FR3088544A1 - Absolute immortelle for its use for photoprotection of the skin - Google Patents
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Abstract
Absolue d'immortelle pour son utilisation pour la photoprotection de la peau L'invention concerne de l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum, pour son utilisation pour la photoprotection cutanée. En particulier pour la prévention et/ou au traitement des altérations de la peau occasionnées par les radiations solaires, les altérations de la peau étant choisies parmi l'une au moins du groupe comprenant : l'érythème solaire, le photo vieillissement induit, les cancers cutanés photo-induits, la lucite estivale bénigne. L'invention concerne également une composition comprenant de l'absolue d'immortelle et un excipient approprié. Elle trouve son application dans le domaine cosmétique ou pharmaceutique.The immortelle absolute for its use for photoprotection of the skin The invention relates to the immortelle absolute, Helichrysum italicum, for its use for skin photoprotection. In particular for the prevention and / or treatment of skin alterations caused by solar radiation, the skin alterations being chosen from at least one of the group comprising: solar erythema, induced photoaging, cancers photo-induced skin, benign summer lucitis. The invention also relates to a composition comprising absolute of immortelle and a suitable excipient. It finds its application in the cosmetic or pharmaceutical field.
Description
DescriptionDescription
Titre de l'invention : Absolue d'immortelle pour son utilisation pour la photoprotection de la peauTitle of the invention: Immortelle absolute for its use for photoprotection of the skin
Domaine technique [0001] L’invention concerne l’absolue d'immortelle pour son utilisation pour la photoprotection de la peau et une composition cosmétique à cet effet.Technical Field [0001] The invention relates to the absolute of immortelle for its use for photoprotection of the skin and a cosmetic composition for this purpose.
[0002] Elle trouve pour application particulièrement avantageuse la prévention et/ou le traitement des altérations ou des dommages de la peau, des phanères et/ou des muqueuses occasionnées par les radiations solaires, plus précisément les rayons ultraviolets.It finds for particularly advantageous application the prevention and / or treatment of alterations or damage to the skin, integuments and / or mucous membranes caused by solar radiation, more precisely ultraviolet rays.
[0003] Elle trouve son application dans le domaine cosmétique ou pharmaceutique.It finds its application in the cosmetic or pharmaceutical field.
Technique antérieure [0004] Le soleil émet des radiations de différentes longueurs d'ondes. Les radiations solaires les plus courtes (rayons gamma et rayons X) ne pénètrent pas l'atmosphère. Les autres radiations dites non ionisantes passent la barrière de l'atmosphère. Parmi celles-là, les radiations ultra-violette s s'étendant de 100 à 400nm comprennent les UV-A (400-315 nm), les UV-B (315-280 nm) et les UV-C (280-100 nm). Toutefois, en raison de l'absorption des UV par la couche d'ozone de l'atmosphère, les UV-C sont très peu nombreux à atteindre la surface de la Terre, les UV-A sont majoritaires suivis des UVB.PRIOR ART The sun emits radiation of different wavelengths. The shortest solar radiation (gamma rays and X-rays) does not penetrate the atmosphere. The other so-called non-ionizing radiations pass the barrier of the atmosphere. Among these, ultraviolet radiation ranging from 100 to 400nm includes UV-A (400-315 nm), UV-B (315-280 nm) and UV-C (280-100 nm ). However, due to the absorption of UV by the ozone layer of the atmosphere, UV-C are very few to reach the surface of the Earth, UV-A are majority followed by UVB.
[0005] Ce sont d'ailleurs, les rayons lumineux de longueurs d'onde comprises entre 280 nm et 400 nm qui permettent le brunissement de l'épiderme humain c'est-à-dire le bronzage. Par ailleurs, les rayons UV-B sont connus pour provoquer des érythèmes et des brûlures cutanées qui peuvent nuire au développement du bronzage naturel, c'est ce qui est couramment dénommé coup de soleil.It is moreover, the light rays of wavelengths between 280 nm and 400 nm which allow the browning of the human epidermis, that is to say the tanning. In addition, UV-B rays are known to cause erythemas and skin burns which can harm the development of natural tanning, this is what is commonly called sunburn.
[0006] On sait également que les rayons UV-A, de longueurs d'onde comprises entre 320 nm et 400 nm sont susceptibles d'induire une altération de celle-ci, notamment dans le cas d'une peau sensible ou d'une peau continuellement exposée au rayonnement solaire. Les rayons UV-A provoquent en particulier une perte d'élasticité de la peau et l'apparition de rides conduisant à un vieillissement prématuré. Ils favorisent le déclenchement de la réaction érythémateuse ou amplifient cette réaction chez certains sujets et peuvent même être à l'origine de réactions phototoxiques ou photo-allergiques.We also know that UV-A rays, wavelengths between 320 nm and 400 nm are likely to induce an alteration thereof, especially in the case of sensitive skin or skin continuously exposed to sunlight. UV-A rays cause in particular a loss of elasticity in the skin and the appearance of wrinkles, leading to premature aging. They promote the triggering of the erythematous reaction or amplify this reaction in certain subjects and can even be the cause of phototoxic or photoallergic reactions.
[0007] De nombreuses compositions cosmétiques destinées à la photoprotection (UV-A et/ ou UV-B) de la peau ont été proposées à ce jour.Many cosmetic compositions intended for photoprotection (UV-A and / or UV-B) of the skin have been proposed to date.
[0008] Les plus courantes sont des compositions antisolaires comprenant des concentrations diverses de un ou plusieurs écrans ou filtres organiques et/ou inorganiques capables de repousser et/ou d'absorber sélectivement le rayonnement UV nocif. Ces écrans ou filtres et leurs quantités étant sélectionnés en fonction de l'indice de protection recherché.The most common are sunscreen compositions comprising various concentrations of one or more organic and / or inorganic screens or filters capable of repelling and / or selectively absorbing harmful UV radiation. These screens or filters and their quantities being selected according to the desired protection index.
[0009] Ces formulations possèdent cependant un certain pouvoir sensibilisant, pouvant induire la survenue d'allergies cutanées après usage répété. Par ailleurs, il n'est pas possible du fait de la nature des filtres ou des écrans existants d'augmenter les quantités de filtres dans les compositions. En effet, les formulations ne sont alors plus adaptées et l'indice de protection n'est pas augmenté de manière proportionnelle.These formulations, however, have a certain sensitizing power, which can induce the occurrence of skin allergies after repeated use. Furthermore, it is not possible due to the nature of the filters or existing screens to increase the quantities of filters in the compositions. In fact, the formulations are no longer suitable and the protection index is not increased proportionally.
[0010] Il existe donc le besoin de proposer une composition photoprotectrice prévenant et/ ou traitant les effets néfastes des rayonnements solaires sur la peau sans les inconvénients des filtres ou écrans solaires connus.There is therefore a need to provide a photoprotective composition preventing and / or treating the harmful effects of solar radiation on the skin without the drawbacks of known filters or sunscreens.
Résumé de l’invention [0011] Pour atteindre cet objectif, la présente invention propose l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum, pour son utilisation pour la photo protection cutanée. C'est-à-dire que l'absolue d'immortelle est destinée à la prévention et/ou au traitement des altérations de la peau occasionnées par les radiations solaires, en particulier les rayons ultraviolets.Summary of the Invention To achieve this objective, the present invention provides the absolute of immortelle, Helichrysum italicum, for its use for skin photo protection. That is to say that the absolute of immortelle is intended for the prevention and / or treatment of alterations of the skin caused by solar radiation, in particular ultraviolet rays.
[0012] De manière surprenante, la demanderesse s'est aperçue que l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum, présentait des propriétés permettant de lutter efficacement contre les effets néfastes occasionnés par les radiations solaires que ce soit en préventif pour réduire l'exposition et la réaction de la peau aux radiations ou en réparation pour réduire les dommages cellulaires.Surprisingly, the applicant has noticed that the absolute of immortelle, Helichrysum italicum, had properties which make it possible to effectively combat the harmful effects caused by solar radiation, whether as a preventive measure to reduce exposure and the skin's response to radiation or repair to reduce cell damage.
[0013] En effet, l'absolue d'immortelle est utile dans la photoprotection en tant qu'anti-inflammatoire et/ou en tant qu'antioxydant et/ou en tant que génoprotecteur.Indeed, the absolute of immortelle is useful in photoprotection as an anti-inflammatory and / or as an antioxidant and / or as a genoprotector.
[0014] En effet, avantageusement, l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum, assure une photoprotection dite adaptative permettant d'induire des processus biologiques protecteurs endogènes ou améliorer leur efficience.In fact, advantageously, the absolute of immortelle, Helichrysum italicum, provides so-called adaptive photoprotection making it possible to induce endogenous protective biological processes or improve their efficiency.
[0015] Avantageusement, l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum, permet également une photoprotection interne susceptible d’inhiber les effets nocifs des rayons ultraviolets.Advantageously, the absolute of immortelle, Helichrysum italicum, also allows internal photoprotection capable of inhibiting the harmful effects of ultraviolet rays.
[0016] De manière préférée, l'absolue d'immortelle assure également au moins partiellement une photoprotection externe qui permet d'empêcher la pénétration du rayonnement.Preferably, the absolute of immortelle also at least partially provides external photoprotection which prevents the penetration of radiation.
[0017] Un autre aspect de la présente invention concerne une composition, avantageusement pour son utilisation pour la photoprotection comprenant de l'absolue d'immortelle Helichrysum italicum et de préférence un excipient approprié.Another aspect of the present invention relates to a composition, advantageously for its use for photoprotection comprising the absolute of immortelle Helichrysum italicum and preferably an appropriate excipient.
Brève description des dessins [0018] Les buts, objets, ainsi que les caractéristiques et avantages de l’invention ressortiront mieux de la description détaillée d’un mode de réalisation de cette dernière qui est illustré par les dessins d’accompagnement suivants dans lesquels :Brief Description of the Drawings The objects, objects, as well as the characteristics and advantages of the invention will emerge better from the detailed description of an embodiment of the latter which is illustrated by the following accompanying drawings in which:
[0019] [fig.l] présente la répartition des familles olfactives de l'absolue d'immortelle par analyse CGO.[Fig.l] presents the distribution of the olfactory families of the absolute of immortelle by CGO analysis.
[0020] [fig.2] est un graphe illustrant l'expression du marquage H2AX sur cellules HaCat en culture.[Fig.2] is a graph illustrating the expression of the H2AX labeling on HaCat cells in culture.
[0021] [fig.3] est un graphe illustrant l'effet de l'absolue d'immortelle sur la production de monoxyde d'azote par le LPS. .[Fig.3] is a graph illustrating the effect of the immortelle absolute on the production of nitrogen monoxide by the LPS. .
[0022] [fig.4] est un graphe illustrant l'effet de l'absolue d'immortelle sur la production de PGE2 induite par le LPS.[Fig.4] is a graph illustrating the effect of the absolute of immortelle on the production of PGE2 induced by LPS.
Description des modes de réalisation [0023] Avant d’entamer une revue détaillée de modes de réalisation de l’invention, sont énoncées ci-après des caractéristiques optionnelles qui peuvent éventuellement être utilisées en association ou alternativement :Description of the embodiments Before starting a detailed review of embodiments of the invention, there are set out below optional features which can optionally be used in combination or alternatively:
[0024] Avantageusement, la photo protection est destinée à la prévention et/ou au traitement des altérations de la peau occasionnées par les radiations solaires, les altérations de peau étant choisies parmi l'une au moins du groupe comprenant : l'érythème solaire également dénommé érythème actinique ou coup de soleil ou brulure photo-induite, le photo vieillissement induit, les cancers cutanés photo-induits tels que les mélanomes ou épithéliomas, la lucite estivale bénigne dénommée allergie solaire, la photosensibilité photo-induite, les démangeaisons photo-induites, ou les réactions autoimmunes photo-induites, [0025] Avantageusement, l'absolue d'immortelle pour son utilisation dans la photoprotection en tant qu'anti-inflammatoire et/ou en tant qu'antioxydant et/ou en tant que génoprotecteur.Advantageously, the photo protection is intended for the prevention and / or treatment of skin alterations caused by solar radiation, the skin alterations being chosen from at least one of the group comprising: solar erythema also called actinic erythema or sunburn or photo-induced burn, photo-induced aging, photo-induced skin cancers such as melanomas or epitheliomas, benign summer lucitis called solar allergy, photo-induced photosensitivity, photo-induced itching , or photo-induced autoimmune reactions, Advantageously, the absolute of immortelle for its use in photoprotection as an anti-inflammatory and / or as an antioxidant and / or as a genoprotector.
[0026] Avantageusement, l'absolue d'immortelle est d'origine Balkans.Advantageously, the absolute of immortelle is of Balkan origin.
[0027] Avantageusement, l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum, comprend une quantité de fraction volatile comprise entre 10 et 70 %, plus précisément entre 30% et 70% plus précisément entre 40% et 60%.Advantageously, the absolute of immortelle, Helichrysum italicum, comprises an amount of volatile fraction of between 10 and 70%, more precisely between 30% and 70% more precisely between 40% and 60%.
[0028] Avantageusement, les radiations solaires sont constituées des rayons UV-A et UV-B. [0029] Avantageusement, l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum, est susceptible d'être obtenue par un procédé d'obtention comprenant les étapes suivantes :Advantageously, the solar radiation consists of UV-A and UV-B rays. Advantageously, the absolute of immortelle, Helichrysum italicum, is capable of being obtained by a process for obtaining comprising the following steps:
[0030] [0031] [0032] [0033] [0034] [0035] [0036] [0037] [0038] [0039][0031] [0032] [0033] [0034] [0035] [0036] [0037] [0038] [0039]
- macération d'immortelle Helichrysum italicum, préférentiellement sèche, dans un solvant organique, ou un mélange de solvants organiques, volatil(s) préférentiellement de type apolaire, préférentiellement de type hydrocarbure, puis- maceration of immortelle Helichrysum italicum, preferably dry, in an organic solvent, or a mixture of organic solvents, volatile (s) preferably of apolar type, preferably of hydrocarbon type, then
- filtration et évaporation du solvant, ou du mélange de solvant, aboutissant à l'obtention d'une concrète, puis- filtration and evaporation of the solvent, or of the solvent mixture, leading to the production of a concrete, then
- lavage à l'alcool de la concrète, puis- alcohol washing of the concrete, then
- glaçage de la concrète lavée à l'alcool, puis- frosting of the concrete washed with alcohol, then
- filtration et évaporation de l'alcool aboutissant à l'obtention de l'absolue.- filtration and evaporation of alcohol leading to the obtaining of the absolute.
Avantageusement, l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum, est susceptible d'être obtenue par un procédé d'obtention comprenant les étapes suivantes :Advantageously, the absolute of immortelle, Helichrysum italicum, is capable of being obtained by a process for obtaining comprising the following stages:
- mélange d'immortelle Helichrysum italicum, préférentiellement sèche, avec ou sans l'alcool comme co-solvant, avec du CO2 sous une pression de 200 à 300 bars et sous une température de 35 à 50°C, préférentiellement pendant 30 minutes à 60 minutes,- mixture of immortelle Helichrysum italicum, preferably dry, with or without alcohol as co-solvent, with CO2 under a pressure of 200 to 300 bars and at a temperature of 35 to 50 ° C, preferably for 30 minutes to 60 minutes,
- en absence de co-solvant ajout d'alcool,- in the absence of co-solvent addition of alcohol,
- obtention d'un extrait alcoolique- obtaining an alcoholic extract
- glaçage et filtration de l'extrait alcoolique, aboutissant à l'obtention de l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum.- frosting and filtration of the alcoholic extract, resulting in the obtaining of the absolute of immortelle, Helichrysum italicum.
Avantageusement, la composition est une composition photoprotectriceAdvantageously, the composition is a photoprotective composition
Avantageusement, la composition comprend une quantité de 0,001% à 0,05%, préférentiellement de 0,01% à 0,05% d'absolue d'immortelle par rapport au poids total de la composition.Advantageously, the composition comprises an amount of 0.001% to 0.05%, preferably from 0.01% to 0.05% of absolute of immortelle relative to the total weight of the composition.
Avantageusement, la composition est une composition cosmétique, pharmaceutique ou dermatologique.Advantageously, the composition is a cosmetic, pharmaceutical or dermatological composition.
Avantageusement, la composition est formulée pour être appliquée par voie topique de préférence cutanée.Advantageously, the composition is formulated to be applied topically, preferably to the skin.
Suivant une variante de l'invention, la composition pour son utilisation pour la photoprotection cutanée est destinée à être appliquée en topique sur la peau avant et/ou après une exposition aux radiations solaires.According to a variant of the invention, the composition for its use for skin photoprotection is intended to be applied topically to the skin before and / or after exposure to solar radiation.
Selon une variante l'invention concerne une méthode de soin cosmétique et/ou esthétique comprenant l'application topique sur les matières kératiniques humaines (peau, lèvres, cheveux, cils, sourcils, ongles) d'une composition définie selon l'invention, pour lutter contre ou prévenir le vieillissement prématuré photo-induit des matières kératiniques humaines (peau, lèvres, cheveux, cils, sourcils, ongles).According to a variant, the invention relates to a cosmetic and / or aesthetic care method comprising the topical application to human keratin materials (skin, lips, hair, eyelashes, eyebrows, nails) of a composition defined according to the invention, for fight against or prevent premature photo-induced aging of human keratin materials (skin, lips, hair, eyelashes, eyebrows, nails).
Selon une variante l'invention concerne une méthode de soin cosmétique et/ou esthétique comprenant l'application topique sur les matières kératiniques humaines (peau, lèvres, cheveux, cils, sourcils, ongles) d'une composition ou tels que définie, pour la protection des matières kératiniques humaines (peau, lèvres, cheveux, cils, sourcils, ongles) contre le rayonnement solaire.According to a variant, the invention relates to a cosmetic and / or aesthetic care method comprising the topical application to human keratin materials (skin, lips, hair, eyelashes, eyebrows, nails) of a composition or as defined, for the protection of human keratin materials (skin, lips, hair, eyelashes, eyebrows, nails) against solar radiation.
[0040] La photoprotection regroupe les divers moyens capables de s’opposer aux dommages cutanés induits par les radiations solaires.Photoprotection brings together the various means capable of opposing skin damage induced by solar radiation.
[0041] On entend par absolue la définition donnée par la norme iso 9235:2013 relative aux matières premières aromatiques naturelles : un produit obtenu par extraction à l’éthanol à partir d’une concrète, d’une pommade florale, d’un résinoïde ou d’un extrait par fluide supercritique. La solution éthanolique obtenue est généralement refroidie et filtrée dans le but de supprimer les cires ; l’éthanol est ensuite éliminé par distillation.By absolute is meant the definition given by standard ISO 9235: 2013 relating to natural aromatic raw materials: a product obtained by ethanol extraction from a concrete, a floral ointment, a resinoid. or an extract by supercritical fluid. The ethanolic solution obtained is generally cooled and filtered in order to remove the waxes; the ethanol is then removed by distillation.
[0042] De même, une concrète est définie par la même norme comme un extrait obtenu à partir d’une matière première naturelle, pouvant être fraîche et préférentiellement sèche dans le cadre de l'invention, par extraction au moyen d’un ou plusieurs solvant(s). Le(s) solvant(s) est/sont ensuite totalement ou partiellement éliminé(s).Similarly, a concrete is defined by the same standard as an extract obtained from a natural raw material, which can be fresh and preferably dry in the context of the invention, by extraction by means of one or more solvent (s). The solvent (s) is / are then totally or partially removed.
[0043] Le terme photovieillissement regroupe l'ensemble des processus dus à l'exposition prolongée de la peau aux rayonnements ultraviolets qui entraînent le vieillissement prématuré de la peau et présente les mêmes caractéristiques physiques que le vieillissement, tel que la flaccidité, l'affaissement, des changements de couleur ou des irrégularités dans la pigmentation, une kératinisation anormale et/ou excessive.The term photoaging brings together all the processes due to the prolonged exposure of the skin to ultraviolet radiation which cause premature aging of the skin and has the same physical characteristics as aging, such as flaccidity, sagging , color changes or irregularities in pigmentation, abnormal and / or excessive keratinization.
[0044] Par cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptable, on entend compatible avec la peau et/ou ses phanères, qui présente une couleur, une odeur et un toucher agréables et qui ne génère pas d'inconforts inacceptables (picotements, tiraillements, rougeurs), susceptibles de détourner le consommateur d'utiliser cette composition.By cosmetically or pharmaceutically acceptable, is meant compatible with the skin and / or its integuments, which has a pleasant color, odor and feel and which does not generate unacceptable discomfort (tingling, tightness, redness), likely to divert the consumer from using this composition.
[0045] On entend par matières kératiniques humaines, les cheveux, les cils, les sourcils, les ongles et en particulier la peau y compris les lèvres.Human keratin materials are understood to mean the hair, the eyelashes, the eyebrows, the nails and in particular the skin, including the lips.
[0046] On entend par radiations solaires les rayonnements émis par le soleil et arrivant à la surface de la Terre en particulier les rayons UV-A et UV-B mais également les rayons infrarouges provoquant un échauffement de la peau.By solar radiation is meant the radiation emitted by the sun and arriving at the surface of the Earth in particular UV-A and UV-B rays but also infrared rays causing heating of the skin.
[0047] L'immortelle, en particulier du genre Helichrysum et de l'espèce italicum est une espèce de plantes à fleurs de la famille des Asteraceae. Elle est présente tout autour de la Méditerranée. Helichrysum italicum est une plante herbacée buissonneuse vivace de 25 à 50 cm, à la tige ligneuse. Ses fleurs sont jaunes, en capitules globuleux, rassemblés en corymbe. La floraison peut avoir lieu selon les années du mois de mai à septembre. Helichrysum italicum est endémique du pourtour méditerranéen. En particulier, dans le cadre de l'invention, l'immortelle Helichrysum italicum est d'origine des Balkans incluant Chypre, la Grèce, l'Albanie, le Monténégro, l'Italie, la Slovénie, la Croatie, la Bosnie-et-Herzégovine, la Serbie. La demanderesse s'est aperçue de manière surprenante que l'origine géographique de l'immortelle, Helichrysum italicum, avait des conséquences sur la composition et l'activité de l'absolue.The immortelle, in particular of the genus Helichrysum and of the species italicum is a species of flowering plants of the family Asteraceae. It is present all around the Mediterranean. Helichrysum italicum is a bushy herbaceous perennial from 25 to 50 cm, with a woody stem. Its flowers are yellow, in globular heads, gathered in a corymb. Flowering can take place depending on the year from May to September. Helichrysum italicum is endemic to the Mediterranean region. In particular, within the framework of the invention, the immortal Helichrysum italicum is of Balkan origin including Cyprus, Greece, Albania, Montenegro, Italy, Slovenia, Croatia, Bosnia and Herzegovina, Serbia. The Applicant has surprisingly noticed that the geographical origin of the immortal, Helichrysum italicum, had consequences on the composition and activity of the absolute.
[0048] L'immortelle est réputée pour sa forte fragrance. Ainsi, elle est connue dans le domaine de la parfumerie et de la cosmétique sous forme d'huile essentielle. En effet, l'huile essentielle est une forme qui contient la part la plus importante de composés volatils qui sont recherchés dans la parfumerie.The immortal is known for its strong fragrance. Thus, it is known in the field of perfumery and cosmetics in the form of essential oil. Indeed, essential oil is a form which contains the most important part of volatile compounds which are sought in perfumery.
[0049] L'absolue présente une composition bien distincte de l'huile essentielle notamment du fait des procédés d'obtention qui ne permettent pas de recueillir les mêmes types de composés. L'absolue d'immortelle Helichrysum italicum présente avantageusement une fraction volatile comprise entre 10 et 70%, plus précisément entre 30 et 70% plus précisément entre 40 et 60%. La présence d'une fraction non volatile non négligeable contrairement à l'huile essentielle constitue un préjugé plutôt négatif pour un homme du métier quant à une utilisation de l'absolue d'immortelle. De plus une fraction non volatile importante peut être un frein pour l'intégration dans des formulations, notamment des formulations cosmétiques et/ou dermatologiques que ce soit du fait de la consistance, la couleur de l'absolue qui n'est pas optimisée pour les formulations cosmétiques et/ou dermatologiques.The absolute has a composition very distinct from the essential oil, in particular because of the processes for obtaining which do not allow the same types of compounds to be collected. The immortelle absolute Helichrysum italicum advantageously has a volatile fraction of between 10 and 70%, more precisely between 30 and 70% more precisely between 40 and 60%. The presence of a non-negligible non-volatile fraction, unlike essential oil, constitutes a rather negative prejudice for a person skilled in the art as regards the use of the immortal absolute. In addition, a large non-volatile fraction can be a brake for integration into formulations, in particular cosmetic and / or dermatological formulations, whether due to the consistency, the color of the absolute which is not optimized for cosmetic and / or dermatological formulations.
[0050] Avantageusement, ce sont les parties aériennes de l'immortelle Helichrysum italicum qui sont utilisées pour l'obtention de l'absolue. Dans le cadre de la présente invention, les parties aériennes sont choisies dans le groupe constitué par les sommités fleuries, les feuilles, les tiges, les fleurs, les graines, ou leurs mélanges.Advantageously, these are the aerial parts of the immortal Helichrysum italicum which are used to obtain the absolute. In the context of the present invention, the aerial parts are chosen from the group consisting of flowering tops, leaves, stems, flowers, seeds, or mixtures thereof.
[0051] L'absolue d'immortelle conforme à l'invention est susceptible d'être obtenue par les procédés classiques connus de l'homme du métier. De manière préférée, le procédé comprend les étapes suivantes d'obtention d'une concrète puis à partir de la concrète d'obtention de l'absolue. Plus précisément, le procédé comprend avantageusement une étape de macération d'immortelle Helichrysum italicum. Préférentiellement, l'immortelle Helichrysum italicum est utilisée sèche dans un solvant organique, ou un mélange de solvants organiques, volatils préférentiellement de type apolaires, hydrocarbures. Selon un mode de réalisation préféré, la macération de la matière sèche se fait successivement, par exemple trois fois dans un nouveau volume de solvant de sorte à épuiser la matière végétale. A titre d'exemple, le solvant, ou mélange de solvant, est choisi parmi le groupe des hydrocarbures comprenant par exemple : hexane, cyclohexane. Le macérat est ensuite préférentiellement filtré pour retirer la matière végétale et le solvant, ou mélange de solvants, est évaporé, aboutissant à l'obtention d'une concrète. La concrète est un produit pâteux et dur. La concrète est lavée à l'alcool. C'est-à-dire que l'on ajoute de l'alcool à la concrète. A titre préféré, l'alcool choisi est de l'éthanol. La concrète mélangée à l'alcool est glacée. Le glaçage qui consiste à refroidir la concrète, par exemple en dessous de 5°C, par exemple à moins 15°C, permet de figer les cires que l'on souhaite retirer. La concrète mélangée à l'alcool et glacée est filtrée pour retirer les cires et l'alcool est évaporé aboutissant à l'obtention de l'absolue. L'absolue d'immortelle est un produit de consistance visqueuse à très visqueuse.The absolute immortelle according to the invention is capable of being obtained by the conventional methods known to those skilled in the art. Preferably, the method comprises the following stages of obtaining a concrete and then starting from the concrete of obtaining the absolute. More specifically, the method advantageously comprises a step of maceration of immortelle Helichrysum italicum. Preferably, the immortal Helichrysum italicum is used dry in an organic solvent, or a mixture of organic solvents, volatile preferably of apolar type, hydrocarbons. According to a preferred embodiment, the maceration of the dry material is carried out successively, for example three times in a new volume of solvent so as to exhaust the plant material. By way of example, the solvent, or mixture of solvents, is chosen from the group of hydrocarbons comprising, for example: hexane, cyclohexane. The macerate is then preferably filtered to remove the plant material and the solvent, or mixture of solvents, is evaporated, resulting in the production of a concrete. The concrete is a pasty and hard product. The concrete is washed with alcohol. That is to say that we add alcohol to the concrete. Preferably, the alcohol chosen is ethanol. The concrete mixed with alcohol is frozen. The icing which consists in cooling the concrete, for example below 5 ° C, for example at least 15 ° C, allows to freeze the waxes which one wishes to remove. The concrete mixed with alcohol and iced is filtered to remove the waxes and the alcohol is evaporated resulting in the obtaining of the absolute. The immortelle absolute is a product of viscous to very viscous consistency.
[0052] La demanderesse s'est aperçue que l'absolue d'immortelle Helichrysum italicum présentait des propriétés intéressantes pour le domaine cosmétique et pharmaceutique.The Applicant has noticed that the absolute of immortelle Helichrysum italicum had interesting properties for the cosmetic and pharmaceutical fields.
[0053] En particulier, pour la photoprotection et en particulier dans le cadre de la prévention et/ou du traitement des altérations des matières kératiniques humaines dues à des radiations solaires.In particular, for photoprotection and in particular in the context of the prevention and / or treatment of alterations in human keratin materials due to solar radiation.
[0054] Les zones de la peau naturellement exposées aux radiations solaires ou qui subissent fréquemment une surexposition aux radiations solaires sont sujettes aux effets néfastes du rayonnement solaire conduisant à des altérations par exemple les érythèmes solaires, le photovieillissement induit, le risque d'apparition de cancers cutanés tels que les mélanomes, ou épithéliomas, la lucite estivale bénigne également dénommée allergie solaire.The areas of the skin naturally exposed to solar radiation or which frequently undergo overexposure to solar radiation are subject to the harmful effects of solar radiation leading to alterations, for example solar erythemas, induced photoaging, the risk of the appearance of skin cancers such as melanomas, or epitheliomas, benign summer lucitis also known as solar allergy.
[0055] L'absolue d'immortelle Helichrysum italicum selon l'invention permet de prévenir ces altérations notamment lorsque l'absolue est appliquée préalablement à l'exposition aux radiations solaires ou bien de traiter ces altérations lorsque l'absolue est appliquée après l'exposition.The absolute immortelle Helichrysum italicum according to the invention makes it possible to prevent these alterations in particular when the absolute is applied before exposure to solar radiation or to treat these alterations when the absolute is applied after the exposure.
[0056] L'absolue d'immortelle Helichrysum italicum présente un rôle de photoprotecteur adaptatif et/ou interne notamment du fait qu'elle présente un effet génoprotecteur face aux rayons UV-B qui a pu être démontré dans l'exemple 5. En outre, elle présente un effet anti-oxydant qui est particulièrement recherché dans la photoprotection pour limiter la production d'espèces oxydantes pouvant être délétère pour les cellules ou réduire leur nombre, comme démontré dans l'exemple 6. De même, un effet antiinflammatoire à des doses réduites est démontré dans l'exemple 7 et assure un rôle apaisant en limitant les réactions anti-inflammatoires permettant d'utiliser l'absolue d'immortelle en application post exposition solaire.The absolute immortelle Helichrysum italicum has an adaptive and / or internal photoprotective role, in particular because it has a genoprotective effect against UV-B rays which could be demonstrated in Example 5. In addition , it has an antioxidant effect which is particularly sought after in photoprotection in order to limit the production of oxidizing species which can be harmful to the cells or reduce their number, as demonstrated in example 6. Similarly, an anti-inflammatory effect in reduced doses is demonstrated in Example 7 and provides a soothing role by limiting anti-inflammatory reactions allowing the use of the absolute of immortelle in application after sun exposure.
[0057] Avantageusement, l'absolue d'immortelle Helichrysum italicum réduit, retarde et/ou prévient le dommage cellulaire, le stress thermique, le stress oxydatif, le choc osmotique et/ou l'inflammation causée par les radiations solaires.Advantageously, the absolute immortelle Helichrysum italicum reduces, delays and / or prevents cell damage, thermal stress, oxidative stress, osmotic shock and / or inflammation caused by solar radiation.
[0058] L'invention concerne également une composition comprenant de l'absolue d'immortelle Helichrysum italicum et un excipient acceptable. L'excipient est cosmétiquement et/ou pharmaceutiquement acceptable.The invention also relates to a composition comprising absolute immortelle Helichrysum italicum and an acceptable excipient. The excipient is cosmetically and / or pharmaceutically acceptable.
[0059] La composition est avantageusement une composition photoprotectrice.The composition is advantageously a photoprotective composition.
[0060] A titre d'exemple, les compositions conformes à l'invention peuvent comporter en plus d'autres agents photoprotecteurs, appelés aussi agents filtrants ou filtres, organiques ou inorganiques complémentaires filtrant des longueurs d'onde comprises dans les UVA et/ou les UVB, hydrophiles ou lipophiles ou bien insolubles dans les solvants cosmétiques ou pharmaceutiques notamment dermatologiques couramment utilisés. La composition de l'invention peut aussi comprendre des filtres minéraux qui sont des pigments.For example, the compositions according to the invention may also comprise other photoprotective agents, also called filtering agents or filters, organic or inorganic complementary filtering wavelengths included in the UVA and / or UVB, hydrophilic or lipophilic or else insoluble in cosmetic or pharmaceutical solvents, in particular dermatological solvents commonly used. The composition of the invention can also comprise mineral filters which are pigments.
[0061] Les compositions selon l'invention trouvent leur application dans un grand nombre de traitements, notamment cosmétiques ou dermatologiques, en particulier de la peau y compris des lèvres et/ou des cheveux, y compris le cuir chevelu, notamment pour la protection et/ou le soin de la peau y compris des lèvres et/ou des cheveux, et/ou pour le maquillage de la peau y compris des lèvres.The compositions according to the invention find their application in a large number of treatments, in particular cosmetic or dermatological, in particular of the skin including the lips and / or the hair, including the scalp, in particular for protection and / or skin care including lips and / or hair, and / or for making up the skin including lips.
[0062] Les compositions selon l'invention peuvent par exemple être utilisées comme produit de maquillage.The compositions according to the invention can for example be used as a makeup product.
[0063] Les compositions selon l'invention peuvent par exemple être utilisées comme produit de soin et/ou de protection solaire pour le visage et/ou le corps de consistance liquide à semi-liquide, telles que des laits, des crèmes plus ou moins onctueuses, gel-crèmes, des pâtes, des brumes de soin. Elles peuvent éventuellement être conditionnées en aérosol et se présenter sous forme de mousse ou de spray. Enfin, les compositions selon l'invention peuvent par exemple être utilisées comme produit de soin et/ou de protection solaire moussant de type shampoing ou huile capillaires.The compositions according to the invention can for example be used as a care product and / or sun protection for the face and / or the body of liquid to semi-liquid consistency, such as milks, creams more or less creamy, gel-creams, pasta, skincare mists. They can optionally be packaged as an aerosol and come in the form of a foam or spray. Finally, the compositions according to the invention can, for example, be used as a foaming sun care and / or sun protection product such as shampoo or hair oil.
Exemples [0064] Exemple 1 : Obtention de l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum [0065] Macération de 120 kg de plante, plus précisément de parties aériennes, préférentiellement sèche, dans 2000 L de solvant ou de mélange de solvants, hexane, cyclohexane, type hydrocarbures pendant 4h, à T°= 45°C. Trois macérations successives avec les mêmes paramètres, la même quantité de plantes, avec une nouvelle quantité de solvant. Evaporation du solvant ou mélange de solvants, tout d’abord à 90°C à pression atmosphérique, puis à 60°C sous vide. La concrète est obtenue avec un rendement de 6% à partir de la plante, préférentiellement sèche.EXAMPLES Example 1: Obtaining the absolute of immortelle, Helichrysum italicum [0065] Maceration of 120 kg of plant, more precisely of aerial parts, preferably dry, in 2000 L of solvent or mixture of solvents, hexane, cyclohexane, hydrocarbon type for 4 hours, at T ° = 45 ° C. Three successive macerations with the same parameters, the same quantity of plants, with a new quantity of solvent. Evaporation of the solvent or mixture of solvents, first at 90 ° C at atmospheric pressure, then at 60 ° C under vacuum. The concrete is obtained with a yield of 6% from the plant, preferably dry.
[0066] L’alcool, type éthanol, est ajouté à la concrète (10 volumes d’alcool pour 1 volume de concrète), le mélange est homogénéisé pendant 2h à l’aide d’une batteuse à pâles thermostatée à 30°C. Le mélange est ensuite glacé à -15°C pendant 12h. Le produit est ensuite filtré sous vide afin d’éliminer les cires insolubles (système Buchner).The alcohol, ethanol type, is added to the concrete (10 volumes of alcohol for 1 volume of concrete), the mixture is homogenized for 2 hours using a paddle mixer thermostatically controlled at 30 ° C. The mixture is then frozen at -15 ° C for 12 hours. The product is then vacuum filtered to remove insoluble waxes (Buchner system).
[0067] L’absolue est obtenue avec un rendement de 75% à partir de la concrète.The absolute is obtained with a yield of 75% from the concrete.
[0068] Exemple 2 : Caractérisation par UHPLC d'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum obtenue par le procédé de l'exemple 1.Example 2: Characterization by UHPLC of absolute immortelle, Helichrysum italicum obtained by the method of Example 1.
[0069] Une analyse par UHPLC-UV/MS/ELSD des composés majoritaires de l’absolue d’immortelle.An analysis by UHPLC-UV / MS / ELSD of the majority compounds of the absolute of immortelle.
[0070] DAD (Détecteur à barrettes de Diodes: de 195 nm à 650 nm [0071] SM (Spectromètre de masse) : ESI+ (Ionisation par électrospray positif) de 100 à 1200 m/z (masse moléculaire) à tension de cône de 10 V.DAD (Diodes Array Detector: from 195 nm to 650 nm [SM] (Mass Spectrometer): ESI + (Ionization by positive electrospray) from 100 to 1200 m / z (molecular mass) at cone voltage of 10 V.
[0072] Les composés majoritaires identifiés sont des dérivés phloroglucinol alpha-pyrone (structure de l'arzanol et dérivés) qui absorbent à des longueurs d’ondes : 292 nm, 297 nm, 295 nm, 289 nm, 294 nm Des dérivés protocatéchiques ou d'acides hydroxycinnamiques sont également détectés.The majority of the compounds identified are phloroglucinol alpha-pyrone derivatives (structure of arzanol and derivatives) which absorb at wavelengths: 292 nm, 297 nm, 295 nm, 289 nm, 294 nm, Protocatechic derivatives or hydroxycinnamic acids are also detected.
[0073] Exemple 3 : Estimation de la fraction volatile d'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum obtenue par le procédé de l'exemple 1.Example 3: Estimation of the volatile fraction of absolute immortelle, Helichrysum italicum obtained by the method of Example 1.
[0074] La fraction volatile d’une absolue est estimée en utilisant la technique de chromatographie en phase gazeuse avec un détecteur à ionisation de flamme (GC-FID), injection liquide sur colonnes polaire et apolaire par étalonnage interne.The volatile fraction of an absolute is estimated using the gas chromatography technique with a flame ionization detector (GC-FID), liquid injection on polar and nonpolar columns by internal calibration.
[0075] D’après cette technique, nous considérons une estimation générale de la fraction volatile de l’absolue entre 10 et 70%.According to this technique, we consider a general estimate of the volatile fraction of the absolute between 10 and 70%.
[0076] Exemple 4 : Analyse olfactive de l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum, obtenue par le procédé de l'exemple 1.Example 4: Olfactory analysis of the absolute of immortelle, Helichrysum italicum, obtained by the method of Example 1.
[0077] L'analyse olfactive est réalisée par chromatographie gazeuse-olfactométrie (CGO) avec 9 panelistes experts. Les résultats représentent en figure 1 la répartition des familles olfactives décrivant l'absolue d'immortelle.The olfactory analysis is carried out by gas chromatography-olfactometry (CGO) with 9 expert panelists. The results represent in FIG. 1 the distribution of the olfactory families describing the absolute of immortelle.
[0078] Exemple 5 : Etude de l'activité génoprotectrice face aux UVB d'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum obtenue par le procédé de l'exemple 1.Example 5: Study of the genoprotective activity against UVB of immortelle absolute, Helichrysum italicum obtained by the method of Example 1.
[0079] Après un prétraitement de 24h par l'absolue d'immortelle, les kératinocytes ont été irradiés par des UVB et la détection de l’histone γΗ2Αχ a été réalisée par immunomarquage et analysée sur la base de micro-photographies en fluorescence [0080] L’observation d’une augmentation du marquage γΗ2Αχ suite à une irradiation UVB est le reflet d’une augmentation des doubles cassures d’ADN. Un traitement efficace aura pour effet de diminuer le pourcentage de cellules marquées γΗ2Αχ ou de diminuer l’intensité globale de marquage γΗ2Αχ par cellule induite par l’irradiation UVB. Ceci sera le reflet d’une diminution du nombre de cassures d’ADN double brins.After a 24 hour pretreatment with the absolute of immortelle, the keratinocytes were irradiated with UVB and the detection of the histone γΗ2Αχ was carried out by immunostaining and analyzed on the basis of fluorescent micro-photographs [0080 ] The observation of an increase in γΗ2Αχ labeling following UVB irradiation is a reflection of an increase in double DNA breaks. An effective treatment will have the effect of reducing the percentage of cells labeled γΗ2Αχ or decreasing the overall intensity of γ 2Αχ labeling per cell induced by UVB irradiation. This will reflect a decrease in the number of double stranded DNA breaks.
[0081] L’EGCG est le produit de référence de cette étude (Epigallocatechine-3-gallate). [0082] Les résultats sont donnés à la figure 2.EGCG is the reference product of this study (Epigallocatechine-3-gallate). The results are given in FIG. 2.
[0083] Dans cette étude, l'irradiation des cellules par des UVB à la dose de 200 mJ/cm2 a induit une augmentation significative du taux de noyaux H2Ax positifs (+ 800 %) en comparaison aux cellules Témoins non irradiées.In this study, the irradiation of the cells with UVB at a dose of 200 mJ / cm 2 induced a significant increase in the rate of positive H2Ax nuclei (+ 800%) compared to the non-irradiated control cells.
[0084] En comparaison aux cellules témoins Ethanol 0,05% irradiées UVB, les cellules traitées préventivement par la référence EGCG à 25 μΜ a induit une forte diminution du taux de noyaux H2Ax positifs (- 800%).In comparison to the 0.05% ethanol UVB irradiated control cells, the cells treated preventively with the EGCG reference at 25 μΜ induced a sharp reduction in the rate of positive H2Ax nuclei (- 800%).
[0085] D'une manière générale, le traitement préventif des cellules avant irradiations UVB par le composé aux trois concentrations testées a fortement diminué (0,01 g/1 : - 1200% ; 0,005 g/1 : - 300 % ; 0,001 g/1 : - 1200 %) le taux de noyaux H2Ax positifs par rapport à la condition Ethanol Irradiée UVB (0,000025%).In general, the preventive treatment of cells before UVB irradiation with the compound at the three concentrations tested has greatly decreased (0.01 g / 1: - 1200%; 0.005 g / 1: - 300%; 0.001 g / 1: - 1200%) the rate of positive H2Ax nuclei compared to the UVB Irradiated Ethanol condition (0.000025%).
[0086] L’absolue d'immortelle aux concentrations de 0,001 g/1, 0,005 g/1 et 0,01 g/1 a fortement diminué le pourcentage de noyaux cellulaires γΗ2Αχ positifs. Dans les conditions du test, nous avons clairement montré un effet génoprotecteur de l’ingrédient. Dès la concentration de 0,001 g/1, l’effet est maximum.The absolute of immortelle at concentrations of 0.001 g / 1, 0.005 g / 1 and 0.01 g / 1 greatly reduced the percentage of positive γΗ2Αχ cell nuclei. Under the conditions of the test, we clearly showed a genoprotective effect of the ingredient. From the concentration of 0.001 g / 1, the effect is maximum.
[0087] L’évaluation de la cytotoxicité a été réalisée par la méthode de relargage du rouge neutre et par la méthode MTT de mesure de l’activité déshydrogénase mitochondriale.The cytotoxicity evaluation was carried out by the neutral red salting out method and by the MTT method for measuring mitochondrial dehydrogenase activity.
[0088] Les concentrations d’essai ont été choisies en fonction des résultats d’études préliminaires d’évaluation de la cytotoxicité du composé sur le type cellulaire utilisé.The test concentrations were chosen based on the results of preliminary studies evaluating the cytotoxicity of the compound on the cell type used.
[0089] Les concentrations choisies correspondent aux concentrations les plus élevées en composé qui ne présentent pas de cytotoxicité.The concentrations chosen correspond to the highest concentrations of compound which do not exhibit cytotoxicity.
[0090] Exemple 6 : Etude de l'activité anti-oxydante par les tests ABTS et DPPH d'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum obtenue par le procédé de l'exemple 1.Example 6: Study of the antioxidant activity by the ABTS and DPPH tests of absolute immortelle, Helichrysum italicum obtained by the method of Example 1.
[0091] Deux types de tests ont été réalisés afin de mesurer l’activité anti-oxydante.Two types of tests were carried out in order to measure the antioxidant activity.
[0092] Le test ABTS permet de mesurer la capacité à piéger les radicaux peroxyls. Peroxydation lipidique.The ABTS test makes it possible to measure the capacity to trap peroxyl radicals. Lipid peroxidation.
[0093] Le test DPPH permettant de mesurer la capacité à piéger les radicaux oxygénés ou non.The DPPH test used to measure the capacity to trap oxygenated radicals or not.
[0094] Les résultats obtenus ont été comparés aux valeurs de FEC50 de l’acide ascorbique, anti-oxydant reconnu. L’EC50 correspond à la concentration en anti-oxydant nécessaire pour réduire de 50% la concentration initiale de DPPH ou de ABTS. Plus la valeur de FEC50 est faible, plus le composé a une activité anti-oxydante importante.The results obtained were compared with the FEC50 values of ascorbic acid, a recognized antioxidant. The EC50 corresponds to the antioxidant concentration necessary to reduce the initial concentration of DPPH or ABTS by 50%. The lower the value of FEC50, the more the compound has significant antioxidant activity.
[0095] [Tableaux 1 :RésultatsdestestsABTSetDPPH][Tables 1: ResultsdestestsABTSetDPPH]
[0096] *solutions dans l’éthanol [0097] “solution dans l’eau pure* Solutions in ethanol [solution] in pure water
L’immortelle présente une excellente activité au regard de ces résultats.The immortelle presents an excellent activity with regard to these results.
[0098] Exemple 7 : Etude de l'activité anti-inflammatoire sur cellules du système immunitaire d'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum obtenue par le procédé de l'exemple 1.Example 7: Study of the anti-inflammatory activity on cells of the immune system of absolute immortelle, Helichrysum italicum obtained by the method of Example 1.
[0099] Effet de l'absolue d’immortelle sur la surproduction de NO induite par le LPS [0100] Un dosage des nitrites, reflet de la production de NO par les macrophages RAW a été réalisé dans les surnageants de culture prélevés en fin d'expérimentation. Ce dosage a été standardisé sur la quantité de cellules de façon à s’affranchir d’une éventuelle variation du nombre de cellules dans les puits.Effect of the immortelle absolute on the overproduction of NO induced by LPS [0100] A determination of nitrites, reflecting the production of NO by RAW macrophages was carried out in the culture supernatants taken at the end of 'experimentation. This assay has been standardized on the quantity of cells so as to be free from any variation in the number of cells in the wells.
[0101] Le traitement des macrophages de la lignée RAW 264.7 avec du LPS 100 ng/ml durant 22h entraîne une très forte accumulation de nitrites dans les surnageants de culture.The treatment of macrophages of the RAW 264.7 line with LPS 100 ng / ml for 22 h leads to a very strong accumulation of nitrites in the culture supernatants.
[0102] La référence Aminoguanidine ou AMG, un inhibiteur de la NO Synthase inductible ou NOSi, enzyme impliquée dans la synthèse de NO, à la concentration 0,1 mM inhibe fortement la production de NO induite par le LPS (-84% par rapport au contrôle LPS).The reference Aminoguanidine or AMG, an inhibitor of inducible NO Synthase or NOSi, an enzyme involved in the synthesis of NO, at a concentration of 0.1 mM strongly inhibits the production of NO induced by LPS (-84% compared to LPS control).
[0103] L’Hydrocortisone, un corticostéroïde anti-inflammatoire, à la concentration de 1 μΜ inhibe faiblement la production de NO induite par le LPS (-20% par rapport au contrôle LPS).Hydrocortisone, an anti-inflammatory corticosteroid, at a concentration of 1 μΜ weakly inhibits the production of NO induced by LPS (-20% compared to LPS control).
[0104] La N-acetylcystéine, un antioxydant à large spectre, décrit comme inhibiteur de la voie NFKB, à la concentration de 5 mM, inhibe modérément la production de NO par les macrophages stimulés par le LPS (-40% par rapport au contrôle LPS).N-acetylcysteine, a broad spectrum antioxidant, described as an inhibitor of the NFKB pathway, at a concentration of 5 mM, moderately inhibits the production of NO by macrophages stimulated by LPS (-40% compared to the control LPS).
[0105] Le solvant Ethanol à 0,1% n'a pas d'effet sur la production de NO.The 0.1% ethanol solvent has no effect on the production of NO.
[0106] Les résultats sont illustrés en figure 3.The results are illustrated in FIG. 3.
[0107] On observe un effet inhibiteur concentration dépendant de l'absolue d'immortelle obtenu à l'exemple 1 sur la production de NO induite par le LPS. L'inhibition de la production de NO est maximale à la concentration de 0,050 g/1 (-64% par rapport au contrôle LPS). L’EC50 de l'absolue Immortelle est estimée entre 0,025 g/1 et 0,050 g/1 sur ce test.There is a concentration inhibiting effect depending on the absolute of immortelle obtained in Example 1 on the production of NO induced by LPS. The inhibition of NO production is maximum at the concentration of 0.050 g / 1 (-64% compared to the LPS control). The EC50 of absolute Immortelle is estimated between 0.025 g / 1 and 0.050 g / 1 on this test.
[0108] Effet de l'immortelle absolue sur la surproduction de PGE2 induite par le LPS.Effect of absolute immortal on the overproduction of PGE2 induced by LPS.
[0109] Le traitement des macrophages de la lignée RAW 264.7 avec du LPS 100 ng/ml durant 22h entraîne une très forte accumulation de prostaglandine E2 dans les surnageants de culture.The treatment of macrophages of the RAW 264.7 line with LPS 100 ng / ml for 22 h leads to a very strong accumulation of prostaglandin E2 in the culture supernatants.
[0110] La référence Aminoguanidine, un inhibiteur de la NO Synthase inductible ou iNOS, enzyme impliquée dans la synthèse de NO, à la concentration 0,1 mM n’ a pas eu d’effet sur la surproduction de PGE2 induite par le traitement LPS.The reference Aminoguanidine, an inhibitor of inducible NO Synthase or iNOS, enzyme involved in the synthesis of NO, at a concentration of 0.1 mM had no effect on the overproduction of PGE2 induced by the LPS treatment. .
[0111] L’Hydrocortisone, un corticostéroïde anti-inflammatoire, à la concentration de 1 μΜ inhibe modérément la surproduction de PGE2 induite par le traitement LPS (-27% par rapport au contrôle LPS).Hydrocortisone, an anti-inflammatory corticosteroid, at a concentration of 1 μΜ moderately inhibits the overproduction of PGE2 induced by LPS treatment (-27% compared to LPS control).
[0112] La N-acetylcystéine, un antioxydant à large spectre, décrit comme inhibiteur de la voie NFKB, à la concentration de 5 mM, a inhibé très faiblement la surproduction de PGE2 induite par le traitement LPS (-4% par rapport au contrôle LPS).N-acetylcysteine, a broad spectrum antioxidant, described as an inhibitor of the NFKB pathway, at the concentration of 5 mM, very slightly inhibited the overproduction of PGE2 induced by the LPS treatment (-4% relative to the control LPS).
[0113] Le solvant Ethanol à 0,1% a inhibé faiblement la surproduction de PGE2 induite par le traitement LPS (-13% par rapport au contrôle LPS).The 0.1% ethanol solvent slightly inhibited the overproduction of PGE2 induced by the LPS treatment (-13% compared to the LPS control).
[0114] Les résultats sont illustrés en figure 4.The results are illustrated in FIG. 4.
[0115] On observe un effet inhibiteur concentration dépendante de 1’ absolue d'immortelle obtenu à l'exemple 1 sur la production de PGE2 induite par le traitement LPS. L'inhibition de la production de PGE2 est observée dès la concentration de 0,010 g/L (-66% par rapport au contrôle LPS). L’EC50 de l'absolue d'immortelle est inférieure à 0,010 g/1 sur ce test.A concentration-dependent inhibitory effect of 1 ′ absolute of immortelle obtained in Example 1 is observed on the production of PGE2 induced by the LPS treatment. The inhibition of PGE2 production is observed from the concentration of 0.010 g / L (-66% compared to the LPS control). The EC50 of the absolute of immortelle is less than 0.010 g / 1 on this test.
[0116] Exemple 8 Etude de phototoxicité de l’absolue d'immortelle, Helichrysum italicum obtenue par le procédé de l'exemple 1.Example 8 Phototoxicity study of the absolute of immortelle, Helichrysum italicum obtained by the method of Example 1.
[0117] Des essais de phototoxicité in vitro 3T3 NRU selon la ligne directrice OCDE N°432 ont été réalisés. Les résultats montrent une absence de phototoxicité de l'absolue d'immortelle sur la gamme de concentrations de 7,81pg/ml à lOOOpg/ml.In vitro phototoxicity tests 3T3 NRU according to the OECD guideline No. 432 were carried out. The results show an absence of phototoxicity of the absolute of immortelle on the range of concentrations from 7.81pg / ml to lOOOpg / ml.
[0118] Exemple 9 Etude de génotoxicité de l'absolue d'immortelle, Helichrysum italicum obtenue par le procédé de l'exemple 1.Example 9 Genotoxicity study of the immortelle absolute, Helichrysum italicum obtained by the method of Example 1.
[0119] Des essais de mutation réverse sur des bactéries, aussi appelé test d'Ames, ont été réalisés selon la ligne directrice OCDE N°471. Les essais ont été réalisés avec les concentrations d'absolue d'immortelle obtenues à l'exemple 1 suivantes : 5000, 1600, 500, 160, 50, 16 et 5 pg/boîte. Aucune activité mutagène ou pro-mutagène n'a été mise en évidence pour toutes les concentrations étudiées.Reverse mutation tests on bacteria, also called Ames test, were carried out according to OECD guideline No. 471. The tests were carried out with the following concentrations of absolute immortelle obtained in Example 1: 5000, 1600, 500, 160, 50, 16 and 5 pg / box. No mutagenic or pro-mutagenic activity was demonstrated for all the concentrations studied.
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