FR3058060A1

FR3058060A1 - Composition pharmaceutique comprenant le beta-elemene, le lupeol, le cinnamaldehyde et/ou le 2-hydroxycinnamaldehyde et/ou le 2'-benzoyloxycinnalmaldehyde et/ou le beta-sitosterol et/ou la curcumine.

Info

Publication number: FR3058060A1
Application number: FR1771115A
Authority: FR
Inventors: Guy Faustin Monkam Nitcheu
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2016-10-31
Filing date: 2017-10-23
Publication date: 2018-05-04
Anticipated expiration: 2037-10-23
Also published as: FR3058060B1

Abstract

La présente invention concerne une composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend en tant que principe actif, une combinaison de béta-élémène, de lupéol et d'un agent pharmaceuticalement actif choisi parmi le cinnamaldéhyde, le 2-hydroxycinnamaldéhyde , le 2'- benzoyloxycinnalmaldéhyde, le béta-sitostérol, la curcumine et leurs mélanges.

Description

(54) COMPOSITION PHARMACEUTIQUE COMPRENANT LE BETA-ELEMENE, LE CINNAMALDEHYDE ET/OU LE 2-HYDROXYCINNAMALDEHYDE ET/OU BENZOYLOXYCINNALMALDEHYDE ET/OU LE BETA-SITOSTEROL ET/OU LA CURCUMINE.

(57) La présente invention concerne une composition pfiarmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend en tant que principe actif, une combinaison de béta-élémène, de lupéol et d'un agent pharmaceuticalement actif choisi parmi le cinnamaldéhyde, le 2-hydroxycinnamaldéhyde, le

2'- benzoyloxycinnalmaldéhyde, le béta-sitostérol, la curcumine et leurs mélanges.

LUPEOL,

LE

2'-

[Domaine Technique de l’invention]

La présente invention concerne une composition pharmaceutique qui peut être utilisée comme médicament, notamment pour le traitement thérapeutique des cancers et notamment du carcinome hépatocellulaire.

[Art Antérieur]

Le traitement palliatif efficace pour le carcinome hépatocellulaire (CHC) a été longtemps considéré comme difficile en raison de la résistance habituelle de ce type de tumeur à la chimiothérapie cytotoxique conventionnelle. Par ailleurs, les chimiothérapies agressives comportant plusieurs molécules cytotoxiques non sélectives ne peuvent souvent pas être proposées à des patients cirrhotiques ayant une fonction hépatique compromise en raison du risque élevé d'effets secondaires systémiques.

L'amélioration de la connaissance des processus moléculaires impliqués dans l'oncogenèse a permis l'identification de nouvelles cibles pour le traitement des cancers. Ainsi, de nouvelles thérapies dites « ciblées » sont actuellement disponibles dans le traitement du CHC et d'autres tumeurs. Elles interviennent principalement dans la transduction des signaux (signaux qui demandent à la cellule de se multiplier). La voie dite des tyrosine-kinases est la mieux connue à ce jour. Cette voie peut être bloquée par des anticorps monoclonaux (Mab) ou des inhibiteurs enzymatiques (inib). On retrouve parmi ces médicaments, les inhibiteurs du VEGF (Facteur de croissance de l'endothélium vasculaire ; le VEGF est secrété par la plupart des cellules tumorales, en partie dû au manque d'oxygénation locale et il favorise l'angiogenèse), les inhibiteurs du récepteur de l'EGFR (Récepteur du facteur de croissance épidermique), les inhibiteurs de plusieurs récepteurs à activité tyrosine kinase qui ciblent parallèlement l'angiogenèse et la prolifération cellulaire, les inhibiteurs des kinases, les inhibiteurs du récepteur IGF-1R, les inhibiteurs de mTOR et les inhibiteurs de la voie de signalisation MEK-ERK.

Cependant, ces thérapies ciblées pour la plupart donnent des résultats relativement modestes en termes d'efficacité et de survie dans le CHC et notamment dans le CHC avancé. D'autre part, l'efficacité des thérapies ciblées dans le CHC reste encore limitée par les phénomènes de résistance. Certaines cellules cancéreuses possèdent ou acquièrent la possibilité de contourner les mécanismes d'actions des médicaments, d'autres par contre sont d'abord sensibles mais développent des capacités de résistance en cours de traitement.

Il convient aussi de souligner qu'avec ces thérapies ciblées, des effets secondaires non négligeables peuvent entraîner un inconfort, et n'offrent pas de ce fait aux patients une meilleure qualité de vie : myélosuppression (des prises de sang sont effectuées régulièrement pour vérifier les taux de globules rouges, globules blancs et plaquettes), alopécie (qui peut être difficile à vivre psychologiquement pour les patients car elle est un signe concret et visible de la maladie), trouble cutané et syndrome de main-pied, diarrhées, hausse de la pression artérielle, protéinurie, hyperglycémie, hypercholestérolémie, réactions allergiques, syndrome de relargage des cytokines, syndrome de lyse tumorale pouvant auto entretenir la tumeur, etc.

D'autre part, plusieurs observations relèvent l’existence d'un lien étroit entre l'inflammation chronique et le risque de développer le cancer. Un des meilleurs exemples de cette corrélation est sans doute l'augmentation dramatique (20 fois) du risque du cancer du côlon chez les personnes touchées par les maladies inflammatoires de l'intestin, en particulier les colites ulcéreuses. C'est aussi le cas du cancer de l'estomac, qui se développe suite à une inflammation provoquée par la présence d'une bactérie, l'Helicobacter pylori. Le cancer de la prostate est provoqué par une inflammation de la prostate (prostatite). Dans le CHC, l’hypothèse est que l’inflammation chronique augmente les mutations d’ADN et que la prolifération accrue des hépatocytes dans les nodules de régénérescence augmente la probabilité de fixation de mutations oncogènes. Par ailleurs, une médication pré et postperfusion associant un corticoïde et un antihistaminique est vivement conseillée afin de réduire les risques de réactions allergiques liés à certaines thérapies ciblées.

Alors que des biomarqueurs ont été validés pour le cancer du sein (nombre de copies HER), le cancer du poumon (mutations de l'EGFR) ou les cancers du côlon (mutations de Kras), il n'y a pas actuellement de biomarqueurs pronostiques validés pour le CHC sous thérapie ciblée.

De nombreuses études ont montré que la reptine et/ou la pontine étaient surexprimées pendant la cancérogenèse ; leur localisation nucléo-cytoplasmique était variable selon le type de cancer et n'était pas forcément un facteur de mauvais pronostic. En revanche, la surexpression de la reptine et de la pontine est un facteur de mauvais pronostic dans les CHC et un taux élevé d'ARNm de pontine est corrélé un mauvais pronostic [(Haurie et al., 2009). Hepatology. 2009 Dec;50(6): 1871-83. doi: 10.1002/hep.23215],

Par ailleurs, il est connu que la reptine est surexprimée dans le cancer de la prostate, le carcinome hépatocellulaire (CHC), le cancer gastrique, le cancer du rein et le cancer du sein.

Il est également connu que la pontine est surexprimée dans le carcinome hépatocellulaire, le cancer du poumon et le cancer colorectal.

Le dysfonctionnement de la reptine et/ou de la pontine a également été mis en évidence dans d'autres cancers tels que les leucémies chroniques, les mésothéliomes et les myélomes multiples, les lymphomes de haut grade, les lymphomes de Burkitt, les tumeurs cérébrales comme les gliomes et les tumeurs de la vessie.

La survivine est également connue comme cible thérapeutique dans le cas du cancer. La majorité des tumeurs solides (cancer du sein, prostate, poumon, rein,...etc) ou hématopoïétiques (myélome multiple, leucémie,...etc) l'exprime de façon aberrante. Il est également connu que les cellules des tumeurs cancéreuses du sein, du poumon et du rein surexpriment la survivine.

Par ailleurs, il est connu que le béta-élémène peut être utilisé comme anti-cancéreux. Il a, de plus, un large spectre antinéoplasique, incluant les tumeurs résistantes aux médicaments anticancéreux classiquement utilisés. Il est également connu qu’il est non cytotoxique et qu’il est bien tolérée par les patients. Il peut passer la barrière hémato-encéphalique et a des propriétés immunostimulatrices. Son activité anti-inflammatoire est également connue. Il est également connu que le béta-élémène inhibe la survivine. Il est également connu pour diminuer voire supprimer la résistance des cellules cancéreuses vis-à-vis des médicaments anti cancéreux.

Il est également connu que le béta-élémène réduit également la résistance des cellules cancéreuses à certains médicaments. Ainsi, il inhibe significativement le MDR1, MRP et GST-ji. Chen et al., (2006) (Journal of Médicinal Plants Research Vol. 6(46), pp. 5720-5729, 3 December, 2012) ont montré que le β-Elémène augmente inévitablement l'accumulation intracellulaire de AMD dans les cellules U251/AMD (cellules ayant développées une résistance à AMD) du glioblastome humain, réduit la IC50 des cellules U251/AMD de 0,915 à 0,051 mg/1.

De plus, il est également connu que le lupéol (aussi connu sous le nom de Fagarstérol ou Clérodol), est un composé pharmacologiquement actif possédant des propriétés antiinflammatoires, anticancéreuses notamment par son activité antiproliférative, par la régulation du cycle cellulaire, de l'apoptose, de l'angiogenèse et de par son effet sur la transition épithélio-mésenchymateuse. Il stimule également le système immunitaire des patients atteints du cancer. Il convient de noter que, le lupéol à dose thérapeutique efficace ne montre aucune toxicité sur les cellules normales et les tissus.

Dans le cas du CHC, il est connu que le lupéol inhibe la protéine BDNF (BrainDerived Neurotrophic Factor-Facteur Neurotrophique Dérivé du Cerveau). Le lupéol inhibe la prolifération cellulaire des cellules HCCLM3 du CHC en fonction de la concentration et du temps, ceci à travers l'activation de Caspase-3 et le clivage du PARP [poly(ADPribose)polymérase]. Cependant, Zhang L et al., (European Journal of Pharmacology, volume 762, 5 September 2015, Pages 55-62) ont aussi constaté que la mort de ces cellules induite par le lupéol était associées à une diminution marquée de l'expression de la protéine BDNF et une ser-9- phosphorylation du GSK-3B (Glycogen Synthase Kinase 3 Beta), avec une suppression concomitante de l'expression de Aktl, PI3K (phosphatidyl inositol 3-kinase), B-caténine, cMyc et ARNm de la Cycline Dl. L'inhibition de la surexpression de BDNF résulte donc de la diminution de l'expression des protéines Akt et PI3k, ainsi que la réactivation de la fonction de GSK-3B.

Par ailleurs, l'administration orale de lupéol à la dose de 50 mg/kg pendant 18 jours consécutives n'a produit aucune mortalité ni toxicité systémique chez les rats.

Il est également connu que les cinnamaldéhydes notamment, le cinnamaldéhyde (CA), le 2-hydroxycinnamaldéhyde (HCA), et le 2- benzoyloxycinnamaldéhyde (BCA), un dérivé semi-synthétique du HCA, ont chacun une activité anti-inflammatoire, anti-proliférative, antiangiogénique, anti-métastatique via l'inhibition de la TEM (transition épithéliomésenchymateuse) et pro-apoptotique sur de nombreuses cellules cancéreuses humaines comme le mélanome, le cancer du sein, le cancer du poumon, le cancer de l'ovaire, le cancer du côlon, cancer de la prostate, myélome et la leucémie.

Il est également connu que la HCA a un effet sur le CHC. Ainsi, Moon EY., (Eun-Yi Moon et al., (2005) European Journal of Pharmacology 530 (2006) 270 - 275.) a étudié l'effet inhibiteur de HCA sur la farnésyl transférase. Chez une souris modèle ayant développé un carcinome hépatocellulaire suite à une mutation transgénique H-rasl2V et sous le contrôle d'un promoteur spécifique telle que l'albumine. Il a été constaté que, l'administration de HCA/BCA pendant 10 semaines a retardé le développement du cancer hépatique par rapport au groupe contrôle. HCA/BCA réduit significativement le nombre et la taille des lésions hépatiques. HCA/BCA augmente le nombre de splénocytes et l'infiltration des lymphocytes dans le foie. Ces données suggèrent que le retard de l'apparition du cancer hépatique pourrait être provoqué par un effet immunostimulant de HCA/BCA sur les cellules T.

Par ailleurs, le béta-sitostérol est connu pour posséder des propriétés antiinflammatoires, antipyrétiques, antinéoplasiques et immunomodulatrices.

[Problème Technique à résoudre]

Un but de la présente invention est de proposer une nouvelle composition pharmaceutique utilisable en tant que médicament et plus particulièrement utilisable dans le traitement du cancer.

Un autre but de l’invention est de proposer une nouvelle composition pharmaceutique utilisable en tant que médicament et plus particulièrement utilisable dans le traitement du cancer qui remédie à tout ou une partie des inconvénients liés aux compositions de l’art antérieur précité.

Un autre but de l’invention est de proposer une composition pharmaceutique qui s’avère particulièrement intéressante dans le traitement du CHC.

Un autre but de la présente invention est de proposer une composition pharmaceutique utilisable en tant que médicament, notamment pour le traitement thérapeutique du CHC, d’insuffisance hépatocellulaire et notamment de cirrhose du foie.

Un autre but de la présente invention est de fournir une composition pharmaceutique utilisable dans le traitement du cancer du sein et/ou du cancer de la prostate.

Un autre but de la présente invention est de proposer une composition pharmaceutique, notamment telle que précitée, qui présente une toxicité réduite et/ou qui est bien tolérée par les patients.

Un autre but de la présente invention est de proposer une composition pharmaceutique qui permet de réduire ou inhiber la résistance médicamenteuse et notamment la résistance médicamenteuse à des agents anticancéreux.

Un autre but de la présente invention est de proposer une composition pharmaceutique qui agit spécifiquement sur les cellules cancéreuses qui surexpriment au moins une protéine choisie parmi la reptine, la pontine et la survivine et en particulier qui agit sur les cellules cancéreuses qui surexpriment la reptine et la pontine et éventuellement la survivine.

Un autre but de la présente invention est de proposer une composition pharmaceutique qui inhibe le rôle des cellules stromales dans la surexpression par les cellules cancéreuses d'au moins une protéine choisie parmi la reptine, la pontine et la survivine.

Un autre but de la présente invention est de proposer une composition pharmaceutique qui permet d'inhiber la surexpression des récepteurs CXCR4 par les cellules cancéreuses, de bloquer la formation d'une nouvelle vascularisation, et de réduire ainsi l'apport sanguin aux tumeurs croissantes.

Un autre but de la présente invention est de proposer une composition pharmaceutique qui permet d'inhiber la formation du stroma tumoral, le processus métastatique, de réduire le risque de récidive tumorale.

Un autre but de la présente invention est de proposer une composition pharmaceutique qui permet d'inhiber l'inflammation, l'altération de la muqueuse intestinale, la translocation bactérienne, virale ou fongique de la lumière intestinale vers la circulation sanguine, l'hyperactivation immunitaire systémique, d'induire une réponse immunitaire vigoureuse, notamment au niveau du tissus lymphoïde associé au tube digestif.

[Brève Description de l’invention]

Pour résoudre au moins un des problèmes techniques précités, la présente invention propose une composition pharmaceutique, qui de manière caractéristique selon l’invention, comprend en tant que principe actif, une combinaison de béta-élémène, de lupéol et d’un agent pharmaceuticalement actif choisi parmi le cinnamaldéhyde, le 2hydroxycinnamaldéhyde, le 2'- benzoyloxycinnalmaldéhyde, le béta-sitostérol, la curcumine et leurs mélanges.

Le Demandeur a en effet constaté qu’une telle composition pharmaceutique s’avérait active dans le traitement du cancer, notamment dans le cas du CHC, du cancer du sein et de la prostate.

Le Demandeur a également mis en évidence un effet synergique d’au moins deux des constituants qui procure une action renforcée de la composition de l’invention sur au moins un mécanisme impliqué dans le phénomène du cancer, à savoir un mécanisme choisi parmi la formation du stroma tumoral, la croissance cellulaire, l'apoptose, l'angiogenèse, le processus métastatique, l'activation des voies de signalisation cellulaire impliquées dans l'inflammation, le métabolisme lipidique, glucidique, l'infection bactérienne, virale et fongique.

Le Demandeur a également mis en évidence que la composition selon l’invention avait un effet sur les cellules surexprimant la reptine et/ou la pontine, ce qui est le cas des cellules cancéreuses de la majorité des cancers, dont le CHC, le cancer du sein et de la prostate.

Le Demandeur a également mis en évidence que la composition selon l'invention inhibait certains axes, notamment CXCR4/CXCL12, qui jouent un rôle fondamentale dans la prolifération, la croissance tumorale, la métastase et la formation d'un microenvironnement immunosuppressive.

[Description détaillée]

La composition pharmaceutique selon l’invention peut être utilisée en tant que médicament et notamment pour son utilisation dans le traitement thérapeutique du cancer. Selon un mode de réalisation particulier de la présente invention, la composition de l’invention peut comprendre, en outre un mélange de béta-sitostérol et de cinnamaldéhyde ou un mélange de béta-sitostérol et de 2-hydroxycinnamaldéhyde ou un mélange de bétasitostérol et de 2'-benzoyloxycinnamaldéhyde ou un mélange des cinnamaldéhydes notamment, le cinnamaldéhyde avec un ou plusieurs de ses dérivés synthétiques et/ou métabolites.

De préférence, elle ne comprend pas un mélange de 2- hydroxycinnamaldéhyde, de 2'benzoyloxycinnalmaldéhyde et de béta- sitostérol.

A titre d’exemple, elle peut comprendre en pourcentage massique de la masse totale des ingrédients actifs, un pourcentage massique de lupéol sensiblement égal ou supérieur à 15% et sensiblement égal ou inférieur à 55, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 30% et sensiblement égal ou inférieur à 50%, un pourcentage de béta-élémène sensiblement égal ou supérieur à 10% et sensiblement égal ou inférieur à 55%, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 20% et sensiblement égal ou inférieur à 40%, un pourcentage de cinnamaldéhyde sensiblement égal ou supérieur à 10% et sensiblement égal ou inférieur à 45%, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 20% et sensiblement égal ou inférieur à 40%, un pourcentage de 2- hydroxycinnamaldéhyde sensiblement égal ou supérieur à 10% et sensiblement égal ou inférieur à 45%, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 20% et sensiblement égal ou inférieur à 40%, un pourcentage de 2'-benzoyloxycinnalmaldéhyde sensiblement égal ou supérieur à 10% et sensiblement égal ou inférieur à 45%, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 20% et sensiblement égal ou inférieur à 40%, un pourcentage de béta-sitostérol, lorsque ladite composition contient cet ingrédient, sensiblement égal ou supérieur à 10% et sensiblement égal ou inférieur à 45%, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 20% et sensiblement égal ou inférieur à 40%.

Lorsque la composition comprend le cinnamaldéhyde et l'un de ses dérivés, leur pourcentage massique par rapport à la masse totale des ingrédients actifs est notamment égal et notamment sensiblement égal à 20%.

La composition selon l’invention comprend en outre, au moins un excipient pharmaceuticalement acceptable. Cet excipient peut être solide ou liquide. Il peut être choisi, par exemple, parmi l’eau purifiée, l’alcool éthylique, le propylène glycol, la glycérine, les huiles végétales, les huiles animales, les hydrocarbures, les silicones, les sucres tels que le glucose, le lévulose, l’amidon de blé, l’amidon de maïs, l’amidon de pomme de terre, la gomme xanthane, la gomme arabique, la gomme adragante, la gomme de Sterculia, la gomme Guar ou Guaranates, les pectines, les alginates, les carraghénates, la gélose ou Agar-Agar, la gélatine, la cellulose et ses dérivés.

La composition de l’invention peut être administrée par n'importe quelle voie appropriée, par exemple par la voie orale, rectale, locale (topique, par exemple), intrapéritonéale, systémique, intraveineuse, intramusculaire, sous-cutanée ou mucosale, notamment sublinguale, ou bien en utilisant un patch, ou encore sous forme encapsulée dans, ou immobilisée sur, des liposomes, des microparticules, des microcapsules, associée à des nanoparticules et analogues. On peut notamment citer, à titre d'exemples non limitatifs d'excipients appropriés pour une administration par voie orale, le talc, le lactose, l'amidon et ses dérivés, la cellulose et ses dérivés, les polyéthylène glycols, les polymères d'acide acrylique, la gélatine, le stéarate de magnésium, des matières grasses animales, végétales ou synthétiques, les dérivés de la paraffine, les glycols, les stabilisants, les conservateurs, les antioxydants, les agents mouillants, les antiagglomérants, les dispersants, les émulsionnants, les agents modifiants du goût, les agents de pénétrations, de solubilisation. Les techniques de formulation et d'administration des médicaments et compositions pharmaceutiques sont bien connues dans la technique ici considérée, l'Homme du Métier pouvant notamment se référer à l'ouvrage Remington's Pharmaceutical Sciences, dernière édition.

Selon l’invention, la composition peut être avantageusement administrée par voie orale, par injection en intraveineuse.

Avantageusement, la composition selon l’invention est adaptée pour être administrée par voie orale ou intraveineuse à une dose sensiblement égale ou supérieure à 40 mg/kg/24h et sensiblement égale ou inférieure à 200 mg/kg/24h en une ou plusieurs prises à un mammifère présentant un tel besoin.

A titre d’exemples, la composition de l’invention peut être utilisée dans le traitement thérapeutique d’un cancer choisi parmi le carcinome hépatocellulaire, le cancer du côlon, le cancer du rectum, le cancer de l’estomac, les cancers de la bouche, notamment le cancer de la langue, le cancer de la prostate, le cancer de la prostate métastatique, le cancer du rein, le cancer du sein, le cancer du sein chimiorésistant, le cancer de la vessie, la leucémie sous forme chronique ou aigüe, le myélome multiple, le lymphome, les tumeurs cérébrales, le cancer du poumon, en particulier l’adénocarcinome du poumon, le cancer de l’utérus, le cancer de l’ovaire, les tumeurs osseuses, le cancer du pancréas, le cancer de la vésicule biliaire et le cancer du foie.

La composition selon l’invention peut avantageusement être utilisée chez les patients atteints d’une maladie inflammatoire chronique et en particulier, dans les maladies inflammatoires chroniques de l’intestin, plus particulièrement les colites ulcéreuses, chez les patients porteurs d’un agent pathogène susceptible de provoquer une inflammation, en particulier, Hélicobacter pylori, chez les patients atteints de diabète, de dyslipidémie, d’affections ostéo-articulaires, les patients atteints d’une insuffisance hépatocellulaire, les patients atteints d'infections bactériennes, fongiques ou virales, notamment les patients atteints par le virus de l'hépatite B et/ou l'hépatite C et/ou le virus d'immunodéficience acquise (VIH).

Dans le cas du CHC, le Demandeur a mis en évidence que la composition selon l’invention donnait de bons résultats au moins in vitro et ne présentait aucune toxicité pour les cellules du foie du patient.

Le mode d’action de la composition de l’invention n’est pas totalement élucidé. Il est plus que probable qu’elle agisse simultanément sur différents mécanismes du cancer. Ainsi, la composition de l’invention peut être utilisée dans le traitement thérapeutique du cancer en tant qu’agent bloquant le recrutement des cellules souches de la moelle osseuse vers le microenvironnement tumoral et/ou en tant qu’agent inhibiteur de la formation du stroma tumoral et/ou en tant qu’agent inhibiteur de la surexpression d’au moins une protéine choisie parmi la reptine, la pontine et la survivine, et de préférence de la reptine et de la pontine et/ou agent anti-inflammatoire et/ou agent provoquant l’apoptose des cellules cancéreuses et/ou agent inhibiteur de l’angiogenèse et/ou agent anti-métastatique.

Ce mécanisme se ferait par déstructuration, une restructuration de la composition lipidique des membranes des cellules, et de ce fait, inhiberait les voies de signalisation cellulaire impliquées dans les maladies métaboliques, la sécrétion des cytokines inflammatoires, des chimiokines, dans la prolifération cellulaire, l'angiogenèse, la métastase, et dans l'infection bactérienne, virale ou fongique.

La présente invention concerne également une préparation pharmaceutique qui comprend la composition selon l’invention, et, en outre, en mélange ou conditionné séparément, au moins un agent anti-cancéreux pour leur utilisation dans le traitement thérapeutique du cancer de manière simultanée, séquencée ou espacée dans le temps.

A titre d’exemple, l’agent anticancéreux peut être choisi parmi les inhibiteurs du

VEGF, les inhibiteurs du récepteur de l'EGFR, les inhibiteurs de plusieurs récepteurs à activité tyrosine kinase qui ciblent parallèlement l'angiogenèse et la prolifération cellulaire, les inhibiteurs des kinases, les inhibiteurs du récepteur IGF-1R, les inhibiteurs de mTOR, les inhibiteurs de la voie de signalisation MEK-ERK, le paclitaxel, As4S4, le tamoxifène, la curcumine, la vincristine, l’adriamycine, Taclarubicine, l'oxaliplatine, le calcium folinate, le 5-fluorouracile, la capecitabine, la cisplatine, la tétraméthylpyrazine, le méthotrexate, la daunorubicine, certains virus génétiquement modifiés qui ciblent préférentiellement les cellules cancéreuses et leurs mélanges, et notamment les mélanges de deux desdits agents anti-cancéreux, les agents radioactifs utilisables en curiethérapie et/ou les métabolites radioactifs injectables ou ingérables.

La présente invention concerne également une préparation pharmaceutique qui comprend en combinaison le béta-élémène, le lupéol et/ou béta-sitostérol, le cinnamaldéhyde et/ou le 2-hydroxycinnamaldéhyde et/ou 2'- benzoyloxycinnamaldéhyde et éventuellement de la curcumine.

La présente invention concerne également un complément alimentaire qui comprend en combinaison du béta-élémène, le lupéol et/ou béta-sitostérol et un agent pharmaceuticalement actif choisi parmi le cinnamaldéhyde, le 2- hydroxycinnamaldéhyde, le

2'-benzoyloxycinnalmaldéhyde et leurs mélanges et éventuellement de la curcumine.

[Définitions]

Les termes « traitement thérapeutique » font référence au traitement curatif et au traitement prophylactique ; au sens de la présente invention, un traitement thérapeutique permet de restaurer au moins partiellement, de corriger au moins partiellement ou de modifier au moins partiellement des fonctions physiologiques en exerçant une action pharmacologique, immunologique ou métabolique.

Le terme « patient » fait référence à un mammifère animal ou humain. La composition selon l’invention peut également être utilisée en médecine vétérinaire.

Au sens de la présente invention, un « agent anti-cancéreux » est un élément qui présente au moins in vitro une action contre les cellules cancéreuses, indépendamment de son mécanisme d’action. Par « action » on entend, au sens de la présente invention la destruction ou la modification au moins partielle des cellules cancéreuses qui permet notamment de limiter la prolifération des cellules cancéreuses et/ou leur propagation.

Les termes « patients atteints de diabète » font référence aux patients atteints de diabète de type 1, les patients atteints de diabète de type 2, les patientes atteintes de diabète gestationnel, les patients atteints de diabète insipide et les patients atteints de diabète rénal.

Le terme « dyslipidémie » fait référence aux hyperlipidémies et aux hypolipidémies déterminées en fonction des critères en vigueur.

Les termes « patients atteints d’affections ostéo-articulaires » désignent les patients qui présentent au moins deux signes choisis parmi les signes inflammatoires, les fistules et la présence avérée de bactéries détectée par une ponction ou une hémoculture.

Les termes « patients atteints d’insuffisance hépatocellulaire » désignent les patients atteints d’une hépatite, quelle que soit sa cause (virale, toxiques, médicamenteuse ou ischémiques) et les patients atteints d’une cirrhose du foie.

Le terme « infection virale » fait référence à une entité biologique que ce soit le virus de l'hépatite B (VHB), le virus de l'hépatite C (VHC), le virus de l'immunodéficience humaine (VIH), le virus de l'herpes (HSV, herpes simplex virus), le cytomégalovirus (CMV) nécessitant un hôte, le plus souvent une cellule, dont il utilise les constituants pour se multiplier.

Au sens de la présente invention, un « complément alimentaire » est une denrée alimentaire dont le but est de compléter le régime alimentaire normal et qui constitue une source concentrée de nutriments ou d’autres substances ayant un effet nutritionnel ou physiologique seuls ou combinés.

S’agissant des agents anti-cancéreux cités, les termes utilisés englobent, sauf indications contraires, les isomères de constitution, les stéréo-isomères de conformation, les énantiomères et les diastéréo- isomères du composé chimique considéré.

S'agissant du cinnamaldéhyde dans la composition selon l'invention, le terme englobe, sauf indications contraires, les dérivés du cinnamaldéhyde, les dimères de formation, en l'occurence HCA-HCA, BCA-BCA, CA-CA.

[Exemples]

Le pourcentage des compositions ci-dessous est un pourcentage en masse par rapport à la masse totale des ingrédients actifs.

Composition la : béta-élémène (30%), lupéol (30%) et 2- hydroxy cinnamaldéhyde (40%).

Composition lb : béta-élémène (30%), lupéol (30%) et 2'- benzoyloxycinnamaldéhyde (40%).

Composition 2 : béta-élémène (30%), lupéol (30%), 2- hydroxy cinnamaldéhyde (20%) et 2'benzoyloxycinnamaldéhyde (20%).

Composition 3a : béta-élémène (50%), lupéol (30%), et 2-hydroxycinnamaldéhyde (20%).

Composition 3b : béta-élémène (50%), lupéol (30%), et 2'-benzoyloxycinnamaldéhyde (20%).

Composition 4a : béta-élémène (15%), de lupéol (50%), de béta-sitostérol (25%) et de 2 hydroxycinnamaldehyde (10%).

Composition 4b : béta-élémène (15%), de lupéol (50%), de béta-sitostérol (25%) et de 2’benzoyloxycinnamaldéhyde (10%).

Composition 5a : béta-élémène (20%), de lupéol (20%), de béta-sitostérol (40%) et de 2 hydroxycinnamaldehyde (20%).

Composition 5b : béta-élémène (20%), de lupéol (20%), de béta-sitostérol (40%) et de 2’benzoyloxycinnamaldéhyde (20%).

Composition 6a : béta-élémène (25%), de lupéol (35%), de béta-sitostérol (15%) et de 2 hydroxy cinnamaldéhyde (25%).

Composition 6b : béta-élémène (25%), de lupéol (35%), de béta-sitostérol (15%) et de 2’benzoyloxycinnamaldéhyde (25%).

Composition 7a : béta-élémène (40%), de lupéol (20%), de béta-sitostérol (20%) et de 2hydroxycinnamaldéhyde (20%).

Composition 7b : béta-élémène (40%), de lupéol (20%), de béta-sitostérol (20%) et de 2’benzoyloxycinnamaldéhyde (20%).

[Résultats expérimentaux]

Différentes lignées cellulaires humaines Hep3B (Carcinome hépatocellulaire), MCF-7 (Cancer du sein), DU-145 (Cancer de la prostate) ont été étudiées. Elles ont été sélectionnées sur la base de leur capacité à surexprimer au moins une protéine choisie parmi la reptine, la pontine et la survivine. Les cellules stromales ont aussi été étudiées afin de déterminer l'impact de la composition selon l’invention dans le microenvironnement tumoral. Ces cellules ont été maintenues dans du DMEM, supplémenté avec 10% de sérum de fœtus bovin (FBS) et une solution antibiotique - antimycotique à 1% (PSM), contenant, la pénicilline, la streptomycine et amphotéricine B dans des conditions de croissance standard (5% de CO2, 37°C, une atmosphère humidifiée). Les compositions précitées ont été dissous et diluées dans du DMSO.

Les cellules précitées ont été traitées avec les solutions croissantes pendant 72h dans des milieux cellulaires complets. Tous les protocoles de traitement et de contrôle ont été préparés comme décrit précédemment.

En monothérapie, il a été observé un effet antiprolifératif du Lupéol, du 2hydroxycinnamaldéhyde plus marqué sur les trois lignées, notamment Hep3B, DU-145 et MCF-7 par rapport au β-Elemene, ceci après une exposition de 72 heures.

Les solutions combinant les molécules ont été étudiées, notamment Lupéol-βElemene, 2-hydroxycinnamaldéhyde^-Elemene et 2-hydroxycinnamaldéhyde-Lupéol. Après une exposition de 72 heures, il a été relevé un effet additif et synergique de la combinaison 2hydroxycinnamaldéhyde-Lupéol plus importante sur des lignées cellulaires Hep3B, DU145 et MCF-7 par rapport aux autres combinaisons.

L'association concomitante du Lupéol, du β-Elemene et du 2-hydroxycinnamaldéhyde a potentialisé, synergisé les effets antiprolifératifs de chaque molécule en monothérapie dans les lignées cellulaires Hep3B et DU145. Cependant, l'effet antiprolifératif de la combinaison était moins importante dans les lignées cellulaires MCF-7.

L'effet de cette combinaison sur l'induction de l'apoptose des cellules Hep3B a été déterminé en utilisant l'annexine-V/Iodure de propidium après 48h de traitement. Il a été observé une coloration accrue de l'annexine-V dans les cellules Hep3B alors qu'une coloration minimale a été observée dans les cellules témoins non traitées.

Dans une co-culture de cellules cancéreuses et stromales, le traitement des cellules confluentes (confluentes à 50%) avec l’une quelconque des solutions préparées a entraîné, une diminution de leur adhérence associée à la mort des cellules cancéreuses, une inhibition de la production par les cellules stromales de facteurs solubles retrouvées dans le microenvironnement tumoral et impliquées dans le processus métastatique et la chimiorésistance.

Ces résultats dans leur ensemble suggèrent que cette composition pharmaceutique inhibe la formation du stroma tumoral et de ce fait, la dissémination métastatique et la chimiorésistance. Elle peut, à juste titre, être utilisée dans le traitement du carcinome hépatocellulaire, le cancer du sein, cancer de la prostate même à des stades avancés.

Claims

Revendications :

1. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu’elle comprend en tant que principe actif, une combinaison de béta-élémène, de lupéol et d’un agent pharmaceuticalement actif choisi parmi le cinnamaldéhyde, le 2-hydroxycinnamaldéhyde et le 2'benzoyloxycinnalmaldéhyde, le béta- sitostérol, la curcumine et leurs mélanges.
2. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée en ce qu’elle comprend, en outre un mélange de béta-sitostérol et cinnamaldéhyde ou un mélange de bétasitostérol et de 2-hydroxycinnamaldéhyde ou un mélange de béta-sitostérol et de 2'benzoyloxycinnalmaldéhyde ou un mélange du cinnamaldéhyde avec un ou plusieurs de ses dérivés synthétiques et/ou métabolites.
3. Composition pharmaceutique selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu’elle comprend en pourcentage massique de la masse totale des ingrédients actifs, un pourcentage massique de lupéol sensiblement égal ou supérieur à 15% et sensiblement égal ou inférieur à 55, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 30% et sensiblement égal ou inférieur à 50%, un pourcentage de béta-élémène sensiblement égal ou supérieur à 10% et sensiblement égal ou inférieur à 55%, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 20% et sensiblement égal ou inférieur à 40%, un pourcentage de cinnamaldéhyde sensiblement égal ou supérieur à 10% et sensiblement égal ou inférieur à 45%, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 20% et sensiblement égal ou inférieur à 40%, un pourcentage de 2-hydroxycinnamaldéhyde sensiblement égal ou supérieur à 10% et sensiblement égal ou inférieur à 45%, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 20% et sensiblement égal ou inférieur à 40%, un pourcentage de 2'-benzoyloxycinnalmaldéhyde sensiblement égal ou supérieur à 10% et sensiblement égal ou inférieur à 45%, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 20% et sensiblement égal ou inférieur à 40%, un pourcentage de béta-sitostérol, lorsque ladite composition contient cet ingrédient, sensiblement égal ou supérieur à 10% et sensiblement égal ou inférieur à 45%, et notamment sensiblement égal ou supérieur à 20% et sensiblement égal ou inférieur à 40%.
4. Composition pharmaceutique selon l’une quelconque des revendications précédentes, pour son utilisation dans le traitement thérapeutique d’un cancer choisi parmi le carcinome hépatocellulaire, le cancer du côlon, le cancer du rectum, le cancer de l’estomac, les cancers de la bouche, notamment le cancer de la langue, le cancer de la prostate, le cancer de la prostate métastatique, le cancer du rein, le cancer du sein, le cancer du sein chimiorésistant, le cancer de la vessie, la leucémie sous forme chronique ou aigüe, le myélome multiple, le lymphome, les tumeurs cérébrales, le cancer du poumon, en particulier l’adénocarcinome du poumon, le cancer de l’utérus, le cancer de l’ovaire, les tumeurs osseuses, le cancer du
5 pancréas, le cancer de la vésicule biliaire et le cancer du foie.

5. Composition pharmaceutique selon l’une quelconque des revendications précédentes, pour son utilisation dans le traitement thérapeutique du cancer chez les patients atteints d’une maladie inflammatoire chronique et en particulier, dans les maladies inflammatoires chroniques de l’intestin, plus particulièrement les colites ulcéreuses, chez les patients porteurs

10 d’un agent pathogène susceptible de provoquer une inflammation, en particulier, Hélicobacter pylori, chez les patients atteints de diabète, de dyslipidémie, d’affections ostéo-articulaires, les patients atteints d’une insuffisance hépatocellulaire, les patients atteints d'infections bactériennes, fongique ou virales, notamment les patients atteints par le virus de l'hépatite B et/ou l'hépatite C et/ou le virus d'immunodéficience acquise (VIH).

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6. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications précédentes pour son utilisation dans le traitement du cancer, d'infections virales, bactériennes ou fongiques notamment chez les patients selon la revendication 5, qui permet d'inhiber l'altération de la muqueuse intestinale, la translocation bactérienne, virale ou fongique de la lumière intestinale vers la circulation sanguine, l'hyperactivation immunitaire systémique,

20 d'induire une réponse immunitaire vigoureuse, en particulier au niveau du tissus lymphoïde associé au tube digestif.
7. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications précédentes qui déstructure, restructure la composition lipidique des membranes des cellules, et de ce fait, inhibe les voies de signalisation cellulaire impliquées dans les maladies métaboliques, la

25 sécrétion des cytokines inflammatoires, des chimiokines, dans la prolifération cellulaire, l'angiogenèse, la métastase, et dans l'infection bactérienne, virale ou fongique.
8. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications précédentes pour son utilisation dans le traitement du cancer en tant qu'agent bloquant du recrutement des cellules souches de la moelle osseuse vers le microenvironnement tumoral et/ou en tant

30 qu'agent inhibiteur de la formation du stroma tumoral et/ou en tant qu'agent inhibiteur de la surexpression d’au moins une protéine choisie parmi la reptine, la pontine et la survivine et de préférence de la reptine et de la pontine.
9. Préparation pharmaceutique caractérisée en ce qu’elle comprend la composition selon l’une quelconque des revendications précédentes et, en outre, en mélange ou conditionné séparément au moins un agent anti-cancéreux pour leur utilisation dans le traitement

5 thérapeutique du cancer.
10. Préparation pharmaceutique selon la revendication 9, caractérisée en ce que ledit agent anticancéreux est choisi parmi les inhibiteurs du VEGF, les inhibiteurs du récepteur de 1EGFR, les inhibiteurs de plusieurs récepteurs à activité tyrosine kinase qui ciblent parallèlement l'angiogenèse et la prolifération cellulaire, les inhibiteurs des kinases, les

10 inhibiteurs du récepteur IGF-1R, les inhibiteurs de mTOR, les inhibiteurs de la voie de signalisation MEK-ERK, le paclitaxel, As4S4, le tamoxifène, la curcumine, la vincristine, l’adriamycine, l’aclarubicine, l'oxaliplatine, le calcium folinate, le 5-fluorouracile, la capecitabine, la cisplatine, la tétraméthylpyrazine, le méthotrexate, la daunorubicine, certains virus génétiquement modifiés qui ciblent préférentiellement les cellules cancéreuses et leurs
15 mélanges et notamment les mélanges de deux desdits agents anti-cancéreux, les agents radioactifs utilisables en curiethérapie et/ou les métabolites radioactifs injectables ou ingérables.