type.
A titre de solvant polaire cosmétiquement acceptable, on choisit un solvant ou un mélange de solvants choisi(s) parmi l’eau, les alcools en C1-C4, tel que l’éthanol, les glycols, tels que l’éthylène glycol, le glycérol, le butylèneglycol et le propylèneglycol, et leurs mélanges. De préférence, on utilise l’eau.As cosmetically acceptable polar solvent, one chooses a solvent or a mixture of solvents chosen from water, C 1 -C 4 alcohols, such as ethanol, glycols, such as ethylene glycol , glycerol, butylene glycol and propylene glycol, and mixtures thereof. Preferably, water is used.
Selon un mode particulier, ledit extrait est caractérisé en ce qu’il comprend de l’eau en une teneur allant de 94 à 96%, une teneur en extrait sec allant de 3 à 5% et des conservateurs en une teneur allant de 0.5 à 1% en poids par rapport au poids total de l’extrait.According to a particular embodiment, said extract is characterized in that it comprises water in a content ranging from 94 to 96%, a dry extract content ranging from 3 to 5% and preservatives in a content ranging from 0.5 to 1% by weight relative to the total weight of the extract.
PP rocédé d’process of extractionextraction
L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention peut être obtenu selon différents procédés d’éco-extraction connus de l’homme du métier et notamment celui décrit ci-après.The aqueous extract of rosewood according to the invention can be obtained according to various eco-extraction processes known to those skilled in the art and in particular that described below.
Selon un mode particulier et préféré, on utilisera comme matériel végétal dans les procédés d’extraction adaptés à l’invention décrits ci-après, des bois de rose de la variété Evanrat, de préférence la rose Jardin de Granville®, de préférence des bois de rose préalablement séchés.According to a particular and preferred mode, one will use as plant material in the extraction processes adapted to the invention described below, rosewoods of the Evanrat variety, preferably the Jardin de Granville® rose, preferably rosewoods roses previously dried.
Par « éco-extraction » on entend un procédé d’extraction permettant de réduire la consommation énergétique, mais aussi l’utilisation de solvants alternatifs et des ressources végétales renouvelables, tout en garantissant un produit/extrait sûr et de qualité. L’Eco extraction privilégie 6 grands principes (Farid Chemat, Dunod, 2010, Eco-Extraction du végétal) :By “eco-extraction” we mean an extraction process that reduces energy consumption, but also the use of alternative solvents and renewable plant resources, while guaranteeing a safe and quality product/extract. Eco-extraction favors 6 main principles (Farid Chemat, Dunod, 2010, Eco-Extraction from plants):
- Favoriser l’innovation par la sélection variétale et l’utilisation de ressources végétales renouvelables,- Promote innovation through varietal selection and the use of renewable plant resources,
- Privilégier les solvants alternatifs dits solvants verts et principalement ceux issus des agro-ressources,- Favor alternative solvents called green solvents and mainly those from agro-resources,
- Réduire la consommation énergétique par l’assistance des technologies innovantes et favoriser la récupération d’énergie,- Reduce energy consumption through the assistance of innovative technologies and promote energy recovery,
- Favoriser la création de coproduits au lieu de déchets pour intégrer la voie de la bio ou agro-raffinerie,- Promote the creation of co-products instead of waste to integrate the path of bio or agro-refinery,
- Réduire les opérations unitaires grâce à l’innovation technologique et favoriser les procédés surs, robustes et contrôlés, et- Reduce unit operations through technological innovation and promote safe, robust and controlled processes, and
- Privilégier un produit non dénaturé, biodégradable, sans contaminants et surtout porteur de valeurs « extrait ». On utilisera donc avantageusement comme solvant vert polaire : l’eau.- Favor a product that is not denatured, biodegradable, without contaminants and above all bears “extract” values. We will therefore advantageously use as polar green solvent: water.
Par « extraction solide/liquide » on entend un type d’extraction mettant en contact un solide (matériel bio-sourcé) et un liquide (dit solvant) afin de laisser diffuser/imprégner un ou plusieurs composé(s) soluble(s) dit(s) soluté(s) dans le liquide. Ceci se fait en général grâce à des actions physiques et physico-chimiques plus ou moins rapides.By “solid/liquid extraction” is meant a type of extraction bringing into contact a solid (bio-sourced material) and a liquid (known as solvent) in order to allow one or more soluble compound(s) known as (s) solute(s) in the liquid. This is generally done through more or less rapid physical and physico-chemical actions.
Les bois peuvent être utilisés frais, congelés ou préalablement séchés à l’aide d’outils de séchage conventionnels et connus de l’homme du métier, comme par exemple le séchage à l’air libre, en étuves, par lyophilisation ou zéodratation. Ainsi, selon un mode de réalisation, et préalablement à l’étape d’extraction elle-même, les bois peuvent avoir été séchés et/ou broyés. Selon un autre mode de réalisation, les bois sont utilisés humides puis broyés.The woods can be used fresh, frozen or dried beforehand using conventional drying tools known to those skilled in the art, such as for example drying in the open air, in ovens, by freeze-drying or zeodration. Thus, according to one embodiment, and prior to the extraction step itself, the wood may have been dried and/or ground. According to another embodiment, the woods are used wet and then ground.
Selon un mode particulier, les bois sont broyés avant extraction, par exemple au moyen d’un mortier, d’un cryobroyage, d’un mixeur, d’un broyeur traditionnel ou d’un centrifugeur selon les méthodes connues de l’homme du métier.According to a particular mode, the woods are crushed before extraction, for example by means of a mortar, a cryogenic grinding, a mixer, a traditional crusher or a centrifuge according to the methods known to those skilled in the art. job.
L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention peut être obtenu en particulier selon des procédés d’extraction enzymatique.The aqueous extract of rosewood according to the invention can be obtained in particular according to enzymatic extraction processes.
Les enzymes choisies hydrolysent certains ou tous les composés du matériel végétal afin de détériorer la paroi cellulaire et donc libérer favorablement les molécules contenues.The selected enzymes hydrolyze some or all of the compounds in the plant material in order to damage the cell wall and thus favorably release the molecules contained therein.
On entend par « paroi cellulaire » ou « paroi végétale » ou « paroi pectocellulosique » l’élément de structure cellulaire qui protège chaque cellule végétale. Elle se compose notamment de trois parties :By “cell wall” or “plant wall” or “pectocellulose wall” is meant the element of cell structure that protects each plant cell. It mainly consists of three parts:
- la lamelle moyenne : riche en pectine et dépourvue de cellulose,- the middle lamella: rich in pectin and devoid of cellulose,
- la paroi primaire : composée majoritairement de cellulose (9 à 25%), d’hémicellulose (25 à 58%), de pectines (10 à 35%), et de protéines (10%),- the primary wall: composed mainly of cellulose (9 to 25%), hemicellulose (25 to 58%), pectins (10 to 35%), and proteins (10%),
- la paroi secondaire : cellulose, hémicellulose.- the secondary wall: cellulose, hemicellulose.
Selon les molécules que l’on cherche à extraire, les enzymes seront adaptées aux parois à hydrolyser pour accéder à ces dites molécules. Avantageusement, on pourra notamment utiliser des enzymes de type cellulase, hémicellulase, pectinase ou protéase, seules ou en combinaison.Depending on the molecules that we are trying to extract, the enzymes will be adapted to the walls to be hydrolyzed to access these said molecules. Advantageously, enzymes of the cellulase, hemicellulase, pectinase or protease type may in particular be used, alone or in combination.
On entend par « cellulase » une enzyme qui peut décomposer la cellulose, biopolymère constitué d'une chaîne linéaire de D-glucose et principal constituant de la paroi cellulaire végétale. Le produit final de la dégradation de la cellulose par la cellulase le glucose. Il existe plusieurs types de cellulases comme la béta-glucosidase, l’endo-cellulase, l’exo-cellulase, l’oxydative cellulase ou encore la cellulose phosphorylase.By "cellulase" is meant an enzyme which can break down cellulose, a biopolymer consisting of a linear chain of D-glucose and the main constituent of the plant cell wall. The end product of cellulose degradation by cellulase is glucose. There are several types of cellulase such as beta-glucosidase, endo-cellulase, exo-cellulase, oxidative cellulase or cellulose phosphorylase.
On entend par « hémicellulase » une enzyme qui peut décomposer l’hémicellulose, biopolymère constitutif de la paroi cellulaire végétale permettant notamment le pontage entre les fibres de cellulose, ainsi qu’avec d'autres composés matriciels. Il existe plusieurs types d’hémicellulases comme l’arabinase, la xylanase, ou la galactanase.By “hemicellulase” is meant an enzyme which can break down hemicellulose, the biopolymer that makes up the plant cell wall, allowing in particular the bridging between cellulose fibers, as well as with other matrix compounds. There are several types of hemicellulases such as arabinase, xylanase, or galactanase.
On entend par « pectinase » une enzyme capable de dégrader la pectine, polysaccharide présent dans les parois cellulaires végétales. Il existe plusieurs types de pectinases comme l’endopolygalacturanase, ou la pectine méthylestérase.“Pectinase” means an enzyme capable of degrading pectin, a polysaccharide present in plant cell walls. There are several types of pectinases such as endopolygalacturanase, or pectin methylesterase.
On entend par « protéase » une enzyme capable de défaire les liaisons peptidiques. Les protéases sont utilisées dans le procédé de l’invention pour hydrolyser les protéines de structure et améliorer la lyse de la matière première, non pour produire des peptides.By “protease” is meant an enzyme capable of undoing peptide bonds. Proteases are used in the process of the invention to hydrolyze structural proteins and improve the lysis of the raw material, not to produce peptides.
On pourra ainsi utiliser une cellulase pour libérer le glucose et la cellulose ; une hemicellulase pour libérer les mono et oligomères de sucres réduits ; une pectinase pour libérer les acides uroniques ; et avantageusement une protéase pour hydrolyser les protéines de structure et améliorer la lyse de la matière première.It will thus be possible to use a cellulase to release the glucose and the cellulose; a hemicellulase to release mono and oligomers of reduced sugars; a pectinase to release uronic acids; and advantageously a protease to hydrolyze the structural proteins and improve the lysis of the starting material.
Dans un mode de réalisation préféré, l’éco-extraction est réalisée au moyen du protocole décrit dans la demande de brevet WO2011045387 (correspondant à la demande de brevet FR2351461) au nom de l’Institut National Polytechnique de Lorraine INPL. Il s’agit d’une technologie alternative répondant aux contraintes réglementaires et environnementales tout en restant compétitif économiquement. Ce procédé innovant, permet d’extraire de la matière végétale, en une seule étape, trois types de produits à savoir une huile (riche en nutriments polyphénols, stérols, vitamine E…), un extrait aqueux ainsi qu’un tourteau (phase solide).In a preferred embodiment, the eco-extraction is carried out using the protocol described in patent application WO2011045387 (corresponding to patent application FR2351461) in the name of the Institut National Polytechnique de Lorraine INPL. It is an alternative technology that meets regulatory and environmental constraints while remaining economically competitive. This innovative process makes it possible to extract from plant matter, in a single step, three types of products, namely an oil (rich in polyphenol nutrients, sterols, vitamin E, etc.), an aqueous extract and a cake (solid phase ).
Ce procédé comprend notamment les étapes suivantes :This method comprises in particular the following steps:
a) addition d'eau à de la matière végétale présentant une taille de particule appropriée,a) addition of water to plant material of appropriate particle size,
b) addition d'un mélange enzymatique contenant au moins une cellulase, au moins une hémicellulase et au moins une pectinase, et avantageusement en outre au moins une protéase,b) addition of an enzyme mixture containing at least one cellulase, at least one hemicellulase and at least one pectinase, and advantageously in addition at least one protease,
c) incubation sous agitation de la matière végétale et du mélange enzymatique pour libérer dans le milieu réactionnel des huiles, des protéines et des sucres fermentescibles, pendant une durée dépendant des rendements recherchés,c) incubation with stirring of the plant material and of the enzymatic mixture to release oils, proteins and fermentable sugars into the reaction medium, for a period depending on the desired yields,
d) séparation du milieu réactionnel pour obtenir de l'huile libre, une phase aqueuse contenant des protéines et des sucres fermentescibles, et une phase solide, etd) separation of the reaction medium to obtain free oil, an aqueous phase containing proteins and fermentable sugars, and a solid phase, and
e) séparation de la phase aqueuse et ajout éventuel de conservateurs.e) separation of the aqueous phase and optional addition of preservatives.
Ainsi, on obtient à l’issue de l’étape de séparation (e) une phase aqueuse correspondant à l’extrait de bois de rose selon l’invention.Thus, at the end of separation step (e), an aqueous phase corresponding to the rosewood extract according to the invention is obtained.
Ainsi, un autre objet de l’invention concerne un procédé de préparation d’un extrait de bois de rose selon l’invention comprenant les étapes :Thus, another object of the invention relates to a method for preparing a rosewood extract according to the invention comprising the steps:
a) addition d'eau au bois de rose préalablement broyé présentant une taille de particule appropriée,a) addition of water to the previously ground rosewood having an appropriate particle size,
b) addition d'un mélange enzymatique contenant au moins une cellulase, au moins une hémicellulase et au moins une pectinase, et avantageusement en outre au moins une protéase,b) addition of an enzyme mixture containing at least one cellulase, at least one hemicellulase and at least one pectinase, and advantageously in addition at least one protease,
c) incubation sous agitation du bois de rose préalablement broyé et du mélange enzymatique pour libérer dans le milieu réactionnel des huiles, des protéines et des sucres fermentescibles, pendant une durée dépendant des rendements recherchés,c) incubation with stirring of the previously ground rosewood and of the enzymatic mixture to release oils, proteins and fermentable sugars into the reaction medium, for a period depending on the desired yields,
d) séparation du milieu réactionnel pour obtenir de l'huile libre, une phase aqueuse contenant des protéines et des sucres fermentescibles, et une phase solide, etd) separation of the reaction medium to obtain free oil, an aqueous phase containing proteins and fermentable sugars, and a solid phase, and
e) séparation de la phase aqueuse et ajout éventuel de conservateurs.e) separation of the aqueous phase and optional addition of preservatives.
Ledit extrait de bois de rose selon l’invention étant obtenu après l’étape de séparation (e).Said rosewood extract according to the invention being obtained after separation step (e).
Avantageusement, ce procédé d’extraction ne fait pas intervenir de solvants organiques, comme l'hexane ce qui pourrait entrainer de nombreux problèmes de sécurité des installations et des personnels, de santé humaine et de préservation de l'environnement. Cette technologie permet ainsi de réduire les émissions de composés organiques volatiles (COV). Il s’agit ainsi d’un procédé propre permettant d'extraire sous forme d’huile et/ou d’extrait aqueux des protéines, sucres et autres co-produits de hautes qualités et directement utilisables en cosmétique.Advantageously, this extraction process does not involve organic solvents, such as hexane, which could lead to numerous problems of safety of installations and personnel, human health and preservation of the environment. This technology thus makes it possible to reduce emissions of volatile organic compounds (VOCs). It is thus a clean process allowing the extraction in the form of oil and/or aqueous extract of proteins, sugars and other co-products of high quality and directly usable in cosmetics.
L’étape de broyage nécessite d’ajuster la durée, et la vitesse en fonction de l’instrument employé et de la nature sèche ou humide du matériau à broyer.The grinding stage requires adjusting the duration and speed depending on the instrument used and the dry or wet nature of the material to be ground.
L’étape de d’addition d’eau nécessite d’ajuster la vitesse, la durée, le ratio eau/solide en fonction notamment de l’instrument à employer.The step of adding water requires adjusting the speed, the duration, the water/solid ratio depending in particular on the instrument to be used.
L’étape d’hydrolyse enzymatique nécessite de déterminer les enzymes à utiliser et d’ajuster divers paramètres tels que le ratio enzyme/substrat, le temps d’hydrolyse, la vitesse d’agitation, le pH et la température.The enzymatic hydrolysis step requires determining the enzymes to be used and adjusting various parameters such as the enzyme/substrate ratio, the hydrolysis time, the stirring speed, the pH and the temperature.
L’étape d’inactivation des enzymes endogènes ou exogènes nécessite d’ajuster des paramètres tels que la température d’inactivation, la température, la durée, de même que le pH.The inactivation step of endogenous or exogenous enzymes requires adjusting parameters such as inactivation temperature, temperature, duration, as well as pH.
L’étape de centrifugation, nécessite d’ajuster des paramètres tels que la vitesse, la température, la durée et le pH.The centrifugation step requires adjusting parameters such as speed, temperature, time and pH.
Selon un mode particulier, à l’étape a), la taille de particule appropriée de la matière végétale est avantageusement obtenue par broyage de ladite matière végétale. Le broyage doit être le plus fin possible pour favoriser l'action des enzymes. Idéalement, toutes les particules doivent avoir une taille proche de 50 µm, de préférence proche de 10 µm.According to a particular mode, in step a), the appropriate particle size of the plant material is advantageously obtained by grinding said plant material. The grinding must be as fine as possible to promote the action of the enzymes. Ideally, all the particles should have a size close to 50 µm, preferably close to 10 µm.
De préférence, la masse d'eau ajoutée à la matière végétale est égale à 1 à 2 fois la masse de ladite matière végétale et ne dépasse pas cette quantité.Preferably, the mass of water added to the vegetable matter is equal to 1 to 2 times the mass of said vegetable matter and does not exceed this quantity.
En particulier à l’étape b), le rapport entre l'activité de la pectinase et l'activité de la cellulase étant d'au moins 0.14, de préférence compris entre 0.3 et 2.5, et plus préférentiellement entre 0.35 et 0.45, et le rapport entre l'activité de la pectinase et l'activité de l'hémicellulase étant d'au moins 7.10-3 ; de préférence compris entre 1.10-2et 0.5, et plus préférentiellement entre 1.10-2et 2.10-2.In particular in step b), the ratio between the activity of the pectinase and the activity of the cellulase being at least 0.14, preferably between 0.3 and 2.5, and more preferably between 0.35 and 0.45, and the ratio of pectinase activity to hemicellulase activity being at least 7.10-3 ; preferably between 1.10-2and 0.5, and more preferably between 1.10-2and 2.10-2.
Plus particulièrement, le mélange enzymatique utilisé contient au moins une cellulase, au moins une hemicellulase, au moins une pectinase, et avantageusement en outre au moins une protéase. Selon un mode particulier, la ou les cellulase(s), hemicellulase(s) et pectinase(s) représentent 75% du mélange enzymatique et la ou les protéase(s) représentent 25% dudit mélange enzymatique. Selon un mode particulier, les cellulases sont présentes en une teneur allant de 1 à 50%, de préférence de 20 à 30% en poids du mélange enzymatique, les hémicellulases sont présentes en une teneur allant de 1 à 50%, de préférence de 20 à 30% en poids du mélange enzymatique et les pectinases sont présentes en une teneur allant de 1 à 50%, de préférence de 20 à 30% en poids du mélange enzymatique. Et avantageusement les protéases sont présentes en une teneur allant de 1 à 50%, de préférence de 20 à 30% en poids du mélange enzymatique.More particularly, the enzymatic mixture used contains at least one cellulase, at least one hemicellulase, at least one pectinase, and advantageously in addition at least one protease. According to a particular embodiment, the cellulase(s), hemicellulase(s) and pectinase(s) represent 75% of the enzymatic mixture and the protease(s) represent 25% of said enzymatic mixture. According to a particular embodiment, the cellulases are present in a content ranging from 1 to 50%, preferably from 20 to 30% by weight of the enzyme mixture, the hemicellulases are present in a content ranging from 1 to 50%, preferably from 20 to 30% by weight of the enzymatic mixture and the pectinases are present in a content ranging from 1 to 50%, preferably from 20 to 30% by weight of the enzymatic mixture. And advantageously the proteases are present in a content ranging from 1 to 50%, preferably from 20 to 30% by weight of the enzymatic mixture.
Dans un mode de réalisation préféré le mélange enzymatique utilisé contient 25% de cellulases, 25% d’hémicellulases, 25% de pectinases et 25% de protéases.In a preferred embodiment, the enzyme mixture used contains 25% cellulases, 25% hemicellulases, 25% pectinases and 25% proteases.
De préférence, la quantité utilisée du mélange enzymatique tel que défini ci-dessus est comprise entre 0.25% et 10%, de préférence entre 1 % et 6%, en volume du mélange eau/matière végétale.Preferably, the quantity used of the enzymatic mixture as defined above is between 0.25% and 10%, preferably between 1% and 6%, by volume of the water/plant material mixture.
Avantageusement, l'incubation selon l'étape c) est réalisée pendant 2 à 20 heures, de préférence entre 4 et 12 heures, à une température comprise entre 25°C et 75°C, de préférence entre 40°C et 60°C, et de préférence autour de 50°C.Advantageously, the incubation according to step c) is carried out for 2 to 20 hours, preferably between 4 and 12 hours, at a temperature between 25° C. and 75° C., preferably between 40° C. and 60° C. , and preferably around 50°C.
La réaction d'hydrolyse est ensuite stoppée par désactivation des enzymes par chauffage de préférence entre 80°C et 105°C pendant par exemple 5 à 20 minutesThe hydrolysis reaction is then stopped by deactivating the enzymes by heating, preferably between 80° C. and 105° C. for for example 5 to 20 minutes.
Puis le milieu réactionnel est séparé, selon l'étape d), en utilisant toutes les techniques de séparation connues adaptées, telle que la centrifugation ou la décantation.Then the reaction medium is separated, according to step d), using all suitable known separation techniques, such as centrifugation or decantation.
Selon un mode particulier, le mélange est préfiltré sur tamis de 0.8mm puis 0.5mm afin de retirer la partie le plus importante de la phase solide, puis une filtration stérilisante est avantageusement réalisée sur plaques clarifiantes d’une taille de pores de 0.2µm, à une pression de 2 Bars.According to a particular mode, the mixture is pre-filtered on a 0.8 mm then 0.5 mm sieve in order to remove the most important part of the solid phase, then a sterilizing filtration is advantageously carried out on clarifying plates with a pore size of 0.2 μm, at a pressure of 2 bar.
La phase aqueuse obtenue après filtration stérilisante est stabilisée avec les conservateurs (acide citrique, sorbate de potassium, benzoate de sodium).The aqueous phase obtained after sterilizing filtration is stabilized with preservatives (citric acid, potassium sorbate, sodium benzoate).
Ainsi selon un mode de réalisation préféré, ledit extrait aqueux de bois de rose, de préférence de bois de rose d’été, est obtenu par un procédé d’extraction comprenant les étapes :Thus, according to a preferred embodiment, said aqueous extract of rosewood, preferably of summer rosewood, is obtained by an extraction process comprising the steps:
a) addition d'eau au bois de rose préalablement broyé présentant une taille de particule appropriée,a) addition of water to the previously ground rosewood having an appropriate particle size,
b) addition d'un mélange enzymatique contenant au moins une cellulase, au moins une hémicellulase et au moins une pectinase, et avantageusement au moins une protéase,b) addition of an enzymatic mixture containing at least one cellulase, at least one hemicellulase and at least one pectinase, and advantageously at least one protease,
c) incubation sous agitation du bois de rose préalablement broyé et du mélange enzymatique pour libérer dans le milieu réactionnel des huiles si présentes, des protéines et des sucres fermentescibles, pendant une durée dépendant des rendements recherchés,c) incubation with stirring of the previously crushed rosewood and of the enzymatic mixture to release into the reaction medium oils if present, proteins and fermentable sugars, for a period depending on the desired yields,
d) séparation du milieu réactionnel pour obtenir de l'huile libre, une phase aqueuse contenant des protéines et des sucres fermentescibles, et une phase solide, etd) separation of the reaction medium to obtain free oil, an aqueous phase containing proteins and fermentable sugars, and a solid phase, and
e) séparation de la phase aqueuse et ajout éventuel de conservateurs.e) separation of the aqueous phase and optional addition of preservatives.
L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est caractérisé notamment par la présence d’acides aminés (acide aspartique, tyrosine, arginine) et de sucres totaux (glucose, fructose).The aqueous extract of rosewood according to the invention is characterized in particular by the presence of amino acids (aspartic acid, tyrosine, arginine) and total sugars (glucose, fructose).
L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention se caractérise également par le fait qu’il ne s’agit pas d’un extrait fermenté.The aqueous extract of rosewood according to the invention is also characterized by the fact that it is not a fermented extract.
Selon un mode particulier, l’extrait aqueux de bois de rose obtenu selon l’invention comprend de l’eau en une teneur allant de 94 à 96%, une teneur en extrait sec allant de 1 à 6% et préférentiellement de 3 à 5% et des conservateurs en une teneur allant de 0.5 à 1% en poids par rapport au poids total de l’extrait. Cet extrait de bois de rose selon l’invention est dénommé en nom INCI water (and) rose extract (and) citric acid (and) potassium sorbate (and) sodium benzoate.According to a particular mode, the aqueous extract of rosewood obtained according to the invention comprises water in a content ranging from 94 to 96%, a dry extract content ranging from 1 to 6% and preferably from 3 to 5 % and preservatives in a content ranging from 0.5 to 1% by weight relative to the total weight of the extract. This rosewood extract according to the invention is called in INCI name water (and) rose extract (and) citric acid (and) potassium sorbate (and) sodium benzoate.
CARACTERISATION DE L’EXTRAITCHARACTERIZATION OF THE EXTRACT
Comme illustré dans les exemples et figures illustratifs de l’invention, la Demanderesse a également mis en évidence, par une étude phytochimique dudit extrait de bois de rose selon l’invention, la présence très nombreux métabolites parmi lesquels 19 flavonols dérivés de la quercétine, 16 flavonols dérivés du kaempférol, 3 flavanonols, 1 anthocyane, 22 flavan-3-ols (incluant catéchine et tannins), 12 gallotannins, 5 ellagitannins et 2 dérivés de l’acide quinique.As illustrated in the examples and illustrative figures of the invention, the Applicant has also demonstrated, by a phytochemical study of said rosewood extract according to the invention, the presence of a large number of metabolites, including 19 flavonols derived from quercetin, 16 flavonols derived from kaempferol, 3 flavanonols, 1 anthocyanin, 22 flavan-3-ols (including catechin and tannins), 12 gallotannins, 5 ellagitannins and 2 quinic acid derivatives.
L’étude réalisée par la Demanderesse a montré que l’extrait de bois est très riche en tannins, gallotannins et ellagitannins, ainsi qu’en flavononols, en plus de flavonols, plus encore comparativement aux extraits de fleur et de fruit de rose.The study carried out by the Applicant showed that the wood extract is very rich in tannins, gallotannins and ellagitannins, as well as in flavononols, in addition to flavonols, even more so compared to flower and rose fruit extracts.
Ainsi, l’extrait de bois contient des flavonols dérivés de la quercétine et du kaempférol, mais ce sont les tannins et précurseurs qui semblent majoritaires, à hauteur de 25 ng eq apigénine/µL. Les gallotannins sont aussi bien présents (3 ng eq apigénine/µL), plus que dans les autres extraits, de même que les ellagitannins (1 ng eq apigénine/µL). Flavononols (3 ng /µL) et dérivés quiniques complètent la composition.Thus, the wood extract contains flavonols derived from quercetin and kaempferol, but it is the tannins and precursors that seem to predominate, up to 25 ng eq apigenin/µL. The gallotannins are also present (3 ng eq apigenin/µL), more than in the other extracts, as are the ellagitannins (1 ng eq apigenin/µL). Flavononols (3 ng /µL) and quinic derivatives complete the composition.
L’épicatéchine, la catéchine et 5 procyanidines dimères sont majoritaires dans l’extrait de bois, entre 1 et 9 ng eq apigénine/µL, avec une grande diversité de tannins minoritaires.Epicatechin, catechin and 5 dimeric procyanidins predominate in the wood extract, between 1 and 9 ng apigenin eq/µL, with a great diversity of minority tannins.
Le bois de rose est en outre plus riche en gallotannins que les autres extraits avec principalement l’acide gallique (GA, 1,4 ng/µL), le méthyl gallate hexoside (MeGH) et deux isomères de glucogalline, les galloyl hexoside-2 et -5 tous à 0,2 ng eq apigénine/µL, et une certaine variété y compris quelques digalloyl-hexosides minoritaires. Cependant aucun gallotannin avec plus de galloyl (trigalloyl-, tetragalloyl ou pentagalloyl-hexoside) n’a été détecté.Rosewood is also richer in gallotannins than the other extracts with mainly gallic acid (GA, 1.4 ng/µL), methyl gallate hexoside (MeGH) and two isomers of glucogallin, galloyl hexoside-2 and -5 all at 0.2 ng apigenin eq/µL, and some variety including some minor digalloyl-hexosides. However, no gallotannin with more galloyl (trigalloyl-, tetragalloyl or pentagalloyl-hexoside) was detected.
Le bois de rose contient une plus grande quantité d’ellagitannins que les autres extraits, avec majoritairement deux isomères de bis-HDDP hexoside) à 0,4 ng eq apigénine/µL, et dans une moindre mesure de la tellimagrandine I et un de ses isomères.Rosewood contains a greater quantity of ellagitannins than the other extracts, with mainly two isomers of bis-HDDP hexoside) at 0.4 ng eq apigenin/µL, and to a lesser extent tellimagrandin I and one of its isomers.
Enfin, les flavononols isomères de taxifolin-pentoside sont à des concentrations notables dans le bois (2ng/µL pour Tax-P1). L’acide quinique est présent à teneurs équivalentes (2,5 ng/µL) dans les trois extraits, mais son dérivé galloylé est en plus grande quantité dans le bois.Finally, the flavononols isomeric to taxifolin-pentoside are at notable concentrations in the wood (2ng/µL for Tax-P1). Quinic acid is present at equivalent levels (2.5 ng/µL) in the three extracts, but its galloylated derivative is in greater quantity in the wood.
L’extrait aqueux de bois selon l’invention présente donc une concentration très importante en molécules, comparativement à d’autres extraits de rose (fleur, fruit). Il est notamment jusqu’à 32 fois plus concentré en flavonols, et jusqu’à 225 fois plus concentré en catéchines que l’extrait de fleur.The aqueous wood extract according to the invention therefore has a very high concentration of molecules, compared to other rose extracts (flower, fruit). In particular, it is up to 32 times more concentrated in flavonols, and up to 225 times more concentrated in catechins than the flower extract.
Une étude parallèle de la composition en minéraux (Ca, K, Mg, Na, P) des différents extraits, montre que l’extrait de bois de rose (1947mg/kg) est 2,5 fois plus concentré en minéraux que l’extrait de fruit (70mg/kg) et 7 fois plus concentré que l’extrait de fleur (289,3mg/kg).A parallel study of the mineral composition (Ca, K, Mg, Na, P) of the different extracts shows that the rosewood extract (1947mg/kg) is 2.5 times more concentrated in minerals than the extract of fruit (70mg/kg) and 7 times more concentrated than the flower extract (289.3mg/kg).
Le fractionnement de l’extrait de bois de rose réalisé par chromatographie de partage centrifuge (Centrifugal Partition Chromatography CPC) a en outre permis d’obtenir un total de 12 fractions. Des analyses RMN, notamment13C ont permis la caractérisation de ces fractions. Les sucres simples (détectés dans les fractions F09, F10, F11 et F12) représentaient plus de 80% de la masse d'extrait sec. Divers acides organiques ont également été détectés (acide coumarique, acide gallique, acide succinique, acide malique et acide quinique). La catéchine et l'épicatéchine étaient les seuls flavonoïdes identifiés. Certains acides aminés ont également été identifiés (leucine, isoleucine et tyrosine).The fractionation of the rosewood extract carried out by centrifugal partition chromatography (Centrifugal Partition Chromatography CPC) also made it possible to obtain a total of 12 fractions. NMR analyses, in particular 13 C, made it possible to characterize these fractions. Simple sugars (detected in the F09, F10, F11 and F12 fractions) represented more than 80% of the dry extract mass. Various organic acids were also detected (coumaric acid, gallic acid, succinic acid, malic acid and quinic acid). Catechin and epicatechin were the only flavonoids identified. Certain amino acids have also been identified (leucine, isoleucine and tyrosine).
En particulier, ledit extrait de bois de rose selon l’invention comprend les métabolites suivants (noms chimiques en anglais) :In particular, said rosewood extract according to the invention comprises the following metabolites (chemical names in English):
- Gallic acid : CAS 149-91-7- Gallic acid: CAS 149-91-7
- Catechin : CAS 154-23-4- Catechin: CAS 154-23-4
- Epicatechin : CAS 490-46-0- Epicatechin: CAS 490-46-0
-p-Coumaric acid : CAS 501-98-4 -p -Coumaric acid: CAS 501-98-4
- β-Hydroxypropiovanillone : CAS 2196-18-1- β-Hydroxypropiovanillone: CAS 2196-18-1
- 3-Methoxygallic acid : CAS 3934-84-7- 3-Methoxygallic acid: CAS 3934-84-7
- Glycerol : CAS 56-81-5- Glycerol: CAS 56-81-5
- 1,3-Propanediol : CAS 504-63-2- 1,3-Propanediol: CAS 504-63-2
- (3 or 5)-monogalloylquinic acid : CAS 93132-94-6 (without stereochemistry)- (3 or 5)-monogalloylquinic acid: CAS 93132-94-6 (without stereochemistry)
- Malic acid : CAS 6915-15-7- Malic acid: CAS 6915-15-7
- Leucine : CAS 328-39-2- Leucine: CAS 328-39-2
- Tyrosine : CAS 556-03-6- Tyrosine: CAS 556-03-6
- Isoleucine : CAS 443-79-8- Isoleucine: CAS 443-79-8
- β-D-glucose : CAS 492-61-5- β-D-glucose: CAS 492-61-5
- α-D-glucose : CAS 492-62-6- α-D-glucose: CAS 492-62-6
- β-D-fructofuranose : CAS 470-23-5- β-D-fructofuranose: CAS 470-23-5
- α -D-fructofuranose : CAS 10489-79-9- α -D-fructofuranose: CAS 10489-79-9
- β-D-fructopyranose : CAS 7660-25-5- β-D-fructopyranose: CAS 7660-25-5
- Methyl-1-glucose : CAS 709-50-2- Methyl-1-glucose: CAS 709-50-2
- Quinic acid : CAS 77-95-2- Quinic acid: CAS 77-95-2
- Rhamnopyranose : CAS 73-34-7- Rhamnopyranosis: CAS 73-34-7
- 1-Monoacetin : CAS 106-61-6- 1-Monoacetin: CAS 106-61-6
- Succinic acid : CAS 110-15-6- Succinic acid: CAS 110-15-6
Parmi ces composés, on note en particulier la présence des composés suivants : catéchine, épicatéchine, β-hydroxypropiovanillone, acide 3-methoxygallique et acide galloylquinique.Among these compounds, the presence of the following compounds is noted in particular: catechin, epicatechin, β-hydroxypropiovanillone, 3-methoxygallic acid and galloylquinic acid.
Ainsi, un autre objet de l’invention concerne donc un composé choisi parmi l’acide gallique, la catéchine, l’épicatechine, l’acidep-coumaric, la β-hydroxypropiovanillone, l’acide 3-methoxygallique, l’acide (3 ou 5)-monogalloylquinique, l’acide malique, la leucine, la tyrosine, l’isoleucine, le β-D-glucose, le α-D-glucose, le β-D-fructofuranose, le α -D-fructofuranose, le β-D-fructopyranose, le methyl-1-glucose, l’acide quinique, le rhamnopyranose, l’acide succinique, et leurs mélanges, ou un extrait végétal le contenant, en particulier un extrait de bois de rose selon l’invention, pour favoriser et/ou améliorer la régénération, la réparation et/ou la cicatrisation de la peau.Thus, another object of the invention therefore relates to a compound chosen from gallic acid, catechin, epicatechin, p -coumaric acid, β-hydroxypropiovanillone, 3-methoxygallic acid, acid ( 3 or 5)-monogalloylquinic acid, malic acid, leucine, tyrosine, isoleucine, β-D-glucose, α-D-glucose, β-D-fructofuranose, α -D-fructofuranose, β-D-fructopyranose, methyl-1-glucose, quinic acid, rhamnopyranose, succinic acid, and mixtures thereof, or a plant extract containing it, in particular a rosewood extract according to the invention , for promoting and/or improving the regeneration, repair and/or healing of the skin.
Selon un mode particulier, le composé est choisi parmi la catéchine, l’épicatechine, la β-hydroxypropiovanillone, l’acide 3-methoxygallique et l’acide galloylquinique, ou un extrait végétal le contenant, en particulier un extrait de bois de rose selon l’invention, pour favoriser et/ou améliorer la régénération, la réparation et/ou la cicatrisation de la peau.According to a particular embodiment, the compound is chosen from catechin, epicatechin, β-hydroxypropiovanillone, 3-methoxygallic acid and galloylquinic acid, or a plant extract containing it, in particular a rosewood extract according to the invention, to promote and/or improve the regeneration, repair and/or healing of the skin.
Selon un autre mode particulier, le composé est choisi parmi l’acide malique, l’acide gallique, la catéchine, l’épicathéchine, la leucine, et leurs mélanges, ou un extrait végétal le contenant, en particulier un extrait de bois de rose selon l’invention, pour favoriser et/ou améliorer la régénération, la réparation et/ou la cicatrisation de la peau.According to another particular embodiment, the compound is chosen from malic acid, gallic acid, catechin, epicathechin, leucine, and mixtures thereof, or a plant extract containing it, in particular a rosewood extract. according to the invention, to promote and/or improve the regeneration, repair and/or healing of the skin.
Selon un autre mode particulier, le composé est choisi parmi les acides uroniques, le fucose, le galactose, la cellobiose, le cellobionate, la tyrosine, l’arginine, la β-hedroxypropiovanillone, l’acide galloylquinique, l’acide coumarique, l’acide férulique, et leurs mélanges, ou un extrait végétal le contenant, en particulier un extrait de bois de rose selon l’invention, pour favoriser et/ou améliorer la régénération, la réparation et/ou la cicatrisation de la peau.According to another particular embodiment, the compound is chosen from uronic acids, fucose, galactose, cellobiose, cellobionate, tyrosine, arginine, β-hedroxypropiovanillone, galloylquinic acid, coumaric acid, ferulic acid, and mixtures thereof, or a plant extract containing it, in particular a rosewood extract according to the invention, for promoting and/or improving the regeneration, repair and/or healing of the skin.
Selon un mode particulier, le composé est choisi parmi l’acide gallique, l’acidep-coumarique, l’acide 3-Methoxygallique, l’acide (3 ou 5)-monogalloylquinique, l’acide malique, l’acide quinique, l’acide succinique, la β-hydroxypropiovanillone et leurs mélanges, ou un extrait végétal le contenant, en particulier un extrait de bois de rose selon l’invention, pour favoriser et/ou améliorer la régénération, la réparation et/ou la cicatrisation de la peau.According to a particular embodiment, the compound is chosen from gallic acid, p -coumaric acid, 3-methoxygallic acid, (3 or 5)-monogalloylquinic acid, malic acid, quinic acid, succinic acid, β-hydroxypropiovanillone and mixtures thereof, or a plant extract containing it, in particular a rosewood extract according to the invention, for promoting and/or improving the regeneration, repair and/or healing of the skin.
Selon un autre mode particulier, le composé est choisi parmi la catéchine, l’épicatechine et leurs mélanges, ou un extrait végétal le contenant, en particulier un extrait de bois de rose selon l’invention, pour favoriser et/ou améliorer la régénération, la réparation et/ou la cicatrisation de la peau.According to another particular embodiment, the compound is chosen from catechin, epicatechin and mixtures thereof, or a plant extract containing it, in particular a rosewood extract according to the invention, to promote and/or improve regeneration, repair and/or healing of the skin.
Selon un autre mode particulier, le composé est choisi parmi la leucine, la tyrosine, l’isoleucine, et leurs mélanges, ou un extrait végétal le contenant, en particulier un extrait de bois de rose selon l’invention, pour favoriser et/ou améliorer la régénération, la réparation et/ou la cicatrisation de la peau.According to another particular embodiment, the compound is chosen from leucine, tyrosine, isoleucine, and mixtures thereof, or a plant extract containing it, in particular a rosewood extract according to the invention, to promote and/or improve the regeneration, repair and/or healing of the skin.
Selon un autre mode particulier, le composé est choisi parmi le β-D-glucose, le α-D-glucose, le β-D-fructofuranose, le α-D-fructofuranose, le β-D-fructopyranose, le méthyl-1-glucose, le rhamnopyranose, et leurs mélanges, ou un extrait végétal le contenant, en particulier un extrait de bois de rose selon l’invention, pour favoriser et/ou améliorer la régénération, la réparation et/ou la cicatrisation de la peau.According to another particular embodiment, the compound is chosen from β-D-glucose, α-D-glucose, β-D-fructofuranose, α-D-fructofuranose, β-D-fructopyranose, methyl-1 -glucose, rhamnopyranose, and mixtures thereof, or a plant extract containing it, in particular a rosewood extract according to the invention, to promote and/or improve the regeneration, repair and/or healing of the skin.
GALENIQUEGALENIC
L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est mis en œuvre dans une composition cosmétique pour application topique sur la peau et/ou les lèvres, en particulier la peau du visage, des mains et/ou du corps, comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable.The aqueous extract of rosewood according to the invention is used in a cosmetic composition for topical application to the skin and/or the lips, in particular the skin of the face, the hands and/or the body, comprising in a physiologically acceptable medium.
L’extrait aqueux de bois de rose est présent dans la composition cosmétique de l’invention dans une quantité efficace pour obtenir l’effet recherché.The aqueous extract of rosewood is present in the cosmetic composition of the invention in an effective amount to obtain the desired effect.
En particulier, il est présent en une teneur allant de 0,1% à 20%, de préférence de 0,5% à 10%, et de préférence encore de 1% à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de la composition. Des exemples illustratifs sont donnés ci-après. La composition cosmétique de l’invention peut se présenter sous toute forme galénique adaptée à une application topique sur la peau et/ou les lèvres et en particulier la peau, par exemple un sérum, une émulsion huile-dans-eau, une émulsion eau-dans-huile, une émulsion multiple, une microémulsion, une lotion, une suspension, un gel aqueux, un stick, une poudre. La composition selon l’invention peut être une composition de soin et/ou de maquillage de la peau et/ou des lèvres, en particulier de la peau.In particular, it is present in a content ranging from 0.1% to 20%, preferably from 0.5% to 10%, and more preferably from 1% to 5% by weight of raw material relative to the total weight. of composition. Illustrative examples are given below. The cosmetic composition of the invention may be in any pharmaceutical form suitable for topical application to the skin and/or the lips and in particular the skin, for example a serum, an oil-in-water emulsion, a water- in-oil, a multiple emulsion, a microemulsion, a lotion, a suspension, an aqueous gel, a stick, a powder. The composition according to the invention may be a composition for caring for and/or making up the skin and/or the lips, in particular the skin.
La composition est préférentiellement destinée à être appliquée sur la peau du visage, des mains et/ou du corps ou sur les lèvres et se présente par exemple sous la forme d’une lotion, d'une crème de soin, d’un sérum, d'un fluide pour le visage, d’un gel de soin pour le visage et/ou le corps, d’une composition de soin des lèvres, d’un baume à lèvres, d’un rouge à lèvre, ou d’un gloss.The composition is preferably intended to be applied to the skin of the face, hands and/or body or to the lips and is for example in the form of a lotion, a care cream, a serum, a fluid for the face, a care gel for the face and/or the body, a care composition for the lips, a lip balm, a lipstick, or a gloss.
Selon un mode particulier, la composition cosmétique selon l’invention est sous la forme d’une crème de soin et/ou de maquillage pour le visage et/ou les mains.According to a particular embodiment, the cosmetic composition according to the invention is in the form of a care and/or make-up cream for the face and/or the hands.
Selon un autre mode particulier, la composition cosmétique selon l’invention est sous la forme d’un gel aqueux pour le contour des yeux.According to another particular embodiment, the cosmetic composition according to the invention is in the form of an aqueous gel for the eye contour.
Selon un autre mode particulier, la composition cosmétique selon l’invention est sous la forme d’une composition de soin et/ou de maquillage pour les lèvres.According to another particular embodiment, the cosmetic composition according to the invention is in the form of a care and/or makeup composition for the lips.
La phase aqueuse représente généralement de 1 à 99% en poids, par rapport au poids total de ladite composition.The aqueous phase generally represents from 1 to 99% by weight, relative to the total weight of said composition.
Phase aqueuseAqueous phase
La phase aqueuse de la composition selon l'invention comprend de l'eau et éventuellement un solvant hydrosoluble.The aqueous phase of the composition according to the invention comprises water and optionally a water-soluble solvent.
On entend par ‘solvant hydrosoluble’ selon l’invention, un composé liquide à température ambiante et miscible à l'eau (miscibilité dans l'eau supérieure à 50 % en poids à 25 °C et pression atmosphérique). On peut citer notamment :The term “water-soluble solvent” according to the invention means a compound that is liquid at room temperature and miscible with water (miscibility in water greater than 50% by weight at 25° C. and atmospheric pressure). We can cite in particular:
- les mono-alcools inférieurs en C1-C5 tels que l'éthanol, l'isopropanol et leurs mélanges ;- C1-C5 lower mono-alcohols such as ethanol, isopropanol and mixtures thereof;
- les glycols en C2-C8 tels que l'éthylène glycol, le propylène glycol, le 1,3-butylène glycol, le dipropylène glycol, et leurs mélanges ;- C2-C8 glycols such as ethylene glycol, propylene glycol, 1,3-butylene glycol, dipropylene glycol, and mixtures thereof;
- les polyols en C2-C32 tels que les polyglycérols, les polyéthylènes glycols, et leurs mélanges,- C2-C32 polyols such as polyglycerols, polyethylene glycols, and mixtures thereof,
et leurs mélanges.and their mixtures.
Elle peut comprendre également des gélifiants hydrophiles, des antioxydants, des conservateurs et leurs mélanges.It may also comprise hydrophilic gelling agents, antioxidants, preservatives and mixtures thereof.
A titre de gélifiants hydrophiles, on peut citer notamment les polymères d’acide acrylique tels que ceux de Nom INCI Carbomer ou de référence commerciale Carbopol®, les copolymères d’acides acrylique et méthacrylique, les polymères carboxyvinyliques, les épaississants associatifs de type acrylique ou polyuréthane, les gélifiants polysaccharidiques tels que les alginates, les gommes naturelles ou modifiées telles que les gommes de xanthane, les gommes de carraghénanes, les gommes d’agar, les gommes de guar, les gommes de gellane, les chitosans, les mannanes, les pullulanes, les dérivés de la cellulose, la gélatine, les pectines, les gélifiants minéraux tels que les bentones ou les silices modifiées, et leurs mélanges.As hydrophilic gelling agents, mention may in particular be made of acrylic acid polymers such as those with INCI name Carbomer or commercial reference Carbopol®, copolymers of acrylic and methacrylic acids, carboxyvinyl polymers, associative thickeners of acrylic type or polyurethane, polysaccharide gelling agents such as alginates, natural or modified gums such as xanthan gums, carrageenan gums, agar gums, guar gums, gellan gums, chitosans, mannans, pullulans, cellulose derivatives, gelatin, pectins, mineral gelling agents such as bentones or modified silicas, and mixtures thereof.
Par gomme naturelle ou modifiée on entend un polysaccharide éventuellement modifié qui s'hydrate en milieu aqueux pour former une solution visqueuse ou une dispersion. Parmi les gommes naturelles on inclut les extraits d'algues, les exsudats de plantes et les gommes extraites de graines ou de racines végétales et celles obtenues par fermentation microbiologique. Les gommes modifiées ou semi-synthétiques comprennent les dérivés de la cellulose et de l'amidon et, de façon générale, les dérivés de toutes les gommes naturelles.By natural or modified gum is meant an optionally modified polysaccharide which hydrates in an aqueous medium to form a viscous solution or a dispersion. Natural gums include seaweed extracts, plant exudates and gums extracted from seeds or plant roots and those obtained by microbiological fermentation. Modified or semi-synthetic gums include derivatives of cellulose and starch and, in general, derivatives of all natural gums.
Selon un mode particulier, la composition cosmétique de l’invention comprend une phase aqueuse gélifiée, notamment par la présence d’au moins un polymère acrylique, en particulier un polymère d’acide acrylique ou copolymère d’acide acrylique et méthacrylique.According to a particular embodiment, the cosmetic composition of the invention comprises a gelled aqueous phase, in particular by the presence of at least one acrylic polymer, in particular an acrylic acid polymer or a copolymer of acrylic and methacrylic acid.
La teneur en gélifiant(s) hydrophile(s) dans la composition cosmétique de l’invention ira généralement de 0,5 à 5%, notamment de 0,7 à 4%, de préférence de 0,9 à 3% et de préférence encore de 1 à 2% en poids par rapport au poids total de ladite composition.The content of hydrophilic gelling agent(s) in the cosmetic composition of the invention will generally range from 0.5 to 5%, in particular from 0.7 to 4%, preferably from 0.9 to 3% and preferably still from 1 to 2% by weight relative to the total weight of said composition.
Phase grasse ou huileuseFatty or oily phase
La composition cosmétique de l’invention peut comprendre en outre une phase grasse (corps gras solides) ou huileuse.The cosmetic composition of the invention may also comprise a fatty (solid fatty substances) or oily phase.
On entend par « phase huileuse » une huile ou un mélange d'huiles miscibles entre elles. Par « huile », on entend, au sens de l'invention, un corps gras, non soluble dans l'eau, liquide à 25°C et pression atmosphérique.The term “oily phase” means an oil or a mixture of oils which are miscible with each other. By “oil” is meant, within the meaning of the invention, a fatty substance, insoluble in water, liquid at 25° C. and atmospheric pressure.
Une phase huileuse selon l’invention peut comprendre des huiles hydrocarbonées, siliconées, fluorées ou non, et leurs mélanges.An oily phase according to the invention can comprise hydrocarbon oils, silicone oils, fluorinated or not, and mixtures thereof.
Ces huiles peuvent être volatiles ou non volatiles, végétale, minérale ou synthétique.These oils can be volatile or non-volatile, vegetable, mineral or synthetic.
Par ‘huile hydrocarbonée’, on entend selon l’invention une huile contenant principalement des atomes d’hydrogène et de carbone.By “hydrocarbon oil” is meant according to the invention an oil mainly containing hydrogen and carbon atoms.
Par ‘huile siliconée’, on entend selon l’invention une huile comprenant au moins un atome de silicium, et notamment au moins un groupe Si-O.By “silicone oil”, is meant according to the invention an oil comprising at least one silicon atom, and in particular at least one Si—O group.
Par ‘huile fluorée’, on entend selon l’invention une huile comprenant au moins un atome de fluor.By “fluorinated oil” is meant according to the invention an oil comprising at least one fluorine atom.
Comme huiles non volatiles hydrocarbonées, on peut citer notamment les huiles hydrocarbonées, les huiles hydrocarbonées d’origine végétale, les éthers de synthèse en C10-C40, les esters de synthèse en C10-C40, les alcools gras en C12-C26, les acides gras supérieurs en C12-C22, et leurs mélanges.As non-volatile hydrocarbon-based oils, mention may in particular be made of hydrocarbon-based oils, hydrocarbon-based oils of plant origin, C10-C40 synthetic ethers, C10-C40 synthetic esters, C12-C26 fatty alcohols, C12-C22 higher fats, and mixtures thereof.
Comme huiles non volatiles siliconées, on peut citer notamment les huiles siliconées phénylées, les huiles siliconées non phénylées, et leurs mélanges.As non-volatile silicone oils, mention may in particular be made of phenyl silicone oils, non-phenyl silicone oils, and mixtures thereof.
Les huiles pourront être présentes dans la composition de l’invention en une teneur allant de 0,01 à 95 % en poids par rapport au poids total de la composition.The oils may be present in the composition of the invention in a content ranging from 0.01 to 95% by weight relative to the total weight of the composition.
La phase grasse ou huileuse peut comprendre également des gélifiants lipophiles, des polymères filmogènes, des tensioactifs, des antioxydants et leurs mélanges.The fatty or oily phase can also comprise lipophilic gelling agents, film-forming polymers, surfactants, antioxidants and mixtures thereof.
Selon un mode particulier de l’invention, la composition cosmétique est sous la forme d’une solution, d’une émulsion, d’un sérum ou d’un gel.According to a particular embodiment of the invention, the cosmetic composition is in the form of a solution, an emulsion, a serum or a gel.
Selon un mode particulier, la composition cosmétique de l’invention ne comprend pas d’autre extrait de rose que des extraits de rose de la variété Evanrat ou Rose Jardin de Granville®.According to a particular embodiment, the cosmetic composition of the invention does not comprise any rose extract other than rose extracts of the Evanrat or Rose Jardin de Granville® variety.
Ingrédients additionnelsAdditional ingredients
La composition de l'invention peut également comprendre tout additif usuellement utilisé en cosmétique tels que des filtres UV, des antioxydants, des parfums, des agents actifs cosmétiques, comme par exemple des agents émollients, des agents hydratants, des agents apaisants, et des charges, des pigments, des nacres et leurs mélanges.The composition of the invention can also comprise any additive usually used in cosmetics such as UV filters, antioxidants, perfumes, cosmetic active agents, such as for example emollient agents, moisturizing agents, soothing agents, and fillers. , pigments, nacres and mixtures thereof.
Selon un mode particulier, la composition cosmétique de l’invention ne comprend pas d’autre extrait de rose que des extraits de rose de la variété Evanrat ou Rose Jardin de Granville®.According to one particular embodiment, the cosmetic composition of the invention does not comprise any rose extract other than rose extracts of the Evanrat or Rose Jardin de Granville® variety .
UTILISATIONSUSES
L’invention porte ainsi sur un extrait aqueux de bois de rose, de préférence de bois de rose d’été, obtenu par extraction enzymatique au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable, ou composition le contenant, pour favoriser et/ou améliorer la régénération de la peau et/ou des lèvres, en particulier de la peau.The invention thus relates to an aqueous extract of rosewood, preferably summer rosewood, obtained by enzymatic extraction using a cosmetically acceptable polar solvent, or a composition containing it, to promote and/or improve the regeneration of the skin and/or of the lips, in particular of the skin.
Par ‘régénération’, on entend que l’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est capable favoriser et/ou stimuler la régénération cellulaire et tissulaire cutanée, en favorisant la prolifération cellulaire. En particulier, l’extrait de bois de rose favorise et/ou améliore la régénération d’une peau et/ou de lèvres lésées et/ou altérées.By “regeneration”, it is meant that the aqueous extract of rosewood according to the invention is capable of promoting and/or stimulating skin cell and tissue regeneration, by promoting cell proliferation. In particular, rosewood extract promotes and/or improves the regeneration of injured and/or altered skin and/or lips.
Par ‘peau et/ou lèvres lésées et/ou altérées’, on entend notamment une peau et/ou des lèvres présentant des lésions et/ou altérations superficielles, liées notamment à des traitements chimiques et/ou abrasifs, comme des traitements laser, peeling, dermabrasions, et/ou des brûlures du 1erdegré, et/ou des maladies de la peau, telles que l’acné en particulier. On parlera notamment de lésions d’acné ou cicatrices d’acné.By 'damaged and/or altered skin and/or lips' is meant in particular skin and/or lips showing superficial lesions and/or alterations, linked in particular to chemical and/or abrasive treatments, such as laser treatments, peeling , dermabrasions, and/or 1st degree burns, and/or skin diseases, such as acne in particular. Reference will be made in particular to acne lesions or acne scars.
Un autre objet de l’invention est un extrait aqueux de bois de rose, de préférence de bois de rose d’été, obtenu par extraction enzymatique au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable, ou composition le contenant, pour favoriser et/ou améliorer la réparation et/ou la cicatrisation de la peau et/ou des lèvres, en particulier la cicatrisation de la peau.Another object of the invention is an aqueous extract of rosewood, preferably summer rosewood, obtained by enzymatic extraction using a cosmetically acceptable polar solvent, or composition containing it, to promote and/or improve the repair and/or the healing of the skin and/or the lips, in particular the healing of the skin.
Par ‘réparation et/ou cicatrisation’, on entend que l’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est capable favoriser et/ou stimuler la prolifération, migration et adhésion cellulaire d’une peau lésée et/ou altérée.By ‘repair and/or healing’, it is meant that the aqueous extract of rosewood according to the invention is capable of promoting and/or stimulating the proliferation, migration and cell adhesion of injured and/or altered skin.
Selon un mode particulier, l’extrait aqueux de bois de rose ou composition en contenant destiné à améliorer la qualité de la peau pendant et/ou après la cicatrisation.According to a particular mode, the aqueous extract of rosewood or composition containing it intended to improve the quality of the skin during and/or after healing.
Selon un mode particulier, l’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est utilisé chez des sujets présentant des lésions et/ou altérations cutanées.According to a particular mode, the aqueous extract of rosewood according to the invention is used in subjects with skin lesions and/or alterations.
Selon un mode particulier, les lésions cutanées sont liées à l’acné.In one particular way, skin lesions are linked to acne.
Selon un autre mode particulier, les lésions et/ou altérations cutanées sont liées à des traitements chimiques et/ou abrasifs, tels que des traitements laser, peeling, dermabrasions, et/ou liées à des brûlures du 1erdegré, notamment induites par une exposition excessive au soleil ou à la suite d'une exposition à une forte source de chaleur.According to another particular mode, the skin lesions and/or alterations are linked to chemical and/or abrasive treatments, such as laser treatments, peelings, dermabrasions, and/or linked to 1st degree burns, in particular induced by a excessive exposure to the sun or following exposure to a strong source of heat.
Selon un mode particulier, ledit extrait aqueux de bois de rose utilisé selon l’invention est obtenu par un procédé d’extraction enzymatique comprenant les étapes :
a) addition d'eau au bois de rose préalablement broyé présentant une taille de particule appropriée
b) addition d'un mélange enzymatique contenant au moins une cellulase, au moins une hémicellulase et au moins une pectinase, et avantageusement en outre au moins une protéase,
c) incubation sous agitation du bois de rose préalablement broyé et du mélange enzymatique pour libérer dans le milieu réactionnel des huiles, des protéines et des sucres fermentescibles, pendant une durée dépendant des rendements recherchés,According to a particular embodiment, said aqueous extract of rosewood used according to the invention is obtained by an enzymatic extraction process comprising the steps:
a) addition of water to previously ground rosewood having an appropriate particle size
b) addition of an enzyme mixture containing at least one cellulase, at least one hemicellulase and at least one pectinase, and advantageously in addition at least one protease,
c) incubation with stirring of the previously ground rosewood and of the enzymatic mixture to release oils, proteins and fermentable sugars into the reaction medium, for a period depending on the desired yields,
d) séparation du milieu réactionnel pour obtenir de l'huile libre, une phase aqueuse contenant des protéines et des sucres fermentescibles, et une phase solide,
e) séparation de la phase aqueuse et ajout éventuel de conservateurs.d) separation of the reaction medium to obtain free oil, an aqueous phase containing proteins and fermentable sugars, and a solid phase,
e) separation of the aqueous phase and optional addition of preservatives.
Selon un mode particulier et préféré, l’extrait aqueux de bois de rose est obtenu à partir de roses de la variété Evanrat, en particulier de la variété rose Jardin de Granville®.According to a particular and preferred mode, the aqueous extract of rosewood is obtained from roses of the Evanrat variety, in particular the Jardin de Granville® rose variety.
Selon un mode particulier et préféré, l’extrait aqueux de bois de rose utilisé selon l’invention comprend au moins un composé choisi parmi l’acide mallique, l’acide gallique, la catéchine, l’épicathechine, la leucine, et leurs mélanges.According to a particular and preferred mode, the aqueous extract of rosewood used according to the invention comprises at least one compound chosen from mallic acid, gallic acid, catechin, epicathechin, leucine, and mixtures thereof. .
L’invention va désormais être illustrée dans les exemples non limitatifs suivants. Sauf indication contraire, les % sont exprimés en % en poids par rapport au poids total de la composition.The invention will now be illustrated in the following non-limiting examples. Unless otherwise indicated, the % are expressed as % by weight relative to the total weight of the composition.
Des analyses ont été faites sur un extrait de bois de rose selon l’invention et d’autres extraits aqueux de rose (extrait aqueux de fleur de rose et extrait aqueux de fruit de rose).Analyzes were carried out on a rosewood extract according to the invention and other aqueous rose extracts (aqueous extract of rose flower and aqueous extract of rose fruit).
L’extrait de fleur de rose est décrit dans les exemples de la demande FR 3 066 388 et l’extrait aqueux de fruit de rose est décrit dans les exemples de la demande FR 3 080 285.The rose flower extract is described in the examples of application FR 3 066 388 and the aqueous extract of rose fruit is described in the examples of application FR 3 080 285.
Exemple 1 :Example 1: EE xtraction à partirextraction from de bois de rosrosewood ee et analyse de ces extraitsand analysis of these extracts
Préparation du végétalPlant preparation
On utilise des bois de rose et fleurs de rose de la variété Evanrat, en particulier de la variété rose Jardin de Granville®. De préférence, le matériel végétal d’origine comprend des bois de rose et des fleurs de rose dans une proportion 0,01% fleurs pour 99,99% de bois à 1% fleurs pour 99% de bois.Rosewood and rose flowers of the Evanrat variety, in particular the Jardin de Granville® rose variety, are used. Preferably, the original plant material comprises rosewood and rose flowers in a proportion of 0.01% flowers to 99.99% wood to 1% flowers to 99% wood.
Les matières premières, ici le bois de rose, éventuellement additionné de fleurs de rose, ont été réduites en poudre en trois étapes.The raw materials, here rosewood, possibly with the addition of rose blossoms, were reduced to powder in three stages.
Etape 1 : passage dans un broyeur de jardin afin d’obtenir des tronçons de deux centimètresStep 1: pass through a garden shredder to obtain sections of two centimeters
Etape 2 : passage dans un broyeur industrielStep 2: passing through an industrial grinder
Mise en solutionDissolution
L’extraction enzymatique a été réalisée dans un réacteur d'une contenance maximale de 70 L. Le réacteur est agité par hélice et est thermostaté par double enveloppe.The enzymatic extraction was carried out in a reactor with a maximum capacity of 70 L. The reactor is stirred by a propeller and is thermostatically controlled by a double jacket.
16 kg de poudre de bois de rose à 0.1% de fleurs de rose sont dispersés et mis en suspension dans 47,5 kg d'eau.16 kg of rosewood powder containing 0.1% rose flowers are dispersed and suspended in 47.5 kg of water.
Afin de désactiver les enzymes endogènes, le mélange a été élevé à une température de 85°C pendant 1 min puis stabilisé à 50°C.In order to deactivate endogenous enzymes, the mixture was raised to a temperature of 85°C for 1 min and then stabilized at 50°C.
Lyse des parois végétalesLysis of plant walls
0,8 kg d’un cocktail Enzymatique HEL1PR1 comprenant un mélange de cellulases, d’hémicellulases et de pectinases à 75% et des protéases à 25%, ont été ajoutés au mélange réactionnel correspondant (5% w/w). La réaction est poursuivie pendant 4 heures, la température est maintenue à 50°C.0.8 kg of a HEL1PR1 enzyme cocktail comprising a mixture of cellulases, hemicellulases and pectinases at 75% and proteases at 25%, were added to the corresponding reaction mixture (5% w/w). The reaction is continued for 4 hours, the temperature is maintained at 50°C.
Inactivation des enzymesInactivation of enzymes
Le mélange a été porté à 85°C pendant 1 min afin d'inactiver les enzymes, puis ramené à 35°C.The mixture was brought to 85°C for 1 min in order to inactivate the enzymes, then brought back to 35°C.
Pré filtrationPre filtration
Le mélange est préfiltré sur tamis de 0,8 mm puis 0,5 mm afin de retirer la partie le plus importante de la phase solide, puis sur un drap.The mixture is pre-filtered on a 0.8 mm then 0.5 mm sieve in order to remove the most significant part of the solid phase, then on a cloth.
Filtration stérilisanteSterilizing filtration
Une filtration a été réalisée sur plaques clarifiantes (PALL corporation) d’une taille de pores de 0,2 µm, à une pression de 2 Bars.Filtration was carried out on clarifying plates (PALL corporation) with a pore size of 0.2 µm, at a pressure of 2 bars.
FormulationFormulation
La phase aqueuse obtenue après filtration stérilisante est stabilisée avec les conservateurs suivants :The aqueous phase obtained after sterilizing filtration is stabilized with the following preservatives:
- Acide citrique- Citric acid
- Sorbate de potassium et- Potassium sorbate and
- Benzoate de sodium- Sodium benzoate
On obtient, après filtration, un extrait aqueux de bois de rose à 3.7% en poids de matière sèche par rapport au poids total de l’extrait. Cet extrait est utilisé dans les exemples suivants visant à mettre en évidence ses effets sur la réparation et/ou régénération et/ou cicatrisation de la peau.After filtration, an aqueous extract of rosewood containing 3.7% by weight of dry matter relative to the total weight of the extract is obtained. This extract is used in the following examples aimed at demonstrating its effects on the repair and/or regeneration and/or healing of the skin.
Des dosages réalisés sur cet extrait aqueux non stabilisé par des conservateurs donnent les résultats suivants :Assays carried out on this aqueous extract not stabilized by preservatives give the following results:
Polyphénols totaux (g/L) : 2,5Total polyphenols (g/L): 2.5
Sucres réducteurs (g/L) : 16,2Reducing sugars (g/L): 16.2
Azote protéique (g/L) : 0,64Protein nitrogen (g/L): 0.64
Protéines totales (g/L) : < 6Total protein (g/L): < 6
Glucose (g/100g): 1,4 (±0,8)Glucose (g/100g): 1.4 (±0.8)
Fructose (g/100g): 0,3 (±0,3)Fructose (g/100g): 0.3 (±0.3)
Exemple 2:Example 2: AAT nalyse phytochimique dphytochemical analysis d e l’extrait de bois de rose et d’autres extraits (fleur, fruit)e rosewood extract and other extracts (flower, fruit)
2.1 Analyse des flavonoides et polyphénols2.1 Analysis of flavonoids and polyphenols
Les extraits suivants ont été testés :The following extracts were tested:
- Extrait aqueux de bois de rose de l’invention, tel que préparé à l’exemple 1 ci-dessus : 3,7% d’extrait sec dans l’eau et 0.5% Acide citrique, 0.15% Sorbate de potassium, 0.3% Benzoate de sodium.Aqueous extract of rosewood of the invention, as prepared in example 1 above: 3.7% dry extract in water and 0.5% citric acid, 0.15% potassium sorbate, 0.3% benzoate sodium.
- Extrait aqueux de fleurs de rose de la variété Evanrat, en particulier de la variété rose Jardin de Granville® décrit dans les exemples (matériel et méthodes) de la demande FR 3 066 388 (‘Cryoextrait’) : 0,65% d’extrait sec dans de l’eau/ glycérol (50/50) et de l’acide citrique, 0.15% Sorbate de potassium, 0.3% Benzoate de sodium.Aqueous extract of rose flowers of the Evanrat variety, in particular of the Jardin de Granville® rose variety described in the examples (materials and methods) of application FR 3 066 388 ('Cryoextract'): 0.65% extract dry in water/glycerol (50/50) and citric acid, 0.15% Potassium Sorbate, 0.3% Sodium Benzoate.
- Extraits aqueux de fruits de rose de la variété Evanrat, en particulier de la variété rose Jardin de Granville® décrit dans les exemples (matériel et méthodes) de la demande FR 3 080 285 : 1,35 % en poids d’extrait sec dans l’eau, 0.5% d’acide citrique et des conservateurs qsp100%.Aqueous extracts of rose fruits of the Evanrat variety, in particular of the Jardin de Granville® rose variety described in the examples (materials and methods) of application FR 3 080 285: 1.35% by weight of dry extract in the water, 0.5% citric acid and qsp100% preservatives.
200 ng d’apigénine sont ajoutés aux échantillons avant filtration, comme étalon interne. Après filtration sur fibre de verre, les aliquots sont prêts à être analysés.200 ng of apigenin is added to the samples before filtration, as an internal standard. After filtration on fiberglass, the aliquots are ready for analysis.
Analyse Chromatographie liquide et Spectrométrie de masseLiquid Chromatography and Mass Spectrometry Analysis
1 µL d’échantillon a été injecté dans un système de chromatographie liquide ultra-performance (UPLC) UPLC-I-Class couplé à un spectromètre de masse Xevo-TQ-S Waters avec ionisation par electrospray selon les recommandations du fournisseur.1 µL of sample was injected into a UPLC-I-Class ultra-performance liquid chromatography (UPLC) system coupled to a Waters Xevo-TQ-S mass spectrometer with electrospray ionization according to the supplier's recommendations.
Chaque composé est quantifié et la teneur du composé est exprimée en ng équivalent apigénine (étalon interne) par µL d’échantillon.Each compound is quantified and the content of the compound is expressed in ng apigenin equivalent (internal standard) per µL of sample.
Concernant les métabolites secondaires phénoliques, 133 composés ont été recherchés dans les trois types d’échantillon (fleurs, bois, fruits) à partir de la bibliographie. 81 composés ont été détectés et annotés par LC-MS et MS/MS dans les trois types d’échantillons, et quantifiés de façon relative : il s’agit de 19 flavonols dérivés de la quercétine, 16 flavonols dérivés du kaempférol, 3 flavanonols, 1 anthocyane, 22 flavan-3-ols (incluant catéchine et tannins), 12 gallotannins, 5 ellagitannins et 2 dérivés de l’acide quinique. Ni flavone, ni leucoanthocyanidine n’ont été détectées.Concerning phenolic secondary metabolites, 133 compounds were searched for in the three types of sample (flowers, wood, fruits) from the bibliography. 81 compounds were detected and annotated by LC-MS and MS/MS in the three types of samples, and quantified relatively: these are 19 flavonols derived from quercetin, 16 flavonols derived from kaempferol, 3 flavanonols, 1 anthocyanin, 22 flavan-3-ols (including catechin and tannins), 12 gallotannins, 5 ellagitannins and 2 derivatives of quinic acid. Neither flavone nor leucoanthocyanidin were detected.
Les extraits ont une composition assez spécifique, d’après les teneurs des composés regroupées par famille chimique. Comme le montre la
La
Le bois de rose est en outre plus riche en gallotannins que les autres extraits comme le montre la
Le bois de rose contient une plus grande quantité d’ellagitannins que les autres extraits, comme le montre la
La
Ces résultats montrent que l’extrait aqueux de bois selon l’invention présente une concentration très importante en molécules, comparativement à d’autres extraits de rose (fleur, fruit). Il est notamment jusqu’à 32 fois plus concentré en flavonols, et jusqu’à 225 fois plus concentré en catéchines que l’extrait de fleur.These results show that the aqueous wood extract according to the invention has a very high concentration of molecules, compared to other rose extracts (flower, fruit). In particular, it is up to 32 times more concentrated in flavonols, and up to 225 times more concentrated in catechins than the flower extract.
Une étude parallèle de la composition en minéraux (Ca, K, Mg, Na, P) des différents extraits, montre que l’extrait de bois de rose (1947mg/kg) est 2,5 fois plus concentré en minéraux que l’extrait de fruit (70mg/kg) et 7 fois plus concentré que l’extrait de fleur (289,3mg/kg).A parallel study of the mineral composition (Ca, K, Mg, Na, P) of the different extracts shows that the rosewood extract (1947mg/kg) is 2.5 times more concentrated in minerals than the extract of fruit (70mg/kg) and 7 times more concentrated than the flower extract (289.3mg/kg).
Ces résultats montrent que l’extrait de bois est très riche en tannins, gallotannins et ellagitannins, ainsi qu’en flavononols, en plus de flavonols, comparativement aux extraits de fleur et de fruit de rose.These results show that the wood extract is very rich in tannins, gallotannins and ellagitannins, as well as flavononols, in addition to flavonols, compared to rose flower and rose fruit extracts.
2.2 Analyse moléculaire de l’extrait de bois de rose2.2 Molecular Analysis of Rosewood Extract
Le fractionnement de l’extrait de bois de rose a été réalisé par Chromatographie de partage centrifuge (Centrifugal Partition Chromatography CPC) selon les conditions opératoires décrites dans Rao V., « Centrifugal Partition Chromatography : an overview », International Journal of Pharmaceutical Research & Analysis 4(6), 2014, p. 353.The fractionation of the rosewood extract was carried out by centrifugal partition chromatography (Centrifugal Partition Chromatography CPC) according to the operating conditions described in Rao V., "Centrifugal Partition Chromatography: an overview", International Journal of Pharmaceutical Research & Analysis 4(6), 2014, p. 353.
En conséquence, 12 sous-fractions ont été obtenues comme illustrées à la
Analyses RMN et identification des principaux métabolitesNMR analyzes and identification of the main metabolites
Un aliquot de chaque fraction de F1 à F12 a été dissout dans 700 μL de DMSO-d6 et analysé par RMN13C à 298 K sur un spectromètre Bruker Avance AVIII-600 (Karlsruhe, Allemagne) équipé d'une cryosonde. Après le traitement des spectres, les intensités absolues de tous les signaux RMN 13C ont été automatiquement collectées et regroupées sur les spectres de la série de fractions à l'aide d'un script informatique dédié. Les résultats ont été importés dans le logiciel PermutMatrix (version 1.9.3, LIRMM, Montpellier, France) pour l'analyse de clustering hiérarchique. Les grappes de déplacement chimique RMN 13C résultantes ont été visualisées sous forme de dendrogrammes sur une carte à deux dimensions. Pour l'identification des métabolites, chaque cluster de déplacement chimique RMN 13C obtenu à partir de HCA a été soumis manuellement au moteur de recherche de structure du logiciel de gestion de base de données ACD / NMR Workbook Suite 2012 (ACD / Labs, Ontario, Canada) comprenant les structures et les déplacements chimiques prévus de faible produits naturels de poids moléculaire.An aliquot of each fraction from F1 to F12 was dissolved in 700 μL of DMSO-d6 and analyzed by 13 C NMR at 298 K on a Bruker Avance AVIII-600 spectrometer (Karlsruhe, Germany) equipped with a cryoprobe. After spectra processing, the absolute intensities of all 13C NMR signals were automatically collected and aggregated onto the fraction set spectra using a dedicated computer script. Results were imported into PermutMatrix software (version 1.9.3, LIRMM, Montpellier, France) for hierarchical clustering analysis. The resulting 13C NMR chemical shift clusters were visualized as dendrograms on a two-dimensional map. For metabolite identification, each 13C NMR chemical shift cluster obtained from HCA was manually submitted to the structure search engine of the ACD/NMR Workbook Suite 2012 database management software (ACD/Labs, Ontario, Canada) including the structures and predicted chemical shifts of low molecular weight natural products.
Des expériences supplémentaires de RMN 2D (HSQC, HMBC et COSY) ont été réalisées sur des fractions contenant des composés présumés identifiés pour confirmer les structures moléculaires proposées par la base de données à la fin du processus de dé-réplication.Additional 2D NMR experiments (HSQC, HMBC and COZY) were performed on fractions containing identified putative compounds to confirm the molecular structures proposed by the database at the end of the de-replication process.
Les principaux métabolites identifiés dans chaque fraction sont présentés dans la
La liste des métabolites identifiés dans cette étude est la suivante (noms chimiques) :The list of metabolites identified in this study is as follows (chemical names):
- Gallic acid: CAS 149-91-7- Gallic acid: CAS 149-91-7
- Catechin: CAS 154-23-4- Catechin: CAS 154-23-4
- Epicatechin: CAS 490-46-0- Epicatechin: CAS 490-46-0
-p-Coumaric acid: CAS 501-98-4 -p -Coumaric acid: CAS 501-98-4
- β-Hydroxypropiovanillone: CAS 2196-18-1- β-Hydroxypropiovanillone: CAS 2196-18-1
- 3-Methoxygallic acid: CAS 3934-84-7- 3-Methoxygallic acid: CAS 3934-84-7
- Glycerol: CAS 56-81-5- Glycerol: CAS 56-81-5
- 1,3-Propanediol: CAS 504-63-2- 1,3-Propanediol: CAS 504-63-2
- (3 or 5)-Monogalloylquinic acid: CAS 93132-94-6 (without stereochemistry)- (3 or 5)-Monogalloylquinic acid: CAS 93132-94-6 (without stereochemistry)
- Malic acid: CAS 6915-15-7- Malic acid: CAS 6915-15-7
- Leucine: CAS 328-39-2- Leucine: CAS 328-39-2
- Tyrosine: CAS 556-03-6- Tyrosine: CAS 556-03-6
- Isoleucine: CAS 443-79-8- Isoleucine: CAS 443-79-8
- β-D-Glucose: CAS 492-61-5- β-D-Glucose: CAS 492-61-5
- α-D-Glucose: CAS 492-62-6- α-D-Glucose: CAS 492-62-6
- β-D-Fructofuranose: CAS 470-23-5- β-D-Fructofuranose: CAS 470-23-5
- α -D-Fructofuranose: CAS 10489-79-9-α-D-Fructofuranose: CAS 10489-79-9
- β-D-Fructopyranose: CAS 7660-25-5- β-D-Fructopyranose: CAS 7660-25-5
- Methyl-1-glucose: CAS 709-50-2- Methyl-1-glucose: CAS 709-50-2
- Quinic acid: CAS 77-95-2- Quinic acid: CAS 77-95-2
- Rhamnopyranose: CAS 73-34-7- Rhamnopyranosis: CAS 73-34-7
- 1-Monoacetin: CAS 106-61-6- 1-Monoacetin: CAS 106-61-6
- Succinic acid: CAS 110-15-6- Succinic acid: CAS 110-15-6
Parmi ces composés, on note en particulier la présence des composés suivants (noms chimiques) : catéchine, épicatechine, β-hydroxypropiovanillone, acide 3-methoxygallique et acide galloylquinique.Among these compounds, the presence of the following compounds (chemical names) is noted in particular: catechin, epicatechin, β-hydroxypropiovanillone, 3-methoxygallic acid and galloylquinic acid.
Les effets biologiques de l’extrait de bois de rose selon l’invention ont ensuite été évalués et sont illustrés dans les exemples suivants.The biological effects of the rosewood extract according to the invention were then evaluated and are illustrated in the following examples.
ExempleExample 33 :: Effet de l’extrait de bois de rose sur la migration des cellulesEffect of rosewood extract on cell migration
L’effet de l’extrait de bois de rose (0,25%) est évalué au moyen d’un test nommé ‘scratch test’ : il s’agit d’un des modèles cellulaires de mesure du pouvoir de cicatrisation/régénération, qui consiste à réaliser une « blessure » calibrée au sein d’une monocouche de cellules en culture et de suivre sur un temps défini (plusieurs heures) la migration des cellules pour recouvrir la zone lésée, et ce, comparativement à une culture témoin (condition contrôle sans ajout de l’extrait).The effect of rosewood extract (0.25%) is assessed using a test called the 'scratch test': this is one of the cellular models for measuring healing/regeneration power, which consists in making a calibrated "wound" within a monolayer of cells in culture and monitoring over a defined time (several hours) the migration of the cells to cover the injured area, and this, compared to a control culture (condition control without adding the extract).
Les Fibroblastes Humains Normaux (FHN), isolés à partir d’une plastie sur un sujet de 58 ans et sur un sujet de 33 ans, sont ensemencés dans des plaques 96 puits (ImageLock, Sartorius, 4379) à une densité de 40 000 cellules par puits dans 100 µL de milieu de culture. Ces plaques sont préalablement coatées au collagène 1 (Culturex Rat Collagen I, R&D Systems, 3440-100-01) à la concentration de 5 µg/cm2.Normal Human Fibroblasts (NHF), isolated from a plasty on a 58-year-old subject and on a 33-year-old subject, are seeded in 96-well plates (ImageLock, Sartorius, 4379) at a density of 40,000 cells per well in 100 µL of culture medium. These plates are coated beforehand with collagen 1 (Culturex Rat Collagen I, R&D Systems, 3440-100-01) at a concentration of 5 μg/cm 2 .
Six heures après l’ensemencement, les FHN ont adhérés et forment une monocouche de cellules confluentes.Six hours after seeding, the NHFs have adhered and form a monolayer of confluent cells.
Afin de mimer une blessure cutanée, un espace artificiel ‘scratch/égratignure’ est créé à l’aide du WoundMaker©. C’est un système mécanique de 96 broches qui permet de réaliser des traits homogènes de 700 à 800 µm de large (Scratch) dans la monocouche de cellules en culture en plaque 96 puits.In order to mimic a skin injury, an artificial 'scratch/scratch' space is created using the WoundMaker©. It is a mechanical system of 96 pins which makes it possible to produce homogeneous lines 700 to 800 µm wide (Scratch) in the monolayer of cells in culture in a 96-well plate.
Les tapis cellulaires sont lavés deux fois avec du milieu de culture pour enlever les débris cellulaires et éviter que les cellules arrachées ne se redéposent et ne réadhèrent dans la zone de la plaie. Puis, les cellules sont traitées avec du milieu contenant ou non (témoin non traité) les différents actifs à tester.The cell mats are washed twice with culture medium to remove cell debris and prevent the stripped cells from redepositing and re-adhering to the wound area. Then, the cells are treated with medium containing or not (untreated control) the various active agents to be tested.
Les plaques sont ensuite placées dans l’IncuCyte® Live-Cell Analysis (Sartorius essenbioscience), un incubateur couplé à un vidéo microscope qui permet de réaliser des images en cinétique et ainsi suivre la fermeture de la plaie en temps réel. Au cours du temps, les cellules situées sur le bord de l'espace nouvellement créé (scratch) se déplaceront pour fermer ce "scratch" et établir de nouveaux contacts cellule-cellule. En comparant les mesures de la plaie à différents intervalles par rapport au temps T0, le taux de recouvrement de l’espace et par conséquent la migration cellulaire sont déterminés.The plates are then placed in the IncuCyte® Live-Cell Analysis (Sartorius essenbioscience), an incubator coupled to a video microscope which makes it possible to produce kinetic images and thus monitor wound closure in real time. Over time, the cells located on the edge of the newly created space (scratch) will move to close this "scratch" and establish new cell-cell contacts. By comparing wound measurements at different intervals relative to time T0, the rate of space coverage and hence cell migration is determined.
3.1 Migration des fibroblastes3.1 Migration of fibroblasts
Les résultats présentés à la
Pour le sujet de 58 ans, sur une période d’observation de 49h, le recouvrement pour la culture témoin (sans ajout de l’extrait) est de 71%, alors que ce recouvrement est atteint pour la culture traitée avec l’extrait de bois de rose (0,25%) au bout de seulement 25h, ce qui correspond à un gain de 24h pour l’obtention du recouvrement maximum avec l’extrait de bois à 0.25%.For the 58-year-old subject, over an observation period of 49 hours, the recovery for the control culture (without addition of the extract) is 71%, whereas this recovery is achieved for the culture treated with the extract of rosewood (0.25%) after only 25 hours, which corresponds to a gain of 24 hours to obtain maximum coverage with the 0.25% wood extract.
Pour le sujet de 33 ans, sur une période de période d’observation de 49h, le recouvrement pour la culture témoin (sans ajout de l’extrait) est de 49%, alors que ce recouvrement est atteint pour la culture traitée avec l’extrait de bois de rose (0,25%) au bout de seulement 28h, ce qui correspond à un gain de 21h pour l’obtention du recouvrement maximum avec l’extrait de bois à 0.25%.For the 33-year-old subject, over an observation period of 49 hours, the recovery for the control culture (without addition of the extract) is 49%, whereas this recovery is achieved for the culture treated with the rosewood extract (0.25%) after only 28 hours, which corresponds to a gain of 21 hours to obtain maximum coverage with the 0.25% wood extract.
ExempleExample 44 : Formulations: Formulations
44 .1.1 Composition sous la forme d’une émulsionComposition in the form of an emulsion
*tel que préparé dans l’exemple 1*as prepared in Example 1
La composition est préparée selon le mode opératoire suivant :The composition is prepared according to the following procedure:
- les gélifiants sont dispersés dans la phase aqueuse (hors extrait aqueux de bois de rose et sodium hydroxyde) qui est portée à 70°C ;the gelling agents are dispersed in the aqueous phase (excluding aqueous extract of rosewood and sodium hydroxide) which is brought to 70° C.;
- la phase grasse (hors concentré de parfum et antioxydant) est chauffée à 70°C ;the fatty phase (excluding perfume and antioxidant concentrate) is heated to 70° C.;
- l’émulsion est réalisée par introduction de la phase grasse dans la phase aqueuse sous forte agitation ;the emulsion is produced by introducing the fatty phase into the aqueous phase with vigorous stirring;
- les gélifiants sont neutralisés par ajout de sodium hydroxide et l’émulsion est refroidie sous agitation modérée avec introduction du concentré de parfum, de l’antioxydant et de l’extrait aqueux de bois de rose à basse température.the gelling agents are neutralized by adding sodium hydroxide and the emulsion is cooled under moderate stirring with the introduction of the perfume concentrate, the antioxidant and the aqueous extract of rosewood at low temperature.
Une application de cette composition sur la peau du visage favorise la régénération de la peau.An application of this composition to the skin of the face promotes regeneration of the skin.
44 .2 Composition.2 Membership sous la forme de gouttes huileuses stabilisées par une membrane polymérique en surface, dans une phase aqueuse gélifiéein the form of oily drops stabilized by a polymeric membrane on the surface, in a gelled aqueous phase
*tel que décrit dans l’exemple 1 ci-dessus*as described in example 1 above
La composition est préparée selon le mode opératoire suivant :The composition is prepared according to the following procedure:
- les gélifiants sont dispersés dans la phase aqueuse hors extrait aqueux de bois de rose et sodium hydroxide,the gelling agents are dispersed in the aqueous phase, excluding the aqueous extract of rosewood and sodium hydroxide,
- l’émulsion est réalisée à T°C ambiante par introduction de la phase grasse dans la phase aqueuse sous forte agitation,the emulsion is produced at ambient T°C by introducing the fatty phase into the aqueous phase with vigorous stirring,
- les gélifiants sont neutralisés par ajouts de sodium hydroxide avant introduction de l’extrait aqueux de bois de rose.the gelling agents are neutralized by adding sodium hydroxide before introducing the aqueous extract of rosewood.
Une application de cette composition sur la peau du visage et/ou des mains, en particulier dans le cas d’une peau altérée et/ou lésée par un traitement laser ou peeling, favorise et améliore la réparation et régénération de la peau.An application of this composition to the skin of the face and/or the hands, in particular in the case of skin altered and/or injured by a laser or peeling treatment, promotes and improves the repair and regeneration of the skin.
44 .3.3 Composition sous la forme d’une crème richeComposition in the form of a rich cream
*tel que décrit dans l’exemple 1 ci-dessus*as described in Example 1 above
La composition est préparée selon le mode opératoire suivant :The composition is prepared according to the following procedure:
La glycérine et l’eau sont mélangés sous agitation jusqu’à homogénéité. Les gélifiants acrylates/C10-30 alkyl acrylate crosspolymer et gomme xanthane sont dispersés sous agitation turbulente.The glycerin and water are mixed with stirring until homogeneous. The acrylate/C10-30 alkyl acrylate crosspolymer and xanthan gum gelling agents are dispersed with turbulent stirring.
Cette phase est chauffée à 80°C et l’ensemble cetyl alcool/glyceryl stearate/PEG-75/ceteth/steareth-2 ; C10-C18 triglycérides, hydrogenated coco-glycerides, cetyl alcohol et hydrogenated polyisobutene préalablement chauffé à 80°C est ajouté et l’ensemble est émulsionné sous forte agitation. A 60 ° C, le couple acide citrique/ citrate trisodique et le neutralisant sont additionnés, puis les poudres sont ajoutées. A la température de 35°C, l’extrait aqueux de bois de rose est ajouté avant le parfum.This phase is heated to 80°C and the cetyl alcohol/glyceryl stearate/PEG-75/ceteth/steareth-2 assembly; C10-C18 triglycerides, hydrogenated coco-glycerides, cetyl alcohol and hydrogenated polyisobutene previously heated to 80°C are added and the whole is emulsified with vigorous stirring. At 60° C., the citric acid/trisodium citrate couple and the neutralizer are added, then the powders are added. At a temperature of 35°C, the aqueous extract of rosewood is added before the perfume.
Appliquée sur la peau, en particulier sur le visage, seule ou à la suite de l’application d’un sérum, cette composition apporte une action hydratante et cicatrisante.Applied to the skin, in particular to the face, alone or following the application of a serum, this composition provides a moisturizing and healing action.
44 .4.4 Composition sous la forme d’un sérumComposition in the form of a serum
*tel que décrit dans l’exemple 1 ci-dessus*as described in example 1 above
Le sérum est appliqué sur l’ensemble du visage et en particulier sur les zones présentant des lésions cutanées, telles que des cicatrices d’acné.The serum is applied all over the face and especially on areas with skin lesions, such as acne scars.
Outre sa texture agréable à l’application, il présente une efficacité cicatrisante remarquable.In addition to its pleasant texture on application, it has remarkable healing effectiveness.
44 .5.5 Composition sous la forme d’une crème SPF 15Composition in the form of an SPF 15 cream
2,5000
2.5000
*tel que décrit dans l’exemple 1 ci-dessus*as described in Example 1 above
L’extrait aqueux de bois de rose est mis en solution dans la phase continue aqueuse de la crème.The aqueous rosewood extract is dissolved in the continuous aqueous phase of the cream.
Chaque phase est préparée séparément puis la phase grasse est ajoutée sous agitation dans la phase aqueuse de façon à obtenir une dispersion homogène des gouttelettes de phase grasse dans la phase continue. La crème a une texture particulièrement agréable à l’application. Elle est appliquée, sur le visage, par un massage léger, en insistant sur les zones cicatricielles.Each phase is prepared separately then the fatty phase is added with stirring to the aqueous phase so as to obtain a homogeneous dispersion of the droplets of fatty phase in the continuous phase. The cream has a particularly pleasant texture on application. It is applied to the face with a light massage, emphasizing the scarred areas.
Claims (10)
a) addition d'eau au bois de rose préalablement broyé présentant une taille de particule appropriée
b) addition d'un mélange enzymatique contenant au moins une cellulase, au moins une hémicellulase et au moins une pectinase, et avantageusement en outre au moins une protéase,
c) incubation sous agitation du bois de rose préalablement broyé et du mélange enzymatique pour libérer dans le milieu réactionnel des huiles, des protéines et des sucres fermentescibles, pendant une durée dépendant des rendements recherchés,
d) séparation du milieu réactionnel pour obtenir de l'huile libre, une phase aqueuse contenant des protéines et des sucres fermentescibles, et une phase solide,
e) séparation de la phase aqueuse et ajout éventuel de conservateurs.Aqueous extract of rosewood, or composition containing it, for use according to any one of the preceding claims, characterized in that the said aqueous extract of rosewood is obtained by an enzymatic extraction process comprising the steps:
a) addition of water to previously ground rosewood having an appropriate particle size
b) addition of an enzyme mixture containing at least one cellulase, at least one hemicellulase and at least one pectinase, and advantageously in addition at least one protease,
c) incubation with stirring of the previously ground rosewood and of the enzymatic mixture to release oils, proteins and fermentable sugars into the reaction medium, for a period depending on the desired yields,
d) separation of the reaction medium to obtain free oil, an aqueous phase containing proteins and fermentable sugars, and a solid phase,
e) separation of the aqueous phase and optional addition of preservatives.
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