FR3106725A1 - Composition de microorganismes pour l’élevage des insectes - Google Patents

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Abstract

L’invention concerne une composition pour son utilisation pour la prophylaxie de pathologies microbiennes affectant la croissance des insectes d’élevage, ladite composition consistant essentiellement en au moins une souche de bactérie du genre Bacillus, ladite souche étant choisie parmi : - une souche de Bacillus subtilis souche NOL01 telle que déposée à la CNCM le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4606, et - une souche de Bacillus appartenant à la même unité taxonomique opérationnelle que ladite souche NOL01, ou un mélange de celles-ci. Figure pour l’abrégé : pas de figure

Description

Composition de microorganismes pour l’élevage des insectes
L’invention concerne une composition de microorganismes pour l’élevage des insectes.
La croissance démographique, l'urbanisation et la montée des classes moyennes ont fait augmenter la demande mondiale en aliments, en aliments pour animaux et notamment, en protéines. D’ici 2030, plus de 9 milliards d’individus devront être nourris, tout comme les milliards d'animaux élevés chaque année pour l'alimentation, les loisirs et comme animaux de compagnie.
Pour répondre à cette demande croissante, la production traditionnelle de matières premières pour l’alimentation animale, comme le soja et les farines de poisson, doit s’intensifier, ce qui pose la question de l'utilisation efficace des ressources et de l'utilisation de sources de protéines alternatives.
De nouvelles solutions protéiques destinées à l’alimentation animale et humaine doivent donc être recherchées.
Comme l’ont récemment évoqué de grandes instances internationales telles que l’Organisation pour l'alimentation et l'agriculture (FAO) et l’Organisation mondiale de la santé (OMS), une des nombreuses réponses possibles aux problèmes de la sécurité alimentaire humaine et animale est d’envisager l'élevage d'insectes, leur consommation et leur valorisation.
A ce jour, seul un petit nombre d’espèces d’insectes a d’ores et déjà été domestiqué en raison de leur valeur commerciale ou celle de leurs produits dérivés, notamment les vers à soie pour leurs fibres et les abeilles pour leur miel. D’autres espèces sont élevées quant à elles pour nourrir les animaux de compagnie (vers de farine et grillons par exemple) ou servir aux loisirs (appâts pour la pêche).
L’élevage d’insectes présente de nombreux avantages.
Les insectes sont ubiquistes et ils se reproduisent rapidement. Ils présentent, en outre, un taux de croissance élevé, un taux de conversion alimentaire et un impact sur l'environnement faibles pendant tout leur cycle de vie. De plus, les insectes peuvent se nourrir de fruits ou légumes devenus impropres à la consommation humaine.
Les insectes sont nutritifs, avec une teneur élevée en protéines de haute qualité, en matières grasses et en minéraux, et sont donc considérés comme une matière première d’intérêt pour la nutrition animale ou humaine. Cette valeur nutritionnelle des insectes dépend de leur stade de vie (stade métamorphique), de leur habitat et de leur alimentation. Toutefois, il est largement admis que les insectes fournissent des protéines et des nutriments de haute qualité en comparaison avec la viande de bœuf et les poissons.
Plus de 1900 espèces d'insectes sont actuellement recensées comme étant comestibles pour l’homme à travers le monde. Cependant, il existe peu de données sur les quantités d'insectes réellement consommées. Selon des données disponibles, les insectes consommés le plus couramment sont les coléoptères (Coleoptera) (31%), les chenilles (Lepidoptera) (18%), les abeilles, les guêpes et les fourmis (Hymenoptera) (14%), les sauterelles, les criquets et les grillons (Orthoptera) (13%), les cigales, les chrysomèles et les cicadelles, les cochenilles et les hémiptères (Hemiptera) (10%), les termites (Isoptera) (3%), les libellules (Odonata) (3%), les mouches (Diptera) (2%) et autres catégories (5%).
Les insectes peuvent être consommés entiers, moulus en une pâte ou encore sous forme d’une poudre après séchage et broyage. Ces pâtes et poudres peuvent être ajoutées à d’autres aliments pauvres en protéines pour accroître leur valeur nutritionnelle (barres chocolatées, biscuits, …).
Cependant, la réglementation européenne en matière de consommation humaine d’insectes ou de produits issus d’insectes reste encore incertaine et son application, non homogène selon les législations nationales.
La majorité des espèces comestibles connues d’insectes est récoltée dans la nature et consommée entière. Se développent toutefois dans le monde des mini-élevages, soit domestiques soit locaux (ex. mini-élevage adossé à un élevage de porc). Ces mini-élevages offrent la possibilité d’accroître l’approvisionnement en protéines d’insecte sans pour autant compromettre les populations d'insectes sauvages.
Toutefois, pour répondre aux enjeux évoqués ci-dessus, de plus en plus d’entreprises travaillent à l’intensification et à l’industrialisation de l’élevage des insectes.
Notamment, la mouche soldat noire (Hermetica illucens )et le ver de farine (Tenebrio molitor )rassemblent tous deux un grand nombre de qualités recherchées pour une production d’insectes à l’échelle industrielle, à savoir : fort taux de croissance, cycle de développement court, taux de ponte élevé, capacité à vivre dans des conditions de fortes densités, valorisation de déchets verts, pouvoir assainissant du substrat.
Comme tout élevage ayant une finalité commerciale, les élevages d’insectes devront répondre à des exigences de rendement, de qualité, de bien-être animal et de sécurité sanitaire pour l’utilisateur, le consommateur et l’environnement.
Dans les élevages d’insectes, il est possible d’observer des mortalités ponctuelles d’individus ou des mortalités plus importantes pouvant toucher tout un lot, de manière parfois très rapide. Les causes de la mortalité des individus peuvent être multiples : des causes physiologiques (problème d’alimentation, mauvaises conditions d’élevage, dispositif d’élevage mal adapté à l’espèce), des causes génétiques (problème de consanguinité, de dégénérescence) ou des causes pathologiques.
En ce qui concerne les pathologies, celles-ci peuvent être liées à une infection microbienne de type virale, fongique ou bactérienne ou encore à une infection parasitaire.
Pour répondre aux nouvelles attentes du marché alimentaire mondial et aux exigences de production de la filière insectes, en tenant notamment compte de ses spécificités, il est nécessaire d’améliorer les rendements de production des insectes notamment en sécurisant la croissance des insectes et en limitant leur mortalité tout au long de leur cycle de vie.
Par exemple, la demande de brevet FR2985664 décrit une composition probiotique destinée à la prévention des mortalités hivernales des abeilles, comprenant desBacillus, éventuellement en association avec d’autres espèces de bactéries.
D’autres exemples de compositions bactériennes sont connus par exemple de la demande CN106854627, qui décrit un mélange des souches deKocuria marinaFE01,Lysinibacillus boronitoleransFE04, etProteus mirabilisFE008 pour son utilisation pour optimiser la croissance d’Hermetia illucenspendant la transformation de lisier de poulets.
Malgré ces compositions connues de l’art antérieur, le besoin de proposer une composition favorable au bon développement des insectes d’élevage demeure.
L’invention vise à remédier à ce manque.
Un objet de l’invention est de proposer une composition microbienne, ainsi qu’une méthode d’amélioration de la performance des élevages d’insectes, notamment des élevages de mouches soldat noires ouBlack Soldier Fliesen anglais (BSF).
L’objectif est de mettre à profit les relations larves/microbiotes afin d’améliorer l’efficience de conversion et de rendement de la production en larves BSF, c’est-à-dire améliorer le taux de croissance des larves et la taille des larves obtenues, et de réduire la mortalité au cours de l’élevage.
Aussi, l’invention concerne-t-elle une composition pour son utilisation pour l’amélioration des performances zootechniques des insectes d’élevage, notamment pour la prophylaxie ou le traitement de pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage, notamment les mouches soldat noires, ladite composition consistant essentiellement en au moins une souche de bactérie du genreBacillus, ladite souche étant notamment choisie parmi :
- une souche NOL01 telle que déposée à la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM, Institut Pasteur 25-28 rue du Docteur Roux 75724 Paris, France) selon le traité de Budapest le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4606, et
- une souche deBacillusappartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que ladite souche NOL01,
ou un mélange de ces souches.
L’invention repose sur la constatation surprenante faite par les inventeurs que des souches spécifiques deBacillus, notamment les souches deBacillusappartenant à la même OTU que la souche NOL01, et notamment des souches deBacillus subtilis, sont capables, lorsqu’elles sont mises en contact avec des insectes d’élevage, de favoriser les performances zootechniques de l’élevage, en particulier de réduire la mortalité, d’augmenter le rendement, etc… Par ailleurs, cette composition permet de favoriser un microbiote favorable aux insectes limitant ainsi le développement des microorganismes indésirables.
Dans l’invention, on entend par « amélioration desperformances zootechniques», l’amélioration de critères techniques liés à la production tels que le gain de poids quotidien des individus (GMQ), le poids des individus à l’abattage, l’indice de consommation d’aliment ou encore la viabilité des insectes d’élevage et leur résistance aux épisodes sanitaires (taux d’infection, taux de mortalité), la qualité des individus (leur teneur en protéine et lipide notamment) et leur capacité de reproduction. L’amélioration de ces critères techniques a un impact sur le rendement global de l’élevage et sa performance économique.
La composition selon l’invention est «constituée essentiellement» desdites souches de bactéries du genreBacillus, ce qui signifie que la composition ne contient, au titre de substance active, que des souches de bactéries du genreBacillussusmentionnées. Cela signifie que la composition est susceptible de contenir d’autres composants, mais ces composants additionnels ne participent pas à l’effet technique: c’est-à-dire que ces composants n’ont pas, seuls, d’influence significative sur l’amélioration des performances zootechnique de l’élevage d’insecte, notamment sur le traitement ou la prévention des pathologies microbiennes affectant la croissance des insectes d’élevage.
Par « souche de bactérie », on entend dans l’invention l’ensemble des individus (bactéries) issus de repiquages successifs d'une colonie bactérienne, cet ensemble étant essentiellement homogène, c’est-à-dire que la très grande majorité des bactéries qui composent la souche ont le même génotype.
En d’autres termes, une souche est une partie d'une espèce bactérienne différente des autres bactéries de la même espèce par une différence mineure mais identifiable. Une souche est également définie comme une population de bactéries qui descend d'un seul organisme ou de la culture isolat pur. Les souches d'une même espèce peuvent différer légèrement les unes des autres à bien des égards.
Avantageusement, l’invention concerne la composition susmentionnée pour son utilisation telle que définie ci-dessus, où ladite au moins une souche de bactérie du genreBacillus, notammentBacillus subtilis, est choisie parmi:
  • une souche NOL01 telle que déposée à la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM, Institut Pasteur 25-28 rue du Docteur Roux 75724 Paris, France) selon le traité de Budapest le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4606, et
  • une souche deBacillus, notammentBacillus subtilis, dont la séquence codant l’ARNr 16S présente au moins 97% d’identité avec la séquence codant l’ARNr 16S de la souche NOL01,
ou un mélange de ces souches.
Les inventeurs ont montré qu’une souche NOL01 ou les souches ayant un génome très similaire à celle-ci, sont capables, par un simple traitement, de prévenir et/ou traiter les pathologies microbiennes des insectes d’élevage et d’améliorer leurs performances zootechniques. Plus particulièrement, les inventeurs ont pu mettre en évidence que la souche NOL01, et les souches deBacillus ,notamment deBacillus subtilis,ayant un génome très proche, sont capables de prévenir ou de traiter des pathologies microbiennes affectant les insectes d’élevage ou encore d’améliorer les performances zootechniques desdits insectes d’élevage.
Dans l’invention, lorsqu’il est fait référence à un dépôt de souche à la CNCM, il est fait référence à un dépôt effectué à la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM, Institut Pasteur 25-28 rue du Docteur Roux 75724 Paris, France) selon le traité de Budapest sur la reconnaissance internationale du dépôt des micro-organismes aux fins de la procédure en matière de brevets.
Comme mentionné ci-dessus, la composition selon l’invention consiste essentiellement en une souche NOL01 ou une souche similaire, ou un mélange de celles-ci. Cela signifie que la composition selon l’invention consiste essentiellement en ladite souche NOL01, ou consiste essentiellement en une ou plusieurs souches appartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que la souche NOL01, ou encore ladite souche NOL01 et une ou plusieurs souches appartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que la souche NOL01. Des exemples seront donnés ci-après.
Par «une souche deBacillusappartenant à la même unité opérationnelle (OTU) que ladite souche NOL01» ou par «une souche similaire» à NOL01, ou encore par «les souches ayant un génome très similaire» ou «très proche» à NOL01, on entend dans l’invention toutes les souches deBacillus, notamment deBacillus subtilis,ayant au moins 97% de séquences génomiques similaires avec la séquence de gènes codant l’ARNr 16S de la souche NOL01.
En biologique, l’unité taxonomique opérationnelle (OTU) est l’unité de base de l'analyse phylogénétique utilisée pour regrouper des individus phylogénétiquement proches. Les séquences d'ADN d'un gène donné, qui sert alors de marqueur taxonomique, sont regroupées par partitionnement de données (clustering) en fonction de leur identité. Un gène principalement utilisé (gène de référence) est l'ARNr 16S pour les bactéries. Ainsi, les OTU sont définies à partir d'un seuil d’identité choisi par l’homme du métier qui est communément de 97%.
Dans l’invention, par «insectes d’élevage», on entend les abeilles dont l’abeille asiatique (Apis cerana), l’abeille domestique européenne (Apis melifera), l’abeille naine (Apis florea), les araignées dont l’araignée Tarentule noire (Brachypelma smithi), les chenilles dont la chenilleBunaeopsis spp ,les coccinelles dont la coccinelle à 7 points (Coccinella septempunctada), les criquets dontLocusta migratoriaet le criquet pèlerin (Schistocerca gregaria ), les fourmis dont la fourmi de Colombie (Atta laevigata ), les grillons dont le grillon des steppes (Gryllus assimilis), le grillon domestique (Acheta domestica), le grillon domestique tropical (Gryllodes sigillatus),les mouches dont la mouche domestique (Musca domestica), la mouche soldat noire (Hermetia illucens), les ténébrions dont le petit ténébrion mat (Alphitobius diaperinus), le ténébrion meunier(Tenebrio molitor),les punaises dont la punaise d’eau géante (Lethocerus americanus), les scarabées dont le scarabée rhinoceros (Allomyrina dichotoma), les scorpions dont le scorpion noir (Heterometrus longimanus), les termites dontMastodermes darwiniensis,les vers dont le ver à soie (Bombyx mori), le ver de bambou (Omphisa fuscidentalis),le ver de palmier (Rhynchophorus ferrugineus), le ver morio (Zophobas morio).
Les insectes d’élevage avantageux selon l’invention sont les mouches soldat noires ou black soldiers (en anglais, abrégé en BSF) ou encoreHermetia illucens.
Dans l’invention, on entend par pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage, toutes les pathologies liées à l’infection de l’élevage par des entomopathogènes et affectant la croissance, le développement, la mue et/ou la survie des insectes d’élevage.
La mort de l’insecte hôte survient par l’action de toxines émises par certains germes (Bacillus thuringiensis), par septicémie bactérienne (Bacillus popilliae), à la suite de la lyse des cellules de l’épithélium intestinal ou encore par destruction des cellules adipeuses ou sanguines (virus, protozoaires).
La plupart des germes entomopathogènes sont spécifiques cependant des bactéries non spécifiques peuvent devenir pathogènes lorsque les conditions d’élevage deviennent anormales; ainsi l’entérobactérieSerratia marcescens Bizio,des Pseudomonas ou encore des bactéries cocci et streptocoques peuvent être délétères et responsables de mortalité chez les insectes d’élevage. En outre, des protozoaires, comme les coccidies ou les microsporidies, peuvent tuer leur hôte à n’importe quel stade du cycle de développement, ou réduire considérablement la vie des adultes, leur fécondité ainsi que la fertilité des œufs.
Il est particulièrement avantageux dans l’invention que la composition susmentionnée comprenne au moins deux souches de bactérie du genreBacillus, et notamment au moins deux souches différentes deBacillus.
Il est encore plus avantageux dans l’invention que la composition susmentionnée comprenne au moins trois souches de bactérie du genreBacillus, et notamment au moins trois souches différentes deBacillus.
Avantageusement, l’invention concerne la composition pour son utilisation telle que définie ci-dessus, où ladite souche de bactérie du genreBacillus, notammentBacillus subtilis, appartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que ladite souche NOL01 est choisie parmi:
  • une souche NOL02 telle que déposée à la CNCM le 21 janvier 2016 sous le numéro CNCM I – 5043, et
  • une souche NOL03 telle que déposée à la CNCM le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4607.
Les souches NOL02 et NOL03 présentent une très grande proximité phylogénique avec la souche NOL01, dans la mesure où elles font toutes les trois parties du même embranchement phylogénique, lorsque leur ADN, notamment l’ADN codant l’ARNr 16S est comparé.
Avantageusement, l’invention concerne la composition pour son utilisation telle que définie ci-dessus, ladite composition consistant essentiellement en :
- la souche NOL01, ou
- la souche NOL02, ou
- la souche NOL03, ou
- la souche NOL01 et la souche NOL02, ou
- la souche NOL01 et la souche NOL03, ou
- la souche NOL02 et la souche NOL03, ou
- la souche NOL01, la souche NOL02 et la souche NOL03.
Avantageusement, l’invention concerne la composition pour son utilisation telle que définie ci-dessus, où ladite composition comprend de 104à 1011colonies bactériennes vivantes du ou desditsBacillus, notammentBacillus subtilis,les colonies bactériennes étant par mL ou g de composition.
En d’autres termes, dans ce mode de réalisation avantageux, si la composition selon l’invention est sous forme liquide, ladite composition comprendra de 104à 1011colonies bactériennes deBacillus, notammentBacillus subtilis,par mL de composition, et cela pour chacune des souches lorsque la composition comprend au moins deux souches.
Si par contre la composition selon l’invention est sous forme déshydratée ou non aqueuse (sous forme solide), ladite composition comprendra de 104à 1011colonies bactériennes deBacilluspar g de composition, et cela pour chacune des souches lorsque la composition comprend au moins deux souches.
Dans l’invention, «de 104à 1011colonies bactériennes» signifie : environ 104, environ 5.104, environ 105, environ 5.105, environ 106, environ 5.106, environ 107, environ 5.107, environ 108, environ 5.108, environ 109, environ 5.109, environ 1010, environ 5.1010ou environ 1011colonies bactériennes.
Les colonies bactériennes s’entendent par mL (ou gramme) de culture bactérienne. L’homme du métier sait aisément comment déterminer ce nombre de bactéries, notamment par comptage soit manuel (en utilisant une lame de Malassez), ou en utilisant un compteur automatique de cellules, ou par dilution puis ensemencement sur gélose et comptage, notamment visuel, des colonies, ou encore par mesure de la densité optique.
Avantageusement, l’invention concerne la composition pour son utilisation telle que définie ci-dessus, où ladite une ou plusieurs souches de bactéries du genreBacillus, notammentBacillus subtilis, sont sous forme végétative ou sous forme sporulée, ou les deux.
Dans les modes de réalisation avantageux de l’invention où la composition susmentionnée consiste essentiellement en deux souches de bactéries du genreBacillus, notammentBacillus subtilis,appartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que ladite souche NOL01, lesditsBacillussont soit tous sous forme végétative, soit tous sous forme sporulée, ou une souche est sous forme sporulée et l’autre souche est sous forme végétative. Si la composition comprend plus de deux souches de bactéries telles que définies ci-dessus, l’homme du métier comprendra quelles combinaisons sont applicables.
Dans les modes de réalisation avantageux de l’invention où la composition susmentionnée consiste essentiellement en trois souches deBacillus, notammentBacillus subtilis,appartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que ladite souche NOL01, soit ces trois souches sont sous forme sporulée, soit ces trois souches sont sous forme végétative, soit une souche est sous forme végétative et les deux autres sous forme sporulée, soit une souche est sous forme sporulée et les deux autres sous forme végétative.
En outre, une même souche de bactérie selon l’invention peut être sous la forme végétative, ou sous la forme sporulée, ou former un mélange de bactéries sous forme végétative et sous forme sporulée.
L’homme du métier saura quelle forme est la plus appropriée pour chacun des souches utilisées dans l’invention.
Avantageusement, l’invention concerne la composition pour son utilisation telle que définie ci-dessus, en association avec au moins une souche de bactérie lactique, notamment au moins une souche deLactococcus lactis .
Les inventeurs ont constaté que la composition selon l’invention peut être complétée par au moins une souche de bactérie lactique, notamment au moins une souche deLactococcus lactis, afin d’améliorer les propriétés de prévention de la mortalité, de préservation des performances en cas de pathologie microbienne ou encore d’amélioration des performances techniques des élevages d’insectes.
Il est particulièrement avantageux dans l’invention que la composition susmentionnée comprenne au moins deux souches de bactéries du genreBacillus, et notamment au moins deux souches différentes deBacillus, et au moins une souche de bactérie lactique, notamment deLactococcus lactis.
Il est encore plus avantageux dans l’invention que la composition susmentionnée comprenne au moins trois souches de bactéries du genreBacillus, et notamment au moins trois souches différentes deBacillus, et au moins une souche de bactérie lactique, notamment deLactococcus lactis.
De manière avantageuse, l’invention concerne la composition susmentionnée pour son utilisation telle que définie précédemment, où ladite souche de bactérie lactique est une bactérie lactique souche NOL11 telle que déposée à la CNCM le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4609.
De manière plus avantageuse, l’invention concerne les compositions suivantespour leur utilisation telle que définie précédemment :
- la souche NOL01, en association avec la souche NOL11, ou
- la souche NOL02, en association avec la souche NOL11, ou
- la souche NOL03, en association avec la souche NOL11, ou
- la souche NOL01 et la souche NOL02, en association avec la souche NOL11, ou
- la souche NOL01 et la souche NOL03, en association avec la souche NOL11, ou
- la souche NOL02 et la souche NOL03, en association avec la souche NOL11, ou
- la souche NOL01, la souche NOL02 et la souche NOL03, en association avec la souche NOL11.
De manière encore plus avantageuse, ladite au moins une souche de bactérie lactique est présente à raison de 104à 1011colonies bactériennes vivantes, les colonies bactériennes étant par mL ou g de composition.
La définition de la quantité de bactérie du genreBacillus, notammentBacillus subtilis, susmentionnée s’appliquemutatis mutandisà la souche de bactérie lactique.
Dans un autre mode de réalisation avantageux, l’invention concerne la composition complétée comme susmentionnée pour son utilisation telle que définie ci-dessus, où ladite composition susmentionnée et ladite souche de bactérie lactique sont utilisées simultanément, séparément ou étalées dans le temps.
De manière avantageuse, l’invention concerne la composition susmentionnée pour son utilisation telle que définie précédemment, ladite composition étant appliquée, ou sous une forme pour être ou apte à être appliquée, sur les œufs, les larves, les prépupes, les pupes ou les individus adultes des insectes d’élevage, directement ou indirectement via le substrat d’élevage.
De manière avantageuse, l’invention concerne la composition susmentionnée pour son utilisation telle que définie précédemment, ladite composition étant appliquée sur les œufs, les larves, les prépupes, les pupes ou les individus adultes des insectes d’élevage.
L’objectif est que les insectes, à un ou plusieurs stades de leur développement, soient en contact direct avec la composition selon l’invention de sorte que les pathogènes ne puissent pas affecter leur croissance, et que le maximum d’entre eux puisse atteindre le stade pupe voire adulte en fonction des productions.
De manière avantageuse, on privilégiera une mise en contact direct précoce des insectes avec la composition selon l’invention.
Aussi, est-il possible d’appliquer la composition selon l’invention directement sur les œufs.
L’invention concerne également de l’alimentation pour insecte comprenant une composition telle que définie ci-dessus, notamment pour son utilisation pour l’amélioration des performances zootechniques des insectes d’élevage, notamment pour la prophylaxie ou le traitement de pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage, c’est-à-dire de pathologies microbiennes affectant la croissance, le développement, la mue et/ou la survie des insectes d’élevage.
Il est particulièrement avantageux que la composition selon l’invention soit intégrée à de l’alimentation permettant la croissance des insectes à leurs différents stades de développement, en particulier pour la nutrition des larves après éclosion et avant empupement.
L’aliment selon l’invention est donc constitué de supports nutritionnels classiquement utilisés pour les élevages d’insectes, par exemple des sous-produits alimentaires, tels que des épluchures de fruits ou de légumes comme des bananes, des carottes, des brocolis, des courgettes, des céréales (blé, maïs…).
L’aliment susmentionné permet:
- une mise en contact indirect de la composition selon l’invention avec les insectes à leurs différents stades de développement, dans la mesure où les insectes se développent dans leur substrat de croissance,
- une absorption des bactéries constituant la composition selon l’invention, lors de la consommation du substrat nutritionnel, ou encore,
- une modification de l’aliment par les bactéries de la composition, de sorte que les nutriments résultant de l’action desdites bactéries sont plus facilement biodisponibles pour les insectes d’élevage.
De manière encore plus avantageuse, la composition selon l’invention est présente dans l’aliment susmentionné à raison de 100g à 1kg par tonne d’aliments.
Dans un autre l’aspect, l’invention concerne l’utilisation d’une composition consistant essentiellement en au moins une souche de bactérie du genre Bacillus, ladite souche étant notamment choisie parmi:
- une souche NOL01 telle que déposée à la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM, Institut Pasteur 25-28 rue du Docteur Roux 75724 Paris, France) selon le traité de Budapest le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4606, et
- une souche deBacillusappartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que ladite souche NOL01,
ou un mélange de ces souches,
pour l’amélioration des performances zootechniques des insectes d’élevage, notamment pour la prophylaxie ou le traitement de pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage, notamment les mouches soldat noires.
De manière avantageuse, l’invention concerne l’utilisation susmentionnée où ladite souche deBacillusappartenant à la même OTU que ladite souche NOL01 est choisie parmi:
- une souche deBacillus subtilissouche NOL02 telle que déposée à la CNCM le 21 janvier 2016 sous le numéro CNCM I – 5043, et
- une souche deBacillus subtilissouche NOL03 telle que déposée à la CNCM le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4607.
De manière encore plus avantageuse, l’invention concerne l’utilisation susmentionnée, ladite composition consistant essentiellement en :
- la souche NOL01, ou
- la souche NOL02, ou
- la souche NOL03, ou
- la souche NOL01 et la souche NOL02, ou
- la souche NOL01 et la souche NOL03, ou
- la souche NOL02 et la souche NOL03, ou
- la souche NOL01, la souche NOL02 et la souche NOL03.
Selon l’utilisation susmentionnée, il est avantageux que la composition comprenne de 104à 1011colonies bactériennes vivantes du ou desditsBacillus,les colonies bactériennes étant par mL ou g de composition.
Il est également encore plus avantageux que ladite une ou plusieurs souches de bactéries du genreBacillussoient sous forme végétative ou sous forme sporulée, ou les deux.
De manière encore plus avantageuse, l’invention concerne l’utilisation susmentionnée, ladite composition étant utilisée en association avec au moins une souche de bactérie lactique, notamment une souche deLactococcus lactis, notamment une bactérie lactique souche NOL11 telle que déposée à la CNCM le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4609, en particulier à raison de 104à 1011colonies bactériennes vivantes, les colonies bactériennes étant par mL ou g de composition.
Avantageusement, l’invention concerne l’utilisation telle que définie ci-dessus, ladite composition étant appliquée ou sous une forme apte à être appliquée, directement ou indirectement via le substrat d’élevage, sur les œufs, les larves, les prépupes, les pupes ou les individus adultes des insectes d’élevage.
Il est également prévu l’utilisation de l’alimentation susmentionnée, pour l’amélioration des performances zootechniques des insectes d’élevage, notamment pour la prophylaxie ou le traitement de pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage.
L’invention concerne également une composition pour son utilisation pour l’amélioration des performances zootechniques des insectes d’élevage, notamment pour la prophylaxie ou le traitement de pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage, notamment les mouches soldat noires, ladite composition consistant essentiellement en au moins une souche de bactérie lactique, notammentLactococcus lactis, ladite souche étant notamment choisie parmi :
- une souche NOL11 telle que déposée à la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM, Institut Pasteur 25-28 rue du Docteur Roux 75724 Paris, France) selon le traité de Budapest le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4609, et
- une souche de bactérie lactique appartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que ladite souche NOL11,
ou un mélange de ces souches.
La composition selon l’invention est «constituée essentiellement» desdites souches de bactéries lactiques, ce qui signifie que la composition ne contient, au titre de substance active, que des souches de bactéries lactiques. Cela signifie que la composition est susceptible de contenir d’autres composants, mais ces composants additionnels ne participent pas à l’effet technique: c’est-à-dire que ces composants n’ont pas, seuls, d’influence significative sur l’amélioration des performances zootechniques de l’élevage d’insecte, notamment sur le traitement ou la prévention des pathologies microbiennes affectant la croissance des insectes d’élevage.
Il peut être particulièrement avantageux que la proximité génétique des bactéries lactiques soit de plus de 97% d’identité de génome, par rapport à l’ARNr 16S de la souche NOL11.
Avantageusement, l’invention concerne une composition susmentionnée pour son utilisation susmentionnée, où ladite composition comprend de 104à 1011colonies bactériennes vivantes de la ou desdites souches de bactérie lactique, les colonies bactériennes étant par mL ou g de composition.
Avantageusement, l’invention concerne une composition susmentionnée pour son utilisation susmentionnée, en association avec au moins une souche de bactérie du genreBacillus, en particulier au moins une souche deBacillus subtilis.
Avantageusement, l’invention concerne une composition susmentionnée pour son utilisation susmentionnée, où ladite souche deBacillusest notamment choisie parmi :
- une souche NOL01 telle que déposée à la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM, Institut Pasteur 25-28 rue du Docteur Roux 75724 Paris, France) selon le traité de Budapest le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4606, et
- une souche deBacillusappartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que ladite souche NOL01,
ou un mélange de ces souches.
Avantageusement, l’invention concerne une composition susmentionnée pour son utilisation susmentionnée, où ladite souche deBacillusappartenant à la même OTU que ladite souche NOL01 est choisie parmi :
- une souche deBacillus subtilissouche NOL02 telle que déposée à la CNCM le 21 janvier 2016 sous le numéro CNCM I – 5043, et
- une souche deBacillus subtilissouche NOL03 telle que déposée à la CNCM le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4607.
Avantageusement, l’invention concerne une composition susmentionnée pour son utilisation susmentionnée, où ladite au moins une souche deBacillusest choisie parmi:
- la souche NOL01, ou
- la souche NOL02, ou
- la souche NOL03, ou
- la souche NOL01 et la souche NOL02, ou
- la souche NOL01 et la souche NOL03, ou
- la souche NOL02 et la souche NOL03, ou
- la souche NOL01, la souche NOL02 et la souche NOL03.
Avantageusement, l’invention concerne une composition susmentionnée pour son utilisation telle que définie ci-dessus, où ladite composition comprend de 104à 1011colonies bactériennes vivantes du ou desditsBacillus, les colonies bactériennes étant par mL ou g de composition.
De manière plus avantageuse, l’invention concerne une composition susmentionnée pour son utilisation telle que définie ci-dessus, ladite composition étant appliquée, ou sous une forme pour être ou apte à être appliquée, sur les œufs, les larves, les prépupes, les pupes ou les individus adultes des insectes d’élevage, directement ou indirectement via le substrat d’élevage.
L’invention concerne en outre une alimentation pour insecte comprenant une composition telle que définie ci-dessus,
en particulier pour son utilisation pour l’amélioration des performances zootechniques des insectes d’élevage, notamment pour la prophylaxie ou le traitement de pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage.
Il est également envisagé l’utilisation d’une composition consistant essentiellement en au moins une souche de bactérie lactique, ladite souche étant notamment choisie parmi :
- une souche NOL11 telle que déposée à la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM, Institut Pasteur 25-28 rue du Docteur Roux 75724 Paris, France) selon le traité de Budapest le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4609, et
- une souche de bactérie lactique appartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que ladite souche NOL11,
ou un mélange de ces souches,
pour l’amélioration des performances zootechniques des insectes d’élevage, notamment pour la prophylaxie ou le traitement de pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage, notamment les mouches soldat noires.
De manière avantageuse, l’invention concerne l’utilisation susmentionnée, où ladite composition comprend de 104à 1011colonies bactériennes du ou desdites bactéries lactiques, les colonies bactériennes étant par mL ou g de composition.
De manière plus avantageuse, l’invention concerne l’utilisation susmentionnée, où ladite composition est en association avec au moins une souche de bactérie du genreBacillus, en particulier au moins une souche deBacillus subtilis, notamment
- une souche NOL01 telle que déposée à la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM, Institut Pasteur 25-28 rue du Docteur Roux 75724 Paris, France) selon le traité de Budapest le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4606, et
- une souche deBacillusappartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que ladite souche NOL01,
ou un mélange de ces souches.
De manière plus avantageuse, l’invention concerne l’utilisation susmentionnée, où ladite souche deBacillusappartenant à la même OTU que ladite souche NOL01 est choisie parmi :
- une souche deBacillus subtilissouche NOL02 telle que déposée à la CNCM le 21 janvier 2016 sous le numéro CNCM I – 5043, et
- une souche deBacillus subtilissouche NOL03 telle que déposée à la CNCM le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4607.
Avantageusement, l’invention concerne l’utilisation susmentionnée, où ladite composition est utilisée en association avec:
- la souche NOL01, ou
- la souche NOL02, ou
- la souche NOL03, ou
- la souche NOL01 et la souche NOL02, ou
- la souche NOL01 et la souche NOL03, ou
- la souche NOL02 et la souche NOL03, ou
- la souche NOL01, la souche NOL02 et la souche NOL03.
Avantageusement, l’invention concerne l’utilisation telle que définie ci-dessus, où ladite composition comprend de 104à 1011colonies bactériennes vivantes du ou desditsBacillus, les colonies bactériennes étant par mL ou g de composition.
Avantageusement, l’invention concerne l’utilisation telle que définie ci-dessus, ladite composition étant appliquée ou sous une forme apte à être appliquée sur les œufs, les larves, les prépupes, les pupes ou les individus adultes des insectes d’élevage, directement ou indirectement via le substrat.
L’invention concerne également l’utilisation d’une alimentation pour insecte susmentionnée pour l’amélioration des performances zootechniques des insectes d’élevage, notamment pour la prophylaxie ou le traitement de pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage.
Dans un autre aspect, l’invention concerne une méthode d’amélioration des performances zootechniques des insectes d’élevage, notamment une méthode pour la prophylaxie ou le traitement de pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage, notamment les mouches soldat noires, comprenant une étape de mise en contact directement ou indirectement via le substrat d’élevage, en particulier, des œufs, des larves, des prépupes, des pupes ou des individus adultes des insectes d’élevage, avec l’une quelconque des compositions susmentionnées, notamment
une composition consistant essentiellement en au moins une souche de bactérie du genre Bacillus, ladite souche étant choisie parmi: une souche NOL01 et une souche deBacillusappartenant à la même OTU que ladite souche NOL01, ou un mélange de ces souches,
ou
une composition consistant essentiellement en au moins une souche de bactérie lactique, choisie parmi: une souche NOL11 et une souche de bactérie lactique appartenant à la même OTU que ladite souche NOL11, ou un mélange de ces souches,
ou un mélange de ces compositions.
L’invention sera mieux comprise à la lumière des figures et des dessins suivants.
Brève description des figures
La Figure 1 est un diagramme en boite à moustaches (box plot en anglais) représentant les poids individuels d’un échantillon représentatif de 30 larves par bac d’engraissement (en g) pour les lots témoins (Contrôle, J1+H2O et J3+H2O - B) comparées à ceux des lots essais (J1+CI et J3+CI - A), à J14. t test: valeur p = 0,0002434.
La Figure 2 est un diagramme en boite à moustaches représentant les masses de pupes par bac d’engraissement (en kg) pour les groupes témoins (Contrôle, J1+H2O et J3+H2O - B) comparées à celles des groupes essais (J1+CI et J3+CI - A), au jour du tri J28. t test: valeur p = 0,001243.
La Figure 3 est un diagramme en boite à moustaches représentant les taux de survie par bac d’engraissement (en %) pour les groupes témoins (Contrôle, J1+H20 et J3+H2O - B) comparés à ceux des groupes essais (J1+CI et J3+CI - A), au jour du tri J28. t test: valeur p = 0,03293.
La Figure 4 est un diagramme en boite à moustaches représentant le nombre estimé de pupes par bac d’engraissement pour les groupes témoins (Contrôle, J1+H2O et J3+H2O - B) comparé à celui des groupes essais (J1+CI et J3+CI - A), au jour du tri J28.
Exemples
Exemple 1
L’objectif de cet essai est de démontrer l’effet d’une composition selon l’invention (CI) sur l’augmentation des rendements de production de larves de BSF en élevage.
Cet essai montre les résultats obtenus en conditions expérimentales sur 30 lots répartis en 5 modalités (soit 6 répétitions par modalité).
1/ Matériel et méthodes :
Les 5 modalités varient selon 2 critères :
- Pulvérisation d’une composition selon l’invention ou non : les groupes témoins subissent soit aucune pulvérisation (Contrôle) soit une pulvérisation d’eau (Jx+H2O) ; les groupes essais subissent une pulvérisation d’une composition selon l’invention (Jx+CI),
- Fréquence de la pulvérisation : quand il y a pulvérisation, celle-ci est réalisée une fois par jour (J1+CI et J1+ H2O) ou une fois tous les 3 jours (J3+CI et J3+ H2O).
Le substrat, commun aux 5 modalités, est composé de matières premières végétales broyées (à l’aide d’un broyeur) afin de mélanger entre elles les matières premières (épluchures de fruits ou de légumes comme des bananes, des carottes, des brocolis, des courgettes, des céréales (blé, maïs…)) de telle manière que le substrat soit nutritionnellement apte à subvenir aux besoins nutritionnels moyens d’une larve d’insecte.
En amont, les œufs proviennent de pondoirs et sont collectés quotidiennement. A J0, ils sont placés à l’incubation (30°C – 70% d’humidité) durant 6 jours, dans des bacs à incubation d’une contenance de 300g de substrat (pH moyen 5,8). Sont ainsi mis en culture environ 0,100g d’œufs de BSF, correspondant approximativement à 8 pontes, dans chacun des 30 bacs à incubation. Le nombre moyen d’œufs inoculés par bac à l’incubation est de 5200 œufs.
Au 7ème jour (J7), les jeunes larves et leur substrat sont transférées dans 30 bacs d’engraissement pour poursuivre leur développement auxquels on ajoute 8kg de substrat frais (pH moyen 5,9).
Les bacs d’engraissement sont alors placés dans la zone de production.
A J28, l’essai se termine avec des individus au stade pupes.
La composition selon l’invention pulvérisée pour les groupes J1+CI et J3+CI est constituée des trois souches deBacillus subtilissuivantes : NOL01, NOL02 et NOL03.
La composition selon l’invention est apportée congelée en élevage et conditionnée dans un flacon de 20 ml. Après décongélation, la fiole de 20 ml est diluée dans 1 litre d’eau dans le réservoir d’un pulvérisateur et la préparation est conservée à 4°C jusqu’à utilisation. Le réservoir est agité avant chaque utilisation quotidienne ou tous les 3 jours.
Pour les groupes avec pulvérisation, on réalise une pulvérisation par bac à incubation ou d’engraissement (soit environ 2 ml), soit de la composition selon l’invention, soit d’eau sans composition selon l’invention de J1 à J17 (ce qui correspond à 17 pulvérisations d’environ 2 ml par bac pour les lots J1+CI et J1+ H20 et 7 pulvérisations d’environ 2 ml par bac pour les lots J3+CI et J3+H20).
Les données sont récoltées :
- tous les jours : relevé de la température des bacs à incubation ou d’engraissement (en °C)
- à J14 et J17, masse des larves (en g)
- au tri = J28, masse des pupes (en g).
2/ Résultats et conclusions
Les résultats sont présentés aux figures 1 à 4.
LaFigure 1montre un poids moyen individuel des larves des lots essais (J1+CI et J3+CI) significativement plus élevé que cellui des groupes témoins (Contrôle, J1+H2O et J3+H2O) à J14 après pulvérisation.
LaFigure 2montre une masse moyenne des pupes des groupes essais (J1+CI et J3+CI) significativement plus élevée que celle des groupes témoins (Contrôle, J1+H2O et J3+H2O) à J28.
LaFigure 3montre un taux de survie moyen pour les groupes essais (J1+CI et J3+CI) significativement plus élevé (+0.08 points) que celui des groupes témoins (Contrôle, J1+H2O et J3+H2O) à J28.
LaFigure 4montre un plus grand nombre moyen de pupes à J28 dans les bacs essais que les bacs témoins, ce qui traduit un taux de mortalité moindre pour les groupes essais (réduction de la mortalité).
Ces données montrent que l’apport de la composition selon l’invention via le substrata un effet bénéfique sur le gain de poids et le nombre final d’individus (réduction de la mortalité) des groupes de BSF traités, que ce soit quotidiennement ou tous les 3 jours. Ce qui se traduit par un gain significatif de biomasse finale.
Exemple 2
L’objectif de cet essai est de démontrer l’effet d’une composition selon l’invention sur la production de larves de BSF d’élevage en cas de pathologie bactérienne délétère à la production.
Cet essai montre les résultats obtenus en conditions expérimentales sur 40 lots répartis en 5 modalités (soit 8 répétitions par modalité) à l’occasion d’un épisode inattendu de contamination bactérienne de l’élevage.
1/ Matériel et méthodes :
Comme dans l’exemple 1, ces 5 modalités varient selon 2 critères, à savoir la pulvérisation sur le substrat d’élevage d’une composition selon l’invention ou non (absence de pulvérisation, pulvérisation d’une composition selon l’invention ou pulvérisation d’H2O) et la fréquence de cette pulvérisation (quotidienne ou tous les 3 jours).
La mise en incubation et en engraissement des 40 lots est identique à l’exemple 1.
La composition du substrat commun aux 5 modalités est identique à celui de l’exemple 1.
La composition selon l’invention pulvérisée pour les groupes J1+CI et J3+CI et sa mise en œuvre sont identiques à celles de l’exemple 1 hormis le nombre de pulvérisation par bac.
Ainsi, pour les groupes avec pulvérisation, on réalise 10 pulvérisations par bac à incubation ou d’engraissement (soit environ 10 ml), soit de la composition selon l’invention, soit d’eau sans composition selon l’invention, de façon quotidienne ou tous les 3 jours selon les lots.
2/ Incident :
A J11, on observe une mortalité importante dans certains lots de l’essai due à une contamination de l’élevage par une bactérie pathogène,Bacillus thuringiensis, communément utilisée en agriculture biologique en tant qu’insecticide naturel. Cette contamination affecte l’ensemble des 40 bacs de l’essai, aussi bien les bacs des lots essais (J1+CI et J3+CI) que les bacs des lots témoins (Contrôle, J1+H2O et J3+H2O).
3/ Résultats :
- De J0 à J14, on n’observe aucune différence d’évolution de la température ni du pH dans les bacs d’engraissement des lots essais (J1+CI et J3+CI) versus les lots témoins (Contrôle, J1+H2O et J3+H2O).
- A J14, aucune différence significative n’est observée entre la masse des larves des différents lots selon la modalité « Fréquence de pulvérisation » quotidienne ou tous les 3 jours.
- A J14, on observe une différence significativement positive (+15.4%) sur la masse moyenne des larves des lots essais (J1+CI et J3+CI) par rapport à celle des lots témoins (Contrôle, J1+H2O et J3+H2O).
- On observe que la mortalité ne s’est pas opérée à la même vitesse dans tous les bacs, les bacs d’engraissement avec pulvérisation de la composition selon l’invention ayant mis environ 3 jours de plus pour déclarer la pathologie que les bacs sans pulvérisation (Contrôle) ou avec pulvérisation d’eau (J1+H2O et J3+H2O). L’apparition des 1ers symptômes de la pathologie dans les bacs Essai a entraîné l’arrêt de l’essai à J14.
- Les larves des lots Contrôle, c’est-à-dire sans pulvérisation de la composition selon l’invention ou avec pulvérisation d’eau, ont montré un taux de mortalité plus important et plus précoce (dès J11) que les lots essais.
4/ Conclusions :
Malgré une contamination bactérienne entraînant une forte mortalité des larves, l’application de la composition selon l’invention permet de poursuivre l’engraissement des larves de BSF 3 jours de plus comparé aux lots témoins : ces 3 jours supplémentaires ont un réel intérêt économique pour une filière de production de protéines d’insectes du fait de la poursuite de la croissance des larves traitées. En effet, sauf dans le cadre d’un élevage pour la reproduction, les larves sont abattues pour valorisation en huile ou tourteau avant la phase de prépupe, vers J14.
Exemple 3
L’objectif de cet essai est de comparer l’effet de différentes compositions selon l’invention sur les rendements de production de larves de BSF d’élevage.
Cet essai montre les résultats obtenus en conditions expérimentales sur 108 lots répartis en 4 modalités et 2 batchs.
1/ Matériel et méthodes :
Les 4 modalités varient selon la composition du substrat mis en œuvre :
- Témoin T- : substrat commun (sans ajout) ;
- L : substrat commun + composition selon l’invention constituée de la souche de bactérie lactiqueLactococcus lactis spp lactis 1souche NOL11, ladite souche étant déposée à la CNCM sous le numéro CNCM I – 4609 ;
- B : substrat commun + composition selon l’invention constituée des trois souches deBacillus subtilissuivantes : NOL01, NOL02, NOL03, lesdites souches étant déposées à la CNCM sous les numéros respectifs : CNCM I - 4606, CNCM I-5043 et CNCM I – 4607 ;
- B+L : substrat commun + composition selon l’invention constituée de la combinaison des souches NOL01, NOL02, NOL03 et NOL11.
Le tableau 1 présente le dispositif de l’essai, en nombre de lots par modalité, selon le batch de production considéré :
Modalité T- B. lactique (L) Bacillus (B) B+L
Batch 1 18 18 18
Batch 2 18 18 18
Total 36 36 18 18
La composition du substrat commun aux 4 modalités est identique à celui de l’exemple 1.
A ce substrat commun, est ajoutée, pour les lots L, B et L+B, la composition selon l’invention, à hauteur de 50g par 100kg de substrat. La composition selon l’invention est apportée sous forme de poudre et incorporée au substrat au moment de sa préparation selon des techniques classiques connues de l’art.
La mise en incubation des 108 lots diffère de celle de l’exemple 1 sur les points suivants :
- 250g de substrat par bac à l’incubation
- 15 unités de ponte par bac à l’incubation
Mesures à prendre au démarrage et lors de l’incubation:
- Le pH , la densité et la matière sèche sont relevés à la fabrication de chacun des différents substrats (J0).
- La température et l’humidité relative de l’incubateur seront enregistrées quotidiennement.
- Le poids des barquettes à incubation sera également enregistré quotidiennement.
- A la sortie de l’incubation (J7), les barquettes seront pesées une dernière fois, la masse de 30 larves sera enregistrée avant le transfert dans les bacs d’engraissement.
A J7, les bacs à incubation sont transférés dans des bacs d’engraissement contenant 15kg de substrat frais. Les bacs d’engraissement sont alors placés dans la zone de production et maintenus dans des conditions optimales d’élevage jusqu’au jour de la récolte à J17.
Mesures à prendre lors de l’engraissement :
La température et l’humidité relative de la zone d’engraissement seront enregistrées quotidiennement ainsi que la température à l’intérieur des bacs, la masse de 30 larves et une observation de bonne santé. Le pH de chaque bac sera mesuré à J10, J13, J15 et le jour de la récolte (J17).
Mesures à prendre le jour de la récolte à J17:
Le jour de la récolte (J17), chaque bac fera l’objet des mesures suivantes :
- La masse du bac avant le tri (en Kg)
- La masse des larves récoltées (en Kg)
- La masse d’amendement récoltées (en Kg)
- La masse de 30 larves.

Claims (10)

  1. Composition pour son utilisation pour l’amélioration des performances zootechniques des insectes d’élevage, notamment pour la prophylaxie ou le traitement de pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage, notamment les mouches soldat noires, ladite composition consistant essentiellement en au moins une souche de bactérie du genreBacillus, ladite souche étant choisie parmi :
    - une souche NOL01 telle que déposée à la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM, Institut Pasteur 25-28 rue du Docteur Roux 75724 Paris, France) selon le traité de Budapest le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4606, et
    - une souche deBacillusappartenant à la même unité taxonomique opérationnelle (OTU) que ladite souche NOL01,
    ou un mélange de ces souches.
  2. Composition pour son utilisation selon la revendication 1, où ladite souche deBacillusappartenant à la même OTU que ladite souche NOL01 est choisie parmi:
    - une souche deBacillus subtilissouche NOL02 telle que déposée à la CNCM le 21 janvier 2016 sous le numéro CNCM I – 5043, et
    - une souche deBacillus subtilissouche NOL03 telle que déposée à la CNCM le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4607.
  3. Composition pour son utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, ladite composition consistant essentiellement en :
    - la souche NOL01, ou
    - la souche NOL02, ou
    - la souche NOL03, ou
    - la souche NOL01 et la souche NOL02, ou
    - la souche NOL01 et la souche NOL03, ou
    - la souche NOL02 et la souche NOL03, ou
    - la souche NOL01, la souche NOL02 et la souche NOL03.
  4. Composition pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, où ladite composition comprend de 104à 1011colonies bactériennes vivantes du ou desditsBacillus ,les colonies bactériennes étant par mL ou g de composition.
  5. Composition pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, où ladite une ou plusieurs souches de bactéries du genreBacillussont sous forme végétative ou sous forme sporulée, ou les deux.
  6. Composition pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, en association avec au moins une souche de bactérie lactique.
  7. Composition pour son utilisation selon la revendication 6, où ladite souche de bactérie lactique est une bactérie lactique souche NOL11 telle que déposée à la CNCM le 14 mars 2012 sous le numéro CNCM I – 4609.
  8. Composition pour son utilisation selon la revendication 6 ou la revendication 7, où ladite au moins une souche de bactérie lactique est présente à raison de 104à 1011colonies bactériennes vivantes, les colonies bactériennes étant par mL ou g de composition.
  9. Composition pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 8, ladite composition étant sous une forme apte à être appliquée sur les œufs, les larves, les prépupes, les pupes ou les individus adultes des insectes d’élevage, directement ou indirectement via le substrat.
  10. Alimentation pour insecte comprenant une composition telle que définie dans l’une quelconque des revendications 1 à 9, notamment pour son utilisation pour l’amélioration des performances zootechniques des insectes d’élevage, notamment pour la prophylaxie ou le traitement de pathologies microbiennes affectant lesdits insectes d’élevage.
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